Ендогена опиоидно индукована неуропластичност допаминергичних неурона у вентралном тегменталном подручју утиче на природну и опијатну награду (КСНУМКС)

Дневне сесије парења.

Да би се проучио временски ток промена величине допаминског неурона у ВТА, сексуално искусне и наивне животиње су убијене на КСНУМКС, КСНУМКС или КСНУМКС д (n = КСНУМКС – КСНУМКС по групи) након последњег дана парења (искуства) или руковања (наивно). Сексуално искусне групе биле су упарене за сексуално понашање током завршне сесије парења, као и укупан број ејакулација током пет сесија (просек КСНУМКС за сваку групу), и нису се разликовали ни по једном параметру сексуалног понашања.

Седнице за парење.

Сексуално наивни мушкарци били су распоређени на једно од два експериментална стања: сексуално наивни или сексуално искусни. Сексуално искусним животињама је дозвољено да се паре пет пута узастопно са рецептивним женкама у правоугаоним тест кавезима (КСНУМКС × КСНУМКС × КСНУМКС цм) док се не прикаже ејакулација или до КСНУМКС х (шта год се десило прво). Кавези су темељито очишћени са КСНУМКС% етанолским раствором и додата је свежа постељина између парења. Сексуално понашање је изведено током мрачне фазе (КСНУМКС – КСНУМКС х након почетка мрака). Само животиње које су ејакулисале током најмање четири од пет сесија парења сматране су сексуално искусним и укључене у експерименте. Уочени су сви састанци парења и забележено је сексуално понашање. Број монтажних (М) интромисија (ИМ), латенција монтирања (МЛ; вријеме од увођења женке до првог успона), латенција интромисије (ИЛ; вријеме од увођења женке до прве интромиције), и латенција ејакулације (ЕЛ; времена од прве интромиције до ејакулације).Агмо, КСНУМКС). Наивне животиње су постављене у чисту тест-кавез за КСНУМКС х истовремено са сексуално искусним мужјацима који су се парили у истој просторији, тако да су били изложени удаљеним женским мирисима, и сличним нивоима поремећаја и еколошке новости као и искусни мужјаци.

Имунофлуоресцентно обележавање.

Животиње су дубоко анестезиране помоћу натријум пентобарбитала (КСНУМКС мг / кг, ип) и перфундиране интракардијално са КСНУМКС мл КСНУМКС% сланог раствора, праћено са КСНУМКС мл КСНУМКС% параформалдехида у КСНУМКС м натријум фосфатном пуферу (ПБ). Мозгови су уклоњени и постфиксовани за КСНУМКС х на собној температури (РТ) у истом фиксативу, а затим уроњени у КСНУМКС% сахарозу и КСНУМКС% натријум азид у КСНУМКС м ПБ за чување на КСНУМКС ° Ц. Короналне секције су исечене на КСНУМКС μм на микротом замрзавања (ХКСНУМКСР, Мицром) и сакупљене су у четири паралелне серије у раствору криопротектора (КСНУМКС% сахароза, КСНУМКС% етилен гликол у КСНУМКС м ПБ) и затим ускладиштене на КСНУМКС ° Ц. Све инкубације су изведене на РТ са благим мешањем и обилним испирањем са КСНУМКС м ПБС, пХ КСНУМКС, између инкубација. Секције су биле изложене КСНУМКС% Х₂O₂ за КСНУМКС мин да уништи ендогене пероксидазе, затим блокира за КСНУМКС х у раствору инкубације (ПБС +: ПБС који садржи КСНУМКС% Тритон Кс-КСНУМКС; Сигма-Алдрицх) и КСНУМКС% говеђег серумског албумина (Јацксон Иммуно Ресеарцх Лабораториес). Затим, секције су инкубиране преко ноћи на РТ у мишјој тирозин хидроксилази (ТХ) -антитиолу (КСНУМКС: КСНУМКС КСНУМКС; Миллипоре). Након инкубације примарног антитела, секције су инкубиране у АлекаФлуор КСНУМКС-коњугованом козјем анти-мишјим антителима (КСНУМКС: КСНУМКС; Инвитроген, Еугене, ОР) за КСНУМКС мин. Коначно, секције су испране са КСНУМКС м ПБ, постављене на Суперфрост Плус стаклене слајдове, осушене и покривене гелватолом који садржи средство против фадинг КСНУМКС-диазабицикло (КСНУМКС) октан (ДАБЦО; КСНУМКС мг / мл, Сигма-Алдрицх; Леннетте, КСНУМКС).

Анализа података: величина неурона.

Слике ТХ-имунореактивних (ИР) неурона у ВТА су узимане на увећању КСНУМКС × на три рострална до каудалног нивоа (Балфоур ет ал., КСНУМКС). Није било разлика између ћелија на различитим нивоима. Величина сома ТХ-ИР неурона је анализирана помоћу ИмагеЈ (Натионал Институтес оф Хеалтх). Средња површина, периметар и кружност мјерени су како је описано Склаир-Таврон и др. (КСНУМКС). Анализирано је просек КСНУМКС ћелија по животињи (у комбинацији са свим КСНУМКС ВТА нивоима) и укључене су само ћелије са јасно видљивим језгром. За сваку животињу, израчуната је средња површина, периметар и кружност. За статистичку анализу кориштена је двосмјерна АНОВА [фактори: сексуално искуство (секс искусан или секс наиван) и вријеме (КСНУМКС, КСНУМКС или КСНУМКС д)] пост хоц поређења користећи Холм – Сидак методу са нивоом значајности КСНУМКС.

Двонедељне сесије парења.

Да би се тестирало да ли је сексуално искуство током дневних сесија парења неопходно за смањење ТХ-ИР неуронске величине сома, анализирани су ВТА допамин неурони животиња које су се париле током пет двонедељних сесија парења. Сесије парења су описане горе, али током периода од КСНУМКС недеља. Мозак је сакупљен КСНУМКС д после последњег парења или руковања.

Означавање имунопероксидазе.

Поред тога, тестирана је употреба осетљивих техника бојења са детекцијом имунопероксидазе и хромогена, што би такође омогућило визуелизацију промена величине ТХ-ИР сома. Перфузија и обрада ткива се одвијају како је горе описано. Након третмана са КСНУМКС% Х₂O₂ и ПБС +, секције су инкубиране преко ноћи на РТ у мишјем поликлоналном тирозин хидроксилази (ТХ) -антитиолу (КСНУМКС: КСНУМКС КСНУМКС; Миллипоре). Након инкубације примарног антитела, секције су инкубиране са козјим анти-зечјим ИгГ (КСНУМКС х, КСНУМКС: КСНУМКС у ПБС +; Вецтор Лабораториес), авидин-биотин-хрен пероксидаза (КСНУМКС х, АБЦ елита; КСНУМКС: КСНУМКС КСНУМКС у ПБС) Вецтор Лабораториес) и КСНУМКС′-диаминобензидин тетрахидроклорид (КСНУМКС мин, КСНУМКС%, ДАБ; Сигма-Алдрицх) појачан са никл сулфатом у (КСНУМКС% у КСНУМКС м ПБ) са водоник пероксидом (КСНУМКС%). Секције су темељито испране у КСНУМКС м ПБ да се оконча реакција и монтира на кодиране Суперфрост плус стаклене слајдове (Фисхер) са КСНУМКС% желатином у ддХ₂О. Након дехидрације, сва стакалца су покривена са ДПКС горивом (дибутил фталат ксилен; Сигма-Алдрицх).

Анализа података: величина неурона.

ТХ-ИР ћелије су анализиране на површину, периметар и кружност како је горе описано. Поред тога, анализиране су ТХ-ИР ћелије у субстантиа нигра (СН), у истим деловима који су коришћени за анализу ВТА ТХ-ИР ћелија. Коначно, након анализе ВТА и СН ТХ-ИР ћелија, одсеци су супротстављени употребом крезиле љубичастих и не-ТХ-ИР ћелија анализирани су користећи исте методе као што је горе описано. Разлике између наивних и искусних група упоређиване су користећи ученике са двоструким репом t тестови са нивоом значајности КСНУМКС.

Експериментални дизајн.

ranije, Руссо ет ал. (КСНУМКС) показали су да хронични морфин изазива толеранцију на морфијумску награду. Пошто сексуално искуство и хронични морфин узрокују слично смањење величине сома допаминских неурона у ВТА, функционална релевантност морфолошких промена изазваних полом је тестирана на награду морфина. Полно искусне и наивне животиње подељене су у шест различитих експерименталних група (n = КСНУМКС – КСНУМКС по групи) на основу сексуалног понашања (сексуално наивно или искусно) и дозе морфина (КСНУМКС, КСНУМКС, или КСНУМКС мг / кг, ип) и тестирани су на морфијум-индуковану условљену преференцију места (ЦПП).

Морфин-ЦПП.

Кондиционирање се одвијало КСНУМКС д након задње сеансе парења и групе су одговарале за сексуални учинак током посљедњег парења. Коришћена ЦПП парадигма састојала се од претестирања, кондиционирања дана и пост-теста, и на основу тога је био базиран апарат Тенк ет ал. (КСНУМКС). Укратко, ЦПП апарат (МЕД Ассоциатес) састојао се од три различите коморе. Између сваке сесије, апарат је темељно очишћен 70% раствором етанола како би се минимализовали дуготрајни мирисни знаци. Да би се утврдиле индивидуалне преференције, спроведено је предтестирање током којег су животиње имале слободан приступ целом апарату током 15 минута. Као група, животиње нису показивале значајну склоност одређеној комори, али је свака појединачна животиња имала малу почетну наклоност. Пацови који су показали значајну предност за једну од комора (> 200 с разлика између времена проведеног у свакој од комора; <5% животиња) током предтеста били су искључени из студије. Током кондиционирања, лек је упарен са првобитно преферираном или нежељеном комором, користећи непристрасну парадигму (Тзсцхентке, КСНУМКСи животиње су биле ограничене на коморе за КСНУМКС мин. Животиње су убризгане физиолошким раствором (ип) ујутро (КСНУМКС: КСНУМКС АМ до КСНУМКС: КСНУМКС ПМ) и ограничене на комору са сланим раствором (контрола). Поподне (КСНУМКС: КСНУМКС-КСНУМКС: КСНУМКС ПМ), животињама је ињициран морфин (ип, КСНУМКС мг / кг, КСНУМКС мг / кг или КСНУМКС мг / кг; морфин сулфат растворен у КСНУМКС% сланом раствору, Јохнсон Маттхеи) и ограничен у комору са морфијумом. Животиње су подвргнуте два дана кондиционирања. Следећег дана (КСНУМКС д после последњег дана парења) спроведен је пост-тест, процедурално идентичан претесту. За статистичку анализу, време проведено у морфијум-упареној комори током пост-теста је упоређено са временом проведеним у сали-упареној комори током пост-теста за сексуално наивне или искусне мушкарце у свакој дози употребом упареног t тест. p <0.05 се сматра статистички значајним. Додатне контролне групе сексуално наивних и искусних животиња добиле су физиолошки раствор и у упареним и у непареним коморама које су служиле као негативне контроле. Ниједна група није открила разлике у времену проведеном између комора.

Експериментални дизајн.

Сексуално искуство резултира у олакшавању сексуалног понашања које се одржава најмање КСНУМКС мјесец (Питцхерс ет ал., КСНУМКС). Да би се анализирао ефекат блокирања МОР-а на олакшање сексуалног понашања изазваног искуством, сексуално искусне животиње примиле су или налоксон или слану отопину прије пет узастопних сједница парења (n = КСНУМКС сваки) као што је горе описано. Недељу дана после последњег парења, спроведен је завршни тест парења током којег је свим животињама дозвољено да се паре до једне ејакулације или до КСНУМКС х. Није било примене налоксона или третмана физиолошким раствором пре парења на последњем дану теста. Параметри парења су упоређивани да би се утврдило да ли је налоксон утицао на сексуално искуство индуковано олакшавање парења (дан КСНУМКС према дану КСНУМКС) или одржавање овог олакшавања (дан КСНУМКС вс тест) коришћењем двосмјерне АНОВА [фактора: третман (сланост у односу на налоксон ) и дан (дан КСНУМКС, дан КСНУМКС, или тест)] и Холм – Сидак метод за пост хоц поређења. За све статистичке тестове, p <0.05 се сматрало статистички значајним.

Системски налоксон на дан теста.

Да би се показало да промењено сексуално понашање на последњем дану теста за парење није било због одсуства налоксона, ми смо давали или налоксон или физиолошки раствор на последњем дану теста парења животињама које су примиле парење у пару са налоксоном док су стекли сексуално искуство. Конкретно, све животиње су примиле ињекцију налоксона (КСНУМКС мг / кг, сц) КСНУМКС мин пре парења са једном ејакулацијом током КСНУМКС узастопних дана. На дан теста КСНУМКС д касније, приближно половина животиња примила је ињекцију налоксона (КСНУМКС мг / кг, n = КСНУМКС) или слан (n = КСНУМКС) КСНУМКС мин прије увођења рецептивне женке. Сексуално понашање је посматрано и забележено. Параметри парења су упоређивани да би се утврдило да ли је налоксон утицао на сексуално искуство индуковано олакшавање парења (дан КСНУМКС према дану КСНУМКС) или одржавање овог олакшавања (дан КСНУМКС вс тест) коришћењем двосмјерне АНОВА [фактора: третман (сланост у односу на налоксон ) и дан (дан КСНУМКС, дан КСНУМКС, или тест)] и Холм-Сидак метод за пост хоц поређења. За све статистичке тестове, p Сматрало се да је <5% статистички значајно.

Ефекти налоксона на краткотрајно изражавање олакшаног сексуалног понашања.

Ефекти третмана налоксоном (КСНУМКС мг / кг, сц) током парења су тестирани на накнадно сексуално понашање током финалног дана теста парења, који је спроведен само КСНУМКС д после последњег парења (слан, n = КСНУМКС; налоксон, n = КСНУМКС).

Систематска предобрада налоксона.

Да би се утврдило да ли поновни третман само налоксоном узрокује оштећење сексуалног понашања КСНУМКС д после последњег третмана, сексуално наивне животиње примиле су пет дневних налоксона (КСНУМКС мг / кг, сц) или ињекције физиолошког раствора наредних дана пре тестирања парења КСНУМКС д после финалног налоксона или ињекције сланог раствора. На овај последњи дан тестирања, животиње нису примиле никакву ињекцију. Сексуално понашање је посматрано и забележено као што је горе описано. Параметри парења су упоређени између група које су користиле неспарене t тестови. За све статистичке тестове, p Сматрало се да је <5% статистички значајно.

Системски налоксон и сексуална награда.

Једна од могућности за пригушење ефекта налоксона на приказ одржавања олакшаног сексуалног понашања је та што налоксон блокира корисне ефекте сексуалног понашања. Да би се испитала та могућност, парадигма ЦПП спроведена је за сексуално понашање одмах након ињекције налоксона или физиолошког раствора код мушкараца без претходног сексуалног искуства. Поступак ЦПП био је сличан горе описаном за морфиј-ЦПП, укључујући претест, дане кондиционирања и пост-тест.

Сексуално понашање било је упарено са првобитно непожељном комором. На супротан начин, свака животиња је добила ињекцију налоксона (n = КСНУМКС) или слан (n = КСНУМКС) КСНУМКС мин прије пријема приступа рецептивној женки. Просечно трајање сеансе парења било је УМКСНУМКС мин. Један минут после ејакулације, животиња је стављена у упарену комору за КСНУМКС мин. На други дан кондиционирања, животиње су примиле ињекцију било налоксона или сланог раствора (које год да су примљене пре парења) и стављене су у непарну комору за КСНУМКС мин. Затим је извршен пост-тест, идентичан претесту. Да би се одредила преференција коморе, време проведено у упареној комори током претестирања и пост-теста је упоређено. За статистичку анализу, упарено t тестови су коришћени да се упореде резултати преференција и разлика, и време у упареној комори током претест и пост-теста да би се утврдило да ли је формиран значајан ЦПП за сексуално понашање. p <0.05 се сматра значајним.

Експериментални дизајн.

Да би се утврдило да ли је ЕОП акција специфично у ВТА, одговорна за ефекте промена сексуалног понашања изазваног сексуалним искуством, животиње су подвргнуте локалној инфузији налоксона или слане воде у ВТА пре пет дневних сесија парења. Бихевиорална парадигма била је слична системском експерименту налоксона. Сексуално искусним животињама је дозвољено да се паре током КСНУМКС узастопних дана до једне ејакулације или до КСНУМКС х. Петнаест минута пре увођења рецептивне женке, мужјаци пацова су примили билатералне инфузије било налоксона (КСНУМКС μг / μл по хемисфери, КСНУМКС μл запремине, растворене у КСНУМКС% физиолошком раствору) или физиолошког раствора (КСНУМКС μл по хемисфери). Билатералне микроињекције су даване при брзини протока КСНУМКС μл / мин током КСНУМКС мин интервала праћене додатним КСНУМКС мин са ињекционом канилом која је остала на месту за дифузију. Затим је ињекциона канила замењена малом канилом и поклопцем за прашину. Једна недеља након завршног дана парења (дан теста), све животиње су се поново париле на ејакулацију без инфузије налоксона или сланог раствора. Слика КСНУМКСA описује експериментални дизајн. Анализа података је изведена као што је описано у експерименту системског налоксона.

Цаннулатион сургери.

Мужјаци пацова су анестезирани интраперитонеалном ињекцијом (КСНУМКС мл / кг) кетамина (КСНУМКС мг / мл) и ксилазином (КСНУМКС мг / мл), и стављени у стереотаксични апарат (Копф Инструментс). Билатералне каниле са водилицом КСНУМКС-а (Пластицс Оне) су спуштене кроз мале бушотине у лобањи у мозак према ВТА на -КСНУМКС мм АП, ± КСНУМКС мм МЛ од брегме и -КСНУМКС мм ДВ са врха лобање према Паксино и Вотсон (КСНУМКС). Кануле су осигуране зубним акрилима који су се причврстили на три вијка постављена у лобању. Животињама је дат период опоравка од КСНУМКС недеље, и свакодневно су обрађиване за навикавање на поступке руковања и ињекције које се користе током тестирања понашања.

Верификација положаја каниле.

Положај канила је испитан коришћењем ТХ-имунолошког бојења да би се потврдило да је ВТА тачно циљана. У анализу су укључене само животиње са одговарајућим положајем (коначне величине група: искусни физиолошки раствор n = КСНУМКС; искусан налоксон n = КСНУМКС). Три додатне животиње које су примиле интра-ВТА налоксон ињекције усмерене ван ВТА груписане су заједно у "пропуштену" ињекциону групу. Пропуштена група је анализирана одвојено како би служила као анатомска контрола и Манн-Вхитнеи U тест је коришћен да би се упоредило понашање у завршном дану теста са мужјацима који су били подвргнути третману налоксоном и салином.

Експериментални дизајн.

Показало се да излагање кавезу у којем су мушкарци стекли искуство парења узрокује МОР активацију у ВТА и неуронској активности у ВТА и НАц (Балфоур ет ал., КСНУМКС). Дакле, окружење за парење служи као условљени знак предикције сексуалне награде. Садашња студија је тестирала да ли је активација МОР-а током сексуалног искуства неопходна за каснију условљену неуро-активацију која је изазвана цуе-ом. Налоксон или физиолошки раствор је примењен системски (ип) КСНУМКС мин пре стављања у арену парења и увођење рецептивне женке за парење (доживљено), или пре контролне манипулације која се састојала од постављања у кавез за руковање без представљања женке (неутрално) окружење, наивно). Тако су створене четири експерименталне групе: Наиве Сал, Наиве НЛКС, Екп Сал и Екп НЛКС. Једна недеља после завршне сеансе за парење, половина животиња у свакој групи била је изложена кавезу за парење (Експерти: сполно условљени знакови) или руковање кавезом (наивни мужјаци: ненасилни / неутрални знакови), док друга половина није била изложена било који знак и уместо тога остао у кућним кавезима (да би се одредио основни пЕРК израз). Ова експериментална парадигма је произвела КСНУМКС групе: Наиве Сал-Но Цуе, Наиве Сал + Цуе, Наиве НЛКС-Но Цуе, Наиве НЛКС + Цуе, Екп Сал-Но Цуе, Екп Сал + Цуе, Екп НЛКС-но Цуе, Екп НЛКС + Цуе (n = КСНУМКС свака осим Наиве НЛКС-Но Цуе, n = КСНУМКС). Животиње су перфундиране КСНУМКС-КСНУМКС мин након излагања знаковима. Контролне животиње су уклоњене из њихових кавеза и парфурисане истовремено.

Иммунохистоцхемистри.

Секција и имунохистокемија су спроведени као што је горе описано. Овде смо користили зечје поликлонско антитело против пКСНУМКС и пКСНУМКС МАП киназа ЕРККСНУМКС и ЕРККСНУМКС (ПЕРК; КСНУМКС: КСНУМКС КСНУМКС; Технологија сигнализације ћелија). Примарно антитело је у литератури детаљно описано (Роук и Бленис, КСНУМКС; Мурпхи и Бленис, КСНУМКС; Фрохмадер ет ал., КСНУМКСб). Штавише, изостављање примарног антитела спречило је сваку имунореактивност, а Вестерн блот анализа можданог ткива пацова открила је две траке при одговарајућим молекуларним тежинама.

Анализа података.

ПЕРК-имунореактивне (-ИР) ћелије су пребројане у бројним регионима мозга коришћењем цевчице за цртање луциде камере која је прикачена на Леица ДМРД микроскоп: НАц [језгро (Ц) и љуска (С); КСНУМКС × КСНУМКС μм; медиални префронтални кортекс; мПФЦ; предња зупчаста област (АЦА); прелимбни кортекс (ПЛ); инфралимбички кортекс (ИЛ); КСНУМКС × КСНУМКС μм свака], каудат - путамен (ЦП; КСНУМКС × КСНУМКС μм), и базолатерална амигдала (БЛА; КСНУМКС × КСНУМКС μм; Балфоур ет ал., КСНУМКС; Фрохмадер ет ал., КСНУМКСб; Питцхерс ет ал., КСНУМКСб). Две секције су пребројане по региону мозга и број ћелија у стандардним областима анализа је затим израчунат као број ћелија по мм². Две тачке су израчунате као средња вредност по животињи за израчунавање групних средстава. Просјечне групе унутар сполно искусних или наивних група су успоређене кориштењем двосмјерне АНОВА [фактори: третман лијековима (НЛКС или Сал) и знак (знак или ниједан знак)] након чега слиједи пост хоц упоређивањем са Холм – Сидак или Манн-Вхитнеи-овим тестовима, где је то могуће, са нивоом значајности p <0.05. У НАц љусци сексуално искусних животиња, постојао је снажан тренд ка значају фактора, па су тако спроведена упоредна упоређивања ради поређења само група физиолошког раствора (Сал-Но Цуе) и физиолошког раствора (Сал + Цуе).

Имагес.

Дигиталне слике су снимљене помоћу ЦЦД камере (Мацрофире, Оптроницс) прикључене на а Леица микроскопом (ДМКСНУМКСБ) са фиксним поставкама камере. Слике су увезене у Адобе Пхотосхоп КСНУМКС софтвер. Слике нису измењене ни на који начин осим за подешавање осветљења и контраста.

Ендогене промене величине сома индукованих опиоидима ВТА допаминских неурона. A, Репрезентативне слике ВТА допаминских неурона из сексуално наивних и искусних животиња које показују смањење величине сома КСНУМКС д након завршне сесије парења. Мерна скала, КСНУМКС μм. Квантитативни подаци који показују да је сексуално искуство (Екп, блацк барс) изазвало значајно смањење површине (B; у μм²) и периметра (C; у μм) ВТА допаминских ћелија, КСНУМКС д (Наивна, Екп; n = КСНУМКС) и КСНУМКС д (Наивна, n = КСНУМКС; Екп, n = КСНУМКС), али не и КСНУМКС д (Наивно, n = КСНУМКС; Екп, n = КСНУМКС) након завршног парења, у поређењу са сексуално наивним контролама (Наиве, беле шипке). Површина је смањена на КСНУМКС% код искусних мушкараца у поређењу са наивним контролама на КСНУМКС или КСНУМКС д. Периметар је редукован на КСНУМКС и КСНУМКС% у искусним групама у поређењу са контролом на КСНУМКС и КСНУМКС д. Није било ефекта на циркуларност (D). Ова пластичност допаминских ћелија у подручју (E) и периметра (F) спријечена налоконом (НЛКС, n = КСНУМКС), али не и слан (Сал, n = КСНУМКС) третман током парења, КСНУМКС д после завршне сесије парења у поређењу са сексуално наивним контролама (Сал, n = КСНУМКС; НЛКС, n = КСНУМКС). Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ; * показује значајну разлику у односу на сексуално наивне контроле истог дана (B, C) или у поређењу са сексуално наивним контролама које су третиране физиолошким раствором и сексуално искусним мужјацима који су третирани налоксоном (E, F).

Сексуално искуство није смањило величину сома у супстанци нигра допаминским неуронима или ВТА нондопаминским неуронима. ВТА ТХ-ИР подручје неурона (A; у μм²) и периметра (B; у μм) код сексуално наивних (белих) и искусних (црних) животиња које су стекле искуство спаривањем два пута недељно, а не током узастопних дана. Субстантиа нигра ТХ-ИР сома подручје (C) и ВТА нон-ТХ-ИР подручје (\ тDу сексуално наивним (белим) и искусним (црним) животињама. Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ; * указује на значајну разлику у односу на сексуално наивне контроле. Репрезентативне слике које приказују ТХ-ИР (смеђе) неуроне у ВТА сексуално наивних (E), и искусни (F) мушкараца. G, H, Слика већег увећања неурона назначена стрелицом E F редом. Ниссл-обојени неурони су приказани плавом на овим сликама. Репрезентативне слике које приказују ТХ-ИР неуроне у СН сексуално наивних (I) и искусни (J) мушкараца. Скале скале: E-J, КСНУМКС μм.

Ефекти сексуалног искуства на награду морфијума. Времена проведена у сланој (Сал) или морфинско-упареној (Мор; КСНУМКС, КСНУМКС или КСНУМКС мг / кг тјелесној тежини) комори током пост-теста у сексуално наивној (Наивна, n = КСНУМКС – КСНУМКС) или искусни (Екп, n = КСНУМКС – КСНУМКС) мужјаци. Подаци представљени као средња вредност ± СЕМ; * указује на значајну разлику у односу на Сал-упарену комору унутар истих животиња. НС, Није значајно.

Ендогени опиоиди играју кључну улогу у олакшавању сексуалног понашања изазваном искуством. A, Експериментални дизајн. B-D, Параметри сексуалног понашања за мушкарце третиране физиолошком отопином (Сал, беле траке, n = КСНУМКС) или налоксон (НЛКС; црне траке, n = КСНУМКС) са системском администрацијом. Приказани подаци су латенција за монтирање (B; секунди), интромиссионC; секунди) и ејакулација (D; секунди) дана КСНУМКС и КСНУМКС од пет узастопних дана парења. Додатно, подаци су приказани за коначни тест парења, КСНУМКС д након пете седнице парења. Подаци су представљени као средња вредност ± СЕМ; + означава значајну разлику између дана КСНУМКС и КСНУМКС унутар третмана; * означава значајну разлику између дана теста и дана КСНУМКС у оквиру третмана; # показује значајну разлику између налоксона и физиолошких група у току дана.

Примена налоксона пре парења повећала је латенције да се подигне и унесе само првог дана парења

Ендогени опиоиди су важни у дугорочном изражавању олакшаног сексуалног понашања изазваног искуством. A, Експериментални дизајн за експеримент са ефектом НЛКС третмана на дан теста. B, Утврдите латенцију дана КСНУМКС и КСНУМКС пет узастопних дана парења и завршног дана теста парења (Тест) након слане (сиве) или налоксонске (црне) ињекције. Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ. * означава значајну разлику између дана КСНУМКС и дана КСНУМКС унутар третмана. # означава значајну разлику између дана теста и дана КСНУМКС у оквиру третмана. C, Експериментални дизајн за експеримент за тестирање ефекта налокона пре третмана само без сексуалног искуства на понашање парења. D, Утврдите латенцију на завршном дану теста парења, КСНУМКС дана након КСНУМКС дана било ињекције физиолошког раствора или налоксона у одсуству парења. Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ. EЕкспериментални дизајн за експеримент како би се тестирало да ли је третман налоксоном утицао на краткотрајни приказ олакшаног сексуалног понашања код сексуално искусних животиња. F, Прикљуците латенцију на дан КСНУМКС и дан КСНУМКС пет узастопних дана парења и финални дан тестирања парења, КСНУМКС дан за даном КСНУМКС у присуству слане (сиве) или налоксон (црне) ињекције. Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ. * означава значајну разлику између дана КСНУМКС и дана КСНУМКС унутар третмана. G, Експериментални дизајн за експеримент како би се тестирало да ли је третман налоксоном блокирао ефекте сексуалног понашања. H, Време проведено у парењу коморе (у секундама) током претестирања (бело) и пост-теста (црно) за животиње које примају или налоксон или слану отопину прије парења. Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ; * показује значајну разлику у односу на претест.

Приказани подаци су латенције до интромисије и ејакулације (секунди) из контролних експеримената спроведених како би се утврдило да су се ефекти МОР блокаде на губитак дуготрајног појачања сексуалног понашања десили независно од недостатка примене налоксона на последњем дану тестирања парења

Ендогени опиоиди у ВТА посредују у искуству изазваном олакшавању сексуалног понашања и његовом дугорочном одржавању. Параметри сексуалног понашања за мушкарце третиране физиолошком отопином (Сал, беле траке, n = КСНУМКС) или НЛКС (црне траке, n = КСНУМКС) са интра-ВТА администрацијом. Приказани подаци су латенција за монтирање (A), интромиссионB), и ејакулација (C) дана КСНУМКС и КСНУМКС од пет узастопних дана парења. Додатно, приказани су подаци за завршни дан тестирања парења, КСНУМКСд следећи дан КСНУМКС у одсуству слане или налоксон ињекције. Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ; + означава значајну разлику између дана КСНУМКС и КСНУМКС унутар третмана; * означава значајну разлику између дана теста и дана КСНУМКС у оквиру третмана; # показује значајну разлику између налоксона и Сал групе у току дана. Шематски цртежи короналних ВТА секција (Х, -КСНУМКС; И-КСНУМКС; Ј-КСНУМКС из брегме) указују на интра-ВТА места убризгавања за све животиње у експерименту КСНУМКС (слан; бела; налоксон, црна; пропуштена, сива), користећи цртеже из шаблона Свансон Браин Мапс (Свансон, КСНУМКС). Каниле су биле билатералне, али су места убризгавања једнострано представљена ради лакшег представљања. фр, Фасцицулус ретрофлекус; МЛ, Медиал лемнисцус; СН, субстантиа нигра.

Ендогено опиоидно дејство је потребно за неуралну активацију у НАц индукованој условљеним индикаторима везаним за пол. Број пЕРК-ИР ћелија по мм² у језгру нуцлеус аццумбенс (A) и љуска (B) код сексуално наивних (белих) и искусних (Експ; црних) животиња које су претходно третиране системским НЛКС или физиолошким раствором (Сал) током сеанси за парење (Експеративни мужјаци) или сесијама за руковање (Наивни мужјаци). Групе су или биле изложене контекстуалним знаковима (Цуе), које су биле везане за парење у мушким мужјацима и неутралним знаковима у наивим животињама, или узимане из кућних кавеза (Но Цуе, назначено недостатком Цуе-ознаке). Подаци су представљени као средња вредност ± СЕМ; * указује на значајну разлику у поређењу са претходно третираним физиолошким раствором без контроле (Наиве Сал-Но Цуе и Екп Сал-Но Цуе); # показује значајну разлику у поређењу са Сал-третираном Цуе-изложеном Екп групом (Екп Сал + Цуе). Репрезентативне слике пЕРК-ИР ћелија по мм² у језгру НАц сексуално искусних мушкараца са Салом (C, D) или НЛКС (E, F) које су или узете из кућног кавеза (Но Цуе, Ц, Е), или изложене контекстуалним знаковима везаним за парење (Цуе; D, F). N = КСНУМКС сваке групе осим Наиве НЛКС (Нема Цуе), n = КСНУМКС. ац, Предња комисија. Мерна скала, КСНУМКС μм.

Ефекти налоксона на пЕРК експресију изазвану парењем цуеа у другим ВТА циљним регионима. Број пЕРК-ИР ћелија по мм² у сексуално наивним (белим) и искусним (Експ; црним) животињама које су претходно биле третиране системским НЛКС или физиолошким раствором (Сал) током сесија парења и биле изложене контекстуалним знаковима (Цуе) или кућном кавезу (без знакова) у АЦА (A), ПЛ (B), И Л (C) и БЛА (D). Подаци представљају средњу вредност ± СЕМ; * указује на значајну разлику у поређењу са претходно третираним физиолошким раствором без контроле (Наиве Сал-Но Цуе и Екп Сал-Но Цуе); # указује на значајну разлику у поређењу са Сал-третираним сексуално наивним контролама изложеним цуе-у (Наиве Сал + Цуе).