Yüksək səliqə bilən qida məhsullarının qadın sıçanlarında erkən həyat tərzi stress törətməsindən əmələ gələn davranış və sinir problemlərinə xeyirli təsirləri (2015)

Jin Young Kim,¹ Jong-Ho Lee,^1,✉ Doyun Kim,^1,2 Soung-Min Kim,¹ JaeHyung Koo,² və Jeong Won Jahng^1,✉

Yazar məlumat ► Maddə qeydləri ► Müəlliflik hüququ və lisenziya məlumatları ►

Bu iş, ergenlik dövründə yüksək səviyyəli yeməklərin qadın sıçanlarda erkən yaşa aid stres təcrübəsi nəticəsində ortaya çıxan psixo-emosional və neyroelektrik bozuklukların təsirlərini araşdırdı. Qadın Sprague-Dawley pups doğumdan (MS) əvvəlki iki həftə ərzində gündəlik 3 h üçün damından ayrılmış və ya tərk edilməmiş (NH). MS qadınların yarısı əlavə olaraq şokolad çerezlərinə pulsuz giriş əldə etdi ad libitum Postnatal günündən 28-ə baxın. Uşaqlar yetkinlik dövründə davranış testlərinə məruz qaldılar. Beyin bölgələrində kəskin stress, ΔFosB və beyinlə yaranan nörotrofik faktor (BDNF) səviyyələrinə plazma kortikosteron reaksiyası təhlil edilmişdir. Bütün eksperimental dövr ərzində total kalorili alınma və bədən çəkisi qazanması eksperimental qruplar arasında fərqlənmədi. Adolesan və gənclik dövründə çörək çıxışı MS təcrübəsi ilə anksiyete / depressiya kimi davranışları yaxşılaşdırdı. ΔFosB ifadəsi azalmışdır, lakin MS qadınların nüvəsindəki acumbensində BDNF artmışdır və ΔFosB ifadəsi normallaşdırılmış və cookie çıxışından sonra BDNF daha da artmışdır. Kəskin stresə qarşı cortikosteron reaksiyası MS təcrübəsi ilə blunted və bişirmə imkanı onu yaxşılaşdırmadı. Sonuçlar, ergenlik döneminde çerez erişimi MS çocuğunun psiko-emosional bozukluklarını yaxşılaştıracağını ve nucleus accumbens'teki ΔFosB ve / veya BDNF ifadesinin temel sinir mekanizmalarında rol oynayabileceğini düşündürmektedir.

Heyvanlar

Sprague-Dawley sıçanları satın alındı ​​(Samtako Bio, Osan, Koreya) və temperaturun sabitliyi (22 ± 1 ℃), nəm (55%) və 12 / 12 hr yüngül / qaranlıq dövr (07-da işıqlar-00 AM). Standard laboratoriya qidaları (Purina Rodent Chow, Purina Co., Seul, Koreya) və membran filtrli təmizlənmiş su mövcud idi ad libitum. Heyvanlar laboratoriya heyvanlarının qorunması və istifadəsi üzrə NIH Təlimatlarına uyğun olaraq, Koreya Tibb Elmləri Akademiyası tərəfindən redaktə edilmiş 2000, Animal Experiments, 1996 Təlimatına əsasən nəzərə alındı. Bütün heyvan təcrübələri, Seul Milli Universitetində Laboratuvar Heyvanları Qulluq və İstifadəsi Komitəsi tərəfindən təsdiq edildi.

Eksperimental protokol

Nullipar qadınlar və sübut edilən süd verənlər heyvan təsis laboratoriyasında yetişdirmək üçün istifadə edilmiş və qüsurlar nəzarət altına alınmış və istənilən ətraf mühitin stimullaşdırılması üçün standartlaşdırılmışdır. ana bətnində həyat. Doğumun təsdiqi sonrası on iki saat sonra [postnatal gün (PND) 1], pups daha əvvəl təsvir etdiyimiz kimi manipulyasiya edildi ^{13, 14, 33 - 35}. Hər zibil ya ana ayrılması (MS) qrupu, ya da idarə olunmayan (NH) qrupu üçün təyin edilmişdir. MS balaları barajından və ev qəfəsindən çıxarıldı və 9: 00-12: 00 saatları arasında ağac çipləri ilə döşənmiş yeni bir qəfəsə (Aspen qırxma, Animal JS Bedding, Cheongyang, Koreya) yaxından yerləşdirildi və sonra evlərinə qayıtdılar. qəfəs və bənd. Ayrılıq dövründə balaların istiləşməsi üçün əlavə müalicə təklif edilmədi. MS gündəlik PND 1-dən 14-ə qədər həyata keçirildi və daha sonra balalar PND 22-də süddən ayrılana qədər bəndləri narahat edilmədən buraxıldı. NH qrupu, həftədə iki dəfə edilən rutin qəfəs təmizlənməsi istisna olmaqla, süddən ayrılana qədər narahat qaldı. Sütdən kəsilmə günündə hər NH və ya MS zibilindən təsadüfi olaraq 2 NH və 4 MS dişi bala seçildi və hər qəfəsdə 2 NH və ya 2 MS yavru yerləşdirildi. Birlikdə yerləşdirilmiş iki qadın MS balası, yüksək dadlı qidaya (HPF) (Oreo çərəzi, Kraft Foods Global, Inc., East Hanover, NJ, ABŞ) pulsuz giriş imkanı əldə etdi. ad libitum PND 28 (MS + HPF qrupu) və hər bir litter (MS qrupu) və NH pups (NH qrup) qalan 2 qadın MS pups yalnız chou standart qəbul etmişdir. Standart chow və Oreo çerezinin qida kompozisiya formulları Cədvəlində göstərilir Table1.1. Gündəlik yemək və çəki artımı PND 29-dan qeyd edildi. 24 h ərzaq alımının qiymətləndirilməsi üçün əvvəlcədən ölçülmüş chow və çerezlər verilmişdir və ertəsi gün, sol miqdarda çoban və çərəzlər çəkilmiş və əvvəlki gün verilən dəyərdən çıxarılıb. Dökülməni əhatə edən xüsusi diqqət alındı. Kaloriya istehlakı çörək və çorba bəslənmənin tərkib hissələrinə görə hesablanmışdır. Hər bir qəfədə pişiklər tərəfindən istehlak edilən qida miqdarı hər bir qəfədə puplərin sayına bölünmüş və hər bir hesablanmış dəyər n = 1 hesab edilmişdir. Su, bütün eksperimental qruplara sərbəst olaraq çıxdı və bütün eksperiment dövründə qida şərtləri davam etdi. Eksperimental protokolun sxematik diaqramı Şəkildə verilmişdir Şəkil 11.

 

Şəkil 1

Eksperimental protokol.

 

Cədvəl 1

Standart çay və Oreo çerezində qida maddəsi (%)

Ambulator fəaliyyəti

NH, MS və MS + HPF qadınları (hər bir qrupda 8 fərqli litrdən n = 4, 24 fərqli litrlərdən olan ümumi 8 pups) PND 54 üzrə ambulator testinə məruz qaldı. Hər bir sınaqda siçovul aktivlik mərkəzinin mərkəzinə yerləşdirildi (uzunluğu 43.2 sm, eni 42.2 sm, hündürlüyü isə 30.5 sm, MED Associates, VT, ABŞ), iki yatay düzəldilmiş şəffaf akril otağı 16 infraqırmızı fotoselli detektor cütləri yerləşdirilib x, y ölçüsü, intervalında olan 2.5 santimetr və onun ambulator fəaliyyəti 30 min üçün kompüterləşdirilmiş sistem tərəfindən monitorinq edilmişdir. Test otağının işıq vəziyyəti gündüz işıqlı vəziyyətdə olan heyvan otaqları ilə eyni dərəcədə qorunub saxlanılmışdır. Ambulator fəaliyyəti hər bir ardıcıl 5 min sessiya zamanı üfüqi sensorda şüa kəsilməsinin ümumi sayıları kimi ölçülmüşdür. Hər siçovulun ambulasiya testi zamanı defekasiya fəaliyyəti, nəcis ballarının çəkisi də vuruldu. Toxuculuq fəaliyyəti daha da təhlili edilmişdir; yəni ön və forma vermək rostral qulluq, bədən, ayaqları və kuyruksuz qidalanma kimi quyruq / genital baxım kimi qəbul edildi ³⁶. Əməliyyat otağı əvvəllər sınaqdan keçirilmiş siçovulların istənilən kokusunu aradan qaldırmaq üçün hər bir istifadə etdikdən sonra 70% etanolla təmizlənmişdir.

Elevated Plus Maze

Ambulator fəaliyyət testindən (PND 56) iki gün keçdikdən sonra siçovullar yüksək artı labirentdə davranış qiymətləndirməsinə, iki qarşı açıq qollu (50 sm uzunluğunda və 10 sm genişlikdə) və iki qarşı qapalı olan əlavə formalı akril labirentinə məruz qaldı (50 sm x 10 sm), mərkəzi platformadan uzanan (31 sm uzunluğunda, 10 sm genişlikdə və 10 sm hündürlükdə). Bütün aparat mərtəbədən 50 sm yuxarı qalxdı. Test proseduru əvvəlcədən izah edildi ³⁷. Hər siçan labirentin mərkəzinə açıq qollardan birinə yerləşdirildi və sonra labirentin açıq və ya qapalı qollarını 5 dəqiqə üçün araşdırdı. Müxtəlif silahlarda keçirdiyi vaxt qeyd edildi. Dörd ləçin hər bir qoluna giriş xəttinin içərisində olması lazım idi, bu da xüsusi kolda sərf olunan vaxtın başlanğıcını işıqlandıran, sonra isə bütün dörd pəncənin yenə xəttin kənarında olduğu zaman qeyd edildi. Labirent əvvəllər test edilmiş siçanın təsirlərinin qarşısını almaq üçün hər testdən sonra 70% etanol ilə təmizlənmişdir.

Zorla Swim Testi

Yüksək artı labirent testindən (PND 59) üç gün sonra siçovullar əvvəlcədən təsvir edilmiş üsula əsasən zorla üzmə testinə məruz qalıblar ³⁸. Hər bir siçovulun 54 sm dərinlikdə (24-40 ​​℃) su ilə doldurulmuş bir şüşə silindrdə (23 sm hündürlükdə və 25 sm diametrdə) 5 dəqiqə ərzində üzməsinə icazə verildi və test iclasları bir videokamera tərəfindən qeydə alındı. silindr tərəfi. Siçovulun suda hərəkətsiz qalma müddəti saniyəölçəndən istifadə edərək video lentlərdən qeydə alınıb. Hərəkətsizlik siçovulların başlarını suyun səthindən yuxarı tutması üçün yalnız lazımlı hərəkətləri etdiklərinə görə mühakimə olunduğu vəziyyət olaraq təyin olundu.

Sıçanlar, istenmeyen stress təsirlərini minimuma endirmək üçün hər testdən əvvəl ən az 2 saat sınaq otaqlarına yerləşdirilib və sirkadiyalı dəyişikliklərin təsirindən qaçmaq üçün 9: 00 AM və 12: 00 PM arasında bütün davranış qiymətləndirmələri keçirildi. Siçovulların müalicəsinin müşahidəçisi ilə davranış skorlaması aparıldı.

Plazma kortikosteron təhlili

Davranış seanslarının bitməsindən bir həftə sonra siçovulların siçovulların dörd əzalarını hərəkət etdirə bildikləri, ancaq bədən istiqamətlərini dəyişdirmədikləri 2 saatlıq bir məhdudlaşdırma qutusuna yerləşdirildi. Quyruq qanı təmkin dövründə 0, 30, 60 və 120 dəq vaxtında toplandı və 2,000 dəq ərzində 20 rpm-də santrifüj edildi. Plazma nümunələri maye azotda donduruldu və analiz üçün istifadə olunana qədər - 80 ° C-də saxlanıldı. Kortikosteronun plazma səviyyələri radioimmunoassay istifadə edərək təyin edilmişdir ¹²⁵I-etiketli Coat-A-Count dəsti (Siemens, CA, ABŞ). Təhlilin həssaslığı 5.7ng / ml idi. Variantın intra-assay katsayısı 4-12.2% idi.

Western blot təhlili

Davranış testlərindən sadəlövh olan siçovullar (hər qrupdakı 6 fərqli zibildən n = 3; 18 müxtəlif zibildən cəmi 6 bala) beyin bölgələrində ΔFosB və BDNF səviyyələrinin qərb ləkə analizi üçün PND 62-də qurban verildi. Qurban kəsilən zaman retroperitoneal yağ yastıqları toplandı və başlar kəsildikdən dərhal sonra beyinlər çıxarıldı. Nüvə akumbenslərinin (NAc) və hipokampusun toxuma nümunələri sürətlə buz üzərində parçalandı, maye azotda donduruldu və istifadə olunana qədər - 80 ° C-də saxlanıldı. NAc toxuma diseksiyası əvvəlki tədqiqatlarımızda istifadə edilən üsula uyğun olaraq incə bir bıçaqla həyata keçirilmişdir ^{28, 39}; Bununla yanaşı, yaxınlıqdakı ventro-medial striatumun mümkün ola bilməsi mümkün deyil. 50-da xNUMX-da toxumalar bir deterjan lizis tamponu (8.0 mM Tris, pH 150, 1 mM NaCl, 100% Triton X-0.5, proteaz və fosfataz inhibitör kokteyli 13,000%) homogenləşdirilmiş və sonra 20-da santrifüj edilmişdir^oC. Yeni borulara köçürülmüş süpernatantlar, protein analiz dəsti (Biorad DC, Biorad, Inc., Hercules, CA) istifadə edərək zülal tərkibi üçün ölçülmüş, lizis tamponunda 80 μg / 20 μl konsentrasiyasında ayrılmış və - 80-də saxlanılmışdır. ° C, əks halda eyni gündə istifadə olunur. Nümunələr yükləmə tamponu ilə qarışdırıldı (100 mM Tris, pH 6.8; 200 mM dithitreitol;% 4 SDS;% 20 qliserol;% 0.2 bromofenol mavisi) 1: 1 seyreltmede, 5 dəqiqə qaynadılmış, tez buzda soyudulmuş və sonra % 12 SDS-poliakrilamid Tris-glisin jelləri üzərində elektroforlaşdırılmışdır. Nitroselüloz membranlara (Hybond-C, Amersham, Bucks, Böyük Britaniya) köçürülmüş zülallar, 5X Tris tamponlu salin-Tween (1 mM C) içərisində% 10 yağsız quru süd ilə müalicə edilmişdir.₄H₁₁YOX₃; 0.145 M NaCl; 0.2% SDS; 0.1% Tween 20) gecə 4 da⁰C. Membranlar poliklonal dovşan əleyhinə osFosB (1: 1000 seyreltmə; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, ABŞ) və ya anti-BDNF (1: 500 seyreltme; Millipore, Temecula, CA, ABŞ) ilə reaksiya verildi və bağlı antikorlar istehsalçının göstərişlərinə əsasən (Lumi-işıqlı qərb ləkələmə substratı; Roche, Indianapolis, IN, ABŞ) kimyəvi-lüminesansla aşkar edildi və rəqəmsal görüntü analiz sistemi (LAS-1000, Fuji filmi, Tokyo, Yaponiya) ilə kəmiyyət göstərildi. Hər bir nümunənin rəqəmləşdirilmiş dəyərləri yükləmə nəzarəti β-aktinə normallaşdırıldı və sonra bütün dəyərlər NH qrupunun orta dəyərinə nisbi dəyərlərə çevrildi.

Statistik təhlil

Məlumatlar bir və ya iki tərəfli [kortikosteron məlumatları; X müddəti (2 səviyyələri), X müddəti (4 səviyyələri), varyans analizi (ANOVA) və qruplar arasında planlaşdırılan müqayisələr post hoc StatView proqramını istifadə edərək (Abacus, Berkeley, CA, ABŞ) lazım olduqda Fisher-in PLSD testi. Bədən çəkisi və qida qəbulu məlumatları ANOVA-nın təkrar tədbirləri ilə daha sonra təhlil edildi, ardından Bonferroni düzəliş edildi P dəyər tənzimlənməsi. Mərhələ səviyyəsində müəyyən edilmişdir P <0.05 və bütün dəyərlər ± SEM vasitələri olaraq təqdim edildi

Qida alınması və bədən çəkisi

MS qadınlar PND 39-ə qədər yaşa uyğun NH çəpərlərindən daha yüngül çıxdılar və sonra çəki fərqləri müşahidə olunmadı (Şəkil (Şəkil2A) .2A). Statistik cəhətdən əhəmiyyətli fərqlər (P<0.05) NND və MS qadınları arasında PND 32 və 39 istisna olmaqla, PND 36 - 37 dövründə müşahidə edildi. Dadlı qidaya giriş MS təcrübəsi ilə çəki fərqini azaltdı və NH və MS + HPF arasındakı statistik əhəmiyyət PND 36-dan sonra yox oldu. Təkrar ANOVA-nın zamanla bədən çəkisinin artmasının MS və MS + HPF arasında fərqli olduğunu göstərdi [F(1,780) = 2.146; P= 0.0008], lakin NH və MS arasında deyil. MS qadınların gündəlik çiyələk alınması yaşa uyğun NH çəpərindən fərqlənmədi (Şəkil (Şəkil2B) .2B). Cookie girişi, MS qadınlarının gündəlik çovqun qəbulunu basdırdı, lakin gündəlik kalori istehlakı, statistik əhəmiyyət kəsb etmədən çerez girişi ilə artırılmağa meyllidir. ANOVA-nın təkrar tədbirləri ilə kalori qəbulunun analizi ananın ayrılması və qida vəziyyətinin heç bir təsiri aşkar etməyib. Bütün eksperimental dövrdə ümumi kalori miqdarı (PND 28 - 62) eksperimental qruplar arasında fərqlənmədi (Şəkil (Şəkil2C) .2C). MS + HPF qadınlarının istehlak etdiyi ümumi kalorinin 40% -i çərəzlərdən (çaydan 3259.921 ± 211.657 kkal, çərəzlərdən 2184.641 ± 186.077 kcal) çıxdı. PND 62'ta MS qadınların retroperitoneal yağ padası, yaşa uyğun NH çəpərlərindən fərqlənmədi və statistik əhəmiyyətə malik olmadan çerez əlavəsi ilə artırıla bilərdi (P= 0.0833, MS vs MS + HPF) (Şəkil (Şəkil 22D).

 

Şəkil 2

Bədən çəkisi (A), gündəlik yemək və kalorili (B), ümumi kaloriya alımı (C) və retroperitoneal yağ padəsinin çəkisi (D). NH; əldən verməyən, yalnız chow ilə bəslənən, MS; yalnız çow ilə qidalanan maternal ayırma, MS + HPF; Chow ilə qidalanan ana separasiya ...

Davranış qiymətləndirmələri

NH, MS və MS + HPF qadınlarının ambulator fəaliyyətləri PND 54-də kompüterləşdirilmiş fəaliyyət kamerasında ölçülmüşdür. MS qadınların ilk (0 - 15 dəq) və sonrakı seans (15 - 30 dəq) müddətində ambulator sayları əhəmiyyətli dərəcədə azalmışdır. NH dişiləri ilə; Bununla birlikdə, əhəmiyyətli bir azalma (P<0.05) NH-yə nisbətən yalnız MS + HPF qrupundakı sonrakı seans zamanı müşahidə edildi (Şəkil (Şəkil3A) .3A). Birinci 15 min sessiyasında səyahət edilən ümumi məsafə MS (P<0.05), lakin NH ilə müqayisədə MS + HPF-də deyil (şəkil (Şəkil3B) .3B). Ambulator fəaliyyəti testi zamanı qulluq davranışları və defekasiya fəaliyyəti qeyd edildi (Şəkil (Şəkil 3C3C & D). MS təcrübəsi rostral baxımı əhəmiyyətli dərəcədə artırdı (P<0.05, NH və MS) çərəz girişini azaldır (P<0.05, MS və MS + HPF) (Şəkil (Şəkil3C) .3C). MS qadınların defekaslıq fəaliyyəti statistik əhəmiyyətə malik olmayan NH-yə nisbətən artmağa meylli idi və çerez əlavəsi onu əhəmiyyətli dərəcədə azaltdı (P<0.05, MS və MS + HPF) (Şəkil (Şəkil 33D).

 

Şəkil 3

Ambulator fəaliyyəti testi PND 54-da həyata keçirilir. Ambulator sayılar ardıcıl olaraq hər 5 min sessiyada atıldı. Ambulator fəaliyyəti testinin 30 min əsnasında törəmə davranışları və defekasiya fəaliyyəti qeyd edildi. Toplam ambulator sayım (A) və səyahət etdi ...

Anksiyete kimi davranışları daha da qiymətləndirmək üçün siçovulların ambulator fəaliyyəti testindən (PND 2) sonra 56 gündən sonra artıb artı labirent testinə məruz qaldı. MS qadınlarda açıq qollarda sərf edilən müddət əhəmiyyətli dərəcədə azalıb (P <0.05), lakin NH ilə müqayisədə MS + HPF-də deyil (şəkil (Şəkil4A) .4A). Eksperimental qruplar arasında faiz açıq qol girdisi fərqlənmədi (Şəkil (Şəkil4B) .4B). Depressiyaya bənzər davranışları qiymətləndirmək üçün sıçanlar yüksək artı labirent testindən (PND 3) sonra 59 gün məcburi üzgəc testinə məruz qaldılar. 5 min məcburi üzgüçülük testi zamanı immobilizmin müddəti MS qadınlarda əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır (P NH ilə müqayisədə <0.05) və MS + HPF qadınlarının hərəkətsizlik skoru NH ilə fərqlənmədi (şəkil (Şəkil 44C).

 

Şəkil 4

Yüksək artı labirent testi (A, B) və sərxoş üzmə testi (C) zamanı hərəkətsizliyi zamanı açıq qüvvələrə sərf olunan vaxt və giriş. Siçovullar PND 56-da yüksək səviyyəli artı labirent testinə və PND 59-da zorla üzmə testinə məruz qalıblar. NH; yalnız çow ilə qidalanmayan, ...

Plazma kortikosteron səviyyəsi

Üzmə testindən bir həftə sonra siçovulların dayanıqlıq stressi alındı ​​və 0, 30, 60 və 120 min nöqtələrində 2 h əyilmə sessiyası zamanı toplandı və plazma kortikosteron təhlili üçün istifadə edildi (Şəkil (Şəkil5) .5). Bazal kortikosteron səviyyələri (0 vaxt nöqtəsi) qruplar arasında fərqlənmədi; Stress başladıldıqdan sonra 30-da və 60 min vaxt nöqtələrində MS-dən daha yüksək olan kortikosteron səviyyəsinin stress ilə bağlı artmasıP<0.05, NH və MS hər zaman nöqtəsində). MS + HPF-nin plazma kortikosteron səviyyələri, stresin başlamasından 30 dəqiqə sonra NH-dən fərqlənmədi, lakin 60 dəqiqə vaxtında NH-dən aşağı idi (P <0.05; NH-də 394.29 ± 38.35 ng / ml, MS + HPF-də 247.48 ± 24.57 ng / ml). Stressin yaratdığı kortikosteron səviyyələrinin 2 yollu ANOVA ilə təhlili ana ayrılmasının əsas təsirlərini aşkar etdi [F(1,56) = 8.814, P= 0.0045] və vaxtı [F(3,56) = 9.335, P<0.0001] və qida vəziyyətinin təsiri yoxdur. Ananın ayrılması ilə zaman arasında və ya qida vəziyyəti ilə zaman arasında əhəmiyyətli qarşılıqlı təsir tapılmadı.

 

Şəkil 5

2 h dövrü sessiyasında plazma kortikosteron səviyyələri. Sıçanlar zorla üzmə testindən bir həftə sonra bərpa stressinə məruz qaldılar. Qidalanma vəziyyəti bərpa dövründə davam etdi. Siçovullar məhdudlaşdırma qutusuna yerləşdirildi ...

ΔFosB və BDNF qərb ləkələri

NAc-da ΔFosB və BDNF səviyyələri qərb blot təhlili ilə tədqiq edilmişdir (Şəkil (Şəkil6) .6). ΔFosB əhəmiyyətli dərəcədə azaldılmışdır, lakin BDNF MS qadınlarda NAcP NH ilə müqayisədə <0.05) (Şəkil (Şəkil 6A6A & B). Fem MS qadınların NAc-dakı FosB səviyyəsi çərəz daxil olmaqla normallaşdırıldı; yəni NH və MS + HPF ilə BDNF səviyyəsi arasında heç bir fərq daha da artırılmadı (P <0.05, MS və MS + HPF). MS qadınlarının hipokampusundakı BDNF səviyyələri NH-yə nisbətən əhəmiyyətli dərəcədə azalmışdır (P <0.05) və çərəz daxil olmaqla bərpa olunmadı (şəkil (Şəkil 66C).

 

Şəkil 6

Hipokampusda (C) NAc (A, B) və BDNF səviyyəsində ΔFosB və BDNF səviyyələrinin Western blot təhlili. Davamlı testlərdən asılı olan siçovullar PND 62-da western blot analizi üçün toxuma nümunələrini toplamaq üçün qurban verilmişdir. NH; ...

Çörəkli qida əlamətləri MS qadınların psixo-emosional davranışlarını yaxşılaşdırdı

Bu çalışmada, həyəcan və depresyonu göstərən davranış skorları, ambulator fəaliyyəti, rostral qulluq və defektasiya fəaliyyəti kimi fəaliyyət testi; Yüksək artı labirent testi zamanı açıq silah qalmaq; zorakı üzmə testi zamanı hərəkətlilik, yeniyetməlik və gənclik dövründə Oreo çerezlərinə pulsuz giriş imkanı verən MS qadınlarda təkmilləşdirilmişdir. MS xəstələrində bildirildiyi kimi, kəskin stresə qarşı kortikosteron reaksiyası MS dişilində blunted edilmişdir ¹⁴. Blunted kortikosteron reaksiyası MS təcrübəsinin bir nəticəsi kimi görünür; yəni təkrarlanan stressin təcrübəsi, çünki kəskin stress probleminə HPA ekseninin cavabları xroniki təkrarlanan stressdən ^{40, 41}. Tədqiqatlar yağda yüksək dərəcədə üstünlük verilən pəhriz xəstəliyinə məruz qalmanın əsas HPA eksen aktivliyini və kəskin stressə olan endokrin cavablarını dəyişə biləcəyini irəli sürdü ⁹stres reaksiyalarını yaxşılaşdırın ^{17, 19} və narahatlıq kimi davranışları azaltmaq ^{18, 20}. Həmçinin, erkən yaşda və gənclikdə Oreo çərəzlərinə (~ 21% yağ məzmunu, orta yağlı pəhriz) pulsuz giriş blunted HPA eksen funksiyasını normallaşdırdı və kişi MS siçovullarında təkmilləşdirilmiş anksiyete kimi davranışları normallaşdırdı ¹⁴. Yəni, ergenlik çerezinin əldə edilməsi, MS təcrübəsi, erkən yaşda təkrarlanan stress və davranış problemlərini yaxşılaşdırmaqla blunted HPA eksen funksiyasını yaxşılaşdıra bilər. Lakin, bu işdə, ergenlik və gənclik dövründə çiyələk girişinə qadın MS siçovullarında kəskin stresə cavab verən HPA eksen fəaliyyəti inkişaf etməmişdir. Qadın MS siçovullarında ergenlik çerezinin anksiyolitik və / və ya antidepresan effektlərinin HPA eksen funksiyası ilə əlaqələndirilməməsi mümkündür, baxmayaraq ki, bu, kişi MS sıçanlarında idi. Kişi və qadın sıçanları çox nöroendokrin və davranış parametrləri ilə fərqlənir və stressə zəiflik cinsi asılıdır ^{42, 43}. Əvvəlki tədqiqat 7 gün orta yağlı pəhriz protokolu kəskin stressdən sonra erkək selektiv şişirdilmiş kortikosteron salınmasına gətirib çıxardığını bildirdi ⁶.

Qadın siçovulların NAc'sində susuz qida əlamətləri və nöron funksiyası

Bu araşdırma göstərir ki, ΔFosB ifadəsi azalır və MS təcrübəsi ilə qadın siçovulların NAc-da BDNF artmışdır. Psixoloji və ya metabolik stressin NAc-da ΔFosB ifadəsini artırdığı bildirilmişdir ^44-46. Tədqiqatlar transkripsiya amili ΔFosB NAc neyronlarında BDNF ifadə ilə əlaqəli olduğunu irəli sürmüşdür ^{32, 47-49}. Birlikdə alındığına görə, NAc-da azalmış ΔFosB və BDNF artımının azalması, erkən yaşda MS stresinin uzunmüddətli nəticəsi ola bilər, ehtimal ki, NAc nöronal funksiyasını modulyasiya edir. NAc nöronal funksiyasını davranış stresi paradiqması ilə modullaşdırma təklif edildi ^{24, 25} və onun disfunksiyası depressiya və narahatlıq pozğunluqları ilə əlaqədardır ^{22, 23, 26, 27}. Həqiqətən, NAc-da artmış BDNF sinyallığı stress-təsirə məruz qalan depressiya modellərində bildirilmişdir ^50-52və стресс-induced depresif effektlər siçovullarda ΔFosB-dən striatumda ifadə olunmuşdu ⁵³. Beləliklə, qadın MS siçovulların depressiya və / və ya narahatlıq kimi davranışları NAc-da azalmış ΔFosB və artmış BDNF ifadəsi ilə bağlı ola bilər.

Bu çalışmada ergenlik döneminde çerez erişimi kadın MS farelerinde ΔFosB ve BDNF ifadelerini artırdı. Bu nəticə, əvvəlki hesabatlarla uyğundur ki, xeyli diyetə məruz qalma NAc-da ΔFosB səviyyəsinin artmasına gətirib çıxarır ³¹, və yüksək yağlı pəhriz ΔFosB üzərində çoxdan ifadə edən siçanların NAc-da BDNF səviyyələrini artırdı ³². Striatumdakı ΔFosB ifadəsinin artdığını göstərir ki, əvvəlki hesabat nəzərə alınaraq, stressə səbəb olan depresif effektlərə möhkəmlik göstərir ⁵³, çərşənbə axşamı günü MS qadınlarımızın çərşənbə axşamı günü əldə etdiyi ΔFosB artımının artması; yəni bazal səviyyəsinə normalləşdirilmiş olsa da, ergenlik cookie çıxışının antidepresan və / və ya anksiyolitik effektivliyinə səbəb ola bilər. Lakin, NAc-da artan BDNF siqnalının əsasən depressiv modellərdə olduğu bildirilmişdir ki, çərəzlərin əldə edilməsinə sahib olan MS qadınların NAc-da BDNF səviyyəsinin antidepresan və anksiolitik təsiri ilə bağlı olduğu aydın deyil ^50-52lakin nadir hallarda antidepresan modellərdə. Əlavə tədqiqatlar təmin edilir.

MS və HPF'nin hipokampal BDNF səviyyələrinə təsiri

Hipokampusda BDNF səviyyəsinin azalması, həm də bu işdə istifadə edilən oxşar MS protokoluna məruz qalan kişi və qadın sıçanlarında bildirilmişdir ^{54, 55}. Eyni zamanda, bu işdə NH müayinələrinə nisbətən qadın MS sıçanlarının hipokampusunda BDNF səviyyəsi azalmışdır. Hipokampal nörogenez anksiyete və depressiya simptomları ilə əlaqədardır ^{56, 57}və hipokampusun HPA eksen fəaliyyətinin geribildirim tənzimləməsinə cəlb edildiyi bilinir. HİP aktivliyinin MS qadınlarımızda blunted olduğunu xatırladaraq, hipokampusdakı BDNF səviyyəsinin azalması, ehtimal ki, blunted HPA eksen fəaliyyəti ilə bağlı olaraq, MS təcrübə ilə narahatlıq və / və ya depressiya pozğunluqlarına təsir göstərə bilər. MS qadınlarda hipokampal BDNF səviyyəsi və HPA eksen fəaliyyəti arasındakı əlaqələr bu işdə cookie girişinin ikisini də yaxşılaşdırmadığından daha da dəstəkləndi. Əvvəlki araşdırma, yüksək yağlı pəhriz (32% yağ) uzunmüddətli istehlakının, bu işdə istifadə edilən oxşar MS protokoluna məruz qalan kişi MS sıçanlarının hipokampusunda BDNF ifadəsini artırdığını göstərdi ⁵⁸. Ergenlik dövründə (~ 21% yağ) bişirmə əleyhinə girişin təsiri qadın MS siçovulların hipokampal BDNF səviyyələrinə təsir edir.

Oreo çerezində yağ / şəkər tərkibinin davranış təsiri

Bu çalışmada, Oreo çerezlerine pulsuz giriş, qadın sıçanlarında psixo-emosional problemləri erkən yaşda stresli bir təcrübə ilə yaxşılaşdırdı. Oreo çerezi, yalnız yağda deyil, cədvəldə göstərildiyi kimi şəkərin yüksək olduğu bir şokolad çerezidir Table1.1. İnsan işində şokolad yemək, içməli su ilə müqayisədə mənfi əhval-ruhiyyəni azaldıb, baxmayaraq neytral və müsbət əhval-ruhiyyədə heç bir təsir tapılmadı ⁵⁹. Və şokoladın əhval-ruhiyyənin yaxşılaşması təsiri şokoladın (südlü şokolad və sadə şokolad) doyurulmasından asılı idi və bu, şirin yemək yeyən yeməklərin eksperimental olaraq səbəb olan mənfi əhval vəziyyətini yaxşılaşdırdığını göstərir. Xroniki yumşaq stress ilə depressiyalı heyvanlarda sukroz istəklərinin artması və depressiya ruhi olan subyektlərdə xüsusilə doyurulmuş süd şokoladının istəkləri artırıldığı bildirildi ⁶⁰. Sükroz və / və ya qarğıdanın azad seçimi, stress stəkanı kəskin stressə bütün modullaşdıqdan əlavə ⁶¹. Bundan əlavə, qısa müddətli yağlı pəhriz (20% Misir yağı, Oreo çerezləri ilə oxşar yağ tərkibi) cinsi cəhətdən dimorphically bir şəkildə neyroendokrin və davranış dəyişikliyinə gətirib çıxardı ^4-6. Birlikdə götürüldükdə, Oreo çərəzlərinin şəkər və yağ məzmunu, MS qadınlarda neytral və davranış problemlərini yaxşılaşdırmağa kömək edə bilər. Bu işdə müşahidə edilən MS xəstələrində Oreo çerezinin əldə edilməsi kimi eyni miqdarda yağ və şəkər təminatının oxşar artımlar yarada biləcəyini araşdırmaq üçün daha çox tədqiqatlar təmin edilir.

Nəhayət, bu çalışmada çərəzə ilə MS qadınlarda retroperitoneal yağ depolarının artırılması tendensiyası müşahidə edildi. Stressin ekssus funksiyası üzərində modulyasiya təsiri ilə yanaşı, doyurucu qida əlamətləri yağlı depotla dolaşan leptin və insulin səviyyələrini əhəmiyyətli dərəcədə artırdı ^{15, 61}. Hər iki leptin və insulin də meso-limbik mükafat sistemində tənzimləyici funksiyanı tətbiq etmək təklif edilmişdir və xüsusilə ventral tegmental sahədə dopamin nəql edənlərin insulinin artması ifadə olunur ^{62, 63}. Yuxarıda təsvir edildiyi kimi, meso-limbik mükafat sistemi stress axının funksiyası ilə əlaqədar psixo-emosional pozğunluqlara yüksək dərəcədə təsir göstərir ^22-27. Beləliklə, artan leptin və / və ya artan yağ deposu ilə insulinin artan meso-limbik mükafat sistemində, əgər istənilən bir modulyasiya, yeməkli qida əlamətləri ilə ruh yüksəkliyində rol oynamağa gəlir. Həqiqətən də, yüksək yağlı pəhrizin uzunmüddətli istifadəsi (32% yağ tərkibi) bu işdə istifadə olunan oxşar MS protokoluna məruz qalan qadın sıçanlarda olduqca artmış yağ depoları ilə narahatlıq kimi davranışları artıran və plazma leptin və insulinin səviyyəsini artırdı ¹¹. Lakin, MS çərəzlərimizdə cookie çıxışında (xNUMX% yağ tərkibi ilə orta yağlı pəhriz) müşahidə olunan davranışlı təkmilləşdirmələrin artan yağ depoları ilə əlaqəsi olub-olmadığını aydınlaşdırmırlar, çünki cookie girişində retroperitoneal yağ deposunun artması statistika əhəmiyyətinə çatmırdı və indiki dövrdə nə leptin, nə də insulin nə ölçüldü.

axırıHPA eksenindeki nörokensiyalar, NAc neyronları və hipokampus gənc qadın MS siçovulların ilk iki həftəsində anadan ayrılma təcrübəsi ilə psixo-emosional əlamətlərinə zidd olduğu ortaya çıxdı. Yüksək qəbul edilən qidaya, orta yaşda yağlı pəhrizə, yeniyetməlik dövrünə və gəncliyə sərbəst giriş, MS qadınlarda depressiya kimi davranışları artırdı və NAc nöronlarında funksional modulyasiya onun əsas neyron mexanizmlərində rol oynaya bilər.

Müəlliflər, statistik təhlili və Dr. JY Lee ilə eksperimental üsullarla kömək üçün Dr. SB Yoo'ya təşəkkür edirlər. Bu tədqiqat Milli Elmi Araşdırmalar Fondunun (2013R1A1A3A04-006580) və Koreya Hökuməti (Elm Nazirliyi, İKT və Gələcək Planlaşdırma Nazirliyi) tərəfindən maliyyələşdirilən Seul Milli Universitetində (2014050477) Yaşlılar üçün Oromaksillofasiyal Disfunksiya Tədqiqatları Mərkəzi vasitəsilə təmin edilmişdir.