Proc Natl Acad Sci Usono A. Jan 19, 2010; 107 (3): 1217 – 1222.
Eldonita rete Dec 29, 2009. doi: 10.1073 / pnas.0911998107
PMCID: PMC2824263
Neurokienco
Yan Liu,a,b Brandon J. Aragona,c Kimberly A. Young,a,b David M. Dietz,b,d,e Mohamed Kabbaj,b,d Michelle Mazei-Robison,e Eric J. Nestler,e kaj Zuoxin Wanga,b,1
Ĉi tiu artikolo estis citita de aliaj artikoloj en PMC.
abstrakta
La praa volvaĵo (Microtus ochrogaster) estas speco de ronĝuloj socie monogama, kiu formas paron ligojn post pariĝo, konduto en kiu centra dopamino (DA) estis implikita. Ĉi tie, ni uzis masklajn praderajn fojnojn por ekzameni la efikojn de drogekspozicio sur paro-ligado kaj rilataj neŭra cirkvitoj. En nia unua eksperimento, amfetamina (AMPH) instigita konduto estis ekzamenita uzante kondiĉitan lokan preferon (CPP) paradigmo kaj estis montrita mediaciita per aktivigo de D1-similaj DA-riceviloj. Tuj poste, ni ekzamenis la efikojn de ripetita AMPH-ekspozicio sur paro-ligado. Taktaj kaj salaj pretraktitaj kontrolaj viroj montris matĉajn induktitajn partnerajn preferojn, dum viroj pretenditaj kun AMPH ĉe la dozoj efikaj por indukti CPP malsukcesis montri matĉajn induktitajn partnerojn. Tia AMPH-kuracado ankaŭ plibonigis D1, sed ne D2, DA-ricevilan esprimon en la kerno accumbens (NAcc). Plue, farmakologia blokado de D1-similaj DA-riceviloj en la NAcc-savitaj induktitaj partneroj-preferoj en AMPH-traktitaj viroj. Kune, niaj datumoj indikas, ke ripetita AMPH-ekspozicio eble mallarĝigas la kondutan repertuaron de viraj pradaj volvaĵoj per specifa mekanismo de DA-ricevilo en la NAcc, rezultigante la difekton de formado de paraj ligoj.
Estas vaste akceptite, ke instigaj kaj emociaj kondutoj, kiuj antaŭenigas taŭgecon, estas reguligitaj per cerbaj rekompencaj cirkvitoj, inkluzive de la mezolimbia dopamina (DA) sistemo (1, 2). Kvankam ĉi tiu sistemo ofte implikas en konsumado de manĝaĵoj kaj seksa konduto (3, 4), ĝi ankaŭ estis implikita en aliaj naturaj motivitaj kondutoj, kiel socia ludado inter junuloj kaj socia ligado inter gepatroj kaj idaro (5-9). Ofte subreprezentataj en esplorado estas la sociaj ligoj formitaj inter plenkreskaj samideanoj, t.e., paraj interligoj. Lastatempa enketo uzanta socian monogaman ronĝulan specion, la pradera volupo (Microtus ochrogaster) (10-12), indiku, ke granda parto de la neŭra regulado sub la formado kaj bontenado de duoblaj ligoj okazas ene de la kerno accumbens (NAcc) (13-15) - mesolimbia cerba regiono kritika por mediacii motivajn kondutojn (1, 2, 16).
Kvankam instiga cirkvitado evoluis por antaŭenigi taŭgan plibonigan konduton kiel nutrado, pariĝo kaj socia ligado (1, 17), ĝi estas vundebla al artefarita uzado per drogoj de misuzo (8). Ekzemple, administrado de psikostimulaj drogoj de misuzo, kiel kokaino kaj amfetamino (AMPH), rezultigas konstantajn ŝanĝojn de mezolimbic DA-agado (18, 19). La intensa efiko de ĉi tiuj cirkvitoj de ĉi tiuj kaj aliaj toksomaniuloj sugestis malpliigi la perceptitan valoron de naturaj stimuloj (20), inkluzive tiujn de socia naturo (8). Kvankam estas sciate, ke drogemuloj montras socian konduton difektita (21), la neŭra regulado de interagoj inter drogsperto kaj socia korinklino estas malbone komprenita. Ĉi tio estas ĉar parte tiaj interagoj malfacilas modeli en tradiciaj laboratoriaj ronĝuloj, kiuj ne montras socian ligon inter plenkreskaj specioj.
La neurobiologio de tia socia korinklino, specife parigita ligado inter plenkreskuloj, estis amplekse studita en la praa volvaĵo (10-12), kaj lastatempe, ĉi tiu specio estis establita kiel farebla modelo por ekzameni la motivan valoron de AMPH (22). Plie, ambaŭ paraj ligaj formadoj kaj AMPH-plifortigo estas mediaciitaj, almenaŭ parte, per DA-transdono ene de la NAcc (14, 15, 23). Tial la nuna studo uzis la praarbitan modelon por establi kondutan analizon por studi la efikojn de drogekspozicio sur socia ligado kaj enfokusigis la NAcc DA signalan sistemon por malkaŝi neŭra mekanismo sub ĉi tiuj kondutaj efikoj.
rezultoj
AMPH-Induktita Kondiĉa Loko-Preferenco (CPP) estas Mediatita de DA en Receptor-Specifa Maniero.
La formado de CPP estis difinita per signifa kresko de tempo pasigita en la AMPH-parigita kaĝo dum la posttesto, post 3 tagoj de AMPH-kondiĉado, relative al la pretest. Nek salaj injektoj nek salo enhavanta la du plej malaltajn dozon de AMPH-testitaj (0.1 kaj 0.5 mg / kg) ŝanĝis preferojn de kaĝo (Figo. 1A). Tamen, viroj kondiĉitaj kun pli altaj dozoj de AMPH, inkluzive de 1.0 (t = 2.87, P <0.01), 3.0 (t = 3.63, P <0.01), aŭ 5.0 mg / kg (t = 3.03, P <0.01), montrita CPP (Figo. 1A).
Ĉar AMPH signife pliigas DA-neurotransmision en praaj vulpoj (24), kaj DA mediacias AMPH-plifortigon en aliaj specioj (23), ni poste ekzamenis DA-ricevilon (DAR) reguladon de AMPH-induktita CPP en viraj praaj voloj. Temoj estis pretestitaj en la paradigma CPP, traktataj per salo aŭ salo enhavanta malsamajn dozojn de la neelektita DAR-antagonisto (haloperidol) antaŭ injektoj de AMPH (1.0 mg / kg) dum 3-tagoj de kondiĉado, kaj poste testis CPP en posttesto. Temoj traktitaj kun salaĵo (t = 2.69, P <0.01) aŭ salo enhavanta la du plej malaltajn dozojn de haloperidolo (0.1 mg / kg; t = 3.62, P <0.01; 1.0 mg / kg; t = 3.89, P <0.01) antaŭ AMPH-kondiĉado montris AMPH-induktitan CPP, dum haloperidolo ĉe 5.0 mg / kg blokis AMPH-induktitan CPP, montrante la partoprenon de DARs en la kondutaj efikoj de AMPH (Figo. 1B). Por determini kiun DAR-subtipon medias pri AMPH-induktita CPP, ni poste administris aŭ D1-similan specifan antagoniston (SCH23390) aŭ D2-similan specifan antagoniston (eticlopride) antaŭ AMPH-injektoj dum kondiĉado. D2-simila antagonismo ne blokis AMPH-induktitan CPP (t = 3.15, P <0.01 por 0.5 mg / kg kaj t = 2.60, P <0.05 por 5.0 mg / kg eticlopride) sed blokado de D1-similaj riceviloj forigis AMPH-induktitan CPP (Figo. 1B), pruvante, ke AMPH-induktita CPP estas mediaciita per aktivigo de D1-similaj, sed ne D2-similaj, riceviloj en viraj praaj voloj.
AMPH Experience spertas pariĝadon-induktitan partnerecan formiĝon.
Kvankam AMPH-induktita CPP postulis aktivigon de D1-similaj riceviloj (Figo. 1B), ni antaŭe montris, ke aktivigo de D1-similaj riceviloj malhelpas formi paron-ligitan formadon de paroj (14). Tial ni hipotezis, ke pretraktado de AMPH interligus pariĝon de induktitaj paroj en viraj praaj volvoj. Maskloj estis dividitaj en kvar grupojn, kiuj ricevis neniujn injektojn (sendifektajn), salajn injektojn, aŭ injektojn de 1.0 aŭ 5.0 mg / kg AMPH dum 3-tagoj (paradigma injekto sufiĉa por indukti CPP). En la kvara tago, ĉiuj viroj estis parigitaj kun sekse akceptebla ino por 24 h kaj tiam testitaj pri partiaj preferoj. Konforma al antaŭaj studoj (14, 25-27), nerompitaj maskloj kaj maskloj kiuj ricevis salajn injektojn dum 3 tagoj antaŭ pariĝo montris partnerojn preferitajn de pariĝo (sendifektaj viroj; t = 3.05, P <0.01, salo injektis virojn; t = 3.21, P <0.01; Figo. 2A). Tamen, viroj, kiuj estis pretratigitaj kun ĉiu dozo de AMPH dum 3 tagoj antaŭ la pariĝo, ne povis montri partnerajn preferojn (Figo. 2A). Grave, antaŭtraktado de AMPH ne influis pariĝon oftecon dum la kunvivadperiodo (F(3, 26) = 0.26, P = 0.85; Figo. 2B) aŭ lokomotora agado dum la partnereca testo (F(3, 26)= 2.34, P = 0.10; Figo. 2C), indikante ke AMPH rekte enmiksiĝis en pariĝ-induktitaj partneraj preferoj.
AMPH Experience spertas D1-Receptorojn en la NAcc.
Konsiderante, ke AMPH-antaŭvidado malplibonigis partnerajn preferojn kaj ambaŭ AMP-induktitajn CPP (vidu supre) kaj duobligadon (14) estas reguligitaj per NAcc DA, ni hipotezis, ke AMPH signife ŝanĝus mezolimbajn DA-cirkvitojn en viraj praaj volvoj. Cerboj de subjektoj de la menciita konduta eksperimento estis prilaboritaj por in situ-etikedado de DA-markaj ARNm. Maskloj traktitaj kun AMPH (1.0 mg / kg) montris signifan kreskon en D1-receptoro (D1R; t = 3.06, P <0.01), sed ne D2-receptoro (D2R), mRNA-markado ene de la NAcc, kompare al maskloj ricevantaj salan antaŭtraktadon (Figo. 3 A-C). Tamen, neniuj grupaj diferencoj estis trovitaj en la denseco de mRNA-markado por tirosina hidroksilazo (TH), DA-transportilo (DAT) aŭ D2Rs en la ventra tegmenta areo (VTA) - la cerba regiono, kiu provizas la primaran dopaminergian enigon al la NAcc (Figo. 3 D-G). Pliigita esprimo de D1Roj en la NAcc estis plue konfirmita de Western blotting (t = 1.90, P <0.05; Figo. 3 H kaj I). Kune, ĉi tiuj datumoj indikas, ke AMPH-ekspozicio havas efikojn de ricevilo kaj retejo sur la mezolimbika DA-sistemo de viraj praaj voloj - pliigante la nivelon de D1Rs en la NAcc.
D1 Receptoroj en la NAcc Mediateca AMPH-Malfaro de Partneraj Preferoj.
Ni antaŭe montris, ke ĉe viraj praderaj vulpoj, aktivigo de D1R-oj ene de la NAcc malhelpis partian formadon de partneroj (14), kaj la nuna studo pruvas, ke AMPH-ekspozicio reguligas D1Rojn en la NAcc (Figo. 3). Tial ni testis la hipotezon, ke AMPH-induktita difekto de partneraj preferoj estas mediaciita de D1R-oj ene de la NAcc. Maskloj ricevis stereotaksan kanuladon celitan bilateralmente al la ŝelo de NAcc (Figo. 4A). Artefarita cerebrospinal fluido (CSF) sole aŭ CSF enhavanta malsamajn dozojn de la D1-simila ricevilo-antagonisto SCH23390 estis injektita en la NAcc antaŭ AMPH-injektoj (1.0 mg / kg) dum 3 tagoj de kondiĉado. Poste, subjektoj estis parigitaj kun ino por 24 h kaj poste testis pri partiaj preferoj. Kiel kun la eksperimento supre (Figo. 2), AMPH-ekspozicio malhelpis pariĝon-induktitan partneran preferon en viroj kiuj ricevis intra-NAcc-injektojn de CSF aŭ malaltan dozon de SCH23390 (Figo. 4B). Tamen, viroj, kiuj estis injektitaj kun alta dozo de SCH23390 (100 ng / kg), montris partnerajn preferojn (t = 2.55, P <0.05), indikante ke D1R-blokado en la NAcc forigis la AMPH-induktitan difekton de kunula preferata formado (Figo. 4B). Neniuj grupaj diferencoj estis trovitaj en pariĝa ofteco dum la kunvivado aŭ lokomotora agado dum la partnereca testo.
diskuto
En ĉi tiu studo, ni replikas nian antaŭan trovon, ke AMPH-ekspozicio induktas CPP en viraj pradkaj volvaĵoj (22) kaj pruvas, ke D1R-aktivigo en la NAcc estas necesa por ĉi tiu konduto, rezulto konforma al studoj en aliaj ronĝuloj (28). Ĉi tiu trovo, kune kun pli fruaj studoj, sugestas, ke apartaj DAergaj mekanismoj en la NAcc reguligas kondutojn de AMPH- kaj partner-motivitaj: AMPH-motivita konduto (CPP) estas mediata de D1R, dum partneroj-motivita konduto (partneraj preferoj) estas faciligita de D2R aktivigo kaj malhelpita de D1R-aktivigo ene de la NAcc (13-15). [Gravas rimarki, ke en la NAcc, D2R-aktivigo mediacias drog-induktitan CPP sub iuj kondiĉoj (29) kaj D1R-aktivado estas implikita en aliaj socie motivitaj kondutoj, kiel tiuj direktitaj al idaro (7, 30)].
Diferenca DAergic-reguligo de CPP kaj partnera prefero-formado estas plej verŝajne atingita per diferencoj en la grado de stimula elvokita DA-koncentriĝo aktiviganta malsamajn DAR-subtipojn. Pro diferencoj en ligaj afinecoj, fortaj altoj en DA-koncentriĝo estas postulataj por aktivigi D1Rojn de malalta afineco, dum modestaj pliigoj en DA-koncentriĝoj prefere aktivigas D2Rojn de alta afineco (31). En praderaj volvaĵoj, AMPH elvokas multe pli grandajn kreskojn de DA-koncentriĝo (24) kompare kun tiu elvokita per pariĝo (15, 25). Ĉi tiuj datumoj sugestas, ke relative modestaj kreskoj de DA-koncentriĝo dum sociaj interagoj (15, 25) permesas specifan aktivigon de D2R-oj de alta afineco kaj tiel faciligas formadon de paraj ligoj. Al la inversa, fortaj kreskoj en DA-koncentriĝo post administrado de AMPH estas probable sufiĉaj por aktivigi D1Rojn de malalta afineco, tiel faciligante CPP-induktita de AMPH.
Specifaj kondutregulaj reguloj de DA estas konformaj al eksterĉelaj elektrofisiologiaj studoj en libere moviĝantaj ratoj montrantaj ke drogaj kaj naturaj stimuloj estas prilaboritaj de apartaj neŭronaj populacioj ene de la NAcc (32). Kvankam tiaj elektrofisiologiaj studoj estas nekapablaj identigi la subtipon de DA-riceviloj esprimitaj sur individuaj neŭronoj, anatomiaj studoj pruvas, ke la NAcc konsistas el projekciaj neŭronoj, kiuj esprimas aŭ D1Rojn aŭ D2Rojn kun tre malmulta kunekspreso (33). Psikostimuliloj prefere aktivigas intracelajn signalajn vojojn malsupren de D1Roj (kiel determinite per pliigita fosforiligo de signalaj molekuloj) (34) kaj ni antaŭe montris, ke pliigita aktivigo de ĉi tiuj signalaj vojoj malhelpas formadon de partneroj (35). Tiel, kvankam DA transdono ene de la NAcc ludas gravan rolon en la respondo al AMPH kaj la formado de partneraj preferoj, ĉi tiuj kondutoj estas probable mediaciitaj per distingaj mikrocirkvitoj, kiuj inkluzivas striajn projekciajn sistemojn (33, 36). Ĉi tio estas de aparta intereso, ĉar la formado de paraj ligoj estas mediata per aktivigo de D2R-esprimantaj neŭronoj, kiuj prefere projektas al la ventra pallidum (33), alia cerba regiono grava por paro-ligado (26).
En ĉi tiu studo, ni provizas evidentecon, ke AMPH-sperto malhelpas pariĝadon induktitan paron. Kiel la partnerecaj preferotestoj en ĉi tiuj eksperimentoj estis faritaj 48 h post la lasta AMPH-ekspozicio (t.e. post kiam la drogo estis tute metaboligita), ĉi tiuj datumoj sugestas konstantan efikon de AMPH sur socia ligado. Unu potenciala mekanismo, konforma al la efikoj de AMPH en aliaj specioj (37, 38), per kio AMPH povas difekti paran ligadon per la kresko de D1R-esprimo ene de la NAcc. Ĉi tiu nocio estas subtenata de la antagonisma rolo de NAcc D1Rs en partnera prefero-formado (14, 24) kaj laŭ la aktualaj datumoj montrantaj la savadon de pariĝo-induktita partnereca prefero per intra-NAcc D1R-blokado en AMPH-traktataj bestoj (Figo. 4). Interese, ni antaŭe montris, ke ĉe viraj praaj voloj, ĝisreguligo de NAcc D1R-oj post 2-semajnoj da paro-ligado faciligas selekteman agreson kontraŭ konsciigaj fremduloj, inkluzive de seksaj akceptemaj inoj, sugestante, ke ĉi tiu neŭra plasteco estas evolua mekanismo per kiu masklaj voloj konservi jam starigitajn parojn (14). La aktuala studo sugestas, ke AMPH artefarite ekigas ĉi tiun neuroplastikecon, kaŭzante AMPH-malpliiĝon de paro-ligado. Eblas ankaŭ ke AMPH-traktitaj maskloj povas asocii la inon kun avara stato de retiriĝo de AMPH, kaj tiel ĉi tiu negativa asocio povus subfosi la malhelpadon de AMPH de paro-ligado. Antaŭa studo pruvis, ke retiriĝo de kreskanta doza horaro de d-amfetamino malhelpis seksan konduton en viraj ratoj (39). En nia studo, tamen, voloj de malsamaj kuracaj grupoj elmontris similajn pariĝojn (Figo. 2B), indikante ke ili probable ne estis en stato de retiro de amfetamino. Tamen ĉi tiu ebleco garantias plian esploron.
Estas bone konstatite ke drog-induktita neŭra plasteco estas fundamenta por drogmanio (40). Psikostimulantoj draste ŝanĝas strukturan plasticecon en la mezolimbia DA-sistemo (41) kaj estas evidenteco por sugesti, ke tiaj ŝanĝoj pli daŭras en D1-esprimantaj neŭronoj (37). Plie, elektrofisiologiaj studoj montris, ke sperto pri kokaino povas redukti postan neuroplastikecon ene de la NAcc (42). Efektive, drog-induktita neŭra reorganizado de la NAcc mildigas la nature okazantan neŭraran reorganizon post nova eksponiĝo al kompleksaj medioj (43). Sekve, kvankam drogmanio estas vaste rekonata kiel malordo de lernado kaj memoro (1, 40, 44), estas ofte subkomprenite, ke drog-induktita perdo de la potencialo por aldona ŝanĝo en mesolimbaj cirkvitoj ankaŭ povas esti esenca por toksomanio. Tia redukto de plastikeco povas limigi kondutan repertuaron al serĉado de drogoj. Estas do ne surprizi, ke AMPH-traktitaj voloj pruvis reduktitan paron-ligan konduton. La aktualaj efikoj de AMPH-ekspozicio sur paro-ligado estas konformaj al antaŭaj studoj ilustrantaj la malbonajn efikojn de psikostimulantoj sur aliaj sociaj kondutoj, inkluzive de patrina konduto (45-47) kaj socia ludado (48-50). Kune tia laboro donas la promeson, ke ekzamenado pri kiel drogaj kaj sociaj stimuloj interagas en la cerbo signife etendas nian komprenon pri la fortaj interagoj inter socia konduto kaj uzado de drogoj en homoj (21).
Materialoj kaj metodoj
Subjekto.
Temoj estis sekse viraj praaj voloj de laboratorio-reprodukta kolonio. Temoj estis malplenigitaj je 21-aĝaj tagoj kaj enloĝitaj en samseksaj frataj paroj en plastaj kaĝoj (12 × 28 × 16 cm) kie akvo kaj manĝaĵo estis provizitaj ad libitum. Ĉiuj kaĝoj estis konservitaj sub 14: 10 lumo-malhela ciklo, kaj la temperaturo estis proksimume 20 ° C. Ĉiuj subjektoj havis ĉirkaŭ 90-tagojn kiam testite. Stereotaksa kanulado kaj ejo-specifa infuzaĵo de DA-drogoj estis priskribitaj detale aliloke (14).
Konduta Testado.
CPP-testado estis farita kiel antaŭe priskribita (22) kun la jenaj esceptoj. La komenca kaĝo prefero por ĉiu temo estis determinita en 30-min pretest en tago 1. Temoj tiam estis kondiĉitaj, dum 40-minaj sesioj, kun AMPH al la nepreferita kaĝo kaj salo al la preferata kaĝo (ambaŭ AMPH kaj salaj injektoj estis donitaj la saman tagon, 6 h aparte) dum 3 sinsekvaj tagoj (tagoj 2-4). Poste, temoj estis testitaj (posttesto) pri la ĉeesto de CPP en la tago 5.
Partnera preferprovo estis farita kiel antaŭe priskribite (14). Mallonge, la prova aparato konsistis el centra kaĝo (12 × 28 × 16 cm) kunigita per kavaĵaj tuboj (7.5 × 16 cm) al du paralelaj identaj kaĝoj ĉiu loĝanta stimulan beston. La stimulaj bestoj estis la "partnero" (ina kunulino de la subjekto) kaj nekonata "fremdulo" (ino, kiu antaŭe ne renkontis la temon), kiuj estis malloze kunigitaj en siaj apartaj kaĝoj sen rekta kontakto unu kun la alia. Al la komenco de la testo 3-h, la subjektoj estis metitaj en la centran kaĝon kaj rajtis libere movi sin tra la aparato. Konduto estis registrita uzante tempodaŭran vidbendan sistemon. Eksperimentantoj blindaj al la manipulado reviziis la bendon kaj registris la konduton de la subjekto. Partnereca prefero estis difinita kiel la subjekto pasigante signife pli da tempo en flank-al-flanka kontakto kun la partnero ol la fremdulo, kiel indikite per parigitaj specimenoj t provo (27).
En Situa Hibridigo kaj Okcidenta Nemoveblaĵo.
Specifaj kontraŭsensaj riboproboj (tablo 1) estis uzataj por D1R, D2R, TH, kaj DAT en situ mRNA-etikedado. Etikedado estis farita kun 35S-markitaj sondoj kaj sensaj mRNA-kontroloj por ĉiu DA-markilo kiel antaŭe priskribita (51). Por Western blotting-analizo, DAR-proteino estis ĉerpita el la supernatanto de NAcc-histo-punktoj kaj testita kiel priskribita antaŭe (52).
Kvantaj Datumoj kaj Analizo.
CPP kaj partneraj preferoj estis determinitaj per parigitaj specimenoj t testoj. ANOVA analizis grupajn diferencojn en paroj de pariĝo dum la unua 6 h de pariĝado kun inaj kaj kaĝaj eniroj dum la partnereca testo. La optikaj densecoj de D1R kaj D2R-mRNA-etikedado en la NAcc same kiel TH, DAT, kaj D2R mRNA-etikedado en la VTA estis kvantigitaj de aŭtomataj radiogramoj uzante komputilan bildan programon (NIH IMAGE 1.64). Datenoj estis prezentitaj kiel procenta ŝanĝo de la mezumo de la sala grupo de kontrolo kaj analizis diferencojn de grupoj t testoj. Fine, optikaj densecoj de etikedado de D1R kaj D2R sur la radiografia filmo el la eksperimentoj de Western blotting estis analizitaj per t provoj.
Eksperimenta Dezajno.
Eksperimento 1a establis dozon-respondan kurbon por AMPH-induktita CPP. Temoj estis pretestitaj en la aparato CPP en tago 1, hazarde atribuitaj en unu el ses eksperimentaj grupoj, kiuj ricevis ip (ip) injektojn de salo enhavanta malsamajn koncentriĝojn de AMPH [0 (n = 12), 0.1 (n = 8), 0.5 (n = 9), 1.0 (n = 12), 3.0 (n = 12), aŭ 5.0 mg / kg (n = 13)] dum 3 tagoj (tago 2 – 4) de kondiĉado, kaj poste testis CPP en posttesto en tago 5.
Eksperimento 1b rivelis la rolojn de DA-riceviloj en AMPH-induktita CPP. Temoj estis pretestitaj en la CPP-aparato kaj hazarde atribuitaj en unu el ok eksperimentaj grupoj, kiuj ricevis sc (sc) injekton de salo (n = 10) aŭ salo enhavanta malsamajn koncentriĝojn de antagonisto de ne-elektita DA-ricevilo [haloperidolo; 0.1 (n = 8), 1.0 (n = 8), aŭ 5.0mg / kg (n = 8)], aŭ specife simila al D1 (SCH23390; 0.5 (n = 7) aŭ 5.0 mg / kg (n = 7)] aŭ D2-simila specifa DA-receptoro antagonisto [eticlopride; 0.5 (n = 8) aŭ 5.0 mg / kg (n = 8)]. Tridek minutojn poste, sojlo dozo de AMPH (1.0mg / kg), kiu induktis CPP en Eksperimento 1a, estis uzata por AMPH-kondiĉado. Post 3 tagoj de AMPH-kondiĉado, ĉiuj subjektoj ricevis postteston de CPP.
Eksperimento 2 ekzamenis, ĉu AMPH-sperto interrompis paran ligadon. Temoj estis hazarde atribuitaj en unu el la tri eksperimentaj grupoj, kiuj ricevis ip-injektojn de salo (n = 8) aŭ salo enhavanta 1.0 mg / kg (n = 8) aŭ 5.0 mg / kg (n = 7) AMPH unufoje tage dum 3 sinsekvaj tagoj - paradigmo, kiu induktis CPP en viraj praaj voloj. En la kvara tago, subjektoj estis parigitaj kun estrogen-komencita ino por 24 h (14), kaj tiam estis provitaj en 3-h-partnera preferprovo. Por kontroli la eblajn efikojn de injektoj sur paraj ligoj, kvara eksperimenta grupo de sendifektaj viroj, kiuj ne ricevis iujn ajn injektojn (n = 6) estis parigita kun estrogen-inaj inoj por 24 h kaj poste testis pri partneraj preferoj. Ĉiuj kondutaj provoj estis videofilmitaj por la konfirmado de pariĝo. La tempodaŭro de la subjektoj flank-al-kontakta kun la partnero kaj la nekonato estis kvantigita. Krome, frekvencoj de pariĝoprocesoj dum la unua 6 h de pariĝado kaj lokomotora agado (indikitaj per kaĝo-kruciĝo) dum la testo de prefero de partnero 3-h estis kvantigitaj. Post la testo de la partnero, la subjektoj estis mortigitaj. Ĉiuj cerboj estis rikoltitaj, frostigitaj sur seka glacio, kaj stokitaj ĉe −80 ° C por en situ hibridiga etikedado de DA-mRNAs.
Eksperimento 3 ekzamenis, ĉu AMPH-difektita paro-ligado estis asociita kun ŝanĝoj en mesolimbic DA-agado. Cerboj de la subjektoj, kiuj ricevis salonn = 8) aŭ 1.0 mg / kg AMPH (n = 8) en Eksperimento 2 estis tranĉitaj sur krioostatilo en koronajn sekciojn (14 μm dikecon), kiuj estis dekonstruitaj sur Superfrost / plus glitiloj (Fisher Scientific). Cerbaj sekcioj ĉe 98-μm-intervaloj estis prilaboritaj por en situ hibridiga etikedado de D1R, D2R, TH, kaj DAT-ARNm. Ĉar voloj spertitaj kun 1.0 mg / kg AMPH montris kreskon en D1R, sed ne D2R, mRNA-etikedadon en la NAcc, kompare kun salaj injektitaj kontroloj, du pliaj grupoj de subjektoj estis generitaj, kiuj ricevis injektojn de salo (n = 6) aŭ 1.0 mg / kg AMPH (n = 6), 24 h da pariĝo, kaj poste partnereca provado, kiel priskribite supre. Subjektoj estis dekapitaj kaj cerboj estis tranĉitaj sur krizostato je 300 μm dikeco. Tiĉaj punktoj prenitaj bilateralmente de la NAcc estis procesitaj por D1R kaj D2R Western blotting.
Eksperimento 4 ekzamenis, ĉu aktivigo de D1-tipaj riceviloj en la NAcc estis respondeca pri AMPH-malkapablo de paro-ligado. Temoj estis enplantitaj kun gvidaj kanuletoj bilateralmente celitaj al la ŝelo de NAcc. Post 3-tagoj de resaniĝo, ili estis hazarde atribuitaj en unu el tri eksperimentaj grupoj, en kiuj ricevis intra-NAcc-injektojn de CSF (200 nL / side, n = 11), aŭ CSF enhavanta 0.4 (n = 6) aŭ 100 ng / side (n = 7) SCH23390. Tridek minutojn poste, ili ricevis ip-injektojn de 1.0 mg / kg AMPH. Ĉi tiu procedo ripetiĝis dum 3 sinsekvaj tagoj. En la kvara tago, subjektoj estis parigitaj kun estrogen-komencita ino por 24 h kaj tiam testitaj pri partneraj preferoj.
Dankojn
La aŭtoroj dankas Kyle Gobrogge, Claudia Lieberwirth, Kelly Lei, kaj Melissa Martin pro legado kritika de ĉi tiu manuskripto. Ĉi tiu laboro estis subtenata de Naciaj Institutoj de Sanaj Grantoj MHR01-58616, DAR01-19627, kaj DAK02-23048 al ZW
Piednotoj
La aŭtoroj deklaras neniun konflikton de intereso.
Ĉi tiu artikolo estas PNAS Rekta Submetiĝo.
Referencoj
;
