Kişi cinsi davranışda (2007) hypocretin (orexin)

J Neurosci. 2007 Mar 14;27(11):2837-45.

Muschamp JW1, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM.

mücərrəd

Arousal tənzimlənməsində hipokretinin (orexin; hcrt / orx) neyronların rolu yaxşı qurulmuşdur.

Son zamanlarda hcrt / orx yeməyin mükafatlandırılması və narkotik axtaran davranışa təsir etdi. Burada bildiririk ki, kişi siçovullarında hcrt / orx neyronlarında Fos immunoreaktivliyi (ir) kopulyasiya zamanı ciddi şəkildə artır, kastrasiya isə hcrt / orx neyron hüceyrə sayında azalır və kopulyativ davranışdakı postkastrasiya pozuntularına uyğundur.

Bu təsir estradiol əvəzetmə ilə bərpa edildi. Androgen (AR) və estrogen (ER alfa) reseptorları üçün immunolabelləşdirmə hcrt / orx-in AR ilə kookalizasiyasını və ER alfanı ifadə edən bir neçə hcrt / orx neyronunun aşkarlanmadığını, hcrt / orx ekspresyonunun hormonal tənzimlənməsinin bu reseptorları olan neyronlardan gələn afferentlər vasitəsilə olduğunu göstərir. Oreksin-1 reseptor antaqonisti SB 334867 [N- (2-metil-6-benzoksazolil) -N ”-1,5-naftiridin-4-il karbamid] sistematik tətbiqinin kopulyasiya davranışını pozduğunu da nümayiş etdiririk. Hcrt / orx-in prozeksual təsirləri üçün bir yer ventral tegmental sahə (VTA) ola bilər. Burada hcrt-1 / orx-A-nın in vivo olaraq VTA dopamin (DA) neyronlarının atəş nisbətində və populyasiya aktivliyində doza bağlı artımlar istehsal etdiyini göstəririk. Kopulyasiya zamanı hcrt / orx-in aktivləşdirilməsi və öz növbəsində, VTA DA nöronlarının hcrt / orx tərəfindən həyəcanlandırılması, kişi cinsi davranışı zamanı əvvəllər müşahidə olunan DA nüvəsindəki güclü artımlara kömək edə bilər. Anterior VTA-da sonrakı üçqat immunolabelinq göstərdi ki, hcrt / orx liflərinə tətbiq olunan tirozin hidroksilaz pozitiv neyronlarda Fos-ir kopulyasiya zamanı artır.

Birlikdə, bu məlumatlar hcrt / orx peptidlərinin, mesolimbik DA sisteminin aktivləşdirilməsi ilə cinsiyyət kimi təbii mükafatların enerjili təqibini asanlaşdırmaq üçün steroidə həssas şəkildə təsir göstərə biləcəyi fikrini dəstəkləyir.

giriş

1990-lərdə kəşfindən bəri (de Lecea et al., 1998; Sakurai və digərləri, 1998), hipokretin (orexin; hcrt / orx) sistemi əsasən oyanış və həzm etmə davranışı baxımından nəzərdən keçirilmişdir (Sutcliffe və de Lecea, 2002; Siegel, 2004). Hcrt / orx siqnalına sahib olan mutant siçanlar yuxu və oyaqlıq arasında tez-tez keçid ilə qeyd olunan oyanışın qeyri-bərabər nümunələrini göstərir (Mochizuki et al., 2004). Hcrt / orx peptidlərinin beyin sistemindəki aktiv aminergik hüceyrə qruplarını oyatmaq üçün güclü proqnozlar ilə fasiləsiz oyanışı asanlaşdırdığına inanılır (məsələn, locus ceruleus, rape) (Peyron et al., 1998; Nambu et al., 1999; Saper və ark., 2005). Oyanıqlığı və oyaqlığı tənzimləyən saytlardakı proqnozlarına əlavə olaraq hcrt / orx neyronları da ventral tegramal bölgədə (VTA) mezolimbik dopamin (DA) yolunun mənşəyini proqnozlaşdırırlar (Fadel və Deutch, 2002). Bu bağlantı nümunəsi bir sıra tədqiqat qruplarını mükafatlandırma ilə əlaqəli möhkəmləndirmədə hcrt / orx rolunu qiymətləndirməyə vadar etdi (DiLeone et al., 2003; Harris və digərləri, 2005; Harris və Aston-Jones, 2006).

Hərəkət edən heyvanlarda araşdırmalar ad libitum hcrt / orx neyronlarının enerjili, kəşfiyyat davranışları dövründə atəş sürətini artırdığını göstərin (Mileykovskiy et al., 2005) və intracerebroventriküler hcrt / orx infuziyasından sonra inkişaf etmiş lokomotor çıxışı DA reseptorlarının blokadası ilə pozulur (Nakamura və digərləri, 2000). Digər tədqiqatlar artan DA hüceyrə aktivliyini nümayiş etdirdi vitro hcrt / orx (Korotkova et al., 2003), həmçinin genişlənmiş nüvə accumbens (NAc) DA sərbəst buraxılması vivo ilə VTA-ya hcrt / orx tətbiq edildikdən sonra (Narita və ark., 2006). Bu yaxınlarda davranış araşdırmaları, hcrt / orx sisteminin aktivləşdirilməsinin, narkotik maddə üçün motivasiya üçün ayrılmaz olduğunu müəyyən etdi (Boutrel və digərləri, 2005; Harris və digərləri, 2005; Borgland və digərləri, 2006), habelə möhkəmləndirmə gücü hipotalamik quruluşlar tərəfindən homeostatik olaraq təyin olunan təbii qida mükafatları (Hoebel, 1969; Rolls və ark., 1980; Fulton və ark., 2000; Thorpe et al., 2005).

Necə ekzogen hcrt / orx qidalanma və qida axtaranları artıra bilər (Kotz, 2006), hcrt / orx intrahypothalamic infuziyası kişi siçan cinsi davranışını asanlaşdırır (Gulia et al., 2003). Artıq hcrt / orx neyronları olduğu bilinən yanal hipotalamik bölgədəki (LHA) saytların elektrikli stimullaşdırılması ilə qidalanma və ya kişi copulatory davranışın ortaya çıxdığı klassik araşdırmalara görə.Vaughan və Fisher, 1962; Caggiula və Hoebel, 1966; Swanson et al., 2005), kopulyasiya zamanı hcrt / orx neyronlarının aktivləşməsi və orexin-1 reseptoru (OX) tərəfindən davranışın pozulmasına dair dəlil axtardıq.1) blokada. Ayrıca, hcrt / orx sisteminin neyroendokrin tənzimlənməsini kastrasiya və hormon dəyişdirilməsinin mərkəzi hcrt / orx tərkibindəki təsirlərini ölçməklə və hcrt / orx və steroid hormon reseptorları üçün ikiqat immunolabelinq ilə qiymətləndirdik. Sonda mesolimbic DA sisteminin hcrt / orx tərəfindən aktivləşdirilə biləcəyini qiymətləndirdik vivo ilə hcrt / orx girişləri qəbul edən VTA-dakı DA neyronlarının kopulyasiya zamanı Fos immunoreaktivliyinin (ir) artıb-artmadığını göstərir.

Material və metodlar

Fos immunohistokimyası, davranış və hüceyrə sayımı.

Yetkinlər (∼325 g), cinsi baxımdan təcrübəli kişi Long-Evans siçovulları (Harlan, Indianapolis, IN) Milli Səhiyyə İnstitutuna uyğun olaraq saxlanılır və istifadə olunur Laboratuvar Heyvanlarının Qulluq və İstifadəsi üzrə Təlimatlarvə bütün prosedurlar universitetlərin İnstitusional Heyvan Baxımı və İstifadəsi Komitələri tərəfindən təsdiq edildi. Testdən bir həftə əvvəl, bütün heyvanlara estradiol benzoat (1 μg, sc) və progesteron tərəfindən estrusa gətirilən ovariektomiya edilmiş bir qadınla gündəlik dörd saatlıq cinsi təcrübə iclaslarına icazə verildi (10 μg, sc; 48 saat əvvəl verildi test; Sigma, St. Louis, MO). Bütün təcrübələrdə davranış testi, heyvanların adi gecə dövrünə 400 saatlıq bir 4 W qırmızı közərmə lampasından işıq altında ev qəfəslərində aparıldı. Kopulyasiya təcrübələri üçün bir qrup (n = 6) kişilərin ev qəfəslərində estrus dişi ilə tək bir boşalmaya qədər çoxalmasına icazə verildi, sonra dişi çıxarıldı. Bütün heyvanlar demək olar ki, dərhal quraşdırılmış və <4 dəq ərzində intromitted. Bu qrup üçün ortalama boşalma gecikməsi 632.6 ± 169.64 s (ortalama ± SEM; n = 6). Bir nəzarət qrupu (n = 6) fəaliyyət səviyyəsi üçün nəzarət etmək üçün istifadə edilmişdir. Bu heyvanlar, eksperimental qrupun kopulyasiya sınaq müddəti ilə uyğun gələn 15 dəqiqə müddətində oyaq və aktiv olduqlarını yoxlamaq üçün əyani olaraq izlənildi. Bu 15 dəqiqə dövrünün əvvəlində və sonunda qəfəs qapaqları açıldı və bağlandı, əks halda heyvanlar narahat qaldı. Bu dövrdə səssiz olan nəzarət heyvanları istifadə edilmədi. Heyvanlar cinahlarında və ya başdan aşağı duruşda dayandıqları təqdirdə səssiz olduqlarına görə mühakimə olundu Espana et al., 2003). Kopulyasiya seanslarının və ya nəzarət müşahidələrinin başlamasından altmış dəqiqə sonra heyvanlar natrium pentobarbital (100 mq / kq) ilə dərin anesteziya edilmiş və PBS-də 0.1 m PBS, pH 7.4 və 4% paraformaldehid ilə mükəmməlləşdirilmişdir. Beyinlər 20% saxaroza-PBS-də kriopotezləşdirilmiş və digər hər 40 mm kriostat bölməsində (heyvan başına 30) hipotalamik hcrt / orx hüceyrə populyasiyasının yaxınlığından pre-hcrt / orx (1: 100; MilliporeƏvvəllər təsvir edilmiş immunohistokimya prosedurlarına görə müvafiq olaraq 1 X, 10,000′-diaminobenzidin (DAB) və nikel intensivləşdirilmiş DAB olan Fos (3: 3; EMD Bioscities, San Diego, CA)Espana et al., 2003; Sato və s., 2005). Hüceyrə saymaları bir Olympus (Tokio, Yaponiya) mikroskopu və ardıcıl bir rostrocaudal səviyyədə bir hissədə kamera istifadə edərək yüksək böyüdülmə altında aparıldı (bax) Əncir 1B,C) (Breynma ilə 2.45 mm posterior)Swanson, 2004). Hər yarımkürədə, iki 470 × 630 μm sayma sahəsinə düşən hüceyrələr, rəqəmsal görüntü analizi proqramı (Image-Pro Plus; Media Kibernetika, Gümüş Bahar, MD) istifadə edərək təcrübi şərtlərə göz yumur. Hər iki yarımkürədə yanal sayma sahələri ön hissələrdən medial sərhədi kimi istifadə edirdilər. Medial sayma sahələri ön hissələrdən yan tərəflər kimi istifadə edirdi. Yalnız Fos, hcrt / orx yalnız və hcrt / orx və Fos-ir ilə cüt etiketli hüceyrələrin sayı qeyd edildi.

Şəkil 1. 

Kopulyasiya zamanı hcrt / orx neyronlarında Fos immunoreaktivliyinin artması. A, Fcr-ir göstərən Hcrt / orx neyronu (sağda). Ölçək çubuğu, 25 μm. B, Qeyri-yaşayış sahəsini idarə edən kişinin sol yarımkürəsindəki sağ sayma sahəsindəki nümayəndəsi. Ölçək çubuğu (in A), 200 μm. C, Kişini idarə edən mikrograf. Ölçək çubuğu, 200 μm. Oklar hcrt / orx neyronlarını Fos-ir göstərir; ulduzlar hcrt / orx hüceyrələrindəki Fos-ir nüvələrini göstərir; fx, fornix.

Kastrasiya təcrübələri və immunoblotting.

Yetkin kişilər (təcrübələrin əvvəlində ∼325 g) Uzun Evans siçovulları (75 mq / kq ketamin HCl və 10 mg / kg xylazine HCl, ip) anesteziya edilmiş və kastrasiya edilmişdir. Anesteziya və mükəmməlləşdirilmədən əvvəl heyvanlardan 7, 14 və ya 28 d gün ərzində sağ qalma müddətinə icazə verildi və beyinləri yuxarıdakı kimi prepro-hcrt / orx üçün immunolabeled edildi (bütün qruplar, n = 5). Bu heyvanlar eyni anesteziya altında skrotal kəsik almış bir şam cərrahi qrupu ilə müqayisə edildi (n = 5). Şams da 28 d-də öldürüldü. Aşağı böyüdülmə altında hücrə sayımları yuxarıdakı kimi eyni koronal müstəvidə aparıldı.

Ayrı bir eksperimentdə 28 d kastratlar (n = 5) və biabırçı idarəetmə (n = 5) natrium pentobarbital (100 mq / kq) ilə dərindən anesteziya edildi və beyinləri çıxarıldı və quru buzla soyudulmuş 2-metilbutanda sürətlə donduruldu. Dondurulmuş hipotalamiya daha sonra, əvvəlki komissiyanın dekussiyasına qədər yalnız medial preoptik sahə (mPOA) vasitəsilə, digəri isə üçüncü mədəciyin hipotalamusa bölünməsi üçün yalnız kaudal olan posterior hipotalamik nüvədən keçərək iki koronal kəsiklə bloklandı. məmə damarları. Bloklar daha sonra ya serebral pedunkulun orta ucunda, həm də üçüncü mədəciyin hipotalamik boşluğunun dorsal ucunda üfiqi bir kəsiklə iki sagittal kəsiklə kəsildi. Daha sonra toxuma blokları sonikasiya ilə homojenləşdirildi, protein proteaz inhibitorları ilə (Roche Complete Mini protease qarışığı; Roche Diagnostics, Indianapolis, IN) dəyişdirilmiş radioimmunoprecipitasiya tamponuna, pH 8.0-a ekstrakte edildi və ekstraktlar santrifüjdən sonra ayrıldı. Hər bir mövzudan alınan ekstraktlar üçün ümumi protein konsentrasiyası təyin edildikdən sonra, hər heyvandan 40 μg protein% 15 SDS-PAGE jelinin ayrı quyularına yüklənmişdir. Elektroforetik ayrılma, poliviniliden difluorid membranlara (Bio-Rad, Hercules, CA) köçürmə və immunolabelləmə Laemmli metoduna uyğun olaraq həyata keçirildi (Klivlend et al., 1977) əvvəllər qeyd olunan anti-pre-hcrt / orx antikorunun 1: 1000 və daha sonra 1: 2000 anti-β-aktin (Sigma) və 1: 5000 keçi anti-dovşan IgG (Santa Cruz Biotexnologiyası, Santa Cruz, CA) istifadə edərək ) Tris tamponlu salinada 5% toz süddə. Protein lentləri inkişaf etmiş kemiluminesans dəsti (ECL; GE Səhiyyə, Piscataway, NJ) və Kodak (Rochester, NY) BioMax filmləri ilə görüntüləndi. Filmlər 40 s-yə məruz qaldı və rəqəmsal olaraq skan edildi, optik sıxlıqları ictimaiyyətə təqdim olunan ImageJ proqramından istifadə edərək ölçüldü. Hər bir heyvan üçün hcrt / orx üçün optik sıxlıq dəyərləri β-aktin yükləmə nəzarətinin faizi olaraq müəyyənləşdirilmiş və statistik təhlil edilmişdir.

Üçüncü təcrübədə, yuxarıda göstərilən kişi siçovullarına şam əməliyyatları verildi (n = 3) və ya hər ikinci gün 28 d üçün dihidrotestosteron (500 μg, sc) ilə kastrasiya edilir və enjekte edilir; n = 4), estradiol benzoat (20 μg, sc; n = 3) və ya yağlı nəqliyyat vasitəsi (0.1 μl); n = 3). Hər iki hormon da Sigma'dan alındı. Hormon dozaları, əvvəlki işlərdə kastratlardakı kopulyasiyanı qorumaq qabiliyyətinə görə seçilmişdir (Putnam et al., 2005). Əməliyyatlardan sonra 28-cu gün, heyvanlar öldürüldü və onların hipotalaması, yuxarıda göstərildiyi kimi Qərb immunoblotu tərəfindən pre-hcrt / orx tərkibinin ölçülməsi üçün bloklandı.

Steroid hormonu reseptoru və hcrt / orx cüt etiketli immunohistokimya.

Bütöv, cinsi cəhətdən sadəlövh bir yetkin kişi LHA-nın beyin bölmələri (∼350 g) Uzun Evans siçovulları androgen reseptoru (AR) üçün immunolabeled edilmişdir (1: 750; n = 6; Santa Cruz Biotexnologiyası) və ya estrogen reseptoru (ERα) (1: 2500; n = 9; Santa Cruz Biotexnologiyası) nikel gücləndirən DAB istifadə. Sonradan AR etiketli bölmələr prepro-hcrt / orx (yuxarıda göstərildiyi kimi) üçün ikiqat etiketləndi və ERα etiketli hissələr prepro-hcrt / orx üçün ikiqat ləkələndi (n = 5). Quraşdırıldıqdan sonra, atlasdakı LHA-nın dörd koronal qatından birini yaxından izləyən hissələr Swanson (2004) bir kamera lucida əlavə istifadə edərək mikroskop altında əl çəkildi və hər hissədə cüt və tək etiketli hücrələr etiketləndi. Rəsmlər Adobe (San Jose, CA) Illustrator-dan istifadə edərək atlas səviyyələrində rəqəmsal şəkildə skan edildi və üst-üstə qoyuldu və hüceyrələrin hər bir hissəsi atlas illüstrasiyalarına çəkildi (Swanson, 2004). ERα-plus-hcrt / orx etiketli bölmələr halında, cüt və tək etiketli hcrt / orx neyronlarının sayı sayıldı.

Farmakologiya və copulatory davranış.

Yetkin kişi (təcrübələrin başlanğıcında N350 g) Uzun Evans siçovulları (n = 9) davranış testlərindən əvvəl bir həftə ərzində cinsi olaraq qəbul edən bir qadınla dörd 1 saatlıq cinsi təcrübə seansları verildi. Son testin ilk 30 dəqiqəsində ən az bir dəfə boşalmağı bacarmayan heyvanlar təcrübədən xaric edildi. Təcrübə seansları və davranış testləri, heyvanın gecə dövrünə 40 saat ərzində 2 W qırmızı közərmə işığı altında aparıldı. Kopulyasiya davranışı testləri kişinin ev qəfəsində aparıldı və müddəti 30 dəqiqə idi. Kişi kopulyasiya davranışının fərqli xüsusiyyətləri (yəni bağlar, daxilolmalar və boşalmalar) bir müşahidəçi tərəfindən hər davranış hadisəsi üçün tezlik və gecikmə məlumatlarını qeyd edən xüsusi kompüter proqramı istifadə edərək təcrübə müalicələrini görmə qabiliyyəti ilə qiymətləndirildi. Davranış testindən XNUMX dəqiqə əvvəl heyvanlara ya OX vurulurdu1 rəqib N- (2-metil-6-benzoksazolil) -N ″-1,5-naftiridin-4-il karbamid (SB 334867) (20 mq / kq, ip) və ya DMSO vasitəsi (0.5 ml / kq). Təcrübə, ilk günün testində beş heyvana, qalan dördünə vasitə aldığı şəkildə sadə bir tarazlıqdaxili mövzu dizaynını izlədi. 48 saatlıq bir dərman yuyulma müddətindən sonra ilk gündə dərmanla müalicə olunan heyvanlara vasitə verildi və əksinə.

Elektrofizyoloji.

Yetkin kişi Sprague Dawley siçovulları (∼350 g) xloral hidrat (400 mq / kq, induksiya üçün ip; 100 mq · kq) ilə anesteziya edildi-1 · H-1 bundan sonra təmir üçün) və stereotaksik alətə quraşdırılmışdır. VTA olan beyin bölgəsi üzərindəki kəllə və dura çıxarıldı. Hər bir heyvan əvvəlcə süni CSF (aCSF) bir infuziya aldı [0.5 μl / 5 min; lambda, anteroposterior, + 2.6 və ya + 3.4 mm; mediolateral, ± 0.8 mm; dorsoventral, −7.0 mm; stereotaksik bir atlas görə düz kəllə (Paxinos və Watson, 1998)], VTA'nın bir tərəfində bir 32 ga Hamilton şpris (0.5 μl / 5 min) ilə. Sonra, 10 dəqiqə sonra VTA'nın ipsilateral tərəfində hüceyrələr başına izləmə nümunəsi proseduru edildi. Bundan sonra heyvanlar hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol) infuziyasını aldılar n = 4; 1.4 nmol, n = 5; və ya 140 nmol, n = 6 aCSF-də həll olundu; Amerikalı Peptid, Sunnyvale, CA) hüceyrələr başına izləmə proseduru bu tərəfdə təkrarlandıqdan əvvəl kontralateral VTA daxil oldu. Enjeksiyonlar yarımkürə və ön və ya posterior enjeksiyon sahəsi tərəfindən tərəzi halına gətirildi. Hüceyrədənkənar vahid qeydlər 1.5 m NaCl ilə doldurulmuş və geri qırılmış tək barrel şüşə mikropipetetlər (çəkmədən əvvəl xarici diametri 2 mm; Dünya Dəqiqlik Alətləri, Sarasota, FL) ilə aparıldı. Elektrod empedansı 2-dən 4 MΩ-yə qədər 135 Hz-də dəyişdi. DA neyronları müsbət-mənfi hüceyrədənkənar fəaliyyət potensialları ilə müəyyən edilmişdir, bunlar tez-tez görkəmli ilkin seqment / somatodendritik (IS / SD) fasilə, geniş fəaliyyət potensial müddəti, yavaş atəş dərəcəsi və nizamsız tək sünbül və ya partlayış atəş nümunəsinə malikdir (Grace və Bunney, 1983). Hər hüceyrə başına bir təcrübə aparmaq üçün qeyd elektrodi VTA-da (2.8-3.4 mm lambdanın ön tərəfi; 0.6-1.0 mm yan tərəfdən; 6.5-8.5 mm beyin səthindən aşağı) stereotaksiya ilə müəyyən edilmiş bir blokdan keçirildi. altı dəfə. Hər təyin edilmiş DA neyronu, Xart məlumat əldə etmə sistemindən istifadə edərək on-line 2 - 5 dəqiqə qeyd edildi (AD Alətləri, Mountain View, CA). Hər bir heyvanın hər bir elektrod izinə rast gəlinən kortəbii aktiv DA neyronlarının ortalama sayı (hər bir hüceyrə) VTA DA neyron populyarlığının göstəricisi idi. DA neyronlarının orta atəş dərəcəsi hər qrupdakı bütün heyvanlardan nümunə götürülmüş bütün DA neyronlarından müəyyən edilmişdir.

140 nmol hcrt / orx qrupunda depolarizasiya inaktivasiyasını sınamaq üçün apomorfin HCl (20 μg / kg, ip; n = 4; Sigma) post-hcrt-1 / orx-A seçmə prosesi başa çatdıqdan dərhal sonra idarə edildi. Apomorfin inyeksiyasından on dəqiqə sonra, əvvəllər hcrt-1 / orx-A qəbul edən VTA tərəfində altı əlavə elektrod parçası seçildi.

Davranış, üç etiketli immunohistokimya və hüceyrə sayları.

Yetkin (∼300 g) kişi Long-Evans siçovullarına yuxarıda göstərildiyi kimi qəbuledici qadınla birlikdə dörd 1 h cinsi təcrübə sessiyası verildi. Əvvəl (1 h) anesteziya, perfuziya və immunolabelinq üçün toxuma hazırlamaq, heyvanlar (n = 6) tək bir boşalmaya köçürməyə icazə verildi. Yuxarıda göstərildiyi kimi, heyvanlar demək olar ki, dərhal quraşdırılmış və qarışmışdır və bu qrup üçün orta boşalma gecikməsi 588.50 ± 85.03 s (orta ± SEM) idi. Təcrübə qrupu, cinsi baxımdan təcrübəli qadınlara kopulyasiya üçün icazə verilməmişdir.n = 6). Yuxarıda olduğu kimi, test heyvanın adi gecə dövrünə 2 saat qırmızı közərmə işığı altında baş verdi. Heyvanlar öldürüldükdən, fiksasiya edildikdən və soyuq mikrotomun bölünməsindən sonra (yuxarıdakı kimi), hər heyvandan dörd rostrocaudal VTA səviyyəsini təmsil edən immunohistokimya üçün dörd hissə seçildi. Fənlərin sayı üçün (n) hər səviyyədə hüceyrələrin sayılması üçün istifadə olunur, bax Cədvəl 4. Bölmələr yuxarıdakı kimi DAB ilə Fos (1: 7500; Santa Cruz Biotexnologiyası) üçün etiketləndi. Bundan sonra bölmələr pre-hcrt / orx (1: 500) və tirozin hidroksilaza (TH; 1: 2000; Millipore) siyaninlə birləşən flüoresan ikincil antikorlarla (müvafiq olaraq 1: 200; Cy3 və Cy2; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Hüceyrə sayımları yüksək (40 ×) böyüdücü altında aparıldı Leica (Nussloch, Almaniya) DM 4000B mikroskopundan istifadə Stereo araşdırıcısı bir müalicə eksperti tərəfindən proqram təminatını (MBF Bioscience, Williston, VT) müalicə şəraitinə görə kor edir. Stereo araşdırıcısı proqram, VTA'nın hər səviyyəsində olan bütün DA hüceyrələri daxil edən bir sayma sahəsini təyin etmək üçün istifadə edilmişdir. VTA-nın dörd rostrocaudal səviyyəsinin hər birində bir fokus uzunluğunda, beş hüceyrə növü etiketləndi: TH-pozitiv neyronlar, Fos-ir göstərən TH-müsbət neyronlar, hcrt / birbaşa (somatik plazmalemma üzərinə) əlavələri göstərən TH-müsbət neyronlar. orx lifləri, həm Fos-ir, həm də hcrt / orx əlavələrini göstərən TH-müsbət neyronlar və nəhayət TH neyronlarında olmayan Fos-müsbət nüvələr.

Məlumatların təhlili.

Fos sınağında hüceyrələrin sayılması üçün qrup vasitələri və ilk belə eksperimentdən Qərb ləkələrinin optik sıxlığı ölçüləri müstəqil nümunələrlə müqayisə edildi t test. Uyğun-nümunələr t sınaq OX vasitəsi ilə aparıldı1 antaqonist davranış təcrübəsi. Kastrasyonda hüceyrələrin sayılması, üç etiketləmə təcrübəsi və orta atəş sürəti və hüceyrələrin hər izi ölçüləri ANOVA'ya məruz qaldı.

Nəticələr

Kopulyasiya hcrt / orx neyronlarında Fos immunoreaktivliyini artırır

Fos-ir göstərmiş hcrt / orx-ir hüceyrələrinin faizi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndi, heyvanların hcrt / orx hüceyrələrində artan Fos-ir nümayiş etdirməsi ilə (t(10) = 7.71; p <0.01) (Cədvəl 1, Əncir 1). İki etiketli hcrt / orx-ın orta nömrələri də qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndi (t(10) = 6.03; p <0.001). Diqqətəlayiq haldır ki, heyvanların surətini çıxararkən, medial və yanal sayma sahələri arasında Fos-pozitiv hcrt / orx nöron sayında heç bir fərq aşkar olunmamışdır (məlumatlar göstərilməyib) (Harris və Aston-Jones, 2006). Fos-ir nüvələrin ümumi ortalama sayı (Fos yalnız və cüt etiketli hcrt / orx neyronları) heyvanların daşınmasında qeyri-ekoloji idarəetmə ilə müqayisədə xeyli çox idi (t(10) = 16.97; p <0.001) (Cədvəl 1).

Cədvəl 1. 

Kişi siçovulların hcrt / orx neyronlarında kopulyasiya zamanı artan Fos-ir

Kastrasiya, hipotalamusda hcrt / orx immunoreaktivliyi və zülal azalır

Utancaq müalicə ilə müqayisə edildikdə, hcrt / orx-ir neyronlarının sayı kastrasiyadan sonra 28 d hüceyrə sayında ciddi azalma göstərdi (Əncir 2A) (F(3,16) = 7.60; p <0.005). Bu, müşahidə olunan populyasiyada hüceyrə sayında% 31.8 azalma deməkdir. Post hoc (Tukey) sınaqdan keçirilmiş siçovulların və ya 7 və ya 14 d kastratların sayı arasında ciddi fərqlər aşkar edilmədi. Hipotalamik prepro-hcrt / orxun sonrakı Qərb immunoblot analizi, xM-müalicə ilə müqayisədə 28 d kastratlardan hcrt / orx bantlarının orta optik sıxlığında əhəmiyyətli dərəcədə azalma aşkar etdi (Əncir 2B) (t(8) = 2.99; p <0.05.).

Şəkil 2. 

Kastrasiya kişi siçovul hipotalamusunda hcrt / orx-ir azalır. A, Bir yarımkürədəki hcrt / orx etiketli neyronların nümayəndə mikroqrafları kastrasyondan sonra 28 d tərəfindən hüceyrə sayında əhəmiyyətli dərəcədə azalma göstərir. İncə dəyərlər hər iki yarımkürə üçün orta hüceyrə sayımlarıdır ± SEM; **p <0.005. Tərəzi çubuğu, 200 μm; fx, fornix. B, Qərb immunoblotları, 28 d kastratların hipotalamik prepro-hcrt / orxlarında əhəmiyyətli dərəcədə azalma göstərir. Hər bir qrup hər iki qrupdakı bir heyvanın siqnalını təmsil edir. Dəyərlər cr-aktinə nisbətən hcrt / orx üçün orta ± SEM optik sıxlıq (od) vahidlərdir; *p <0.05. C, 28 d kastratlardakı prepro-hcrt / orx üçün immunoblotlar E göstərir2 neftlə işlənmiş idarəetmə ilə müqayisədə hipotalamik hcrt / orx tərkibini şamların tərkibinə bərabər tutmaq. Eyni kiçik hərf ilə qruplar əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmir (p <0.05).

Estradiol hipotalamik hcrt / orx protein səviyyəsini bərpa edir

Kastrasyondan və ya şam əməliyyatından sonra 28 d-də yağdan təmizlənmiş heyvanlarda pre-hcrt / orx səviyyəsi şam və estradiol səviyyəsindən xeyli aşağı idi (E2) düzəldilmiş qruplar (F(3,9) = 8.47; p <0.005) (Əncir 2C). Bir tərəfli ANOVA ilə post hoc (Tukey) testləri, sham və E-də ölçülən pre-hcrt / orx səviyyələrinin olduğunu müəyyən etdi2yetişdirilən heyvanların bir-birlərindən fərqlənmədiyi və E olduğunu söylədi2 qrup DHT ilə müalicə olunan heyvanlardan fərqlənmirdi.

ERα hcrt / orx ilə əlaqələndirilir və hcrt / orx neyronlarının anatomik olaraq fərqli bir populyasiyasında coexpressed

Nüvə AR, əsas hcrt / orx nöron populyasiyasından ventral yolla çıxarıldı və orta qövs nüvəsindən optik yola yayıldı. Heç bir halda eyni nöronda nüvə AR və hcrt / orx tapılmadı (məlumatlar göstərilmədi). ERα hipotalamusun ventral dərəcəsində oxşar bir paylanma nümunəsi göstərsə də, ERα etiketlənməsi ventromedial nüvədə daha geniş idi. Daha çox dorsal olaraq, ERα etiketi, zona incerta altındakı daxili kapsuldan dorsomedial hipotalamusa (DMH) medial olaraq uzanan hüceyrələrin konus bantlarında tapıldı. ERα üçün etiket nadir hallarda hcrt / orx neyronlarında tapıldı (tədqiq olunan əhalinin <1% -i). ERα-nın hcrt / orx ilə kokalizasiya etdiyi görüldükdə, tipik olaraq DMH içindəki nöronlarda və ya sadəcə rostral idi (Əncir 3). Beləliklə, hipotalamusdakı çox az hcrt / orx nöronu ERα ifadə etsə də, DMH-də və ya yaxınlığında olanların yüksək nisbəti (∼65%)Əncir 3).

Şəkil 3. 

ERα hcrt / orx ilə əlaqələndiricidir. ERα nüvələri qapalı dairələr, hcrt / orx neyronları açıq dairələr, ikiqat etiketli ERα plus hcrt / orx hüceyrələri ulduzlarla təmsil olunur. Bregma üçün nömrələr millimetrlik caudaldadır. AHN, ön hipotalamik nüvə; fx, fornix; ot, optik trakt; PVN, paraventrikulyar nüvə; VMH, ventromedial hipotalamus; 3v, üçüncü ventrikül.

Hcrt / orx reseptor blokadası təsirini pozur

Vasitə ilə müqayisədə OX ilə əvvəlcədən müalicə1 antagonist SB 334867 qarışıqlıq üçün ortalama gecikmələri artırdı və orta boşalma tezliyini azaldıb (Cədvəl 2). Cütlənmiş nümunələr t Testlər SB 334867-ın intromission laqeydliyinə əhəmiyyətli təsirini aşkar etdi (t(8) = 3.31; p <0.05) və boşalma tezliyi (t(8) = 2.40; p <0.05). Dərman müalicəsi, eyni zamanda boşalma və boşalma üçün ortalama gecikmələrdə əhəmiyyətsiz bir artım meydana gətirdi və orta müdaxilə sayında azaldı (Cədvəl 2).

Cədvəl 2. 

OX1 antagonist SB 334867 kişi copulatory davranışını pozur

Hcrt-1 / orx-A, VTA DA neyronunun atəş sürətini və populyasiya aktivliyini artırır və depolarizasiyanı aktivləşdirir

Hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol) ən aşağı dozası, vasitə ilə idarə olunan idarəetmə ilə müqayisədə orta VTA DA neyron atəş dərəcəsini artırdı (Əncir 4B,C) (cüt istiqamətdə müqayisə; F(1,18) = 13.83, p <0.01; qarışıq 2 × 3 ANOVA-dan sonra, F(1,10) = 13.67, p <0.005), lakin başqa heç bir hcrt-1 / orx-A dozası bu təsiri göstərmədi. Bu doza hcrt / orx-in 2 × 3 ANOVA-da aşkar olunan atəş hızı üzərində əhəmiyyətli bir əsas təsirindən məsul görünür. A post hoc (Tukey) sınağı aCSF ilə müalicə olunan qruplar arasında dozada nisbətdə ciddi bir fərq olmadığını göstərdi. Hcrt-1.4 / orx-A'nın 1 nmol dozası VTA DA neyron populyasiyasının fəaliyyətini əhəmiyyətli dərəcədə artırdı (hər elektrod izində təsbit edilən spontan aktiv neyronların sayı (Əncir 4D) (cüt-cüt müqayisə, F(1,24) = 6.42, p <0.05; 2 × 3 qarışıq ANOVA-da əhəmiyyətli bir qarşılıqlı əlaqədən sonra, F(2,10) = 16.71, p <.001). Test edilmiş ən yüksək hcrt-1 / orx-A dozası (140 nmol) DA neyronlarının populyasiya aktivliyini əhəmiyyətli dərəcədə azaltdı (yol başına hüceyrələr) (Əncir 4D) (140 nmol dozada ANOVA'nın birtərəfli təkrarlanması, F(2,6) = 12.20; p <0.01). Bu azalma sistemik apomorfin inyeksiyası ilə bərpa edildi (Tukey's) post hoc test).

Şəkil 4. 

Hcrt / orx VTA DA nöronal fəaliyyətini tənzimləyir vivo ilə. AXarakterik geniş fəaliyyət potensialı və IS / SD fasiləsini göstərən tipik bir VTA DA neyronun dalğası. BTipik, bursting fəaliyyətini göstərən eyni nəqliyyat vasitəsi ilə işləyən neyronun atəş dərəcəsi və sxemi; alt, 0.014 nmol hcrt 1 / orx A lokal infuziyasından sonra müşahidə olunan sürətli atəş edən neyronn = 4). C, D, VTA DA neyronlarının atəş sürətinə və populyasiya aktivliyinə yerli infuziya edilmiş hcrt-1 / orx-A nisbətinin dozası. Hcrt-1 / orx-A (1.4 nmol; n = 5) əhalinin aktivliyini artırır. 140 nmol hcrt 1 / orx A-dan sonra azalmış populyarlıq (n = 4) sistemik apomorfin (20 μg / kq) tərəfindən tərs edildi. Hər bir çubuğun içərisindəki nömrə, qeyd olunan nöronların sayını göstərir. Göstərilənlər SEM deməkdir. *p <0.05; **p <0.01.

Hcrt / orx əlavələri olan TH-müsbət VTA neyronları, püskürmədən sonra Fos-irdə artım göstərir

TH pozitiv neyronlardakı Fos-ir nüvələrinin orta sayında ikitərəfli ANOVA müalicənin təsirini göstərdi (F(1,38) = 38.88; p <0.001) və anatomik səviyyə (F(7,38) = 12.59; p <0.001) və bu iki amil arasında əhəmiyyətli bir qarşılıqlı təsir (F(7,38) = 7.45; p <0.001), kopulyasiya zamanı əmələ gələn Fosun ön sayma səviyyələrində üstünlük təşkil etdiyini göstərir. Bunu sonrakı birtərəfli ANOVA və post hoc Fos-müsbət nüvələrin sayının daha çox olacağını göstərən iki anteriormost səviyyəni ("rostral" və "orta 1") aşkar edən (Tukey) testlər (F(3,24) = 9.48; p <0.001). Eyni, bazal Fos-ir səviyyəsinə görə fərqlənmədiyi qeyri-yaşayış nəzarətləri üçün də doğru deyildi (Cədvəl 3). Hcrt / orx tətbiqləri olan TH etiketli neyronların faizi eksperimental müalicə ilə fərqlənmədi; lakin, bu tədbir ən rostral səviyyənin hər iki qrupdakı bu neyronların xeyli yüksək nisbətinə malik olduğu nəzərə çarpan bir rostrocaudal gradient göstərdi (Cədvəl 4) (F(3,38) = 133.57; p <0.001). Bu tapıntı, ön VTA-da müşahidə etdiyimiz hcrt / orx liflərinin daha yüksək sıxlığı ilə uyğundur. Fos-ir göstərən (lakin hcrt / orx tətbiqləri olmayan) TH etiketli nöronların nisbəti nə müalicə, nə də rostrokada səviyyəsinə görə fərqlənmir. Həm Fos, həm də hcrt / orx tətbiqlərini göstərən TH nöronlarının nisbəti müalicənin əhəmiyyətli bir təsiri göstərdi (F(1,38) = 8.62; p <0.01), səviyyə (F(3,38) = 4.53; p <0.01) və onların qarşılıqlı əlaqəsi (F(3,38) = 4.53; p <0.01). Təcrübə qrupundan alınan bir tərəfli ANOVA, hcrt / orx tətbiqləri olan TH nöronlarında kopulyasiyanın yaratdığı Fos-irin rostral VTA-da yerləşən hüceyrələrdə daha çox meydana gəldiyini göstərir (F(3,24) = 4.85; p <0.05).

Cədvəl 3. 

Dörd rostrocaudal səviyyədəki VTA-nın müsbət olmayan hüceyrələrindəki Fos-ir nüvələrin sayı

Cədvəl 4. 

Hcrt / orx tətbiqləri, Fos və ya hər ikisini göstərən TH neyronlarının faizi

Müzakirə

LHA-da hcrt / orx neyronlarında artan Fos-ir bu hüceyrələrin aktivləşməsinin kişi reproduktiv davranışının müşayiət olunduğunu göstərir (Morgan və Curran, 1991). Bu məlumatlar əvvəlcədən xNUMX-deoksiglukoza tədqiqatlarına, estrogen qadın qoxularına məruz qaldıqdan sonra LHA-da metabolik aktivliyin artdığını bildirmişdir (Orsini və digərləri, 1985). Bu təsir hcrt / orx kişi copulatory davranışını asanlaşdırmaq üçün göstərildiyi mPOA kimi hcrt / orx neyron terminal bölgələrində inkişaf etmiş hcrt / orx ötürülməsini əks etdirə bilər (Gulia et al., 2003). Hcrt / orx nöronlarında cinsi əlaqəli Fos induksiyası hcrt / orx nöronlarının təbii möhkəmləndiricilərə həssas olduğu anlayışı ilə uyğundur. Son bir araşdırma, Fos-irin siçovulların hcrt / orx nöronlarında bir qida mükafatı gözləməsi üçün şərt artdığını və Fos-irdəki bu artımın şərtli yer seçim paradiqmasında heyvanların seçim puanı ilə əlaqəli olduğunu göstərdi (Harris və digərləri, 2005). Hcrt / orx neyronlarının aktivləşdirilməsi mükafatlandırma ilə əlaqəli bir fenomen ola bilər, çünki yuxarıdakı tədqiqat yeni bir obyekt stimuluna məruz qalan heyvanlarda Fos-ir hcrt / orx hüceyrələrində möhkəm artım olmamasını göstərdi. Bu müəlliflər, hcrt / orx neyronlarının bazal (15%), yenilikçi (18%) və qida şərtli (50%) Fos-ir ifadələrini burada bildirdiyimizə uyğundur (12% bazal vs 40) % kopulyasiya ilə əlaqəli). Bu müşahidələr hcrt / orx neyronlarının qida və cinsiyyət kimi təbii mükafatlar tərəfindən aktivləşdirildiyini göstərir.

Burada təsvir olunan hcrt / orxın estrogenik tənzimlənməsi, kişi cinsi davranışının mümkün hipokretinerjik nəzarəti üçün əlavə bir dəlil təmin edir. Burada bildirilən hcrt / orx itkisinin vaxt kursunun kişi cinsi davranışının kastrasyondan sonra azalması üçün həftələr çəkdiyini və bundan əlavə E olduğunu göstərdiyini göstərən klassik davranış məlumatlarına uyğundur.2 davranışı bərpa etmək üçün tələb olunan DHT deyil,Hull et al., 2006). Daha bir təcrübə etmədən, yalnız E olmaması halında hcrt / orx mövcudluğunu əsaslandıran mexanizmlər haqqında fərziyyə edə bilərik.2. Ən sadə izahat ola bilər ki, hcrt / orx səviyyəsinin azalması ilə ötürücünün vezikulyar mağazalarında asanlıqla ölçülən tükənmə gecikməsini əks etdirir. Aşağıda müzakirə edildiyi kimi, hcrt / orx neyronlarında ER-ların olmaması hcrt / orx ifadəsinin həmin reseptorları olan neyronların girişləri ilə tənzimlənməsini təklif edir. Çünki nöropeptid sintezi (Enyeart et al., 1987), hərəkətlilik (Shakiryanova et al., 2005) və buraxma fəaliyyətdən asılı hadisələrdir (Fulop et al., 2005), istənilən postkastrasiya hcrt / orx neyron həyəcan keçiriciliyində azalır (Smith və digərləri, 2002) bu proseslərə mənfi təsir göstərə bilər, peptidin sərbəst buraxılma kinetikasını yavaşlatır ki, azaldılmış sintez səviyyəsi bir müddət görünməsin. Hər hansı bir mexanizmlə, ehtimal ki, steroidin hərəkətinin peptidin bazal səviyyəsini qorumaq üçün məsuliyyət daşıyan kompleks bir kaskadın ilk elementidir.

Məhz hcrt / orx neyronları enerji balansı ilə əlaqəli yumoristik amillərə cavab olaraq qida qəbulunu tənzimləyir (Olszewski və digərləri, 2003; Burdakov et al., 2006), hcrt / orx neyronları da hormonal mühitə həssas görünür və buna bənzər şəkildə reproduktiv davranışı asanlaşdıra bilər. Burada təqdim olunan məlumatlar bazal hcrt / orx ifadəsinin E tərəfindən saxlanıldığını göstərir2. Tamamilə hcrt / orx ifadəsini ifadə edən nadir hallarda təsirsiz olan heyvanlarda bu ötürücü, kişinin cinsi davranışı və mükafatı üçün vacib olan quruluşlarda işlənməsini asanlaşdırar. Hcrt / orx neyronları mPOA, stria terminalisin yataq nüvəsi (BNST) və VTA (kimi) ilə əhəmiyyətli qarşılıqlı əlaqə bağlantılarına malikdirlər.Peyron et al., 1998; Sakurai və digərləri, 2005), kişi cinsi davranışının ifadəsi üçün əhəmiyyətli olduğu bilinir (nəzərdən keçirin, baxın) Hull et al., 2006). Kastrasyondan sonra hcrt / orx səviyyəsində azalmaların bu quruluşlara həyəcan verici giriş mənbəyinin azalacağını və bununla davranışın pozulacağını gözləmək olar.

ER aktivləşdirməsinin bazal hcrt / orx ifadəsini davam etdirməsi əlavə araşdırma gözləyir; lakin, ehtimal ki, LHA-ya proyekt edən ERα ifadə edən beyin bölgələrindən afferents tərəfindən idarə olunur (Simerly et al., 1990; Yoshida et al., 2006), xüsusən də bəzi həyəcan verici proqnozlara sahib olan quruluşlar (məsələn, BNST və mPOA (Georges və Aston-Jones, 2002; Henny və Jones, 2006)]. AR-nin hcrt / orx ilə kolokalizasiyası barədə məlumat vermirik və bir neçə hcrt / orx neyronunun ERα-immunopozitiv olmasına baxmayaraq, bu hüceyrələr kastrasiyanın qeyd olunan təsirlərini izah etmək üçün kifayət qədər sayda deyildilər və azaldıqlarını görənlərin qeydində deyildilər. kastrasiya sonrası hcrt / orx məzmunu (İncir. 2A, 3). Həmçinin bildiririk ki, ERα-ir nüvələri və hcrt / orx neyronları qonşu ERα tərkibli hüceyrələr tərəfindən hcrt / orx neyron və gen ifadə fəaliyyətinin yerli tənzimlənməsi imkanını artıraraq tez-tez sıxılır. Bu tip həyəcanverici lokal dövrə fəaliyyətinin əhəmiyyəti hcrt / orx sistemində izah edilmişdir (Li və digərləri, 2002). Lazımi anatomik təcrübələrdə ERα tərkibli hüceyrələrin hcrt / orx neyronlarına atdığı həyəcan verici sinapsları göstərilməyincə, hcrt / orx-in hormondan asılı, afferent idarəedici ifadəsi qəbul edilə bilməz. Hcrt ifadə diuretik olaraq dəyişir (Taheri et al., 2000), hamiləlik dövründə (Kanenishi et al., 2004) və müxtəlif pəhriz manipulyasiyalarına cavab olaraq (Cai et al., 1999; Griffond et al., 1999). Dinamikasını tənzimləyən molekulyar mexanizmlər hcrt ifadə səciyyələndirilməmişdir, beləliklə nüvədən membrana gedən yolu izləyir və hcrt / orx ifadəsinə təsir edə biləcək namizəd siqnal molekullarına ad vermək bu zaman çətindir.

Hcrt / orx siqnalının cinsiyyət kimi davranışları gücləndirməkdə iştirak etməsi anlayışı, OX ilə müalicədən sonra cinsi davranışdakı dəyişiklikləri göstərən məlumatlarla da dəstəklənir.1 antagonist SB 334867 (Cədvəl 2). Kokainin özünü idarə etməsinin stresdən qaynaqlanan yenidən qurulmasının qarşısını almaq üçün istifadə olunanlara oxşar bir dozada (Boutrel və digərləri, 2005), SB 334867, hcrt / orx ötürülməsinin blokadasının estrogen qadınların stimullaşdırıcı xüsusiyyətlərinə təsir göstərə biləcəyini ifadə edərək, intromission gecikməsini və boşalma sayını azaldıb.

DA mükafat, həvəsləndirici motivasiya və uyğunlaşma davranışı üçün vacib bir nörotransmitterdir (Berridge və Robinson, 1998; Ikemoto və Panksepp, 1999; Müdrik, 2004). VTA DA neyron fəaliyyətinə hcrt / orxun güclü dozadan asılı bir həyəcanverici təsirini müşahidə etdik. Bu tapıntı hcrt / orx möhkəmlənmədə rolunu dəstəkləyir və mesolimbic DA sisteminin hcrt / orx proqnozlarının kişi cinsi davranışını artırmaq üçün hərəkət edə biləcəyi mPOA xaricindəki bir yer olduğunu göstərir. Test edilmiş ən aşağı dozada (0.014 nmol), hcrt / orx populyasiya fəaliyyətinə (hüceyrələr / iz) təsir etmədən atəş sürətini artırdı (Əncir 4C). Aralıq dozada (1.4 nmol), DA neyronlarının populyar aktivliyi artmışdır ki, bu da əvvəllər səssiz, hiperpolyar neyronların aktivləşdiyini göstərir (Əncir 4D). Ən yüksək dozada (140 nmol) VTA DA neyronlarının populyar aktivliyi azaldı. Maraqlıdır ki, VTA DA neyron populyasiyasında hcrt / orx səbəbli azalma DA agonist apomorfinin kəskin administrasiyası tərəfindən tərs edilmişdir (Əncir 4D). Normal heyvanlarda apomorfin, autoreceptorları aktivləşdirərək DA neyronlarını hiperolyarlaşdırır və onların atəş sürətini və populyasiya aktivliyini azaldır. Bununla birlikdə, xroniki antipsikotik müalicə və ya sui-istifadə dərmanları ilə təkrar müalicə edildikdən sonra, apomorfin əhali fəaliyyətində dərmanla əlaqəli azalmanı geri ala bilər (Grace və digərləri, 1997; Shen və Choong, 2006). Apomorfinin atəşə davam etməsi üçün kifayət qədər həddindən artıq hüceyrələri təkrar dolduraraq depolarizasiya inaktivasiyasını bərpa edəcəyi düşünülür. Birlikdə, bu məlumatlar hcrt / orx-in VTA DA neyronlarına bir doza asılı bir həyəcanverici təsir göstərdiyini və əvvəlki ilə uyğun olduğunu göstərir. vitro işləmək (Korotkova et al., 2003).

LHA-dan VTA-ya enən yolların əhəmiyyəti bir sıra təcrübələrdə araşdırılmışdır (Bielajew və Shizgal, 1986; Shizgal, 1989; Siz et al., 2001). Bu məlumatlar, hipotalamik olaraq vasitəçilik edilmiş motivasiya edilmiş davranış zamanı NAc DA-nın artımını artırmağı təklif edir (Pfaus və digərləri, 1990; Wenkstern et al., 1993) və ya qidalanma (Hernandez və Hoebel, 1988; Rada və digərləri, 2005) bu enən proqnozlara etibar edə bilər. Bu cür proqnozların hcrt / orx ehtiva etməsi, hcrt / orx intra-VTA enjeksiyonundan sonra NAc DA effluxunun artdığı görülən təcrübələrlə dəstəklənir (Narita və ark., 2006). Hipotalamusun içərisində serotonin [5-hidroksitriptamin (5-HT)] LHA-da hcrt / orx neyronlarını güclü hiperpolyar edə bilər (Li və digərləri, 2002). Seçici serotonin inhibitorlarını və ya 5-HT-ni özündə saxlayır, hcrt / orx ifadə edən hüceyrələrin əsas populyasiyasının yaxınlığında LHA-ya ters çevrilir, bazal və qadın köklü NAc DA sərbəst buraxılmasını azaldır və püskürtmeyi pisləşdirirLorrain və digərləri, 1997, 1999). Yuxarıda hcrt / orx neyronlarının kopulyasiya zamanı və VTA DA neyronlarının hcrt / orx tərəfindən aktivləşdirilməsini göstərən məlumatlara əsasən hcrt / orx proqnozlarının VTA-ya enməsi cinslə əlaqəli NAc DA sərbəst buraxılmasına vasitəçi ola biləcəyini iddia edirik. Bundan əlavə, bu proqnozların daxili LHA 5-HT tərəfindən inhibe edilməsi, 5-HT-nin NAc DA sərbəst buraxılmasına və cinsi davranışa inhibe təsirini izah edə bilər.

Hcrt / orx-DA qarşılıqlı təsirləri üçün bir anatomik bir substrat, TH-müsbət VTA neyronlarının hcrt / orx sistemi tərəfindən innervasiya olunduğunu və kopulyasiya kimi mükafatlandırıcı stimullara məruz qalan Fos-irin artdığını göstərir.Əncir 5, Cədvəl 4). Bu təsir həm davranış əlaqəliliyini, həm də məkan spesifikliyini göstərdi, çünki hcrt / orx təyin olunmuş TH neyronlarında Fos induksiyası yalnız heyvanların köçürülməsinin ön VTA-da aşkar edilmişdir. Bu aktivləşdirmə nümunəsinin VTA-nın bu hissəsində görünməsi bəlkə də misilsizdir, çünki DA hüceyrələri beyin sistemindəki daha distal hədəflərə vermədən əvvəl bu bölgəni keçən hcrt / orx neyronlarının əsas populyasiyasına ehtiyatla yalan (Peyron et al., 1998).

Şəkil 5. 

Kopulyasiya, hcrt / orx təyin olunmuş VTA DA neyronlarında Fos-ir inhibə edir. A, VTA-da TH, hcrt / orx və Fos etiketlərini göstərən mikrograflar. Oklar hcrt / orx tətbiqləri ilə Fos-müsbət TH neyronlarını ifadə edir; ulduz işarələri olmadan ikiqat etiketli neyronları qeyd edir. Ölçək çubuğu, 45 μm. B, Tətbiqdə hcrt / orx boutonlarının yerlərini göstərən oxlarla Fos-müsbət TH neyronlarının təfərrüatları. C, Hesablamada istifadə olunan VTA-nın rostrocaudal səviyyələrini göstərən tünd bölmələr (qaranlıq kölgəli). Hər hissənin yuxarı sol hissəsindəki nömrələr bregmadan millimetrdir. Yuxarı sağdakı nömrələr, o səviyyədəki hüceyrə sıxlığının orta SEM qiymətləndirmələridir. Qutuda içindəki mikrografların sahəsi göstərilir A.

Bu məlumatlar, gonadal steroidlərin motivasiyalı davranışda tətbiq olunan DA sistemlərinə hipotalamik girişə təsir göstərə biləcəyi yeni bir yol təklif edir (Əncir 6). Ayrıca, hcrt / orx tərəfindən tənzimlənən davranışların artan siyahısına cinsi davranışlar, o cümlədən oyanış, həzm etmə davranışı və narkotik axtaranlar da əlavə olunur.

Şəkil 6. 

Hcrt / orx-in gonadal steroid və VTA DA tərəfindən hcrt / orx tərəfindən tənzimlənməsi üçün model. Gonadal testosterondan aromataz tərəfindən sintez olunan Estradiol, BNST, mPOA və LHA-da ERα tərkibli neyronlara təsir göstərir. Bu quruluşlar hipotalamik hcrt / orx neyronlarına istiqamətlənir. Bu quruluşların həyəcan verici proqnozları steroid həssas bir şəkildə hcrt / orx neyron və gen ifadə fəaliyyətinə təsir göstərə bilər. VTA üçün Hcrt / orx proqnozları, kişi cinsi davranışı zamanı orta beyin DA neyronal fəaliyyətini artırır. Bu təsir, hcrt / orx fəaliyyətini maneə törədən, cinsi davranışı və NAc DA sərbəst buraxılmasını maneə törədən 5-HT intra-LHA infuziyaları ilə bloklana bilər.

Dəyişikliklər

  • Aprel 21, 2006.
  • Yeniləmə yanvar 23, 2007 qəbul etdi.
  • Qəbul edilmiş fevral 8, 2007.

  • Bu iş Amerika Birləşmiş Ştatları İctimai Səhiyyə Xidmətləri MH073314 (JWM), MH40826 və MH01714 (EMH) və AA12435 (R.-YS) tərəfindən dəstəklənmişdir. Doktor Samir Haj-Dahmane'ya faydalı məsləhətlərinə və doktor Zuoxin Wang'a mikroskopiya avadanlığı təqdim etdikləri üçün təşəkkür edirik.

  • Yazışmalar John Muschamp, Florida Dövlət Universitetinin Psixologiya Bölməsi, Tallahassee, FL 32306-1270-a ünvanlanmalıdır. [e-poçt qorunur]

References

  1. â † μ
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Dopaminin mükafatdakı rolu nədir: hedonik təsir, mükafat öyrənilməsi və ya təşviq zəifliyi? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  2. â † μ
    1. Bielajew C,
    2. Şizgal P

    (1986) Medial ön beyin qabığının özünü stimullaşdırmasında azalan lifləri təsir edən dəlil. J Neurosci 6: 919-929.

  3. â † μ
    1. Borgland SL,
    2. Taha SA,
    3. Sarti F,
    4. Sahələr HL,
    5. Bonci A

    (2006) VTA-da olan Orexin A sinaptik plastisiyanın induksiyası və kokainə qarşı davranış həssaslığı üçün vacibdir. Neyron 49: 589-601.

  4. â † μ
    1. Boutrel B,
    2. Kenny PJ,
    3. Specio SE,
    4. Martin-Fardon R,
    5. Markou A,
    6. Koob GF,
    7. de Lecea L

    (2005) Kokain axtaran davranışın stresdən qaynaqlanan bərpasının vasitəçiliyində hipokretinin rolu. Proc Natl Acad Sci ABŞ 102: 19168-19173.

  5. â † μ
    1. Burdakov D,
    2. Jensen LT,
    3. Alexopoulos H,
    4. Williams RH,
    5. Fearon IM,
    6. O'Kelly I,
    7. Gerasimenko O,
    8. Fugger L,
    9. Verkhratsky A

    (2006) Tandem gözenekli K + kanalları, qlükoza ilə oreksin neyronlarının inhibe edilməsini vasitəçilik edir. Neyron 50: 711-722.

  6. â † μ
    1. Caggiula AR,
    2. Hoebel BG

    (1966) Posterior hipotalamusdakı "Kopulyasiya-mükafat saytı". Elm 153: 1284-1285.

  7. â † μ
    1. Cai XJ,
    2. Widdowson PS,
    3. Harrold J,
    4. Wilson S,
    5. Buckingham RE,
    6. Arch JR,
    7. Tadayyon M,
    8. Clapham JC,
    9. Wilding J,
    10. Williams G

    (1999) Hipotalamik orexinin ifadəsi: qan qlükoza və qidalanma ilə modulyasiya. Diabet 48: 2132-2137.

  8. â † μ
    1. Klivlend DW,
    2. Fischer SG,
    3. Kirschner MW,
    4. Laemmli UK

    (1977) Natrium dodecil sulfatdakı məhdud proteoliz və gel elektroforez ilə analiz yolu ilə peptid xəritələşdirilməsi. J Biol Chem 252: 1102-1106.

  9. â † μ
    1. de Lecea L,
    2. Kilduff TS,
    3. Peyron C,
    4. Gao X,
    5. Foye PE,
    6. Danielson PE,
    7. Fukuhara C,
    8. Battenberg EL,
    9. Gautvik VT,
    10. Bartlett FS II.,
    11. Frankel WN,
    12. van den Pol AN,
    13. Bloom FE,
    14. Gautvik KM,
    15. Sutcliffe JG

    (1998) Hipokretinlər: nöroeksitator fəaliyyəti olan hipotalamusa məxsus peptidlər. Proc Natl Acad Sci ABŞ 95: 322-327.

  10. â † μ
    1. DiLeone RJ,
    2. Georgescu D,
    3. Nestler EJ

    (2003) Mükafat və narkomaniyada yan hipotalamik nöropeptidlər. Life Sci 73: 759-768.

  11. â † μ
    1. Enyeart JJ,
    2. Sheu SS,
    3. Hinkle PM

    (1987) Gərginliyə həssas Ca2 + kanallarının Dihidropiridin modulyatorları GH4C1 hipofiz şiş hüceyrələri tərəfindən prolaktin istehsalını xüsusi olaraq tənzimləyir. J Biol Chem 262: 3154-3159.

  12. â † μ
    1. Espana RA,
    2. Valentino RJ,
    3. Berridge CW

    (2003) Hipokretin sintez edən və hipokretin-1 reseptorlarını ifadə edən neyronlarda Fos immunoreaktivliyi: gündüz və nocturnal kortəbii oyanma, stress və hipokretin-1 administrasiyasının təsiri. Nevrologiyada 121: 201-217.

  13. â † μ
    1. Fadel J,
    2. Deutch AY

    (2002) Orexin-dopamin qarşılıqlı təsirinin anatomik substratları: ventral tegramal bölgəyə yanal hipotalamik proqnozlar. Nevrologiyada 111: 379-387.

  14. â † μ
    1. Fulop T,
    2. Radabaugh S,
    3. Smith C

    (2005) Siçan adrenal xromaffin hüceyrələrində fəaliyyətə bağlı diferensial ötürücü buraxır. J Neurosci 25: 7324-7332.

  15. â † μ
    1. Fulton S,
    2. Woodside B,
    3. Şizgal P

    (2000) Leptin ilə beyin mükafat dövriyyəsinin modulyasiyası. Elm 287: 125-128.

  16. â † μ
    1. Georges F,
    2. Aston-Jones G

    (2002) Stria terminalisin yataq nüvəsi ilə ventral tegramal bölgə hüceyrələrinin aktivləşdirilməsi: orta beyin dopamin neyronlarına yeni bir həyəcan verən amin turşusu girişi. J Neurosci 22: 5173-5187.

  17. â † μ
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS

    (1983) Nigral dopaminergik neyronların hüceyrə və hüceyrəli olmayan elektrofizyolojisi. 1. Tanınma və xarakterizə. Nevrologiyada 10: 301-315.

  18. â † μ
    1. Grace AA,
    2. Bunney BS,
    3. Moore H,
    4. Şirkət Adı Todd CL

    (1997) Dopamin-hüceyrə depolarizasiya bloku antipsikotik dərmanların terapevtik hərəkətləri üçün bir model kimi. Trends Neurosci 20: 31-37.

  19. â † μ
    1. Griffond B,
    2. Risold PY,
    3. Jacquemard C,
    4. Colard C,
    5. Fellmann D

    (1999) İnsulinlə əlaqəli hipoqlikemiya, siçovul yanal hipotalamik bölgədə preprohypocretin (orexin) mRNA-nı artırır. Neurosci Lett 262: 77-80.

  20. â † μ
    1. Gulia KK,
    2. Mallick HN,
    3. Kumar VM

    (2003) Orexin A (hipokretin-1) tətbiqi, medial preoptic bölgədə siçovullarda kişi cinsi davranışını gücləndirir. Nevrologiyada 116: 921-923.

  21. â † μ
    1. Harris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2006) Ausus və mükafat: oreksin funksiyasındakı bir dixotomiya. Trends Neurosci 29: 571-577.

  22. â † μ
    1. Harris GC,
    2. Wimmer M,
    3. Aston-Jones G

    (2005) Mükəmməl olmaqda yanal hipotalamik oreksin neyronları üçün bir rol. təbiət 437: 556-559.

  23. â † μ
    1. Henny P,
    2. Jones BE

    (2006) Oreksin / hipokretin neyronlarının GABAergic, glutamatergic və ya xolinergic bazal beyin terminalları tərəfindən qorunması presinaptik vezikulyar daşıyıcı və postsinaptik iskala zülalları üçün immunostaining ilə sübut edilmişdir. J Comp Neurol 499: 645-661.

  24. â † μ
    1. Hernandez L,
    2. Hoebel BG

    (1988) Qida mükafatı və kokain mikrodializ ilə ölçüldüyü kimi nüvədəki hüceyrələrarası hüceyrəli dopamin artırır. Life Sci 42: 1705-1712.

  25. â † μ
    1. Hoebel BG

    (1969) Qidalanma və özünü stimullaşdırmaq. Ann NY Acad Sci 157: 758-778.

  26. â † μ
    1. Hull EM,
    2. Wood RI,
    3. McKenna KE

    (2006) Knobil və Neillin çoxalma fiziologiyası, Kişi cinsi davranışının nevrologiyası, Ed Neill JD (Elsevier, New York), Ed 3, s. 1729-1824.

  27. â † μ
    1. İkemoto S,
    2. Pansepp J

    (1999) Nüvənin əsaslandırılmış davranışda dopamin artırması: mükafat axtaranlara xüsusi istinadla birləşdirən bir şərh. Brain Res Brain Res Rev 31: 6-41.

  28. â † μ
    1. Kanenishi K,
    2. Ueno M,
    3. Şirkət Adı Momose S,
    4. Kuwabara H,
    5. Tanaka H,
    6. Sato C,
    7. Kobayashi T,
    8. Hino O,
    9. Sakamoto H,
    10. Hata T

    (2004) Hamiləlik dövründə siçovul beyində pre-oreksin mRNA ifadəsi artır. Neurosci Lett 368: 73-77.

  29. â † μ
    1. Korotkova TM,
    2. Sergeeva OA,
    3. Eriksson KS,
    4. Haas HL,
    5. Qəhvəyi RE

    (2003) ventral tegramal bölgənin dopaminergik və nondopaminergik neyronlarının oreksinlər / hipokretinlər tərəfindən həyəcanlanması. J Neurosci 23: 7-11.

  30. â † μ
    1. Kotz CM

    (2006) Bəslənmə və kortəbii fiziki fəaliyyətin inteqrasiyası: oreksin üçün rol. Fiziol Behav 88: 294-301.

  31. â † μ
    1. Li Y,
    2. Gao XB,
    3. Sakurai T,
    4. van den Pol AN

    (2002) Hipokretin / oreksin hipokretin neyronlarını yerli bir glutamat neyronu-Hipotalamik arousal sisteminin qurulması üçün potensial bir mexanizm vasitəsi ilə həyəcanlandırır. Neyron 36: 1169-1181.

  32. â † μ
    1. Lorrain DS,
    2. Matuszewich L,
    3. Friedman RD,
    4. Hull EM

    (1997) Yanal hipotalamik bölgədəki hüceyrədaxili serotonin postejakulyasiya aralığında artır və kişi siçovullarda kopulyasiyaya mane olur. J Neurosci 17: 9361-9366.

  33. â † μ
    1. Lorrain DS,
    2. Riolo JV,
    3. Matuszewich L,
    4. Hull EM

    (1999) Yanal hipotalamik serotonin nüvə accumbens dopamin inhibə edir: cinsi doyma üçün təsirlər. J Neurosci 19: 7648-7652.

  34. â † μ
    1. Mileykovskiy BY,
    2. Kiyashchenko LI,
    3. Siegel JM

    (2005) Müəyyən edilmiş hipokretin / orexin neyronlarında fəaliyyətin davranış əlaqələri. Neyron 46: 787-798.

  35. â † μ
    1. Mochizuki T,
    2. Crocker A,
    3. McCormack S,
    4. Yanagisawa M,
    5. Sakurai T,
    6. Scammell TE

    (2004) Orexin sökülən siçanlarda davranış vəziyyətinin qeyri-sabitliyi. J Neurosci 24: 6291-6300.

  36. â † μ
    1. Morgan JI,
    2. Curran T

    (1991) Sinir sistemindəki stimul-transkripsiya əlaqəsi: induksiya olunan proto-onkogenlərin fos və iyuna cəlb edilməsi. Annu Rev Neurosci 14: 421-451.

  37. â † μ
    1. Nakamura T,
    2. Uramura K,
    3. Nambu T,
    4. Yada T,
    5. Goto K,
    6. Yanagisawa M,
    7. Sakurai T

    (2000) Oreksinlə əlaqəli hiperlokomoziya və stereotipiya dopaminergik sistem vasitəsiylə vasitəçilik olunur. Brain Res 873: 181-187.

  38. â † μ
    1. Nambu T,
    2. Sakurai T,
    3. Mizukami K,
    4. Hosoya Y,
    5. Yanagisawa M,
    6. Goto K

    (1999) Yetkin siçovul beynində orexin neyronlarının paylanması. Brain Res 827: 243-260.

  39. â † μ
    1. Narita M,
    2. Nagumo Y,
    3. Hashimoto S,
    4. Xotib J,
    5. Miyatake M,
    6. Sakurai T,
    7. Yanagisawa M,
    8. Nakamachi T,
    9. Shioda S,
    10. Suzuki T

    (2006) Orexinergik sistemlərin mezolimbik dopamin yolunun aktivləşməsində və morfinin təsir etdiyi əlaqəli davranışlarda. J Neurosci 26: 398-405.

  40. â † μ
    1. Olszewski PK,
    2. Li D,
    3. Grace MK,
    4. Billington CJ,
    5. Kotz CM,
    6. Levine AS

    (2003) Yanal hipotalamusun daxilində fəaliyyət göstərən grelin oreksigen təsirinin neyron əsasları. Peptidlərin 24: 597-602.

  41. â † μ
    1. Orsini JC,
    2. Jourdan F,
    3. Cooper HM,
    4. Monmaur P

    (1985) Qadın iylərinin kişi siçovulundakı yan hipotalamusa təsiri. Semitizantik deoksiglukoza analizi. Fiziol Behav 35: 509-516.

  42. â † μ
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (1998) Stereotaksik koordinatlarda siçovul beyni (Akademik, New York), Ed 4.

  43. â † μ
    1. Peyron C,
    2. Tighe DK,
    3. van den Pol AN,
    4. de Lecea L,
    5. Heller HC,
    6. Sutcliffe JG,
    7. Kilduff TS

    (1998) Çox nöronal sistemə hipokretin (orexin) layihəsi olan neyronlar. J Neurosci 18: 9996-10015.

  44. â † μ
    1. Pfaus JG,
    2. Damsma G,
    3. Nomikos GG,
    4. Wenkstern DG,
    5. Blaha CD,
    6. Phillips AG,
    7. Fibiger HC

    (1990) Cinsi davranış kişi sıçanında mərkəzi dopamin ötürülməsini artırır. Brain Res 530: 345-348.

  45. â † μ
    1. Putnam SK,
    2. Sato S,
    3. Riolo JV,
    4. Hull EM

    (2005) Kastrasiya edilmiş kişi siçovullarında testosteron metabolitlərinin kopulyasiya, medial preoptic dopamin və NOS-immunoreaktivliyə təsiri. Horm Behav 47: 513-522.

  46. â † μ
    1. Rada P,
    2. Avena NM,
    3. Hoebel BG

    (2005) Şəkərin gündəlik bükülməsi dəfələrlə accumbens qabığında dopamin buraxır. Nevrologiyada 134: 737-744.

  47. â † μ
    1. Rolls ET,
    2. Burton MJ,
    3. Mora F

    (1980) Meymunda beyin stimullaşdırılması mükafatının neyrofizioloji analizi. Brain Res 194: 339-357.

  48. â † μ
    1. Sakurai T,
    2. Amemiya A,
    3. Ishii M,
    4. Matsuzaki I,
    5. Chemelli RM,
    6. Tanaka H,
    7. Williams SC,
    8. Richardson JA,
    9. Kozlowski GP,
    10. Wilson S,
    11. Arch JR,
    12. Buckingham RE,
    13. Haynes AC,
    14. Carr SA,
    15. Annan RS,
    16. McNulty DE,
    17. Liu WS,
    18. Terrett JA,
    19. Elshourbagy NA,
    20. Bergsma DJ,
    21. et al.

    (1998) Oreksinlər və orexin reseptorları: qidalanma davranışını tənzimləyən hipotalamik nöropeptidlər və G zülalı birləşdirilmiş reseptorlar bir ailədir. Cell 92: 573-585.

  49. â † μ
    1. Sakurai T,
    2. Nagata R,
    3. Yamanaka A,
    4. Kawamura H,
    5. Tsujino N,
    6. Muraki Y,
    7. Kageyama H,
    8. Kunita S,
    9. Takahashi S,
    10. Goto K,
    11. Koyama Y,
    12. Shioda S,
    13. Yanagisawa M

    (2005) Siçanlarda genetik kodlanmış bir izləyici tərəfindən aşkarlanan orexin / hipokretin neyronlarının daxil olması. Neyron 46: 297-308.

  50. â † μ
    1. Saper CB,
    2. Scammell TE,
    3. Lu J

    (2005) Yuxu və sirkadiyalı ritmlərin hipotalamik tənzimlənməsi. təbiət 437: 1257-1263.

  51. â † μ
    1. Sato S,
    2. Braham CS,
    3. Putnam SK,
    4. Hull EM

    (2005) Kişi siçovulların MPOA-da neyron nitrat oksidi sintazası və gonadal steroid qarşılıqlı təsiri: co lokallaşdırma və testosteronun təsirli bərpası və nNOS-immunoreaktivlik. Brain Res 1043: 205-213.

  52. â † μ
    1. Şakiryanova D,
    2. Tully A,
    3. Hewes RS,
    4. Deitcher DL,
    5. Levitan ES

    (2005) Sinaptik neyropeptid veziküllərinin fəaliyyətə bağlı azadlığı. Nat Neurosci 8: 173-178.

  53. â † μ
    1. Shen RY,
    2. Choong KC

    (2006) Metilfenidat müalicəsindən sonra ventral tegramal bölgədəki dopamin neyronlarında fərqli uyğunlaşmalar və etanol məruz qalmış siçovullar. Biol Psixiatriya 59: 635-642.

  54. â † μ
    1. Şizgal P

    (1989) İntrakranial özünü stimullaşdırma hüceyrə analizinə qarşı: toqquşma tədqiqatlarının töhfələri Neurosci Biobehav Rev 13: 81-90.

  55. â † μ
    1. Siegel JM

    (2004) Hipokretin (orexin): normal davranışda və nöropatologiyada rol. Annu Rev Psychol 55: 125-148.

  56. â † μ
    1. Simerly RB,
    2. Chang C,
    3. Muramatsu M,
    4. Swanson LW

    (1990) Siçovul beyində androgen və estrogen reseptoru mRNA tərkibli hüceyrələrin paylanması: bir situ hibridləşdirmə işi. J Comp Neurol 294: 76-95.

  57. â † μ
    1. Smith MD,
    2. Jones LS,
    3. Wilson MA

    (2002) Hippokampal dilim həyəcanlılıqdakı cins fərqləri: testosteronun rolu. Nevrologiyada 109: 517-530.

  58. â † μ
    1. Sutcliffe JG,
    2. de Lecea L

    (2002) Hipokretinlər: oyanma həddini təyin etmək. Nat Rev Neurosci 3: 339-349.

  59. â † μ
    1. Swanson LW

    (2004) Beyin xəritələri III: siçovul beyninin quruluşu (Elsevier, New York), Ed 3.

  60. â † μ
    1. Swanson LW,
    2. Sanchez-Watts G,
    3. Watts AG

    (2005) Yanal hipotalamik zonanın yeni bir bağlama sxemində melanin-konsentrat hormon və hipokretin / orexin mRNA ifadə nümunələrinin müqayisəsi. Neurosci Lett 387: 80-84.

  61. â † μ
    1. Taheri S,
    2. Sunter D,
    3. Dakin C,
    4. Moyes S,
    5. Şirkət Adı Seal L,
    6. Gardiner J,
    7. Rossi M,
    8. Ghatei M,
    9. Bloom S

    (2000) Orexində gündəliyin dəyişməsi Bir siçovul mərkəzi sinir sistemindəki immunoreaktivlik və pre-orexin mRNA. Neurosci Lett 279: 109-112.

  62. â † μ
    1. Thorpe AJ,
    2. Cleary JP,
    3. Levine AS,
    4. Kotz CM

    (2005) Mərkəzdən idarə olunan orexin A siçovullarda şirin qranullar üçün motivasiyanı artırır. Psixofarmakologiya (Berl) 182: 75-83.

  63. â † μ
    1. Vaughan E,
    2. Fisher AE

    (1962) İntrakranial elektrik stimullaşdırılması ilə əlaqəli kişi cinsi davranışı. Elm 137: 758-760.

  64. â † μ
    1. Wenkstern D,
    2. Pfaus JG,
    3. Fibiger HC

    (1993) Cinsi qəbuledici qadın siçovulların ilk məruz qalması zamanı kişi siçovulların nüvəli akumbensində dopamin ötürülməsi artır. Brain Res 618: 41-46.

  65. â † μ
    1. Wise RA

    (2004) Dopamin, öyrənmə və motivasiya. Nat Rev Neurosci 5: 483-494.

  66. â † μ
    1. Yoshida K,
    2. McCormack S,
    3. Espana RA,
    4. Crocker A,
    5. Scammell TE

    (2006) Siçovul beyninin orexin neyronlarına təsir göstərir. J Comp Neurol 494: 845-861.

  67. â † μ
    1. Siz ZB,
    2. Chen YQ,
    3. Wise RA

    (2001) Dopamin və glutamat, yanal hipotalamik özünü stimullaşdırmadan sonra nüvənin böyüdülməsi və ventral tegramal bölgədə sərbəst buraxılması. Nevrologiyada 107: 629-639.

Bu məqaləyə istinadən məqalələr

  • Klomifen sitratı (müalicəvi dərin beyin hipotalamik modulyatoru) ilə müalicəyə davamlı odadavamlı SUNCT sindromunun tam yüngülləşdirilməsi Cephalalgia, 1 Oktyabr 2014, 34 (12): 1021-1024
  • Hipokretin (orexin), ventral teimental bölgədəki kotransmitter dynorfinin antitray təsirini artıraraq mükafatı asanlaşdırır. PNAS, 22 aprel 2014, 111 (16): E1648-E1655
  • Orexin / Hipokretin Ventral Tegmental Dopamin Neyronlarının Prefrontal Aktivləşdirmə Reaksiyasını Modulyasiya edir: Gündəlik Təsirlər Nörobilim jurnalı, 17 Noyabr 2010, 30 (46): 15585-15599
  • Orexin A / Hypocretin-1 Pozitiv Tənzimləyicilərə Motivasiya Tərtibləndirir Nörobilim jurnalı, 9 Sentyabr 2009, 29 (36): 11215-11225
  • Orexin ilə stimullaşdırılmış MAP kinaz kaskadları insan H295R adrenokortikal hüceyrələrindəki çoxsaylı G-protein siqnal yolları vasitəsilə aktivləşdirilir: A və B oreksinləri üçün müxtəlif rollarda Endokrinologiya jurnalı, 1 Avqust 2009, 202 (2): 249-261