Biol Psychiatry. 2008 Dec 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 Jul 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
sumber
Jurusan Biologi Kewan, Universitas Pennsylvania, Philadelphia, PA 19104-6046, AS.
abstrak
latar:
Sénsitip pikeun ganjaran geus implicated salaku faktor predisposing pikeun paripolah anu patali jeung penyalahgunaan narkoba ogé overeating. Sanajan kitu, mékanisme kaayaan anu nyumbang kana ganjaran kepekaan henteu kanyahoan. Urang hipotésis yén dysregulation dina signalling dopamin bisa jadi cukang lantaran kaayaan tina sensitipitas ganjaran anu gedé whereby rangsangan rewarding bisa meta kana normalize sistem.
métode:
Kami nganggo modél mouse genetik tina sensitipitas pahala anu ningkat, beurit Delta FosB-overexpressing, pikeun nguji énggal-énggal anu ngalereskeun réspon kana diet anu gajih tinggi. Tanda anu nawaran pahala dina beurit ieu ditaliti duanana dasarna sareng nuturkeun minggu 6 ngeunaan paparan diet anu haratis. Beurit ditaliti dina uji paripolah nyusul ditarikna di luhur gajih pikeun meunteun kerentanan model ieu kanggo ngaleungitkeun rangsangan anu pahala.
Hasil:
Hasilna nunjukkeun aktivasina jalur anu dirobih di sapanjang circuitry daérah tegmental-accotorens-hypothalamic-ventral akibat tina overexpression Delta FosB di inti accumbens sareng striatal wilayah. Tahap fosforilasi adénosin monofosfat (cAMP) réspon anu mengikat protéin (pCREB), Faktor neurotrophic otak-turunan (BDNF), sareng dopamin sareng siklik adenosin monofosfat fosfroprotein régulasi ku massa molekular tina 32 kDa (DARPP-32) dina inti accumbens dikurangan dina beurit Delta FosB, saranan pikeun ngurangan dopamin signaling. Genep minggu paparan diet gajih tinggi lengkep teu aya hubunganana, ngungkabkeun kapasitas mujarab pikeun diet anu pikaresepeun. Beurit Delta FosB ogé nunjukkeun kanaékan pinunjul dina kagiatan lokomotor sareng résponén patali kahariwang 24 jam saatos ditarikna gajih tinggi.
conclusions:
Hasil ieu nyiptakeun sensitipitas dasar dina émbaran pahala anu aya hubunganana ku disregulasi tina Delta FosB sareng dopamin signaling anu tiasa diormalkeun nganggo diet palatable sareng tiasa janten fenotip anu predisposisi dina sababaraha bentuk obesitas.
perkenalan
Sanaos ningkatkeun pangaweruh urang ngeunaan sistem saraf anu ngontrol nafsu sareng kasenangan, laju obesitas terus ningkat di Amérika Serikat. Perawatan narkoba anu ayeuna gaduh efficacy kawates, sareng modifikasi perilaku kakurangan tina patuh jangka panjang minimal (1). Konsumsi dahareun calorically-padet, palatable dikaitkeun kana parobahan stres sareng jalur ganjaran dina uteuk, nunjukkeun yén sipat anu nguntungkeun tina dahareun sapertos kitu tiasa ngatasi sinyal kasaimbangan énergi (2-4). Dahareun anu gajih ageung mangrupikeun ganjaran alami, ngaktifkeun pusat ganjaran otak dina cara anu mirip sareng panyalahgunaan, sareng sapertos anu parantos dianggo dina paradigma mandiri (5-8). Ku kituna, kamungkinan éta paripolah sareng motivasi pikeun overeating sareng penyalahgunaan narkoba ngabagi mékanisme kaayaan umum, berpotensi muka dibuka pengobatan anyar pikeun dua kaayaan éta.
Dina ngulik hubungan antara kadaharan anu haratis sareng jalur anu ngatur pahala sareng setrés dina uteuk, kami samemehna parantos ngaidentipikasi spidol molekular sareng biokimia tina kéngingkeun pahala sareng ningkat setrés saatos ditarik tina diet gajih tinggi (HF). Sarupa jeung ubar penyalahgunaan, paparan kana diet anu pikaresepeun dina panilitian urang nyababkeun ningkat tingkat tingkat transkripsi ΔFosB dina inti accumbens (NAc), struktur pahala otak tengah (9, 10). Tikus anu teu kaémbarkeun ΔFosB nunjukkeun réspon instrumén parantos pikeun pahala tuangeun dahareun (11), ngajantenkeun aranjeunna alat anu berharga pikeun nguji peran sensitipitas sareng disregulasi jangka panjang sistem pahala dina réaksi molekular sareng biokimia kana diet palatable.
Dina studi anu ayeuna, urang ngagunakeun beurit ΔFosB-overexpressing pikeun nguji parobihan jangka panjang dina spidol pahala dina aréa neurocircuit NAc-hypothalamus-ventral (VTA) minangka résponasi kana diet HF palatable. Dumasar kana paniliti sateuacana dina beurit nu sensitip ieu ganjaran, urang hipotesis yén parobihan anu dipengaruhi ΔFosB dina sensitipitas pahala ngalibetkeun disregulasi dina sinyal dopamin akibat tina réspon NAc ka VTA. Salajengna, urang hipotesis yén paparan kana pahala alami diet HF padat énérgi teras bakal normalisasi sistem dopaminergic dina beurit ieu, nyababkeun réspon anu ageung pikeun setrés ditarik tina diet HF ieu.. Aspék unik tina ngamangpaatkeun diet anu pikaresepeun salaku bahan anu matak ngamungkinkeun urang ngalebetkeun input hypothalamic pikeun pahala circuitry dina fenotipe anu tiasa diramalkeun ku hiji populasi anu obesitas pikeun obesitas tahan. Pikeun nguji hipotesis ieu, urang diajar spidol of neuropansmission dopamin, kalebet pCREB, BDNF, sareng DARPP-32 dina NAc sareng tyrosine hydroxylase sareng transporter dopamin dina VTA, nuturkeun paparan HF. Kami ogé nalungtik spidol energi kasaimbangan anu dikenal pikeun mangaruhan kaluaran dopamin, kalebet reséptor leptin sareng orexin dina ekspresi VTA sareng orexin dina hypothalamus gurat.
Bahan jeung Métode
sato
Tikus bitransgenik jalu anu teu kaédah exFosB dina neuron-positip dinarphin-positip di NAc sareng dorsal striatum (Kelz et al., 1999) didamel dina latar anu dicampur (ICR: C57Bl6 / SJL) di The University of Texas Southwestern Medical Center tur diropéa sareng dites di Universitas Pennsylvania. Sadaya beurit dikelompokeun dina doxycycline (100 μg / ml dina cai nginum) dugi ka dugi di Universitas Pennsylvania. Pikeun mendorong overexpression, doxycycline dihapus (n = 23) (12). Tikus kadali (n = 26) teras nampi ubar. Beurit ditugaskeun ka grup diet dalapan minggu saatos ngaleungitkeun doxycyline nalika ekspresi waktos parantos ditingalikeun dugi ka tingkat maksimal (13). Tikus dikelompokeun dina 12: 12 siklus lampu-gelap (lampu dina 0700) kalayan kadaharan sareng cai anu sayogi libitum. Sadaya studi anu dilakukeun dumasar kana protokol ékspérimén anu disatujuan ku Komite Ngurus jeung Pamakéan Kewan Institut Pennsylvania of Pennsylvania, sareng sadaya prosedur diayakeun saluyu sareng tungtunan institusional.
Pedah diét
Beurit dipertahankeun di chow imah (n = 16) atanapi disimpen dina HF (n = 16-17) genep genep minggu. House chow (Purina Lab Diet, St. Louis, MO) ngandung 4.00 kcal / g, diwangun ku protein 28%, lemak 12%, sareng karbohidrat 60%. Diet HF (Diet Research, New Brunswick, NJ) ngandung 4.73 kcal / g, diwangun ku protein 20%, lemak 45%, sareng karbohidrat 35%.
Babasan biokimia sareng gén
Beurit dianalisis saatos genep minggu paparan diet. Otot dipiceun tina tangkorak sareng boh beku dina és garing atanapi dibédakeun NAc (kira-kira 0.5 - 1.75 mm tina bregma, di jerona 3.5 - 5.5 mm) sareng beku dina nitrogén cair. Tissue disimpen dina -80 ° C dugi diserang.
Nganalisa biokimia
Cara pikeun blot Kulon dijelaskeun dina bahan tambahan. Antibodi anu dianggo nyaéta: Cdk5, CREB, sareng BDNF (1: 500, Biotéhnologi Santa Cruz, Santa Cruz, CA) sareng phospho-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, Teknologi Signaling Cell, Danvers, MA).
Éktorimografi panarima
Métode detil pikeun autoradiography dijelaskeun dina bahan tambahan. Ligand anu dipaké nyaéta 2 nM H3 - SCH 23390 sareng 5 nM H3 - spiperone (PerkinElmer, Boston, MA).
Di situ hibridisasi
Tissue processing jeung hybridization dilakukeun sapertos anu dijelaskeun (14). Panyilidikan DARPP-32 ogé disayogikeun ku P. Greengard (Rockefeller University), sareng panyilidikan orexin ku J. Elmquist (Universitas Texas Southwestern Medical Center). Geser diusahakeun pikeun DARPP-32 diidinan pikeun pilem kanggo dinten 3, sareng slide anu diidinan pikeun orexin diusulkeun kanggo pilem dina dinten 4. Kuantitas gambar pilem dilakukeun sakumaha anu dijelaskeun saméméhna (10).
QRT-PCR
RNA diasingkeun tina VTA sareng ekspresi gen individu ditaksir nganggo asépsi génis TaqMan negeskeun (Applied Biosystems, Foster City, CA). Metodeu detil sareng analisa statistik tiasa dipendakan dina bahan tambahan.
Paripolah analisa
Pikeun nguji efek sensitipitas pahala kana parobahan paripolah anu didorong ku diet, sawaréh beurit ditarik tina HF saatos opat minggu paparan sareng dipulangkeun ka imah chow (n = 9 control, n = 8 ΔFosB). Dua puluh opat jam saatos ditarikna, beurit kakeunaan tés buka-lapang saluyu sareng paradigma ditarikna diet anu diterbitkeun saméméhna (10). Sakeudeung, beurit disimpen di tengah aparatur kabuka-lapangan sareng diawaskeun salami lima menit. Jumlah garis salib, boli fecal, waktos di tengah, sareng salibna di tengahna diukur.
statistik
Sadaya data kecuali titik-titik Kulon dianalisis nganggo ANOVA dua arah dituturkeun ku uji PLSD Fisher kalayan perlakuan doxycycline (expressionFosB expression) sareng kaayaan diét salaku variabel bébas. Pikeun nganalisis RT-PCR, nilai P ngirangan digunakeun pikeun menerkeun sababaraha babandingan dina kelompok anu aya gén anu aya hubunganana (tingali bahan suplemén). Blot barat dianalisis ngagunakeun t-test murid kalayan perlakuan doxycycline salaku variabel bébas, ngabandingkeun kapadetan optik dina blot anu sami. Sadaya data ditepikeun salaku hartosna ± SEM.
Results
Bedana biokimia dasar
Pikeun ngécéskeun jalur molekular anu ngadasarkeun sensitipitas pahala anu ningkat dina beurit ΔFosB-overexpressing, tingkat sababaraha molekul sinyal isian diperiksa dina NAc. Aya trend pikeun tingkat ningkatna Cdk5 dina NAc beurit ΔFosB dibandingkeun sato kontrol littermate anu dijaga dina doxycycline (F = 5.1, P = 0.08; Gbr. 1A). MFosB beurit nyatakeun tingkat pangirangan pCREB (F = 7.4, P <0.05; Gbr. 1B) ogé tingkat total CREB (F = 5.4, P = 0.05; Gbr. 1C). A réduksi signifikan dina BDNF ogé dititénan dina NAc beurit ΔFosB (F = 10.6, P <0.05; Gbr. 1D).
Gambar 1
Beurit beueus ΔFosB nunjukkeun spidol biokimia tina pangurangan dopamin pangurangan dina NAc
Asupan dahareun sareng beurat awak dina diet gajih tinggi
Salajengna urang nalungtik pangaruh tina diet HF anu lumayan ngaganjel kana robahan sinyal molekul dina beurit ΔFosB-overexpressing. Henteu aya bédana antara beurit ΔFosB sareng kontrol dina asupan katuangan boh di bumi atanapi HF. Nanging, aya panurunan total asupan kalori anu dinormalisasi kana beurat awak nalika kakeunaan HF anu khusus pikeun beurit ΔFosB (F = 11.2, P <0.01; Gbr. 2A). Dina akhir genep minggu paparan diét, beurit anu nampi HF beuratna langkung beurat tibatan anu dina diet chow (F = 17.2, P <0.001), sareng beurit osFosB beuratna kirang sadayana tibatan kontrol (F = 5.6, P <0.05; Gbr. 2B). Épék ieu khusus pikeun béda antara kelompok dina diet chow (P <0.05).
Gambar 2
Beurit overexpressing overFosB nunjukkeun henteu aya béda dina asupan tuangeun dina tuangeun atanapi chow atanapi gajih tinggi (HF)
Beda biokimia dina diet gajih tinggi
Pikeun nangtoskeun kumaha bédana basal dina sinyal NAc tiasa dirobih ku diet HF, protéin sinyal anu sami anu ditaliti di dasarna ditaliti sato anu ngagaduhan genep minggu HF. Henteu aya béda anu signifikan dina tingkat Cdk5 (Gbr. 3A). Tingkat tingkat pCREB sareng total CREB henteu deui bénten saatos genep minggu HF (Gbr. 3B, C). Tingkat BDNF nyata dina luhurna ΔFosB beurit saatos genep minggu paparan HF (F = 6.5, P = 0.05; Gbr. 3D).
Gambar 3
Bedana séhat anu tinggi (HF) henteu jelas bédana sinyal anu ditingali dina NAc tina beurit ΔFosB overexpressing
Dopamin reséptor autoradiography
Kami nganggo autoradiography reséptor pikeun ngaji naha robahan ΔFosB anu diinduksi dina sinyal dopamin dina NAc aya hubunganana sareng parobahan éksprési reséptor dopamin (Gbr. 4A). Diét tinggi gajih nembongan nambahan rada kapadetan beungkeutan reséptor D1 (P = 0.14), sareng bédana ieu langkung ageung dina beurit ΔFosB (Gbr. 4B). Aya ogé trend nuju kanaékan daérah ngariung D1 nuturkeun HF (P = 0.06), sareng uji post hoc nunjukkeun ieu signifikan dina beurit ΔFosB (P <0.05; Gbr. 4C). Béda sareng reséptor D1, henteu aya parobahan kapadetan mengikat reséptor D2 (control chow = 97.6 ± 6.9, control HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB chow = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) atanapi area ngariung (control chow = 47.3 ± 3.4, kontrol HF = 53.8 ± 6.0, ΔFosB chow = 51.9 ± 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) dina NAc katitén.
Gambar 4
Diet gajih tinggi (HF) nyababkeun parobihan dina dopamin reseptor D1 sareng éksprési DARPP-32 dina inti accumbens (NAc) tina ΔFosB beurit overexpressing
Babasan DARPP-32 dina NAc
In situ hibridisasi dianggo pikeun nangtoskeun tingkat éksprési DARPP-32 dina NAc (Gbr. 4D). Diét tinggi gajih sacara signifikan ningkatkeun éksprési DARPP-32 di daérah uteuk ieu (F = 5.1, P <0.05), sareng aya interaksi anu signifikan antara diét sareng expressionFosB ungkapan (F = 8.9, P <0.05), kalayan beurit ΔFosB nunjukkeun anu langkung ageung parobahan anu diinduksi ku diet (Gbr. 4E). Beda basal dina éksprési DARPP-32 antara kontrol sareng beurit ΔFosB diungkabkeun ku post post hoc (P <0.01), ogé paningkatan anu signifikan dina éksprési DARPP-32 dina beurit ΔFosB dina HF (P <0.01).
Babasan Gene dina VTA
QRT-PCR digunakeun pikeun nganilai parobahan éksprési gén dina VTA, nargétkeun sababaraha gén konci anu sateuacana kalebet dina pangaturan pahala. Sadaya sampel dinormalisasi janten β-aktin. Pikeun mastikeun yén éksprési in-aktin henteu dirobih ku perlakuan, uji coba misah dijalankeun pikeun ngabandingkeun β-aktin kana kontrol internal anu kadua, GAPDH. Henteu aya béda anu signifikan dina expression-actin expression (ΔCT nilai, β-actin - GAPDH: control chow = 2.29 ± 0.21, control HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB chow = 2.32 ± 0.49, ΔFosB HF = 2.37 ± 0.10).
Tren pikeun interaksi antara expressionFosB éksprési sareng pangobatan diét dititénan pikeun éksprési tirosin hidroksilase (F = 3.6, P <0.06; Gbr. 5A). Genep minggu kakeunaan HF katingalina ngirangan éksprési tirosin hidroksilase dina beurit kontrol sareng ningkatkeun éksprési dina beurit ΔFosB. A interaksi anu signifikan antara expressionFosB éksprési sareng paparan diet dititénan pikeun éksprési transporter dopamin (F = 6.7, P <0.03; Gbr. 5B). Sarupa sareng tirosin hidroksilase, paparan HF ngirangan éksprési transporter dopamin dina beurit kontrol sareng ekspresi ningkat sacara signifikan dina beurit ΔFosB (P <0.05). Beda basal dina éksprési transporter dopamin antara kontrol sareng beurit ΔFosB henteu ngahontal signifikansi (P = 0.16), tapi saatos 6 wks HF, beurit ΔFosB nyatakeun tingkat transporter dopamin anu luhur pisan dibandingkeun sareng kontrol (P <0.05).
Gambar 5
Paparan diet gajih tinggi (HF) sareng ekspresi ΔFosB nyababkeun parobahan éksprési sajumlah molekul konci dina VTA
Aya hiji trend nunjukkeun pangaruh kanaékan expressionFosB éksprési pikeun ngirangan tingkat TrkB dina VTA (F = 5.7, P <0.04; Gbr. 5C). Sanaos henteu aya pangaruh utama dina expression-opioid reséptor reséptor, aya trend nuju ngirangan éksprési beurit osFosB (P = 0.08; Gbr. 5D). Ekspresi tina reséptor leptin ogé ditangtukeun dina VTA. Pangaruh signifikan tina paparan diét kapanggih (F = 6.1, P <0.03), kalayan HF nyata ngirangan tingkat reséptor leptin dina VTA dina ΔFosB sareng beurit kontrol (Gbr. 5E). Éksprési reséptor orexin 1 dina VTA ogé diperiksa. Aya pangaruh anu signifikan tina diet kana éksprési reséptor orexin (F = 9.0, P <0.02), kalayan beurit kakeunaan HF nyatakeun tingkat anu langkung luhur dina VTA (Gbr. 5F). Aya ogé kacenderungan pikeun beurit ΔFosB pikeun nganyatakeun tingkat reséptor 1 orexin anu langkung luhur di daérah otak ieu (P <0.05).
Babasan Orexin dina hipothalamus gurat
Kami ngukur tingkat oréksin dina hipotalamus gurat, asal tina jeroan oréksinergik VTA, ku hibridisasi in situ (Gbr. 6A). Aya interaksi anu signifikan antara expressionFosB éksprési sareng paparan diét dina éksprési orexin (F = 9.1, P <0.01), kalayan HF sacara signifikan ningkatkeun tingkat oréksin dina beurit kontrol (P <0.05) sareng turunna éksprési dina beurit ΔFosB (Gbr. 6B). Sanaos henteu aya bénten anu signifikan dina éksprési orexin dina kaayaan basal, nuturkeun 6 wks HF, beurit ΔFosB nyatakeun tingkat pangirangan oréksin sacara signifikan dibandingkeun sareng kontrol (P <0.05).
Gambar 6
Diet gajih (HF) ngagaduhan épék bédana dina éksprési orexin dina kontrol (Ctrl) sareng beurit overexpressing BFosB
Behavioral nganalisa
Pikeun ngaevaluasi parobihan dina gairah sareng émosionalitas kusabab parobihan diét, beurit kakeunaan tés lapangan terbuka 24 jam saatos ditarikna diet HF (10). Total garis salib, anu dicetak salaku ukuran gairah, kapangaruhan sacara signifikan ku ΔFosB éksprési (F = 6.6, P <0.05) sareng diet (F = 4.6, P <0.05; Gbr. 7A). Beurit ΔFosB langkung aktip dina lingkungan novél tibatan kontraksi, sareng uji post hoc nunjukkeun yén beurit anu ditarik tina HF sacara signifikan langkung aktip tibatan anu kakeunaan chow (P <0.05). Boli tinja diitung salaku ukuran paripolah kawas kahariwang (10). Aya pangaruh utami expressionFosB éksprési (F = 10.2, P <0.01), kalayan iceFosB-overexpressing beurit ngahasilkeun langkung boli tinja dina lingkungan novél, khususna di chow imah sareng grup ditarikna HF (Gbr. 7B). MFosB beurit dijaga dina diet HF ngahasilkeun langkung kirang boli tinja tibatan anu dijaga dina chow sareng anu ditarik 24 jam sateuacan tés. Beurit kontrol sigana henteu kapangaruhan ku diet. Teu aya pangaruh anu signifikan tina expressionFosB éksprési atanapi diet dina waktos anu dianggo di tengah lapangan terbuka (control chow = 14.5 ± 3.1 sec, control HF = 18.0 ± 3.2 sec, control W / D = 15.4 ± 1.9 sec, ΔFosB chow = 16.9 ± 2.4 detik, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 detik, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 detik).
Gambar 7
Beurit leuwih beurit ΔFosB langkung peka kana efek tina diet gajih tinggi (HF)
diskusi
Dina pengobatan obesitas, aya kabutuhan kritis pikeun idéntipikasi faktor anu mangaruhan karentanan kana overeating sareng kamampuan beurat. Jalur pahala otak ngagaduhan peran anu penting dina motivasi pikeun sareng résponasi kana dahareun anu palatable sareng parobahan diet (6, 10, 15, 16). Salaku sinyal orexigenic sareng anorexigenic sacara langsung tiasa pangaruh ganjaran sinyal liwat sirkuit hypothalamus-VTA-NAc, elucidation gen anu responsif kana diet palatable anu énergi dina jero pusat ganjaran tiasa nyayogikeun target terapeutik novel dina pengobatan obesitas (17, 18). Ku sabab kitu, urang diteliti spidol biokimia sareng molekular tina ganjaran sareng kasaimbangan énergi signalling sapanjang sirkuit hypothalamus-VTA-NAc sebagai respon kana beurit HF dina beurit ΔFosB-overexpressing salaku modél sensitipitas ditingkatkeun kana parobahan pahala (13, 19, 20) , sareng sensitipitas perilaku nuturkeun ditarikna diet. Kami di hipotesis yén disregulasi basal tina dopamin sinyal dina beurit ΔFosB bakal dinormalisasi ku épék reward tina diet HF, ngalangkungan simpang énérgi sinyal kasaimbangan sareng sistem dopamin.
Pikeun nguji spidol anu nunjukkeun disregulasi dina dopamin sinyal dina NAc, kami nalungtik tingkat reséptor D1 sareng épéktorir hilir. Sanaos teu aya bedana anu signifikan dina éditor anu resep D1, aya tren pikeun paparan HF pikeun ningkatkeun wilayah mengikat dina beurit ΔFosB. Ieu pikaresepeun sapertos induksi ΔFosB ku narkoba sareng ganjaran alami muncul dina subtipe dinamika positip dinonphin spiny medium anu utamina nganyatakeun reséptor D1 (9, 21). Tingkat tingkat dopamine hilir isyarat pCREB dikurangan sacara signifikan dina beurit ΔFosB, dukungan ngirangan aktivasi reséptor D1 di daérah otak ieu (22, 23). Narikna, kami ogé mendakan panurunan anu signifikan dina total tingkat CREB dina beurit ΔFosB, nunjukkeun kapasitas dikirangan salajengna pikeun transduksi sinyal dopamin anu tiasa sékundér pikeun tanggepan anu diturunkeun tina pCREB (24) anu berkepanjangan. Ekspresi BDNF diatur ku pCREB, ditingkatkeun ku aktivasina D1, sareng mangrupikeun mediator penting tina hubungan-saraf neuroplasticity dina NAc (25, 26). Sasuai, urang mendakan panurunan anu signifikan dina protéin BDNF dina NAc tina beurit ΔFosB.
Sagala neuron spiny sedeng dina NAc nganyatakeun DARPP-32 (27). Pangaruhna seueur pangaruh janten pamuter penting dina jalur pahala (28), sareng parantos kasimpulan ubar kecanduan sareng gangguan sanés ngalibetkeun sistem dopamin kalebet gangguan afektif sareng skizofrenia (27, 29). Kami mendakan réduksi basal jero dina ekspresi DARPP-32 dina NAc tina beurit ΔFosB. Ekspresi DARPP-32 diatur ku BDNF, sareng ku sabab édisi anu dikirangan tiasa langsung aya hubunganana sareng réduksi dina tingkat BDNF anu dideteksi dina beurit ΔFosB (27, 29, 30). Malah parobahan anu sedeng dina kaayaan fosforilasi DARPP-32 tiasa nyababkeun parobihan anu ageung dina sinyal intrakélular dina NAc (27). Panaliti saméméhna teu ngalaporkeun teu aya parobahan dina protéin DARPP-32 dina beurit ΔFosB nyusul panyabutan 12-wk tina doxycycline nalika penilaian striatal langkung luas dilakukeun (31). nunjukkeun yén épék ΔFosB dina DARPP-32 tiasa waé waktos sareng daérah anu khusus.
Kami di hipotesis yén réduksi dramatis dina indeks dopamin sinyal dina NAc of ΔFosB beurit kamungkinan ngalibatkeun parobahan neuron proyéksi dopamine VTA, sanaos ΔFosB henteu kapendem dina jero neuron ieu. Ku alatan éta, urang nalungtik ekspresi gen anu aya hubunganana sareng dopamine dina VTA, kalebet tyrosine hydroxylase sareng transporter dopamin. Tingkat tyrosine hydroxylase sareng transporter dopamin positif hubungan sareng kaluaran dopamin. Aya tren pikeun beurit ΔFosB pikeun nunjukkeun ngirangan tirosin hidroksilase sareng pengurangan anu signifikan dina transporter dopamine, kalayan disregulasi sinyal dopamin dina NAc. Kusabab pangurangan dasar ieu dina gén-dopamine anu aya hubunganana dina VTA sahiji beurit ΔFosB panginten ngarobih réspon anu dirobih ti NAc salami overexpression jangka panjang ΔFosB, urang nalungtik ekspresi reséptor BDNF, TrkB, salaku mékanisme kamungkinan NAc kana feedback VTA (32). Sarupa jeung tyrosine hydroxylase sareng transporter dopamin, ekspresi TrkB ogé nunjukkeun yén trend dikurangan dasarna dina beurit ΔFosB anu henteu ngahontal artos nalika dilereskeun pikeun sababaraha perbandingan. Kompleks BDNF-TrkB tiasa diangkut sacara retrogradely sareng polah dina jero VTA pikeun mangaruhan éksprési gen lokal sareng ngamajukeun kamekaran sél sareng pangropéa (33). Salajengna, aktivasina BDNF tina presynaptic TrkB dina jeroeun NAc tiasa langsung merangsang dopamin neurotransmission (32), ngadukung panyiraman dopamin signaling dina beurit ieu.
Aktipasi dinamis tina reséptor κ-opioid ngatur sinyal dopamin sareng mangrupikeun mékanisme anu sanésna nalika NAc ngintip kana VTA (34). Kami mendakan ekspresi reséptor κ-opioid dina VTA nunjukkeun tren dikurangan dina beurit ΔFosB. Ku overexpression ΔFosB parantos ditingalikeun ngirangan ekspresi dinamis di NAc (20), beurit ΔFosB sigana ngagaduhan réduksi anu jero dina VTA κ-aktivasina opioid. Sanaos signalling dynorphin normalna ngahasilkeun pangaruh ngahambat kana neuron dopamin (35), beurit anu nunjukkeun ditingkatkeun mandiri obat-obatan panyalahgunaan nunjukkeun tingkat pangurangan dynorphin dina NAc, nunjuk kana peran pikeun panyandakan dinorfin dasarna dina ningkatkeun sensitipitas pahala (36 , 37). Dregregulasi dynorphin - κ-opioid system parantos dikaitkeun kana akuisisi sareng kegigihan penyalahgunaan narkoba, ngadukung kasaimbangan kritis sinyal opioid dina normalisasi jalur dopamin (38).
Dumasar kana kapasitas ganjaran tina diet HF anu padet, urang hipotesis yén disregulasi dina dopamin sareng pahala opioid sinyal dina beurit ΔFosB bakal ngaduga beurit ieu kana réspon pahala anu ditingkatkeun pikeun diet sapertos kitu, sahingga normalisasi sistem ganjaran via aktivasina hypothalamus -VTA-NAc sirkuit. Salami genep pendeta diet genep minggu, teu aya bedana asupan tuangeun antara ΔFosB sareng beurit kontrolna diperhatoskeun, nunjukkeun yén parobahan anu aya dina spidol biokimia sareng molekular tina sinyal anu aya dina beurit ΔFosB henteu kusabab bédana kalori anu dikonsumsi. Sakumaha anu diantisipasi, bédana basal dideteksi dina pCREB, total CREB, BDNF, DARPP-32, sareng tingkat reséptor κ-opioid antara ΔFosB sareng beurit kontrol dikerjakeun, kamungkinan kusabab kaluaran dopamin dina beurit ΔFosB dina HF (29, 39-41) .
Ujian kadua tirosin hidroksilase sareng transporter dopamin dina VTA ngungkabkeun tanggapan anu nolak tina ΔFosB sareng beurit kontrol nuturkeun HF. Tikus kontrol nunjukkeun turunna tyrosine hydroxylase sareng ekspresi transporter dopamin, sedengkeun beurit ΔFosB ditampilkeun paningkatan duanana gén anu aya kaitanana dopamin. Lucuna, ekspresi hidroksilase tyrosine dirobih di VTA ku kokain kronis atanapi administrasi methamphetamine (42-44), nunjukkeun yén ΔFosB beurit tiasa mendakan pahala alami HF langkung salient tibatan beurit kontrol.
Dina raraga nalungtik kumaha poténsi input hypothalamic ka VTA tiasa nerepkeun sinyal anu ngagambarkeun kasaimbangan tanaga, ekspresi resép leptin sareng reséptor orexin-1 ogé ditaliti. Tingkat sirkulasi leptin ditambihkeun ku HF, sareng leptin tiasa meta dina VTA kanggo ngarobih sinyal dopamin (18, 45). Ekspresi reséptor VTA leptin sami-sami turun ku HF dina duanana ΔFosB sareng beurit kontrol, saluyu sareng angkat beurat anu sami sareng asupan diet bari dina HF. Lemak luhur ogé tambah éksprési tina reséptor orexin-1 dina VTA boh ΔFosB sareng beurit kontrol. Orexin ngaktifkeun neuron dopamin dina VTA, ngamajukeun plastikitas VTA, sareng ningkatkeun tingkat dopamin dina NAc (46-48). Diet gajih tinggi parantos nunjukkeun pikeun ningkatkeun éksprési orexin dina beurit, saluyu sareng pangamatan urang (49, 50). Maka, tambah éksprési tina reséptor orexin ogé parobahan dina sinyal leptin dina VTA tiasa ngamajukeun pahala diet boh inFosB sareng mencit beurit, ngadukung sékrésiasi antara jalan-jalan anu ngaluarkeun sinyal kasaimbangan énergi sareng anu dihijikeun langsung pikeun ganjaran.
Pikeun nguji épék-pangaruh anu narik-narik tina ganjaran ditarikna, beurit ditaliti dina ujian terbuka lapangan 24 hrs diangkat tina HF. Beurit ΔFosB langkung sénsitip kana épék akut tina ditarikna diet anu dipikaresep, nunjukkeun kagiatan galak anu ageung sareng produksi boli fecal dina arena kabuka dibandingkeun sareng sadaya kelompok kontrol sareng diet anu sanés. Beurit ΔFosB ogé nunjukkeun pola tingkah laku anu pikaresepeun dina uji coba ieu ngeunaan ganjaran sareng sensitipitas setrés, ku diet HF mimiti ngirangan produksi boli fecal relatif ka chow, sareng ditarikna deui ningkatkeun réaksi nu patali kahariwang ieu. Ieu paningkatan paningkatan kagiatan kabuka-lapang henteu correlate sareng parobahan ekspresi orexin, nunjukkeun hubungan pikeun gairah anu didorong ku tekanan anu sanés ngan ukur akibat tina parobihan orexin-mediated. Gagasan, data ieu ngadukung hipotesis urang yén ΔFosB beurit bakal langkung peka kana akut épék anu ditarikna tina diet anu disababkeun ku sensitipitas ganjaran anu luhur..
Kumaha overexpression jangka panjang ΔFosB dina NAc ngakibatkeun parobahan sapertos paripolah sareng signalling jangka panjang.? Kami parantos ngusulkeun modél detil kabeneran VTA dimana dirobih réspon ti NAc sareng hypothalamus relays sinyal ngeunaan kaayaan paham pikeun nangtoskeun pangaturan sistem dopamin anu tiasa ngadukung hubungan antara disregulasi jalur sareng pédah predisposition pikeun obesitas (Gbr. 8). Salila paparan HF, sababaraha input ngagambarkeun boh kasaimbangan énergi sareng kaayaan paham konvér dina VTA. Peningkatan dina sinyal leptin sareng orexin ogé réspon anu dirobih ti NAc ka hypothalamus gurat kenging mangaruhan kumaha sinyal orexigenic ieu ngabales HF dina beurit ΔFosB (17, 18, 45, 47, 51-53). Luhurna dipangaruhan ku diet anu tinggi-induksi di BDNF tiasa masihan réspon ganjaran kana VTA, salajengna ngalaksanakeun parobahan dina éksprési gén dopamine.
Gambar 8
Diet gajih tinggi (HF) normalisasi ganjaran disregulated sinyal dina beurit ΔFosB
Ieu nyababkeun spidol molekular tina sensitipitas ganjaran sareng nunjukkeun yén disregulasi jangka panjang sistem dopamin tiasa ngiringan hiji jalma pikeun kecanduan sareng obesitas. Salajengna, data ieu nyayogikeun léngkah penting pikeun menunjukkeun tujuan terapi anyar anu aya dina pengobatan sareng pencegahan obesitas sareng gangguan sanésna anu tiasa janten puseur dina sistem pahala. Ka hareupna, éta bakal penting pikeun nalungtik kumaha sistem ieu réspon kana ngaleupaskeun diet HF, ogé pikeun nalungtik bédana jinis kelainan dina sensitipitas pikeun ganjaran sareng panyebaran diet gajih tinggi.
Bahan suplemén
Hamba. Métode
Klik di dieu pikeun ningali. (61K, doc)
Acknowledgments
Panulis ngaharepkeun hatur nuhun ka Cathy Steffen pikeun bantosan sareng pembiakan sato sareng transfer. Karya ieu dirojong ku hibah ti University of Pennsylvania Diabetes Center (DK019525) sareng ku hibah ti National Institute of Mental Health (R01 MH51399 sareng P50 MH66172) sareng National Institute on Drug Abuse (R01 DA07359).
Footnotes
Paparan Kauangan: Sadaya panulis nyatakeun yén aranjeunna henteu gaduh kapentingan kauangan biomedis atanapi konflik anu dipikaresep.
Rujukan
1. Wadden TA, RI Berkowitz, LG Womble, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Percobaan sacara acak tina modifikasi gaya hirup sareng farmakoterapi pikeun obesitas. N Engl J Med. 2005; 353 (20): 2111-20. [PubMed]
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Ngurangan pahala nikotin dina obesitas: cross-perbandingan dina manusa sareng beurit. Psychopharmacology (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Beda individu dina sensitipitas pahala aya hubunganana sareng hawa nafsu sareng beurat awak relatif di awéwé séhat. Napsu. 2005; 45 (2): 198-201. [PubMed]
4. Kelley AE, Berridge KC. Gangguan saraf tina hadiah alami: relevan pikeun ubar adiktif. J Neurosci 2002; 22 (9): 3306-11. [PubMed]
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Beurit kalayan dopamin anu didirikeun dina panganteur nunjukkeun motivasi, tapi henteu diajar, pikeun hadiah dahareun. Neuropsychopharmacology. 2006; 31 (7): 1362-70. [PubMed]
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham nyayuh minyak jagung nambahan accumbens dopamin dina beurit. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2006; 291 (5): R1236-9. [PubMed]
7. Mendoza J, Angeles-Castellanos M, Escobar C. Entrainment ku tuangeun palatable nyababkeun kagiatan antikipatik sareng ekspresi c-Fos dina daérah anu aya hubunganana dina otak. Gerentes. 2005; 133 (1): 293-303. [PubMed]
8. BE Schroeder, Binzak JM, Kelley AE. Propil umum aktifitas kortis prefrontal nuturkeun paparan nikotin- atanapi isyarat kontéks kontéks. Gerentes. 2001; 105 (3): 535-45. [PubMed]
9. Nestler EJ, Barrot M, DW Diri. DeltaFosB: saklar anu molekular pikeun kecanduan. Proses Natl Acad Sci AS A. 2001; 98 (20): 11042-6. [Artikel bébas PMC] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Turunna di dahareun langkung sering ngahasilkeun karesepitas emosional sareng résiko kambuh. Biol Psychiatry. 2007; 61 (9): 1021-9. [PubMed]
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. dFosB dina Nukleus Accumbens Ngatur Paripolah Instrumental Pangan-Diuatan deui sareng Motivasi. The Journal of Neuroscience. 2006; 26 (36): 9196-9204. [PubMed]
12. J J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Sasatoan transgenik nganggo ekspresi gen anu disasarkan, dina uteuk. Mol Farmakol. 1998; 54 (3): 495-503. [PubMed]
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, DW Diri, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Babasan faktor transkripsi deltaFosB dina uteuk ngatur sensitipitas kokain. Alam. 1999; 401 (6750): 272-6. [PubMed]
14. Bale TL, dorsa DM. Bedana séksét sareng pangaruh éstrogen dina éksprési asid ribonukléat resépor oxytocin dina hipothalamus ventromedial. Endokrinologi. 1995; 136 (1): 27-32. [PubMed]
15. Avena NM, Long KA, Hoebel BG. Beurit gumantung gula nunjukkeun ditingkatkeun ngaréspon pikeun gula saatos abstinence: bukti pangaruh pangurangan gula. Fisiologis Behav. 2005; 84 (3): 359-62. [PubMed]
16. Bakal MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nuklir akustens mu-opioid ngatur asupan diet gajih luhur ku cara ngaktipkeun jaringan otak anu disebarkeun. J Neurosci 2003; 23 (7): 2882-8. [PubMed]
17. Zheng H, Patterson LM, HR Berthoud. Sinyal Orexin di daérah tegmental ventral diwajibkeun pikeun napsu gajih tinggi anu diangsang ku stimulasi opioid tina inti accumbens. J Neurosci 2007; 27 (41): 11075-82. [PubMed]
18. Hommel JD, Trinko Sunda, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLeone RJ. Reséptor Leptin isyarat dina neuron dopamin midbrain ngatur dahar. Neuron. 2006; 51 (6): 801-10. [PubMed]
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, DW DW. Panyebaran spésiés spénatal-spésifik khusus tina DeltaFosB nambihan insentif kanggo kokain. J Neurosci 2003; 23 (6): 2488-93. [PubMed]
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, MP Cassidy, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Peran penting pikeun DeltaFosB dina inti accumbens dina aksi morfin. Nat Neurosci. 2006; 9 (2): 205-11. [PubMed]
21. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Cocaine-ngainduksi tulang tonggong dendritik dina D1 sareng reséptor dopamin D2-ngandung neuron spiny sedeng dina accumbens inti. Proses Natl Acad Sci AS A. 2006; 103 (9): 3399-404. [Artikel bébas PMC] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Analitis genetik tina kecanduan narkoba: peran réspon rémpo ngariung protéin. J Mol Med. 1998; 76 (2): 104-10. [PubMed]
23. Nestler EJ. Mékanisme molekular tina kecanduan narkoba. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 24-32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Newton SS. CREB Binding sareng Aktivitas Brain: Spésipitas Daerah sareng Induksi ku Perampokan Electroconvulsive. Biol Psychiatry. 2007
25. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chrodatin remodeling mangrupikeun mékanisme konci dina kaayaan kasetrum kokotor dina striatum. Neuron. 2005; 48 (2): 303-14. [PubMed]
26. Graham DL, Edwards S, BKttell RK, Dileone RJ, Rios M, DW Diri. Aktivitas BDNF dinamis dina inti accumbens kalayan panggunaan kokain ningkatkeun pangaturan diri sareng kambuh. Nat Neurosci. 2007; 10 (8): 1029-37. [PubMed]
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 nyéépkeun lampah sababaraha ubar nyiksa. Aaps J. 2005; 7 (2): E353-60. [Artikel bébas PMC] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Ungkapan ekspresi Gene beurit divergently dipilih pikeun sensitipitas methamphetamine. Mamm Genome. 2005; 16 (5): 291-305. [PubMed]
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT sareng CDK5 / p35 nyapihkeun otak anu diturunkeun faktor neurotrofic otak induksi tina DARPP-32 dina ukuran saraf spiny ukuran sedeng dina vitro. J Biol Kim. 2007; 282 (10): 7352-9. [PubMed]
30. Benavides DR, Bibb JA. Peran Cdk5 dina nyiksa ubar sareng plastis. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025: 335-44. [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Balukar panyebaran kronis ka kokain diatur ku protéin neuronal Cdk5. Alam. 2001; 410 (6826): 376-80. [PubMed]
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrophins merangsang sékrési dopamin tina neuron beurit mesencephalic via resép Trk sareng p75Lntr. J Biol Kim. 1996; 271 (35): 21100-7. [PubMed]
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, DW Diri, Nestler EJ. Peran penting BDNF dina jalur dopamin mesolimbik dina setrés éléh sosial. Élmu. 2006; 311 (5762): 864-8. [PubMed]
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr Sirkuit pahala dopamin mesolimbik dina depresi. Biol Psychiatry. 2006; 59 (12): 1151-9. [PubMed]
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Sambetan kappa opioid arus somatodendritik dopamin perencat arus perdana. J Neurophysiol. 2007; 97 (1): 883-91. [PubMed]
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Béntin dininphin sareng sistem enkephalin dina beurit Fischer sareng Lewis: pangaruh kasabaran morfin sareng ditarikna. Otak Res. 1995; 683 (1): 25-35. [PubMed]
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Béda antara beurutan alkohol (AA) sareng ngasarkeun alkohol (ANA) beurit dina sistem prodynorphin sareng proenkephalin. Alkohol Clin Exp Res. 1994; 18 (5): 1272-9. [PubMed]
38. Kreek MJ. Cocaine, dopamin sareng sistem opioid endogen. J Addict Dis. 1996; 15 (4): 73-96. [PubMed]
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. Seueur rupana CREB. Tren Neurosci. 2005; 28 (8): 436-45. [PubMed]
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamine D1 reséptor mediasi CREB fosforilasi via fosforilasi tina reséptor NMDA di Ser897-NR1. J Neurochem. 2003; 87 (4): 922-34. [PubMed]
41. DW DW. Peraturan panyawat ubar sareng -seeking paripolah ku neuroadaptasi dina sistem dopamin mesolimbic. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 242-55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfine sareng kokain ngalaksanakeun parna kronis umum dina tirosin hidroksilase di daérah ganjaran dopaminergic. J Neurochem. 1991; 57 (1): 344-7. [PubMed]
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, ngarepkeun BT. Neuroadaptasi molekular di daérah akurat sareng daérah penegangan ventral dina dinten 90 mimiti kapaksa tina pantang kapaksa tina kokain administrasi dina beurit. J Neurochem. 2003; 85 (6): 1604-13. [PubMed]
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. Pangaruh tina administrasi mandiri merthetamin dina tiroosin hidroksilase sareng tingkat transporter dopamin dina jalur dopamin mesolimbik sareng nigrostriatal beurit. Psychopharmacology (Berl) 2006; 185 (4): 505-13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Perda leptin jalur dopamin mesoaccumbens. Neuron. 2006; 51 (6): 811-22. [PubMed]
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kurahashi K, Suzuki T. Implikasi protéin kinase C dina pengangkatan orexin-induksi tingkat dopamin extracellular sareng pangaruh anu nguntungkeun. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5): 1537-45. [PubMed]
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Langsung ngalibetkeun sistem orexinergic dina ngaktifkeun jalur dopamin mesolimbic sareng paripolah anu aya kaindah ku morfine. J Neurosci 2006; 26 (2): 398-405. [PubMed]
48. Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Widang HL, Bonci A. Orexin A dina VTA penting pikeun induksi palapis synaptic sareng sensitipitas palaku pikeun kokain. Neuron. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
49. Taman ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Parobihan dina ekspresi orexin-A sareng neuropeptida Y dina hipothalamus beurit anu berpuasa gancang sareng gajih. J Vet Sci. 2004; 5 (4): 295-302. [PubMed]
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Péptida anu ngatur asupan pangan: ekspresi gen orexin naék nalika kaayaan hipertriglyceridemia. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1454-65. [PubMed]
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, HR Berthoud. Péptida anu ngatur asupan tuangeun: manipulasi napsu napsu accupens ngaktifkeun neuron orexin hypothalamic sareng nyegah neuron POMC. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1436-44. [PubMed]
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Aktipasi subpopulasi oronin / hypocretin anu ngandung neuron hypothalamin ku panyambutan GABAA-mediated inhibisi tina inti accumbens cangkang, tapi henteu ku paparan ka lingkungan novel. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2): 376-86. [PubMed]
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Peran pikeun neuron hypotalamic génétik atanapi garansi dina milarian ganjaran. Alam. 2005; 437 (7058): 556-9. [PubMed]
;