Orexin medias inicadon de seksa konduto en seksaj naivaj masklaj ratoj, sed ne estas kritika por seksa efikeco.

Horma Konduto. Aŭtoro manuskripto; havebla en PMC 2011 Aug 1.

Eldonita en fina redaktita formo kiel:

PMCID: PMC2917508

La fina redaktita versio de la eldonisto de ĉi tiu artikolo haveblas ĉe Hormo-konduto

Vidu aliajn artikolojn en PMC tio citas La artikolo eldonita.

Iru al:

abstrakta

La hipotalama neuropeptida oreksino meditas ekscitiĝon, dormadon, kaj nature rekompencajn kondutojn, inkluzive manĝaĵon. Vira seksa konduto estas ŝanĝita de orexin-riceviloj-1-agonistoj aŭ antagonistoj, sugestante rolon por oreksino-A en ĉi tiu nature rekompencanta konduto. Tamen, la specifa rolo de endogena oreksino-A aŭ B en malsamaj elementoj de vira seksa konduto nuntempe estas neklara. Tial la nunaj studoj utiligis markilojn por neŭra aktivigo kaj orexin-ĉel-specifaj lezoj por testi la hipotezon, ke oreksino estas kritika por seksa instigo kaj agado ĉe viraj ratoj. Unue, cFos-esprimo en orexinaj neŭronoj estis montrita post prezentado de akceptema aŭ ne-akceptema ino sen plia aktivado per malsamaj elementoj de pariĝo. Tuj poste, la funkcia rolo de oreksino estis testita uzante saporinon kun oksinino-B, kaj rezultigis lezonojn de oreksa ĉelo en la hipotalamo. Lesoj estis kondukitaj en sekse naivaj viroj kaj posta seksa konduto estis registrita dum kvar pariĝoj. Lesionaj maskloj montris mallongigitajn latentojn por munti kaj intrigi dum la unuaj, sed ne postaj pariĝoj, sugestante ke lezoj faciligis komencon de seksa konduto en seksaj naivuloj, sed ne spertaj viroj. Same, lezoj ne influis seksan instigon ĉe spertaj viroj, determinitaj per kursaj provoj. Finfine, altaj plusaj testoj pruvis reduktitajn anser-similajn kondutojn en vunditaj viroj, subtenante rolon por oreksino en angoro asociita kun komenca elmontro al la ino en naivaj bestoj. Entute, ĉi tiuj trovoj montras, ke oreksino ne estas kritika por vira seksa agado aŭ instigo, sed povas ludi rolon en ekscitiĝo kaj angoro rilata al seksa konduto en naivaj bestoj.

Ŝlosilvortoj: oreksino, hipokretino, seksa konduto, kopulacio, neŭra aktivado, instigo, hipotalamo, noveco, ekscitiĝo, angoro

Enkonduko

Orekso, ankaŭ konata kiel hipokretino, estas hipotalama neuropeptido kritika por nutrado de konduto,de Lecea et al., 1998; Sakurai et al; 1998, Sakurai, 2006; Benoit et al., 2008eksciti kaj dormi (Chemelli et al., 1999; Lin et al., 1999, Sakurai, 2007; Furlong kaj Carrive, 2007; Furlong et al., 2009; Carter et al., 2009). Oreksaj neŭronoj estas lokalizitaj al la flanka hipotalamika areo (LHA) kaj perifornia dorsomedia hipotalamo (PFA-DMH) kaj produktas du neuropeptidojn, orexin-A kaj B (de Lecea et al., 1998; Sakurai et al., 1998). Orexinaj neŭronoj pruviĝis projekti al cerbaj strukturoj implikitaj en mediacio de ekscitiĝo inkluzive de la locus coeruleus, tuberomammilaria kerno kaj peduculopontina tegmenta kerno (Peyron kaj aliaj, 1998; Hagan et al., 1999; Horvath et al., 1999; Baldo et al., 2003). Oreksino ankaŭ estis implikita en rekompenco kaj instigo, specife rilata al manĝaĵoj kaj drogoj de misuzo (Aston-Jones et al., 2009a; Aston-Jones et al., 2009b) kaj oreksaj neŭronoj pruviĝis rekompenci rilatajn cerbajn strukturojn en la mezolimbia sistemo inkluzive de la ventrala tegmenta areo (VTA) kaj kerno accumbens (NAc) (Peyron kaj aliaj, 1998; Fadel kaj Deutch, 2002; Martin et al., 2002; Baldo et al., 2003). Oreksaj neŭronoj estas aktivigitaj per kondiĉitaj kuntekstaj indikoj asociitaj kun manĝaĵo kaj drog-rekompenco (Harris et al., 2005; de Lecea et al., 2006; Choi et al., 2010) kaj estis montritaj ludi rolon en rekompenco-nutra konduto (Choi et al., 2010). Plie, intracerebroventricular (ICV) aŭ intraperitoneala administrado de antagonisto de oksigen-ricevilo 1 (ORX1) antagonisto rezultigas malpliigitan motivon por plaĉa manĝaĵo (Thorpe et al., 2005; Nair et al., 2008), dum ICV orexin-A-administrado povas reinstali ĉi tiun motivon (Boutrel et al., 2005).

La rolo de oreksino en aliaj rekompencaj kondutoj nuntempe estas neklara, kvankam pluraj studoj implicis rolon por oreksino en kontrolo de seksa konduto ĉe viraj ratoj. Ĝi antaŭe estis montrita, ke oreksaj neŭronoj estas aktivigitaj per kopulado ĉe viraj ratoj (Muschamp et al., 2007). Krome, administrado de oreksino-A en la median preoptikan areon (mPOA) rezultigis plibonigitan seksan agadon evidentigitan de reduktitaj latencoj por munti kaj intrigi, kaj pliigitaj oftecoj de montriloj kaj entrudiĝo (Gulia et al., 2003). En kontrasto, ICV-administrado de oreksino-A mildigis seksan instigon reduktante virinan preferon, kvankam nur en tre seksaj motivoj de virojBai et al., 2009). Studoj uzantaj ORX1-antagonistojn ankaŭ pruvis kontraŭdirajn datumojn, ĉar sistema administrado de ORX1-antagonisto iomete difektis seksan agadon pliigante la latentecon al intromiĝo sen tuŝi aliajn parametrojn de seksa konduto (Muschamp et al., 2007), dum ICV-administrado de ORX1-antagonisto havis neniun efikon al seksa instigo (Bai et al., 2009). Kune ĉi tiuj studoj sugestas, ke administrado de ekzogena oreksino-A influas seksan agadon kaj motivadon; tamen, endogena oreksino eble ne ludas gravan rolon por mediacii seksan konduton (Bai et al., 2009). Tial la celo de ĉi tiu studo estis determini ĉu endogena oreksino estas esenca por seksa instigo kaj agado de vira rato.

Unue, ĝi determinis kiam dum seksa konduto orexinaj neŭronoj estas aktivigitaj, provante la hipotezon, ke oreksaj neŭronoj estas aktivigitaj post la enkonduko de la rekompenca stimulo. Plie, kiel pruvis, ke seksa sperto influas seksan agadon (Dewsbury, 1969) kaj la rekompencaj propraĵoj de seksa konduto (Tenk et al., 2009), oni determinis, ĉu seksa sperto influas orexinan neŭronan aktivadon dum pariĝo. Fine oni testis, ĉu oreksino ludas kritikan rolon en seksa instigo kaj agado uzante specifajn lezojn de ĉelkorpoj de neŭroksinoj.

Materialoj kaj metodoj

Plenkreskaj viraj Sprague Dawley-ratoj (200 – 250g) estis akiritaj de Harlan (Indianapolis, IN) aŭ Charles River Laboratories (Sherbrooke, Kebekio, Kanado) kaj loĝigitaj individue aŭ en paroj depende de la individua eksperimento (vidu sube) en Plexiglas-kaĝoj. La ĉambro de kolonio estis konservita sur 12 / 12 renversita lumo-malluma ciklo (lumoj malŝaltitaj ĉe 10 am) kaj manĝo kaj akvo estis haveblaj ad libitum krom dum kondutisma testado. Inaj Sprague-Dawley-ratoj estis akiritaj de Harlan (Indianapolis, IN) aŭ Charles River Laboratories (Sherbrooke, Kebekio, Kanado) estis bilateralmente ovariectomizitaj kaj enplantitaj subkutanee kun 5% 17-β-estradiol benzoato-kapsilaj kapsuloj. Seksa receptiveco estis induktita per subkutagaj injektoj de progesterono (500 µg en 0.1ml de sesamo-oleo) proksimume 4 h antaŭ kongresaj kunsidoj. Ĉiuj proceduroj estis aprobitaj de la Komitatoj pri Besto-Prizorgado ĉe la Universitato de Cincinnati kaj la Universitato de Okcidenta Ontario kaj konformas al gvidlinioj skizitaj de la Nacia Instituto pri Sano kaj la Kanada Konsilio pri Bredzorgoj. Ĉiuj kondutaj testoj estis farataj dum la unua duono de la malhela fazo sub malhela ruĝa lumigado, krom se notite alie.

Eksperimenta Dezajno

cFos esprimaj studoj

Viraj ratoj (n = 48) estis loĝigitaj individue kaj duono de la bestoj akiris seksan sperton en la hejma kaĝo dum 5 dufoje ĉiusemajne pariĝantaj kunsidoj. La testado de apareamiento estis realigita en la hejma kaĝo por forigi ekspreson de ekscitiĝo kaj cFos induktita de eksponiĝo al malsama apera aparejo kaj ekspozicio al kondiĉitaj indikoj asociitaj kun antaŭa apareamiento (Balfour et al., 2004). Akceptebla ino estis enkondukita en la hejman kaĝon kaj maskloj rajtis pariĝi ĝis unu ejakulado aŭ dum 60-minutoj. Dum ĉiu testo oni observis seksan konduton. La tuta nombro de montriloj kaj entrudiĝoj, same kiel la latencoj al unua monto kaj entrudiĝo (la tempo de prezento de la akceptema ino ĝis la unua monto aŭ entrudiĝo), kaj ejakulado (la tempo de la unua enmiksiĝo ĝis ejakulado), estis registritaj (Agmo, 1997). La cetera duono de la bestoj restis sekse naiva. Ĉi tiuj bestoj estis loĝigitaj en la sama ĉambro kiel la sekse spertaj maskloj, estis manipulitaj kaj elmontritaj al odoroj kaj sonoj asociitaj kun pariĝo, tamen ili ne kongruis. Naivaj kaj spertaj bestoj estis plu subdividitaj en 6-eksperimentaj grupoj (n = 4 per grupo). La naivaj kaj spertaj grupoj de 6 inkluzivis: Kontroli virojn kun neniu eksponiĝo al seksa konduto (Hejma kaĝo); maskloj elmontritaj al ne-akceptema ino en la hejma kaĝo dum 15-minutoj (Anestrosa Ino). Maskloj povis enketi kaj interagi, tamen ne kongruis pro manko de virina akceptemo; maskloj eksponitaj al la odoroj de akceptebla ino metitaj en dratan keston sur la supro de la hejma kaĝo dum 15-minutoj (Estrula Ino); maskloj, kiuj montris montrilojn, sed ne entrudiĝojn aŭ ejakuladon kun inoj maskitaj vagine (Monto); maskloj, kiuj montris montrilojn kaj entrudiĝojn nur (Intromision); kaj maskloj, kiuj pariĝis al unu ejakulado (ejakulado). Unu horon post la fino de la testo, viroj estis oferitaj por analizi cFos-esprimon. Sekse spertaj grupoj kongruis kun parametroj de seksa konduto kaj ne estis signifaj diferencoj inter grupoj antaŭ la fina testo. Plie, ne estis signifaj diferencoj inter naivaj kaj spertaj grupoj en nombro da montriloj plus entombigoj dum la fina testo.

Perfluoj: cFos-esprimo

Ĉiuj viroj estis profunde anesteziitaj kun natria pentobarbitolo (270 mg / mL) kaj estis kardard-perfuzigitaj kun 4% paraformaldehido (500 mL; PFA). Sekvaj perfuzaj cerboj estis forigitaj tuj kaj post-fiksitaj dum unu horo en la sama fiksaĵo kaj tiam transdonitaj al 20% sukrosa solvo por krioprotekto. Cerboj estis sekigitaj sur frostiga mikrotomo (Microm, Walldorf, Germanio) en koronaj sekcioj de 35 µm kaj kolektitaj en 4 paralelaj sekcioj en krio-protektanta solvo (30% sukerozo en 0.1 M PB enhavanta 30% etilenglicol kaj 0.01% natria azido) kaj stokitaj je −20 ° C ĝis plua prilaborado.

Immunohistoĥemio

Ĉiuj kovadoj estis faritaj ĉe ĉambra temperaturo kun milda agitado. Senpagaj flotaj sekcioj estis lavitaj vaste kun salina fosfato de natria fosfato 0.1M (PBS). Sekcioj estis blokitaj kun 1% H2O2 (30% proviza solvo) en PBS dum 10-minutoj, tiam vaste rinsita denove kun PBS. Sekcioj estis inkubataj per inkuba solvo (PBS enhavanta 0.1% bovan seruman albuminon kaj 0.4% Triton X-100) dum 1 horo. Primaraj antikorpaj inkubadoj estis faritaj en la inkuba solvo dum la nokto ĉe ĉambra temperaturo. Sekvaj makulaj sekcioj estis enŝovitaj en PBS, muntitaj sur pli ŝarĝitajn vitrajn lumbildojn kaj kovritaj per dibutila ftalato-xileno (DPX).

cFos / Oreksino

Unu serio de sekcioj estis imunoprocesita por cFos kaj oreksino. Sekcioj estis inkubitaj dum la nokto kun kuniklo levita antikorpo rekonanta cFos (kuniklo kontraŭ-cFos, sc-52; 1: 10 000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) sekvita per 1-horaj inkubacioj kun biotinilata kaprina kontraŭ-kuniklo (1: 500 , Viraj Laboratorioj, Burlingame, CA) kaj avidina ĉevaldoksidita peroksida komplekso (1: 1000, ABC-kit, Vektoro-Laboratorioj, Burlingame, CA). Sekcioj estis inkubitaj dum 10-minutoj en 0.02% diaminobenzidino (DAB) (Sigma, Sankta Luiso, MO) en 0.1M-fosfata bufro (PB) enhavanta 0.012% hidrogenan peroksidon kaj 0.08% nikel sulfaton, rezultigante bluan-nigran reagan produkton. Sekcioj tiam estis inkubitaj dum la nokto kun kuniklo levita antikorpo rekonanta oreksinon-A (kuniklo kontraŭ-oreksino-A, H-003-30; 1: 20 000, Phoenix Pharmaceuticals, Burlingame, CA) sekvita de 1-hora inkubacio kun anti-biotilita kapro. -rabbit kaj ABC, kiel priskribite supre. Finfine, la sekcioj estis inkubitaj dum 10-minutoj kun 0.02% DAB en 0.1M PB enhavanta hidrogenan peroksidon de 0.012%, rezultigante ruĝetan brunan reakcion.

Ĉiuj antikorpoj estis karakterizitaj antaŭe (Chen et al., 1999; Satoh et al., 2004; Salomono et al., 2007). Immunohistoĉemiaj kontroloj inkluzivis preterlasadon de primaraj antikorpoj, analizo de okcidentaj blotoj montrante unuopajn bandojn ĉe taŭga pezo (cFos), kaj perdon de imunohistoocheemia oreksina signalo kun leksinoj B-saporin (oreksino).

datumoj Analizo

cFos / Oreksino

Neŭronoj etikeditaj por oksinino aŭ oreksino kaj cFos estis kalkulitaj bilateralmente en tri reprezentaj sekcioj per besto, sciate, enhavi maksimuman nombron de la neurona populacio de oreksino (Sakurai et al., 1998) etendanta −2.3 mm al −3.6 mm de bregmo (Paxinos kaj Watson, 1998) (figuro 1), uzante desegnan tubon ligitan al Leica-mikroskopo (Leica Microsystems; Wetzlar Germany), de observita blindigita al eksperimentaj grupoj. La PFA-DMH kaj LHA estis delinigitaj surbaze de la loko de la fornico (Figuro 1a). Procentoj de oreksaj neŭronoj esprimantaj cFos estis kalkulitaj kaj averaĝe po hemisfero por ĉiu besto, kaj grupaj rimedoj estis kalkulitaj. Statistika signifo inter grupoj estis determinita uzante dudirektan ANOVA kun seksa sperto kaj seksa konduto dum fina testo kiel faktoroj sekvitaj de la LSD-testoj de Fisher kun 95%-konfido-nivelo.

figuro 1 

Loko de oreksaj neŭronoj en la hipotalamo. (A) Anatomia loko de oreksinaj neŭronoj en la hipotalamo. (Paxinos kaj Watson, 1998), Skala stango: 200 µm. (B) Ununuraj markitaj oreksinaj neŭronoj en la PFA-DMH en nekontrolita besto. (C) Oreksino ...

Studoj pri Oreio-Lesio

kirurgio

Maskloj estis loĝigitaj individue kaj ricevis unu antaŭ-testan pariĝon kun akceptebla ino antaŭ lesio kaj malkaŝa kirurgio. Seksa konduto estis registrita kiel priskribita supre kaj grupoj pariĝis surbaze de parametroj de pariĝa konduto. Viraj ratoj estis anestezitaj per isoflurano (Abbot Laboratories, St. Laurent, Kebekio, Kanado) uzante gasan aparaton Surgivet Isotec4 (Dividado de Medicina Veto de Smiths, Markham, Ontario, Kanado) kaj metis en stereotipan aparaton (Kopf Instruments, Tujunga, CA) kun gasa masko kovranta la nazon kaj buŝon por konservi anestezon. Incizo estis farita por elmontri la kranion kaj lambda kaj bregma estis trovitaj kaj determinitaj ebenaj. Oni fosis truon en la kranio per dremel-borilo (Dremel, Racine, WI) kaj vitraj micropipetoj (40µm-diametro, World Precision Instruments Inc, Sarasota, FL) plenigitaj per la celita toksina oreksino-B-saporino (IT-20, Advanced Celi Sistemojn, San-Diego, CA; 200ng / µL en PBS); aŭ nekonjugita toksino BLANK-saporino (IT-21, Advanced Targeting Systems, San-Diego, CA; 200ng / µL en PBS; mallertaj kontroloj) estis malaltigitaj en la hipotalamo. Ĉi tiu celita toksino pruviĝis ligi kun alta afineco al ĉeloj esprimantaj receptoron de oksinino 2 (ORX2) kaj kun signife pli malalta afineco por ĉeloj esprimantaj ORX1 (Gerashchenko et al., 2001), kaj estis montrita specife abla al orexinaj neŭronoj en la hipotalamo (Frederick-Duus et al., 2007). Flankaj infuzaĵoj de 1 µL (2 per hemisfero) estis injektitaj ĉe la sekvaj koordinatoj: AP = −2.8 kaj −3.2; ML = 0.7 kaj 0.8; DV = −9.0 (Paxinos kaj Watson, 1998). Post ĉiu infuzaĵo la nadlo estis restita por 3-minutoj por permesi disvastigon. Necesejoj estis malrapide forigitaj kaj vundoj estis fermitaj per vundaj klipoj. Du semajnojn post lezo-kirurgio, ĉiuj viroj estis provitaj pri seksa sperto dum kvar pariĝoj kaj tiam estis submetitaj al la kurejo kaj / aŭ levita plusa labirprovo (vidu sube). Kirurgioj estis faritaj en tri malsamaj kohortoj, disigitaj de pluraj semajnoj, por atingi sufiĉan nombron da bestoj per grupo.

Seksa Konduto

Ĉiuj viroj estis provitaj pri seksa konduto dum 4-kunsido-kunsidoj kondukataj ĉiun duan tagon en la hejma kaĝo. Dum ĉiu kunsido, maskloj pariĝis kun akceptema ino al unu ejakulado aŭ dum 60-minutoj, kiel ajn aperis la unua. La pariĝa konduto estis registrita kiel priskribita pli supre kaj kopula efikeco ankaŭ estis kalkulita [nombroj da intromisioj / (nombroj da montriloj + nombroj de intromisioj)]. Statistikaj diferencoj en parametroj de seksa agado estis komparitaj inter lezo kaj malkaŝaj grupoj por ĉiu provo uzante unudirektan ANOVA kun lesio-kirurgio kiel faktoro kaj la LSD-testo de Fisher kun 95%-konfido-nivelo, aŭ kiam konvene, ne-parametraj testoj estis aranĝitaj per unu-voja ANOVA de Kruskal-Wallis kun lesio-kirurgio kiel faktoro kaj Dunn-testo kun 95%-konfidenca nivelo. Krome, datumoj por ĉiu grupo estis komparataj al la antaŭkirurgiaj datumoj per parigitaj t-testoj.

Seksa Motivado: Kureganta Testo

Post provado de seksa konduto, subgrupo de la nun sekse spertaj viroj estis provita pri seksa instigo uzante rektan kursan aparaton (MED Associates Inc., St. Albans, VT) (120 cm longa; Lopez kaj aliaj, 1999). Maskloj kutimis al la kureja aparato dum du postaj 10-minutaj provoj faritaj en la sama tago. Tuj poste, du provaj provoj estis faritaj. Dum la unua proceso, stimula besto (ekstruda ino, anestra ino aŭ masklo) estis metita en celan keston kun boritaj dividiloj ĉe la fino de la kurejo. Ventumilo kutimis blovi la odorojn de la stimulaj bestoj al la masklo. Eksperimentaj viroj estis metitaj en la startan keston, la pordo malfermiĝis por permesi aliron al la kurejo, kaj tempo por atingi la celan skatolon estis registrita. Atinginte la celan skatolon, al viroj ricevis 30-sekundojn por interagi kun la stimula besto malantaŭ la ekrano. Identeca dua proceso sekvis 1 horon poste. Statistika signifo inter tempoj por atingi la celon inter provo 1 kaj provo 2 estis analizita uzante parigitajn t-testojn kun 95%-konfido-nivelo. Statistika signifo inter grupoj estis determinita uzante unudirektan ANOVA kun lesio-kirurgio kiel faktoro sekvita de la LSD-testoj de Fisher kun 95%-konfido-nivelo.

Anksie-simila Konduto: Elevated Plus Labirinto

Subgrupo de la nun sekse spertaj maskloj estis testita pri angoro-simila konduto por determini ĉu efikoj de oreksaj lezoj sur seksa agado aŭ instigo estis pro ŝanĝoj de angoro aŭ ekscitiĝo. Maskloj estis elmontritaj al la levita plusa labirilo (EPM; MED Associates Inc., St. Albans, VT) en hele lumigita ĉambro dum la fino de la luma fazo. La EPM konsistis el 4-brakoj ĉiu 50 cm en longo etendiĝante de centra krucvojo kaj estis levita 75 cm. Du brakoj de la labirinto estis malfermitaj al la ekstera medio kaj la aliaj du estis enfermitaj kun malhela sidflanka 40 cm alta. Bestoj estis metitaj sur la EPM kaj kontrolitaj dum kvin minutoj. Tempo pasigita en malfermitaj kaj fermitaj brakoj, kaj totalaj nombroj de enskriboj en ĉiu brako estis registritaj uzante fotobranĉajn tabelojn. Statistika signifo inter grupoj estis determinita uzante unudirektan ANOVA kun lezo kiel faktoro sekvita de la LSD-testoj de Fisher kun 95%-konfidenca nivelo.

Perfuzoj kaj pariĝitaj cFos

Post ĉiu kondutisma testado, ĉiuj viroj estis profunde anestezitaj kun natria pentobarbitolo (270mg / mL) kaj estis transcardiale perfuzigitaj kun 500 mL de 4% PFA por verifiko de lezo kiel priskribita antaŭe. Krome, por testi la efikojn de oreksaj lezoj sur pariĝo-induktita cFos-esprimo, grupoj de malhonestaj kaj lezaj maskloj pariĝis ĝis unu ejakulado. Unu horon post ejakulado, viroj estis transcardiale perfuzigitaj kun 4% PFA kiel priskribite supre. Duono de la viroj en ĉi tiu grupo ne estis enkondukitaj al ino kaj estis perfuzitaj el la hejma kaĝo por servi kiel nekontrolitaj kontroloj.

Immunohistoĥemio

Cerboj estis sekciitaj uzante frostigan mikrotomon en 4 paralelaj serioj de 35 µm koronaj sekcioj kaj konservitaj kiel priskribita supre. Por verifiko de lezo, unu serio de sekcioj enhavantaj la hipotalamon el ĉiuj lezaj eksperimentoj estis unika markita por oreksino uzanta la saman kuniklon kontraŭ-oreksinon-A kaj DAB-protokolon priskribitan supre. Unu serio de sekcioj de la bestoj pariĝintaj estis makulita por cFos kaj oreksino kiel priskribite supre.

Kontraŭa Kontrolado

En ĉiu besto, nombroj de neŭrinoksaj neŭronoj imunoreaktivaj por oreksino estis kalkulitaj bilateralmente en la PFA-DMH kaj LHA en 3-sekcioj esprimantaj maksimumajn nombrojn de oksinoksaj ĉeloj en ne-kirurgiaj kontroloj, −2.3 mm ĝis −3.6 mm de bregma kiel priskribite supre. La ĉeloj per hemisfero estis averaĝe por ĉiu besto, kaj grupaj rimedoj estis kalkulitaj. Ne-kirurgiaj kontrolaj bestoj (el eksperimentoj kun cFos) estis uzataj por determini nerompitajn / bazajn nombrojn de oreksaj neŭronoj kaj datumoj estas esprimitaj kiel procentoj kompare al la ne-kirurgiaj kontrolaj virojfiguro 2). Maskloj, kiuj havis malpli ol 20% oreksinajn ĉelojn kompare al ne-kirurgiaj kontrolaj bestoj, estis inkluzivitaj en la lesiva grupo. Bestoj kun pli ol 20%, sed malpli ol 80% estis inkluzivitaj en parta lezogrupo. Sham-kontroloj ne havis signifajn ŝanĝojn en nombroj de oksinoksaj ĉeloj. Statistika signifo inter malprudentaj, partaj kaj kompletaj lezaj bestoj estis kalkulita uzante unudirektan ANOVA kaj Fisher's LSD-teston kun 95% -fida nivelo.

figuro 2 

Verifiko de lesio. Reprezentaj bildoj montrantaj oreksinon (A) kaj MCH (B) ĉelojn en malseka lezo-besto injektita kun BLANK-saporino. Reprezentaj bildoj montrantaj perdon de oreksinaj ĉeloj (C), sed sendifektaj MCH-ĉeloj (D) en lezo-besto injektita kun oreksino ...

Specio de Lesio

Por kontroli, ke lezoj estis limigitaj al oreksaj neŭronoj, unu serio de sekcioj enhavantaj la hipotalamon el subaro de ŝamaj kaj lezaj bestoj (n = 20) estis imunoprocesita por koncentriĝanta hormono de melanocito (MCH), hipotalamo peptido kiu havas superkovrantan lokon (sed ne kolokalizo) kun oreksaj neŭronoj (Broberger et al., 1998), uzante kuniklon kreskitan antikorpon rekonantan MCH (kuniklo kontraŭ-MCH, H-070-47; 1: 150 000, Phoenix Pharmaceuticals, Burlingame, CA) kaj DAB kiel priskribite antaŭe. MCH-neŭronoj esprimas ORX1 (Bäckberg et al., 2002) sed ne ORX2 (Volgin et al., 2004), kaj ne reduktiĝas signife sekvante orexinan B-saporinan traktadon (Frederick-Duus et al., 2007). Immunoreaktivaj ĉeloj MCH estis kalkulitaj bilateralmente en du sekcioj per besto (sham: n = 7; lezo n = 5), uzante alternajn sekciojn al tiuj analizitaj por neŭroksinoj. Lesoj ne reduktis signife nombrojn de MCH-neŭronoj nek en PFA-DMH nek en LHA (tablo 1; Figuro 2b, d; PFA-DMH: p = 0.47; LHA: p = 0.33). Plue, pariĝo induktita esprimo de cFos estis kalkulita bilateralmente en unu reprezenta sekcio per besto (sham: n = 4; lezo n = 3), uzante alternajn sekciojn al tiuj analizitaj por neŭroksinoj. Lesoj ne influis esprimadon de cFos-pariĝo en la PFA-DMH aŭ LHA (tablo 1; PFA-DMH: p = 0.53; LHA: p = 0.82). Finfine, reprezentaj sekcioj uzataj por oreksaj ĉelaj kalkuloj (bestoj: sham: n = 6; lezo: n = 6) estis Nissl kontraŭkreskitaj per kreta viola (5 g kresila viola acetato (C-5042, Sigma, Sankta Luiso, MO)), 0.5 g da natria acetata trihidrato (S209, Thermo Fisher Scientific, Ottawa, Ontario, Kanado), 1L duoble distilita akvo kun glacia acetata acido (AX0073-6, EMD Kemiaĵoj, Misisipo, Ontario, Kanado) je pH: 3.14). Kalkuloj de Nissl makulitaj neŭronoj estis faritaj en normaj areoj de analizo (250 µm × 200 µm) en la ĝenerala loko de oreksaj neŭronoj. Nombroj de Nissl-makulitaj neŭronoj ne diferencis inter ŝamaj kaj lesaj grupoj (tablo 1; PFA-DMH: p = 0.23; LHA: p = 0.33).

tablo 1 

Kontrolo de specifa lezo: Analizo de la nombro de neŭronoj makulitaj de Nissl, MCH aŭ pariĝo induktita cFos pruvis, ke ne ekzistas signifa perdo de neŭronoj ĝenerale, MCH-ĉeloj, aŭ induktita neŭra aktivigo en la PFA-DMH aŭ ...

Ĉar evidentiĝis manko en oreksino kontribuanta al narkolepsio en musoj (Chemelli et al., 1999), hundoj (Lin et al., 1999) kaj homoj (Siegel, 1999; Nishino et al., 2000; Peyron kaj aliaj, 2000; Thannickal et al., 2000) bestoj estis observitaj por certigi la foreston de narkoleptika fenotipo. Oni observis bestojn dum la daŭro de ĉiuj kondutaj provoj raportitaj en ĉi tiu studo kaj ne montris iajn karakterizaĵojn de narkolepsio.

Matĉ-induktita cFos-esprimo en lezaj bestoj

Nombroj de cFos-imunoreaktivaj ĉeloj estis kalkulitaj bilateralmente en 3-sekcioj per bestoj en normaj areoj de analizo en la ventra tegmentala areo (VTA; 900 × 900 µm), mPOA (400 × 600 µm); nukleo accumbens (NAc) kerno kaj ŝelo (400 × 600 µm) kaj la antaŭlimaj, infralimbaj kaj antaŭaj cingulataj subregionoj de la media prefrontal kortekso (mPFC) (600 × 800 µm per subregiono) fare de observita blindigita al eksperimentaj grupoj . Kalkuloj estis averaĝaj por ĉiu besto, kaj grupaj rimedoj estis kalkulitaj. Statistika signifo estis kalkulita uzante dudirektan ANOVA kun seksa sperto kaj lezo kiel faktoroj sekvitaj de la LSD-testo de Fisher kun 95%-konfido-nivelo.

rezultoj

Oreona neŭrona aktivado dum seksa konduto

Signifa kresko de cFos-esprimo en orexinaj neŭronoj estis observita sekve de seksa konduto en ambaŭ PFA-DMH (F(5,31) 63.4; p <0.001; Figuro 3a) kaj LHA (F(5,31) 10.4; p <0.001; Figuro 3b), sen efiko de seksa sperto. Specife, en kaj sekse naivaj kaj spertaj bestoj, ĉiuj eksperimentaj grupoj de viroj montrantaj malsamajn parametrojn de seksa konduto (enketo de anesteza ino, elmontro al eksteraj inaj odoroj, montrado de montrado, entrudiĝoj, aŭ ejakulado) montris egalan indukton de cFos kompare kun hejmo. kaĝkontroloj kun pli alta procento de oksoksinaj ĉeloj aktivigitaj en la PFA-DMH (60-80%) kontraŭ la LHA (14-33%), sen diferencoj inter la eksperimentaj grupoj. Ĉi tiuj rezultoj sugestas, ke oreksaj neŭronoj estas aktivigitaj post eksponiĝo al la stimula ino sen plia aktivado dum seksa agado. Plie, la aktivado ne dependas de incita savo de la ina stimulo ĉar tiel ne-akceptemaj kaj akceptemaj inoj induktis aktivadon en sekse spertaj viroj.

figuro 3 

Oreksaj neŭronoj en PFA-DMH (A) kaj LHA (B) esprimis cFos sekvante ĉiujn parametrojn de pariĝa konduto en naivaj kaj spertaj bestoj. Mallongigoj: HC, hejma kaĝo; AF: anesteza ino; EF, estra ino; M, Monto; IM, Intromigo; E, Ejakulado. ...

Efikoj de lezoj de oreksino

Seksa Konduto

Oreksaj lezoj rezultigis faciligon de seksa konduto (monto latencia: F(2,47) 3.962; p = 0.034; entrudiĝa latenco: H = 9.104; p = 0.011). Dum la unua pariĝo, viraj maskoj montris pli mallongajn latentojn por munti kaj enmiksiĝon kompare al malhelpaj bestoj (monto latencia: p = 0.03; entrudiĝa latencia: p = 0.01; Ilustraĵo 4a – b) kaj kompare kun latencoj dum la antaŭkirurgia apareado (monto latencia: p = 0.02; entrudiĝa latenco: p = 0.03; Datumoj ne montritaj). Partaj lezaj maskloj ne diferencis signife de malprudentaj maskloj, kaj neniu grupo diferencis de la antaŭkirurgia pariĝo. Efikoj de lezoj sur montaj kaj entrudaj latencoj malpliigis kun seksa sperto, ĉar ne estis diferencoj inter grupoj, dum iu el la postaj provoj (provo 4 montrita en Ilustraĵo 4a – b). Ejakulaj latencoj (Figuro 4c), nombroj da montoj (Figuro 4d) kaj entrudiĝoj (Figuro 4e) same kiel kopula efikeco (Figuro 4f) ne signife diferencis inter grupoj dum iu el la provoj aŭ ene de ĉiu grupo inter la unua pariĝa provo kaj la antaŭkirula testo.

figuro 4 

Oreksaj lezoj mallongigis latencojn por montri kaj entrudiĝon en sekse naive maskloj dum proceso 1. Oreksaj lezoj ne influis pariĝon dum proceso 4, post kiam viroj akiris seksan sperton. (A) Monto Latenado. (B) Intromisión Latenado. (C) Ejakulado ...
Kureja testo

Orexinaj lezoj ne influis seksan motivon taksitan en rekta provtempo en sekse spertaj viroj. En la daŭro de du provaj provoj, lezaj maskloj kuris signife pli rapide al estra ino en la dua proceso kompare al la unua proceso (p = 0.03; figuro 5). Tia pliigita daŭra tempo indikas seksan instigon (Lopez kaj aliaj, 1999). Parta lezo kaj malhonoraj maskloj ankaŭ kuris pli rapide al estra ino dum provo 2 (p = 0.03), kvankam ĉi tio ne atingis signifon en malhonestaj viroj (p = 0.052). Neniu el la grupoj montris pliigitan rapidon por kuri al anesteza ino aŭ masklo dum provo 2. Plie, neniuj signifaj diferencoj estis observitaj inter malhonestaj, partaj kaj vundaj maskloj rapide por kuri al iu stimula besto sur nek prova 1 nek provado 2, evidentigante mankon de diferencoj en ĝenerala agado sur la kurejo.

figuro 5 

Orexinaj lezoj ne influis seksan motivadon en sekse spertaj viroj. Montritaj estas tempoj por atingi estran inon en la kureja testo dum ambaŭ provoj 1 kaj 2. * indikas signifan redukton de tempo atingi la inon en provo 2 kompare kun ...
Anksie-simila konduto

Rezultoj ĝis nun sugestas, ke lezoj povus faciligi komencon de seksa konduto en naivaj bestoj per ebla efiko al respondoj al novecoj kaj / aŭ angil-similaj kondutoj kiam maskloj renkontas novan inon. Subtene, lezaj maskloj montris malpliiĝon de angoro-simila konduto sur la EPM, vidita kiel malpliigita procento de tempo pasigita en la fermitaj brakoj, (p = 0.012; figuro 6) kaj pliigita procento de tempo sur la malfermitaj brakoj (p = 0.023; figuro 6) kompare kun hontaj maskloj. Partaj lezoj havis neniun signifan efikon. Ĉi tiuj datumoj plue subtenas, ke lezo malpliigis maltrankvilan konduton.

figuro 6 

Oreksaj lezoj malpliigis maltrankvilan konduton sur la levita plusa labirinto. Procento de tempo pasigita en la fermitaj brakoj (maldekstre) malpliiĝis kaj procento de tempo en malfermitaj brakoj (dekstre) pliigis ĉe vunditaj viroj. * indikas signifan diferencon ...
cFos Esprimo

Por taksi ĉu endogena oreksino kontribuas al pariĝo-induktita neŭrona aktivado en regionoj de cerbaj neserigitaj orexinoj, oni faris analizon de esprimado de matĉoj induktitaj de cFos en VTA, NAc-kerno kaj ŝelo, mPOA kaj mPFC. Ambaŭ vundaj kaj hontaj maskloj, pariĝo signife pliigis cFos en ĉiuj analizitaj cerbaj areoj kompare kun nereguligitaj kontroloj (tablo 2). Lesoj ne influis neŭralan aktivadon, ĉar ŝamaj kaj lezaj bestoj ne diferencis en bazlinia aŭ matĉa induktita esprimo de cFos.

tablo 2 

La apareamiento induktita cFos en malhonoraj, partaj kaj lesaj grupoj kompare kun ne-pariĝantaj kontroloj de la sama lezo-stato.

diskuto

Ĉi tiuj studoj esploris la rolon de endogena oreksino en seksa agado kaj instigo en la vira rato. Estis trovite, ke oreksino ne estas esenca por seksa instigo aŭ agado. Anstataŭe, oreksaj neŭronoj estas aktivigitaj de la ina stimulo, sendepende de la hormona stato de la ina aŭ seksa sperto de la masklo. Plie, forigo de endogena oreksino per speciokulaj lezoj de oreksino malpliigis angul-similajn kondutojn kaj faciligis komencon de seksa konduto en seksaj naivuloj. Tiel, la rezultoj de ĉi tiu studo subtenas rolon por oreksino en ekscitiĝo (de Lecea et al., 2006; Harris kaj Aston-Jones, 2006; Sakurai, 2007; Boutrel et al., 2009; Furlong kaj Carrive, 2009; Furlong et al., 2009) kaj angoro (Suzuki et al., 2005; Davis et al, 2009; Li et al., 2010), sed ne subtenas kritikan rolon por oreksino en seksa instigo aŭ agado.

La rezultoj de ĉi tiuj studoj plue klarigas la rolon de endogena oreksino kaj la ŝajnajn kontrastajn trovojn de la antaŭaj studoj ekzamenantaj la rolon de oreksino en vira seksa konduto uzante farmacologiajn ilojn. Intra-mPOA-infuzaĵoj de ekzogena oreksino-A kondukis al pliigo de seksa ekscitiĝo kaj plibonigo de seksa agado, sugestante ke oreksino povus agi en la mPOA por pliigi instigon kaj agadon de seksa konduto (Gulia et al., 2003). Kontraŭe, ICV-infuzaĵoj de oksigeno-A mildigita seksa instigo kaj ekscitiĝo (Bai et al., 2009), dum antagonisto de riceviloj de oreksino ne efikis pri seksa ekscitiĝo (Bai et al., 2009), indikante endogenan oksinon eble ne ludas rolon en seksa instigo. Fine, ORX1-blokado per sistemaj injektoj estis montrita nur iomete malhelpi kopulatan agadon (Muschamp et al., 2007). El ĉi tiuj konfliktaj studoj eblas eltiri kelkajn konkludojn. Unue, apliko de ekzogena oksino-A eble influas konduton, sed ORX1-blokado estas sen gravaj efikoj, sugestante negravan rolon por endogena oksino en regulado de vira seksa konduto (Bai et al., 2009). La aktualaj rezultoj subtenas ĉi tiun eblon. La aktualaj studoj uzantaj forigon de oreksino per speci-lezoj de oreksino indikas, ke endogena oreksino ne estas esenca por seksa instigo aŭ agado, konforme al observoj de Bai et al (2009). Tamen gravas, ke rimarku, ke manko de efikoj de oreksaj lezoj sur seksa instigo en la kurejo povas esti pro la fakto, ke bestoj akiris seksan sperton antaŭ testado de seksa instigo, tial manko de efiko en la kureja testo povas esti ŝuldata. al la seksa sperto de la viroj. Estontaj eksperimentoj povas pritrakti ĉi tiun averton testante la efikojn de oreksaj lezoj sur seksa instigo en naivaj viroj.

Eblas ankaŭ, ke la du oreksaj ligoj kaj la du subtipoj de riceksoj de oreksino (ORX1 kaj ORX2; Sakurai et al., 1998) povas reguligi seksan konduton en kontraŭaj direktoj. Uzante teknikojn de oreksulaj lezoj, la ligandoj por ambaŭ subtipoj de riceviloj de oreksino (oreksino-A kaj B) estis forigitaj en la nuna studo. La du subtipoj de riceviloj estas esprimitaj en malsamaj cerbaj areoj (Trivedi et al., 1998; Marcus et al., 2001) kaj estis montritaj malsame regi memoron por serĉado de kokaino kun induktita kuracado (Smith et al., 2009). Antaŭaj studoj pri seksa konduto ĉefe centris sur la rolo de oreksino-A kaj ORX1 (vidu diskuton supre). La antagonisto de ricekso de oreksino SB334867 uzita en la studoj ĝis nun specife celas ORX1, kiu havas altan afinecon por oreksino-A kaj signife pli malalta afineco por oksinino-B (Sakurai et al., 1998). Same, oreksino-A estis uzata kiel la ekzogena oreksino en antaŭaj studoj (Gulia et al., 2003; Bai et al., 2009). Estontaj studoj necesas por esplori la rolon de oreksino-B kaj ORX2 en regulado de vira seksa konduto.

La nuna studo testis la efikojn de longtempa perdo de oreksino. Muschamp et al. (2007) sugestis, ke longtempa redukto de oreksino post kastrado eble rimarkas la perdon de seksa instigo kaj agado. Ĉi tiu hipotezo estis kontraŭdirita de la aktualaj trovoj, ĉar lezoj de oksoksino ne reduktis seksan motivadon aŭ agadon. Eblas, ke la longtempa oreksa perdo en la nuna studo eble rezultigis kompensajn mekanismojn, kvankam neniuj ŝanĝoj en la neŭra aktivigo de pariĝo induktita de la pariĝo en la cirkvito mediata seksan konduton estis detektitaj. Tamen estas klare, ke redukto aŭ manko de oreksino ne malhelpas seksan konduton. Plie, la rezultoj de la nuna studo ne subtenas grandan rolon por orekso en indukto de cFos-esprimo per seksa konduto. Klare evidentiĝis, ke oreksino kontribuas al aktivigo de neŭronoj en la VTA (Korotkova et al., 2003; Borgland et al., 2006; Narita et al., 2006; Vittoz et al., 2008). Tamen, oreksaj ĉelaj lezoj ne blokis neŭralan aktivadon en la VTA aŭ en iuj aliaj rekompenc-rilataj cerbaj regionoj analizitaj, malgraŭ la ĉeesto de orekso-imunoreaktivaj fibroj en proksima proksimeco al la aktivigitaj neŭronoj en virŝafaj viroj. Tiel, apareado de induktita neŭra aktivado en tiuj cerbaj regionoj ne ŝajnas dependi de oreksa agado.

Iom neatendita trovo de la nuna studo estis la efiko de lezoj de oreksino sur faciligo de ekado de seksa konduto en seksaj naivuloj, sed ne spertaj bestoj. Ĉi tio montriĝis, ke ĝi rilatas al redukto de angor-similaj kondutoj. Tial la efikoj de oreksaj lezoj sur seksa instigo kaj agado povas esti malĉefaj de ĝiaj efikoj al angoro kaj ekscitiĝo. Efektive antaŭaj studoj sugestis rolon por oreksino en angoro kiel ICV-infuzaĵo de oreksino-A malpliigis tempon sur la malfermitaj brakoj de EPM en musoj (Suzuki et al., 2005). Infuzado de oreksino-A en la paraventricula kerno de la talamo de viraj ratoj malpliigis tempon pasigitan en la centra areo de malferma kampoĉambro kaj malpliigis novan objektan esploradon, indikante ke oksino povus esti implikita en la generado de angoro-simila konduto (Li et al., 2010). Krome, regantaj masklaj ratoj, kiuj montras pliigitan riskon sur la EPM, pliigis nivelojn de ORX1-mRNA en la mPFC (Davis et al., 2009). Oreksino ankaŭ pruviĝis ŝanĝi la respondojn al streĉo (Ida et al., 1999; Ida et al., 2000), kaj stimulo de orexinaj riceviloj pliigas liberigon de kortikotrofina liberiga faktoro (Al-Barazanji et al., 2001; Singareddy et al., 2006), kortikosterono (Ida et al., 2000; Kuru et al., 2000) kaj adrenocorticotropa hormono (Kuru et al., 2000). Orexinaj antagonistoj estas nuntempe en klinikaj provoj por kuracado de sendormeco, malordo kiu ofte komorbas kun maltrankvilaj malordoj (Sullivan kaj Neria, 2009), kaj estas hipoteze, ke orexinaj antagonistoj povus esti uzataj por trakti angoro-malordojn (Mathew et al., 2008). Konsiderante la kreskantan korpon de indikoj pri oreksino en angoro kaj ekscitiĝo, ĝi ŝajnas ke oreksaj lezoj povas faciligi la komencon de seksa konduto en naivaj viroj reduktante angul-similajn respondojn ligitajn kun la enkonduko de nova stimulo, nome la ino.

Signifa aktivigo de oreksaj neŭronoj estis vidita post seksa ekscitiĝo kaj seksa konduto en ambaŭ sekse naive kaj spertaj bestoj en kaj la PFA-DMH kaj LHA, kun 60-80% kaj 14-33% de oksoksinaj ĉeloj esprimantaj cFos, respektive. Ekzistas korpa indico subtenanta dikotomion en orexin-neuronal funkcio ene de la oksinela ĉela populacio, kun la PFA-DMH kritike implikita en ekscitiĝo kaj la LHA estante kritika por rekompencaj kondutoj (Harris et al., 2005; Harris kaj Aston-Jones, 2006, Aston-Jones, 2009a). Tial, aktivigo de la PFA-DMH oreksinaj ĉeloj de la ina stimulo subtenas la hipotezon, ke oreksino estas aktivigita de kaj ekscesa por ekscitiĝo, inkluzive de seksa ekscitiĝo ĉe naivaj kaj spertaj viroj, kaj angoro ligita kun la nova ina stimulo ĉe naivuloj. Tamen, PFA-DMH-ĉeloj estis aktivigitaj al similaj niveloj sendepende de la sperto de la viroj kaj la hormona statuso de la inoj, sugestante, ke la PFA-DMH-ĉeloj estis aktivigitaj dum ĝenerala ekscitiĝo kaj ne specife de seksa ekscitiĝo. Plie, niaj studoj ne plene subtenas la ekziston de tute diotoma oreksa ĉela populacio ĉar estis signifa aktivigo de la LHA post eksponiĝo al ĉiuj parametroj de seksa ekscitiĝo kaj agado, sendepende de ĉu la kondutoj estis asociitaj kun rekompenco. Tiel, spertaj maskloj elmontritaj al anesteza ino montris egalajn nivelojn de oreksinĉela aktivado en LHA kompare al spertaj viroj, kiuj kopulis al ejakulado. Tamen nur ĉi-lasta grupo formos kondiĉitan lokan preferon por pariĝo (Tenk et al, 2009); sugestante, ke kopulacio al ejakulado estas pli rekompenca ol aliaj elementoj de pariĝo. La nuna studo ne specife testis la rolon de oreksino en seksa rekompenco; tial necesas estontaj studoj por trakti tiun demandon.

Resume, la rezultoj de ĉi tiuj studoj pruvas, ke oreksino ne estas kritika por seksa agado aŭ instigo. Anstataŭe, oreksaj ĉelaj lezoj pruviĝis redukti maltrankvilon, sugestante ke endogena oreksino estas implikita en kreskanta angoro. Plie, forigo de oreksino rezultigis faciligon de iniciatado de seksa konduto ĉe virseksaj naivuloj, sugestante ke endogena oreksino povus malhelpi komencon de pariĝo, eble pliigante maltrankvilon kiel respondon al la nova stimulo, nome la ino. Ĉi tiuj trovoj plue ellasas la neŭrajn cirkvitojn implikitajn en seksa agado kaj angoro, kaj aldonas al kreskanta korpo de literaturo pri la rolo de oreksino en mediacio de ekscitiĝo kaj angoro.

Dankoj

Ĉi tiu esplorado estis subtenita de subvencioj de la Nacia Institutoj pri Sano (R01 DA014591), Kanadaj Institutoj de Sano-Esploro (RN 014705), kaj Nacia Scienco kaj Inĝenieria Esplora Konsilio de Kanado (Discovery Grant (341710)) al LMC.

Piednotoj

Malgarantio de Eldonisto: Ĉi tio estas PDF-dosiero de unita manuskripto, kiu estis akceptita por publikigado. Kiel servo al niaj klientoj ni provizas ĉi tiun fruan version de la manuskripto. La manuskripto suferas kopion, kompostadon kaj revizion de la rezultanta pruvo antaŭ ol ĝi estas publikigita en ĝia fina maniero. Bonvolu noti, ke dum la procezo de produktado povas malkovri erarojn, kiuj povus influi la enhavon, kaj ĉiujn laŭleĝajn malvirtojn, kiuj aplikeblas al la ĵurnalo.

Referencoj

  1. Agmo A. Virina rato seksa konduto. Brain Res Brain Res Protok. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Al-Barazanji KA, Wilson S, Baker J, Jessop DS, Harbuz MS. Centra oreksino-A aktivigas hipotalamo-pituitaria-adrenan akson kaj stimulas hipotalamikan kortikotropinan liberigan faktoron kaj arginajn vasopresinajn neŭronojn en konsciaj ratoj. J Neuroendocrinol. 2001; 13: 421 – 424. [PubMed]
  3. Aston-Jones G, Smith RJ, Moorman DE, Richardson KA. Rolo de flankaj hipotalamaj oreksaj neŭronoj en rekompenca prilaborado kaj toksomanio. Neŭrofarmakologio. 2009a; 56 Suppl 1: 112 – 121. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  4. Aston-Jones G, Smith RJ, Sartor GC, Moorman DE, Massi L, Tahsili-Fahadan P, Richardson KA. Flankaj hipotalamaj oreksaj / hipokretinaj neŭronoj: Rolo en rekompenco kaj toksomanio. Cerbo Res. 2009b; 1314: 74 – 90. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  5. Bai YJ, Li YH, Zheng XG, Han J, Yang XY, Sui N. Orexin A mildigas senkondiĉan seksan instigon ĉe viraj ratoj. Farmacol Biochem Behav. 2009; 91: 581 – 589. [PubMed]
  6. Bäckberg M, Hervieu G, Wilson S, Meister B. Orexin-ricevilo-1 (OX-R1) imunoreaktiveco en kemie identigitaj neŭronoj de la hipotalamo: fokuso sur orekso celoj implikitaj en kontrolo de manĝaĵo kaj akva konsumado. Eur J. Neurosci. 2002; 15: 315 – 328. [PubMed]
  7. Baldo BA, Daniel RA, Berridge CW, Kelley AE. Supertaksaj distribuaĵoj de oreksino / hipokretino- kaj dopamina-beta-hidroksilase imunoreaktivaj fibroj en rato-cerbaj regionoj mediaciaj ekscitiĝo, instigo kaj streso. J Comp Neurol. 2003; 464: 220 – 237. [PubMed]
  8. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksa konduto kaj seks-rilataj mediaj agoj aktivigas la mesolimbian sistemon en masklaj ratoj. Neuropsychofarmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  9. Benoit SC, Tracy AL, Davis JF, Choi D, Clegg DJ. Novaj funkcioj de oreksigenaj hipotalamaj peptidoj: de genoj ĝis konduto. Nutrado. 2008; 24: 843 – 847. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  10. Borgland SL, Taha SASF, Kampoj HL, Bonci A. Oreksino A en la VTA estas maltrankviliga por induktado de sinaptika plasteco kaj kondutisma sentivigo al kokaino. Neŭrono. 2006; 49 (4): 589 – 601. [PubMed]
  11. Boutrel B, Cannella N, de Lecea L. La rolo de hipokretino en veturado de ekscitiĝo kaj celoj. Cerbo Res. 2009 [PMC libera artikolo] [PubMed]
  12. Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF, de Lecea L. Rolo por hipokretino en mediacio de streĉ-induktita restarigo de koka-serĉanta konduto. Proc Natl Acad Sci Usono A. 2005; 102: 19168 – 19173. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  13. Broberger C, De Lecea L, Sutcliffe JG, Hokfelt T. Hypocretin / orexin- kaj melanin-koncentriĝantaj hormon-esprimantaj ĉeloj formas apartajn populaciojn en la flankaj lateralaj hipotalamoj: rilato al la neuropeptida Y kaj agouti-rilataj proteinaj sistemoj. J Comp Neurol. 1998; 402: 460 – 474. [PubMed]
  14. Carter ME, Borg JS, de Lecea L. La cerbaj hipokretinoj kaj iliaj riceviloj: mediatoj de alostata ekscitiĝo. Curr Opin Pharmacol. 2009; 9: 39 – 45. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  15. Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, Richardson J. A., Williams SC, Xiong Y, Kisanuki Y, Fitch TE, Nakazato M, Hammer RE, Saper CB, Yanagisawa M. Narcolepsio en orekso knokaŭta muso : molekula genetiko de dormregulado. Ĉelo. 1999; 98: 437 – 451. [PubMed]
  16. Chen CT, Dun SL, Kwok EH, Dun NJ, Chang JK. Orexin-simila imunoreaktiveco en la cerbo de rato. Neurosci Lett. 1999; 260: 161 – 164. [PubMed]
  17. Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. La rolo de oreksino-A en manĝaĵa instigo, rekompenco-nutra konduto kaj manĝaĵo-induktita neuronal aktivado en ratoj. Neŭroscienco. 2010; 167: 11 – 20. [PubMed]
  18. Davis JF, Krause EG, Melhorn SJ, Sakai RR, Benoit SC. Dominantaj ratoj estas naturaj riskoj kaj montras pliigitan motivon por manĝaĵa rekompenco. Neŭroscienco. 2009; 162: 23 – 30. [PubMed]
  19. de Lecea L, Jones BE, Boutrel B, Borgland SL, Nishino S, Bubser M, DiLeone R. toksomanio kaj ekscitiĝo: alternativaj roloj de hipotalamaj peptidoj. J. Neurosci. 2006; 26 (41): 10372 – 10375. [PubMed]
  20. de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, Fukuhara C, Battenberg EL, Gautvik VT, Bartlett FS, 2nd, Frankel WN, van den Pol AN, Bloom FE, Gautvik KM, Sutcliffe JG. La hipokretinoj: hipotalamo-specifaj peptidoj kun neŭro-ekscitita agado. Proc Natl Acad Sci Usono A. 1998; 95: 322 – 327. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  21. Dewsbury DA. Kopulativa konduto de ratoj (Rattus norvegicus) kiel funkcio de antaŭa kopulacia sperto. Anim Behav. 1969; 17: 217 – 223. [PubMed]
  22. Fadel J, Deutch AY. Anatomiaj substratoj de orekso-dopamina interagoj: flankaj hipotalamaj projekcioj al la ventra tegmentala areo. Neŭroscienco. 2002; 111: 379 – 387. [PubMed]
  23. Frederick-Duus D, Guyton MF, Fadel J. Manĝaĵo-generita pliiĝo en kortika acetilkolina liberigo postulas orexinan transdonon. Neŭroscienco. 2007; 149: 499 – 507. [PubMed]
  24. Furlong TM, Carrive P. Neŭrotoksaj lezoj centritaj sur la perifornia hipotalamo abolicias la kardiovaskulajn kaj kondutajn respondojn de kondiĉita timo al kunteksto sed ne de bremsado. Cerbo Res. 2007; 1128: 107 – 119. [PubMed]
  25. Furlong TM, Vianna DM, Liu L, Carrive P. Hipocretino / oreksino kontribuas al la esprimo de iuj, sed ne ĉiuj formoj de streĉiteco kaj ekscitiĝo. Eur J Neurosci. 2009; 8: 1603 – 1614. [PubMed]
  26. Gerashchenko D, Kohls MD, Greco M, Waleh NS, Salin-Pascual R, Kilduff TS, Lappi DA, Shiromani PJ. Hipocretin-2-saporin-lezoj de la flanka hipotalamo produktas narcoleptik-similan dorman konduton en la rato. J Neŭroscio. 2001; 21: 7273 – 7283. [PubMed]
  27. Gulia KK, Mallick HN, Kumar VM. Oreka A (hipokretina-1) apliko ĉe la media preoptika areo potencas viran seksan konduton en ratoj. Neŭroscienco. 2003; 116: 921 – 923. [PubMed]
  28. Hagan JJ, Leslie RA, Patel S, Evans ML, Wattam TA, Holmes S, Benham CD, Taylor SG, Routledge C, Hemmati P, Munton RP, Ashmeade TE, Shah AS, Hatcher JP, Hatcher PD, Jones DN, Smith MI , Piper DC, Hunter AJ, Porter RA, Upton N. Orexin A aktivigas pafon de la locus coeruleus kaj pliigas ekscitiĝon en la rato. Proc Natl Acad Sci Usono A. 1999; 96: 10911 – 10916. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  29. Harris GC, Aston-Jones G. Ekscito kaj rekompenco: dikotomo en oreksa funkcio. Tendencoj Neurosci. 2006: 29: 571-577. [PubMed]
  30. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Rolo por flankaj hipotalamaj oreksaj neŭronoj en rekompenco. Naturo. 2005; 437 (7058): 556 – 559. [PubMed]
  31. Horvath TL, Peyron C, Diano S, Ivanov A, Aston-Jones G, Kilduff TS, van Den Pol AN. Hipokretina (oreksina) aktivigo kaj sinaptika innervado de la noradrenergia sistemo locus coeruleus. J Comp Neurol. 1999; 415: 145 – 159. [PubMed]
  32. Ida T, Nakahara K, Katayama T, Murakami N, Nakazato M. Efekto de laterala cerebro-ventra injekto de la apetito-stimulanta neuropeptido, oreksino kaj neuropeptida Y, sur la diversaj kondutaj agadoj de ratoj. Cerbo Res. 1999; 821: 526 – 529. [PubMed]
  33. Ida T, Nakahara K, Murakami T, Hanada R, Nakazato M, Murakami N. Ebla implikiĝo de oreksino en la streĉa reago ĉe ratoj. Komunumo de Biochem Biophys Res. 2000; 270: 318 – 323. [PubMed]
  34. Korotkova TM, Sergeeva OA, Eriksson KS, Haas HL, Brown RE. Ekscitiĝo de ventralaj tegmentaj areoj dopaminergikaj kaj nekontaminaj neŭronoj de oreksinoj / hipokretinoj. J Neŭroscio. 2003; 23 (1): 7 – 11. [PubMed]
  35. Kuru M, Ueta Y, Serino R, Nakazato M, Yamamoto Y, Shibuya I, Yamashita H. Centre administrita oreksino / hipokretino aktivigas HPA-akson en ratoj. Neuroreporto. 2000; 11: 1977 – 1980. [PubMed]
  36. Li Y, Li S, Wei C, Wang H, Sui N, Kirouac GJ. Ŝanĝoj en kortuŝa konduto produktitaj de orexinaj microinjektoj en la paraventricula kerno de la thalamo. Farmacol Biochem Behav. 2010; 95: 121 – 128. [PubMed]
  37. Lin L, Faraco J, Li R, Kadotani H, Rogers W, Lin X, Qiu X, de Jong PJ, Nishino S, Mignot E. La sendorma kanina narkolepsia kanino estas kaŭzita de mutacio en la receptoro de hipokretina (oreksino) geno 2 . Ĉelo. 1999; 98: 365 – 376. [PubMed]
  38. Lopez HH, Olster DH, Ettenberg A. Seksa instigo en la vira rato: la rolo de primaraj stimuloj kaj kopulacia sperto. Horma Konduto. 1999; 36: 176 – 185. [PubMed]
  39. Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, Elmquist JK. Diferenciala esprimo de riceviloj de oreksino 1 kaj 2 en la cerbo de rato. J Comp Neurol. 2001; 435: 6 – 25. [PubMed]
  40. Martin G, Fabre V, Siggins GR, de Lecea L. Interago de la hipokretinoj kun neurotransmisiloj en la kerno accumbens. Regule Pept. 2002; 104: 111 – 117. [PubMed]
  41. Mathew SJ, Prezo RB, Charney DS. Lastatempaj progresoj en la neurobiologio de maltrankvilaj malordoj: implicoj por novaj terapeŭtoj. Am J Med Genet C Semin Med Genet. 2008; 148C: 89 – 98. [PubMed]
  42. Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Rolo por hipokretino (oreksino) en vira seksa konduto. J Neŭroscio. 2007; 27: 2837 – 2845. [PubMed]
  43. Nair SG, Golden SA, Shaham Y. Diferencaj efikoj de la hipokretina 1-receptoro-antagonisto SB 334867 pri alt-grasa manĝaĵa mem-administrado kaj restarigo de manĝaĵoj serĉantaj ratojn. Br J Pharmacol. 2008; 154: 406 – 416. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  44. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Rekta implikiĝo de oreksinergiaj sistemoj en la aktivigo de la mezolimbia dopamina vojo kaj rilataj kondutoj induktitaj de morfino. J Neŭroscio. 2006; 26: 398 – 405. [PubMed]
  45. Nishino S, Ripley B, Overeem S, Lammers GJ, Mignot E. Hypocretin (orexin) manko en homa narkolepsio. Lanceto. 2000; 355: 39 – 40. [PubMed]
  46. Paxinos G, Watson C. La Rato-Cerbo en Stereotoksaj Koordinatoj. San Diego, CA: Akademia Gazetaro; 1998
  47. Peyron C, Faraco J, Rogers W, Ripley B, Overeem S, Charnay Y, Nevsimalova S, Aldrich M, Reynolds D, Albin R, Li R, Hungs M, Pedrazzoli M, Padigaru M, Kucherlapati M, Fan J, Maki R , Lammers GJ, Bouras C, Kucherlapati R, Nishino S, Mignot E. Mutacio en kazo de frua apero narkolepsia kaj ĝeneraligita foresto de hipokretinaj peptidoj en homaj narcoleptikaj cerboj. Nat Med. 2000; 6: 991 – 997. [PubMed]
  48. Peyron C, Tighe DK, van den Pol, de Lecea L, Heller HC, Sutcliffe JG, Kilduff TS. Neŭronoj enhavantaj hipokretinon (oreksino) projektas al multnombraj sistemoj neuronales. J Neurosci. 1998: 18: 9996-10015. [PubMed]
  49. Sakurai T. Roloj de riceksinoj de oreksinoj kaj oreksinoj en centra regulado de nutra konduto kaj energia homeostazo. CNS-Neurol-Malordo-Drogaj Celoj. 2006; 5: 313 – 325. [PubMed]
  50. Sakurai T. La neŭra cirkvito de oreksino (hipokretino): konservado de dormo kaj maldormo. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 171 – 181. [PubMed]
  51. Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​Williams SC, Richardson JA, Kozlowski GP, Wilson S, Arch JR, Buckingham RE, Haynes AC, Carr SA, Annan RS, McNulty DE, Liu WS , Terrett JA, Elshourbagy NA, Bergsma DJ, Yanagisawa M. Oreksinoj kaj oreksaj riceviloj: familio de hipotalamaj neuropeptidoj kaj proteinoj G-kuplitaj de proteinoj, kiuj reguligas manĝan konduton. Ĉelo. 1998; 92: 573 – 585. [PubMed]
  52. Satoh S, Matsumura H, Fujioka A, Nakajima T, Kanbayashi T, Nishino S, Shigeyoshi Y, Yoneda H. FOS-esprimo en orexinaj neŭronoj post muskimol-perfuzo de preoptika areo. Neuroreporto. 2004; 15: 1127 – 1131. [PubMed]
  53. Siegel JM. Narcolepsio: ŝlosila rolo por hipokretinoj (oreksinoj) Ĉelo. 1999; 98: 409 – 412. [PubMed]
  54. Singareddy R, Uhde T, Komisaroj R. Diferencialaj efikoj de hipokretinoj sur bruo-sole kontraŭ potencaj komencaj respondoj. Physiol Behav. 2006; 89: 650 – 655. [PubMed]
  55. Smith RJ, Vidu RE, Aston-Jones G. Orexin / hipokretina signalado ĉe la oksinina 1-ricevilo reguligas cue-provokitajn kokain-serĉantajn. Eur J Neurosci. 2009; 30: 493 – 503. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  56. Salomono A, De Fanti BA, Martinez JA. Periferia grenlinio interagas kun oreksinaj neŭronoj en glukoza signalado. Regule Pept. 2007; 144: 17 – 24. [PubMed]
  57. Sullivan GM, Neria Y. Farmakoterapio en post-traŭmata streĉa malordo: evidenteco de hazardaj kontrolitaj provoj. Curr Opin Invest Drugs. 2009; 10: 35 – 45. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  58. Suzuki M, Beuckmann CT, Shikata K, Ogura H, Sawai T. Orexin-A (hipokretino-1) estas eble implikita en generado de angoro-simila konduto. Cerbo Res. 2005; 1044: 116 – 121. [PubMed]
  59. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Kruĉoj KK, Coolen LM. Seksa rekompenco en masklaj ratoj: efikoj de seksa sperto pri kondiĉitaj lokoj preferataj de ejakulado kaj interrompo. Horm Behav. 2009: 55: 93-97. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  60. Thannickal TC, Moore RY, Nienhuis R, Ramanathan L, Gulyani S, Aldrich M, Cornford M, Siegel JM. Reduktita nombro de hipokretinaj neŭronoj en homa narkolepsio. Neŭrono. 2000; 27: 469 – 474. [PubMed]
  61. Thorpe AJ, Cleary JP, Levine AS, Kotz CM. Centre administrita oreksino A pliigas motivon por dolĉaj buletoj en ratoj. Psikofarmakologio (Berl) 2005; 182: 75 – 83. [PubMed]
  62. Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Dissendo de mRNA de oreksin-ricevilo en la cerbo de rato. FEBS Lett. 1998; 438: 71 – 75. [PubMed]
  63. Vittoz NM, Schmeichel B, Berridge CW. Hipokretino / orekso prefere aktivigas kaŭdomajn ventrajn tegmentajn areojn de dopaminaj neŭronoj. Eur J Neurosci. 2008; 28: 1629 – 1640. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  64. Volgin DV, Cigno J, Kubin L. Ununura ĉela RT-PCR-gena esprimo profilanta akre. disaj kaj imunokitokemie identigitaj centraj neŭronoj. J. Neurosci-Metodoj. 2004; 136: 229 – 236. [PubMed]