ඉදිරිපස එන්ඩොක්රිනෝල් (ලෝසැන්). 2017; 8: 216.
2017 Aug 29 ප්රකාශයට පත් කරන ලදි. doi: 10.3389 / fendo.2017.00216
PMCID: PMC5581815
ජුලී පැරඩිස්,1 පියරේ බෝරෝ,1 තෝමස් මොයොන්,1 සොෆී නික්ලෝස්,2 පැට්රීෂියා පර්නෙට්,1,*† සහ වින්සන්ට් පයිලේ1,*†
වියුක්ත
බලශක්ති ense න ආහාර පරිභෝජනය කරන මාතෘ පරිභෝජනය ළමුන් තුළ තරබාරු වීමේ අවදානම වැඩි කරයි. මෙය එහි හෙඩොනික් දේපල සඳහා පරිභෝජනය කරන රසවත් ආහාර අධික ලෙස පරිභෝජනය කිරීම හා සම්බන්ධ වේ. පර්යන්ත මාතෘ ආහාර හා මේදය සඳහා දරුවන්ගේ මනාපයන් සම්බන්ධ කරන යටින් පවතින යාන්ත්රණය තවමත් දුර්වල ලෙස වටහාගෙන නොමැත. මෙම අධ්යයනයේ දී, ගර්භණී සමයේදී සහ මවි කිරි කාලය තුළ මාතෘ අධි මේද / අධික සීනි සහිත ආහාර [බටහිර ආහාර (ඩබ්ලිව්ඩී)] හි බලපෑම අධ්යයනය කිරීම අපගේ අභිප්රාය වන්නේ මීයන්ගේ දරු උපතේ සිට ලිංගික පරිණතභාවය දක්වා පාලනය කරන විපාක මාර්ගයන් ය. තීරණාත්මක කාල වකවානු තුනකදී (ළමා කාලය, නව යොවුන් විය සහ වැඩිහිටිභාවය) WD සහ පාලක දරුවන් පිළිබඳ දීර් follow පසු විපරමක් අප විසින් සිදු කරන ලද අතර (i) මේද මනාපයන්, (ii) ජාන ප්රකාශන පැතිකඩ මත රසවත් ආහාර සඳහා පෙරිනටල් නිරාවරණයේ බලපෑම විමර්ශනය කිරීම කෙරෙහි අවධානය යොමු කළෙමු. , සහ (iii) මෙසොලිම්බික් ඩොපමිනර්ජික් ජාලවල ස්නායු කායික / වාස්තු විද්යාත්මක වෙනස්කම්. ඩබ්ලිව්.ඩී පෝෂණය, පර්යන්ත කාලයට පමණක් සීමා වී ඇති බව හෝමියෝස්ටැටික් හා හෙඩොනික් මොළයේ පරිපථ සංවිධානය කිරීම කෙරෙහි පැහැදිලි දිගුකාලීන බලපෑමක් ඇති නමුත් මේද මනාපයන් මත නොවන බව අපි පෙන්වා දුන්නෙමු. අපි විශේෂිත මොළයේ අණුක අත්සන් සමඟ සහසම්බන්ධිත මේදය සඳහා මනාපයේ නිශ්චිත පරිණාමයක් පෙන්නුම් කළෙමු. ඩබ්ලිව් ඩී ෆෙඩ් වේලි වලින් පැවත එන දරුවන් තුළ, ඩොපමයින් (ඩීඒ) පද්ධතිවලට සම්බන්ධ ප්රධාන ජානවල ඉහළ ප්රකාශනයක් සමඟ සම්බන්ධ මේද මනාපයන් ළමා කාලයේ දී අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු; නව යොවුන් වියේදී, කණ්ඩායම් දෙකටම අධික මේද මනාපයක්, WD කාණ්ඩයේ 3 දින පරීක්ෂණය අතරතුර ක්රමානුකූලව අඩු වූ අතර, WD කාණ්ඩය සඳහා DA පද්ධතිවලට සම්බන්ධ ප්රධාන ජානවල අඩු ප්රකාශනයක් සමඟ සම්බන්ධ වී ඇති අතර ඒවා ආරක්ෂා කිරීම සඳහා වන්දි යාන්ත්රණයක් යෝජනා කළ හැකිය. තවදුරටත් අධික මේද නිරාවරණයෙන්; වැඩිහිටි වියේදී, මේදය පාලනය කිරීම මීයන්ට සමාන වූ නමුත් for- ඇමයිනොබියුට්රික් අම්ල ජාලය, සෙරොටොනින් ප්රතිග්රාහක සහ පොලිසියලික් අම්ලය-එන්.සී.ඒ.එම් මත යැපෙන හයිපොතලමස් නැවත සකස් කිරීම සඳහා සම්බන්ධ වූ ප්රධාන ජානවල ගැඹුරු වෙනස් කිරීම් සමඟ සම්බන්ධ විය. සමස්තයක් වශයෙන් ගත් කල, මෙම දත්ත වලින් හෙළි වන්නේ, මාතෘ ඩබ්ලිව්.ඩී, පර්යන්ත කාල පරිච්ඡේදයට පමණක් සීමා වී ඇති අතර, ආහාර ගැනීමේ හැසිරීමට සම්බන්ධ හයිපොතලමියම් හෝමියොස්ටැටික් හා විපාක මාවතේ ප්රබල ප්රතිනිර්මාණයක් සිදු වුවද, පසු කාලීන ජීවිතයේ බලශක්ති හෝමියස්ටැසිස් සහ මේද මනාපයන් කෙරෙහි තිරසාර බලපෑමක් නොමැති බවයි. මෙම පරිපථ ප්රතිනිර්මාණය කිරීමේ අදාළත්වය අවබෝධ කර ගැනීම සඳහා තවදුරටත් ක්රියාකාරී අත්හදා බැලීම් අවශ්ය වේ.
හැදින්වීම
මුල් කාලීන ජීවන පරිසරය හා සිදුවීම් පසුකාලීන ජීවිතයේ සෞඛ්ය හා රෝග නැඹුරුතාවයට දායක වන බව හොඳින් හඳුනාගෙන තිබේ (1-3). පරිවෘත්තීය කාලසීමාව තුළ පෝෂණ හා හෝමෝන පරිසරයේ සිදුවන වෙනස්කම් දරු දැරියන් තරබාරුකමට හා ඊට සම්බන්ධ ව්යාධි විද්යාවන්ට පසුකාලීනව නැඹුරු වන්නේ කෙසේද යන්න විස්තර කිරීමට පරිවෘත්තීය සලකුණු කිරීමේ සංකල්පය යෝජනා කර ඇත. බලශක්ති අහිතකර ආහාර පරිභෝජනයේ ප්රති ence ලයක් ලෙස අධික ලෙස පෝෂණය වීම අපගේ අහඹු ජීවන රටාවේ සැලකිය යුතු කාරණයක් වේ. ඇත්ත වශයෙන්ම, මෙම වර්ගයේ ආහාර මාතෘ ආහාරයට නිරාවරණය වන පුද්ගලයින්ට තරබාරුකම හා පරිවෘත්තීය සින්ඩ්රෝමය වර්ධනය වීමේ වැඩි අවදානමක් ඇත (4, 5). බොහෝ අධ්යයනවලින් හෙළි වී ඇත්තේ ගර්භණීභාවය හා කිරිදීම තුළින් මාතෘ අධික මේද ආහාර (HFD) දරුවන්ගේ පරිවෘත්තීය ක්රියාවලියට දිගු කාලීනව බලපාන බවයි (6-8). පරිවෘත්තීය නියාමනයට සම්බන්ධ මාර්ග වලට අමතරව, හැසිරීම් පෝෂණය කිරීමේදී මොළයේ ප්රතිලාභ පද්ධති ද වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි (9, 10). විපාක සහ ඇබ්බැහි වීමේ සන්දර්භය තුළ දැඩි ලෙස අධ්යයනය කරන ලද මෙසොලිම්බික් ඩොපමයින් (ඩීඒ) ස්නායු සම්ප්රේෂණය මිනිසුන් දෙදෙනාම ආහාර මගින් ඇති කරන ස්ථුලතාවයේ වෙනස් වේ (11-13) සහ සතුන් (14-16). ඩීඒ ප්රක්ෂේපනයන් විශාල වශයෙන් පශ්චාත් කාලයට පසුව වර්ධනය වේ (17), එබැවින් ඔවුන්ගේ වර්ධනයට මුල් ආහාර වේලට බලපානු ඇත. පසුගිය වසර කිහිපය තුළ මීයන් පිළිබඳ අත්හදා බැලීම්වලින් පෙනී යන්නේ මාතෘ එච්එෆ්ඩී පරිභෝජනය දරුවන් තුළ හෙඩොනික් පෝෂණය වැඩි දියුණු කරන බවයි (18, 19). මෙම නිරීක්ෂණය ඩීඒ පද්ධතියේ ක්රියාකාරිත්වයේ යම් යම් වෙනස්කම් වලට සම්බන්ධ වුවද (20-22), මුල් අවධියේදී ඔන්ටොජනි සහ ප්රතිලාභ මාර්ග ප්රතිසංස්කරණය කිරීම පිළිබඳ සීමිත දත්ත ලබා ගත හැකිය (21). GABA (am- ඇමයිනොබියුට්රික් අම්ලය) වැනි ත්යාග පද්ධතියේ ඩීඒ නොවන සං sign ා කොටස පර්යන්ත පෝෂණ ආතතියට බලපාන්නේ කෙසේද සහ කෙසේද යන්න ලේඛනගත කර නොමැත. ඇත්ත වශයෙන්ම, GABA නියුරෝන විපාක සහ පිළිකුල සඳහා ප්රධාන කාර්යභාරයක් ඉටු කරන බව පෙනේ. Ventral tegmental area (VTA) GABA නියුරෝන වලට විවිධ මොළයේ ප්රදේශ වලින් සමාන ආදාන රටාවක් ලැබේ (23), සහ මෑත කාලීන දෘෂ්ටි ජනක පාදක චර්යාත්මක අධ්යයනයන් මගින් කොන්දේසි සහිත ස්ථාන මග හැරීමේදී VTA GABA හි ප්රධාන භූමිකාව ඉස්මතු කරයි (24) සහ විපාක පරිභෝජන හැසිරීම (25). න්යෂ්ටික සමුච්චය (NAc) ප්රධාන වශයෙන් සෑදී ඇත්තේ GABAergic මධ්යම ස්පයිනි නියුරෝන වල ප්රක්ෂේපණයෙනි. එය ලිම්බික්-මෝටර අතුරුමුහුණතක් ලෙස ක්රියා කරයි. හරහා ventral pallidum (VP) සහ වෙනත් මෝටර් ප්රයෝග සඳහා ප්රතිදානය (26). අවසාන වශයෙන්, LH හි GABA සම්බන්ධතා රාශියක් මගින් සෑදී ඇති හයිපොතලමස් (27) සහ න්යෂ්ටිය ආරෝපණය කිරීම, කුසගින්න සහ තෘප්තියේ සං als ා ඒකාබද්ධ කරයි (10).
මෙම අධ්යයනයේ අරමුණ වන්නේ මීයන්ගේ දරු උපතේ සිට ලිංගික පරිණතභාවය දක්වා මාතෘ බටහිර ආහාර (ඩබ්ලිව්ඩී) ආහාරයට ගන්නා බලපෑම හඳුනා ගැනීමයි (i) මේද මනාපයන් මත (ii) ඩීඒ පද්ධතියේ ජාන ප්රකාශන පැතිකඩ, GABAergic පද්ධතිය සහ හයිපොතලමස් හි ප්ලාස්ටික් බව , සහ (iii) එකම කාල පරිච්ෙඡ්දය සඳහා වූ මෙසොලිම්බික් ඩොපමිනර්ජික් ජාලවල ස්නායු කායික / වාස්තු විද්යාත්මක වෙනස්කම් පිළිබඳව. එබැවින්, කිරි වැරීමෙන් පසු, කිරි වැරීම, P25, ලිංගික පරිණතභාවය, P45 සහ වැඩිහිටිභාවය, P95), මාතෘ WD ශරීරයේ බර වැඩිවීම සහ දරු ප්රසූතියෙන් පසු නිතිපතා චව් යටතේ තබා ඇති දරුවන්ගේ ඇඩිපෝස් පටක වර්ධනය කෙරෙහි අපි තක්සේරු කළෙමු. සමගාමීව, අපි මේදය මනාප පරීක්ෂණයක් සිදු කළ අතර, පසුව ආහාර පරිභෝජනය, තේරීම සහ අභිප්රේරණ නියාමන පද්ධති සඳහා සලකුණු තෝරා ගැනීමක් සඳහා විශේෂිත වූ පිටපත් විශ්ලේෂණයක් සහ පසුව ප්රධාන සංරචක විශ්ලේෂණය (PCA) සිදු කළෙමු. අපගේ ප්රති results ල ඩීඒ පද්ධතියේ පෝෂණ වැඩසටහන්කරණය කෙරෙහි අවධානය යොමු කරමින් මෑත කාලීන ප්රති results ල සැලකිය යුතු ලෙස පොහොසත් කළේය.
ද්රව්ය සහ ක්රම
ආචාර ධර්ම ප්රකාශය
දේශීය සත්ව සුභසාධක කමිටුව, යුරෝපා සංගමය (නියෝගය 2010 / 63 / EU), ඉන්ස්ටිටියුට් නැෂනල් ඩි ලා රීචර්ච් ඇග්රොනොමික් (පැරිස්, ප්රංශය) සහ ප්රංශ පශු වෛද්ය දෙපාර්තමේන්තුවේ (ප්රංශ පශු වෛද්ය දෙපාර්තමේන්තුවේ) මාර්ගෝපදේශයන්ට අනුකූලව සියළුම අත්හදා බැලීම් සිදු කරන ලදී.A44276). පර්යේෂණාත්මක ප්රොටෝකෝලය ආයතනික ආචාර ධර්ම කමිටුව විසින් අනුමත කරන ලද අතර APAFIS 8666 යොමුව යටතේ ලියාපදිංචි කර ඇත. ආතතිය අවම කිරීම සඳහා සෑම පූර්වෝපායක්ම ගනු ලැබූ අතර එක් එක් අත්හදා බැලීම් මාලාවේ භාවිතා කරන සතුන් සංඛ්යාව.
සතුන් සහ ආහාර
12 ± 12 ° C දී ආහාර සහ ජලය සමඟ සතුන් 22 h / 2 h ආලෝකය / අඳුරු චක්රයක් තුළ නඩත්තු කරන ලදී. ලිබිටුම්. ගර්භණී දිනයේ දී ගැහැණු ස්ප්රැග්-ඩව්ලි මීයන් තිස් දෙකක් (ශරීර බර: 240-290 g) 1 (G1) සෘජුවම ජැන්වියර් (ප්රංශයේ Le Genest Saint Isle) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. ඔවුන් තනි තනිව නවාතැන් ගෙන ඇති අතර ඒවායින් 5 සඳහා පාලන ආහාර වේලක් (CDN) (0% හරක් මස් මේදය සහ 16% සුක්රෝස්) හෝ ගර්භණී හා මවි කිරි කාලය තුළ 21 සඳහා WD (30% හරක් මස් මේදය සහ 16% සුක්රෝස්) පෝෂණය කරන ලදී. (වගුව බලන්න Table1: 1: නෙදර්ලන්තයේ ABdiet Woerden වෙතින් kcal වලින් ආහාර සංයුතිය). උපතේදී, පැටවුන්ගේ ප්රමාණය පැටවුන් අට දෙනෙකුට 1: 1 පිරිමි හා ගැහැණු අනුපාතය සමඟ සකස් කරන ලදී. අපි එක් එක් කණ්ඩායම සඳහා 12 පිරිමි සහ 16 ගැහැණු සතුන්ගෙන් සමන්විත පැටව් ගසමින් 4 වේලි වලින් පිටත තබා ගත්තෙමු. කිරි වැරීමේ දී (P4), සීඩී සහ ඩබ්ලිව් ඩී වේලි වලට උපත ලැබූ දරුවන් අත්හදා බැලීම අවසන් වන තෙක් සම්මත චව් මත තබා ඇත (රූප (Figure1A, B) .1ඒ, බී). පැටවුන්ගේ සිරුරේ බර උපතේදී වාර්තා වූ අතර ඉන් පසුව සෑම දිනකම 10: 00 am සිට P21 (කිරි වැරීම) දක්වා සටහන් විය. කිරි වැරීමෙන් පසු සහ අත්හදා බැලීම අවසන් වන තෙක් සෑම 3 දිනකටම මීයන් බර කිරන ලදී. අපි දත්ත ඉදිරිපත් කරන්නේ පිරිමි දරුවන් පිළිබඳ පමණි. ගැහැණු මීයන් වෙනත් අධ්යයනයක් සඳහා භාවිතා කරන ලදී (රූපය (Figure11).
හැසිරීම (ද්වි-බෝතල් තේරීමේ පරීක්ෂණය)
තීරණාත්මක සංවර්ධන කාල පරිච්ඡේද තුනක් අධ්යයනය කරන ලදි (P21 සිට P25 දක්වා: යෞවනය, P41 සිට P45 දක්වා: නව යොවුන් විය සහ P91 සිට P95 දක්වා: තරුණ වැඩිහිටි). 24 පිරිමි පැටවුන් (n බෝතල් දෙකක තේරීම නොමිලේ පරීක්ෂණයක් සිදු කිරීම සඳහා අහඹු ලෙස තෝරාගෙන තනි කූඩුවක තබා ඇත (රූප (Figure1A, B) 1ඒ, බී) (28-30). මෙම පරීක්ෂණය මේද රසය කෙරෙහි ඇති ආකර්ශනීය බව මිහිරි රසයෙන් වි oci ටනය කිරීමෙන් සහ කැලරි පරිභෝජනයේ පරිවෘත්තීය බලපෑමෙන් හැකිතාක් දුරට අධ්යයනය කිරීමෙන් භාවිතා කරන ලදී. ඇත්ත වශයෙන්ම, 1% ඉරිඟු තෙල් ද්රාවණ පරිභෝජනය 0.09 kcal / ml පමණක් ගැනීම සමඟ සම්බන්ධ වේ. බෝතල් දෙකක් තිබීම පුරුද්දෙන් දිනකට පසු, පරීක්ෂණය P2 හි 25 දින සහ 4 දින P41 සහ P91 හි සිදු කරන ලදී (රූපය (Figure1A) .1ඒ). විස්තරාත්මකව, කිරි වැරීමේ (P21) දී, 24 පැටවුන් 2 දින සඳහා තනි තනිව තබා ඇත (රූපය (Figure1A): 1A): 1% xantUM විදුරුමස් (ප්රංශයේ සිග්මා ඇල්ඩ්රික්, ශාන්ත ක්වෙන්ටින් ෆලාවියර්) සහ xanthan gum ද්රාවණය (2% ඉරිඟු තෙල් ඉමල්ෂන්) අතර දින 1, පුරුදු අවධිය, 0.3, මීයන්ට බෝතල් දෙකක නිදහස් තේරීමක් ලබා දෙන ලදී. 0.3%). P41 සහ P91 හි 24 පැටවුන් භාවිතා කරන ලද අතර අඛණ්ඩව දින තුනක් බෝතල් දෙකකින් තොර තේරීමක් යෝජනා කරන ලදී. XantUM විදුරුමස් ද්රාවණය සහ රස ද්රාවණය (ඉරිඟු තෙල් 1%) දිනපතා 11: 00 am හි 3 දින සඳහා (P45 සහ P95) වාර්තා විය. ස්ථාන මනාප නැඹුරුව වැළැක්වීම සඳහා බෝතල් දෙකේ පිහිටීම දිනපතා ප්රතිලෝම කරන ලදි. 24 h හි පරිභෝජනය කරන ලද මුළු පරිමාවට පරිභෝජනය කරන “මේද ද්රාවණය” පරිමාවෙහි අනුපාතය ලෙස මේද මනාප ලකුණු ගණනය කරන ලදි. චර්යාත්මක පරීක්ෂණය පුරාම සියලුම මීයන් සම්මත චව් ආහාර යටතේ පවත්වා ගෙන යනු ලැබීය.
පටක එකතු කිරීම සහ රුධිර සාම්පල ලබා ගැනීම
බෝතල් දෙකේ නිදහස් තේරීමේ පරීක්ෂණයේ අවසාන දිනට පසු දින, මීයන්ගෙන් අඩක් (n = එක් කණ්ඩායමකට 6) CO විසින් අළුයම 09:00 ත් 12:00 ත් අතර වේගයෙන් දනීකරණය කරන ලදී2 ආශ්වාස කිරීම. රුධිරය EDTA (Laboratoires Léo SA, St. Quentin en Yvelines, France) සමඟ නල වල එකතු කරන ලද අතර කේන්ද්රාපසාරී 2,500 g 15 මිනිත්තුව සඳහා 4 at C දී. ප්ලාස්මා −20 at C දී ශීත කළ. අවයව සහ තනි රෙට්රොපෙරිටෝනියල් මේද ඩිපෝව වි ected ටනය කර බර කිරන ලදී. මොළය වේගයෙන් ඉවත් කර මොළයේ අනුකෘතියක (WPI, සරසෝටා, FL, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදයේ මීයන් 300-600 g) තැන්පත් කරන ලදී. පළමුවෙන්ම හයිපොතලමස් වි ected ටනය විය [පැක්සිනෝස්ගේ ඇට්ලස් ඛණ්ඩාංක වලට අනුව: බ්රෙක්මා සිට −1.0 සිට −4.5 මි.මී.31)] ඉන්පසු, සෑම මීයක් සඳහාම, NAc මට්ටමින් 2 mm thickness ණකම සහිත කිරීටක පෙති දෙකක් සහ VTA මට්ටමින් තවත් එකක් ලබා ගන්නා ලදී. දකුණු හා වම් එන්ඒසී සහ දකුණ සහ වම් වීටීඒ (එක් සතෙකුට සාම්පල හතරක්) සාම්පල විවිධ බයොප්සි පන්ච් (ස්ටයිෆල් රසායනාගාර, නැන්ටෙරේ, ප්රංශය) (NAc සහ 4 මි.මී. සඳහා විෂ්කම්භය 3 මි.මී. ventral midbrain සඳහා). ටැක්මන් අඩු dens නත්ව අරාව (ටීඑල්ඩීඒ) විසින් ජාන ප්රකාශනය පසුව තීරණය කිරීම සඳහා සාම්පල දියර නයිට්රජන් වල ශීත කළ අතර −80 at C හි ගබඩා කර ඇත.
අනෙක් මීයන් (n = 6 කණ්ඩායමකට) පෙන්ටෝබාර්බිටල් (150 mg / kg ip) සමඟ ගැඹුරින් නිර්වින්දනය කර ඇති අතර, පාරදෘශ්ය භෞතික විද්යාත්මක සේලයින් වි usion ටනයකින් පරිපූර්ණ කරන ලද අතර අයිස්-සීතල 4% පැරෆෝමැල්ඩිහයිඩ් පොස්පේට් බෆරයේ (PB), pH 7.4. මොළය වේගයෙන් ඉවත් කර, 1 for 4 ° C දී එකම ස්ථායීකරණයේ ගිලී, අවසානයේදී 25% PB සුක්රෝස් තුළ පැය 24-48 අතර ගබඩා කර ඇත. මොළය පසුව අයිසොපෙන්ටේන් හි −60 at C දී ශීත කළ අතර අවසානයේ එය භාවිතා කරන තෙක් −80 at C ට ගබඩා කර ඇත. එන්ඒසී, හයිපොතලමස් සහ වීටීඒ 20 µm අනුක්රමික කිරීටක කොටස් වලට ක්රයෝස්ටැට් (මයික්රොම්, මයික්රොටෙක්, ෆ්රැන්චෙවිල්, ප්රංශය) සමඟ කපා ඇත. එක් එක් මොළය සඳහා කොටස් 10–4 ක් අඩංගු වීදුරු ස්ලයිඩ 6 කින් යුත් ශ්රේණි දෙකක් හෝ තුනක් සිදු කරන ලදී. සෑම වීදුරු ස්ලයිඩයක් සඳහාම අනුක්රමික කොටස් 200 µm පරතරයකින් යුක්ත වේ (රූපය (Figure66).
ජෛව රසායනික ප්ලාස්මා විශ්ලේෂණය
P25, P45 සහ P95 මීයන් මත එකතු කරන ලද EDTA ප්ලාස්මා ප්ලාස්මා ග්ලූකෝස්, NEFA (එස්ටරීකරණය නොකළ මේද අම්ල), ඉන්සියුලින් සහ ලෙප්ටින් මැනීමට භාවිතා කරන ලදී. ග්ලූකෝස් සහ NEFA මනිනු ලැබුවේ විශේෂිත කට්ටල (ග්ලූකෝස් සහ NEFA PAP 150 කට්ටල, BioMérieux, Marcy-l'Etoile, ප්රංශය) සමඟ වර්ණකමිතික එන්සයිම ප්රතික්රියා භාවිතා කරමිනි. ඉන්සියුලින් සහ ලෙප්ටින් සඳහා නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව හෝමෝන විශේෂිත ELISA කට්ටල සමඟ පරීක්ෂා කරන ලදී (මීයන් / මූසික ඉන්සියුලින් ELISA කට්ටලය, මීයන් ලෙප්ටින් ELISA කට්ටලය, ලින්කෝ පර්යේෂණ, ශාන්ත චාල්ස්, MO, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය).
හෘද රෝගය
අනුක්රමික VTA සහ NAc කොටස් අඩංගු වීදුරු විනිවිදක පළමුව 3-4 h සඳහා අවහිර කරන ලද අතර පසුව පහත සඳහන් ප්රතිදේහ මිශ්රණයකින් එක රැයකින් 4 at C දී පුර්ව ලියාපදිංචි කර ඇත: මූසික ප්රති-නියුඑන් (1: 500; IgM; මිලිපෝර් ජෛව විද්යා පර්යේෂණ ප්රතික්රියාකාරක, මර්ක්, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) සහ හාවා විරෝධී TH (1: 1,000; මිලිපෝර් ජෛව විද්යා පර්යේෂණ ප්රතික්රියාකාරක, මර්ක්, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය). ප්රාථමික ප්රතිදේහ සමඟ පුර්ව ලියාපදිංචි වීමෙන් පසුව සහ පී.බී. සමඟ සේදීමෙන් පසුව, ද්විතියික ප්රතිදේහ මිශ්රණයක කොටස් පුර්ව ලියාපදිංචි කර ඇත: ඇලෙක්සා එක්ස්එන්එම්එක්ස් සංයුක්ත බූරුවන්ගේ මවුස් විරෝධී අයි.ජී.එම් සහ ඇලෙක්සා එක්ස්එන්එම්එක්ස්-සංයෝජිත බූරුවා ප්රති-හාවා අයි.ජී.ජී. (488: 568; , MA, USA) 1 h සඳහා. කොටස් සුපර් ෆ්රොස්ට් ප්ලස් රන් ස්ලයිඩ (තර්මෝෆිෂර් සයන්ටිෆික්, වෝල්තම්, එම්.ඒ., ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය), වාතය වියළන ලද අතර ප්රෝලෝන්ග් ™ ගෝල්ඩ් ඇන්ටිෆේඩ් ප්රතික්රියාකාරක (ඉන්විට්රජන්, තර්මෝෆිෂර් සයන්ටිෆික්, වෝල්තම්, එම්.ඒ., ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) සමඟ ආවරණය කර ඇත.
VTA හි TH නියුරෝන ගණන
එක් එක් මීයා සඳහා, කලින් විස්තර කර ඇති පරිදි TH- ධනාත්මක සෛල ගණනය කරන ලදි (32) VTA හි විවිධ රෝස්ට්රොකාඩල් මට්ටම් තුනකදී: තුන්වන ස්නායුවෙන් පිටවන මට්ටමේ (බ්රෙග්මාට සාපේක්ෂව දුර: −5.3 මි.මී.), 200 rom රෝස්ට්රල් සහ 200 caud caudal මෙම මට්ටමට (රූප (Figure6A) .6ඒ). වම් සහ දකුණු පැත්ත සඳහා, නැනෝ සූමර්-එක්ස්ආර් ඩිජිටල් විනිවිදක ස්කෑනරයක × 40 විශාලනය භාවිතා කරමින්, මධ්යගතව මෙසෙන්ස්ෆලෝන්හි පාර්ශ්වීය මායිම දක්වා වූ ආයිත්තමක් පර්යන්ත පත්රිකාවේ සිට මධ්ය වීඑස්ඒ දක්වා වූ සම්පූර්ණ වීටීඒ ඇතුළත් ඩිජිටල් පින්තූරයක් ලබා ගන්නා ලදී. C12000 (හමාමාට්සු, ජපානය). එක් එක් කොටස සඳහා VTA හි පරිමිතිය වටා රේඛාවක් අඳින ලදී. මායිම් තෝරාගනු ලැබුවේ සෛලවල හැඩය පරීක්ෂා කර පැක්සිනෝස් සහ වොට්සන් සිතියම් වෙත යොමු කිරීමෙනි. ඩොපමිනර්ජික් නියුරෝනයක් පැහැදිලිව පෙනෙන න්යෂ්ටියක් සහිත නියුඑන් (+) / ටීඑච් (+) ප්රතිශක්තිකරණ සෛලීය ශරීරයක් ලෙස අර්ථ දැක්විය. NIH Image J මෘදුකාංගය (සෛල කවුන්ටර ප්ලගිනය) භාවිතා කරමින්, NeuN (+) / TH (+) සෛල ගණනය කරනු ලැබුවේ සත්ව කණ්ඩායම් පිළිබඳ දැනුමක් නොමැති විවිධ පුද්ගලයින් දෙදෙනෙකු විසිනි. බෙදීම් සෛල ගණනය කිරීමේ දෝෂ නිවැරදි කරන ලද්දේ ඇබර්ක්රොම්බි සූත්රයෙනි (32), කොහෙද N = n[t/(t + d)] (N = මුළු සෛල ගණන; n = ගණන් කළ සෛල ගණන; t = අංශයේ thickness ණකම; හා d = සෛල විෂ්කම්භය), සහ මෙම නිවැරදි කිරීමේ සාධකය 0.65 විය. දත්ත මධ්යන්ය ලෙස ප්රකාශ වේ [NeuN (+) / TH (+) වමේ සහ දකුණේ VTA] ± SEM.
NAc හි TH තන්තු ens නත්වය
NAc හි ඩොපමිනර්ජික් ස්නායු පර්යන්තවල TH ප්රෝටීන් අන්තර්ගතය තක්සේරු කර ඇත්තේ TH ප්රතිශක්ති ola නතා කරන ලද කොටස්වල ව්යුහ විද්යාත්මක dens නත්වමිතික විශ්ලේෂණය මගිනි. TH තන්තු dens නත්වය NAc හි රොස්ට්රෝකාඩල් අක්ෂය දිගේ අත්තනෝමතික මට්ටම් තුනකින් ගණනය කරන ලදි (බ්රෙග්මා 2.20, 1.70, සහ 1.20 mm) (රූපය (Figure6B) .6බී). කෙටියෙන් කිවහොත්, නැනෝ සූමර්-එක්ස්ආර් ඩිජිටල් ස්ලයිඩ ස්කෑනරයක × 40 විශාලනය භාවිතයෙන් ලබාගත් සමස්ත ස්ට්රයැටම් සහ එන්ඒසී ඇතුළත් ඩිජිටල් කරන ලද පින්තූරය C12000 (හමාමාට්සු, ජපානය) ලබා ගන්නා ලදී. දී ඇති NAc සඳහා, දෘශ්ය dens නත්වය (OD) මැනීමේ ප්රදේශය අර්ථ දැක්වීම සඳහා මුළු න්යෂ්ටිය වටා රේඛාවක් අඳින ලදි (රූපය (Figure6B) .6බී). එන්අයිඑච් පිංතූර ජේ මෘදුකාංගය භාවිතා කරමින් එම කොටසේම කෝපස් කෝලෝසම් (TH ප්රතිශක්ති රසායන විද්යාව සඳහා පැල්ලම් නොකරන ලද කලාපයක්) මත ඇඳ ඇති රවුම් කලාපයකින් මනින ලද OD අගය සමඟ ලබාගත් අගය සාමාන්යකරණය කරන ලදි. OD අනුපාතයේ මධ්යන්යයක් ලෙස දත්ත ප්රකාශ කෙරේ (කොටස් තුනෙහි කෝපස් කෝලෝසම් හි NAc / OD අගයෙහි OD අගය) ± SEM.
TLDA සහ TaqMan විසින් ජාන ප්රකාශනය
නියුක්ලියෝස්පින් ආර්එන්ඒ / ප්රෝටීන් කට්ටලය (මැචෙරි-නාගල්, හෝර්ඩ්ට්, ප්රංශය) භාවිතා කරමින් ආර්එන්ඒ, ශීත කළ එන්ඒසී, වීටීඒ වලින් පොහොසත් සාම්පල සහ හයිපොතලමස් වලින් හුදකලා විය. නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව සම්පූර්ණ RNA DNase ජීර්ණයට ඉදිරිපත් කරන ලදී, ප්රමාණය 260 / 280 nm UV අවශෝෂණය මගින් තක්සේරු කරන ලද අතර ගුණාත්මකභාවය ඇජිලන්ට් 2100 ජෛව විශ්ලේෂක පද්ධතිය භාවිතයෙන් තක්සේරු කරන ලදී, පසුව RNA අඛණ්ඩතාව අංකය (RIN) ගණනය කරන ලදී. 8 ට අඩු RIN සහිත සාම්පල ඉවතලන ලදි. 10 ofl පරිමාවෙන් ඉහළ ධාරිතාවයකින් යුත් RT කට්ටලයක් (ව්යවහාරික ජෛව පද්ධති, ෆොස්ටර් සිටි, CA, USA) භාවිතා කරමින් සමස්ත RNA වලින් එක් මයික්රොග්රෑම් එකක් සීඩීඑන්ඒ වෙත ප්රතිවර්තනය කරන ලදි.
කලින් විස්තර කළ පරිදි (33), TLDA යනු 384 හොඳින් ක්ෂුද්ර තරල කාඩ්පතක් වන අතර එය 384 එකවර තත්ය කාලීන PCR සිදු කළ හැකිය (ව්යවහාරික ජෛව පද්ධති, ෆොස්ටර් සිටි, CA, USA). ප්ලාස්ටික් හා ආහාර පරිභෝජනය නියාමනය කිරීමට අදාළ විවිධ ජාන පවුල් ආවරණය කිරීම සඳහා අපි විශේෂයෙන් නිර්මාණය කරන ලද ටීඑල්ඩීඒ භාවිතා කළෙමු. සෑම අභිරුචි කාඩ්පතක්ම 2 × 4 ප්රතික්රියා කුටි අඩංගු 2 × 48- නියැදි පැටවීමේ රේඛා ලෙස වින්යාස කර ඇත (යොමුව: 96a). 92- ජාන කට්ටලයක් (වගුව S1 පරිපූරක ද්රව්ය වලින්) සහ ගෘහ පාලක ජාන හතරක් (18S, Gapdh, Polr2a, සහ Ppia) අධ්යයනය කරන ලදී. තථ්ය කාලීන PCR ලයිෆ් ටෙක්නොලොජීස් තක්මන් ප්රතික්රියාකාරක භාවිතා කර ABI ප්රිස්ම් 7900HT අනුක්රමික අනාවරණ පද්ධතිය (ව්යවහාරික ජෛව පද්ධති, ෆොස්ටර් සිටි, සීඒ, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) මත ක්රියාත්මක කරන ලදී. SDS 2.3 මෘදුකාංගය (ව්යවහාරික ජෛව පද්ධති, ෆොස්ටර් සිටි, සීඒ, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) භාවිතයෙන් පීසීආර් හරහා අමු ප්රතිදීප්ත දත්ත එක්රැස් කරන ලද අතර එමඟින් එළිපත්ත චක්ර තවදුරටත් ජනනය කරන ලදී. අක්රමවත් PCR ධාවනය වෙනස් කොට සැලකීම සඳහා තර්මෝෆිෂර් ක්ලවුඩ් ඇප් (තර්මෝෆිෂර්, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) භාවිතයෙන් පෙරීමෙන් පසුව, නියැදියක තක්සේරු කිරීම් n = 6 (n P5 හි WD කාණ්ඩයට = 25). සාපේක්ෂ ප්රමාණ කිරීම සඳහා දත්ත පසුව තර්මෝෆිෂර් ක්ලවුඩ් ඇප් (තර්මෝෆිෂර්, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) සමඟ විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ජාන ප්රකාශනයේ සාපේක්ෂ ප්රමාණය (RQ) පදනම් වූයේ RQ = 2 සමීකරණය භාවිතා කරමින් සංසන්දනාත්මක Ct ක්රමය මත ය.T සී, එහිදී එක් ජාන ඉලක්කයක් සඳහා tCt යනු ක්රමාංකන නියැදියකින් අඩු කර අන්තරාසර්ග පාලනයකින් සාමාන්යකරණය කරන ලද Ct විචලනයයි. හරියටම, අපි GeNorm ඇල්ගොරිතම (ThermoFisher Cloud App RQ, ThermoFisher, USA) භාවිතා කරමින් වඩාත් ස්ථාවර ගෘහ පාලක ජානය තීරණය කළෙමු. ගෘහ පාලක ජාන හතර අතුරින්, ගප්ද් යනු එන්ඒසී සහ හයිපොතලමස් සඳහා ආවේණික පාලනය ලෙසත්, වීපීඒ සඳහා පීපියා ලෙසත් අර්ථ දක්වා ඇති අතර විශ්ලේෂණය කරන ලද කාල පරිච්ඡේද තුනේ සියලුම සාම්පල සඳහා මෙය සත්ය වේ. සීඩී කාණ්ඩයට සාපේක්ෂව ජාන ප්රකාශනයේ 10% වර්ධනයක් සඳහා එක් වර්ණයක් පැවරීම සඳහා ජාන ප්රකාශනයේ ග්රැෆික් නිරූපණය අතින් නිර්මාණය කර ඇත. පරාමිතික නොවන විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණය භාවිතා කරමින් සැලකිය යුතු විචලනයක් තරු ලකුණක් සමඟ සටහන් විය.
සංඛ්යාන විශ්ලේෂණය
ප්රති Results ල මධ්යන්ය ලෙස දැක්වේ table වගු සහ සංඛ්යා වල SEM. ශරීරයේ බර විවිධ වේලාවන්හි විශ්ලේෂණය කිරීම, මේද මනාපයන් සහ ප්රතිශක්තීකරණ රසායන විද්යාවෙන් ලබාගත් OD අනුපාතය සඳහා මෑන්-විට්නි පරාමිතික නොවන පරීක්ෂණය භාවිතා කරන ලදී.
3 දින මේද මනාපයන්හි වැදගත්කම තක්සේරු කිරීම සඳහා, අපි සෑම දිනකම තීරු සංඛ්යාන විශ්ලේෂණයක් සිදු කළෙමු. සෑම කණ්ඩායමක් සඳහාම, පරාමිතික නොවන විල්කොක්සන්ගේ අත්සන් කරන ලද ශ්රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණයෙන් මේද ද්රාවණය සහ පාලන ද්රාවණය පරිභෝජනය කරන ලදී. අපි මනාප මධ්යන්ය අගය 50% (තිත් රතු ඉර) හි උපකල්පිත අගය සමඟ සංසන්දනය කළෙමු. රතු තරු ලකුණක් සමඟ සැලකිය යුතු විචලනය සටහන් විය. QPCR RQ අගය විශ්ලේෂණය සඳහා අපි එකම පරීක්ෂණය භාවිතා කළෙමු; අපි මධ්යන්ය RQ අගය 1 හි උපකල්පිත අගය සමඟ සංසන්දනය කළෙමු. සැලකිය යුතු විචලනයක් තරු ලකුණක් සමඟ සටහන් විය (රූපය (Figure44).
ප්ලාස්මා නියැදි විශ්ලේෂණය සඳහා, අපි පරාමිතික නොවන මෑන් සහ විට්නි පරීක්ෂණයක් සිදු කළෙමු. TH- ධනාත්මක සෛල ගණන දෙයාකාරයකින් ANOVA සහ p අගය ගණනය කරන ලදී. ක්රියාත්මක කරන ලද පරීක්ෂණවල ගුණත්වය නිසා බොන්ෆෙරෝනි පශ්චාත් නිවැරදි කිරීම යෙදුවේ මෙම පරීක්ෂණයෙන් පසුව පමණි. ප්රිස්ම් එක්ස්එන්එම්එක්ස් මෘදුකාංගය (ග්රැෆැඩ් මෘදුකාංග ඉන්කෝපරේෂන්, ලා ජොල්ලා, සීඒ, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) භාවිතා කරමින් සංඛ්යාන විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී.
දත්ත කට්ටලයේ සාමාන්ය ව්යුහය (එනම් ගෝලීය පීසීඒ තුනක්) දෘශ්යමාන කිරීම සඳහා එක් එක් මොළයේ බයොප්සි පන්ච් (වීටීඒ, එන්ඒසී සහ හයිපොතලමස්) සඳහා විවිධ කාල වේලාවන්හිදී අධීක්ෂණය නොකළ පීසීඒ එකක් 130 පරාමිතීන් (ටීඑල්ඩීඒ, හැසිරීම සහ ප්ලාස්මා දත්ත) මත සිදු කරන ලදී. කාල ලක්ෂ්යයකට). PCA යන්න අර්ථ දැක්විය හැක්කේ දත්තවල විකලාංග ප්රක්ෂේපණය අඩු මාන රේඛීය අවකාශයකට ය, එනම් ප්රක්ෂේපිත දත්තවල විචල්යතාවය උප අවකාශයේ උපරිම වේ. අපි මුලින්ම ප්රකාශිත හෝ තරමක් ප්රකාශ නොවන ජාන පෙරීමකට ලක් කළෙමු (රූපය (Figure5) .5). සීඩී ෆෙඩ් වේලි වලින් සහ ඩබ්ලිව් ඩී ෆෙඩ් වේලි වලින් පැවත එන දරුවන්ගේ අගයන් එක් එක් පීසීඒ බිම්වල විවිධ වර්ණවලින් දර්ශනය විය. මෙම පර්යේෂණාත්මක කණ්ඩායම් දෙක අධීක්ෂණය නොකළ පීසීඒ සංරචක මගින් හොඳින් වෙන් වී ඇත්දැයි බැලීමට. මෙම විශ්ලේෂණය දරුවන්ගේ කණ්ඩායම් දෙක අතර අවකලනය ලෙස ප්රකාශ වන ජාන කාණ්ඩ වෙන් කරයි. පසුව, එම්ආර්එන්ඒ සලකුණු වල විවිධ පොකුරු මත අවධානය යොමු කරන ලද පීසීඒ සිදු කරන ලදී: ප්ලාස්ටික් බව (සෛල ඇලවීම, සයිටොස්කෙලිටන්, නියුරෝට්රොෆික් සාධකය, සයිනොප්ටොජෙනිසිස් සහ පිටපත් කිරීමේ නියාමනය), ඩීඒ මාර්ගය, GABAergic path, epigenetic modulators (histone deacetylase සහ histone acetyl transferase). මෙම අවධානය යොමු කරන ලද PCA මඟින් මාතෘ ආහාර සහ සමහර සලකුණු සහ නිශ්චිත පවුල් ජාන අතර සහසම්බන්ධය එකවර දෘශ්යමාන කිරීමට කෙනෙකුට ඉඩ දෙයි. PCA විශ්ලේෂණය සඳහා ගුණාත්මක පරිමාණයක් භාවිතා කරන ලද අතර අවධානය යොමු කළ PCA: +++: ඉතා හොඳ වෙන් කිරීම; ++: පීසීඒ වෙන්වීමේ වැරදි පැත්තේ එක් මීයා සමඟ හොඳ වෙන් කිරීම; +: වැරදි පැත්තේ මීයන් දෙදෙනෙකු (එක් එක් කණ්ඩායමෙන් එකක්) සමඟ හොඳ වෙන්වීමක්, -: පැහැදිලි වෙන්වීමක් නැත.
ප්රතිපල
ශරීර බර හා වර්ධනය
ගර්භණී සමයේදී මාතෘ ඩබ්ලිව්.ඩී. (G1 සිට G21 දක්වා) උපතේදී පැටවුන්ගේ ශරීර බරට බලපාන්නේ නැත (රූපය (Figure2) 2) (CD: 6.55 ± 0.07 g vs WD: 6.54 ± 0.05 g p = 0.9232) (රූප (Figure2A, B) .2ඒ, බී). උපත් සිට කිරි වැරීම දක්වා ශරීරයේ බර වැඩිවීම සීඩී වේලි වලින් උපදින දරුවන්ට වඩා 21% ඉහළ අගයක් ගනී. සීඩී වේලි වලින් පැවත එන දරුවන්ට වඩා ශරීර බරක් සහිත ඩබ්ලිව් ඩී වේලි වලින් උපත ලැබූ දරුවන්ගේ කිරි වැරීමේදී සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වේ (36.19 ± 0.90 g vs 47.32 ± 1.48 g p <0.001) (රූපය (Figure2C) .2ඇ). කිරි වැරීමේ සිට අත්හදා බැලීමේ අවසානය දක්වා (P95) මීයන්ට සම්මත චව් ආහාර වලින් පෝෂණය වූ අතර සීඩී වේලි දරු පරපුරට වඩා WD වේලි වලින් පැවත එන දරුවන් සඳහා ශරීර බර වැඩි විය. විස්තරාත්මකව: නව යොවුන් වියේදී (P39) (රූප (Figure2A, D), 2A, D), CD: 176.8 ± 3.3 g vs WD: 192.2 ± 3.3 g p = 0.0016 සහ P93 හි (තරුණ වැඩිහිටි) (රූප (Figure2A, E) 2A, E) CD: 478 ± 9.9 g vs WD: 508.6 ± 10.3 g p = 0.0452.
විවිධ කාල වකවානුවලදී හෝමෝන සහ පරිවෘත්තීය සලකුණු
ප්ලාස්මා ලෙප්ටින්, ඉන්සියුලින්, ග්ලූකෝස් සහ NEFA සාන්ද්රණයන් P25, P45 සහ P95 හි මැනිය. සෑම වයස් කාණ්ඩයකම, ප්ලාස්මා ග්ලූකෝස්, එන්ඊඑෆ්ඒ සහ ඩබ්ලිව්ඩී දරුවන්ගේ ලෙප්ටින් මට්ටම සීඩී දරු පරපුරට වඩා සංඛ්යාත්මකව වෙනස් නොවීය (වගුව (Table2,2, n = කණ්ඩායමකට 6). ඩබ්ලිව් ඩී පෝෂක වේලි වලින් පී 25 ට පමණක් (p = 0.0327, මෑන් සහ විට්නි පරීක්ෂණය).
කිරි වැරීමේ සිට වැඩිහිටි විය දක්වා මේද මනාපයන් සඳහා පෙරිනාටල් ඩබ්ලිව්ඩී වල බලපෑම
මේද මනාපයට WD හි බලපෑම ගවේෂණය කිරීම සඳහා, අපි වර්ධන කාලය තුළ විවිධ කාල ස්ථාන තුනක බෝතල් දෙකක තේරීමේ ආදර්ශයක් භාවිතා කළෙමු. මෙම පරීක්ෂණය මගින් මේද රසය සඳහා වන මනාපය අධ්යයනය කිරීම සඳහා හැකි තරම් දුරට එහි පරිවෘත්තීය බලපෑම වළක්වා ගැනීමට භාවිතා කරන ලදී. බෝතලයෙන් (P25, P45, සහ P95 හි) “අතිරේක” කැලරි ප්රමාණයෙහි වෙනස්කම් සංඛ්යානමය වශයෙන් වැදගත් නොවන බව අපි පෙන්වා දුන්නෙමු. කණ්ඩායම් අතර (රූප S1පරිපූරක ද්රව්යවල A-C). තවද, 1% ඉරිඟු තෙල් ද්රාවණයේ පරිභෝජනයේ වෙනස නිසා P1 හි WD මීයන් සඳහා 25% ක කැලරි වැඩි වීමක් සිදු වේ (WD: 4.9% vs CD: 3.9% කැලරි ප්රමාණය) සහ සීඩී මීයන් සඳහා 0.5% P45 (WD: 2% vs CD: 2.5% කැලරි අඩංගු වේ) (රූප S1පරිපූරක ද්රව්යවල ඩී-එෆ්). P25 හි, සීඩී වේලි වල සිටින පැටවුන්ට මේදය සඳහා මනාපයක් නොමැත (44.87 ± 9.8%, p = 0.339); ප්රතිවිරුද්ධ ඩබ්ලිව් ඩී මීයන් මේදය සඳහා මනාපයක් දක්වයි (75.12 ± 8.04%, p = 0.039 විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණයෙන් පසුව, රතු තරු ලකුණු). තවද කණ්ඩායම් දෙක අතර සංඛ්යානමය වෙනසක් ඇත p = 0.0347 (මෑන් සහ විට්නි පරීක්ෂණය, කළු හැෂ් ටැගය) (රූපය (Figure33ඒ).
P45 සහ P95 හි කණ්ඩායම් දෙකට මේදය සඳහා සැලකිය යුතු මනාපයක් ඇත, එනම් 50% හි න්යායාත්මක වටිනාකමට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් වේ (P45, CD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005 සහ WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; P95, CD: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425 සහ WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණයෙන් පසුව, රතු තරු ලකුණු) (රූපය (Figure3A) .3ඒ). රස බැලීමේ එක් දිනක් (P45 හිදී) කණ්ඩායම් දෙක සඳහා අගයන් වෙන් කොට හඳුනාගත නොහැකි විය p = 0.7857 සහ පී 95 හි p = 0.9171 මෑන්-විට්නි පරීක්ෂණය) (රූපය (Figure33ඒ).
කාලයත් සමඟ මීයන් ඔවුන්ගේ මේද පරිභෝජනය නියාමනය කරන්නේ කෙසේදැයි දැන ගැනීම සඳහා, අපි මේදය ඉදිරිපත් කිරීම අඛණ්ඩව දින තුනක් P45 සහ P95 හි නැවත නැවතත් කළෙමු (රූප (Figure3B, C) .3බී, සී). P45 හි දී, WD වේලි වල පිරිමින්ට පමණක් මේදය ද්රාවණය සඳහා වන මනාපය ක්රමයෙන් අහිමි විය (රූපය (Figure3B) 3B) (තෙවන දිනය: 53.12 ± 8.36% p = 0.851 විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණයෙන් පසුව). කෙසේ වෙතත්, P95 (වැඩිහිටි වයස) දී සියලු සතුන් දින 3 ක පරීක්ෂණය තුළ පරිණාමය නොමැති මේදයට වැඩි කැමැත්තක් දැක්වීය (රූපය (Figure33C).
සාරාංශයක් ලෙස, මෙම ආකෘතියේ දී, මුල් අවධියේදී (ළමා කාලය), නව යොවුන් වියේදී කාලයත් සමඟ ප්රගතිශීලී උනන්දුවක් නොදක්වන ඩබ්ලිව් ඩී වේලි මගින් පෝෂණය කරන මීයන්ගේ මේදය සඳහා මනාපයක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. වැඩිහිටි වියේදී මීයන් කණ්ඩායම් දෙක අතර වෙනසක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු.
හයිපොතලමස් සහ ප්රතිලාභ මාර්ගවල ප්රතිනිර්මාණය කිරීමේ මොළයේ ප්ලාස්ටික් හා GABA පරිපථවල අණුක අත්සන
ගර්භණී සමයේදී සහ මවි කිරි කාලය තුළ මාතෘ ඩබ්ලිව්ඩී පරිභෝජනය හයිපොතලමස් සහ දරුවන්ගේ විපාක මාර්ග කෙරෙහි බලපෑමක් ඇති කරන්නේද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා, මොළයේ ප්ලාස්ටික් බව, මොළයේ ආකෘති නිර්මාණය සහ ආහාර පරිභෝජනය හා එපජෙනෙටික් වල අඩංගු ස්නායුක පරිපථවල ප්රධාන සාධක කිහිපයක සාපේක්ෂ ප්රකාශනය අපි මැන බැලුවෙමු. නියාමකයින්. විවිධ මොළයේ (එනම්, හයිපොතලමස්, වීටීඒ සහ එන්ඒසී) ඒවායේ බහුලත්වය විශ්ලේෂණය කිරීමට අපි ටීඑල්ඩීඒ භාවිතා කළෙමු (වගුව S1 පරිපූරක ද්රව්ය වලින්) කාල තුනක දී. P25, P45, සහ P95 හි බෝතල් දෙක තේරීමේ පරීක්ෂණවලින් පසුව තිරගත කිරීම සිදු කරන ලදි (රූපය (Figure1) 1) ඩබ්ලිව් ඩී ෆෙඩ් වේලි වලින් උපත ලැබූ පිරිමි හය දෙනෙකු සහ සීඩී ෆෙඩ් වේලි වලින් උපත ලැබූ පිරිමි හය දෙනෙකු මත.
හයිපොතලමස් හි P25 හි, විවිධ කාණ්ඩ දහතුනකින් යුත් ජාන පහක් ප්රධාන වශයෙන් ප්ලාස්ටික් සලකුණු සහ GABA සලකුණු වල සැලකිය යුතු ලෙස අඩු mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් පෙන්නුම් කර ඇති අතර WD පෝෂිත වේලි වල පැටවුන්ගෙන් W20% (Gfap) සහ −40% (Gabra5) අතර වේ. සංයුක්ත තැටි සහිත වේලි. ප්රතිලාභ මාර්ග බයොප්සි (VTA සහ NAc) වලදී, ජාන දෙකක් සංඛ්යානමය ඉහළ mRNA ප්රකාශන මට්ටම් (D2R සහ Gabra1), එනම් DA සං sign ා සහ GABA ප්රතිග්රාහක සහ එක් ජානයක් NAc හි අඩු ප්රකාශනයක් (Hcrtr2) (එනම් orexin 2 ප්රතිග්රාහක) පෙන්වයි. VTA හි ජාන හතරක් සැලකිය යුතු ලෙස ඉහළ mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් (Map2, Gabara1, Hcrtr1, සහ Hcrtr2) (එනම්, ප්ලාස්ටික් සලකුණු, GABA ප්රතිග්රාහක සහ සෙරොටොනිනර්ජික් ප්රතිග්රාහක) ප්රදර්ශනය කර ඇත (රූපය (Figure44).
හයිපොතලමස් හි P45 හි, විවිධ කාණ්ඩ දහතුනකින් යුත් ජාන පහක් සීඩී ෆෙඩ් වේලි වල මීයන් සමඟ සසඳන විට ඩබ්ලිව් ඩී ෆෙඩ් වේලි වල පැටවුන් තුළ −20% (Fos) සහ −50% (FosB) අතර අඩු mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් පෙන්නුම් කරයි. ප්රතිලාභ මාර්ග බයොප්සි වල P45 හි, ජාන හතරක් ඉහළ mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් (Gfap, Dat, Cck2r, සහ Kat5) සහ ජාන දෙකක් NAc හි අඩු ප්රකාශනයක් (Fos and FosB) පෙන්වන අතර ජාන තුනක් අඩු mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් පෙන්නුම් කරයි (Arc, VTA හි FosB, සහ Th) සහ එක් ජානයක් ඉහළ මට්ටමක (Gabrg2).
හයිපොතලමස් හි P95 හි, විවිධ කාණ්ඩ දහතුනකින් යුත් 20 ජාන + 20 සහ + 40% (Syt4 සිට Gjd2 දක්වා) අතර ඉහළ mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් පෙන්වන අතර 3 ජාන අඩු mRNA ප්රකාශනයක් (FosB, D1r, සහ Gabarb1) සීඩී ෆෙඩ් වේලි වල මීයන් සමඟ සසඳන විට ෆෙඩරල් වේලි. විපාක මාර්ග බයොප්සි වල P95 හි, 12 ජාන + 20 සහ + 40% (Syn1 සිට Hcrt1 දක්වා) සහ 1 ජානය NAc හි අඩු ප්රකාශනයක් (Th) අතර ඉහළ mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් පෙන්නුම් කරයි, 6 ජාන ඉහළ mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් (Ncam1) , Gja1, Gjd2, Gabra5, Htr1a, සහ Htr1b), සහ 6 ජාන අඩු mRNA ප්රකාශන මට්ටමක් පෙන්නුම් කරයි (Cntf, Igf1, Fos, Socs3, Gabrb2, සහ Hdac3).
සියලු ප්රමාණාත්මක පරාමිතීන් (එනම්, ප්ලාස්මා මාත්රාව, චර්යාත්මක දත්ත සහ එම්ආර්එන්ඒ ප්රකාශන විචලනයන්) භාවිතා කරමින් මොළයේ බයොප්සි තුනට අනුරූපව අධීක්ෂණය නොකළ පීසීඒ තුනක් අපි සිදු කළෙමු. කණ්ඩායම් දෙකෙන් පැහැදිලි වෙන්වීමක් ලබාගෙන ඇත්තේ NAc සහ VTA සඳහා P95 හි පමණි (වගුව (Table33).
පීසීඒ සහසම්බන්ධතා කවය සහ ටීඑල්ඩීඒ දත්ත වලට අනුව (මෙම පීසීඒ හි ඇතුළත් කර ඇති විචල්යයන්ගෙන් බහුතරයක් නියෝජනය කරයි), අපි වෙන් කිරීම සඳහා වගකිව යුතු ජාන පවුල් නිර්වචනය කර අවධානය යොමු කරන ලද පීසීඒ (රූප (Figure5A, B, 5A, B, උදාහරණයක් ලෙස). නාභිගත කරන ලද පීසීඒ අනාවරණය කළේ එන්ඒසී හි පීඑක්ස්එන්එම්එක්ස් ඩීඒ සලකුණු සහ හයිපොතලමස් හි ඇති ප්ලාස්ටික් සලකුණු මගින් දරුවන්ගේ කණ්ඩායම් දෙක වෙන් කළ හැකි බවයි (වගුව (Table33 සාරාංශය සඳහා). P45 හි එවැනි වෙනස්කම් කිරීමක් පසුව ලබාගෙන නොමැත. කෙසේ වෙතත්, P95 හි එකම විශ්ලේෂණයෙන් හෙළි වූයේ NAc සහ හයිපොතලමස් හි GABA පද්ධතියේ විවිධ සලකුණු, සහ ප්ලාස්ටික් සලකුණු (හයිපොතලමස්, NAc සහ VTA වලින්) සහ එපජෙනෙටික් නියාමකයින් (NAc වලින් පමණක්) සතුන් කණ්ඩායම් දෙක වෙන් කිරීමට දායක වන බවයි ( රූපය (Figure5; 5; වගුව Table33).
මෙම විශ්ලේෂණය මඟින් GABAergic සලකුණු වලට මෙන්ම, හෝමියොස්ටැටික් යන දෙඅංශයේම ප්ලාස්ටික් හා එපිටජන්ටික් සලකුණු වලට ද, චර්යා රටා පෝෂණය කිරීමේ ප්රති reward ල මාර්ගයට ද දිගු කාලීනව බලපාන බව අනාවරණය වේ.
TH සෛලවල ප්රතිශක්ති ist න රසායන විද්යාව පිටපත් විශ්ලේෂණය තහවුරු කරයි
විවිධ සංවර්ධන කාලවලදී NAc සහ VTA හි TH mRNA හි යම් වෙනසක් අප නිරීක්ෂණය කළ හෙයින්, මෙම ප්රති results ල TH ප්රතිශක්තිකරණ සමඟ සහසම්බන්ධ කිරීම අපගේ ඉලක්කය විය. ඩොපමිනර්ජික් සෛල සිරුරු පිහිටා ඇති VTA හි TH / NeuN ධනාත්මක සෛල ගණන විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර NAc හි පිහිටා ඇති ස්නායු අවසානයන්හි TH ප්රතිශක්තීකරණයේ OD ප්රමාණනය කරන ලදී. P45 හි ඇති සීඩී මීයන්ට සාපේක්ෂව TH (+) සෛල WD හි VTA හි අඩු බහුල විය (රූප (Figure6A, C, E; 6ඒ, සී, ඊ; රූපය S2පරිපූරක ද්රව්ය වලින් A). කාල පරිච්ඡේද තුනෙහි (P25) අංශ මට්ටම සහ TH / NeuN ප්රමාණකරණය අතර සැලකිය යුතු අන්තර්ක්රියාකාරිත්වයක් නොතිබුණි p = 0.9991, පී 45 p = 0.9026, සහ පී 95 p = 0.9170). P45 දී පමණක්, දරුවන් කණ්ඩායම් දෙක අතර සංඛ්යානමය වෙනසක් ලබා ගන්නා ලදි (p = 0.0002) (රූපය (Figure6E) .6ඊ). ඊට අමතරව, කණ්ඩායම් දෙක අතර PACNUMX සහ P25 හි NAc හි TH ප්රතිශක්තීකරණයේ OD හි වෙනසක් අප නිරීක්ෂණය කළේ නැත (P45 හි OD අනුපාත අගයන්: සංයුක්ත තැටියේ 25 ± 1.314 සහ WD හි 0.022 ± 1.351, p = 0.2681; OD අනුපාත අගයන් P45: 1.589 ± 0.033 සංයුක්ත තැටියට එදිරිව 1.651 ± 0.027 WD, p = 0.1542). කෙසේ වෙතත්, TH ස්නායු අවසානයෙහි OD හි සැලකිය යුතු අඩුවීමක් WD කාණ්ඩයේ P95 හි NAc හි දක්නට ලැබුණි (OD අනුපාත අගයන් p95: 1.752 ± 0.041 සංයුක්ත තැටියට එදිරිව 1.550 ± 0.046, WD, p = 0.0037) (රූප (Figure6B, D, F; 6බී, ඩී, එෆ්; රූපය S2පරිපූරක ද්රව්යවල බී).
සාකච්ඡා
මෙම අධ්යයනයේ දී, අපි උපකල්පනය කළේ මාතෘ පර්යන්ත මන්දපෝෂණය බලශක්ති හෝමියස්ටැසිස්, ආහාර තෝරා ගැනීම සහ දරුවන්ගේ ආහාර පරිභෝජනය සඳහා සම්බන්ධ ප්රතිලාභ මාර්ග සංවර්ධනය කිරීමේ වැඩසටහනට බලපානු ඇති බවයි. උපතේ සිට කිරි වැරීම දක්වා මාතෘ ඩබ්ලිව්ඩී පරිභෝජනයේ බලපෑම අපි පුළුල්ව විමසා බැලුවෙමු. කුඩා දරුවන්ගේ සිට වැඩිහිටි විය දක්වා දරුවන්ගේ විශේෂිත මොළයේ ප්රදේශවල (වීටීඒ, එන්ඒසී සහ හයිපොතලමස්) GABA, සෙරොටොනින් සහ ඩීඒ මාර්ග වලට. අපගේ ප්රති results ල වලට අනුව, මේද හා පැණිරස වලින් පොහොසත්, පර්යන්ත කාලයට තදින් සීමා කර ඇති, ජාන ප්රකාශන පැතිකඩෙහි වෙනස්වීම හා මෙසොලිම්බික් වල ස්නායු කායික / වාස්තු විද්යාත්මක වෙනස්කම් සමඟ සම්බන්ධිත දරුවන් තුළ මුල් මේද මනාපයන් (ළමා කාලය) කෙරෙහි බලපෑමක් ඇති කරයි. dopaminergic ජාල. කෙසේ වෙතත්, දරුවන් චව් ආහාර වේලෙහි තබා ඇති විට, නව යොවුන් වියේ පසුවන ඩබ්ලිව්.ඩී පෝෂණය කරන ලද මීයන් තුළ මේදය කෙරෙහි ඇති ආකර්ශනීය බව ක්රමයෙන් අඩුවී ඇති අතර එය ඩීඒ පද්ධතියේ ජානවල ප්රකාශිත අඩුවීම හා වීටීඒ හි TH- ධනාත්මක නියුරෝන සුළු වශයෙන් අඩුවීම සමඟ සම්බන්ධ වේ. . පසුකාලීන ජීවිතයේ දී මේද මනාපයන් කණ්ඩායම් අතර වෙනස් නොවීය. GABAergic ජාල වල වැදගත් ප්ලාස්ටික් බවක් සහ හයිපොතලමස් හි බලශක්ති හෝමියස්ටැසිස් ජාලය WD පෝෂිත වේලි වලින් මීයන් තුළ හඳුනාගෙන ඇත (රූපය (Figure77).
මෙම අධ්යයනයේ දී අප විසින් නිරීක්ෂණය කරන ලද perinatal-WD පරිභෝජනයේ පළමු බලපෑම වන්නේ කිරි වැරීමේ දී දරුවන්ගේ ශරීර බර වැඩි වීම නමුත් උපතේදී වෙනසක් නැත. ඇත්ත වශයෙන්ම, WD කාණ්ඩයේ සතුන් උරා බොන කාලය අවසානයේදී සංයුක්ත තැටියට වඩා 21% වැඩි බරක් ලබා ගනී. WD පෝෂිත වේලි වලින් දරුවන් සඳහා උපත් බර වෙනස් කිරීම සම්බන්ධයෙන් පෙර අධ්යයනයන් පරස්පර ප්රති results ල ලබා දී ඇත: වැඩි ශරීර බරක් (19, 34), අඩු ශරීර බරක් (18, 21, 35) හෝ වෙනසක් නැත (6, 22). අපගේ දත්ත මෑත කාලීන මෙටා-ප්රතිගාමී විශ්ලේෂණයකට අනුකූල වේ (36) 171 පර්යේෂණාත්මක ප්රකාශන මත සිදු කරන ලද අතර නිගමනය වූයේ මාතෘ එච්එෆ්ඩී නිරාවරණය දරුවන්ගේ උපත් බරට බලපාන්නේ නැති නමුත් කිරි දෙන කාලය අවසානයේදී ශරීර බර වැඩි කිරීමට හේතු වූ බවයි. WD දරු පරපුරේ වැඩි ශරීර බර බොහෝ විට පිළිබිඹු වන්නේ කිරි සංයුතියේ සහ / හෝ කිරි නිෂ්පාදනයේ වෙනසක් පෙර ප්රකාශනවල දක්වා ඇති හෙයිනි (37, 38). ඔවුන්ගේ වැඩි ශරීර බරට අනුකූලව, කිරි බොන කාලය අවසානයේදී සීඩී දරු පරපුරට වඩා ඩබ්ලිව් ඩී දරුවන්ගේ රෙට්රොපෙරිටෝනියල් මේද අනුපාතය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය (P25, Table Table2), 2), එය පෙර අධ්යයනයන්ට අනුකූල වේ (18, 21). කෙසේ වෙතත්, ඉහළ ඇඩිපෝසිටි P45 සහ P95 හි නොපවතින අතර ඉන්සියුලින්, NEFA සහ ග්ලූකෝස් ප්ලාස්මා වැනි අනෙකුත් පරිවෘත්තීය පරාමිතීන් කණ්ඩායම් අතර වෙනස් නොවීය. ගර්භණී සමයේදී සහ මවි කිරි කාලය තුළ පැහැදිලි මාතෘ ස්ථුලතාවයකින් තොරව, දරුවන් තුළ කල්පවත්නා පරිවෘත්තීය බලපෑම් ඇති කිරීමට ආහාර පමණක් ප්රමාණවත් නොවන බව අපගේ ප්රති results ලවලින් පෙනී ගියේය (22, 39, 40).
පෙරිනටාල් එච්එෆ්ඩී පරිභෝජනය රසවත් ආහාර සඳහා දරුවන්ගේ මනාපයන් සමඟ ධනාත්මකව සම්බන්ධ වන බව වාර්තා වේ (41). අපගේ අධ්යයනයේ දී, අපි නිරන්තර චව් මත කිරි වැරූ දරුවන් සඳහා මේද මනාපයන් පරීක්ෂා කිරීම අරමුණු කරගත් දීර් it කාලීන අධ්යයනයක් සිදු කළෙමු.
ළමා වියට පෙරිනාටල් ඩබ්ලිව්ඩී වල බලපෑම (කිරි වැරීමෙන් පසු)
මීයන් පැටවුන් solid න ආහාර අනුභව කරයි උපතින් දින 19 - 20 (42) ඔවුන්ගේ මස්තිෂ්ක විපාක මාර්ග තවමත් පරිණත නොවූ විට (17). එබැවින් මේදය සඳහා ඔවුන්ගේ මුල් මනාපය අධ්යයනය කිරීම සහ මෙම මුල් මනාපය මොළයේ පිටපත් විශ්ලේෂණය සමඟ සම්බන්ධ කිරීම ඉතා සිත්ගන්නා සුළු විය. කිරි වැරීමෙන් පසු, සීඩී මීයන් තුළ දක්නට නොලැබෙන ඩබ්ලිව් ඩී දරුවන්ගෙන් මේදය සඳහා මනාපයක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. පාලිත මීයන් සඳහා කුඩා අවධියේදී මේද සඳහා අඩු මනාපයක් සහ පර්යන්ත මන්දපෝෂණය හා රසවත් ආහාර මනාපයන් අතර සම්බන්ධයක් පෙන්වන අනෙක් වාර්තා සමඟ මෙය අනුකූල වේ (43).
එම වයසේදී මාතෘ ආහාර සම්බන්ධයෙන් පැටවුන් සමූහය වෙනස් කොට සැලකීමට ගෝලීය පීසීඒ ඉඩ දුන්නේ නැත. කෙසේ වෙතත්, ඩීඒ සලකුණු වලට පමණක් සීමා වූ ඉලක්කගත පීසීඒ සිදු කළ විට, අපි කණ්ඩායම් වලින් හොඳ වෙන් කිරීමක් ලබා ගත්තෙමු. ඇත්ත වශයෙන්ම, ඩබ්ලිව් ඩී පැටවුන් තුළ NAc හි D2 ප්රතිග්රාහක mRNA වල ප්රකාශනයේ කැපී පෙනෙන වැඩි වීමක් දක්නට ලැබේ. NAc හි මෙම postynaptic D2 අධික ලෙස පීඩනය යෙදීම මේදය සඳහා ඉහළ පෙළඹවීමකට අර්ධ වශයෙන් සම්බන්ධ විය හැකිය (44). සීඩී පැටවුන් හා සසඳන විට ඩබ්ලිව්ඩී පැටවුන් තුළ වෙනත් පිටපත් කිහිපයක් වෙනස් කර ඇත, එනම් එන්ඒසී සහ වීටීඒ හි ඇල්ෆා එක්ස්එන්එම්එක්ස් ගබාඒ අනු ඒකකයේ වැඩි වීමක් සහ මෙම න්යෂ්ටිවල ගබා ප්රතිග්රාහක ප්රතිසංවිධානය කිරීමට යෝජනා කරන හයිපොතලමස් හි ඇල්ෆා එක්ස්එන්එම්එක්ස් ගබා අනු අනුකාරකයේ අඩුවීමක්.
නව යොවුන් වියට පෙරිනාටල් ඩබ්ලිව්ඩී වල බලපෑම
P45 හි දී, ඉදිරිපත් කිරීමේ පළමු දිනයේ දී කණ්ඩායම් දෙකටම සමාන ඉහළ මේද මනාපයක් අපි නිරීක්ෂණය කළ නමුත්, සිත්ගන්නා කරුණ නම්, WD මීයන් නැවත නැවත ඉදිරිපත් කිරීමෙන් පසු මේදය සඳහා ඇති උනන්දුව ක්රමයෙන් නැති වී යාමයි. නව යොවුන් විය යනු ජීවිත කාලය පුරාම සංජානන සැකසීමට අවශ්ය ස්නායු චර්යා ප්රතිසංවිධානයෙහි තීරණාත්මක කාල පරිච්ඡේදයකි (45), සහ විවිධ අධ්යයනයන් මගින් මේද ආහාර වේලක අහිතකර සංජානන බලපෑමට කැපී පෙනෙන අවදානමක් පෙන්නුම් කරයි (46-48). මෙම ප්රති result ලය මුල්හවුස්ලර් කණ්ඩායමේ පෙර වැඩවලට පටහැනි බව පෙනේ (21, 35) බාල මීයන් (6 සති) කුණු ආහාර සඳහා පැහැදිලි මනාපයක් පෙන්වයි. කෙසේ වෙතත්, ඔවුන්ගේ ප්රකාශනවල පර්යේෂණාත්මක පරමාදර්ශය වෙනස් වූයේ මීයන්ට කිරි වැරීමේ සිට පූජාව දක්වා (6 සති) සම්මත චව් සහ කුණු ආහාර යන දෙකටම නොමිලේ ප්රවේශ විය හැකි බැවිනි.
සමගාමීව, අපි NAc හි ඩැට් එම්ආර්එන්ඒ හි වැඩි වීමක් සහ වීටීඒ හි Th එම්ආර්එන්ඒ හි අඩුවීමක් මැන බැලුවෙමු. එය ඩබ්ලිව්ඩී මීයන්ගේ වීටීඒ හි අඩු TH (+) සෛල සංඛ්යාවක් පෙන්නුම් කළ ප්රතිශක්ති oh නතා රසායන විද්යාව මගින් සනාථ කරන ලදී. කිරි වැරීමේ දී ඩීඒ පද්ධතිය සඳහා ඉහළ සම්ප්රේෂණ ක්රියාකාරකම් වලින් පසුව, පීඑක්ස්එන්එම්එක්ස් හි අඩු වූ ක්රියාකාරිත්වය අපගේ ඩබ්ලිව්ඩී මීයන් තුළ දක්නට ලැබෙන රසවත් ආහාර සඳහා ඇති අඩු උනන්දුව පැහැදිලි කරයි. අප විශ්ලේෂණය කළ විවිධ න්යෂ්ටිවල ෆොස් සහ ෆොස්බී එම්ආර්එන්ඒ ප්රකාශනය ක්රමානුකූලව අඩුවීම මාතෘ ඩබ්ලිව්ඩී නිරාවරණයෙන් පසු මස්තිෂ්ක ක්රියාකාරිත්වය අඩුවීමේ සලකුණක් විය හැකි බව ද සැලකිල්ලට ගත යුතුය.
නව යොවුන් වියේ පසුවන මීයන් ඔවුන්ගේ පෙර හැසිරීමට ප්රතිවිරුද්ධ මේදය සඳහා වඩාත් වේගවත් අකමැත්තක් පෙන්නුම් කළේය. ළමා කාලය තුළ “සාමාන්ය” ආහාර වේලක් භාවිතා කිරීම නව යොවුන් වියේදී අතිශයෝක්තියෙන් යුත් මේද මනාපයක් කරා ඔවුන්ව “ආරක්ෂා” කරන බව පෙනේ. ඊට පටහැනිව, කිරි වැරීමෙන් පසු මීයන්ට නොමිලේ කුණු කෑම ලබා ගත හැකි විට, Ref හි මෙන්. (21, 35), ඔවුන් නව යොවුන් වියේදී මේදය සඳහා ප්රබල මනාපයක් පෙන්නුම් කරයි. මෙම ප්රති result ලයෙන් ඇඟවෙන්නේ කිරි වැරීමෙන් පසු 3 සති චව් ආහාර මගින් පරිපථ නැවත ප්රජනනය කර නව යොවුන් වියේ දරුවන් උග්ර මේද අභියෝගයකට සංවේදී නොවන බවයි.
වැඩිහිටියන්ට Perinatal WD හි බලපෑම
දැනටමත් විස්තර කර ඇති පරිදි නැවත නැවතත් මේදය ඉදිරිපත් කිරීමෙන් පසුව පවා වැඩිහිටි මීයන් මේදය සඳහා මනාපයේ වෙනසක් නොපෙන්වයි (22, 35). සමගාමීව, NAc හි Th mRNA සහ ප්රෝටීන වල අඩුවීමක් සහ VTA හි ඩැට් mRNA ප්රකාශනය අඩු කිරීමේ ප්රවණතාවක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. නයිෆ් සහ සහායක (20) වැඩිහිටි මීයන් තුළ ඩීඑෆ් පද්ධතියේ අඩු ක්රියාකාරිත්වයක් දැනටමත් එච්එෆ්ඩී සමඟ පෝෂණය කර ඇති අතර, මයික්රො ඩයලයිසිස් සමඟ මනිනු ලබන ඇම්ෆෙටැමයින් සඳහා මොට වූ ඩීඒ ප්රතිචාරයක් සහ මේද විපාක සඳහා වැඩි පෙළඹවීමක් ඇත (මෙම ආකෘතිය පිළිබඳ මෑත කාලීන qPCR දත්ත සාරාංශ කළ වගුව බලන්න, වගුව S2 අතිරේක ද්රව්ය වලින්). NAc හි TH ප්රමාණකරණයේ (mRNA සහ immunohistochemistry) එක් සීමාවක් පැමිණෙන්නේ NAc සෛලවලට Th mRNA සහ ප්රෝටීන ප්රකාශ කළ හැකි අතර පසුව DA තන්තු ප්රමාණකරණයට පක්ෂග්රාහී විය හැකිය (49, 50). කෙසේ වෙතත්, NAc හි TH ප්රතිශක්තීකරණ භාවිතය ප්රධාන වශයෙන් අනාවරණය වූයේ මිඩ්බ්රේන් ඩීඒ නියුරෝන (VTA සහ SNc) වලින් එන ax න ඇක්සෝන් පර්යන්තයන් ය. සාමාන්යයෙන්, ස්ට්රයිටේටම් සහ එන්ඒසී හි TH ප්රකාශ කරන නියුරෝන හඳුනාගත හැක්කේ ඉහළ ඩීඒ තුවාල වූ සතුන් තුළ පමණි (51) එබැවින් අපගේ ප්රතිශක්තිකරණ අංශවල හඳුනාගත නොහැකි ය. මෙම අධ්යයනයේ දී, එන්ඒසී හි මු ඔපියොයිඩ් ප්රතිග්රාහකයේ ප්රබල වැඩිවීමක් ද අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. අනෙක් කණ්ඩායම්, විවිධ ආකෘතීන් සහිතව, එච්එෆ්ඩී වලට මුල් අවධියේදී නිරාවරණය වූ මීයන්ගේ කශේරුකා පටලවල අඩුවීමක් පෙන්නුම් කරයි (කිරි දෙන හා ගර්භණී සමයේදී) (19, 21) හෝ වෙනසක් නැත (35). එම්ආර්එන්ඒ මට්ටමින් පමණක් මනිනු ලබන මෙම වෙනස් කිරීම් මඟින් ඉහළ ඔපියොයිඩ් සංවේදීතාවයකට සම්බන්ධ ඩීඒ පරිපථවල සුළු හයිපෝ ක්රියාකාරිත්වයක් පිළිබිඹු විය හැකිය (52) අප විසින් සිදු කරන ලද චර්යාත්මක පරීක්ෂණයට බලපෑමක් ඇති කිරීමට එය ප්රමාණවත් නොවේ. ක්රියාකාරී ප්රවේශයන් භාවිතා කරමින් මෙම උපකල්පන තහවුරු කළ යුතුය. මෑත කාලීන පුවත්පතක, සමාන ආකෘතියක් සහිත, රොමානි-පෙරෙස් සහ වෙනත් අයට, එච්එෆ්ඩී දරුවන් සඳහා ක්රියාකාරී කන්ඩිෂනින් පෙට්ටිවල සැලකිය යුතු වැඩි වීමක් නිරීක්ෂණය කිරීමට නොහැකි වූ නමුත් ගුවන් ධාවන පථයේ පරීක්ෂණ ආදර්ශයක ඉලක්ක පෙට්ටියක් කරා ළඟා වීමට කෙටි ප්රමාදයක් නිරීක්ෂණය කරන ලදී (22). අපගේ පර්යේෂණාත්මක තත්වයන් තුළ දිගු කල් පවතින මේද මනාපයන් නොතිබුණද, පර්යන්තීය මාතෘ ඩබ්ලිව්ඩී පරිභෝජනය NAc සහ හයිපොතලමස් හි GABA ප්රතිනිර්මාණය කිරීම මගින් වැඩි වශයෙන් මැදිහත් වූ අනෙකුත් මස්තිෂ්ක පරිපථ කෙරෙහි දිගු කාලීන බලපෑමක් ඇති කරන බව අපට පෙනී ගියේය. NAc පරිභෝජන හැසිරීම සඳහා “සංවේදක සෙන්ඩිනල්” ලෙස සැලකේ (52). GABA විසින් නිකුත් කරන LH නියුරෝන නිෂේධනය කිරීමෙන් ආහාර පරිභෝජනය මර්දනය කර ඇති බව මෑත අධ්යයනයන් පෙන්වා දී ඇත (53). ඕ'කොනර් සහ වෙනත් අය. NAc D1R නියුරෝන (GABAergic ප්රොජෙක්ටින් නියුරෝන) ආහාර පරිභෝජනය නැවැත්වීම සඳහා LH VGAT නියුරෝන තෝරා බේරා ගන්නා බව පෙන්නුම් කළේය (54). මෙම අත්හදා බැලීම් මඟින් චර්යාත්මක ප්රතිචාර පාලනය කිරීම සඳහා වගකිව යුතු GABA පරිපථයක් (NAc / Hypothalamus) නිරාවරණය කරයි. මෙම කශේරුකා ස්ට්රයැටම්-හයිපොතලමික් පද්ධතිය තවත් පරිපථයක් සම්පූර්ණ කරන අතර ඇඳ න්යෂ්ටිය ස්ට්රියා ටර්මිනලිස් GABA විසින් නිකුත් කරන VGAT ග්ලූටමේට් වලට නියුරෝන ප්රක්ෂේපණය කරන Vglut LH නියුරෝන මුදා හැරීම සහ LH vglut2 සෘජුවම නිෂේධනය කිරීම පෝෂණය කරයි (55). NAc කවචයට සම්බන්ධ ආහාර රුචිය නියාමනය කිරීමේ පරිපථයේ තවත් වැදගත් අංගයක් වන්නේ VPA වෙත GABA- මුදාහරින නිෂේධන ප්රක්ෂේපණයකි (56). මෙම දත්ත මගින් පෝෂණය ප්රවර්ධනය කිරීම සඳහා හයිපොතලමස් සහ එන්ඒසී අතර අන්තර් ක්රියාකාරිත්වයේ දී GABA සං sign ාකරණයේ තීරණාත්මක කාර්යභාරය ඉස්මතු කරයි. අපගේ අධ්යයනයේ දී, GABA ප්රතිනිර්මාණයට සම්බන්ධ නියුරෝන වල ජනගහනය සහ මෙම වෙනස් කිරීම් මගින් ජාල වෙනස් කළ හැකි ආකාරය වෙනස් කිරීමට අපට නොහැකි විය. කෙසේ වෙතත්, GABA පරිපථවල කේන්ද්රීය භූමිකාව වැඩි උනන්දුවක් දැක්විය යුතුය. විශේෂයෙන්, විද්යුත් භෞතික විද්යාත්මක ප්රවේශයන් භාවිතා කරමින් මෙම GABA පරිපථවල තවදුරටත් ක්රියාකාරී අත්හදා බැලීම් කිරීම ඉතා සිත්ගන්නා සුළු වනු ඇත (57). අධ්යයනය කරන ලද න්යෂ්ටීන් තුනෙහි 5HT1a සහ 5HT1b ප්රතිග්රාහක සඳහා mRNA පිටපත ගෝලීයව නියාමනය කිරීම ද අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. සෙරොටොනින් තන්තු ප්රක්ෂේපණය කිරීමේ බහුතරය පැමිණෙන්නේ ඩෝසල් රැප් න්යෂ්ටිය (ඩීආර්එන්) සහ මධ්ය රැප් න්යෂ්ටිය (එම්ආර්එන්) ය. වෙතින් මෑත දත්ත ඉතින් පටිගත කිරීම් සහ නිරූපණ අධ්යයනයන් විපාකයේදී 5HT හි ධනාත්මක කාර්යභාරයක් පෙන්නුම් කරයි (58). ආවේගශීලී පාලනය සඳහා DRN වෙතින් 5HT තන්තු සම්බන්ධ වේ (59). VTA සහ NAc හි 5HT1a වැඩි කිරීම ආවේගශීලීත්වය පාලනය කළ හැකි වන්දි යාන්ත්රණයක් විය හැකිය. හයිපොතලමස් හි, c ෂධ අධ්යයනවලින් පෙනී යන්නේ 5HT1a ප්රතිග්රාහක උප ප්රභේද සෙරොටොනින් උත්තේජනය මගින් ඇති කරන ආහාර හැසිරීම මැඩපවත්වනු ඇති බවයි (60, 61). හයිපොතලමස් හි ඇති 5HT1a සහ b ප්රතිග්රාහක මගින් සෙරොටොනින් පෝෂණය-මර්දන ක්රියාවලියට විභවයක් ඇති කළ හැකි අතර එම නිසා වන්දි ගෙවීමේ යාන්ත්රණයක් විය හැකිය. නිසි ක්රියාකාරී අත්හදා බැලීම් කිරීමෙන් මෙම උපකල්පන සත්යාපනය කළ යුතුය.
මෙම ජාල වෙනස්වීම් Ncam mRNA ලෙස ප්ලාස්ටික් සලකුණු වෙනස් කිරීම සමඟ සම්බන්ධ වේ. වැඩිහිටි මීයන්ගේ හයිපොතලමස් වලදී, Ncam1 සහ St8sia4 පිටපත් වල වැඩි වීමක් යෝජනා කරන අතර බහු අවයවික අම්ල (PSA) සං aling ා වැඩි කිරීම. PSA යනු සෛල-සෛල අන්තර්ක්රියා මොඩියුලේට් කරන සෛල-මතුපිට ග්ලයිකන් ය. සෛලීය ඇලවුම් ප්රෝටීන වල බහුඅවයවීකරණය මධ්යම ස්නායු පද්ධතියේ විවිධ උපාගමික ප්ලාස්ටික් මත රඳා පවතින ක්රියාවලීන්ට සම්බන්ධ වන අතර උග්ර ධනාත්මක ශක්ති සමතුලිතතාවයේ දී ආහාර පරිපථවල අනුවර්තී උපාගමික ප්ලාස්ටික් සඳහා අවශ්ය බව වාර්තා වී ඇත (33, 62). මීට අමතරව, සෛල අන්තර්ක්රියාකාරිත්වයේ සහ සයිනොප්ටොජෙනොසිස් හි අනෙකුත් නියාමකයින් මෙම හයිපොතලමියම් ප්ලාස්ටික් වලට සම්බන්ධ විය හැකිය.
අවසාන වශයෙන් (රූපය (Figure7), 7), මාතෘ ඩබ්ලිව්ඩී පරිභෝජනය දරුවන්ගේ ආහාර ගැනීමේ හැසිරීම නියාමනය කරන හෝමියොස්ටැටික් හා හෙඩොනික් පරිපථ සංවිධානය කිරීම කෙරෙහි දිගුකාලීන බලපෑමක් ඇති කරයි. තීරණාත්මක කාල වකවානු තුනක් විශ්ලේෂණය කිරීමෙන්, විශේෂිත මොළයේ අණුක අත්සන් සමඟ සහසම්බන්ධිත මේද මනාපයන් සඳහා පැහැදිලි පරිණාමයක් පෙන්වීමට අපට හැකි විය. ළමා කාලය තුළ, මේදය සඳහා ඇති මනාපය ඩීඒ පද්ධතියේ ඉහළ ක්රියාකාරිත්වයක් සමඟ සම්බන්ධ විය හැකිය. නව යොවුන් විය, මේද මනාපයේ ප්රතිලෝමයක් මගින් සංලක්ෂිත වේ, වන්දි ගෙවීමේ යාන්ත්රණයක් යෝජනා කරන ඩීඒ පද්ධති සලකුණු වල අඩු ප්රකාශනය සමඟ සම්බන්ධ විය. දැනුම් දිය යුතු ඉතා සිත්ගන්නා කරුණක් නම්, මෙම ආකෘතියේ දී, කිරි වැරීමෙන් පසු සමබර ආහාර වේලක් මඟින් මේදය සඳහා ඇති ආශාව අඩු කිරීමෙන් නව යොවුන් වියේ මීයන් විනාශකාරී ආහාර පුරුදු වලින් ආරක්ෂා කර ගත හැකිය. වැඩිහිටි වියේදී කණ්ඩායම් දෙකටම මේදය සඳහා ඉහළ මනාපයක් තිබුණද, ඩබ්ලිව් ඩී ෆෙඩ් වේලි වල මීයන් GABA පරිපථවල ගැඹුරු ප්රතිනිර්මාණයක් පෙන්නුම් කළේය. මෙම කල්පවත්නා ප්ලාස්ටික් වල ප්රතිවිපාක මොනවාද? නව යොවුන් වියේදී අතිශයෝක්තියට නංවන ලද obesogenic ආහාර ගැනීම මෙම මොට වූ විපාක ක්රමය නැවත සක්රීය කරයිද? බටහිර රටවල අලුත උපන් හා දරුවන්ගේ පෝෂණ පසු විපරම් වලදී එවැනි ප්රශ්න අදාළ විය හැකිය.
ආචාර ධර්ම ප්රකාශය
දේශීය සත්ව සුභසාධක කමිටුව, යුරෝපා සංගමය (නියෝගය 2010 / 63 / EU), ඉන්ස්ටිටියුට් නැෂනල් ඩි ලා රීචර්ච් ඇග්රොනොමික් (පැරිස්, ප්රංශය) සහ ප්රංශ පශු වෛද්ය දෙපාර්තමේන්තුවේ (ප්රංශ පශු වෛද්ය දෙපාර්තමේන්තුවේ) මාර්ගෝපදේශයන්ට අනුකූලව සියළුම අත්හදා බැලීම් සිදු කරන ලදී.A44276). පර්යේෂණාත්මක ප්රොටෝකෝලය ආයතනික ආචාර ධර්ම කමිටුව විසින් අනුමත කරන ලද අතර APAFIS 8666 යොමුව යටතේ ලියාපදිංචි කර ඇත. ආතතිය අවම කිරීම සඳහා සෑම පූර්වෝපායක්ම ගනු ලැබූ අතර එක් එක් අත්හදා බැලීම් මාලාවේ භාවිතා කරන සතුන් සංඛ්යාව.
කර්තෘ දායකත්වය
ජේපී සහ පීබී අත්හදා බැලීම් කළ අතර සාකච්ඡාවට හා ලිවීමට සහභාගී වූහ. ටී. අත්හදා බැලීම සැලසුම් කිරීම සඳහා එස්එන් දායක වූ අතර සාකච්ඡාවට සහභාගී විය. පීපී අත්හදා බැලීම සැලසුම් කිරීම සඳහා දායක වූ අතර සාකච්ඡාවලට සහභාගී වූ අතර අත් පිටපත ලිවීය. වීපී විසින් අත්හදා බැලීම් සැලසුම් කර සිදු කරන ලදී, දත්ත විශ්ලේෂණය කර අත් පිටපත ලිවීය.
පොලී ගැටුම් ප්රකාශනය
කතුවරුන් ප්රකාශ කර ඇත්තේ, උනන්දුවක් දක්වන විභව ගැටුමක් ලෙස අර්ථ දැක්විය හැකි ඕනෑම වාණිජ හෝ මූල්ය සම්බන්ධතා නොමැතිව සිදු කරන බවයි.
අනුමත කර
අධ්යයනය පුරාම සතුන් රැකබලා ගැනීම සඳහා ගුයිලූම් පූපෝ සහ බ්ලැන්ඩින් කැස්ටෙලානෝ, එම්ආර්එන්ඒ නිස්සාරණය සඳහා ඇන්තනි පග්නිස් සහ ටීඑල්ඩීඒ, ප්ලාස්මා සාම්පල විශ්ලේෂණය සඳහා ඇයගේ උදව් සඳහා ඉසබෙල් ග්රිට් සහ ඇලෙක්සැන්ඩ්රේ බෙනානි සහ මාරි-චැන්ටල් කැනීවෙන්ක් පිළිගැනීමට කතුවරුන් කැමතියි. ඔවුන්ගේ ප්රයෝජනවත් සාකච්ඡාව සහ TLDA නිර්මාණය සඳහා.
පාද සටහන්
අරමුදල්. මෙම පර්යේෂණයට කලාපීය ඩෙස් පේස් ඩි ලා ලොයර් ප්රදාන PARIMAD (VP), LCL පදනම් ප්රදානය (VP සහ PP), සැන්ටේඩිජ් පදනම (VP) සහ INRA Metaprogram DIDIT (SN, VP, PP) සහයෝගය ලබා දී ඇත.
පරිපූරක ද්රව්ය
මෙම ලිපිය සඳහා අතිරේක ද්රව්ය අන්තර්ජාලය හරහා සොයාගත හැකිය http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.
රූපය S1
බෝතලය අඩංගු ඉරිඟු තෙල් වලින් සම්පූර්ණ ශක්තිය ලබා ගැනීම. (ඒ) බටහිර ආහාර (ඩබ්ලිව්ඩී) පෝෂණ වේලි සහ පාලක ආහාර (සීඩී) පෝෂක වේලි වලින් බලු පැටවුන් සඳහා පීඑක්ස්එන්එම්එක්ස් හි එක්ස්එන්එම්එම්එක්ස් සඳහා ඉරිඟු තෙල් බෝතලයේ කැලරි ප්රමාණය. (බී) P24 හි 45 h සඳහා ඉරිඟු තෙල් බෝතලයේ කැලරි ප්රමාණය (බෝතල් පරීක්ෂණයේ තුන්වන දිනය). (C) P24 හි 95 h සඳහා ඉරිඟු තෙල් බෝතලයේ කැලරි ප්රමාණය (බෝතල් පරීක්ෂණයේ තුන්වන දිනය). පැනල් සඳහා (A-C), දත්ත මධ්යන්ය ලෙස ප්රකාශ වේ ± SEM, සංඛ්යානමය වෙනසක් නැත (p > 0.05) සෑම වයස් කාණ්ඩයකම මෑන් සහ විට්නි පරාමිතික නොවන පරීක්ෂණයෙන් පසුව නිරීක්ෂණය කරන ලදී. (D) ඉරිඟු තෙල් බෝතලයෙන් ගන්නා කැලරි ප්රමාණය ප්රතිශතයක් ලෙස ඩබ්ලිව්.ඩී පැටවුන් සහ සීඩී පැටවුන් තුළ P24 හි 25 h සඳහා වන මුළු කැලරි ප්රමාණය (ඉරිඟු තෙල් බෝතලය + සම්මත චව් ආහාර) සමඟ සසඳයි. (ඊ) බඩ ඉරිඟු තෙල් බෝතලයේ ඇති කැලරි ප්රමාණය ප්රතිශතයක් ලෙස ඩබ්ලිව්.ඩී පැටවුන් සහ සීඩී පැටවුන් තුළ P24 හි (බෝතල් පරීක්ෂණයේ තුන්වන දිනය) 45 h සඳහා වන මුළු කැලරි ප්රමාණය (ඉරිඟු තෙල් බෝතලය + සම්මත චව් ආහාර) සමඟ සසඳයි. (F) බඩ ඉරිඟු තෙල් බෝතලයෙන් ගන්නා කැලරි ප්රතිශතය, ඩබ්ලිව් ඩී පැටවුන් සහ සීඩී පැටවුන් තුළ P24 (බෝතල් පරීක්ෂණයේ තුන්වන දිනය) හි 95 h සඳහා වන මුළු කැලරි ප්රමාණය (ඉරිඟු තෙල් බෝතලය + සම්මත චව් ආහාර) සමඟ සැසඳේ. පැනල් සඳහා (ද), මුළු කැලරි ප්රමාණයෙන් දත්ත ප්රකාශ වන්නේ සංඛ්යානමය වෙනසක් නැත (p > 0.05) සෑම වයස් කාණ්ඩයකම යේට්ස්ගේ නිවැරදි කිරීම සමඟ චි-චතුරස්රයට පසුව නිරීක්ෂණය කරන ලදී.
රූපය S2
න්යෂ්ටික සමුච්චය (NAc) සහ ventral tegmental area (VTA) හි TH ප්රතිශක්තිකරණයේ විවිධ කාල ලක්ෂ්ය තුනක නියෝජිත ඡායා රූප සටහන්. (ඒ) VTA මට්ටමින් TH / NeuN ප්රතිශක්තීකරණයේ ඡායා රූප සටහන, බ්රෙග්මා වෙතින් −5.30 මි.මී. රතු ලේබල් කිරීම නියුඑන් සඳහා වන අතර කොළ පැහැති එකක් ටීඑච් සඳහා වේ. සුදු ඊතලය තෙවන ස්නායුවේ පිටවීම පෙන්නුම් කරයි. (බී) NAc මට්ටමින් TH ප්රතිශක්තීකරණයේ ඡායා රූප සටහන, බ්රෙග්මා වෙතින් + 1.70 මි.මී. හරිත ලේබල් කිරීම TH සඳහා වේ. සුදු ඊතලය ඉදිරිපස කොමිස් පෙන්වයි.
වගුව S1
ටාක්මන් අඩු dens නත්ව අරාව සහිත ජාන ලැයිස්තුවක් අනුරූප ජීවන තාක්ෂණයන් සමඟ නව නිපැයුම් කේත.
වගුව S2
ඩොපමයින් පථයේ පිටපත් ප්රකාශනය පිළිබඳ ප්රකාශිත දත්තවල සාරාංශය. රතු අක්ෂර ළමා කාලයටත්, නිල් පාට නව යොවුන් වියටත්, කළු අය වැඩිහිටියන්ටත් අනුරූප වේ. ; ඉහළ කැලරි සහිත ආහාර (ජන්ක් ෆුඩ්, ඩබ්ලිව්ඩී හෝ එච්එෆ්ඩී) පෝෂණය කළ වේලි වලින් පැටවුන්ගේ අඩු පිටපත් ප්රකාශනයකට අනුරූප වේ.
ආශ්රිත