Созылмалы фармакологиялық, эмоционалдық және оптогенетикалық ынталандыруға жауап беретін шырышты нейронның субтитрлеріндегі DeltaFosB индукциясы (2013)

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Lobo MK, Zaman S, Дамез-Верно Д.М., Koo JW, Багот ТК, Динери Дж.А., Нугент А, Финкель Е., Чаудхури Д, Чандра Р., Riberio E, Рабкин Ж., Mouzon E, Качоп Р, Ж.Ф., Хан МХ, Dietz DM, Өзіндік DW, Hurd YL, Vialou V, Nestler EJ.

қайнар көз

Мэриленд медицина университетінің анатомия және нейробиология бөлімі, Балтимор қаласы, Мэриленд 21201, Фишберг нейробиология бөлімі және Фридман Брейн Институты, Синай тауындағы Иахн медицина мектебі, Нью-Йорк, ХNUMX, психиатрия және фармакология және жүйелер кафедралары Терапевтика, Синай тауындағы Иахан медицина мектебі, Нью-Йорк, Нью-Йорк 10029, психиатрия бөлімі, Техас университетінің оңтүстік-батыс медициналық орталығы, Даллас, Техас 10029, фармакология және токсикология кафедрасы және нашақорлық бойынша ғылыми-зерттеу институты, Нью-Йорк мемлекеттік университеті Буффало, Нью-Йорк, Нью-Йорк 75390 және Ұлттық де ла Санте-де-ла-Рехерче Медике институты, U14214, Ұлттық де ла-Речерче ғылыми орталығы, Unité Mixte de Recherche 952, UPMC, Париж, 7224, Франция.

дерексіз

Транскрипция коэффициенті ΔFosB, стриатумда бірнеше созылмалы қоздырғыштар, мысалы, нашақорлық, антипсихотикалық препараттар, табиғи пайда және стресс сияқты әсер етеді. Алайда, зерттеулерде аз ғана екі стиральды ортаңғы спинальды нейронның (MSN) кіші түрлеріндегі ΔFosB индукциясының дәрежесі зерттелген. 1 (D1) допаминдік рецептормен байытылған және допаминдік рецептор 2 (D2), байытылған MSN-ді вентральды стриатада, ядродағы және NRum-дағы дренажда (NRc) және дрон қабығында (NAcat dondersal) және допаминдік рецептордағы байытылған және допаминдік рецептордағы ΔFosB индукциясын бағалау үшін флуоресцентті BAC трансгендік тышқандарды қолданамыз. ) бірнеше есірткіге, соның ішінде кокаин, этанол, Δ (9) -тетрагидроканнабинол мен опиатқа созылмалы әсер еткеннен кейін; антипсихотикалық препарат, галоперидол; кәмелетке толмағандарды байыту; сахароза ішу; калорияны шектеу; серотонинді селективті қалпына келтіру ингибиторы антидепрессант, флуоксетин; және әлеуметтік жеңіліс стрессі. Біздің нәтижелеріміз көптеген ынталандырғыштарға созылмалы әсер етудің барлық үш стриатальды аймақтағы MSN-кіші типтегі селективті үлгіде «FosB» қоздыратындығын көрсетеді. Стратумдағы riFosB индукциялық индукциясын зерттеу үшін NAc-қа синаптикалық кірістер жіберетін мидың лимбиялық аймақтарындағы белсенділікті арттыру үшін оптогенетиканы қолданамыз; бұл аймақтарға вентральды тегментальды аймақ және бірнеше глютаматериялық афферентті аймақтар кіреді: медиальды префронтальды кортекс, амигдала және вентральды гиппокамп. Бұл оптогенетикалық жағдайлар NAc ядросы мен қабығындағы MSN қосалқы типтеріндегі ΔFosB индукциясының ерекше заңдылықтарына әкеледі. Бұл нәтижелер созылмалы ынталандыруларға жауап ретінде «стрриатальды MSN қосалқы типтеріндегі« FosB индукциясының »селективті заңдылықтарын анықтайды және стриатумдағы ΔFosB индукциясының тізбек деңгейіндегі механизмдер туралы жаңа түсінік береді.

кіріспе

Созылмалы ынталандыру, соның ішінде теріс пайдалану есірткі, антипсихотикалық дәрі-дәрмектер, стресс және табиғи пайда, ofFosB - тұрақты өнімнің бөлінуіне әкеледі FosB ген, стриатумда (мысалы, Hope және басқалар, 1994; Hiroi және Graybiel, 1996; Хирой және басқалар, 1997; Moratalla және басқалар, 1996; Perrotti және басқалар, 2004, 2008; Мюллер және Унтервальд, 2005; McDaid және т.б., 2006; Teegarden және Bale, 2007; Wallace және басқалар, 2008; Солиналар және т.б., 2009; Vialou және басқалар, 2010, 2011; Kaplan және т.б., 2011). Бұл жинақталу мидың осы аймағында ΔFosB арқылы көптеген гендердің екі бағытты реттелуіне әкеледі (McClung және Nestler, 2003; Renthal және басқалар, 2008, 2009; Vialou және басқалар, 2010; Robison және Nestler, 2011). Сриатум негізінен 95 (D1) немесе допаминдік рецептор 1 (D2) сияқты көптеген гендерді байыту негізінде екі кіші түрлерге бөлінген GABAergic проекциясы орташа спинальды нейрондардан (MS2%) тұрады.Герфен, 1992; Graybiel, 2000; Lobo және басқалар, 2006; Хейман және басқалар, 2008және олардың әртүрлі субкортикалық құрылымдарға дифференциалды шығуы арқылы (Альбин және басқалар, 1989; Герфен, 1992; Каливас және басқалар, 1993; Graybiel, 2000; Никола, 2007; Смит және басқалар, 2013). Соңғы кездері мультипликативті және моторлы мінез-құлықты медитациялауда осы MSN кіші түрлерінің вентральды стриатумдағы (ядро accumbens [NAc]) және дорсальды стриатумдағы (dStr) нақты молекулалық және функционалды рөлдерін көрсететін көптеген мәліметтер болды.Lobo және Nestler, 2011; Gittis және Kreitzer, 2012).

Алдыңғы зерттеулер ΔFosB негізінен D1-MSN-де кокаинмен немесе созылмалы доңғалақпен жүретін созылмалы емдеу әдісімен қозғалады, бұл табиғи марапат түрі болып табылады (Moratalla және басқалар, 1996; Werme және т.б., 2002; Lee және т.б., 2006), ал созылмалы тежелу стресстері ΔFosB-ны MSN қосалқы түрлерінде де қоздырады (Perrotti және басқалар, 2004). Әрі қарай, жасуша типіне қатысты трансгенді желілерден немесе вирустық генмен берілетін гендік трансферден алынған дәлелдемелер «D1-MSNs-де FosB индукциясы кокаинге мінез-құлық және құрылымдық икемділікті, морфинге, доңғалақтың жұмысына, тамақтануға деген реакцияны және созылмалы әлеуметтік жеңіліске тұрақтылықты арттыратынын көрсетеді. стресс, ал Δ D2-MSN-де FosB индукциясы доңғалақтың жұмысына мінез-құлық реакциясын теріс реттейді (Kelz және басқалар, 1999; Werme және т.б., 2002; Colby және басқалар, 2003; Olausson және басқалар, 2006; Zachariou және басқалар, 2006; Vialou және басқалар, 2010; Grueter және басқалар, 2013; Робисон және т.б., 2013).

D1-MSN-мен D2-MSN-ге қарсы әсері бар осы созылмалы мотивациялық ынталандыруды реттеудегі ΔFosB-тің шешуші рөлін ескере отырып, біз мұнда бірнеше созылмалы қоздырғыштармен, соның ішінде есірткіге әсер ету арқылы MSN кіші түрлерінде pFosB индукциясының заңдылықтарын жан-жақты зерттейміз. теріс пайдалану, антипсихотикалық препаратпен созылмалы емдеу, қоршаған орта мен аппетитикалық ынталандыруларға созылмалы әсер ету, созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессі және антидепрессантпен созылмалы емдеу. Мидың бірнеше афферентті лимбалық аймағында riFosB индукциясын басқаратын тізбек механизмдерін түсіну үшін біз допаминергиялық немесе глутамататергиялық афферентті ми аймақтарындағы жасуша денелерін бірнеше рет активтендіріп, MSN қосалқы индукциясындағы ΔFosB индукциясын зерттеу үшін оптогенетикалық технологияларды қолданамыз. Біздің нәтижелеріміз созылмалы қоздырғыштар арқылы стриатальды D1-MSN және D2-MSN-де ΔFosB индукциясы туралы жаңа түсінік береді және бірінші рет стриатумдағы және таңдамалы MSN кіші түрлерінде ΔFosB индукциясын көрсетеді.

Материалдар мен әдістер

Жануарлар.

D1-GFP or D2-GFP гемизигот тышқандары (Gong және басқалар, 2003) C57BL / 6 фонында 12 с жарық күңгірт циклде ad libitum тамақ және су. Барлық зерттеулер Мэриленд университетінің медицина мектебінде және Синай тауындағы Иахан медицина мектебінде жануарларды күту және пайдалану жөніндегі институционалдық комитеттер жасаған нұсқауларға сәйкес жүргізілді. Еркек тышқандары (8 апталар жасы) барлық тәжірибелер үшін қолданылды. Барлық тышқандар жетілдірілді, ал жарық циклінің түстен кейін миы жиналды. Гемизигота D1-GFP және D2-GFP C57BL / 6 немесе FVB / N фонындағы тышқандар мінез-құлқы, D1-MSN және D2-MSN-дің физиологиясы және MSN-тің дамуы бойынша жабайы типтегі тышқандарға балама екені көрсетілген (Lobo және басқалар, 2006; Чан соавт., 2012; Nelson және басқалар, 2012). Сонымен қатар, осы зерттеуде қарастырылған «ФосБ индукциясының жалпы заңдылықтарын жабайы типтегі жануарларда жасушалық емес-селективті құралдармен салыстыруға болады (мысалы, Perrotti және басқалар, 2004, 2008).

Кокаинмен емдеу.

D1-GFP (n = Бір емге 4) және D2-GFP (n = Бір емдеу үшін 4) тышқандар үйдегі капаста 7 күн сайын кокаинді (20 мг / кг) немесе 0.9% тұзды инъекциялар алды. 1 немесе 3 d кокаин (20 мг / кг) инъекцияларына арналған тышқандар 6 немесе 4 d 0.9% тұзды инъекциялар алды, содан кейін сәйкесінше 1 немесе 3 d кокаин инъекциясы болды. Барлық тышқандар соңғы инъекциядан кейін 24 сағ жетілдірілді. Кокаиннің бұл дозасы алдыңғы зерттеулер негізінде таңдалды (мысалы, Maze және басқалар, 2010).

Галоперидолмен емдеу.

D1-GFP (n = Бір емге 3 немесе 4) және D2-GFP (n = Бір емделуге ХНУМХ) тышқандарға халоперидол (4 мг / кг) ауыз суға, рН 2 (Нараян және т.б., 2007) немесе тұрақты ауыз су, рН 6.0, 3 апта ішінде (21 d). ХНУМХ күні тышқандар жетілдірілді.

Морфинмен емдеу.

D2-GFP тышқандар (n = Бір емдеудің 4 немесе 5) изофлуранмен қысқа уақыттық наркоздалып, алдын-ала сипатталғандай 25 және 1 күндерінде морфин (3 мг) немесе шамальды түйіршіктер алды.Mazei-Robison және басқалар, 2011). ХНУМХ күні тышқандар жетілдірілді.

Этанолмен емдеу.

D2-GFP тышқандар (n = Бір емге 4 немесе 5) 10% этанолға (EtOH) ұшырады, бұл C57BL / 6 дозасын ішуге ұсынды (Yoneyama соавт., 2008). Тышқандарға 10% EtOH (бөтелке А) және су (B құты) үшін екі бөтелке таңдау тесті берілді, ал D2-GFP екі бөтелкедегі суды бақылайды (A және B құтысы) 10 d. EtOH бөтелкелерін алатын барлық тышқандар EtOH үшін артықшылықты көрсетті (100 × бөтелке көлемі / [бөтелке көлемі + бөтелке B көлемі)). 10% EtOH бөтелкесін алған тышқандар сумен салыстырғанда EtOH-ны едәуір көп тұтынды, ал екі бөтелкеде су алатын тышқандар сұйықтықты тұтынуда айырмашылықты байқамады. 10 күндізгі кеште барлық тышқандарға қалыпты ауыз су беріліп, 11 күні жетілдірілді.

Δ (9) -тетрагидроканнабинолмен (Δ (9) -THC) емдеу.

D2-GFP (n = Бір емдеу үшін 3) тышқандар 9 d үшін күніне екі рет Δ (10) -THC (0.9 мг / кг) немесе көлік құралын (0.3% Tween бар 7% тұзды) қабылдады ((XNUMX% тұзды).Perrotti және басқалар, 2008). Соңғы инъекциядан кейін тышқандар 24 сағ жетілдірілді.

Кокаинді өзін-өзі басқару.

D2-GFP тышқандар (n = 4 немесе 5 бір емге 20 мг сахароза түйіршіктерін қысыммен белгіленген арақатынаста 1 (FR1) арматуралау кестесінде ұстап тұруға үйретілді, 30 қатарынан сынақ күндері үшін тұтынылған 3 сахароза түйіршіктерін алу критерийлері стандартты процедураларға сәйкес алынды (Larson және басқалар, 2010). Басуды басқаруды үйренген тышқандарға кокаинді көктамыр ішіне енгізуге мүмкіндік беретін хирургиялық жолмен көктамыр ішіне катетер енгізілді. Операциядан кейін бір аптадан кейін, FRNNUMX күшейту кестесінде 2 с күнделікті сеанстары кезінде тышқандар өзін-өзі басқару парадигмасына енгізілді. Өзін-өзі басқару жабдықтары (Med Associates) белсенді тұтқадағы реакция кокаиннің (1 мг / кг / дұрыс тұтқаны басу үшін инфузия) жеткізілуіне, ал белсенді емес тұтқаның жауабына жауап беретін етіп жасалған. бағдарламаланған нәтиже болмады. Күнделікті 2.5 с сеанстарында, 0.5 д аптасына, 1 апталарда FR2 кестесінде тышқандардың өздігінен басқаратын кокаин. D2-GFP Балама уақыт аралығында 0.9% тұзды инъекциялар алатын тышқандар басқару ретінде пайдаланылды. Соңғы кокаин немесе тұзды қабылдағаннан кейін тышқандар 24 сағ жетілдірілді.

Героинді өзін-өзі басқару.

Героинді өзін-өзі басқаруға дейін, D2-GFP тышқандар (n = Бір емделуге арналған 4) жеті күндік 1 сағаттарда шоколад таблеткаларын (BioServ, Dustless Precision Pellets) престеу үшін қолдануға үйретілді. Басуды басқаруды үйренген тышқандарға героинді көктамыр ішіне енгізуге мүмкіндік беретін хирургиялық жолмен көктамыр ішіне катетер енгізілді. Операциядан кейін бір аптадан кейін, тышқандар өзін-өзі басқару парадигмасына 3 с күнделікті сессиялары кезінде FR1 күшейту кестесінде стандартты процедураларға сәйкес енгізілді (Navarro және басқалар, 2001). Өзін-өзі басқару жабдықтары (Med Associates) белсенді тұтқадағы жауап героиннің (5 мкг / кг / инъекция; NIDA есірткі жеткізетін бағдарлама) жеткізілуіне әкелді, сондықтан белсенді емес жауап тұтқаның бағдарламаланған салдары жоқ. 30 d үшін героинді өздігінен басқаратын процедураға жануарларға рұқсат берілді. D2-GFP Балама уақыт аралығында 0.9% тұзды инъекциялар алатын тышқандар басқару ретінде пайдаланылды. Тышқандар 24 сағ соңғы героин немесе тұзды қабылдағаннан кейін жетілдірілді.

Ювеналды қоршаған ортаны байыту.

D2-GFP (n = 4 бір топқа) тышқандар егеуқұйрықтардан бейімделген парадигманы қолдана отырып, 21 (P21) босанғаннан кейінгі күні байытылған ортаға немесе қалыпты тұрғын үй жағдайларына шығарылды (Жасыл және басқалар, 2010). Байытылған ортаға байытылған-o-cob төсектері бар (Andersons зертханалық төсек-орындары) үлкен шкаф торы, тінтуірдің туннельдері, күмбездері мен дөңгелектері, тырнақ шарлары, саятшылар (Био Серв) және басқа да ойыншықтар кірді. Тышқан PNNUMX дейін 4 апта ішінде тұрғын үй жағдайында болды, содан кейін жетілдірілді.

Сахароза емдеу.

D2-GFP тышқандар (n = Бір емделуге арналған 4 немесе 5) алдыңғы зерттеуге ұқсас 10% сахароза үшін екі бөтелке таңдау сынағы берілді (Wallace және басқалар, 2008). Тышқандарға 10% сахароза (A бөтелке) және су (B құты) берілді, алайда D2-GFP 10 d үшін екі бөтелкедегі суды басқарады. Сахароза бөтелкелерін алатын барлық тышқандар сахарозаға басымдық берді (100 × бөтелкеге ​​арналған көлем / бөтелке A көлем + бөтелке B көлемі). 10% сахароза бөтелкесін алған тышқандар суға қарағанда сахарозаны едәуір көп тұтынды, ал екі бөтелкеде су алатын тышқандар сұйықтықты тұтынуда айырмашылықты байқамады. 10 күндізгі кеште барлық тышқандарға қалыпты ауыз су беріліп, 11 күні жетілдірілді.

Калорияны шектеу.

D2-GFP тышқандар (n = Бір генотипке 4) калорияны шектеу протоколынан өтті, онда олар 60% -ды алды ad libitum күнделікті калория (Vialou және басқалар, 2011) 10 d үшін. D2-GFP басқару тышқандары chow-ға толық қол жеткізді. 10 күндізгі кеште барлық тышқандар човке толық қол жеткізіп, 11 күні жетілдірілді.

Әлеуметтік жеңіліске ұшыраған стресс.

D2-GFP тышқандар (n = 4 немесе 5 бір топқа) жоғарыда сипатталғандай 10 d әлеуметтік жеңіліс стрессінен өтті (Бертон және басқалар, 2006; Кришнан және басқалар, 2007). Үлкен хомяк торында 1 мин ішінде тышқандар агрессивті CD5 отставкаға жіберілді. Содан кейін тышқандар сенсорлық байланыста болу үшін тесілген бөлгіштің екінші жағындағы сол торға 24 с орналастырылды. Келесі күні тышқандар CD1 тінтуіріне дәл осындай жағдайда және баспана жағдайында ұшырады. Бұл 10 d үшін күн сайын жаңа CD1 қайталанды. Бақылау тышқандары ұқсас жағдайларда орналастырылған, жеңіліске ұшырамай. 11 күні тышқандар әлеуметтік өзара әрекеттесу үшін сыналды. Тінтуірлер алдымен тінтуірдің қатысуынсыз (жаңа нысанасыз) ашық алаңдағы жаңа камерамен әрекеттескен уақытына сыналды, содан кейін камераның артында тұрған CD1 (мақсат) романының жаңа тінтуірімен (мақсат) әрекеттескен уақытына сыналды (Бертон және басқалар, 2006; Кришнан және басқалар, 2007). Бұрын сипатталған параметрлер негізінде тышқандар сезімтал немесе икемді топтарға бөлінді (Кришнан және басқалар, 2007). Бұған жаңа тінтуірмен өткізілген жалпы уақыт пен өзара қатынас коэффициенті кірді: (мақсатты өткізуге жұмсалған уақыт / мақсатсыз өткізілген уақыт) × 100. Бұл шара сезімтал және икемді топтарды сенімді түрде анықтау үшін көрсетілді және басқа мінез-құлық айырмашылықтарымен өте тығыз байланысты (Кришнан және басқалар, 2007). Барлық тышқандар әлеуметтік өзара әрекеттестік сынағынан кейін 24 сағ жетілдірілді (48 с соңғы әлеуметтік жеңіліс эпизодынан кейін).

Флуоксетинмен емдеу.

D2-GFP тышқандар (n = 3 немесе 4 бір топқа) 14-ті флюксетиннің (20 мг / кг) немесе көлік құралының (0.9% циклодекстринімен 10% тұзды) күн сайын ішке ішілік инъекциялар алды (Бертон және басқалар, 2006). Соңғы инъекциядан кейін тышқандар 24 сағ жетілдірілді.

Стереотаксикалық хирургия.

D2-GFP Тышқандар кетаминмен (100 мг / кг) / ксилазинмен (10 мг / кг) анестезияға ұшырап, кішкентай жануарларға арналған стереотаксикалық құралға орналастырылды, олардың бас сүйектері бетіне шығарылды. Отыз үш өлшеуіш шприц инелері 0.5 – 1 мкл, минутына 0.1 мкл жылдамдықпен вирусты екі жақты вентральді тегнальды аймаққа (VTA), медиальды маңдай қыртысына (mPFC), амигдалаға немесе вентральды гиппомпусқа инфузия үшін қолданылды. vHippo). AAV [adeno-байланысты вирус] -hSyn-ChR2 [channelhhodopsin 2] -EYFP немесе AAV-hSyn-EYFP VTA ішіне енгізілді D2-GFP тышқандар (n = Бір топқа 5) стереотаксикалық координаттарда (алдыңғы - артқы, later3.3 мм; бүйірден - медиальді, 0.5 мм; дорсальді-вентральді, −4.4 мм, 0 ° бұрыш). Бұдан кейін ұзындығы 26 мм болатын екі жақты канула (3.9-өлшегіш), VTA үстіне имплантация жасалды (алдыңғы-артқы, −3.3 мм; бүйірден-медиальды, 0.5 мм; дорсальді-вентральды, −3.7 мм) (Koo және басқалар, 2012; Chaudhury соавт., 2013). AAV-CaMKII-ChR2-mCherry немесе AAV-CaMKII-mCherry mPFC ішіне енгізілді (n = 4 немесе 5 әр топ үшін), амигдала (n = 3 немесе 4 әр топ үшін) немесе vHippo (n = Бір топқа 3 немесе 4) D2-GFP имплантациядан кейін тышқандар 105 мкм созылмалы имплантацияланатын оптикалық талшықтармен (Sparta et al. 2011). Координаттар келесідей болды: mPFC (инфралимбиялық нысаналы, бірақ біз вирустың прелимбиялық аймақтарға таралуын байқадық: алдыңғы-артқы, 1.7 мм; бүйірден-медиальды, 0.75 мм; дорсальды-вентральді, −2.5 мм, 15 ° бұрыш) және оптикалық талшық (дорсальды-вентральды, −2.1 мм); амигдала (базальді амигдала нысанаға алынды, бірақ біз вирустың амигдаланың орталық ядросына таралуын байқадық; алдыңғы-артқы, −1.6 мм; бүйірден-медиальді, 3.1 мм; дорсальді-вентральді, −4.9 мм, 0 ° бұрыш) және оптикалық талшық (дорсальды-вентральды, −4.9 мм); vHippo (вентральды субдикулум нысанаға алынды, бірақ біз вирустың вентральдық гиппокампаның басқа аймақтарына таралуын байқадық; алдыңғы-артқы, −3.9 мм; бүйірден-медиальді, 3.0 мм; дорсальды-вентральді, −5.0 мм, 0 ° бұрыш) және оптикалық талшық (дорсальды-вентральды, −4.6 мм).

Оптогенетикалық жағдайлар.

үшін in vivo VTA нейрондық оқ атуды оптикалық басқару, 200 мкм ядролы оптикалық талшықты патч сымы канулаға бекіту үшін өзгертілді. Талшық каннулаға бекітілгенде, талшықтың ұшы кануладан тыс ∼0.5 мм кеңейтілген (Lobo және басқалар, 2010; Chaudhury соавт., 2013). Үшін in vivo mPFC, амигдала және vHippo нейрондық атысқа оптикалық бақылау, имплантацияланатын басты бекіту талшықтарына 62.5 мкм бөлінген талшық патч сымы қосылды (Sparta соавт. 2011). Оптикалық талшықтар FC / PC адаптері арқылы 473 нм көгілдір лазер диодына (Crystal Lasers, BCL-473-050-M), ал жеңіл импульстар стимулятор (Agilent, 33220A) арқылы жасалды. VTA үшін көк жарық (473 нм) фазалық импульстар, 20 мц үшін 40 мс (Chaudhury соавт., 2013), 10 күн ішінде 5 күн ішінде жеткізілді MPFC, амигдала және vHippo үшін көгілдір жарық (473 нм) импульстар, 20 Гц 30 с үшін 10 минутына күніне 5 д. Жеткізілді. Жарық жеткізу үйдің қабығында болды, және барлық тышқандар 24 сағ соңғы жарықтандырудан кейін жетілдірілді.

In vitro патч-қысқыш электрофизиология.

Бүкіл жасушалық жазбалар жоғарыда аталған вирустармен егілген тышқандардан VTA допаминдік нейрондардан немесе mPFC глутаматтердждік нейрондардан алынды. Кескінді жазу тышқандарда жоқ болды in vivo ынталандыру, бірақ 1 d кесекпен қоздыру (1 d) немесе 4 d in vivo ынталандыру және 1 d тілім стимуляциясы (5 d). Стрессті азайту және сау кесектерді алу үшін электрофизиология аймағына жеткізілгеннен кейін бірден тышқандар анестезирленіп, 40 мм NaCl, 60 mm KCl, 128 mm NaH бар мұзды aCSF бар 3-1.25 с үшін жетілдірілді.2PO4, 10 мм d-глюкоза, 24 мм NaHCO3, 2 мм CaCl2, және 2 мм MgCl2 (95% O бар оттегі2 және 5% CO2, рН 7.4, 295 – 305 мОсм). MPFC немесе VTA бар мидың өткір кесектері NaCl-ны 254 мм сахарозамен толығымен алмастыру нәтижесінде алынған және 95% O қаныққан суық сахароза-aCSF-тегі микросүзгіш (Ted Pella) көмегімен кесілді.2 және 5% CO2. Кесектер 1 сағтан 37 ° C-қа дейін aCSF бар сақтау камерасында ұсталды. Патч-тамшуырлар (3-5 MΩ), бүкіл жасушалық ток үшін ішкі ерітіндімен толтырылды, олар мыналарды қамтиды: 115 мм калий глюконаты, 20 мм KCl, 1.5 mm MgCl2, 10 мм фосфокреатин, 10 мм HEPES, 2 mm магний ATP және 0.5 mm GTP (pH 7.2, 285 mOsm). Бүкіл жасушалық жазбалар aCSF көмегімен 34 ° C температурада жүргізілді (ағым жылдамдығы = 2.5 мл / мин). Көк жарықпен жүретін пойыздар (mPFC үшін 20 Гц немесе VTA үшін 20 мс, VTA үшін 40 мс) FC / PC адаптері арқылы 473 нм көгілдір лазер диодына (OEM) қосылған және 200 арқылы mPFC және VTA кесектеріне жеткізілген стимулятор арқылы жасалды мкм оптикалық талшық. Ағымдық қысқыш эксперименттері Multiclamp 700B күшейткішін қолдану арқылы жүзеге асырылды, ал мәліметтер pClamp 10-де (Молекулалық құрылғылар) алынды. Тәжірибелер кезінде сериялардың тұрақтылығы бақыланып, 3 кГц (Бессель сүзгісі) кезінде мембраналық токтар мен кернеулер сүзілді.

Иммуногистохимия.

Тінтуірлер хлорлы гидратпен анестезирленді және ХНУМХ м PBS-пен перфузияланды, содан кейін PBS-те 0.1% параформальдегид. Мидар бір түн ішінде 4% параформальдегидке қосылды, содан кейін 4% сахарозада кипрессервацияланды. Мидар криостатта (Leica) 30 мкм-ден PBN-ге 35% натрий азидімен бөлінді. Иммуногистохимия үшін бөлме температурасында шейкерде 0.1 с үшін 3% Triton-X бар 0.01% қалыпты есек сарысуында бөлімдер бұғатталды. Содан кейін бөлімдер бастапқы антиденелерге бөлме температурасында шейкерде бір түн ішінде инкубацияланды. Пайдаланылған антиденелер мыналар болды: қоянға қарсы FosB (1: 1, каталог # sc-2000, Санта-Крус биотехнологиясы), тышқанға қарсы NeuN (48: 1, каталог #MAB1000, Милипоре), тауыққа қарсы GFP (377: 1) , каталог # 5000-10, Aves) және қоянға қарсы CREB (ақуызды байланыстыратын CAMP жауап элементі; 20: 1, каталог # 1000-06, Милипоре). Келесі күні бөлімдер PBS-де шайылды, содан кейін қайталама антиденелерде 863 с инкубациясы жасалды: есектерге қарсы Cy1 есек, тышқанға қарсы Cy3 және DyLight-5 немесе Alexa-488 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). MCherry және тирозин гидроксилазы иммуногистохимиясы үшін бұрын сипатталғандай тәжірибелер жүргізілді (Lobo және басқалар, 2010; Mazei-Robison және басқалар, 2011). Бөлімдер PBS-те шайылып, слайдтарға орнатылып, қапталған.

Суретке түсіру және ұяшықтарды санау.

Иммунофлуоресценция Zeiss Axioscope немесе Olympus Bx61 конфокалдық микроскопында бейнеленген. ImageJ бағдарламалық жасақтамасымен ұяшықтарды санау жүргізілді. 1.42-1.1 NAc (ядро және қабықша) және дорсальды стриатум сынамаларын іріктеу суреттері 2 немесе 3 ми секцияларынан / жануарлардан алынды (қараңыз) Інжір. 1A). 400 мкм × 500 мкм сурет көмегімен тінтуірдің ми аймағына жалпы 250 – 250 жасушалар есептелді. Ұяшықтар алдыңғы зерттеуге ұқсас ImageJ бағдарламалық жасақтамасының көмегімен есептелді (Lobo және басқалар, 2010). Шамамен 400-500 жалпы NeuN жасушалары бір тінтуірге ми аймағына есептелді, содан кейін GFP саны+, GFP+: ΔFosB+, GFP-, және GFP-: ΔFosB+ әр аймақта ұяшықтар есептелді. Деректер келесі түрде сандық есептелді: (GFP)+: ΔFosB+ нейрондар × 100%) / (жалпы GFP+ нейрондар) және (GFP)-: ΔFosB+ нейрондар × 100%) / (жалпы GFP- нейрондар). GraphPad Prism бағдарламалық жасақтамасының көмегімен статистикалық талдау жүргізілді. Барлық ұяшықтарды санау анализінде екі жақты АНОВалар және Бонферрони посты сынақтары қолданылды.

Сурет 1.  

Созылмалы кокаин стриаталды аймақтардағы D1-MSN-де ΔFosB-ны индукциялайды. A, Брегмадан + 1.42-тен + 1.10-ке дейінгі стратиальды секциялар жасушаларды санау үшін қолданылды. Сурет a D2-GFP стриатальды бөлім зерттелген үш стриатальды аймақты көрсетеді: NAc өзегі, ...

нәтижелері

OsFosB D1-MSN және D2-MSN-де кокаинге және галоперидолға бірнеше рет ұшырағаннан кейін индукцияланады

Біз алдымен MSN қосалқы типтеріндегі BFB индукциясын қарастырдық D1-GFP және D2-GFP D1-MSN-де osFosB ақуызын жоғарылату үшін бұрын көрсетілген созылмалы кокаин жағдайларын қолданатын тышқандар (Moratalla және басқалар, 1996). D1-GFP және D2-GFP D1 немесе D2 рецепторлары генінің астындағы жетілдірілген жасыл флуоресцентті ақуызды білдіретін BAC трансгендік тышқандар (Інжір. 1A), 20 d үшін кокаинді (7 мг / кг) немесе тұзды тұзды ішілік инъекциялармен қабылдады, және миды соңғы инъекциядан кейін 24 сағ жинады (Інжір. 1B). Содан кейін біз NeuN, GFP немесе FosB-ға қарсы антиденелерді қолдана отырып, ми бөлімдерінде иммуногистохимия жасадық және NAc ядросында, NAc қабығында және dStr жасушаларында сурет салдық және саналдық (Інжір. 1A,C). Анти-FosB антиденесі толық көлемді FosB және ΔFosB деп таныған кезде, батыстық дақтарды немесе иммуногистохимияны қолданумен жүргізілген көптеген зерттеулер ΔFosB 24 с шығарылу уақытының нүктесінде болатын жалғыз анықталатын түр екенін дәлелдеді (мысалы, Perrotti және басқалар, 2008). Сондықтан біз 24 сағ немесе одан да көп уақыт нүктесін осы зерттеудегі барлық жағдайлардан кейін миды жинау үшін пайдаландық, бұл тек ΔFosB-ны анықтап отырғанымызға көз жеткізді. Стрриатальды MSN-де стриатумдағы барлық нейрондардың ∼95% құрайтындықтан, біз GFP анықтау үшін NeuN иммунолабелдеуін қолдандық- қарама-қарсы MSN кіші түрімен байытылған нейрондар (мысалы, D2-MSN D1-GFP тышқандар мен D1-MSN D2-GFP тышқандар). Біз таптық D1-GFP кокаинмен өңделген тышқандар GFP құрамындағы ΔFosB индукциясын көрсетеді+/ NeuN+ NAc ядродағы нейрондар (D1-MSNs), NAc қабығындағы және dStr, ал GFP-/ NeuN+ жасушалар (D2-MSNs) барлық стрриатальды аймақтарда osFosB индукциясының айтарлықтай жоғарылауын байқамады (Інжір. 1D): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі F(1,12) = 16.41, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі F(1,12) = 12.41, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.001; dStr: есірткі × жасуша түрі F(1,12) = 12.07, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01. Осы тұжырымдарға сәйкес біз байқадық D2-GFP тышқандарда GFP-де ofFosB индукциясы жоқ+/ NeuN+ нейрондар (D2-MSNs), бірақ GFP-де ΔFosB индукциясы-/ NeuN+ (D1-MSNs) кокаинмен емдеуден кейін барлық стрриатальды аймақтарда (Інжір. 1D): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі F(1,12) = 15.76, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.0001; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі: F(1,12) = 20.33, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; dStr: есірткі × жасуша түрі: F(1,12) = 35.96, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.001. Біз MSN-дегі ,FosB индукциясының кинетикасын 1, 3 немесе 7 д кокаиннен (20 мг / кг, ip) инъекциядан кейін зерттедік. Біз D1-MSN-де striFosB индукциясының 3 немесе 7 d кокаинмен емделуімен барлық стриатальды аймақтардағы тұзды еммен салыстырғанда айтарлықтай индукциясын байқадық (Інжір. 1F): dStr-тен ұсынылған график; екі жақты АНОВА, жасуша түрі × күн F(2,13) = 17.87, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.01, p <0.001. Бұл WesternFosB жинақтаудың стриатумдағы уақыт ағымына сәйкес келеді, бұл батыстың жойылуымен байқалды (Hope және басқалар, 1994) және кокосқа әсер ету кезінде ΔFosB-ны тек D1-MSN-де индукциялауды растайды.

Келесіде галоперидолға созылмалы әсер еткеннен кейін subFosB индукциясын иммуногистохимия арқылы MSN қосалқы типтерінде қарастырдық (Інжір. 2). Алдыңғы жұмыс созылмалы галоперидол D2-MSN-де osFosB-ны тудыруы мүмкін деп жанама түрде ұсынды (Hiroi және Graybiel, 1996; Atkins және басқалар, 1999) бұған дейін тікелей қарастырылмаған болса да. D1-GFP және D2-GFP тышқандар ағынды суға галоперидол (2 мг / кг), рН 6.0 алды, ал D1-GFP және D2-GFP басқару тышқандары тұрақты ауыз суды алды, рН 6.0, 21 d (3 апта) үшін және ми 22 күні жиналды (Інжір. 2A). Кокаин сияқты, біз стриатумдағы барлық FosB тәрізді иммунореактивтілік FosB емес, толық ұзындықты FosB екенін білдіреді (Atkins және басқалар, 1999). Біз таптық D1-GFP Галоперидол қабылдаған тышқандарда GFP-де ΔFosB индукциясы байқалмады+/ NeuN+ NAc ядродағы, NAc қабығындағы немесе dStr ішіндегі нейрондар (D1-MSN); алайда, ЖҚҚ-да «FosB» деңгейінің едәуір жоғарылауы байқалды-/ NeuN+ барлық стриатальды аймақтардағы нейрондар (D2-MSN) (Інжір. 2B,C): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі: F(1,10) = 23.29, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: препарат: препарат × жасуша түрі: F(1,10) = 30.14, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; dStr: есірткі × жасуша түрі: F(1,10) = 37.63, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.0001. Бұл сараптамамен расталды D2-GFP тышқандар: біз GFP-де ΔFosB-нің айтарлықтай индукциясын байқадық+/ NeuN+ барлық үш стриатальды аймақтағы нейрондар (D2-MSN), бірақ GFP-де ΔFosB-де айтарлықтай өзгеріс жоқ-/ NeuN+ (D1-MSNs) галоперидолмен емдегеннен кейін (Інжір. 2B,C): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі: F(1,12) = 24.30, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.05; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі: F(1,12) = 26.07, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.001; dStr: есірткі × жасуша түрі: F(1,12) = 21.36, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.01. D1-MSN-де ΔFosB индукциясының ұқсас үлгісін екеуінде де қайталанған кокаин әсерінен байқадық. D1-GFP (GFP)+/ NeuN+) және D2-GFP (GFP)-/ NeuN+) тышқандарға және D2-MSN-де қайталанған галоперидол арқылы D1-GFP (GFP)-/ NeuN+) және D2-GFP (GFP)+/ NeuN+) тышқандар, біздің тәжірибелеріміздің қалған бөлігі D2-GFP D1-MSN-де GFosB индукциясын зерттеу үшін тышқандар (GFP)-/ NeuN+) және D2-MSN (GFP)+/ NeuN+) басқа созылмалы қоздырғыштардан кейін.

Сурет 2.  

Созылмалы галоперидол стриатальды аймақтарда D2-MSN-де ΔFosB-ны индуктивті түрде қоздырады. A, 21 d халоперидолмен емдеудің уақыттық курсы (2 мг / кг, ауыз суға) немесе су. B, NAc қабығының иммуногистохимиясы D1-GFP және D2-GFP галоперидолдан кейінгі тышқандар ...

Бақылау ретінде біз кокаин мен галоперидол жағдайындағы CREB экспрессиясының деңгейлерін зерттедік, бұл нәтижелер басқа транскрипция факторларына жалпылануы мүмкін бе ()Інжір. 3). Біз бақылау мен есірткіге шалдыққан тышқандардың арасында CREB өрнегінде айтарлықтай айырмашылықты байқамадық. Әрі қарай, D2-MSN және D1-MSN арасындағы CREB деңгейлерінде ешқандай айырмашылық байқалған жоқ (Інжір. 3B,C).

Сурет 3.  

Созылмалы кокаин немесе галоперидол MSN кіші түрлеріндегі CREB-ді қоздырмайды. A, Стриатумдағы CREB және GFP үшін иммуностазинг D2-GFP созылмалы кокаин немесе созылмалы галоперидолдан кейінгі тышқандар (Інжір. 1 және Және22 есірткі емдеу туралы аңыздар). Масштаб жолағы, 50 мкм. ...

Медициналық есірткі арқылы MSN қосалқы типтеріндегі FB индукциясының ерекше заңдылықтары

Себебі алдыңғы зерттеулер көрсеткендей, теріс пайдаланудың басқа есірткілері стриатальды субрегиондарда osFosB-ны қоздыруы мүмкін (Perrotti және басқалар, 2008), біз ΔFosB-ны апиындарға, EtOH немесе Δ (9) -THC-ге созылмалы әсер еткеннен кейін MSN қосалқы типтерінде қарастырдық. Алдымен біз созылмалы морфинді әсер етудің стриатальды аймақтардағы белгілі бір MSN кіші түрлерінде «FosB» әсер ететіндігін зерттедік. D2-GFP Тінтуірлер 25 және 1 күндері шаман немесе морфин (3 мг) түйіршіктерінің екі тері астындағы имплантаттарын алды, ал 5 күні ми жиналды (Інжір. 4AFosB емес, FosB индукцияланған кезде (Zachariou және басқалар, 2006). Кокаиннің керемет контрастында, екі MSN қосалқы түрі де NAc ядросында, NAc қабығында және dStr құрамындағы ΔFosB-нің шамалы бақылауымен салыстырғанда едәуір (және шамамен салыстырылатын), ,FosB индукциясының барлық стриатальдарда байқалмағаны байқалды. аймақтар (Інжір. 4A): екі жақты АНОВА; NAc өзегі: дәрі F(1,14) = 75.01, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); NAc қабығы: есірткі F(1,14) = 62.87, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); dStr: есірткі F(1,14) = 60.11, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Сурет 4.  

Есірткіге тәуелділік есірткі стриатальды аймақтарда MSN қосалқы типтерінде osFosB тудырады. A, Созылмалы морфинмен емдеу (25 мг түйіршіктері 1 және 3 күндерінде) D2-GFP тышқандар NAc ядросында, NAc қабығында және dStr-де MSN қосалқы типтерінде ΔFosB едәуір индукциясына әкеледі ...

Біз EtOH созылмалы әсерінен кейін MSN қосалқы типтеріндегі ΔFosB индукциясының заңдылықтарын зерттедік. D2-GFP тышқандарға 10% EtOH (бөтелке А) және су (бөтелке B) үшін екі бөтелке таңдау сынағы берілді, ал D2-GFP екі бөтелкедегі суды басқарады (А және В бөтелкелері), 10 d үшін және ми 11 күні жиналды (Інжір. 4B). 10% EtOH бөтелкесін алған тышқандар сумен салыстырғанда EtOH-ны едәуір көп тұтынды, ал екі бөтелкеде су алатын тышқандар сұйықтықты тұтынуда айырмашылықты байқамады (Інжір. 4B): су бөтелкесіне артықшылық: 50.00 ± 4.551%, EtOH тобы: 84.44 ± 8.511%; Студенттікі t тест, p <0.05. Созылмалы EtOH әкімшілігі D1-MSNs өзгеріссіз NAc ядросындағы, NAc қабығы мен dStr-дегі D2-MSN-де ΔFosB индукциясының маңызды индукциясына әкелді (Інжір. 4B): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі: F(1,14) = 24.58, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.05; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі: F(1,14) = 36.51, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.01; dStr: есірткі × жасуша түрі: F(1,14) = 29.03, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.01.

D2-GFP Сондай-ақ, тышқандарға 9 d үшін күніне екі рет Δ (10) -THC (7 мг / кг, ip) өңделді, ал соңғы инъекциядан кейін мидар 24 сағ жиналды. Кокаин мен EtOH жағдайларына ұқсас, біз созылмалы Δ (1) -THC қабылдайтын тышқандарда D9-MSN-де селективті түрде ΔFosB-нің едәуір жоғарылауын байқадық.Інжір. 3E): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі F(1,8) = 26.37, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі: F(1,8) = 44.49, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.001; dStr: есірткі × жасуша түрі F(1,8) = 29.30, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01.

Бұдан әрі біз терапевтік кокаин немесе опиаттың тергеуші әкімшілігімен «FosB индукциясының MSN қосалқы түріндегі тышқандар препаратты ерікті түрде басқаратын шартты парадигмаларда кездесетінін» қарастырдық. Біріншіден, D2-GFP FRNNUMX кестесінде 0.5 га күн үшін 1 апта ішінде 2 апта ішінде тышқандар кокаинді басқаруға үйретілді (3 мг / кг / инфузия) және миды соңғы инфузиядан кейін 24 сағ жинады (Інжір. 4D), FosB емес, FosB индукцияланған кезде белгілі болады (Larson және басқалар, 2010). Тышқан белсенді және белсенді емес тұтқаны басқанда едәуір көп уақыт жұмсады (Інжір. 4D; Студенттікі t тест, p <0.01). Кокаиннің орташа тәуліктік дозасы көктамыр ішіне 19.1 мг / кг құрады (Інжір. 4D) жоғарыда қолданылған 20 мг / кг қарын астындағы дозаға ұқсас (Інжір. 1). Байланысты емес кокаин әсерінде (Інжір. 1), кокаиннің өзін-өзі басқаруы тұзды әсермен салыстырғанда барлық стрриатальды аймақтарда тек D1-MSN-де osFosB индукциясын тудырғанын анықтадық (Інжір. 4D): ANOVA, NAc екі жақты: дәрілік × жасуша түрі F(1,14) = 21.75, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі: F(1,14) = 26.52, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.01; dStr: есірткі × жасуша түрі F(1,14) = 33.68, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.001. Сол сияқты, континентті емес опиатты (морфин) экспозициясына ұқсас (Інжір. 4A), біз оны таптық D2-GFP Өздігінен басқарылатын героин (инфузияға 30 мкг / кг), FRNNUMX кестесінде 1 га күн ішінде 3 аптада 2 аптада 24 с тексерілді, соңғы препараттың әсерінен кейін барлық D2-MSN және D1-MSN-де индукцияны көрсетті. аймақтар (Інжір. 4E): екі жақты АНОВА, NAc өзегі: дәрі F(1,12) = 68.88, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); NAc қабығы: есірткі F(1,12) = 80.08, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: есірткі F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Героиннің орташа тәуліктік дозасы 0.459 мг / кг құрады, ал тышқандар белсенді және белсенді емес рычагты басуға едәуір көп уақыт жұмсады (Студенттік) t тест, p <0.05) (Інжір. 4E).

Қоршаған ортаны байыту және тәбетті ынталандыру osFosB-ны D1-MSN және D2-MSN екеуінде де тудырады.

Себебі алдыңғы зерттеулер табиғи сыйақылардың стриаталды аймақтардағы osFB әсер ететіндігін көрсетті (Werme және т.б., 2002; Teegarden және Bale, 2007; Wallace және басқалар, 2008; Солиналар және т.б., 2009; Vialou және басқалар, 2011), D1-MSN үшін таңдамалы доңғалақ индукциясы бар (Werme және т.б., 2002), біз басқа табиғи сыйақылардың индукциясының жасушалық ерекшелігін көрсететінін тексердік. Біз алдымен ювеналды байыту парадигмасын қолдандық D2-GFP тышқандар байытылған ортада емізуден бастап (3 апта) 4 апталық кезеңге орналастырылды (Інжір. 5A). Бұған дейін NFc және dStr тінтуірінде osFosB-ны қоздыратын әдіс пайда болды (Солиналар және т.б., 2009; Lehmann және Herkenham, 2011). Тұрғын үй жағдайымен салыстырғанда, байытылған орта stFosB барлық стриатальды аймақтарда едәуір өсті, бірақ D1-MSN және D2-MSN-де салыстырмалы индукциямен жасуша типіне байланысты емес.Інжір. 5A): екі жақты ANOVA, NAc өзегі: қоршаған орта F(1,12) = 89.13, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc қабығы: қоршаған орта F(1,12) = 80.50, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: қоршаған орта F(1,12) = 56.42, p <0.01, Bonferroni пост тесті: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Сурет 5.  

Қоршаған ортаны байыту және тәбетті ынталандыру NFosB-ны MSN қосалқы түрлерінде де тудырады. A, D2-GFP 21 аптаның ішінде P4-тен басталған байытылған ортада орналасқан тышқандар барлық стрриаталь бойынша MSN қосалқы түрлерінде ΔFosB индукциясын көрсетеді. ...

Келесіде біз созылмалы аппетитикалық ынталандырулардан кейін subFosB өрнегін MSN қосалқы түрлерінде қарастырдық. Біз алдымен созылмалы сахароза ішудің әсерін сынап көрдік, ол бұрын BFos NAc егеуқұйрығында болатынын көрсетті (Wallace және басқалар, 2008). D2-GFP тышқандарға 10% сахароза (бөтелке A) және су (B шөлмек) үшін екі бөтелке таңдау тесті берілді, ал D2-GFP 10 d үшін екі бөтелкедегі (A және B құты) алынған суды басқару және 11 күні ми жиналды (Інжір. 5B). 10% сахароза алған тышқандар сахарозаны едәуір көп тұтынды, ал екі бөтелкеде су алатын тышқандар сұйықтықты тұтынуда айырмашылықты байқамады (Інжір. 5B): А бөтелкесіне артықшылық, су: 50.00 ± 4.749%, сахароза: 89.66 ± 4.473%; Студенттікі t тест, p <0.001. Біз созылмалы сахарозаны тұтынудың NAc ядросында, NAc қабығында және dStr-де ΔFosB туғызғанын және бұл MSN кіші типтерінде де болғанын анықтадық (Інжір. 5B): ANOVA, NAc екі жақты: емдеу F(1,12) = 76.15 p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc қабығы: емдеу F(1,12) = 63.35, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: емдеу F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Соңында, біз калорияны шектегеннен кейін NFosB өрнегін MSN қосалқы түрлерінде қарастырдық, өйткені локомотивтердің белсенділігі мен мотивациялық күйін арттыратын бұл жағдай бұрын NAc тінтуірінде ΔFosB деңгейін жоғарылату үшін көрсетілген (Vialou және басқалар, 2011). D2-GFP Тінтуірлер 60% -ын алған калориямен шектелген хаттамадан өтті ad libitum күн сайын 10 d үшін калория және 11 күні ми жиналды (Інжір. 5C). Калорияны шектеу NAc өзегі мен NAc қабығындағы osFosB деңгейінің жоғарылауын көрсетті (Vialou және басқалар, 2011), сонымен қатар dStr-де osFosB деңгейінің жоғарылауы. Алайда, біз D1-MSN-де D2-MSN-ге қарағанда дифференциалды индукцияны байқамадық (Інжір. 5C): ANOVA, NAc екі жақты: емдеу F(1,12) = 67.94 p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc қабығы: емдеу F(1,12) = 67.84, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: емдеу F(1,12) = 82.70, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессі және антидепрессантпен емдеу MSN кіші түрлеріндегі osFosB дифференциалды индукциясын тудырады.

Біз бұған дейін chronicFosB созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессінен кейін тышқандарда NAc көбейгенін көрсеткен едік (Vialou және басқалар, 2010). Бұл индукция сезімтал тышқандарда да (стресстің анық емес тізбегін көрсететін) және серпімді болған тышқандарда (осы жойқын әсерлердің көпшілігінен құтылатындар) байқалғанына қарамастан, ΔFosB индукциясы серпімді кіші топта көп болды және тікелей көрсетілді. тұрақтылық жағдайына делдал болу. Осы зерттеуде біз осы екі фенотиптік топтағы osFosB индукциясы үшін керемет жасушалық ерекшелігін таптық. D2-GFP Тышқандар 10 d әлеуметтік жеңіліс стрессіне ұшырап, әлеуметтік өзара әрекеттестіктің негізінде сезімтал және икемді популяцияларға бөлінді (Інжір. 6A), бұл басқа мінез-құлық белгілерімен өте тығыз байланысты (Кришнан және басқалар, 2007). Әлеуметтік жеңіліс стресстен кейін сезімтал мінез-құлықты дамыған тышқандар D2-MSN-де NAc ядросында, NAc қабығында және dStr-те индукция байқалмайды, D1-MSN-де индукциясы байқалмайды. Керемет керісінше, икемді және басқарылатын тышқандармен салыстырғанда, D1-MSN-де D2-MSN-де индукция байқалмайды, DXNUMX-MSN-де индукция байқалмайды (DXNUMX-MSN-де).Інжір. 6A; екі жақты ANOVA, NAc өзегі: топтық жасуша түрі F(1,20) = 20.11, p <0.05, Bonferroni сынақтан кейінгі: D2-MSN / сезімтал p <0.05, D1-MSN / серпімді p <0.05; NAc қабығы: топтық × ұяшық типі F(1,20) = 27.79, p <0.01, Bonferroni сынақтан кейінгі: D2-MSN / сезімтал p <0.001, D1-MSN / серпімді p <0.01; dStr: топ × ұяшық типі F(1,20) = 19.76, p <0.01, Bonferroni сынақтан кейінгі: D2-MSN / сезімтал p <0.05, D1-MSN / серпімді p <0.01).

Сурет 6.  

Созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессі және созылмалы флуоксетин стриатумдағы ентігетін MSN кіші түрлерінде FosB индукциясын тудырады. A, D2-GFP 10 d әлеуметтік жеңіліс стресс-көрмесіне сезімтал, барлық стриаталды жағдайдағы D2-MSN-де FosB индукциясы ...

SSRI антидепрессанты, флуоксетинмен созылмалы емдеу созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессінен кейін сезімтал тышқандар көрсеткен депрессияға қарсы әрекеттерді қалпына келтіреді (Бертон және басқалар, 2006). Сонымен қатар, мұндай емдеу AFosB-ті NAc сезімтал, сондай-ақ бақылау тышқандарын тудырады және біз флуоксетиннің пайдалы мінез-құлық әсерлері үшін осындай индукция қажет болатындығын дәлелдедік (Vialou және басқалар, 2010). Флюксетинді созылмалы қабылдағаннан кейін ΔFosB индукциясының жасушалық ерекшелігін қарастырдық. D2-GFP тышқандар флюксетинді (20 мг / кг, ip) 14 d үшін алды, ал ми 15 күні жиналды (Інжір. 6B). D1-MSN-де ΔFosB-нің индукциясын едәуір байқадық, бірақ D2-MSN-де емес, флуоксетинмен өңделген тышқандарда көлік құралдарын басқарумен салыстырғанда (Інжір. 6B; екі жақты ANOVA, NAc өзегі: дәрі-дәрмек × жасуша түрі F(1,10) = 14.59, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: есірткі × жасуша түрі: F(1,10) = 26.14, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; dStr: есірткі × жасуша түрі F(1,10) = 8.19, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.001).

NAc мидың афферентті аймақтарын in vivo оптогенетикалық манипуляциясы стриатальды аймақтарда және MSN қосалқы типтерінде ΔFosB индукциясының айқын заңдылықтарын тудырады.

NAc-қа допаминергиялық және глутаматтергиялық афферентті енгізу сыйақы іздеуді жеңілдетеді және депрессияға ұқсас мінез-құлықты өзгертеді (Цай және басқалар, 2009; Covington және басқалар, 2010; Adamantidis және басқалар, 2011; Witten және басқалар, 2011; Britt және басқалар, 2012; Lammel және басқалар, 2012; Stuber және т.б., 2012; Chaudhury соавт., 2013; Kumar және т.б., 2013; Tye және басқалар, 2013), біз мидың бірнеше негізгі афферентті аймақтарының әрекетін басқарғаннан кейін riFosB индукциясын стриатальды MSN қосалқы типтерінде қарастырдық. Біз ChR2-ны бірнеше аймақтың әрқайсысында өрнектедік және оларды бұрын айтылғандай көгілдір жарықпен (473 нм) белсендірдік (Gradinaru соавт., 2010; Yizhar және басқалар, 2011). Жақында жүргізілген зерттеу VTA-дағы ChR2-тің жасушалық емес селективті өрнегінен кейін көгілдір жарықпен фазалық ынталандыру VTA допаминдік нейрондардың селективті ChR2 фазалық ынталандыруымен бірдей мінез-құлық фенотипінің пайда болғандығын көрсетті (Chaudhury соавт., 2013), біз VR-де AAV-hsyn-ChR2-EYFP қолдана отырып ChR2 білдірдік D2-GFP тышқандар; басқару тышқандарына AAV-hsyn-EYFP егілді. VTA бөлімдері ChR2-EYFP өрнегін визуализациялау үшін тирозин гидроксилазы мен ГФП-мен бірге болды (Інжір. 7C). D2-GFP VR-де жалғыз ChR2-EFYP немесе EYFP білдіретін тышқандар VTA-дың 5 мин 10 мин XNUMX мин алды, жоғарыда сипатталғандай,Koo және басқалар, 2012; Chaudhury соавт., 2013) (Інжір. 7A) және миды 24 с соңғы ынталандырудан кейін жинады. 2 d ынталандырудан кейін ChR5 VTA дофаминдік нейрондарды белсендендіру қабілеттілігін төмендету болған жоқ (Інжір. 7B). ChR2-EYFP білдіретін VTA нейрондарының қайталанған фазалық ынталануы NAc ядросындағы MSN қосалқы түрлерінде ΔFosB жоғарылайды, бірақ NAc қабығындағы D1-MSN-де (Інжір. 7C; екі жақты ANOVA, NAc өзегі: оптогенетикалық ынталандыру F(1,16) = 51.97, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.001; (MSN кіші типтері де) NAc қабығы: оптогенетикалық ынталандыру × жасуша түрі: F(1,16) = 13.82, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01). Біз көгілдір жарық фазалық стимуляциясынан кейін dStr-де ΔFosB индукциясы байқалмады, VTA-экспрессиялық ChR2-EYFP-ге қарағанда, EYFP бақылаушыларымен салыстырғанда. Бұл нәтижелерді сақтықпен түсіндіру керек, өйткені біз оптикалық стимуляция үшін VTA допаминдік нейрондарын мақсатты түрде таңдамадық, ал соңғы зерттеулер VTA-да нопопергиялық емес проекциялық нейрондарды, сондай-ақ VTA-ның едәуір гетерогендігін көрсетті, бұл атысқа байланысты мінез-құлық реакцияларына алып келуі мүмкін. әсер ететін нейрондардың параметрлері мен субпопуляциясы (Цай және басқалар, 2009; Lammel және басқалар, 2011, 2012; Witten және басқалар, 2011; Kim және т.б., 2012, 2013; Tan және басқалар, 2012; van Zessen және басқалар, 2012; Stamatakis және Stuber, 2012; Chaudhury соавт., 2013; Tye және басқалар, 2013).

Сурет 7.  

NAc тіршілік ететін ми аймақтарының оптогенетикалық активтенуі MSN кіші және стриатальды аймақтардағы ΔFosB индукциясының айқын заңдылықтарын тудырады. A, Оптогенетикалық ынталандыру парадигмасы. Миды оптогенетикалық 24 d кейін 5 сағ жинады ...

Келесіде біз AR-CaMKII-ChR2-mCherry және AAV-CaMKII-mCherry векторларын ChR2-mCherry немесе mCherry-ді тек басқару құралы ретінде, mPFC, amigdala немесе vHippo-да қолдандық. D2-GFP тышқандар (Інжір. 7D-F). CaMKII-ChR2 вирусымен араласқан ChR2 және mCherry өрнегі көбінесе глютаматериялық нейрондарды белгілейтін CaMKII өрнегімен колокализацияланатындығын көрсетті (Gradinaru соавт., 2009; Варден және т.б., 2012). Осы аймақтардағы ChR2-ті білдіретін жасушаларды 20 Гц көк жарықпен 10 мин күнде 5 d күн ішінде 24 д-қа шығардық, ал мидар XNUMX с соңғы ынталандырудан кейін жиналды (Інжір. 7A). Бұл ынталандыру үлгісі observed27-33 Гц атылуын алды, негізінен байқалған қосарланудың салдарынан. 2 d ынталандыру кезінде ChR5-тің айқын сезінбеуі байқалмады; дегенмен, біз 1-ден 5 д-ге дейін (32-33 Гц) ынталандырудың аздап өсуін байқадық. MPFC нейрондарының оптогенетикалық активтенуі NAc ядросындағы D1-MSN-де osFosB индукциясының пайда болуын, ал ΔFosB индукциясы NAc қабығындағы MSN қосалқы түрлерінде де болғанын анықтадық (Інжір. 7D; екі жақты ANOVA, NAc өзегі: оптогенетикалық ынталандыру × жасуша түрі F(1,14) = 10.31, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: оптогенетикалық тітіркендіргіштер F(1,14) = 57.17, p <0.001, Bonferroni пост тесті: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). MPFC іске қосылғаннан кейін dStr-де ΔFosB деңгейлерінде өзгеріс байқалмады. Керісінше, амигдала нейрондарының оптогенетикалық активтенуі NAc ядросындағы екі MSN кіші типтерінде және селективті түрде NAc қабығындағы D1-MSN-де ΔFosB индуцирленген, dStr-де өзгеріссізІнжір. 7E; екі жақты ANOVA, NAc өзегі: оптогенетикалық ынталандыру F(1,10) = 78.92, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc қабығы: оптогенетикалық ынталандыру × жасуша түрі: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, Bonferroni пост тесті: p <0.0001). Соңында, vHippo нейрондарының оптогенетикалық активтенуі NAc өзегінде де, NAc қабығында да D1-MSN-де significantFosB индукциясын едәуір арттырды, dStr-де өзгеріс байқалмады (Інжір. 7F; екі жақты ANOVA, NAc өзегі: оптогенетикалық ынталандыру × жасуша түрі F(1,10) = 18.30, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01; NAc қабығы: оптогенетикалық ынталандыру × жасуша түрі: F(1,10) = 22.69, p <0.05, Bonferroni пост тесті: p <0.01).

талқылау

Бұл зерттеу бірнеше созылмалы қоздырғыштардан кейін стриатальды аймақтардағы «D1-MSN және D2-MSN индукцияларын» қарастырады (Кесте 1). Біз алдымен қолданудың орындылығын анықтаймыз D1-GFP және D2-GFP созылмалы кокаиннен кейінгі D1-MSN-де және созылмалы галоперидолдан кейінгі D2-MSN-де селективті индукцияны көрсететін репортер желілері. Кокаиннің нәтижелері алдыңғы зерттеулерге сәйкес келеді (Moratalla және басқалар, 1996; Lee және т.б., 2006кокаинді марапаттауда inFosB үшін D1-MSN-де белгіленген рөл (Kelz және басқалар, 1999; Colby және басқалар, 2003; Grueter және басқалар, 2013). Біз бұрын тергеуші және өзін-өзі басқаратын кокаиннің osFosB-ны NAc-қа тең дәрежеде индукциялайтынын көрсеткен болатынбыз (Winstanley және басқалар, 2007; Perrotti және басқалар, 2008), және ең бастысы, біз кокаин қабылдаудың екі режимі ΔFosB-ны D1-MSN-де барлық үш стриаталды аймақта іріктеп шығаратынын көрсетеді. Біздің нәтижелеріміз өткір кокаиннің басқа да ерте гендерді қоздыратынын және D1-MSN-де бірнеше жасушаішілік сигналдық белоктардың фосфорлануын көрсететін алдыңғы зерттеулерге сәйкес келеді.Bateup және басқалар, 2008; Бертран-Гонсалес және басқалар, 2008). Сол сияқты, созылмалы галоперидолдан кейінгі ΔFosB индукциясының кернеуі D2 тәрізді рецепторлық агонистердің осы индукцияның блокадасына сәйкес келеді (Atkins және басқалар, 1999) және жедел галоперидолдың таңдамалы индукциясы бар ерте гендер және D2-MSN-дегі бірнеше белокты фосфорлану (Bateup және басқалар, 2008; Бертран-Гонсалес және басқалар, 2008).

Кесте 1.  

Созылмалы фармакологиялық, эмоционалды және оптогенетикалық ынталандырулардан кейінгі стрриатальды MSN кіші түрлеріндегі FosB индукциясыa

Кокаин сияқты, біз EtOH және Δ (9) -THC теріс пайдаланудың екі есірткісіне созылмалы әсер етуі барлық сриаталды аймақтардағы D1-MSN-де ΔFosB-ны селективті түрде қоздыратындығын анықтадық. Біз бұрын EtOH ΔFosB-ны NAc ядросында, NAc қабығында және dStr-де қоздыратындығын көрсеттік, бірақ бұл X (9) -THC ΔFosB-ны NAc ядросында едәуір жоғарылатады, басқа трендтерде байқалады (Perrotti және басқалар, 2008). Біз осында D9-MSN-де NAc ядросында osFosB индукциясының ең үлкенін (1) -THC байқадық; басқа стрриатальды аймақтардағы индукцияны көрсету қабілетіміз жасушаларға арнайы жасалған анализге байланысты болуы мүмкін. Бір қызығы, созылмалы морфин мен героиннің өзін-өзі басқаруы, теріс пайдаланудың басқа есірткілеріне қарағанда, MSN қосалқы типтерінде osFosB-ны барлық стриаталды аймақтар бойынша салыстырмалы түрде жүргізді. Жақында жүргізілген зерттеу өткір морфин D1-MSN-де c-Fos қоздырғышын көрсетті, ал созылмалы морфиннен кейінгі налоксон-тұнбаны алу D2-MSN-де c-Fos-ты қоздырады (Энокссон және т.б., 2012). Біздің зерттеуімізде апиынның жойылу белгілері байқалмағанымен, зерттелген уақытта морфинмен немесе героинмен басқарумен байланысты болған нәзік кетіру осы жерде көрсетілген D2-MSN-де osFosB индукциясына жауап береді. Біз D1-MSN-де osFosB-нің D2-MSN-де емес, морфинге жауап беретін реакцияны көбейтетінін бұрын айтқан болатынбыз (Zachariou және басқалар, 2006). Енді D2-MSN-де FosB индукциясының апиынның кетуіне жағымсыз әсер ететіндігін тексеру қызықты болар еді. Дәрі-дәрмектің алынып тасталуы мен барлық препараттармен бірге seenFosB индукциясына деген ықыласының зерттелуі керек.

Алдыңғы зерттеулер көрсеткендей, қоршаған ортаны байыту кезінде ΔFos NAc және dStr әсер етеді (Солиналар және т.б., 2009; Lehmann және Herkenham, 2011). Біздің деректеріміз бұл жинақтау барлық стриаталды аймақтардағы D1-MSN және D2-MSN-де бірдей болатындығын көрсетеді. Байыту парадигмасы бұған дейін кокаинге әсер ететін және локомотивті реакциялар ретінде көрсетілген болатын (Солиналар және т.б., 2009); дегенмен, бұл мінез-құлық фенотипі «FosB» жинақталуының салдары емес, өйткені «D1-MSN-де FosB индукциясы кокаинге мінез-құлық реакциясын күшейтеді, ал D2-MSN-де мұндай индукция байқалмайтын әсерге ие емес (Kelz және басқалар, 1999; Colby және басқалар, 2003; Grueter және басқалар, 2013). Созылмалы сахарозаны тұтыну бұрын NAc-да osFosB жоғарылағанын көрсетті, немесе D1-MSN-де немесе NT-де қосалқы типтерде NFosB-нің шамадан тыс қысылуы, NAc-та сахароза тұтынуды күшейтеді (Olausson және басқалар, 2006; Wallace және басқалар, 2008). Мұнда біз NAc пен dStr-тегі MSN қосалқы типтеріндегі сахароза ішкеннен кейін osFosB индукциясын байқадық. Соңында, біз NAc-тегі «FosB» индукциясы жоғары майлы тағамға деген ынталандыру мен энергия шығынын азайту арқылы калорияны шектеуге кейбір бейімделгіш реакциялар туғызатынын көрсетті (Vialou және басқалар, 2011). Жалпы, бұл нәтижелер ΔFosB NAc және dStr-те жинақталуы D1-MSN және D2-MSN екеуінде де бірнеше табиғи марапаттарға жауап беретіндігін көрсетеді. Бұл тұжырым «FosB D1-MSN-де тек басқа табиғи марапаттардан кейін, созылмалы доңғалақтан кейін жинақталады және D1-MSN-де ΔFosB күшейтілген доңғалақты доңғалақтан кейін жинақталады» деген бақылауды ескере отырып, таңқаларлық, өйткені D2-MSN-тегі FosB шамадан тыс доңғалақтың жүгірісі төмендеді (Werme және т.б., 2002). Алайда, доңғалақпен жүру «ФосБ» индукциясының әр түрлі болуына жауап беретін нақты қозғалыс жолдарын белсендіруі мүмкін. Кез-келген жағдайда, басқа табиғи марапаттармен алынған нәтижелер, мысалы, кокаин, EtOH және Δ (9) -THC сияқты дәрілік препараттармен салыстырғанда, стриатумдағы FosB-ны сараланған түрде басқарады. These Осы табиғи сыйақы жағдайында екі MSN қосалқы жүйесінде FosB индукциясы жақында жүргізілген зерттеуге сәйкес келеді, азық-түлік сыйлығына арналған іс-әрекеттің басталуы MSN қосалқы типтерін де қосады (Cui және басқалар, 2013).

Созылмалы әлеуметтік жеңіліс стресстері osFosB сезімтал және серпімді тышқандардың NAc қабығында болады, бірақ NAc ядросында тек шыдамды тышқандарда болады (Vialou және басқалар, 2010). Одан әрі, D1-MSN-де ΔFosB шамадан тыс стресстері созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессінен кейін тұрақтылыққа ықпал етеді. Флуоксетинмен созылмалы емдеу, сонымен қатар, созылмалы әлеуметтік жеңіліс стрессінен кейін stressFosB стрессивті наит тышқандарында және сезімтал тышқандарда жинақталады, және ΔFosB шамадан тыс стресстері антидепрессант тәрізді мінез-құлық реакцияларының соңғы жағдайларында делдал болатындығы көрсетілді (Vialou және басқалар, 2010). Сонымен, алдыңғы зерттеу созылмалы тежелу стресстен кейінгі екі ортада да «FosB индукциясын көрсетті» (Perrotti және басқалар, 2004). Осы зерттеудің нәтижелері, біз D1-MSN-де индукцияны тұрақты және флюксетинмен өңделген тышқандарда, бірақ сезімтал тышқандардағы D2-MSN-де таңдамалы түрде көрсетеміз, осы ертерек табылған мәліметтерге маңызды түсінік беріп, ΔFosB D1- гипотезасын қолдаймыз. MSNs серпімділік пен антидепрессант әрекетін делдал етеді, ал D2-MSN-де osFosB сезімталдыққа әсер етуі мүмкін. Енді бұл болжамды тексеру үшін қосымша жұмыс қажет.

Оптогенетиканы қолданған жақында жүргізілген жұмыс NAc-қа допаминергиялық және глютаматериялық афференттердің сыйақылар мен стресстерге қарсы әсер етуде маңызды рөлін көрсетеді. Осы оптогенетикалық құралдарды NAc afferent аймақтарында бірнеше рет активациялаудан кейін D1-MSN және D2-MSN-де индукцияны зерттеу үшін қолданамыз. VTA нейрондарын фазалық ынталандыру немесе амигдалада негізінен глютаматериялық нейрондардың активтенуі ΔFosB-ны D1-MSN-де NAc қабығында және NAc ядросының екі қосалқы бөлігінде де түрлендіретінін анықтадық. Керісінше, mPFC нейрондарының активтенуі AFosB индукциясының керісінше жағдайына әкеледі, NAc ядросында D1-MSNs деңгейінің жоғарылауы, бірақ NAc қабықшасындағы екі MSN қосалқы индукция. Соңында vHippo нейрондарының оптогенетикалық активтенуі AFosB NAc ядросы мен қабығындағы D1-MSN-де жинақталуына әкеледі. VHippo тұжырымдары соңғы зерттеулерге сәйкес келеді, бұл гиппокампальды кірістер D2-MSN-ке қарағанда D1-MSN-ге қарағанда әлдеқайда әлсіз екенін көрсетті (MacAskill және басқалар, 2012және бұл кірістер кокаин қоздырғышын басқарады (Britt және басқалар, 2012). Сонымен қатар, «FosB индукциясын негізінен D1-MSN-де барлық кіріспен көрсету» алдыңғы зерттеулерге сәйкес келеді, «D1-MSNs-де FosB теріс пайдалану есірткіге қарсы реакцияны күшейтеді, сонымен қатар VTA допаминдік нейрондардың немесе mPFC-нің оптогенетикалық ынталандыратынын көрсететін зерттеулер. NAc-тегі амигдала немесе vippo терминалдары марапатқа ықпал етеді (Kelz және басқалар, 1999; Zachariou және басқалар, 2006; Цай және басқалар, 2009; Witten және басқалар, 2011; Britt және басқалар, 2012; Grueter және басқалар, 2013).

Осы екі MSN кіші түрлерінің ішінде оң немесе теріс ынталандырулармен дифференциалданатын селективті нейрондық ансамбльдер болуы мүмкін. Бұл біздің D2-MSN-де «FosB индукциясын» белгілі бір марапаттау жағдайларында (опиаттар мен табиғи сыйақылар), сондай-ақ жағымсыз (әлеуметтік жеңіліс) жағдайлардағы бақылауымызды ескеруі мүмкін. Striatum MSN кіші түрлерінен тыс өте гетерогенді, соның ішінде доральді және вентральды стриатумдағы патч және матрицалық бөлімдер (Герфен, 1992; Watabe-Uchida және басқалар, 2012). Бұдан әрі, алдыңғы зерттеулер психостимуляторлардың стриаталды нейрондық ансамбльдердің өте аз пайызын белсенді индукциямен белсендіретінін көрсетті. FosB белсендірілген нейрондардағы ген (Гуэз-Барбер және басқалар, 2011; Liu және т.б., 2013), бірақ бұл активтендірілген нейрондардың D1-MSN немесе D2-MSN екендігі белгісіз. «FosB» -нің де, қабықпен де, сыйақы мен жағымсыз мінез-құлықтың да ортасында атқаратын қызметі де белгісіз. «D1-MSN-де FosB шамадан тыс экспрессивтілігі ядрода да, қабықта да үнсіз синапстарды көбейтті, бірақ D2-MSN-де өрнек тек қабықтағы үнсіз синапстарды азайтты (Grueter және басқалар, 2013). Сонымен қатар, coreFosB индукциясы ядроға және қабыққа әртүрлі механизмдер арқылы әсер етуі мүмкін, өйткені қабықта aineFosB-нің CaMKIIα тұрақтандырылғанын анықтадық, бірақ қабықта BFosB көп жиналуына әкелетін негізгі емес (Робисон және т.б., 2013). MSN ішкі типтерін қабықпен, активтендірілген нейрондық ансамбльдермен немесе патчтармен матрицалық бөліктерге таңдамалы түрде бағыттайтын болашақ зерттеулер осы гетерогенді аймақтардағы ΔFosB-тің мінез-құлық рөлін анықтауға көмектеседі.

Жалпы, NAc-тағы osFosB-тің электр тізбегі арқылы жасушалық-селективті индукциялық заңдылықтары, ынталандырушы және стрессті қоздырғыштар осы ынталандырудың ерекшеліктерін кодтау үшін әртүрлі NAc афференттерін әр түрлі түрде біріктіреді деп болжайды. Біздің нәтижелеріміз созылмалы қоздырғыштар арқылы стриатальды MSN қосалқы типтеріндегі ΔFosB индукциясы туралы жан-жақты түсінік беріп қана қоймайды, сонымен қатар NAc функциясына әсер етудегі белгілі бір нейрондық тізбектердің әсерін түсіну үшін ΔFosB-ны молекулалық маркер ретінде қолдану тиімділігін көрсетеді.

Сілтемелер

Авторлар бәсекелес қаржылық мүдделер туралы мәлімдеме жасамайды.

Әдебиеттер тізімі

  1. Adamantidis AR, Tai HC, Boutrel B, Zhang F, Stuber Г.Д., Будыгин Е.А., Туриньо С, Бончи А, Дейсеррот К, де Lecea L. Сыйақы іздейтін мінез-құлықтың бірнеше фазаларының допаминергиялық модуляциясын оптогенетикалық зерттеу. J Neurosci. 2011; 31: 10829 –10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  2. Albin RL, Young AB, Penney JB. Базальды ганглия бұзылыстарының функционалдық анатомиясы. Трендтер Neurosci. 1989; 12: 366-375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [Кросс реф]
  3. Аткинс Дж.Б., Члан-Фурни Дж, Най Хе, Хирои Н, Карлезон В.А., Джр, Нестлер Э.Дж. Антипсихотикалық және типтік емес дәрілерді қайталама енгізу арқылы δFosB аймағына тән индукциясы. Синапс. 1999; 33: 118–128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [Кросс реф]
  4. Bateup HS, Svenningsson P, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. Психостимуляторлық және антипсихотикалық препараттармен DARPP-32 фосфорлануының жасушалық типті реттелуі. Nat Neurosci. 2008; 11: 932 –939. doi: 10.1038 / nn.2153. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  5. Бертон О, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. BDNF-дің мезолимикалық допамин жолында әлеуметтік жеңіліске ұшырауындағы негізгі рөлі. Ғылым. 2006; 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Кросс реф]
  6. Бертран-Гонсалес Дж, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Hervé D, Valjent E, Girault JA. Кокаин мен галоперидолға жауап ретінде D1 және D2 рецепторлары бар стриаталды нейрондардағы допаминдік сигналдардың активтендірілуінің қарама-қарсы заңдылықтары. J Neurosci. 2008; 28: 5671 –5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [Кросс реф]
  7. Брит Дж, Беналиоуад Ф, МакДевитт Р.А., Стюбер Г.Д., Wise RA, Bonci A. Synaptic және ядролардың акумбензияларына бірнеше глутамеретических кірістердің мінез-құлықтығы. Нейрон. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  8. Чан CS, Петерсон Дж.Д., Гертлер Т.С., Глейч К.Е., Квинтана Р.Е., Куи Q, Себель Л.Е., Плоткин Ж.К., Хейман М, Хайнц Н, Гренгард П, Сурмейер Д.Д. Drd2-eGFP BAC трансгенді тышқандардағы стриатальды фенотиптің штаммға тән реттелуі. J Neurosci. 2012; 32: 9124 –9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  9. Чаудхури Д., Уолш Дж.Д., Фридман А.К., Хуарес Б, Ку С.М., Коо Дж.В., Фергюсон Д, Цай Х.К., Померанц Л, Кристоффель Д.Д., Нектоу А.Р., Экстранд М, Домингос А, Мазей-Робисон М.С., Моузон Е, Лобо М.К. Нев Р.Л., Фридман Дж.М., Руссо С.Ж., Дейсеррот К, соавт. Ортаңғы мидағы дофаминдік нейрондарды бақылау арқылы депрессияға байланысты мінез-құлықты жылдам реттеу. Табиғат. 2013; 493: 532 –536. doi: 10.1038 / табиғат11713. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB кокаин үшін ынталандыруды күшейтеді. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Медициналық префронтальды кортекстің оптогенетикалық ынталандыруының антидепрессант әсері. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  12. Cui G, Jun SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Costa RM. Іс-қимылдар басталған кезде стриатальды тікелей және жанама жолдардың қатар жүруі. Табиғат. 2013; 494: 238 –242. doi: 10.1038 / табиғат11846. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  13. Энокссон Т, Бертран-Гонсалес Дж, Кристи М.Д. Орташа торлы нейрондарды білдіретін D2- және D1-рецепторлар ядросы сәйкесінше морфинді шығару және жедел морфин арқылы селективті түрде белсендіріледі. Нейрофармакология. 2012; 62: 2463 –2471. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [Кросс реф]
  14. Герфен CR. Неостриатальды мозаика: базальды ганглиядағы көп деңгейлі құрылым. Анну Рев Неврчи. 1992; 15: 285 –320. doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [Кросс реф]
  15. Гиттис АГ, Крейцер айнымалы ток. Стратиальды микросхемалар және қозғалыс бұзылыстары. Нейроцитарлық үрдістер. 2012; 35: 557 –564. doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  16. Гонг С, Чжэн С, Даутти М.Л., Лосос К, Дидковский Н., Шамбра У.Б, Новак Н.Ж., Джойнер А, Лебланк Г., Хаттен М.Е., Хайнц Н. Бактериялық жасанды хромосомаларға негізделген орталық жүйке жүйесінің атласы. Табиғат. 2003; 425: 917 –925. doi: 10.1038 / табиғат02033. [PubMed] [Кросс реф]
  17. Gradinaru V, Mogri M, Thompson KR, Henderson JM, Deisseroth K. Паркинсондық нейрондық тізбектің оптикалық деконструкциясы. Ғылым. 2009; 324: 354 –359. doi: 10.1126 / science.1167093. [PubMed] [Кросс реф]
  18. Gradinaru V, Zhang F, Ramakrishnan C, Mattis J, Prakash R, Diester I, Goshen I, Thompson KR, Deisseroth K. Оптогенетиканы әртараптандыруға және кеңейтуге арналған молекулалық және жасушалық тәсілдер. Жасуша. 2010; 141: 154 –165. doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [Кросс реф]
  19. Грейбиель А.М. Базальды ганглия. Ағаш Биол. 2000; 10: R509 – R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [Кросс реф]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Басс CE, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Қоршаған ортаны байыту төменгі циклді аденозинді монофосфатқа жауап беретін элементтің (CREB) ядро ​​аккумуляторларымен әрекеттесуімен байланысқан мінез-құлық фенотипін жасайды. Биол психиатриясы. 2010; 67: 28 –35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB ядро ​​accumbens тікелей және жанама жолының функциясын әртүрлі түрде модуляциялайды. Proc Natl Acad Sci АҚШ A. 2013; 110: 1923-1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Golden SA, Schrama R, Koya E, Stern AL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Hope BT. FACS таңдамалы түрде белсендірілген ересек стриатальды нейрондарда кокаин тудыратын гендік реттеуді анықтайды. J Neurosci. 2011; 31: 4251 –4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  23. Гейман М, Шейфер А, Гонг С, Петерсон Дж.Д., Күн Р, Рэмси К.Е., Суарез-Фаринас М, Шварц С, Стефан Д.А., Сурмейер Д.Д., Гренгард П, Хайнтс Н. ОЖЖ жасушаларының типтерін молекулалық сипаттауға арналған трансляциялық профильдеу. . Жасуша. 2008; 135: 738 –748. doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  24. Hiroi N, Graybiel AM. Атипиялық және типтік нейролептикалық емдеу стриатумда транскрипция факторы экспрессиясының нақты бағдарламаларын тудырады. J Comp Neurol. 1996; 374: 70-83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [Кросс реф]
  25. Hiroi N, Brown Brown, JR, Haile CN, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB мутантты тышқандары: созылмалы кокаин индукциясының жоғалуымен байланысты ақуыздар және кокаиннің психомоторлы және пайдалы әсеріне сезімталдығы жоғарылайды. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94: 10397–10402. doi: 10.1073 / pnas.94.19.10397. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  26. BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Иадарола М.Ж., Накабеппу Ю, Думан Р.С., Нестлер Е.Ж. Созылмалы кокаинмен және басқа созылмалы емдеу әдісімен мидағы өзгертілген фос тәрізді ақуыздардан тұратын ұзаққа созылған AP-1 кешенін индукциялау. Нейрон. 1994; 13: 1235 –1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [Кросс реф]
  27. Каливас П.В., Черчилль Л, Клитеник М.А. GABA және энкефалин проекциясы ядродан аккумбенттерден және вентральды паллидумнан вентральды тегментальды аймаққа. Неврология. 1993; 57: 1047 –1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [Кросс реф]
  28. Каплан Г.Б., Лейт-Моррис К.А., Фан В, Янг А.Д., Гай MD. Ашыну сенсибилизациясы FosB / ΔFosB өрнегін мидың алдыңғы, кортикальды, стригатальды және амигдалалық аймақтарында көрсетеді. PLoS One. 2011; 6: e23574. doi: 10.1371 / jurnal.pone.0023574. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  29. Келц М.Б., Чен Дж, Карлезон В.А., Джр, Уислер К, Гилден Л, Бекманн А.М., Штеффен С, Чжан Ю.Д., Маротти Л, Self DW, Tkatch T, Баранаускас Г., Сурмейер Д.Д., Нев Р.Л., Думан Р.С., Пикчиотто М.Р., Nestler EJ. Транскрипция факторының ΔFosB мидағы әсері кокаинге сезімталдықты басқарады. Табиғат. 1999; 401: 272 –276. doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [Кросс реф]
  30. Ким К.М., Баратта М.В., Ян А, Ли Д, Бойден Е.С., Фиорилло CD. Оперантты күшейту үшін допаминдік нейрондардың табиғи сыйақысы арқылы уақытша активтендірудің оптогенетикалық мимикасы жеткілікті. PLoS One. 2012; 7: e33612. doi: 10.1371 / jurnal.pone.0033612. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  31. Ким ТИ, МакКал Дж.Д., Джун Ю.Х., Хуанг X, Сюда Э.Р., Ли Ю, Сонг Дж, Сонг Ю, Пао ХА, Ким Р.Х, Лу С, Ли С.Д., Сонг И.С., Шин Г, Аль-Хасани Р, Ким С, Тан Депутаты, Хуанг Ю, Оменетто Ф.Г., Роджерс Дж.А. және басқалар. Сымсыз оптогенетикаға арналған инъекциялық, ұялы масштабтағы оптоэлектроника. Ғылым. 2013; 340: 211 –216. doi: 10.1126 / science.1232437. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Sun H, Scobie KN, Damez-Werno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, DietMM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Han MH, Nestler EJ. BDNF - морфиндік әрекеттің теріс модуляторы. Ғылым. 2012; 338: 124 –128. doi: 10.1126 / science.1222265. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  33. Кришнан В, Хан Ми, Грэм Д.Л., Бертон О, Ринтхаль В, РССС, Лапланд Q, Грэм А, Лютер М, Лагас Д.С., Гозе С, Реймер Р, Таннус П, Грин Т, Неве Р.Л., Чакраварти С, Кумар А , Eisch AJ, Self DW, Lee FS және т.б. Миға сыйымдылық аймақтарында әлеуметтік зақымдануға бейімділік пен қарсылыққа негізделген молекулалық бейімделулер. Ұяшық. 2007; 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Кросс реф]
  34. Kumar S, Black SJ, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington HE, 3rd, Dzirasa K. Аффективті желілерді кортикальды бақылау. J Neurosci. 2013; 33: 1116 –1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, Malenka RC. Допаминдік нейрондық синапстардың провективті модуляциясы аверсивті және пайдалы ынталандыру. Нейрон. 2011; 70: 855 –862. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran C, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, Malenka RC. Вентральды тегментальды аймақтағы кірісті және марапатты бақылау. Табиғат. 2012; 491: 212 –217. doi: 10.1038 / табиғат11527. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  37. Ларсон Е.Б, Аккентли Ф, Эдвардс С., Грэхэм Д.Л., Симмонс Д.Л., Алибхай IN, Нестлер Е.Ж., Өзіндік DW. Кокаиннің өзін-өзі басқаруы және шығарылуы кезінде ΔFosB, FosB және cFos-ті стриальді реттеу. J Нейрохим. 2010; 115: 112 –122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  38. Ли КВ, Ким Ю, Ким А.М., Хельмин К, Наирн А.К., Гренгард П. D1 және D2 допамин рецепторлары бар ядро ​​аккумуляторларында орташа спиниальды нейрондарда омыртқаның дендриттік дендриттік түзілуі. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103: 3399-3404. doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Экологиялық байыту инфрақызыл кортекс тәуелді нейроанатомиялық жол арқылы әлеуметтік жеңіліске стресс тұрақтылығын береді. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  40. Лю QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Хоу X, Шахам Y, Хоуп Б.Т. Флуоресценттік-активтендірілген жасушаларды сұрыптауды (FACS) J Neurochem қолдана отырып, метамфетаминмен белсенді фос-экспрессивті нейрондарды бір ратикалық дорсальды стриатумнан молекулалық өзгерістерді анықтау. 2013 doi: 10.1111 / jnc.12381. doi: 10.1111 / jnc.12381. Интернет арқылы жариялау. Шілде 29, 2013. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  41. Лобо М.К., Ковингтон Х., 3rd, Чаудхури Д., Фридман А.К., Сан Х, Дамез-Верно Д., Диц Д.М., Заман S, Коо Дж.В., Кеннеди П.Ж., Моузон Е, Могри М, Нев Р.Л., Дейсеррот К, Хан М.Х., Нестлер EJ. BDNF сигналының жасуша түріне тән жоғалуы кокаиннің сыйымдылығын оптогенетикалық бақылауға еліктейді. Ғылым. 2010; 330: 385 –390. doi: 10.1126 / science.1188472. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  42. Lobo MK, Nestler EJ. Нашақорлықтағы стриаталды теңдестіру әрекеті: орта және ортаңғы спинальды нейрондардың тікелей және жанама жолдары. Алдыңғы нейроанат. 2011; 5: 41. doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Grey M, Geschwind DH, Yang XW. Жасөспірімдер мен ересек тінтуірдің миындағы стриатальды проекциялық нейрон түрлерін FACS-массивтік профильдеу. Nat Neurosci. 2006; 9: 443 –452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [Кросс реф]
  44. MacAskill AF, Little JP, Cassel JM, Carter AG. Жасушаішілік қосылыс ядро ​​аккумуляцияларындағы жол белгілері негізінде жүреді. Nat Neurosci. 2012; 15: 1624 –1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  45. Магнет I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Кокаин-индуцирленген пластикасында гистон метилтрансферазасының G9a-ның маңызды рөлі. Ғылым. 2010; 327: 213-216. doi: 10.1126 / science.1179438. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  46. Мазей-Робисон М.С., Коо Дж.В., Фридман А.К., Лансинк С.С., Робисон А.Ж., Виниш М, Кришнан В, Ким С, Сьюта М.А., Галли А, Нисвендер К.Д., Аппасани Р, Хорват М.М., Нев RL, Уорли ПФ, Снайдер Ш. Hurd YL, Chef JF, Han MH, Russo SJ, соавт. МТОР сигнализациясының және допаминдік нейрондардың вентральды тегментальды аймағында морфиндік бейімделудегі нейрондық белсенділіктің рөлі. Нейрон. 2011; 72: 977 –990. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  47. McClung CA, Nestler EJ. Геннің экспрессиясын және кокаинді марапаттауды CREB және osFosB арқылы реттеу Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 –1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Кросс реф]
  48. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Метамфетаминнің сенсибилизациясы сүтқоректілердің миының лимбиялық тізбегіндегі pCREB және ΔFosB-ді әр түрлі өзгертеді. Мол фармакол. 2006; 70: 2064 –2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [Кросс реф]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Graybiel AM. D1 класты допаминдік рецепторлар стриатумдағы ақуызға негізделген ақуыздардың кокаин тудырған тұрақты көрінісіне әсер етеді. Нейрорепорт. 1996; 8: 1 –5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [Кросс реф]
  50. Мюллер Д.Л., Унтервальд Э.М. D1 допаминдік рецепторлары үзіліссіз морфинді қабылдағаннан кейін ratFosB индукциясын егеуқұйрық стриатумында модуляциялайды. J Фармакол Exp Ther. 2005; 314: 148 –154. doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [Кросс реф]
  51. Нараян С., Касс К.Е., Томас Е.А. Созылмалы галоперидолмен емдеу тінтуір миында миелин / олигодендроцитке байланысты гендердің төмендеуіне әкеледі. J Neurosci Res. 2007; 85: 757 –765. doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [Кросс реф]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta W, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua MA, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. Опиоид пен каннабиноидты рецепторлардың функционалды өзара әрекеті. есірткіні өзін-өзі басқару. J Neurosci. 2001; 21: 5344 –5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Pascoli V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Жабайы типтегі және гемизиготалы Drd1a және Drd2 BAC трансгенді тышқандардағы стрриатальға тәуелді әрекеттерді салыстыру. J Neurosci. 2012; 32: 9119 –9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  54. Nicola SM Ядролардың акументальды базальдік ганглииалды әсерді таңдау тізбегінің бөлігі ретінде. Психофармакология. 2007; 191: 521-550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [Кросс реф]
  55. Олауссон П, Дженц Дж.Д, Тронсон Н, Нев Р.Л., Нестлер Э.Д., Тейлор Дж.Р. ΔFosB ядродағы аккумуляторлар тамақтанатын аспаптық мінез-құлық пен мотивацияны реттейді. J Neurosci. 2006; 26: 9196 –9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [Кросс реф]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Созылмалы стресстен кейінгі ми құрылымдарында δFosB индукциясын жүргізу. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Кросс реф]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB индукциясының мидағы теріс қолданылатын есірткілердің нақты үлгілері. Synapse. 2008; 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  58. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. ΔFosB созылмалы амфетамин әсерінен кейін с-фос генінің эпигенетикалық десенсибилизациясын жүргізеді. J Neurosci. 2008; 28: 7344 –7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  59. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbay M, Nestler EJ. Хроматиннің кокаинмен реттелуінің геномдық талдауы сиртуиндер үшін жаңа рөл ашады. Нейрон. 2009; 62: 335 –348. doi: 10.1016 / j.neuron.2009.03.026. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  60. Робисон А.Ж., Нестлер Е.Ж. Тәуелділіктің транскрипциялық және эпигенетикалық механизмдері. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 623 –637. doi: 10.1038 / nrn3111. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Thomas M, Nestler EJ. Созылмалы кокаинге мінез-құлық және құрылымдық реакциялар үшін ядро ​​аккумуляциясының қабығында osFosB және кальций / сабыродулинге тәуелді ақуыз киназа II қатысатын қоректену циклі қажет. J Neurosci. 2013; 33: 4295 –4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  62. Смит Р.Ж., Лобо М.К., Спенсер S, Каливас PW. D1 және D2 проекциялық нейрондардағы кокаин қоздырғыштары (тікелей және жанама жолдармен синонимді емес дихотомия). 2013; 23: 546 –552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. Өмірдің алғашқы кезеңдерінде қоршаған ортаны байыту кокаиннің мінез-құлық, нейрохимиялық және молекулалық әсерін төмендетеді. Нейропсихофармакология. 2009; 34: 1102 –1111. doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [Кросс реф]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovelsø N, van Zessen R, Stuber GD. Нейрондық тізбектерді ұзақ уақыт оптогенетикалық манипуляциялау үшін имплантацияланатын оптикалық талшықтардың құрылысы. Nat Protoc. 2012; 7: 12 –23. doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [Кросс реф]
  65. Stamatakis AM, Stuber GD. Бүйірлік гапенулаға вентральды ортаңғы мидың кіруін белсенді ету мінез-құлықтан аулақ болуға ықпал етеді. Nat Neurosci. 2012; 24: 1105 –1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  66. Stuber GD, Britt JP, Bonci A. Сыйақы іздейтін нейрондық тізбектердің оптогенетикалық модуляциясы. Биол психиатриясы. 2012; 71: 1061 –1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  67. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Мирзабеков Дж.Д., Дехнер Дж, Лабуибе Г, Дейсеррот К, Те К.М., Люшер C. VTA жетегіндегі GABA нейрондары орын ауыстыруды шарттады. Нейрон. 2012; 73: 1173 –1183. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [Кросс реф]
  68. Tegarden SL, Bale TL. Диетаны қалаудың төмендеуі эмоционалдылықты жоғарылатады және диеталық рецидивтің төмендеу қаупін тудырады. Биол психиатриясы. 2007; 61: 1021 –1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [Кросс реф]
  69. Цай HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Фосикті допаминергиялық нейрондарда атқылау мінез-құлықты қалыпқа келтіру үшін жеткілікті. Ғылым. 2009; 324: 1080 –1084. doi: 10.1126 / science.1168878. [PubMed] [Кросс реф]
  70. Тье К.М., Мирзабеков Ж.Д., Варден М.Р., Ференцзи Е.А., Цай Х.К., Финкельштейн Дж, Ким С.Ю., Адхикари А, Томпсон К.Р., Андалман А.С., Гунайдин Л.А., Виттен ИБ, Диссерот К.Допаминдік нейрондар нейрондық кодтауды және депрессияға байланысты өрнекті модулдейді мінез-құлқы. Табиғат. 2013; 493: 537 –541. doi: 10.1038 / табиғат11740. [PubMed] [Кросс реф]
  71. ван Зессен Р., Филлипс Дж.Л., Будыгин Е.А., Штубер Г.Д. VTA GABA нейрондарының белсенділігі сыйақыны тұтынуды бұзады. Нейрон. 2012; 73: 1184 –1194. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Ковингтон HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Wattts EL, Wallace DL, Igiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolanños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA және т.б. BrainFosB мидың қан айналым жүйесіндегі стресске және антидепрессантқа қарсы тұрақтылықты қамтамасыз етеді. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 –752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgoub M, Yu HG, Rush AJ, Pranav H, Jung S, Yangisawa M, Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. Калорияны шектейтін метаболизм өзгерістеріндегі ΔFosB рөлі. . Биол психиатриясы. 2011; 70: 204 –207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  74. Уоллес Д.Л., Виалу V, Риос Л, Карле-Флоренция Т.Л., Чакраварти С, Кумар А, Грэм Д.Л., Грин Т.А., Кирк А, Игигес С.Д., Перротти Л.И., Баррот М, Диелоне Р.Ж., Нестлер Е.Ж., Боланос-Гузман CA. DeltaFosB-ның ядродағы әсері табиғи сыйақымен байланысты мінез-құлыққа әсер етеді. J Neurosci. 2008; 28: 10272 –10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  75. Тәртіп сақшысы М.Р., Селимбейоглу А, Мирзабеков Дж.Д., Ло М, Томпсон К.Р., Ким С.Ю., Адхикари А, Тье К.М., Фрэнк Л.М., Дейсеррот К. К. Мінез-құлыққа қатысты реакцияны бақылайтын алдын-ала кортекс-ми-нейрондық проекция. Табиғат. 2012; 492: 428 –432. doi: 10.1038 / табиғат11617. [PubMed] [Кросс реф]
  76. Ватабе-Учида М, Чжу Л, Огава С.К., Ваманрао А, Учида Н.М орта допаминдік нейрондарға ортаңғы миды тікелей енгізу. Нейрон. 2012; 74: 858 –873. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [Кросс реф]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB доңғалақтың жүгірісін реттейді. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Грин Т.А., Бахтелл, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Ront ФосБ индукциясы орбитальды қыртыстық қабықта кокаин тудырған танымдық дисфункцияға төзімділікті туғызады. J Neurosci. 2007; 27: 10497 –10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Кросс реф]
  79. Witten IB, Steinberg EE, Li SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho Ch, Song, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. Recombinase-драйверлері: құралдар, әдістері және допаминмен арматурада оптогенетикалық қолдану. Нейрон. 2011; 72: 721 –733. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  80. Йижар О, Фенно Л.Е., Дэвидсон Т.Ж., Могри М, Дейсерот К. Нейрондық жүйелердегі оптогенетика. Нейрон. 2011; 71: 9 –34. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [Кросс реф]
  81. Yoneyama N, Crabbe JC, Ford MM, Murillo A, Finn DA. 22 инбридті тышқан штамдарында этанолды ерікті тұтыну. Алкоголь. 2008; 42: 149 –160. doi: 10.1016 / j.alohol.2007.12.006. [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Latchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB үшін морфиндік әсер етуші ядродағы маңызды рөл. Nat Neurosci. 2006; 9: 205 –211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [Кросс реф]