Fizik konpòtman. Otè maniskri; disponib nan PMC 2012 Oct 24.
Pibliye nan fòm final edited kòm:
Physiol Behav. NAN Oktòb NAN; KOUMAN POU (NAN): KIJAN – NAN.
Pibliye sou entènèt 2011 Me 24. doi: 10.1016 / j.physbeh.2011.05.018
PMCID: PMC3480195
NIHMSID: NIHMS299784
Abstrè
Syans anvan yo sijere ke suk ak manje ki kondanen nan chanjman konpòtman ak nerokimiken ki sanble ak sa yo wè ak dejwe dwòg, ki gen ladan siy retrè opiate-tankou. Etid yo ap parèt ki montre plizyè endis newochimik ak konpòtman nan dejwe lè bèt overeat yon rejim alimantè ki gen anpil grès. Objektif etid sa a se te itilize alimantasyon likid ak solid ki gen anpil sik ak kontni grès pou detèmine si wi ou non retrè opiyatif wè apre konsomasyon fleri nan rejim sa yo nan rat Sprague Dawley. Yo te bay gwoup kontwòl yo ad lib aksè nan manje a dous-grès oswa chow estanda. Lè sa a, tout rat yo te bay yon batri nan tès ki mezire siy opiate-tankou retrè, ki gen ladan siy somatik nan detrès, ki gen plis anlè plis-labirent enkyetid, ak ipopozisyon lokomoteur. Ni naloxone-presipite (3 mg / kg) ni privasyon-induit retrè te obsève nan rat ki te konsève sou yon nitrisyonèlman konplèt rejim dous-grès rejim alimantè, yon dous, rejim alimantè ki gen anpil grès complétée ak chow estanda rat, oswa yon likid dous ... manje grès. Pli lwen, rediksyon pwa kò a 85%, ki se li te ye nan potansi efè yo ranfòse nan sibstans ki nan abi, pa t 'afekte naloxone-presipite siy retrè opiate-tankou. Kidonk, kontrèman ak rezilta anvan yo rapòte konsènan rat ak anrejistreman aksè nan yon solisyon sikwoz, rat ki repa egzajere manje dous-grès konbinezon pa montre siy opiate-tankou retrè nan kondisyon yo teste yo. Done sa yo sipòte lide ke konsomasyon twòp nan eleman nitritif diferan kapab lakòz konpòtman ki asosye ak adiksyon nan diferan fason, e ke konpòtman yo ki ta ka karakterize "depandans manje" ka subtipi ki baze sou konpozisyon an nitrisyonèl nan manje nan manje.
entwodiksyon
Sistèm nè ki motive ak ranfòse k ap chèche manje ak konsomasyon tou souliye konpòtman ki asosye ak abi dwòg [...1-5]. Baze sou sa a sipèpoze newolojik, li te sijere ke konsomasyon an nan sèten manje ta ka rezilta tou nan dejwe ki tankou konpòtman [...6-8]. Etid anvan yo nan laboratwa nou an ak lòt moun sijere ke aksè limite nan sik kondwi a chanjman konpòtman ak amenajman nan Dopamine (DA) ak sistèm opyòd ki menm jan an, menm pi piti nan grandè, nan sa yo wè pandan dejwe dwòg.8].
Nan konpòtman sa yo ki tankou depandans ki asosye ak konsomasyon dòz ki gen sik ladan, prèv ki montre tankou retrè opyat se yon enterè patikilye. Sèvi ak modèl bèt laboratwa nou yo ki gen pwoblèm manje ki gen sik ladan, nou te jwenn ke lè yo te administre opioid antagonist naloxone a, rat yo montre siy somatik nan retrè, ki gen ladan dan tranbleman, latranblad forepaw, ak tèt tèt-tranble, kòm byen ke enkyetid sou elve nan plis-labirent . Pli lwen, konpòtman sa yo makonnen ak yon diminisyon nan lage nan DA nan nwayo accumbens yo ak yon ogmantasyon nan liberasyon an nan asetilkolin [9], yon dezekilib neurochimik ke yo te wè pandan retrè nan plizyè dwòg abi [...]10, 11]. Siy konpòtman ak newochimik nan retrè opiyab tankou te obsève tou san yo pa itilize nan naloxone (sètadi, natirèlman) apre yon vit nan rat ak yon istwa nan repa egzajere manje sik [12]. Gen lòt ki te note ke rat ak yon istwa nan aksè limite nan sik gen yon diminisyon nan tanperati kò lè sik la te retire pou XN h [13] epi yo ka montre siy konpòtman agresif14], tou de ki yo tou aksepte indications nan retrè. Pli lwen, yon rejim alimantè ki gen anpil sik te montre pouse siy enkyetid ak hyperphagia ki parèt yo medyatè pa sistèm òmòn òtograf relijye nan sèvo [...15].
Lòt etid yo te evalye aspè nan dejwe ki ta ka leve nan repons a lòt manje gou, tankou moun rich nan grès oswa konbinezon dous-grès. Naloxone te rapòte pou pwodwi siy retrè opyatif tankou nan rat manje yon rejim alimantè kafeterya-style, ki genyen yon varyete de grès- ak sik ki rich manje [16]. Plis dènyèman, li te montre ke rat ekspoze a rejim rich nan grès pral angaje yo nan konpòtman anpil diferan sijestif nan dejwe [...11, 17-19], men ensidan an nan retrè opiate-tankou pa te sistematik etidye nan yon kontèks twòp nan grès, epi yo pa nan kontèks la nan limite-aksè orè.
Etandone ke tou de grès ak sik afekte sistèm opyòd [...3], ke makronutriman sa yo pafwa boule nan eksè e yo ka gen yon wòl nan obezite ki asosye ak twòp.20, 21] e petèt dejwe manje [...]22, 23], objektif etid sa a se te pou detèmine si ou wè retrè opiyab tankou nan rat yo konsève sou orè ki gen aksè limite nan rejim rich nan sik ak grès ki lakòz manje repa egzajere. Nan plizyè fason, konsepsyon sa a se analogue nan kondisyon an manje moun, kòm epizòd yo frison nan kèk moun yo souvan enkli ladan konbinezon nan macronutrients sa yo [...20, 21, 24, 25]. Pli lwen, etid la prezan examines efè a ki manje repa egzajere nan konbinezon grès-sik ka gen sou ekspresyon de retrè lè rat yo nan tou de pwa kò nòmal ak redwi, depi li konnen sa yon pwa kò ki ba ka potansi efè dwòg nan abi [26]. Pli lwen, rat ak yon pwa kò ki ba lage plis DA pase pwa kontwole nòmal lè frenezi manje sik [...27], ki ka sijere yon efè ranfòse ranfòse nan yon pwa kò ki ba ki ta ka afekte gravite a nan retrè.
Materyèl ak Metòd
Metòd jeneral yo
Gason Sprague-Dawley rat yo te jwenn nan Taconic Farms (Germantown, NY) ak loje endividyèlman nan Inivèsite Princeton vivary an sou yon ranvèse 12-h limyè: 12-h fè nwa sik. Chanm nan te kenbe nan 20 ° ± 1 ° C, ak bèt yo te fè ad lib aksè nan dlo nan tout tan ak aksè nan chow laboratwa estanda, LabDiet # 5001 (PMI Nitrisyon Creole, Brentwood, MO; 3.02 kcal / g) jan sa dekri anba a. Tout pwosedi yo te apwouve pa Komite Enstitisyonèl ak Sante Animal Princeton University. Rejim yo ak pwosedi yo rezime nan Table 1.
Exp. 1: Naloxone-presipite ak espontane opiate-tankou tès retrè nan rat manje yon nitrisyonèlman konplè, grès-ak-sik-rejim alimantè ki rich.
Rat (315-325 g) te divize an kat pwa-matche gwoup (n = 10 / gwoup) ak asiyen nan youn nan kondisyon sa yo manje sa yo pou 25 jou: (yon) XN-h aksè chak jou nan dous-grès chow (Rechèch Rejim, New Brunswick, NJ, #2; 12451% grès, 45% pwoteyin, 20% idrat kabòn, 35 kcal / g) kòmanse 4.7 h apre aparisyon nan sik la fè nwa, ak estanda chow rat yo disponib sèlman pou lòt la 6 h pou chak jou; (b) 22-h aksè a chow a dous-grès lendi, mèkredi, ak vandredi (MWF) ak ad lib aksè a chow estanda wonjè pandan rès tan; (c) ad lib chow dous-grès; e (d) ad lib estanda chow (LabDiet # 5001, PMI Nitrisyon Creole, Richmond, IN; 10% grès, 20% pwoteyin, 70% idrat kabòn, 3.02 kcal / g). Manje te ranplase de fwa chak semèn. Yo te mezire manje chak jou (anvan ak apre peryòd aksè 2-h, oswa tan ki ekivalan pou la ad lib-fed gwoup). Pwa kò yo te tou mezire pandan tan sa yo nan jou 1-7 ak jou 18-24 nan aksè.
1a. Naloxone presipite tès retrè
Nan jou yo te plase 26 ak 27 rat owaza pou fè tès pou siy retrè. Tès sa yo te gaye sou 2 jou asire ke tès yo te fèt tankou fèmen nan kòmansman peryòd aksè nòmal 2-h ke posib pou chak rat. Pou teste pou siy somatik nan retrè opiatif tankou, rat yo te administre antagonist nan opioid naloxone (Sigma, St Louis; 3 mg / kg, sc). Piki te administre 6 h apre aparisyon nan sik la fè nwa, lè aksè manjabl manje ta nòmalman kòmanse. Rat nan gwoup la MWF 2-h nòmalman te gen yon peryòd 46-h nan privasyon chow manjabl ant peryòd aksè yo pandan semèn nan (byenke yo te gen estanda chow disponib pandan tan sa a), epi yo te tou prive nan manje a manjabl sou fen semèn nan. Se konsa, estandadize peryòd la privasyon 46-h, nou asire ke tout rat yo te fè tès XNH h nan privasyon Chow-grès chow. Dis minit apre piki a, yo te mete rat yo nan yon kaj plastik aliyen ak kabann-o-Cobs (Anderson la Co, Maumee, OH), ak siy somatik nan retrè yo te anrejistre pou 46 min pa yon obsèvatè obsève kondisyon eksperimantal. Ka ka mòde grif, defigire defansif, chen ki mouye chen, danrèl danjere, tranbleman nan tèt, tranbleman forepaw, kalfou travèse, ak netwayaj yo te anrejistre pou chak rat, epi ka total de konpòtman sa yo te adisyone yo pwodwi yon nòt endèks retrè an jeneral. , lè l sèvi avèk yon metòd modifye soti nan lòt rapò [...28, 29].
1b. Tès espontane retrè
Pou detèmine si ta ka konpòtman retrè ka obsève pa tou senpleman retire rejim alimantè a manjabl (sètadi, san yo pa naloxone), rat yo te pwochen aksè bay sèlman chow rat estanda pou 3 semèn. Lè sa a, yo te retounen rat yo nan orè manje anvan yo pou 14 jou. Pandan peryòd ki vin apre nan privasyon Chow dous-grès, tout bèt yo te konsève sou chow rat estanda pou XNX h. Nan fen 46 h, lè gwoup eksperimantal la ta nòmalman jwenn aksè a dous-grès chow yo, yo te olye teste pou siy somatik nan retrè.
Exp. 2: Naloxone-presipite ak tès espontane retrè nan rat manje chou rat estanda ak yon manje nitrisyonèl konplè moun rich nan sik ak tout grès.
Eksperyans sa a te itilize yon evalyasyon te ajoute nan retrè opiate-tankou, ki wo plis labirent la, detèmine tou de somatik ak enkyetid-tankou repons a retrè soti nan manje ki fèt. Rat yo (350-400 g) te divize an twa pwa-matche gwoup (n = X / gwoup) epi kenbe sou ad lib chow ak dlo complétée ak sa ki annapre yo pou 28 jou: (a) 12-h aksè a yon wo-sik, segondè-grès melanj (4.48 kcal / g; 35.7% grès, 64.3% sikwoz; bè, poud sik, prepare nan nou an ... laboratwa); (b) ad lib aksè a menm melanj sik ak grès (c) ad lib chow. Manje te ranplase de fwa chak semèn, nan ki fwa bèt yo te peze.
2a. Tès espontane retrè
Nan jou 28, yo te mete tout rat sou yon rejim alimantè ad lib chow rat estanda. 24 ak XN h pita tout rat yo te teste pou siy somatik nan opiate-tankou retrè yo nan lòd yo detèmine yon endèks retrè an jeneral, jan sa dekri nan Exp. 36a. Lè sa a, tès pou enkyetid, bèt yo te Lè sa a, endividyèlman mete pou min 1 nan yon wo-labirent plis [...30]. Aparèy la te gen kat bra, chak X cm lajè pa XNX cm nan longè, e li te wo 10 cm anwo etaj la. De bra opoze yo te fèmen ak miray ranpa segondè opak, pandan y ap de lòt bra yo pa te gen okenn mi pwoteksyon. Eksperyans lan te fèt anba limyè wouj pou minimize entèripsyon nan sik sirkadyèn rat la. Rat yo te mete yo nan sant la nan labirent la ak oryantasyon tèt altered nan direksyon yon bra louvri oswa fèmen. Chak pwosè plis-labirent te videyo epi pita nòt pou kantite lajan an nan tan pase ak tèt la, zepòl ak forepaws sou bra a louvri, fèmen bra oswa seksyon sant nan labirent la pa yon obsèvatè avèg nan kondisyon rejim alimantè a.
2b. Naloxone-presipite tès retrè
Apre tès nan Exp. 2a, tout rat yo te retounen nan rejim asiyen yo pou 21 jou ak Lè sa a, yo te administre naloxone (Sigma, St Louis; 3 mg / kg, sc). Dis minit apre piki, rat yo te obsève pou siy somatik nan retrè ak wo-labirent enkyetid ki wo (jan sa dekri nan Exp. 2a).
Exp. 3: Naloxone-presipite opiate-tankou tès retrè nan rat konsève sou chow rat estanda ak ak yon manje likid moun rich nan sik ak tout grès.
Rejim yo teste nan Exp. 1 ak 2 te solid; pwochen nou teste yon rejim alimantè likid yo nan lòd yo kontwole pou efè teksti an, depi siy retrè opiate-tankou nan modèl bèt nou yo nan repa egzajere manje ki gen sik ladan ki enplike itilize nan yon solisyon sikwoz [...8, 9], epi gen diferans ke yo rekonèt nan efè alimantasyon solid ak likid ka genyen sou konpòtman enèjetik [...]31, 32]. Rat (300 – 375 g) te divize an kat pwa-matche gwoup (n = X / gwoup) epi kenbe yo pou 8 jou sou. ad lib Chow complétée ak: (a) aksè 12-h nan yon EMULSYON nan lwil oliv, sik ak dlo (3.4 Kcal / mL, 35% grès, 10% sik; Mazola® lwil oliv mayi, sikwoz, dlo tiyo ak 0.6% Emplex, Caravan Engredyan. , Lenexa, KS, prepare nan laboratwa nou an), ak chow; (b) 12-h aksè nan Vaniy Asire (1.06 Kcal / mL, 30% grès, ak 30% sik, Abbott laboratwa, Abbott Park, IL) ak chow; (C) 12-h aksè nan yon 10% (w / v) solisyon sikwoz (0.4 Kcal / mL) ak chow, oswa (d) ad lib chow. Pou prepare EMULSION a, dlo te chofe nan 75-80 ° C epi li te ajoute nan lòt engredyan. Emulsion a te melanje sou yon gwo vitès pou 5 min ak Lè sa a, refwadi nan yon beny glas jouk li rive 20 ° C. Tout rejim (eksepte pou estanda chow) yo te likid epi yo te prezante nan yon tib bwè gradye. Manje te ranplase chak jou epi yo te peze bèt chak semèn.
Naloxone-presipite tès retrè
Apre 28 jou sou rejim yo asiyen, rat yo te administre naloxone (3 mg / kg, sc). Dis minit apre piki a, yo te mete rat sou plis la-labirent plis jan sa dekri nan Exp. 2a. Imedyatman apre yon tès 5-min anlè plis-labirent, rat yo te mete nan yon enfòmatik, chanm louvri-jaden aktivite anba limyè wouj (MED Associates, Georgia, VT, 30.5 cm segondè flan Acrylic ak 16 photocells enfrawouj sou chak nan twa aks yo. ). Tout jaden an te 43.2 cm × 43.2 cm. Chak rat te okòmansman plase nan sant jaden an epi li te bay yon peryòd aklimatasyon 10 min anvan egzamen an te kòmanse [33, 34]. Lè sa a, lokomotè aktivite, defini kòm reyon enfrawouj gwo bout bwa, yo te kontwole pou XNX min.
Exp. 4: Naloxone-presipite opiate-tankou tès retrè nan rat nan pwa kò redwi
Yo nan lòd yo teste si wi ou non siy retrè ta ka jwenn nan yon pwa kò diminye, pwa-matche rat (283-345 g) yo te konsève pou 21 jou sou: (a) 2-h aksè chak jou nan dous-grès chow (Rechèch Rejim, New Brunswick, NJ, #12451, kòm yo itilize nan Exp 1) kòmanse 6 h apre aparisyon nan sik la fè nwa, ak estanda rat chow disponib sèlman pou lòt la 22 h pou chak jou (n = 10), oswa (b) ad lib estanda chow ak 2 h nan aksè nan chow a dous-grès sèlman de jou (jou 2 ak jou 22 oswa 23; Acute Sweet-Grès gwoup, n = 9). Yo te mezire manje chak jou nan 6 h ak 8 h apre aparisyon nan sik la fè nwa; manje te ranplase de fwa chak semèn.
4a. Nòmal tès retrè pwa
Nan jou 22, XN h nan peryòd la fè nwa, tout rat yo te bay naloxone (6 mg / kg, sc). Dis minit apre piki a, yo te obsève rat pou siy somatik nan retrè ak elve plis-labirent enkyetid jan sa dekri nan Exp. 3a.
4b. Redwi tès retrè pwa kò ou
2-h chak jou rat-Grès yo te redwi a 85% pwa kò sou yon peryòd 7-jou pa diminye chak jou estanda disponiblite chow swa yon mwatye plon (3 g) oswa yon plon (5 g) ak dous-grès chow nan yon demi-plon (2 g) oswa yon plon (3.5 g). Kantite manje yo te bay te ajiste pou chak rat depann sou pousantaj de pèdi pwa. Gwoup la Sweet-Grès Acute te tou redwi a 85% pwa kò sou yon peryòd 7-jou pa diminye chak jou disponiblite estanda chow a 1-granules 2. Rat nan gwoup sa a yo te ba 2-h aksè a dous-grès chow pou yon twazyèm fwa nan jou 30 oswa 31. Tès Retrè (siy somatik ak plis-labirent) yo te fèt ankò nan jou 29 jan sa dekri nan Exp. 1a ak 2a.
4c. Pwa nòmal aktivite tès lokomoteur
Apre tès nan pwa kò redwi, yo te bay tout rat yo ad lib aksè nan estanda chow pou yon mwa pou pèmèt yo retounen nan yon pwa kò nòmal pou laj yo. Lè sa a, tout bèt yo te retounen nan rejim eksperimantal yo pou 14 jou. Rat nan gwoup la Acute Sweet-Grès yo te ba aksè a chow a dous-grès ankò sou katòzyèm jou a nan aksè nan rekòmanse rejim yo tès yo nan lòd yo detèmine si konpòtman te akòz repa egzajere manje oswa ekspoze sèlman nan rejim alimantè a. Lè sa a, NAN h apre aparisyon nan sik la fè nwa, naloxone (6 mg / kg, sc) te administre. Dis minit apre piki a, yo te mete rat nan yon enfòmatik, chanm louvri-jaden aktivite anba limyè wouj, jan sa dekri nan Exp. 3a. Chak rat te okòmansman mete nan sant la nan chanm lan lokomoteur, ak konte aktivite yo te mezire pou 3 min.
4d. Pwa redwi tès aktivite Lokomotè
Exp Exp. 4c, pwa kò nan tout rat yo te redwi ankò nan 85% jan sa dekri pi wo a sou kou a nan 7 jou. Yo te fè tès aktivite Lokomoteji a Lè sa a, jan sa dekri nan Exp. 3c.
Estatistik analiz
Done yo te analize lè l sèvi avèk yon sèl-fason ak de fason analyses nan divèjans (ANOVA) ak pòs-hoc Newman Keuls oswa Tukey tès lè li apwopriye, oswa t-tès elèv la. Pou done ki pi anwo nan labirent, aktivite bra louvri te konsidere kòm tan total ke chak rat te pase nan bra yo louvri nan labirent la [35]. Done Locomotor yo te analize premye ak yon sèl-fason ANOVA pou chak mezi nan lokomosyon ak Lè sa a, ak de-fason ANOVA yo konpare nan-an mezi lokomotè nan pwa kò nòmal ak redwi, osi byen ke ant-gwoup mezi. Erè ki prezante nan maniskri sa a se erè estanda nan vle di la.
rezilta
Exp. 1: Naloxone-presipite oswa espontane siy somatik nan enkyetid yo pa te obsève nan rat bay yon nitrisyonèlman konplè dous-grès chow
Admisyon ak done pwa kò
Done yo konsomasyon pou rat sa yo te deja rapòte [...36]. Yon ti tan rezime rezilta sa yo, konpare ak gwoup kontwòl yo, rat ak aksè 2-h chak jou ak aksè 2-h MWF pou manje nitritif konplè dous-grès boule kantite lajan gwo nan chow nan gou nan h la nan aksè. Pwa kò a nan bèt sa yo ogmante akòz manje gwo ak Lè sa a, diminye ant binges kòm yon rezilta nan konsomasyon oto-restriksyon nan chow estanda sa yo binges. Sepandan, malgre fluctuations sa yo nan pwa kò gwoup la ak aksè a dous-grès chow chak jou te vin siyifikativman plis pwa pase gwoup la kontwòl ak estanda chow disponib ad lib. Pli lwen, lè analize pran pwa sou dire etid la, te gen yon diferans ant gwoup yo (F(3,39) = 7.74, p <0.001), ak bèt sa yo ki gen 2-h aksè chak jou nan chow la dous-grès pran plis pwa pase kontwòl yo estanda chow-manje (108.6 ± 6.2 g vs 75.4 ± 3.8 g, respektivman; p<0.001) ak kontwòl yo dous-grès-manje-manje (88.3 ± 4.9 g; p<0.05). Anplis de sa, rat yo ak 2-h MWF aksè nan manje a dous-grès pran plis pwa pase kontwòl chow-manje (95.0 ± 4.6 g vs 75.4 ± 3.8 g, respektivman; p
Tès Retrè
Lè yo bay naloxone, pa te gen okenn diferans nan nòt endèks retrè pou konpòtman somatik te note ant gwoup yo (F(3, 36) = 2.71, p = ns). Konpòtman sa yo enkli latranblad forepaw, kaj travèse, grif mòde ak defansiv burrowingp = ns pou chak; wè Fig. 1). Chen chichè mouye pa te obsève nan okenn gwoup.
Ka montre nan siy somatik nan retrè apre privasyon nan chow a dous-grès yo montre nan Fig. 2. Pa te gen okenn siyifikasyon nan mitan gwoup ant nòt la endèks retrè total (F(3, 36) = 2.04, p = ns). Konparezon ki gen bon konprann yo pa devwale diferans ki genyen ant gwoup yo pou tranbleman avi, grif ki gaye sou grif oswa defonsaj defansp = ns pou tout moun). Siyifikasyon yo te wè nan mitan gwoup nan ka travèse kalòj (F(3, 36) = 4.66, p <0.05). Apre sa Tès Tukey revele ke 2-h rat aksè chak jou te montre siyifikativman mwens ka nan kaj travèse pase ad lib Chow rat (p <0.01) oswa ad lib Sweet-Grès rat (p <0.05). Ankò, tranbl chen mouye yo pa te obsève nan okenn gwoup.
Exp. NUMT: Naloxone-presipite, siy somatik espontane, oswa siy espontane nan enkyetid nan elve nan plis labirent pa yo te obsève nan rat manje yon sipleman dous-grès nan chow estanda yo.
Admisyon ak done pwa kò
Bèt ki te nan gwoup la 12-h dous-Grès + Chow boule plis nan manje a dous-grès pandan premye èdtan nan aksè chak jou konpare ak bèt sa yo kenbe sou la. ad lib Dous-Grès + Chow rejim alimantè (F(NAN, 2) = NAN, p <0.001, jou 28 nan aksè rejim alimantè, 5.6 vs 1.1 g, respektivman). Sou 28 jou nan aksè rejim alimantè, 12-h Sweet-Grès gwoup la konsome 3.5 ± 0.9 g nan chow, la ad lib Dous-Grès gwoup boule 0.68 ± 0.7 g nan chow, ak la ad lib Chow gwoup boule 2.3 ± 1.5 g nan chow nan premye èdtan an. Malgre diferans ki genyen nan konsomasyon sipleman dous-grès la ak chow, nan jou 28 pa te gen okenn diferans estatistik enpòtan nan mitan gwoup nan kantite total kalori boule sou yon peryòd 24-h (F(NAN, 2) = 22; p = ns; 12-h Sweet-Grès: 82.8 ± 2.6 Kcal, ad lib Dous-Grès: 77.3 ± 7.8 Kcal, ad lib Chow: 83.2 ± 6.8 Kcal). Nan jou 28, pwa kò nan rat yo pa te siyifikativman diferan nan mitan gwoup (F(NAN, 2) = NAN, p = ns). Pli lwen, analiz de pwa pran sou dire a nan etid la sede pa gen okenn diferans enpòtan nan mitan gwoup (F(NAN, 2) = NAN, p = ns).
Tès Retrè
Pa te gen okenn diferans estatistik enpòtan nan nòt endèks retrè note nan mitan gwoup yo.F(2, 23) = 0.24, p = ns; 12-h Sweet-Grès gwoup = 11.5 ± 2.6, ad lib Sweet-Grès gwoup = 13.6 ± 2.6; ad lib Chow group = 13.4 ± 1.8) ak XN h (F(NAN, 2) = NAN, p = ns; 12-h Sweet-Grès gwoup = 11.8 ± 2.6, ad lib Sweet-Grès gwoup = 12.1 ± 1.4; ad lib Chow gwoup = 10.5 ± 2.0) apre bèt yo te wete nan rejim alimantè a gou. Nòt nan endèks gen ladan konpòtman nan goumin, chen mouye tranbl, kalòj travèse, latranblad forepaw, grif mòde epi defansiv (pou chak konparezon pè-ki gen bon konprann, ... p = ns). Pa gen okenn ka nan headshakes yo te obsève nan h yo tan 24 ak 36 h tan.
An tèm de la ki plis labirent, apre yo fin H nvi nan privasyon te gen yon diferans estatistik enpòtan nan mitan gwoup an tèm de tan ki pase sou bra a louvri (F(NAN, 2) = NAN, p<0.05; 3.1 ± 1.4 s, 20.0 ± 6.0 s ak 15.4 ± 4.7 s, ad lib Dous-Grès, 12-h Sweet-Grès ak ad lib Chow respektivman), ak rat yo ki te konsève sou ad lib Dous-Grès depanse mwens tan sou bra a louvri pase 12-h Sweet-Grès gwoup la oswa ad lib Chow gwoup (p <0.05). Nan 36 h privasyon, pa gen okenn efè yo te wè nan tan pase sou bra a louvri nan labirent la plis (F(NAN, 2) = NAN, p= ns; 26.3 ± 7.6, 30.0 ± 10.0 ak 23.4 ± 7.2 s, ad lib Dous-Grès, 12-h Sweet-Grès ak ad lib Chow respektivman).
Apre naloxone, pa te gen okenn diferans estatistik siyifikatif nan endèks retrè nòt nan konpòtman somatik te note nan mitan gwoup yo (F(2, 23) = 0.64, p = ns). Rezilta endèks Retrè yo te 8.4 ± 2.5 pou gwoup la 12-h Sweet-Grès, 11.5 ± 2.3 pou la. ad lib Sweet-Grès gwoup ak 11.4 ± 1.7 pou la ad lib Chow gwoup. Nòt nan endèks gen ladan konpòtman nan dan bavardaj, goumin, kaj travèse, latranblad forepaw, grif mòde epi defansiv (pou chak konparezon pè-ki gen bon konprann, ... p = ns). Pa gen okenn ka nan headshakes oswa chen mouye tranbl te obsève.
Exp. 3: Naloxone-presipite siy somatik oswa siy enkyetid nan elve a plis labirent pa yo te obsève nan rat manje yon likid ki gen anpil grès, wo-sikwoz rejim alimantè.
Done Admisyon
Pa twazyèm semèn nan nan aksè rejim alimantè, te gen yon diferans nan mitan gwoup an tèm de konsomasyon premye èdtan yo (Sik-lwil oliv EMULSION = 32% nan kcal, Vaniy Asire w ke = 27% nan kcal, ak 10% Sucrose = 24% nan kcal konsomasyon total chak jou; F(2, 27) = 39.40, p <0.001). Te gen tou yon diferans estatistik siyifikatif nan mitan gwoup yo an tèm de konsomasyon chak jou yo nan estanda wonjè chow (F(3, 78) = 22.86, p <0.0001), ak bèt yo ak manje gou ki disponib ki montre yon diminisyon konsomasyon yo nan estanda rat chow pa jou 28 (23 ± 3 Kcal: emulsyon sik-lwil; 30 ± 4 Kcal: Vanilla Asire; 71 ± 2 Kcal: 10% sikwoz ) relatif a la ad lib Chow gwoup (101 ± 4 Kcal). Malgre ke te gen yon diferans wè nan mitan gwoup yo nan konsomasyon an jeneral kalorik chak jou (F(3, 27) = 3.50, p <0.05), swivi konparezon miltip endike ke pa te gen okenn diferans te note lè chak gwoup te endepandamman konpare ak gwoup la kontwòl chow-konsome (101 ± 4 Kcal), p = ns nan tout ka (118 ± 13 Kcal: emulsyon sik-lwil; 93 ± 11 Kcal: Vaniy Asire; 85 ± 6 Kcal: 10% sikwoz). Pli lwen, kantite lajan an nan sikwoz aktyèl boule (nan gram) te konsistan atravè gwoup ak chak gwoup konsome 3-XNX g nan sik / chak jou, menm bay alimantasyon yo varyeF(2, 20) = 2.32, p = ns). Nan fen semèn 4, pa te gen okenn diferans nan pwa kò nan mitan gwoup (F(3,31) = 0.25, p = ns). Sepandan, lè analize pran pwa sou dire etid la, te gen yon diferans ant gwoup yo (F(3,31) = 3.67, p <0.05), ak bèt sa yo ki konsome emulsyon an sik-lwil pran plis pwa pase kontwòl yo Chow-manje (123 ± 23 g vs 67 ± 6 g, respektivman, p <0.05).
Retrè done yo
Lè yo mete sou plis anwo nan syèl la-labirent apre piki naloxone, bèt yo ak 12-h 10% Aksè sikwoz pase mwens tan sou bra a louvri nan labirent la plis konpare ak Chow-manje kontwòl (t(9) = 2.58, p <0.05; 52 ± 7 vs 75 ± 3 s). Pa gen okenn lòt diferans yo te note nan mitan gwoup yo (12-h gwoup emulsyon sik-lwil = 54 ± 11 s sou bra a louvri; 12-h Vanilla Asire gwoup = 75 ± 3 s sou bra a louvri). Analiz de done yo labirent jaden louvri revele ke 12-h 10% gwoup la sikwoz te ogmante aktivite lokomotè (F(3, 29) = 3.65, p <0.05) konpare ak la ad lib Chow gwoup (743 ± 70 ak 512 ± 57 konte anbilans, respektivman). Pa gen lòt diferans yo te note nan mitan gwoup yo nan labirent la jaden ouvè (12-h Sik-lwil EMULSION = 561 ± 71 konte anbilans; 12-h Vanilla Asire gwoup = konte 576 anbilans 58).
Exp. 4: Naloxone-presipite siy somatik oswa siy enkyetid nan ki wo plis labirent la nan rat dous-grès-bingeing pa t 'wè lè redwi a 85% pwa kò.
Admisyon ak done pwa kò
Kòmanse dezyèm semèn lan nan aksè dous-grès, rat nan 2-h chak jou gwoup la Sweet-Grès boule yon kantite twòp nan kalori nan h la 2 nan aksè nan dous-grès chow (66.8% nan total konsomasyon chak jou), ki se konsistan ak rapò anvan nou an lè l sèvi avèk modèl sa a [...36] ak sijere regrèt konpòtman manje. Gwoup la Sweet Sweet-Grès boule 24.6 ± 12.5 kcal nan jou 2 ak 48.1 ± 14.1 kcal nan jou 22 oswa 23 soti nan granules yo dous-grès. Nan pwa nòmal kò a, repete-mezi ANOVA (ak yon koreksyon Greenhouse-Geisser) te montre yon gwoup siyifikatif × entèraksyon tan (...F(1.63, 27.70) = 21.28, p <0.001). Tès Post-hoc revele siyifikativman pi lou pwa kò pou 2-h chak jou Sweet-Grès gwoup la konpare ak gwoup la egi Sweet-grès (jou 8: t(1, 17) = 2.28, p <0.05, jou 12: t(1, 17) = 2.63, p <0.05, ak jou 16: t(1, 17) = 2.94, p <0.01). Pli lwen, lè yo te pran pwa sou premye 16 jou yo, rat yo nan 2-h chak jou Sweet-grès gwoup la te jwenn yo te pran siyifikativman plis pwa pase gwoup la egi Sweet-grès (81.0 ± 4.1 g vs 45.3 ± 4.5 g, respektivman; F(1, 18) = 33.83, p <0.001). Lè bèt yo te redwi nan pwa kò, pè echantiyon t-test endike ke kò pwa nan tou de gwoup yo te estatistik siyifikativman redwi (t(9) = 25.50, p <0.001 ak t(8) = 19.93, p <0.001, 2-h Sweet-Grès Chow ak egi Sweet-grès Chow, respektivman).
Retrè done yo
Nan pwa nòmal, sèlman diferans lan obsève ant gwoup revele ke 2-h chak jou rat yo Grès-ekspoze siyifikativman mwens ka nan kaj travèse konpare ak Acte dous-grès rat yo (2.3 ± 0.4 vs 4.5 ± 0.9, respektivman; F(1, 16) = 5.54, p <0.05; Fig. 3). Sepandan, pa gen okenn diferans yo te wè nan endèks retrè an jeneral (2-h chak jou Sweet-grès: 9.4 ± 1.2; Egi Sweet-grès: 12.5 ± 2.0; F(1, 16) = 2.00, p = ns). Sa enkli mezi nan konpòtman fouyman, tranbl nan tèt, goumin ak elve (p = ns pou chak). Pa gen rat montre okenn ka nan dantretyen.
Nan pwa kò redwi, pa te gen okenn diferans estatistik enpòtan ant gwoup yo nan ka nan siy somatik nan retrè, jan yo wè nan nòt la endèks (F(1, 16) = 0.49, p = ns). Rezilta endèks Retrè yo te 13.0 ± 3.2 nan gwoup la Sweet-grès Acute vs 10.8 ± 1.2 nan gwoup la 2-h chak jou dous-grès. Nòt nan endèks gen ladan konpòtman nan dan bavardaj, édikasyon, goumin, kaj travèse, latranblad forepaw, grif mòde ak fouye konpòtman. Yo pa t obsève okenn koz de zepòl.
Nan elve tès la plis-labirent, tan ki pase sou bra a louvri pa t 'diferan pa gwoup anvan rediksyon pwa (2-h chak jou Sweet-grès gwoup: 22.4 ± XNUMS; Acute Sweet-Grès Chow gwoup: 7.7 ± 17.4 yo; F(1, 16) = 0.14, p = ns) oswa apre rediksyon pwa (2-h chak jou Gwoup dous-grès: 22.4 s ± 7.0 yo; gwoup Acute Sweet-grès: 16.5 ± 7.8 yo; F(1, 16) = 0.32, p = ns). Nan tès la Lokomotè aktivite, nan tou de pwa kò nòmal ak redwi, pa te gen okenn diferans siyifikatif ant 2-h chak jou rat Sweet-Grès ak Ac rase dous-Grès an tèm de aktivite lokomotè (Fig. 4).
Lè nan yon pwa kò diminye, kèlkeswa gwoup la, tout rat yo te pi aktif (F(1, 16) = 7.13, p <0.05, Fig. 4) te pase plis tan nan sant laF(1, 16) = 11.83, p <0.005; 2-h chak jou dous-grès: 12.0 ± 1.7 min nan pwa kò redwi, kont 9.6 ± 1.6 min nan pwa nòmal; Egi Sweet-Grès: 12.8 ± 3.2 min nan pwa kò redwi kont 8.8 ± 2.2 min nan pwa kò nòmal) nan chanm nan aktivite lokomotè konpare ak konpòtman yo nan yon pwa kò nòmal, men pa te gen okenn entèraksyon ant pwa kò ak gwoup.
Diskisyon
Baze sou konklizyon yo nan kat eksperyans sa yo, rat regrèt manje manje yon manje ki gen ladan tou de grès ak sik pa demontre siyifikatif endikasyon de naloxone-presipite oswa espontane retrè opiate-tankou. Bay konklizyon anvan yo ke rat manje fren manje sik montre siy naloxone-presipite retrè [...9] (ki te tou repwodwi isit la nan Exp. 3), nou espere naloxone-enjeksyon rat ak aksè limite nan yon sikre, grès ki rich rejim alimantè ki montre siy menm jan an nan retrè. Sepandan, enklizyon de grès nan rejim alimantè a ka gen entèfere ak ekspresyon an nan siy retrè. Rezilta sa yo Se poutèt sa, sijere ke retrè opiate-tankou se pa sa yo obsève an repons a manje repa egzajere nan tout rejim gou, espesyalman sa yo moun rich nan grès, ki se, tankou sik, li te ye fè egzèsis efè sou sistèm opioid nan sèvo. Kidonk, aparisyon siy retrè opyat yo tankou repons a manje abitid manje yo parèt tankou makronutriman espesifik.
Pwopriyete depandans nan rejim segondè nan grès ak sik
Nan revizyon anvan nou te rezime rezilta yo nan laboratwa nou an ak lòt moun sijere ke aksè limite nan sik ka rezilta nan plizyè siy konpòtman ak neurochemical nan dejwe nan rat, ki gen ladan retrè opiate-tankou [...8, 37]. Te gen etid lè l sèvi avèk modèl bèt sijere ke aksè nan yon rejim alimantè ki gen anpil grès ka tou entités kèk siy adiksyon ...16]. Gwoup Corwin a te montre yon ogmantasyon nan pwogresif-rapò repons nan rat regrèt manje grès, sijere ke motivasyon ranfòse [38]. Bale ak kòlèg li yo montre ke sourit yo ke yo kenbe sou yon wo-grès oswa segondè-idrat kabòn rejim alimantè ak Lè sa a, refize aksè nan manje a pral kenbe yon estimilis degoutans (chòk pye) yo nan lòd yo jwenn manje yo vle [...11]. Apre yon peryòd retrè egi (privasyon), sourit yo ki gen aksè nan yon rejim alimantè ki gen anpil grès montre siy enkyetid kòm byen ke redwi ekspresyon nan kortikotropin-divilge faktè nan nwayo santral la nan amiggala la. Sepandan, McGee ak kòlèg li yo te note pa gen okenn siy enkyetid oswa motivasyon ranfòse lè l sèvi avèk yon orè rapò pwogresif apre privasyon soti nan aksè limite chak jou nan yon rakousi legim sikre, menm jan ak rejim alimantè a nou itilize nan Exp. 2 [17]. Ansanm, etid sa yo sijere ke kèk siy espesifik nan depandans ka jwenn lè bèt yo ofri yon grès ki gen rejim, men rezilta yo konplèks epi yo ka enfliyanse pa faktè tankou konpozisyon rejim alimantè, pwa kò, ak orè aksè.
Macronutriyan espesifik, Fòm ak Disponibilite kòm Faktè nan retrè Manje nourisan
Etid yo prezan enkòpore yon varyete de wo-grès rejim, ki gen ladan kèk ki nitrisyonèlman konplè, menm jan ak yon "repa." Gen lòt ki te sipleman nan yon rejim alimantè ki estanda chow, menm jan ak yon "ti goute," ki yo souvan boule pandan epizòd arachistin. [25]. Rejim yo tou te varye nan teksti, ki soti nan rejim alimèt nan Exp. 1, sipleman rejim alimantè semi-solid nan Exp. 2 ak rejim yo likid nan Exp. NAN. Rejim likid yo te itilize paske yo te idantifye relasyon ant overconsumption nan rejim likid ak ki vin apre pwa pran [31, 32]. Epitou, paske syans anvan nou yo ki montre siy retrè opiatif tankou an repons a aksè sucrose itilize yon solisyon sikwoz (repwodwi isit la nan Exp 3 kote bèt regrèt manje sikwoz pase mwens tan sou bra a louvri nan labirent la plis ak te montre siy retrè. ipèraktiv indwi nan labirent la jaden louvri). Nou teste yon likid grès yo wè si fòm nan manje a ta ka gen yon efè nan ekspresyon an nan retrè-asosye konpòtman. Sepandan, aksè nan yon likid moun rich anpil grès pa t 'precipited siy retrè. Soti nan varyete sa a nan teksti rejim alimantè ak fòm, nou konkli ke kèlkeswa kalite ki gen anpil grès ki rich manje oswa fòm nan ki li bay, eksperyans yo prezan pa t 'montre siy ki klè nan retrè opiate-tankou nan bèt ki gen frasi-aksè a grès.
Yon lòt manipilasyon te pran an kont nan etid sa a te peryòd aksè. Gen kèk nan rat yo te bay 12-h aksè chak jou nan rejim alimantè a manjabl, pandan ke lòt moun yo te bay aksè 2-h sou yon orè chak jou oswa tanzantan. Yo montre toude kalite aksè ki gen restriksyon sou presipitasyon konpòtman manje a [...8, 39]. Te konsomasyon repa egzajere yo montre sa ki lakòz chanjman nan sistèm rekonpans nan sèvo, patikilyèman sistèm nan dopamine, nan tou de moun ...40] ak nan modèl rat, ki sanble ak efè yo wè ak kèk dwòg abi [...]8]. Malgre ke yo te montre orè aksè yo mennen nan repa egzajere manje, ki te konfime nan eksperyans sa yo prezan, okenn nan peryòd yo aksè tès mennen nan siy opioid ki tankou nan retrè an repons a grès.
Entèpretasyon Rezilta Postive nan Prezantasyon Eksperyans yo
Pandan ke an jeneral, done yo sijere ke siy retrè opiatif tankou pa pwezante lè yo ofri rat yo aksè limite nan yon manje ki gen grès ki gen gou, te gen kèk rezilta pozitif jwenn nan seri a prezan nan eksperyans ki merite diskisyon. Nan Exp. KMANSE, apre yo fin H nvi nan privasyon soti nan yon chow dous-grès, rat ki te deja gen aksè 1 te montre mwens ka nan pasaj kaj-konpare ak ad lib kontwole manje (estanda rat chow oswa wo-grès, chow rat dous). Hypoactivity te note pandan retrè kokayin nan rat [41]. Sepandan, pa gen okenn siy opiate-tankou retrè te note nan lòt tès yo ki fèt sou gwoup sa a, tankou mezi yo somatik nan retrè.
Nan Exp. KA, apre yo finn pa gen bèt prive ad lib aksè nan rejim alimantè a dous-grès te montre diminye tan ki pase sou bra a louvri nan labirent la ki wo plis. Sa a jwenn enteresan, jan li sijere ke yon gwoup ki gen ad lib aksè nan manje nan manatable te montre yon chanjman nan konpòtman ki asosye ak retrè. Sepandan, lè yo teste nan XN h, efè a pa te aparan. Sa a te kapab akòz lefèt ke gen yon fenèt espesifik nan tan nan ki siy espontane nan enkyetid sòti, epi ki te peryòd ki ekspire nan pwochen tan an evalyasyon yo. Oswa, li te kapab sijere ke itilize repete nan labirent la ki wo-plis chanje pèfòmans lan sou tès la. Pandan ke kèk etid sijere ke ekspoze repete nan labirent la ki wo plis pa afekte rezilta a nan tès la [...42, 43], lòt moun rapòte yon efè habituation [...44-47]. Nan seri a prezan nan syans, pou pati ki pi pa gen okenn diferans yo te wè ant gwoup yo nan enkyetid, ki kapab endike pa gen okenn diferans ki fèt pa ekspoze repete. Sepandan, pozitif la ak ad lib-fed bèt nan Exp. 2 ta dwe konsidere nan yon kontèks repete itilize tès sa a.
Wòl pwa kò a nan ekspresyon siy depandans yo
Nan etid la prezan, nou evalye varyab yo nan repa egzajere manje ak pwa kò, tou de nan yo ki te montre pou kontribye pou siy adiksyon-tankou. Lòt gwoup yo te montre ke lè rat yo bay aksè limite nan yon dous, rejim alimantè chokola yo, yo vin obèz epi montre enkyetid ki tankou konpòtman lè refize aksè nan manje a gou [15]. Etid anvan nou yo montre konpòtman retrè-tankou nan bèt kenbe sou sikrez la tanzantan, nan pwa nòmal. Lòt rezilta yo te montre tou ke bèt obèz ak ad lib oswa aksè limite nan yon rejim alimantè kafeterya montre defisi nan mezolimbic Dopamine nerotransmission [18, 48], men bèt ki gen aksè limite (sètadi, aksè doulè) ki pa te klase kòm obèz pa t 'montre downregulated dopaminè reseptè 2. Sa a soulve lide ki di obezite nan tèt li te kapab mennen nan chanjman ki fèt nan sistèm nan rekonpans nan sèvo [18]. Kontrèman, etid sou moun ki gen pwoblèm manje ki fèt san konte sijere ke repa egzajere manje, endepandan de obezite, ki lakòz afekte sistèm DA mesolimbic [40], konsa en enpòtans ki genyen nan etidye varyab yo espesifik nan suralimantasyon ak obezite, tou de ansanm ak endepandan. Nan papye a prezan, nou pa t 'obsève siy opiate-tankou retrè sòti nan rat ki te vin ki twò gwo sou yon manje ki rich anpil grès (Exp.1). Paske etid anvan yo sijere ke obezite ka precipited chanjman depandans tankou nan sèvo a, ki ka oswa ka pa nesesèman enplike siyale retrè opiate-tankou, li posib ke nou ta ka yo te kapab obsève diferan (sètadi, ki pa Peye-asosye-ki gen rapò ak) siy retrè nan rat sa yo.
Nan Exp. 4 nou evalye efè a nan pwa kò redwi sou Aparisyon nan siy retrè. Rat ki gen manje-prive istwa pi vit vin kokayin pwòp tèt ou-administrasyon konpare ak kontwòl [...49], ak rediksyon pwa yo te montre amelyore efè yo nan rekonpans dwòg [...26]. Redwi pwa nan kò rat rezilta nan yon rediksyon nan nivo DA nan NAc a 33% nan nivo debaz yo [...50, 51]. Nou te deja jwenn ke lè pwa yo nan kò rat ak yon istwa nan repa egzajere manje sik redwi a 85%, DA lage nan repons a sik se pli lwen ogmante [...27]. Pou rezon sa yo, nou ipotèz ke diminye pwa nan kò rat yo ta ka amelyore ekspresyon an nan siy retrè. Sepandan, nan Exp. KIJAN, naloxone-presipite siy retrè yo pa t obsève lè rat yo te wete XNIM% nan pwa nòmal kò yo.
Kòm yon mezi te ajoute nan enkyetid, nou evalye aktivite lokomotè. Ogmante aktivite lokomotè ki asosye ak retrè dwòg [...52-54], epi yo te jwenn li nan Exp. 3 nan rat regrèt manje sik, men se pa nan rat ak aksè limite nan grès. Pli lwen, nan Exp. ANVAN, pa te gen okenn diferans siyifikatif ant rat krache manje grès ak rat kontwòl nan lokomosyon tèm, swa nan nòmal oswa redwi pwa kò.
konklizyon
Rat yo konsève sou yon rejim alimantè ki regle rich nan sik ak grès pa t 'montre siy retrè opiate-tankou lè ki twò gwo, pwa nòmal, oswa mèg, lè l sèvi avèk tou de fòm solid ak likid nan rejim yo. Rezilta sa yo kontrè avèk rezilta anvan laboratwa sa a, ak lòt moun, ki endike konpòtman opresif-tankou retrè nan rat ki repa egzajere manje sik. Konklizyon yo prezan sipòte nosyon an ki siy adiksyon nan repons a manje twòp manje agreyab ka eleman nitritif-espesifik, souliye enpòtans ki genyen nan plis ankèt sou efè yo diferans ki twòp nan eleman nitritif espesifik ka gen sou sistèm rekonpans nan sèvo.
Pwen esansyèl rechèch la
- Etid yo montre endis neurochemical ak konpòtman nan dejwe lè bèt overeat yon rejim alimantè ki gen anpil grès.
- Naloxone-presipite retrè pa t 'wè nan rat netwayaj manje yon varyete de wo-grès, rejim dous.
- Retrè privasyon-induit pa te wè nan rat manje frasi manje yon varyete de wo-grès, rejim dous.
- Rediksyon pwa kò a, ki konnen pou potentiye efè ranfòse sibstans abi, pa te afekte naloxone-presipite siy retrè opiate-tankou.
- Rat ki repa egzajere manje dous-grès konbinezon pa montre siy opiate-tankou retrè nan kondisyon yo itilize yo.
Remèsiman
Rechèch USFS te sipòte pa AA-12882 (BGH) ak DK-079793 ak Fondasyon Nasyonal Manje Maladi yo (NMA).
Nòt anba paj
Limit responsabilite Piblikatè a: Sa a se yon dosye PDF nan yon maniskri inedan ki te aksepte pou piblikasyon. Kòm yon sèvis nan kliyan nou yo nou ap bay vèsyon sa a byen bonè nan maniskri a. Maniskri a pral sibi copyediting, sijè, ak revizyon prèv ki vini an anvan li pibliye nan fòm final li yo. Tanpri sonje ke pandan erè pwosesis pwodiksyon yo ka dekouvri ki ta ka afekte kontni an, ak tout avètisman legal ki aplike nan jounal la konsène.
Referans
;