خروج موجب ایجاد الگوهای متمایز بیان FosB / ΔFosB در موش های بیضوی سوئیس به عنوان حساس پذیری و مقاومت به حساسیت حرکتی ناشی از اتانول (2014)

Pharmacol Biochem Behav. 2014 فوریه؛ 117: 70-8. doi: 10.1016 / j.pbb.2013.12.007. Epub 2013 دسامبر 16.

De Pauli RF1, Coelhoso CC2, Tesone-Coelho C2, Linardi A3, Mello LE2, سیلویرا DX1, سانتوس جی جی4.

چکیده

قرار گرفتن در معرض داروهای مزمن و از بین بردن دارو باعث ایجاد پلاستیک عصبی عصبی می شود که می تواند به عنوان پاسخ های عملکردی و پاتولوژیک در نظر گرفته شود. به خوبی ثابت شده است که پلاستیک عصبی در سیستم لنبی نقش مهمی در عود و همچنین ویژگی های اجباری اعتیاد به مواد دارد. اگر چه افزایش در بیان FosB / DeltaFosB یکی از مهمترین شکل های پلاستیک عصبی در اعتیاد به مواد مخدر است، اما مشخص نیست که آیا آنها نشان دهنده پریشانی عملکردی یا پاتولوژیک هستند. اهمیت قابل توجه تفاوت های فردی در گذار از استفاده تفریحی به اعتیاد به مواد مخدر است. این تفاوت ها در مطالعات مربوط به پارادایم حساسیت حرکتی ناشی از اتانول گزارش شده است. در مطالعه حاضر، ما بررسی کردیم که آیا موش های حساس شده و غیر حساس شده با توجه به بیان FosB / DeltaFosB متفاوت هستند. موش های سوئیس بیرون از موش صحرایی روزانه 21days به صورت اتانول یا نمک به مدت طولانی درمان می شوند. با توجه به فعالیت حرکتی در مرحله اجرایی، آنها به عنوان حساسیت (EtOH_High) یا غیر حساسیت (EtOH_Low) طبقه بندی شدند. پس از 18h یا 5days، مغز آنها برای ایمونوهیستوشیمی FosB / DeltaFosB پردازش شد. در روز 5th withdrawal، ما می توانیم بیان FosB / DeltaFosB افزایش یافته در گروه EtOH_High (در قشر مغزی)، در گروه EtOH_Low (در منطقه تنگنال شکمی) و در هر دو گروه (در striatum). تفاوت در گروه EtOH_Low بیشتر سازگار بود. بنابراین، تغییرات رفتاری مشاهده شده در مرحله خرید از حساسیت حرکتی ناشی از اتانول با پلاستیک های عصبی دیفرانسیل در طی دوره برداشت همراه بود. علاوه بر این، الگوهای متمایز بیان FosB / DeltaFosB که در موش های حساس شده و غیر حساس شده تشخیص داده می شود بیشتر به مدت زمان برداشت نسبت به داروهای مزمن بستگی دارد. در نهایت، افزایش در بیان FosB / DeltaFosB در طول دوره برداشت می تواند به عنوان به علت پلاستیکی عملکرد و پاتولوژیک در نظر گرفته شود.

 

های لایت

  • بیان DeltaFosB یک شکل مهم از پلاستیک عصبی در اعتیاد به مواد مخدر است

  • با این حال، معلوم نیست که آیا این نشان دهنده عملکرد پلاستیکی است یا خیر.

  • در اینجا ما تفاوت در DeltaFosB در میان موش های حساس شده و غیر حساس شده پیدا کردیم.

  • این تفاوت ها بیشتر به دوره برداشت بستگی دارد به داروها.

  • ما پیشنهاد می کنیم که این تغییرات به صورت پلاستیکی عملکردی و پاتولوژیک نمایان می شود.

کلید واژه ها

  • FosB;
  • DeltaFosB;
  • حساسیت locomotor;
  • برداشت;
  • متغیر رفتاری;
  • موشها

1. معرفی

چالش تحقیق اخیر در مورد اعتیاد به مواد مخدر، شناختن مکانیزم های پلاستیکی عصبی است که میان گذر از استفاده تفریحی و از دست دادن کنترل رفتاری در مورد جستجوی مواد مخدر و مصرف مواد مخدر را متمایز می کند. یکی از مهمترین نظریه های اعتیاد به مواد مخدر، که به نام "سمت تاریک اعتیاد" نامیده می شود، نشان می دهد که پیشرفتی از تکانشگری (مرتبط با تقویت مثبت) تا تسخیر (مربوط به تقویت منفی) وجود دارد. این پیشرفت، در یک چرخه فروپاشی، شامل موارد زیر می شود: مشغله / پیش بینی، مسمومیت خوردن، و اثر برداشتن / منفی (کوب و لو مول، 2005, کوب و لو مول، 2008 و کوب و ولکوف، 2010) از این سناریو، مطالعات معتاد به مواد مخدر بر روی سازوکارهای عصبی شناختی مرتبط با حالت های منفی عاطفی که از هر دو نوع خستگی حاد و طولانی صورت می گیرد، تمرکز می کنند. با توجه به نظریه "طرف تاریکی اعتیاد"، به نظر می رسد تغییرات پلاستیک درازمدت و پایدار در مدارهای عصبی رخ می دهد که هدف آن محدود کردن پاداش است. با این حال، این تغییرات پلاستیک، منجر به حالت احساسی منفی می شود که وقتی دسترسی به دارو جلوگیری می شود ظاهر می شود. این مکانیزم باعث ایجاد انگیزه قوی برای ایجاد اعتیاد می شود و همچنین برای نگهداری آن (کوب و لو مول، 2005 و کوب و لو مول، 2008).

حساسیت لوموموتور یک مدل حیوانی مفید است که بر اساس این واقعیت است که افزایش اثرات ذهنی داروها در طول مواجهه مکرر آنها با افزایش اثرات حرکتی تحریک کننده ناشی از دارو (Vanderschuren و Kalivas، 2000 و Vanderschuren و Pierce، 2010) گرچه حساسیت حرکتی حرکتی چندین رفتار مربوط به اعتیاد به مواد مخدر را تقلید نمی کند، ویژگی های مورفولوژیکی و نورولوژیکی آن هم موازی با کسانی است که از انتقال تفریحی به اعتیاد به مواد مخدر پیروی می کنند (رابینسون و کلب، 1999, Vanderschuren و Kalivas، 2000 و Vanderschuren و Pierce، 2010) به طور سنتی، پروتکل حساسیت حرکتی حرکتی شامل سه مرحله است: گرفتن (قرار گرفتن در معرض مواد مکرر)، دوره انزال و چالش (یک تماس جدید با دارو پس از دوره خروج). متاسفانه، اغلب مطالعات با استفاده از حساسیت حرکتی حرکتی تنها در مرحله کسب و چالش متمرکز شده است، همپوشانی دوره برداشت.

به خوبی ثابت شده است که قرار گرفتن در معرض مکرر داروهای سوء استفاده (Perrotti و همکاران، 2008) و استرس مزمن (Perrotti و همکاران، 2004) باعث افزایش بیان فاکتور رونویسی fosB / deltafosB در سیستم کورتیکولیمبیک می شود. تجمع FosB / DeltaFosB در این مناطق به عنوان نقش مهمی در مقاومت در برابر استرس (Berton و همکاران، 2007 و Vialou و همکاران، 2010) و در اثر پاداش کوکائین (هریس و همکاران، 2007 و Muschamp و همکاران، 2012)، اتانول (کاست و همکاران، 2009 و لی و همکاران، 2010) و opioids (زاکاریو و همکاران، 2006 و Solecki و همکاران، 2008) بنابراین ممکن است که FosB / DeltaFosB تعدادی از رویدادهای پلاستیک عصبی مربوط به حساسیت حرکتی ناشی از اتانول و همچنین خروج از مرحله فاز حساسیت حرکتی حرکتی را مدوله کند.

قابل توجه است که تفاوت های فردی در طول گذار از استفاده تفریحی به اعتیاد به مواد مخدر وجود دارد (Flagel et al.، 2009, جورج و کوب، 2010 و Swendsen و Le Moal، 2011) به عنوان مثال ، موش های DBA / 2 J بیشتر از C57BL / 6 J نسبت به حساسیت حرکتی ناشی از اتانول مستعد پاسخ هستند (فیلیپس و همکاران، 1997 و ملون و بوهم، 2011a) در موش های بی سواد سوئیس، تغییرات رفتاری در مورد حساسیت حرکتی ناشی از اتانول بواسطه ماسور و دوس سانتوس (1988). از آن پس مطالعات دیگر نشان داده اند که ویژگی های مهم مغز و اعصاب مرتبط با تغییرات رفتاری در دستیابی به حساسیت حرکتی ناشی از اتانول (Souza-Formigoni et al.، 1999, Abrahão و همکاران، 2011, Abrahão و همکاران، 2012, Quadros و همکاران، 2002a و Quadros و همکاران، 2002b) با این حال، این مطالعات تاثیر تغییرات رفتاری را در دوره برداشت پس از فاز اکتسابی حساسیت حرکتی حرکتی نیافتند. در یک مطالعه اخیر، آزمایشگاه ما تفاوت قابل توجهی بین موش های بیضوی حساس و غیر حساسیت نسبت به بیان نوع گیرنده کانابینوئید 1 (CB1R) در طول برداشت داشت. در این مطالعه، موش های حساس شده (اما نه غیر حساس شده) بیان CB1R را در قشر پره فرونتال، منطقه قاعده شکمی، آمیگدالا، استریاتوم و هیپوکامپ (Coelhoso و همکاران، 2013).

با توجه به تنوع رفتاری کاملاً اثبات شده در موشهای سوئیسی از نظر حساسیت حرکتی ناشی از اتانول ، و اینکه این تنوع در حین خروج بعدی با ویژگیهای عصبی شیمیایی متمایزی همراه است ، مطالعه حاضر بیان FosB / DeltaFosB را در موشهای حساس و غیر حساس در آغاز بررسی کرد (18 ساعت) و پس از 5 روز پس گرفتن

2 مواد و روش ها

2.1 فاعل، موضوع

موشهای نر نژاد سوئیس وبستر (EPM-1 Colony ، سائو پائولو ، SP ، برزیل) ، که در اصل از خط آلبینو سوئیس وبستر از مرکز توسعه مدلهای حیوانی در زیست شناسی و پزشکی در دانشگاه فدرال سائو پائولو گرفته شده است. . موش ها در شروع آزمایش 12 هفته سن داشتند (30-40 گرم). گروه های 10 تایی موش در قفس هایی (40 × 34 × 17 سانتی متر) با ملافه های چوبی قرار گرفتند. کلنی حیوانات کنترل شده با دما (20–22 درجه سانتیگراد) و رطوبت (50٪) در یک چرخه روشن / تاریکی (12/12 ساعت) ، با چراغ های روشن در ساعت 07:00 ، با گلوله های ماوس و آگهی آب لوله کشی حفظ شد. آزاد ، به جز در حین آزمایش. موش ها در این شرایط مسکن حداقل 7 روز قبل از شروع درمان دارویی و آزمایش های رفتاری نگهداری شدند. مراقبت از حیوانات و روش های تجربی تحت پروتکل های تأیید شده توسط کمیته اخلاق مراقبت و استفاده از حیوانات دانشگاه (شماره پروتکل: 2043/09) ، مطابق با دستورالعمل 2010/63 / EU اتحادیه اروپا برای آزمایش حیوانات (http://ec.europa.eu/environmental/chemicals/lab_animals/legislation_en.htm).

2.2 حساسیت locomotor

پروتکل حساسیت حرکتی حرکتی بر اساس یک مطالعه قبلی از آزمايشگاه ما بود (Coelhoso و همکاران، 2013) در ابتدای پروتکل ، به همه حیوانات محلول نمکی به صورت داخل صفاقی تزریق شد و بلافاصله به مدت 15 دقیقه در یک جعبه فعالیت خودکار (اینسایت ، برزیل) آزمایش شد تا حرکت پایه ایجاد شود. دو روز بعد ، روزانه به حیوانات اتانول (2 گرم در کیلوگرم ، 15 درصد وزنی بر ولت در 0.9/XNUMX درصد NaCl ، گروه ip - EtOH) تزریق شد. N = 40) یا سرم نمکی (حجم مشابه ، IP ، - گروه کنترل ، N = 12) ، در طول 21 روز. درست بعد از تزریق های 1 ، 7 ، 14 و 21 ، حیوانات به مدت 15 دقیقه در قفس فعالیت قرار گرفتند. حرکت افقی در هر موقعیت با استفاده از یک سیستم تجزیه و تحلیل رفتاری (آزمایشگاه پان ، اسپانیا) اندازه گیری شد. همانطور که انتظار میرفت ( ماسور و دوس سانتوس، 1988 و Coelhoso و همکاران، 2013) متغیرهای رفتاری در فعالیت حرکتی در روز 21st به ما اجازه می دهد که حیوانات گروه EtOH را در زیرگروه های 2 توزیع کنیم: EtOH_High (که از٪ 30 بالا از توزیع گرفته شده) و EtOH_Low (از پایین 30٪ از توزیع) بنابراین، تنها٪ 60 حیوانات در تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. این استراتژی یکسان است با آنهایی که در مطالعات مورد بررسی تنوع فردی در پارادایم حساسیت اتانول ( ماسور و دوس سانتوس، 1988, Souza-Formigoni et al.، 1999, Quadros و همکاران، 2002a, Quadros و همکاران، 2002b, Abrahão و همکاران، 2011, Abrahão و همکاران، 2012 و Coelhoso و همکاران، 2013).

پس از طبقه بندی تعریف گروه های آزمایشی ، ما 2 آزمایش مستقل با توجه به معیارهای زمانی دوره خروج انجام دادیم: پس از 18 روز پس گرفتن بنابراین ، این مطالعه شامل 5 گروه آزمایشی (کنترل ، EtOH_High و EtOH_Low) بود که به 3 زیر گروه (2 ساعت و 18 روز ترک) تقسیم شدند (N = 6 در هر زیر گروه). انتخاب این دو علامت زمانی در دوره ترک به دلیل جنبه های جنبشی بیان FosB و DeltaFosB پس از 18 ساعت خروج (همانطور که در بخش بحث توضیح داده شد) و پس از 5 روز خروج ، براساس مطالعات قبلی از آزمایشگاه ما بود. که برخی از ویژگی های عصبی شیمیایی مربوط به دوره ترک در الگوی حساسیت حرکتی را بررسی کرده است ( Fallopa و همکاران، 2012 و Escosteguy-Neto و همکاران، 2012) سرانجام ، برای انجام همبستگی بین حساسیت حرکتی و بیان FosB / DeltaFosB ، ما نمره حساسیت حرکتی را برای هر حیوان محاسبه کردیم ، با این فرمول: score = (حرکت در روز 21 - حرکت در روز 1) * 100 / حرکت در روز اول

2.3 ایمونوهیستوشیمی

پس از دوره ترک مربوطه ، حیوانات با کوکتل حاوی کتامین (75 میلی گرم در کیلوگرم ، IP) و زیلازین (25 میلی گرم در کیلوگرم ، IP) بی حس شدند. پس از از دست دادن رفلکس قرنیه ، آنها با استفاده از 100 میلی لیتر محلول بافر فسفات 0.1 میلی متر [با نمک بافر فسفات (PBS)] و به دنبال آن 100 میلی لیتر پارافورمالدئید 4٪ (PFA) از طریق قلب مورد استفاده قرار گرفتند. مغزها بلافاصله پس از پرفیوژن برداشته و به مدت 24 ساعت در PFA نگهداری و سپس به مدت 30 ساعت در محلول 48٪ ساکارز / PBS نگهداری شدند. بخشهای تاجی سریال (30 میکرومتر) با استفاده از میکروتوم انجماد برش داده شده و در داخل محلول ضد انجماد نگهداری می شود تا در روشهای ایمونوهیستوشیمی با رنگ آمیزی شناور آزاد استفاده شود.

برای ایمونوهیستوشیمی ، یک روش مرسوم آویدین-بیوتین-ایمونوپراکسیداز انجام شد. بخشهای مغزی تمام گروههای آزمایشی در همان دوره قرار گرفتند ، به مدت 3 دقیقه با هیدروژن پراکسیداز (15)) تحت پیش تیمار قرار گرفتند و سپس با PBS به مدت 30 دقیقه شستشو شدند. سپس ، تمام بخشها در طی 30 دقیقه در PBS-BSA .5 exposed قرار گرفتند تا از واکنشهای غیر اختصاصی جلوگیری شود. پس از آن ، بخشها یک شب با آنتی بادی اولیه خرگوش anti-FosB / DeltaFosB انکوبه شدند (1: 3,000،32519؛ Sigma Aldrich، St Louis، MO، USA. no .cat. AV30) در محلول PBS-T (300 میلی لیتر PBS ، 100 میکرولیتر تریتون) X-2) پس از آن ، بخشها به مدت 1 ساعت در یک آنتی بادی ثانویه IgG ضد خرگوش بز بیوتینیله (در 600: 90 ؛ وکتور ، بورلینگام ، کالیفرنیا ، ایالات متحده) در دمای اتاق انکوبه شدند. سپس این بخشها با مجتمع آویدین-بیوتین (کیت استاندارد Vectastain ABC ؛ وکتور ، بورلینگام ، کالیفرنیا ، ایالات متحده) به مدت XNUMX دقیقه تحت درمان قرار گرفتند و به واکنش دی آمینوبنزیدین با شدت نیکل ارسال شدند. بین پله ها ، بخشها در PBS شستشو داده شده و بر روی چرخان تحریک شدند. بخشها بر روی اسلایدهای روکش دار ژلاتین نصب شده ، خشک ، کم آب و لغزش می شوند.

مناطق انسفالیک زیر تجزیه و تحلیل شدند: قشر پیش فونتیال (قشر سینهولت قدامی قدامی (Cg1)، قشر پیشوئی لگن (PrL) و قشر infralimbic cortex (IL)]، قشر مغزی [اولیه (M1) و ثانویه (M2)]، striatum پشتی DmS) و روده دو طرفه (DlS)]، Striatum درشتی [nucleus accumbens core (Acbco) و پوسته (Acbsh)، ventral pallidum (VP)]، هیپوکامپ [لایه ی هرمی از Cornus Ammong 1 و 3 (CA1 و CA3) لایه گرانول گریس دندانه دار (DG)]، آمیگدال [هسته غضروفی (BlA) و هسته مرکزی (CeA)]، هسته ونترومدائی هیپوتالاموس (VMH) و بخش قاعده شکمی (بخش قدامی (VTAA) و خلفی (VTAP) دیدن عکس. 1) از میکروسکوپ Nikon Eclipse E200 متصل به کامپیوتر برای گرفتن تصاویر از هر قسمت با بزرگنمایی 20 پوند استفاده شد. تصاویر به عنوان بایگانی .tiff برای تجزیه و تحلیل خلفی ایمنی پذیری FosB / DeltaFosB ذخیره شدند. سلولهای واکنش دهنده ایمنی با استفاده از نرم افزار ImageJ شمارش شدند (NIH Image ، Bethesda ، MD ، USA). مناطق مغز بر روی هر عکس با توجه به Atlas مغز موش Stereotaxic مشخص شد (فرانکلین و Paxinos، 1997) از آنجایی که میکروکروگرافی های گرفته شده توسط میکروسکوپ نشان دهنده 2.5/10 XNUMX XNUMX است3 میکرومتر2 در بزرگ نمایی 20 ، کمی سلولهای دارای برچسب FosB / DeltaFosB به عنوان میانگین سلولهای رنگ آمیزی ایمنی در هر 2.5 × 10،XNUMX بیان می شود3 میکرومتر2. مقادیر بدست آمده در گروههای EtOH به مقادیر کنترل نرمال شده و به صورت٪ بیان می شود. (شاهد = 100٪).

  •  
  • عکس. 1.  

    نمایه برداری از مناطق مغز نمونه برداری شده است. نقاشی ناقص از بخش های کرونالی مغز موش صحرایی که نمونه برداری شده اند (از فرانکلین و Paxinos، 1997) M1 = قشر حرکتی اولیه ؛ M2 = قشر حرکتی ثانویه ، CG1 = قشر cingulate قدامی ، PrL = قشر prelimbic ، IL = قشر infralimbic ، Acbco = هسته هسته accumbens ، Acbsh = پوسته هسته accumbens ، VP = پالیدوم شکمی DmS = ناحیه پشتی خلفی ، DlS = خلف مخچه Cornus Ammonis 1، CA1 = Cornus Ammonis 3؛ DG = لایه دانه ای شکنج دندانه دار ، BlA = هسته بازولاتین آمیگدالا ، CeA = هسته مرکزی آمیگدالا ، VmH = هسته هیپوتالاموس ونترومدیال ، VTAA = قسمت قدامی ناحیه شکمی شکمی ، VTAP = قسمت خلفی ناحیه شکمی شکمی.

2.4 تحلیل آماری

در ابتدا ، از Shapiro-Wilk برای بررسی نرمال بودن توزیع همه متغیرها استفاده شد. نتایج رفتاری توسط ANOVA یک طرفه برای اندازه گیری مکرر با در نظر گرفتن عامل 5 دوره حساسیت حرکتی مورد بررسی قرار گرفت: پایه ، روز 1 ، روز 7 ، روز 14 و روز 21. نتایج بافت شناسی با استفاده از ANOVA دو طرفه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت ، به عنوان عوامل: دوره ترک (18 ساعت و 5 روز) و گروه آزمایش (شاهد ، EtOH_High و EtOH_Low). متغیرهای غیر پارامتری به منظور کاهش پراکندگی داده ها ، در نمرات Z استاندارد شدند و متعاقباً در ANOVA دو طرفه اعمال شد ، همانطور که قبلا توضیح داده شد. نیومن کولز تعقیبی در صورت لزوم مورد استفاده قرار گرفت. سرانجام ، ما ارتباطات احتمالی بین سلولهای مثبت FosB / DeltaFosB و نمرات حساسیت حرکتی را بررسی کردیم. این همبستگی ها فقط برای هسته هایی که اختلاف آماری بین گروه های آزمایش یافته شده بود محاسبه شد. از آنجا که این اختلافات به 5 روز خروج محدود شد (به بخش نتایج مراجعه کنید) ، مقادیر FosB / DeltaFosB در نظر گرفته شده در این همبستگی ها به این دوره خاص از زمان خروج اشاره دارد. از آنجا که این اختلافات به 5 روز خروج محدود شد (به بخش نتایج مراجعه کنید) ، مقادیر FosB / DeltaFosB در نظر گرفته شده در این همبستگی به این زمان خاص برداشت اشاره دارد. سطح معنی داری 5٪ تعیین شد (p 0.05)

3. نتایج

3.1 حساسیت locomotor

ANOVA برای اندازه گیری های مکرر تفاوت های قابل توجهی در عامل گروه [F(2,32) = 68.33 ، p <0.001] ، در دوره پروتکل [F(4,128) = 9.13 ، p <0.001] ، و تعامل بین آنها [F(8,128) = 13.34 ، p <0.001] در تحرک پایه هیچ تفاوتی وجود نداشت ، و هر دو گروه EtOH در روز اول دستیابی ، در مقایسه با گروه کنترل ، افزایش مشابهی در حرکت داشتند.p 0.01) با این حال ، EtOH_High (اما EtOH_Low نه) افزایش تدریجی فعالیت حرکتی را در طول مرحله کسب نشان می دهد (p <0.01 ، در رابطه با گروههای کنترل و EtOH_Low ، در آخرین روز کسب ؛ p <0.01 در رابطه با فعالیت حرکتی آن در روز اول کسب) ( عکس. 2) این داده ها نتایج تحقیق اولیه را تایید کرد ( ماسور و دوس سانتوس، 1988) و از گزارش قبلی ما ( Coelhoso و همکاران، 2013) در مورد تغییرات رفتاری در موش های بیرون از مغز سوئیس به حساسیت حرکتی ناشی از اتانول تحریک شده است.

  • اتانول باعث افزایش تدریجی و قوی حرکت در طول مزمن می شود ...
  • عکس. 2.  

    اتانول باعث افزایش تدریجی و قوی حرکتی در طول درمان مزمن در EtOH_High می شود ، اما در گروه EtOH_Low نیست. داده ها به صورت میانگین ± SEM بیان شدند N = 12 برای گروههای کنترل ، EtOH_High و EtOH_Low. ⁎⁎P <0.01 نسبت به گروه کنترل ، در همان دوره. ##P <0.01 در رابطه با گروه EtOH_Low ، در همان دوره. ‡‡P <0.01 در ارتباط با فعالیت حرکتی پایه ، در همان گروه. ¥¥P <0.01 در رابطه با فعالیت حرکتی در 1st روز کسب، در همان گروه.

3.2 بیان FosB / DeltaFosB

فتومیکو گرافیک تصویری ایمنی فعال FosB / DeltaFosB در تصویر زیر نشان داده شده است عکس. 3 و مقادیر عادی در نشان داده شده است عکس. 4, عکس. 5, عکس. 6 و عکس. 7. آنالیز واریانس دوطرفه تفاوت های قابل توجهی در M1، M2، DmS، DlS، Acbco، Acbsh، VP و VTA وجود دارد (برای مقادیر غیر نرمال ایمنی فعال فعال FosB / DeltaFosB و تجزیه و تحلیل آماری تمام ساختارها، جدول Suppl1 و میز 1، به ترتیب). در ساختارهایی که اختلافات آماری را می توان مشاهده کرد ، چهار الگوی مختلف از بیان FosB / DeltaFosB وجود دارد. در اولین مورد ، مشاهده شده در M1 و M2 ، افزایش بیان FosB / DeltaFosB در روز پنجم برداشت اتانول فقط در گروه EtOH_High (در مقایسه با مقادیر EtOH_High در 18 ساعت خروج ، و همچنین ، به کنترل و گروههای EtOH_Low در 5 روز خروج) (نگاه کنید به عکس. 4) در الگوی دوم ، مشاهده شده در VTAA ، بیان FosB / DeltaFosB در 5 روز خروج اتانول فقط در گروه EtOH_Low افزایش یافته است (در مقایسه با مقادیر EtOH_Low در 18 ساعت خروج ، همچنین ، در گروه کنترل در 5 روز خروج ) (دیدن عکس. 5) در الگوی سوم ، مشاهده شده در DmS ، Acbco و Acbsh ، بیان FosB / DeltaFosB در 5 روز خروج اتانول در هر دو گروه EtOH_High و EtOH_Low افزایش یافت (در مقایسه با مقادیر مربوطه در 18 ساعت خروج) ، اما فقط گروه EtOH_Low با گروه کنترل متفاوت بود (نگاه کنید به عکس. 6) سرانجام ، در الگوی چهارم ، مشاهده شده در DlS و VP ، بیان FosB / DeltaFosB در 5 روز خروج اتانول در هر دو گروه EtOH_High و EtOH_Low افزایش یافت (در مقایسه با مقادیر مربوطه در 18 ساعت خروج) ، اگرچه این افزایش از نظر آماری بیانگر بود در EtOH_Low نسبت به EtOH_High و فقط گروه EtOH_Low با گروه کنترل متفاوت است (نگاه کنید به عکس. 7).

  • میکروسکوپ تصویری از ایمونوئوراکتیو FosB / DeltaFosB در × 20 از ...
  • عکس. 3.  

    میکروکروگرافی مصور از ایمنی پذیری FosB / DeltaFosB در بزرگ نمایی 20 ×. DmS = جسم مخطط پشتی ؛ DlS = جسم مخطط پشتی؛ Acbco = هسته هسته اکومبنس ؛ Acbsh = پوسته هسته accumbens؛ VP = پالیدوم شکمی VTAa = قسمت قدامی ناحیه شکمی شکمی.

  •  
  • عکس. 4.  

    بیان FosB / DeltaFosB در 18 ساعت و 5 روز دوره خروج در گروههای EtOH_High و EtOH_Low در M1 و M2. داده ها به صورت میانگین ± SEM بیان شده و با توجه به مقادیر گروه های کنترل (خط نقطه ای - 100٪ در نظر گرفته می شود) داده های نرمال شده را نشان می دهد. میله های خاکستری = 18 ساعت برداشت اتانول ؛ میله های سیاه = 5 روز خروج اتانول. ** P <0.01 نسبت به گروه کنترل مربوطه ## P <0.01 ، در رابطه با مقدار مربوط به آن در 18 ساعت خروج. ‡‡ P <0.01 ، در ارتباط با گروه EtOH_Low در همان مدت. M1 = قشر حرکتی اولیه ، M2 = قشر حرکتی ثانویه.

  • بیان FosB / DeltaFosB در 18h و 5days دوره برداشت در EtOH_High ...
  • عکس. 5.  

    بیان FosB / DeltaFosB در 18 ساعت و 5 روز دوره خروج در گروههای EtOH_High و EtOH_Low در VTA. داده ها به صورت میانگین ± SEM بیان شده و با توجه به مقادیر گروه های کنترل (خط نقطه ای - 100٪ در نظر گرفته می شود) داده های نرمال شده را نشان می دهد. میله های خاکستری = 18 ساعت برداشت اتانول ؛ میله های سیاه = 5 روز خروج اتانول. ** P <0.01 نسبت به گروه کنترل مربوطه ## P <0.01 ، در رابطه با مقدار مربوط به آن در 18 ساعت برداشت. VTA = ناحیه شکمی شکمی.

  • بیان FosB / DeltaFosB در 18h و 5days دوره برداشت در EtOH_High ...
  • عکس. 6.  

    بیان FosB / DeltaFosB در 18 ساعت و 5 روز دوره خروج در گروههای EtOH_High و EtOH_Low در Acbco ، Acbsh و DmS. داده ها به صورت میانگین ± SEM بیان شده و با توجه به مقادیر گروه های کنترل (خط نقطه ای - 100٪ در نظر گرفته می شود) داده های نرمال شده را نشان می دهد. میله های خاکستری = 18 ساعت برداشت اتانول ؛ میله های سیاه = 5 روز خروج اتانول. * P <0.05 ** P <0.01 ، در ارتباط با گروه کنترل مربوطه. ## P <0.01 ، در رابطه با مقدار مربوط به آن در 18 ساعت برداشت. Acbco = هسته هسته accumbens ، Acbsh = پوسته هسته accumbens ، DmS = جسم مخطط پشتی.

  • بیان FosB / DeltaFosB در 18h و 5days دوره برداشت در EtOH_High ...
  • عکس. 7.  

    بیان FosB / DeltaFosB در 18 ساعت و 5 روز دوره خروج در گروههای EtOH_High و EtOH_Low در VP و DlS. داده ها به صورت میانگین ± SEM بیان شده و با توجه به مقادیر گروه های کنترل (خط نقطه ای - 100٪ در نظر گرفته می شود) داده های نرمال شده را نشان می دهد. میله های خاکستری = 18 ساعت برداشت اتانول ؛ میله های سیاه = 5 روز خروج اتانول. ** P <0.01 نسبت به گروه کنترل مربوطه # P <0.05 ## P <0.01 ، در رابطه با مقدار مربوط به آن در 18 ساعت برداشت. ‡‡ P <0.01 ، در ارتباط با گروه EtOH_Low در همان مدت. VP = پالیدوم شکمی ، DlS = جسم مخطط پشتی.

  • میز 1. 

    پارامترهای آماری به دست آمده در ANOVA دو طرفه در رابطه با تجزیه و تحلیل بیان FosB / DeltaFosB.

  • هستهعامل دورهعامل درماندوره * درمان
    M1F(1,30) = 5.61 ، P = 0.025F(2,30) = 3.21 ، P = 0.055F(2,30) = 2.61 ، P = 0.089
    M2F(1,30) = 4.72 ، P = 0.038F(2,30) = 1.53 ، P = 0.233F(2,30) = 3.45 ، P = 0.045
    CG1F(1,30) = 11.08 P = 0.002F(2,30) = 0.95 ، P = 0.398F(2,30) = 3.31 ، P = 0.050
    PrLF(1,30) = 8.53 ، P = 0.007F(2,30) = 1.72 ، P = 0.197F(2,30) = 2.74 ، P = 0.081
    ILF(1,30) = 3.77 ، P = 0.062F(2,30) = 1.91 ، P = 0.167F(2,30) = 0.98 ، P = 0.389
    آکبوF(1,30) = 22.23 P کمتر از 0.001F(2,30) = 2.63 ، P = 0.089F(2,30) = 5.68 ، P = 0.008
    AcbshF(1,30) = 50.44 P کمتر از 0.001F(2,30) = 4.27 ، P = 0.023F(2,30) = 13.18 ، P کمتر از 0.000
    VPF(1,30) = 38.01 P کمتر از 0.001F(2,30) = 5.07 ، P = 0.013F(2,30) = 10.93 ، P کمتر از 0.000
    DmSF(1,30) = 28.89 P کمتر از 0.001F(2,30) = 3.75 ، P = 0.035F(2,30) = 7.71 ، P = 0.002
    DLSF(1,30) = 13.58 P = 0.001F(2,30) = 5.41 ، P = 0.011F(2,30) = 4.72 ، P = 0.017
    CA1F(1,30) = 4.81 ، P = 0.036F(2,30) = 7.37 ، P = 0.002F(2,30) = 1.62 ، P = 0.215
    CA3F(1,30) = 14.92 P = 0.001F(2,30) = 2.46 ، P = 0.102F(2,30) = 3.81 ، P = 0.034
    DGF(1,30) = 0.59 ، P = 0.447F(2,30) = 1.49 ، P = 0.241F(2,30) = 0.24 ، P = 0.785
    بلهF(1,30) = 6.47 ، P = 0.016F(2,30) = 0.12 ، P = 0.884F(2,30) = 1.71 ، P = 0.199
    CeAF(1,30) = 2.55 ، P = 0.121F(2,30) = 0.22 ، P = 0.801F(2,30) = 0.71 ، P = 0.501
    VmHF(1,30) = 6.51 ، P = 0.016F(2,30) = 0.71 ، P = 0.503F(2,30) = 1.75 ، P = 0.192
    VTAAF(1,30) = 9.64 ، P = 0.004F(2,30) = 3.76 ، P = 0.035F(2,30) = 2.65 ، P = 0.087
    VTAPF(1,30) = 6.05 ، P = 0.021F(2,30) = 1.79 ، P = 0.184F(2,30) = 1.64 ، P = 0.211
  • M1 = قشر حرکتی اولیه ؛ M2 = قشر حرکتی ثانویه ، CG1 = قشر cingulate قدامی ، PrL = قشر prelimbic ، IL = قشر infralimbic ، Acbco = هسته هسته accumbens ، Acbsh = پوسته هسته accumbens ، VP = پالیدوم شکمی DmS = ناحیه پشتی خلفی ، DlS = خلف مخچه Cornus Ammonis 1، CA1 = Cornus Ammonis 3؛ DG = لایه دانه ای شکنج دندانه دار ، BlA = هسته بازولاتور آمیگدالا ، CeA = هسته مرکزی آمیگدالا ، VmH = هسته هیپوتالاموس شکمی ، VTAA = قسمت قدامی ناحیه شکمی شکمی ؛ VTAP = قسمت خلفی ناحیه قطعه ای مرکزی.

برای تایید اینکه تغییرات در بیان FosB / DeltaFosB به علت خروج، و نه قرار گرفتن در معرض اتانول، ما همبستگی بین نمره حساسیت حرکتی حرکتی و سلول های ایمنولاسیون FosB / DeltaFosB در روز 5th در خروج در هسته فوق ذکر شده (M1، M2، Acbco، Acbsh، DmS، DlS، VP، VTAA). همانطور که انتظار می رفت، همبستگی قابل توجهی برای هر یک از این هسته ها وجود نداشت (M1 - r2 = 0.027862 ، p = 0.987156 M2 - r2 = 0.048538 ، p = 0.196646 Acbco - r2 = 0.001920 ، p = 0.799669 Acbsh - r2 = 0.006743 ، p = 0.633991 DmS - r2 = 0.015880 ، p = 0.463960 DlS - r2 = 0.023991 ، p = 0.914182 جانشین - r2 = 0.002210 ، p = 0.785443 VTAA - r2 = 0.001482 ، p = 0.823630)

4 بحث

نتایج مشاهده شده در این مطالعه نشان می دهد که افزایش بیان FosB / DeltaFosB مشاهده شده در الگوریتم حساسیت حرکتی ناشی از اتانول به احتمال زیاد در ارتباط با برداشت به جای استفاده از داروهای مزمن است. با این حال، تغییرات رفتاری در حساسیت توسعه حرکتی همراه با الگوهای متمایز بیان FosB / DeltaFosB در هنگام خروج همراه بود. نقش قشر حرکتی، منطقه قاعده شکمی و striatum در دستیابی و بیان پارادایم حساسیت حرکتی حرکتی به خوبی ثابت شده است (Vanderschuren و Pierce، 2010) علاوه بر این، محرومیت از مسیر mesolimbic یکی از ویژگی های مرکزی neurobiological دوره برداشت همراه با ظهور آمیگدال گسترش یافته استکوب و لو مول، 2005 و کوب و لو مول، 2008) با این حال، تنها تعداد کمی از مطالعات، دوره برداشت پارادایم حساسیت حرکتی حرکت را بررسی کردند. نتایج ما با تغییرات جالبی در بیان FosB / DeltaFosB در قشر مغزی، منطقه قاعده شکمی و striatum در این دوره مواجه شد.

FosB cDNA بیان پروتئین های 33 ، 35 و 37 کیلو دالتون را رمزگذاری می کند. قرار گرفتن در معرض محرک های حاد باعث القای پروتئین قوی 33 و گسسته 35 و 37 kDa Fos می شود. در نتیجه ، تحت فعال سازی حاد ، بیان غالب FosB مربوط به 33 کیلو دالتون است (McClung و همکاران، 2004 و نستر، 2008) تفاوت چشمگیر دیگری نیز بین این پروتئین ها وجود دارد: فقط 35-37 کیلو دالتون پروتئین ایزوفرم های بسیار پایداری هستند. به دلیل این ثبات بالا ، این فرمهای کوتاه شده FosB ، DeltaFosB نیز نامیده می شوند ، در مغز جمع می شوند و در پاسخ به محرک های مزمن ، مانند درمان های دارویی روانگردان ، تشنج های مزمن التهاب ، و استرس بسیار بیان می شوند (کلز و نستلر، 2000, نستلر و همکاران، 2001 و McClung و همکاران، 2004) به عنوان یک نتیجه، DeltaFosB به عنوان یک سوئیچ مولکولی پایدار به میانجیده اشکال انعطاف پذیری عصبی و رفتاری طولانی مدت در نظر گرفته شده است. جالب توجه است، مطالعه ی زیبا با استفاده از خطوط ماوس که بیانگر تفاوت فزاینده FosB و DeltaFosB است، نشان داد که FosB برای افزایش تحمل استرس ضروری است و همبستگی بین حساسیت حرکت انگیز ناشی از روان درمانی و تجمع DeltaFosB در striatumOhnishi و همکاران، 2011) بنابراین ، هر دو پروتئین می توانند نقش مهمی در پروتکل تجربی مورد استفاده در مطالعه حاضر داشته باشند. قابل ذکر است که آنتی بادی FosB مورد استفاده FosB و DeltaFosB را تشخیص می دهد. از آنجا که FosB پس از یک محرک حاد طی 6 ساعت به سطح پایه کاهش می یابد (نستلر و همکاران، 2001) و DeltaFosB پس از مواجهه با محرکهای مکرر جمع می شوند ، ما تصمیم گرفتیم که حیوانات را 18 ساعت پس از مرحله اکتساب قربانی کنیم ، تا از سوگیری های احتمالی درمان اتانول بیش از بیان FosB جلوگیری کنیم. با این وجود ، به لحاظ فنی دقیق ، ما در مطالعه حاضر به عنوان عبارت FosB / DeltaFosB اشاره خواهیم کرد. ذکر این نکته مهم است که این استراتژی در مطالعات دیگر ، از جمله آنهایی که از همان آنتی بادی اولیه توصیف شده در اینجا استفاده شده است ، استفاده شده است (Conversi et al.، 2008, لی و همکاران، 2010, Flak et al.، 2012 و گارسیا پرز و همکاران، 2012) به عنوان یک نتیجه، علاوه بر این محدودیت های تجربی، ما نتایج خود را با توجه به نقش DeltaFosB در پلاستیک عصبی بررسی خواهیم کرد.

به خوبی ثابت شده است که قرار گرفتن در معرض دارو مزمن بیان FosB / DeltaFosB در مناطق مختلف مغز (نستلر و همکاران، 2001 و Perrotti و همکاران، 2008) جالب است که ، در مطالعه حاضر ، موشهای حساس به اتانول و غیر اتانول با موشهای تحت درمان با نمک نمکی در مورد بیان FosB / DeltaFosB 18 ساعت پس از مرحله اکتساب تفاوت نداشتند. علاوه بر این ، هیچ ارتباط معنی داری بین بیان FosB / DeltaFosB و نمرات حساسیت حرکتی وجود ندارد. این واگرایی را می توان حداقل تا حدی با اختلافات موجود در پروتکل تجربی توضیح داد. به عنوان مثال ، با توجه به قرار گرفتن در معرض اتانول ، در دو مطالعه از دو الگوی انتخاب بطری آزاد در 15 جلسه نوشیدن متناوب استفاده شد (لی و همکاران، 2010) یا رژیم غذایی مایع کامل غذایی که طی 17 روز بصورت خودکار انجام می شود (جایی که حیوانات در دوزهای 8 تا 12 گرم در کیلوگرم در روز اتانول مصرف می کنند) (Perrotti و همکاران، 2008) در مطالعه دیگری، هرچند نویسندگان به درمان مزمن اشاره می کنند، پروتکل شامل تنها قرار گرفتن در معرض اتانول 4 (Ryabinin و وانگ، 1998) بنابراین ، پروتکل های استفاده شده در جای دیگر کاملاً متفاوت از پروتئین مورد استفاده در اینجا است ، که شامل 21 روز درمان است که تزریق روزانه اتانول توسط یک آزمایشگر انجام می شود. علی رغم این تفاوت ها ، چندین مطالعه در مورد تزریق داخل صفاقی وجود دارد که گزارش می دهد بیان FosB / DeltaFosB افزایش یافته است پس از پروتکل های حساسیت حرکتی ناشی از تحریک کننده های روان (Brenhouse و Stellar، 2006, Conversi et al.، 2008 و Vialou و همکاران، 2012) و opioids (کاپلان و همکاران، 2011) با این حال، پروتکل های حساسیت حرکتی حرکتی در این مطالعات بسیار کمتر از قرار گرفتن در معرض دارو 21 است و در بعضی از آنها دارو به صورت متناوب به کار می رود. در مقابل، پروتکل ما از درمان مشابهی که در مطالعات قبلی شامل تزریق 21 روزانه اتانول (ماسور و دوس سانتوس، 1988, Souza-Formigoni et al.، 1999, Quadros و همکاران، 2002a, Quadros و همکاران، 2002b, Abrahão و همکاران، 2011 و Abrahão و همکاران، 2012) شواهدی وجود دارد که اگر چه مصرف کوکائین مزمن انباشت بیان DeltaFosB را در nucleus accumbens ترویج می کند، تحرک به القاء mRNA DeltaFosB در هر دو جفت درشت و پشتی (لارسون و همکاران، 2010) بنابراین ما فرض کردیم که عدم تفاوت در گروه های آزمایشی ما در فاز خرید ممکن است ناشی از تحمل در مورد القاء FosB / DeltaFosB باشد، زیرا در پروتکل حاضر دوره ای طولانی تر از مرحله کسب در مقایسه با دوره های مورد استفاده برای روان درمانی و opioids وجود دارد در سایر مطالعات

مطالعات با استفاده از موش های نابود شده و ترانس ژنیک نشان داد که موش های جهش یافته FosB پاسخ های رفتاری به کوکائین را افزایش داده اند، از قبیل اثرات حرکتی تحریک کننده و ترجیح مکان محرمانه. علاوه بر این، بیان هر دو DeltaFosB ابتدایی و کوکائین القا شده در این موش جهشی وجود ندارد (Hiroi و همکاران، 1997) در مقابل، موش های ترانس ژنیک با بیش از حد بیان القا شده از DeltaFosB، حساسیت به اثرات پاداش کوکائین و مورفین (Muschamp و همکاران، 2012) این نتایج مستلزم شواهدی مستقیم از همبستگی نزدیک بین DeltaFosB و فرایند پاداش است. استرس مزمن علاوه بر تظاهرات مکرر دارو همچنین بیان DeltaFosB را در مدارهای کورتیکولیمبیک (Perrotti و همکاران، 2004) جالب توجه است، موش های ترانس ژنیک بیش از حد DeltaFosB نسبت به اثرات طرفدار افسردگی از آگونیست کاپا اپوئیدی کمتر شناخته شده است که شناخته شده است به ایجاد دیسفریا و اثرات استرس مانند در جوندگانMuschamp و همکاران، 2012) بنابراین ، علاوه بر فرایند پاداش ، DeltaFosB همچنین نقشی محوری در جنبه های احساسی پدیده ها دارد. در این سناریو ، ترک نیز می تواند باعث بیان FosB / DeltaFosB شود ، زیرا استرس یکی از م componentلفه های اصلی ترک دارو است. این دیدگاه مطابق با نتایج ما است ، زیرا هیچ ارتباطی بین بیان FosB / DeltaFosB و نمرات حساسیت وجود نداشت و علاوه بر این ، افزایش بیان FosB / DeltaFosB فقط در روز پنجم خروج مشاهده شد.

جالب توجه است که در برخی از ساختارها، افزایش FosB / DeltaFosB در گروه EtOH_High و EtOH_Low مشاهده شد، هرچند در گروه اول بیشتر بیانگر این بود که این افزایش می تواند بر اساس شدت آنها پیامدهای عملکردی متفاوت داشته باشد. این فرضیه را می توان با چندین نقش کاربردی مشخص FosB / DeltaFosB توضیح داد. به عنوان مثال، موش هایی که در معرض کوکائین قرار داشتند، در طول دوره برداشت، بیان DeltaFosB را در acumbens nucleus افزایش دادند، اثر مثبت با ترجیح کوکائین همبستگی داشت، اما با ترجیح نوتیفیکیشن منفی بود. علاوه بر این، استرس در هنگام خروج، پاسخ های رفتاری به استرس های روانی را با افزایش بیان DeltaFosB در نورون های کورتیکولیمبیک (Nikulina و همکاران، 2012) بنابراین، DeltaFosB می تواند تنظیم اختلال پردازش هودینی را که در طی خروج طولانی مدت رخ می دهد ((Marttila و همکاران، 2007) از سوی دیگر، هر دو انعطاف پذیری به استرس و پاسخ های ضد افسردگی مربوط به بیان بالینی DeltaFosB در striatum (Vialou و همکاران، 2010) بنابراین، ما فرض بر این است که افزایش FosB / DeltaFosB در striatum در EtOH_High می تواند اثرات پاداش اتانول را افزایش دهد، و حساسیت بالاتری نسبت به اثرات داروهای بعدی را افزایش می دهد. از سوی دیگر، افزایش شدید در FosB / DeltaFosB دیده شده در گروه EtOH_Low می تواند حساسیت به هر دو افسردگی و اثرات استرس را کاهش دهد، به حداقل رساندن اثرات تقویت منفی قرار گرفتن در معرض دارو و در نتیجه، توضیح مقاومت بالاتر در این گروه جالب توجه است که این پارادوکس دارای پایه عصبی بود. به عنوان مثال، موش های ترانس ژنیک بیش از حد FosB در ستون فقرات متوسط ​​نورون های GABAergic هسته accumbens افزایش سطح هر دو گیرنده های mu- و kappa-opioid (سیمللی و همکاران، 2011)، و این گیرنده ها به ترتیب باعث افزایش و مهار تنزیم mesolimbic (Manzanares و همکاران، 1991 و Devine و همکاران، 1993) علاوه بر این بیان سلول نیز می تواند به طور چشمگیری پیامدهای عملکرد FosB / DeltaFosB را تغییر دهد. در یک مطالعه زیبا با استفاده از موشهایی که بیش از حد DeltaFosB را در D1- یا D2 بیان میکنند، نورونهای موجود در هسته accumbens نشان دادند که DeltaFosB در نورونهای D1- (اما نه در D2-) پاسخهای رفتاری به کوکائین (Grueter et al.، 2013).

جالب توجه است که ، در مورد قشر حرکتی ، افزایش بیان FosB / DeltaFosB فقط در گروه EtOH_High وجود دارد و محدود به روز 5 خروج است. عدم افزایش در 18 ساعت خروج را می توان با یک مکانیسم تحمل احتمالی در بیان FosB / DeltaFosB در این منطقه پس از قرار گرفتن در معرض اتانول مزمن توضیح داد. علاوه بر این ، نتایج ما نشان می دهد که تغییرات عصبی شیمیایی فعال در قشر حرکتی در طول دوره خروج وجود دارد ، با وجود این واقعیت که حیوانات در این دوره دستکاری نشده اند. این جالب است ، زیرا این انعطاف پذیری می تواند ، حداقل تا حدی ، در حفظ حساسیت حرکتی نقش داشته باشد. اگرچه بیش فعالی پایدار پس از چند روز ترک در اینجا مورد مطالعه قرار نگرفت ، مطالعات زیادی از جمله مطالعات قبلی از آزمایشگاه ما وجود دارد ، نشان می دهد که موش های حساس (اما غیر حساس نیستند) هنگام چالش با اتانول پس از یک دوره ترک داده شده ، حرکت را افزایش داده اند (ماسور و دوس سانتوس، 1988, Souza-Formigoni et al.، 1999, Quadros و همکاران، 2002a, Quadros و همکاران، 2002b, Abrahão و همکاران، 2011, Abrahão و همکاران، 2012, Fallopa و همکاران، 2012 و Coelhoso و همکاران، 2013).

در نهایت قابل توجه است که تنها گروه EtOH_Low افزایش بیان FosB / DeltaFosB را در بخش قدامی (اما نه خلفی) منطقه تکتونال شکمی نشان داد. این بخش ها دارای پیش بینی های متمایز و پروفایل های عصبی هستند و مشارکت آنها در فرایند پاداش بستگی به عوامل متعددی دارد (Ikemoto، 2007) به عنوان مثال ، تجویز اتانول توسط موش ها به قسمت خلفی مربوط است ، اما به قسمت شکمی ناحیه تگمنتال شکمی مربوط نیست (Rodd-Henricks و همکاران، 2000 و Rodd et al.، 2004) علاوه بر این، سیستم اندوکانابینوئید، همچنین GABA-A، Dopramergic D1-D3 و گیرنده های 5HT3 سروتونینینژیک نقش مهمی در رفتار اخلاقی اتانول (لینسندبرت و بوهم، 2009, Rodd et al.، 2010, ملون و بوهم، 2011b و Hauser و همکاران، 2011) با این حال، GABA-B در قسمت قدامی شکم تنگستن، از نظر پاداش (مور و بوهم، 2009) و اثرات حرکتی تحریک کننده (بوم و همکاران، 2002) اتانول علاوه بر این، گیرنده های نیکوتین کولینرژیک در قسمت قدامی در افزایش سطوح انباشته شده dopamine ناشی از اتانول (Ericson et al.، 2008) بنابراین، صرف نظر از مشخصات متمایز این بخش ها، ممکن است تغییراتی که در گروه EtOH_Low در بخش های قدامی دیده می شود، می تواند مربوط به روند پاداش باشد. کوکائین مکرر، اما مورفین مزمن مزمن و یا استرس مزمن مزمن، DeltaFosB را در ناحیه قلب تنگستن، به ویژه در جمعیت سلولی گاما آمینوبوتیریک (GABA) (Perrotti و همکاران، 2005) این واقعیت می تواند سطوح نرمال FosB / DeltaFosB را در طول برداشتن مواجهه با موشهای EtOH_High مواجهه در محدوده قاعده ای از ناحیه موش ها، بدون در نظر گرفتن تجربیات استرس بالا در این دوره، توضیح دهد. علاوه بر این، این داده ها حداقل، تا حدی، فرضیه ای را مطرح می کنند که افزایش بیان FosB / DeltaFosB در طول برداشت در EtOH_Low می تواند به عنوان پاسخ سازگار شناخته شود.

تفاوت های فردی که در طول گذار از استفاده تفریحی به اعتیاد به مواد مخدر دیده می شود قابل توجه است (Flagel et al.، 2009, جورج و کوب، 2010 و Swendsen و Le Moal، 2011) به عنوان یک نتیجه، ضروری است که مطالعه ویژگی های نوروبیولوژیکی مربوط به تنوع فردی. حساسیت رفتاری یک مدل حیوانی است که معمولا برای بررسی ویژگی های نوروبیولوژیکی اعتیاد به مواد مخدر استفاده می شود. اساس این مدل این است که اثرات ذهنی داروها در معرض مکرر آنها افزایش می یابد. حساسیت حرکتی حرکتی طولانی مدت است و در ارتباط مستقیم با تغییرات مورفولوژیکی و عصبی شیمیایی در مسیر mesolimbic و چندین سلول انسفالیکی مربوط به عاطفه و رفتار حرکتی است (رابینسون و کلب، 1999 و Vanderschuren و Pierce، 2010) یک مطالعه پیشگام توسط ماسور و دوس سانتوس (1988) نشان داد که متغیرهای رفتاری زیادی در موشهای بیرون از مغز سوئیس در مورد حساسیت حرکتی ناشی از اتانول ایجاد شده است. از آن زمان مطالعات دیگر همبستگی مهمی بین ویژگی های نورولوژیکی و متغیرهای رفتاری را نشان داده اند، به ویژه در ارتباط با دوپامینرژیک (Abrahão و همکاران، 2011, Abrahão و همکاران، 2012 و Souza-Formigoni et al.، 1999) و سیستم های glutamatergic (Quadros و همکاران، 2002a و Quadros و همکاران، 2002b) علاوه بر این، یک مطالعه قبلی از آزمایشگاه ما با استفاده از الگوریتم حساسیت حرکتی ناشی از اتانول نشان داد که موش های حساس شده (اما نه حساسیت) افزایش قابل توجهی در نوع گیرنده کانابینوئید 1 (CB1R) در طول دوره انقباضCoelhoso و همکاران، 2013) در اینجا ما الگوهای مختلف بیان FosB / DeltaFosB را در هنگام خروج از گروه EtOH_High و EtOH_Low شناسایی کردیم.

به طور خلاصه، تغییرات رفتاری مشاهده شده در مرحله خرید از حساسیت حرکتی ناشی از اتانول همراه با پلاستیسیته متمایز عصبی در طول دوره برداشت همراه است. جالب توجه است که نتایج ما نشان می دهد که الگوهای متفاوت بیان FosB / DeltaFosB در موش های حساس شده و غیر حساسیت نسبت به دوره انقباض نسبت به اثرات دارو مزمن مرتبط است، احتمالا به علت تحمل داروئی FosB / DeltaFosB رونویسی.

در زیر داده های تکمیلی مربوط به این مقاله است.

تشکر و قدردانی

RFP و CCC به ترتیب، دریافت مدرک کارشناسی از CAPES و FAPESP را دریافت کردند. CTC، LEM، DXS و JGSJ توسط FAPESP و CNPq.

منابع

  •  
  • نویسنده مسئول در: Rua Cesário Mota Jr ، 61 ، 12 ساله ، سائوپائولو ، SP 01221-020 ، برزیل. تلفن. / فاکس: + 55 11 33312008.
  • 1
  • این نویسندگان به طور یکسان در مطالعه حاضر شرکت کردند.

کپی رایت © 2013 Elsevier Inc.