Variado en Oxytocin Receptor-Denseco en la Nukleo Accumbens havas Diferencajn Efikojn sur Membroforaj Kondutoj en Monogamaj kaj Poligamaj Voĉoj (2009)

J Neŭroscio. Aŭtoro manuskripto; havebla en PMC Oct 27, 2009.

Eldonita en fina redaktita formo kiel:

PMCID: PMC2768419

NIHMSID: NIHMS93410

La fina redaktita versio de ĉi tiu artikolo de la eldonisto disponeblas senpage ĉe J Neurosci

Vidu aliajn artikolojn en PMC tio citas La artikolo eldonita.

Iru al:

abstrakta

Oksitocinaj riceviloj en la kerno accumbens estis implikitaj en la regulado de aloparentaj kondutoj kaj paro-ligaj formoj en la socie monogama praa volupo. Oksitocina receptoro-denseco en la kerno accumbens estas pozitive korelaciita kun alloparenting en junaj kaj plenkreskaj inaj praaj voloj, kaj antagonisto de riceviloj de oksitocino infuzita en la kerno accumbens blokas ĉi tiun konduton. Plue, praderaj volvaĵoj havas pli altajn densecojn de riceviloj de oksitocino ĉe la akciuloj ol specioj de ne ronĝuloj monogamaj, kaj blokado de akumulaj oksitocinaj riceviloj malhelpas formadon de partneroj preferitaj de pariĝo. Ĉi tie ni uzis adeno-asociitajn viralajn vektorajn genajn translokigojn por ekzameni la funkcian rilaton inter akuma oxitocina denseco kaj socia konduto en pradoj kaj herbejoj. Plenkreskaj inaj praderaj voloj, kiuj tro-esprimaj oksitocin-receptorojn en la kerno accumbens montris akcelitan partneron-formadon post kunvivado kun masklo, sed ne montris plibonigitan aloparentan konduton. Tamen, partnera prefero ne faciligis en ne-monogamaj herbejoj, enkondukante oksitocin-receptoron en la kerno accumbens. Ĉi tiuj datumoj konfirmas rolon por ricevilo de oksitocino ĉe la akciuloj en la regulado de partneraj preferoj en virinaj praaj voloj, kaj sugestas, ke esprimo de oksitocina ricevilo en la akciuloj ne sufiĉas por antaŭenigi partnerajn preferojn en ne-monogamaj specioj. Ĉi tiuj datumoj estas la unuaj, kiuj montras rektan rilaton inter la denseco de riceviloj de oksitocino en la kerno de akcentoj kaj variado en kondutoj de socia korinklino. Tiel, individua variado en esprimo de riceviloj de oksitocino en la striato povas kontribui al natura diverseco en sociaj kondutoj.

Ŝlosilvortoj: patrina, virusa, preferinda, neuropeptida, kogno, autoradiografio

ENKONDUKO

Mikrotinaj ronĝuloj montras rimarkindan diversecon en sociaj kondutoj, kiuj iras de tre filiaj kaj socie monogamaj, ĝis relative samsociaj kaj priparolaj pariĝaj strategioj (Gruderadams kaj Getz, 1985). La socie monogama praa volemo (Microtus ochrogaster) formas daŭrajn sociajn alligitecojn, aŭ duopajn interligojn, al kontraŭ-seksa partnero sekvante kunvivadon kaj pariĝon, dum ne-monogamaj volboj (Microtus pennsylvanicus) tipe ne. Plenkreskaj virinaj praaj vulpoj de plenkreskuloj montras konsiderindan diversecon en sia spontana nutra konduto, aŭ aloparentala konduto, kun proksimume la duono montrante patrinan similan konduton al idoj dum la aliaj ignoras aŭ atakas idojn (Lonstein kaj De Vries, 1999; Bales kaj Carter, 2003; Olazabal kaj Juna, 2005). Tiel varoj donas bonegan ŝancon ekzameni la neurobiologiajn mekanismojn sub la socia korinklino kaj aloparentaj prizorgoj, same kiel la mekanismojn kondukantajn al diverseco en ĉi tiuj kondutoj ambaŭ inter specioj kaj inter individuoj.

La nepeptida oksitocino (OT) estis implicita en la regulado de ambaŭ partneroj-formado de preferoj kaj aloparentaj kondutoj en praaj vulpoj. Infuzado de antagonisto de oksitocina ricevilo (OTR) en la nukleon accumbens (NAcc), sed ne en la apuda caudata putamen blokas pariĝ-induktitan partneran formiĝon de prefero, laboratorio-prokuro de formado de paraj ligoj (Young et al., 2001). Similaj infuzaĵoj de OTR-antagonisto en la NAcc ankaŭ blokas aloparentan konduton en virgulinoj.Olazabal kaj Juna, 2006b). Tiel la aktivigo de OTRoj en la NAcc faciligas ambaŭ formajn preferojn de partneroj kaj aloparentan konduton en virinaj praaj voloj.

Variado en OTR-denseco en la NAcc estis hipotezita por kontribui al specioj diferencoj en socia organizo kaj aloparentala konduto. Praaj vulvoj havas altajn densecojn de OTR en la NAcc, dum ne-monogamaj herbejoj, musoj kaj ratoj ne (Insel kaj Shapiro, 1992; Olazabal kaj Juna, 2006a). Praaj vulpoj ankaŭ montras pli altajn nivelojn de aloparentaj kondutoj ol ĉe paŝtejoj, musoj aŭ ratoj (Olazabal kaj Juna, 2006a). Paralele al ĉi tiu inter-speca rilato inter OTR-denseco en la NAcc kaj gepatra konduto, OTR-denseco en la NAcc estas pozitive korelaciita kun aloparentala konduto en kaj junaj kaj plenkreskaj inaj praderaj voloj (Olazabal kaj Juna, 2006b, a). En ĉi tiu studo, ni uzis adeno-asociitan viralan vektoron (AAV) genan translokadon por testi rekte la hipotezon, ke variado en NAcc OTR-denseco povas kontribui al variado en socia ligiteco kaj aloparentala konduto. Plenkreskaj inaj pradaj volvoj estis bilateralmente infuzitaj en la NAcc kun AAV kodanta la OTR-genon de pradera vole, rezultigante signifan alton en OTR-ligado. Bestoj tiam estis testitaj pri aloparentala konduto kaj partnero-prefero. Ni tiam testis la hipotezon, ke OTR-esprimo en la NAcc estis sufiĉa por faciligi partian preferon-formadon per infuzado de inaj herbejoj kun la sama vektoro. Ni antaŭdiris, ke kompare al kontroloj, OTR-tro-esprimantaj inaj praderaj voloj montrus pliigitan aloparentan konduton kaj akcelitan kunan preferon. Plue, ni antaŭdiris, ke parencaj inoj esprimantaj OTR en la NAcc disvolvus partnerajn preferojn rilate al viraj partneroj.

MATERIALOJ KAJ METODOJ

bestoj

Praaj kaj herbejaj volboj estis loĝigitaj en samseksaj grupoj kun 2-3-volboj / kaĝo de la tempo de la demeto de 21-23-aĝaj tagoj. Loĝado konsistis el ventumita 36 × 18 × 19cm Plexiglass-kaĝo plenigita per Bed-okobbs Laboratory Animal Bedding laŭ 14: 10 hr malhela / malhela ciklo ĉe 22 ° C kun aliro al manĝo (kuniklo LabDiet, Richmond, IN) kaj akvo ad libitum . La pradaj volboj estis akiritaj de nia laboratorio-reprodukta kolonio, kiu origine devenis de kampoj kaptitaj voloj en Ilinojso. Paŝtejoj estis derivitaj de stoko akirita de reprodukta kolonio ĉe Florida Ŝtata Universitato. Temoj estis 2-5-jaraj sendifektaj inaj inaj voloj. Stimulaj bestoj estis sekse spertaj plenkreskaj viraj voloj. Ĉiu masklo funkciis kiel "partnero" kaj "fremdulo" dum la partnereca testo (vidu sube). Litermakuloj estis asignitaj al malsamaj kuracaj grupoj por kontroli variaĵon ene de litotukoj kaj ene de kaĝoj. Ĉiuj proceduroj estis aprobitaj de la Institucia Komitato pri Prizorgo kaj Uzado de la Emoria Universitato.

Adeno-Associated Viral Vectors

La OTR-kodiga sekvenco estis kreita per dismetado de la unua ekzono de genrostona klono de Prairie vole OTR kodanta la unuajn kvin transmembranajn domajnojn (Genbank-alira nombro AF079980) Kaj la 3 ′ fino de la OTR amplifita de pradera vole utero cDNA. La kodiga sekvenco re-enkadrigis uzante PCR por forigi la UTR-ojn kaj provizi novajn flankojn-limigajn lokojn por faciligi la klonadon en la AAV-vektora plasmido. La modifita geno tiam estis klonita en vektoran plasmidon AAV2 inter 0.6 kb citomegalovirus (CMV) iniciatinto kaj SV40 DNA-fragmento enhavanta la SV40 malgrandan intron kaj poliA-signalon. La AAV2-OTR estis kruc-pakita en AAV9 per triobla plasmida transfekto al AAV-293-ĉeloj (Stratagene, La Jolla, CA) uzante norman kalcit-fosfatan metodon. Neniu helpa viruso estis uzata. Plasmido AAV2-eGFP estis enpakita paralele en AAV9 kiel negativa kontrolo-vektoro. Mallonge, ĉiu plasmo de vektoro AAV, plasmido AAV2 / 9 rep / cap provizanta AAV2-replicase kaj AAV9-kapsidajn funkciojn, kaj 3rd plasmido kodanta Adenovirus-helpfunkciojn, pHelper (Stratagene), estis kun-transfektitaj en 293-ĉelojn je molara rilatumo de 1: 1: 1. Ĉeloj estis rikoltitaj 48-horoj post-transfekcia. La ĉelaj peletoj tiam estis re-suspenditaj en DMEM, kaj la intracelulajn virusajn erojn liberigitajn de tri sinsekvaj ĉirkaŭvojoj de frostigaj degeloj, sekvitaj de centrifugado ĉe 13,000 rpm por 10 min sur tabl-supran centrifugilon por forigi partiklojn. La vektoraj akcioj estis stokitaj ĉe −80 C, kaj titolitaj de PCR en reala tempo uzante ABI Prism 7700 Sequence Detection System de Perkin-Elmer Applied Biosystems (Foster City, CA). Titolistoj estis sur la ordo de 1012 DRP / ml. (DRP = Dnase Resistant Particles).

Viral Vector Infusion

Stereotaksiaj infuzaĵoj estis faritaj sub isoflurana anestezo en Kopf-stereotakso ekipita kun Ultra Micro Pump II (Mondo Precision Instruments, Sarasota, FL) kaj 26-kalibra Hamilton-seringeto. Inoj estis injektitaj bilateralmente en la ŝelon de la NAcc (pradaj volvaĵoj: AP + 1.7mm, ML .9mm, DV −4.5mm, herbejoj: AP + 1.6mm, ML .9mm, DV −4.3mm) kun 750nl de aŭ AAV enhavanta la volatilon. oksitocina ricevilo (CMV-OTR, N = 12), aŭ vektoro esprimanta vektoron eGFP (CMV-GFP, N = 16). Viruso infuziĝis je 93.8nl / min. La jeringo estis en loko por 5 min sekvante infuzaĵon por minimumigi disvastigon de vektoro supren laŭ la nadla spuro. Sham-operaciaj bestoj (N = 9) estis anestezitaj kaj havis siajn skalpojn incisiitaj kaj suturitaj. Post kirurgio, bestoj estis grupigitaj ĝis la testo de partnera prefero. Preparaj studoj indikis, ke OTR-esprimo ĉe la loko de injekto estis stabila post 10-tagoj.

Alloparental Behavior Testing

Unu monaton post injekto, la prerioj estis testitaj pri gepatra konduto. Testado okazis inter 0800:1800 kaj 45.5hr. Testbestoj estis metitaj en grandan puran kaĝon (24 × 20 × 15cm) kaj lasis alklimatiĝi dum 2min. Du hundidoj (5-900 tagoj) estis metitaj sur unu ekstremon de la kaĝo. La latenteco alproksimiĝi al la hundidoj, nombro da bestoj kiuj atakis idojn, kaj la kvanton da tempo pasiganta trejni, ŝvebi kaj preni la idojn estis registrita. Latenteco de 15 sekundoj estis atribuita al bestoj, kiuj ne aliris la idojn dum la 30-minuta testo por statistika analizo. Testado tuj estis ĉesigita se la ino atakis la idojn. Bestoj estis klasifikitaj kiel parentalaj se ili pasigis> XNUMX sekojn lekante la idojn sen ataki. Surbaze de la rezultoj de la eksperimento kun preriaj kampmusoj, herbejaj kampmusoj ne estis testitaj pri aloparenta konduto.

Partner Preference Testing (Prairie Vole)

Unu monaton post la testado de aloparentala konduto, kaj du monatojn post AAV-infuzaĵo, inoj ricevis 4 μg de estradiol benzoato (EB; Fisher, Pittsburgh, PA) dissolvita en 0.1ml de sesamo-oleo ĉiutage dum 3-tagoj antaŭ pariĝo por indiki seksan receptivecon. . 16-horoj post la lastaj EB-injektaj bestoj estis metitaj en puran kaĝon (28 × 17 × 12cm) kun sekse sperta plenkreska masklo dum 6-horoj kaj poste revenis al grupaj loĝejoj. Ekparo-konduto estis registrita dum la komenca 6-hora kunloĝado. La poentaro al unua enmiksiĝo kaj la nombro de pariĝaj bataloj en la unua horo estis notitaj. Latencia de 3600-sekundoj estis asignita al bestoj, kiuj ne kongruis dum la 1-hora periodo por la celo de statistika analizo. La sekvan matenon (14-horoj post la kunloĝado), la bestoj estis testitaj pro kunula prefero. En testo de prefero de partnero, la eksperimenta ino estas metita en neŭtralan centran ĉambron de tri-ĉambra aparato, en kiu la komuna masklo estas ligita en unu flanka ĉambro kaj novega "stranga" masklo estas kunligita en la alia (Williams et al., 1992). La eksperimenta besto senpage moviĝas tra la ĉambroj kaj la tempo pasigita proksime al ĉiu masklo estas registrita uzante sistemon de aŭtomata trabo por rompiCurtis kaj Wang, 2005b, a; Lim et al., 2007).

Tagon poste, la inoj reedziĝis kun la sama partnero dum pliaj 12-horoj da kunvivado. La inoj tiam estis testitaj denove pri partnereca prefero (18-hora totala kontaktotempo). Ĉi tiu du etaĝa paradigmo estis uzata por maksimumigi nian detekton de faciliga provo de partnereca prefero, ĉar ekzistas varieco en la sojla tempo necesa por formi partneran preferon. Oni konsideris bestojn preferi partneron se ili pasigis duoble pli da tempo en proksima proksimeco kun la kompaniano kompare kun la fremdulo.

Provo-Prefero-Provo (Paŝtejo)

Tipe herbejoj de nia kolonio ne formos paran ligon post 24hrs de eksponiĝo de matĉoj. Tial por ĉi tiu eksperimento, partneroj de preferoj estis faritaj post kunvivado de 24 kaj pliaj 48-horoj (72-horoj entute). Ĉiuj aliaj traktadoj kaj testaj metodoj estas samaj kiel supre.

Kolekto kaj pretigo de teksaĵoj

Post la kondutismaj eksperimentoj bestoj estis dekapitataj post profunda anestezado kun isofluorano. Tiam oni kolektis cerbon kaj frostiĝis sur pulvorigita seka glacio. La cerbo estis sekciigita tra la serio NAcc en 6 ĉe 20μm, sur cryostat, sur glitilojn de Fisher Frost-plus. Diapozitivoj estis stokitaj ĉe −80C ĝis uzitaj en aŭtoreradiografio.

OTR-Autoradiografio

Aŭtradiografio de riceviloj de OTR estis uzita por taksi OTR-ligadon en AAV-injektitaj bestoj. Autoradiografio estis farita kiel priskribita antaŭe kun malgrandaj modifoj (Insel et al., 1991; Wang kaj Juna, 1997). Sekcioj estis forigitaj de -80C-stokado, permesiĝis aerigi, trempis en 0.1% paraformaldehido en fosfatan buŝan salinon (pH 7.4), kaj enŝovigis dufoje en 50 mM Tris-bufron (pH 7.4) por forigi endogenan OT. Tuj poste oni kovris la histon en 50 pM 125I-OVTA (NEX 254050UC PerkinElmer, Waltham, MA) dum unu horo. Senbrida radioligando estis forigita per kvar lavoj en 50mM Tris plus 2% MgCl2 (pH 7.4) kaj tiam trempita en dH20 kaj aero sekiĝis sub torento de malvarmeta aero. Fojo seka, la lumbildoj estis elmontritaj al BioMax MR-filmo (Kodak, Rochester, NY) dum 72-horoj. Du CMV-OTR kaj unu CMV-GFP-bestoj estis ekskluditaj de la kondutisma analizo pro injektaj mankoj.

Immunohistoŝemio de GFP

Subaro de la bestoj (N = 5) injektitaj kun CMV-GFP, perfuziĝis transcardiale kun 50 ml de PBS, sekvita de 50 ml de 4% paraformaldehido en 0.1 M fosfata bufro enhavanta 2.5% akroleinon (Polisciencoj, Warrington, PA). Tuj post perfusion, la cerbo estis forigita kaj konservita ĉe 4 ° C en 30% sukrosa solvo ĝis sekcio. La cerbo estis tranĉita en koronajn sekciojn de 25μm kun frostiga mikrotomo kaj stokita libera flosado en krio-protektanta solvo je −20 ° C ĝis imunohistoocheemia prilaborado.

Serio A 1: 6 tra la vizaĝozaŭsa akso de ĉiu cerbo estis prilaborita por GFP. Mallonge, sekcioj estis forigitaj el la krioprotektanta solvo, enŝovitaj vaste en kalio-fosfatan bufitan salinon (pH 7.4), kaj tiam reagis dum 15-minutoj en 1% natria borohidrido por forigi troajn aldehidojn. Sekcioj tiam estis inkubitaj en primara antikva solvo direktita kontraŭ GFP en kalio-fosfata bufita salo (KPBS) enhavanta 0.1% Triton-X por 1 horo ĉe ĉambra temperaturo sekvita per 48-horoj ĉe 4 ° C. La ĉeloj enhavantaj GFP estis identigitaj per uzado de kontraŭklasa kontraŭkorpaj antikorpoj (Kat. Ne. A6455, Invitrogen, Carlsbad, CA) kun policlonal kuniklo kontraŭ koncentriĝo de 1: 100,000. Post primara antikva inkubacio, la histo estis enŝovita en KPBS, inkubita dum 1-horo en biotinilita kapra kontraŭbela IgG (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) je koncentriĝo de 1: 600, kaj enŝovita en KPBS, sekvita de 1- hora inkubacio en avidin-biotina peroxidasa komplekso (ABC Elite Kit PK-6100 Vector, Burlingame, CA) ĉe koncentriĝo de 1: 200. Post lavado en KPBS kaj Tris-bufro (pH 7.2), GFP estis videbla kiel bruna reakcia produkto per 3,3′-diaminobenzidino enhavanta hidrogenan peroksidon de 0.08% en Tris-bufroj. La reaga produkto estis ĉesigita post proksimume 20-minutoj lavante en Tris-bufron. Sekcioj estis muntitaj el salo sur glatenojn sub gelatino, sekigitaj per aero, deshidratigitaj en serio de gradigitaj alkoholoj, malplenigitaj en Histoclear (Nacia Diagnozo, Atlanta, GA), kaj kovritaj per uzado de Krystalon (EMD Chemicals, Gibbstown, NJ).

Statistika Analizo

Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± norma eraro de la meznombro (SEM). Dudirekta RM ANOVA funkciis uzante tempon elspezitan kun ĉiu stimula besto kiel la dependa variablo, la faktoro ene de subjektoj estas partnero aŭ fremdulo, kaj kuracado kiel la faktoro inter subjektoj. La Holm-Sidak-Testo estis uzita por post-hoc paraj komparoj kiam signifa interaga efiko estis detektita. Unudirektaj ANOVAoj funkciis per gepatroj kaj pariĝaj kondutoj por prerioj. Tiuj kondutoj, kiuj ne plenumis la kriteriojn por normaleco, estis analizitaj per la Kruskal-Wallis One Way Analysis of Variance on Rangs. Preciza Testo de Fisher estis uzita por determini grupajn diferencojn en la proporcio de bestoj montrantaj gepatran konduton. Meadow vole-pariĝa konduto estis analizita uzante t-Teston kaj Mann-Whitney Rank Sum Test kiam la normalectesto malsukcesis.

REZULTO

Alloparental Behavior en Prairie Voles

La proporcio de CMV-OTR injektitaj inaj preriaj kampmusoj kun aloparenta konduto (3/9) ne diferencis de la kontrolo (4/15) aŭ simulitaj kampmusoj (3/10) (p> 0.5; Figuro 1A). Du CMV-OTR, kvar CMV-GFP-kontrolo, kaj du ŝamaj inoj, kiuj estis klasifikitaj kiel ne-aloparentaj, atakis la idojn. La latenteco por alproksimiĝi al hundidoj (Figuro 1B) kaj tempo dediĉita al lekado / trejnado ankaŭ ne diferencis signife inter la grupoj (H = 0.31, P> 0.8 por latenteco, H = 0.40, P> 0.8 por trejnado). Kiam nur la bestoj, kiuj atingis la kriteriojn esti alparentaj, estis komparitaj, la latenteco alproksimiĝi al hundidoj por inoj CMV-OTR (140.2 ± 65.2 sekundoj) ne diferencis ol CMV-GFP (62.5 ± 39.3 sekundoj) aŭ trompo (169.4 ± 51.7 sekundoj) ) inoj (F (2,7) = 1.27, p> 0.3). Ankaŭ ne estis diferenco en la tempo, kiun la aloparentraj CMV-OTR-inoj pasigis lekantajn idojn kompare kun la aloparentalaj CMV-GFP aŭ ŝajnaj inoj (F (2,7) = 1.94, p> 0.2; Figuro 1C). La totala tempo, kiun ĉiu grupo pasigis lekadon / preparadon, ŝvebadon kaj portadon de la idoj, ankaŭ ne diferencis inter la alparenta CMV-OTR (695.2 ± 77.1 sekundoj) CMV-GFP (387.5 ± 132.7 sekundoj) aŭ trompo (503.8 ± 82.8 sekundoj) ) bestoj (F (2,7) = 1.98, p> 0.2).

figuro 1  

Alloparentala konduto en virŝafaj, CMV-GFP kaj CMV-OTR inaj pradaj volvaĵoj. A) Ne estis efiko de kuracado sur la proporcio de inoj en ĉiu kuracista grupo, kiu montris aloparentan konduton. La malhelaj stangoj reprezentas la procenton de bestoj, kiuj ...

Ekvena Konduto en Prairie Voles

Pariĝa konduto ne estis grave influita de la antaŭa kirurgia kuracado de la inoj. La latenteco al unua enmeto ne estis signife malsama ĉe maskloj kun CMV-OTR-inoj kompare kun maskloj parigitaj al CMV-GFP aŭ simulitaj inoj (H = 5.043, p = .08; Figuro 2A). Kvankam la grupo CMV-OTR emis pariĝi pli frue ol la aliaj grupoj, ili ne pariĝis pli ofte. La nombro de pariĝaj atakoj en la unua horo ne diferencis en paroj enhavantaj CMV-OTR-inojn de paroj enhavantaj CMV-GFP aŭ ŝajnajn inojn (F (2,31) = 0.46, p> 0.6; Figuro 2B).

figuro 2  

Amasado kaj partnero preferis konduton en virŝafaj, CMV-GFP, kaj CMV-OTR-virinaj praaj voloj. La latencia al unua enmiksiĝo (A) kaj la nombro de pariĝado (B) ne multe diferencis inter la grupoj. C) Post 6-hora kunvivperiodo, ...

Partnereca Prefero-Konduto en Prairie Voles

Post la kunvivperiodo de 6 hr, neniu el la grupoj montris signifan partian preferon (Figuro 2C). Ne estis ĉefa efiko de kuracado (F (2,31) = 0.56, p> 0.5) aŭ tempo pasigita kun la kunulo kontraŭ la fremdulo (F (1,31) = 0.46, p> 0.5). Post pliaj 12 horoj da kunvivado, ne estis ĉefa efiko de kuracado (F (2,29) =, 78, p = 0.5) aŭ la tempo pasigita kun la kunulo kontraŭ fremdulo (F (1,29) = 3.71 , p = 0.06). Tamen estis signifa interaga efiko (F (2,29) = 5.56, p = 0.009). La post-hoc testo malkaŝis, ke inoj de CMV-OTR pasis signife pli da tempo proksime al la partnero ol al la fremdulo (p <0.001; Figuro 2D). Tamen, la CMV-GFP kaj ŝajnaj inoj ne montris partneran preferon post ĉi tiu periodo (p> 0.05; Figuro 2D). Krome, 80% de CMV-OTR injektitaj volatiloj atingis la kriteriojn havi partian preferon, t.e. pasigi duoble pli da tempo kun la kompaniano ol la fremdulo, kompare kun nur 31% de CMV-GFP injektitaj kaj 44% de malhonestaj bestoj (Figuro 2E, F).

OTR kaj GFP-Esprimo en NAcc de Prairie Voles

Autoradiografio estis farita por determini lokadon de AAV-injekto kaj kontroli, ke la vektoro CMV-OTR rezultigis pliigitan OTR-ligadon kompare kun kontroloj. Kiel antaŭe raportis, estis signifa individua variado en OTR-ligado en la NAcc de kontrolaj CMV-GFP-pradaj volvaĵoj (Ilustraĵo 3A, B). Distingitaj altoj en OTR-ligado estis detektitaj en la NAcc de CMV-OTR injektitaj pradaj volvaĵoj (Figuro 3C). Krome, imunohistokemio de GFP estis farita sur cerbaj sekcioj de CMV-GFP-bestoj por determini la amplekson de esprimo en neŭronoj de la NAcc. Klara etikedado de ĉeloj kun neŭronaj trajtoj estis detektita, konfirmante, ke la vektoroj de CMV AAV pelis esprimon en neŭronoj (Figuro 3E, F).

figuro 3  

Analizo de OTR kaj GFP-esprimo en CMV-OTR kaj CMV-GFP-virinaj praaj voloj. OTR-denseco estis determinita uzante ricevil-aŭradiografion. A, B) Ekzistis signifa variado en la denseco de OTR liganta en la NAcc de CMV-GFP-inoj. Ĉi tio estas en kontrasto ...

Ekpaciga Konduto en Paŝtejaj Krestoj

Neniuj signifaj diferencoj en pariĝa konduto estis observitaj inter la kuracaj grupoj en herbejoj. La latenteco al unua enirado ne diferencis ĉe maskloj parigitaj kun inoj CMV-OTR (1245.1 ± 1465.9 sekundoj) kompare kun viroj parigitaj por kontroli inojn CMV-GFP (566.6 ± 989.8 sekundojn) (T = 128.0, p> 0.2). La nombro de pariĝaj atakoj en la unua horo ankaŭ ne diferencis en paroj enhavantaj inojn CMV-OTR (6.8 ± 5.1) de paroj enhavantaj inojn CMV-GFP (9.5 ± 4.4) (t = 1.42, p> 0.1).

Partnereca Prefero en Paŝtejaj Volvoj

Post 24hr-kunvivperiodo, neniu el la grupoj montris signifan partian preferon (Figuro 4A). Ne estis ĉefa efiko de kuracado (F (1,20) = 0.19, p> 0.6) aŭ tempo pasigita kun partnero kontraŭ fremdulo (F (1,20) = 0.09, p> 0.7). Post pliaj 48 horoj da kunvivado, denove estis neniu signifa ĉefa efiko de kuracado (F (1,19) =. 65, p> 0.4) aŭ tempo pasigita kun ambaŭ inoj (F (1,19) = 0.62, p> .4; Figuro 4B).

figuro 4  

Partnereca konduto de virinaj herbejoj post 24 hr kunloĝado (A) kaj post kulmina 72-hora kunloĝado (B). Inaj injektitaj CMV-OTR kaj CMV-GFP ne montris partian preferon. Ili pasigis egalajn kvantojn de tempo kun la partnero ...

OTR-Esprimo en la NAcc de Meadow Voles

Injektitaj herbejoj de CMV-GFP havis malmultan aŭ neniun OTR-ligadon en la NAcc (Figuro5A). En kontrasto, CMV-OTR injektitaj herbejaj volboj havis signifan OTR-ligadon en la NAcc, komparebla al tiu de la pradoj (Figuro 5B).

figuro 5  

Aŭtradiografia ricevilo ilustranta OTR-ligantan densecon en la NAcc de CMV-OTR (A) kaj CMV-GFP (B) herbejojn. Notu, ke CMV-GFP-virinaj herbejoj havis malmultan aŭ neniun OTR-ligadon en la NAcc. Tamen, OTR-ligado en la NAcc estis draste levita ...

DISCUSO

Specioj-diferencoj en OTR-denseco en la NAcc estis asociitaj kun specioj diferencoj en pariĝa strategio (socia monogamio vs poligamio) kaj aloparentala konduto, sugestante, ke variado en OTR-riceva esprimo povas subesti speciojn de diferencoj en socia organizo kaj kondutoInsel et al., 1991; Juna kaj Wang, 2004; Olazabal kaj Juna, 2006b). Socie monogamaj praaj volvoj havas pli grandajn densecojn de OTR en la NAcc ol ne-monogamaj herbejoj kaj montaj voloj, kaj farmakologia blokado de tiuj riceviloj malhelpas formiĝi kun la prefero de partnereco (Young et al., 2001; Olazabal kaj Juna, 2006b). Ankaŭ estas signifa individua variado en OTR-denseco en la NAcc ene de pradaj vulvoj (Ilustraĵo 3A, B). OTR-denseco en ĉi tiu regiono pozitive korelacias kun individua variado en aloparentala konduto de plenkreskaj seksaj naivaj inaj praaj voloj (Juna, 1999; Olazabal 2006) kaj OTR-antagonisma administrado en la NAcc forigas ĉi tiun konduton (Olazabal kaj Juna, 2006a). Tial en ĉi tiu studo ni celis rekte testi la rilaton inter ricevilo-denseco en la NAcc kaj filia konduto en volatiloj, per uzo de geno-translokado AAV.

Niaj rezultoj montras, kiel antaŭvidite, inaj praderaj volvaĵoj kun altaj niveloj de OTR en la NAcc-ekspozicio akcelita partnera prefero-formado kompare al inoj kun pli malalta OTR-denseco (CMV-GFP aŭ ŝamanoj). Ckonforme al nia prognozo, ne estis diferenco en aloparentala konduto inter grupoj, sugestante diferencajn mekanismojn per kiuj akumula OTR reguligas formadon de kunuloj kaj aloparentajn kondutojn. Niaj rezultoj subtenas la hipotezon, ke individuaj diferencoj en OTR-esprimo kontribuas al intra-speca variado en iuj aspektoj de filia konduto. Tamen, kreskanta OTR-esprimo en la NAcc ne sufiĉis por indiki partian preferon-formadon en herbejoj, eĉ post 72-horoj de kunvivado, sugestante ke la specioj diferencoj en akumula OTR sole ne sufiĉas por klarigi la speciojn pri la kapablo formi partneron. preferoj. Gravas rimarki, ke en iuj ajn parametroj ekzamenis neniujn diferencojn pri pariĝa konduto. Tial la plibonigita partnera prefero en la eksperimentaj praaj voloj ne povas esti atribuita al pliigita seksa agado dum la komenca kunvivperiodo.

Plenkreskaj inaj pradaj volvoj montras rimarkindan individuan variadon en sia elmontro de aloparentaj prizorgoj. Ĉirkaŭ 50% de sekse naivaj inoj spontane retiriĝos, lekos kaj funebros super hundidoj prezentitaj al ili (Lonstein kaj De Vries, 1999; Bales kaj Carter, 2003; Olazabal kaj Juna, 2005). Ankaŭ estas signifa individua variado en OTR-denseco en la NAcc inter prasaj volvoj (Juna, 1999). Inoj kun pli altaj densecoj de OTR en la NAcc estas pli verŝajne elmontri aloparentan respondecon ol bestoj kun pli malalta OTR en ĉi tiu areo. Tiel estis mirinde, ke pliigo de OTR-denseco en NAcc de praaj volvoj ne plibonigis aloparentan konduton. La fakto, ke ĉi tiuj bestoj montris akcelitan forman preferon de partneroj, sugestas, ke la OTR derivita de la viral-vektora transgeno estis funkcie kuplita por signali transdukciajn vojojn en la NAcc.

Ni hipotezas, ke individua variado en OTR-aktivigo en la NAcc dum evoluo povas ludi pli gravan rolon en produkto de speci-variaĵoj en aloparentala konduto. La pozitiva korelacio en OTR-denseco en la NAcc kaj aloparentala konduto estis montrita en junaj praderaj volvoj same kiel ĉe plenkreskuloj (Olazabal kaj Juna, 2006b, a). La aloparentala konduto en praaj vulpoj ŝajnas esti precipe sentema al perturboj dum disvolviĝo. Ekzemple, perinatal-ekspozicio al OT ŝanĝas aloparentan konduton en virinaj praaj vulpoj (Bales et al., 2007). Tial, individuoj kun pli altaj densecoj de OTR dum evoluo povas sperti pliigitan OTR-signaladon en la NAcc, rezultigante longdaŭrajn neŭkemiajn ŝanĝojn, kiuj pliigas la probablon montri aloparentan konduton kiam ili fariĝas plenkreskuloj. Se ĉi tiu hipotezo estas ĝusta, ni antaŭdirus, ke kreskanta OTR-esprimo en la NAcc neatene pliigus la oftecon de aloparentaj kondutoj.

Alia klarigo por la malsukceso plibonigi OTR-esprimon en la NAcc por pliigi aloparentan konduton estas, ke variado en OTR-esprimo en multoblaj cerbaj regionoj povas esti necesa por produkti la atendatan diversecon en konduto. Ekzemple, OTR-esprimo en la flanka septumo estas negative korelaciita kun aloparentala konduto (Olazabal kaj Juna, 2006a). Fine, eblas ankaŭ ke variado en hormona ekspozicio aŭ socia sperto influas OTR-densecon en la NAcc aldone al ŝanĝo de aloparentaj kondutoj. Ekzemple, la ĉeesto aŭ foresto de la patro dum disvolviĝo aŭ perinata manipulado de steroidaj hormonoj povas influi la montradon de aloparentala respondeco en virinaj praderaj voloj (Roberts et al., 1996; Roberts et al., 1998; Lonstein kaj De Vries, 2000).

En viraj praaj voloj, vasopresino ludas kritikan rolon en la elmontro de patra konduto same kiel partnera prefero-formado, paraleligante la rolon de oksitocino en inoj (Winslow et al., 1993; Wang et al., 1994). Farmakologiaj studoj pri specifaj retejoj pruvas, ke V1aR en la ventral pallidum, ĉefa produkto de la NAcc, estas kritika por formado de paraj ligoj (Lim kaj Juna, 2004). Pliigi V1aR en la ventral pallidum uzante viral-vektor-genan translokigon de genoj akcelas partneran preferon formadon de viraj praderaj volvoj (Pitkow et al., 2001), trovo kiu paralelas la aktualan studon. Kvankam tro-esprimi V1aR en la ventrala pallidum de masklaj herbejoj ne sufiĉis por indiki patran konduton, ĝi tamen antaŭenigis partneran preferon (Lim et al., 2004); kontraste, en la aktuala studo troekspreso de OTR en la NaCC ne stimulis partneron preferi formadon en inaj herbejoj.

Ekzistas pluraj eblaj klarigoj pri la fiasko de inaj herbejoj kun levita OTR en la NAcc por formi partnerajn preferojn. Unue, diferencoj de specioj en liberigo de OT ene de la NAcc dum apareado povas diferenci inter inaj pradarbanoj kaj volbaj folioj. Kvankam OTR-lokalizado diferencas inter la specio, ambaŭ praaj volvoj kaj herbejaj volvoj havas OT-imunoreaktivajn fibrojn en la NAcc (Ross kaj Juna, nepublikigitaj datumoj). En vivo eksperimentoj pri mikrodijaliso montris, ke pariĝo stimulas liberigon de OT en la NAcc de inaj praaj voloj, sed paralelaj studoj ne estis faritaj en herbejoj (CD Cole kaj Young, nepublikigitaj datumoj). Eblas, ke infuzado de OT en CMV-OTR traktitajn bestojn faciligus partian preferon formiĝi en herbejoj. Tamen oni devas rimarki, ke ĉe ratoj kaj ŝafoj, vaginokervia stimulado pliigas centran liberigon de OT (Kendrick et al., 1986; Sansone et al., 2002). Tial verŝajne, herbejoj jam spertas pliiĝon de akumula OT kun pariĝo. Alia klarigo por la malsukceso de NAcc OTR-esprimo stimuli partnerprefektan formadon en inaj herbejaj volboj estas ke diferencoj de specioj en OTR-esprimo en aliaj cerbaj regionoj ankaŭ estas necesaj por paro-ligado. Ekzemple, OTR-denseco ankaŭ estas pli alta en la prefrontal-kortekso kaj flanka amigdala en praaj voloj kompare kun specioj de neŭroamaj voloj (Insel et al., 1991; Young et al., 1996; Smeltzer et al., 2006). Tial, altigi OTR-esprimon en multoblaj lokoj povas esti necesa por stimuli pariĝon-induktitan partnerpreferojn en paŝtejoj. Finfine, eblas ke multoblaj neŭkemiaj diferencoj inter la specioj respondecas pri specifa diferenco en konduto (ekz. Dopamino, kortikotropina liberiga faktoro) (Gingrich et al., 2000; Liu kaj Wang, 2003; Smeltzer et al., 2006; Lim et al., 2007).

Estas iuj gravaj avertoj de nia eksperimenta aliro, kiuj garantias diskuton. Unue, la CMV-OTR probable pliigis OTR-esprimon en ĉiuj ĉelaj tipoj en la injektita areo, inkluzive de neŭronaj populacioj, kiuj kutime ne respondas al OT. Tamen, eblas ke la transgena OTR rezultis en pli granda signalado en neŭronoj, kiuj normale esprimas endogenan OTR pro plibonigita sentivigo al OT liberigita al tiuj neŭronoj, aŭ ĉeesto de taŭgaj malsuprenirantaj signalaj molekuloj. Due, la areo de transgena esprimo produktita de virusa vektora infuzaĵo ne estis unuforme esprimita super la tuta vizaĝo-kaŭsa aŭ medio-flanka etendo de la NAcc. En la inoj de CMV-OTR, OTR-esprimo estis konstante levita en la ŝelaj kaj apudaj kernaj regionoj de la NAcc. Tamen oni devas rimarki, ke ŝelo de la NAcc estis plej implika en la regulado de partnera prefero-formado kaj OTR-denseco en ĉi tiu sama regiono estas pli alte korelaciita kun aloparenta konduto ol la kerna regiono.

Ĉi tiu estas la unua studo por pruvi konklude, ke variado en OTR-esprimo en la cerbo povas kontribui al variado en socia konduto. OT estis vaste implikita en la regulado de pluraj kondutoj, inkluzive de socia informo-prilaborado kaj memoro, kuna elekto, patrina nutrado kaj alligiteco (Dantzer et al., 1987; Kendrick, 2000; Ferguson et al., 2001; Kavaliers et al., 2003). Nun estas klara pruvo, ke OT modulas ankaŭ homan socian kognon, inkluzive de interpersona fido, okula rigardo, vizaĝa memoro kaj percepto de emocio (Kosfeld et al., 2005; Domes et al., 2007; Guastella et al., 2008; Savaskan et al., 2008). OT-administrado pliigas la retenon de socia kogno en voĉa intonacio-tasko en aŭtismaj subjektoj (Hollander et al., 2007), kaj pluraj genetikaj studoj raportis modestajn asociojn inter ne-kodantaj polimorfismoj de la OTR-geno kaj aŭtismo-spektra malordo.Wu et al., 2005; Jacob et al., 2007; Lerer et al., 2007; Yrigollen et al., 2008). Estas malmulta informo pri la distribuo de OTR, kaj nenio scias pri individua variado de OTR-denseco en la homa cerbo. Niaj rezultoj sugestas, ke variado en OTR-denseco en specifaj cerbaj regionoj povas kontribui al individuaj diferencoj en socia kognitiva funkcio en homoj.

Dankoj

La aŭtoroj volas danki Lorra Mathews pro ŝia bonega laboro administranta nian volejan kolonion. Ĉi tiu studo estis subtenita de NIH koncedas MH064692 al LJY, RR00165 al Nacia Esplorcentro Yerkes, kaj NSF STC IBN-9876754.

Referencoj

  1. Balas KL, Carter CS. Seksdiferencoj kaj evoluaj efikoj de oksitocino sur agreso kaj socia konduto en praaj vulpoj (Microtus ochrogaster) Horma Konduto. 2003; 44: 178 – 184. [PubMed]
  2. Bales KL, van Westerhuyzen JA, Lewis-Reese AD, Grotte ND, Lanter JA, Carter CS. Oksitocino havas dozon-dependajn evoluajn efikojn sur par-ligado kaj aloparentala prizorgado en virinaj praaj voloj. Horma Konduto. 2007; 52: 274 – 279. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  3. Curtis JT, Wang Z. Ventral-tegmenta areo-implikiĝo en paro-ligado en viraj pradaj volvaĵoj. Physiol Behav. 2005a; 86: 338 – 346. [PubMed]
  4. Curtis JT, Wang Z. Glucocorticoid-ricevilo-implikiĝo en paro-ligado en virinaj praaj voloj: la efikoj de akra blokado kaj interagoj kun centraj dopaminaj rekompenco-sistemoj. Neŭroscienco. 2005b; 134: 369 – 376. [PubMed]
  5. Dantzer R, Bluthe RM, Koob GF, Le Moal M. Modulado de socia memoro ĉe viraj ratoj per neŭrohipofizaj peptidoj. Psikofarmakologio (Berl) 1987; 91: 363 – 368. [PubMed]
  6. Domoj G, Heinrichs M, Michel A, Berger C, Herpertz SC. Oksitocino plibonigas "menso-legadon" ĉe homoj. Biol Psikiatrio. 2007; 61: 731 – 733. [PubMed]
  7. Ferguson JN, Aldag JM, Insel TR, Juna LJ. Oksitocino en la meza amigdala estas esenca por socia rekono ĉe la muso. J Neŭroscio. 2001; 21: 8278 – 8285. [PubMed]
  8. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopaminaj D2-riceviloj en la kerno accumbens gravas por socia korinklino en virinaj praaj vulpoj (Microtus ochrogaster) Behav Neurosci. 2000; 114: 173 – 183. [PubMed]
  9. Gruderadams S, Getz LL. Komparo de la apareamiento kaj patra konduto en Microtus ochrogaster kaj Microtus pennsylvanicus. Urnalo de Mamifenio. 1985; 66: 165 – 167.
  10. Guastella AJ, Mitchell PB, Dadds MR. Oksitocino pliigas rigardon al la okula regiono de homaj vizaĝoj. Biol Psikiatrio. 2008; 63: 3 – 5. [PubMed]
  11. Hollander E, Bartz J, Chaplin W, Phillips A, Sumner J, Soorya L, Anagnostou E, Wasserman S. Oksitocino pliigas retenon de socia kogno en aŭtismo. Biol Psikiatrio. 2007; 61: 498 – 503. [PubMed]
  12. Insel TR, Shapiro LE. Oksitocina ricevilo distribuas reflektan socian organizon en monogamaj kaj poligamaj volvoj. Proc Natl Acad Sci Usono A. 1992; 89: 5981 – 5985. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  13. Insel TR, Gelhard R, Shapiro LE. La kompara dissendo de antaŭbrainaj riceviloj por neŭrohipofizaj peptidoj en monogamaj kaj poligamaj musoj. Neŭroscienco. 1991; 43: 623 – 630. [PubMed]
  14. Jacob S, Brune CW, Carter CS, Leventhal BL, Lord C, Cook EH., Jr Asocio de la geno ricevilo de oksitocino (OXTR) en kaŭkazaj infanoj kaj adoleskantoj kun aŭtismo. Neurosci Lett. 2007; 417: 6 – 9. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  15. Kavaliers M, Colwell DD, Choleris E, Agmo A, Muglia LJ, Ogawa S, Pfaff DW. Difektita diskriminacio kaj aversio al parazitaj masklaj odoroj de inaj oksitocinaj frapaj musoj. Genoj Cerbo Konduto. 2003; 2: 220 – 230. [PubMed]
  16. Kendrick KM. Oksitocino, patrineco kaj ligado. Exp Physiol. 2000; 85 (Spec Ne): 111S – 124S. [PubMed]
  17. Kendrick KM, Keverne EB, Baldwin BA, Sharman DF. Cerebrospinalaj fluidaj niveloj de acetilcolinesterazo, monoaminoj kaj oksitocino dum laboro, akuŝo, vaginokerva stimulo, ŝafido kaj apartigo de ŝafidoj. Neŭroendokrinologio. 1986; 44: 149 – 156. [PubMed]
  18. Kosfeld M, Heinrichs M, Zak PJ, Fischbacher U, Fehr E. Oksitocino pliigas fidon al homoj. Naturo. 2005; 435: 673 – 676. [PubMed]
  19. Lerer E, Levi S, Salomon S, Darvasi A, Yirmiya N, Ebstein RP. Asocio inter geno de oksitocina receptoro (OXTR) kaj aŭtismo: rilato al Vineland Adaptive Behavior Scales kaj kono. Mol Psikiatrio. 2007 [PubMed]
  20. Lim MM, Juna LJ. Vasopresin-dependaj neŭralaj cirkvitoj sub la paro-ligoformado en la monogama praa volvaĵo. Neŭroscienco. 2004; 125: 35 – 45. [PubMed]
  21. Lim MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Juna LJ. Plibonigita partnera prefero en promiska specio manipulante la esprimon de ununura geno. Naturo. 2004; 429: 754 – 757. [PubMed]
  22. Lim MM, Liu Y, Ryabinin AE, Bai Y, Wang Z, Juna LJ. La riceviloj de CRF en la kerno accumbens modulas partian preferon en praaj voloj. Horma Konduto. 2007; 51: 508 – 515. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  23. Liu Y, Wang ZX. Nukleo accumbens oksitocino kaj dopamino interagas por reguligi paron-ligadon en inaj pradaj volvoj. Neŭroscienco. 2003; 121: 537 – 544. [PubMed]
  24. Lonstein JS, De Vries GJ. Seksaj diferencoj en la gepatra konduto de plenkreskaj virgulinoj praaj voloj: sendependeco de gonadaj hormonoj kaj vasopresino. J Neuroendocrinol. 1999; 11: 441 – 449. [PubMed]
  25. Lonstein JS, De Vries GJ. Influo de gonadaj hormonoj sur la evoluo de gepatra konduto en plenkreskaj virgulaj pradaj voloj (Microtus ochrogaster) Behav Brain Res. 2000; 114: 79 – 87. [PubMed]
  26. Olazabal DE, Juna LJ. Varieco en "spontana" patrina konduto asocias kun angor-simila konduto kaj afineco en naiva junulo kaj plenkreskaj inaj praderaj voloj (Microtus ochrogaster) Dev Psychobiol. 2005; 47: 166 – 178. [PubMed]
  27. Olazabal DE, Juna LJ. Specioj kaj individuaj diferencoj en juneca virina aloparenta prizorgado estas asociitaj kun oksitocina ricevilo-denseco en la striatum kaj la flanka septo. Horma Konduto. 2006a; 49: 681 – 687. [PubMed]
  28. Olazabal DE, Juna LJ. Oksitocinaj riceviloj en la kerno akcentaj faciligas patran konduton "spontanean" en plenkreskaj inaj praderaj volvaĵoj. Neŭroscienco. 2006b; 141: 559 – 568. [PubMed]
  29. Paxinos G, Watson C. La cerbo de rato en stereotaksaj koordinatoj. kvara Eldona Akademia Gazetaro; San-Diego, CA: 1998.
  30. Pitkow LJ, Sharer CA, Ren X, Insel TR, Terwilliger EF, Young LJ. Faciligo de afiliación kaj paro-ligita formado per genopreceptoro de vasopresina receptoro en la ventran antaŭenon de monogama volumo. J Neŭroscio. 2001; 21: 7392 – 7396. [PubMed]
  31. Roberts RL, Zullo A, Gustafson EA, Carter CS. Perinatalaj steroidaj traktadoj ŝanĝas aloparentan kaj afian konduton en praaj volapoj. Horma Konduto. 1996; 30: 576 – 582. [PubMed]
  32. Roberts RL, Williams JR, Wang AK, Carter CS. Kunlabora reproduktado kaj monogamio en praaj vulpoj: Influoj de la saro kaj geografia variaĵo. Anim Behav. 1998; 55: 1131 – 1140. [PubMed]
  33. Sansone GR, Gerdes CA, Steinman JL, Winslow JT, Ottenweller JE, Komisaruk BR, Insel TR. Vaginocervika stimulo liberigas oksitocinon ene de la spina ŝnuro ĉe ratoj. Neŭroendokrinologio. 2002; 75: 306 – 315. [PubMed]
  34. Savaskan E, Ehrhardt R, Schulz A, Walter M, Schachinger H. Post-lernanta intranasan oksitocinon modulas la homan memoron por vizaĝa identeco. Psikoneuroendokrinologio. 2008; 33: 368 – 374. [PubMed]
  35. Smeltzer MD, Curtis JT, Aragona BJ, Wang Z. Dopamina, oksitocino, kaj vasopresina ricevilo kuniganta en la mezaj antaŭfrontalaj kortekso de monogamaj kaj promiskaj volvoj. Neurosci Lett. 2006; 394: 146 – 151. [PubMed]
  36. Wang Z, Juna LJ. Ontogenio de ricevilo de oksitocino kaj vasopresino en la flanka septo en praaj kaj montaj volvaĵoj. Cerbo Res Dev Cerbo Res. 1997; 104: 191 – 195. [PubMed]
  37. Wang Z, Ferris CF, De Vries GJ. Rolo de sepsa vasopresina inervaĵo en patra konduto en praderaj vulpoj (Microtus ochrogaster) Proc Natl Acad Sci Usono A. 1994; 91: 400 – 404. [PMC libera artikolo] [PubMed]
  38. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Disvolviĝo de partneraj preferoj en virinaj praaj vulpoj (Microtus ochrogaster): la rolo de socia kaj seksa sperto. Horma Konduto. 1992; 26: 339 – 349. [PubMed]
  39. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. Rolo por centra vasopresino en paro-ligado en monogamaj praaj voloj. Naturo. 1993; 365: 545 – 548. [PubMed]
  40. Wu S, Jia M, Ruan Y, Liu J, Guo Y, Shuang M, Gong X, Zhang Y, Yang X, Zhang D. Pozitiva asocio de la geno ricevilo de oksitocino (OXTR) kun aŭtismo en la ĉina populacio Han. Biol Psikiatrio. 2005; 58: 74 – 77. [PubMed]
  41. Juna LJ. Frank A. Beach Award. Oksitocino kaj vasopresinaj riceviloj kaj speci-sociaj kondutoj. Horma Konduto. 1999; 36: 212 – 221. [PubMed]
  42. Juna LJ, Wang Z. La neurobiologio de paro-ligado. Nat Neurosci. 2004; 7: 1048 – 1054. [PubMed]
  43. Juna LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Ĉelaj mekanismoj de socia korinklino. Horma Konduto. 2001; 40: 133 – 138. [PubMed]
  44. Juna LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Diferencoj de specioj en gena esprimo de centra oksitocina ricevilo: kompara analizo de iniciataj sekvencoj. J Neuroendocrinol. 1996; 8: 777 – 783. [PubMed]
  45. Yrigollen CM, Han SS, Kochetkova A, Babitz T, Chang JT, Volkmar FR, Leckman JF, Grigorenko EL. Genoj kontrolantaj filian konduton kiel kandidataj genoj por aŭtismo. Biol Psikiatrio. 2008; 63: 911 – 916. [PMC libera artikolo] [PubMed]