Cruthadh cnàimh dendritic a tha air a bhrosnachadh le cocaine ann an neurons meadhain spàineach le dromnine d1 agus D2 ann an nucleus accumbens (2006)

Proc Natl Acad Sci SA A. Feb 28, 2006; 103 (9): 3399 – 3404.
Foillsichte air-loidhne Feb 21, 2006. doi:  10.1073 / pnas.0511244103
PMCID: PMC1413917
Neuroscience
Tha an artaigil seo air a bhith air ainmeachadh artaigilean eile ann am PMC.

Abstract

Chaidh atharrachadh air spines dendritic a dh'adhbharaich an neach-inntinn air niùclairean dopaminoceptive ann an accumbeus nuumbens (NAcc) a dh ’fhaodadh a bhith air a ghabhail a-mach mar fhreagairt neuronal freagarraich a tha ceangailte ri giùlanan tràilleachd maireannach. Tha NAcc sa mhòr-chuid air a dhèanamh suas de dhà fho-bhuille air leth de neurons spàinteach meadhanach mòr a ’nochdadh ìrean àrda de luchd-gabhail dopamine D1 no D2. Anns an sgrùdadh a th ’ann an-dràsta, rinn sinn anailis air dùmhlachd droma dendritic an dèidh làimhseachadh cnain mhòir aig an àm ri teachd ann an neuroin spàinteach meadhanach mòr D1 no D2 anns na NAcc. Bha na sgrùdaidhean sin a ’dèanamh feum de luchachan tar-ghinealach a chuir EGFP an cèill fo smachd an neach-taic D1 no D2 (Drd1-EGFP no Drd2-EGFP). As dèidh làithean 28 de dh ’leigheas cocaine agus làithean 2 de tharraing a-mach, dh'èirich àireamh an cnàimh-droma ann an neurons Drd1-EGFP- agus Drd2-EGFP-deimhinneach. Ach, cha robh an àrdachadh ann an dùmhlachd cnàimh-droma air a chumail suas ach ann an làithean Drd1-EGFP-deimhinneach 30 às deidh toirt air falbh dhrogaichean. Gu sònraichte, chunnacas barrachd ΔFosB abairt ann an neurons Drd1-EGFP-agus Drd2-dearga às deidh làithean 2 a thaobh toirt air falbh dhrogaichean ach dìreach ann an neurons Drd1-EGFP-deimhinneach às deidh làithean 30 airson toirt air falbh dhrogaichean. Tha na toraidhean sin a ’moladh gu bheil an dùmhlachd droma meudaichte a th’ ann às deidh làimhseachadh a ’chaochain chinealach seasmhach ach ann an neurons anns a bheil D1-receptor agus gu bheil ΔFosB abairt co-cheangailte ri cruthachadh agus / no cumail suas spines dendritic ann an D1 a thuilleadh air neurons gabh-chuir D2 ann an NAcc.

Tha an t-slighe mesopimergic mesolimbic air a dhèanamh de neurons anns an sgìre fosgarrach fionnarach a tha a ’toirt a-steach an niùclas accumbens (NAcc), a’ chabair-chrom-dhearg, cortex ro-reultach, agus amygdala (1), a ’toirt seachad niùclairean dopaminergic nigrostriatal anns an subsia nigra (pars compacta) a’ toirt seachad tuairmeas dìridh gu striatum dorsal (2). Bidh psychostimulants a ’toirt àrdachadh air co-chruinneachaidhean sioncopach de dopamine ann an NAcc: cocaine, le bhith a’ cur às do dhopamine bho bhith a ’faighinn às an t-sionaicic, agus amphetamine, le bhith a’ brosnachadh sgaoileadh dopamine bho cheann-uidhe nearbh (3-5). Bidh rianachd ath-shealach, eadar-amail de thinneas nan euslaintich a ’toirt a-mach freagairtean giùlain àraichte (mothachaidh) ri buaidhean gluasadach dian nan drugaichean seo (6-8). Tha a ’mhòr-chuid de loidhnichean fianais a’ nochdadh gu bheil atharrachaidhean atharrachail ann an sgìre meudachd ventral – NAcc dopaminergic aig teis-meadhain atharrachaidhean ann am plaideas a tha an crochadh air eòlas a tha an urra ri giùlan dhrogaichean.

A bharrachd air dopamine, tha feum air glutamate airson a bhith a ’leasachadh mothachaidh giùlain ann an fhreagairt le psychostimulants (9, 10). Bidh neòin-eanchainn meadhanach mòr (MSNs) ann an ventral striatum a ’faighinn ro-mheasaidhean glutamatergic gun chiall bho cortex ro-dhìreach a tha a’ toirt air cinn cinn spines dendritic. Tha MSN cuideachd mar a ’phrìomh thargaid airson axons dopaminergic a tha a’ sioncronadh air spìcean droma (1, 11, 12). Mar sin, tha spines dendritic ann an MSN a ’riochdachadh an roinn ceallach far a bheil tar-chur dopaminergic agus glutamatergic air am filleadh a-steach an toiseach.

Bidh dopamine ag obrachadh air dà phrìomh fho-choinneachadh gabhaltach, an fo-bhroinn D1 (D1 agus D5 subtypes) agus an D2 subfamily (D2, D3, agus fo-bhric D4) (13). Ann an dorsal striatum, tha sgrùdaidhean anatamaigeach air sealltainn gu bheil ìrean àrd de ghabhadain D1 ann an MSNs striatonigral (còmhla ri stuthan P agus dynorphin), ach sa mhòr-chuid bidh MSNan striatopallach a ’toirt a-steach innealan D2 (còmhla ri enkephalin) (14-17). Tha na ro-mheasaidhean bho NAcc nas toinnte na ann an striatum dorsal, le slige agus prìomh phàirtean na NAcc a ’stobadh gu fo-roinnean eadar-dhealaichte den ventral pallidum agus don sgìre reusanta fosgarrach agus sumia nigra (18). Ged a tha luchd-gabhail D2 agus enkephalin air an cur an cèill gu mòr ann an ro-mheasaidhean don vental pallidum, lorgar gabhadan D1 agus susbaint P an aon rud ann an ro-mheasaidhean gu ceàrnaidh vental pallidum agus ventral definitionlex (19). Nochd sgrùdaidhean air luchd-dèanaidh agus gaisgearan airson luchd-gabhail D1 no D2 gu bheil feum air luchd-gabhail D1 agus D2 airson atharrachaidhean giùlain anns a bheil earbsa saothrachadh (20-25). Ach, tha coltas gu bheil dreuchdan nan gabhadan seo eadar-dhealaichte. Mar eisimpleir, a ’brosnachadh ghlacadairean D1 attenuates cocaine a tha a’ sireadh le bhith a ’toirt seachad bho in-steallaidhean cocaine bunanachadh agus leigheasan àrainneachdail co-cheangailte ri cocaine, ach le bhith a’ brosnachadh gabhadan D2 ath-shuidheachadh a ’toirt taic do chocàin (26-28).

Tha na h-ìobairtean giùlain a tha co-cheangailte ri tràilleachd Psychostimulant beò airson ùine mhòr. Mar sin, tha ùidh mhòr ann a bhith ag aithneachadh atharrachaidhean fad-ùine air an toirt air adhart le drogaichean aig ìre moilecular agus structarail ann an cuairtean neuronon a tha air an riaghladh le dopamine agus glutamate (29-32). Gu sònraichte, chaidh faighinn a-mach mu bhith a ’nochdadh gu fad-ùine air cocaine no amphetamine an àireamh de phuingean meuran dall-chluasach agus cnàimhean droma MSNs ann an NAcc (33-35). Chaidh a dhearbhadh gun lean na h-atharrachaidhean structarail seo suas gu for1 – 3.5 mìosan às deidh an nochdadh dhrogaichean mu dheireadh (30, 35agus agus thathar air a bhith air am moladh a bhith a ’dèanamh atharrachadh fad-ùine ann am plastaidheachd synaptic a tha co-cheangailte ri bhith a’ fosgladh gu furasta.

B 'e amas an rannsachaidh seo sgrùdadh a dhèanamh air atharrachaidhean structarail air cleachdadh cocain air spines dendritic ann an fo-dhùbhlain de MSN a tha a ’toirt a-steach gabhadan D1 no D2. Anns na sgrùdaidhean sin, tha sinn air luchain tar-chuir chnòmasach bitheagach (BAC) a chleachdadh a chuireas an EGFP an cèill fo smachd neach-gabhail dopamine D1 (Drd1-EGFP) no D2 (Drd2-EGFP) (36). Tha na toraidhean a ’sealltainn gu bheil, ged a tha barrachd dùmhlachd ann an cnàmh droma a’ tachairt an toiseach ann am MSNs a tha a ’gabhail a-steach D1 agus MSNs a tha a’ gabhail a-steach do D2, gu bheil an dùmhlachd-droma ath-leasaichte seasmhach dìreach ann an neurons le D1 a tha a ’gabhail a-steach. A bharrachd, bidh sinn a ’lorg atharrachaidhean co-ionann ann an abairt an fhactair tar-sgrìobhaidh ΔFosB, a’ moladh gum faod ΔFosB a bhith an sàs ann an cruthachadh agus / no cumail suas spines dendritic ann an D1 a bharrachd air neurons anns a bheil D2 a tha a ’gabhail a-steach ann an NAcc.

toraidhean

Anailis air MSNs ann an Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP BAC Transgenic Mice.

Tha am pàtran tilgeil de MSNs bho striatal droma agus ventral ann an luchag transgenic Drd1-EGFP no Drd2-EGFP BAC air a chomharrachadh le mion-sgrùdadh air abairt GFP (36). Bidh an abairt eadar-dhealaichte de GFP ann am MSNs de striatum dorsal mar as trice a ’freagairt ri gabhadain D1 neo D2 in-ghabhaltach, fa leth (36). Rinn sinn anailis a bharrachd air abairt eadar-dhealaichte de GFP ann an NAcc ann an luchag Drd1-EGFP no Drd2-EGFP (Fig. 1a agus b). Ged a chuir ≈58% de neurons ann an NAcc GFP an cèill ann an luchag Drd1-EGFP (Fig. 1a), Chuir ≈48% de neurons ann an NAcc GFP an cèill ann an luchagan Drd-2-EGFP (Fig. 1b). Tha MSNan a ’riochdachadh 90 – 95% de na neurons uile ann an NAcc (12, 37). Tha gabhadain D1 air an cur an cèill a-mhàin ann am MSNs, agus tha gabhadain D2 air an cur an cèill ann am MSNs agus ann an eadar-amaran colinergic, a tha a ’riochdachadh 1 – 3% de neurons striatal (37). Le bhith a ’toirt nan nithean sin fa-near, tha na toraidhean a’ moladh gu bheil, gu ìre bheag, ≈10 – 15% de MSNs ann an NAcc dualtach an dà chuid D1 agus glacadairean D2 a chur an cèill.

Fig. 1. 

Mion-sgrùdadh air MSNs ann an Drd1-EGFP agus luchaichean Drd2-EGFP. (a agus b) Sliseagan stèidhichte san eanchainn bho NAcc de Drd1-EGFP (a) no Drd2-EGFP (b) Chaidh luchaichean tar-chuir BAC a thoirt a-steach airson GFP agus NeuN (mar chomharradh neuronal coitcheann). Tha na dealbhan aonaichte a ’sealltainn, ann an dath buidhe, colocalization ...

Anailis air Spines Dendritic ann an Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP Mice.

Bha abairt GFP anns na luchaichean Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP feumail gus buidhnean cealla neuronal a shaoradh. Ach, bha an comharra GFP ann an dendrites agus spines dendritic ro lag airson am mion-sgrùdadh a cheadachadh às deidh dìonadh le antibodies an aghaidh GFP. Chaidh lìbhrigeadh dathach de chraobhan de fhlùraichean flùranach le meadhanan a chleachdadh bho chionn ghoirid gus àireamhan neuronal a chomharrachadh ann an dòigh luath agus èifeachdach (38). Faodar neurons a thoirt a-steach le bhith a ’cleachdadh an dòigh-obrach seo, agus a rèir coltais tha an dòigh coltach ri bhith a’ dèanamh an coltas dha Golgi – Cox. Gus sgrùdadh a dhèanamh air morf-eòlas dendritic neurons ann an NAcc, chaidh sliseagan cruinn stèidhichte a chomharrachadh le dath floparce lipophilic 1,1′-diotadecyl-3,3,3 ′, perllorate 3'-tetramethylindocarbocyanine (DiI) le bhith a ’cleachdadh gunna gine. Tha eisimpleir de MSN air a dhathte le DiI air a shealltainn ann Fig. 1c. Fo na cumhaichean a chleachdar, b ’àbhaist dhuinn a bhith a’ coimhead air neurronan le ainm gun stuthan a bhith a ’gabhail thairis bho neurons eile le comharraidhean. Le barrachd meudachaidh, dh ’fhaodar coimhead air morf-eòlas dendritic mionaideach, a’ gabhail a-steach spines dendritic, (Fig. 1d).

Chleachd sinn an uair sin measgachadh de bhileagan DiI agus immunohistochemistry airson GFP ann an luchagan tar-chuir Drd1-EGFP no Drd2-EGFP, a chaidh a dhèanamh comasach le bhith a ’cleachdadh dùmhlachadh ìosal de ghlan-ghaisgich airson casg na maoth (faic Dòighean-obrach). Le bhith a ’coimeas gu faiceallach air an abairt DiI stain agus GFP ann am buidhnean cealla MSNs, dh’ fhaodadh sinn neurons DiI- agus GFP-deimhinneach no DiI-deimhinneach agus GFP-diúltach aithneachadh ann an Drd1-EGFP (Fig. 2a) no Drd2-EGFP (Fig. 2bc) luchainn. Airson nan sgrùdaidhean a leanas, rinn sinn anailis air morf-eòlas dendritic ann an neurons DiI- agus GFP-deimhinneach a-mhàin bho Drd1-EGFP no luchag Drd2-EGFP.

Fig. 2. 

Mion-sgrùdadh air spines dendritic ann an luchaichean Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP. Neurons ann an NAcc de luchaichean Drd1-EGFP (ano) luchag Drd2-EGFP (b) an toiseach air an comharrachadh le DiI (dearg) agus an uairsin a ’leantainn le immunohistochemistry a’ cleachdadh anti-GFP antibody (EGFP, uaine). Dìreach a-mhàin ...

Toraidhean Droch Cocaine ann an Barrachd Spine Dlàth ann am MSNs Cruinn a ’Nochdadh An dara cuid Drd1-EGFP no Drd2-EGFP.

Chaidh luchaichean Drd1-EGFP no Drd2-EGFP an cur a-steach uair is uair le cocaine (30 mg / kg) no salann airson ceithir seachdainean an dèidh a chèile (faic Dòighean-obrach). Làithean dà latha (2WD) no 30 (30WD) às dèidh an làimhseachadh dhrogaichean mu dheireadh, chaidh eanchainn a ghiullachd airson bileagan DiI agus immunohistochemistry mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Thuirt sgrùdadh a rinneadh roimhe gun robh làimhseachadh cnàimh le amphetamine a ’meudachadh dùmhlachd ann an cnàmh droma a’ toirt air falbh bho bhith a ’cumail a-mach d ites nan de MSNs ann an NAcc.35). Mar sin, chuingealaich sinn an sgrùdadh againn gus dendrites a thoirt air falbh (ie, an fheadhainn le meuran dara-no treas-òrdugh), a ’gabhail a-steach roinnean-crìche. Nuair a chaidh mion-sgrùdadh a dhèanamh air aig 2WD, chaidh dùmhlachd cnàimh-droma àrdachadh ann am MSNs Drd1-EGFP-deimhinneach (128% de bhuidheann saillte) (Fig. 3a agus c) agus gu ìre nas lugha ann an neurons Drd2-EGFP-deimhinneach (115% de bhuidheann saillte) (Fig. 3 b agus d). An dèidh 30WD, chaidh barrachd dùmhlachd droma a chumail ann an neurons Drd1-EGFP-deimhinneach (118% de smachd saillte) (Fig. 3 a agus c) ach chan eil ann an neurons Drd2-EGFP-positive (Fig. 3 b agus d).

Fig. 3. 

Àrdachadh ann an àrdachadh ann an cnò-oile cronach ann an dùmhlachd ann an cnàmh-droma ann an Drd1-EGFP- no DN2-EGFP-dearfach MSNs ann an NAcc. (a agus b) Drd1-EGFP (a) no Drd2-EGFP (bc) gun deigheadh ​​luchagan a làimhseachadh le salann (Sal) no cocaine (Coc, 30 mg / kg) airson seachdainean 4. Bha eanchainn na luchaige 2WD no 30WD air an giullachd ...

Tha morf-eòlas nan cnàimhean droma a tha caochlaideach a thaobh an fhad agus an leud a tha an ceann droma. Mar sin, chaidh sinn a-mach a ’sgaoileadh a-mach à ceithir stuthan ruadh (stubby, balgan-buachair, tana, agus filopodia) aig 2WD bho chocaine (chan eil dàta air a shealltainn). Dlùth de sheòrsa balgan-buachair (119.7 ± 4.0%, P <0.01) agus spìcean tana (120.0 ± 3.4%, P Chaidh <0.01) a mheudachadh le làimhseachadh cocaine ann an MSNs Drd1-EGFP-positive, ach tha dùmhlachd stubby (182.4 ± 21.6%, P <0.05) agus spìcean balgan-buachair (122.5 ± 5.0%, P Chaidh <0.01) a mheudachadh ann an MSNs Drd2-EGFP-positive. Cha robh àrdachadh mòr ann an spìcean stobach ann an neurons Drd1-EGFP-positive no de spìcean tana ann an neurons Drd2-EGFP-positive.

Innseanan Cocaine Cronach ΔFosB Mìneachadh ann an Drd1-EGFP- no Drd2-EGFP-MSNs dearbhach ann an NAcc.

Tha BFosB na bhall de theaghlach Fos a tha a ’dèiligeadh ri cùisean. Do dh ’a dh’ aindeoin a bhith a ’faighinn a-mach gu bheil sgaoileadh chocàin a’ toirt a-steach tòiseachadh luath agus eadar-ghluasadach ann an grunn is-thorma ann an NAcc, bidh barrachd fiosrachaidh mu bhith a ’faighinn a-steach do chocain a’ fàs ìre ΔFosB. A bharrachd air an sin, tha an àrdachadh ann an ΔFosB a ’leantainn air adhart ann an NAcc airson seachdainean gu mìosan an dèidh stad a bhith air nochdadh dhrogaichean agus chaidh a ràdh gum bu chòir dha a bhith an sàs ann an riaghladh fad-ùine air gintinn, eadhon an dèidh do dhrogaichean a bhith air an toirt gu crìch (29, 39, 40).

Gus sgrùdadh air ΔFosB ann an NAcc a sgrùdadh bho luchag Drd1-EGFP no Drd2-EGFP às dèidh làimhseachadh cocain, rinn sinn anailis air taisbeanadh FosB agus GFP le bhith a ’comharrachadh dà-ainm (Fig. 4 agus Clàr 1) Tha a ’aghaidh an aghaidh anti-FosB a’ toirt aithne air a h-uile seòrsa FosB, ach tha sinn a ’gabhail ris gu bheil an àrdachadh dìon a 'riochdachadh ΔFosB (faic Dòighean-obrach airson tuilleadh deasbaid). Ann an luchagan saillte, chuir 16% de neurons Drd1-EGFP-deimhinneach agus 15% de neurons Drd2-EGFP-dearbhach a ’bhanachdach an-aghaidh FosB le dìth an ìre mhath lag (Fig. 4 a agus b agus Clàr 1). Mar thoradh air làimhseachadh ath-dhèanta de chocain agus 2WD às dèidh sin thàinig meudachadh mòr anns an àireamh de neurons Drd1-EGFP-deimhinneach a chuir co-chuing ΔFosB (55% de nèamhan GFP-deimhinneach) (Fig. 4c agus Clàr 1). Chaidh meudachadh nas lugha, ach fhathast cudromach ann an ΔFosB abairt a lorg ann an neurons Drd2-EGFP-positive (25% de neurons GFP-deimhinneach) (Fig. 4d agus Clàr 1). Mar a thachair leis na h-atharrachaidhean ann an dùmhlachd cnàimh-droma, chaidh an nochdadh nas motha de osFosB a chumail ann an neurons Drd1-EGFP-deimhinneach (46% de neurons dearbhach-GFP) ach chan ann ann an neurons Drd2-EGFP-deimhinneach (15% de neurons dearbhach-GFP) an dèidh 30WD (Fig. 4 e agus f agus Clàr 1). Thoir an aire gu bheil an abairt ΔFosB a chaidh a mheudachadh air a choimhead Fig. 4f tha e an làthair ann an neurons Drd2-EGFP-diúltach.

Fig. 4. 

Bidh cococ ainsealach a ’toirt an expressionFosB in ann an abairt ann an Drd1-EGFP- no DN2-EGFP-dearbhach MSNs ann an NAcc. Drd1-EGFP (a, c, agus e) no Drd2-EGFP (b, d, agus fc) gun deigheadh ​​luchagan a làimhseachadh le cocan saillte no làn-chneasta mar a chaidh a mhìneachadh ann Fig. 3. 2WD (c agus d) no 30WD (e agus ...
Clàr 1. 

Tomhais de neurons-dearbhach EGFP-dearbhach a ’bruidhinn ΔFosB

Deasbaireachd

Thathar den bheachd gu bheil atharrachaidhean fad-ùine ann an neurotransmission dopaminergic fo-ghiùlan a tha co-cheangailte ri drogaichean. Gu h-àraidh, chaidh àrdachadh a dhèanamh air àrdachadh ann an dùmhlachd droma dendriticn le MSNs ann an NAcc gus a bhith ceangailte ri ath-eagrachadh ceangal sioncmaigeach (30). Tha an NAcc sa mhòr-chuid air a dhèanamh suas de dhà fho-bhuille air leth de MSN a ’nochdadh ìrean àrda de ghabhadairean D1 no D2 dopamine. Anns an sgrùdadh a th ’ann an-dràsta, tha sinn air mion-sgrùdadh a dhèanamh air dùmhlachd cnàimh-droma ann am MSNs a tha a’ gabhail a-steach D1 no D2 a tha a ’toirt a-steach ann an NAcc an dèidh làimhseachadh cocain. Tha na toraidhean a fhuaireadh a ’sealltainn gu bheil, ged a tha barrachd dùmhlachd ann an cnàmh droma a’ tachairt an toiseach ann am MSNs anns a bheil D1 a ’gabhail a-steach agus DNNXX a’ toirt a-steach dùmhlachadh droma bìdichte seasmhach dìreach ann an neurons anns a bheil D2-receptor. A bharrachd air an sin, bidh sinn a ’lorg phàtran co-chosmhail de dh'atharrachaidhean ann an abairt an fhactaraidh tar-sgrìobhaidh ΔFosB ann an D1 agus MSNs a tha a’ gabhail a-steach airson DCCNUMX.

Bha na sgrùdaidhean sin a ’dèanamh feum de luchaichean tar-chuir BAC a tha a’ cur GFP an cèill ann an fo-chosgaisean sònraichte de MSNs fo smachd an neach-taic D1 no D2. A bharrachd air sin, leasaich sinn dòigh leubail dhùbailte a chuir còmhla immunohistochemistry airson GFP le leacadh ballistic de neurons a ’cleachdadh DiI. Chleachd sgrùdaidhean a rinneadh roimhe seo modh Golgi-Cox gus sgrùdadh a dhèanamh air a ’bhuaidh a bha aig psychostimulants air dùmhlachd droma (34), agus thug dòigh DiI a chaidh a chleachdadh an seo toraidhean a bha coimeasach gu ìreach. Leasaich sinn am modh leubail dhùbailte oir chan eil Golgi staining co-chòrdail le immunohistochemistry. Mar as trice, tha dìon-dìon a ’cur feum air cuirp de dh’ eanchainn le stuth-glanaidh, pròiseas a bhios mar as trice a ’toirt a-mach de thàthadh de ròsan lipophilic bhon mhembrane (38). Ach, nar sgrùdaidhean làithreach, cha robh feum aig GFP immunostaining air dùmhlachd àrd de ghalaraidh airson a bhith a ’dèanamh an-fhìdeag airson meinirean agus mar sin dh’ fhaodadh a chleachdadh ann an co-bhoinn ri bhith a ’comharrachadh dath lipophilic. Bu chòir an dòigh clàraidh dà-bhratach a bhith feumail san fharsaingeachd airson sgrùdaidhean air atharrachaidhean structarail ann an spines dendritic, mar eisimpleir nuair a chleachdar iad airson mion-sgrùdadh air loidhnichean luchainn tar-chuir BAC far a bheil GFP air a chur an cèill ann an àireamhan sònraichte de neurons ann an cortex (36).

Ged a tha e fhathast connspaideach, thathar a ’creidsinn gu bheil D1 agus D2 gaisgearan air an sgaradh a-mach gu ìre mhòr bho neurons ro-mheasaidhean dìreach (striatonigral) agus neo-dhìreach (striatopallidal), fa leth (17, 41). Bha a ’chiad charactar de shuidheachadh na GFP anns na luchaichean Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP co-chòrdail ris a’ cho-dhùnadh seo (36). A bharrachd air an sin, tha an sgrùdadh againn air àireamh nan neurons GFP-dearbhach ann an NAcc bho luchagan Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP co-chòrdail ris a ’cho-dhùnadh gu bheil ≈50% de MSNan a’ cur a-steach na gabhadain D1 a-mhàin, nach ’ach ≈35 – 40% a’ riochdachadh gabhadan D2 ach agus gu bheil ≈10 – 15% a ’co-èigneachadh le luchd-gabhail D1 agus D2. Tha an luach seo de choexpression coltach ris an ìre a tha sin air a dhèanamh le sgrùdaidhean air dorsal striatum a chuir ri chèile sgrùdadh patch-clamp air neurons singilte teann le dòighean RT-PCR airson mRNAs a chumail air falbh agus àrdachadh (ex17% co-cheangal de enkephalin agus stuth P) (42). Bu chòir a thoirt fa-near nach cuir na h-sgrùdaidhean againn an-dràsta ceist luchd-gabhail D3, D4, agus D5 a-steach, agus nach eil iad a ’dèiligeadh ri ìrean ìosal de chuir an cèill air gabhadain D1 ann am MSN a’ nochdadh ìrean àrda de ghabhadairean D2 no a chaochladh.

Tha grunn sgrùdaidhean a chaidh a dhèanamh roimhe air sgrùdadh a dhèanamh air eadar-nàiseantachd neo-dhiongmhaltach an abairt a th ’air a’ ghabhail a-steach aig altram psychostimulant agus an dreuchd aig glacadairean D1 agus D2 (43-45). Thug na sgrùdaidhean sin taic don cho-dhùnadh gu bheil Fos and ΔFosB Inntrigidh air a chuir an gnìomh le bhith a ’toirt a-steach luchd-gabhail D1. Ach, tha buaidh aig an co-theacs àrainneachdail anns a bheil drogaichean psychostimulant air an riarachadh le eadar-shuidheachadh ceallach.46, 47). Mar eisimpleir, bidh amphetamine no cocaine a ’toirt a-steach san dachaigh cèidse a’ toirt buaidh air ginean tràth sa bhad (a ’gabhail a-steach Fos) anns a’ bhrìgh seo ann an ceallan P-dearfach a bhios a ’co-èigneachadh glacadairean D1. Air an taobh eile, dh ’fhaodadh na drugaichean seo a bhith ag àrach taisbeanadh Fosaidh anns an dà chuid MSNUMX D1 agus D2 le bhith a’ faighinn ann an àrainneachd ùr. Cha robh am pròtacal a chaidh a chleachdadh nar n-sgrùdaidhean làithreach a ’toirt a-steach sparradh dhrogaichean ceangailte ri àrainneachd ùr. Ach, chan urrainn dhuinn a dhol an sàs ann an seòrsa de chuideam a bhios an crochadh air co-theacsa agus a tha an urra ri ΔFosB abairt ann an DNNX a bhith a ’gabhail a-steach MSNs.

B 'e feart sònraichte anns na toraidhean an-dràsta am pàtran co-shìnte le barrachd dùmhlachd ann an cnàmh-droma agus ΔFosB. Thàinig àrdachadh ann an dùmhlachd cnàimh-droma agus expressionFosB abairt an toiseach ann am MSNs a ’toirt a-steach Drd1-EGFP agus Drd2-EGFP. Ach, cha robh na h-atharrachaidhean sin seasmhach ach ann an neurons anns a bheil D1 a ’gabhail a-steach. Is e aon mhìneachadh a dh'fhaodadh a bhith ann airson an t-sealladh gun deach barrachd dùmhlachd ann an cnàmh-droma agus ΔFosB abairt a lorg gu neònach ann an neurons anns a bheil D2 a tha a ’gabhail a-steach anns an ìre bheag de MSN a bhios a’ co-èigneachadh D1 agus gabhadan dopamine D2. Mar sin, dh ’fhaodadh gun gabh nàdar gluasadach nan àrdachaidhean seo a bhith co-cheangailte ri buaidhean gluasadach gnìomhachadh D2 gabhadan air slighean comharrachaidh D1-eisimeileach (48). Tha e inntinneach gu bheil na h-atharrachaidhean ann an dùmhlachd droma agus expressionFosB abairt ag atharrachadh, a dh ’fhaodadh a bhith a’ nochdadh comas slighean comharrachaidh a tha an urra ri D2 airson seasmhachd ΔFosB.

Tha am beachd gu bheil atharrachaidhean co-shìnte ann an cur an cèill ΔFosB agus dùmhlachd cnàimh-droma co-chòrdail ris a ’bheachd gu bheil BFosB an sàs ann an cruthachadh tùsail agus cumail suas spines dendritic an dèidh sin ann an neurons anns a bheil D1 a tha a’ gabhail a-steach ann an NAcc. Tha mìneachadh ΔFosB air a riaghladh le slighe comharrachaidh D1 / DARPP-32 / PP1-eisimeileach ann am MSNs (49). Tha grunn sgrùdaidhean air sealltainn gu bheil ΔFosB a ’cluich pàirt chudromach ann an gnìomhan duaisidh agus gnìomh nan psychostimulants (no39), is dòcha le bhith a ’toirt buaidh air an abairt de dh'iomadh gineachan a’ gabhail a-steach gabhadan neurotransmitter, pròtainean comharrachaidh, agus pròtainean a tha an sàs ann an riaghladh morf-eòlas neuronal (50). Ach chan eil fios againn an-dràsta mu na h-uidheaman moilecular sònraichte a tha an sàs ann an cruthachadh cnàimh a dh ’ann an cocain. Tha na sgrùdaidhean a rinn sinn roimhe air sealltainn gu bheil in-shìoladh in-innse na Cdk5 inhibitor roscovitine air àrdachadh ann an dùmhlachd cnàimh (51). A bharrachd air sin, tha Cdk5 na ghine targaid sìos-sruth airson ΔFosB agus tha e air a bhith ceangailte ri atharrachaidhean atharrachail co-cheangailte ri leigheas cnò-diadhaidh (52). Mar sin, is e dòigh so-chreidsinneach a th 'ann an atharrachadh air fosfaidean cdk5-eisimeileach an crochadh air cruthachadh spine co-cheangailte ri cocain agus / no seasmhachd cnàimh-droma. PAK (53), β-catenin (54), PSD-95 (55), agus spinophilin (56) a tha nam fo-fhreumhaichean airson Cdk5 agus tha iad uile an sàs ann an riaghladh morphogenesis spine (57-60). Bithear an dòchas gun dèan barrachd feart air na fo-fhillidhean seo agus fo-fhigearan Cdk5 eile ann an spìcean solas air na dòighean a tha an sàs ann an riaghladh cruthachadh cnàimh-droma le psychostimulants.

Dòighean-obrach

Ainmhidhean.

Chaidh luchagan a bha a ’giùlan EGFP transgene fo smachd an neach-gabhail dopamine D1 no D2 a chruthachadh le pròiseact tar-chuir Gensat BAC (36). Bha na luchain tar-ghinealach a bha air an cleachdadh san sgrùdadh seo a ’ciallachadh seachdainnean 4 – 5 a bha ann agus bha iad air cùl an Eilbheis-Webster. Bha luchagan air an cumail ann an rothaireachd 12: 12-h agus dorcha / dorcha agus air an cumail ann am buidhnean de 2 – 5 le biadh agus uisge ri fhaighinn ad libitum. Bha a h-uile pròtacal bheathaichean an co-rèir ri Stiùiridhean Nàiseanta Institiud Slàinte airson Cùram agus Cleachdadh Làraich-obrach Saotharlann agus chaidh aontachadh le Comataidh Cùram is Cleachdadh Ainmhidhean Institiùd Oilthigh Rockefeller.

Làimhseachadh dhrugaichean.

Chaidh aithris gun robhar a ’làimhseachadh leigheas cocàin (30 mg / kg, gach latha) gu fàs làidir ann an dùmhlachd cnàimh-droma MSNs ann am bun agus sligean NAcc bho radan, ach gun robh dòs nas ìsle (15 mg / kg) nas motha na an slige (61). Mar sin, chleachd sinn an tomhas nas àirde de chocàin gus atharrachadh structarail a ghluasad anns an dà chuid de NAcc. Bha luchainn a ’faighinn aon in-stealladh (ip) de 30 mg / kg cocaine-HCl (no saline) gach latha airson 5 làithean an dèidh a chèile, agus an uairsin àm 2 an-stealladh, agus chaidh an dòigh-obrach seo ath-aithris airson 4 seachdainnean an dèidh a chèile. Chaidh steallaidhean a dhèanamh anns a ’chèidse dachaigh. 2WD no 30WD, chaidh eanchainn lucha a ghiullachd airson bileagan DiI agus / no immunohistochemistry.

Làimhseachadh ballistic leis an Fluorescent Dye DiI.

Bha luchainn air an cuir a-mach le 80 mg / kg sodium pentobarbital agus perfused thar-ghnèitheach le 5 ml PBS, agus an uair sin ùmhlachd luath le 40 ml de paraformaldehyde 4% ann am PBS (20 ml / min). Chaidh Brains a thoirt air falbh gu luath às a ’chlaigeann agus chaidh an cur air ais ann am paraformaldehyde 4% airson 10 min. Chaidh sliseagan eòrna (100 μm) a chomharrachadh le lìbhrigeadh ballistic de dath fluaraiseach DiI (Deuchainnean Molecular) mar a chaidh a mhìneachadh ann an ref. 38. Chaidh dòigh-obrach le bhith a ’cuir a-mach lipi DiI-immunohistochemistry a leasachadh le dùmhlachd ìosal de ghalaraidh. Chaidh na h-earrannan le leid ann an DiI a chuir a-steach còmhla ri 0.01 Triton X-100 ann am PBS airson mionaid 15 agus an uairsin an goirteadh ann an serum gobhar 0.01% Triton X-100 agus 10% ann am PBS airson 1 h gus bileag neo-shònraichte a lùghdachadh. An dèidh sin chaidh earrannan meurach a dhùsgadh le antibod de ghlas àbhaisteach 1% / 0.01 Triton X-100 agus anti-GFP (Abcam, Cambridge, MA) airson 2 h aig teòthachd an t-seòmair, air a nighe, agus air a ghèid ann an 1: caolú 1,000 de FITC- antibody dara ìre co-chuingichte (Deuchainnean Molecular). Chaidh earrannan a chuir air sleamhnagan microscope agus a ’gabhail a-steach tro mheadhan sreap. Cheadaich an dòigh pàipeir ballistic mion-sgrùdadh air structar cnàimh droma-brìghte, agus bha na toraidhean a fhuaireadh gu càileachdail agus gu cainneachdail ann an coimeas ri sgrùdaidhean a rinneadh roimhe sin a ’cleachdadh modh buailidh Golgi – Cox ann an sliseagan deanan luibhean (34). Ach, an coimeas ri sgrùdaidhean a rinneadh roimhe, is ann ainneamh a mhothaich sinn spìcean dà cheann ann an neurons le dhath DiI-dhath. Faodaidh an eadar-dhealachadh seo a bhith mar thoradh air cugallachd modhan glanaidh no caochlaidheachd na luchaige (an sgrùdadh seo) an aghaidh meineag luchan (34).

Immunohistochemistry.

Chaidh beathaichean a bhiadhachadh agus a dhrùgadh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Chaidh brains a thoirt air falbh agus an stòradh thar oidhche ann am paraformaldehyde 4% aig 4 ° C. Chaidh Brains a ghluasad gu sioncron 30% ann an fuasgladh PBS airson cryoprotection. Chaidh earrannan crùnaidh (12 μm) a ghearradh air microtome reothadh (Leica) agus an uair sin air an giullachd airson immunohistochemistry. An uair sin chaidh earrannan Brain a chuir a-mach ann an 0.3% Triton X-100 ann am PBS airson min 15 agus air an ath-luachadh dà uair ann am PBS. Chaidh na h-earrannan a chur a-mach ann an serum gobhar àbhaisteach 10% ann am PBS airson 1 h aig 37 ° C, fosgailte do bhun-antibodies (air a lagachadh ann an serum gobhar 1% àbhaisteach ann am PBS) tron ​​oidhche aig 4 ° C, agus an uairsin air a sgoladh ann am PBS agus air a ghoid le àrd-sgoil antibodies airson 1 h aig 37 ° C. Chaidh na antibodies a leanas a chleachdadh: anti-pan-FosB coinean (SC-48, 1: 500; Bith-theicneòlas Santa Cruz), anti-NeuN (Chemicon) luchag, an-aghaidh coineanaich GFP, IgG frith-choineanach le FITC, agus rhodamine- frith-luch luibheanach IgG (Deuchainnean Molecular). Airson bileagan trì-fhillte (ΔFosB, NeuN, agus GFP), chaidh roinnean na h-eanchainn a thoirt a-steach an toiseach le antibody anti-pan-fosB agus antibody anti-NeuN agus an uair sin gan gintinn le antibodies àrd-ìre (frith-choineanach Rhodamine-IgG agus frith-luch comhshuite IgG ). Chaidh tuilleadh iallan a dhèanamh air earrannan an eanchainn dhùbailte dùbailte airson in-ghabhaltas GFP le bhith a ’cleachdadh teicneòlas le bhith a’ cleachdadh Zenon (Zenon Alexa Fluor 488, probes Molecular). Chaidh am antibody anti-pan-FosB a thogail gu N terminus FosB agus tha e ag aithneachadh ΔFosB agus FosB fad-ùine (62). Stèidhichte air sgrùdaidhean eile a sheall gu bheil ΔFosB ach chan eil FosB no eile a ’eile a’ gabhail a-mach à beathachadh co-cheangailte ri leigheas cocaine, tha sinn a ’gabhail ris gu bheil na h-àrdachadh fad-ùine ann an dìonachd a’ riochdachadh expressionFosB. Ach chan eil fios cò am comharra a tha anns a ’bhodhaig dìon-dìonach a chithear ann an luchagan le còmhdach salainn. Mion-sgrùdadh staitistigeil ann Clàr 1 cleachd oileanaich nan oileanach t deuchainn.

Sgrùdadh Spine Dendritic.

Chaidh MSNan fa leth ann an NAcc a thaghadh airson sgrùdadh spine stèidhichte air grunn shlatan-tomhais. (i) Cha robh ach beagan bheag no cus iomlaid ri ceallan eile le comharraidhean gus dèanamh cinnteach nach biodh troimh-chèile air pròiseasan bho cheallan eadar-dhealaichte. (ii) Dh'fheumadh co-dhiù trì dendrites sa bhunait a bhith rim faicinn airson ceallan airson an cleachdadh airson mion-sgrùdadh. (iii) Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air dendrites distal (dendrites terminal no faisg air an dendrite terminal). Chaidh mion-sgrùdadh a dhèanamh air dendrites bhon dà MSN ann an cridhe agus slige an NAcc. Ged a chunnaic sinn MSNan le glè bheag de spàin (seòrsa spìosrach II), cha do rinn sinn mion-sgrùdadh air ach MSNan le mòran dùmhail (seòrsa spìosrach I). Gus dùmhlachd an spine a thomhas, chaidh fad dendrite (> 20 μm de dh'fhaid) a lorg le bhith a ’cleachdadh miocroscop confocal (Zeiss LSM 510) le lionsa bogaidh ola (× 40). Chaidh a h-uile ìomhaigh de dendrites a thogail aig diofar z ìrean (eadar-dhealachaidhean doimhneachd 0.5 – 1 μm) gus sgrùdadh a dhèanamh air morf-eòlas nan cnàimhean droma. Chaidh a h-uile tomhas a dhèanamh le bathar-bog sgrùdadh ìomhaigh metamorph (Universal Imaging, Downingtown, PA). Chleachd anailis staitistigeach an deuchainn Kolmogorov – Smirnov.

Chaidh tionndaidhean bho dendrites a sheòrsachadh ann an ceithir seòrsachan stèidhichte air an ùine mar a tha air a mhìneachadh ann an ath-chunntasan. 63 agus 64. Bha protrusions Clas 1, ris an canar cuideachd protuberances stubby, <0.5 μm de dh'fhaid, cha robh ceann spine mòr aca, agus cha robh coltas gu robh amhach orra; bha cnàmhan clas 2, no cumadh balgan-buachair, eadar 0.5 agus 1.25 μm de dh'fhaid agus bha iad air an comharrachadh le amhach goirid agus ceann mòr an spine; bha clas 3, no bioran tana, eadar 1.25 agus 3.0 μm agus bha amhach droma fada le cinn bheaga; bha clas 4, no leudachadh filopodial, nan protrusions fada filamentous aig nach robh ceann spine follaiseach.

Acknowledgments

Chaidh taic a thoirt don obair seo le Tabhartas Seirbheis Slàinte Poblach nan Stàitean Aonaichte (DA10044 (gu PG agus ACN) agus le Urras Simons, Stèidheachd Peter J. Sharp, Bunait Picower, agus Bunait FM Kirby.

giorrachaidhean

  • NAcc
  • nobhailean accumbens
  • MSN
  • niùcoin spàinteach meadhanach mòr
  • BAC
  • chromosom fuadain lobhagach
  • Drd1
  • gabhadan dopamine D1 air a threòrachadh leis an luchd-taic
  • Drd2
  • gabhadan dopamine D2 air a threòrachadh leis an luchd-taic
  • DiI
  • 1,1′-diotadecyl-3,3,3 ′, 3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate
  • 2WD
  • Làithean 2 an dèidh an leigheas dh ’mu dheireadh
  • 30WD
  • Làithean 30 às deidh an làimhseachadh dhrugaichean mu dheireadh.

Footnotes

 

Aithris mu strì eadar com-pàirtean: Cha deach còmhstri sam bith fhoillseachadh.

iomraidhean

1. Totterdell S., Smith ADJ Chem. Neuroanat. 1989; 2: 285 – 298. [Sgaoileadh]
2. Smith Y., Bevan MD, Shink E., Bolam JP Neuroscience. 1998; 86: 353 – 387. [Sgaoileadh]
3. RE Hikkila RE, Orlansky H., Cohen G. Biochem. Pharmacol. 1975; 24: 847 – 852. [Sgaoileadh]
4. Ritz MC, Lamb RJ, Goldberg SR, Kuhar MJ Saidheans. 1987; 237: 1219 – 1223. [Sgaoileadh]
5. Nestler EJ Treandan Pharmacol. Sci. 2004; 25: 210 – 218. [Sgaoileadh]
6. Kalivas PW, Stiùbhart J. Brain Res. An t-Urr. 1991; 16: 223 – 244. [Sgaoileadh]
7. Pierce RC, Kalivas PW Brain Res. An t-Urr. 1997; 25: 192 – 216. [Sgaoileadh]
8. Robinson TE, Berridge KC Annu. An t-Urr. Psychol. 2003; 54: 25 – 53. [Sgaoileadh]
9. Madadh ME, Khansa MR Brain Res. 1991; 562: 164 – 168. [Sgaoileadh]
10. Vanderschuren LJ, Kalivas PW Psychopharmacology. 2000; 151: 99 – 120. [Sgaoileadh]
11. Sesack SR, Pickel VMJ Comp. Neurol. 1992; 320: 145 – 160. [Sgaoileadh]
12. Smith AD, Bolam JP Trends Neurosci. 1990; 13: 259 – 265. [Sgaoileadh]
13. Sibley DR, Monsma FJ, Jr Treandan Pharmacol. Sci. 1992; 13: 61 – 69. [Sgaoileadh]
14. Beckstead RM, Cruz CJ Neuroscience. 1986; 19: 147 – 158. [Sgaoileadh]
16. Gerfen CR, Young WS, III Brain Res. 1988; 460: 161 – 167. [Sgaoileadh]
16. Gerfen CR Trends Neurosci. 2000; 23: S64 – S70. [Sgaoileadh]
17. Gerfen CR, Engber TM, Mahan LC, Susel Z., Chase TN, Monsma FJ, Jr, Sibley DR Science. 1990; 250: 1429 – 1432. [Sgaoileadh]
18. Zahm DS Neurosci. Biobehav. An t-Urr. 2000; 24: 85 – 105. [Sgaoileadh]
19. Lu X.-Y., Ghasemzadeh MB, Kalivas PW Neuroscience. 1998; 82: 767 – 780. [Sgaoileadh]
20. Gob Gob, Le HT, Creese I. Neurosci. Lett. 1987; 79: 315 – 320. [Sgaoileadh]
21. WL Woolverton, Virus RM Pharmacol. Biochem. Behav. 1989; 32: 691 – 697. [Sgaoileadh]
22. Bergman J., Kamien JB, Spealman RD Behav. Pharmacol. 1990; 1: 355 – 363. [Sgaoileadh]
23. BP Epping-Jordan, Markou A., Koob GF Brain Res. 1998; 784: 105 – 115. [Sgaoileadh]
24. Caine SB, Negus SS, Mello NK, Bergman JJ Pharmacol. Exp. Ther. 1999; 291: 353 – 360. [Sgaoileadh]
25. De Vries TJ, Cools AR, Shippenberg TS NeuroReport. 1998; 9: 1763 – 1768. [Sgaoileadh]
26. Fèin DW, Barnhart WJ, Lehman DA, Nestler EJ Science. 1996; 271: 1586 – 1589. [Sgaoileadh]
27. TV Khroyan, RL Barrett-Larimore, Rowlett JK, Spealman RDJ Pharmacol. Exp. Ther. 2000; 294: 680 – 687. [Sgaoileadh]
28. Alleweireldt AT, Weber SM, Kirschner KF, Bullock BL, Neisewander JL Psychopharmacology. 2002; 159: 284 – 293. [Sgaoileadh]
29. Nestler EJ Nat. An t-Urr. Neurosci. 2001; 2: 119 – 128. [Sgaoileadh]
30. Robinson TE, Kolb B. Neuropharmacology. 2004; 47: 33 – 46. [Sgaoileadh]
31. Kalivas PW Curr. Opin. Pharmacol. 2004; 4: 23 – 29. [Sgaoileadh]
32. Hyman SE, Malenka RC Nat. An t-Urr. Neurosci. 2001; 2: 695 – 703. [Sgaoileadh]
33. Robinson TE, Kolb BJ Neurosci. 1997; 17: 8491 – 8497. [Sgaoileadh]
34. Robinson TE, Kolb B. Eur. J. Neurosci. 1999; 11: 1598 – 1604. [Sgaoileadh]
35. Li Y., Kolb B., Robinson TE Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1082 – 1085. [Sgaoileadh]
36. Gong S., Zheng C., Doughty ML, Losos K., Didkovsky N., Schambra UB, Nowak NJ, Joyner A., ​​Leblanc G., Hatten ME, et al. Nàdar. 2003; 425: 917 – 925. [Sgaoileadh]
37. Zhou FM, Wilson CJ, Dani JAJ Neurobiol. 2002; 53: 590 – 605. [Sgaoileadh]
38. Grutzendler J., Tsai J., Modhan Gan WB. 2003; 30: 79 – 85. [Sgaoileadh]
39. Kelz MB, Chen J., Carlezon WA, Jr, Whisler K., Gilden L., Beckmann AM, Steffen C., Zhang YJ, Marotti L., Self DW, et al. Nàdar. 1999; 401: 272 – 276. [Sgaoileadh]
40. Nestler EJ Neuropharmacology. 2004; 47: 24 – 32. [Sgaoileadh]
41. Le Moine C., Bloch BJ Comp. Neurol. 1995; 355: 418 – 426. [Sgaoileadh]
42. Surmeier DJ, Song WJ, Yan ZJ Neurosci. 1996; 16: 6579 – 6591. [Sgaoileadh]
43. Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M., Nestler EJJ Pharmacol. Exp. Ther. 1995; 275: 1671 – 1680. [Sgaoileadh]
44. Gerfen CR, Keefe KA, Gauda EBJ Neurosci. 1995; 15: 8167 – 8176. [Sgaoileadh]
45. Moratalla R., Elibol B., Vallejo M., Graybiel AM Neuron. 1996; 17: 147 – 156. [Sgaoileadh]
46. Badiani A., Oates MM, Latha HE, Watson SJ, Akil H., Robinson TE Behav. Brain. Res. 1999; 103: 203 – 209. [Sgaoileadh]
47. Uslaner J., Badiani A., Norton CS, Latha HE, Watson SJ, Akil H., Robinson TE Eur. J. Neurosci. 2001; 13: 1977 – 1983. [Sgaoileadh]
48. Huff RM, Chio CL, Lajiness ME, Goodman LV Adv. Pharmacol. 1998; 42: 454 – 457. [Sgaoileadh]
49. Zachariou V., Sgambato-Faure V., Sasaki T., Svenningsson P., Berton O., Fienberg AA, Nairn AC, Greengard P., Nestler EJ Neuropsychopharmacology. 2005 Aug 3; 10.1038 / sj.npp.1300832.
50. McClung CA, Nestler EJ Nat. Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. [Sgaoileadh]
51. Norrholm SD, Bibb JA, Nestler EJ, Ouimet CC, Taylor JR, Greengard P. Neuroscience. 2003; 116: 19 – 22. [Sgaoileadh]
52. Bibb JA, Chen J., Taylor JR, Svenningsson P., Nishi A., Snyder GL, Yan Z., Sagawa ZK, Comhairle Ouimet, Nairn AC, et al. Nàdar. 2001; 410: 376 – 380. [Sgaoileadh]
53. Nikolic M., Chou MM, Lu W., Mayer BJ, Tsai LH Nature. 1998; 395: 194 – 198. [Sgaoileadh]
54. Sgrìobhaiche-ciùil S., Lau KF, McLoughlin DM, Brownlees J., Ackerley S., Leigh PN, Shaw CE, Miller CC Eur. J. Neurosci. 2001; 13: 241 – 247. [Sgaoileadh]
55. Morabito MA, Sheng M., Tsai LHJ Neurosci. 2004; 24: 865 – 876. [Sgaoileadh]
56. Futter M., Uematsu K., Bullock SA, Kim Y., Hemmings HC, Jr., Nishi A., Greengard P., Inbhir Nàrann AC Proc. Natl. Acad. Sci. Na Stàitean Aonaichte. 2005; 102: 3489 – 3494. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
57. Hayashi ML, Choi SY, Rao BS, Jung HY, Lee HK, Zhang D., Chattarji S., Kirkwood A., Tonegawa S. Neuron. 2004; 42: 773 – 787. [Sgaoileadh]
58. Murase S., Mosser E., Schuman EM Neuron. 2002; 35: 91 – 105. [Sgaoileadh]
59. Prange O., Murphy THJ Neurosci. 2001; 21: 9325 – 9333. [Sgaoileadh]
60. Feng J., Yan Z., Ferreira A., Tomizawa K., Liauw JA, Zhuo M., Allen PB, Ouimet CC, Greengard P. Proc. Natl. Acad. Sci. Na Stàitean Aonaichte. 2000; 97: 9287 – 9292. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
61. Li Y., Acerbo MJ, Robinson TE Eur. J. Neurosci. 2004; 20: 1647 – 1654. [Sgaoileadh]
62. Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S., Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. Eur. J. Neurosci. 2005; 21: 2817 – 2824. [Sgaoileadh]
63. Na Hearadh KM, Jensen FE, Tsao BJ Neurosci. 1992; 12: 2685 – 2705. [Sgaoileadh]
64. Vanderklish PW, Edelman GM Proc. Natl. Acad. Sci. Na Stàitean Aonaichte. 2002; 99: 1639 – 1644. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]