Метамфетаминът действа върху субпопулациите на неврони, регулиращи сексуалното поведение при мъжки плъхове (2010)

Неврология. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

източник

Катедра по анатомия и клетъчна биология, Школа по медицина и стоматология Шулих, Университет на Западна Онтарио, Лондон, Онтарио, Канада, N6A 5C1.

абстрактен

Метамфетаминът (Meth) е силно пристрастяващ стимулант. Злоупотребата с мет обикновено се свързва с практиката на сексуално рисково поведение и увеличеното разпространение на вируса на човешкия имунодефицит и Meth потребителите съобщават за повишено сексуално желание, възбуда и сексуално удоволствие. Биологичната основа за тази връзка между лекарството и пола е неизвестна. Настоящото изследване показва, че приложението на Meth при мъжки плъхове активира неврони в мозъчните области на мезолимбичната система, които участват в регулирането на сексуалното поведение. По-специално, Meth и съчетаването на коактивиращи клетки в ядрото и черупката на nucleus accumbens, на базалатералната амигдала и предната част на cingulate. Тези констатации показват, че за разлика от сегашното убеждение, наркотиците могат да активират същите клетки като естествено подсилващо, т.е. сексуално поведение и от своя страна могат да повлияят на принудителното търсене на тази естествена награда.

Ключови думи: nucleus accumbens, базалатерална амигдала, префронтална кора, злоупотреба с вещества, репродукция, пристрастяване

Мотивацията и възнаграждението се регулират от мезолимбичната система, взаимосвързана мрежа от мозъчни области, съставена от вентралната сегментална зона (VTA) nucleus accumbens (NAc), базалатералната амигдала и медиалната префронтална кора (mPFC) (Кели, 2004, Kalivas и Volkow, 2005). Има достатъчно доказателства, че мезолимбичната система се активира в отговор на двете вещества на злоупотреба (Ди Киара и Императо, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) и към естествено поощряващо поведение, като например сексуално поведение (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Сексуалното поведение на мъжете, и по-специално еякулацията, е силно възнаграждаващо и укрепващо при животните (Pfaus et al., 2001). Мъжки гризачи развиват условно предпочитание на място (CPP) към копулация (Agmo и Berenfeld, 1990, Мартинес и Паредес, 2001, Tenk, 2008), и ще изпълнява оперативни задачи за достъп до сексуално възприемчива жена (Everitt et al., 1987, Everitt и Stacey, 1987). Наркотиците от злоупотреба също възнаграждават и укрепват, а животните ще се научат да самоназначават злоупотребяващи вещества, включително опиати, никотин, алкохол и психостимуланти (Wise, 1996, Пиърс и Кумаресан, 2006, Feltenstein и See, 2008). Въпреки че е известно, че и двата вида наркотици и сексуалното поведение активират мезолимбичните мозъчни области, понастоящем не е ясно дали медикаментите на злоупотреба влияят на същите неврони, които медиират сексуалното поведение.

Електрофизиологичните проучвания показват, че храната и кокаинът активират невроните в NAc. Въпреки това, двете усилватели не активират същите клетки в NAc (Carelli et al., 2000, Carelli и Wondolowski, 2003). Освен това, храната и самоадминистрацията на захароза не причиняват дългосрочни изменения на електрофизиологичните свойства, които се индуцират от кокаина (Chen et al., 2008). За разлика от това, събирането на доказателства предполага, че мъжкото сексуално поведение и наркотичните средства могат действително да действат върху същите мезолимбични неврони. Психостимулантите и опиоидите променят проявата на сексуално поведение при мъжки плъхове (Мичъл и Стюарт, 1990, Фиорино и Филипс, 1999a, Фиорино и Филипс, 1999b). Последните данни от нашата лаборатория показаха, че сексуалният опит променя реакцията към психостимуланти, както се вижда от чувствителните локомоторни реакции и чувствително възприемане на възнаграждението при д-амфетамин при сексуално опитни животни. (Pitchers et al., 2009). Подобен отговор преди това е наблюдаван при многократно излагане на амфетамин или други злоупотребяващи лекарства (Lett, 1989, Shippenberg и Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren и Kalivas, 2000). Заедно тези находки показват, че сексуалното поведение и реакциите към наркотици са медиирани от същите неврони в мезолимбичната система. Следователно, първата цел на настоящото изследване е да се изследва невралната активация на мезолимбичната система чрез сексуално поведение и прилагане на лекарство в същото животно. По-специално, тествахме хипотезата, че психостимулантът, метамфетаминът (Meth), действа директно върху невроните, които обикновено медиират сексуалното поведение.

Мет е една от най-злоупотребяваните наркотици в света (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) Начесто се свързва с променено сексуално поведение. Интересно е, че потребителите на Meth съобщават за повишено сексуално желание и възбуда, както и за засилено сексуално удоволствие (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Освен това, Злоупотребата с мет обикновено се свързва със сексуално насилствено поведение (Rawson et al., 2002). Потребителите често съобщават, че имат многобройни сексуални партньори и е по-малко вероятно да използват защита, отколкото други злоупотребяващи с наркотици (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). За съжаление, проучвания, показващи използването на Meth като предиктор на сексуалното рисково поведение, са ограничени, тъй като те разчитат на непотвърдени самооценки (Elifson et al., 2006). Затова е необходимо изследване на клетъчната основа на Meth-индуцирани промени в сексуалното поведение в животински модел, за да се разбере този комплексен наркотик-секс връзка.

С оглед на горепосочените доказателства, предполагащи, че лекарства за злоупотреба, и по-специално Meth, могат да действат върху неврони, които обикновено участват в медиирането на сексуалното поведение, целта на настоящото проучване е да изследва невралната активация чрез сексуално поведение и администриране на психостимуланта Meth, В това проучване е приложена невроанатомична техника, използваща имунохистохимична визуализация на непосредствено ранните гени Fos и фосфорилирана карта киназа (pERK) за откриване на едновременно неврално активиране чрез сексуално поведение и съответно Meth. Fos се изразява само в ядрото на клетките, с максимално ниво на експресия 30 – 90 минути след активирането на неврона. Има достатъчно доказателства, че сексуалната активност предизвиква изразяване на Fos в мозъка (Pfaus и Heeb, 1997, Veening и Coolen, 1998), включително мезокортиколимбичната система (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Съществуват също доказателства, че злоупотребата с лекарства предизвиква експресия на pERK в рамките на мезокортиколимбичната система (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). За разлика от изразяването на Fos, фосфорилирането на ERK е силно динамичен процес и се появява само 5-20 минути след невронна активация. Отделните времеви профили на Fos и pERK ги правят идеален набор от маркери за последващо активиране на невроните от два различни стимула.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛНИ ПРОЦЕДУРИ

Учебни предмети

Възрастни мъжки плъхове Sprague Dawley (210-225 g), получени от Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canada), бяха настанени по два на клетка в стандартни клетки от плексиглас (домашни клетки). Стаята за животни се поддържаше в обратен светлинен цикъл 12 / 12 h (светлините бяха изключени при 10.00 h). Налични бяха храна и вода ad libitum. Всички тестове бяха проведени през първата половина на тъмната фаза при слабо червено осветление. Женските стимули, използвани за сексуално поведение, са двустранно овариектомирани при дълбока анестезия (13 mg / kg кетамин и 87 mg / kg ксилазин) и получават подкожен имплант, съдържащ 5% естрадиол бензоат (EB) и 95% холестерол. Сексуалната възприемчивост се индуцира чрез подкожно (sc) прилагане на 500 μg прогестерон в 0.1 ml сусамово масло 4 h преди тестване. Всички процедури бяха одобрени от Комитета за грижа за животните в Университета на Западна Онтарио и отговарят на насоките, изложени от Канадския съвет за грижа за животните.

Експериментални проекти

Експерименти 1 и 2: Мъжки плъхове (n = 37) се оставят да се чифтосват с рецептивна женска към една еякулация (Е) или за 30 min, която някога е била първа в чисти тестови клетки (60 × 45 × 50 cm) по време на пет пъти -седмични предварителни сесии за чифтосване, за да придобиете сексуален опит. По време на последните две сесии бяха записани всички стандартни параметри за сексуална активност, включително: латентност на монтиране (ML; време от въвеждането на женската до първото монтиране), латентност на интромията (IL; време от въвеждането на женската до първото монтиране с вагинално проникване), латентност на еякулацията (EL; време от първата интоксикация до еякулация), пост-еякулационен интервал (PEI; време от еякулация до първото последващо въвеждане), брой на монтиране (M), и брой на интромациите (IM) (Agmo, 1997). Всички мъжки получават 1 ml / kg дневна инжекция 0.9% NaCl (физиологичен разтвор; sc) 3 последователни дни преди деня на теста, за привикване към работа и инжекции. Един ден преди деня на изпитването, всички мъжки са били настанени единично. При опитни мъже Fos може да бъде индуциран от обусловени контекстуални сигнали, свързани с предишен сексуален опит (Balfour et al., 2004). Следователно, всички манипулации на чифтосване и контрол по време на заключителните тестове бяха проведени в домашната клетка (за избягване на предсказуеми условни сигнали), за да се предотврати активация, предизвикана от кондиционирани реплики при мъжете без контрол. Мъжете са разпределени в осем експериментални групи, които не се различават по никаква мярка за сексуално представяне по време на последните две сесии на чифтосване (данните не са показани). По време на заключителния тест на мъжете било позволено да се чифтосват в домашната им клетка, докато не показаха еякулация (пол) или не получават партньорка (без секс). Всички двойки мъжки се перфузират 60 минути след началото на чифтосването, за да се даде възможност за анализ на индуцирана от чифтосване Fos-експресия. Мъжките получават инжекция 4 mg / kg Meth или 1 ml / kg физиологичен разтвор (sc) (n = 4 всеки), или 10 (експеримент 1) или 15 (експеримент 2) min преди перфузия, за анализ на медикаментозно предизвикано фосфорилиране на MAP киназа. Дозировката и времето преди перфузията се основават на предишни доклади (Choe et al., 2002, Чо и Уан, 2002, Чен и Чен, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Контролните групи включват мъже, които не са се чифтосали, но получават Meth 10 (n = 7) или 15 (n = 5) min преди жертвоприношение, или инжектиране с физиологичен разтвор 10 (n = 5) или 15 (n = 4) min преди жертвоприношението , След жертвоприношението, мозъкът се обработва за имунохистохимия.

Експеримент 3: Тъй като в експеримента 1 и 2 беше използвана висока доза Meth, беше извършен допълнителен невроанатомен експеримент, за да се изследва дали сексуалното поведение и по-ниската доза Meth предизвикват дозозависими модели на припокриване на неврална активация. Това изследване е проведено по идентичен начин като експериментите 1 и 2. Обаче, на крайния тест, двойки и ненаситени групи (п = 6 всеки) получават 1 mg / kg Meth (sc) 15 min преди жертвоприношение.

Експеримент 4: За да се провери дали нервната активация, причинена от пола и Meth, е специфична за Meth, този експеримент изследва дали подобни модели на припокриване на невралната активация могат да бъдат наблюдавани с психостимуланта d-амфетамин (Amph). Този експеримент се провежда по идентичен начин като експериментите 1 и 2. Обаче, на крайния тест, на мъжките се прилага или Amph (5 mg / kg), или физиологичен разтвор (1 mg / kg) (sc) 15 min преди жертвоприношение (n = 5 всеки). Контролните нечовешки мъже получават физиологичен разтвор или Amph 15 минути преди жертвоприношението. Преглед на експерименталните групи, използвани в експерименти 1 – 4, е предоставен в Таблица 1.

Таблица 1      

Общ преглед на експерименталните групи, включени в експерименти 1 – 4.

Подготовка на тъкани

Животните се анестезират с пентобарбитал (270 mg / kg; ip) и се перфузират транскардиално с 5 ml физиологичен разтвор, последван от 500 ml 4% параформалдехид в 0.1 М фосфатен буфер (РВ). Мозъците се отстраняват и фиксират за 1 h при стайна температура в същия фиксатор, след което се потапят в 20% захароза и 0.01% натриев азид в 0.1 М PB и се съхраняват при 4 ° С. Коронарните срезове (35 μm) бяха отрязани на замразяващ микротом (H400R, Micron, Германия), събрани в четири паралелни серии в разтвор на криопротектор (30% захароза и 30% етилен гликол в 0.1 M PB) и съхранявани при 20 ° C до по-нататъшно обработка.

имунохистохимия

Всички инкубации се извършват при стайна температура с леко разбъркване. Свободно плаващи участъци се промиват обилно с 0.1 М фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS) между инкубациите. Секциите се инкубират в 1% Н2O2 за 10 min, след това се блокира в инкубационен разтвор (PBS, съдържащ 0.1% говежди серумен албумин и 0.4% Triton X-100) за 1 h.

Perk / Fos

Тъканта се инкубира в продължение на една нощ с заешко поликлонално антитяло срещу p42 и p44 карта кинази ERK1 и ERK2 (pERK; 1: 400 експеримент 1 и 19 много 1; Клетъчна сигнализация Cat # 4.000;), последвано от 2 h инкубации с биотинилиран магарешки анти-заешки IgG (3: 21; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) и авидин-хрянов пероксидазен комплекс (ABC Elite; 9101: 1; Vector Laboratories, Burlingame, CA). След това тъканта се инкубира за 1 min с биотинилиран тирамид (BT; 500: 1 в PBS + 1000% H2O2; Комплект за усилване на сигнала на тирамида, NEN Life Sciences, Бостън, Масачузетс) и за 30 min с конюгиран стрептавидин Alexa 488 (1: 100; Laboratories Jackson Immunoresearch, West Grove, PA). След това тъканта се инкубира в продължение на една нощ със заешко поликлонално антитяло срещу c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, СА), последвано от 30 min инкубация с кози анти-заешки Alexa 555 (1: Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). След оцветяването, срезовете бяха измити старателно в 200 M PB, монтирани върху стъклени слайдове с 0.1% желатин в ddH20 и се покрива с водна среда за поставяне (Gelvatol), съдържаща анти-избледняващ агент 1,4-диазабицикло (2,2) октан (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, МО). Имунохистохимичните контроли включват пропускане на едната или и двете първични антитела, което води до отсъствие на маркиране в подходяща дължина на вълната.

Анализ на данни

Сексуално поведение

За всичките четири експеримента се записват стандартни параметри за сексуална активност, както е описано по-горе и се анализират чрез анализ на дисперсията (ANOVA). Анализът на данните за сексуалното поведение през последния ден от теста не показва съществени различия между групите по отношение на всеки от параметрите на сексуалното представяне.

PERK / Fos броя клетки

Единични и двойно белязани клетки за Fos и pERK се преброяват в каудалните нива на NAc ядрото и субрегионите на черупката, базолатералната амигдала (BLA), постеродорсалната медиална амигдала (MEApd), централната амигдала (CeA), медиалното преоптично ядро ​​(MPN), пост-медиадния и постолатерално ядро ​​на стрия терминалис (BNSTpm и BNSTpl), както и предната част на Cingulated (ACA), предварителната (PL), и инфлибимната (IL) суб-области на mPFC. Изображенията са заснети с помощта на охладена CCD камера (Microfire, Optronics), прикрепена към Leica микроскоп (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Германия) и софтуер Neurolucida (MicroBrightfield Inc) с фиксирани настройки на камерата за всички обекти (използвайки 10x цели). Използвайки софтуера на neurolucida, областите на анализ бяха дефинирани въз основа на ориентири (Суонсън, 1998) уникален за всеки мозъчен регион (вж Фигура 1). Стандартни зони на анализ са използвани във всички области, с изключение на ядрото и черупката на NAc. В последните области, pERK и Fos експресията не са хомогенни и се появяват в подобни на пластири модели. Следователно, цялото ядро ​​и черупката са очертани на базата на забележителности (латерален вентрикул, предни коловози и острови Калея). Областите на анализ не се различават между експерименталните групи и са 1.3 mm2 в NAc ядрото и черупката. Стандартните области на анализ за останалите области са: 1.6 mm2 в BLA, 2.5 и 2.25 mm2 съответно в MEApd и CeA, 1.0 mm2 в MPN, 1.25 mm2 в подрегионите BNST и mPFC и 3.15 mm2 в VTA. Две секции бяха преброени двустранно за всяка мозъчна област на животно, и броят на единичните и двойно белязани клетки за pERK и Fos, както и процентите на pERK клетки, които експресират Fos маркера бяха изчислени. За експерименти 1, 2 и 4, средните стойности за групата бяха сравнени с помощта на двупосочен ANOVA (фактори: чифтосване и лекарство) и LSD на Fisher за ретроспективни сравнения на ниво значимост на 0.05. За експеримента 3, средните стойности за групата бяха сравнени с помощта на несдвоени t-тестове при ниво на значимост на 0.05.

Фигура 1      

Схематични чертежи и изображения, илюстриращи мозъчни области на анализ. Посочените зони за анализ се основават на ориентири, уникални за всеки мозъчен регион, не се различават между експерименталните групи и са 1.25 mm2 в подрегиони mPFC (а), 1.3 mm2 в ...

Снимки

Цифрови изображения за Фигура 3 бяха уловени с помощта на CCD камера (DFC 340FX, Leica), прикрепена към Leica микроскоп (DM500B) и бяха внесени в Adobe Photoshop 9.0 софтуер (Adobe Systems, San Jose, CA). Изображенията не се променят по никакъв начин, освен за регулиране на яркостта.

Фигура 3      

Представителни образи на NAc отсечки, имунооцветени за Fos (червени; a, d, g, j) и pERK (зелени; b, e, h, k) на животни от всяка експериментална група: Няма пол + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), No Sex + Meth (g, h, i) и Sex + Meth (j, k, l). Десните панели са ...

РЕЗУЛТАТИ

Невронна активация на лимбичната система чрез сексуално поведение и мет администриране

Експеримент 1: Анализ на единични и двойно белязани клетки за индуцирани от чифтосване Fos и Meth-индуциран pERK при мъже, които са получили Meth 10 минути преди жертвоприношение, показват Fos, индуциран от чифтосване в MPN, BNSTpm, NAc ядро ​​и черупка, BLA, VTA, и всички подрегиони на mPFC, в съответствие с предходни проучвания, демонстриращи индуцирана от чифтосване Fos експресия в тези области (Baum и Everitt, 1992, Pfaus и Heeb, 1997, Veening и Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Meth администриране 10 минути преди да се жертва индуциран pERK в NAc ядро ​​и черупка, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl и региони на mPFC, в съответствие с активиращи модели, индуцирани от други психостимуланти (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Освен това са наблюдавани три модела на ко-експресия на неврална активация чрез сексуално поведение и Meth: Първо, зоните на мозъка са били идентифицирани, където полът и лекарствата активират ненапосредстващи невронни популации (Таблица 2). По-конкретно, в CeA, MEApd, BNSTpl и mPFC се наблюдава значително увеличение както на индуцирания от лекарството pERK (F (1,16) = 7.39–48.8; p = 0.015– <0.001), така и на индуцирания от пола Fos (F (1,16, 16.53) = 158.83–0.001; р <1,16). Въпреки това, в тези региони не е имало значително увеличение на двойно белязани неврони при мъже, лекувани с Meth. Единственото изключение беше MEApd, където беше открит ефект на чифтосване върху броя на двойно маркирани клетки (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Въпреки това, няма общ ефект от лечението с наркотици и двойното маркиране в групите, лекувани с Meth, не е значително по-високо, отколкото в групите, третирани с физиологичен разтвор, поради което не е причинено от лекарствотоТаблица 2). Второ, мозъчните области бяха идентифицирани, когато невралната активация беше индуцирана само от чифтосване (Таблица 3). По-конкретно, MPN, BNSTpm и VTA се активират само чрез чифтосване и съдържат значителни увеличения на Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p <0.001), индуцирани от чифтосване, но не и Met-индуциран pERK.

Таблица 2      

Преглед на индуцираното от чифтосване Fos и Meth-индуцирано експресиране на pERK в мозъчните области, където сексуалността и лекарствата активират неприпокриващи се нервни популации.
Таблица 3      

Преглед на индуцираното от чифтосване Fos и Meth-индуцирана експресия на pERK в мозъчни области, където нервната активация се индуцира само чрез чифтосване.

Най-накрая бяха открити области на мозъка, при които полът и лекарствата активираха припокриващи се популации от неврониФигура 2 намлява and3) .3). В сърцевината и черупката на NAc, BLA и ACA имаше общи ефекти от чифтосването (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) и медикаментозното лечение (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), както и взаимодействие между тези два фактора (F (1,16) = 5.082–47.27; p = 0.04- <0.001; няма значително взаимодействие при ACA) върху броя на клетките, изразяващи и двете индуциран от чифтосване Fos и мет-индуциран pERK. Анализът post hoc разкри, че броят на двойно белязаните неврони е значително по-висок при мъже, инжектирани с Meth, в сравнение с мъже, третирани с Meth (p = 0.027- <0.001), или мъже, третирани с физиологичен разтвор (p = 0.001- <0.001) мъже (Фигура 2 намлява and3) .3). Когато данните бяха изразени като проценти на активирани с лекарство неврони, 39.2 ± 5.3% в NAc ядрото, 39.2 ± 5.8% в NAc черупката, 40.9 ± 6.3% в BLA и 50.0 ± 5.3% от ACA невроните бяха активирани от и чифтосване, и Meth.

Фигура 2      

Индуцирана с пола Fos и Meth-индуцирана експресия на pERK в NAc, BLA и ACA неврони 10 min след администриране на 4 mg / kg Meth. Средни числа - sem от Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойни (c, f, i, l) белязани клетки в NAc ядрото (a, ...

Неочаквано наблюдение беше, че сексуалното поведение е повлияло на индуцирания с Meth pERK. Въпреки че Meth значително индуцира нивата на pERK както в двойки, така и в несвързани с Meth инжектирани групи, в NAc, BLA и ACA, маркирането с pERK е значително по-ниско при съседни мъже, инжектирани с Meth, в сравнение с мъжете, инжектирани с Meth. (Фигура 2b, e, h, k; р = 0.017- <0.001). Тази находка може допълнително да подкрепи хипотезата, че полът и лекарствата действат върху едни и същи неврони, но също така може да е показателно за индуцирани от чифтосване промени в усвояването на лекарството или метаболизма, които на свой ред причиняват променени нервни отговори на Meth. За да се изследва дали сексуалното поведение причинява различен временен модел на индуцирано от лекарството активиране, секции от NAc, BLA и АСА са оцветени за мъже, пожертвани в по-късен момент (15 min) след прилагане на лекарството (експеримент 2).

Експеримент 2: Анализът на единични и двойно белязани клетки потвърждава описаните по-горе констатации, че сексуалното поведение и последващото излагане на Meth 15 минути преди жертвоприношението води до значително повишаване на Fos и pERK имуномаркирането в NAc ядрото и черупката, BLA и ACA. В допълнение, значителна ко-експресия на индуцирани от чифтосване Fos и Meth-индуцирани pERK бяха отново намерени в тези области (Фигура 4; ефект на чифтосване: F (1,12) = 15.93–76.62; р = 0.002- <0.001; лекарствен ефект: F (1,12) = 14.11-54.41; р = 0.003- <0.001). Броят на двойно белязаните неврони при мъже, инжектирани с Meth, е значително по-висок в сравнение с мъже, третирани с Meth (p <0.001) или мъже, третирани с физиологичен разтвор (p <0.001). Когато данните са изразени като проценти на активирани от лекарства неврони, 47.2 ± 5.4% (NAc ядро), 42.7 ± 7.6% (NAc черупка), 36.7 ± 3.7% (BLA) и 59.5 ± 5.1% (ACA) от активирани неврони чрез чифтосване също се активират от Meth. Освен това, индуцираният от наркотици pERK не се различава между чифтосваните и несвързаните животни (Фигура 4b, e, h, k), във всички области с изключение на ACA (p <0.001). Тези данни показват, че сексуалното поведение наистина причинява промяна на временния модел на индукция на pERK от Meth.

Фигура 4      

Индуцирана с пола Fos и Meth-индуцирана експресия на pERK в NAc, BLA и ACA неврони 15 min след администриране на 4 mg / kg Meth. Средни числа - sem от Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойни (c, f, i, l) белязани клетки в NAc ядрото (a, ...

Невронна активация след сексуално поведение и 1 mg / kg Meth

Досега резултатите показват, че сексуалното поведение и 4 mg / kg Meth активират припокриващи се популации от неврони в NAc ядрото и черупката, BLA и ACA. To изследване на влиянието на дозировката на лекарството върху това припокриване в активирането, модели на неврална активация също са изследвани, използвайки по-ниска доза Meth. NAc ядрото и черупката, BLA и АСА бяха анализирани за активиране, предизвикано от пол и Meth. Всъщност, сексуалното поведение и последващото излагане на Meth доведоха до значително повишаване на Fos и pERK имуномаркирането в NAc ядрото и обвивките, BLA, както и невроните в ACA областта на mPFC (Фигура 5). Интересно е, че по-ниската доза Meth води до подобен брой pERK белязани неврони, индуцирани от 4 mg / kg Meth в четирите мозъчни области, анализирани. По-важното е, че ядрото на NAc и черупката, BLA и ACA показват значително увеличение на броя на двойно маркираните клетки (Фигура 5c, f, i, l) в сравнение с несъчетани мъже, инжектирани с мет (p = 0.003- <0.001). Когато данните са изразени като проценти на активираните от лекарството неврони, 21.1 ± 0.9% и 20.4 ± 1.8% в сърцевината и черупката на NAc, съответно 41.9 ± 3.9% в BLA и 49.8 ± 0.8% от невроните на ACA по пола и Мет.

Фигура 5      

Индуцирана с пола Fos и Meth-индуцирана експресия на pERK в NAc, BLA и ACA неврони 15 min след администриране на 1 mg / kg Meth. Средни числа - sem от Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойни (c, f, i, l) белязани клетки в NAc ядрото (a, ...

Невронна активация след сексуално поведение и прилагане на d-амфетамин

За да се провери дали горните резултати са специфични за Meth, е проведен допълнителен експеримент за изследване на невралната активация, предизвикана от чифтосване и Amph. Анализът на единични и двойно белязани клетки за pERK и Fos показа, че сексуалното поведение и последващата експозиция на Amph са довели до значително повишаване на Fos и pERK имуномаркирането в NAc ядрото и черупката и BLA (Фигура 6; ефект на чифтосване: F (1,15) = 7.38–69.71; р = 0.016- <0.001; лекарствен ефект: F (1,15) = 4.70–46.01; р = 0.047- <0.001). Освен това броят на двойно маркираните неврони е значително по-висок при мъже, лекувани с Amph, в сравнение с мъже, третирани с Amph (p = 0.009- <0.001), или мъже, третирани с физиологичен разтвор (p = 0.015- <0.001) (Фигура 6c, f, i). Когато данните се изразяват като проценти на активирани с лекарство неврони, съответно 25.7 ± 2.8% и 18.0 ± 3.2% в NAc ядрото и обвивката, и 31.4 ± 2.0% от BLA невроните се активират и от двойката Amph. Регионът ACA на mPFC показва значителни нива на Fos, индуциран от чифтосване (Фигура 6j; F (1,15) = 168.51; р <0.001). Въпреки това, за разлика от Meth, Amph не доведе до значително повишаване на индуцираните от лекарството нива на pERK в ACA (Фигура 6k) или броя на двойно белязани неврони в ACA (Фигура 6l) в сравнение с двамата мъже, инжектирани с физиологичен разтвор.

Фигура 6      

Индуцирана с пола Fos и индуцирана от Amph pERK експресия в NAc, BLA и ACA неврони 15 min след прилагане на 5 mg / kg Amph. Средни числа - sem от Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) и двойни (c, f, i, l) белязани клетки в NAc ядрото (a, ...

ДИСКУСИЯ

Настоящото изследване показва на клетъчно ниво припокриване между нервната активация от естественото усилващо сексуално поведение и психостимуланта Meth. Следователно, тези данни показват, че не само лекарствата действат върху едни и същи области на мозъка, които регулират естествената награда, но всъщност лекарствата активират същите клетки, които участват в регулирането на естествената награда. По-конкретно, тук е показано, че сексуалното поведение и Meth ко-активират популация от неврони в ядрото на NAc и черупката, BLA и ACA областта на mPFC, идентифицирайки потенциални места, където Meth може да повлияе на сексуалното поведение.

Настоящата констатация, че сексуалното поведение и администрирането на Meth активират припокриващи се популации от неврони в NAc, BLA и ACA е в контраст с констатациите от други проучвания, които показват, че различни популации на NAc неврони кодират лекарството и естествената награда.

По-конкретно, електрофизиологичните проучвания, които сравняват невралната активация по време на самостоятелно прилагане на естествени възнаграждения (храна и вода) и интравенозен кокаин, показват, че самоконтролът на кокаин активира диференциална, неприпокриваща се популация от неврони, която като цяло не реагира по време на оператор, отговарящ за вода и подсилване на храните (92%). Само 8% от аккумалните неврони показват активиране както от кокаин, така и от естествена награда (Carelli et al., 2000).

За разлика от това, мнозинството (65%) от клетката в NAc показа активация чрез различни естествени ползи (храна и вода), дори ако един подсилвач беше по-вкусен (захароза) (Roop et al., 2002).

Няколко фактора може да са допринесли за несъответствието с настоящите резултати. Първо, различни технически подходи са използвани за изследване на невронната активност. Настоящото изследване използва невроанатомичен метод за откриване на едновременна неврална активация от два различни стимула с помощта на двойна флуоресценция на имуноцитохимични за Fos и pERK, което позволява изследване на единично клетъчно активиране върху големи участъци от мозъчните области. Обратно, изследванията на Carelli и колегите използвали електрофизиологични записи, ограничени до NAc на животните, за да се справят с това дали само-администрирането на лекарства за злоупотреба активира същата нервна верига, използвана от естествените награди.

Второ, настоящото проучване изследва различно естествено възнаграждение, т.е. сексуално поведение в сравнение с предишни проучвания, които използват храна и вода в ограничени плъхове (Carelli, 2000). Храната и водата биха могли да имат по-малка полза от чифтосването. Сексуалното поведение е силно възнаграждаващо и плъховете лесно образуват CPP за копулация (Agmo и Berenfeld, 1990, Мартинес и Паредес, 2001, Tenk, 2008). Въпреки че плъховете с ограничена диета образуват CPP за вода (Agmo et al., 1993, Перкс и Клифтън, 1997) и храна (Перкс и Клифтън, 1997), дНеограничените плъхове за предпочитане консумират и образуват CPP за по-вкусни храни (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

Трето, нашите проучвания включват различни лекарства за злоупотреба в сравнение с предишни проучвания, използващи метамфетамин и амфетамин вместо кокаин. Настоящите резултати показват, че специфично Meth, и в по-малка степен амфетамин, води до активиране на неврони, също активирани от сексуално поведение. Опитът с лекарства може също да е изиграл важен фактор в нашите открития. В настоящите проучвания са използвани животни, които са били полово преживели, но не са употребявали наркотици. За разлика от това, електрофизиологичните проучвания на Carelli и колегите използвали „добре тренирани” животни, които получили повтарящи се експозиции на кокаин.

Следователно, възможно е Meth-индуцираната активация на неврони, активирана от сексуално поведение, да бъде променена при опитни плъхове. Въпреки това, предварителните проучвания от нашата лаборатория предполагат, че е малко вероятно опитът с лекарства да бъде основен фактор, тъй като сексуалното поведение и лечението с Meth при мъже, хронично лекувани с Meth, са активирали подобни проценти на активираните с лекарство неврони, както се съобщава в настоящото проучване. (20.3 ± 2.5% в NAc ядрото и 27.8 ± 1.3% в NAc черупката; Frohmader и Coolen, непубликувани наблюдения).

И накрая, настоящото изследване изследва „прякото” действие на лекарства, използващи пасивна администрация. Следователно, настоящият анализ не разкрива информация относно невронните вериги, участващи в търсенето на лекарства или сигналите, свързани с възнаграждението на лекарството, а по-скоро разкрива невралната активност, причинена от фармакологичното действие на лекарството, В предишните електрофизиологични проучвания, нервната активност на NAc, която се проявява в рамките на секунди от подсилени отговори, не е резултат от фармакологичното действие на кокаина, но е силно зависима от асоциативните фактори в рамките на парадигмата за самоуправление (Carelli, 2000, Carelli, 2002). По-конкретно, НЯ нейната активност е повлияна от независими от отговора презентации на стимули, свързани с интравенозно доставяне на кокаин, както и от инструментални непредвидени случаи (т.е. натискане на лоста), присъщи на тази поведенческа парадигма (Carelli, 2000, Carelli и Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli и Wightman, 2004). В обобщение, нашите констатации за коактивиране чрез природно и лекарствено възнаграждение могат да бъдат специфични за активиране чрез сексуално поведение и пасивно прилагане на Meth и Amph.

Мет и секс активират припокриващи се популации от неврони в NAc ядрото и черупката по дозо-зависим начин. Съ-активираните неврони в NAc могат да медиират потенциалните ефекти на Meth върху мотивацията и благоприятните свойства на сексуалното поведение, тъй като пораженията на NAc нарушават сексуалното поведение (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). В допълнение, тези неврони са потенциално място за дозо-зависими лекарствени ефекти върху чифтосване, тъй като по-ниската доза Meth (1 mg / kg) намалява броя на двойно белязани клетки с 50% в сравнение с по-високата доза Meth (4 mg / килограма). Въпреки че това проучване не идентифицира химичния фенотип на коактивираните неврони, предишни проучвания показват, че индуцираната от лекарството експресия на pERK и Fos в NAc зависи от допаминовите (DA) и глутаматните рецептори (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Въпреки че не е ясно дали индуцираната от чифтосване неврална активация в NAc зависи от тези рецептори, това е демонстрирано и в други участъци на мозъка, особено в медиалната преоптична област (Ламли и Хъл, 1999, Dominguez et al., 2007). TСъщо така, Meth може да действа върху невроните, които също се активират по време на сексуално поведение чрез активиране на допаминови и глутаматни рецептори. Ролята на NAc глутамата в сексуалното поведение в момента е неясна, но е добре установено, че DA играе важна роля в мотивацията за сексуално поведение. (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Проучванията за микродиализа съобщават за увеличаване на изтичането на NAc DA по време на апетитна и консуматорска фаза на мъжко сексуално поведение (Фиорино и Филипс, 1999a, Lorrain et al., 1999) и мезолимбичен изтичане на DA е свързано с улесняване на започването и поддържането на сексуално поведение на плъхове (Pfaus и Everitt, 1995). Освен това, DA манипулационните изследвания показват DA антагонисти в NAc инхибират сексуалното поведение, докато агонистите улесняват започването на сексуално поведение.r (Everitt et al., 1989, Pfaus и Phillips, 1989). По този начин, Meth може да повлияе на мотивацията за сексуално поведение чрез активиране на DA рецепторите.

За разлика от NAc, броят на двойно белязаните клетки в BLA и АСА остава относително непроменен, независимо от дозата Meth. BLA е от решаващо значение за дискретно асоциативно учене и е силно ангажирано с условно укрепване и оценка на възнаграждението по време на инструменталния отговор (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Виж, 2002). Плъховете с увредено BLA показват намален лост за натискане на кондиционирани стимули с храна (Everitt et al., 1989) или сексуално подсилване (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). За разлика от това, тази манипулация не влияе на консуматорската фаза на хранене и сексуално поведение (Cardinal et al., 2002). BLA също играе ключова роля в паметта на условните стимули, свързани с лекарствените стимули (Грейс и Розенкранц, 2002, Лавиолет и Грейс, 2006). Лезиите или фармакологичните инактивации на BLA блокират придобиването (Whitelaw et al., 1996) и израз (Грим и виж, 2000) кондиционирано възстановяване на кокаина, без да се засяга процеса на администриране на лекарството. Освен това, Амф, инфузиран директно в BLA, води до потенциално възстановяване на лекарството в присъствието на условните знаци (Виж et al., 2003). Следователно, възможно е предаването на DA да повиши психостимуланта в BLA води до усилване на емоционалната изява и търсенето (Ledford et al., 2003) на сексуално възнаграждение, като по този начин допринася за засиленото сексуално влечение и желание, докладвано от злоупотребяващите с Meth (Semple et al., 2002, Грийн и Халкитис, 2006).

В ACA, невралната активация на активирани от пола неврони е независима от дозата и специфична за Meth, тъй като не е наблюдавана с Amph. Въпреки че Meth и Amph имат подобни структурни и фармакологични свойства, Meth е по-мощен психостимулант от Amph с по-дълготрайни ефекти (NIDA, 2006). Изследвания на Goodwin et al. показва, че Meth генерира по-голям изтичане на DA и инхибира клирънса на локално прилагания DA по-ефективно в NAc на плъх, отколкото Amph. Тези характеристики могат да допринесат за пристрастяващите свойства на Meth в сравнение с Amph (Goodwin et al., 2009) и може би разликите в нервната активация, наблюдавани между двете лекарства. Не е ясно обаче дали различните модели на резултати се дължат на разликите в ефикасността между лекарствата или проблемите на потентността, свързани с използваните дози, и е необходимо по-нататъшно изследване.

Коактивирането чрез Meth и пола не е наблюдавано в други подрегиони на mPFC (IL и PL). При плъхове АСА е обстойно проучена с помощта на апетитни задачи, подкрепяйки ролята в асоциациите на стимул-подсилване (Everitt et al., 1999, Виж, 2002, Cardinal et al., 2003). Има достатъчно доказателства, че mPFC участва в жаждата за наркотици и рецидив към търсенето на наркотици и поведението на наркотици при хора и плъхове. (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin и See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas и Volkow, 2005). азНаред с това беше предложено, че дисфункцията на mPFC, причинена от повтарящо се излагане на наркотици на злоупотреба, може да е причина за намаляване на импулсния контрол и повишено поведение, насочено към наркотиците, както се наблюдава при много зависими (Дженч и Тейлър, 1999). Последните данни от нашата лаборатория показаха, че увреждането на mPFC води до продължаващо търсене на сексуално поведение, когато това е свързано с неприятен стимул (Davis et al., 2003). Въпреки че това проучване не изследва АСА, то подкрепя хипотезата, че mPFC (и специално ACA) медиират ефектите на Meth върху загубата на инхибиторен контрол върху сексуалното поведение, както е докладвано от злоупотребяващите с Meth (Salo et al., 2007).

В заключение, заедно тези проучвания представляват критична първа стъпка към по-доброто разбиране на това как лекарствата за злоупотреба действат върху невронните пътища, които обикновено медиират естествените награди. Освен това тези резултати показват, че за разлика от сегашното убеждение, че наркотичните вещества не активират същите клетки в мезолимбичната система като естествена награда, Meth и в по-малка степен Amph активират същите клетки като сексуалното поведение. На свой ред, тези съвместно активирани невронни популации могат да повлияят на търсенето на естествена награда след експозицията на лекарството. И накрая, резултатите от това изследване могат значително да допринесат за нашето разбиране за основата на зависимостта като цяло. Сравненията на приликите и различията, както и промените в нервната активация на мезолимбичната система, предизвикани от сексуално поведение спрямо наркотици, могат да доведат до по-добро разбиране на злоупотребата с вещества и свързаните с това промени в естествената награда.

Благодарности

Това изследване е подкрепено от грантове от Националния институт по здравеопазване R01 DA014591 и канадските институти за здравни изследвания RN 014705 на LMC.

СЪКРАЩЕНИЯ

  • ABC
  • комплекс авидин-биотин-пероксидаза от хрян
  • ACA
  • предната част на зъбната кухина
  • Amph
  • D-амфетамин
  • BLA
  • базолатерална амигдала
  • BNSTpl
  • зародишното ядро ​​на постеклоралното легло на stria terminalis
  • BNSTpm
  • постромедиално легло ядро ​​на stria terminalis
  • BT
  • биотинилиран тирамид
  • СЕА
  • централна амигдала
  • CPP
  • предпочитано място
  • E
  • възклицание
  • EL
  • латентност на еякулацията
  • IF
  • инфлибимна област
  • IL
  • латентност на входа
  • IM
  • вмъкване
  • M
  • монтиране
  • MAP киназа
  • митоген-активирана протеин киназа
  • MEApd
  • постеродорна медиална амигдала
  • Meth
  • метамфетамин
  • ML
  • монтиране на латентност
  • mPFC
  • медиална префронтална кора
  • MPN
  • медиално преоптично ядро
  • NAc
  • nucleus Accumbens
  • PB
  • фосфатен буфер
  • PBS
  • фосфатно буфериран физиологичен разтвор
  • ПЕИ
  • интервал след еякулацията
  • вирвам
  • фосфорилирана MAP киназа
  • PL
  • предварителен участък
  • VTA
  • вентрална тегментова област

Бележки под линия

Отказ от отговорност на издателя: Това е PDF файл на неиздаден ръкопис, който е приет за публикуване. Като услуга за нашите клиенти предоставяме тази ранна версия на ръкописа. Ръкописът ще бъде подложен на копиране, набиране и преглед на получените доказателства, преди да бъде публикуван в крайната си форма. Моля, имайте предвид, че по време на производствения процес могат да бъдат открити грешки, които биха могли да повлияят на съдържанието, както и всички правни откази, които се отнасят за списанието.

Препратки

  1. Agmo A. Сексуално поведение на мъжки плъхове. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Засилващи свойства на еякулацията при мъжки плъхове: роля на опиоидите и допамина. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Падуа M, Velazquez G. Награда и укрепване, произведени от питейна вода: Роля на опиоиди и подтипове на допаминовите рецептори. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Сексуалното поведение и свързаните с пола екологични сигнали активират мезолимбичната система при мъжки плъхове. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Повишена експресия на c-fos в медиалната преоптична област след чифтосване при мъжки плъхове: Роля на аферентни входове от средната амигдална и средна мозъчна област. Неврология. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Роля на префронталната кора при предизвикано от стреса и кокаин възстановяване на търсенето на кокаин при плъхове. Психофармакология (Berl) 2003; 168: 66 – 74. [PubMed]
  7. Кардинал RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Емоция и мотивация: ролята на амигдалата, вентралния стриатум и префронталната кора. Невронауки и биоповеденчески прегледи. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Кардинал RN, Паркинсон JA, Марбини HD, Тонер AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Ролята на предната част на зъбния мозък в контрола върху поведението чрез условни стимули на Павлов при плъхове. Поведенческа неврология. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Активиране на изгарянето на клетки от аккуменс чрез стимули, свързани с доставянето на кокаин по време на самостоятелно приложение. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens изстрелва клетки по време на целенасочено поведение за кокаин срещу „естествено“ подсилване. Физиология и поведение. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Селективно активиране на некроните на accumbens чрез кокаин-свързани стимули по време на многократна схема вода / кокаин. Изследване на мозъка. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Доказателство, че отделните невронни вериги в nucleus accumbens кодират кокаин срещу „естествено” (вода и храна) награда. J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Функционална микросхема в аккумбенсите, лежащи в основата на наркотичната зависимост: прозрения от сигнализирането в реално време по време на поведение. Текущо становище в областта на невробиологията. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Селективното кодиране на кокаин срещу естествени възнаграждения от neurous accumbens неврони не е свързано с хронична експозиция на лекарства. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Чанг JY, Джан Л, Джанак PH, Удуърд DJ. Невронални реакции в префронталния кортекс и nucleus accumbens по време на самостоятелно приложение на хероин в свободно движещи се плъхове. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Кокаин, но не и естествено възнаграждение за самоуправление, нито пасивно вливане на кокаин, произвежда устойчиви LTP в VTA. Neuron. 2008; 59: 288-297. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Подобрена активност на Cdk5 и транслокация на p35 в вентралния стрийатум на остри и хронични третирани с метамфетамин плъхове. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Лимбична активация по време на кокаиново желание. Am J психиатрия. 1999; 156: 11-18. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  19. Чое ES, Чунг КТ, Мао Л, Уанг JQ. Амфетаминът повишава фосфорилирането на извънклетъчната сигнално-регулирана киназа и транскрипционните фактори в стриатума на плъх чрез метаботропните глутаматни рецептори от група I. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Чое Ес, Ван JQ. CaMKII регулира фосфорилирането, предизвикано от амфетамин ERK1 / 2 в стритарни неврони. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Общество за поведенческа невроендокринология. Vol. 44. Синсинати, Охайо: Хормони и поведение; 2003. Лезии на медиалния префронтален кортекс не нарушават сексуалното поведение при мъжки плъхове; стр. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Наркотиците, злоупотребявани от хора, преференциално увеличават синаптичните концентрации на допамин в мезолимбичната система на свободно движещи се плъхове. Proc Natl Acad Sci US A. 1988, 85: 5274-5278. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Спазването активира NMDA рецепторите в медиалната преоптична област на мъжки плъхове. Поведенческа неврология. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Прогнози за поемане на сексуален риск сред новите употребяващи наркотици. Вестник за изследване на секса. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Фармакотерапия на пристрастяване към метамфетамин: актуализация. Злоупотребата с наркотични вещества. 2008; 29: 31-49. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Сексуална мотивация: нервен и поведенчески анализ на механизмите, които са в основата на апетитните и копулаторни реакции при мъжки плъхове. Neurosci Biobehav Rev. 1990, 14: 217 – 232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Взаимодействия между амигдалата и вентралната ивица в асоциации на стимул-награда: Проучвания, използващи график за сексуално подсилване от втори ред. Неврология. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Изследвания на инструменталното поведение при сексуално подсилване при мъжки плъхове (Rattus norvegicus): I. Контрол чрез кратки визуални стимули, свързани с рецептивна жена. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Асоциативни процеси в пристрастяването и възнаграждението Ролята на амигдало-вентралните стрийтални подсистеми. Анали на Нюйоркската академия на науките. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Изследвания на инструменталното поведение при сексуално подсилване при мъжки плъхове (Rattus norvegicus): II. Ефекти от преоптични лезии, кастрация и тестостерон. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, виж RE. Невроциркулацията на пристрастяването: преглед. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Експресираната от амфетамин с-fos мРНК експресия в каудат-путамен: ефектите на DA и NMDA рецепторните антагонисти варират като функция на невроналния фенотип и околната среда. Вестник по неврохимия. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Динамичните промени в nucleus accumbens допамин ефлукс по време на Coolidge ефект при мъжки плъхове. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Улесняване на сексуалното поведение и повишено допаминово изтичане в ядрените обвивки на мъжки плъхове след D-амфетамин-индуцирана поведенческа сенсибилизация. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Улесняване на сексуалното поведение при мъжки плъхове след индуцирана от d-амфетамин поведенческа сенсибилизация. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Амфетамин и метамфетамин диференциално повлияват допаминовите транспортери in vitro и in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  37. Грейс AA, Rosenkranz JA. Регулиране на условни отговори на базолатералните неврони на амигдалата. Физиология и поведение. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Грант S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Активиране на веригите на паметта по време на търсенето на кокаин. Proc Natl Acad Sci US A. 1996, 93: 12040-12045. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  39. Зелен AI, Halkitis PN. Кристал метамфетамин и сексуална социалност в градска гей субкултура: Избирателен афинитет. Култура, здраве и сексуалност. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, виж RE. Дисоциация на първични и вторични лимбични ядра, свързани с възнаграждение, в животински модел на рецидив. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Взаимодействия на хормони-невротрансмитери в контрола на сексуалното поведение. Изследвания на поведенческия мозък. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Мъжко сексуално поведение. В: Pfaff DW, et al., Редактори. Хормони Мозъчен и поведение. Сан Диего, Калифорния: Elsevier Science (САЩ); 2002. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Допамин и серотонин: влияния върху мъжкото сексуално поведение. Физиология и поведение. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Ефекти на еднократно и многократно прилагане на метамфетамин или морфин върху генната експресия на неврогликана в мозъка на плъх. Международен вестник за невропсихофармакология. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Кондиционирани предпочитания на място (CPPs) към висококалорични „закуски“ в щамове на плъхове, генетично предразположени срещу резистентност към затлъстяване, предизвикано от диета: Резистентност към блокада на налтрексон. Фармакология Биохимия и поведение. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Влияние на опиоидния антагонизъм върху условните предпочитания на местата за закуска. Фармакология Биохимия и поведение. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Импулсивност в резултат на фронтостриална дисфункция при злоупотреба с наркотици: последици за контрола на поведението чрез стимули, свързани с възнаграждение. Психофармакология (Berl) 1999; 146: 373 – 390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Невронната основа на пристрастяването: патология на мотивацията и избора. Am J психиатрия. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Памет и пристрастяване: споделена невронна верига и молекулярни механизми. Neuron. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Противопоставяне на ролята на nucleus accumbens и предната латерална хипоталамична област при контрола на сексуалното поведение при мъжки плъх. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Грейс АА. Канабиноидите потенцират емоционалната пластичност на обучението в невроните на медиалния префронтален кортекс чрез Basolateral Amygdala Inputs. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, виж RE. Потенцирано възстановяване на търсенето на кокаин след инфузия на D-амфетамин в базолатералната амигдала. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Повтарящите се експозиции се засилват, а не намаляват благоприятните ефекти на амфетамина, морфина и кокаина. Психофармакология (Berl) 1989; 98: 357 – 362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Сексуално поведение при мъжки плъхове след радиочестотни или допамин-намаляващи поражения в nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Страничен хипоталамусен серотонин възпрепятства появата на ядра на допамин: последствия за сексуалната плътност. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Хъл Ем. Ефекти на D1 антагонист и на сексуален опит върху копулационно-индуцирана Fos-подобна имунореактивност в медиалното преоптично ядро. Изследване на мозъка. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Само придружаващите се чифтосване се награждават при плъхове от двата пола. Хорм Бехав. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. Маклафлин J, виж RE. Селективното деактивиране на дорсомедиалния префронтален кортекс и на базалотералната амигдала отслабва обусловеното възстановяване на погасеното поведение при търсене на кокаин при плъхове. Психофармакология (Berl) 2003; 168: 57 – 65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Улесняване на сексуалното поведение при мъжки плъх в присъствието на стимули, които преди са били свързани със системни инжекции на морфин. Фармакология Биохимия и поведение. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Правила за възнаграждение за метамфетамин чрез сигнализираща пътека на екстрацелуларната регулирана киназа 1 / 2 / ets-like Gene-1 чрез активиране на допамин NIDA ( Серия от доклади от изследвания: Злоупотреба с метамфетамин и добавка 2006 NIH Номер на публикация 06-4210.PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Преоценка на усилвателя и условно предпочитание на мястото. Физиология и поведение. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Пътища на сексуалното желание. Вестник на сексуалната медицина. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Психофармакологията на сексуалното поведение. В: Блум ФЕ, купър диджей, редактори. Психофармакология: четвъртото поколение напредък. Ню Йорк: Гарван; 1995. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Последици от непосредствено-ранна индукция на ген в мозъка след сексуално стимулиране на женски и мъжки гризачи. Бюлетин за изследвания на мозъка. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Кондициониране и сексуално поведение: преглед. Хорм Бехав. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Диференциални ефекти на допаминовите рецепторни антагонисти върху сексуалното поведение на мъжки плъхове. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Мезолимбичната допаминова система: Последният общ път за засилване на ефекта на злоупотребата с наркотици? Невронауки и биоповеденчески прегледи. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Питчери KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Сексуалният опит предизвиква функционална и структурна пластичност в мезолимбичната система. Биологична психиатрия. 2009 В пресата.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Колебанията на допамин в nucleus accumbens по време на поддържане, изчезване и възстановяване на интравенозно само-приложение на D-амфетамин. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Наркотици и сексуални ефекти: роля на типа наркотици и пол. Вестник на лечението за злоупотреба с вещества. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Сексуалното поведение увеличава експресията на c-fos в предния мозък на мъжкия плъх. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Холандър RJ, Carelli RM. Активността на аккумсенсите по време на многократна схема за подсилване на вода и захароза при плъхове. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon МН, Galloway GP, Waters C, Мур CD, Buonocore MH. Контролът на вниманието и нивата на метаболита в мозъка в злоупотребяващите с метамфетамин. Биологична психиатрия. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Кристалният метамфетамин и екстази се различават по отношение на опасния секс сред младите гей мъже. Канадско списание за общественото здраве. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Вижте RE. Невронни субстрати на условно-възобновен рецидив към поведение, търсещо наркотици. Фармакология Биохимия и поведение. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Виж RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Пристрастяване към наркотици, рецидив и амигдала. Анали на Нюйоркската академия на науките. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Мотивации, свързани с употребата на метамфетамин сред ХИВ мъже, които правят секс с мъже. Вестник на лечението за злоупотреба с вещества. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Моделът на възстановяване на лекарството: история, методология и основни открития. Психофармакология (Berl) 2003; 168: 3 – 20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Чувствителност към условните ефекти на кокаина: фармакологични и времеви характеристики. J. Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Чувствителност към условните ефекти на морфина: фармакология и времеви характеристики. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Прогнози за сексуално рисково поведение на ХИВ в общностна извадка от мъже и жени, употребяващи наркотици. СПИН и поведение. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Употреба на метамфетамин и поведение на сексуален риск в американските гимназисти: констатации от Национално проучване на поведението на риска. Превенция на науката. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Ефекти на допаминови и NMDA рецептори върху кокаин-индуцираната Fos експресия в стриатума на Fischer плъхове. Изследване на мозъка. 2008; 1243: 1-9. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  84. Swanson LW, редактор. Карти на мозъка: Структура на мозъка на плъх. Амстердам: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Сексуално възнаграждение при мъжки плъхове: Ефекти от сексуалния опит върху условно предпочитание на място, свързано с еякулации и интродукции. Хорм Бехав. 2008 [PMC безплатна статия] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, страници C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Включване на екстрацелуларната сигнално регулирана каскада на киназа за свойствата на кокаин-награждаване. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pages C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Лекарствата, предизвикващи пристрастяване и не-пристрастяване, предизвикват различни и специфични модели на активиране на ERK в мозъка на мишка. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Регулирането на каскада на протеинова фосфатаза позволява конвергентните допаминови и глутаматни сигнали да активират ERK в стриатума. Proc Natl Acad Sci US A. 2005, 102: 491-496. [PMC безплатна статия] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Промени в допаминергичното и глутаматергично предаване при индукция и изразяване на поведенческа сенсибилизация: критичен преглед на предклиничните проучвания. Психофармакология (Berl) 2000; 151: 99 – 120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Неврална активация след сексуално поведение в мозъка на мъжки и женски плъх. Изследвания на поведенческия мозък. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou А, Робинс TW, Everitt BJ. Екзитотоксичните лезии на базалотералната амигдала нарушават придобиването на поведение, търсещо кокаин, по график на второстепенно укрепване. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Невробиология на пристрастяването. Текущо становище в областта на невробиологията. 1996; 6: 243-251. [PubMed]