DeltaFosB в ядрената обвивка е критичен за засилване на ефектите от сексуалната награда. (2010)

КОМЕНТАРИ: Delta FosB е маркер за всички зависимости, както поведенчески, така и химически. Тъй като тази молекула се увеличава във веригата за възнаграждение, поведението на пристрастяването също се увеличава. Това е една от молекулите, участващи в невропластичните промени. Този експеримент показва, че се увеличава със сексуалния опит, подобно на начина, по който става при наркоманиите. В експеримента те използваха генно инженерство, за да повишат нивата му отвъд „нормалното“. Това доведе до засилено улесняване на сексуалната активност. Смятаме, че това се случва с пристрастяването към порно.

ПЪЛНО ИЗСЛЕДВАНЕ

Питчери KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Гени Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Август 16.

Катедра по анатомия и клетъчна биология, Школа по медицина и стоматология Шулих, Университет на Западна Онтарио, Лондон, Онтарио, Канада.

Резюме

Сексуалното поведение при мъжки плъхове е възнаграждаващо и укрепващо. Въпреки това, малко се знае за специфичните клетъчни и молекулярни механизми, които медиират сексуалното възнаграждение или засилващите ефекти на наградата за последващо изразяване на сексуално поведение. Това изследване тества хипотезата, че ΔFosB, стабилно изразената пресечена форма на FosB, играе решаваща роля в укрепването на сексуалното поведение и предизвиканото от опита улесняване на сексуалната мотивация и представяне.

Доказано е, че сексуалният опит причинява натрупване на ΔFosB в няколко области на лимбичен мозък, включително nucleus accumbens (NAc), медиален префронтален кортекс, вентрален тегментален участък и опашен путамен, но не и медиалното преоптично ядро.

След това, индукция на c-Fos, низходяща (репресирана) мишена на ΔFosB, беше измерена при сексуално опитни и наивни животни. Броят на индуцираните от чифтосването c-Fos-имунореактивни клетки е значително намален при сексуално опитни животни в сравнение с сексуално наивни контроли.

Накрая, нивата на ΔFosB и неговата активност в NAc бяха манипулирани с помощта на вирусно-медииран трансфер на ген, за да се изследва неговата потенциална роля в посредничеството на сексуалния опит и предизвиканото от опита улесняване на сексуалното представяне. Животните с прекомерна експресия на ΔFosB показват повишено улесняване на сексуалната активност със сексуален опит по отношение на контролите. Обратно, експресията на ΔJunD, доминиращ негативен свързващ партньор на ΔFosB, отслабва стимулираното от сексуалния опит улесняване на сексуалната активност и забавеното дългосрочно поддържане на фасилитацията в сравнение със зелените флуоресцентни протеини и ΔFosB свръхекспресиращи групи.

Заедно тези констатации подкрепят критичната роля на ΔFosB в NAc за засилване на ефектите от сексуалното поведение и стимулираното сексуално представяне, предизвикано от сексуален опит.

ВЪВЕДЕНИЕ

Сексуалното поведение е силно възнаграждаващо и укрепващо за мъжки гризачи (Coolen et al. 2004; Pfaus и др. 2001). Освен това, сексуалният опит променя последващото сексуално поведение и награда (Тенк и др. 2009). С повтарящ се опит за чифтосване, сексуалното поведение се улеснява или „подсилва”, което се потвърждава от намалените латентности за иницииране на чифтосване и улесняване на сексуалното представяне (Балфур и др. 2004; Pfaus и др. 2001). Основните клетъчни и молекулярни механизми за сексуално възнаграждение и подсилване обаче са слабо разбрани. Доказано е, че сексуалното поведение и обусловените сигнали, които предсказват свързване, временно индуцират експресия на непосредствено ранен ген c-fos в мезолимбичната система на мъжки плъхове (Балфур и др. 2004; Pfaus и др. 2001). Освен това, наскоро беше доказано, че сексуалният опит предизвиква дълготрайна невропластичност в мезолимбичната система на мъжки плъх (Frohmader и др. 2009; Кани и др. 2010). В допълнение, при мъжки плъхове е доказано, че сексуалният опит индуцира ΔFosB, a Член на семейството на Fos, в nucleus accumbens (NAc) (Wallace и др. 2008). ΔFosB, пресечен вариант на FosB, е уникален член на семейството на Fos поради по-голямата си стабилност (Carle и др. 2007; Ulery-Рейнолдс и др. 2008; Ulery и др. 2006) и играе роля за повишаване на мотивацията и възнаграждението за злоупотреба с наркотици и дългосрочната невропластична медиирана зависимост (Nestler и др. 2001). ΔFosB образува хетеромерен комплекс на транскрипционен фактор (активатор протеин-1 (AP-1)) с Jun протеини, за предпочитане JunD (Чен и др. 1995; Hiroi и др. 1998). Чрез индуцируема свръхекспресия на ΔFosB, главно ограничена до стриатума при използване на би-трансгенни мишки, се създава подобен на лекарство фенотип, въпреки липсата на предишно излагане на лекарството (McClung и др. 2004). Този поведенчески фенотип включва чувствителен локомоторен отговор към кокаин (Kelz и др. 1999), по-голямо предпочитание към кокаин (Kelz и др. 1999) и морфин (Захариу и др. 2006) и повишено самоуправление на кокаина (Колби и др. 2003).

Подобно на лекарственото възнаграждение, ΔFosB се регулира от естественото благоприятно поведение и медиира изразяването на тези поведения. Свръхекспресията на ΔFosB в NAc при използване на модели на гризачи увеличава доброволното движение на колелото (Werme и др. 2002), инструментална реакция за храна (Olausson и др. 2006), прием на захароза (Wallace и др. 2008), и улеснява мъжа (Wallace и др. 2008) и жена (Bradley и др. 2005) сексуално поведение. По този начин, ΔFosB може да участва в посредничеството на ефектите от естествения опит. Tнастоящото проучване разширява предишните проучвания, като специално изследва ролята на ΔFosB в NAc в дългосрочните резултати от сексуалния опит при последващо поведение на чифтосване и неврална активация в мезолимбичната система.

  • Първо, беше установено кои участъци от мозъка участват в схемата за възнаграждение и сексуалното поведение, изразяващи ΔFosB, предизвикано от сексуален опит.
  • На следващо място, ефектът на индуцирания от пола опит ΔFosB върху индуцираната от чифтосване експресия на c-Fos, низходяща цел, репресирана от ΔFosB (Renthal и др. 2008), е изследвано.
  • Накрая, ефектът от манипулиране на ΔFosB активността в NAc (свръхекспресия на ген и експресия на доминиращ партньор с отрицателно свързване) върху сексуалното поведение и предизвиканото от опита улесняване на сексуалната мотивация и производителността беше определено с използване на технология за доставяне на вирусен вектор.
Отиди на:

МЕТОДИ

Животни

Възрастни мъжки плъхове Sprague Dawley (200-225 грама) са получени от Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Животните се настаняват в плексигласови клетки с тунелна тръба в същите полови двойки по време на експерименти. Стаята на колонията е регулирана по температура и се поддържа на цикъл светъл тъмен 12 / 12 hr с налични храни и вода ad libitum освен по време на поведенчески тестове. Жени на стимулите (210-220 грама) за сеанси на чифтосване получават подкожен имплант, съдържащ 5% естрадиол бензоат и 95% холестерол след двустранна овариектомия при дълбока анестезия (0.35g кетамин / 0.052g ксилазин). Сексуалната възприемчивост се индуцира чрез прилагане на 500ug прогестерон в 0.1 mL сусамово масло приблизително 4 часа преди тестване. Всички процедури бяха одобрени от комитетите за грижа и използване на животните на Университета на Западна Онтарио и бяха съобразени с насоките на CCAC, включващи гръбначни животни в изследванията.

Сексуално поведение

Срещите за чифтосване се случват по време на ранната тъмна фаза (между 2 - 6 часа след началото на тъмния период) при слабо червено осветление. Преди началото на експеримента, животните бяха разделени на случаен принцип по групи. По време на брачните сесии на мъжки плъхове беше позволено да се копулират до еякулация или 1 час, а параметрите за сексуално поведение бяха записани, включително: латентност на монтиране (ML; време от въвеждането на женската до първото монтиране), латентност на интрамесия (IL; време от въвеждането на жената до първото монтиране с вагинално проникване), латентност на еякулацията (EL; време от първата интоксикация до еякулация), интервал след еякулация (PEI; време от еякулация до първото последващо вливане), брой планини (M; тазово тласкане без вагинално) проникване), брой интромусии (IM, монтиране, включително вагинално проникване) и ефективност на копулация (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). В анализите за животни, които не са показали еякулация, не са включени номера на планини и интродукции. Латентността на планината и интродукцията са параметри, които показват сексуална мотивация, докато латентността на еякулацията, броят на планините и копулационната ефективност отразяват сексуалната активност (Хъл 2002).

Експеримент 1: Изразяване на ΔFosB

На сексуално неактивни мъжки плъхове се оставя да се чифтосват в чисти тестови клетки (60 × 45 × 50 cm) за 5 последователни, ежедневни сесии на чифтосване или са останали сексуално наивни. Допълнителна таблица 1 очертава поведенческата парадигма за експерименталните групи: неидеен пол (NNS; n = 5), неактивен пол (NS; n = 5), без полова връзка (ENS; n = 5) и опитен пол (ES; n = 4). NS и ES животни бяха пожертвани с 1 час след еякулацията в последния ден на чифтосване, за да се изследва индуцираната от чифтосването c-Fos експресия. NNS животни се умъртвяват едновременно с ENS животни 24 часа след последната сесия на чифтосване, за да се изследва индуцирания от половия опит ΔFosB. Половите опитни групи бяха подбрани за сексуално поведение преди следващо изследване. Не са открити значителни разлики между групите за каквито и да било поведенчески мерки в рамките на подходящата сесия на чифтосване, както и облекчаването на сексуалното поведение, предизвикано от половия опит, от двете групи (Допълнителна таблица 2). Контролът включва сексуално наивни мъже, обработвани едновременно с чифтосване на животни, осигуряващи излагане на женски миризми и гласове без пряк женски контакт.

За жертвоприношение, животните се анестезират дълбоко с натриев пентобарбитал (270mg / kg; ip) и се перфузират интракардиално с 50 mL 0.9% физиологичен разтвор, последвано от 500 mL 4% параформалдехид в 0.1 М фосфатен буфер (РВ). Мозъците се отстраняват и след фиксиране за 1 h при стайна температура в същия фиксатор, след това се потапят в 20% захароза и 0.01% натриев азид в 0.1 М PB и се съхраняват при 4 ° С. Коронарните срезове (35 цт) бяха отрязани със замразяващ микротом (H400R, Micron, Germany), събрани в четири паралелни серии в разтвор на криопротектор (30% захароза и 30% етилен гликол в 0.1 М PB) и съхранявани при -20 ° C. Свободно плаващи участъци се промиват обилно с 0.1 М фосфатно-буфериран физиологичен разтвор (PBS; рН 7.3-7.4) между инкубациите. Секциите бяха изложени на 1% Н2O2 за 10 min при стайна температура за унищожаване на ендогенни пероксидази, след това блокиран в PBS + инкубационен разтвор, който е PBS, съдържащ 0.1% говежди серумен албумин (каталожен артикул 005-000-121; Лаборатория Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) и 0.4% Triton -100 (каталожен артикул BP151-500; Sigma-Aldrich) за 1 h. След това срезовете се инкубират в продължение на една нощ при 4 ° С в пан-FosB заешко поликлонално антитяло (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, СА, USA). Пан-FosB антитялото се повдига срещу вътрешен регион, споделен от FosB и ΔFosB. ΔFosB-IR клетките са специфично ΔFosB-положителни, тъй като по време след пост-стимулацията (24 часа) всички FosB, индуцирани от стимул, се разграждат (Perrotti и др. 2004; Perrotti и др. 2008). В допълнение, в този експеримент, животните, които се чифтосват в последния ден (NS, ES), се умъртвяват с 1 h след чифтосване, така че преди FosB експресията. Western blot анализът потвърждава откриването на ΔFosB при приблизително 37 kD. След инкубация на първичното антитяло, срезове се инкубират за 1 h в биотин-конюгиран кози анти-заешки IgG (1: 500 в PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, СА, САЩ) и след това 1 h в авидин-биотин-хосерид пероксидаза (ABC елит 1: 1K в PBS, Vector Laboratories, Burlingame, СА, САЩ). След това инкубационните секции бяха обработени по един от следните начини:

1. Етикетиране на единична пероксидаза

Секции от NNS и ENS животни бяха използвани за мозъчен анализ на натрупване на ΔFosB, предизвикано от сексуален опит. След инкубация с АВС, пероксидазният комплекс се визуализира след третиране за 10 минути до хромогенен разтвор, съдържащ 0.02% 3,3'-диаминобензидин тетрахидрохлорид (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), усилен с 0.02% никел сулфат в 0.1 M PB с водороден пероксид (0.015%). Срезовете бяха измити старателно в 0.1 М PB за прекратяване на реакцията и монтирани върху кодирани Superfrost плюс стъклени слайдове (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) с 0.3% желатин в ddH20. След дехидратация всички предметни стъкла се покриват с DPX (дибутил фталат ксилен).

2. Двойна имунофлуоресценция

Секции от всичките четири експериментални групи, съдържащи NAc и mPFC, бяха използвани за анализ на ΔFosB и c-Fos. След инкубацията с ABC, срезовете се инкубират за 10 min с биотинилиран тирамид (BT; 1: 250 в PBS + 0.003% H2O2 Комплект за усилване на сигнала на тирамида, NEN Life Sciences, Boston, MA) и за 30 min с Alexa 488-конюгиран стрепавидин (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). След това секциите се инкубират в продължение на една нощ с заешко поликлонално антитяло, специфично разпознаващо c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, СА), последвано от 30 min инкубация с козе анти-заешко Cy3-конюгирано вторично антитяло. (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). След оцветяването, срезовете бяха измити старателно в 0.1 M PB, монтирани върху кодирани стъклени предметни стъкла с 0.3% желатин в ddH20 и се покрива с водна монтажна среда (Gelvatol), съдържаща анти-избледняващия агент 1,4-диазабицикло (2,2) октан (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, МО). Имунохистохимичните контроли включват пропускане на едната или и двете първични антитела, което води до отсъствие на маркиране в подходяща дължина на вълната.

Анализ на данни

Мозъчен анализ на ΔFosB

Двама експериментатори, слепи за лечение, извършиха сканирането на кодираните слайдове. ΔFosB-имунореактивни (-IR) клетки в мозъка са полу-количествено анализирани, използвайки скала за представяне на броя на ΔFosB-позитивните клетки, както е посочено в Таблица 1, В допълнение, на базата на полуколичествени резултати, броят на ΔFosB-IR клетките беше преброено, използвайки стандартни области на анализ в мозъчни области, замесени в награда и сексуално поведение, използвайки тръба за чертеж на камера lucida, прикрепена към Leica DMRD микроскоп (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Германия): NAc (ядро (C) и черупка (S); 400 × 600µm), анализирани на три рострално-каудални нива (Балфур и др. 2004); вентрална тегментална област (VTA; 1000 × 800µm), анализирана на три рострално-каудални нива (Балфур и др. 2004) и VTA опашка (Perrotti и др. 2005); префронтален кортекс (предна част на cinglulate (ACA); предварителен кортекс (PL); инфлибимска кора (IL); 600 × 800µm всеки); опашен путамен (CP; 800 × 800µm); и медиално преоптично ядро ​​(MPN; 400 × 600 µm) (Допълнителни фигури 1 – 3). Бяха преброени две секции на подрегион и осреднени на животно за изчисляване на средната група. Сексуално наивни и опитни средни стойности на групата на ΔFosB-IR клетките бяха сравнени за всяка субрегион, използвайки неспарени t-тестове.

Таблица 1    

Обобщение на експресията на ΔFosB в сексуално наивни и опитни животни
Анализ на ΔFosB и c-Fos

Изображенията са заснети с помощта на охладена CCD камера (Microfire, Optronics), прикрепена към Leica микроскоп (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Германия) и Neurolucida софтуер (MicroBrightfield Inc) с фиксирани настройки на камерата за всички обекти (използвайки 10x цели). Брой клетки, експресиращи c-Fos-IR или ΔFosB-IR в стандартни области на анализ в NAc ядро ​​и черупка (400 × 600µm всеки; Допълнителна фигура 1и ACA на mPFC (600 × 800µm; Допълнителна фигура 3) се преброяват ръчно от наблюдател, заслепен за експерименталните групи, в 2 секции на животно, използвайки софтуера Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) и усреднен за животно. Груповите средни стойности на c-Fos или ΔFosB клетки бяха сравнени с помощта на двупосочна ANOVA (Фактори: сексуален опит и сексуална активност) и Fisher LSD за post hoc сравнения при ниво на значимост на 0.05.

Експеримент 2: манипулиране на израза на ΔFosB

Вирусен векторно медииран трансфер на гени

Полово наивни мъжки плъхове Sprague Dawley се разделят на случаен принцип в групи преди стереотаксичната хирургия. Всички животни получават двустранни микроинжекции на рекомбинантни аденоасоциирани вирусни (rAAV) вектори, кодиращи GFP (контрола; n = 12), див тип ΔFosB (n = 11) или доминантно-отрицателен свързващ партньор на ΔFosB, наречен ΔJunD (n = 9) в NAc. ΔJunD намалява транскрипцията, медиирана от ΔFosB чрез конкурентно хетеродимеризиране с ΔFosB преди свързване на региона AP-1 в генни промотори (Winstanley и др. 2007). Вирусният титър се определя чрез qPCR и се оценява ин виво преди началото на изследването. Titer е 1 – 2 × 1011 инфекциозни частици за mL. rAAV векторите бяха инжектирани в обем от 1.5 uL / ​​страна за 7 минути (координати: AP + 1.5, ML +/- 1.2 от Bregma; DV - 7.6 от повърхността на черепа съгласно Paxinos и Watson, 1998) с помощта на Hamilton спринцовка (5µL Harvard Apparatus, Holliston, MA, САЩ). Векторите не произвеждат никаква токсичност по-голяма от контролните \ tWinstanley et al., 2007; за подробности относно приготвянето на AAV, вж Hommel et al., 2003). Поведенчески експерименти започнаха 3 седмици след векторни инжекции, позволяващи оптимална и стабилна вирусна инфекция (Wallace и др. 2008). Експресията на трансгени в миши видове достига пикове през 10 дни и остава повишена за най-малко 6 месеца (Winstanley и др. 2007). В края на експеримента, животните бяха транскардиално перфузирани и NAc секциите бяха имуно-обработени за GFP (1: 20K; заек анти-GFP антитяло; Молекулни проби), използвайки ABC-пероксидаза-DAB реакция (както е описано по-горе) до хистологично потвърждаване на местата за инжектиране чрез GFP като маркер (Допълнителна фигура 4). ΔFosB и ΔJunD векторите също така съдържат сегмент, експресиращ GFP, разделен от вътрешно място на въвеждане на рибозома, което позволява проверка на мястото на инжектиране чрез визуализация на GFP при всички животни. В статистическите анализи бяха включени само животни с места на инжектиране и разпространение на вирус, ограничен до NAc. Разпространението на вируса обикновено се ограничаваше до част от NAc и не се разпространяваше рострално-каудално в цялото ядро. Нещо повече, разпространението на вируса изглеждаше най-вече ограничено до черупката или ядрото. Въпреки това, вариациите на местата на инжектиране и разпространението в NAc не оказват влияние върху поведението. Накрая, GFP инжекциите не повлияват сексуалното поведение или предизвиканото от опит улесняване на сексуалното поведение в сравнение с нехирургичните животни от предишни проучвания (Балфур и др. 2004).

Сексуално поведение

Три седмици след доставянето на вирусен вектор, животни, свързани с една еякулация (или за 1 час) за 4 последователни, ежедневни сесии на чифтосване, за да получат сексуален опит (сесии с опит) и впоследствие са тествани за дългосрочно изразяване на опит, предизвикано от улесняване на сексуалното поведение 1 и 2 седмици (тестови сесии 1 и 2) след последната сесия за опит. Параметрите на сексуално поведение бяха записани по време на всички сесии на чифтосване, както е описано по-горе. Статистическите разлики за всички параметри по време на всяка сесия на чифтосване се сравняват в рамките на групата и между тях, като се използват двупосочни повторни измервания ANOVAs (фактори: сесия на лечение и чифтосване) или еднопосочни ANOVAs (латентност на еякулацията, брой на монтиране и интродукции; фактор: лечение или чифтосване). сесия), последвани от тестове на Fisher LSD или Newman-Keuls за post hoc сравнения при ниво на значимост на 0.05. По-конкретно, улесняващите ефекти на сексуалния опит върху параметрите на чифтосване са сравнени между опитните сесии 1 (наивни) и опитните сесии 2, 3, или 4 всеки, както и между експерименталните групи в рамките на всяка сесия на опит. Освен това, за да се анализират ефектите от лечението (вектор) върху дългосрочното улесняване на сексуалното поведение, параметрите на чифтосване се сравняват между опитната сесия 4 и 1 на тестовата сесия и 2 в рамките на всяка третирана група и се сравняват между експерименталните групи в рамките на всяка тестова сесия.

Отиди на:

РЕЗУЛТАТИ

Сексуалният опит причинява натрупване на ΔFosB

Първоначално беше проведено полуколичествено изследване на натрупването на ΔFosB в мозъка при мъже с полова зрялост в сравнение с сексуално наивни контроли. Обобщение на общите констатации е предоставено в Таблица 1, ΔFosB-IR анализът беше продължен чрез определяне на броя на ΔFosB-IR клетки в няколко лимбично-свързани мозъчни участъци, използвайки стандартни области на анализ. Фигура 1 показва представителни изображения на DAB-Ni, оцветяващи NAc на сексуално наивни и опитни животни. Значителна ΔFosB регулация е намерена в подрегионите на mPFC (Фигура 2A), NAc ядрото и черупката (2B), опашната путамена (2B) и VTA (2C). В NAc съществуват значителни различия на всички рострално-каудални нива в ядрото на NAc и черупката, а данните са показани в Фигура 2 е средната стойност за всички ростро-каудални нива. За разлика от това, не е наблюдавано значително увеличаване на ΔFosB-IR в хипоталамусното медиално преоптично ядро ​​(NNS: Avg 1.8 +/− 0.26; ENS: Avg 6.0 +/− 1.86).

Фигура 1    

 

Представителни изображения, показващи ΔFosB-IR клетки (черни) в NAc на несъществуващ пол (А) и не изпитват никакви полови (В) групи. aco: anterior commissure Scale bar показва 100 µm.
Фигура 2     

Брой на ΔFosB-IR клетките в: А. инфлибимни (IL), предварителни (PL) и предни зъбни корти (ACA) субрегиони на медиалния префронтален кортекс; Б. Ядрото на ядрото и черупката, и опашният путамен (СР); C. Рострална, средна, опашна и опашна ...

Сексуалният опит отслабва индуцираното от чифтосването c-Fos

Ефектът от сексуалния опит върху ΔFosB нива в NAc се потвърждава с помощта на флуоресцентно оцветяване. Освен това бяха анализирани ефектите на сексуалния опит върху експресията на c-Fos. Фигура 3 демонстрира представителни изображения на ΔFosB- (зелен) и c-Fos (червен) -IR клетки във всички експериментални групи (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). Сексуалният опит значително е увеличил експресията на ΔFosB в ядрото на NAc (Фигура 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) и черупка (Фигура 4C: F1,15 = 9.3; р = 0.008). За разлика от това, чифтосването на 1 час преди перфузията не оказва влияние върху експресията на ΔFosB (Фигура 4A, С) и не е установено взаимодействие между сексуалния опит и чифтосването непосредствено преди перфузията. Имаше общ ефект на чифтосване преди перфузията върху c-Fos експресията и в NAc ядрото (Фигура 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) и черупка (Фигура 4D: F1,15 = 39.4; р <0.001). Освен това в сърцевината на NAc е открит цялостен ефект от сексуалното преживяване (Фигура 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) и черупка (Фигура 4D: F1,15 = 1.7; р = 0.211) и взаимодействие между сексуалния опит и чифтосване преди перфузията се открива в NAc ядрото (F)1,15 = 6.5; p = 0.022), с тенденция в черупката (F1,15 = 1.7; р = 0.211; F1,15 = 3.4; р = 0.084). Post hoc анализите показаха индуцирана с чифтосване експресия на c-Fos в ядрото и черупката на сексуално наивни мъже (Фигура 4B, D). Въпреки това, при сексуално опитни мъже, c-Fos не е значително увеличен в NAc ядрото (Фигура 4B) и значително намалени в черупката (Фигура 4D). По този начин, сексуалният опит предизвиква намаляване на индуцираната от чифтосване експресия на c-Fos. P-стойностите за специфични сравнения по двойки са в легендите на фигурите.

Фигура 3     

Представителни изображения, показващи ΔFosB (зелено) и c-Fos (червено) в NAc за всяка експериментална група. Лентата за мащабиране показва 100 µm.
Фигура 4     

Индуциран от половия опит ΔFosB и индуциран от чифтосване c-Fos. Имунореактивни клетки от ΔFosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) или c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) за всяка група: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) или ES (n = 4). Данните са изразени ...

Ефектът от сексуалния опит върху нивата на c-Fos, предизвикани от чифтосване, не се ограничава до NAc. Подобно затихване на експресията на c-Fos се наблюдава в АСА при сексуално опитни животни в сравнение със сексуално наивни контроли. Сексуалният опит има значителен ефект върху експресията на ΔFosB в ACA (Фигура 4E: F1,15 = 154.2; р <0.001). Чифтосването преди перфузия няма ефект върху експресията на ΔFosB (Фигура 4C), но значително повиши c-Fos (Фигура 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) в ACA. Освен това, индуцираната от чифтосване експресия на c-Fos в ACA е значително намалена от сексуалния опит (Фигура 4F: F1,15 = 15.8; р = 0.001). Беше открито двупосочно взаимодействие между сексуалния опит и чифтосването преди перфузията за експресията на c-Fos (Фигура 4F: F1,15 = 15.1; р <0.001). P-стойностите за конкретни сравнения по двойки са във фигурите на легендите. И накрая, не се наблюдава значително намаляване на индуцираната от чифтосване експресия на c-Fos в медиалното преоптично ядро ​​(NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), област, в която опитът на чифтосване не е причинил значително увеличаване на експресията на ΔFosB, което показва, че индуцираната от чифтосване експресия на c-Fos не е била засегната във всички мозъчни области.

ΔFosB в NAc медиира усилването на сексуалното поведение

За изследване на потенциалния молекулен механизъм за засилване на сексуалното поведение, както е доказано чрез предизвикано от опита улесняване на сексуалното поведение, са определени ефектите от локалната манипулация на ΔFosB нивата и неговата транскрипционна активност. Сексуалното преживяване по време на четирите последователни сесии имаше значителен ефект върху латентността на монтирането (Фигура 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), латентност на входа (Фигура 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) и латентност на еякулацията (Фигура 5CGFP, F11,45 = 3.8; р = 0.006). Контролните животни от GFP показват очакваното улеснено от опита усещане за сексуално поведение и показват значително по-ниски латентности до първото монтиране, първото вливане и еякулацията по време на сеанса на опит 4 в сравнение с опитния сеанс 1 (Фигура 5A – C; вижте фигурата за р-стойностите). Това предизвикано от опита улесняване на сексуалното поведение е наблюдавано и в групата на ΔFosB за латентност на планината и интромията, но не е установена значителна разлика в латентността на еякулацията (Фигура 5A – C). За разлика от това, животните ΔJunD показват забавено улеснение; въпреки че латентността за монтиране, интрамусии и еякулации се е понижила с повтарящи се сесии на съчетаване, нито един от тези параметри не е достигнал статистическа значимост, когато се сравнява между сесиите с опит 1 и 4 (Фигура 5A – C). Между сравненията на групите за всяка сесия показват, че ΔJunD има значително по-дълги латентности за монтиране, интромит и еякулация по време на опитни сесии в сравнение с ΔFosB и GFP (Фигура 5A – C). В допълнение, както сексуалният опит, така и лечението имаха значително влияние върху ефективността на копулацията (Фигура 5F: сексуален опит, F1,12 = 22.5; р <0.001; лечение, F1,12 = 3.3; р = 0.049). Мъжете на ΔFosB са имали повишена ефективност на копулацията по време на сесия 4 в сравнение с опита 1 (Фигура 5F). В допълнение, животните ΔFosB имат значително по-малко опори преди еякулацията по време на опита 4, в сравнение с опитния сеанс 1 (Фигура 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004), и че мъжките ΔJunD са имали значително по-високи стойности преди еякулацията, като по този начин значително намаляват ефективността на копулацията, в сравнение с всяка от другите две групи (Фигура 5D и F). По този начин, GFP и ΔFosB животните показват предизвикано от опита улесняване на инициирането на сексуално поведение и сексуална активност, докато ΔJunD животните не са.

Фигура 5     

Сексуалното поведение на GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) и ΔJunD (n = 9) животни: латентност на монтиране (А), латентност на интровизията (В), латентност на еякулацията (С), брой планини (D), брой интромусии (E) и ефективност на копулацията (F). Данните са изразени ...

За да се тества хипотезата, че експресията на ΔFosB е критична за дългосрочно изразяване на предизвикано от опита улесняване на сексуалното поведение, животните са тествани 1 седмица (1 тест сесия) и 2 седмици (тест сесия 2) след последната сесия опит. Наистина, улеснено сексуално поведение се поддържа и в двете групи GFP и ΔFosB, тъй като нито един от поведенческите параметри не се различава между тестовите сесии 1 или 2 и крайната сесия 4, в рамките на GFP и ΔFosB групите (Фигура 5A – C; с изключение на латентността на еякулацията и ефективността на копулацията в тестова сесия 1 за ΔFosB животни). Значителни разлики между ΔJunD животни и GFP или ΔFosB групи бяха открити в двете тестови сесии за всички параметри на сексуалното поведение (Фигура 5A – F). Нямаше открити различия между или в рамките на групите при сравняване на броя на интродукции, PEI, или проценти от животни, които еякулират (100% от мъжете във всички групи, еякулирани по време на последните четири сесии на чифтосване).

Отиди на:

ДИСКУСИЯ

Настоящото изследване показа, че сексуалният опит причинява натрупване на ΔFosB в няколко лимбично-свързани мозъчни области, включително NAc ядрото и черупката, mPFC, VTA и опашната путамена. В допълнение, сексуалният опит атенюира индуцираната от чифтосване експресия на c-Fos в NAc и АСА. И накрая, беше показано, че ΔFosB в NAc е критичен при посредничеството за улесняване на чифтосването по време на придобиването на сексуален опит и дългосрочното изразяване на предизвикано от опита улесняване на сексуалното поведение.. По-специално, намаляването на ΔFosB-медиирана транскрипция отслабва предизвиканото от опита улесняване на сексуалната мотивация и представяне, докато свръхекспресията на ΔFosB в NAc предизвика засилено улесняване на сексуалното поведение по отношение на повишената сексуална активност с по-малко опит. Взети заедно, настоящите открития подкрепят хипотезата, че ΔFosB е критичен молекулен медиатор за дългосрочната невронна и поведенческа пластичност, предизвикана от сексуалния опит.

Настоящите констатации разширяват предходни проучвания, показващи индуциран от половия опит ΔFosB в NAc при мъжки плъхове (Wallace и др. 2008) и женски хамстери (Hedges и др. 2009). Wallace et al. (2008) показа, че rAAV-ΔFosB свръхекспресия в NAc засилено сексуално поведение при сексуално наивни животни по време на първата сесия на чифтосване, \ t както е видно от по-малко интромусии до еякулация и по-кратки пост-еякулаторни интервали, но не са имали ефект при сексуално опитни мъже (Wallace и др. 2008).

За разлика от това, настоящото проучване не показва никакви ефекти на свръхекспресия на ΔFosB при мъже, които не са били полово нелекувани по време на първия тест, а по-скоро по време на и след придобиването на сексуален опит. ΔFosB свръх-експресори демонстрират повишена сексуална ефективност (повишена ефективност на копулацията) в сравнение с GFP животни.

В допълнение, настоящото изследване изпробва ролята на ΔFosB чрез блокиране на ΔFosB-медиирана транскрипция, използвайки вирусен вектор, експресиращ ΔJunD. Предотвратяването на индуцираното от опита увеличение на ΔFosB експресията инхибира предизвиканото от опита улесняване на сексуалната мотивация (повишена латентност при монтиране и интродукция), както и сексуално представяне (повишена латентност на еякулацията и брой на монтиране) и последващо дългосрочно изразяване на улеснено сексуално поведение.

Следователно, тези данни са първите, които показват задължителна роля на ΔFosB в придобиването на предизвикано от опита улесняване на сексуалното поведение. Освен това, тези данни показват, че ΔFosB също е критично ангажиран в дългосрочното изразяване на улеснено поведение, предизвикано от опита. Предлагаме, че това дългосрочно изразяване на улеснено поведение представлява форма на памет за естественото възнаграждение, следователно ΔFosB в NAc е посредник на паметта на наградата. Сексуалният опит също увеличава нивата на ΔFosB в VTA и mPFC, области, включени в наградата и паметта (Балфур и др. 2004; Филипс и др. 2008). Необходими са бъдещи проучвания, за да се изясни потенциалното значение на ΔFosB-регулирането в тези области за запаметяване.

Експресията на ΔFosB е много стабилна, така че има голям потенциал като молекулен медиатор на персистиращи адаптации на мозъка след хронични смущения (Nestler и др. 2001). Показано е, че ΔFosB постепенно увеличава NAc при многократни инжекции с кокаин и продължава до няколко седмици (Надявам се и др. 1992; Надявам се и др. 1994). Тези промени в експресията на NAc ΔFosB се свързват със сенсибилизиране и пристрастяване към лекарството (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung и др. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler и др. 2001; Захариу и др. 2006). За разлика от това, ролята на BFosB в посредничеството на естественото възнаграждение е недостатъчно. Появиха се скорошни доказателства, че индуцирането на ΔFosB в NAc е включено в естествената награда. Нивата на ΔFosB се увеличават по подобен начин в NAc след прием на захароза и движение на колелото, Свръхекспресията на ΔFosB в стриатума с използване на бит-генетични мишки или вирусни вектори при плъхове води до увеличаване на приема на захароза, повишена мотивация за храна и повишено спонтанно движение на колелото (Olausson и др. 2006; Wallace и др. 2008; Werme и др. 2002). Настоящите данни значително допринасят за тези доклади и подкрепят идеята, че ΔFosB е критичен медиатор за подсилване на възнаграждението и естествена памет за възнаграждение.

ΔFosB може да медиира усилено от опита усилено сексуално поведение чрез индуциране на пластичност в мезолимбичната система. Всъщност сексуалният опит причинява редица дълготрайни промени в мезолимбичната система (Брадли и Мейзел 2001; Frohmader и др. 2009; Кани и др. 2010). TheПоведенческото ниво, чувствителният локомоторен отговор към амфетамина и повишеното възнаграждение с амфетамин са показани при сексуално опитни мъжки плъхове (Кани и др. 2010); изменен локомоторният отговор към амфетамина също е наблюдаван при женски хамстери (Брадли и Мейзел 2001). Освен това е установено увеличаване на броя на дендритните бодли и сложността на дендритните беседки след въздържание от сексуален опит при мъжки плъхове (Кани и др. 2010). Настоящото изследване показва, че ΔFosB може да бъде специфичен молекулен медиатор на дългосрочните резултати от сексуалния опит. В съгласие, наскоро бе доказано, че ΔFosB е важен за индуциране на дендритни промени на гръбначния стълб в отговор на хронично приложение на кокаин. (Dietz и др. 2009; Лабиринт и др. 2010).

Не е ясно кой невротрансмитер (и) е отговорен за индуцирането на ΔFosB в NAc, но DA е предложен като кандидат (Nye и др. 1995). Практически всички наркотици, включително кокаин, амфетамин, опиати, канабиноиди и етанол, както и природни възнаграждения, увеличават ΔFosB в NAc (Perrotti и др. 2005; Wallace и др. 2008; Werme и др. 2002). Както лекарствата за злоупотреба, така и природните възнаграждения увеличават синаптичната концентрация на DA в NAc (Damsma и др. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). ΔFosB индукция чрез лекарствени средства за злоупотреба е показана в DA рецептор, съдържащ клетки и кокаин-индуцираният ΔFosB е блокиран от D1 DA рецептор антагонисT (Nye и др. 1995). Следователно, освобождаването на DA се предполага, че стимулира експресията на ΔFosB и по този начин медиира невропластичността, свързана с възнаграждение. По-нататъшното поддържане на идеята, че нивата на ΔFosB са зависими от DA, е откритието, че областите на мозъка, където сексуалният опит променя нивата на ΔFosB, получават силен допаминергичен принос от VTA, включително медиалния префронтален кортекс и базалатералната амигдала.

За разлика от това, ΔFosB не се увеличава в медиалната преоптична област, въпреки че тази област получава допаминергичен вход, макар и от източници на хипоталамус (Miller & Lonstein 2009). Необходими са бъдещи проучвания, за да се провери дали индуцираното от чифтосване ΔFosB изразяване и ефектите на сексуалния опит върху сексуалната мотивация и производителността са зависими от действията на ДА. Ролята на DA при сексуални награди при мъжки плъхове в момента не е напълно ясна (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Има достатъчно доказателства, че DA се освобождава в NAc по време на експозиция на жена или чифтосване (Damsma и др. 1992) и DA неврони се активират по време на сексуално поведение (Балфур и др. 2004). Обаче, системните инжекции на DA рецепторния антагонист не предотвратяват условно предпочитано място, предизвикано от сексуално възнаграждение (Agmo & Berenfeld 1990) и хипотезата, че DA е от решаващо значение за армиране на чифтосване, предизвикано от опита, е неизпитано.

Не е ясно и какви са медиаторите на ефектите на ΔFosB върху сексуалното поведение. Показано е, че ΔFosB действа както като транскрипционен активатор, така и като репресор, чрез AP-1 зависим механизъм (McClung & Nestler 2003; Peakman и др. 2003). Идентифицирани са многобройни целеви гени, включително непосредствения ранен ген c-fos (Надявам се и др. 1992; Надявам се и др. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal и др. 2008; Джан и др. 2006), cdk5 (запушалка и др. 2001), динорфин (Захариу и др. 2006), сиртуин-1 (Renthal и др. 2009), NFkB субединици (Ang и др. 2001),и AMPA глутамат рецептор GluR2 субединица (Kelz и др. 1999). Настоящите резултати показват, че нивата на c-Fos, индуцирани от чифтосване, са намалени чрез сексуален опит в мозъчни области с повишен ΔFosB (NAc и ACA). Потискането на c-Fos изглежда зависи от периода от последните последващи чифтосване и повтарящи се срещи, както в предишни проучвания, такова намаление на c-Fos не е открито при мъжки плъхове, тествани 1 седмица след последната сесия на чифтосване (Балфур и др. 2004) или след сексуален опит, състоящ се само от едно заседание за чифтосване (Lopez & Ettenberg 2002). Освен това, настоящата констатация е в съответствие с доказателствата, че ΔFosB потиска с-fos гена след хронична експозиция на амфетамин (Renthal и др. 2008). В съответствие с тези констатации, индукцията на няколко непосредствени ранни генни мРНК (c-fos, fosB, c-jun, junB и zif268) е намалена след многократни инжекции с кокаин в сравнение с остри инжекции с лекарства (Надявам се и др. 1992; Надявам се и др. 1994), и индуцираните от амфетамин c-fos бяха потиснати след оттегляне от хроничното приложение на амфетамин (Джабер и др. 1995; Renthal и др. 2008). Функционалната значимост на понижената регулация на експресията на c-Fos след хронично лекарствено лечение или сексуален опит остава неясна и се предполага, че е важен хомеостатичен механизъм за регулиране чувствителността на животното към повтарящо се възнаграждение (Renthal и др. 2008).

В заключение, настоящото изследване показва, че ΔFosB в NAc играе неразделна роля в паметта на сексуалното възнаграждение, поддържайки възможността ΔFosB да е важна за общото възнаграждение и паметта., Резултатите от настоящото проучване допълнително изясняват нашето разбиране за клетъчните и молекулярните механизми, които медиират сексуалното възнаграждение и мотивация, и добавят към литературата, че ΔFosB е важен играч в развитието на пристрастяването, като демонстрира роля за ΔFosB в естествена награда армировка.

Отиди на:

Допълнителен материал

Supp Фиг. S1-S4 и Таблица S1-S2

Отиди на:

Благодарности

Това проучване е подкрепено от грантове от канадските институти за изследване на здравето към LMC, Националния институт за психично здраве към EJN, и естествените и инженерни изследователски съвет на Канада към KKP и LMC.

Отиди на:

СПРАВКИ

  • Agmo A. Сексуално поведение на мъжки плъхове. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Agmo A, Berenfeld R. Засилващи свойства на еякулацията при мъжки плъхове: роля на опиоидите и допамина. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Индукция на ядрен фактор kappaB в nucleus accumbens от хронично приложение на кокаин. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Сексуалното поведение и свързаните с пола екологични сигнали активират мезолимбичната система при мъжки плъхове. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Сагава ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Ефектите на хронично излагане на кокаин се регулират от невронния протеин Cdk5. Природата. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-хидроксидопаминови лезии при женски хамстери (Mesocricetus auratus) премахват чувствителните ефекти на сексуалния опит върху копулаторните взаимодействия с мъже. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Брадли KC, Meisel RL. Индукцията на сексуалното поведение на c-Fos в nucleus accumbens и стимулираната с амфетамин локомоторна активност се чувствителни от предишния сексуален опит при женски сирийски хамстери. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Зависими от протеазома и независими механизми за дестабилизиране на FosB: идентифициране на домейните на FosB degron и последствията за стабилността на DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chao J, Nestler EJ. Молекулярна невробиология на наркоманията. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Регулиране на делта FosB и FosB-подобни протеини чрез електроконвулсивен припадък и лечение с кокаин. Молекулярна фармакология. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Свръхекспресията на DeltaFosB със специфична клетъчна клетка повишава стимула за кокаин. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Централна регулация на еякулацията. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Сексуалното поведение увеличава предаването на допамин в nucleus accumbens и striatum на мъжки плъхове: сравнение с новост и локомоция. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Dietz DM, Maze I, Mechanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Съществена роля на ΔFosB в кокаиновата регулация на дендритни бодли на neurous accumbens. Общество за неврологията Анотация. 2009
  • Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Смесващи се удоволствия: Преглед на ефектите на лекарствата върху сексуалното поведение при хора и животински модели. Хорм Бев. 2009 В пресата.
  • Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Свръхекспресията на Delta FosB в nucleus accumbens повишава половото възнаграждение при женските сирийски хамстери. Гени Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Храненето и хипоталамусната стимулация увеличават оборота на допамин в аккумбенс. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Хранителното възнаграждение и кокаинът увеличават извънклетъчния допамин в nucleus accumbens, измерен чрез микродиализа. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Съществена роля на гена fosB в молекулярни, клетъчни и поведенчески действия на хронични електроконвулсивни припадъци. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Локална локализация на ген в мозъка при използване на вирусно-медиирана РНК интерференция. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Надежда Б, Кософски Б, Hyman SE, Nestler EJ. Регулиране на непосредствена ранна експресия на ген и свързване на AP-1 в ядрото на плъхове accumbens чрез хроничен кокаин. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Надежда BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Индукция на дълготраен AP-1 комплекс, съставен от изменени Fos-подобни протеини в мозъка чрез хроничен кокаин и други хронични лечения. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Сексуално поведение на мъжете. Хорм Бев. 2002;1: 1-139.
  • Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Острата и хронична терапия с амфетамин различно регулира нивата на невропептидните RNA и Fos имунореактивност в плъшичните неврони. Неврология. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Jenkins WJ, Becker JB. Динамично повишаване на допамина по време на копулацията при женски плъх. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, младши, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Експресията на транскрипционния фактор deltaFosB в мозъка контролира чувствителността към кокаин. Природата. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Lopez HH, Ettenberg A. Експозицията на женски плъхове дава разлики в c-fos индукцията между сексуално-наивни и опитни мъжки плъхове. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Лабиринт I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Русо SJ, Механик М, Музон Е, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schafer Y, Nestler EJ. Съществена роля на хистон метилтрансфераза G9a в индуцирана от кокаин пластичност. Науката. 2010;327: 213-216. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Регулиране на генната експресия и кокаиновото възнаграждение от CREB и DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: молекулен превключвател за дългосрочна адаптация в мозъка. Brain Res Mol Мозъчен Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Miller SM, Lonstein JS. Допаминергични изпъкналости към медиалната преоптична област на следродилните плъхове. Неврология. 2009;159: 1384-1396. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Стимулиращо транскрипционно свързване в неврони: роля на клетъчни гени от непосредствено ранен стадий. Тенденции в неврози. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Nestler EJ. Молекулни механизми на наркомания. Neuropharmacology. 2004;47 Допълнение 1: 24 – 32. [PubMed]
  • Nestler EJ. Невробиологията на кокаиновата зависимост. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Nestler EJ. Review. Транскрипционни механизми на пристрастяване: роля на DeltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: устойчив молекулен превключвател за пристрастяване. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola М, Nestler EJ. Фармакологични изследвания на регулирането на хронична свързана с FOS антигенна индукция от кокаин в стриатума и nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB в nucleus accumbens регулира инструменталното поведение и мотивацията, подсилени с храна. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Индуцируема, специфична за мозъчната област експресия на доминантно негативен мутант на c-Jun в трансгенни мишки намалява чувствителността към кокаин. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB се натрупват в GABAergic клетъчна популация в задната опашка на вентралната тегментална област след лечение с психостимулант. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Индукция на deltaFosB в мозъчни структури, свързани с възнаграждение след хроничен стрес. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Различни модели на индукция на DeltaFosB в мозъка чрез злоупотреба с лекарства. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Pfaus JG. Пътища на сексуално желание. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Кондициониране и сексуално поведение: преглед. Хорм Бев. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Поглед отгоре надолу към допамина, мотивацията и паметта. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Питчери KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Невропластичността в мезолимбичната система, предизвикана от естественото възнаграждение и последващото въздържание. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB медиира епигенетичната десенсибилизация на c-fos гена след хронична експозиция на амфетамин. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Renthal W, Kumar A, Xiao G, Уилкинсън М, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Кодадек TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Анализът на генома на хроматиновата регулация чрез кокаин разкрива ролята на сиртуините. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Сексуално възнаграждение при мъжки плъхове: ефекти от сексуалния опит върху условните предпочитания на мястото, свързани с еякулацията и интродукциите. Хорм Бев. 2009;55: 93-97. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Фосфорилирането на DeltaFosB медиира неговата стабилност in vivo. Неврология. 2008
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Регулиране на стабилността на DeltaFosB чрез фосфорилиране. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Влиянието на DeltaFosB в nucleus accumbens върху естественото поведение, свързано с възнаграждение. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB регулира движението на колелата. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley СА, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Индукцията на DeltaFosB в орбитофронталната кора медиира поносимостта на кокаин-индуцирана когнитивна дисфункция. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Важна роля за DeltaFosB в nucleus accumbens в морфиновото действие. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos улеснява придобиването и изчезването на предизвикани от кокаин постоянни промени. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]