Depressiya və anksiyete ilə əlaqədar davranışlar üçün prefrontal kortikal dövriyyə xolesistokinin vasitəçiliyi: ΔFosB (2014)

mücərrəd

Azalan medial prefrontal korteks (mPFC) nöronal fəaliyyət, sosial məğlubiyyətə səbəb olan depresiya və siçanlarda narahatlıq kimi davranışlarla əlaqələndirilir. Bununla birlikdə, azalmış mPFC fəaliyyətinin və molekulyar mexanizmlərin rolu naməlum olaraq qalır. Burada göstəririk ki, FosB transkripsiyası amilinin mPFC-də, xüsusən də prelimbik (PrL) bölgəsində, stressə qarşı həssaslığı vasitəçilik edir. L PrL-də FosB induksiyası, xroniki sosial məğlubiyyət stresindən və regionFosB-nin bu bölgədəki həddindən artıq sıxılmasından sonra həssas olan siçanlarda seçici şəkildə meydana gəldi, lakin yaxın infralimbik (İL) ərazidə deyil, artan stres həssaslığını artırdı. ΔFosB bu təsirləri qismən xoletsistokinin (CCK) -B reseptorunun induksiyası ilə istehsal etdi: mPFC-də CCKB blokadası möhkəm bir fenotipə səbəb olur, halbuki mPFC-yə daxil olan CCK administrasiyası sosial stressin anksiogen və depresan kimi təsirlərini təqlid edir. Əvvəllər həssas siçanlarda mPFC neyronlarının optogenetik stimullaşdırılması xroniki sosial məğlubiyyət stresindən sonra görülən bir neçə davranış anormallığını dəyişdirdiyini aşkar etdik. Buna görə, kortikal proqnozların optogenetik stimullaşdırılmasının CCP-nin mPFC-də patoloji təsirini xilas edəcəyini fərz etdik. MPFC içərisində CCK infuziyasından sonra, əhval tənzimləməsində iştirak edən iki subkortikal quruluşa, bazolateral amigdala ya da nüvənin böyüməsinə, optogenetik olaraq mPFC proqnozlarını stimullaşdırdıq. Corticoamygdala proqnozlarının stimullaşdırılması CCK-nin anksiojenik təsirini maneə törətdi, baxmayaraq ki, sosial məğlubiyyətin digər əlamətlərinə heç bir təsir göstərilmədi. Əksinə, corticoaccumbens proqnozlarının stimullaşdırılması CCK-nin təsir etdiyi sosial qaçınma və saxaroza üstünlük çatışmazlıqlarını, lakin anksiyojenik təsirləri əks etdirdi. Birlikdə, bu nəticələr, sosial stresə səbəb olan davranış çatışmazlıqlarının fərqli subkortikal hədəfə doğru kortikal proqnozlar vasitəsilə ΔFosB və CCK-nın iştirak etdiyi mPFC-də molekulyar uyğunlaşmaların qismən vasitəçilik edildiyini göstərir.s.

Keywords: accumbens, amigdala, narahatlıq, CCK, depresiya, mPFC

giriş

Medial prefrontal korteks (mPFC), hipokampus, amiqdala və nüvə böyüməsi (NAc) daxil olmaqla bir neçə anatomik və funksional bir-biri ilə əlaqəli limbik beyin bölgələri, depressiya və narahatlıq əsas simptomlarının vasitəçiliyində tətbiq olunur (; ; ; ; , ; ; ). Məsələn, amigdala qarşı kortikal rəyin olmaması disforik duyğularla əlaqələndirilir və uğurlu müalicədən sonra normal səviyyəyə qayıdır. MPFC sahəsi olan subgenual cingulate korteksinin dərin beyin stimullaşdırılmasının antidepressant təsiri həm kortikal, həm də subkortikal beyin fəaliyyətinin normal səviyyəyə qaytarılması ilə əlaqələndirilir (; ). Eynilə, NAc'ın dərin beyin stimullaşdırılması antidepressant və anksiyolitikdir və NAc, amgdala və mPFC-də dəyişdirilmiş metabolizm ilə əlaqələndirilir (; ; ). Bu məlumatlar, mexanizmlərdən asılı olmayaraq antidepresan müalicəsinin həm aktiv, həm də aktiv olmayan subkortikal dövrələrdə fəaliyyətini normallaşdırdığı əhval pozğunluqlarının bir sinir şəbəkəsi fərziyyəsini dəstəkləyir (; ; ; ; ; ).

Fiziki və ya psixoloji stresə xroniki məruz qalma ilə əlaqəli heyvan modelləri mPFC-də neyronların quruluşunu və fəaliyyətini pozur (), amiqdala (), hipokampus () və NAc (; ). Xroniki sosial məğlubiyyət stresi, depressiyanın etoloji cəhətdən etibarlı bir modeli (), Zif268 və c-Fosun azaldılmış ifadəsindən qaynaqlanan mPFC nöronal aktivliyi azaldır (; ). Bundan əlavə, mPFC-nin optogenetik stimullaşdırılması bu çatışmazlıqları bərpa edir və antidepresan kimi təsir göstərir (), əhval-ruhiyyə ilə əlaqəli hadisələrdə mPFC-nin əhəmiyyətini təsdiqləyir. To, gəmirici mPFC, primatlarda olduğu kimi, bazolateral amygdala (BLA) və NAc-a proqnozlar vasitəsilə hissəvi emosional davranışa nəzarət edir (; ; ). Buna baxmayaraq, mPFC-nin bu rolunu vasitə edən molekulyar mexanizmlər naməlum olaraq qalır.

Hazırkı tədqiqat əvvəlcə stress fəsadına qarşı çıxdığı xroniki sosial məğlubiyyət stresi ilə NAc-də yaranan sabit bir transkripsiyon amili ΔFosB-yə yönəldilmişdir. (). Məğlubiyyət stresindən sonra ΔFosB induksiyasının beyin miqyaslı xəritəsini həyata keçirdik və əvvəlki tədqiqatlara bənzər şəkildə tapdıq (; ; ), mPFC-də möhkəm induksiya. Təəccüblüdür ki, mPFC-də belə “FosB induksiyası” stressə həssaslığı artırır. Xoletsistokinin (CCK) -B reseptorunu mFFC-də ΔFosB-nin molekulyar hədəfi olaraq təyin etdik, burada CCKergic nörotransmissiyası həm sosial stressin həm ansiogen, həm də depresogen təsirlərinə məruz qalmışdır (, ). MPFC-də CCK fəaliyyətinin həm sosial, həm də narahatlıq və depressiya kimi təsirləri üçün lazımlı və kifayət olduğunu gördük. Bundan əlavə, optogenetik yanaşmalardan istifadə edərək, mPFC alt dövranlarında CCK-nın xüsusi hərəkətlərini nümayiş etdiririk: mPFC-BLA proqnozlardakı CCK narahatlıq simptomlarını vasitə edir, mPFC-NAc proqnozlarında CCK depressiya simptomlarını vasitə edir.

Material və metodlar

Təcrübə 1: Xroniki sosial məğlubiyyət stresi ilə ΔFosB induksiyasının beyin miqyasında xəritələşdirilməsi.

Səkkiz həftəlik C57BL / 6J kişi siçanları əvvəllər təsvir olunduğu kimi ardıcıl 10 gün ərzində xroniki sosial məğlubiyyət stresinə məruz qaldılar (; ; ) (görmək Cədvəl 1; Əncir 1A). Qısaca, hər bir siçan gündə 1 dəqiqə ərzində tanımadığı, aqressiv bir kişi CD5 təqaüdə çıxan damazlıq siçan məruz qaldı. CD1 təcavüzkar ilə birbaşa qarşılıqlı əlaqədən sonra (5 min) heyvanlar, hissedici, lakin fiziki deyil, təmasda olan növbəti 24 h üçün eyni qəfəsin bitişik bir hissəsinə yerləşdirildi. Nəzarət heyvanları ekvivalent qəfəslərdə, lakin eyni gərginliyin üzvləri ilə yerləşirdi. Sosial qarşılıqlı sınaqlar, məğlubiyyətin son günündən sonra 24 saat sonra edildi. Tanımadığı bir CD1 kişi siçanına sosial qaçınma, yayımlanan protokollara görə qiymətləndirildi. "Qarşılıqlı təsir zonasında" (qəfəs ətrafındakı bir 8 sm geniş bir dəhliz) sərf olunan vaxt ölçüldü. Məğlub olan siçanların həssas və möhkəm subpopulyasiyalara bölünməsi əvvəllər təsvir olunduğu kimi aparıldı (; ). İdarəetmə siçanlarının əksəriyyəti boş hədəf mühitindən daha çox sosial hədəflə qarşılıqlı əlaqə qurmağa daha çox vaxt sərf etdiyindən, qarşılıqlı təsir nisbəti 100 (qarşılıqlı təsir zonasında sosial hədəfin olmadığı və qarşılıqlı təsir zonasında sərf olunan bərabər vaxt) bir kəsmə olaraq istifadə olunur: puanları <100 olan siçanlar "həssas", ≥100 puanları olanlar "dayanıqlı" kimi etiketlənir. Geniş davranış, biyokimyəvi və elektrofizyolojik analizlər bu fərqli həssas və davamlı alt populyasiyaların etibarlılığını dəstəkləyir (; ; ).

Cədvəl 1.  

Mm başına FosB-immunoreaktiv nüvələrin orta sayı (± SEM)2 xroniki (24 d) sosial məğlubiyyət stresindən sonra beyin nəzarətində, həssas və davamlı siçan 10 saat sonra
Şəkil 1.  

MFPB-də fosB induksiyası stresə qarşı həssaslığı artırır. A, 24 sosial məğlubiyyət epizodlarının sonundan sonra PFosB immunohistokimyasının mPFC 10 saatında nümayəndəsi fotomiqrafları. B, ΔFosB induksiyası GABAergicdə baş vermir ...

Sosial qarşılıqlı testdən dərhal sonra siçanlar 4% paraformaldehid / PBS ilə kəllədaxili olaraq müayinə və mükəmməlləşdirildi. Hüceyrə ΔFosB sayar+ NAc-dəki neyronlar əvvəllər göstərildiyi kimi aparıldı (). 30% saxaroza ilə beyinlər krioprotekte edilmiş və coronal bölmələr (30 μm) bir dondurucu mikrotomda kəsilmiş və immunohistokimya üçün işlənmişdir. Sərbəst üzən hissələr, 0.3% Triton və 3% normal keçi serumunu ehtiva edən bir tamponda yerləşdirilmişdir. ΔFosB, eyni tamponda zülalın N-terminal hissəsinə (1 / 1000 Santa Cruz Biotexnologiyası, kataloq # sc-48) qarşı qaldırılmış dovşan poliklonik antikorları istifadə edərək aşkar edildi, sonra biotinlənmiş keçi anti-dovşan IgG antikorları və avidin-biotinlə işləndi substrat olaraq DAB ilə peroksidaz kompleks metodu (Vector Laboratories). Diaminobenzidin inkubasiya dövrləri hər şərait üçün sabit saxlanıldı (100 s). Dilimlər monte edildi, susuzlaşdırıldı və örtüldü. ΔFosB-immunopozitiv hüceyrələr nüvədə xüsusi bir qəhvəyi bir ləkə göstərmiş və bir müşahidəçi tərəfindən mikroskop (20 × böyüdücü) istifadə edərək müalicə şərtlərini görmüşdür. Hər beyin sahəsini əhatə edən üç beyin bölməsi kəmiyyətləmə üçün siçan başına seçildi. Hər beyin bölgəsinin anatomik bölgüsü Paxinos siçan beyin atlası ilə bölünərək müqayisə edilərək aparıldı. İmmunohistokimya üçün şərtlər fon səviyyəsini ΔFosB-müsbət hüceyrələrin düzgün eyniləşdirilməsinə imkan verən minimuma endirmək üçün optimallaşdırılmışdır. Hər bir heyvan üçün orta dəyərlər hesablanmış və statistik təhlil üçün fərdi bir araşdırma kimi qiymətləndirilmişdir. İstifadə olunan antikor həm ΔFosB, həm də tam uzunluğundakı FosB'u tanısa da, Qərbin ləkələnməsindən bilirik ki, tədqiq olunan şəraitdə yalnız ΔFosB aşkar edilə bilər (; ).

Təcrübə 2: sosial stressə səbəb olan stressFosB neyron fenotipinin mPFC-də eyniləşdirilməsi.

Kortikal GABAergik neyronlarda ΔFosB ifadəsini araşdırmaq üçün xroniki sosial məğlubiyyət stresinə məruz qalan və NFosB üçün ləkələnmiş GAD2-tDTomato siçanlarının toxumalarını istifadə etdik (bax. Yuxarıda göstərildiyi kimi) Əncir 1B). Siçanlar yetişdirici toxuma GAD2-Cre siçanları (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; JAX səhmdar nömrəsi 010802) ()) ilə (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; JAX fond nömrəsi 007908) ilə dəyişkən dayanacaqlı tdTomato (RFP variant) daşıyır.

Təcrübə 3: prelimbik (PrL) və infralimbik (IL) korteksdə ΔFosB həddən artıq ekspressiyanın davranış təsirləri.

Yetkin kişi siçanlarında (8 həftə) mPFC'nin PrL və ya IL bölgələrinə HSV-ΔFosB-GFP və ya HSV-GFP vurmaq üçün stereotaksik əməliyyat edildi. Qısaca, siçanlar ketamin (10 mq / kq) və xylazin (1 mq / kq) qarışığı ilə anesteziya edildi və PrL üçün viral çatdırılma üçün aşağıdakı stereotaksik koordinatlar istifadə edildi: 1.8 mm (ön / arxa), 0.65 mm (yanal) ), −2.2 mm (dorsal / ventral); və IL üçün: 1.9 mm (ön / arxa), 0.75 mm (yanal), −2.8 mm (dorsal / ventral) orta xəttdən 10 ° bucaq altında (bregma ilə). Cəmi 0.5 μl təmizlənmiş virus 5 min müddət ərzində (0.1 mkl / dəq) iki 5 min istirahət ilə davam etdi. Viral enjeksiyon yerləri standart histoloji metodlardan istifadə edərək təsdiqləndi (bax) Əncir 1C). Mükəmməl dəqiqliklə, məlumatları siçanlarda IL qarşı IL qarşı selektiv şəkildə hədəfləmək mümkün olmasa da Şəkil 1C əsasən bir bölgəni və ya digərini hədəf almaq çox mümkün olduğunu göstər. Həqiqətən, iki bölgəni hədəfə almaqla əldə edilən fərqli davranış təsirləri (Nəticələrə bax) bu yanaşmanı əsaslandırır. Siçanların ilk dəstəsi yalnız submaximal sosial məğlubiyyət təcrübəsində istifadə edilmişdir (bax.) Əncir 1D). Əməliyyatdan üç gün sonra, siçanlar həmin gün ardıcıl iki məğlubiyyətə məruz qaldılar və daha sonra 24 saat sonra sosial qarşılıqlı təsir üçün sınaqdan keçirildi. Bu submaximal məğlubiyyət proseduru, genetik manipulyasiyalardan sonra ehtimal olunan fenotipləri aşkar etmək üçün əvvəllər təsdiq edilmişdir (; ).

Siçanların ikinci dəstəsi bazal narahatlıq və depresif kimi davranışları sınamaq üçün istifadə edildi (bax.) Əncir 1E-J). Əməliyyatdan bir gün sonra siçanlar 1% (w / v) saxaroza məhlulu ilə yerləşdilər. Növbəti gün, siçanlar gündəlik su ilə doldurulmuş bir su şüşəsi və 1% saxaroza həll şüşəsi arasında seçim edə bildilər. 24 h üçün saxaroza məhlulu suqəbuledici əməliyyatdan sonra dördüncü və beşinci gün ərzində ölçüldü və qəbul edilən mayenin ümumi miqdarının faizi ilə ifadə edildi. Siçanlar açıq sahədə (gün 3), yüksək artan labirent (gün 4), sosial qarşılıqlı əlaqə (gün 5 səhər) və məcburi üzmə (gün 5 günortadan sonra), yayımlanan protokollar əsasında sınaqdan keçirildi (). Bu test qaydası ilə sonrakı testlərdəki nəticələrin əvvəlkilərdən təsirlənmədiyini gördük (). Açıq sahədəki siçanların aktivliyi qırmızı işıq şəraitində videotekləmə sistemindən (Ethovision) istifadə edərək 5 min qeydə alınıb. Yüksək artan labirent, döşəmədən yuxarı 60 sm məsafədə yerləşən və iki açıq və iki qapalı qola bölünmüş iki düz kəsişən uçuş-enmə zolağından ibarət idi. Siçanlar labirentin mərkəzində ayrıca yerləşdirilmiş və 5 dəqiqə ərzində hər qolu sərbəst araşdırmağa icazə verilmişdir. Açıq sahədə və yüksək artan labirent testlərində mərkəzdə və açıq qollarda keçirilmiş vaxt, müvafiq olaraq, narahatlıqla əlaqəli cavabların tərs indeksi olaraq istifadə edilmişdir. Bir gün məcburi üzmə sınağı 5 dəqiqə ərzində aparıldı. Məcburi üzmə testi zamanı artan dözümsüzlük prodepressiya kimi bir davranış olaraq izah edildi. Bu 1 günlük test siçanlarda çox istifadə edildi və proqnozlaşdırılan etibarlılıq ölçüsü olaraq təsdiqləndi, buna görə antidepresan dərmanlar dözümsüzlük müddətini azaldır.

Nəhayət, ayrı bir siçan qrupu HSV-osFosB ilə mOFC inyeksiya edildi və submaximal məğlubiyyətdən sonra sosial qarşılıqlı təsir üçün sınaqdan keçirildi (bax) Əncir 1K).

HSV vektorları Rachael Neve'dən (Massaçusets Texnologiya İnstitutu) alındı. Maraq genləri (ΔFosB və GFP) CMV təbliğatçısıdır. Bu vektorlar əvvəlki nəşrlərdə geniş təsdiqlənmişdir (məsələn, ).

Təcrübə 4: xroniki sosial stressin mPFC-də CCKB reseptor səviyyəsinə təsiri.

24 saatında sosial qarşılıqlı testdən sonra beyinlər tez çıxarıldı və ardıcıl dilimləndi və mPFC sürətlə parçalanaraq quru buz üzərində donduruldu (baxın) Əncir 2A,B). RNT təcrid edilməsi, qPCR və məlumat analizi əvvəllər təsvir olunduğu kimi aparıldı (; ). RNT TriZol reaktivi (Invitrogen) ilə təcrid edilmiş və QIAGEN-dən RNAeasy mikro dəstləri ilə daha da təmizlənmişdir. Bütün RNA nümunələrinin 260 / 280 və 260 / 230 ≥1.8 dəyərləri olduğu təyin olundu. Tərs transkripsiya iScript (Bio-Rad) istifadə edərək edildi. SYBR Yaşıl (Quanta) istifadə qPCR, aşağıdakı dövrə parametrləri ilə Tətbiqi Biyosistemlər 7900HT RT PCR sistemi ilə aparıldı: 2 ° C-də 95 min; 40 s, 95 s üçün 15 ° C, 59 s üçün 30 ° C və 72 ° C üçün 33 s; tək PCR məhsullarını təsdiqləmək üçün dissosiasiya əyriləri yaratmaq üçün 95 ° C-yə qədər qızdırılıb. Məlumatlar C müqayisə edərək təhlil edildit conditionC ilə müalicə vəziyyətinin dəyərləri (həssas və ya davamlı siçan və ya HSV-osFosB vs HSV-GFP)t metod (). qPCR primerləri aşağıdakılardır: ΔFosB, irəli, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT və tərs, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, irəli, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC və tərs, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, irəli, AGCGCGATACATCCAGCAG və tərs, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, irəli, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG və tərs, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Şəkil 2.  

CCKB reseptorunun blokadası bir önəmlilik, antidepresan kimi təsir göstərir. A, Sosial məğlubiyyət yalnız davamlı siçanlarda mPFC-də CCKB reseptor səviyyəsini azaldır (n = 8 - 10). *p <0.05, nəzarətlə müqayisədə (bir tərəfli ANOVA). **p <0.05 ...
Təcrübə 5: ΔFosB-nin CCKB reseptoru və cFos səviyyələrinə təsiri.

Siçanlar HSV-osFosB ilə intra-PrL vuruldu. Əməliyyatdan sonra 72 saat sonra, viral overtekspressin zirvəsində enjeksiyon yerləri bir flüoresan mikroskop altında parçalandı (bax Əncir 2C). RNT izolyasiyası, qPCR və məlumat təhlili yuxarıda göstərildiyi kimi aparıldı. qPCR astarları aşağıdakılardır: c-fos, irəli, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA və tərs, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

Təcrübə 6: ΔFosB blokadasının stresə səbəb olan CCKB reseptor səviyyəsinə və dayanıqlığına təsiri.

Yetkin siçanlar HLV-GFP və ya HSV-unJunD ilə PrL-yə ikitərəfli vuruldu (bax) Əncir 2D-F). ΔJunD, DFosB-nin dominant-mənfi antaqonisti kimi çıxış edən JunD-nin N-terminal kəsilmiş mutantıdır. Siçanlar 5 d gündə iki dəfə sosial məğlubiyyətə məruz qaldılar. Maksimum HSV transgene ifadəsi dövrünə təsadüf etmək üçün qısaldılmış bu sürətlənmiş sosial məğlubiyyət protokolu əvvəllər istifadə edilmiş və sosial qaçışın maksimum səviyyəsini artırmaq üçün göstərilmişdir (). Son stres epizodundan 24 saat sonra, anestezikanın neyronal protein səviyyəsinə təsirinin qarşısını almaq üçün siçanlar anesteziya olmadan başlarını kəsdilər. Yoluxmuş toxuma PBS tərkibli proteaz (Roche) və fosfataz (Sigma-Aldrich) inhibitorlarında 15 ölçülü zərbədən istifadə edərək götürülmüş və dərhal quru buzda dondurulmuşdur. Nümunələr modifikasiya olunmuş RIPA tamponunda yüngül sonikasiya ilə homojenləşdirildi: 10 mm Tris bazası, 150 mm sodyum xlorid, 1 mm EDTA,% 0.1 SDS, 1% Triton X-100,% 1 natrium deoksixolat, pH 7.4 və proteaz və fosfataz inhibitorları yuxarıda. Laemmli tamponu əlavə edildikdən sonra, zülallar% 4-15 poliakrilamid qradiyentli jellərdə ayrıldı (Criterion System; Bio-Rad) və Western blotlama, istehsalçının protokollarına görə Odyssey sistemi (Li-Cor) istifadə edilərək həyata keçirildi. Membranlar CCKB reseptor antikoru ilə ləkələnmişdir (1/1000, Acris, kataloqu # AP01421PU-N). Başqa bir siçan qrupuna PrL-də AAV-unJunD və ya AAV-GFP enjekte edildi və daha sonra maksimal transgen ifadəsinə imkan vermək üçün əməliyyatdan 5 həftə sonra siçanlar submaksimal məğlubiyyət protokoluna təqdim edildi. Son məğlubiyyətdən 24 saat sonra sosial qarşılıqlı təsir üçün test edildi.

Təcrübə 7: daxili mPFC CI-988, CCKB antaqonistinin sosial stresə səbəb olan sosial qaçınma və anhedoniyaya təsiri.

MPFC-ni hədəf alan ikitərəfli kanül (1.0 mm kanül, cannula məsafəsinə qədər, 1.8 mm ön, enjektor −2.2 mm dorsal / ventral) həssas siçanlara implantasiya edilmişdir (bax) Əncir 2G,H). Əməliyyatdan bir həftə sonra, CI-10-nin 988 ng birbaşa PrP-ni hədəf alan mPFC-yə yoluxdu. Daha sonra siçanlar sosial qarşılıqlı davranışlarına görə sınaqdan keçirildi. Saxaroza üstünlük qalan 24 saat üçün ölçüldü. CI-988 (Tocris Bioscience) duzlu şəkildə həll edilmiş, aliqotlaşdırılmış və dondurulmuşdur. Final seyreltme sınaq günü hazırlanmışdır. Sosial qarşılıqlı sınaqdan əvvəl CI-988 idarə olunan (2 mq / kq) 30 dəqiqə əvvəl həssas olan siçanlarda əlavə bir təcrübə aparıldı.

Təcrübə 8: CCKB agonistinin sosial stresə həssaslığına təsiri və mPFC proqnozlarının BLA ya da NAc-a optogenetik stimullaşdırılması ilə tərsinə.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP və ya AAV-CaMKII-EYFP, ilk növbədə PrL-i hədəf alaraq sağ mPFC-yə vuruldu (bax) Əncir 3A –G). Beş həftə sonra, optik liflər sağ NAc (1.4 ön / arxa, 2.6 yanal, −4.7 dorsal / ventral orta xəttdən 25 ° bucaq altında) və ya BLA (−1.6 anterior / posterior, 3.1 lateral, −4.7 dors) yerləşdirilmişdir. / orta xəttdən heç bir açı olmayan ventral). Eyni cərrahi əməliyyat zamanı ikitərəfli kətan mPFC-yə yerləşdirildi (yuxarıya bax). Cannulae və liflər diş sementi ilə kəlləə bağlandı. Bundan sonra siçanlara 1 həftəlik davranış təcrübələri başlamazdan əvvəl bərpa etməyə icazə verildi. Siçanlar submaksimal məğlubiyyətə məruz qaldılar, sonra 24 saat sonra sosial qarşılıqlı əlaqə üçün sınaqdan keçirildi, birbaşa yüksəldilmiş üstəgəl labirent tərəfindən izlənildi və qalan 24 saat üçün saxaroza üstünlük verildi. İctimai qarşılıqlı sınaqdan əvvəl 30 dəqiqə əvvəl, siçanların yarısı CCK-8 (10 ng) ilə mPFC daxil edildi, digər yarısı isə vasitə (salin) aldı. Siçanlar cüt olaraq sınaqdan keçirilmişdir (bir vasitə və bir AAV-GFP və ya AAV-ChR8 olan bir CCK-2 ilə işlənmiş siçan). CCK-8 (Sigma) duzlu suda həll edilmiş, aliqotlaşdırılmış və dondurulmuşdur. Final seyreltme sınaq günü hazırlanmışdır.

Şəkil 3.  

CCK-8-da yaranan stres həssaslığı xüsusi kortikal proqnozlardan asılıdır. A, Submaximal sosial məğlubiyyətdən sonra 24 saat sonra və CCK-30 infuziyasından 8 dəqiqə sonra sosial qarşılıqlı əlaqə üçün bir test zamanı mPFC proyeksiya bölgələri lazerlə stimullaşdırıldı. CCK-8 infuziyası ...

Optik stimullar yayımlanan protokollara əsasən aparıldı (). Optik liflər (Thor Laboratories) xroniki olaraq implantasiya edilmiş və FC / PC adapteri ilə 473 nm mavi lazer dioduna (Kristal Lazerlər, BCL-473-050-M) qoşulmuşdur. Mavi işıq nəbzləri yaratmaq üçün bir stimulyator (Agilent, #33220A) istifadə edilmişdir. Bütün stimullaşdırmalar zamanı 40 ms 100 Hz (9.9 ms sünbül genişliyi) mavi işıq nəbzləri, yalnız sosial qarşılıqlı sınaq müddəti ərzində hər 3 s-ni BLA ya da NAcdakı terminal bölgələrə çatdırdı, kortikal bir partlayışa bənzəyən nümunəni təqlid etdi. fəaliyyət. Optik lif işığının intensivliyi hər istifadədən əvvəl bir işıq sensoru (Thor Laboratories, S130A) istifadə edərək yoxlanıldı və işıq intensivliyi ∼15 mW idi. Daha əvvəl elektrofizyolojik olaraq təsdiqlənmiş bu stimullaşdırma protokolu (), davranış müşahidələrinə və c-Fos ifadəsinin optogenetik cəhətdən stimullaşdırılmış bölgələrdən kənarda olmamasına əsaslanan nöbet yaratmadı ().

Təcrübə 9: CCKB agonistinin c-Fos mRNA səviyyəsi ilə ölçülən mPFC neyron fəaliyyətinə təsiri.

İkitərəfli cannulae, mPFC-ni hədəf alan böyüklər siçanlarına implantasiya edildi Əncir 3H). Bir həftəlik istirahətdən sonra siçanlar submaksimal məğlubiyyətə məruz qaldılar və bir müddət sonra CCK-8 24 ilə infuziya edildi. mPFC zərbələri dərman infuziyasından sonra 30 dəqiqə sonra götürüldü və yuxarıda göstərildiyi kimi mRNA analizi üçün hazırlanmış nümunələr götürüldü.

Heyvan yuvası.

Səkkiz həftəlik C57BL / 6J kişi siçanları (The Jackson Laboratoriyası) istifadə edilmişdir. Təcrübəli manipulyasiyalardan əvvəl bütün siçanlar ən azı 1 həftə müddətində heyvanlar məkanına yerləşdilər və 23 ° C-25 ° C-də bir 12 h işıq / qaranlıq dövrdə (7: 00 AM-də işıqlar) saxlanıldı ad libitum qida və suya giriş. Təcrübələr Sinir dağında yerləşən İcahn Tibb Məktəbində Nevrologiya Cəmiyyəti və İnstitusional Heyvanlara Qayğı və İstifadə Komitəsinin təlimatlarına uyğun olaraq aparıldı.

Statistik analizlər.

Göstərilən məlumatlar orta ± SEM (səhv sətirləri kimi təmsil olunur) şəklində ifadə edilir. İmmunohistokimyəvi, biokimyəvi və davranış analizlərindəki nəzarət, həssas və davamlı siçanlar arasında vasitələri müqayisə etmək üçün bir tərəfli ANOVA-lar istifadə edilmişdir. Bir tərəfli ANOVA-lar GFP-kontrolları ilə açıq sahədəki, yüksək artan labirent, məcburi üzmə və saxaroza üstünlük testləri ilə PrL və ya İL-də osFosB həddindən artıq ekspressiya arasındakı vasitələri müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir. GFP-kontrolları, osFosB-PrL və ΔFosB-IL arasında qarşılıqlı təsir testində iki tərəfli ANOVA istifadə edildi. İki tərəfli ANOVA-lar CCK-8 effektlərini bütün davranış təcrübələrində optogenetik stimullaşdırma ilə və ya olmadan müqayisə etmək üçün, həmçinin ΔFosB həddindən artıq ekspressiya və ya CI-988 infuziyasının sosial qaçışa təsirini müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir. Lazım olduqda post hoc analizlər bir Bonferroni istifadə edərək edildi post hoc test. Tələbələr t testlər, CI-988 infuziyasının təsirini saxaroza üstünlük vermə və məcburi üzmə testlərinə və CCK-8-in təsirlərini müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir c-Fos mRNA səviyyəsi. Təcrübə şərtləri arasındakı fərqlər nə vaxt statistik baxımdan əhəmiyyətli hesab olunurdu p ≤ 0.05.

Nəticələr

Xroniki sosial məğlubiyyət stresi ilə ΔFosB induksiyasının beyin miqyasında xəritələşdirilməsi

Xroniki (10 d) sosial məğlubiyyət stresinin gedişatından sonra, əvvəllər stres reaksiyalarında tətbiq olunan beyin və orta beyin bölgələrinə diqqəti yönəltməklə, controlFosB-nin immunohistokimyası tərəfindən nəzarət, həssas və davamlı siçanlarda araşdırdıq. Heyvanlar son məğlubiyyət epizodundan sonra 24 saat sonra təhlil edildi. Xroniki sosial stress resFosB-ni davamlı və həssas siçanlar arasında müşahidə olunan fərqli nümunələri olan çoxsaylı beyin bölgələrinə aparır. Göstərildiyi kimi Cədvəl 1 və Şəkil 1A, IL, BLA, hipokampusun dişli girusu, dorsal striatum və NAc nüvəsi möhkəm siçanlarda üstünlüklü aktivləşmə göstərdi; NAcdakı bu cür nəticələr dərc edilmiş nəticələrə uyğundur (). Təəccüblü fərqli olaraq, həssas siçanlar PrL-də, yan septumda və stria terminalisin yataq nüvəsində daha çox induksiya göstərdilər. Bir neçə beyin bölgəsi həssas və müqavimətli siçanlarda ableFosB induksiyasını göstərdi; bunlara orbitofrontal korteks (OFC, PFC-nin başqa bir sahəsi), NAc qabığı, dorsal raf və periaqueducal boz (PAG) daxildir.

Kortikal bölgələrdə ΔFosB induksiyasını göstərən neyron tipini müəyyən etmək üçün GAD2-tdTomato siçanları xroniki sosial məğlubiyyət stresinə məruz qaldılar. Sus Həssas siçanlarda FosB immunoreaktivliyi GABAergik neyronlarda aşkar edilə bilmədi (Əncir 1B), digər xroniki stresdən sonra kortikal piramidal neyronlarda ΔFosB-nin xüsusi induksiyasının aşkarlanmasını təsdiqləyir (). Əlavə edilməmiş idarəetmə siçanlarında, Beyin bölgələri üzrə əsas ΔFosB səviyyəsi əvvəlki tədqiqatlarda bildirilənlərə oxşardı (, ) hər hansı bir bölgə ilə müqayisədə NAc və dorsal striatumda daha yüksək bazal səviyyəsi olan, dişli girus istisna olmaqla, striatal bölgələrdə olanlarla müqayisə olunan səviyyələri (Cədvəl 1).

PMPFC-də olan FosB stressə qarşı həssaslığı artırır

Bu tapıntıları izləmək üçün əvvəlcədən bu bölgənin optogenetik aktivləşdirilməsinin sosial məğlubiyyət paradiqmasında antidepresan kimi təsir göstərdiyini göstərdiyimiz üçün PrL-ə diqqət yetirdik (). Bu beyin bölgəsində ΔFosB induksiyasının funksional nəticələrini sınamaq üçün, nəzarət siçanlarının PrL-də ΔFosB-ni viral olaraq aşırdıq. (Əncir 1C) və normal heyvanlarda sosial qaçışa səbəb olmayan sosial məğlubiyyət stressinin submaksimal kursuna məruz qaldı. Siçanları həddindən artıq dərəcədə sıxan ΔFosB, GFP inyeksiya edilmiş siçanlara nisbətən submaximal sosial məğlubiyyətdən sonra sosial qaçınma davranışlarını göstərdikləri üçün sosial məğlubiyyətə daha çox həssas idilər. (qarşılıqlı, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, virusun əsas təsiri, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Bonferroni sonrakı test t = 2.447, p <0.05) (Əncir 1D). Bu siçanlar bir 1 günlük məcburi üzmə testində artan dözümsüzlük göstərdilər (F(2,31) = 6.448, p <0.05; Bonferroni sonrakı test t = 3.518, p <0.05) (Əncir 1E), antidepresan dərmanları tərəfindən istehsal edilənlərin əksinə bir təsirdir. Bunun əksinə olaraq, PrL-də ΔFosB həddindən artıq ekspressiya narahatlıq kimi davranış, saxaroza üstünlük vermə, sosial qarşılıqlı təsir və ya lokomotor fəaliyyətin bir neçə əsas tədbirini dəyişdirmədi (Əncir 1F – J). Birlikdə, bu tapıntılar, ofFosB-nin PrL-də həssas siçanların selektiv induksiyası stressə və onun zərərli nəticələrinə səbəb olması barədə fərziyyəni dəstəkləyir. Bunun əksinə olaraq, PFF-nin başqa bir bölgəsindəki həddindən artıq stress, IL, əsas emosional davranışlara və ya sosial məğlubiyyət stresinə təsir göstərməmişdir. (Əncir 1D – J), Medial OFC-də "FosB həddindən artıq ifrazat" xroniki sosial məğlubiyyətə qarşı dayanıqlığı artırmağa meyl göstərdi, baxmayaraq ki, bu təsir statistik əhəmiyyətə çatmırdı. (qarşılıqlı, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, qarşılıqlı təsir müddətinin əsas təsiri, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Bonferroni sonrakı test t = 3.860, p GFP qrupu daxilində <0.05; t = 1.960, p 0.05FosB qrupu daxilində <XNUMX; virusun təsiri, t = 2.447, p <0.05) (Əncir 1K).

ΔFosB mKFC-də CCKB induksiyasını təşviq edir

Böyük bir dəlil orqanı, beyində bol neyropeptid olan CCK-nin stres və narahatlıq neyrobioloji mexanizmlərində mühüm rol oynadığını təsdiqləyir. (). Xüsusilə, siçovullarda sosial stres zamanı CCP-nin sərbəst buraxılması narahatlıqla əlaqəli davranışlarla əlaqədardır (). CCK-nin insan depressiyasında iştirakı bəlli olmasa da, son sübutlar siçovullarda sosial məğlubiyyətə səbəb olan depresiya kimi davranışdakı rolunu göstərir (). Beləliklə, mPFC-də CCK və ya onun CCKB (CCK2 kimi tanınan) reseptor səviyyələrində dəyişikliklərin həssas və möhkəm siçanlar arasındakı fərqlərə səbəb ola biləcəyini fərz etdik. Son məğlubiyyət epizodundan sonra 48 saatda yalnız möhkəm siçanların mPFC-də CCKB mRNA səviyyəsi azaldı ((F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroni sonrası test, t = 3.104, p <0.05 ilə nəzarət; t = 5.113, p <0.01 və həssas) (Əncir 2A). CCK mRNA səviyyəsində ya həssas, həm də davamlı siçanlarda heç bir fərq müşahidə edilməmişdir (məlumatlar göstərilmir). Δ artımını müşahidə etdikFosB Yuxarıda bildirilən protein məlumatlarına uyğundur yalnız həssas siçanlarda mRNA səviyyəsi (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Bonferroni sonrakı test t = 3.336, p <0.05 və həssas; t sınaq t(12) = 2.138, p <0.05 ilə nəzarət) (Əncir 2B). Çünki osFosB çoxsaylı genlərin transkripsiyasını tənzimləyir (; ), CCKB mRNA ifadəsini tənzimləyə biləcəyi ehtimalını nəzərdən keçirdik. Bu sualı həll etmək üçün əvvəlcə LFosB-ni PrL-də həddindən artıq sıxdıq və bu manipulyasiyanın bu bölgədəki CCKB mRNA səviyyəsini yüksəltdiyini gördük (t(12) = 2.012, p <0.05 ilə GFP) (Əncir 2C). Maraqlıdır ki, bir azalma da gördük c-Fos osFosB həddindən artıq ekspressiyasından sonra mRNA səviyyəsi (t(11) = 3.382, p <0.01) (Əncir 2C). These tapıntıları “Həssas siçanların PrL-də FosB induksiyasının, davamlı siçanlarda görülən CCKB-nin basmasının qarşısını alaraq həssaslığın aktiv bir mexanizmidir.

Bu müşahidələri daha da gücləndirmək üçün actJunD, transaktivasiya sahəsini itirən və bununla da dominant mənfi antaqonist rolunu oynayan ΔFosB bağlayıcı tərəfdaşıdır və stresə səbəb olan CCKB ifadəsinə təsirini təyin etdik. Xroniki sosial məğlubiyyət stresinə həssas siçanların PrL-də CCKB protein səviyyəsinin artdığını təsdiq etdik (t sınaq t(12) = 2.289, p <0.05 ilə nəzarət) (Əncir 2D,E). Üstəlik, bu induksiya bu bölgədəki ΔJunD həddindən artıq ifrazatı ilə tamamilə blok edildi (F(2,20) = 6.306, p <0.01, Bonferroni sonrası test t = 3.615, p <0.01) (Əncir 2D,E), ΔFosB stresə səbəb olan CCKB ifadəsini vasitəçilik etdiyi fərziyəsini dəstəkləyir. Bundan əlavə, LFosB-nin PrL-dəki fəaliyyətinin yerli unJunD ifadəsi ilə blokadası da stressi məğlub etmək üçün müqavimət göstərmişdir (t sınaq t(16) = 2.114, p = 0.05 vs nəzarət) (Əncir 2F). Güclü siçanlarda CCKB-nin tənzimlənməsini əsas götürən mexanizm izah edilməlidir.

Stresə davamlılıq və həssaslıqda CCKB-nin rolu

Çatışmazlığa qarşı həssaslığın mediasiyasında CCLB tənzimlənməsinin rolunu birbaşa yoxlamaq üçün seçici CCKB reseptor antaqonisti CI-988 (10 ng) birbaşa həssas siçanların bu beyin bölgəsinə infuziya verdik. CI-988, CCKB reseptorlarını təsirli şəkildə antagonizə edir vivo ilə çünki CCKB reseptor alt növü üçün nanomolar yaxınlığı və yüksək seçicilik nümayiş etdirir (). CCKB fəaliyyətinin blokadası sosial qarşılıqlı əlaqəni güclü şəkildə artırdı (Əncir 2G) (qarşılıqlı, F(1,20) = 7.795, p <0.05; narkotik F(1,20) = 5.38, p <0.05, Bonferroni sonrası test t = 3.615, p <0.01). CI-988 infuziyası, həssas siçanlarda müşahidə olunan sükroz seçimindəki kəsiri də aradan qaldırdı (t(8) = 2.681, p <0.05) (Əncir 2H). Hər iki davranış nəticəsi, PrL-də CCK fəaliyyətinin blokadasının güclü antidepresan kimi təsir göstərdiyini göstərir. Maraqlıdır ki, daxildə qəbul edildikdə, CI-988 sosial yayınma tərsinə təsir göstərməmişdir (məlumatlar göstərilmir).

Çıxışı yoxlamaq üçün, CCLB'nin PrL-də aktivləşməsi sosial qaçınma və xroniki sosial məğlubiyyət stresi nəticəsində yaranan saxaroza üstünlükünün azalmasına vasitəçilik edə biləcəyini, beyində CCK-nin üstünlük təşkil edən forması olan CCK-8 (10 ng) yerli infuziyasının təsirini araşdırdıq. , depressiya və narahatlıqla əlaqəli davranışlar haqqında. Dərmanın dozası ədəbiyyatdakı əvvəlki nəticələrə əsasən seçildi (; ; ). Siçanlar davranış testindən əvvəl 24 saat submaksimal sosial məğlubiyyət stresinə məruz qaldılar (Əncir 3A). Testdən əvvəl 8 dəqiqə əvvəl infuziya edilmiş CCK-30, sosial qarşılıqlı təsir testində sosial qaçınmanı artırmaqla yanaşı, qaldırılmış artan labirentdə (SI: BLA, qarşılıqlı təsir, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; dərmanın əsas təsiri, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Bonferroni sonrakı test t = 2.957, p <0.05; NAc: qarşılıqlı əlaqə, F(1,26) = 6.688, p <0.05, Bonferroni sonrası test t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, qarşılıqlı təsir, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni sonrakı test t = 2.509, p <0.05 dərman təsiri; t = 2.528, p <0.05 virus təsiri; NAc, t sınaq t(17) = 1.961; p EYFP qrupu daxilində <0.05 dərman təsiri) (Əncir 3B –E, sol). Saxaroza seçimində heç bir fərq müşahidə olunmadı (Əncir 3F,G, sol). Nəhayət, CCK-8 infuziyası bu təhlillərdə sadələşdirilməmiş siçanların davranışına (sosial qarşılıqlı təsir və yüksək artan labirent) təsir göstərməmişdir (məlumatlar göstərilmir). These nəticələri, davamlı siçanlarla müqayisədə həssas siçanların PrL-də osFosB vasitəçiliyi ilə artan artımın, bu heyvanların nümayiş etdirdiyi bəzi stresə səbəb olan davranış çatışmazlıqlarının artmasına səbəb olduğunu göstərir.

NK-a qarşı BLA-ya kortikal proqnozları aktivləşdirərək stressə qarşı həssaslığın CCK-nin təsirini blokadası

Azalan mPFC sinir fəaliyyəti, siçanlarda depressiyaya bənzər davranışlarla, antidepresan kimi təsir göstərən həssas siçanların mPFC neyronlarının optogenetik stimullaşdırılması ilə əlaqələndirilir (). Beləliklə CCK-nin neyronal fəaliyyətini maneə törətməklə və bununla da depressiyaya bənzər davranışa səbəb ola biləcəyini düşündük. Bu fərziyyəyə uyğun olaraq bir azalma müşahidə etdik c-Fos Bu beyin bölgəsinə CCK infuziyasına cavab olaraq PrL-də mRNA səviyyəsi (t(13) = 2.235, p <0.05) (Əncir 3H).

Növbəti olaraq, mPFC-nin optogenetik stimullaşdırılması CCK-nin neyron fəaliyyətinə təsir göstərərək antidepresan təsir göstərdiyini fərz etdik. Bu fərziyyəni sınamaqda CCK-nin anksiogen və prodepressiya kimi təsirlərini vasitəçilik edən subkortikal quruluşları araşdırdıq. MPFC layihəsinin piramidal neyronları, NAc və BLA-ya, stresə qarşı davranış reaksiyasına təsir edən iki limbik quruluşa çox təsir edir. Hər iki beyin bölgəsinin dəyişdirilmiş fəaliyyəti narahatlıq və depressiyaya bənzər davranışların ifadəsində mühüm rol oynadığı göstərilmişdir (; ). Buna görə də, PrL-dən NAc-a və ya BLA-ya glutamaterjik proqnozların stimullaşdırılmasının CCL mikroinfüzyonunun PrL-dəki zərərli təsirlərinə qarşı olub olmadığını yoxladıq (Əncir 3A). AAV-CaMKII-ChR2-EYFP və ya AAV-CaMKII-EYFP-ni bir nəzarət olaraq PrL-ə vurduq. CaMKII təbliğatçısı, viral ifadəni kortikal bölgələrdə glutamatergik piramidal neyronlara hədəf aldığı bilinir. Bundan sonra transgenlərin NAc və BLA-da bu piramidal neyronların sinir terminallarına daşınması üçün kifayət qədər vaxt (6 həftə) verdik (Əncir 3I). Siçanlar submaximal sosial məğlubiyyət aldı; 24 saat sonra, biz CCK-8-ni PrL-ə daxil etdik və bundan sonra 30 dəqiqə sonra, NAc və ya BLA-da glutamatergik terminalların optogenetik stimullaşdırılması zamanı sosial qarşılıqlı təsir ölçüldü. Sosial qarşılıqlı sınaqdan dərhal sonra, siçanlar, narahatlıq ilə əlaqəli davranışı qiymətləndirmək üçün yuxarı qaldırılmış üst-üstəgəl labirentdə qiymətləndirildi və sonra anhedoniyanı qiymətləndirmək üçün saxaroza üstünlük verildi.

PrL glutamatergic proqnozların NAc-a optogenetik stimullaşdırılması, daxili PrL CCK-8 (qarşılıqlı təsir, F(1,26) = 6.688, p <0.05, ChR2 qrupunda dərman təsiri yoxdur) (Əncir 3C). Bundan fərqli olaraq, NAc-a qədər stimullaşdırma, yuxarı qaldırılmış labirentdə ölçülən narahatlığa bənzər davranışa təsir göstərməmişdir (Əncir 3E); lakin, bu cür stimullaşdırılmamış siçanlarla (qarşılıqlı əlaqə, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Bonferroni sonrakı test t = 2.998, p CCK-0.05 müalicə olunan heyvanlarda <8 stimullaşdırma təsiri) (Əncir 3G).

PrL glutamatergic proqnozlarının BLA-ya optogenetik stimullaşdırılması ilə çox fərqli bir davranış nümunəsi görüldü. Bu cür stimul, daxili PrL CCK-8 infuziyası (qarşılıqlı təsir, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; dərmanın əsas təsiri, F(1,22) = 11.75, p <0.05; stimullaşdırılmış qrupda təsir yoxdur, t sınaq t(12) = 2.054, p <0.05) (Əncir 3B). Bununla birlikdə, BLA afferentsinin stimullaşdırılması, yuxarı qaldırılmış labirentin açıq qollarında sərf olunan vaxtın artması ilə göstərilən bir anksiyolitik təsir göstərir. F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni sonrakı test t = 2.528, p CCK-0.05 müalicə olunmuş qruplar daxilində <8 virus təsiri) (Əncir 3D). BLA-ya glutamaterjik proqnozların stimullaşdırılması, saxaroza üstünlük verməyə əhəmiyyətli təsir göstərmədi (qarşılıqlı təsir, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Əncir 3F).

Müzakirə

Hazırkı araşdırmanın nəticələri, sosial stressə həssaslığın əsasını təşkil edən molekulyar uyğunlaşmaların sübutudur. Xroniki sosial məğlubiyyət stresindən sonra ΔFosB induksiyasını göstəririk, burada ΔFosB həddindən artıq dərəcədə stresə həssaslığı artırır. CCKB reseptorunu PrL-də osFosB tərəfindən tənzimlənən, hədəf həssas siçanlarda CCKB zülalını cəlb edən və seçici olaraq siçanlarda meydana gələn CCKB ifadəsinin azalmasının qarşısını alan bir hədəf gen olaraq təyin etdik. Daha sonra göstərdik ki, bir CCK agonistinin PrL-yə infuziyası sosial stresə cavab olaraq depressiya və narahatlıq kimi davranış anormallıqlarını inkişaf etdirir, halbuki həssas siçanların bu bölgədəki CCKB reseptor fəaliyyətinin blokadası bu təsirləri qarşısını alır. Sonradan PrL-də proksiallıq və prodepressiya kimi fəaliyyətlərdə iştirak edən mikrosxemləri müəyyən etmək üçün optogenetik vasitələrdən istifadə etdik. Kortiko-NAc glutamatergik proqnozlar sosial qaçınma və azaldılmış saxaroza üstünlükləri ilə təsdiqlənən mükafat defisitləri ilə vasitəçilik etsə də, bu mikrosxem PrL-yə daxil olan CCK-nin anksiogen təsirinə təsir göstərmir. Əksinə, BLA üçün kortikal proqnozlar, narahatlıqla əlaqəli davranışların təzahürüdür, lakin sosial stresə səbəb olan sosial qaçınma və ya saxaroza üstünlük çatışmazlığına təsir göstərmir. Birlikdə, bu məlumatlar göstərir ki, xroniki sosial məğlubiyyət stresindən sonra PrL-dəki dəyişikliklər xüsusi subkortikal proqnozlar vasitəsilə çoxsaylı davranış çatışmazlıqlarına vasitəçilik edir.

ΔFosB: bir limbik stres şəbəkəsi və mPFC-də rol

ΔFosB immunohistokimyası xroniki stresdən təsirlənmiş neyronları tək hüceyrəli qətnamə ilə müəyyənləşdirir və stres tənzimlənən neyron dövranının xəritələşdirilməsində istifadə edilmişdir (; ; ). Xroniki sosial məğlubiyyət stresinin ΔFosB-ni beyin bölgələrində davamlı və həssas qruplar arasında fərqli nümunələri olan bir sıra bölgələrdə, yalnız davamlı siçanlarda induksiya göstərdiyini, digərlərinə yalnız həssas siçanlarda, bəzilərində isə hər iki şərtdə də göstərdiyini göstərmək üçün istifadə etdik.Cədvəl 1). Əvvəlki işlər, NAc və ya ventral PAG-da FosB induksiyasının xroniki stresə qarşı müqavimət göstərdiyini və antidepresan reaksiyalarına kömək etdiyini göstərdi. (; ).

Bu bölgənin optogenetik stimullaşdırılması antidepresan təsirini göstərən əvvəlki tapıntılar ilə birlikdə həssas siçanların PrL-də ΔFosB induksiyası (), bu kortikal bölgədəki ΔFosB təsirini öyrənməyə çağırdı. NAc və ventral PAG-dakı tapıntıların əksinə olaraq, PrL-dəki FosB-nin xroniki sosial məğlubiyyət stresinə həssaslığını artırdığını və narahatlıq kimi davranışa və ya saxaroza üstünlük vermədən məcburi üzmə testində prodepressiya kimi bir effekt verdiyini gördük. PrL-dən fərqli olaraq yaxınlıqdakı İL-də osFosB həddindən artıq ekspressiya təsiri tapmadıq. Bu yaxınlarda edilən bir araşdırma, siçanlarda ΔFosB səviyyəsinin yüksəldiyini tapdı və bu subregionu sosial stresə davamlı etdi (). Digər davranış sahələrində əks effektlər göstərdiyi bu iki mPFC subregions üçün diferensial rolların həlli üçün əlavə tədqiqatlar tələb olunur (; ; ). Əvvəllər depressiyaya düşmüş insanların NAc-da ΔFosB-nin daha aşağı səviyyələrini göstərdiklərini bildirdik (), wburada ΔFosB-nin daha yüksək səviyyəsi depressiyaya uğramış insanların dorsolateral PFC (Brodmann sahəsi 46) göstərilmişdir (). Sonuncu tədqiqatda digər kortikal bölgələr araşdırılmadı. Hər halda, bu tapıntılar birlikdə transkripsiya amilinin stres həssaslığına çox fərqli təsir göstərdiyi insan depressiyasındakı ΔFosB ifadəsindəki bölgəyə aid anormallıqları dəstəkləyir. Gələcək tədqiqatlarda ΔFosB-nin induksiya olunduğu bir çox digər beyin bölgələrində təsirini araşdırmaq maraqlı olardı (Cədvəl 1) stress cavabları haqqında.

PrL-də "FosB induksiyasının" depresiyaya bənzər davranışa səbəb ola biləcəyi bir mexanizm, PrL fəaliyyətinin qarşısını almaqdır. ΔFosB, AMPA glutamat cavablarını yatırtmaq üçün göstərildi, və c-Fos ifadə, NAc orta spiny neurons (; ; ). Eyni şəkildə, bir azalma da tapdıq c-Fos PrL-də ΔFosB həddindən artıq ekspressiyasından sonra ifadə. Beləliklə, PrL-də ΔFosB induksiyası xroniki sosial məğlubiyyət stresindən sonra bu bölgədə görülən neyronal fəaliyyətin azalmasına görə cavabdeh ola bilər. BLA və NAc kimi subkortikal hədəflərinə nisbətən bu qədər azalmış tonun qorxu ifadə etməsini və stressə qarşı emosional reaksiyaları söndürə bilməməsini gücləndirməsi gözlənilir (, ). Üstəlik, mPFC lezyonları həssas stres reaksiyalarını və qorxu məhvində çatışmazlıqları artırır (; ; ; ), qismən ΔFosB induksiyası vasitəsi ilə vasitəçiliyə məruz qalan mPFC-nin stresdən yaranan dəyərsizləşmənin depressiyaya və digər streslə əlaqəli xəstəliklərə səbəb ola biləcəyini irəli sürdü ().

Stres həssaslığında CCK-nin rolu

CCKB reseptorunun ΔFosB-nin hədəfi olduğuna dair sübutlar veririk ki, həssas siçanların PrL-də BFosB induksiyası BFosB-nin bu bölgədəki prodepressiya kimi təsirlərini göstərən bir mexanizmdir. CCP-nin mPFC dövriyyəsindəki spesifik hərəkətləri bəlli olmasa da, kemiricilərdə CCK GABAergic interneurons daxilində lokallaşdırılmışdır (). Yerli GABA sərbəst buraxılmasını artırmaqla və piramidal neyronlarla ifadə olunan CCKB reseptorlarına birbaşa təsir etməklə kortikal piramidal neyronların fəaliyyətini dayandırmaq düşünülür (; ; ; ). Beləliklə, CCKergic nörotransmissiyası yuxarıda qeyd olunan PrL fəaliyyətinin azalmasına töhfə verə bilər.

CCK, sağlam könüllülərdə çaxnaşma hücumlarına səbəb olan CCKB agonistlərinin sistemli rəhbərliyi ilə anksiyojen bir agentdir. Çaxnaşma hücumlarına meylli xəstələr CCK məruz qaldıqdan sonra həssaslaşırlar (; ). Bir neçə tədqiqat CCK-nın gəmiricilərdəki anksiyogen təsirini təsdiqlədi (). Siçovullarda məğlubiyyət zamanı stres zamanı mPFC-də CCK azadlığı narahatlıqla əlaqəli davranışlarla əlaqədardır (); PrL və IL subregions bu işdə fərqlənmədi. Bu yaxınlarda, CI-988 ilə CCKB-nin sistemli, xroniki blokadası siçovullarda antidepresan kimi təsir göstərmişdir (). Məcburi üzmə testində CI-988 normallaşdırılmış hərəkətsizlik vaxtı. Ayrıca hipotalamik-hipofiz-adrenal oxun hiperaktivliyinin qarşısını aldı, hipokampal həcm və hüceyrələrin yayılmasının azaldıldı və normal olaraq sosial məğlubiyyət ilə ortaya çıxan saxaroza üstünlük verildi. Budur, bu nəticələri CI-988-in PrL-ə həssas siçanların vurduğu antidepresan təsirini göstərərək təsdiqləyirik, baxmayaraq ki, tək bir sistem inyeksiya bu təsiri təqlid etməmişdir.

PrL-də CCK-nin kəskin hərəkətlərinə əlavə olaraq, möhkəmliyə əsaslanan molekulyar uyğunlaşma ola bilən möhkəm siçanlarda CCKB mRNA səviyyəsinin azaldığını müəyyən etdik. Həqiqətən, CCKergic tonunda dəyişikliklər, xüsusən CCKB səviyyələri, narahatlığın ifadə olunması üçün vacib bir mexanizm təşkil edir. Transjenik siçanlar anabir beyində həddindən artıq dərəcədə təzyiq göstərən CCKB-nin artmasına səbəb olan narahatlıq və qorxu reaksiyalarını göstərir (). Dözümlü və həssas siçanlar arasında dəyişdirilmiş CCKB səviyyələrini tapmaq, narahatlıq və depresif bənzər davranışdakı fenotipik fərqlərə kömək edə bilər. Burada, PrL-i CCK-nin anksiyogen və prodepressant təsirləri üçün kritik bir anatomik substrat olaraq sosial stres kontekstində nümayiş etdiririk. Buna baxmayaraq, BLA, hipokampus, NAc və PAG daxil olmaqla CCK-nın davranış hərəkətlərində bir sıra digər beyin bölgələri iştirak edir (; ; ; ; ). Ayrıca, həssas heyvanların mPFC-də deyil, mRNA səviyyələrində deyil, CCKB protein səviyyəsində artım aşkar etdik. Bu tapıntılar vurğulayır ki, mRNA səviyyələri tez-tez protein səviyyəsi ilə əlaqələndirilsə də, bu mütləq belə deyildir ().

Optogenetik təcrübələrimiz göstərir ki, PrL-dən NAc-a və ya BLA-dakı glutamaterjik proqnozların artması PrL-də CCK-nin təsirini artırır. Optogenetik stimullaşdırmanın bu təsirinin CCK tərəfindən idarə olunan eyni PrL neyronları ilə vasitəçi olduğunu müəyyən etmək üçün əlavə tədqiqatlar lazımdır. Maraqlıdır ki, məlumatlarımız bu iki mikrosxemin fərqli davranış anormalliklərinin müxtəlif sahələrini vasitəçilik etməkdə fərqli rollarını ortaya qoyur. Kortiko-NAc proyeksiyası anhedoniya və mükafata nəzarət edir; sosial qaçınmanı tənzimləməsi, bu simptomun daha çox artan sosial narahatlıq deyil, sosial davranış üçün azaldılmış motivasiya və mükafatın təzahürü olduğunu təsdiqləyir. Bu nəticə benzodiazepinlərin bu anormalliyi düzəldə bilməməsinə uyğundur (), və NAc'ın mPFC stimullaşdırılması sui-istifadə dərmanları üçün mükafat və motivasiyanı artırdığını göstərdi (). Bunun əksinə olaraq, kortiko-BLA proyeksiyası, gəmiricilərdə və insanlarda böyük bir ədəbiyyata uyğundur, narahatlıqla əlaqəli simptomları idarə edir (yuxarıya bax).

Sonda hazırkı tədqiqatın nəticələri həssas və möhkəm heyvanlarda tətbiq olunan limbik beyin bölgələrinin bir nümunəsini müəyyənləşdirir və həssaslığı təşviq edən PrL-də dəyişikliklər göstərir. Bu dəyişikliklər ΔFosB və CCKB reseptorunun induksiyasını əhatə edir. Bundan fərqli olaraq, PrL-də CCK hərəkətlərinin blokadası antidepressant və anksiyolitik təsir göstərir. Ayrıca, bu hərəkətləri vasitəçilik edən bu kortikal piramidal neyronların subkortikal hədəflərini, depressiya ilə əlaqəli davranışlar üçün zəruri olan bir kortiko-NAc dövranı və narahatlıq ilə əlaqəli davranışlar üçün zəruri olan bir kortiko-BLA dövrə qururuq. 1990-lərdə depresiyalı xəstələrdə CCKB antaqonistlərinin klinik tədqiqatları ümidverici nəticələr vermədiyi halda, mövcud tapıntılar bu cür agentlərin terapevtik potensialının yüksək səviyyədə stresə məruz qalmış xəstələrin alt hissələrində yenidən nəzərdən keçirilməsinin dəyərini göstərir.

Dəyişikliklər

 

Bu iş Milli Ruh Sağlamlığı İnstitutu (EJN) və Beyin və Davranış Araşdırması Vəqfi Şizofreniya və Depresiya Araşdırmaları Milli İttifaqı tərəfindən dəstəklənmişdir VV'ye Gənc Müfəttiş Mükafatı

 

 

Müəlliflər rəqib maliyyə maraqlarını bəyan etməyiblər.

 

References

  • Akirav I, Maroun M. Medial prefrontal korteks-amigdala dövranının qorxunun tükənməsinə təsir göstərməsində rolu. Sinir plastı. 2007; 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Barbas H, Blatt GJ. Topoqrafik cəhətdən hippokampal proqnozlar, rezus meymunundakı funksional olaraq fərqli prefrontal bölgələri hədəf alır. Hippokampus. 1995; 5: 511 –533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Siçovuldakı sosial məğlubiyyəti gözləyən bir modeldə xolesistokininə bənzər bir materialın kortikal hüceyrədənkənar səviyyəsini artırdı. J Neurosci. 2001; 21: 262 –269. [PubMed]
  • Becker C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Siçovullarda təkrarlanan sosial məğlubiyyətə səbəb olan depresiya kimi davranış və bioloji dəyişikliklər: xolesistokininin iştirakı. Mol Psixiatriya. 2008; 13: 1079 –1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. Siçovul nüvəsinin böyüdülməsi və amigdala daxil edilmiş xoletsistokinin mikroinekte edilmiş davranış reaksiyalarında asimmetriya. Neyrofarmakologiya. 1994; 33: 995 –1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, həm GABAA, həm də GABAB reseptorlarında fəaliyyət göstərərək, in vitro səthində xolesistokininə bənzər materialın sərbəst buraxılmasına mane olur. Beyin Res. 1992; 590: 255 –262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Mezolimbik dopamin yolunda BDNF-nin əsas məğlubiyyət stressində rolu. Elm. 2006; 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Stress tərəfindən iFosB-nin periaqueduktal bozda olması, aktiv mübarizə tədbirlərinə kömək edir. Neyron. 2007; 55: 289 –300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Nukleus dərin beyin stimullaşdırılması ilə müalicəyə davamlı depresiyada depresiya və narahatlıq dərəcələrini azaldır. Biol Psixiatriya. 2010; 67: 110 –116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Çaxnaşma pozğunluğunda xoletsistokinin tetrapeptidinə qarşı həssaslıq: klinik və davranış nəticələri. Arch Gen Psixiatriya. 1991; 48: 603 –610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Bremner JD. Stress beyinə zərər verirmi? Biol Psixiatriya. 1999; 45: 797 –805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Bremner JD. Travmatik stres: beyinə təsir. Dialogues Clin Neurosci. 2006; 8: 445 –461. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Bremner JD. Posttravmatik stres pozğunluğu və digər streslə əlaqəli pozğunluqlarda neyroimajinq. Neuroimaging Clin North Am. 2007; 17: 523 –538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Sinaptik və çoxlu glutamaterjik girişlərin nüvəli akumbenslərə davranış profili. Neuron. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Prelimbik və infralimbik neyronlar iştahaaçan instrumental davranışın fərqli cəhətlərini göstərir. PLoS One. 2013; 8: e57575. doi: 10.1371 / jurnal.pone.0057575. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Yüksək xolesistokininerjik ton siçandakı narahatlığın ifadə olunması üçün vacib bir molekulyar / neyron mexanizm təşkil edir. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2006; 103: 3881-3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Choi DC, Gourley SL, Ressler KJ. Prelimbic BDNF və TrkB siqnalları həm iştahaaçan, həm də həssas emosional öyrənmənin konsolidasiyasını tənzimləyir. Tərcümə Psixiatriya. 2012; 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Christoffel DJ, Golden SA, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. IκB kinazı sosial məğlubiyyət stresi ilə əlaqəli sinaptik və davranış plastikliyini tənzimləyir. J Neurosci. 2011; 31: 314 –321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Covington HE, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Qısa bir sosial məğlubiyyət stresi: amigdala və prefrontal korteksdə bir binge və zif268 mRNA ifadəsi zamanı kokainin qəbul edilməsi. Neyropsikofarmakologiya. 2005; 30: 310 –321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Medial prefrontal korteksin optogenetik stimullaşdırılması antidepressant təsiri. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, Tamminga CA, Nestler EJ. Stressə qarşı kokain səbəb olan həssaslıqda repressiv histon metilasyonunun rolu. Neyron. 2011; 71: 656 –670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • de Montigny C. Xolecystokinin tetrapeptid, sağlam könüllülərdə çaxnaşma tipli hücumları doğurur: ilkin tapıntılar. Arch Gen Psixiatriya. 1989; 46: 511 –517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen JJ. Xoletsistokinin oktapeptidinin (CCK-8) və tetrapeptidin (CCK-4) nüvələrin kaudal hissəsinə və ya onun rostral hissəsinə və serebral ventriküllərə vurulduqdan sonra əks təsiri. Neurochem Int. 1987; 10: 473 –479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Stresə qarşı hipotalamik-hipofiz-adrenal reaksiyaların tənzimlənməsində medial prefrontal korteksin (cingulate gyrus) rolu. J Neurosci. 1993; 13: 3839 –3847. [PubMed]
  • Drevets WC. Depressiyanın neyroimaging və nöropatoloji tədqiqatları: əhval pozğunluqlarının idrak-emosional xüsusiyyətləri üçün təsirlər. Curr Opin Neurobiol. 2001; 11: 240 –249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Əsas depresiyada təsirli və bilişsel nəzarət beyin dövranında dəyişdirilmiş emosional müdaxilənin emalı. Biol Psixiatriya. 2008; 63: 377 –384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Mathews J, Snyder AZ, Sheline YI. Antidepresan müalicəsi əsas depressiyada emosional müdaxilə emalı zamanı dorsolateral prefrontal korteksdəki hipoaktivliyi normallaşdırır. J Disord təsir göstərir. 2009; 112: 206 –211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Psixobiologiya və möhkəmliyin molekulyar genetikası. Nat Rev Neurosci. 2009; 10: 446 –457. doi: 10.1038 / nrn2649. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. CRF, NKB və CCK'nin kortikal mənbələri və neokorteksdəki piramidal hüceyrələrə təsiri. Cereb Cortex. 2006; 16: 1440 –1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Nüvənin neyropsixoloji təhlükəsizliyi əsas depressiya üçün dərin beyin stimullaşdırmasını artırır: 12 aylıq stimullaşdırma təsiri. Dünya J Biol Psixiatriya. 2011; 12: 516 –527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB, nüvə adapterlərinin birbaşa və indirekt yolak funksiyasını fərqli olaraq modullaşdırır. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2013; 110: 1923-1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Mayada protein və mRNA bolluğu arasındakı əlaqə. Mol Hüceyrə Biol. 1999; 19: 1720 –1730. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Siçovuldakı medial prefrontal korteks: funksional və anatomik xüsusiyyətlərə əsaslanan bir dorso-ventral fərqliliyinə dəlil. Neurosci Biobehav Rev. 2003; 27: 555-579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Holson RR. Mezial prefrontal kortikal lezyonlar və siçovullarda həssaslıq: I. Aversiv stimullara reaksiya. Fiziol Behav. 1986; 37: 221 –230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Əsas depresif pozğunluqda anhedoniyanın neyron əlaqələri. Biol Psixiatriya. 2005; 58: 843 –853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Müalicəyə davamlı depresiya: somatik müalicədə irəliləyişlər. Ann Clin Psixiatriya. 2007; 19: 279 –287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Kennedi SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Əsas depressiyanın paroksetin müalicəsindən sonra pozitron emissiya tomoqrafiyası ilə ölçülən regional beyin qlükoza mübadiləsindəki dəyişikliklər. Am J Psixiatriya. 2001; 158: 899 –905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS, et al. Beyin mükafat bölgələrində ictimai məğlubiyyətə və həssaslığa əsaslanan molekulyar adaptasiyalar. Cell. 2007; 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Krishnan V, Nestler EJ. Depressiyanın molekulyar neyrobiologiyası. Təbiət. 2008; 455: 894 –902. doi: 10.1038 / təbiət07455. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Lehmann ML, Herkenham M. Ətraf mühitin zənginləşməsi bir infralimbik korteksə bağlı neuroanatomik yolla sosial məğlubiyyətə stress təzyiqini təmin edir. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Brain, şəbəkələr, depressiya və s. Eur Neuropsychopharmacol. 2013; 23: 55 –62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Mayberg HS, Lozano AM, Voon V, McNeely HE, Seminowicz D, Hamani C, Schwalb JM, Kennedy SH. Müalicəyə davamlı depresiya üçün dərin beyin stimullaşdırılması. Neyron. 2005; 45: 651 –660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Xəzər Universitetinin rektoru Yaqub Eyvazovun sözlərinə görə, bu gündən etibarən, Nestler EJ. Kokain ilə bağlı plastisitədə histon metiltransferaza G3a'nın əsas rolu. Elm. 9; 2010: 327-213. doi: 216 / science.10.1126. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • McClung CA, Nestler EJ. CREB və DeltaFosB tərəfindən gen ifadə və kokain mükafatının tənzimlənməsi. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 –1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Milad MR, Quirk GJ. Medial prefrontal korteks siqnal yaddaşındakı neyronlar qorxunun tükənməsi üçün. Təbiət. 2002; 420: 70 –74. doi: 10.1038 / təbiət01138. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J, Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Müalicəyə davamlı depresiya üçün ikitərəfli epidural prefrontal kortikal stimullaşdırma. Biol Psixiatriya. 2010; 67: 101 –109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Siçovullarda təkrarən sosial məğlubiyyət stresindən sonra mezokortikolimbik quruluşlarda uzun müddət davam edən dəyişiklik: mu-opioid reseptoru mRNA və FosB / DeltaFosB immunoreaktivliyi. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272 –2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Soylu F, Roques BP. CCK-B reseptoru: kimya, molekulyar biologiya, biokimya və farmakologiya. Prog Neurobiol. 1999; 58: 349 –379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Seroogy KB, Hamon M, Roques BP. Beynəlxalq Farmakologiya Birliyi: XXI. Xoletsistokinin reseptorlarının quruluşu, paylanması və funksiyaları. Farmakol Yeniləmə 1999; 51: 745-781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M, Hernandez-Gomez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 K (+) artırır - ortaya çıxdı [3H] müxtəlif beyin sahələrindən dilimlərdə qamma-aminobutirik turşu buraxılması. Eur J Pharmacol. 1993; 250: 423 –430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Xroniki stressdən sonra mükafatla əlaqəli beyin strukturlarında βFOSB induksiyası. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-nun istifadəsi ilə narkotik maddələri ilə beynin induksiyası. Sinapse. 2008; 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Radley JJ, Rocher AB, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Təkrarlanan stress, siçovul medial prefrontal korteksdə dendritik bel itkisinə səbəb olur. Cereb Cortex. 2006; 16: 313 –320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB, xroniki amfetamin təsirindən sonra c-fos geninin epigenetik desensitizasiyası ilə vasitəçilik edir. J Neurosci. 2008; 28: 7344 –7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Rezayat M, Roohbakhsh A, Zarrindast MR, Massoudi R, Djahanguiri B. Cholecystokinin və GABA'nın yüksəldilmiş artan labirent testində siçovulların dorsal hipokampusunda qarşılıqlı təsiri. Fiziol Behav. 2005; 84: 775 –782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Richard JM, Berridge KC. Prefrontal korteks, nüvə accumbens glutamat pozulması nəticəsində yaranan arzu və qorxunu modulyasiya edir. Biol Psixiatriya. 2013; 73: 360 –370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Xoletsistokinin reseptor alt tipləri: Heyvan modellərində narahatlıq və mükafatla əlaqəli davranışların modulyasiyasındakı rol. J Psixiatriya Neyroci. 2003; 28: 171 –181. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axmacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. Dərin dövranı mükafatlandırmaq üçün dərin beyin stimullaşdırılması odadavarı əsas depressiyada yüngülləşdirir. Neyropsikofarmakologiya. 2008; 33: 368 –377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Şərti qorxunun ifadəsi və tükənməsində prelimbik və infralimbik kortekslərin, ventral hipokampusun və bazolateral amiqdalanın ayrılan rolu. Neyropsikofarmakologiya. 2011; 36: 529 –538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Silva MG, Boyle MA, Barmaq S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. Siçovul medial frontal korteksin böyük və kiçik lezyonlarının davranış təsirləri. Exp Brain Res. 1986; 65: 176 –181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Pişikin vizual korteksində və hipokampusundakı GABAergik neyronların müxtəlif populyasiyalarında somatostatin- və ya xolesistokinin-immunoreaktiv material vardır. J Neurosci. 1984; 4: 2590 –2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Antidepresanlar stress reaksiyasını yaxşılaşdırmaq üçün yeni neyronlar cəlb edir. Mol Psixiatriya. 2011; 16: 1177 –1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Taniguchi H, He M, Wu P, Kim S, Paik R, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. Beyin qabığında GABAergik neyronların genetik hədəflənməsi üçün Cre sürücü xətlərinin bir mənbəyi. Neyron. 2011; 71: 995 –1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gelinier JC, Trojak B, Bonin B. Əsas depresif bozukluğu olan xəstələrin dorsolateral prefrontal korteksində DeltaFOSB asılı bir gen ifadə nümunəsinin aktivləşdirilməsi. J Disord təsir göstərir. 2011; 133: 174 –178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Tsankova NM, Berton O, Renthal W, Kumar A, Neve RL, Nestler EJ. Depressiya və antidepressant təsir göstərən bir siçan modelində davamlı hippokampal xromatinin tənzimlənməsi. Nat Neurosci. 2006; 9: 519 –525. doi: 10.1038 / nn1659. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Amygdala dövriyyəsi narahat və geri istiqamətli nəzarət vasitəçiliyi. Təbiət. 2011; 471: 358 –362. doi: 10.1038 / təbiət09820. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Ignigue SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolanos CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA və s. Beyin mükafat dövrlərindəki DeltaFosB, stresə və antidepresan reaksiyalara qarşı vasitəçilik edir. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 –752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Cingulate korteksindəki funksional heterojenlik: ön icra və posterior qiymətləndirici bölgələr. Cereb Cortex. 1992; 2: 435 –443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Imipramine müalicəsi və davamlılıq depresiya modellərində siçan nüvəsində bənzər xromatin tənzimlənməsini nümayiş etdirir. J Neurosci. 2009; 29: 7820 –7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Yaşıl TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Orbitofrontal korteksdəki DeltaFosB induksiyası, kokainlə əlaqəli bilişsel disfunksiyaya dözümlülük verir. J Neurosci. 2007; 27: 10497 –10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Xoletsistokininin siçovul beyin qabığından in vivo-da sərbəst buraxılması: GABA və glutamat reseptor sistemlərinin rolu. Beyin Res. 1987; 406: 207 –214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [PubMed] [Çaprazlıq]
  • Zanoveli JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr Xoletsistokinin sulfatlı oktapeptidin (CCK-8s) sistematik və intra-dorsal periaqueduktal boz enjeksiyonları, yüksəlmiş T-labireyə təqdim olunan siçovullarda çaxnaşma şəklində reaksiya yaradır. Peptidlər. 2004; 25: 1935 –1941. doi: 10.1016 / j.peptidlər.2004.06.016. [PubMed] [Çaprazlıq]