OHARRAK: Delta FosB mendekotasunaren molekula nagusietako bat da. Mendekotasun prozesu batean zehar igo edo pilatu egiten da, mendekotasun portaera eta garunaren birkabletzea indartuz. Mendekotasuna kimikoa edo portaerakoa den ala ez handitzen da. Ikerketa honek erakusten du pilatzen dela sexu jardueran eta azukre kontsumoan. Ikertzaileek ere ikusi zuten sexu jarduerak azukre kontsumoa areagotzen zuela. Delta FosB mendekotasun batean parte hartu dezake beste mendekotasun bat indartzeko. Galdera da: nola eragiten dio pornoaren "gehiegizko kontsumoak" Delta FosB-i? DeltaFosB-n botatzen duen dopamina denez, zure burmuinaren araberakoa da.
Ikasketa osoa: ΔFosBren eragina Nukleoaren Accumbens on Natural Reward Related Behavior-en
J Neurosci. 2008 Urria 8; 28 (41): 10272 – 10277.
doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008.
Deanna L Wallace1,2, Vincent Vialou1,2, Loretta Rios1,2, Tiffany L. Carle-Florence1,2, Sumana Chakravarty1,2, Arvind Kumar1,2, Danielle L. Graham1,2, Thomas A. Green1,2, Anne Kirk1,2, Sergio D. Iñiguez3, Linda I. Perrotti1,2,4, Michel Barrot1,2,5, Ralph J. DiLeone1,2,6, Eric J. Nestler1,2, y Carlos A. Bolaños-Guzmán1,2,3 +
+ Egile oharrak
DL Wallaceren egungo helbidea: Helen Willis Neurozientzia Institutua, Kaliforniako Unibertsitatea, Berkeley, Berkeley, CA 94720.
TL Carle-Florentziaren gaur egungo helbidea: Mary Kay Research Laboratories, Dallas, TX 75379.
DL Graham-en egungo helbidea: Merck Laboratories, Boston, MA 02115.
TA Green-en egungo helbidea: Virginia Commonwealth University, Richmond, VA 23284.
EJ Nestler-en egungo helbidea: Neurozientzia Saila, Mount Sinai Medikuntza Eskola, New York, NY 10029.
Laburpena
Transkripzio faktorea deltaFosB (ΔFosB), nuklearren accumbens (NAc) eragindako tratu txarren drogak esposizio kronikoaren arabera, frogatu du drogak horiek sentsibilizatutako erantzunak bitartekari. Hala eta guztiz ere, gutxiago ezagutzen da ΔFosB rolari buruzko sari naturalen erantzunak arautzeko. Hemen, frogatzen dugu bi sari indartsu naturalen jokabideak, edari alkoholikoak eta sexu-portaerak, ΔFosB-en maila handitzen dutela NAn. Gene bidezko bitartekaritza bidezko bitartekaritza erabiltzen dugu, ΔFosB indukzioek nola eragiten dieten erantzun natural horiek sari natural horien inguruan. Frogatzen dugu ΔFosBren gehiegizko soberakina NaC-an saccharose ingesta handitzen duela eta portaera sexuaren alderdiak sustatzen dituela. Horrez gain, ΔFosB maila handitu duten aurreko sexu-esperientzia duten animaliak ere erakusten dute azukrearen kontsumoa areagotzea. Lan honek iradokitzen du ΔFosB ez dela ugaltze-drogen bidez emandako NA-an induzitzen, baizik eta aberasgarria estimulu naturalengatik. Gainera, gure aurkikuntzek erakusten dute ΔFosB induzitzen duten estimuluen esposizio kronikoa beste sari natural batzuen kontsumoa handitu dezakeela.
Sarrera
ΔFosB, Fos familiaren transkripzio faktorea, fosB genearen (Nakabeppu eta Nathans, 1991) enbor ebaki bat da. Estimulu akutuei erantzuteko Fos familiako beste proteina batzuekin konparatuta maila nahiko baxuetan adierazten da, baina estimulazio kronikoaren ondoren garunean maila altuetara metatzen da, egonkortasun berezia duelako (Nestler, 2008). Metaketa hori modu jakin bat da eskualde bakoitzeko estimulazio kroniko mota batzuei erantzuteko, besteak beste, tratu txarrak jasan dituzten drogak, desamortizazioak, antidepresiboak, antipsikotikoak, lesio neuronala eta estres mota ugari [berrikusteko, ikus Cenci (2002) ) eta Nestler (2008)].
ΔFosB indukzioaren ondorio funtzionalak hobekien ulertzen dira gehiegikeriaren aurkako drogetan, proteinak nukleo accumbens-en (NAc) gehien eragiten dutenak dira, ia gehiegikeriaren droga mota guztiei emandako erantzuna (Muller eta Unterwald, 2005; McDaid et al. , 2006; Nestler, 2008; Perrotti et al., 2008). NAc estral ventralaren parte da eta neurrizko substratu garrantzitsua da tratu txarrak jasan dituzten drogen ekintza aberasgarriak lortzeko. Horren arabera, gero eta ebidentzia gehiagok iradokitzen dute eskualde honetan ΔFosB indukzioak animalia batek sentsibilitatea handitzen duela gehiegikeriaren drogen efektu aberasgarrietarako eta horiek lortzeko motibazioa ere handitu dezake. Horrela, NAc-n ΔFosB gehiegi adierazteak animaliek kokainarekiko edo morfinarekiko lehentasunak garatzen dituzte edo kokaina auto-administratzen dute, droga dosi txikiagoetan, eta kokaina lortzeko palanka prentsa hobetzen du proportzio progresiboaren paradigman (Kelz et al., 1999 ; Colby et al., 2003; Zachariou et al., 2006).
Droga ordaintzeko bitartekaritzan duen eginkizunaz gain, NAk sari naturalen erantzunak arautzean inplikatu da eta azken lanek sari naturalen eta ΔFosBen arteko harremana ere proposatu dute. Gurpil borondatearen ibilerak ΔFosB maila handitzen duela erakusten da NAc-n, eta garuneko eskualde honen ΔFosB gehiegizko adierazpenak korrikako etengabeko hazkundea eragiten du, zenbait aste irauten baitu, kontroleko animaliekin konparatuz, zeintzuek 2 asteetan zehar egiten dituzten platerak (Werme et al ., 2002). Era berean, koipe handiko dieta batek ΔFosB induzitzen du NAc-en (Teegarden eta Bale, 2007); ΔFosB eskualde honetan gehiegizko gehiegizko depresioa elikagaien sarirako erantzun instrumentala handitzen da (Olausson et al., 2006). Gainera, fosB genea amaren portaeran (Brown et al., 1996) inplikatuta dago. Hala ere, informazio gutxi dago ΔFosB eta sexu portaeraren arteko harremanari buruz, sari naturalik indartsuenetako bat. Gainera, oraindik argi eta garbi dago ΔFosBen inplikazio posibleak sinesgarritasun jokabide naturalen eredu “addiktiboak” diren ereduetan. Adibidez, hainbat txostenek mendekotasun itxurako alderdia erakutsi dute sakarosaren ingesta paradigmetan (Avena et al., 2008).
RewardFosB ekintzaren inguruko ezagutza zabaltzeko sari-jokabide naturaletan hedatzeko, ΔFosB-en indukzioa ikertu genuen sakarosa edateko eta sexu-portaera ereduetan. Era berean, ΔFosB-en sobreexpresioak NAC-n nola aldatzen dituen sari natural horien portaerak nola aldatzen diren zehaztu genuen, eta sari natural baten aurreko esposizioak aberasgarriak diren beste portaera natural batzuk hobe ditzakeen ala ez.
Materialak eta metodoak
Animalien prozedura guztiak Texas Southwestern Medical Center-eko Unibertsitateko Animalien Arreta eta Erabilerarako Batzorde Instituzionalak onartu zituen.
Sexual portaera.
Sprague Dawley arratoiaren sexu esperientzia duten arratoiak (Charles River) eme hartzaileekin erlazionatzea ahalbidetuz, ejakulaziora arte, ∼1-2 aldiz 8-10 astetan 14 saio guztira. Jokabide sexuala aurretik deskribatu den bezala ebaluatu zen (Barrot et al. 2005). Kontrol gizonezkoak arena eta ohe berean egoteko esposizioak sortzen ziren, denbora berdinean, esperientziadun gizonezkoak bezala. Emakumezkoak ez ziren sekula aretoan sartu gizonezko kontrol horiekin. Aparteko esperimentu batean, talde esperimental osagarria sortu zen: gizonezkoak estrusera sartu gabeko hormona tratatu zuten emakumezkoetan sartu ziren. Gizonezko hauek muntaketak eta intromisioak egiten saiatu ziren; hala ere, emakumezkoak ez zirelako hartzerik izan, talde honetan ez da sexu portaerarik lortu. Azken saioa hasi eta hamazortzi ordura, animaliak perfusatu edo deskapitatu zituzten, eta garunak ehun prozesatzeko. 5th saioaren ondoren ∼14 d beste animalia talde batentzat, sakarosa hobespena probatu zen ondoren deskribatuta. Xehetasun gehiago lortzeko, ikusi Metodo osagarriak (www.jneurosci.org webgunean eskuragarri dago material osagarria).
Azukrearen kontsumoa.
Lehenengo esperimentuan (1a. Irudia), arratoiek sarbide mugagabea eman zieten bi ur botilara 2 d-ri, eta, ondoren, botila bakoitza ur eta sakarosa 2 d-ra, sakarosa-kontzentrazioa handituz (0.125-50%). Bi ur botilen 6 d aldi bat jarraitu da, eta ondoren, ur botila bateko 2 d eta 0.125% sakarosa botila bat. Bigarren esperimentuan (1b irudiak, c, 2), arratoiek sarbide mugagabea eman zioten ur botilari bakoitzari eta 10% sakarosa 10 d. Kontrol animaliek bi botila ur soilik jaso zituzten. Animaliak bizkortu edo azkar deskapitalizatu ziren, eta garunak ehun prozesatzeko erabiltzen ziren.
Bi botila aukeratzeko proba.
Bi botilen hautatzeko paradigma aurretik deskribatu zen (Barrot et al. 2002) egin zen. Kirurgia egin aurretik, banakako balizko ezberdintasunak kontrolatzeko, animaliak fase iluneko lehenengo 30 minean uren eta 1% sakarosaren artean bi botila aukeratzeko prozedurarako. Birak bitartekatutako gene-transferentziaren ondoren hiru aste (ikus azpian) eta portaerazko proba osagarriak egin aurretik, ura soilik eman zitzaien animaliei 30 min bi botila aukeratzeko prozedura egin zitzaien uraren eta 1% sakarosa-soluzioaren artean.
Sexu esperientziadun eta kontroleko animaliek ez zuten prozedura itxurarik izan sexu portaeraren aurretik. Sexu (edo kontrol) portaeraren 14th saioa hasi eta bost egunera, animaliei bi botilen aukera eman zitzaien uraren eta 1% sakarosa-soluzioaren artean beren argi zikloaren lehenengo 30 min artean. Sexu esperientziadun eta kontroleko animalia talde bereiziak erabili ziren sexu portaeraren ondoren osFosB maila neurtzeko eta sexu portaerak sakrosiaren lehentasunean duen eragina aztertzeko.
Western blotting.
Zulatutako disekzioen bidez lortutako NAc disekzioak Western blotting bidez aztertu ziren (Perrotti et al., 2004), FosB antigorputz poliklonalen untxi bat erabiliz [antigorputzak karakterizatzeko, ikus Perrotti et al. (2004)] eta glikeraldehido-3-fosfat deshidrogenasa (GAPDH) (RDI-TRK5G4-6C5; Ikerketa Diagnostikoak) antigorputz antigorputz bat, kontrol proteina gisa balio zuen. Δ FosB proteinen maila GAPDH-ra normalizatu ziren, eta lagin esperimentalak eta kontrolekoak alderatu ziren. Xehetasun gehiago lortzeko, ikusi Metodo osagarriak (www.jneurosci.org webgunean eskuragarri dago material osagarria).
Immunohistochemistry.
Animaliak perfusionatuta zeuden, eta garuneko ehunak tratatu ziren argitaratutako immunohistochimika metodoak erabiliz (Perrotti et al., 2005). Estimulu aberasgarrien azken esposizioa 18 – 24 h azterketa baino lehen gertatu zenez, FosB itxurako immunoreaktibitate guztia pan-FosB antigorputzarekin detektatu genuen (SC-48; Santa Cruz Bioteknologia), ΔFosB (Perrotti et al. 2004) islatu genuen. , 2005). Xehetasun gehiago lortzeko, ikusi Metodo osagarriak (www.jneurosci.org webgunean eskuragarri dago material osagarria).
Gene-transferentzia birikoa.
Kirurgia Sprague Dawley gizonezkoen arratoietan egin zen. Adenoari lotutako birusak (AAV) bektoreak alde bakarrean injektatu ziren, alde bakoitzeko 1.5 μl, NAc-ean aurretik deskribatu bezala (Barrot et al., 2005). Lokalizazio zuzena 40 μm-ko krilil-bioleta-orbanekin egindako esperimentuen ondoren egiaztatu zen. Bektoreek proteina fluoreszente berdea (GFP) (AAV-GFP) edo A ΔFosB eta GFP (AAV-ΔFosB) adierazten duten kontrola zeuden (Zachariou et al., 2006). NAc transgenoen adierazpenen denboraren arabera, animaliek 3-4 portaera probatu zuten AAV bektoreak injektatu eta aste batzuetara, transgenoaren adierazpena maximoa denean (Zachariou et al., 2006). Xehetasun gehiago lortzeko, ikusi Metodo osagarriak (www.jneurosci.org webgunean eskuragarri dago material osagarria).
Estatistika azterketa.
Esanahia neurtu zen bi faktoretako neurri errepikatuko ANOVA erabiliz eta baita Studenten t probak ere, konparazio anitzetarako zuzendu ziren. Datuak bitarteko gisa adierazten dira ± SEM. Esanahi estatistikoa p <0.05 gisa definitu zen.
Emaitzak
Azukrearen esposizio kronikoa eragiten du sacrosioaren sarrerarekin eta sentsibilizazioarekin erlazionatutako portaera
Bi botilen aukerako paradigma ezarri genuen, non sakarosaren kontzentrazioa 2 d bi 2 d ur bakoitzeko bi botilen ondoren bikoiztu zen. Azukrearen kontzentrazioa% 0.125-en hasi zen eta% 50-ra igo zen. Animaliek ez zuten sakroso-lehentasunik erakutsi 0.25% sakarosa arte, eta, ondoren, urak baino sakarosa gehiago edan zuen kontzentrazio altu guztietan. 0.25% kontzentrazioan hasita, animaliek sakarosa-bolumena gero eta gehiago edan zuten, sakarosaren bolumena 5 eta% 10% -ra iritsi arte. 20% eta altuagoetan, sakarosaren bolumena txikitzen hasi ziren, sakarosaren kontsumo osoaren maila egonkorrak mantentzeko (1a, irudia). Paradigma honen ondoren, animaliek 6 d gastatu zuten bi ur botilarekin bakarrik, eta 0.125% sakarosa botila bat edo 2 d-rako ura aukeratzeko aurkeztu zitzaien. Animaliek kontzentrazio horretan urak baino azukre gehiago edan zuten, eta sakroso-lehentasun esanguratsua erakutsi zuten 1 egunean.
Kopuru 1.
Bi botilako sakarosa aukeratzeko paradigmek sakarosa kontsumoa areagotzen dutela erakusten dute. a, Sakarosaren kontzentrazioak handitzeak "U forma alderantzikatua" hartzearen portaera dakar, erretiratze-aldi baten ondorengo errekurtsoen eta sentsibilizazioaren antzeko jokabidearekin [uraren eta sakarosaren sarreraren arteko desberdintasun esanguratsua 2 eguneko% 0.25 kontzentrazio bakoitzean eta ondorengo sakarosaren esposizioa (t (30) = 4.81; p <0.001; n = 8, konparazio anitzetarako zuzendua)]. Txertaketa, ingesta 2 egun baino gehiagoko kontzentrazio bakoitzean irensten diren sakarosa gramo gisa adierazten da, sarrerarekin egonkortuta dagoela kontzentrazio altuagoetan adieraziz. b, bi botilen aukeren paradigmako 10 d-ko animaliek sakarosa ingesta kantitate handiagoak erakusten dituzte 1. egunean zehar (ingesta egun batez bakarrik erakusten da). ANOVA bi faktoretako neurri errepikatuak eguneko efektu nagusia agerian utzi du (F (3,27) = 42.3; p <0.001), sakarosa (F (1,9) = 927.2; p <0.001) eta sakarosa × egunekoa (F (3,27) = 44.8; p <0.001; n = 10 / taldea). c, Pisu gehikuntza handiagoa, sakarosaren eraginpean dauden kontroleko (ura soilik) animaliekin alderatuta. Bi faktoreko neurri errepikatuak ANOVAk eguneko efektu nagusia nabarmena erakusten du (F (5,70) = 600; p <0.001). Bi taldeek pisua irabazten dute denborarekin, eta sakarosa eta eguneko elkarreragin esanguratsua (F (5,70 ) = 17.1; p <0.001; n = 10 / taldea), sakarosa taldeak denborarekin pisu handiagoa hartzen duela iradokiz.
Gehieneko bolumena 10% kontzentraziora iritsi zenez, animalia inozoek 10 d-rako botila bat eta 10% sakarosa botila batetik 10 d-ren artean botila bat eta bi kontrol botilako talde batekin alderatuta. Eguzki-azukreak eguneko 1 egunean (1b). Gainera, pisu handiagoa lortu dute sukarreko esposizio jarraiaren ondoren kontroleko animaliekin alderatuta, pisuaren aldea denboran zehar handituz (Fig. XNUMXc).
Azukre edateko edateak ΔFosB mailetan handitzen du
Animalia hauek 10% sakarosa paradigman aztertu genituen theFosB NAC mailetan, Western blotting (Fig. 2a) eta immunohistokimika (Fig. 2b) erabiliz. Bi metodoek brainFosB proteinaren indukzioa agerian utzi zuten garuneko eskualde honetan, esperientzia duten sakarosean, kontroleko animaliekin alderatuta. ΔFosB proteina sekuentzia osoa FosB luzera osoaren barruan dagoenez, FosB moduko immunoreaktibitatea antzemateko erabiltzen diren antigorputzek bi proteinak ezagutzen dituzte (Perrotti et al., 2004, 2005). Hala ere, Western blotting-ek agerian utzi zuen ΔFosB soilik eragin zuela sakarosa edatean. Horrek adierazten du immunohistokoimikak ikusitako seinalearen aldea ΔFosB dela. 2b irudian ikusitako hazkundea NAc nukleoan eta oskolan aurkitu da, baina ez estriatu dorsalean (datuak ez dira erakusten).
Kopuru 2.
Sakarosaren kontsumoak eta sexu portaerak gora egiten dute cFosB adierazpena NAc-n. a,% 10eko sakarosaren kontsumo kronikoak bi botilak aukeratutako paradigman, baita sexu-portaerak ere, increaseFosB adierazpena handitzen dute NAc-n Western blot-en bidez (sakarosa, t (11) = 2.685; * p = 0.021; n = 5– 8; sexu portaera, t (12) = 2.351; * p = 0.037; n = 6-8). Olfakzioa kontrolatzeko gizonezkoak ez dira oso desberdinak sexu gabeko kontroleko gizonezkoekin (t (10) = 0.69; p> 0.50; n = 4-8). NS, ez da esanguratsua. b, Sakarosa esperientzia duten animalien garuneko atalek ΔFosB immunorreaktibitate handiagoa erakusten dute NAc kontroleko animaliekin alderatuta immunohistokimikaren bidez. Irudiak (10 ×) tratamendu talde bakoitzeko sei arratoiren burmuineko atal anitzen ordezkari dira. AC, Aurreko komisioa. c, Sexu esperientzia duten animalien garun atalek ΔFosB immunorreaktibitate handiagoa erakusten dute immunohistokimikaren bidez NAc kontroleko homologoekin alderatuta. Irudiak (10 ×) tratamendu talde bakoitzeko sei eta zortzi arratoi arteko garuneko atal anitzen ordezkari dira.
Sexu-portaerak ΔFosB-ko NA maila handitzen du
Ondoren, sexu-portaera kronikoek ΔFosB indukzioan duten eragina ikertu genuen NAc-en. Sexu esperientzia duten gizonezko arratoiek sarbide mugagabea zuten emakumezko hartzaileekin 14 saioetarako ejakulaziora arte 8 – 10 astean zehar. Garrantzitsua da animalien kontrolak ez direla etxeko kaiola kontrolatzen, baizik eta azterketa egunetan eta manipulazio berdinaren ondorioz sortuak zelai irekiko zelaian eta oheetan zeinetan kopulazioa denbora berdinean gertatu zen, baina emakumezko harreragatik esposizio gabe egon zen. efekzio eta manipulazio efektuak Western blotting erabiliz, sexu esperientziak significantlyFosB maila nabarmen handitu zuela ikusi genuen kontrol taldearekin alderatuta (2a irudia), eta ez da FosB luzera osoko maila antzeman. Datu horiekin bat etorrita, immunohistokimikak ΔFosB tindaketaren hazkuntza erakutsi du bai NAC-ko muinean eta oskolan (Fig. 2c), baina ez estriatu dorsala (ez dira datuak erakusten).
Sexu esperientzia duten animalietan ikusitako ΔFosB gehikuntza ez zela elkarrekintza soziala edo loturarik gabeko beste estimulu batzuei egotzita, hormona tratatu duten emakumezkoen eraginpean zeuden gizonezkoak ez diren gizonezkoak sortu genituen, baina kopiatzea onartzen ez zitzaien. Gizonezko horiek ez zuten diferentziarik ΔFosB mailetan olfaction-arena kontroleko animalia multzo batekin alderatuz (2a irudia), ΔFosB indukzioa sexu portaerari erantzuten zaiola iradokiz eta ez gizarteko edo gizonezkoak ez diren adingabeak.
ΔFosBren gehiegizko azpiegitura NAk sakarosaren ingesta handitzen du
Birus bidezko gehiegizko espresio sistema erabiliz, hainbat astez ΔFosB-ren adierazpen egonkorra ahalbidetzen duena (Zachariou et al., 2006) (3a. Irudia), ΔFosB maila altuagoek duten eragina ikertu dugu, NAc-ri zuzenduta zehazki, sakarosa edateko. portaera (3b irudia). Lehenik eta behin aseguratu genuen ez zegoela desberdintasunik oinarrizko sakarosaren jokabidean kirurgia egin aurretik sakarosa hartzeko aurretiazko proba batekin (AAV-GFP, 6.49 ± 0.879 ml; AAV-ΔFosB, 6.22 ± 0.621 ml; n = 15 / taldea; p> 0.80). Ebakuntza egin eta hiru astera, ΔFosB adierazpena egonkorra izan zen d10 d-tan, animaliei kirurgia osteko sakarosa proba egin zitzaien. AAV-ΔFosB taldeak AAV-GFP kontrol taldeak baino sakarosa askoz gehiago edan zuen (3b. Irudia). Bi taldeen artean (AAV-GFP, 0.92 ± 0.019 ml; AAV-ΔFosB, 0.95 ± 0.007 ml; n = 15 / taldea; p> 0.15) ur-hartze kopuruan ez zen alderik egon bi taldeen artean. sakarosaren espezifikoa da.
Kopuru 3.
ΔFosB-en gehiegizko adierazpena sari naturalen portaeraren alderdiak arautzen ditu. a, NAc xede gunearen irudikapena aldebiko biral-bitartekotasunaren transferentzia genetikoaren bidez eta ΔFosB adierazpenaren adibidea, immunohistokimikaren bidez detektatua, AAV-osFosB injekzioaren ondoren. b, AAV-ΔFosB-en injekzioak NAc-k emaitza sakarosaren sarrerak handitzea eragiten du AAV-GFP injektatutako kontrolekin alderatuta (t (28) = 2.208; * p = 0.036; n = 15 / taldea). Era berean, 10 sexu-jokabidearen asteak, sexu inozoen kontrolekin alderatuta, sakarosaren sarrerarekin (t (14) = 2.240; * p = 0.042; n = 7 – 9) areagotzen da. c, osFosB gehiegizko espresioak murriztu egiten du sexu inozoetan animalien ejakulazioa lortzeko beharrezkoa den GFP kontrolekin alderatuz (t (30) = 2.145; * p = 0.04; n = 15 – 17) eta postejakulazio-tartea murrizteko joera sortzen du ( t (30) = 1.916; #p = 0.065; n = 15 – 17).
ΔFosBren gehiegizko azalpenean NAk sexu jokabidea eragiten du
Jarraian, ΔFosB gehiegizko espresioak NACn erregulatzen duen ala ez adierazten du animalia inozoek eta esperientziadunek. AAV-ΔFosB- eta -GFP-rekin tratatutako animalien artean sexu-portaeraren parametroetan ez dugu desberdintasunik aurkitu (ikusi S1 taula osagarria, www.jneurosci.org webgunean eskuragarri dagoen material osagarrian), animalsFosB gehiegizko animalia inozoetan nabarmen murriztu da lehenengo sexu portaera esperientzian ejakulaziora joateko beharrezkoak diren sarbide-kopurua. (Fig. 3c). Lehen sexu esperientziaren ondoren ΔFosB taldeko posejakulazio-tartea murrizteko joera ere egon zen (Fig. 3c). Aitzitik, ez da inolako desberdintasunik ikusi mendietan, intomozioetan edo ejakulazioan animalia inozoetan edo esperientziadunetan (ikus S1 taula osagarria, www.jneurosci.org webgunean material osagarria eskuragarri). Era berean, ez da alderik antzeman sarrera-tasaren [sarreren kopurua / (sarreren kopurua + muntaia kopurua)], nahiz eta baliteke talde bakoitzeko munta kopuruaren aldakortasun handia dela eta.
Sexu-esperientziak sacarosa hartzeko sarrerak handitzen ditu
RFosB mailak hazkunde handia aurkitu dugulako bai sakroso edateko eta baita sexu esperientziaren ondoren, eta ΔFosB gehiegizko espresioak jokabideen erantzunak bi sariei eragiten dielako, interesgarria izan zen sariren baten aurreko esposizioak besteekiko portaerak erantzun nabarmenak izan ote zituen aztertzea. . Sexu esperientzia baino lehen, animalia inozoak ausaz esleitzen ziren kontrol edo sexu baldintzetara. Orduan, animaliak 8-10 asteetan zehar sexu-esperientzien edo kontrol-baldintzen aurrean azaldu ziren. Azken sexu saioa hasi eta bost egunera, animaliak 30 min bi botilen aukera paradigma bat jasan zuten ur botila baten eta sakarosaren artean. Aurkitu genuen sexu esperientzia duten animaliek kontrolak baino sakarosa gehiago edaten zutela (3b irudia). Urarekin sexu esperientziadun eta kontroleko animalien artean ez da diferentziarik egon (kontrola, 1.21 ± 0.142 ml; sexu esperientziakoa, 1.16 ± 0.159 ml; n = 7 – 9; p = 0.79), efektua sakrosoari dagokiona iradokiz.
Eztabaida
Azterlan honek literaturaren aurreko hutsune bat ΔFosB-k sexuarekin eta sakarosarekin lotutako jokabide naturaletan duen rola argitzen du. Lehenik eta behin, ΔFosB-k NAC-en pilatzen den ala ez zehaztea erabaki genuen, sari naturalen esposizio kronikoa egin ondoren. Lan honen ezaugarri garrantzitsu bat animaliei aukera eman zitzaien beren jokabidean, drogak autoadministratzeko paradigmekin analogiaz. Honenbestez, osFosB mailetan saririk borondatez kontsumitzearekin zerikusia zegoela ziurtatu zen. Sakarosa ereduak (irudian 1) erakusten du mendekotasun-portaeraren alderdiak, sukarosaren sarrerako beste eredu batzuekin alderatuta: saria eta kontrolaren arteko aukera, alderantzizko U formako dosi-erantzunaren kurba, erretiratu ondoren sentsibilizatutako erantzuna eta gehiegizko ingesta. Eredu honek pisu gehikuntza ere eragiten du, eguneroko azukre eten ereduan adibidez (Avena et al. 2008) esate baterako.
Gure datuek, lehen aldiz, bi premia natural, sakarosa eta sexu gako motak ezartzen dituzte, bai ΔFosB mailetan NA. Igoera horiek Western blotting eta immunohistochimikek ikusi zituzten; Bi metodoak erabiliz ziurtatzen da ikusitako proteina produktua BFosB dela eta ez FosB luzera osoa, fosB genearen beste produktu bat. ΔFosB-en indukzio selektiboa sakarosoaren eta sexuaren arabera ΔFosB-en indukzio selektiboa NAc-en kasuko gehiegizko drogak ia modu kronikoan administratu ondoren (ikus Sarrera). Nabarmentzekoa da, ordea, hemen antzeman zen sari naturalen aurrean ofFosB indukzio maila droga sari gisa ikusitakoa baino txikiagoa dela: sukarrak edateak eta sexu jokabideek 40-60% ΔFosB mailen igoera kontrastatu dute. gehiegikeriaren aurkako droga askorekin ikusitako hainbat indukziora (Perrotti et al. 2008).
Azterketa honen bigarren helburua ΔFosB indukzioan NAc-k sari naturalekin lotutako jokabideetan izan zuen ondorio funtzionala ikertzea zen. PreviousFosB-ek drogen sarietan izan zuen eraginari buruz gure lanaren zati handi batek sagu bitransgeniko induzibleak erabili ditu. Bertan, osFosB adierazpena NAc eta dorsal-striatum-i zuzenduta dago. OsFosB-rekin gehiegizko espresio saguek kokaina eta opiazeoekiko portaera erantzun hobeak erakusten dituzte, baita gurpilak eta elikadurarako erantzun instrumentalak ere (ikus Sarrera). Azterketa honetan, berriki garatutako birikoaren bitartekaritza geneak transferitzeko sistema erabili dugu ΔFosB gaizki espresatzeko, gizonezko arratoien burmuineko eskualdeetan (Zachariou et al. 2006). Hemen aurkitu genuen ΔFosB gehiegizko espresioak sakarosaren kontsumoa handitu zuela kontroleko animaliekin alderatuta, bi taldeen artean ur-sarrerarekin diferentziarik ez zegoela.
ΔFosB-ek sexu-jokabideetan nola eragiten duen ere ikertu dugu. Erakutsi genuen ΔFosB gehiegizko espresioa NAc-etan murrizten dela sexu inozoetako animaliak ejakulatzeko beharrezkoak diren intromisio kopurua. Hau ez zen bat etorriko sexu portaera inozoen beste desberdintasunekin, besteak beste, mendiko alterazioekin, sarrerarekin edo ejakulazio latentziekin. Gainera, osFosB gehiegizko espresioak ez zuen sexu-portaeraren inguruko inolako aldaketarik eragin sexu esperientziadun animalietan. Ez da harritzekoa NAC-n manipulazio batek sexu-jokabideetan eragiteko duen gaitasuna, garuneko sari-eskualde honek sexu-portaerak arautzen dituela erakusten duten froga gero eta handiagoak direla eta (Balfour et al., 2004; Hull eta Dominguez, 2007). Intomisio kopuruaren decreaseFosB-k eragindako beherakadak sexu portaera hobetzea eragin dezake, cFosB NAB-en gehiegizko espresioa duten animalia inozoek esperientziadun animalien antzera jokatzen dute. Adibidez, sexu esperientzia errepikatu duten probetan, animaliek intomisio gutxiago behar dituzte ejakulaziora iristeko (Lumley eta Hull, 1999). Horrez gain, ejFosB gehiegizko espresioarekin postexakulazio-tartearen beherakadaren joerak ere islatzen du gizonezko esperientziadun gizakiengan (Kippin eta van der Kooy, 2003). Honekin batera, suggestFosBek animalia inozoetan gehiegizko espresioak sexu jokabidea erraztu dezakeela pentsatzen dute, animalia inozoek esperientziadun edo sexualki motibatutako animalien antza izan dezaten. Bestalde, ez dugu ΔFosB gehiegizko espresioak sexu-portaeran izan duen eragin esanguratsurik ikusi. Sexu-portaerari buruzko azterketa konplexuagoek (adibidez, lekuen lehentasun baldintzatua) betterFosB-ren balizko ondorioak hobeto diskriminatzen dituzte.
Azkenean, sari natural baten aurreko esposizioak beste batekiko portaeraren erantzunetan nola eragiten duen ikertu genuen. Zehazki, aurreko sexu esperientziak sakarosa hartzerakoan duen eragina zehaztu dugu. Bai kontrolean, bai sexu esperientzia duten animaliek sakarosarekiko lehentasun handia erakutsi zuten arren, sexu esperientzia duten animaliek sakarosa askoz gehiago edaten zuten, ur kontsumoan aldaketarik gabe. Aurkikuntza interesgarria da, izan ere, iradokitzen du sari baten aurreko esposizioak beste estimulu aberasgarri baten balio aberasgarria areagotu dezakeela, neurri batean partekatutako oinarri molekularra (adibidez, ΔFosB) sariaren sentikortasuna egongo balitz espero zitekeen bezala. Ikerketa honen antzera, sexu portaera jasaten zuten hamster emakumezkoek kokainaren portaera efektuekiko sentsibilitate handiagoa erakutsi zuten (Bradley eta Meisel, 2001). Aurkikuntza horiek garunaren sarien zirkuituen barruan plastikotasunaren nozioa onartzen dute, izan ere, gaur egungo sarien balioa antzematen den sarien esposizioen gainean eraikitzen da.
Laburbilduz, hemen aurkeztutako lanak frogatzen du, gehiegikeriaren drogekin batera, sari naturalek cFosB maila eragiten dutela NAc-n. Era berean, ΔFosB gehiegizko adierazpenak garuneko eskualde honetan animaliaren portaera-erantzunak erregulatzen ditu sari naturalen aurrean, lehenago sendagaien sarietan ikusi bezala. Aurkikuntza hauek iradokitzen dute ΔFosB-k eginkizun orokorragoa duela sari mekanismoen erregulazioan, eta droga mota eta sari natural askotan ikusitako sentsibilizazio gurutzatua bitartekatzen lagun dezake. Gainera, gure emaitzek NAF-en ΔFosB indukzioa drogamenpekotasunaren funtsezko alderdiak ez ezik, sari naturalen kontsumo konpultsiboa dakarten mendekotasun natural deiturikoen alderdiak bitartekaritza izan dezakete.
Oin-oharrak
• Lan honek Droga-abusuei buruzko Institutu Nazionalaren eta Institutu Nazionalaren eta Eszizofreniaren eta Depresioaren Ikerketarako Aliantza Nazionalaren diru-laguntza izan zuen.
• Korrespondentzia Carlos A. Bolanos-ek zuzendu behar du goiko helbidean. [posta elektroniko bidez babestua]
• Copyright © 2008 Society for Neuroscience 0270-6474 / 08 / 2810272-06 $ 15.00 / 0
Aurreko atala
Erreferentziak
1. ↵
1. Avena NM,
2. P Rada,
3. Hoebel BG
(2008) Azukrearen menpekotasuna lortzeko frogak: azukre-kontsumitzaile intermitenteen eta gehiegizko portaeraren eta neurokimikoen eraginak. Neurosci Biobehav Rev 32: 20 – 39.
CrossRefMedline
2. ↵
1. Balfour ME,
2. Yu L,
3. Coolen LM
(2004) sexu-jokabidea eta sexu-lotutako ingurumen-adierazpenak sistema mesolimbikoa arratoien gizonezkoetan aktibatzen dute. Neuropsikofarmakologia 29: 718 – 730.
CrossRefMedline
3. ↵
1. Barrot M,
2. Olivier JD,
3. Perrotti LI,
4. DiLeone RJ,
5. Berton O,
6. Eisch AJ,
7. S impey,
8. Ekaitza DR
9. Neve RL,
10. Yin JC,
11. Zachariou V,
12. Nestler EJ
(2002) CREB nukleoko jarduera accumbens shell-ek jokabide-erantzunen isurketak kontrolatzen ditu estimulu emozionaletara. Proc Natl Acad Sci USA 99: 11435 – 11440.
Abstract / FREE Testu osoa
4. ↵
1. Barrot M,
2. Wallace DL,
3. Bolaños CA,
4. Graham DL,
5. Perrotti LI,
6. Neve RL,
7. Chambliss H,
8. Yin JC,
9. Nestler EJ
(2005) Antsietatea arautzea eta CREBk sexu portaera hasiera accumbens-en. Proc Natl Acad Sci USA 102: 8357 – 8362.
Abstract / FREE Testu osoa
5. ↵
1. Bradley KC,
2. Meisel RL
(2001) Accumbens nukleoan eta funtzio lokomotora estimulatutako anfetaminak indarrean jartzen duen sexu-portaeraren indukzio sexuala hamsters siriar emakumezkoen aurreko sexu-esperientziaren arabera sentikortuta dago. J Neurosci 21: 2123 – 2130.
Abstract / FREE Testu osoa
6. ↵
1. Brown JR,
2. Ye H,
3. Bronson RT,
4. Dikkes P,
5. Greenberg ME
(1996) Berehalako gene fosbarririk gabeko saguak elikatzeko akatsa. Zelula 86: 297 – 309.
CrossRefMedline
7. ↵
1. Zentroko MA
(2002) L-DOPAk eragindako diskinesia patogenesian parte hartzen duten transkripzio faktoreak Parkinson gaixotasunaren arratoi eredu batean. Aminoazidoak 23: 105-109.
CrossRefMedline
8. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Auto DW
(2003) DeltaFosB zelularen estresio zelularen espezifikazioa gainkarga hobetzen da kokaina. J Neurosci 23: 2488 – 2493.
Abstract / FREE Testu osoa
9. ↵
1. Kaskoa EM,
2. Dominguez JM
(2007) "Sexu-jokaera karraskatzaile gizonezkoa Horm Behav 52: 45 – 55.
CrossRefMedline
10. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Self DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Garapenean transkripzio-faktorearen deltaFosBren adierazpena kokaina gaitzesten da. Natura 401: 272 – 276.
CrossRefMedline
11. ↵
1. Kippin TE,
2. van der Kooy D
(2003) Pedunculopontine tegmental nukleoko lesio excitotoxicak arratoien jatorrizko intsektuak kopulazioari eragiten die eta gizonezko arratoi esperientziadunetan kopulazioaren efektu onuragarria blokeatzen dute. Eur J Neurosci 18: 2581 – 2591.
CrossRefMedline
12. ↵
1. Lumley LA,
2. Kaskoa EM
(1999) D1 antagonistaren efektuak eta sexu esperientziaren kopulazio-eragindako Fos antzeko immuneak duten medial aurreko hari nukleoan. Brain Res 829: 55 – 68.
CrossRefMedline
13. ↵
1. McDaid J,
2. Graham parlamentaria,
3. Napier TC
(2006) Metanfetaminak eragindako sentsibilizazioa desberdina da pCREB eta DeltaFosB aldatzen, ugaztunen burmuinaren zirkuitu limbikoan. Mol Pharmacol 70: 2064 – 2074.
Abstract / FREE Testu osoa
14. ↵
1. Muller DL,
2. Unterwald EM
(2005) D1 dopamina-hartzaileek deltaFosB indukzioa modulatzen dute arratoi estrukturatuan, aldizka morfina administrazioan. J Pharmacol Exp 314: 148 – 154.
Abstract / FREE Testu osoa
15. ↵
1. Nakabeppu Y,
2. Nathans D
(1991) FosB modu naturalean trunkatua den Fos / Jun-eko transkripzio jarduera inhibitzen du. Zelula 64: 751 – 759.
CrossRefMedline
16. ↵
1. Nestler EJ
(2008) Mendekotasunaren transkripzio mekanismoak: ΔFosBren papera. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 363: 3245 – 3255.
Abstract / FREE Testu osoa
17. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. N irteera
4. Neve RL,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(2006) accumbensen nukleo DeltaFosBk elikagaiak indartu eta motibatzen ditu. J Neurosci 26: 9196 – 9204.
Abstract / FREE Testu osoa
18. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) DeltaFosB indukzioa estresa kronikoaren ondorengo sari-garuneko egituren artean. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
Abstract / FREE Testu osoa
19. ↵
1. Perrotti LI,
2. Bolaños CA,
3. Choi KH,
4. Russo SJ,
5. Edwards S,
6. Ulery PG,
7. Wallace DL,
8. Self DW,
9. Nestler EJ,
10. Barrot M
(2005) DeltaFosB zelula GABAergic populazioan pilatzen da ventral zona tegmental atzekaldean tratamendu psikostimulatzaileak egin ondoren. Eur J Neurosci 21: 2817 – 2824.
CrossRefMedline
20. ↵
1. Perrotti LI,
2. Weaver RR,
3. Robison B,
4. Renthal W,
5. Maze I,
6. Yazdani S,
7. Elmore RG,
8. Knapp DJ,
9. Selley DE,
10. Martin BR,
11. Sim-Selley L,
12. Bachtell RK,
13. Self DW,
14. Nestler EJ
(2008) DeltaFosB indukzioaren ereduak bereizi burmuinean gehiegikeria drogak. Synapse 62: 358-369.
CrossRefMedline
21. ↵
1. Teegarden SL,
2. Bale TL
(2007) Estresaren eraginak dieta-lehentasunean eta sarreretan sartzeko eta estresarekiko sentsibilitatearen menpe daude. Biol Psikiatria 61: 1021 – 1029.
CrossRefMedline
22. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thorén P,
6. Nestler EJ,
7. Brené S
(2002) DeltaFosB-k gurpila ibiltzea arautzen du. J Neurosci 22: 8133 – 8138.
Abstract / FREE Testu osoa
23. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy parlamentaria,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) Ezinbestekoa da DeltaFosB funtsezko zeregina nukleoko accumbens morfinaren ekintzan. Nat Neurosci 9: 205 – 211.
CrossRefMedline
;