Iturria
Alkoholismoa eta Wagoner Zentroa Addiction Ikerketa, Neurozientzia Institutua, Texas Unibertsitatea, Austin, Austin, TX, 78712, AEB. [posta elektroniko bidez babestua].
Laburpena
LABURPENA:
AURREKARIAK:
Alkoholaren sarrerarekin murriztu edo arintzeko ezintasuna alkoholaren erabilera nahasteen ezaugarri bereizgarria da. Ikerketen portaera eta eredu genetiko berriak edateko aldaketak eragiten dituzten aldaketak gure alkoholaren erabilera nahasteen inguruko ezagutza hobetuko du. Alkoholaren auto-administrazioko jokabide bereiziak aurrez ikusi ziren bi saguzarretako F1 hibridoen tentsioak alderatuz: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) alkoholaren alkohol-kontzentrazio handiko eta abstinentzia-aldietan esperientzia ondoren alkoholaren hobespen murriztua erakutsi C57BL / 6J x FVB / NJ (berriz)BxF) erakutsi alkoholaren hobespen iraunkorra. Fenotipo hauek interesgarriak dira hibrido horiek frogatzen dutela gehigarri genetikoa (BxN) eta overdominance (BxF) etanolaren ingesta agerraldia esperientzia modu mendean hartuta.
Zehazki, BxF-k alkoholaren lehentasun iraunkorra eta BxN-k alkoholaren hobespen murriztua erakutsi ditu etanolaren kontzentrazio altuekin; Hala eta guztiz ere, etanolaren kontzentrazio baxuko esperientziak bi hibridoen alkoholaren lehentasun iraunkorra sortzen du.
Azterlan honetan hipotesia frogatu dugu fenotipo horiek transkripzio faktore induziborako ekoizpen diferentzialak irudikatzen dituztela, ΔFosB, saria, aversion eta estresa lotutako garuneko eskualdeetan.
EMAITZAK:
Plastikozko neuronak (ΔFosB mailak neurtuak) aldaketak esperientzia menpekoak ziren, baita garuneko eskualdeak eta genotipo espezifikoak ere. Zirkuitu neuronalaren aldeko apustua etanolaren kontsumoaren motibazio alderdiak azpimarratu zituen..
BxN saguek alkoholaren murrizketa txikia erakutsi zuten ΔFosB mailak Edinger-Westphal nuklearretan, alkoholaren lehentasun iraunkorrak erakusteko eta ΔFosB mailak erdiko amygdala erdian igo ziren kontrol saguekin alderatuta.
BxN saguak alkoholaren hobespen iraunkorrak erakusten dituzte ΔFosB maila altuagoetan, Edinger-Westphal nukleoa, eta amygdala (erdiko eta alboko zatiketa).
Gainera, sartu BxN saguak ΔFosB-eko Edinger-Westphal nukleoko eta ventral tegmental eskualde mailetan nabarmen positiboki etanolaren lehentasunarekin eta ingestaarekin erlazionatuta. Gainera, klusterizazio hierarkikoko analisiak agerian uzten du ΔFosB maila txikiko iazko sagu etanola gutxi duten sagu ugari daude klusterretan, baina ΔFosB maila altuko ΔFosB maila orokorreko alkoholaren iraunkortasun lehentasunak dituzten saguak asko elkarrekin egiten dira.
ONDORIOAK:
Bi alkohol-fenotipoekin konparatuz eta kontrastatuz, ikerketak frogatzen du sari eta estresarekin erlazionatutako zirkuituek (Edinger-Westphal nukleoa, azaleko segmentu ventrala, amigdalala barne) duten alkoholaren hobespen murriztua adierazten duten plastikotasuna.
Aurrekariak
Badakigu sustapen faktoreak, ingurumen eta genetikoak, alkoholaren gehiegikeriarekin eta alkoholarekin lotutakoak. Alegiazko kopuruen kopuruak edateko alkohol askoren sintoma txikia da, alkoholiko askoren sintoma nagusia da, alkoholaren erantzun maila baxua ahultasun faktore garrantzitsu bat alkoholismoaren garapenean [1,2]. Alkoholaren moderazioan eragiten duten faktore neurobiologikoak definituz gero, alkoholaren erabilera eta tratu txarrak ulertzen lagunduko du, eta alkoholaren erabilera nahasteak diagnostikatzeko tratamendu hobeak garatzeko estrategia eraginkorra da. Giza gaixotasunak imitatzeko karraskarientzako ereduak gaixotasun hau ulertzeko eta tratamenduak hobetzeko aurrera egiteko tresna indartsua izan da. Hainbat alorreko alkoholismoaren eta alkoholismoaren alderdiak aztertzeko leku asko daude, alkoholismoaren eredu bat ere ez. Tamalez, sagu batek etengabeko soluzioak automatikoki administra ditzakeen antzeko ingurumen baldintzen arabera, oso araberakoa izango da atzeko plano genetikoan [3].
Berriki, aurkitu dugu C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) eta FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 hibridoen saguek alkohol maila altuenak alkohol maila altuak auto-administra ditzakete bi botilotarako lehentasunezko probetan (emakumezkoek kontsumitzen dute 20-35 g / kg / egun eta gizonezkoak 7-25 g / kg / eguneko, kontzentrazioaren eta paradigmaren arabera) [4]. Eredu genetiko berri honek abantaila handia du lehendik dauden tentsioekin alderatuta, fenomeno gehiegizantearen froga eta odol handiko alkohol-maila duten edarien artean [4]. Gainera, BxF saguek erakusten duten etanolaren kontsumoa ikus daiteke etanolaren beste bi edateko paradigmetan (ilunpetan eta etanolaren onarpena edateko fluidoen sarbide planean)4]. Alkohol auto-administrazioko jokabide desberdinak ikusi genituenean, bi sagu tentsio F1 hibridoak alderatuz gero: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) alkoholaren kontzentrazio altuak eta abstinentzia alkoholak dituzten esperientzia eta alkoholaren aldez aurreko hobespenarekin BxF erakusketa hobetu ondoren erakutsi [5]. Bateragarritasun probak dituzten bateria erabiliz, BxN sindromea BxF sagu baino sentikorragoa da etanolaren efektuak eta lasaiak, baina ez aberasgarriak. [6].
Alkoholaren kontsumorako goi mailako jokabidearen eta eredu genetikoen inguruko oinarrizko ikerketa eta edateko edateak eragindako esperientziak gure alkoholaren gehiegikeriak eta alkoholismoak ezagutzera emango dizkigu. Alkoholaren hobespen fenotipo murriztua interesgarria da, BxN saguek etanolaren soluzioen lehentasun handia erakusten dute. Alkoholaren kontsumoa murrizteko motibazio-alderdia etanolaren kontzentrazio altuen eta abstinentzia altuaren ondoren ezezaguna bada ere, BxN saguak alkoholaren kontsumitzaile moderatuekin alderatu ahal izango lirateke, etanol soluzioak oraindik ere kontsumitzen baitute, baina maila murriztuan, ustez esperientzia aberatsa dela eta.
Alkoholaren lehentasunezko eredu iraunkorra ere interesgarria da, BxF saguek etanol maila oso altuak kontsumitzen dituztelako, aurreko esperientzia kontuan hartu gabe. Alkoholaren hobespen iraunkorra eta murriztua alkoholaren gabezia efektua izan daiteke, animalia batek alkoholaren kontsumoa areagotu egin du nabarmenki, kontsumoa murriztu ostean.e [7]. Alkoholaren gabezia eragina fenomeno erabilgarria da edateko alkoholaren jokabidea handitzea. Alkoholaren gabezia-efektua induzitzen duen esperimentazio esperimentala alegia, hemen erabilitako ordutegiaren arabera oso desberdina izan arren, alkoholaren gabezia-efektuak alkoholaren eta alkoholaren hobekuntzako alkoholarenganako lehentasunak alderatuz gero, alkoholaren ikerketaren eredu karsten fenomeno garrantzitsu bat eztabaidatzen den portaera-fenotipo desberdinak azaltzen ditu. Alkoholaren hobespen murriztua alkoholaren gabezia efektuaren kontrakoa izango litzateke eta alkoholaren lehentasun iraunkorra alkoholaren gabezia efektuaren gabezia dela esan daiteke. Animalia genetiko eredu askoren erabilera, hala nola, BxF eta BxN, asko laguntzen du alorreko alkoholaren erabilera nahasteak genetikaren eta ingurumenaren arteko elkarrekintza konplexuen ondorioz. Hibrido horietako berehalako hasierako geneen adierazpen diferentziala identifikatzea garunaren zirkuituan garrantzi handia ematen du etanolaren ezaugarri aberats eta aberatsentzat.
Etanolak eta beste droga-arduratzen diren neurocircuits aztertu dituzte karraskarien modelo zehatzetan plastizitate neuronalaren eta / edo jardueraren markatzaile molekularrak erabiliz [8-15]. Autoanalizatutako eta esperimentaleko etanol administratuak ez dira garuneko metabolismo mapen baliokideak, zirkuitu espezifikoak etanolaren indarraren efektuak azpimarratzen ditu [8,9].
Alkoholaren ikerketan sakonki esploratu beharreko funtsezko osagai bat, alkoholaren hobespen iraunkorreko eta portaera jokaerak aztertzea eta jokabide hauen artean arduratzen diren neurona zirkuituak identifikatzea da. Esperimentu honen helburua alkoholaren hobespen iraunkorra eta murriztua arduratzen duten garuneko eskualdeak identifikatzea da. Alkoholaren administrazio kronikoa (tratu txarrak dituzten beste drogekin batera) ΔFosB mailan burmuineko eskualde mailako desberdintasunak erakutsi dituelako frogatzen dugu portaeraren fenotipo horiek transkripzio faktore induziborako ekoizpen diferentziala irudikatzen dutela, ΔFosB, ezagutzen den garuneko eskualdeetan saria, ausardia eta estresa izan behar dira [10].
ΔFosB mailan eskualde mailako desberdintasunak eragiten dituzten kroniken artean, tratu txarrak (alkohola, kokaina, anfetamina, nikotina, morfina eta antipsikotikoak), estres kronikoa (estresaren estresa, oinez shock ezustekoak, seinale elektrokonvulsivatuak)11]. Garuneko epe luzeko egokitze posibleen bitartekari gisa, FosB (FosB edo ΔFosB) aldaera nagusia etanolaren tratamendu kronikoari erantzunez bereizten da.
FosB eta ΔFosB neurtu dituzten hainbat ikerketek estimulu kronikoen ondoren, ΔFosB esferaren mekanismo nagusia (esate baterako, azpitik azaltzen direnak) egiaztatzen ez dutenak dira. Hala ere, froga sendoak daude ΔFosB, ez FosB, estromio kronikoen ondoren isoforma menderatzaileak [10-12]. Ryabinin eta Wang-ek (1998) egindako ikerketa batek aurkitu zuen DBA / 2J saguen gasezko alkohol txikietan, lau eguneko etanolaren injekzioak errepikatzen zirela FosBren esposizioaren handitze sendoak ondorengo garuneko eskualdeetan: aurreko amigdaloa nukleo cortikoa, alboko septum ventrala, amygdala zentrala , alboko amigdalala, alboko hipotalamoaren, nucleus accumbens shell, stria terminalisen ohearen nukleoa eta thalamusaren parabentrikoen nukleoa [13]. Haien emaitzak etanolaren erantzun neurozientifikoa identifikatzen dute. FosB adierazpena alkohol handian ere neurtu da C57BL / 6J sagua etanaren autogestioa eskuratzeko eta mantentze lanak sarbide mugatuen arabera. FosB mailetan aldaketak ez zeuden auto-administrazioa eskuratzean [14]. Hala eta guztiz ere, etengabeko etanol auto-administrazioan bi aste igaro ondoren, FosB maila amygdala eta Edinger-Westphal nukleo erdiko erdiko nukleoa [15]. Oro har, txostenek etanol autokamerikan aritzen diren eskualde berritzaileak identifikatzen dituzte, baita bide mesokorticolimikoa eta amigdalaren hedapena ere.16]. Hala ere, garrantzitsua da ΔFosB mailan aldaketak etanolaren administrazioaren, dosiaren eta tratamenduaren edo ordutegiaren araberako iraupenaren araberakoak direla [13-15].
Azterketan erabilitako sagu-tentsioak eredu interesgarriak eskaintzen dituzte alkoholaren hobespen iraunkor eta murriztuaren eta alkoholaren aldaera ezberdinen arduradunen azpiko mekanismoak alderatzeko. Azterketa honek frogatzen du alkoholaren murrizketa murrizten duten saguak ere sari eta estresatutako zirkuituetan plastizitate esanguratsuak erakusten dituztela (Edinger-Westphal nukleoa, azaleko segmentu ventrala, amigdalala, nukleotidoak eta cortex zinguluak barne).
Emaitzak
Alkoholaren kontzentrazioen eragina eta BxF eta BxN saguen auto-administrazioan abstinenteak diren epeak
Etanolaren kontzentrazio desberdinak eta / edo abstinentzia-aldiak etanolaren kontsumoa aldatu ondoren, etanolaren kontsumoa neurtzeko lau ordutegi (talde) diseinatu genituen. (Figure1a, b).1a, b). Hibrido bakoitzerako lau talde esperimental izan ziren: Kontzentrazio altuak, Abstinentzia epea kontzentrazio altuak, Kontzentrazio baxuak eta Kontinentzi txikiak Abstinentzia epea. Etanolaren hobespenaren datu osoa (irudia (Figure2)2) eta kontsumoa (irudia (Figure3)3) datuak (talde guztientzat eta bi genotipoetarako) erreferentzia gisa aurkezten dira. Alkoholaren hobespen iraunkorraren eta murriztuaren jokabidearen fenotipoak erakusteko eta ilustratzeko, 9% etanola lehentasun eta kontsumorako datuak Figurasen aurkezten dira Figures44 and5.5. Portaera-fenotipo horiek 9% etanolaren hobespen eta kontsumoaren konbinazioan oinarritzen dira, goi-kontzentrazio taldeetan lehenengo eta bigarren, hirugarren eta laugarren aurkezpenetan eta egun baxuko konbinazio baxuko taldeetan. ANNOVA (genotipo x denbora) 9% etanolaren hobespen eta kontsumorako bi modu burutu zen. Kontzentrazio handiko taldea, etanolaren hobespena (irudia (Figure4a)4a) eta kontsumoa (irudia (Figure5a)5a) handiagoak ziren BxFrako BxN baino, eta BxFk alkohol lehentasun eta kontsumo iraunkorra erakutsi zuen bitartean BxNk alkohol lehentasun eta kontsumo murriztua erakutsi zuen (ETANOL LEHENTASUNA - F (3,54) elkarreragina = 4.83, P <0 01, genotipo F (1,54, 24.10) = 0.001, P <3,54, denbora F (9.92) = 0.0001, P <1,54; ETANOL KONTSUMOA - elkarreragina N / S, genotipo F (50.73) = 0.0001, P <3,54, denbora F (11.68, 0.0001) = XNUMX, P <XNUMX). Kontzentrazio altuko abstinentzia duten taldeentzat, etanolaren lehentasuna (irudia (Figure4b)4b) eta kontsumoa (irudia (Figure5b)5b) handiagoak ziren BxFrako BxN baino, eta BxFk alkohol lehentasun eta kontsumo iraunkorra erakutsi zuen bitartean BxNk alkohol lehentasun eta kontsumo murriztua erakutsi zuen (ETANOL LEHENTASUNA - F (3,132) elkarreragina = 15.89, P <0.0001, F genotipo (1,132) = 250.43, P <0.0001, denbora F (3,132) = 27.48, P <0.0001; ETANOL KONTSUMOA - elkarreragina F (3,132) = 11.35, P <0.0001, F genotipoa (1,132) = 510.88, P <0.0001, denbora F (3,132) = 22.42, P <0.0001). Kontzentrazio baxuko taldearentzat, etanolaren lehentasuna (irudia (Figure4c)4c) eta kontsumoa (irudia (Figure5c)5c) handiagoak ziren BxFrako BxNrako, eta hibrido biek alkoholaren lehentasun eta kontsumo iraunkorra erakutsi zuten (ETANOL LEHENTASUNA - interakzioa N / S, F genotipoa (1,54) = 12.2, P <0.01, denbora N / S; ETANOL KONTSUMOA - interakzioa N / S, F genotipo (1,54) = 74.83, P <0.0001, denbora N / S). Kontzentrazio baxuko abstinentzia duten taldeentzat, etanolaren lehentasuna (irudia (Figure4d)4d) eta kontsumoa (irudia (Figure5d)5d) handiagoak izan ziren BxFrako BxNrako, eta bi hibridoek murrizketa moderatua erakutsi zuten alkoholaren lehentasunean eta kontsumoan (ETANOL LEHENTASUNA - interakzioa N / S, F genotipoa (1,132) = 166.58, P <0.0001, denbora N / S; ETANOL KONTSUMOA - interakzioa F (3,132) = 3.61, P <0.05, F genotipo (1,132) = 480.64, P <0.0001, denbora F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Laburbilduz, Kontzentrazio Handiko taldeetan (abstinentziarik gabe), BxF-k alkohol-lehentasun iraunkorra erakutsi zuen bitartean BxN-k alkohol-hobespen murriztua eta kontzentrazio baxuko taldeetan (abstinentziarik gabe), BxF-k eta B6xN-k alkohol-lehentasun iraunkorra erakutsi zuten. Intereseko fenotipoak abstinentziarik gabe taldeetan hobekien atzematen direnez, ikerketaren gainerako ardatza dira.
ΔFosB mailak
ΔFosBren kuantifikazioa eta analisia alkoholaren hobespen iraunkor eta murriztuan kronikoki aktibatuta dagoen neurocircuitrya identifikatzeko erabiltzen zen. Hibrido bakoitzerako hiru talde esperimental ziren: kontzentrazio altuak, kontzentrazio baxuak eta ura (kontrolak). ΔFosB datuak ehuneko ΔFosB neuron positiboetan aurkezten dira [(ΔFosBren neuronak positiboak #) / (# neuron positiboak N ΔFosB + Nissl posizioko neuronak)] (Taula (Table1).1). Aurreko lanak erakutsi du etanolaren esperientziak neurodegenerazioa bultzatu dezakeela [17]. Hori dela eta, ikertzaile honen neuron-zenbakiak ikertu genituen eta azterketa honetan kuantifikatutako garun-eskualdeetan genotipo edo taldean oinarritutako desberdintasun esanguratsurik ez. Honako hiru analisi hauek egin dira ΔFosB datuak: 1), hiru aldeko ANOVA (genotipo x taldea x garuneko eskualdea), 2) genotipo bakoitzerako ANOVA (garuneko eskualdeen x taldea) eta bi korrelazio matrizeak korrelazioen mapan garatu ziren. sareak.
Errepikatutako neurriek hiru bider ANOVA (genotipo x taldea x garuneko eskualdea) genotipo x garuneko eskualde elkarrekintza agerian utzi dute [F (15,375) = 2.01, P <.05], talde garuneko eskualde elkarrekintza [F (15.375) = 1.99, P <0.01], eta garuneko eskualdearen efektu nagusia [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Genotipo bakoitzeko bi norabideko ANOVA (garuneko eskualde x taldea) errepikatutako neurriek erakutsi zuten talde eta garuneko eskualdearen efektu nagusia BxF zein BxNrentzat [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, efektu nagusia taldea; F (15,374) = 25.64, P <.0001, garuneko eskualdearen efektu nagusia; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, taldearen efektu nagusia; F (15,360) = 23.73, P <.0001, genotipoaren efektu nagusia]. Hoc osteko analisiak BxNren sei talde desberdintasun esanguratsu agerian utzi ditu (irudia (Figure6a-c).6ac). ΔFosB mailak ehuneko altuagoak izan zituzten Kontzentrazio Baxuko taldetan, La, CeC / CeL, EW eta UTIko U taldeetan baino. ΔFosB ehuneko altuagoa izan zen Goi Kontzentrazioen taldeko CeMPVeko Ura taldetan baino. % ΔFosB ehuneko altuagoa izan zen Kontzentrazio baxuen taldetan, Goi Kontzentrazioen taldean baino. ΔFosB datu guztiak garatutako beste eskualde batzuei buruzko datuak Tablean aurkezten dira Table1.1. Pearson-en r korrelazio analisia garuneko eskualde jakin batean ΔFosB positiboen neuronen% etanolaren kontsumoarekin edo lehentasunarekin erlazionatuta dagoen jakiteko erabili da. Etanolaren kontsumoak eta lehentasunak korrelazio positibo nabarmena erakutsi zuten% ΔFosB-rekin BxN saguen EW eta VTAn (ETANOL KONTSUMOA - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ETANOL LEHENTASUNA - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 guztientzat).
ΔFosB adierazpenaren, genotipoaren, garuneko eskualdeen eta etanolen kontsumoaren arteko harreman konplexuagoa esploratu egin da osagai nagusien analisia eta kluster hierarkikoa erabiliz. Osagai nagusien analisiaren arabera, 80 osagaiak irudikapenen gehiengoaren (~ 5%) datuen arabera irudikatu zuen. Unsupervised hierarchical clustering (gizabanakoek eta garuneko eskualdeek biltzen) ondoren egin eta ordenatu zuten lehenengo osagai nagusia erabiliz (Irudia (Figure7).7). Banakako klusterrak agerian uzten du etanolaren kontsumoan oinarritzen den talde sendoa, baina ez da perfektua, genotipoa edozein dela ere. Etengabeko sagu etanolak asko elkartu eta ΔFosB orokorra baino txikiagoa izan zen, batez bestekoa baino askoz handiagoa eta alkoholaren aldaera iraunkorrak erakusten zituzten saguak baino. Bi kluster hauek izan ziren gehien desberdina. Hiru klusterrek ΔFosB balioak eta etanolaren betaurrekoen nahasketa baino txikiagoa, gutxiago eta batezbestekoa izan zuten.
Eztabaida
Alkoholaren auto-administrazioko jokabide bereizgarriak bi sagu tentsio H1 hibridoak alderatuz gero, BxN-k alkoholaren kontzentrazio altuak eta abstinentzia-aldiak dituzten esperientziak ondoren alkoholaren hobespen murriztua erakutsi du, BxF-k alkoholaren aldez aurreko hobekuntza erakusten baitu. BxF-k eredu egonkorrak, kontsumo altuak (alkoholaren hobespen iraunkorra) eta BxN ereduek edateko moderatua (alkoholaren hobespen murriztua) dituzte. Plastikozko neuronaltasuna (edo jarduera, ΔFosB mailak neurtzen duenez) etanolaren esperientzien arabera desberdina izan zen, eta neuronaren zirkuitu espezifikoen eginkizuna azpimarratzen du alkoholaren hobespen iraunkor eta murriztuan.
C57BL / 6, etanolaren lehentasuna eta kontsumoa alkohol gehiegizko tentsio altukoak direla eta, hasierako etanolaren kontzentrazioaren araberakoa da, abstinentzia luzea eta azpi-tentsioa (C57BL / 6Cr edo C57BL / 6J)7,18]. BxF-ko saguen ikusitako etanolaren hobespen eta kontsumoa koherentea izan zen (eta BxN baino egonkorragoak) lau probetan landutako probetan. BxN-ko etanolaren lehentasun eta kontsumorako neurri moderatuan edateko kronikotasunaren programa bakarrarekin (abstinentzia gabeko kontzentrazio baxuak) mantendu ziren, eta lehentasunen eta kontsumoaren murrizketak probatu zituzten beste edateko txerto kroniko guztiekin. BxN alkohol-hobekuntza murriztua animalia-eredu berri bat eskaintzen du, eta esperientzia (etanolaren hainbat etanolaren kontzentrazio anitzetan eta / eta abstinentzia-epe laburrean esperientzia duten hainbat aldiz errepikatzen denean) nabarmen murrizten du etanolaren kontzentrazio oso lehiakorra.
Etanol autoamministratzaile eta esperimentalek emandako garuneko metabolismo mapak garatzen dituzte, eta zirkuitu espezifikoak etanolaren indar indargarriak azpimarratzen ditu. [8,9]. Hipotesia frogatu dugu alkoholaren hobespen portaeraren fenotipo iraunkorrak eta murriztuak transduzio induzituaren ekoizpen diferentzialak irudikatzen dituztela, ΔFosB, premia, aversion eta estresean parte hartzen duten garuneko eskualdeetan. ΔFosB epe luzeko egonkortasun berezia duen transkripzio faktorea da, eta ez du estimulurik desbideratzen c-Fos-ek, baizik eta tratamendu kronikoetan metatzen da. ΔFosB-en handitzeak jarduera neuronala areagotzea eragiten dute eta neuronaren plastikotasun iraunkorra islatzen dute. Garuneko eskualdeetan ΔFosBren erreakzio positiboen ehunekoak aurkitu genituen genotipoaren (BxF eta BxN) eta taldearen (Uren kontrola, kontzentrazio baxuak eta kontzentrazio altuenak).
Fedo BxN, post-hoc analisia agerian uzten zuen bolumeneko etanolaren kontsumoa ΔFosB handitu zela EW nuklear, VTA eta amigdalan: plastikotasun neuronala handitu egin zen etanolaren, sariaren eta estresaren erantzunetan garatutako garuneko eskualdeetan. Kontzentrazio handiko taldearen BxN saguak (alkoholaren hobespen murriztua) EH-ko plastizitate neuronala murriztu dute, neuronek alkohol-sarrerarekin erantzuten dieten esperientziaz gain, menpekotasun plastikoarekin. Kontzentrazio txikiko taldean (alkoholaren hobespen iraunkorra erakutsi), EJko plastizitate neuronala goi kontzentrazioetan eta Uren kontroleko taldeetan baino handiagoa da. Etanolaren paradigma eta saguaren eredu genetikoen erabilerarekin egindakoa kontuan hartuta, gure BxN saguen EWren aurkikuntzak etanol kontsumoaren aurreko ikasketekin adostu dira [14,15]. EWren ez-preganglionikoa duela gutxi izan da perioculomotor urocortina (Ucn) duten neuronak edukitzea [19]. Ucn1, CRF1 eta CRF2 errezeptoreekin lotzen duen peptido gisa erabiltzen den corticotropin askatzailea (CRF) bezalakoa da. Ikerketa genetiko, farmakologiko eta lesioen erabilerari buruzko aurreko ikerketek erakutsi dutenez, UcnXUMXk alkoholaren kontsumoa arautzen du [19-22]. THemen, alkoholaren sarrerarekin oso harremana genetikoa da karraskariak, Ucn1-ren oinarrizko maila altuagoak EW eta LSi mailatan [23]. Horrela, EW-k alkohol gehiena eta BxF-ko saguak kontsumitzen dituen garrantzi post-hoc falta zen ustekabeko. Agian hau da BxF uraren taldeko ΔFosB ehuneko zertxobait altxatzen den BxN uraren taldearekin alderatuta. Izan ere, ehuneko ΔFosB mailak, alkoholaren hobespen iraunkorra (BxF High Concentrations group, BxF Low Concentrations taldea eta BxN Low Concentrations taldea) antzekoak izan ohi dituztenak, oso antzekoak dira.
BxNrako, kontzentrazio baxuko taldeetan etanolaren kontsumoak plastikozko neurona handitu zuen VTAn (kontzentrazio altuen eta uraren kontroleko taldeetan baino handiagoa). Etanolaren lehentasuna eta kontsumoa ere handiagoa zen kontzentrazio baxuko taldean. BxF saguak prezipitatu eta kontsumitzen dituzten alkohol altuetan VTAan ikusi dugun garrantzi post-hoc falta zen ustekabeko eta ΔFosB basaleko maila baxuagokoak izan litezke uraren kontrol-taldean. ΔFosB-ko ehunekoak BxF ur-taldean pixka bat altxatu ziren BxN uraren taldearekin alderatuta, ΔFosB-ko ehunekoak nahiko antzekoak ziren alkoholaren lehentasun iraunkorra (BxF High Concentrations group, BxF Low Concentrations group eta BxN Low Concentrations group) . VTA dopamina-sistemak etanolaren indar-efektuak bitartekotzerakoan funtsezko zeregina betetzen du eta etanolaren eta saritutako jokabideen artean garrantzitsuak diren konexio errealetan parte hartzen du [24-26]. Gainera, VTA proiektuak amygdala eta EW nuklearentzako. Arratoiak automatikoki etanol administra ditzakegu VTAra zuzenean [27]. Era berean, etanolaren esposizioa VTAren neurona dopaminergikoen tasa tiroztatzen du [28,29]. Handitutako tiro-tasa BZNren ΔFosB indukzioarekin lotu daiteke BTAren borondatezko etanola kronikoko administrazioaren ondoren.
Alkoholaren mendekotasuna epe luzeko neuroadaptazioek eragiten dute, emozio-egoeren negatiboak direlako; indargarri negatiboan mekanismo garrantzitsua da amikdalaren barruan seinaleztapena duen corticotropin-releasing factor (CRF) seinalea [30]. CeAren neuronaren manipulazio farmakologikoak GABA, CRF, opioide, serotonina, dinorfina eta norepinefrina hartzaileei zuzenduta daude [25,31-34]. GABA antagonistek, baita CRF antagonistei, etanolaren kontsumoa murrizten dute [32,33,35]. CeAren lesioak etengabeko sarbidea eten bolumena kontsumitzen du [36]. Gure aurkikuntzek gehiago onartzen dute CeA-ren zeregina arauaren alkoholaren edateko portaeran. GABAergikoen neuronak erdiko amigdalan osatzen dute, populazio heterogeneoak osatzen dituzten konexioek peptidoaren edukiarekin zerikusia dutenak. GABAergikoen neuronak CeAren irteeraren jarduera osatzen dute. Berrikusi bezala [Wee eta Koob (2010]), sHainbat ikerketek dinosauroen eta kappa opioideen errezeptoreen rola identifikatu dute etanol intakeen mantentze eta eskalamenduane [37]. Duela gutxi, Walker et al frogatu du κ-opioideen hartzailearen antagonistek, nor-binaltorphimine, amygdala hedatuaren barruan selektiboki murrizten dutela etanolaren auto-administrazioa animalia menpekoetan [38]. Kappa opioideen hartzailearen seinaleztapena estresaren intersekzioaren, interesaren eta abusuaren intersekzioaren intereseko funtsezkoa izaten jarraitzen du. Ere frogatu du estresaren eragindako etanaren autoadministrazioa kappa opioideen hartzailearen seinaleztapena dela medio [39]. CeA erdigunea latero-capsularra (CeL / CeC) eta laterial ventral medialean banatu daiteke. CeL / CeC-ren GABAergikoen neuronak dopaminergia-innervationek jasotzen dute VTAtik; Aurretik adierazi bezala, neurona horiek etanola agudoaren administrazioaren ondoren aktibatzen dira eta ΔFosB saguak umeen alkoholaren aldez aurreko hobespena erakusten dute. Era berean, ikusi Mc [Ezkontidea (2002]) CeAren berrikuspen bikain eta alkoholaren efektuak [40]. Gure azterketan, BxN alkoholaren hobespen iraunkorreko saguak (Kontzentrazio Baxuko taldea) CeC / CeL eta La eta BxN saguak dituzten plastikozko neurona handitu bat erakutsi zuten. Alkoholaren hobespen murriztua (kontzentrazio handiko taldea) erakutsi zuten plastikozko neurona handitu egin zen CeMPVn. Emaitzek iradokitzen dute etanolaren esperientzia espezifikoa plastikoan gertatzen dela amabdalaren GABAergiko neuronetan. Datu horiekin batera, VTA eta EWren plastikotasun neuronaleko aldaketekin batera, zirkuitu hau proposatzen dugu plastikotasun esanguratsua alkoholaren lehentasunezko baldintzetan.
Ikerketek erakutsi dutenez, C57BL / 6J saguak odoleko alkoholaren maila altua lortzen du bi botilako edateko aukerarekin, baina alkoholaren maila horiek ez dira mantentzen, eta edaten ez duten arren Dole eta Gentryk (1984) ezarritako motibazio farmakologikorako irizpideak betetzen dituzte [41,42]. BxN saguak gutxienez alkoholaren lehentasun murriztua erakutsi zuen C57BL / 6J saguaren [1]. Hori dela eta, odoleko alkoholaren laginak hartu ez badituzu ere, ez da seguruenik BxN alkoholaren murrizketa murriztua lortzen duten BxN saguak farmakologikoki garrantzitsuak diren odoleko alkohol-mailak jasotzen dituztela eta odoleko alkoholaren kontzentrazio altuak iradokitzen ez direla garuneko eskualde horien plastizitatea bultzatzeko. Garrantzitsua da BxF taldearen efektuak oso esanguratsuak izatea ere, BxF burmuineko eskualdeen emaitzak post-hoc (zuzendutako konparazio anitzetarako) ez zirela adierazi ΔFosBren neurona positiboek aldaketa esanguratsuak adierazi zituzten etanol kronikoen kontsumoaren ondorengo eskualde guztietan ordutegi desberdin horiekin.
Aldagaiak sailkapen hierarkikoetan egindako harreman potentzialak ikusteko. Emaitza analitikoaren beroaren mapa ΔFosB mailen eta etanolaren kontsumoa, genotipoaren arabera, joera orokorra erakusten du. Goi mailako ΔFosB mailak kontsumo handiarekin lotu ziren eta ΔFosB maila txikiagoa kontrol kontrolarekin lotutako animaliak ziren; Hala eta guztiz ere, harremanaren indarra ez zen nahikoa edateko fenotipoak aurreikusteko, soilik ΔFosB mailetan oinarrituta.
Ondorioak
Alkoholaren auto-administrazioko jokabide bereiziak bi saguzarretako F1 hibridoekin ikusi ziren: BxN-k alkoholaren hobespen murriztua erakutsi zuen alkohol-kontzentrazio handiko esperientzia baten ondoren eta BxF-k alkoholaren hobespen iraunkorra erakutsi zuen. BxF-k eredu egonkorrak, kontsumo altuak (alkoholaren hobespen iraunkorra) eta BxN ereduek edateko moderatua (alkoholaren hobespen murriztua) dituzte. Plastikozko neuronak (ΔFosB mailak neurtuak) aldaketak esperientzia-menpekoak ziren, baita garuneko eskualdeak eta genotipo-espezifikoak ere, neuronaren zirkuituak definituz gero etanolaren kontsumoaren alderdi motiboak azpimarratzen zituena. Emaitza hauek erakusten dute saguaren hibridoetan guraso-lerroen aldaketak alkoholaren kontsumoaren ereduen aldaketak eta ΔFosB adierazpeneko ereduen aldaketak markatzen dituztela, garuneko sare desberdinek sagu hibrido desberdinetan aritzen direla iradokitzen dutela.
Metodoak
Etika
Azterketa hori Osasun Institutu Nazionalen Laborategiko Animalien Arreta eta Erabilerarako Gomendioen gomendioen arabera egin zen. Protokoloak Texas Unibertsitateko Animal Care eta Erabilera Batzordearen Batzordeak (AUP 2010-00028) onartzen ditu. Kirurgia guztiak sodio pentobarbital anestesiarekin egin ziren, eta sufrimendua minimizatzeko ahaleginak egin ziren.
Animaliak
Ikasketak C1BL / 57J eta FVB / NJ edo NZB / B6NJ saguak (BxF F1 eta BxN F1, ama-tentsioa x aintzat hartzea) eratorritako emakumezkoak F1 saguarekin egindakoak ziren. C57BL / 6J, FVB / NJ, eta NZB / B1NJ hazleek The Jackson Laboratory-etik erosi zuten (Bar Harbor, ME) eta 7-8 astean bitan banatu zen. Kumeak genotipo bakoitzeko talde isosexualetan (BxF F1, BxN F1) desegin zituzten. Saguak bakarrik probatu genituen aurretiaz bildutako datuen arteko alderaketa errazteko [1,5,6]. Saguak kaiola arruntetan zeuden, janariarekin eta urarekin ad libitum. Colonia gela eta probako gela 12 h argi batean zeuden: 12 h iluntzeko zikloa (07-en argiak: 00).
Bi botila aukeratu etanol hobespenen proba
Botila bi aukeren metodoa erabili zen, BxF eta BxN emakumezkoen saguetan, borondatezko etanaren auto-administrazioko ereduak zehazteko [1,6]. F1 harrizko saguzarre hibridoak (adina 63 egun) kaiolak estandar batean banatu ziren banan-banan, etometroko soluzio bat sartu aurretik urarekin duten sipper hodiarekin nahastuta. Habituation ondoren, saguak bi botila berdinak izan zituzten: bata ura eta bestea etanol soluzioa dutenak. Kanpoko posizioak egunero aldatu ziren posizio hobespenak kontrolatzeko. Isurketa eta lurrunketa potentzialak kontuan hartuta, saguak gabe kontrol kaietan hodiak apurtutako batez besteko pisua egun bakoitzeko edateko edari bakarretatik kendu zen. Saguek 4 egunean behin pisatu zituzten esperimentuan zehar. Fluidoen kontsumoa esperimentu osoan zehar neurtu zen egunero. Etanolaren kontsumoa eta etanolaren lehentasuna sagu bakoitzaren arabera kalkulatu ziren eta balio horiek etanolaren kontzentrazio guztien batez bestekoa izan zen. BxF eta BxN saguen auto-administrazioko alkohol-kontzentrazioen eta abstinentzia-aldien efektuak kontzentrazio altuetarako sarbidea duten talde esperimental bat izendatzea frogatu zen (3-35% etanolen soluzioetara iristeko eskalada, 3 errepikatutako 9, 18, eta 27% etanola, 9% etanolaren azken aurkezpenarekin amaituta) eta kontzentrazio baxuko talde bat (3-9% etanorako sarbidea eskalatzea, 9% etanolera sartzeko egindako esperimentuaren gainerakoa). Talde horietako bakoitzak asteko astebeteko hiru abstinentzia egin zituen edo ez zuen azpimaila izan. Saguaren kontrolak antzeko baldintza izan zituen saguak esperimentatzen zituen aldi berean, baina ur botila bat bakarrik eskaini zioten.
Guztira, hibrido bakoitzeko bost talde zeuden: Ura (n = 14-16), Kontzentrazio altuak (n = 10), Abstinentzia epea kontzentrazio altuak (n = 20), Kontzentrazio baxuak (n = 10) eta Kontzentrazio baxuak Abstinentzia epeekin (n = 20). Irudia ikusteko Figure11 bi botilako aukeraketa taldeko ordutegi zehatzenetarako.
ΔFosB Immunohistoquímica eta kuantifikazioa
OsFosB immunohistokimika (IHC) 16 burmuineko eskualdeetan neurtu zen 72 uretan (Kontrola) edo urarekin eta alkoholarekin [Kontzentrazio altuak eta kontzentrazio baxuak] 73 eguneko etengabeko sarbidea izan zuten saguetatik. Kontzentrazio handien eragina etanolaren lehentasunean eta kontsumoan abstinentziaren eragina baino askoz ere handiagoa zen; beraz, abstinentzia aldiak izan zituzten taldeak ez ziren ΔFosB IHC neurketetan sartu. Gainera, esperimentua alkoholaren lehentasun iraunkor edo murriztuaren lehen itxuratik harago burutu zen, portaeraren fenotipoak egonkorrak direla erakusteko etanolaren kontzentrazio aldaketen ziklo errepikatuak etanolaren kontsumo kronikoaren ondorioak aztertzeko. Esperimentuaren 175. egunean alkohola kendu eta lau edo zortzi ordu igaro ondoren, saguak anestesiatu egin ziren (20 mg / kg sodio pentobarbital) eta barnealdean perfusionatu zituzten 0.01 M 100 M fosfato bufferatutako gatz (PBS) 4 ml-rekin, eta ondoren, 4 ml% 4 paraformaldehidoa PBSn. Burmuinak kendu ziren,% 3 paraformaldehidoan konpondu ziren 50 ° C-tan,% 30 agarosan sartuta, bibratomo batean zatituta (30 um, korona), krioprotektantean jarri ziren (% 0.1 sakarosa,% 4 etilenglikola eta% 20 polibiniloa pirrolidona PBSn) gauean 0.3 ° C-tan, eta -2 ° C-tan biltegiratuta IHCrako prozesatu arte. Desizoztutako atalak PBSarekin garbitu,% 2 H3O4rekin tratatu eta ordu batez inkubatu ziren% 3 ahuntz serum normalean, markaketa ez zehatza gutxitzeko. Ehunen atalak gauean inkubatu ziren 48 ° C-tan% 1 ahuntz serum normalean eta anti-FosB (SC-5000, 1: 200 diluzioa, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Atalak garbitu, inkubatu egin ziren untxiaren aurkako ahuntz Ig biotinilatuan (1: 200 diluzioa, Vector Laboratories, Burlingame, CA) ordubetez, garbitu eta inkubatu ziren avidina-biotina konplexuan (0.05: 0.015 diluzioa, Elite kit-Vector Laboratories) . Peroxidasaren jarduera% XNUMX diaminobenzidinarekin (% XNUMX H) duen erreakzioaren bidez ikusi zen2O2). Ehunen sekzioak Nissl zenbatu zituzten (metileno urdin / azure II erabiliz). Diapositibak itsuentzako zenbaketa kodifikatu ziren. ΔFosB-IR neuronak 50X (olioa) handitzean zenbatzen ziren, fractionator optikoaren metodoa erabiliz eta StereoInvestigator ordenagailuko softwarea erabiliz. Laginketa parametroaren informazioa: zenbaketa markoa (50um x 50um x 10um) berdina izan zen eskualde guztietan kuantifikatuta; Hala eta guztiz ere, sareta-tamaina garuneko eskualde bakoitzerako zehaztu zen, bilateral zelula-zenbaketa totalak 100-300 berdina izan zedin, 0.1 baino gutxiagoko aldakuntza koefizientea lortzeko. Datuak ΔFosB nukleo positiboen ehuneko gisa kalkulatu ziren (ΔFosB nukleotido positiboak / neuronak).
Ikerketa honetan erabiltzen diren FosB antigorputzak (SC-48, Santa Cruz Bioteknologia, Santa Cruz, CA) FosB eskualde barneko baten aurrean planteatu dira eta FosB eta ΔFosB aitortzen ditu. Antigorputz honek FosB eta ΔFosB aitortzen dituen arren, ikerketan kuantifikatutako neuron immunopositiboek ΔFosB neuron positiboak deituko dituzte, eta frogatu denez, gehiegikeria drogak, alkoholak barne, zehazki induzitzen dute ΔFosB, ez FosB, neuronetan. Perrotti et al. ([2008]) ΔFosB indukzioa neurtu zuen (tratu txarrak administrazio kronikoaren aurrean, alkohola barne), bi antigorputz erabiliz: FosB eta ΔFosB (SC-48) eta ΔFosB (ez komertzialki erabilgarriak) hautemangarria eta droga guztientzat Foskuneko antigorputzarekin (SC-48) erabiliz ikusitako immunorea-aktibitatea ΔFosB-ren ondorioz gertatzen da, ez baitituzte inongo immunore-aktibotasun neuronarik antzeman antigorputz selektiboaren bidez FosB-ren luzera osoan [10]. Gainera, ΔFosB garuneko eskualdean eta zelula-motako modu espezifikoan induzitzen da ezaguna, tratamendu kroniko desberdinek eta gai honi buruzko iritzi bikainak daude eskuragarri [11,43,44].
Egitura neuroanatomikoen laburpenak eta kokapenak
Il - kortex infralimbikoa (+1.70 mm); Cg1 - kortex zingulatua 1 (+1.1 mm); Cg2 - kortex zingulatua 1 (+1.10 mm); NAcc core - nucleus accumbens core (+1.10 mm); NAcc shell - accumbens shell nukleoa (+1.10 mm); LSi - alboko septum tartekoa (+1.10 mm); La - alboko amigdala (-1.22 mm); Bla - amigdala basolaterala (-1.22 mm); CeC / CeL - erdiko kapsularra eta erdiko alboko amigdala (-1.22 mm); CeMPV - amigdalaren erdiko nukleoaren zati posterioventral mediala (-1.22 mm); PAG - gris periaquaductal (-3.64 mm); EW - Edinger-Westphal nukleoa (-3.64 mm); VTA - ventral tegmental area (-3.64 mm); DR - bizkarreko rafea (- 4.60 mm); PBN - nukleo parabrakiala (-5.2 mm); NTS - nukleoaren traktu solitarioa (-6.96 mm). Stereotaxiako Koordenatuen Mouse Brain[45] bat edo hiru atal subjektiboki lotu zen garuneko eskualde bakoitzean kuantifikatzeko.
Prozedura estatistikoak
Datuen batez besteko ± SEM gisa jakinarazi dira, bestela adierazi izan ezik. Datuak normalean banatzen ziren. Estatistikak 6 (StatSoft, Tulsa, OK, USA) eta GraphPad Prism bertsioaren 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA) estatistikak egin ziren. Bi aldiz errepikatutako neurriak ANOVAk etanolaren kontsumorako eta lehentasunezko datuak egiteko erabiltzen ziren taldeen arteko ezberdintasunak ebaluatzeko. ANOVAs bi eta hiru bider izan ziren ΔFosB datuetarako, elkarrekintzak eta taldeko ondorio nagusiak ebaluatzeko (Kontzentrazio Handiak, Kontzentrazio Baxuak eta Ura), garuneko eskualdea eta genotipoa. Bonferroniren konparaketa anitzak eta Bonferroni-ren post-hoc zuzentzeak egokiak ziren. Zehazki, estresa eta saritzeko zirkuituak FosB handitu egingo lirateke saguak, alkoholaren hobespen murriztua erakutsiz. Gurutze hibriko bakoitzeko, Pearson-en R-a erabiltzen da ΔFosB mailen eta etanolaren lehentasun eta kontsumoaren arteko korrelazio esanguratsuen presentzia identifikatzeko etanol-saguetan.
Elkartruke hierarkikoa egin zen datuen elkartrukea nola aldatu eta datuak elkarrekin nola ebaluatu. Balio mediana kalkulatuek ehuneko ΔFosB datu falta zuten, eta ez ziren datuen% 15 gainditzen. Inkestatutako balioek egiaztatutako balioak baino ziurgabetasun handiagoa badago ere, klusterizazio hierarkikoa aztertzeak zorroztasun osoa eskatzen du kasu-jakintsuen konparazioetarako. Klusterren hierarkikoa Ward-en metodoa erabiliz egin zen eta osagai nagusien osagai nagusia (JMP®, 8 bertsioa, SAS Institute Inc., Cary, NC) osagai nagusiaren lehenengo osagaiaren arabera ordenatu ziren. Ura eta etanol-talde esperimentatuentzat, ΔFosB datuak garuneko eskualde bakoitzerako z-puntuazioa eraldatu zen eta osagai nagusiak aztertzea egin zen kluster kopuruaren arabera. Datuak ondoren, garuneko eskualdeek eta partikularrek klusterizazio analisi hierarkikoari jarraiki erabiltzen zituzten.
Autoreen ekarpenak
ARO, YAB, RAH, TAJk azterketaren diseinuan lagundu du. AROk datuak eskuratu ditu. ARO, IP, RDM datuak aztertu zituen. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB eta RAH eskuizkribua idazteko eta berrikusteko parte hartzen dute. Egile guztiek azken manuscrito irakurri eta onartu dute.
Eskerrak
Drs eskerrak eman nahi dizugu. Jody Mayfield eta Colleen McClung eztabaida lagungarrietarako eta Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour eta Darshan Pandya laguntza teknikoetarako. Ikerketa hori Grant AA13520 Alkoholismo Partzuergoko Neurozientzia Integrazioko Ekimenaren laguntzarekin eta Alkoholaren eta Alkoholismoaren Laguntzako AA06399-S eta AA16424 Institutu Nazionalak babesten du.
Erreferentziak
- Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. El fuego mítico y la respuesta al alcohol en misión indígena. Am J Psikiatria. 1997;154: 983-988. [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Subgrupoen aurkikuntzak, alkoholaren erantzunaren maila gisa, alkoholaren erabilera nahasteen arrisku faktore gisa: emakume eta latinoen unibertsitateko biztanleria. Alkohola Exp. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Etanolaren borondatezko kontsumoa 15 saguaren gurutzean. Psychopharmacology. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Hibridoak C57BL / 6J x FVB / NJ saguak alkohol gehiago edaten dute C57BL / 6J saguak baino. Alkohola Exp. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Alkohol kontsumorako goi mailako eredu genetikoak hibridoak dira. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. C57BL / 6JxFVB / NJ eta C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1 sagu hibridoen arteko portaeraren arteko ezberdintasunak: etanolaren kontsumorako kontrola. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Alkoholaren gabezia eta eskalatze efektua C57BL / 6J-en garapenean. Alkohola Exp. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Etanolaren eta etanolaren / sacrosioaren auto-administrazioaren efektuak arratoien tokiko garun-glukosa erabilerarako tasetan. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ. Etanolaren dosi baxuen eta moderatuek arratoien garuneko metabolismo aldaketak sortzen dituzte. Alkohola Exp. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indukzioaren ereduak bereiztea burmuinean indukzioaren bidez. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: garuneko epe luzerako moldaketa molekularra. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB zelula populazio batean GABAergic batean pilatzen da tratamendu psikotermulatuaren ostean. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Ryabinin AE, Wang YM. Alkoholaren alkoholaren errepikapena diferentzialki eragiten die C-Fos eta FosB proteinen immunorea-aktibitatea DBA / 2J saguengan. Alkohola Exp. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. ITFen adierazpena saguaren garunean, alkoholaren auto-administrazioa eskuratzean. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Alkoholaren edateko garuneko eskualde-aldakuntza selektiboak transkripzio induzitu faktoreen adierazpenean ekoizten ditu. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Kalivas PW. Nola determinatzen dugu droga-induced neuroplastic changes that are important? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Crews FT, Nixon K. Alkoholismoaren neuroendekapen eta birsorkuntza-mekanismoak. Alkohola. 2009;44: 115-127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Gurutze Ref]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. C57BL / 6 saguen substantzien etanol-gabezia eragina karakterizatzea. Alkohola. 2006;40: 119-126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Urokortina 1 sagu-garunean banaketa tentsio-menpekoa da. Neurozientzia. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Ryabinin AE. Edding-Westphal nukleoaren lesioak C57BL / 6J saguen etanol-induced hypothermia eta etanol kontsumoa eten. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Urokortina 1 mikroinjekzioa saguaren alboko zatian sartu eta alkoholaren kontsumoa eskuratzea eta adierazpena arautzen du. Neurozientzia. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Urocortin 1 adierazpena, alkoholaren alkoholaren desberdintasunen arabera hautatutako arratoi-lerroen bost pareetan. Psychopharmacology. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Ryabinin AE, Weitemier AZ. Urocortin 1 neurocircuit: etanol-sentsibilitatea eta potentziala alkoholaren kontsumoan. Brain Res Rev. 2006;52: 368-380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Alkoholaren auto-administrazioa: dopamina mesolimikoaren rola. Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- McBride WJ, Li TK. Alkoholismoaren animalia ereduak: karraskarien alkoholaren portaera handia duen neurobiologia. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Neurocircuitry etanolen saria eta mendekotasuna duten helburuak. Alkohola Exp. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Etiopako autokontroleko intracraniala, Wistar arratoien maskuriko ventral tartearen barruan: dopamina neuronak inplikatzeko froga. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Etanolaren dosi baxuak aktibatzen dituzte neuron dopaminergikoak ventral tegmental eremuan. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Etanolak in vitro arratoi tegmentalaren eremuko dopamina neuronak tiro egiten ditu. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Heilig M, Koob GF. Alkoholaren menpekotasuna murrizteko corticotropin faktorea funtsezkoa. Trends Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Dyr W, Kostowski W. Evidencias de que la amígdala está involucrada en el inhibidor de los efectos secundarios de 5-HT3 receptor antagonistas en el consumo de ratas. Alkohola. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. CRF1-hartzailearen eta opioideen antagonistaren efektuak alkohol-edateko alkoholaren prebalentzia (P) arratoietan hartutako mendekotasunean eragindako alkoholetan. Alkohola Exp. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Hyytiä P, Koob GF. GABAA hartzailearen antagonismoa amygdala hedatuan etanol autoadministrazioa gutxitzen arratoietan. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Etanolak GABAergic transmisioa handitzen du pre-eta postsynaptic guneak neurona amygdala erdiko neuronetan. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Intraamygdala muscimol gutxitzen da arratoien menpeko etanolaren autosupantzaketa eragilea. Alkohola Exp. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Lortutako antsietate esperimentala eta borondatezko etanolaren kontsumoa arratoietan, amigdalaren kontrako lesioak erdiko baina ez basolateralen ondoren. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Wee S, Koob GF. Dynorphin-kappa opioidearen sistemaren eginkizuna gehiegikeria drogak indargabetzeko. Psikopharmakologia (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Helburua dinosauroen / kappa opioideen hartzaileen sistemak alkoholaren gehiegikeria eta menpekotasuna tratatzeko. Alkohola. 2012;46: 359-370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Kostako endopenoideen opioidearen bitartekotza, etanolaren baldintza hobeak eta norbere administrazioa hobetzeko eragindako estresaren ondorioz. Psikopharmakologia (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Gurutze Ref]
- McBride WJ. Amygdalaren nukleo zentrala eta alkoholaren eta alkoholaren portaera karraskarien eraginak. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Alkoholismo analogikoan saguetan: eskala faktoreak ereduan. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Alkoholismo analogikoan saguetan: edateko farmakologikoki motibatzea aitortzeko irizpideak. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
- Nestler EJ. Adikzioaren neurobiologia molekularra. Am J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: epe luzeko medikazio molekularreko neurona eta portaeraren plastikotasuna. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Gurutze Ref]
- Franklin KJ, Paxinos G. Saguaren garuna koordenatu estereotikoetan. 2. San Diego, CA: akademikoa; 2001.
;