نوروپلاستی ناشی از مواد اپوئیدی اندوژن در نورونهای دوپامینرژیک در ناحیه قهوه ای شکمی بر پاداش طبیعی و مخدر اثر می گذارد (2014)

نظرات: La مطالعات DeltaFosB ما اغلب همه را متمرکز میکنیم هسته accumbens (مرکز پاداش) ، و دریافت که رابطه جنسی تقریباً همان مکانیسم های مغزی را با مت و کوکائین تجربه می کند. از مطالعه برجسته توسط همین محقق (قانون پاداش طبیعی و دارو بر روی مکانیسم های پلاستیکی عصبی مشترک با ΔFosB به عنوان یک واسطه کلید (2013)):

بنابراین ، جوایز طبیعی و دارویی نه تنها در یک مسیر عصبی همگرا می شوند ، بلکه در همان واسطه های مولکولی و احتمالاً در همان سلول های عصبی در هسته هسته جمع می شوند تا بر برجستگی انگیزه و "خواستن" هر دو نوع پاداش تأثیر بگذارند.

از بین بردن: مت، کوکائین و جنس همه چیزهای اساسی یکسان برای سلول های عصبی در مرکز پاداش (هسته accumbens)، هر چه آنها ممکن است متفاوت در جاهای دیگر مغز انجام دهد. این مسئله، صحبت معمولی را که برندهای طبیعی و داروها در مکانیسم ها و اثرات متفاوت است، کنار گذاشته شد.

این مطالعه جدید بررسی کرده است که رابطه جنسی با VTA چه کاری انجام می دهد. VTA محلی است که سلولهای عصبی تولید کننده دوپامین آغاز می شوند - و آنها به هسته اکومبنس ، قشر پیشانی و آمیگدالا منشعب می شوند. اساساً VTA منبع (چشمه) بیشتر دوپامین ماست. این 2 تصویر از مدار پاداش را ببینید: Pic1, Pic2

محققان دریافتند که جنس (اوج) بدن سلولی را در VTA به طور موقت (در مردان) کاهش می دهد. سلول های بدن و دندریت های آنها ماده خاکستری مغز را شامل می شود. این دقیقا همان چیزی است که وابستگی هروئین به VTA می دهد (استفاده همزمان از هروئین، اما مصرف مزمن هروئین). توجه داشته باشید که این همان انقباض بدن سلول VTA است در معتادان هروئین انسان اتفاق می افتد.

انقباض سلولی ناشی از جنس به مدت حداقل روز 7 طول می کشد. تغییرات ناشی از جنس در روز 30 به حالت عادی بازگشته است، اما محققان تنها روزهای 1، 7 و 30 را ارزیابی کردند.

کوچک شدن اجسام سلول در اعتیاد به هروئین منجر به دوپامین پایین تر در هسته اکومبنس می شود - یا همان چیزی که ما آن را می نامیم کاهش حساسیت. محققان برای ارزیابی پاسخ آنها (بعد از رابطه جنسی) به موش ها مرفین تزریق کردند اما اتفاقی نیفتاد. معمولاً موش ها مرفین را زیاد دوست دارند اما در اینجا موقتاً از حساسیت زدایی کردند. به طور خلاصه ، مدار پاداش موش های پس از انزال به سطح پایین هروئین پاسخ نمی داد. محققان تصور کردند که برای ایجاد واکنش "طبیعی" موش ، دوزهای بالاتر مورد نیاز است.

به طور خلاصه - جنسیت (به طور موقت) در VTA همان اعتیاد به هروئین را انجام می دهد: جمع شدن دوپامین در بدن بدن سلول های عصبی. این منجر به کاهش دوپامین در مرکز پاداش ، و پاسخگویی کمتر به مواد مخدر می شود - و حداقل 7 روز طول می کشد تا مغز موش بهبود یابد.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

کوزه KK1, کتک زدن CM2, Beloate LN3, فولر ج2, ون S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Coolen LM5.

چکیده

پاداش طبیعی و مواد مخدر از سوء استفاده همگرا در مسیر mesolimbic و مکانیزم مشترک مکانیسم پلاستیک عصبی در هسته accumbens. قرار گرفتن در معرض مزمن در معرض opiates، باعث ایجاد پلاستیک در نورونهای دوپامینرژیکی منطقه تنگنال شکمی (VTA) می شود که تحمل تحمل مورفین را تنظیم می کند.

در اینجا، ما فرضیه هایی را بررسی می کنیم که انتشار اپیوئیدی اندوژن ناشی از جفتگیری در VTA سبب تغییرات ریفولوژی سلول های دوپامین VTA در موش های صحرایی می شود که به نوبه خود، بیان طولانی مدت تقویت کننده ی رفتار جنسی را ایجاد می کند.

اول، تجربه جنسی کاهش VTA dopamine soma اندازه 1 و 7 روز، اما نه 30 روز پس از آخرین جلسه ملاقات. این اثر با نالوکسون مسدود شده است قبل از هر جلسه ملاقات؛ بنابراين، پلاستيکي سلول دوپامين VTA وابسته به فعاليت اپيوئيد درون زا بود.

به نوبه خود، پلاستیسیته VTA با پاداش متابولیسم اپیدمی مرتبط بود، به عنوان مردان مذکر که از نظر جنسی تجربه نکردند، ترجیح محل را برای 0.5 mg / kg مورفین تشکیل داد.

سپس تعیین شد که آیا اثر افیونی درونی در موشهای صحرایی نالوكسان در طی تجربه جفت گیری، یا سیستمیک یا داخل VTA، پاداش جنسی و حافظه را متمایز می كند. نالوکسون از تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجویز اولیه در جلسات مکرر تکرار نشدنی یا جلوگیری از جابجایی مکان جلوگیری نمیکند. با این حال، درمان نالوكسان موجب تضعیف رفتارهای جنسی و فعال سازی عصبی در ناحیه Mesolimbic ناشی از علائم شرطی مرتبط با جفتگیری شد..

با هم، این داده ها نشان می دهد که opioids های درونی در هنگام جفت گیری باعث ایجاد پلاستیک عصبی در نورون های دوپامین VTA می شوند که برای پاداش مورفین و حافظه بلند مدت برای رفتار پاداش طبیعی به نظر می رسد.

 

معرفی

رفتارهای پاداش طبیعی توسط سیستم mesocorticolimbic (میسل و مولین، 2006; Hoebel و همکاران، 2009; Frohmader و همکاران، 2010a; Pitchers و همکاران، 2010a; جوان و همکاران، 2011; بلوم و همکاران، 2012) مواد مخدر از سوء استفاده باعث تغییرات عصبی در این سیستم می شود که به نوبه خود به توسعه و بیان سوء مصرف مواد کمک می کند (ایمن و همکاران، 2006; نستر، 2012) قبلا ما تصور می کردیم که تجربه با رفتار پاداش طبیعی، یعنی تجربه جنسی در موش های نر، سبب افزایش پلاستیسیته عصبی در هسته accumbens (NAc) می شود، از جمله افزایش ستون های دندریتیک (Pitchers و همکاران، 2010a) و deltaFosB (Pitchers و همکاران، 2013) به نوبه خود، این پلاستیک ناشی از جنس برای اثرات تجربه جنسی در جفت گیری بعدی، که به عنوان تسهیل آغاز و عملکرد رفتار جنسی (Pitchers و همکاران، 2010b, 2012, 2013) علاوه بر این، تجربه جنسیت باعث تغییر واکنش به عوامل روانشناختی، از جمله حساسیت به فعالیت حرکتی و افزایش پاداش (Frohmader و همکاران، 2010a; Pitchers و همکاران، 2010a, 2013).

NAc یکی از اهداف پایین دست در نورونهای دوپامینرژیک در منطقه قاعده شکمی (VTA) است. نورون های دوپامین VTA در هنگام جفت گیری فعال می شوند و پس از قرار گرفتن در معرض نشانه های مشروط پیش بینی کننده پاداش جنسی (بالفور و همکاران، 2004; Frohmader و همکاران، 2010a)، از طریق پپتید اپيوئيدی (EOP) در گيرنده های μ-opioid (MORs؛ Matthews و آلمانی، 1984; جانسون و شمال، 1992; Klitenick و همکاران، 1992; Ikemoto et al.، 1997; بالفور و همکاران، 2004) از این رو، قرار گرفتن در معرض نشانههای مشروط پیشگیری از رفتار جنسی باعث آزادسازی EOP و فعال سازی سلولهای دوپامین VTA میشود که انگیزه جنسی را تسهیل میکند (میچل و استوارت، 1990; ون فورث و همکاران، 1995; ون فورت و ون ر، 1996) و آزادی دوپامین در NAc (Fiorino و همکاران، 1997).

قرار گرفتن در معرض مواجهه با مواد مخدر خارجی باعث تغییرات مورفولوژیکی در VTAمازای رابینز و همکاران، 2011; مازای رابینسون و نستر، 2012) کاهش حجم سمع نورونهای دوپامین VTA (Sklair-Tavron و همکاران، 1996; Spiga et al.، 2003; چو و همکاران، 2007; Russo et al.، 2007; مازای رابینز و همکاران، 2011)، سطح پروتئین های نوروفیلیم (بیتنر جانسون و همکاران، 1992)، افزایش تحریک پذیری سلولهای دوپامین و کاهش انتقال آکسوپلاسمی و خروجی دوپامین به NAc (بیتنر جانسون و همکاران، 1992; مازای رابینز و همکاران، 2011) این نورون دوپامین VTA باعث تحرک پاداش مورفین می شود و در حال گذار بودن در طی یک ماه از سقط جنین (Russo et al.، 2007) در حال حاضر مشخص نیست که آیا پلاستیک در نورون های دوپامین VTA منحصر به اعمال opiates است یا اگر آنها همچنین توسط انتشار EOP در طول رفتار طبیعی پاداش تولید می شود.

در اینجا ما فرضیه را بررسی می کنیم که تجربه پاداش طبیعی موجب پیدایش نوروپلاستی شبیه به علت opiates می شود و به این ترتیب opiates همگرا با مکانیسم پلاستیکی است که برای رفتار پاداش طبیعی و حافظه پاداش حیاتی است. ما آزمایش می کنیم که آیا تجربه جنسی در موشهای نر باعث کاهش اندازه Soma از نورون های دوپامین VTA از طریق فرآیند وابسته به عمل EOP در VTA می شود. علاوه بر این، ما بررسی می کنیم که آیا تغییرات ناشی از EOP در نورون های دوپامین VTA با تقویت رفتار پاداش طبیعی و اختصاص دادن انگیزه به نشانه های مرتبط با پاداش طبیعی همراه است، در حالی که باعث متقابل تحمل به پاداش مورفین.

مواد و روش ها

حیوانات

موش های صحرایی Sprague-Dawley مرد (200-225 g) از رود چارلز تهیه شده و به صورت جفت در اتاق های مصنوعی روشن شده در چرخه نور / تاریکی 12 h در تمامی آزمایشات (نور خاموش در 10: 00 AM به جز آزمایش تحمل مورفین ، چراغ خاموش در 5: 00 PM). غذا و آب در دسترس بود ad libitum به جز در آزمایشات رفتاری. خانم های تحریک کننده تخمدان بودند و به صورت زیر جلدی با کپسول های 5٪ 17-β-استرادیول بنزوات سیلستیک (1.98 میلی متر قطر داخلی، 0.5 سانتی متر طول، Dow-Corning) کاشته شدند. تزریق پروژسترون (زیر پوستی، 500 μg در ml MN0.1 روغن کنجد) 3-6 h قبل از آزمایش برای تحریک پذیری جنسی تجویز شد. همه روش ها توسط کمیته های مراقبت از حیوانات دانشگاه غرب غربی انتاریو و دانشگاه میشیگان تایید شده و مطابق با شورای کانادایی مراقبت های حیوانی و دستورالعمل های بهداشت ملی در مورد حیوانات مهره دار در تحقیقات مطابق است.

دوره زماني تغيير اندازه سايت VTA dopamine

جلسات ملاقات روزانه

برای مطالعه دوره تغییرات در اندازه سمور نئون دوپامین در VTA، حیوانات با تجربه جنسی و ساده لوح در 1، 7 یا 31 d (n = 5-8 در هر گروه) پس از آخرین روز جفتگیری (تجربه) یا دست زدن (ساده لوح). گروه های با تجربه جنسی در طی جلسه نهایی همجنسگرایی و همچنین تعداد کل انزال در طی پنج جلسه (میانگین 5 برای هر گروه) همسان بودند و در هیچ یک از پارامترهای رفتار جنسی تفاوت نداشتند.

جلسات جفتگیری

از نظر جنسی، ساده لوحانه به دو حالت آزمایشی تقسیم می شود: از نظر جنسی نادیده و یا از نظر جنسی. حیوانات با تجربه جنسی به مجاز پنج بار در روزهای متوالی با زنان دریافت کننده در قفسه های آزمایش مستطیلی (60 × 45 × 50 سانتی متر) تا زمان انزال و یا تا 1 ساعت (هر کدام که در ابتدا) قرار داشتند، به هم متصل شدند. قفس ها با محلول اتانول 70٪ کاملا تمیز می شوند و مایع تازه ای بین جلسات جفت گیری اضافه شد. رفتار جنسی در طول فاز تاریک (2-6 h پس از شروع تاریکی) انجام شد. فقط حیواناتی که در طی حداقل چهار جلسه از پنج جلسه ملاقات انزال داشتند از تجربه جنسی برخوردار بودند و شامل آزمایشات می شدند. تمام جلسات ملاقات مشاهده شد و رفتار جنسی ثبت شد. تعداد مورچه ها (M) در حال حرکت (IMs)، زمان تأخیر (ML؛ زمان از معرفی زن به اولین کوه)، زمان تاخیر intromission (IL؛ زمان از معرفی زن به اولین intromission)، و تاخیر انزال (EL؛ زمان از اولین انعقاد تا انزال) ثبت شد (Agmo، 1997) حیوانات نابالغ در یک قفس تمیز برای 1 h قرار داده شدند و همزمان با مردانی که از نظر جنسی تجربه کرده بودند در همان اتاق جفت شده بودند، به طوری که در معرض بوی های دورافتاده زنان قرار گرفتند و سطح مشابهی از اختلالات و تازگی محیطی را به عنوان مردان تجربه کردند.

برچسب زدن ایمونوفلورسانس

حیوانات با استفاده از پنتوباربیتال سدیم (270 mg / kg، ip) بطور عمیق بیهوش شد و به صورت intracardially با 50 میلی لیتر 0.9٪ سالین، و سپس 500 میلی لیتر از 4٪ پارا فرمالدهید در 0.1 مایع بافر فسفات سدیم (PB) بیهوش شد. مغزها برداشته شده و پس از 1 ساعت در دمای اتاق (RT) در همان ثابت قرار داده شده و پس از آن 20٪ ساکارز و 0.01٪ سدیم آزید در 0.1 m PB برای ذخیره در 4 ° C غوطه ور شدند. بخش های کرونال بر روی میکروسکوپ انجماد (H35R، Microm) در میکروسکوپ 400 μm (H30R، Microm) برش داده شد و در چهار رشته موازی در محلول گریو محافظ (30٪ سقز، 0.1٪ اتیلن گلیکول در 20 m PB) و سپس در 0.1 ° C ذخیره شد. تمام انكوباسيون ها در RT با آرامش ملایم و شستشوی زیاد با 7.35 m PBS، pH 1، بین انكوباسيون انجام شد. بخش ها با XNUMX٪ H قرار گرفتند2O2 برای 10 دقیقه برای از بین بردن پراکسیداز های درونی، سپس 1 h در محلول انکوباسیون (PBS +: PBS حاوی 0.4٪ Triton X-100؛ سیگما-Aldrich) و 0.1٪ گاو آلبومین سرم (آزمایشگاه های تحقیقاتی ایمونولوژیک جکسون) مسدود شده است. سپس، بخش ها در یک شب در RT در آنتی بادی تیروسین هیدروکسیلاز (TH) (1: 20 000؛ میلیونر) پس از انکوباسیون اولیه آنتی بادی، بخش ها در 555 دقیقه در آنتی بادی ضد موش بز بز (1: 100، Invitrogen، Eugene، OR) کنسانتره AlexaFluor 30 انکوباتور شدند. در نهایت، بخش ها با 0.1 m PB شسته شده و بر روی اسلایدهای شیشه ای Superfrost Plus شسته شده و با ژلوتول حاوی عامل ضد فشرده اکتان 1,4-diaazabicyclo (2,2) (DABCO؛ 50 mg / ml، Sigma-Aldrich؛ لنت، 1978).

تجزیه و تحلیل داده ها: اندازه سینه نورون.

تصاویری از نورون های TH-immunoreactive (IR) در VTA در بزرگنمایی 40 × در سه سطح rostral تا caudal (بالفور و همکاران، 2004) تفاوت بین سلول ها در سطوح مختلف وجود ندارد. اندازه سومی نورون های TH-IR با استفاده از ImageJ (موسسات ملی بهداشت) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. محدوده متوسط، محیط و دایره ای اندازه گیری شده است به شرح زیر است Sklair-Tavron و همکاران (1996). به طور متوسط ​​سلول های 25 در هر حیوانی (مجموع 3 VTA تمام شده) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و فقط سلول هایی با هسته به وضوح قابل مشاهده بود. برای هر حیوان، میانگین، محیط و دایره ای محاسبه شد. برای تجزیه و تحلیل آماری، آنالیز واریانس دو طرفه مورد استفاده قرار گرفت [عوامل: تجربه جنسی (جنس تجربه شده یا نابغه جنسی) و زمان (1، 7 یا 31 d)] و به دنبال آن تعقیبی مقایسه ها با استفاده از روش Holm-Sidak با سطح معنیداری 0.05.

VTA غیر داپامین تغییر می کند

جلسات پیوند دو هفته ای

برای بررسی اینکه آیا تجربه جنسی در طول جلسات جفتگیری روزانه برای کاهش اندازه سمی نورون TH-IR مورد نیاز است، نورون های دوپامین VTA حیواناتی که در طی جلسات پنج جلسه دو هفته ای دوخته شده بودند، مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. جلسات جفتگیری همانطور که در بالا شرح داده شد، اما بیش از یک دوره از 2.5 هفته. مغز 7 d بعد از جفت گیری یا دست زدن به آخرین بار جمع آوری شد.

برچسب ایمونوئوروکسیداز

علاوه بر این، با استفاده از تکنیک های حساس رنگ آمیزی با تشخیص ايمونوئوروکسیداز و کروموزوم، امکان مشاهده تجربیات تغییر اندازه سومی TH-IR نیز مورد آزمایش قرار گرفت. پردازش بافت و پردازش انجام شد همانطور که در بالا توضیح داده شد. پس از درمان با 1٪ H2O2 و PBS +، بخش ها در یک شب در RT در یک تریسترویین هیدروکسیلاز (TH) آنتی بادی پلیکونال موش (1: 20 000؛ میلیونر) پس از انكوباسيون آنتيبادي ابتدا، بخشها با IgG ضد خرگوش بز از كنسانتره بيوتين (1 h، 1: 500 در PBS +، Vector Laboratories)، پيدايش ايدين بيوتين-هورريديش پراكسيداز (1 h، ABC elite، 1: 1 000 در PBS آزمایشگاههای بردار) و 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (10 min، 0.02٪، DAB؛ Sigma-Aldrich) با سولفات نیکل در (0.02٪ در 0.1 m PB) با پراکسید هیدروژن (0.015٪) افزایش یافته است. بخش ها در 0.1 m PB به طور کامل شسته شدند تا فورا واکنش خنک شوند و بر روی اسلایدهای شیشه ای Superfrost اضافه شده (Fisher) با ژلاتین 0.3٪ در ddH2O. پس از کمبود آب، تمام اسلایدها با دیواره DPX (دوبوتیل فتالیت زایلن، سیگما-آلدریچ) قرار گرفتند.

تجزیه و تحلیل داده ها: اندازه سینه نورون.

سلول های TH-IR برای مساحت ، محیط و دایره شکل همانطور که در بالا توضیح داده شد ، تجزیه و تحلیل شدند. علاوه بر این ، سلولهای TH-IR در ماده نیگرا (SN) ، در همان بخشهایی که برای تجزیه و تحلیل سلولهای VTA TH-IR استفاده می شوند ، مورد بررسی قرار گرفت. سرانجام ، پس از تجزیه و تحلیل سلولهای VTA و SN TH-IR ، مقاطع با استفاده از کرسیل بنفش مورد سنجش قرار گرفت و سلولهای غیر TH-IR با استفاده از همان روشهای توصیف شده در بالا مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. تفاوت بین گروه های ساده لوح و با تجربه با استفاده از دانش آموزان دو دم مقایسه شد t آزمایش با سطح معنیداری 0.05.

اثر نالوكسان بر كاهش اندازه سموم دوپامین ناشی از تجربه

برای تعیین اینکه آیا MORs نقش مهمی در تغییر جنسیت ناحیه دوپامین داشتند، MOR در طی رفتارهای جنسی مسدود شدند. نیمی از حیوانات تجربه جنسی را به دست آوردند، در حالی که نیمه دیگر مورد استفاده قرار گرفت اما از نظر جنسی نادان باقی ماند. حیوانات تجربه شده از نظر جنسی در روزهای متوالی در 5 مجازند. در گروه های دارای تجربه و ناشنوايی، حیوانات با نالوکسون آنتاگونیست غیر اختصاصی MOR (10 mg / kg، sc، Sigma-Aldrich، محلول در محلول 0.9٪ saline) یا نمک زدایی 30 min قبل از تجویز زن (با تجربه) یا قبل از برخورد (آدم ساده)؛ به این ترتیب، چهار گروه تجربی تشکیل می شود: سالین ناخوشایند جنسی (Naive Sal)، نالوکسون نابالغ جنسی (Naive NLX)، سالین نرمال (Exp Sal) و نالوکسون (NLX؛ n = 5-8 در هر گروه). درمان نالوكسان اثر معنی داری بر روی هر یك از پارامترهای رفتار جنسی نداشت، در هر دو گروه 5 d و گروه های درمان شده با نالوكسان و سالین در یك رابطه جنسی مشابه بود. تمام حیوانات از طریق 7 D پس از عمل جراحی آخرین جراحی کشته شدند. جداسازی، ایمونوهیستوشیمی و تجزیه و تحلیل داده ها (دو طرفه آنالیز واریانس: عوامل مرتبط با جنس و درمان دارویی) برای اندازه گیری حجم دوپامین به ترتیب در بالا توصیف شد.

مورفین ترجیح می دهد محل قرار گیری

طراحی تجربی.

قبلا، روسو و همکاران (2007) نشان داد که مورفین مزمن تحمل به پاداش مورفین را تحریک می کند. از آنجا که تجربه جنسی و مورفین مزمن موجب کاهش مشابهی در میزان نورون های دوپامین در VTA می شود، ارتباطات عملکردی تغییرات مورفولوژیک ناشی از جنس برای پاداش مورفین مورد آزمایش قرار گرفت. حیوانات با تجربه جنسی و ساده لوح به شش گروه تجربی تقسیم شدند (n = 9-13 در هر گروه) بر اساس رفتار جنسی (ناخوشایند جنسی یا تجربه شده) و دوز مورفین (0.5، 5.0، یا 10.0 mg / kg، ip) و برای ترجیح محل موقت ناشی از مورفین (CPP) مورد آزمایش قرار گرفتند.

مورفین CPP

تهویه 1 d بعد از آخرین جلسه ملاقات انجام شد و گروه ها برای عملکرد جنسی در طی جلسه ملاقات گذشته همسان شدند. پارامتر CPP مورد استفاده شامل پیش آزمون، روز تهیه و پس آزمون و دستگاه بر اساس آن بود Tenk et al (2009). به طور خلاصه ، دستگاه CPP (همکاران MED) از سه اتاق مجزا تشکیل شده بود. بین هر جلسه ، دستگاه با محلول اتانول 70٪ کاملاً تمیز می شد تا نشانه های بویایی طولانی مدت به حداقل برسد. برای تعیین تنظیمات فردی ، پیش آزمایشی انجام شد که طی آن به مدت 15 دقیقه به حیوانات دسترسی آزاد به کل دستگاه داده شد. به عنوان یک گروه ، حیوانات ترجیح قابل توجهی برای یک اتاق خاص نشان ندادند ، اما هر حیوان جداگانه اولویت اولیه کمی داشت. موشهایی که اولویت قابل توجهی برای یکی از اتاقها نشان دادند (> 200 ثانیه اختلاف بین زمان صرف شده در هر یک از اتاقها ؛ <5 of از حیوانات) در طول پیش آزمون از مطالعه خارج شدند. در طی تهویه ، دارو با استفاده از یک الگوی بی طرفانه یا در ابتدا با اتاق ترجیحی یا غیر ترجیحی جفت شد (Tzschentke، 2007) و حیوانات به اتاق های 30 دقیقه محدود شدند. حیوانات به صورت صبح (9: 00 AM به 12: 00 PM) تزریق شد و در محفظه زوج سالم (کنترل) قرار گرفتند. در بعد از ظهر (1: 00-4: 00 PM)، حیوانات با مورفین (Ip، 0.5 mg / kg، 5.0 mg / kg یا 10.0 mg / kg، مورفین سولفات حل شده در 0.9٪ سالین، جانسون ماتی) تزریق شد به محفظه متصل به مرفین حیوانات تحت دو روز تهیه قرار گرفتند. روز بعد (3 d پس از آخرین روز جفتگیری)، یک آزمون پس از آزمون، به طور روتین یکسان با پیش آزمون انجام شد. برای تجزیه و تحلیل آماری، زمان صرف شده در اتاق مورفین با زوج در طول پس آزمون با زمان صرف شده در اتاق زوج سالین در طی پس آزمون برای مردان نادیافته یا تجربه شده در هر دوز با استفاده از زوج زوج t آزمون. p 0.05/XNUMX <از نظر آماری معنادار در نظر گرفته شد. گروه کنترل اضافی از حیوانات ساده لوح و باتجربه از نظر جنسی ، در هر دو اتاق جفت و غیر جفت نمکی دریافت کردند تا به عنوان کنترل منفی عمل کنند. هیچ تفاوتی در زمان صرف شده بین اتاق برای هر دو گروه تشخیص داده نشد.

اثرات نالوکسون سیستمیک بر تسهیل رفتارهای جنسی ناشی از تجربه

طراحی تجربی.

تجربه جنسی منجر به تسهیل رفتار جنسی شده است که برای حداقل ماه 1 نگهداری می شود (Pitchers و همکاران، 2012) برای تجزیه و تحلیل اثر مسدود کردن MOR در تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجربه، حیوانات با تجربه جنسی نالوکسون یا سالین قبل از پنج جلسه پیوند متوالی (n = 12 هر) همانطور که در بالا توضیح داده شد. یک هفته پس از آخرین جلسه ملاقات، یک آزمایش نهایی جفت گیری انجام شد که در آن تمام حیوانات مجاز به بستن تا یک انزال یا تا 1 ساعت بود. قبل از جفتگیری در روز آزمون نهایی، هیچ درمان نالوکسون یا سالین انجام نشد. پارامترهای جفتگیری برای تعیین اینکه آیا نالوکسون تحت تأثیر تسهیل جفت گیری (روز 1 در مقابل روز 5) یا حمایت از این تسهیل (روز 5 در مقابل آزمون) با استفاده از دو روش ANOVA [عوامل: درمان (سالین در مقابل نالوکسون) ) و روز (روز 1، روز 5، یا آزمون)] و روش هولم-سیداک برای تعقیبی مقایسه ها برای همه آزمون های آماری p 0.05/XNUMX <از نظر آماری معنادار در نظر گرفته شد.

آزمایش های کنترل اضافی

سیستم نالوكسان در روز آزمون.

برای نشان دادن این که رفتار جنس تغییر یافته در روز آزمون ناپایداری نهایی به دلیل عدم وجود نالوکسون نبود، ما در نهایت آزمون ناپروکسن یا سالین را به حیوانات اعطا کردیم که با نالوکسون زوج همراه شده بودند. به طور خاص، تمام حيوانات تزريق نالوكسان (10 mg / kg، sc) 30 قبل از جفت شدن به يك انزال در طول روز متوالي 5 را دريافت كردند. در روز آزمون 7 d، تقریبا نیمی از حیوانات تزریق نالوکسون دریافت کردند (10 mg / kg، n = 7) یا شور (n = 6) 30 دقیقه قبل از معرفی یک زن گیرنده. رفتار جنسی مشاهده و ثبت شد. پارامترهای جفتگیری برای تعیین اینکه آیا نالوکسون تحت تأثیر تسهیل جفت گیری (روز 1 در مقابل روز 5) یا حمایت از این تسهیل (روز 5 در مقابل آزمون) با استفاده از دو روش ANOVA [عوامل: درمان (سالین در مقابل نالوکسون) ) و روز (روز 1، روز 5، یا آزمون)] و روش هولم-سیداک برای تعقیبی مقایسه ها برای همه آزمون های آماری p <5٪ از نظر آماری معنادار در نظر گرفته شد.

اثرات نالوكسان بر بیان كوتاه مدت رفتار جنسی تسهیل شده.

اثرات درمان نالوكسان (10 mg / kg، sc) در طی جفتگیری در رفتار پس از زایمان در طی روز آزمون ناپیوسته، كه تنها پس از جفت گیری (یك سالن، n = 5؛ نالوکسون n =

سیستم پیشگیری از نالوكسان

برای تعیین این که آیا درمان مکرر نالوکسون به تنهایی باعث اختلال در رفتار جنسی 7 d می شود یا خیر، پس از آخرین درمان، حیوانات ناگوار جنسی پنج بار روزانه نالوکسون (10 mg / kg، sc) یا تزریق سالین را در روزهای متوالی قبل از یک آزمایش جفتگیری 7 d پس از نالوکسون نهایی یا تزریق شور. در این روز آزمون نهایی، حیوانات هیچ تزریقی دریافت نکردند. رفتار جنسی مشاهده شده و ثبت شده به عنوان شرح داده شده در بالا. پارامترهای جفتگیری بین گروهها با استفاده از ناپیوسته مقایسه شد t آزمایشات برای همه آزمون های آماری p <5٪ از نظر آماری معنادار در نظر گرفته شد.

سیستمیک نالوکسون و پاداش جنسی.

یك احتمال برای اثرات تضعیف كننده نالوكسون در نمایش حفظ رفتارهای جنسی آسان این است كه نالوكسان جلوه های تأثیرگذار رفتارهای جنسی را مسدود می كند. برای آزمایش این احتمال ، الگوی CPP برای رفتارهای جنسی بلافاصله پس از تزریق نالوکسان یا نمکی در مردان بدون تجربه جنسی قبلی انجام شد. روش CPP مانند مورفین-CPP که در بالا توضیح داده شد ، شامل پیش آزمون ، روزهای تهویه ، و پس آزمون بود.

رفتار جنسی با اتاق اولیه غیرقطعی مرتبط بود. در یک روش متعادل، هر حیوان تزریق نالوکسون (n = 12) یا شور (n = 11) 30 min قبل از دسترسی به یک زن گیرنده. متوسط ​​زمان پیوستن تقریبا ~ 13 دقیقه بود. یک دقیقه بعد از انزال، حیوان به مدت 30 دقیقه در اتاق زوج قرار داده شد. در روز تهیه روزانه، حیوانات تزریق یا نالوکسون یا نمک را دریافت کردند (هر کدام از آنها قبل از جفت گیری دریافت کرده بودند) و به مدت 30 دقیقه در اتاق نازک قرار داده شدند. بعد، یک آزمون پس از آن انجام شد، همانند پیشآزمون. برای تعیین اولویت اتاق، مدت زمان صرف شده در اتاق زوج در طول پیش آزمون و پس آزمون، مقایسه شد. برای تجزیه و تحلیل آماری، زوج t برای مقایسه مقادیر اولویت و تفاوت، و زمان در اتاق زوج در پیش آزمون و پس آزمون، برای تعیین اینکه آیا یک CPP قابل توجه برای رفتار جنسی شکل گرفته است، استفاده شد. p 0.05/XNUMX <معنادار در نظر گرفته شد.

اثر نالوكسان داخل VTA بر تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجربه

طراحی تجربی.

برای تعیین اینکه آیا اقدام EOP به طور خاص در VTA، مسئول اثرات تغییرات ناشی از تجربه جنسی در رفتار جنسی بود، حیوانات قبل از 5 جلسه ملاقات روزانه با تزریق موضعی نالوکسون یا شور در VTA قرار گرفتند. پارادایم رفتاری شبیه به آزمایش سیستمیک نالوکسون بود. حیواناتی که از نظر جنسی تجربه شده بودند، در طی 5 روزهای متوالی تا یک انزال یا تا 1 ساعت مجبور به همکاری بودند. 15 دقیقه قبل از معرفی زن گیرنده، موشهای نر از دوز مصرفی نالوکسون (10 μg / μl در هر نیمکره، 0.5 μl حجم، محلول در محلول نمک 0.9٪) یا سالین (0.5 μl در هر نیمکره) دریافت کردند. ریزنمونه های دو طرفه با سرعت جریان 0.5 μl / min برای یک فاصله زمانی 1 دقیقه و پس از آن 1 دقیقه اضافی با کانول تزریق در محل برای انتشار منتشر شد. سپس کانول تزریق با کانول مجلسی و کلاه گرد و غبار جایگزین شد. یک هفته پس از آخرین روز جفتگیری (روز آزمون)، تمام حیوانات یک بار دیگر به انزال زدند بدون تزریق نالوکسون یا سالین. شکل 3A طرح تجربی را طراحی می کند. تجزیه و تحلیل داده ها به صورت توصیفی در آزمایش نالوکسون سیستمیک انجام شد.

جراحی کانولاسیون

موش های صحرایی نر با تزریق داخل صفاقی (0.1 میلی لیتر / کیلوگرم) کتامین (0.87 میلی گرم / میلی لیتر) و زایلازین (0.13 میلی گرم / میلی لیتر) بیهوش شدند و به دستگاه Stereotaxic (Kopf Instruments) گذاشتند. کانولهای هدایت کننده 21 دو طرفه (Plastics One) از طریق سوراخ های کوچک مته در جمجمه به مغز به سمت VTA در -4.8 میلی متر AP، ± 0.75 میلی متر ML از برگما و -7.8 mm DV از بالای جمجمه با توجه به Paxinos و واتسون (2013). کانول ها با اکریلیک دندانی که به سه پیچ در جمجمه بستگی دارد، تضمین شده است. حیوانات یک دوره بهبودی هفته 2 دریافت کردند و روزانه برای عادت و رفتار با دستورالعمل های تزریق و تزریق مورد استفاده در آزمایشات رفتاری قرار گرفتند.

تایید قرار دادن کانولا.

قرار دادن کانولها با استفاده از TH-immunostaining مورد بررسی قرار گرفت تا تأیید شود که VTA دقیقا هدف قرار داده شده است. در آزمایشات فقط حیوانات با محلول مناسب در نظر گرفته شدند (حجم گروه نهایی: سالین آزمایشی n = 8؛ نالوکسون با تجربه n = 6) سه حیوان اضافی که تزریق داخل وریدی نالوکسون به خارج از VTA انجام دادند، در یک گروه تزریقی «از دست رفته» گروه بندی شدند. گروه از دست رفته به طور جداگانه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند که به عنوان کنترل های تشریحی و من ویتنی مورد استفاده قرار می گرفت U برای مقایسه رفتار در روز آزمون نهایی با مردان مبتلا به نالوکسون و سالین درمان شده، از آزمون استفاده شد.

بیان pERK ناشی از رابطه متقابل مرتبط با جفت شدن

طراحی تجربی.

در معرض قرار گرفتن در قفس که در آن مردان تجربه تجربه متناوب نشان داده شده است باعث فعال شدن MOR در فعالیت VTA و عصبی در VTA و NAc (بالفور و همکاران، 2004) از این رو، محیط زوج، به عنوان پیشگویی مشروط برای پاداش جنسی عمل می کند. در حال حاضر مطالعه مورد بررسی قرار گرفته است که آیا فعال شدن MOR در طول تجربه جنسی برای فعالیت های عصبی ناشی از ایجاد نشانه های متعارف مورد نیاز است. نالوکسون یا سالین به طور سیستمیک (ip) 30 دقیقه قبل از قرارگیری در عرصه جفتگیری و معرفی یک زن گیرنده برای جفتگیری (تجربه شده) یا قبل از دستکاری کنترل که شامل قرارگیری در قفس تحویل بدون ارائه زن (بی طرف محیط زیست، ساده لوح). بنابراین، چهار گروه تجربی ایجاد شد: Naive Sal، Naive NLX، Exp Sal، and Exp NLX. یک هفته بعد از جلسه پیوند نهایی، نیمی از حیوانات در هر گروه در معرض قفس جفتگیری قرار گرفتند (مردان مستقل: نشانه های مشکوک مرتبط با جنس) و یا دست زدن به قفس (مردان نابالغ: نشانه های غیرقابل انعطاف / خنثی)، در حالی که نیمه دیگر در معرض هر نشانه ای و در عوض در قفس خانه (برای تعیین بیان پایه pERK) باقی مانده است. این پارامتر تجربی گروههای 8 را تولید کرد: Naive Sal-No Cue، Naive Sal + Cue، Naive NLX-No Cue، Naive NLX + Cue، Exp Sal-No Cue، Exp Sal ​​+ Cue، Exp NLX-No Cue، Exp NLX + Cue (n = 4 به جز Naive NLX-No Cue، n = 3) حیوانات 10-15 دقیقه پس از قرار گرفتن در معرض سیگنال قرار گرفتند. کنترل حیوانات از قفس های خانه خود برداشته شد و به طور همزمان آنزیم شد.

ایمونوهیستوشیمی

بخش بندی و ايمونوهيستوشيمي همانطور که در بالا توصيف شد انجام شد. در اینجا ما از یک آنتی بادی پلی کلونال خرگوش علیه p42 و p44 MAP Kinases ERK1 و ERK2 (pERK؛ 1: 4 000؛ Cell Signaling Technology) استفاده کردیم. آنتی بادی اولیه در ادبیات گسترده (Roux و Blenis، 2004; مورفی و بلنیس، 2006; Frohmader و همکاران، 2010b) علاوه بر این، حذف آنتی بادی های اولیه باعث جلوگیری از همه ایمنی فعال شد و تجزیه و تحلیل وسترن بلات بافت مغز موش نشان داد که دو باند در وزن مولکولی مناسب وجود دارد.

تحلیل داده ها.

سلول های PERK ایمنی فعال (-IR) در تعدادی از مناطق مغز شمارش شده با استفاده از یک لوله یاب دوربین lucida متصل به یک لایکا میکروسکوپ DMRD: NAc [هسته (C) و پوسته (S)؛ 400 × 600 μm؛ قشر متوسط ​​پیشانی؛ mPFC؛ منطقه قدامي قدامي (ACA)؛ قشر prelimbic (PL)؛ قشر infralimbic (IL)؛ 600 × 800 هر میکرومولار]، Caudate-پوتامن (CP؛ 800 × 800 μm) و آمیگدال ناحیه پشتی (BLA؛ 900 × 1200 μm؛ بالفور و همکاران، 2004; Frohmader و همکاران، 2010b; Pitchers و همکاران، 2010b) دو بخش در هر منطقه مغز شمارش شدند و تعداد سلول ها در زمینه های استاندارد تجزیه و تحلیل ها به صورت تعداد سلول ها در میلی متر محاسبه شد2. دو محاسبه به ازای هر حیوان برای هر محاسبه گروهی معنی بود. میانگین میانگین گروه در گروه های با تجربه و یا ساده لوحانه با استفاده از دو روش ANOVA [عوامل: درمان دارویی (NLX یا Sal) و نشانه (نشانه یا نشانه) تعقیبی مقایسه ها با استفاده از آزمون های Holm-Sidak یا Man-Whitney در صورت لزوم با سطح معنی دار p <0.05 در پوسته NAc از حیوانات با تجربه جنسی ، گرایش زیادی به اهمیت فاکتورها وجود دارد و بنابراین ، مقایسه های جفتی فقط برای مقایسه گروه های شور (Sal-No Cue) و نشانه سالین (Sal + Cue) انجام شد.

تصاویر.

تصاویر دیجیتالی با استفاده از یک دوربین CCD (Macrofire، Optronics) به یک دوربین متصل شد لایکا میکروسکوپ (DM5000B) با تنظیمات دوربین ثابت. تصاویر به نرم افزار Adobe Photoshop 9.0 وارد شدند. به جز تنظیم روشنایی و کنتراست، تصاویر به هیچ وجه تغییری نکردند.

نتایج

تغییرات جنسی ناشی از سلول های دوپامین VTA

تجربه جنسی منجر به کاهش حجم VTA دوپامین سم (شکل 1A-C) تجربه جنسی به طور قابل توجهی کاهش سطح و محیط سومی VTA TH-IR سلول (منطقه: F(1,31) = 23.068، p <0.001 محیط ، F(1,31) = 18.225، p <0.001) همچنین یک تأثیر عمده مهم در زمان وجود داشت (مساحت: F(2,31) = 6.377، p = 0.005؛ محیط، محیط F(2,31) = 4.389، p = 0.021) و یک تعامل قابل توجه بین تجربه و زمان (منطقه: F(2,31) = 5.284، p = 0.011؛ محیط، محیط F(2,31) = 4.347، p = 0.022) مقایسه های پراکنده نشان داد که سطح و محیط سلول های TH-IR به طور قابل توجهی 1 و 7 d را پس از آخرین روز رفتار جنسی در حیوانات تجربه شده در مقایسه با کنترل های جنسی ناخوشایند کاهش می دهد [شکل 1B، حوزه: p = 0.002 (1 د) p <0.001 (7 روز) C، محیط: p = 0.009 (1 د) p <0.001 (7 روز)]. هنگامی که اندازه سوما از سلولهای عصبی TH-IR به 31 روز پس از آخرین جلسه جفت گیری بازگشت ، اثر رفتار جنسی از بین می رود.شکل 1B، حوزه: p = 0.798؛ C، محیط: p = 0.785) تغییرات ناشی از تجربه جنسی در هیچ یک از نقاط زمانی در دایره ای (شکل 1D) کاهش اندازه سمع VTA دوپامین به روزهای جفت گیری وابسته نبود، زیرا تجربه جفت گیری در طی جلسات پنج روزه دو هفته ای، کاهش حجم VTA دوپامین سم (شکل 2A,B, E-H، حوزه: p = 0.004؛ محیط: p <0.001) در مقابل ، تجربه جنسی بر اندازه سوما TH-IR در ماده سیاه تأثیر نمی گذارد (شکل 2C, I-J، حوزه: p = 0.13؛ محیط: p = 0.16) و اندازه سومی را در نورون های غیر VTR-TH-IR (شکل 2D, E-H، حوزه: p = 0.46؛ محیط: p =

شکل 1. 

تغییرات اندازه سومی ناشی از مواد مغذی درون غدد درون سلولی نورونهای دوپامین VTA. Aتصاویر نماینده از نورون های دوپامین VTA از حیوانات ناخوانده و تجربه شده نشان می دهد که کاهش سم اندازه 7 d پس از جلسه نهایی جفت گیری. نوار مقیاس، 5 μm. داده های کمی نشان می دهد که تجربه جنسی (Exp، میله های سیاه) باعث کاهش چشمگیر در منطقه (B؛ در μm2) و محیط (C؛ در μm) سلولهای دوپامین VTA، 1 d (Naive، Exp؛ n = 6) و 7 d (ناخودآگاه، n = 5؛ Exp، n = 6)، اما 31 d (Naive، n = 6؛ Exp، n = 8) بعد از جفت گیری نهایی، در مقایسه با کنترل های جنسی ناشیانه (Naive، میله سفید). در مناطق تجربه شده در مناطق 84 و 1 د، نسبت به کنترل های ساده لوح در مقایسه با 7٪ کمتر بود. محیط به 91.6 و 90٪ در گروه های با تجربه نسبت به کنترل در 1 و 7 d پاسخ دادند. هیچ تاثیری بر روی دایره ای (D) این پلاستیسیت سلول دوپامین در منطقه (E) و محیط (F) توسط نالوکسون (NLX، n = 8)، اما نه شور (Sal، n = 7) در طی جفت گیری، 7 d پس از جلسه نهایی جفت گیری در مقایسه با کنترل های جنسی ناچیز (Sal، n = 5؛ NLX n = 6) داده ها به معنی ± SEM؛ * نشان دهنده تفاوت معنی داری در مقایسه با کنترل های جنسی ناشی از همان روز (B, C) یا در مقایسه با کنترل های جنسی ناشی از سالین و نالوکسون تحت درمان با مردان مبتلا به جنس (E, F).

شکل 2. 

تجربه جنسی باعث کاهش اندازه سوما در نورونهای دوپامین مورتایا نگریا یا نورونهای VDA ناندپامین نشد. VTA TH-IR Neuron soma area (A؛ در μm2) و محیط (B؛ در μm) در حیوانات ناخوشایند (سفید) و با تجربه (سیاه) که دو بار در هفته به جای در طی روزهای متوالی تجربه می کردند. Substantia nigra TH-IR soma area (C) و منطقه VTA غیر TH-IR soma (D) در حیوانات ناخوانده جنسی (سفید) و با تجربه (سیاه). داده ها به معنی ± SEM؛ * نشان دهنده تفاوت معنی داری در مقایسه با کنترل های جنسی ناخوشایند است. تصاویر نمایشی نشان می دهد که نورون های TH-IR (قهوه ای) در VTA از جنسیت ساده لوح (E) و تجربه (F) مردانی G, H، یک تصویر بزرگتر از نورون نشان داده شده توسط فلش ​​در E و F به ترتیب. نورون های رنگ آمیزی Nissl در این تصاویر به رنگ آبی نشان داده شده است. تصاویر نماینده نشان می دهد که نورون های TH-IR در SN غیر جنسی ناباب (I) و تجربه (J) مردانی میله های مقیاس: E-J، 20 μm.

کاهش میزان سوموس ناشی از سکس در اثر استفاده از نورون های دوپامین VTA وابسته به فعال شدن گیرنده های اپيوئيد است

کاهش میزان Soma نورون دوپامین VTA ناشی از تجویز جنسی توسط نالوکسون آنتاگونیست غیر اختصاصی MOR مسدود شده بود، قبل از هر جلسه ملاقات تجویز شد. درمان نالوكسان قبل از جلسات جراحي بر روي ناحيه (F(1,22) = 4.738، p = 0.041) و به سمت تاثیر قابل توجهی بر محیط (F(1,22) = 2.892، p = 0.052) تعامل قابل توجهی بین تجربه و درمان نالوکسون برای منطقه (F(1,22) = 5.578، p = 0.027) و محیط (F(1,22) = 8.167، p = 0.009) مقایسه مقایسه ای نشان داد که تجربه جنسی در حیوانات درمان شده با نمک به طور قابل توجهی کاهش ناحیه و محیط 7 دونات دوپامین VTA پس از جلسه آخر همجواری را در مقایسه با مردان مبتلا به ناباروی جنسی (شکل 1E، حوزه: p = 0.018؛ F، محیط: p = 0.007) در مقابل، حیوانات تحت درمان با نالوکسون، از نظر جنسی، با مردان نابالطی تحت درمان با نالوکسون (شکل 1E، حوزه: p = 0.483؛ F، محیط: p = 0.330) علاوه بر این، اندازه سومی حیوانات سالین با تجربه نسبت به حیوانات با تجربه نالوکسون (شکل 1E، حوزه: p = 0.002؛ F، محیط: p = 0.002) این اثر از نالوکسون برای تجربه جنسی خاص مشخص بود، به طوری که درمان تنها نالوکسون بر اندازه سومی سلول TH-IR در مردان مبتلا به نالوكسان نابالغ جنسی ناسازگار نبود در مقایسه با گروه شاهدشکل 1E,F) علاوه بر این، این اثر نالوکسون بر کاهش اندازه سومی ناشی از تجربه، ناشی از اثرات نالوكسان بر رفتار جنسی نبود، زیرا رفتار جفتگیری بین مردان و نالوكسان و درمان سالین به طور معنی داری تفاوت نداشت، به جز زمان طولانی تر برای پیوند زایی پس از انزال (فاصله پس از انزال) در مردان تحت درمان با نالوكسان طی جلسه اول و پنجم (p = 0.03 و p = 0.004 به ترتیب). هر دو مرد سالين و نالوكسان درمان شده در هر يك از پنج جلسه ملاقات به انزال متصل شدند.

تسلیم پاداش مورفین ناشی از تجربه جنسی

اثرات تجربی جنس بر اندازه سمع VTA دوپامین با عمل EOP در VTA مشابه مواردی است که برای مواد مخدر اگزوژن گزارش شده است (Sklair-Tavron و همکاران، 1996; Russo et al.، 2007) بنابراین، آزمایش شده است که آیا پریشانی سلول دوپامین VTA ناشی از پاداش طبیعی بر پاداش برای مورفین اپیدمی تاثیر می گذارد. در واقع، تجربه جنسی باعث تحمل پاداش مورفین شد، شبیه به اثرات مواد مخدر مزمن (Russo et al.، 2007) مردان مبتلا به سکسوپلاستی موفق به تولید یک CPP برای دوز مورفین mg / kg 0.5؛ در حالی که مردان نابالغ جنسی برای این دوز یک CPP را تشکیل می دادند، که نشان می دهد که با گذراندن زمان بیشتری در اتاق مورفین در مقایسه با اتاق زایمان سالین در طول پس آزمون (شکل 3; p = 0.039) هر دو گروه از لحاظ جنسی نواخته و با تجربه، مقدار قابل ملاحظه ای از زمان در اتاق مورفین در مقایسه با اتاق با زوج سالین با دوزهای بالاتر از مورفین صرف مقدار mg / kg 5.0شکل 3؛ آدم ساده: p = 0.029؛ Exp: p = 0.012) و 10.0 mg / kg (شکل 3؛ آدم ساده: p <0.001 انقضا: p =

شکل 3. 

اثرات تجربه جنسی بر روی پاداش مورفین. در طول آزمایش پس از تست، در سالم (Sal) یا مورفین زوج (مور، 0.5، 5 یا 10 میلی گرم / کیلوگرم وزن بدن) n = 10-13) یا تجربه (Exp، n = 9-13) مرد. داده های به دست آمده به صورت میانگین ± SEM؛ * نشان دهنده تفاوت معنی داری نسبت به اتاق سلول زرد در داخل یک حیوان است. NS، مهم نیست.

تسهیل رفتارهای جفتگیری ناشی از تجربه جنسی بستگی به فعال شدن گیرنده های اپیدمی دارد

یافته ها تا کنون نشان می دهد که EOP در VTA در طول جلسات کوتاه جراحی 5 روزانه موجب ایجاد پلاستیک نورون های دوپامین VTA می شود که شبیه به اثرات مورفین مزمن یا خودمراقبتی هروئین است (Russo et al.، 2007; مازای رابینز و همکاران، 2011) ما فرض کردیم که کاهش اندازه سمع Dopamine VTA برای یادگیری پاداش و به ویژه برای تسهیل رفتار جنسی از انگیزه و عملکرد ناشی از تجربه جنسی است. این فرضیه با مسدود کردن MOR با استفاده از نالوکسون در طی جراحی و بررسی تأثیرات در تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجربه جنسی در طی پنج جلسه ملاقات روزانه مورد آزمایش قرار گرفت. داده ها در شکل 4 برای جلسات اول و پنجم جفت گیری تنها به عنوان این داده ها هستند که بهترین نشان دهنده ی تسهیل رفتار جفت گیری ناشی از تجربه است. علاوه بر این، اثرات بلندمدت درمان نالوكسان در جلسات جفت گیری در حفظ تسهیل رفتارهای جفتگیری ناشی از تجربه در طی آزمون ناپیوسته 1 هفته ای بعد آزمایش می شود. شکل 4A طراحی تجربی را نشان می دهد. اثر اصلی جلسه تمرینی بر روی تمام پارامترهای رفتار جنسی (تأخیر: F(2,55) = 11.286، p <0.001 تأخیر ورود: F(2,55) = 8.767، p <0.001 تأخیر انزال: F(2,55) = 10.368، p <0.001 <) و درمان نالوکسان در تأخیرهای نصب شده (F(1,55) = 6.585، p = 0.013) و intromission (F(1,55) = 7.863، p = 0.007) مقايسه دو طرفه نشان داد که درمان نالوکسون در طول جلسه اول جراحي رفتار جنسي را تحت تاثير قرار داد؛p = 0.002) و intromission (p = 0.002) در مقایسه با شاهد سالین در روز اول جفت گیری. این اثر نالوكسان بر رفتار جنس اولیه با تجویز جنسی كاهش یافت و در هر یك از جلسات پس از آن، مشاهده نشد (جدول 1) علاوه بر این، تجویز نالوكسان قبل از هر جلسه پنج جلسه ملاقات باعث جلوگیری از ابتلا به رفتار جنسی با تجربه جنسی نشد. با توجه به اثرات تقویتی تجربه جنسی، مردان مبتلا به نمک زده نشان داد که تاخیر در خواب (شکل 4B; p = 0.032) intromission (شکل 4C; p = 0.033) و انزال (شکل 4D; p <0.001) در پنجمین جلسه جفت گیری در مقایسه با اولین جلسه جفت گیری ، که نشان دهنده تسهیل رفتار جنسی است. به طور مشابه ، مردان تحت درمان با نالوکسان تاخیرهای قابل توجهی کوتاه تر برای نصب نشان می دهند (شکل 4B; p <0.001) ، درگیری (شکل 4C; p <0.001 <) و انزال (شکل 4D; p = 0.017) در پنجم در مقایسه با روز اول. علاوه بر این، مردان مبتلا به نالوکسون از کنترل های شور در هر یک از تأخیر در طی جلسه پنجم جفت گیری تفاوت نداشتند.

شکل 4. 

مواد افیونی اندوژن نقش مهمی در تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجربه ایفا می کنند. A، طراحی تجربی. B-D، پارامترهای رفتار جنسی در مردان مبتلا به سالین (سال، میله سفید، n = 11) یا نالوکسون (NLX؛ میلههای سیاه، n = 12) با مدیریت سیستمیک. داده های نشان داده شده اند تاخیر برای سوار شدن (B؛ ثانیه)، intromission (C؛ ثانیه) و انزال (D؛ ثانیه) در روز 1 و 5 از پنج روز متوالی از جفتگیری. علاوه بر این، داده ها برای آزمون جفت گیری نهایی، 7 d پس از جلسه پنجم جفت شدن نشان داده شده است. داده ها به صورت میانگین ± SEM ارائه می شوند؛ + نشان دهنده تفاوت معنی داری بین روزهای 1 و 5 در طی درمان است. * تفاوت معنی داری بین روز آزمون و روز 5 در طی درمان دارد # نشان دهنده تفاوت معنی داری بین گروه های نالوکسون و سالین در روز است.

جدول 1. 

تجویز نالوکسون قبل از جفتگیری موجب افزایش تاخیر زمانی برای بستن و تکامل در روز اول جفتگیری می شود

در مقابل، درمان نالوكسان در طی جلسات تجربه جنسی موجب اختلال در تسهیل رفتارهای جنسی در روز آزمون تطبیق نهایی شد. روز آزمون پس از جلسه نهایی جفت گیری در صورت عدم تزریق نالوکسون، 7 d انجام شد. مردان مبتلا به سل مقاوم به درمان با تجویز پیشگیری از رفتارهای جنسی ناشی از تجربه نشان دادند. به طور خاص، تاخیر در نصب، تعامل و انزال در بین جلسه پنجم جلسه و روز آزمون نهایی (شکل 4B-D) در حالی که مردان مبتلا به نالوکسون افزایش معنی داری در تأخیر در نصب داشتند (شکل 4B; p = 0.033)، intromission (شکل 4C; p = 0.036) و انزال (شکل 4D; p = 0.049) در روز آزمون در مقایسه با جلسه پنجم جفت گیری. همچنین، در روز آزمون، حیوانات نالوکسون به طور قابل توجهی کندتر از مردان تحت درمان با نمک زدگی بودند که با تأخیرهای طولانیتری که روی آنها نشان داده میشد (شکل 4B; p = 0.017) و intromission (شکل 4C; p = 0.043) بنابراین درمان نالوکسون نگهداری را مسدود کرد، اما ابتدا توسعه تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجربه را محدود نمی کرد. این یافته ها نشان دهنده نقش حیاتی پلاستیک ناحیه دوپامین VTA ناشی از EOP در بیان طولانی مدت تقویت رفتار پاداش طبیعی است.

چندین آزمایش کنترل اضافی برای تعیین اینکه اثرات محرک گیرنده های اپيوئيد در از دست دادن تقویت طولانی مدت رفتار جنسی مستقل از عدم وجود تجویز نالوکسون در روز آزمون ناپیوسته نهایی (شکل 5A,B)، به تعطیلی طولانی مدت، اما نه کوتاه مدت نگهداری از تسویه حساب (شکل 5E,F)، ناشی از قرار گرفتن در معرض روزانه تنها با نالوکسون (شکل 5C,D) و از دست دادن پاداش جنسی در مردان مبتلا به نالوکسون (شکل 5G,H) اولا برای نشان دادن این که رفتار جنسی تغییری در آزمون جفتگیری نهایی به دلیل عدم وجود نالوكسان نبود، یا نالوكسان یا سالین در روز آزمون آخر جفت گیری به حیواناتی كه در طی تجربه جنسی زوج با نالوكسان دریافت كردند (شکل 5A) یکی از مهمترین تأثیرات روزهای تعطیلی در روزهای تعطیلات (شکل 5B; F(2,27) = 30.031، p = 0.038) و intromission (جدول 2; F(2,27) = 10.686، p = 0.048) اثر روزانه جفت گیری در تأخیری به انزال (جدول 2; F(2,27) = 2.388، p = 0.109) همانند آنچه که در بالا توضیح داده شد، درمان نالوكسان در هنگام جفت گیری، بر تسهیل رفتار جنسی در طی جلسات پنج جلسه ی جنسی اولیه تاثیر نمی گذارد. هر دو گروه (گروه های تحت درمان با نمک و نالوکسون به وسیله درمان دریافت شده در طی آزمایش جفت گیری نهایی، هر دو نالوکسون را در طی جفت گیری دریافت کردند)، رفتار جنسی را در روز 5 نسبت به روز 1 نشان دادند و تاخیر به میزان قابل توجهی کوتاه تر برای اولین بارشکل 5B؛ سالین: p = 0.033؛ نالوکسون: p = 0.014) و intromission (جدول 2؛ سالین: p = 0.034؛ نالوکسون: p = 0.026) حیواناتی که نالوکسون یا نمک را در روز آزمون آخر جفت گیری دریافت کرده بودند، تاخیرهای طولانیتری برای سوار شدن داشتند (شکل 5B؛ سالین: p = 0.018؛ نالوکسون: p = 0.029) و intromission (جدول 2؛ سالین: p = 0.019؛ نالوکسون: p = 0.020) در مقایسه با روز پنجم تجربه جفت شدن. بنابراين تجويز نالوكسان يا سالين در روز آزمون بلافاصله قبل از جفت كردن در تأثير درمان نالوكسان در جلسات تجويز جنسي تأثير نگذاشت و تضعيف رفتارهاي جنسي كوتاه مدت نيز مشابه آنچه كه در حيواناتي كه هيچ تزريق مصرف نكرده بودند، مشابه بود در روز آزمون تطبیق نهایی (شکل 4).

شکل 5. 

مواد افیونی اندوژن در بیان دراز مدت از تسهیل رفتار جنسی ناشی از تجربه مهم هستند. Aطراحی تجربی برای آزمایش اثر NLX در روز آزمون. B، زمان تأخیر در روزها 1 و 5 از پنج روز متوالی از جفت گیری و روز آزمون تطبیق نهایی (آزمایش) پس از تزریق سالین (خاکستری) یا نالوکسون (سیاه). داده ها به معنی ± SEM می باشند. * نشان دهنده تفاوت معنی دار بین روز 1 و روز 5 در طی درمان است. # نشان دهنده تفاوت معنی داری بین روز آزمون و روز 5 در طی درمان است. Cطراحی تجربی برای آزمایش تا اثرات نالوكسان قبل از درمان به تنهایی بدون تجربه جنسی در رفتار جفتگیری. D، زمان تأخیر در روز بعد آزمون جفتگیری، روز 7 پس از روز 5 یا تزریق نمک یا محلول نالوکسون در غیاب جفتگیری. داده ها به معنی ± SEM می باشند. Eطراحی تجربی برای آزمایش برای آزمایش اینکه آیا درمان نالوکسون بر روی نمایش کوتاه مدت رفتار جنسی تسهیل شده در حیوانات مبتلا به جنس برخورد شد. Fدر روز 1 روز و 5 روز پنج روز متوالی از روز آزمون جفتگیری و نهایی جفتگیری، 1 روز بعد از روز 5 در حضور سالین (خاکستری) یا تزریق نالوکسون (سیاه). داده ها به معنی ± SEM می باشند. * نشان دهنده تفاوت معنی دار بین روز 1 و روز 5 در طی درمان است. Gطراحی تجربی برای آزمایش برای تست اینکه آیا درمان نالوکسون جلوه های ارزشمند رفتار جنسی را مسدود می کند. Hزمان صرف جفت شدن اتاق زوج (در ثانیه) در پیش آزمون (سفید) و پس آزمون (سیاه) برای حیوانات دریافت نالوکسون یا سالین قبل از جفتگیری. داده ها به معنی ± SEM؛ * نشان دهنده تفاوت معنی دار در مقایسه با پیش آزمون است.

جدول 2. 

داده های نشان داده شده اند که تاخیر در انعقاد و انزال (ثانیه) از آزمایش های کنترل انجام شده برای تعیین اینکه اثرات محرک MOR در از دست دادن تقویت طولانی مدت رفتار جنسی به طور مستقل از عدم مصرف نالوکسون در روز آزمون تطبیق نهایی

برای تعیین این که آیا درمان نالوکسون در هنگام تجربه زوج با تجربه جنسی و تکرار به نالوکسون به تنهایی باعث ناراحتی رفتار جنسی در 7 d پس از آخرین درمان، حیوانات ناخوشایند جنسی یا پنج تزریق روزانه نالوکسون یا تزریق سالین قبل از یک آزمایش نهایی 7 د بعد (شکل 5C) تفاوت معنی داری برای هر پارامتر جفت گیری بین گروه های پیش خوراک سالین و نالوکسون (شکل 5D؛ تأخیر تأخیر زمان بستن: سالین 139.7 ± 40.3 در برابر نالوکسون 121.83 ± 42.55؛ تأخیر انزال: سالین 887.9 ± 70.0 در مقابل نالوکسون 1050.8 ± 327.31). این نتایج نشان می دهد که تنها نالوکسون برای تغییر رفتار جنسی بعدی کافی نیست، همانند کمبود اثرات نالوکسون تنها بر پلاستیک نرون های دوپامین VTA.

ما فرض می کنیم که درمان نالوکسون در هنگام دستیابی به تجویز جنسی، بیان طولانی مدت از تسهیل رفتار جنسی را ناشی از تجربه جنسی را مختل می کند. برای آزمایش این بیشتر، اثرات درمان نالوكسان در طی جفت گیری بر روی رفتار جنسی بعدی در طی آزمون جفتگیری نهایی انجام شد كه تنها پس از جفت گیری 1 d انجام شد (طراحی تجربی؛ شکل 5E) یک اثر مهم مهم روز جفتگیری روی کوه وجود داشت (شکل 5F; F(2,20) = 19.780، p <0.001 <) و تأخیرهای ورود به سیستم (جدول 2; F(2,20) = 19.041، p <0.001) اثر اصلی قابل توجهی در روز بر تأخیر انزال وجود ندارد (جدول 2; F(2,20) = 3.042، p = 0.070) همانطور که در بالا توضیح داده شد، تمام مردان (با وجود درمان های سالین و نالوکسون)، رفتار جنسی را در طی پنج جلسه تجربه جنسی نشان دادند که با تأخیر قابل ملاحظه کوتاه تر می شود (شکل 5F؛ سالین: p = 0.002؛ نالوکسون: p = 0.018) و intromission (جدول 2؛ سالین: p = 0.006؛ نالوکسون: p = 0.009) در روز 5 در مقایسه با روز 1. به طور مشابه، رفتار جنسی تسهیل شده در روز آزمون در مقایسه با روز 1 نشان داد که با تأخیر به طور معکوس کوتاه تر به نظر می رسد (شکل 5F؛ سالین: p = 0.001؛ نالوکسون: p = 0.020) و intromission (جدول 2؛ سالین: p = 0.004؛ نالوکسون: p = 0.009) مهمتر از همه، درمان نالوكسان در هنگام جفتگیری، تاكید كرد كه 1 d پس از تجویز جنین، تحت تأثیر رفتارهای جنسیتی ناشی از تجربه جنسی قرار نگرفته است، مستقل از درمان نالوكسان در این روز آزمون تطبیق نهایی.

سرانجام ، ما این احتمال را آزمایش کردیم که اثرات تضعیف کننده نالوکسون در بیان طولانی مدت رفتار جنسی تسهیل شده ناشی از اثر مسدود کننده نالوکسون بر خواص ارزشمند رفتار جنسی باشد. با این حال ، نالوکسون بلافاصله قبل از جفت گیری اداره نمی شود تشکیل CPP برای جفت گیری را تغییر نمی دهد (شکل 5G)، نشان می دهد که درمان نالوکسون پاداش جنسی را تغییر نمی دهد. هر دو گروه درمان شده با نمک و نالوکسون یک CPP قابل توجهی را برای رفتار جنسی نشان دادند که به طور قابل توجهی افزایش زمان صرف شده در اتاق زوج جنس (شکل 5H؛ سالین: p = 0.038؛ نالوکسون: p = 0.002) در طی آزمون پس از مقایسه با پیش آزمون. بنابراین، نالوکسون با مسدود کردن پاداش مرتبط با رفتار جنسی، تأثیرات مضر خود را بر نگهداشتن رفتار جنسی تسهیل نمی کند.

تسهیل رفتار جنسی بستگی به فعالیت EOP در VTA دارد

برای تایید اینکه EOP به طور خاص در VTA عمل می کند تا باعث تسکین رفتار جنسی درازمدت شود، طراحی تجربی که در آن قرار دارد شکل 3A به جای تزریق سیستمیک، با تزریق داخل وریدی نالوکسون تکرار شد. نتایج مشابه با تجویز سیستمیک توصیف شده در بالا بود. یک اثر مهم مهم روز جفتگیری بر روی تمام پارامترهای رفتار جنس (شکل 6A، تأخیر: F(2,33) = 4.494، p = 0.019؛ B، زمان تأخیر: F(2,33) = 4.042، p = 0.027؛ C، تأخیر انزال: F(2,33) = 5.309، p = 0.010) و درمانی VTA نالوكسان بر روی تاخیرهای نصبF(1,33) = 7.345، p = 0.011) و intromission (F(1,33) = 6.126، p = 0.019) ناتوکسون داخل VTA از تسهیل رفتار اولیه جنسی در طول 5 d از جفتگیری جلوگیری نمیکند، همانطور که مردان مبتلا به نالوکسون نشان دادند که تاخیر زمانی برای بستن (شکل 6A; p = 0.001)، intromission (شکل 6B; p <0.001 <) و انزال (شکل 6C; p = 0.001) در روز 5 در مقایسه با روز 1. مردان مبتلا به نالوكسان در روز پنجم جفتگیری در هر یك از تأخیرها، از مردان مبتلا به نمكسیلی متفاوت نیستند. درمانی VTA نالوكسان مانند تزریق سیستمیک موجب افزایش معجون (شکل 6A; p <0.001 <) و تأخیرهای ورود به سیستم (شکل 6B; p <0.001) در روز جفت گیری در مقایسه با مردان تحت درمان با شور ، که در جلسات بعدی جفت گیری مشاهده نشد (که در طی آن مردان تحت درمان با نالوکسان و شور تفاوت نداشتند). یک مشاهده غیرمنتظره این بود که در این آزمایش ، مردان تحت درمان با شور ، از نظر آماری تاخیرهای نصب یا تاخیر درازدستی را نشان ندادند (همانطور که در تمام آزمایشات توضیح داده شده در بالا نشان داده شد) ، و فقط تأخیر انزال در روز پنجم نسبت به روز اول کوتاه شد (شور: p =

شکل 6. 

اپيوئيد آندوژن در تسهيل رفتار جنسي و نگهداري درازمدت آن ناشي از تجربيات درون VTA است. پارامترهای رفتار جنسی در مردان مبتلا به سالین (Sal، میله سفید، n = 8) یا NLX (میله های سیاه و سفید، n = 6) با تزریق داخل VTA. داده های نشان داده شده اند تاخیر برای سوار شدن (A)، intromission (B) و انزال (C) در روزهای 1 و 5 از پنج روز متوالی جفتگیری. علاوه بر این، داده ها برای روز آزمون آخر جفت شدن، 7 d بعد از روز 5 در غیاب تزریق سالین یا نالوکسون نشان داده شده است. داده ها به معنی ± SEM؛ + نشان دهنده تفاوت معنی داری بین روزهای 1 و 5 در طی درمان است. * تفاوت معنی داری بین روز آزمون و روز 5 در طی درمان دارد # نشان دهنده تفاوت معنی داری بین گروه نالوکسون و گروه Sal در روز است. نقاشی های مقطعی از بخش های VTA کرونال (H، -4.60؛ I، -5.00؛ J، -5.25 از برگی) نشان می دهد که محل تزریق داخل VTA برای تمام حیوانات در آزمایش 5 (سالین، سفید، نالوکسون، سیاه و سفید، خاکستری از دست رفته،) با استفاده از نقشه های الگو از Swanson Brain Maps (سوانسون، 2004) کانول ها دو طرفه بودند، اما به دلیل سهولت ارائه، سایت های تزریق به طور یک جانبه ارائه می شوند. fr، Fasciculus retroflexus؛ ML، لنسموس Medial؛ SN، substantia nigra.

درمان درون-VTA ناکولون مانع نگه داشتن رفتار جنسی تسهیل شده مشاهده شده در مردان مبتلا به جنس نر، مشابه اثرات نالوکسون سیستمیک است. به طور خاص، در روز آزمون نالوكسان، مردان داراي تاخيرهاي طولاني تري داشتند (شکل 6A; p = 0.011)، intromission (شکل 6B; p = 0.010) و انزال (شکل 6C; p = 0.015) در مقایسه با جلسه پنجم جفت گیری و در مقایسه با مردان تحت درمان با شور در روز آزمون نهایی (شکل 6A, p = 0.006؛ B, p = 0.008) در مقابل، حیوانات تحت درمان با نمک در زمان تأخیر برای ایجاد و تعامل بین روز آزمون نهایی و روز 5 جفتگیری تفاوت نداشتند. این اثرات اختصاصی به تحویل نالوکسون به VTA بود، به عنوان مردان با کانتینرها در نزدیکی اما هدف قرار دادن VTA (شکل 6D; n = 3) نشان داد که بهبود طولانی مدت رفتار جنسی مشابه با کنترل های سالین درمان شده (ML، IL = 53 ± 6.245، EL = 389 ± 299.5) و در مقایسه با حیوانات داخل وریدی نالوکسون در روز آزمون تطبیقی ​​(ML، IL: p = 0.029؛ EL: p =

اقدام EOP برای فعال سازی عصبی ناشی از نشانه های مرتبط با جنسی مرتبط است

بر اساس یافته های تاکنون، ما فرض کردیم که فعال شدن EOP در VTA در حین تجربه جفتگیری و کاهش اندازه سمع VTA بعد از آن، برای اختصاص دادن انگیزه برای پیوند انگیزه های مرتبط با پاداش و در نتیجه نگهداری رفتار جنسی تسهیل می شود. برای آزمایش این فرضیه، اثرات مسدود کردن گیرنده های مهاری در حین تجربه جفت شدن بر فعالیت های عصبی ناشی از قرار گرفتن در معرض قرار گرفتن در معرض قرار دادن نکات محرمانه پیش بینی کننده پاداش جنسی (نشانه های مرتبط جنسی) مورد بررسی قرار گرفت. حیوانات ناخوشایند جنسی نیز در معرض نشانه های زیست محیطی بودند، اما این با تجربه قبلی همجواری ارتباط نداشتند، از این رو نشانه های بی طرف بود. در نهایت، سطح پایینی pERK در گروه های کنترل شده از نظر جنسی و نابالغ که در قفس های خانه باقی مانده و در معرض هیچ نشانه ای قرار نگرفت (-No Cue) تعیین شد. تأیید و گسترش یافته های قبلی (بالفور و همکاران، 2004)، قرار گرفتن در معرض نشانه های متنی در ارتباط با پاداش جنسی قبلی، به طور قابل توجهی افزایش بیان pERK در مردان مبتلا به جنس نر در NAc (شکل 7) و mPFC (شکل 8A-C) اما فعال سازی نورون در BLA (شکل 8D) یا CPU (داده ها نشان داده نمی شود). اثرات اصلی نشانه گذاری نشانه در هسته NAc (F(1,12) = 12.1941، p = 0.004)، ACA (F(1,12) = 5.541، p = 0.038) و PL (F(1,12) = 5.241، p = 0.041) و درمان نالوكسان در هسته NAc (F(1,12) = 6.511، p = 0.025)، ACA (F(1,12) = 15.242، p = 0.002) و PL (F(1,12) = 7.336، p = 0.019) تعامل قابل توجهی در هسته NAc وجود داشت (F(1,12) = 10.107، p = 0.008)، ACA (F(1,12) = 16.060، p = 0.002)، PL (F(1,12) = 8.235، p = 0.014) و IL ((F(1,12) = 6.965، p = 0.022) در ابتدا، قرار گرفتن در معرض سیگنال مربوط به جفتگیری، مقدار PERK را در حیوانات تجربه شده از جنس بالغ (Exp Sal ​​+ Cue) در مقایسه با کنترلهایی که در معرض هیچ نشانه ای قرار نگرفت و از قفس خانه (Exp Sal-No Cue) در هسته NAc (شکل 7A; p <0.001 <) و زیرمجموعه های mPFC ACA (شکل 8A; p = 0.001)، PL (شکل 8B; p = 0.003) و IL (شکل 8C; p = 0.029) در مقابل، در حیوانات نابالغ جنسی تحت درمان با نمک، قرار گرفتن در معرض نشانه های متنی که با پاداش جنسی همراه نبودند، هیچ کدام از مناطق مغز را ایجاد نکرد (Naive Sal + Cue در مقایسه با Sal-No Cue؛ انجیر. 7, 8)، نشان می دهد که القاء pERK خاصی برای قرار گرفتن در معرض نشانه های مربوط به تجربه جنسی است. علاوه بر این، تجربه جنسی تنها باعث تغییر بیان pERK در هر منطقه مغزی نشد، زیرا تفاوت بین گروه هایی که از قفسه های خانگی گرفته شده بودند، از نظر جنسی ناچیز یا تجربه و درمان با سالین یا نالوکسون بود.

شکل 7. 

اقدامات اپیدمی آندوژنیک برای فعال سازی عصبی در ناخالصی های ناشی از نشانه های مشکوک مرتبط با جنسیت ضروری است. تعداد سلولهای pERK-IR در میلیمتر2 در هسته هسته accumbens (A) و پوسته (B) در حیوانات ناخوانده جنسی (سفید) و با تجربه (پیشرفته و سیاه) که قبل از درمان با NLX سیستمیک یا سالین (Sal) در طی جلسات جفتگیری (مردانی پیشرفته) و یا دست زدن به جلسات (مردان نابالغ). گروه ها در معرض نشانه های متنی (Cue) قرار گرفتند که نشانه های مربوط به جفت گیری در مردان عصبی و نشانه های خنثی در حیوانات نایو یا گرفته شده از قفس های خانه (بدون نشانه، نشان دهنده عدم وجود نشانه نشانه) بود. داده ها به صورت میانگین ± SEM ارائه می شوند؛ * اختلاف معنیداری در مقایسه با شاهد در معرض نشانه های قبل از درمان شور (Naive Sal-No Cue و Exp Sal-No Cue) را نشان می دهد؛ # نشان دهنده تفاوت معنیداری در مقایسه با گروه Exp Expanded Cue تحت درمان با Sal (Exp Sal ​​+ Cue) است. تصاویر نمایشی از سلولهای pERK-IR در میلیمتر2 در هسته NAc مردان با تجربه جنسی با Sal (C, D) یا NLX (E, F) که یا از قفس منزل (No Cue، C، E) گرفته شده است یا در معرض خطوط متنی مربوط به جفت (Cue؛ D, F). N = 4 هر گروه به جز Naive NLX (بدون سی دی)، n = 3 ac، کمر قدامي. نوار مقیاس، 100 μm.

شکل 8. 

اثرات نالوكسان بر بیان pERK ناشی از جفت گیری در ناحیه های هدف دیگر VTA. تعداد سلولهای pERK-IR در میلیمتر2 در حیواناتی که از لحاظ جنسی نواخته شده (سفید) و با تجربه (پیشرفته و سیاه) بودند که در طی جلسات جراحی با سیستمیک NLX یا سالین (Sal) تجویز شدند و در ACA (یا نشانه های متنی)A)، PL (B)، IL (C) و BLA (D) داده ها نشان دهنده میانگین ± SEM هستند؛ * اختلاف معنیداری در مقایسه با شاهد در معرض نشانه های قبل از درمان شور (Naive Sal-No Cue و Exp Sal-No Cue) را نشان می دهد؛ # نشان می دهد تفاوت معنی داری در مقایسه با کنترل سلول های ناشی از نشانه تحت درمان با سل (Naive Sal + Cue).

در حمایت از فرضیه ما، درمان نالوكسان در طول تجربه جنسی به طور قابل توجهی باعث كاهش القاء PERK توسط نشانه های مشروط مرتبط با جنس شد. بیان pERK در مردان مبتلا به نارسایی تحت درمان با نالوکسون (Exp NLX + Cue) از بیان اولیه pERK در هر یک از گروه های کنترل شده ناخوشایند یا با تجربه از قفس های خانگی متفاوت نیست (Naive Sal-No Cue یا Naive NLX- بدون سی دی) علاوه بر این، بیان pERK در مردان تجربی تحت درمان با علائم نالوکسون (Exp NLX + Cue) به طور معنی داری در مقایسه با حیوانات تجربه شده در معرض سیلسیوس (Exp Sal ​​+ Cue) در هسته NAc (شکل 7A; p = 0.002) و زیرمجموعه های mPFC (شکل 8A، ACA: p <0.001 B، PL: p = 0.002؛ C، IL: p =

در پوسته NAc، آنالیز دوطرفه ANOVA اثرات قابل توجهی از عوامل مواجهه با نشانه ها و درمان نالوكسان نداشت. با این حال، مقایسه دو جانبه نشان داد که قرار گرفتن در معرض نشانه، pERK را در گروه مبتلا به جنس مذکر تحت درمان با شور (Exp SAL + Cue) در مقایسه با گروه شاهد نابالغ سالمشکل 7B؛ بی نظیر SAL-No Cue: p =

بحث

مطالعه حاضر نشان می دهد که EOP در عمل VTA در طی رفتار جنسی، رفتار پاداش طبیعی، باعث کاهش شدید اما موقت در اندازه سگ سلول های دوپامین VTA شد. کاهش در اندازه سم در نورون های غیر Dopamine VTA و همچنین در نورون های دوپامین در substantia nigra نزدیک مشاهده نشد، که نشان می دهد این تغییر به سلول های دوپامین VTA اختصاص یافته است. این پلاستیک دودویی VTA به نظر می رسد مشابه آنچه که منجر به قرار گرفتن در معرض مواد مخدر مزمنSklair-Tavron و همکاران، 1996; Russo et al.، 2007; مازای رابینز و همکاران، 2011) و تحمل مشابه به پاداش اپیوئین (مورفین) خارجی است. ما نشان دادیم که پلاستیک VTA دوپامین برای دوره های طولانی (نگهداری)، اما کوتاه مدت (توسعه)، تقویت رفتار جنسی و فعالیت عصبی ناشی از نشانه های پاداش (pERK) در مناطق هدف VTA بسیار مهم است: NAc و mPFC. این یافته ها نشان می دهد که نقش پلاستیک VTA دوپامین در بیان طولانی مدت انگیزه های پیش بینی های پاداش طبیعی یا حافظه پاداش است.

به خوبی تایید شده است که تجربه جنسی در تسهیل رفتار جنسی بعدی، از جمله شروع سریعتر شروع زوج و افزایش عملکرد (بالفور و همکاران، 2004; Pitchers و همکاران، 2010a,b, 2012) این تسهیل یا تقویت رفتار جنسی برای حداقل 28 d پس از جفت گیری (Pitchers و همکاران، 2012) علاوه بر این، نشان داده شده است که رفتار جنسى و نشانه های مشروط پیش بینی کننده پاداش جنسى، باعث درونی شدن MOR در VTA و ایجاد فعالیت عصبی در کل سیستم mesolimbic، از جمله در VTA (نورون های دوپامین و نودوپامین)، NAc، PFC و BLAبالفور و همکاران، 2004, 2006) این است که نورون های دوپامین VTA به خوبی در حال ایجاد نقش مهمی در یادگیری و ارجاع محرک های انگیزه های مرتبط با پاداش (Berridge و Robinson، 1998; Berridge و همکاران، 2009; Flagel et al.، 2011) و برای پیش بینی پاداش (شولتز، 2010) یافته های جاری بر روی دانش فعلی ما نشان می دهد و نشان می دهد که نوروپلاستی VTA ناشی از پاداش برای این توابع بسیار مهم است و وابسته به فعال سازی MOR توسط EOP در VTA است. در حال حاضر شناخته شده است که EOP لیگاند MOR است که در VTA در رفتار جنسی مردانه عمل می کند. اگر چه β اندورفین و انکهفالین در انگیزه انگیزشی برای تقویت کننده های مواد غذایی (هاوارد و همکاران، 2002)، این امر هنوز برای رفتار جنسی جنسی مردان ثابت شده است. ما قبلا نشان داده ایم که نورون های β-endorphin در طی جفت گیری فعال نمی شوند و همچنین در MRNA POMC افزایش نمی یابد؛ بنابراین، پیشنهاد می کند که β اندورفین ممکن است EOP بحرانی در VTA در هنگام جفت گیری (دیویس و همکاران، 2007) این پلاستیسیته VTA دوپامین برای فعالیت عصبی در mPFC، NAc و VTA پس از قرار گرفتن در معرض علائم محیط زیست پیش بینی کننده پاداش جنسی ضروری است. علاوه بر این، پلاستیک VTA دوپامین برای بیان طولانی مدت افزایش آغاز و عملکرد رفتار جنسی حیاتی بود. در مقابل، عصب پلاستیکی VTA ناشی از تجربیات جنسی برای پاسخ هدیونی به عنوان پاداش جنسی (تعیین شده توسط CPP) و تسهیل در کوتاه مدت انگیزه جنسی و عملکرد (در طول تجربه جنسی و یا 1 بعد از آن) باقی مانده با وجود مسدود شدن MOR در هنگام جفتگیری (مهررا و باوم، 1990) در عوض، داده ها نشان می دهد که نوروپلاستی دوپامین VTA طولانی تر (7 d بعد از تجربه جنسی گذشته؛ Pitchers و همکاران، 2012) بیان "خواسته" از پاداش جنسی و پاسخ های انگیزشی بالا به زوجین (میلر و باوم، 1987; Berridge و Robinson، 1998).

حیوانات تجربه شده از لحاظ جنسی به طور متقابل به پاداش مورفین، مشابه اثرات چرخ در حال حرکت در موش ها، یک رفتار طبیعی دیگر، اثرات متوقف شده با درمان نالوکسون (Lett et al.، 2001, 2002) و مصمم به وابستگی به پلاستیسیته سلول دوپامین VTA (یافته های فعلی) است. همانند پاداش های طبیعی، مکرر مواجهه با مورفین یا هروئین مواد مخدر باعث کاهش سایز VTA دوپامین می شود (Sklair-Tavron و همکاران، 1996; Spiga et al.، 2003; Russo et al.، 2007; مازای رابینز و همکاران، 2011) علاوه بر این، قرار گرفتن در معرض مواد مخدر با استفاده از دوره های کوتاه مدت برداشت باعث تحمل پاداش می شود، چرا که با مصرف دوزهای بالاتری از مواد مورد نیاز برای تشکیل انجمن پاداش (Shippenberg و همکاران، 1987; Russo et al.، 2007) و باعث می شود حیوانات خود را اداره می کنند تا مصرف دارو را افزایش دهند (احمد و همکاران، 2000; واکر و همکاران، 2003) از این رو، EOP و opiates بر روی ساختارهای معمول عصبی عمل می کنند تا تحریم های پاداش را در هنگام خروج زودرس ایجاد کنند، که ممکن است مکانیسم سازگاری هوموستاتیک را برای مقابله با تحریک با قرار گرفتن در معرض مکرر (کوب و لو مول، 2005) در مقابل، در حالی که در مدت زمان طولانی از ترک اعتیاد به مواد مخدر، تحمل به حساسیت به خواص پاداش به دارو (هریس و استون جونز، 2003; استون جونز و هریس، 2004; هریس و گویرز، 2004) جالب توجه است، تجربیات جنسى که به دنبال یک دوره سقط جنین 7-28 d می شود باعث ایجاد حساسیت متقابل برای پاداش روانى (Pitchers و همکاران، 2010a) که وابسته به بیان دلتا فسف ناشی از جفتگیری و فعال سازی 1 گیرنده دوپامین در NAc (Pitchers و همکاران، 2013) از این رو، تجربه پاداش جنسی باعث تحرک پاداش همزمان و پاداش روانشناختی پاداش می شود، گرچه دوره رهایی جنسی از تحریم پاداش مورفین همچنان مورد آزمایش قرار می گیرد. ما معتقدیم که این اثرات متضاد بر پاداش دارو ممکن است توسط اشکال مختلف پلاستیسیته عصبی در مناطق مختلف سیستم mesolimbic متاثر شود: عمل VTA EOP و پلاستیک دوپامین، می توانند تحمل پاداش opiate (مطالعه فعلی)، در حالی که بیان NAc deltaFosB کنترل حساسیت به روان درمانی (Pitchers و همکاران، 2013) هر دو این حوادث می توانند به تشدید مواد مخدر کمک کنند (احمد و کوب، 1998, 1999; احمد و همکاران، 2000, 2002, 2003; واکر و همکاران، 2003).

مکانیزم های مولکولی که به وسیله آن EOP بر نورون های دوپامین VTA تأثیر می گذارند در طی رفتار پاداش طبیعی هنوز معلوم نیست. مسیر IRS2-Akt-mTORC2 واسطه اصلی کاهش اندازه سم در VTA ناشی از تکرار مورفین (Jaworski و همکاران، 2005; Russo et al.، 2007; مازای رابینز و همکاران، 2011) تجویز مورفین تکرار شده باعث ایجاد تغییرات در اندازه نورون های دوپامین در VTA می شود که توسط تزریق داخل VTA از عامل مغناطیسی (BDNF؛ Sklair-Tavron و Nestler، 1995) BDNF این مسیر را از طریق سیگنال TrkB (Russo et al.، 2007)، یک گیرنده کیناز با بالا بودن وابستگی به BDNF و بخشی از مسیر IRS2-Akt (Seroogy و Gall، 1993; نومان و سرووگی، 1999) و در نورونهای دوپامین و GABA در VTA بیان شده است. تنظیم مقادیر مختلف اجزای مسیر IRS2-Akt با استفاده از فن آوری انتقال ویروس ویروسی موجب بروز اثرات مواجهه با داروهای مزمن می شود. علاوه بر این، با قرار دادن این مسیر سیگنالینگ (Russo et al.، 2007) و بیش از حد بیان یک جزء از mTORC2 جلوگیری از کاهش Voma dopamine Somma ناشی از مورفین (مازای رابینز و همکاران، 2011) بنابراین، کار قبلی تحقیق در مورد اثرات مواد مخدر مزمن در اندازه Voma dopamine سم نشان می دهد که پایین رگولاتور ناشی از مورفین مسیر IRS2-Akt-mTOR هر دو کافی و لازم برای این اثر استمازای رابینسون و نستر، 2012) بنابراین، وسوسه انگیز است که فرض کنیم که اثرات تجربه جنسی بر روی نوروپلاستی دوپامین VTA به طور مشابه توسط BDNF و مسیر IRS2-Akt-mTORC2 متمرکز است.

در نتيجه، مطالعه حاضر نشان داد که عصب پلاستيک VTA از طريق تجربيات رفتار طبيعي طبيعي، به ويژه با رفتارهاي جنسي مردانه تکرار شده است. به طور خاص، EOP در VTA اقدام به کاهش میزان سموم دوپامین می کند که فرض شده است که با افزایش تحریک پذیری عصبی و خروج کمتر از دوپامین، منجر به ایجاد سیستم هیپودالپامنیک می شود و سیستم mesolimbic را در پاسخ به نشانه هایی که پیش بینی کننده پاداش جنسی هستند، تغییر می دهد. علاوه بر این، عصب پلاستیکی VTA برای انگیزه انگیزشی و پاداش حافظه حیاتی است، اما نه برای تاثیر افراطی رفتار جنسی. در نهایت، عصب پلاستیسیته VTA ناشی از رفتار پاداش طبيعی و به دنبال آن دوره کوتاه مدت رعایت پاداش، موجب بروز پاداش درمانی می شود و بنابراین ممکن است آسیب پذیری را در توسعه اعتیاد به مواد مخدر تأثیر بگذارد.

پانویسها و منابع

  • دریافت ژانویه 12، 2014.
  • بازبینی May 17، 2014 دریافت شد.
  • پذیرفته شد May 20، 2014.

  • این تحقیق توسط کمک های مالی از موسسه تحقیقات بهداشت کانادا به LMC و شورای تحقیقات علوم طبیعی و مهندسی به KKP پشتیبانی شد

  • نویسندگان هیچگونه منافع مالی رقابتی را اعلام نمی کنند.

  • مکاتبات باید به Dr Lique M. Coolen، مرکز پزشکی میسیسیپی، گروه فیزیولوژی و بیوفیزیک، خیابان 2500 خیابان شمالی، جکسون، MS 39216-4505، خطاب شود. [ایمیل محافظت شده]

منابع

  1. ↵
    1. Agmo A

    (1997) رفتار جنسی مرد موش. مغز پروتئین رز مغز 1: 203-209.

  2. ↵
    1. احمد ش،
    2. Koob GF

    (1998) انتقال از مصرف متوسط ​​تا بیش از حد مواد مخدر: تغییر در نقطه تنظیم هودونیک. علم 282: 298-300.

  3. ↵
    1. احمد ش،
    2. Koob GF

    (1999) افزایش طولانی مدت در نقطه تنظیم برای خودکامه کوکائین پس از افزایش در موش صحرایی. روانی 146: 303-312.

  4. ↵
    1. احمد ش،
    2. واکر JR،
    3. Koob GF

    (2000) افزایش مداوم انگیزه برای مصرف هروئین در موش صحرایی با سابقه افزایش مواد مخدر. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

  5. ↵
    1. احمد ش،
    2. کنی PJ
    3. Koob GF
    4. مارکو آ

    (2002) شواهد neurobiological برای allostasis هودونی در ارتباط با افزایش مصرف کوکائین. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. احمد ش،
    2. لین D،
    3. Koob GF
    4. پارسونز LH

    (2003) افزایش مصرف خودسرانه کوکائین به سطوح dopamin accumbens هسته ناشی از کوکائین تغییر نکرده است. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. استون جونز گ.
    2. هریس گچ

    (2004) بسترهای مغز برای افزایش مصرف مواد مخدر در هنگام خروج طولانی مدت. Neuropharmacology 47: 167-179.

  8. ↵
    1. بالفور من،
    2. یو لی،
    3. Coolen LM

    (2004) رفتار جنسی و نشانه های زیست محیطی مربوط به جنس سیستم mesolimbic را در موش های نر فعال می کند. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  9. ↵
    1. بالفور من،
    2. براون JL،
    3. یو لی،
    4. Coolen LM

    (2006) مشارکت بالقوه از efferents از قشر Medial prefrontal به فعال سازی عصبی پس از رفتار جنسی در موش صحرایی. علوم اعصاب 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. بیتنر جانسون د،
    2. گیتارت X
    3. نستلر EJ

    (1992) پروتئین های نوروفیلام و سیستم دوپامین مازولیمبیک: تنظیم مشترک توسط مورفین مزمن و کوکائین مزمن در ناحیه تژه ای ماهیچه موش صحرایی. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Berridge KC
    2. Robinson TE

    (1998) نقش دوپامین در پاداش: تاثیر هودینی، یادآوری پاداش یا اهمیت انگیزه چیست؟ Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Berridge KC
    2. رابینسون TE
    3. Aldridge JW

    (2009) اجزای پاداش: «دوست داشتن»، «دلخواه» و یادگیری. رفع علامت فارماكول 9: 65-73.

  13. ↵
    1. بلوم ک،
    2. ورنر T
    3. کارنز س
    4. کارنز پ.،
    5. Bowirrat A
    6. جوردانو جی
    7. اسکار برمن M
    8. طلا M

    (2012) جنسیت، مواد مخدر و سنگ 'n' رول: فرضیه فعالیت مازولیمبیک مشترک به عنوان عملکرد پلی مرفیسم ژن پاداش. J داروهای روانگردان 44: 38-55.

  14. ↵
    1. چو NN
    2. Zuo YF
    3. منگ ل
    4. لی دی،
    5. هان JS،
    6. Cui CL

    (2007) تحریک الکتریکی محیطی کاهش اندازه سلول و افزایش سطح BDNF در منطقه تنگنال شکم در موشهای مزمن مورفین را کاهش داد. با توجه به مغز 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. دیویس BA
    2. فیتزجرالد من،
    3. براون JL،
    4. آمستالند KA
    5. Coolen LM

    (2007) فعال سازی نورون های POMC در طول تحریک عمومی، اما رفتار جنسی در موش های صحرایی نر. بهوان نوروزی 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF
    2. Coury A
    3. Phillips AG

    (1997) تغييرات پویا در هسته تک فاکتور تکامون دوپامین در اثر کوليج در موشهای صحرايی نر. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. پرچم SB،
    2. کلارک جی جی،
    3. رابینسون TE
    4. مایو ل
    5. Czuj A،
    6. Willuhn I،
    7. Akers CA،
    8. کلینتون SM،
    9. Phillips PE
    10. Akil H

    (2011) نقش انتخابی برای دوپامین در یادگیری محرک پاداش. طبیعت 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader KS
    2. کیک کیک،
    3. بالفور من،
    4. Coolen LM

    (2010a) مخلوط کردن لذت: بررسی اثر داروها در رفتار جنسی در انسان و مدل های حیوانی. هورم بوهو 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader KS
    2. Wiskerke J
    3. ویس آر،
    4. Lehman MN
    5. Coolen LM

    (2010b) متامفتامین در زیرگروه های نورون هایی که رفتار جنسی در موش های نر را کنترل می کنند، عمل می کند. علوم اعصاب 166: 771-784.

  20. ↵
    1. هریس ایکس،
    2. جویرز جی سی

    (2004) استحکام زیاد در هنگام خروج از مورفین حاد: یک مدل خروج از مواد مخدر و اضطراب. روانی 171: 140-147.

  21. ↵
    1. هریس گچ،
    2. استون جونز گ

    (2003) انگیزه و یادگیری تغییر یافته پس از برداشتن مواد مخدر: شواهد دیرگردهی طولانی مدت پردازش پاداش. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

  22. ↵
    1. دکتر هیوارد
    2. پینتر جی،
    3. کم MJ

    (2002) کمبود پاداش انتخابی در موشهای بدون بتا اندورفین و انکافالین. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel BG
    2. Avena NM،
    3. بوکرز من،
    4. ردا پ

    (2009) اعتیاد طبیعی: یک مدل رفتاری و مدار مبتنی بر اعتیاد به قند در موش صحرایی. J Addict Med 3: 33-41.

  24. ↵
    1. هیمان SE
    2. Malenka RC
    3. نستلر EJ

    (2006) مکانیسم عصبی اعتیاد: نقش یادگیری و حافظه مرتبط با پاداش. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Ikemoto S،
    2. کوهل RR
    3. مکبرید WJ

    (1997) مسدود شدن گیرنده GABA (A) در ناحیه قاعده قاعده قشر قدامی، سطح خارج سلولی دوپامین را در سلولهای مغز موش صحرایی افزایش می دهد. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. جوروسی جی
    2. اسپنگلر S،
    3. Seeburg DP
    4. هوگنرات CC
    5. شنگ م

    (2005) کنترل داربستگی دندریتیک توسط هدف هدف از مسیر رپامایسین توسط فسفونیوییدید-3-kinase-akt-mammals. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. جانسون SW
    2. شمال آر

    (1992) اپيوئيد ها با استفاده از هيپرپولاريزاسيون بينابينهاي موضعي، نورونهاي دوپامين را تحريک ميکنند. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. Klitenick MA
    2. DeWitte P
    3. Kalivas PW

    (1992) مقررات انتشار آزادي دوپامين سموتو دندريتيک در محيط تکتونستي شکم توسط اپيوئيدها و GABA: يک مطالعه ميکروبياليز in vivo. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. Koob GF
    2. Le Moal M

    (2005) پلاستیسیته نورپردازی پاداش و "سمت تاریک" اعتیاد به مواد مخدر. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. لنت DA

    (1978) یک محیط مونتاژ بهبود یافته برای میکروسکوپ ایمنی فلوئورسانس. ام ج بالین پاتول 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Lett BT
    2. گرنت VL
    3. کوه MT

    (2001) نالوكسان، ترجيح محل شرطي ناشي از چرخ در حال اجرا در موش ها را كاهش مي دهد. فیزیول بوهو 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Lett BT
    2. گرنت VL
    3. کوه MT،
    4. فلین گ

    (2002) تجربه قبلی با چرخ در حال اجرا باعث تحمل متقابل به اثر پاداش مورفین می شود. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. متیوز RT،
    2. DC آلمان

    (1984) شواهد الکتروفیزیولوژیک برای تحریک نورون های دوپامین ناحیه شکمی موش صحرایی توسط مورفین. علوم اعصاب 11: 617-625.

  34. ↵
    1. مازای رابینس MS
    2. کوه JW
    3. فریدمن AK
    4. Lansink CS
    5. رابینز AJ
    6. وینیس م،
    7. کریشنان V
    8. کیم س
    9. Siuta MA
    10. گالیل A
    11. Niswender KD
    12. آپاسانی ر
    13. هوروث MC
    14. Neve RL
    15. Worley PF
    16. اسنایدر ش.،
    17. Hurd YL
    18. تشویق JF،
    19. هان MH
    20. روسو SJ
    21. و همکاران

    (2011) نقش برای سیگنالینگ mTOR و فعالیت های عصبی در سازگاری ناشی از مورفین در نورون های دوپامین ناحیه تکتونستیک شکمی. یاخته عصبی 72: 977-990.

  35. ↵
    1. مازای رابینس MS
    2. نستلر EJ

    (2012) پلاستیک مولکولی و سلولی ناشی از Opiate ناحیه تگنتال شکمی و نورون های کوتولولین locus coeruleus. بهار هارپ Perspect Med 2: a012070

  36. ↵
    1. مهرا BJ
    2. باوم MJ

    (1990) نالوکسون این بیان را مختل می کند، اما نه به دست آوردن موش های نر از یک پاسخ ترجیحی واکنش conditioned برای یک زن oestrous. روانی 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Meisel RL
    2. مولینز AJ

    (2006) تجربه جنسی در جوندگان زن: مکانیسم های سلولی و عوارض عملکردی. با توجه به مغز 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. میلر رول،
    2. باوم MJ

    (1987) نالوکسون مهارکننده جفتگیری و ترجیح محل شرطی برای یک زن استروئیدی در موشهای نر به زودی پس از کاستراسیون می باشد. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. میچل جی بی،
    2. استوارت ج

    (1990) تسهیل رفتارهای جنسی در موشهای مردانه همراه با تزریق داخل وریدی ویروس اپی دومی. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. مورفی لئو
    2. بلنیس ج

    (2006) مشخصات سیگنال MAPK: محل مناسب در زمان مناسب. روند Biochem Sci 31: 268-275.

  41. ↵
    1. نستلر EJ

    (2012) مکانیسم های ترانسپورتی از اعتیاد به مواد مخدر. Clin Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G
    2. واتسون سی

    (2013) مغز موش در مختصات Stereotaxic (Academic، بوستون)، Ed 7.

  • ↵
    1. کیک کیک،
    2. بالفور من،
    3. Lehman MN
    4. Richtand NM
    5. یو لی،
    6. Coolen LM

    (2010a) Neuroplasticity در سیستم mesolimbic ناشی از پاداش طبیعی و پاداش پس از آن است. Biol روانپزشکی 67: 872-879.

  • ↵
    1. کیک کیک،
    2. Frohmader KS
    3. Vialou V
    4. موزون E
    5. نستلر EJ
    6. Lehman MN
    7. Coolen LM

    (2010b) DeltaFosB در هسته accumbens برای تقویت اثرات پاداش جنسی حیاتی است. ژنهای مغز به آب 9: 831-840.

  • ↵
    1. کیک کیک،
    2. اسمید اس
    3. دی سباستینو آر.،
    4. وانگ X
    5. Laviolette SR
    6. Lehman MN
    7. Coolen LM

    (2012) تجربه پاداش طبیعی AMPA و NMDA گیرنده و توابع عملکرد هسته accumbens را تغییر دهید. PLOS یکی 7: e34700

  • ↵
    1. کیک کیک،
    2. Vialou V
    3. نستلر EJ
    4. Laviolette SR
    5. Lehman MN
    6. Coolen LM

    (2013) پاداش های طبیعی و دارویی بر روی مکانیسم های پلاستیکی عصبی با DeltaFosB به عنوان یک واسطه کلیدی عمل می کنند. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. روپ PP
    2. بلنیس ج

    (2004) ERK و p38 MAPK فعال پروتئین کیناز: یک خانواده پروتئین کیناز با عملکرد های مختلف بیولوژیکی. Microbiol Mol Biol Rev 68: 320-344.

  • ↵
    1. روسو SJ
    2. Bolanos CA،
    3. Theobald DE،
    4. دکارلیس NA
    5. Renthal W
    6. کومار A
    7. Winstanley CA،
    8. Renthal NE
    9. ویلی، MD
    10. خود DW
    11. راسل دز
    12. Neve RL
    13. Eisch AJ
    14. نستلر EJ

    (2007) مسیر IRS2-Akt در نورونهای دوپامین میانه ای تنظیم کننده پاسخ های رفتاری و سلولی به مواد مخدر است. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. شولتز W

    (2010) عملکرد چندگانه نورون های دوپامین. F1000 Biol Rep 2: 2.

  • ↵
    1. Seroogy KB
    2. گال CM

    (1993) بیان نوروتروفین ها توسط نورون های دوپامینرژیک میانه ای. Expand Neurol 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS
    2. Bals-Kubik R
    3. هرز A

    (1987) خواص انگیزشی opioids: شواهدی مبنی بر این که فعال سازی گیرنده های دلتا، فرآیندهای تقویت کننده را متمایز می کند. با توجه به مغز 436: 234-239.

  • ↵
    1. اسکارایران Tavron L
    2. نستلر EJ

    (1995) اثرات متقابل مورفین و نوروتروفین ها، NT-3، NT-4 و BDNF، بر روی نورون های لوسوس کوئرولوس در شرایط آزمایشگاهی. با توجه به مغز 702: 117-125.

  • ↵
    1. اسکارایران Tavron L
    2. شیعه WX
    3. لین SB
    4. هریس هاروارد
    5. Bunney BS
    6. نستلر EJ

    (1996) مورفین مزمن ناشی از تغییرات قابل ملاحظه ای در مورفولوژی نورون های دوپامین mesolimbic است. Proc Natl Acad Sci USA 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. سیگنال S،
    2. Serra GP
    3. MC Puddu
    4. فدادی م،
    5. دیانا م

    (2003) ناهنجاری های ناشی از ترک مورفین در میکروسکوپ اسکن لیزر VTA: confocal. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. سوانسون LW

    (2004) نقشه های مغز: ساختار مغز موش (Academic، San Diego)، Ed 3.

  • ↵
    1. Tenk CM
    2. ویلسون ه
    3. ژانگ ک Q
    4. کیک کیک،
    5. Coolen LM

    (2009) پاداش جنسی در موشهای صحرایی نر: اثرات تجربیات جنسی در تنظیمات شرطی مرتبط با انزال و انقراض. هورم بوهو 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) برآورد پاداش با پارادایم فضایی (CPP): به روز رسانی دهه گذشته. معتاد بیول 12: 227-462.

  • ↵
    1. ون فورث WR،
    2. ون ر ی م

    (1996) انگیزه جنسی: دخالت اپيوئيد های اندوژن در ناحیه تنگنال شکمی. با توجه به مغز 729: 20-28.

  • ↵
    1. ون فورث WR،
    2. Wolterink G
    3. ون ر ی م

    (1995) مقررات رفتار جنسی مردانه: دخالت مخدرهای مغز و دوپامین. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. واکر JR،
    2. چن SA
    3. Moffitt H
    4. Inturisi CE
    5. Koob GF

    (2003) در معرض قرار گرفتن در معرض مواد مخدر مزمن باعث افزایش مصرف خودسرانه هروئین در موش صحرایی می شود. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. جوان KA
    2. Gobrogge KL
    3. لی یو
    4. وانگ زا

    (2011) Neurobiology پیوند جفت: بینش از جوندگان اجتماعی مونوگرافی. سوراخ سوراخ دار Neuroendocrinol 32: 53-69.

    •