Behav Neurosci. Otè maniskri; disponib nan PMC 2015 Dec 1.
Pibliye nan fòm final edited kòm:
- Behav Neurosci. XNIM desanm; KOUMAN POU (NAN): KIJAN – NAN.
- Pibliye sou entènèt 2015 Oct 26. doi: 10.1037 / bne0000095
PMCID: PMC4658266
NIHMSID: NIHMS724902
Kyle E. Parker,1,2,3 Matt P. McCabe,1,2 Howard W. Johns,1,2 Dane K. Lund,2,4 Fiona Odu,4 Rishi Sharma,2,5 Mahesh M. Thakkar,5 DDW Cornelison,2,4 ak Matthew J. Will1,2
Abstrè
Etid la prezan eksplore wòl nan amigdala a nan medyatè yon modèl inik nan konpòtman manje kondwi pa andedan-accumbens (ACB) opioids opiyid nan rat la. Inactivation tanporè amygdala basolateral la (BLA), via GABAA agonis muscimol administrasyon anpeche konsomasyon ogmante apre yo fin anndan-ACB opioid administrasyon nan selektif µ-opioid agonist la D-Ala2, NMe-Phe4, Glyol5-enkephalin (DAMGO), men kite fèy apwòch manje konpòtman entak, patikilyèman apre konsomasyon te fini. Yon entèpretasyon se ke inaktivasyon nan BLA a oaza bloke aktivite neral kache DAMGO-kondwi consummatory (konsomasyon), men pa konpetitif appetitive (apwòch). Eksperyans yo prezan pran avantaj de distans sa a tanporèl nan konsomasyon ak konpòtman apwòch yo mennen ankèt sou aktivite ki asosye nè yo. Apre swa enteryè-ACB saline oswa administrasyon DAMGO, avèk oswa san BLA administrasyon muscimol, rat yo te bay aksè 2hr nan yon kantite limite nan rejim alimantè ki gen anpil grès. Imedyatman apre sesyon manje a, yo te ofri sakrifis rat yo ak sèvo yo pou modèl aktivite neral atravè rejyon enpòtan nan sèvo ke yo rekonèt pou kontwole konpòtman alimantè tou de apeti ak konplemantè. Rezilta yo montre ke andedan-Acb DAMGO administrasyon ogmante C-Fos deklanchman nan newòn orexin nan zòn nan periforninal nan ipotalamus la e ke sa a ogmantasyon nan deklanchman ki te bloke pa BLA muscimol inaktivasyon. Administrasyon Intra-Acb DAMGO ogmante aktivasyon C-Fos nan newòn dopaminergic nan zòn nan tegmental ventral, konpare ak kontwòl saline, ak inactivation BLA pa te gen okenn efè sou ogmantasyon sa a. An jeneral, done sa yo bay kous sikolojik ki ka medyasyon enfliyans nan selektif nan BLA a sou kondwi akonplisman, men pa apèstif, manje konpòtman nan yon modèl nan edonikman-kondwi manje konpòtman.
Rezo a distribye kontribiye nan andedan-accumbens (AC) opyat manje medyatè te anpil egzamine (Will et al., 2003; Kelley et al., 2005; Zheng et al., 2007; Berridge, NAN), ak kontribisyon amygala basolateral la (BLA) te patikilyèman enteresan. Tanporè inaktivasyon BLA a ak GABA aA agonist muscimol anpeche ogmantasyon gaya nan gwo grès konsomasyon apre yo fin administre intra-Acb nan selektif µ-opyoyid agonist la D-Ala2, NMe-Phe4, Glyol5-enkephalin (DAMGO), men BLA inaktivasyon pa gen okenn enfliyans sou ogmante manje kondwi pa egi 24hr privasyon manje (Will et al., 2004). Enfliyans BLA sa a sou mezi espesyalman yon modèl pou eden manje te plis karakterize pou montre BLA inactivation anpeche konsomasyon ogmante kondwi pa andedan-Acb DAMGO, ankò kite konpòtman apwòch manje entak, patikilyèman apre konsomasyon nan rejim alimantè a te fini. Pandan ke yon karakterizasyon pi bon ak entèpretasyon nan done sa yo ki te bay nan Will ak kòlèg li (2009), BLA inactivation parèt sèlman entèfere ak faz la konsomasyon nan wo-grès konpòtman manje, men se pa faz la apwòch manje kondwi pa deklanchman opioid nan ACB la.
Istorikman, konpòtman rekonpanse yo te klase nan yon apeti faz, ki gen ladan konpòtman apwòch ki enplike nan chèche stimuli rekonpanse tankou manje, ak nan akizisyon faz, ki gen ladan konpòtman tankou konsomasyon nan manje (Craig, NAN; Lorenz, 1950). Sa a te distenksyon obsève pou dè dekad epi li rete popilè jodi a kòm teyori nan motivasyon ki gen rapò ak manje ak lòt rekonpans evolye (Nicola ak Deadwyler, NAN; Berridge, NAN; Kelley et al., 2005; Boul ak Balthazart, NAN; Jager & Witkamp, 2014). Tantativ pou defini fizyoloji kache faz distenk konpòtman sa yo enkli modèl kote tretman te entèfere ak ekspresyon yon faz san enfliyanman lòt laIkemoto ak Panksepp, 1996; Hanlon et al., 2004; Zhang et al., 2003; Jennings et al., 2015). Etid sa a prezante egzaminasyon fizyoloji ki anba a nan yon modèl inik nan konpòtman manje kote yo te faz la consummatory ak apeti disiste.
Eksperyans yo prezante envestige modèl yo nè nan aktivite kache konpòtman yo manje appetitive ak consummatory kondwi pa andedan-Acb DAMGO. Premyèman, jwenn premye a (Will et al., 2009) te repwodwi etabli site la pou dezyèm eksperyans lan, ki gen ladan bezwen nan detèmine yon kantite lajan apwopriye nan rejim alimantè limite bay nan etid la dezyèm fwa. Nan dezyèm eksperyans lan, apre chak nan kat kondisyon tretman dwòg, tout matyè yo te bay aksè a yon kantite limite nan rejim alimantè ki gen anpil grès, bay chak gwoup tretman eksepte DAMGO-sèlman trete gwoup la, yo rive jwenn sasyete (sètadi kantite obsève anba anons kondisyon lib nan eksperyans 1). Imedyatman apre sesyon alimantasyon 2hr la, rat yo te sakrifye pou pran modèl aktivite neral ki asosye avèk modèl konpòtman ki parèt. Done anvan yo demontre ke antyèman nan konsomasyon ak konpòtman apwòch konsomasyon Hopper rive nan min nan premye 30 nan sesyon-an tès apre tout tretman yo, men andedan-Acb DAMGO, avèk oswa san BLA inaktivasyon pwodwi nivo gaya nan konpòtman apwòch manje pandan dènye min 90 nan sesyon tès 2hr (Will et al., 2009). Se poutèt sa, aktivite neral ki asosye ak motivasyon an apwòch ak konsome yo ta dwe reprezante nan rat ki resevwa andedan-acb DAMGO tretman san yo pa BLA inaktif. Kontrèman, modèl aktivite neral nan rat k ap resevwa andedan-Acb tretman DAMGO ak inaktif BLA ta dwe reflechi egal motivasyon apwòch, men reflete redwi motivasyon konsome.
Aktivite neral te egzamine nan rejyon nan sèvo ke yo rekonèt pou fè medyasyon konpòtman enterè enteresan ak enteresan, ki gen ladan zòn tegmental ventral (VTA), ipotalamis dorsal medsin (DMH), zòn lokal nan ipotalamik la (PeF), ak ipotalik lateral (LH)Kelley et al., 2005; Zheng et al., 2007; Fields et al., 2007). Administrasyon Intra-Acb DAMGO ogmante ekspresyon C-Fos nan newòn ipèrfamik perifornikal e ekspresyon sa a mande pou orexin siyal nan VTA a (Zheng et al., 2007). Kolektivman, sa yo ak lòt done sijere ke modèl sa a nan manjabilite-pwovoke manje nan Akb µ-opyat aktivasyon reseptè ka rekrite Pef orexin newòn ak amelyore orexin siyal nan VTA a ki ka nan vire modile DA eflèktif ak ak mPFC, kondwi manje konpòtman. (Fields et al., 2007). Efè BLA deklanchman ki nesesè yo obsève yon ogmantasyon nan andedan-Acb DAMGO segondè-grès konsomasyon, men se pa wo-grès konpòtman apwòch, yo pral eksplore.
Metòd
Rat
Trant-sis rat gason Sprague-Dawley (Harlan Sprague-Dawley, Inc., Indianapolis, IN) peze 300-400 g, yo te loje nan pè nan plèksiglas kaj nan yon chanm koloni klima ki kontwole nan yon tanperati ki nan 22 ° C. Rat yo te kenbe sou yon 12-hr limyè-nwa sik, ak tout eksperyans yo te fèt pandan faz la limyè (0700-1900) ant èdtan yo nan 1200 ak 1500. Sof si yo di yon lòt jan, rat te gen aksè lib nan laboratwa Chow ak dlo pou bwè anvan ak nan tout eksperyans lan. Gwoup yo te gen rat 6 – 8. Tout pwosedi eksperimantal yo te fèt ann akò ak pwotokòl ki te apwouve pa Inivèsite Missouri Enstitisyonèl Swen Animal ak Sèvi Komite.
Operasyon
Rat yo te anestezi ak yon melanj de ketamin ak ksilin (90 mg / kg ak 9 mg / kg, respektivman; Sigma, St. Louis, MO), ak 2 kouche nan kanulas gid asye pur (kalib 23, 10 mm) yo te sterotaxically vize. bilateralman pi wo pase fwontyè a nan nwayo a ACB ak koki lateral ak BLA ak sekirite nan zo bwa tèt la ak vis asye pur ak limyè résine maladi (Pwovizyon pou Dan nan New England, Boston). Apre operasyon an, stylets fil yo te mete nan cannulas yo gid yo anpeche okluzyon. Kowòdone pou sit sa yo ki vize yo jan sa a: ACB: AP, + NAN; ML, ± 1.4; DV, -2.0; BLA: AP, -7.8; ML, ± 2.8; DV, -4.7 (Kowòdone DV reprezante plasman nan zegwi piki 8.6mm ki pwolonje 12.5mm ventral nan kanul a).
Aparèy
Evalyasyon konpòtman nan manje te pran plas nan yon chanm separe de chanm koloni an nan uit Plexiglas (30.5 cm × X cm x × CM) manje chanm (Med Associates, St Albans, VT). Rat te gen aksè a ad libitum dlo ak apeprè 24.1g nan rejim alimantè a gou, eksepte kote yo te note. Manje chanm yo te ekipe ak kat travès enfrawouj Lokomotè aktivite ki sitiye 21.0 cm apa nan tout longè a nan chanm lan ak 35 cm anwo etaj la. Yon echèl otomatik kap peze pou Hopper a manje kontwole konsomasyon an nan manje. Yon gwo twou san fon infrared spanning antre nan Hopper a manje detèmine kantite ak dire nan chak antre tèt nan zòn nan Hopper. Hopper nan manje ak boutèy dlo yo te chita sou bò a menm (kwen opoze) nan yon miray chanm, ak yon plato dechè detachable te lokalize anba etaj la ba. Mezi yo enkli lokomotè aktivite (kantite reyon orizontal gwo bout bwa), dire nan antre Hopper (mwayèn dire nan kraze gwo bout bwa nan papòt la nan Hopper a), Hopper antre (kantite repo gwo bout bwa nan papòt la nan Hopper a), ak kantite lajan boule ( gram nan rejim alimantè boule). Peryòd egzamen an fèt nan siveyans konpòtman nan chanm yo manje pa yon òdinatè kouri Med-PC lojisyèl (Med Associates Version IV, St Albans, VT).
pwosedi
Dwòg Microinjection
D-Ala2, NMe-Phe4, Glyol5-enkephalin (DAMGO; Rechèch Biochemicals, Natick, MA) ak muscimol (Sigma, St Louis, MO) te tou de fonn nan esteril 0.9% saline. Kontwòl veyikil la te toujou esterilize sal 0.9%. Perfusion yo te lage ak yon ponp microdrive (aparèy Harvard, South Natick, MA), ki konekte pa vle di nan tub PE (PE-10), pandan y ap rat yo te dousman pòtatif. Twa-twa-kalib enjektè 12.5-mm yo te itilize, pwolonje 2.5 mm pi lwen pase nan fen cannulas yo gid. To piki a te 0.32 µl / min pou Acb la ak 0.16 µl / min pou BLA a, avèk dire total perfusion ki te 93 yo, sa ki lakòz volim 0.5-µl ak 0.25-µl, respektivman. Yon minit anplis te pèmèt pou difizyon.
konsepsyon
Eksperyans 1
Sèvi ak yon-nan sijè konsepsyon, tout gwoup rat te resevwa chak nan kat konbinezon tretman dwòg sou kat jou tretman apa nan yon lòd counter-balanse. Tout tès konpòtman pou tou de eksperyans yo te kòmanse 1 semèn pòs-operasyon nan Med-Associates chanm yo konsomasyon konsomasyon manje. Rat yo te bay aksè a rejim alimantè a nan chanm sa yo pou 2hr chak jou sou 6 jou youn apre lòt. Sou 5 lath jou, te yon piki 10-mm eleman e kite nan plas pou XNX min, ki pa gen okenn volim enjeksyon. Sou 2 lath jou, te yon piki 12.5-mm eleman, ak sal administre pou 93 s. Nan chak jou tès, miskimol (20 ng / 0.25 µl / bò bilateralman) oswa saline te enfuze nan BLA a, ki te swiv imedyatman pa DAMGO (0.25 mg / 0.5 µl / bò bilateralman) oswa saline nan ACB a, konsa rezilta nan kat tretman posib. konbinezon. Sesyon an tès 2hr te kòmanse imedyatman apre piki a sot pase yo ak rat yo te bay ad libitum aksè a wo-grès rejim alimantè. Te gen omwen XNUM jou ant jou tretman an.
Eksperyans 2
Kat gwoup nan rat, lè l sèvi avèk yon ant-sijè konsepsyon, ak chak gen bilateral cannulas ki vize a ACB la ak BLA. Rat yo te bay aksè a rejim alimantè a nan chanm sa yo pou 2hr chak jou sou 6 jou youn apre lòt ak pwosedi piki yo te idantik ak eksperyans 1, sepandan chak rat ta sèlman ap resevwa 1 nan konbinezon yo tretman dwòg 4 posib. Konsomasyon an ki gen anpil grès rejim alimantè sou 6th jou a nan tretman debaz te itilize counter-balans plasman tretman dwòg asire menm jan debaz modèl kontwòl konsomasyon. Sou 8 lath jou, bèt yo te bay 1 nan tretman 4 dwòg posib ak aksè nan 8g nan rejim alimantè pou 2hr.
Istolojik Verifikasyon Kanulasyon Plasman an
Imedyatman apre sesyon alimantè 2hr la, bèt yo te retire nan chanm manje yo, pwofondman anestezi ak ketamin ak ksilaz (90 mg / kg ak xNUMX mg / kg), ak transaryal perfused. Sèvo yo te retire ak plonje nan formalin (9%) lannwit lan nan 10 ° C ak Lè sa a, cryoprotected pa transfere nan yon solisyon sikwoz (4%) nan 20 ° C. Yo te ranmase seksyon seri jele (4 µm) nan tout limit nan sit piki a, monte sou glisad jelatinize, ak tache kont kalsyòm ak vyolèt. Des plasman kanulèz yo te Lè sa a, analize pou presizyon ak done ki sòti nan rat ak kane deplace yo pa te enkli nan analyses yo.
Immunohistochemistry
Sèvo yo te tranche nan epesè 40 µm ak ki estoke nan solisyon tampon 0.1M fosfat (PB, pH 7.4) nan 4 ° C. Pwotokòl la gratis tach imunofluoresans tache te jan sa a: Seksyon yo te lave (3 × XNUM min) nan PBS. Sit obligatwa ki pa espesifik yo te bloke lè l sèvi avèk solisyon bloke [yon melanj 10% nòmal sewòm bouk kabrit (Jackson Immuno Rechèch, West Grove, PA) ak 10% Triton X-0.3 (Sigma) nan PBS)] pou XN h. Next, seksyon yo ki te enkubasyon nan yon melanj bwason ki gen lapen anti-c-Fos antikò (100: NOU; Calbiochem) ak poul anti-tyrosin idroksilaz (VTA) oswa sourit anti-orexin-A (ipotalamik) lannwit lan. Seksyon yo te lave (2 × 1 min) nan PBS ki gen 5000% Tween-4 (PBST). Next, seksyon yo te enkubatèr pou èdtan 30 nan yon tanpon bloke, ak yon bwason nan antikò segondè: Alexa Fluor 0.05 kabrit Anti-lapen IgG ak Alexa Fluor 20 kabrit Anti-poul IgG (Invitrogen). Tout antikò segondè te itilize nan konsantrasyon rekòmande nan 2: 555. Seksyon yo te lave (488 × 1 min) nan PBST ak PB (500 × 4 min). Seksyon yo te monte sou glisad super-jèl (VWR Creole, USA) ak pèmèt yo seche nan tanperati chanm pandan y ap pwoteje soti nan limyè. Sèvi ak ProLong Twous ki monitè kè bebe Anti-fenn (Invitrogen) tranch yo te kouvri glise ak ki estoke nan 30 ° C. Tout enkubasyon yo te fèt nan tanperati chanm eksepte sa yo ki nan antikò prensipal yo ki te enkubasyon nan 2 ° C. Pou kontwole varyasyon nan reyaksyon imunoyistochimik, tisi ki soti nan diferan gwoup tretman yo te reyaji ansanm. Anplis de sa, tach te absan nan eksperyans kontwòl ak omisyon nan antikò prensipal yo.
Analiz estatistik konpòtman
Pou eksperyans 1, tout mezi pou manje nan sesyon total 2-hr ak nan tout kondisyon tretman yo te analize ak yon de-faktè nan-sijè ANOVA (Tretman Acb X Amygdala Tretman), ak nivo yo pou chak faktè yo te swa veyikil oswa dwòg. . Pou eksperyans 2, tout mezi manje yo te analize lè l sèvi avèk yon de-faktè ant-sijè ANOVA (Acb Tretman X Amygdala Tretman), ak nivo yo pou chak faktè yo te swa veyikil oswa dwòg.
Konte pwosedi, D ', ak analiz estatistik
Pou evalyasyon an kantitatif nan ekspresyon iminoraktivite nan ipotalamik la (ki gen ladan ipotalam lateral la, perifornical zòn, dorsomedial ipotalamus) ak VTA, twa tranch anatomik tisi paralèl ki soti nan chak emisfè (6 total pou chak rejyon) yo te analysé ak mwayenn. Tout imaj yo te pwodwi nan swa 4 × oswa 10 × objektif ak yon mikwoskòp confocal lè l sèvi avèk lojisyèl an D 'Slidebook 4.3 (Entelijan Imaging Innovations, Denver, CO). Tou depan de rejyon an patikilye, yo te imunoreactivite fliyoresan nan yon tranch 40µm imaged pou swa C-Fos sèlman, c-Fos / TH, oswa c-Fos / OrexinA chanèl ki make, separe ak yon seri limit san konte. Imaj yo te Lè sa a, parèt sou yon ekran plen lè l sèvi avèk java ki baze sou domèn lojisyèl gratis ImageJ (National Enstiti nan Sante, Bethesda, MD, USA), kòm yon pwosesis imaj ak pwogram analiz ki pèmèt balisage chak newòn endividyèl ak pozitif tach pou chak chanèl te genyen. konte nan yon mòd avèg-a-tretman. Newòn yo te klase kòm C-Fos sèlman, peptides sèlman, oswa doub-ki make anba prezans nan pi wo a background pwodwi antikò reyaksyon nan nwayo a selil.
Tout zòn yo te deziyen ak trase lè l sèvi avèk rat sèvo Atlas la (Paxinos & Watson, 1998). Vantal Tegmental Zòn ak tirozin Hydroxylase; seksyon chwazi yo te ant -5.2 ak -5.5mm anterior a bregma. Nan chak nivo, rejyon an ki gen selil hydroxylase tirozin (TH-IR) ak c-Fos-IR yo te konte nan tou de emisfè yo. Hypothalamus ak Orexin-A; seksyon chwazi yo te ant -2.8 ak -3.3 mm anteryè ak bregma. Rejyon ipotalamik la (ant -2.8 ak -3.3 mm) yo te jwenn ki gen orèksin-A selil pozitif te divize an twa rejyon soti nan medyal lateral. Tout selil andedan, ventral, ak dorsal nan forniks la te enkli rejyon an presegondè ki make kòm perifornical (PeF). Orexin-A-make selil lateral nan rejyon sa a yo te enkli nan ipotalamus lateral la (LH), ak sa yo medyal ki soti nan fornix la te nan gwoup medyal la (DMH), ki sipèpoze ak ipotalamus la dorsomedial. Newòn yo te konte nan tou de emisfè yo.
rezilta
Tout efè tretman yo endike nan referans a kote (yo) nan dwòg oswa administrasyon veyikil (sètadi andedan-Acb DAMGO). Kòm tout rat yo te bay tou aksè ak boule yon kantite limite nan rejim alimantè ki gen anpil grès, tout chanjman ki fèt nan konpòtman manje ki asosye (Exp. 1 ak 2) ak modèl activation neral (Exp. 2) se nesesèman efè a konbine nan chak dwòg respektif. tretman ak rejim alimantè boule.
Manje konpòtman
Eksperyans 1
Enfliyans BLA inaktif sou konpòtman manje ki gen anpil grès kondwi pa andedan-AC administrasyon DAMGO.
Konsomasyon
Jan yo montre nan Fig. 1a, yon ANOVA ki fèt sou done yo konsomasyon manje devwale yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman Acb (F (1, 7) = 13.9, p <.01), tretman BLA (F (1, 7) = 8.6, p <.05), ak Acb × BLA entèraksyon tretman (F (1, 7) = 8.9, p <.05). Analiz pòs-hoc revele ke intra-Acb DAMGO + intra-BLA tretman saline mennen nan nivo konsomasyon siyifikativman pi wo (p <.05) konpare ak tou de tretman kontwòl (entra-Acb saline + entra-BLA saline; intra-Acb saline + entra-BLA muscimol), ak tretman intra-BLA muscimol bloke ogmantasyon sa a (p <.05).
Dire antre Hopper manje
Jan yo montre nan Fig. 1b, yon ANOVA ki fèt sou done yo antre Hopper dire dire devwale yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman ak (F (1, 7) = 36.3, p <.001), tretman BLA (F (1, 7) = 12.1, p <.05), ak Acb × BLA entèraksyon tretman (F (1, 7) = 16.5, p <.005). Analiz pòs-hoc devwale ke intra-Acb DAMGO + entra-BLA tretman muscimol mennen nan siyifikativman pi wo total manje Hopper tan dire konpare ak tout lòt tretmanp <.001), ki pa gen okenn lòt tretman siyifikativman diferan youn ak lòt.
Antre Hopper Manje
Jan yo montre nan Fig. 1c, yon ANOVA ki fèt sou done yo antre Hopper manje revele yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman Acb (F (1, 7) = 10.6, p <.05), pandan y ap tretman BLA apwoche siyifikasyon (F (1, 7) = 3.89, p = .08), ak entèraksyon Acb × BLA tretman (F (1, 7) = 7.9, p <.05). Analiz pòs-hoc revele ke intra-Acb DAMGO + entra-BLA muscimol tretman mennen nan siyifikativman plis antre Hopper manje konpare ak tout lòt tretman (p <.05), ki pa gen okenn lòt tretman siyifikativman diferan youn ak lòt.
Locomotor aktivite
Jan yo montre nan Fig. 1c, yon ANOVA ki fèt sou done yo antre Hopper manje revele yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman Acb (F (1, 7) = 23.5, p <.005), men pa gen efè prensipal tretman BLA (F (1, 7) = 1.4, p > .05), e pa gen okenn entèraksyon tretman Acb × BLA (F (1, 7) = .056, p > .05).
Eksperyans 2
Enfliyans sou inaktivasyon BLA sou konpòtman manje ki gen anpil grès ak modèl activation neral kondwi pa administrasyon DAMGO andedan-AC.
Plasman pou tretman dwòg te balanse avèk nivo konsomasyon wo grès ki soti nan 6 lath jou de baz la. Nivo konsomasyon sa yo te jan sa a: SAL-SAL, 5.1g; SAL-DAM, 4.9g; MUSC-SAL, 4.9g; MUSC-DAM, 4.8g.
Konsomasyon
Jan yo montre nan Fig. 2a, yon ANOVA ki fèt sou done yo konsomasyon manje devwale yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman Acb (F (3, 24) = 26.60, p <.001), men pa gen efè tretman BLA (F (3, 24) = 0.02, ns) oswa yon entèraksyon tretman Acb × BLA (F (3, 24) = 0.61, ns).
Antre Hopper Manje
Jan yo montre nan Fig. 2b, yon ANOVA ki fèt sou kantite total antre Hopper atravè tout sesyon an manje devwale yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman Acb (F (3, 24) = 8.55, p <.01), men pa gen efè tretman nan tretman BLA (F (3, 24) = 1.68, ns) oswa yon entèraksyon tretman Acb × BLA (F (3, 24) = 0.39, ns).
Dire antre Hopper manje
Jan yo montre nan Fig. 2c, yon ANOVA ki fèt sou dire total de tout antre Hopper atravè tout sesyon an manje devwale yon efè enpòtan siyifikatif nan tretman Acb (F (3,) = 24, p = .001), men okenn efè tretman BLA (F (3, 24) = .62, ns) oswa yon entèraksyon tretman Acb × BLA (F (3, 24) = 0.07, ns).
Locomotor aktivite
Jan yo montre nan Fig. 2d, yon ANOVA ki fèt sou total la lokomotor aktivite nan tout sesyon an manje devwale yon siyifikatif prensipal efè tretman Acb (F (3, 24) = 12.93, p = .001), men okenn efè tretman BLA (F (3, 24) = .198, ns) oswa entèraksyon Acb × BLA (F (3, 24) = 0.61, ns).
Immunohistochemistry
Zòn ventral Tegmental
Jan yo montre nan Fig. 3a, yon ANOVA ki fèt sou c-Fos selil IR nan VTA a revele yon efè siyifikatif nan tretman Acb (F (3, 24) =, 25.67 p <.001), men pa gen efè tretman BLA (F (3, 24) = 1.13, ns) oswa entèraksyon ant tretman (F (3, 24) = 2.80, ns). Yon ANOVA ki fèt sou pousantaj selil TH-IR ki montre c-Fos IR revele yon efè tretman Acb (F (3, 24) = 6.33, p <.05), men pa gen efè tretman BLA sou pousantaj TH- Selil IR ki montre c-Fos IR (F (3, 24) = .07, ns) pa gen okenn entèraksyon enpòtan ant tretman (F (3, 24) = .63, ns).
Perifornical ipotalamus
Jan yo montre nan Fig. 3b, yon ANOVA ki fèt sou c-Fos IR nan PeF la (rejyon analize montre nan Fig. 5b) devwale yon efè siyifikatif nan tretman Acb (F (3, 24) = 30.78, p <.001), tretman BLA (F (3, 24) = 30.52, p <.001) ak yon Acb × BLA entèraksyon tretman (F (3, 24) = 8.75, p <.01). Yon ANOVA ki fèt sou pousantaj nan selil OrxA-IR ki montre c-Fos IR devwale yon efè enpòtan nan tretman Acb (F (3, 24) = 55.85, p <.001), tretman BLA (F (3, 24) = 23.52, p <.001), ak yon Acb × BLA entèraksyon tretman (F (3, 24) = 14.32, p <.001). Nan Figi 5a ak 5b, analiz pòs hoc yo montre ke BLA inaktivasyon siyifikativman diminye entra-Acb DAMGO pwovoke ekspresyon c-Fos epi redwi kantite selil orexin ki eksprime c-Fos (p <.05).
Dorsomedial ipotalamus
Jan yo montre nan Table 1, yon ANOVA ki fèt pou kantite selil IR c-Fos nan DMH la revele yon efè siyifikatif nan tretman intra-Acb (F (3, 24) = 20.19, p <.001), men pa gen efè nan tretman intra-BLA ( F (3, 24) = 1.63, ns) oswa yon entèraksyon tretman Acb × BLA (F (3, 24) = 0.05, ns). Yon ANOVA ki fèt sou pousantaj selil OrxA-IR ki montre c-Fos IR revele yon efè siyifikatif nan tretman Acb (F (3, 24) = 13.39, p <.001), tretman BLA (F (3, 24) = 5.85, p <.05), men pa gen okenn entèraksyon tretman Acb × BLA (F (3, 24) = .89, p = .36).
Lateral ipotalamus
Jan yo montre nan Table 1, yon ANOVA ki te fèt pou kantite c-Fos selil IR nan LH a devwale pa gen efè nan Acb ((F (3,24) = .11, ns) oswa tretman BLA ((F (3, 24 = 6.82, p < .05) epi pa gen okenn entèraksyon (F (3,24) = .26, ns) .Yon ANOVA ki fèt sou pousantaj nan selil OrxA-IR ki montre c-Fos IR devwale pa gen okenn efè enpòtan nan tretman Acb (F (3, 24 ) = .64, ns), tretman BLA (F (3, 24) = .08, ns), oswa yon entèraksyon nan tretman (F (3, 24) = .77, ns.)
Diskisyon
Anba kondisyon aksè ad libitum ki gen anpil grès, inaktivasyon BLA te redwi ogmantasyon konsomasyon wo grès ki te pwodwi pa andedan-Acb DAMGO, pandan y ap kite ekzagere konpòtman apwòch manje Hopper intact, ki konfime rapò a anvan (Will et al., 2009). Dezyèm eksperyans lan egzamine fenomèn sa yo menm, men anba limite rejim alimantè ki gen anpil grès kondisyon aksè, sa ki pèmèt tout gwoup tretman eksepte andedan-ACB DAMGO sèlman trete gwoup la, yo rive jwenn sasyete (sètadi konsome kantite obsève anba kondisyon lib ad nan Exp. 1). Intra-ACB sal trete bèt, avèk oswa san BLA inaktif, boule nivo menm jan an ki gen anpil grès rejim alimantè ak parèt nivo menm jan an konpòtman apwòch, kòm prevwa. De gwoup tretman ki enterese an patikilye, moun k ap resevwa DAMGO andedan-ACB avèk oswa san BLA inactivation, boule prèske tout rejim alimantè a wo-grès ki disponib nan premye min nan 30hr sesyon an tès 2hr ak parèt modèl ki idantik nan konpòtman apeti (sètadi nimewo. nan antre Hopper manje, dire antre Hopper manje) sou min nan 90 final, jan sa prevwa. Tretman Intra-Acb DAMGO egzajere tou de kantite ak dire nan konpòtman apwòch Hopper manje kèlkeswa BLA inaktivasyon, konpare ak tou de enteryè-AC saline trete gwoup kòm deja rapòte (Will et al., 2009). Importantly, jan obsève nan eksperyans 1 ak deja (Will et al., 2004, 2009), andedan-ACb tretman DAMGO, san yo pa BLA inaktif, mennen nan konsomasyon nivo omwen doub kantite lajan yo bay la anba kondisyon an aksè limite. Se poutèt sa, modèl aktivite neral nan rat ki te resevwa andedan-acb DAMGO tretman san yo pa BLA inaktif ta dwe reflete tou de motivasyon an apwòch ak konsome plis manje pi lwen pase sa ki te disponib. Kontrèman, modèl aktivite neral nan rat k ap resevwa andedan-Acb tretman DAMGO, ak BLA inaktif la, yo ta dwe reflete yon motivasyon ogmante a. apwòch manje a, men yon motivasyon redwi pou konsome manje anplis, konpare ak rat trete avèk DAMGO andedan-ACb san BLA inaktif. Sa a se kritik pa sèlman raison la pou konsepsyon an, men entèpretasyon nan done yo kounye a. Nivo nan rejim alimantè ki disponib te chwazi pa sèlman yo kenbe nivo konsomasyon nan yon seri limite atravè gwoup, men tou asire rat nan tout gwoup tretman, eksepte gwoup la DAMGO-sèlman, rive jwenn oswa satiated sasyete (jan yo detèmine pa eksperyans 1 ak anvan yo rezilta yo, gade Will et al., 2009).
Administrasyon Intra-Acb DAMGO ogmante VTA c-Fos IR siyifikativman nan newòn dopaminergic konpare ak tretman kontwòl saline, ak nan administrasyon intra-BLA nan muscimol pa te gen okenn enfliyans sou ogmantasyon sa a. Previous rechèch sijere ke ogmante nan c-Fos IR nan VTA a ak an patikilye, VTA Dopamine (DA) newòn, jwe yon wòl santral nan rekonpans, motivasyon, ak dejwe dwòg (...Park & Carr, 1998; Zhang & Kelley, 2000; Cason et al., 2010). Administrasyon antagonist Dopamine nan blòk ACB konpòtman apwòch apwòch manje ankò pa gen okenn efè sou grangou-pwovoke konsomasyon chow (Baldo et al., 2002) oswa konsomasyon andidib ACB DAMGOWill et al., 2006). Administrasyon entè-ACb nan agonis Dopamine ogmante pwogresif-rapò repons pou yon ranfòse manje, men pa gen okenn efè sou manje gratis.Zhang et al., 2003). Done sa yo ak lòt moun sijere ke ekzajere konpòtman apwòch yo manje apwopriye obsève nan tou de gwoup tretman administre andedan-Acb DAMGO, avèk e san BLA inactivation, yo medyatè pa ogmante aktivite nan VTA newamin dopaminergic.
Modèl la nan Pef orexin-Yon aktivite nerono alimèt moute ak modèl yo konsomasyon tipikman obsève sa yo menm tretman efè anba kondisyon sa yo aksè libWill et al, 2009, 2004), ak tretman andedan-ACB DAMGO mennen nan pi wo konsomasyon pase nenpòt ki lòt tretman. Nou menm tou nou te jwenn ke andedan-ACB DAMGO ogmante DMH c-Fos aktivite kèlkeswa tretman BLA, men se sèlman andedan-DAMGO pou kont li ogmante pwopòsyon an nan newòn orexin eksprime c-Fos konpare ak kontwòl. Malgre wòl li nan konpòtman manje DAMGO-induit (Zhang & Kelley, 2000; Will et al., 2003), DAMGO pa t 'ogmante siyifikativman LH c-Fos aktivite, byenke Zhang ak Kelley (2000) pa t 'pèmèt bèt yo rive jwenn sasyete.
Ipotalamus la te konsidere kòm yon sant pou règleman otonòm nan omeyostazi enèji; ki gen ladan regilasyon manje, eksitasyon, ak rekonpans (Kalra et al., 1999, Harris & Aston-Jones, 2006). Nòon ki eksprime peptides yo orexigenic orexin-A ak melanin-konsantre òmòn (MCH) yo konnen yo peple zòn lateral yo nan ipotalamik la (Dat Et al., 1999), an patikilye, zòn nan perifornical. Konsomasyon an nan yon rejim alimantè ki gen anpil grès obsève yo dwe kondwi pa orexin-A santralman administre (Yamanaka et al., 2000) se bloke pa anvan administrasyon naloxone antagonist opioid (Clegg et al., 2002), ki sijere yon entèraksyon nan peptides opioid ak orexin nan medyatè manje konsomasyon gou. Entè-VTA orexin-A administrasyon tou eksite neuron dopon (Borgland et al., 2006). Bloke orexin siyal nan VTA a diminye DAMGO-pwovoke manje nan yon rejim alimantè ki gen anpil grès (Zheng et al., 2007), men nan ki nivo sa a se nan diminye konpòtman yo ki ka kontribye nan ogmante konsomasyon ogmante konsomasyon se enkoni. Se poutèt sa, aktyèl la jwenn ke ogmante aktivite a dopaminèrjik VTA apre DAMGO andedan-acb te afekte pa inaktivasyon BLA, malgre diminye PeF aktivite orexin, ogmante enpòtans ki genyen nan karakterizasyon konpòtman nan tou de etap yo apeti ak consummatory nan konpòtman manje. Anplis de sa, done sa yo bay ipotèz tèste pou ekzamine enfliyans Peex orexin ak vta Dopaminergic modulasyon sou apwòch kondwi opioid ak faz consummatory nan manje.
Etid la kounye a itilize limite aksè rejim alimantè (sètadi gram disponib) kontwole pou enfliyans nan nivo konsomasyon diferans apre divès kalite tretman dwòg. Etid la tou limite egzamen li yo nan yon rejim alimantè sèl; Se poutèt sa, posiblite a rete manje ki opioid ki kondwi nan lòt rejim gou ka regle menm jan. Chwa nan rejim alimantè a gen anpil grès te kondwi pa karaktè ki sot pase yo nan rezo ki asosye devwale underlie andedan-ACB DAMGO manje ki gen anpil grès (Will et al., 2003; Baldo et al., 2013 pou revizyon), patikilyèman wòl BLA (Will et al., 2004, 2009). Se enkoni si wi ou non rezilta yo prezan yo espesifik nan rejim alimantè ki gen anpil grès, oswa si yo ta tou dwe obsève lè l sèvi avèk yon rejim alimantè altènatif. Enteresan, yon etid resan te jwenn ke menm nan mitan rejim trè manjab, gen yon diferans ki make nan modèl aktivasyon c-fos atravè rejyon manje kle regilye nan sikwi a mesocorticolimbicDela Cruz et al., 2015). Etid tan kap vini yo ap oblije detèmine si rezilta yo prezan yo espesifik a wo-grès rejim.
An rezime, done sa yo bay insight nan ki jan BLA a reponn a deklanchman opioid nan ACB a espesifikman kondwi konsomasyon, men se pa apwoche konpòtman, ki asosye ak yon rejim alimantè ki gen anpil grès. Done yo sijere ke konpòtman konsomasyon kondwi pa andedan-acb DAMGO ka rive akòz aktivite ogmante nan orexin-A newòn nan PeF la, pandan y ap ogmante konpòtman apwòch manje parèt yo dwe asosye ak ogmante aktivite dopaminèrjik VTA, ak aktivasyon BLA sèlman oblije obsève. faz konsomasyon an. Done sa yo bay yon pi bon konpreyansyon sou de konpòtman manje separasyon nan yon modèl manje ki byen karakterize. Rechèch sa a ogmante konesans nou sou sikwiyè neral ki kritik pou bay manje bon gou ak pote enplikasyon pou konprann konpòtman yo maladaptive manje ki patisipe nan devlopman obezite ak konpòtman manje-dejwe.
Remèsiman
Otè yo ta renmen rekonèt sipò nan sibvansyon DA024829 soti nan Enstiti Nasyonal la nan abi dwòg nan MJW.
Referans
- Badiani A, Leone P, Noel MB, Stewart J. Ventral zòn mekanism opioid zòn ak batman nan konpòtman enjere. Rechèch nan sèvo. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Baldo BA, Sadeghian K, Basso AM, Kelley AE. Efè selektif Dopamine D1 oswa D2 blokaj reseptè nan nwayo accumbens sou-rejyon sou konpòtman enjeksyon ak asosye aktivite motè. Behav Brain Res. KIYÈ DESEME NAN; KI JAN AN (KIJAN-NAN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Baldo BA, Pratt NOU, Will MJ, Hanlon EC, Bakshi VP, Cador M. Prensip nan motivasyon devwale pa fonksyon yo divès nan neuropharmacological ak neuroanatomical substrats kache konpòtman manje. Neurosci Biobehav Rev. 2013 Nov; 37 (9 Pt A): 1985 – 1998. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Boul GF, Balthazart J. Kouman itil se distenksyon an appetitif ak consummatory pou konpreyansyon nou sou neuroendocrine kontwòl nan konpòtman seksyèl? Èt Behav. 2008 Feb; 53 (2): 307 – 311. repons otè 315-8. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Berridge KC. Konsèp motivasyon nan newosyans konpòtman. Physiol Behav. XNUM Apr; 2004 (81): 2 – 179. Revize. [PubMed]
- Berridge KC. 'Li renmen' ak 'vle' rekonpans manje: substrats nan sèvo ak wòl nan maladi manje. Fizyoloji ak konpòtman. 2009; 97 (5): 537-550. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Wòl orexin / ipokretin nan rekonpanse k ap chèche ak adiksyon: enplikasyon pou obezite. Fizyoloji ak Konpòtman. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Clegg DJ, Air EL, SC Woods, Seeley RJ. Manje ki provoke pa orexin-A, men se pa melanin-konsantre òmòn, se opyok medyatè. Endocrinology. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Craig W. Apeti ak aversions kòm elektè nan ensten. Biyolojik Bilten. KOULYE; NAN: KIJAN-NAN. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Dat Y, Ueta Y, Yamashita H, Yamaguchi H, Matsukura S, Kangawa K, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakazato M. Orexins, peptides ipotalamik orexigenik, kominike avèk sistèm otonomik, neuroendokriyèn ak sistèm neuroreglulasyon. Proc Natl Acad Sci USA. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Dela Cruz JA, Coke T, T Karagiorgis, Sampson C, Icaza-Cukali D, Kest K, R Ranaldi, Bodnar RJ. c-Fos endiksyon nan mezosansafalik pwojeksyon chemen Dopamine objektif ak striatum dorsal apre konsomasyon oral nan sik ak grès nan rat. Sèvo Res Bull. 2015 Feb; 111: 9 – 19. [PubMed]
- Jaden HL, Hjelmstad GO, Margolis EB, Nicola SM. Neurral nan zòn tegmental ventral nan aprann konpetisyon ak ranfòsman pozitif. Revizyon Anyèl nan neroloji. KOULYE; NAN: KIJAN-NAN. [PubMed]
- Hanlon EC, Baldo BA, Sadeghian K, Kelley AE. Ogmantasyon nan konsomasyon manje oswa konpòtman k ap chèche manje ki pwovoke pa GABAergic, opioid, oswa stimulation dopaminergic nan nwayo accumbens yo: se li grangou? Sikofarmakoloji (Berl) NAN MAR; 2004 (172): NAN – NAN. [PubMed]
- Harris GC, Aston-Jones G. eksitasyon ak rekonpans: yon dikotomi nan fonksyon orexin. Tandans nan neroloji. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Ikemoto S, Panksepp J. Divilgasyon ant repons ki bon ak sa ki apati pa manipilasyon nan rejyon sèvo rekonpans yo. Behav Neurosci. XNUM Apr; 1996 (110): 2 – 331. [PubMed]
- Jager G, Witkamp RF. Sistèm andokanabinoid la ak apeti: enpòtans pou rekonpans manje. Nutr Res Rev. 2014 Jun 2; 27 (1): 172 – 185. [PubMed]
- Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Taylor JG, Huang J, Veleta K, Kantak PA, Aita M, Shilling-Scrivo K, Ramakrishnan C, Deisseroth K, Otte S, Stuber GD. Vizyalize dinamik rezo ipotalamik pou konpòtman ki apeti ak consomateur. Pòtab. 2015 Jan 29; 160 (3): 516-527. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Kalra SP, Dube MG, Pu S, Xu B, Horvath TL, Kalra PS. Kominikasyon apeti-regleman wout nan règleman an ipotalamik nan pwa kò. Revizyon andokrin yo. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Kelley AE, Baldo BA, Pratt NOU, Will MJ. Kutokritrikal-ipotalamik sikwiyon ak motivasyon manje: entegrasyon enèji, aksyon ak rekonpans. Physiol Behav. KIYÈ DESEME NAN; KIJAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Lorenz K. Metòd konparatif nan etidye modèl konpòtman natirèl. Symp. Soc. Exp. Biol. KOULYE; NAN: KIJAN-NAN.
- Nicola SM, Deadwyler SA. Pousantaj revizyon nan nwayo nwayo accumbens se Dopamine-depann epi li reflete tan an sou kokayin-ap chèche konpòtman nan rat sou yon orè rapò pwogresif nan ranfòsman. J Neurosci. KOUNYE jiyè a; NAN (KIJAN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Park TH, Carr KD. Modèl Neuranatomical nan imunorèksyon Fos tankou tankou induit pa yon repa ki gen gou ak anviwònman repa-pè nan rat saline-ak naltrexone trete. Rechèch nan sèvo. KOULYE; NAN: KIJAN-NAN. [PubMed]
- Èske MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nukle accumbens mu-opioids kontwole konsomasyon nan yon rejim alimantè ki gen anpil grès atravè deklanchman nan yon rezo distribye sèvo. J neroloji. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Èske MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Amygdala a enpòtan pou manje ki pa gen anpil grès nan pa gen pwoblèm ak medyom opioid. Neworeport. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Èske MJ, Pratt NOU, Kelley AE. Farmakolojik karakterizasyon manje ki gen anpil grès ki pwovoke pa eksitasyon opioid nan ventre striatum la. Physiol Behav. NAN SIS KI; KI NAN (KIJAN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Èske MJ, CE Pritchett, KE Parker, Sawani A, Ma H, Lai AY. Konpòtman karakterizasyon de amygdala patisipasyon nan medyatè andedan-accumbens opioid konpòtman manje kondwi. Konpòtman neroloji. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PMC gratis atik] [PubMed]
- Yamanaka A, Kunii K, Nambu T, N Tsujino, Sakai A, Matsuzaki mwen, Miwa Y, Goto K, Sakurai T. konsomasyon manje Orexin-endike enplike nan neuropeptide Y wout. Rechèch nan sèvo. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Zhang M, Kelley AE. Amelyorasyon konsomasyon nan manje ki gen anpil grès sa yo striatal mu-opioid stimulation: kat mikroinjection ak fos ekspresyon. Newoscience. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
- Zhang M, Kelley AE. Konsomasyon nan solisyon sakre, sèl, ak etanòl ogmante pa perfusion nan yon agonist opioid mu nan nwayo accumbens la. Psychopharmacology (Berl) NAN; NAN (NAN): NAN-NAN. [PubMed]
- Zhang M, Balmadrid C, Kelley AE. Nukle accumbens opioid, GABaergic, ak dopaminèrjik modulasyon nan motivasyon manje gou: efè kontras revele pa yon etid rapò pwogresif nan rat la. Behav Neurosci. XNUM Apr; 2003 (117): 2 – 202. [PubMed]
- Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Siyal Orexin nan zòn nan tegmental ventral obligatwa pou apeti ki gen anpil grès pwovoke pa eksitasyon opioid nwayo accumbens yo. J nan neroloji. KOULYE; KI NAN (KIYEN): KIJAN-NAN. [PubMed]
;