Jonathan P. Fadok, 1,2 Tavis MK Dickerson, 2 və Richard D. Palmiter2 *
J Neurosci. Müəllif əlyazması; PMC 2010 Mart 9-də mövcuddur.
Son olaraq redaktə şəklində dərc olunub:
J Neurosci. 2009 Sentyabr 9; 29 (36): 11089-11097.
doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1616-09.2009.
1 Nörobiyoloji və Davranış Lisansüstü Proqramı, Vaşinqton Universiteti, Seattle, WA 98195
2 Biokimya bölümü və Howard Hughes Tibb İnstitutu, Vaşinqton Universiteti, Seattle, WA, 98195
Yazışmalar aşağıdakılara yönəldilməlidir: Richard D. Palmiter, HHMI və Biokimya Bölümü, Box 357370, Vaşinqton Universiteti, Seattle, WA 98195. E-poçt: [e-poçt qorunur]
Yayımcının bu məqalənin son redaktə edilmiş versiyasını J Neurosci-də pulsuz əldə etmək olar
Yayımlanan məqaləyə istinadən PMC-də olan digər məqalələrə baxın.
mücərrəd
Dopamin (DA) çox funksiyaları, o cümlədən motor funksiyası, idrak və mükafat emalına aiddir; Ancaq qorxu emalında DA-nın rolu birmənalı olaraq qalır. DA-nın qorxu ilə əlaqəli öyrənilməsində rolunu araşdırmaq üçün dopamin çatışmazlığı (DD) siçanları qorxu-potensiallaşmış bir başlanğıc paradiqmasında sınaqdan keçirilmişdir. DA sintezi 3, 4-dihidroksi-L-fenilalanin (L-Dopa) administrasiyası vasitəsilə DD siçanlarında bərpa edilə bilər, beləliklə DA-də tükənmiş və ya yaranan vəziyyətdə qorxu emalının qiymətləndirilməsinə imkan verir. DD siçanlarında qorxuya səbəb olan qışqırıq baş vermədi, lakin qorunma şəraitindən dərhal sonra L-Dopanın idarəsi ilə bərpa edilə bilər. Ventral tegmental ərazidə DA sintezinin seçici viral bərpası DD siçanlarında qorxu öyrənməsini və DA sintezini bazolateral amigdala bərpa olunmuş qısa müddətli yaddaşa proqnozlaşdırılan DA nöronların bərpasını tam bərpa etdi, lakin uzunmüddətli yaddaş və ya şok həssaslaşdırma deyil. DA D1 reseptoru (D1R) və D2 kimi reseptorların reputa bağlı qorxu öyrənməsi üçün lazım olduğunu göstəririk.
Bu tapıntılar göstərir ki, bir çox təyinatlı bölgələrdə birdən çox reseptor subtipləri üzərində hərəkət edən DA qorxu yaddaşının sabitləşməsini asanlaşdırır.
Açar sözlər: Dopamin, qorxu, qorxu potensialı başlanğıc, amigdala, dopamin D1 reseptoru, dopamin D2 reseptoru
giriş
Neyromodulyator DA, mükafatla əlaqəli öyrənmə və dərman axtarış davranışı üçün vacibdir (Schultz, 2002, Wise, 2004) və toplanan sübutlar DA-nın qorxu ilə əlaqəli öyrənmə üçün də vacib ola biləcəyini göstərir (Lamont və Kokkinidis, 1998; Guarraci et al , 1999; Greba və Kokkinidis, 2000; Guarraci və s., 2000; Greba və s., 2001; Pezze və Feldon, 2004, Oliveira və s., 2006). bu beyin sahələrdə qorxu öyrənmək üçün mühüm limbik beyin sahələri ventral midbrain layihənin DA neurons, və DA səviyyəsi (aversive hadisələri zamanı artırmaq Abercrombie et al, 1989. Kalivas və Duffy, 1995; Doherty və Gratton, 1997; İnqlisi və Moghaddam , 1999). Bundan əlavə, bəzi midbrain DA neyronları qəzəbli stimullara və proqnozlaşdırıcı tövsiyələrə (Guarraci və Kapp, 1999; Horvitz, 2000, Joshua və s., 2008) atəş dərəcələrini artırır. Bundan əlavə DA, hipokampus və amigdala (Bissiere və digərləri, 2003, Limon və Manahan-Vaughan, 2006, Swant kimi), qorxu öyrənmə üçün kritik sahələrdə uzun müddətli potensiasiya, əsas neyron korrelyasiya asanlaşdırmaq üçün göstərilmişdir və Wagner, 2006).
DA nöron fiziologiyasının qorxuya gətirməsi ilə əlaqədar irəliləyişlərə baxmayaraq, DA və onun könlüm reseptorlarının qorxu ilə əlaqəli öyrənmədə dəqiq rolu həll edilməmişdir. D1R benzeri antagonistlərin sistematik olaraq və ya amigdalana salınması qorxu ilə əlaqəli öyrənmənin alınması və ya ifadə edilməsinin qarşısını almaq üçün göstərilmişdir; digərləri isə bu dərmanların heç bir təsiri olmadığını göstərmişlər (Guarraci və ark., 1999; Greba və Kokkinidis, 2000; Oliveira və s., 2006). Bundan əlavə, D1R-kimi agonistlərin qorxu kondisionerinə təsirini artırmaq və ya təsir göstərməməsi göstərilmişdir (Guarraci və s., 1999; Greba və s., 2000; Inoue və s., 2000; Oliveira et al., 2006). Analoji fərq tədqiqatlar D2R kimi reseptorları üçün agonistler və ya antaqonistləri istifadə aşkar edilmişdir (Guarraci et al, 2000.. Strike et al, 2001; Ponnusamy et al, 2005.. De Oliveira et al, 2006). Bu uyğunsuzluqlar davranış metodologiyası, dərman vasitələrinə dozalara bağlı təsirlər və ya farmakoloji maddələrin seçilməsində fərqliliklər ola bilər. Məsələn, DA reseptor antaqonistləri seçiciliklərində geniş fərqlənirlər, bəzi tədqiqatlar isə D2 reseptorlarını daha çox seçici cəhətdən antagonizasiya edə bilər, digərləri isə D2, D3 və D4 reseptorlarını (Missale və s., 1998) daha geniş antagonizasiya edə bilər.
DA-nın qorxu ilə əlaqəli öyrənmədə rolunu aydınlaşdırmaq üçün DA (DD siçanları) olmayan siçanları və ya D1R və ya DA D2 reseptorlarından (D2R) olmayan siçanları istifadə etdik və onları qorxu-potensiallaşmış bir başlanğıc paradiqmasında sınaqdan keçirdik. Qorxu-potensiyallaşan başlanğıc, bir neytral stimulun bir ayak (Koch, 1999) ilə cütləşmələrdən sonra akustik çaşqın cavabında artdığını göstərən bir Pavlovian-qorxulu kondisioner paradiqmasıdır. Qorxu-potensiyallaşmış başlanğıc, bu tədqiqatlar üçün ideal bir paradiqmadır, çünki hipoaktiv DD siçanında ölçmək çətin olan dondurma davranışının qiymətləndirilməsindən asılı deyil (Zhou və Palmiter, 1995). DD siçanlarının DA-tükənməmiş və ya DA-dolu bir vəziyyətdə tədqiq edildiyi üçün onlar DA-nın öyrənmə və yaddaşın formalaşmasında rolunu öyrənmək üçün ideal bir imkandır. Bundan başqa, Cre recombinase-in virus vasitəsi ilə çatdırılmasını istifadə edərək DA siqnalları DD siçanlarının Th allelinin (Hnasko və s., 2006) yenidən aktivləşdirilməsi ilə xüsusi hədəf bölgələrinə seçilən şəkildə bərpa edilə bilər. DA-nın müəyyən hədəf sahələrinə seçici bərpası qorxu kondisionerləri zamanı DA sinyallaşması ilə tənzimlənən beyin bölgələrinin qiymətləndirilməsinə imkan verir.
Material və metodlar
Heyvanlar və müalicələr
DD siçanları açıqlandığı kimi yaradılıb (Hnasko və digərləri, 2006). Qısaca, DD (Thfs / fs; DbhTh / +) siçan bir neomycin müqavimət durub vasitəsilə təsirsiz hala edilmiş iki nonfunctional tirozin hydroxylase (Th) alleller keçirmək (NeoR) gen Th gen ilk Intro daxil lox P sites qucaqladığı . Bu siçanlar da bir toxunmaz dopamin β-hidroksilaz (Dbh) allelini və Th geninin hədəf bir şəkildə yerləşdirilməsi ilə bir Dbh alelini daşıyır. Nəzarət heyvanları ən azı bir toxunmamış Th aleli və bir bütöv Dbh allele daşıyır. DD heyvanlarında qeyri-dopaminergik katekolaminlərin səviyyəsi normaldır və bütün katekolaminlərin səviyyəsi nəzarət heyvanlarında normaldır (Zhou və Palmiter, 1995, Szczypka et al., 1999). Siçanlar qarışıq C57BL / 6 X 129 / Sv genetik fonunda saxlanılırdı. Şiddətli hipofagiya səbəbiylə, DN siçanları gündə təxminən postnatal gündən başlayaraq 50-dan başlayaraq 33 μl / g (Zhou və Palmiter, 1995) həcmində 10 mg / kg-da L-Dopa ilə gündə (ip) enjekte edilmişdir. Bu enjeksiyonlar 8 üçün DA funksiyasını 10 saatına bərpa edir (Szczypka və s., 1999). D1R knockout (KO) və D2R KO fareleri təsvir edilmişdir (Drago və ark., 1994; Kelly et al., 1997). Hər iki suş C57BL / 6 fonunda saxlanılır. D1R KO siçanlarının böyüməsinin geriləməsi səbəbi ilə, dörd həftə içində sütlənmiş və sonra böyüməni təşviq etmək üçün nəmlənmiş çovu qidalandı. Bütün heyvanlar PCR analizi ilə genotip edilmişdir. Kişi və qadın siçanlar 2-5 aylıq dövrlər arasında davranış testlərinə məruz qaldılar. Bütün siçanlar 12: 12 (yüngül: qaranlıq) dövrü altında qidalanma ilə (5LJ5; PMI Feeds, Sent-Luis, MO) və suda mövcud olan bir temperaturda tənzimlənir. Bütün davranış təcrübələri işıq dövrü ərzində aparılmışdır. Bütün siçanlar Səhiyyə Milli İnstitutu və Vaşinqton Universitetinin Heyvan Qulluq və İstifadə Komitəsi tərəfindən müəyyən edilmiş qaydalara əsasən müalicə olunmuşdur
D2R KO siçanları D2 benzeri antagonist etiklopride (Sigma, St. Louis, MO) 2 mg / kg (ip) 'də tətbiq edilirdi. Eticlopride 0.5% salin ildə eritildi və son xnumxll / g həcmində verildi. D0.9R yabanı tipi (WT) siçan vasitəyə enjekte edildi.
Aparat
Prepulse inhibisyonunu, həyəcanlandırıcı cavabları və qorxu potensiallı qışqırımı ölçmək üçün səs-söndürmə başlayan otaqları (SR-Lab, San Diego Instruments, San Diego, CA) istifadə edildi. Başladığı cavablar üçün, pulse başlanğıcından başlayaraq, 65 1-msec oxunuşları alındı. Çarpazlığa cavab vermək üçün şok başlanğıcından başlayan 500 1-msec oxunuşları alınmışdır. Cavabın zirvəsi amplitudu prepulse inhibisyonunu, həyəcanlandırıcı cavabları, qorxu-potensiasiya edən başlanğıcı və şok reaktivliyini hesablamaq üçün istifadə edilmişdir. Ağ səs-küy, kameranın tavanında yerləşən yüksək tezlikli hoparlör tərəfindən istehsal edilmişdir. Arxa səsləri daimi 65 dB səviyyəsində saxlanılırdı. Səs səviyyələri səs səviyyəli bir oxucu (RadioShack, Fort Worth, TX) istifadə edərək desibellərdə (Ölçək) ölçüldü. Qəzəblənmə vahidi başlanğıc cavab oxumalarının (San Diego Instruments, San Diego, CA) bütövlüyünü təmin etmək üçün istifadə edilmişdir. Istifadə etmək üçün başlama qutusunun arxa divarına 8-watt işığı düzəldildi.
Başlama cavab əyriləri
Bir 5-min habituation dövründən sonra, heyvanlar səs səviyyəsinin artması ilə bir sıra yeddi sınaqdan keçirildi: 80-dan 120-ə qədər, 30 saniyədə bir ITI ilə. Bu seriya ümumi 10 sınaqları üçün 70 dəfə təqdim edildi. Bütün sınaqlarda, heç bir səsi olmayan null sınaqlardan başqa, səs nəbzi 40 msec idi.
Əvvəlcədən pulse inhibisyonu
Heyvanlara 10-min habituation dövrü verildi, bundan sonra mövzular 5 40-msec, 120-dB, pulse-tək sınaqlarla təqdim edildi. Siçanlar daha sonra 50 sınaqları ilə təqdim edildi və ya üç prepulse sınaqdan (5, 10 və 15-dB fondan yuxarı) bir startle pulse-tək sınaq və ya akustik stimul olmadığı bir boş sınaq. İntertrial interval (ITI) ortalama 15 san (5-25 sıra). Bir başlanğıc sınaq 40-msec, 120-dB ağ səs-küydən ibarət idi. Prepulse sınaqları 20-msec 70-dB pulse 75 msec tərəfindən əvvəl olan 80, 40 və ya 120-dB intensivliyi bir 100-msec müddəti prepulse ibarətdir. Prepulse inhibisyonu aşağıdakı formula ilə hər prepulse səviyyəsində hesablanmışdır:% inhibition = [(prepulse sınaqında ortalama başlanğıc cavab / pulse-tək sınaqda ortalama başlanğıc cavabı) × 100]. DD siçanları DA-tükənmiş vəziyyətdə, L-Dopa enjeksiyasından sonra 18-24 saatda test edilmişdir.
Qorxu-gücləndirilmiş həyəcan (7-gün paradiqması)
1 (baseline) günü, bir 5-min habituation dövründən sonra, siçanlara siqnal-təsadüfi sifarişli 20 sınaqları verildi, tapşırıq və no-cue şərtləri arasında bərabər bölündü. No-cue sınaqları üçün heyvanlar 40-msec, 105-dB akustik pulse ilə təqdim edildi. Nümunə sınaqları üçün heyvanlar bir 10-sn işıq nişanı ilə təqdim edildi, bu 40-msec, 105-dB pulse ilə birgə sonlandı. ITI orta 120 san (60 üçündür 180 saniyə).
Təlim 2, 4 və 6 günlərində baş verib. Bir 10-min habituation dövründən sonra, siçanlara 10-mA, 0.2-sn ayak ilə birgə sonlanan replika işıqının 0.5 təqdimatları verildi. ITI orta 120 san (60 üçündür 180 saniyə). Test iclasları 3, 5 və 7 günlərində baş verib və yuxarıda təsvir edilən əsas müzakirə sessiyası ilə eyni idi. DD siçanları DA-tükənmiş vəziyyətdə idi, 18, son L-Dopa enjeksiyasından sonra, təməl, təlim və sınaq sessiyaları zamanı 24-ə qədər idi. L-Dopa, şəkil əfsanələrində göstərildiyi kimi məşqlərdən sonra enjekte edildi. Aşağıdakı formul qoruyucu potensiallaşdırılmış qışqırımı hesablamaq üçün istifadə edilmişdir:% potentiation = [(Təqib sınaqları üzrə cavabların ortalaması / no-cue sınaqları üzrə cavabların ortalaması-1) × 100].
Qorxu-gücləndirilmiş həyəcan (3-gün paradiqması)
Bu paradiqmanın günləri 1 və 3 (əsas və test) 7-gün qorxu potensiallı başlanğıc paradiqması üçün bənzərdir. 2 (təlim) günü siçanlar 30-sec nişanı 10-mA, 0.2-sec ayaq ilə 0.5 cütləşməsini aldılar. ITI ortalaması 120 saniydi (60 üçündür 180 saniyə). DD siçanları bazal, təlim və test zamanı DA-tükəndi.
Qısa müddətli yaddaş
Başlanğıc və test sessiyaları 7-gün paradiqması üçün təsvir edilənlərlə eyni idi. 2 günü, bir 5-min habituation dövründən sonra, 30-sec bir 10-sec bir cue işıq, 0.5-sec, 0.2-mA footshock ilə birgə sona çatdı 120 pairings verildi. İTİ ortalama 60 saniyə (180 üçündür 10). Təlimdən sonra siçanlar testdən əvvəl XNUMX dəqiqə üçün ev kafeslərinə yerləşdirildi. Qısamüddətli yaddaş qorxu-potensiallaşmış həyəcan üçün istifadə edilən eyni formuldan istifadə edərək qiymətləndirilmişdir.
Şok Həssaslaşması
Hər bir heyvan üçün qısa müddətli yaddaş səviyyəsində və test sessiyalarında heç bir göstəriş şərtlərinə cavablar şokun həssaslaşdırılmasını hesablamaq üçün aşağıdakı formulda istifadə olunmuşdur:% sensitizasiya = [(test zamanı ortalama başlanğıc cavabı / 1) × 100].
Th gen funksiyasının rekombinasiya vasitəsi ilə bərpası
Isofluran (1.5-5%) anesteziyalı siçan bir stereotaksik alətə yerləşdirildi (David Kopf Instruments, Tujunga, CA). ventral tegmental sahəsində Th gen funksiyasının bərpası üçün rekombinant AAV1-Cre-GFP virus ventral midbrain daxil ikitərəfli vurulub (1.2 × 1012 hissəciklər / ml-də titered) (mm əlaqələndirir: bregma üçün 3.5 posterior, 0.5 lateral Midline üçün , 4.5 ventral Bregma, 0.5 μl / yarımkürə). BLA DA, Rekombinant CAV2-Cre virus xüsusi bərpası üçün ikitərəfli vurulub (2.1 × 1012 hissəciklər / ml-də titered) (mm əlaqələndirir: bregma üçün 1.5 posterior, 3.25 lateral, Midline üçün 5 ventral bregma etmək; 0.5 μl / yarımkürəsi) . Hər iki viral vektorun ətraflı təsviri dərc olundu (Hnasko və s., 2006; Zweifel və s., 2008). Virus infuziya pompasına (WPI, Sarasota, FL) qoşulan bir 10-gauge şpris iğnesi (Hamilton, Reno, NV) istifadə edərək, bir 32-min dövrünə viruslar enjekte edildi.
İmmünohistokimya
50 mg / ml sodyum pentobarbital (0.2-0.3 ml / heyvan) ilə anesteziyadan sonra siçanlar fosfat tamponlu salin ilə transcardial olaraq perfüze edilmiş, sonra fosfat tamponlu salinada 4% paraformaldehiddir. Dissected beyinlər 4% paraformaldehiddə gecə-gündək sabitlənmiş, fosfat tamponlu salinada 30% sükrozda cryoprotected və daha sonra izopentanda tez dondurulmuşdur. Pulsuz süzülmüş koronal bölmələr (30 μm) anti-TH (1: 1000, Chemicon) ya da dovşan anti-TH (1: 2000, Chemicon) antikorları ilə immunostained edilmişdir. İmmünofloresans Cy2- və ya Cy3-konjuge IgG ikincil antikorlarını (1: 200, Jackson ImmunoResearch) istifadə edərək əldə edilmişdir. Ləkələnmiş bölmələr slaydlarda quraşdırılıb, lentə alındı və dik parlaq mikroskopla (Nikon) şəkli çəkildi.
Statistik təhlil
Performans analizləri təkrar tədbirlər və birtərəfli ANOVA, Fisher post-hoc və nəticələrində qeyd olunan Tələbələrin t-testlərindən ibarət idi. Statistik analiz statistika proqramı (Statsoft, Tulsa, Oklahoma) istifadə edilmişdir.
Nəticələr
DD siçanlarının sağlam akustik qəzəbi və normal prepulse inhibisyonu var
Qorxu-potensiyallaşmış başlanğıc sağlam səsli stimul və sensorimotor qapaqları tələb edir. DA-nın olmaması ilə akustik qəzəblənmə mübadiləsinin dəyişdirildiyini müəyyən etmək üçün DA-tükənmiş DD siçanlarının (18-dən 24 saat sonra L-Dopa) çox decibel səviyyələrinə təsiri ölçüldü və nəzarətlərə (Şəkil 1A) nisbətən müqayisə edildi. Təkrarlanan tədbirlər ANOVA genotipin əsas təsiri olmadığını və genotip və səs səviyyəsinin arasında əhəmiyyətli bir qarşılıqlı əlaqəni göstərməmişdir.
Şəkil 1
DA qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanı öyrənmək üçün vacibdir. A, İdarəetmə (n=10, qara kvadratlar) və DD siçanlarının (n=10, açıq kvadratlar) müxtəlif səs intensivliyinə akustik həyəcan reaksiyası. Cavablar ixtiyari vahidlərdə bildirilir. B, Prepulse inhibisyonu nəzarətdə (n=3, qara çubuqlar) və DD siçanlarında (n=10, açıq çubuqlar) 10 müxtəlif prepulse intensivliyində sınaqdan keçirilmişdir. Ulduzlar p<0.05, təkrar ölçülər ANOVA-nı göstərir. C, 7 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasını təsvir edən sxematik. Başlanğıc və sınaq günlərində siçanlar psevdor-təsadüfi olaraq 10 təqdimat (40 dB ürkütmə nəbzinin 105 ms müddətində təqdimatı) və 10 replika sınaqları təqdimatı (qorxulu nəbzlə birlikdə bitən 10 saniyəlik işıq işarəsi) aldılar. sifariş. Təlim günlərində siçanlar 10 saniyə davam edən, 10 mA ayaq zərbəsi ilə bitən 0.5 saniyəlik işıq siqnalının 0.2 cütləşməsini aldılar. Sınaq günlərində öyrənmə, işarəsiz sınaqlarla müqayisədə replika sınaqlarında potensialın faizi kimi qiymətləndirildi. Təlimdən 10 saat sonra (3 və 2-cü gün) L-Dopa verilmiş D, DD siçanları (n=4, açıq çubuqlar) öyrənə bilmədilər (Test 1 və 2). Bununla belə, DD siçanları məşqdən dərhal sonra vurulduqda (6-cı gün) onlar qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan keçirdilər (Test 3). Ulduzlar p<0.05, təkrar ölçülər ANOVA-nı göstərir. E, Təlim sessiyaları zamanı şok reaktivliyinin ölçülməsi (Nəzarət n=10, qara çubuqlar; DD n=10, açıq çubuqlar). Cavablar ixtiyari vahidlərdə bildirilir. F, DA-nın vacib olduğu kritik zaman dövrünü müəyyən etmək üçün istifadə edilən 3 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanlanma paradiqmasını təsvir edən sxematik. Bütün 30 replika-şok cütləşməsi bir məşq günündə verildi və DD siçanları təlimdən 1 saat və ya 3 saat sonra dərhal L-Dopa ilə müalicə edildi. G, Yalnız nəzarət (n = 8, bərk qara çubuqlar, C) və məşqdən dərhal sonra vurulan DD siçanları (n = 7, şaquli zolaqlar, 0 saat) sınaq günündə qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan nümayiş etdirdi. Qorxu ilə gücləndirilmiş bu qorxu səviyyəsi L-Dopa 1 saat (n=6, diaqonal zolaqlar) və ya 3 saat (n=6, açıq çubuqlar) məşqdən sonra verilən DD siçanlarında müşahidə ediləndən xeyli yüksək idi. Ulduz işarələri ilkin göstərici ilə müqayisədə p<0.05-i göstərir, Fisher post-hoc. Bildirilən bütün dəyərlər ± SEMDA ilə tükənmiş DD və nəzarət siçanları da sensorimotor keçiddə çatışmazlıqları aşkar etmək üçün istifadə olunan impulsdan əvvəl inhibə paradiqmasında sınaqdan keçirilmişdir. DD siçanlarında prepulse inhibisyonu gücləndirilmişdir (Şəkil 1B; təkrar tədbirlər ANOVA, genotip: F1, 18=5.37; p<0.05; prepulse səviyyəli qarşılıqlı əlaqə ilə əhəmiyyətli genotip aşkar edilməmişdir). Bu məlumatlar göstərir ki, DD siçanlarında DA tükənmiş vəziyyətdə olarkən həyəcan reaksiyalarında çatışmazlıqlar və ya sensorimotor qapı mexanizmlərində azalmalar yoxdur və onların qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan təcrübələrində istifadəsini təsdiqləyir.
Dopamin qorxu-potensiallaşmış həyəcan öyrənmək üçün kritik bir vaxtda lazımdır
DA-nın qorxulu bir kondisioner tapşırığını öyrənmək üçün lazım olub olmadığını müəyyən etmək üçün DD və nəzarət siçanları 7 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanlanma paradiqmasına məruz qaldılar (Şəkil 1C). DD siçanları DA tükənmiş vəziyyətdə təlim keçmiş və sınaqdan keçirilmişdir. Təlimdən 24 saat sonra sınaqdan keçirildikdə, nəzarət siçanları DD siçanlarında müşahidə olunmayan tək məşq seansından sonra qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan nümayiş etdirdilər (Şəkil 1D; təkrar ölçülər ANOVA, genotip, F1, 18=7.4590, p<0.05). Hətta əlavə məşq seansından sonra DD siçanları qorxudan yaranan həyəcanı ifadə edə bilmədilər, nəzarət siçanları isə möhkəm öyrənmələrini ifadə etməyə davam etdilər. Maraqlıdır ki, 6-cı gündə məşqdən dərhal sonra L-Dopa verildikdə, DD siçanları ilkin göstəricidən əhəmiyyətli dərəcədə yüksək olan (birtərəfli ANOVA F1, 18=9.1999, p<0.01) və nəzarət səviyyələrindən fərqlənməyən qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan nümayiş etdirdilər ( Şəkil 1D). DD və nəzarət siçanları üçün təlim günlərində şok reaktivliyi hər hansı bir məşq günündə genotiplər arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənməmişdir ki, bu da DD siçanlarında öyrənmə çatışmazlığının ayaq şokunu hiss edə bilməməsi ilə bağlı olmadığını göstərir (Şəkil 1E). Kritik vaxt pəncərəsini xarakterizə etmək üçün. DA hərəkəti üçün əlavə bir araşdırma L-Dopa tətbiqinin vaxtını dəyişdi. DD və nəzarət siçanlarına 30 işıq şoku cütlüyündən (Şəkil 1F) ibarət bir məşq sessiyası verildi və sonra L-Dopa ilə məşqdən dərhal, 1 saat və ya 3 saat sonra vuruldu və 24 saat sonra sınaqdan keçirildi. Təlimdən dərhal sonra inyeksiya edilən DD siçanları sınaq günündə nəzarətdə olduğu kimi güclü qorxu ilə gücləndirilmiş ürküdüblər, halbuki təlimdən 1 saat və ya 3 saat sonra L-Dopa yeridilmiş DD siçanları heç bir öyrənmə göstərməyib (Şəkil 1G; təkrar tədbirlər ANOVA; müalicə × sessiya F3, 23=5.1032, p<0.01). Bu məlumatlar göstərir ki, DA qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasında öyrənmək üçün sonlu bir müddət ərzində lazımdır. Bununla belə, DD heyvanları həmişə DA olmadıqda sınaqdan keçirildiyindən, qorxudan qorxu yaddaşının ifadəsi üçün DA lazım deyil. Bundan əlavə, DA-nın olmaması şok reaktivliyini pozmur.
D1R qorxu potensiallı qışqırıq üçün vacibdir
Qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan üçün hansı DA reseptorlarının zəruri olduğunu araşdırmaq üçün əvvəlcə D1R KO siçanlarını təhlil etdik. D1R KO və nəzarət, vəhşi tipli (WT) siçanlar, DD siçanları üçün təsvir olunduğu kimi, həyəcan siqnalı intensivliyinin çox səviyyələrində sınaqdan keçirilmişdir (Şəkil 2A). Test edilmiş hər hansı səs səviyyəsində D1R KO və WT siçanları arasında əhəmiyyətli fərq yox idi, bu, D1R KO siçanlarının bütöv bir akustik həyəcan reaksiyasına malik olduğunu göstərir. Əvvəlki tədqiqatlarla razılaşaraq, D1R KO siçanlarında pozulmamış prepulse inhibisyonunu müşahidə etdik (Ralph-Williams et al., 2002). 7 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanlandırma paradiqmasında sınaqdan keçirildikdə, D1R KO siçanları sınaq günlərinin heç birində öyrəndiklərini ifadə edə bilmədilər (Şəkil 2B; təkrar ölçülər ANOVA genotip × test günü F3, 48=6.28; p<0.01), halbuki WT siçanlar 2-ci və 3-cü sınaq günlərində qorxu ilə gücləndirilmiş qorxuya malik idilər (p<0.05 və p<0.01, müvafiq olaraq 2 və 3-cü testə qarşı nəzarətin başlanğıc səviyyəsi, Fisher post-hoc). D1R KO siçanları hər üç məşq günündə WT-dən daha çox şok reaktivliyinə malik idi (Şəkil 2C; təkrar tədbirlər ANOVA, genotip F1, 16=10.18; p<0.01; əhəmiyyətli genotip × təlim günü müşahidə olunmadı). Beləliklə, D1R KO siçanları WT siçanları ilə müqayisədə ayaq şokuna yüksək reaksiya göstərsələr də, hətta 3 günlük məşqdən sonra belə qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanı əhəmiyyətli dərəcədə zəiflətdilər. Bu məlumatlar D1R KO heyvanlarında öyrənmə pozğunluğunu göstərir və D1R-ni replikadan asılı qorxu kondisionerində DA-nın təsirlərinə vasitəçilik etməkdə iştirak edir. Şəkil 2 D1R KO siçanları öyrənməni əhəmiyyətli dərəcədə pozub. A, D1R WT (n=9, qara kvadratlar) və KO (n=9, açıq kvadratlar) siçanlarının akustik həyəcan reaksiyası. B, D7R siçanları ilə 1 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasının nəticələri. D1R WT siçanları (n=9, bərk qara çubuqlar), lakin D1R KO siçanları (n=9, açıq çubuqlar) yox, 3-cü sınaq günündə qorxu ilə gücləndirilmiş ürküdülər. Ulduzlar KO-nu WT ilə müqayisə edərək p<0.01-i göstərir, Fisher post- hoc. C, Zərbə reaktivliyinin ölçülməsi. D1R KO siçanları (n=9, açıq çubuqlar) WT (n=9, bərk çubuqlar) ilə müqayisədə ayaq zərbələrinə daha yüksək reaksiya verirlər. Ulduzlar p<0.05, təkrar ölçülər ANOVA-nı göstərir. Bildirilən bütün dəyərlər deməkdir ± SEM Təəccüblü reaksiyalar və şok reaktivliyi üçün ixtiyari vahidlərlə bildirilən rəqəmlər.
Qorxu-potensiyallaşmış başlanğıc D2R KO siçanlarında pozulmuşdur, lakin digər D2 kimi reseptorları tələb edir
D2 benzeri reseptorların qorxu potensialına uğrayan başlanğıc üçün lazım olub olmadığını araşdırmaq üçün, D2R KO və WT siçanları başlanğıc cavabına və qorxu potensiallı başlama testlərinə məruz qaldı. WT və D2R KO farelerinin D2R KO farelerinin sağlam bir acoustic şaşırtıcı cavabına (Şəkil 3A) sahib olduğunu ifadə edərək, test edilmiş bütün dB səviyyələrində bərabər başlanğıc cavablarına malikdir. D1R KO farelerine bənzər şəkildə D2R KO farelerinin intact prepulse inhibisyonuna malik olduğunu müşahidə etdik (Ralph-Williams və s., 2002). 7 gün qorxu potentiated əl-ayağa salmaq paradiqma test zaman, WT və D2R KO də siçan ekvivalent bütün 3 test gün səviyyəsi (Şəkil 3B) və şok reaksiya da qorxu potentiated əl-ayağa salmaq nümayiş qrupları (Şəkil 3C) arasında müxtəlif idi. Bu məlumatlar, D2R-nin qorxu-potensiallaşmış həyəcanı öyrənmək üçün zəruri olmadığını göstərir.
Şəkil 3
D2R KO siçanlarında bütövlükdə qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan var. A, D2R WT (n=8, qara kvadratlar) və KO siçanlarının (n=8, açıq kvadratlar) akustik həyəcan reaksiyası. B, D7R siçanları ilə 2 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanlandırma paradiqmasının nəticələri. Həm WT (n=8, bərk çubuqlar), həm də KO (n=8, açıq çubuqlar) siçanları əhəmiyyətli dərəcədə qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan nümayiş etdirdilər. C, Təlim zamanı zərbə reaktivliyinin ölçülməsi (WT, n=8, bərk çubuqlar; KO, n=8, açıq çubuqlar). D, WT və D2R KO siçanları (hər biri n = 11) 3 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasına məruz qaldı. D2R KO siçanlarına məşqdən əvvəl etikloprid (0.5 mq/kq) verildi və sınaq zamanı qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan ifadə edə bilmədilər. Ulduzlar p<0.01, KO-ya qarşı WT, Fisher post-hoc-u göstərir. Bildirilən bütün qiymətlər orta ± SEM-dir. Təəccüblü reaksiyalar və şok reaktivliyi üçün cavablar ixtiyari vahidlərdə bildirilir. Əvvəlki tədqiqatlar göstərmişdir ki, D2-yə bənzər antaqonistlərin sistemli və ya birbaşa amigdalaya tətbiqi şərtlənmiş qorxunu pozur (Guarraci et al., 2000; Greba və başqaları, 2001; Ponnusamy və başqaları, 2005). Onların nəticələri ilə bizim nəticələrimiz arasındakı uyğunsuzluğu araşdırmaq üçün D2R KO siçanlarına 2 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş ürkütmə paradiqmasında məşq etməzdən əvvəl D0.5R kimi antaqonist etikloprid (3 mq/kq; çatdırılan ip) tətbiq olundu. Təlimdən sonra 24 saat sınaqdan keçirildikdə, avtomobilə enjekte edilmiş WT siçanları qorxu ilə gücləndirilmiş qorxu nümayiş etdirdi, halbuki etikloprid yeridilmiş D2R KO siçanları öyrənmə göstərmədi (Şəkil 3D; təkrar ölçülər ANOVA genotip × gün F1, 20=7.5698, p<0.05) . Bu nəticələr göstərir ki, D1R-dən əlavə, D2-yə bənzər DA reseptorları ailəsinin üzvü, lakin D2R deyil, qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan üçün vacibdir.
DD və D1R KO siçanlarında qısa müddətli yaddaş pozulmuşdur
DA qorxudan güclənmiş bir heyrətləndirmə öyrənmək üçün təlimdən sonra bir saat ərzində tələb olunur. Bu təcrübələrdə, qorxudan güclü bir qorxu üçün uzun müddətli yaddaş məşqdən 24 saat sonra təhlil edildi. DA-nın qısa müddətli yaddaş üçün də lazım olub olmadığını yoxlamaq üçün yola çıxdıq. DD heyvanları və nəzarətləri təlimdən 2 dəqiqə sonra qısamüddətli yaddaşını sınayan 10 günlük bir paradiqmaya məruz qaldı (şəkil 4A). Test günündə şok həssaslığı və qısa müddətli yaddaş qiymətləndirildi. Qısamüddətli yaddaş, başlanğıc reaksiyalarında replikaya bağlı artımlar olaraq təyin olundu, şok həssaslaşması isə səs siqnalından sonra səs işarəsindən asılı olmayan akustik başlanğıc cavabının kontekstdən asılı gücləndirilməsidir (McNish və digərləri, 1997; Richardson, 2000; Risbrough və s. al., 2008). DD siçanlarda nəzarətdən əhəmiyyətli dərəcədə az şok həssaslığı var idi (Şəkil 4B, p <0.05; Tələbə testi). Eynilə, nəzarət siçanları DD siçanlarında olmayan güclü qısamüddətli yaddaş nümayiş etdirdi (Şəkil 4B, p <0.05, DD versus control, Student's t-test). Bu məlumatlar DA-nın qorxu ilə gücləndirilmiş qaşqabağın qısa və uzun müddətli yaddaşı üçün lazım olduğunu göstərir. Bundan əlavə, DA, şok həssaslığı ilə qiymətləndirildiyi kimi, kontekstdən asılı olan qorxu öyrənməsi üçün lazımdır. Bu məlumatlar həmçinin qorxu kondisioner yaddaş izinin stabilləşməsi üçün kritik dövrdə DA-nın tələb olunduğu barədə əvvəlki qənaəti gücləndirir. Şəkil 4 Qısamüddətli yaddaş və şok həssaslığı DA-dan asılıdır. A, Davranış paradiqmasının dizaynı. 1-ci gündə ilkin başlanğıc cavabları alındı. 2-ci gündə, siçanlar 30 replika-şok cütlüyünü aldılar və sonra testdən əvvəl 10 dəqiqə ərzində evlərinə qaytardılar. B, İdarəetmə siçanları (n = 10, qara çubuqlar) DD (n = 10, açıq çubuqlar) ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə daha çox şok həssaslığına və qorxu ilə gücləndirilmiş qorxuya malikdirlər. Ulduz işarələri p <0.05; Tələbə testi. C, WT (n = 7, qara çubuqlar) və D1R KO (n = 7, açıq çubuqlar) siçanlar bütöv şok həssaslığına malikdirlər. Qısa müddətli yaddaş testi zamanı yalnız WT-də qorxu ilə gücləndirilmiş bir qorxu var. Ulduz işarələri p <0.05, KO-ya qarşı WT; Tələbə testi. D, WT (n = 8, qara çubuqlar) siçanları D2R KO (n = 8, açıq çubuqlar) ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə daha çox şok həssaslığına malikdir. Qorxu ilə gücləndirilən səviyyələr WT və D2R KO siçanları arasında eynidir. Ulduz işarələri p <0.05, KO-ya qarşı WT; Tələbə testi. Bildirilən bütün dəyərlər vasitələrdir ± SEMQısamüddətli yaddaşda və şok həssaslığında DA-nın roluna hansı reseptor alt tiplərinin vasitəçilik etdiyini araşdırmaq üçün D1R və D2R KO siçanları DD siçanları ilə eyni paradiqmada sınaqdan keçirilmişdir. D1R KO siçanları qısa müddətli yaddaş səviyyələrini WT siçanlarından xeyli aşağı salıb (Şəkil 4C, p <0.05; Student's t-test); Bununla birlikdə, D1R KO-da şok həssaslaşma səviyyələri ilə kontekstə bağlı öyrənmənin toxunulmaz olduğunu göstərən nəzarət siçanları arasında əhəmiyyətli bir fərq yox idi. D2R KO siçanlarında şok həssaslaşma səviyyələri WT-dən xeyli aşağı idi (Şəkil 4D, p <0.05; Student's t-test), lakin qısa müddətli yaddaşın WT və KO siçanları səviyyələri arasında əhəmiyyətli bir fərq yox idi.
DA-nın bazolateral amigdalana bərpası qısa müddətli yaddaşa imkan vermək üçün kifayətdir
Bazolateral amigdala replika bağlı qorxu yaddaşının alınması üçün vacibdir (Maren, 2003, Maren və Quirk, 2004, Sigurdsson və s., 2007). Bundan əlavə, bazolateral amigdala funksiyasını asanlaşdırmaqda DA üçün mühüm rol oynadığına dair sübutlar mövcuddur (Rosenkranz və Grace, 2002; Bissiere və s., 2003; Marowsky et al., 2005). Kainatlı amigdala DA-nın qorxu-potensiallaşmış başlanğıc üçün tələb olunmadığını araşdırmaq üçün DD və nəzarət siçanları CAV2-Cre vektoru ilə bazolateral amigdalana (Şəkil 5A) iki tərəfli şəkildə enjekte edilmişdir. Bu vektor retrograd şəkildə D-nin nöronlarına enjeksiyon sahəsindən Th gen aktivliyini bərpa edir (Hnasko et al., 2006). İmmunhistokimya TH dorsal striatum və nüvə accumbens (Şəkil 2G) in CAV5-Cre-enjekte DD siçanların basolateral amygdala (Şəkil 5J) mövcud, lakin yox idi ki, aşkar. TH ilk növbədə ventral tegmental sahənin kaudal hissələrində (Şəkil 5D) kiçik nöronlara bərpa edilmişdir. . Ədəbiyyatında ümumi amygdala-layihələndirilməsi DA neurons kiçik nömrələri ilə uyğundur vurulub DD siçanlarda 10-mkm bölmə başına 30 TH-müsbət hüceyrələri (Ford et al, 2006 çox adətən az var idi Lammel et al. , 2008; Margolis et al., 2008).
Şəkil 5
DD siçanlarında endogen TH ifadəinin regiona xüsusi bərpası. A, basolateral amigdala (BLA) xilasetmə sınaqları üçün sxematik təsvir koordinatları. DD (n = 7) və nəzarət (n = 7) siçanları CAV2-Cre vektorları (0.5 uL / yarımkürə) ilə BLA-ya iki tərəfli olaraq enjekte edilmişdir. B, ventral tegmental bölgə (VTA) xilasetmə təcrübələri üçün enjeksiyon koordinatlarını təsvir edən sxematik. AAV1-Cre-GFP, DD (n = 0.5) VTA və nəzarət siçanlarına (n = 7) iki tərəfli olaraq (10 uL / yarımkürə) enjekte edilmişdir. Rəqəmlər Paxinos və Franklin, 2001-dan adaptasiya edildi. C-E, viral yoluxmuş WT nəzarət ventral midbrain, BLA-injected DD və VTA-injected DD göstərən coronal dilim (4 × böyüdücü) TH boyama müqayisə. C, Sİ-nin immunohistokimyası nəzarətində midbrain VTA və əsasən nigra pars compacta (SNpc; ox göstərilən) DA nöronların varlığını göstərir. D, BLA-xilas edilən DD siçanlar VTA-da TH-pozitiv nöronların az sayda idi. Inset, soma və proseslərdə TH ekspresyonunu göstərən, qutlu bölgənin 40 × böyüməsidir. E, VTA-qurtarılmış DD siçanlarının əsas ifadəsi VTA-da TH ifadəsi idi. SNpc-də (ok ilə göstərilən) TH lekinqinin olmaması. W-virusa yoluxan nəzarət, BLA-qurtarılmış və VTA-qurtarılmış DD siçanlarından olan F-H, Coronal bölmə (4 × böyüdücü), dorsal striatum və nüvəli akumbenslərdəki TH ifadəsini göstərmişdir. F, WT virusu enjekte edilmiş kontroller, dorsalın tamamı boyunca (ox ilə göstərilən) və ventral striatumda TH ifadəsinə malikdir. G, BLA-xilas edilən DD siçanlarının striatumunda aşkar TH ifadəsi yoxdur. H, VTA-qurtarılmış DD siçanlar, dorsal striatumda (ox ilə göstərilən) yalnız bir az boyama ilə çekirdek akumbensində TH ifadəsinə malikdir. I-K, Coronal bölməsində (10 × böyüdücü) TH-nin ifadəsi virusa yoluxmuş WT nəzarətində BLA-qutuya alınmış və VTA-qurtarılmış DD siçanlarını əks etdirir.
Bazolateral amigdala enjekte edilmiş siçanlar 3 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasına məruz qaldılar. Qısamüddətli yaddaş və şok həssaslığı məşqdən 10 dəqiqə sonra qiymətləndirildi və qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan üçün uzunmüddətli yaddaş təlimdən 24 saat sonra qiymətləndirildi (Şəkil 6A). Maraqlıdır ki, bazolateral amigdala yeridilmiş DD siçanlarında yalnız qısamüddətli yaddaş bərpa edilib. Qısamüddətli yaddaşın səviyyələri nəzarət qrupları ilə eyni idi, lakin uzunmüddətli yaddaş (p<0.05; Student's t-test) və şok həssaslığı (p<0.05; Student's t-test) nəzarət qruplarından əhəmiyyətli dərəcədə aşağı idi. Təlim zamanı şok reaktivliyinin səviyyələri qruplar arasında eyni idi (Nəzarət: 1613±333 və BLA-dan xilas edilmiş DD: 1758±260). Bu məlumatlar göstərir ki, əsasən ventral tegmental sahənin kaudal aspektindən yaranan bazolateral amigdalaya DA proyeksiyaları qısa müddətli qorxu yaddaşının əldə edilməsi üçün kifayətdir, lakin beynin digər kortikal və ya limbik sahələrinə DA proqnozları çox güman ki, vacibdir. kontekstual öyrənmə və qorxu yaddaşı izinin uzunmüddətli sabitləşməsi. Şəkil 6 Bazolateral amigdala (BLA) ilə xilas edilmiş DD siçanları qısamüddətli yaddaşı bərpa etdi, ventral tegmental zona (VTA) ilə xilas edilən DD siçanları isə öyrənməni tam bərpa etdi. A, Virusla vurulmuş WT nəzarəti (n = 7) və BLA ilə xilas edilmiş DD siçanları (n = 7) 3 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasına məruz qaldı. Solda, BLA ilə xilas edilmiş siçanlarda şok həssaslığı əhəmiyyətli dərəcədə aşağıdır. Orta, Qısamüddətli yaddaş (STM) BLA ilə xilas edilmiş siçanlarda səviyyələri idarə etmək üçün bərpa edildi. Təlimdən 24 saat sonra qiymətləndirilən sağ, Uzunmüddətli yaddaş (LTM) BLA ilə xilas edilmiş siçanlarda yoxdur. B, 10 günlük qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcan paradiqmasında WT nəzarəti (n = 7) və VTA ilə xilas edilmiş DD siçanlarının (n = 3) nəticələri. Solda, VTA ilə xilas edilmiş DD siçanlarında şok həssaslığı nəzarətdən əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmirdi. Orta və Sağ, STM və LTM yaddaş səviyyələri VTA-xilasetmə siçanlarında nəzarətlə eyni idi. Ulduz işarələri p<0.05, xilasetmə qarşı nəzarət, Tələbənin t-testini göstərir. Bildirilən bütün dəyərlər ± SEM deməkdir
TR-nin ventral tegmental bölgəsinə bərpası DA neyronları öyrənmək üçün kifayətdir
Ventral midbrendən çıxan iki əsas DA dövrə var; əsasən əsasən nigra pars kompaktası və mesokortikolimbik dövrədən ibarət olan mesostriatal dövrə əsasən ventral tegmental sahədən çıxır. Mezokortikolimbik dövrə, basolateral amigdala (Bjorklund və Dunnett, 2007, Lammel və s., 2008) daxil olmaqla, reputa-bağımlı qorxu kondisionerləri üçün vacib olduğu bilinən beyin nüvələrinə geniş proqnozlaşdırır. Uzun müddətli yaddaş və şok həssaslaşması üçün mesokortikolimbik DA-nın daha tam bərpası tələb olunmadığını araşdırmaq; DD və nəzarət siçanları endojen Th genini (Şəkil 1B) xüsusilə aktivləşdirmək üçün ventral tegmental sahəyə bir AAV5-Cre-GFP vektoru ilə ikitərəfli şəkildə enjekte edildi.
İmmünohistokimya hansı DA nöronlarının aşkar edildiyini və hansı hədəflərin TH ifadəsini bərpa etdiyini təyin etmək üçün istifadə edilmişdir. Qeyri-xilas edilən DD siçanlarında TH boyama olmur (Hnasko və s., 2006). İmmünohistokimya, ventral tegmental bölgə-enjekte edilmiş DD siçanlarında TH'nin bərpası ventral tegmental sahəyə və hədəflərinə (Şəkil 5E, H, K) çox xüsusi olduğunu göstərir. Dorsal striatumda, əsas nigra pars kompaktadan (Şəkil 5H) gələn DA neyronlarının əsas hədəfi, THF-nin akumbens və bazolateral amigdalanın sağlam TH ekspresyonuna (Fig 5H, K) malik olduğu TH boyama çox az idi.
Ventral tegmental bölgə-sintetik siçanlar əsas 3-gün qorxu potensiasiya edilmiş başlanğıc paradiqmasını basolateral amigdala-enjekte edilmiş siçanlar kimi təsvir etmişlər (Şəkil 6B). Şok həssaslaşması, qısa müddətli yaddaş və uzunmüddətli yaddaş ventral tegmental sahə-enjekte edilmiş DD siçanlarında nəzarət səviyyəsinə bərpa edilmişdir. Təlim zamanı şok reaktivlik qruplar arasında eyni idi (Control: 1653 ± 268 versus VTA-qurtardı DD: 1602 ± 198). Bu məlumatlar, ventral tegmental sahədən DA proqnozlarının qısa müddətli və uzunmüddətli cued-qorxusuz yaddaşın meydana gəlməsinə və kontekstə bağlı şok sensitizasiyasına kifayətdir.
Müzakirə
Bu nəticələr göstərir ki, qorxu potensiallaşmış şişkinliklə ölçülmək üçün DA-nın cued-qorxu kondisionerinə ehtiyacı var. DD təlimatları dərhal bərpa edilmədiyi təqdirdə, DD siçanları qorxu-potensiallaşmış şaqqıltıları sergilemedi. DD siçanlar da qısa müddətli yaddaş və şok həssaslığını pozmuşdur. Əhəmiyyətli olaraq, DA-tükənməmiş DD siçanlarında prepulse inhibisyonu aşağı olmamışdır, DA-nın olmaması ilə sensorimotor qapağının azalmadığını bildirir. Əvvəlki araşdırmalar göstərir ki, DA ötürülməsini gücləndirən psixotropimulyantlar prepulse inhibisyonunu aşağı sala bilər (Schwarzkopf et al., 1992; Bubser və Koch, 1994; Ralph və s., 1999; Swerdlow et al., 2006; Doherty et al., 2007) və digərləri dopamin qəbuledicilərinin farmakoloji inhibisyonu prepulse inhibisyonunu artırdığını nümayiş etdirdi (Schwarzkopf və s., 1993; Depoortere et al., 1997). Bu bulgulara uyğun olaraq, DD siçanlarının nəzarət siçanlarının üzərində prepulse inhibisyonunun kiçik, lakin əhəmiyyətli bir artımı olmuşdur. Əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, DA reseptorlarının farmakoloji inhibisyonu akustik qışqırma reaksiyasını (Davis və Ağayanyan, 1976, Schwarzkopf et al., 1993) azalda bilər. Dopamin tükənmiş DD siçanlarının əhəmiyyətli dərəcədə dəyişdirilə bilmədikləri akustik çaşqınlıq reaksiyaları; lakin əvvəlki hesabatlarla (Schwarzkopf et al., 1993) uyğun olaraq yüksək stimul intensivliyində nəzarətlərə nisbətən azalmış cavablara meyl göstərilmişdir.
Burada təqdim olunan məlumatlar DA-nın aşkara bağımlı qorxusun yaddaşının alınması və ya ifadəsi üçün vacib olmadığını göstərir, çünki DD siçanlarının test dövründə DA-i tələb etməməsi daha əvvəl, L-Dopanın dərhal sonra L-Dopanın infeksiyası ilə əldə edilmiş qorxu potensiyalı qıcıqlanmasını ifadə etməkdir təlim. Bununla yanaşı, bizim təcrübələrimiz DA-da təlim zamanı ilkin stimul prosesi üçün tələb olunduğuna dair mübahisə edir, çünki DD siçanları bütün təlimlərdə dopamin-tükəndirildi. Bunun əvəzinə, məlumatlarımız, DD siçanlarının qısa müddətli yaddaşını ifadə etmədikləri üçün yaddaşın izlənilməsinin erkən dayandırılması üçün DA lazım olduğunu göstərir və uzun müddətli yaddaş yalnız L-Dopa dərhal verildikdə görülür, ancaq 1 saat sonra deyil təlim. Şübhəsiz ki, dərhal dərhal sonra L-Dopa ilə DD siçanlarını birləşdirərək, yaddaş izini uzun müddətli bir forma daxil etməyə imkan verən stabilləşdirir. Aversive stimullar qorxu-yaddaşın sabitləşdirilməsinə imkan verən beyin bölgələrində DA səviyyələrində uzadılmış artımlara səbəb olur (Abercrombie və s., 1989; Kalivas və Duffy, 1995, Doherty və Gratton, 1997, Inglis və Moghaddam, 1999). Bizim məlumatlarımıza uyğun olaraq, digərlər DA-nın post-təlim manipulyasiyalarının qorxu ilə əlaqəli yaddaş dəyişdiyini (Bernaerts və Tirelli, 2003, Lalumiere və s., 2004, LaLumiere və digərləri, 2005) göstərmişlər.
Bizim tapıntılar çoxlu DA reseptor subtiplərinin qorxu-potensiallı qışqırıq üçün zəruri olduğunu göstərir. D1R KO faresinin qorxu potensiallı qışqırıqları üçün qısa müddətli və uzunmüddətli yaddaş olmaması, bu reseptor alt tipi üçün DA-nın reputa-bağlı qorxu öyrənməsində təsirini təmin etməkdə mühüm rol oynadığını göstərir. Maraqlıdır ki, konteksdən asılı qorxu öyrənmə D1R KO siçanlarında sağlam idi. Bu məlumatlar D1R-kimi antagonistlərin şok sensitizasiyaya təsir etmədən ziddiyyətli təhlükənin öyrənilməsini zəiflədiyini göstərən digər tədqiqatları təsdiqləyir və bu təcrübələrdəki farmakoloji manipulyasiyaların D1R (Lamont və Kokkinidis, 1998, Guarraci və s., 1999) . Bu məlumatlar D1R-nin digər reputa-bağlı öyrənmə paradiqmalarında (Smith və s., 1998; Eyny və Horvitz, 2003) mühüm rolunu göstərən tədqiqatlarla da uyğundur.
D2R KO qüvvətli qorxuya saldı, lakin şok həssaslığa malik olmadı. Greba et al. (2001) D2R-nin intra-amygdalar antagonizasiyasının şok sensitizasiyasına və qorxu-potensiallaşmış başlanğıcın başlanğıc başlanğıcına və ya ayağına qarşı təsirlərə yol vermədən zədələnməsinə gətirib çıxardığını göstərmişdir. D2R-nin aktivləşdirilməsi, ehtimal ki, qorxu potensiallaşmış başlanğıc yaddaşına (Bissiere və s., 2003) görə həyati əhəmiyyət kəsb edən BLA-da uzunmüddətli potensiasiyanın induksiyasına gətirib çıxarır. Bizim məlumatlar göstərir ki, D2R reputa bağımlı qorxu təhsili üçün zəruri deyil, əksinə, bu DA reseptorunun alt tipi kontekstə bağlı şok həssaslaşması üçün vacibdir. D2R KO siçanlarını D2-kimi antagonist etikloprit ilə sistemli şəkildə təhvil vermədən qoruyan potensial qüsurları qarşısını aldı; Buna görə də, etikloprid ilə inhibe edilmiş olan digər D2R-reseptorlarının qorxu potensiallaşmış başlanğıcda (Sigala və s., 1997; Bernaerts və Tirelli, 2003; Laviolette və s., 2005; Swant və Wagner , 2006). Beləliklə, əvvəlki tədqiqatlarda D2-kimi antagonistlərin gətirdikləri reputa-bağlı tədrisdə pozğunluqlar D2R ailəsinin digər üzvlərini inhibe edən bu dərmanlara aid edilə bilər.
Xüsusi olaraq ventral tegmental sahəyə endogen TH-nin seçmə bərpası DD siçanlarında öyrənilmənin bərpasına gətirib çıxardı. İmmünohistokimya TH'nin nüvəli akumbens və bazolateral amigdala kimi mühüm limbik nüvələrə bərpa edildiyini, lakin dorsal striatuma deyil, bərpa edilmişdir. Bundan əlavə, əsasən nigra pars kompaktasında TH üçün pozitiv nöronlar olduqca az idi. Bu məlumatlar ventral tegmental sahə neyronlarından DA-nın cued-və kontekstual-qorxu kondisionerləri üçün vacib olduğunu göstərir.
DA-nın bazolateral amigdala qədər seçici bərpası olan siçanlar qısa müddətli yaddaşını ifadə edir, lakin uzun müddətli yaddaş və ya şoka qarşı həssaslaşdırma deyil. Əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, DA GABAergik inhibitor tonunda dəyişikliklər vasitəsilə amygdala funksiyasını asanlaşdırır və bu təsir D1R ya da D2R (Bissiere və digərləri, 2003; Kroner və s., 2005; Marowsky və s., 2005) tərəfindən vasitələndirilir. Buradakı məlumatlar göstərir ki, bazolateral amigdala DA DA qorxu potensiallaşmış qışqırıq üçün qısa müddətli yaddaş əldə etmək üçün vacibdir, lakin yaddaşın uzunmüddətli sabitliyi üçün kifayət deyil. Qısa müddətli yaddaşın bərpası ventral tegmental sahədən çıxan azyolli amigdala proqnozlaşdırıcı DA neyronlarının az sayda vasitəsi ilə baş verir. Ventral tegmental bölgədə qurtarılmış DD siçanlarında endogen TH-nin daha geniş yayılmış bərpası qısa müddətli və uzun müddətli yaddaşa gətirib çıxardı; Buna görə TH-nin digər mesocorticolimbic sxemlərinə bərpası ehtimal ki, qorxu-potensiallaşmış çaşqınlıq üçün uzunmüddətli yaddaşı yaratmalıdır. Əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, nüvə acumbens və prefrontal korteks qorunma şəraitində DA-nın mühüm hədəfləri ola bilər (Kalivas və Duffy, 1995; Murphy və digərləri, 2000; Pezze və digərləri, 2003; LaLumiere və digərləri, 2005; Laviolette et al., 2005, Floresco və Tse, 2007). Buna görə də uzunmüddətli yaddaşın meydana gəlməsi üçün nüvəli akumbens və ya prefrontal korteksdə DA sinyalizasiya tələb olunur.
Xülasə olaraq, tədqiqatımızda genetik siçan modelləri, farmakologiya və funksiyaya bölgəyə xüsusi xilasetmə birləşməsi istifadə olunur. Bu nəticələr mükafat emalının xaricində bu nörotransmitter üçün mühüm rol oynayır. Bundan başqa, bizim tədqiqat bir çox DA retseptorları üzərində birbaşa çoxlu beyin bölgələrində əmələ gələn qorxu kondisionerləri üçün hərəkətə ehtiyac olduğunu göstərir. . Son tədqiqatlar ventral tegmental sahəsi DA neurons (Ford et al, 2006 yeri hədəf görə molekulyar və fizioloji xüsusiyyətləri əhəmiyyətli dərəcədə dəyişir ki nazil etdik Margolis et al, 2006. Bjorklund və Dunnett, 2007; Lammel et al, 2008. Margolis et al., 2008). Th gen seçilmiş basolateral amygdala üçün layihələndirilməsi DA neurons bərpa olan biz həyata təcrübələr onlar digər beyin bölgələrində layihələndirilməsi DA neurons təminatların daha ventral tegmental sahəsi neurons kiçik seçin əhali var ki, aşkar. DA nöron populyasiyalarının heterojenliyini nümayiş etdirən işlər ilə birləşən məlumatlar bu diskret DA dövrələrinin hər birinin rolunu anlamağa ehtiyac olduğunu vurğulayır. DA-nın bir çox davranış və fizioloji funksiyasını qorxu ilə əlaqəli öyrənməni əhatə edən məlumatların genişləndirilməsi, travma sonrası stress pozuqluğu, obsesif-kompulsif bozukluk və ümumiləşdirilmiş anksiyete pozuqluğu kimi yayılmış qorxu ilə əlaqəli xəstəliklərin daha yaxşı başa düşülməsinə gətirib çıxara bilər.
Minnətdarlıq
Bu istintaq qismində İctimai Səhiyyə Xidməti, Milli Tədqiqat Xidməti Mükafatı, T32 GM07270, Ümumi Tibb Elmləri Milli İnstitutu və NIH Ümumi Tibb Elmləri Milli İnstitutları 'Grant 4 R25 GM 058501-05 tərəfindən dəstəkləndi. Əlyazma, Albert Quintananın histoloji yardımı və Valerie Wall-in siçan koloniyası baxımına aid faydalı şərhləri üçün Ilene Bernstein, Lisa Beutler, Çarlz Chavkin və Larry Zweifelə təşəkkür edirik. Drag Miguel Chillon (CBATEG Vector Production Unit, Barselona Universitat Autonoma'da) CAV2 və Matthew AAV1 virusuna görə təşəkkür edirik.
References
1. Abercrombie ED, Keefe KA, DiFrischia DS, Zigmond MJ. Striatumda, vivo dopaminin sərbəst buraxılmasında, nüvəli akumbens və medial frontal korteksdə stressin diferensial təsiri. J Neurochem. 1989; 52: 1655-1658. [PubMed]
2. Bernaerts P, Tirelli E. Dopamin D4 reseptor agonisti PD168,077-nin C57BL/6J siçanlarında öyrənilmiş inhibitor qaçınma reaksiyasının yaddaş konsolidasiyasına asanlaşdırıcı təsiri. Behav Brain Res. 2003;142:41–52. [PubMed]
3. Bissiere S, Humeau Y, Luthi A. Dopamin darvazaları, feedforward inhibisyonu bastırarak lateral amigdala LTP induksiyası. Nat Neurosci. 2003; 6: 587-592. [PubMed]
4. Bjorklund A, Dunnett SB. Beyində dopamin nöron sistemləri: bir yeniləmə. Trends Neurosci. 2007; 30: 194-202. [PubMed]
5. Bubser M, Koch M. Siçovulların akustik həyəcan reaksiyasının prepulse inhibisyonu medial prefrontal korteksin 6-hidroksidopamin lezyonları ilə azalır. Psixofarmakologiya (Berl) 1994;113:487-492. [PubMed]
6. Davis M, Ağacanyan GK. Apomorfin və haloperidolun siçovullarda akustik həyəcan reaksiyasına təsiri. Psixofarmakologiya (Berl) 1976;47:217-223. [PubMed]
7. de Oliveira AR, Reimer AE, Brandao ML. Dopamin D2 reseptor mexanizmləri şərtli qorxu ifadəsində. Pharmacol Biochem Behav. 2006; 84: 102-111. [PubMed]
8. Depoortere R, Perrault G, Sanger DJ. Siçovullarda həyəcan refleksinin impulsdan əvvəl inhibisyonunun gücləndirilməsi: antipsikotik aktivliyin aşkarlanması üçün bir model olaraq prosedurun farmakoloji qiymətləndirilməsi. Psixofarmakologiya (Berl) 1997;132:366-374. [PubMed]
9. Doherty JM, Masten VL, Powell SB, Ralph RJ, Klamer D, Low MJ, Geyer MA. Dopamin D1, D2 və D3 Reseptor Alt Növlərinin Kokainin Siçanlarda Prepulse İnhibisyonuna Dağıdıcı Təsirlərinə Töhfələri. Neyropsixofarmakologiya. 2007;12:12.
10. Doherty MD, Gratton A. Nüvə akkumbensindəki NMDA reseptorları nüvə akkumbenslərində və ventral tegmental sahədə stressin səbəb olduğu dopamin salınmasını modullaşdırır. Sinaps. 1997;26:225–234. [PubMed]
11. Drago J, Gerfen CR, Lachowicz JE, Steiner H, Hollon TR, Love PE, Ooi GT, Grinberg A, Lee EJ, Huang SP, et al. D1A dopamin reseptorları olmayan mutant siçanın striatal funksiyasının dəyişdirilməsi. Proc Natl Acad Sci US A. 1994;91:12564–12568. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
12. Eyny YS, Horvitz JC. İştahanın kondisionerində D1 və D2 reseptorlarının əks rolları. J Neurosci. 2003;23:1584–1587. [PubMed]
13. Floresco SB, Tse MT. Bazolateral amigdala-prefrontal kortikal yolda inhibitor və həyəcanverici ötürülmənin dopaminergik tənzimlənməsi. J Neurosci. 2007;27:2045–2057. [PubMed]
14. Ford CP, Mark GP, Williams JT. Mezolimbik dopamin nöronlarının xüsusiyyətləri və opioid inhibisyonu hədəf yerə görə dəyişir. J Neurosci. 2006; 26: 2788-2797. [PubMed]
15. Greba Q, Kokkinidis L. SCH 1 dopamin D23390 reseptor antaqonistinin periferik və intraamigdalar administrasiyası qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanı bloklayır, lakin şok reaktivliyini və ya akustik həyəcanın şok həssaslığını bloklayır. Davranış nevroloji. 2000;114:262–272. [PubMed]
16. Greba Q, Munro LJ, Kokkinidis L. Qorxu gücləndirən ürküdücü ilə ölçülən klassik şərtli qorxu ifadəsində ventral tegmental sahənin xolinergik muskarinik reseptorlarının iştirakı. Brain Res. 2000;870:135–141. [PubMed]
17. Greba Q, Gifkins A, Kokkinidis L. Amigdaloid dopamin D2 reseptorlarının inhibəsi qorxu ilə gücləndirilmiş həyəcanla ölçülən emosional öyrənməni pozur. Brain Res. 2001;899:218–226. [PubMed]
18. Guarraci FA, Kapp BS. Uyğun dovşanda fərqli pavlovian qorxu kondisionerində ventral tegmental sahə dopaminergik nöronların elektrofizyoloji xarakteristikası. Behav Brain Res. 1999; 99: 169-179. [PubMed]
19. Guarraci FA, Frohardt RJ, Kapp BS. Pavlovian qorxu kondisionerində amigdaloid D1 dopamin reseptorunun iştirakı. Brain Res. 1999;827:28–40. [PubMed]
20. Guarraci FA, Frohardt RJ, Falls WA, Kapp BS. Bir D2 dopamin reseptor antaqonistinin intra-amigdaloid infuziyalarının Pavlovian qorxu kondisionerinə təsiri. Davranış nevroloji. 2000;114:647–651. [PubMed]
21. Hnasko TS, Perez FA, Scouras AD, Stoll EA, Gale SD, Luquet S, Phillips PE, Kremer EJ, Palmiter RD. Dopamin çatışmazlığı olan siçanlarda nigrostriatal dopaminin Cre rekombinaz vasitəçiliyi ilə bərpası hipofagiya və bradikineziyanı geri qaytarır. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:8858–8863. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
22. Horvitz JC. Görülən mükafatlandırılmayan hadisələrə mesolimbokortikal və nigrostriatal dopamin reaksiyaları. Neyrologiya. 2000;96:651–656. [PubMed]
23. Inglis FM, Moghaddam B. Amigdalanın dopaminergik innervasiyası stressə çox yüksək təsir göstərir. J Neurochem. 1999; 72: 1088-1094. [PubMed]
24. Inoue T, Izumi T, Maki Y, Muraki I, Koyama T. Dopamin D (1/5) antaqonisti SCH 23390-ın şərtli qorxunun əldə edilməsinə təsiri. Pharmacol Biochem Davranışı. 2000;66:573–578. [PubMed]
25. Yeşua M, Adler A, Mitelman R, Vaadia E, Bergman H. Midbrain dopaminergik nöronlar və striatal kolinergik internöronlar, ehtimal olunan klassik kondisioner işlərinin müxtəlif dövrlərində mükafat və səbirli hadisələr arasındakı fərqləri kodlayır. J Neurosci. 2008; 28: 11673-11684. [PubMed]
26. Kalivas PW, Duffy P. Strok tərəfindən nüvə akumbensinin qabığında dopamin ötürülməsinin selektiv aktivasiyası. Brain Res. 1995; 675: 325-328. [PubMed]
27. Kelly MA, Rubinstein M, Asa SL, Zhang G, Saez C, Bunzow JR, Allen RG, Hnasko R, Ben-Jonathan N, Grandy DK, Low MJ. Dopamin D2 reseptor çatışmazlığı olan siçanlarda hipofiz laktotrof hiperplaziyası və xroniki hiperprolaktinemiya. Neyron. 1997;19:103–113. [PubMed]
28. Koç M. Qəfil nevrobiologiya. Prog Neurobiol. 1999; 59: 107-128. [PubMed]
29. Kroner S, Rosenkranz JA, Grace AA, Barrionuevo G. Dopamin in vitro bazolateral amigdala nöronlarının həyəcanlanmasını modullaşdırır. J Neurophysiol. 2005; 93: 1598-1610. [PubMed]
30. Lalumiere RT, Nguyen LT, McGaugh JL. Dopaminin məşqdən sonrakı intrabazolateral amigdala infuziyaları inhibitor qaçınma yaddaşının konsolidasiyasını modullaşdırır: noradrenergik və xolinergik sistemlərin cəlb edilməsi. Eur J Neurosci. 2004;20:2804–2810. [PubMed]
31. LaLumiere RT, Nawar EM, McGaugh JL. Bazolyar amigdala və ya nüvəli akumbens qabığı tərəfindən yaddaş konsolidasiyasının modullaşdırılması həm beyin bölgələrində eyni vaxtda dopamin qəbuledici aktivasiyasını tələb edir. Mem öyrən. 2005; 12: 296-301. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
32. Lammel S, Hetzel A, Hackel O, Jones I, Liss B, Roeper J. İkili mezokortikolimbik dopamin sistemi daxilində mesoprefrontal neyronların unikal xüsusiyyətləri. Neyron. 2008;57:760–773. [PubMed]
33. Lamont EW, Kokkinidis L. Dopamin D1 reseptor antaqonisti SCH 23390-ın amigdalaya infuziyası gücləndirilmiş ürkütmə paradiqmasında qorxu ifadəsini bloklayır. Brain Res. 1998;795:128–136. [PubMed]
34. Laviolette SR, Lipski WJ, Grace AA. Medial prefrontal korteksdəki neyronların subpopulyasiyası dopamin D4 reseptorundan asılı olan bazolateral amigdala girişi vasitəsilə partlama və tezlik kodları ilə emosional öyrənməni kodlayır. J Neurosci. 2005;25:6066–6075. [PubMed]
35. Limon N, Manahan-Vaughan D. Dopamin D1/D5 reseptorları hipokampal uzunmüddətli potensiasiya və uzun müddətli depressiya vasitəsilə yeni məlumatların əldə edilməsini təmin edir. J Neurosci. 2006;26:7723–7729. [PubMed]
36. Maren S. Amigdala, sinaptik plastiklik və qorxu yaddaşı. Ann NY Acad Sci. 2003;985:106–113. [PubMed]
37. Maren S, Quirk GJ. Qorxu yaddaşının neyron siqnalı. Nat Rev Neurosci. 2004;5:844–852. [PubMed]
38. Margolis EB, Mitchell JM, Ishikawa J, Hjelmstad GO, Fields HL. Midbrain dopamin nöronları: proqnozlaşdırma hədəfi potensial potensial müddəti və dopamin D (2) reseptor inhibisyonunu müəyyən edir. J Neurosci. 2008; 28: 8908-8913. [PubMed]
39. Margolis EB, Lock H, Chefer VI, Shippenberg TS, Hjelmstad GO, Fields HL. Kappa opioidləri prefrontal korteksə proyeksiya edən dopaminerjik neyronları seçici şəkildə idarə edir. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:2938–2942. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
40. Marowsky A, Yanagawa Y, Obata K, Vogt KE. İnterneuronların xüsusi bir alt sinfi amigdala funksiyasının dopaminergik asanlaşdırılmasına vasitəçilik edir. Neuron. 2005; 48: 1025-1037. [PubMed]
41. McNish KA, Gewirtz JC, Davis M. Hippocampusun lezyonlarından sonra kontekstual qorxunun sübutu: dondurmanın pozulması, lakin qorxu ilə gücləndirilməyən həyəcan. J Neurosci. 1997;17:9353–9360. [PubMed]
42. Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Dopamin reseptorları: quruluşdan funksiyaya. Physiol Rev. 1998;78:189–225. [PubMed]
43. Murphy CA, Pezze M, Feldon J, Heidbreder C. Dopaminin differensial iştirakı, akumbensin nüvəsinin qabığında və nüvəsində, yalnış şərtləndirilmiş stimula gizli inhibənin ifadəsində. Neyrologiya. 2000;97:469–477. [PubMed]
44. Pezze MA, Feldon J. Mesolimbicin qorxu kondisionerində dopaminergik yollar. Prog Neurobiol. 2004; 74: 301-320. [PubMed]
45. Pezze MA, Bast T, Feldon J. Şərti qorxu üçün siçovul medial prefrontal korteksdə dopamin ötürülməsinin əhəmiyyəti. Sereb Korteks. 2003;13:371–380. [PubMed]
46. Ponnusamy R, Nissim HA, Barad M. D2-kimi dopamin reseptorlarının sistematik blokadası siçanlarda kondisiyalı qorxuların aradan qaldırılmasına kömək edir. Mem öyrən. 2005; 12: 399-406. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
47. Ralph RJ, Varty GB, Kelly MA, Wang YM, Caron MG, Rubinstein M, Grandy DK, Low MJ, Geyer MA. Dopamin D2, lakin D3 və ya D4 deyil, reseptor alt növü siçanlarda amfetamin tərəfindən istehsal olunan impulsların qarşısının alınmasının pozulması üçün vacibdir. J Neurosci. 1999;19:4627–4633. [PubMed]
48. Ralph-Williams RJ, Lehmann-Masten V, Otero-Corchon V, Low MJ, Geyer MA. Birbaşa və dolayı dopamin agonistlərinin prepulse inhibisyonuna diferensial təsiri: D1 və D2 reseptorlarını sökən siçanlarda bir araşdırma. J Neurosci. 2002;22:9604–9611. [PubMed]
49. Richardson R. Təəccüblənmənin şok həssaslaşması: öyrənilmiş və ya öyrənilməmiş qorxu? Behav Brain Res. 2000;110:109–117. [PubMed]
50. Risbrough VB, Geyer MA, Hauger RL, Coste S, Stenzel-Poore M, Wurst W, Holsboer F. CRF(1) və CRF(2) Reseptorları Potensiasiya edilmiş həyəcandan kontekstə, lakin Diskret İşarələrə tələb olunur. Neyropsixofarmakologiya. 2008; 19:19.
51. Rosenkranz JA, Grace AA. Pavlovian kondisionerində qoxuya uyan amigdala potensialının dopaminin vasitəçiliyi modulyasiyası. Təbiət. 2002; 417: 282-287. [PubMed]
52. Schultz W. Dopamin və mükafatla rəsmiləşmək. Neyron. 2002;36:241–263. [PubMed]
53. Schwarzkopf SB, Mitra T, Bruno JP. Yenidoğulmuşlar kimi dopamin tükənmiş siçovullarda hissiyyat qapısı: şizofreniya xəstələrində tapıntılara potensial uyğunluq. Biol Psixiatriya. 1992;31:759–773. [PubMed]
54. Schwarzkopf SB, Bruno JP, Mitra T. Haloperidol və SCH 23390-ın bazal və stimullaşdırılmış şəraitdə akustik həyəcan və prepulse inhibisyonuna təsiri. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psixiatriya. 1993;17:1023–1036. [PubMed]
55. Sigala S, Missale C, Spano P. Dopamin D2 və D3 reseptorlarının siçovulda öyrənmə və yaddaşa əks təsiri. Eur J Pharmacol. 1997;336:107–112. [PubMed]
56. Sigurdsson T, Doyere V, Cain CK, LeDoux JE. Amigdalada uzunmüddətli potensiya: qorxu öyrənmə və yaddaşın hüceyrə mexanizmi. Neyrofarmakologiya. 2007;52:215–227. [PubMed]
57. Smith DR, Striplin CD, Geller AM, Mailman RB, Drago J, Lawler CP, Gallagher M. D1A dopamin reseptorları olmayan siçanların davranışının qiymətləndirilməsi. Neyrologiya. 1998;86:135–146. [PubMed]
58. Swant J, Wagner JJ. Dopamin daşıyıcı blokadası, D1 dopamin reseptorunun aktivləşdirilməsi yolu ilə siçovulların hipokampusunun CA3 bölgəsində LTP-ni artırır. Mem öyrənin. 2006;13:161–167. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
59. Swerdlow NR, Shoemaker JM, Kuczenski R, Bongiovanni MJ, Neary AC, Tochen LS, Saint Marie RL. Siçovullarda ön beyin D1 funksiyası və sensorimotor qapısı: D1 blokadasının təsiri, frontal lezyonlar və dopamin denervasiyası. Neurosci Lett. 2006;402:40–45. [PubMed]
60. Szczypka MS, Rainey MA, Kim DS, Alaynick WA, Marck BT, Matsumoto AM, Palmiter RD. Dopamin çatışmazlığı olan siçanlarda qidalanma davranışı. Proc Natl Acad Sci US A. 1999;96:12138–12143. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
61. Müdrik RA. Dopamin, öyrənmə və motivasiya. Nat Rev Neurosci. 2004;5:483– 494. [PubMed]
62. Zhou QY, Palmiter RD. Dopamin çatışmazlığı olan siçanlar hipoaktiv, adiptik və aphagicdir. Cell. 1995; 83: 1197-1209. [PubMed]
63. Zweifel LS, Argilli E, Bonci A, Palmiter RD. Plastiklik və asılılıq davranışları üçün dopamin neyronlarında NMDA reseptorlarının rolu. Neyron. 2008;59:486–496. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
;