Tha fèin-riaghladh cronail deoch làidir a 'toirt a-mach àrdachadh ΔFosB: coimeas eadar luchagan dùbailte le pàtranan deoch sònraichte (2012)

BMC Neurosci. 2012 Oct 29;13:130. doi: 10.1186/1471-2202-13-130.
 

Stòr

Ionad Wagoner airson Deoch Làidir agus tràilleachd Rannsachadh, Institiud Neuroscience, Oilthigh Texas aig Austin, Austin, TX, 78712, USA. [post-d fo dhìon]

Abstract

AN T-EILEANACH:

CÙL-FHIOSRACHADH:

Tha an neo-chomas airson deoch làidir a lughdachadh no a riaghladh na chomharra sònraichte airson eas-òrdughan cleachdadh deoch làidir. Bidh rannsachadh air modailean giùlain agus ginteil ùr-nodha de dh ’atharrachaidhean ann an òl a tha air am brosnachadh le eòlas ag adhartachadh ar n-eòlas air eas-òrdughan cleachdadh deoch làidir. Chaidh giùlan fèin-rianachd deoch làidir sònraichte fhaicinn roimhe seo nuair a bhathar a ’dèanamh coimeas eadar dà shreath hybrid F1 de luchainn: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) sealltainn nas lugha de roghainn deoch làidir às deidh eòlas le dùmhlachd àrd de dheoch làidir agus amannan stad fhad 'sa tha C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) a ’sealltainn roghainn deoch làidir seasmhach. Tha na phenotypes sin inntinneach leis gu bheil na hibridan sin a ’nochdadh gu bheil cuir-ris ginteil (BxN) agus overdominance (BxF) ann an toirt a-steach ethanol ann an dòigh a tha an urra ri eòlas.

Gu sònraichte, bha taisbeanadh BxF a ’nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach agus taisbeanadh BxN a’ lughdachadh roghainn deoch làidir às deidh eòlas le dùmhlachd àrd ethanol; ge-tà, bidh eòlas le dùmhlachd ethanol ìosal a ’toirt a-mach roghainn deoch làidir seasmhach airson an dà hibrid.

Anns an sgrùdadh làithreach, rinn sinn deuchainn air a ’bheachd gu bheil na phenotypes sin air an riochdachadh le cinneasachadh eadar-dhealaichte den fhactar tar-sgrìobhaidh inducible, ΔFosB, ann an duais, aversion, agus roinnean eanchainn co-cheangailte ri cuideam.

TORAIDHEAN:

Bha atharrachaidhean ann an plastachd neuronal (mar a chaidh a thomhas le ìrean ΔFosB) an urra ri eòlas, a bharrachd air roinn eanchainn agus genotype sònraichte, a ’toirt taic a bharrachd dha gu bheil cuairteachadh neuronal mar bhunait air taobhan brosnachail de chaitheamh ethanol..

Bha ìrean ΔFosB nas ìsle aig luchainn BxN a bha a ’nochdadh roghainn deoch làidir nas ìsle ann an neul Edinger-Westphal na luchainn a bha a’ nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach, agus ìrean ΔFosB nas motha ann amygdala medial sa mheadhan an coimeas ri luchagan smachd.

Bha luchainn BxN a ’sealltainn roghainn deoch làidir seasmhach a’ taisbeanadh ìrean ΔFosB nas àirde anns an sgìre teasach ventral, Niùclas Edinger-Westphal, agus amygdala (roinnean meadhanach agus fadalach).

A bharrachd air an sin, ann an Bha ìrean luchainn BxN ΔFosB ann an neul Edinger-Westphal agus roinnean teasach ventral ceangailte gu mòr ri roghainn ethanol agus toirt a-steach. A bharrachd air an sin, sheall mion-sgrùdadh trusaidh hierarchical gu bheil mòran de luchainn ethanol-naïve le ìrean ìosal ΔFosB ìosal ann am brabhsair, ach tha mòran de luchainn a tha a ’nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach le ìrean àrda ΔFosB iomlan ann am brabhsair còmhla.

CO-DHÙNAIDHEAN:

Le bhith a ’dèanamh coimeas agus eadar-dhealachadh eadar dà phenotypes deoch làidir, tha an sgrùdadh seo a’ sealltainn gu bheil na cuairtean co-cheangailte ri duais agus cuideam (a ’toirt a-steach niuclas Edinger-Westphal, sgìre teasach ventral, amygdala) a’ faighinn plastachd nach beag a tha a ’nochdadh mar roghainn deoch làidir nas lugha.

Cùl-fhiosrachadh

Tha feartan so-leòntachd aithnichte, àrainneachd agus ginteil, co-cheangailte ri ana-cleachdadh deoch làidir is deoch làidir. Tha an comas a bhith ag òl tòrr deoch làidir gun mòran buaidh air an neach sin na phrìomh chomharra ann an iomadh deoch-làidir, a ’sealltainn gu bheil ìre ìosal de fhreagairt do dheoch làidir na phrìomh adhbhar so-leònte ann an leasachadh deoch-làidir [1,2]. Cuidichidh mìneachadh factaran neurobio-eòlasach a tha a ’cur ri modaladh deoch làidir ar tuigse mu chleachdadh is ana-cleachdadh deoch làidir, agus tha e na ro-innleachd èifeachdach airson a bhith a’ leasachadh leigheasan leasaichte do dhaoine fa leth a tha air an dearbhadh le eas-òrdughan cleachdadh deoch làidir. Tha cleachdadh mhodalan creimich gus aithris a dhèanamh air galair dhaoine air a bhith na inneal cumhachdach ann a bhith a ’toirt air adhart a bhith a’ tuigsinn a ’ghalair seo agus a’ leasachadh leigheasan. Tha grunn mhodalan creimich nan àite gus sgrùdadh a dhèanamh air mì-ghnàthachadh deoch làidir agus deoch-làidir, ach chan eil gin dhiubh a ’modail deoch làidir gu tur. Tha an ìre gum bi luchag gu fèin-rianachd a ’toirt seachad fuasglaidhean ethanol fo chumhachan àrainneachdail coltach ri seo gu mòr an urra ris a’ chùl ginteil aice [3].

O chionn ghoirid, lorg sinn gu bheil luchagan hybrid C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) agus FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 fèin-rianachd a ’toirt ìrean neo-àbhaisteach àrd de dheoch làidir rè deuchainnean roghainn dà bhotal (bidh boireannaich ag ithe 20 - 35 g / kg / day agus fireannaich 7 - 25 g / kg / latha, a rèir dùmhlachd agus paradigm) [4]. Tha buannachd mhòr aig a ’mhodal ginteil ùr seo an taca ri sreathan a tha air an toirt a-steach, a’ toirt a-steach fianais de phenotype overdominant agus ag òl gu ìrean deoch làidir fuil àrd [4]. A bharrachd air an sin, tha an caitheamh àrd de ethanol air a thaisbeanadh le luchagan BxF air fhaicinn ann an dà pharaid òil ethanol (ag òl anns an dorchadas agus gabhail ri ethanol rè ruigsinneachd clàraichte fluid) [4]. Chunnaic sinn an uairsin giùlan fèin-rianachd deoch làidir sònraichte nuair a bha sinn a ’dèanamh coimeas eadar dà shreath hybrid F1 de luchainn: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) a’ sealltainn roghainn deoch-làidir nas lugha an dèidh eòlas le dùmhlachd àrd de dheoch làidir agus amannan staonadh agus BxF a ’nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach [5]. A ’cleachdadh bataraidh de dheuchainnean giùlain, tha sinn air sealltainn gu bheil BxN nas mothachail na luchagan BxF gu buaidhean aversive agus sedative, ach gun a bhith buannachdail, ethanol [6].

Cuiridh rannsachadh bunaiteach air modailean giùlain agus ginteil ùr de chaitheamh àrd deoch làidir agus atharrachaidhean air an adhbhrachadh le eòlas ann an òl barrachd eòlais air ana-cleachdadh deoch làidir is deoch làidir. Tha am phenotype roghainn deoch làidir nas lugha inntinneach oir tha luchagan BxN an toiseach a ’nochdadh roghainn àrd airson fuasglaidhean ethanol. Ged nach eil fios dè an taobh brosnachail de bhith a ’lughdachadh na tha de dheoch làidir an dèidh eòlas le dùmhlachd àrd ethanol agus staonadh, is dòcha gum bi luchagan BxN air an samhlachadh ri luchd-òil meadhanach leis gu bheil iad fhathast ag ithe fuasglaidhean ethanol ach aig ìre nas ìsle, is dòcha mar thoradh air eòlas casgach.

Tha am modail roghainn deoch làidir seasmhach inntinneach cuideachd, leis gu bheil luchagan BxF gu seasmhach ag ithe ìrean fìor àrd de ethanol ge bith dè an eòlas a bh ’ann roimhe. Faodaidh roghainn deoch làidir seasmhach agus lùghdaichte a bhith co-cheangailte ri buaidh bochdainn deoch làidir, iongantas far a bheil beathaichean a ’nochdadh àrdachadh mòr ann an caitheamh deoch làidir às deidh ùine de stad èiginneache [7]. Tha buaidh bochdainn deoch làidir na iongantas feumail airson a bhith a ’sgrùdadh barrachd giùlan deoch làidir. Ged a tha an clàr deuchainneach a tha aithnichte airson a bhith a ’brosnachadh buaidh bochdainn deoch làidir gu math eadar-dhealaichte na an clàr-ama a thathar a’ cleachdadh an seo, tha a bhith a ’dèanamh coimeas eadar roghainn deoch làidir seasmhach agus nas ìsle airson buaidh bochdainn deoch làidir a’ ceangal nan diofar phenotypes giùlain a chaidh a dheasbad an seo ri iongantas cudromach ann am modalan creimich de sgrùdadh deoch làidir. Bhiodh roghainn deoch-làidir nas ìsle an aghaidh buaidh bochdainn deoch làidir agus dh ’fhaodadh roghainn deoch làidir a bhith air a mhìneachadh mar às aonais buaidh bochdainn deoch làidir. Tha cleachdadh mhodalan beathach ginteil eadar-mheasgte, leithid BxF agus BxN, a ’cur gu mòr ri adhartachadh an raoin oir thathas den bheachd gu bheil eas-òrdughan cleachdadh deoch làidir ag èirigh bho eadar-obrachaidhean iom-fhillte eadar gintinneachd agus an àrainneachd. Tha a bhith a ’comharrachadh eadar-dhealachadh gine tràth sa bhad airson na hibridan sin a’ toirt sealladh dhuinn air cuairteachadh na h-eanchainn a tha cudromach airson feartan buannachdail agus casgach ethanol.

Chaidh ethanol agus neurocircuits eile a tha an sàs ann an drogaichean a sgrùdadh ann am modalan creimich sònraichte a ’cleachdadh comharran moileciuil de plasticity neuronal agus / no gnìomhachd [8-15]. Chan eil ethanol fèin-rianachd agus air a rianachd le deuchainnean a ’leantainn gu mapaichean metabolail eanchainn co-ionann, a’ moladh gu bheil cuairteachadh sònraichte mar bhunait ri buaidhean ath-neartachaidh ethanol [8,9].

Is e aon phrìomh phàirt, nach deach a sgrùdadh gu mòr fhathast ann an rannsachadh deoch làidir, sgrùdadh air giùlan roghainn deoch làidir seasmhach agus lughdaichte agus comharrachadh chuairtean neuronal a tha an sàs anns na giùlan sin. B ’e amas an deuchainn seo roinnean eanchainn a chomharrachadh a bha an sàs le roghainn deoch làidir seasmhach agus nas ìsle. Leis gu bheilear air sealltainn gu bheil rianachd deoch làidir cronail (còmhla ri drogaichean eile de dhroch dhìol) ag adhbhrachadh eadar-dhealachaidhean roinneil eanchainn ann an ìrean ΔFosB, rinn sinn deuchainn air a ’bheachd gu bheil na phenotypes giùlain sin air an riochdachadh le cinneasachadh eadar-dhealaichte den fhactar tar-sgrìobhaidh inducible, ΔFosB, ann an roinnean eanchainn a tha aithnichte do a bhith an sàs ann an duais, strì, agus cuideam [10].

Tha brosnachaidhean cronail a dh ’adhbhraicheas eadar-dhealachaidhean roinneil ann an ìrean ΔFosB a’ toirt a-steach drogaichean mì-ghnàthachaidh (deoch làidir, cocaine, amphetamine, nicotine, morphine, agus antipsicotics), cuideam broilleach (cuideam cuibhreachaidh, clisgeadh coise neo-fhaicsinneach, glacaidhean electroconvulsive), agus ruith cuibhle èiginneach [11]. Mar eadar-mheadhanair a dh’fhaodadh a bhith ann de dh ’atharrachaidhean fad-ùine san eanchainn, tha eadar-dhealachadh cudromach ann a bhith a’ comharrachadh an eadar-dhealachadh ceannasach de FosB (FosB no ΔFosB) mar fhreagairt air làimhseachadh ethanol cronach.

Tha grunn sgrùdaidhean ann a thomhais FosB agus ΔFosB às deidh brosnachaidhean cronail nach deach a dhearbhadh gur e ΔFosB am prìomh isoform (mar an fheadhainn a tha air a mhìneachadh gu h-ìosal). Ach, tha fianais làidir ann gur e ΔFosB, no FosB, am prìomh isoform às deidh brosnachaidhean cronach [10-12]. Lorg sgrùdadh le Ryabinin agus Wang (1998) ann an deoch-làidir ìosal a b ’fheàrr le luchagan DBA / 2J, gun robh ceithir latha de dh’ in-stealladh ethanol a ’leantainn gu àrdachadh làidir ann an abairt FosB anns na roinnean eanchainn a leanas: niuclas cortical amygdaloid anterior, ventrale septum lateral, amygdala meadhanach , amygdala lateral, hypothalamus lateral, slige niuclas accumbens, niuclas leabaidh de stria terminalis, agus niuclas paraventricular an thalamus [13]. Tha na toraidhean aca a ’comharrachadh neurocircuit a tha freagairt air ethanol. Chaidh abairt FosB a thomhas cuideachd anns an alcol àrd as fheàrr le luchag C57BL / 6J aig àm togail agus cumail suas fèin-rianachd ethanol fo chumhachan ruigsinneachd cuibhrichte. Cha robh atharrachaidhean ann an ìrean FosB nuair a fhuair iad fèin-rianachd [14]. Ach, às deidh dà sheachdain de fèin-rianachd ethanol ruigsinneachd cuibhrichte, chaidh ìrean FosB àrdachadh ann am meadhan niùclas meadhan an niuclas amygdala agus Edinger-Westphal [15]. Gu h-iomlan, tha aithisgean a ’comharrachadh roinnean nobhail a tha an sàs ann am fèin-rianachd ethanol, a bharrachd air a bhith a’ toirt àite don t-slighe mesocorticolimbic agus amygdala leudaichte [16]. Ach, tha e cudromach toirt fa-near gu bheil atharrachaidhean ann an ìrean ΔFosB an urra ri slighe rianachd ethanol, dòs, agus an ùine a tha fosgailte do làimhseachadh no clàr [13-15].

Tha na gathan luch a chaidh a chleachdadh san sgrùdadh seo a ’toirt seachad modalan inntinneach airson coimeas a dhèanamh eadar roghainn deoch làidir seasmhach agus nas lugha agus na h-innleachdan bunaiteach a tha an urra ris na freagairtean sònraichte deoch làidir sin. Tha an sgrùdadh seo a ’sealltainn gu bheil luchainn a tha a’ nochdadh nas lugha de roghainn deoch làidir cuideachd a ’nochdadh plastachd mòr ann an cuairtean co-cheangailte ri duais agus cuideam (a’ toirt a-steach niuclas Edinger-Westphal, sgìre teasach ventral, amygdala, niuclas accumbens, agus cortex cingulate).

toraidhean

A ’bhuaidh a th’ aig dùmhlachdan deoch làidir agus amannan stad air fèin-rianachd ann an luchagan BxF agus BxN

Gus sealltainn gun do dh ’atharraich diofar chruinneachaidhean ethanol agus / no amannan staonadh caitheamh ethanol às deidh sin, dhealbhaich sinn ceithir clàran (buidhnean) gus caitheamh ethanol a thomhas (Figear) (Figear1a, b).1a, b). Bha ceithir buidhnean deuchainneach ann airson gach hibrid: Co-chruinneachaidhean Àrd, Co-chruinneachaidhean Àrd le Ùine Abstinence, Co-chruinneachaidhean Ìosal, agus Co-chruinneachaidhean Ìosal le Ùine Abstinence. Dàta coileanta airson roghainn ethanol (Figear (Figear2)2) agus caitheamh (Figear (Figear3)3) tha dàta (airson a h-uile buidheann agus an dà genotypes) air an toirt seachad airson fiosrachadh. Gus na phenotypes giùlain de roghainn deoch làidir seasmhach agus lùghdaichte a stèidheachadh agus a nochdadh, tha dàta roghainn agus caitheamh ethanol 9% air a thaisbeanadh ann am Figearan Figearan44 agus and5.5. Tha na phenotypes giùlain sin stèidhichte air coimeas eadar roghainn agus caitheamh ethanol 9% bhon chiad, dàrna, treas, agus ceathramh taisbeanadh anns na buidhnean Co-chruinneachaidhean Àrd agus làithean deuchainneach co-fhreagarrach airson na buidhnean Co-chruinneachaidhean Ìosal. Chaidh ANOVA dà-shligheach (ùine genotype x ùine) de roghainn agus caitheamh ethanol 9% a dhèanamh. Airson a ’bhuidheann High Concentrations, roghainn ethanol (Figear (Figear4a)4a) agus caitheamh (Figear (Figear5a)5a) bha iad nas motha airson BxF na BxN, agus bha BxF a ’taisbeanadh roghainn agus caitheamh deoch làidir seasmhach fhad‘ s a bha BxN a ’taisbeanadh roghainn agus caitheamh deoch làidir nas ìsle (ETHANOL PREFERENCE - eadar-obrachadh F (3,54) = 4.83, P <0. 01, genotype F (1,54, 24.10) = 0.001, P <3,54, ùine F (9.92) = 0.0001, P <1,54; CO-DHÙNADH ETHANOL - eadar-obrachadh N / S, genotype F (50.73) = 0.0001, P <3,54, ùine F (11.68, 0.0001) = XNUMX, P <XNUMX). Airson a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Àrd le staonadh, roghainn ethanol (Figear (Figear4b)4b) agus caitheamh (Figear (Figear5b)5b) nas motha airson BxF na BxN, agus bha BxF a ’taisbeanadh roghainn agus caitheamh deoch làidir seasmhach fhad‘ s a bha BxN a ’taisbeanadh roghainn is caitheamh deoch làidir nas ìsle (ETHANOL PREFERENCE - eadar-obrachadh F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotype F (1,132) = 250.43, P <0.0001, ùine F (3,132) = 27.48, P <0.0001; CO-DHÙNADH ETHANOL - eadar-obrachadh F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotype F (1,132) = 510.88, P <0.0001, ùine F (3,132) = 22.42, P <0.0001). Airson a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal, roghainn ethanol (Figear (Figear4c)4c) agus caitheamh (Figear (Figear5c)5c) bha iad na bu mhotha airson BxF na BxN, agus bha an dà hibrid a ’taisbeanadh roghainn agus caitheamh deoch làidir seasmhach (ETHANOL PREFERENCE - eadar-obrachadh N / S, genotype F (1,54) = 12.2, P <0.01, ùine N / S; CO-DHÙNADH ETHANOL - eadar-obrachadh N / S, genotype F (1,54) = 74.83, P <0.0001, ùine N / S). Airson a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal le staonadh, roghainn ethanol (Figear (Figear4d)4d) agus caitheamh (Figear (Figear5d)5d) bha iad nas motha airson BxF na BxN, agus bha an dà hibrid a ’nochdadh lùghdachaidhean meadhanach ann an roghainn agus caitheamh deoch làidir (ETHANOL PREFERENCE - eadar-obrachadh N / S, genotype F (1,132) = 166.58, P <0.0001, ùine N / S; CO-DHÙNADH ETHANOL - eadar-obrachadh F (3,132) = 3.61, P <0.05, genotype F (1,132) = 480.64, P <0.0001, ùine F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Ann an geàrr-chunntas, ann am buidhnean Àrd-cho-chruinneachaidhean (gun staonadh), sheall BxF roghainn deoch làidir seasmhach fhad ‘s a bha BxN a’ taisbeanadh roghainn deoch làidir nas ìsle agus anns na buidhnean Co-chruinneachaidhean Ìosal (gun staonadh), bha an dà chuid BxF agus B6xN a ’taisbeanadh roghainn deoch làidir seasmhach. Leis gu bheil na phenotypes inntinneach air an glacadh as fheàrr ann am buidhnean gun staonadh, tha iad mar fhòcas air a ’chòrr den sgrùdadh.

Figear 1  

Clàr deuchainneach airson ruigsinneachd leantainneach caitheamh ethanol saor-thoileach. a. Clàr deuchainneach airson buidhnean Co-chruinneachaidhean Ìosal agus Co-chruinneachaidhean Àrd. b. Clàr deuchainneach airson dùmhlachdan ìosal le amannan seasmhachd agus dùmhlachd àrd ...
Figear 2  

Tha roghainn ethanol an urra ri genotype agus dùmhlachd ethanol. a. Anns na buidhnean Àrd-cho-chruinneachaidhean, tha roghainn ethanol (caitheamh ethanol / caitheamh fluid iomlan) nas motha airson BxF na BxN agus tha e eadar-dhealaichte le dùmhlachd ethanol air a thabhann. b ...
Figear 3  

Tha caitheamh ethanol an urra ri genotype agus dùmhlachd ethanol. a. Anns na buidhnean Àrd-cho-chruinneachaidhean, tha caitheamh ethanol (g / kg / day ethanol fìor) nas motha airson BxF na BxN agus tha e eadar-dhealaichte le dùmhlachd ethanol air a thabhann. b. Anns na dùmhlachdan àrda ...
Figear 4  

Feinotypes giùlan roghainn deoch làidir seasmhach agus lughdaichte. Thathas a ’sealltainn coimeas eadar roghainn 9% ethanol bhon chiad, dàrna, treas, agus ceathramh taisbeanadh gus na phenotypes giùlain de roghainn deoch làidir seasmhach no lughdaichte a stèidheachadh. a. ...
Figear 5  

A ’cumail suas agus a’ lughdachadh phenotypes giùlan deoch làidir. Thathas a ’sealltainn gu bheil coimeas eadar caitheamh ethanol 9% bhon chiad, an dàrna, an treas agus an ceathramh taisbeanadh a’ stèidheachadh na phenotypes giùlain de chaitheamh deoch làidir seasmhach no lughdaichte. ...

Ìrean ΔFosB

Chaidh tomhas agus mion-sgrùdadh ΔFosB a chleachdadh gus neurocircuitry a chomharrachadh a chaidh a ghnìomhachadh gu cronail rè roghainn deoch làidir seasmhach agus lughdaichte. Bha trì buidhnean deuchainneach ann airson gach hibrid: Co-chruinneachaidhean Àrd, Co-chruinneachaidhean Ìosal, agus Uisge (Smachd). Tha dàta ΔFosB air a thaisbeanadh mar neadan dearbhach ΔFosB deimhinneach [(# de ΔFosB neurons adhartach) / (# de ΔFosB neurons adhartach + # de Nissl positive neurons)] (Clàr (Table1).1). Tha obair roimhe air sealltainn gum faod eòlas ethanol brosnachadh a thoirt do neurodegeneration [17]. Mar sin, rinn sinn sgrùdadh air àireamhan neuronal san sgrùdadh seo agus chan eil sinn ag aithris gu bheil eadar-dhealachadh mòr sam bith stèidhichte air genotype no buidheann airson na roinnean eanchainn a chaidh a thomhas san sgrùdadh seo. Chaidh na trì mion-sgrùdaidhean a leanas de dhàta ΔFosB a dhèanamh: 1) trì-slighe ANOVA (genotype x buidheann x sgìre eanchainn), 2) dà-shlighe ANOVA (roinn eanchainn x buidheann) airson gach genotype, agus 3) chaidh matrices co-dhàimh a leasachadh gus co-dhàimh a mhapadh lìonraidhean.

Clàr 1  

Àireamh sa cheud de Neurons Deimhinneach ΔFosB

Le ceumannan ath-aithris nochd ANOVA trì-shligheach (genotype x buidheann x roinn eanchainn) eadar-obrachadh genotype x roinn eanchainn [F (15,375) = 2.01, P <.05], buidheann x eadar-obrachadh sgìre eanchainn [F (15.375) = 1.99, P <0.01], agus prìomh bhuaidh sgìre eanchainn [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Sheall ceumannan ath-aithris ANOVA dà-shligheach (roinn eanchainn x buidheann) airson gach genotype gu robh prìomh bhuaidh de bhuidheann agus roinn eanchainn airson an dà chuid BxF agus BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, prìomh bhuaidh buidheann; F (15,374) = 25.64, P <.0001, prìomh bhuaidh sgìre eanchainn; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, prìomh bhuaidh na buidhne; F (15,360) = 23.73, P <.0001, prìomh bhuaidh genotype]. Nochd mion-sgrùdadh post-hoc sia eadar-dhealachaidhean buidhne cudromach airson BxN (Figear (Figear6a-c).6ac). Bha ìrean sa cheud ΔFosB nas àirde ann am buidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal na anns a ’bhuidheann Uisge ann an La, CeC / CeL, EW, agus VTA. Bha a ’cheudad ΔFosB nas àirde anns a’ bhuidheann Co-chruinneachaidhean Àrd na anns a ’bhuidheann Uisge ann an CeMPV. Bha a ’cheudad ΔFosB nas àirde anns a’ bhuidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal na anns a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Àrd ann an EW. Tha dàta ΔFosB airson a h-uile roinn eanchainn eile air a thomhas air a thaisbeanadh ann an Clàr Table1.1. Chaidh mion-sgrùdadh co-dhàimh Pearson a chleachdadh gus faighinn a-mach an robh% de neurons dearbhach ΔFosB ann an sgìre eanchainn sònraichte ceangailte ri caitheamh no roghainn ethanol. Sheall caitheamh agus roghainn ethanol co-dhàimh adhartach mòr le% ΔFosB anns an EW agus VTA de luchainn BxN (CO-DHÙNADH ETHANOL - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ETHANOL PREFERENCE - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 dha na h-uile).

Figear 6  

Bidh roghainn deoch làidir seasmhach agus lughdaichte a ’brosnachadh ΔFosB anns an amygdala, EW, agus VTA. Ceallan adhartach ΔFosB deimhinneach ann an roinnean den amygdala (a.), EW (b.), agus VTA (c.). dS an Iar- agus e. Ìomhaighean riochdachail de staining ΔFosB / Nissl ...

Chaidh an dàimh iom-fhillte am measg abairt ΔFosB, genotype, roinn eanchainn, agus caitheamh ethanol a sgrùdadh tuilleadh le bhith a ’cleachdadh mion-sgrùdadh prìomh phàirtean agus cruinneachadh rangachaidh. Nochd mion-sgrùdadh prìomh phàirtean gu robh a ’mhòr-chuid de chaochlaideachd (~ 80%) anns an dàta air a riochdachadh le co-phàirtean 5. Chaidh cruinneachadh rangachaidh gun stiùireadh (air a thional le daoine fa leth agus roinnean eanchainn) an uairsin agus chaidh òrdachadh a ’cleachdadh a’ chiad phrìomh phàirt (Figear (Figear7).7). Nochd an cruinneachadh fa leth pàtrain buidhneachaidh làidir, ach chan eil sin foirfe, stèidhichte air caitheamh ethanol, ge bith dè an genotype. Bha mòran de na luchagan ethanol-naïve a ’cruinneachadh còmhla agus a’ taisbeanadh nas lugha de ΔFosB na bha cuibheasach agus bha mòran de na luchagan a bha a ’nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach air an cruinneachadh còmhla agus a’ taisbeanadh ΔFosB nas motha na a ’chuibheasachd. B ’e an dà bhuidheann seo an fheadhainn as eadar-dhealaichte. Bha na trì buidhnean eadar iad a ’riochdachadh measgachadh nas motha na, nas lugha na, agus cuibheasach de luachan ΔFosB agus phenotypes òl ethanol.

Figear 7  

Chan eil ìrean ΔFosB air an stiùireadh le caitheamh ethanol a-mhàin. Chaidh cruinneachadh rangachaidh a dhèanamh agus tha am mapa teas mar thoradh air ìrean ΔFosB fa leth agus an caitheamh ethanol 9% co-fhreagarrach air a shealltainn. Uaine = ΔFosB nas lugha na ...

Deasbaireachd

Chaidh giùlan fèin-rianachd deoch làidir sònraichte a choimhead nuair a bhathar a ’dèanamh coimeas eadar dà shreath hybrid F1 de luchainn: Tha BxN a ’nochdadh nas lugha de roghainn deoch làidir às deidh eòlas le dùmhlachd àrd de dheoch làidir agus amannan stad fhad‘ s a tha BxF a ’nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach. Modailean BxF seasmhach, caitheamh àrd (roghainn deoch làidir seasmhach) agus modailean BxN ag òl meadhanach (nas lugha de roghainn deoch làidir). Bha plastachd neuronal (no gnìomhachd, mar a chaidh a thomhas le ìrean ΔFosB) eadar-dhealaichte a rèir eòlas ethanol, a ’toirt tuilleadh taic do dhreuchd bunaiteach de chuairteachadh neuronal sònraichte ann an roghainn deoch làidir seasmhach agus lughdaichte.

Airson an cuideam àrd a tha ag òl deoch làidir, C57BL / 6, tha roghainn agus caitheamh ethanol gu mòr an urra ri dùmhlachd tùsail ethanol, fad staonadh, agus fo-strain (C57BL / 6Cr no C57BL / 6J) [7,18]. Fhuair sinn a-mach gu robh an roghainn agus an caitheamh ethanol a chaidh fhaicinn ann an luchagan BxF gu cunbhalach nas àirde (agus nas seasmhaiche na ann am BxN) anns na ceithir clàran eadar-dhealaichte a chaidh a dhearbhadh. Cha deach an roghainn agus an caitheamh meadhanach meadhanach àrd ann am BxN a chumail suas ach le aon chlàr de dh ’òl cronail (Co-chruinneachaidhean Ìosal gun staonadh), fhad‘ s a chaidh lughdachadh ann an roghainn agus caitheamh leis na clàran-ama òil eile a chaidh a dhearbhadh. Tha roghainn deoch-làidir lùghdaichte BxN a ’tabhann modail beathach ùr-nodha anns am bi eòlas (taisbeanadh cunbhalach de ethanol às deidh eòlas le grunn cho-chruinneachaidhean àrd ethanol agus / no grunn amannan goirid de bhith a’ stad) a ’lughdachadh gu mòr am freagairt aca gu dùmhlachd ethanol a b’ fheàrr leotha roimhe.

Bidh ethanol fèin-rianachd agus air a rianachd le deuchainnean a ’toirt a-mach diofar mhapaichean metabolail eanchainn, a’ moladh gu bheil cuairteachadh sònraichte mar bhunait ri buaidhean ath-neartachaidh ethanol [8,9]. Rinn sinn deuchainn air a ’bheachd gu bheil na phenotypes giùlan roghainn deoch làidir seasmhach agus lughdaichte air an riochdachadh le cinneasachadh eadar-dhealaichte den fhactar tar-sgrìobhaidh inducible, ΔFosB, ann an roinnean eanchainn a tha aithnichte a bhith an sàs ann an duais, aversion, agus cuideam. Tha ΔFosB na fhactar tar-sgrìobhaidh le seasmhachd fad-ùine sònraichte agus chan eil e a ’desensitize gu brosnachaidhean mar a bhios c-Fos a’ dèanamh, ach bidh e a ’cruinneachadh rè leigheasan broilleach. Tha àrdachadh ann an ΔFosB mar thoradh air barrachd gnìomhachd neuronal agus thathas den bheachd gu bheil iad a ’nochdadh plastachd neuronal a mhaireas ùine mhòr. Fhuair sinn a-mach gu bheil an àireamh sa cheud de neurons dearbhach ΔFosB ann an roinnean eanchainn an urra ri genotype (BxF agus BxN) agus buidheann (Smachd uisge, Co-chruinneachaidhean Ìosal, agus Co-chruinneachaidhean Àrd).

Fno BxN, sheall mion-sgrùdadh post-hoc gun robh caitheamh ethanol saor-thoileach a ’leantainn gu barrachd ΔFosB ann an niuclas EW, VTA, agus amygdala: a’ nochdadh barrachd plastachd neuronal ann an roinnean eanchainn a tha aithnichte a bhith an sàs ann am freagairtean ethanol, duais, agus cuideam. Tha luchagan BxN anns a ’bhuidheann High Concentrations (roghainn nas lugha de dheoch làidir) air plastachd neuronal a lughdachadh anns an EW, a’ moladh gum bi na neurons sin a ’dèiligeadh ri deoch làidir le plastachd a tha an urra ri eòlas. Anns a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal (air a thaisbeanadh roghainn deoch làidir seasmhach), tha plastachd neuronal anns an EW nas motha na anns na buidhnean dùmhlachd àrd agus smachd uisge. Ged a chaidh a dhèanamh a ’cleachdadh diofar phàtranan òil ethanol agus modalan luch ginteil, tha na co-dhùnaidhean againn ann an luchagan EW de BxN ag aontachadh le sgrùdaidhean caitheamh ethanol roimhe [14,15]. Chaidh an EW neo-preganglionic a chomharrachadh o chionn ghoirid mar a bhith a ’toirt a-steach peroculomotor urocortin (Ucn) - a’ cumail suas neurons [19]. Tha Ucn1 na fhactar leigeil ma sgaoil corticotropin (CRF) - coltach ri peptide a tha a ’ceangal gabhadairean CRF1 agus CRF2. Tha sgrùdaidhean roimhe a ’cleachdadh dòighean ginteil, cungaidh-leigheis, agus lesion air sealltainn gu bheil Ucn1 an sàs ann a bhith a’ riaghladh caitheamh deoch làidir [19-22]. T.an seo tha ro-innse ginteil aithnichte airson ìre àrd de dheoch làidir ann an creimich a tha ceangailte ri ìrean basal nas àirde de Ucn1 ann an EW agus LSi [23]. Mar sin, cha robh dùil ris an dìth brìgh post-hoc a chunnaic sinn ann an EW airson deoch làidir àrd a b ’fheàrr agus a’ caitheamh luchainn BxF. Is dòcha gu bheil seo mar thoradh air na h-ìrean ΔFosB sa cheud beagan nas àirde ann am buidheann uisge BxF an coimeas ri buidheann uisge BxN. Gu dearbh, bha na h-ìrean sa cheud ΔFosB airson a h-uile luchainn a bha a ’taisbeanadh roghainn deoch làidir seasmhach (buidheann BxF High Concentrations, buidheann BxF Low Concentrations, agus buidheann BxN Low Concentrations) gu math coltach.

Airson BxN, mheudaich caitheamh ethanol anns a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal plastachd neuronal anns an VTA (nas motha na anns na buidhnean dùmhlachd àrd agus smachd uisge). Bha roghainn agus caitheamh ethanol cuideachd nas motha airson a ’bhuidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal. Bha an dìth brìgh post-hoc a chunnaic sinn ann an VTA airson deoch làidir àrd a b ’fheàrr agus a’ caitheamh luchainn BxF ris nach robh dùil agus dh ’fhaodadh seo a bhith mar thoradh air ìrean basal beagan nas àirde de ΔFosB anns a’ bhuidheann smachd uisge. Chaidh ìrean sa cheud ΔFosB àrdachadh beagan anns a ’bhuidheann uisge BxF an taca ri buidheann uisge BxN, ach bha na h-ìrean ΔFosB sa cheud gu math coltach airson a h-uile luchainn a bha a’ nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach (buidheann BxF High Concentrations, buidheann BxF Low Concentrations, agus buidheann BxN Low Concentrations) . Tha prìomh dhreuchd aig siostam dopamine VTA ann a bhith a ’meadhanachadh buaidhean ath-neartachaidh ethanol agus a’ gabhail pàirt ann an iomadh ceangal dà-thaobhach a tha cudromach airson ethanol agus giùlan co-cheangailte ri duais [24-26]. A bharrachd air an sin, tha na pròiseactan VTA gu niuclas amygdala agus EW. Thathas air sealltainn gu bheil radain a ’fèin-rianachd ethanol gu dìreach a-steach don VTA [27]. Cuideachd, bidh foillseachadh ethanol a ’meudachadh ìre losgaidh neurons dopaminergic ann an VTA [28,29]. Dh ’fhaodadh ìre losgaidh àrdachadh a bhith ceangailte ris an inntrigeadh ΔFosB anns an VTA a chunnaic sinn às deidh rianachd ethanol saor-thoileach cronail ann am BxN.

Tha eisimeileachd deoch làidir ag adhbhrachadh neuroadaptations fad-ùine, a ’leantainn gu stàitean tòcail àicheil; is e inneal cudromach ann an daingneachadh àicheil comharran bàillidh a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin (CRF) taobh a-staigh an amygdala [30]. Tha làimhseachadh cungaidh-leigheis de neurons anns an CeA air cuimseachadh air gabhadairean GABA, CRF, opioid, serotonin, dynorphin, agus norepinephrine [25,31-34]. G.Bidh antagonists ABA, a bharrachd air antagonists CRF, a ’lughdachadh caitheamh ethanol [32,33,35]. Bidh leòintean an CeA a ’lughdachadh ruigsinneachd leantainneach de chaitheamh ethanol saor-thoileach [36]. Tha na co-dhùnaidhean againn a ’toirt taic a bharrachd do dhreuchd airson CeA ann a bhith a’ riaghladh giùlan deoch làidir. Tha neurons GABAergic ann am meadhan amygdala a ’cruthachadh sluagh heterogeneous aig a bheil ceanglaichean a’ nochdadh co-cheangailte ris an t-susbaint peptide aca. Bidh na neurons GABAergic sin ag amalachadh gnìomhachd toraidh den CeA. Mar a chaidh ath-sgrùdadh ann an [Wee agus Koob (2010]), stha sgrùdaidhean everal air àite a chomharrachadh airson gabhadairean dynorphin agus kappa opioid ann an cumail suas agus àrdachadh ethanol intake [37]. O chionn ghoirid, tha Walker et al air dearbhadh gu bheil an antagonist gabhadair κ-opioid, no-binaltorphimine, taobh a-staigh an amygdala leudaichte gu roghnach a ’lughdachadh fèin-rianachd ethanol ann am beathaichean eisimeileach [38]. Tha soidhneadh gabhadair opioid Kappa fhathast na phrìomh ùidh ann an rannsachadh aig eadar-ghearradh cuideam, duais, agus strì. Chaidh a dhearbhadh cuideachd gu bheil fèin-rianachd ethanol a tha air a bhrosnachadh le cuideam air a mheadhanachadh le comharran gabhadair kappa opioid [39]. Faodar an CeA meadhanach a ro-roinn a-steach don lateo-capsular (CeL / CeC) agus ventral posterior ventral. Bidh neurons GABAergic den CeL / CeC a ’faighinn in-ghabhail dopaminergic bhon VTA; mar a chaidh ainmeachadh roimhe, tha na neurons sin air an cur an gnìomh às deidh rianachd ethanol gruamach agus a ’nochdadh barrachd luchainn ΔFosB a’ nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach. Cuideachd, faic Mc [Bride (2002]) airson lèirmheas sàr-mhath air CeA agus buaidh deoch làidir [40]. Anns an sgrùdadh againn, sheall luchainn BxN le roghainn deoch làidir seasmhach (buidheann Co-chruinneachaidhean Ìosal) barrachd plastachd neuronal anns na luchagan CeC / CeL agus La agus BxN le nas lugha de roghainn deoch làidir (buidheann dùmhlachd àrd) a ’nochdadh barrachd plastachd neuronal anns an CeMPV. Tha na co-dhùnaidhean sin a ’moladh gu bheil eòlas sònraichte ethanol a’ toirt a-steach plastachd ann an neurons GABAergic anns an amygdala. Leis an dàta seo, còmhla ri atharrachaidhean co-fhreagarrach ann am plastachd neuronal anns an VTA agus EW, tha sinn a ’moladh gum bi a’ chuairt seo fo phlastaig mhòr fo chumhachan seasmhach roghainn deoch làidir.

Tha rannsachadh roimhe air sealltainn gum faod luchagan C57BL / 6J ìrean àrda deoch làidir fala a choileanadh le bhith ag òl dà roghainn botal, ach chan eil na h-ìrean deoch làidir fala sin air an cumail suas agus gu tric chan eil an t-òl a ’coinneachadh ri slatan-tomhais airson brosnachadh cungaidh-leigheis a chuir Dole and Gentry (1984) a-mach [41,42]. Bha luchainn BxN a bha a ’taisbeanadh roghainn deoch-làidir nas lugha ag ithe nas lugha na bhiodh dùil bho luchag àbhaisteach C57BL / 6J [1]. Mar sin, ged nach do ghabh sinn sampallan deoch làidir fala, chan eil e coltach gun do choilean luchagan BxN a bha a ’sealltainn roghainn deoch-làidir nas ìsle ìrean deoch làidir fala buntainneach a thaobh cungaidh-leigheis, a’ moladh nach eil dùmhlachdan deoch làidir fala riatanach gus plastachd a bhrosnachadh air na roinnean eanchainn sin. Tha e cudromach toirt fa-near gu bheil buaidh fìor chudromach de bhuidheann cuideachd ann am BxF, eadhon ged nach do sheall toraidhean post-hoc (air an ceartachadh airson ioma-choimeas) airson roinnean eanchainn BxF atharrachaidhean mòra anns a ’cheud de neurons dearbhachFFB airson sgìre sam bith às deidh caitheamh ethanol cronach. leis na diofar chlàran sin.

Gus sealltainn na dàimhean a dh ’fhaodadh a bhith ann am measg caochladairean chaidh cruinneachadh rangachaidh a dhèanamh. Tha clàr teas an anailis a thig às a ’sealltainn gluasad coitcheann eadar ìrean ΔFosB agus caitheamh ethanol ge bith dè an genotype. Bha ìrean ΔFosB nas àirde co-cheangailte ri òl àrd agus bha ìrean ΔFosB nas ìsle ceangailte ri beathaichean smachd; ge-tà, cha robh neart an dàimh gu leòr gus ro-innse ceart a dhèanamh air phenotypes òl stèidhichte air ìrean ΔFosB a-mhàin.

Co-dhùnaidhean

Chaidh giùlan fèin-rianachd deoch làidir sònraichte a choimhead le dà shreath de luchainn F1: Tha BxN a ’sealltainn nas lugha de roghainn deoch làidir às deidh eòlas le dùmhlachd àrd de dheoch làidir fhad‘ s a tha BxF a ’nochdadh roghainn deoch làidir seasmhach. Modailean BxF seasmhach, caitheamh àrd (roghainn deoch làidir seasmhach) agus modailean BxN ag òl meadhanach (nas lugha de roghainn deoch làidir). Bha atharrachaidhean ann an plastachd neuronal (mar a chaidh a thomhas le ìrean ΔFosB) an urra ri eòlas, a bharrachd air roinn eanchainn- agus genotype-sònraichte, a ’mìneachadh tuilleadh mun chuairteachadh neuronal mar bhunait air taobhan brosnachail de chaitheamh ethanol. Tha na toraidhean sin a ’sealltainn gu bheil atharrachadh ann an aon loidhne phàrant ann an luchagan tar-chinealach a’ leantainn gu atharrachaidhean ann am pàtrain caitheamh deoch làidir agus atharrachaidhean comharraichte ann am pàtrain abairt ΔFosB, a ’moladh gu bheil lìonraidhean eanchainn sònraichte an sàs anns na luchagan eadar-dhealaichte sin.

Dòighean-obrach

Cùisean an Là

Chaidh an sgrùdadh seo a dhèanamh a rèir na molaidhean anns an Stiùireadh airson Cùram is Cleachdadh Bheathaichean Saotharlann nan Institiudan Nàiseanta Slàinte. Chaidh am protocol aontachadh le Comataidh Institiùid Cùram is Cleachdadh Bheathaichean Oilthigh Texas aig Austin (AUP 2010 - 00028). Chaidh a h-uile lannsa a dhèanamh fo anesthesia sodium pentobarbital, agus chaidh a h-uile oidhirp a dhèanamh gus fulangas a lughdachadh.

Animals

Chaidh sgrùdaidhean a dhèanamh a ’cleachdadh luchagan tar-chinealach boireann F1 a thàinig bho luchagan C57BL / 6J agus an dàrna cuid luchagan FVB / NJ no NZB / B1NJ (BxF F1 agus BxN F1, strain màthaireil x strain athair). Chaidh luchd-briodaidh C57BL / 6J, FVB / NJ, agus NZB / B1NJ a cheannach bho Shaotharlann Jackson (Bar Harbour, ME) agus chaidh an briodadh aig seachdainean 7 - 8. Chaidh clann a thoirt a-mach à buidhnean isosexual de gach genotypes (BxF F1, BxN F1). Rinn sinn deuchainn air dìreach luchagan boireann gus coimeas a dhèanamh comasach le dàta a chaidh a chruinneachadh roimhe [1,5,6]. Bha luchagan a ’fuireach ann an cèidsichean àbhaisteach le biadh is uisge air a thoirt seachad ad libitum. Bha seòmar a ’choloinidh agus an seòmar deuchainn air solas 12 h: cearcall dorcha 12 h (solais air adhart aig 07: 00).

Deuchainn roghainn dà roghainn botal ethanol

Chaidh an dà dhòigh roghainn botal a chleachdadh gus pàtrain fèin-rianachd ethanol saor-thoileach a dhearbhadh ann an luchagan BxF boireann agus BxN [1,6]. Bha luchagan boireann hybrid F1 (aois 63 làithean) air an cumail leotha fhèin ann an cèidsichean àbhaisteach fhad ‘s a bha iad a’ fuireach airson seachdain gu botail le tiùban sipper anns a bheil uisge mus deach fuasgladh ethanol a thoirt a-steach. An dèidh àiteachadh, bha cothrom aig luchagan air dà bhotal co-ionann: aon le uisge agus am fear eile le fuasgladh ethanol. Chaidh suidheachadh an tiùba atharrachadh gach latha gus smachd a chumail air roghainnean suidheachaidh. Gus cunntas a thoirt air dòrtadh agus falmhachadh a dh’fhaodadh a bhith ann, chaidh an cuideam cuibheasach a chaidh a thoirt bho phìoban ann an cèidsichean smachd gun luchainn a thoirt air falbh bho luachan òil fa leth gach latha. Chaidh luchagan a thomhas gach latha 4 tron ​​deuchainn. Chaidh a h-uile caitheamh fluid a thomhas gach latha tron ​​deuchainn. Chaidh an ìre de ethanol a chaidh a chaitheamh agus roghainn ethanol a thomhas airson gach luchag, agus bha na luachan sin cuibheasach airson gach dùmhlachd de ethanol. Chaidh buaidh dùmhlachd deoch làidir agus amannan staonadh air fèin-rianachd ann an luchagan BxF agus BxN a nochdadh le bhith a ’sònrachadh buidheann deuchainneach le ruigsinneachd air Co-chruinneachaidhean Àrd (a’ meudachadh ruigsinneachd gu fuasglaidhean ethanol 3-35%, air a leantainn le 3 ath-chuairtean de 9, 18, agus 27% ethanol, a ’crìochnachadh le taisbeanadh deireannach de 9% ethanol) agus buidheann eile le Co-chruinneachaidhean Ìosal (a’ meudachadh ruigsinneachd gu 3-9% ethanol, leis a ’chòrr den deuchainn air a dhèanamh le ruigsinneachd air 9% ethanol). Bha fo-bhuidheann aig gach aon de na buidhnean sin a dh ’fhiosraich no nach d’ fhuair eòlas air trì amannan seachdaine. Bha luchagan smachd a ’faighinn suidheachaidhean coltach ris aig an aon àm ri luchagan deuchainneach, ach cha deach ach aon bhotal uisge a thabhann dhaibh.

Gu h-iomlan, bha còig buidhnean ann airson gach hibrid: Uisge (n = 14-16), Co-chruinneachaidhean Àrd (n = 10), Co-chruinneachaidhean Àrd le Ùine Abstinence (n = 20), Co-chruinneachaidhean Ìosal (n = 10), agus Co-chruinneachaidhean Ìosal le Ùine Abstinence (n = 20). Thoir sùil air Figear Fòram11 airson dà chlàr buidhne roghainn botail mionaideach.

ΔFosB Immunohistochemistry agus tomhas

Chaidh ΔFosB immunohistochemistry (IHC) a thomhas ann an 16 roinnean eanchainn bho luchainn a fhuair 72 latha de ruigsinneachd leantainneach gu uisge (Smachd) no uisge & deoch làidir [Co-chruinneachaidhean Àrd agus Co-chruinneachaidhean Ìosal]. Bha buaidh Co-chruinneachaidhean Àrd air roghainn agus caitheamh ethanol mòran nas motha na buaidh staonadh; mar sin, cha robh buidhnean aig an robh amannan staonadh air an gabhail a-steach ann an tomhais ΔFosB IHC. Nas fhaide, chaidh an deuchainn a dhèanamh nas fhaide na a ’chiad shealladh de roghainn deoch làidir seasmhach no lùghdaichte gus sealltainn gu bheil na phenotypes giùlain seasmhach le cuairtean cunbhalach de dh’ atharrachaidhean dùmhlachd ethanol gus sgrùdadh a dhèanamh air buaidhean caitheamh ethanol cronach. Ceithir gu ochd uairean a-thìde às deidh dhaibh deoch làidir a thoirt air falbh air an 73mh latha den deuchainn, chaidh luchainn a thoirt a-steach gu domhainn (175 mg / kg sodium pentobarbital) agus air an toirt a-steach gu intracardially le 20 ml de 0.01 M saline bufair fosfáit (PBS), agus an uairsin 100 ml de 4% paraformaldehyde ann am PBS. Chaidh brains a thoirt air falbh, post-seasta ann an 4% paraformaldehyde aig 4 ° C, freumhaichte ann an agarose 3%, air a roinn (50 um, coronal) air vibratome, air a chur ann an cryoprotectant (30% sucrose, 30% ethylene glycol, agus 0.1% polyvinyl pyrrolidone ann am PBS) thar oidhche aig 4 ° C, agus air a stòradh aig −20 ° C gus an tèid a ghiullachd airson IHC. Chaidh earrannan leaghte a nighe le PBS, an làimhseachadh le 0.3% H2O2, agus an toirt a-steach airson uair a-thìde ann an serum gobhar àbhaisteach 3% gus bileagan neo-shònraichte a lughdachadh. Chaidh earrannan fìnealta an uairsin a chuir a-steach thar oidhche aig 4 ° C ann an serum gobhar àbhaisteach 3% agus anti-FosB (SC-48, 1: 5000 dilution, Bith-theicneòlas Santa Cruz, Santa Cruz, CA). Chaidh earrannan a nighe, a thoirt a-steach ann an Ig an-aghaidh coineanach gobhar biotinylated (dilution 1: 200, Vector Laboratories, Burlingame, CA) airson uair a thìde, a nighe, agus a bhrosnachadh ann an iom-fhillte avidin-biotin (dilution 1: 200, Elite kit-Vector Laboratories) . Chaidh gnìomhachd peroxidase fhaicinn le ath-bhualadh le 0.05% diaminobenzidine (anns a bheil 0.015% H.2O2). Chaidh earrannan fìne a chuir an aghaidh Nissl (a ’cleachdadh methylene blue / azure II). Chaidh sleamhnagan a chòdachadh airson cunntadh dall. Chaidh neurons ΔFosB-IR a chunntadh aig meudachadh 50X (ola) a ’cleachdadh an dòigh fractionator optigeach agus bathar-bog coimpiutair StereoInvestigator. Fiosrachadh paramadair samplachaidh: bha am frèam cunntais (50um x 50um x 10um) an aon rud airson a h-uile sgìre a chaidh a thomhas; ge-tà, chaidh meud a ’ghriod a dhearbhadh airson gach sgìre eanchainn gus dèanamh cinnteach gum biodh cunntasan cealla dà-thaobhach iomlan co-ionann ri 100 - 300 gus co-èifeachd atharrachaidh nas lugha na 0.1 a choileanadh. Chaidh dàta a thomhas mar cheudad de niuclasan dearbhach ΔFosB (àireamh de niuclasan dearbhach ΔFosB / àireamh de neurons) airson gach sgìre.

Chaidh an antibody FosB a chaidh a chleachdadh san sgrùdadh seo (SC-48, Bith-theicneòlas Santa Cruz, Santa Cruz, CA) a thogail an aghaidh sgìre a-staigh de FosB agus tha e ag aithneachadh an dà chuid FosB agus ΔFosB. Ged a tha an antibody seo ag aithneachadh an dà chuid FosB agus ΔFosB, thèid na neurons immunopositive a chaidh a thomhas san sgrùdadh seo ainmeachadh mar neurons dearbhach ΔFosB bho chaidh a dhearbhadh gu bheil drogaichean mì-ghnàthachaidh, a ’toirt a-steach deoch làidir, gu sònraichte a’ brosnachadh ΔFosB, no FosB, ann an neurons. Perrotti et al. ([2008]) thomhais e inntrigeadh ΔFosB (mar fhreagairt do rianachd cronail dhrogaichean mì-ghnàthachaidh, a ’toirt a-steach deoch làidir) a’ cleachdadh dà antibodies: aon a tha ag aithneachadh FosB agus ΔFosB (SC-48) agus aon roghnach airson ΔFosB (nach eil ri fhaighinn gu malairteach) agus lorg e sin airson a h-uile droga air an sgrùdadh, tha an immunoreactivity a chaidh a choimhead a ’cleachdadh an antibody FosB (SC-48) mar thoradh air ΔFosB, leis nach do lorg iad neurons immunoreactive sam bith a’ cleachdadh antibody roghnach airson FosB làn-fhaid [10]. A bharrachd air an sin, tha fios gu bheil ΔFosB air a bhrosnachadh ann an dòigh eanchainn sònraichte agus seòrsa cealla, le diofar leigheasan cronail agus tha lèirmheasan sàr-mhath rim faighinn air a ’chuspair seo [11,43,44].

Giorrachaidhean agus àiteachan structaran neuroanatomical

Il - cortex infralimbic (+1.70 mm); Cg1 - cortex cingulate 1 (+1.1 mm); Cg2 - cortex cingulate 1 (+1.10 mm); Cridhe NAcc - cridhe niuclas accumbens (+1.10 mm); Slige NAcc - slige niuclas accumbens (+1.10 mm); LSi - eadar-mheadhanach septum fadalach (+1.10 mm); La - amygdala fadalach (−1.22 mm); Bla - amygdala basolateral (−1.22 mm); CeC / CeL - meadhan capsular agus amygdala fadalach sa mheadhan (−1.22 mm); CeMPV - cuibhreann posterioventral medial de phrìomh niuclas an amygdala (−1.22 mm); PAG - liath periaquaductal (−3.64 mm); EW - niuclas Edinger-Westphal (−3.64 mm); VTA - sgìre teasach ventral (−3.64 mm); DR - raphe dorsal (- 4.60 mm); PBN - niuclas parabrachial (−5.2 mm); NTS - niuclas tractus solitarius (−6.96 mm). Brain na luchaige ann an co-chomharran stereotaxic[45] chaidh a chleachdadh gus aon no trì earrannan a mhaidseadh gu cuspaireil airson tomhas gach sgìre eanchainn.

Modhan staitistigeil

Thathas ag aithris air dàta mar a ’chuibheasachd ± SEM, ach a-mhàin far a bheil a chaochladh air a chomharrachadh. Mar as trice chaidh dàta a sgaoileadh. Chaidh staitistig a dhèanamh a ’cleachdadh Statistica dreach 6 (StatSoft, Tulsa, OK, na SA) agus dreach GraphPad Prism 4.00 (Bathar-bog GraphPad, San Diego, CA, USA). Chaidh ceumannan ath-aithriseach ANOVA dà-shligheach a dhèanamh airson caitheamh ethanol agus dàta roghainn gus eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean a mheasadh. Chaidh ANOVAan dhà no trì a dhèanamh airson dàta ΔFosB gus eadar-obrachaidhean agus prìomh bhuaidhean airson buidheann (Co-chruinneachaidhean Àrd, Co-chruinneachaidhean Ìosal, agus Uisge), roinn eanchainn, agus genotype a mheasadh. Chaidh ceartachadh Bonferroni airson ioma-choimeas agus post-hoc Bonferroni a dhèanamh nuair a bha sin iomchaidh. Gu sònraichte, smaoinich sinn gum biodh an cuideam agus duais cuairteachaidh air FosB a mheudachadh ann an luchagan a ’sealltainn nas lugha de roghainn deoch làidir. Airson gach crois tar-chinealach, chaidh r Pearson a chleachdadh gus làthaireachd co-cheangalan cudromach eadar ìrean ΔFosB a chomharrachadh agus roghainn agus caitheamh ethanol ann an luchagan le eòlas ethanol.

Chaidh cruinneachadh rangachaidh a dhèanamh gus sealltainn mar a tha an dàta ag atharrachadh agus gus measadh a dhèanamh air mar a tha am buidheann dàta còmhla. Chuir luachan meadhanaichte barraichte an àite dàta ΔFosB a chaidh a chall, nach robh nas àirde na 15% den dàta. Ged a tha barrachd mì-chinnt ann na bhiodh na luachan barantaichte air an cumail ann an da-rìribh, feumaidh mion-sgrùdadh trusaidh rangachaidh ballrachd iomlan no cuir às gu tur airson coimeasan cùis-glic. Chaidh cruinneachadh rangachaidh a dhèanamh a ’cleachdadh dòigh Ward agus chaidh na cruinneachaidhean a thàinig às an òrdugh leis a’ chiad phrìomh phàirt de sgrùdadh prìomh phàirtean (JMP®, Version 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). Airson buidhnean le eòlas uisge agus ethanol, chaidh an dàta ΔFosB airson gach sgìre eanchainn a chruth-atharrachadh le sgòr-z agus chaidh mion-sgrùdadh prìomh phàirtean a dhèanamh gus an àireamh de fhuaraidhean a dhearbhadh. Bha an dàta an uairsin air a thàthadh le roinnean eanchainn agus daoine fa leth a ’cleachdadh mion-sgrùdadh trusaidh hierarchical fo stiùir.

Gnothaichean co-fharpais

Tha na h-ùghdaran ag ràdh nach eil com-pàirt sam bith aca.

Tabhartasan ùghdaran

Chuir ARO, YAB, RAH, TAJ ri dealbhadh an sgrùdaidh. Fhuair ARO an dàta. Rinn ARO, IP, RDM mion-sgrùdadh air an dàta. Bha ARO, RDM, IP, TAJ, YAB, agus RAH an sàs ann a bhith a ’dreachdadh agus ag ath-sgrùdadh an làmh-sgrìobhainn. Leugh agus ghabh na h-ùghdaran ris an làmh-sgrìobhainn dheireannach.

Buidheachas

Bu mhath leinn taing a thoirt dha Drs. Jody Mayfield agus Colleen McClung airson còmhraidhean feumail agus Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour, agus Darshan Pandya airson taic theicnigeach. Fhuair an rannsachadh seo taic bhon Iomairt Neuroscience Integrative air Tabhartas Co-bhanntachd Deoch Làidir AA13520, agus Tabhartasan Institiud Nàiseanta air Mì-chleachdadh Deoch Làidir agus Deoch Làidir AA06399-S agus AA16424.

iomraidhean

  • Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. An uirsgeul uisge teine ​​agus freagairt do dheoch làidir ann an Innseanaich Misean. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [Sgaoileadh]
  • Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Toraidhean thar fo-bhuidhnean a thaobh ìre freagairt deoch làidir mar fhactar cunnairt airson eas-òrdughan cleachdadh deoch làidir: sluagh colaiste de bhoireannaich agus Latinos. Res Clin Clin Alcohol. 2004;10: 1499-1508. [Sgaoileadh]
  • Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Caitheamh saor-thoileach de ethanol ann an sreathan luch 15 a-steach. Eòlas-inntinn. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Bidh luchagan C57BL / 6J x FVB / NJ ag òl barrachd deoch làidir na tha luchagan C57BL / 6J. Res Clin Clin Alcohol. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Luchagan hibrid mar mhodalan ginteil de chaitheamh àrd deoch làidir. Giùlan Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. Eadar-dhealachaidhean giùlain eadar luchagan hybrid C57BL / 6JxFVB / NJ agus C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1: a thaobh smachd air toirt a-steach ethanol. Giùlan Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Leasachadh buaidh bochdainn deoch làidir agus àrdachadh ann an C57BL / 6J. Res Clin Clin Alcohol. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Buaidhean fèin-rianachd ethanol agus ethanol / sucrose air ìrean cleachdadh glucose cerebral ionadail ann am radain. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [Sgaoileadh]
  • Williams-Hemby L, Porrino LJ. Bidh dòsan ìosal agus meadhanach de ethanol a ’toirt a-mach pàtrain sònraichte de dh’ atharrachaidhean metabolach cerebral ann am radain. Res Clin Clin Alcohol. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, DJ Knapp, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Pàtranan eadar-dhealaichte air inntrigeadh DeltaFosB san eanchainn le drogaichean de dhroch-dhìol. Sinapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • McClung CA, Ulery PG, LI Perrotti, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: gluasad moileciuil airson atharrachadh ùine-fhada san eanchainn. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [Sgaoileadh]
  • Bidh Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB a ’cruinneachadh ann an sluagh cealla GABAergic ann an earball posterior na sgìre teasach ventral às deidh làimhseachadh psychostimulant. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Ryabinin AE, Wang YM. Bidh rianachd deoch làidir a-rithist a ’toirt buaidh eadar-dhealaichte air immunoreactivity pròtain c-Fos agus FosB ann an luchagan DBA / 2J. Res Clin Clin Alcohol. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. Abairt ITF ann an eanchainn luch aig àm a bhith a ’faighinn fèin-rianachd deoch làidir. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Bidh òl deoch làidir a ’toirt a-mach atharrachaidhean roghnach sgìre eanchainn ann a bhith a’ cur an cèill factaran tar-sgrìobhaidh oideachail. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Kalivas PW. Ciamar a cho-dhùineas sinn dè na h-atharrachaidhean neuroplastic a tha air an adhbhrachadh le drogaichean a tha cudromach? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Sgiobaidhean FT, Nixon K. Innealan neurodegeneration agus ath-nuadhachadh ann an deoch làidir. Deoch làidir. 2009;44: 115 - 127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Crois Ref]
  • Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Caractar a ’bhuaidh ethanol-bochdainn ann an substrains de luchagan C57BL / 6. Deoch làidir. 2006;40: 119 - 126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Tha cuairteachadh Urocortin 1 ann an eanchainn luch an urra ri cuideam. Eun-eòlas. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Ryabinin AE. Bidh leòintean de niuclas Edinger-Westphal ann an luchagan C57BL / 6J a ’cur dragh air hypothermia a tha air a bhrosnachadh le ethanol agus caitheamh ethanol. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Bidh microocjection Urocortin 1 a-steach do septum fadalach na luchaige a ’riaghladh togail agus cur an cèill caitheamh deoch làidir. Eun-eòlas. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Abairt Urocortin 1 ann an còig paidhrichean de loidhnichean radan air an briodadh gu roghnach airson eadar-dhealachaidhean ann an òl deoch làidir. Eòlas-inntinn. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Ryabinin AE, Weitemier AZ. An neurocircuit urocortin 1: ethanol-cugallachd agus a bhith an sàs ann an caitheamh deoch làidir. Brain Res Rev. 2006;52: 368 - 380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Fèin-rianachd deoch làidir: dreuchd dopamine mesolimbic. Ann Acad Acad Sgi. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • McBride WJ, Li TK. Modalan beathach deoch làidir: neurobiology de ghiùlan àrd deoch-làidir ann an creimich. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Targaidean neurocircuitry ann an duais agus eisimeileachd ethanol. Res Clin Clin Alcohol. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Fèin-rianachd intracranial de ethanol taobh a-staigh sgìre teasach ventral radain Wistar fireann: fianais airson a bhith an sàs le neurons dopamine. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Bidh dòsan ìosal de ethanol a ’gnìomhachadh neurons dopaminergic anns an sgìre teasach ventral. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Bidh ethanol a ’meudachadh ìre losgaidh neurons dopamine ann an sgìre teascal ventral radan in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Heilig M, Koob GF. Tha e na phrìomh phàirt de fhactaraidh a bhith a ’sgaoileadh corticotropin a thaobh a bhith an urra ri deoch-làidir. Trends Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Dyr W, Kostowski W. Fianais gu bheil an amygdala an sàs ann am buaidhean bacaidh antagonists gabhadair 5-HT3 air òl deoch làidir ann am radain. Deoch làidir. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. Buaidhean antagonists CRF1-receptor agus opioid-receptor air àrdachadh a tha air a bhrosnachadh le eisimeileachd ann an òl deoch làidir le radain as fheàrr le deoch-làidir (P). Res Clin Clin Alcohol. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Hyytiä P, Koob GF. Bidh antagonism gabhadair GABAA anns an amygdala leudaichte a ’lughdachadh fèin-rianachd ethanol ann am radain. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Bidh ethanol a ’meudachadh sgaoileadh GABAergic aig gach làrach ro- agus postynaptic ann an neurons rat amygdala. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Bidh intc-amygdala muscimol a ’lughdachadh fèin-rianachd ethanol obrachail ann am radain eisimeileach. Res Clin Clin Alcohol. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Lùghdaich dragh deuchainneach agus caitheamh ethanol saor-thoileach ann am radain a ’leantainn leòintean amygdala meadhanach ach chan e basolateral. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Wee S, Koob GF. Dreuchd an t-siostam opioid dynorphin-kappa ann a bhith a ’daingneachadh buaidhean dhrogaichean droch dhìol. Eòlas-inntinn (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. A ’cuimseachadh air siostaman gabhadair opioid dynorphin / kappa gus làimhseachadh ana-cleachdadh deoch làidir agus eisimeileachd. Deoch làidir. 2012;46: 359 - 370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Meadhanachadh endogenous kappa-opioid de potentiation air a bhrosnachadh le cuideam de roghainn àite ethanol-conditioned agus fèin-rianachd. Eòlas-inntinn (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • McBride WJ. Niùclas meadhanach an amygdala agus buaidh giùlan deoch làidir is deoch làidir ann an creimich. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Dole VP, Gentry RT. A dh ’ionnsaigh analogue de dheoch làidir ann an luchagan: Factaran sgèile anns a’ mhodail. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Dole VP, Gentry RT. A dh ’ionnsaigh analogue de dheoch làidir ann an luchagan: Slatan-tomhais airson a bhith ag aithneachadh deoch làidir le cungaidh-leigheis. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Nestler EJ. Neurobiology moilecular de thinneas. Am J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: eadar-mheadhanair moileciuil de plasticity neural agus giùlan fad-ùine. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [Sgaoileadh] [Crois Ref]
  • Franklin KJ, Paxinos G. An eanchainn luch ann an co-chomharran stereotaxic. 2. San Diego, CA: Acadaimigeach; 2001.