DeltaFosB dalam The Nucleus Accumbens Penting untuk Memperkuat Efek Hadiah Seksual. (2010)

KOMENTAR: Delta FosB adalah penanda untuk semua kecanduan, baik perilaku maupun kimiawi. Saat molekul ini meningkat di sirkuit hadiah, begitu pula perilaku adiktif. Itu salah satu molekul yang terlibat dalam perubahan neuroplastik. Eksperimen ini menunjukkan bahwa itu meningkat dengan pengalaman seksual, mirip dengan bagaimana hal itu terjadi dengan kecanduan narkoba. Dalam percobaan tersebut mereka menggunakan rekayasa genetika untuk meningkatkan levelnya melebihi "normal". Ini menghasilkan peningkatan fasilitasi aktivitas seksual. Kami pikir ini terjadi dengan kecanduan pornografi.

STUDI LENGKAP

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Gen Otak Behav. 2010 Okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Agustus 16.

Departemen Anatomi dan Biologi Sel, Sekolah Kedokteran dan Kedokteran Gigi Schulich, Universitas Ontario Barat, London, Ontario, Kanada.

ABSTRAK

Perilaku seksual pada tikus jantan bermanfaat dan menguatkan. Namun, sedikit yang diketahui tentang mekanisme seluler dan molekuler spesifik yang memediasi hadiah seksual atau efek penguatan hadiah terhadap ekspresi perilaku seksual selanjutnya. Studi ini menguji hipotesis bahwa ΔFosB, bentuk terpotong yang diekspresikan secara stabil dari FosB, memainkan peran penting dalam penguatan perilaku seksual dan fasilitasi yang diinduksi oleh pengalaman motivasi dan kinerja seksual.

Pengalaman seksual terbukti menyebabkan akumulasi osFosB di beberapa daerah otak limbik termasuk nucleus accumbens (NAc), korteks prefrontal medial, daerah tegmental ventral dan putamen berekor tetapi tidak pada nukleus preoptik medial.

Selanjutnya, induksi c-Fos, target hilir repFosB, diukur pada hewan yang berpengalaman secara seksual dan naif. Jumlah sel c-Fos-imunoreaktif yang diinduksi kawin menurun secara signifikan pada hewan yang mengalami hubungan seksual dibandingkan dengan kontrol yang naif secara seksual.

Akhirnya, levelsFosB tingkat dan aktivitasnya di NAc dimanipulasi menggunakan transfer gen yang dimediasi virus untuk mempelajari peran potensial dalam memediasi pengalaman seksual dan fasilitasi yang diinduksi pengalaman dari kinerja seksual. Hewan dengan ekspresi berlebih osFosB menunjukkan peningkatan fasilitasi kinerja seksual dengan pengalaman seksual relatif terhadap kontrol. Sebaliknya, ekspresi unJunD, mitra pengikat negatif dominan ΔFosB, melemahkan fasilitasi yang diinduksi pengalaman seksual dari kinerja seksual dan menghambat pemeliharaan fasilitasi jangka panjang dibandingkan dengan protein fluoresensi hijau dan overFosB yang mengekspresikan kelompok.

Bersama-sama, temuan ini mendukung peran penting untuk ekspresi osFosB di NAc untuk efek penguatan perilaku seksual dan fasilitasi yang disebabkan oleh pengalaman seksual dari kinerja seksual.

PENGANTAR

Perilaku seksual sangat bermanfaat dan menguatkan bagi tikus jantan (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Selain itu, pengalaman seksual mengubah perilaku dan hadiah seksual berikutnya (Tenk et al. 2009). Dengan pengalaman kawin yang berulang, perilaku seks difasilitasi atau "diperkuat", dibuktikan dengan penurunan latensi untuk memulai perkawinan dan fasilitasi kinerja seksual (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Namun, mekanisme seluler dan molekuler yang mendasari penghargaan dan penguatan seksual kurang dipahami. Perilaku seksual dan isyarat terkondisi yang memprediksi perkawinan telah terbukti secara sementara menginduksi ekspresi gen c-fos segera-awal dalam sistem mesolimbik tikus jantan (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Selain itu, baru-baru ini menunjukkan bahwa pengalaman seksual menginduksi neuroplastisitas jangka panjang dalam sistem mesolimbik tikus jantan (Frohmader et al. 2009; Pitcher et al. 2010). Selain itu, pada tikus jantan, pengalaman seksual telah terbukti menginduksi osFosB, a Anggota keluarga Fos, di nucleus accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, varian sambatan terpotong dari FosB, adalah anggota unik dari keluarga Fos karena stabilitasnya yang lebih besar (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) dan memainkan peran dalam peningkatan motivasi dan penghargaan untuk penyalahgunaan obat-obatan terlarang dan plastisitas saraf jangka panjang yang memediasi kecanduan (Nestler et al. 2001). ΔFosB membentuk kompleks faktor transkripsi heteromer (protein aktivator-1 (AP-1)) dengan protein Jun, lebih disukai JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Melalui ekspresi berlebih dari ΔFosB, terutama terbatas pada striatum menggunakan tikus bi-transgenik, fenotip perilaku seperti kecanduan obat diproduksi walaupun tidak ada paparan obat sebelumnya (McClung et al. 2004). Fenotip perilaku ini mencakup respons alat gerak yang peka terhadap kokain (Kelz et al. 1999), peningkatan preferensi untuk kokain (Kelz et al. 1999) dan morfin (Zachariou et al. 2006), dan peningkatan pemberian sendiri kokain (Colby et al. 2003).

Mirip dengan imbalan obat, osFosB diregulasi oleh perilaku penghargaan alami dan memediasi ekspresi perilaku ini. Ekspresi berlebihan ΔFosB di NAc menggunakan model rodent meningkatkan putaran roda sukarela (Werme et al. 2002), instrumental merespons makanan (Olausson et al. 2006), asupan sukrosa (Wallace et al. 2008), dan memfasilitasi laki-laki (Wallace et al. 2008) dan perempuan (Bradley et al. 2005) perilaku seksual. Dengan demikian, osFosB mungkin terlibat dalam memediasi efek dari pengalaman alami yang bermanfaat. TPenelitian saat ini memperluas studi sebelumnya dengan secara khusus menyelidiki peran osFosB dalam NAc dalam hasil jangka panjang dari pengalaman seksual pada perilaku kawin berikutnya dan aktivasi saraf dalam sistem mesolimbik..

  • Pertama, ditetapkan daerah otak mana yang terlibat dalam sirkuit hadiah dan perilaku seksual yang mengekspresikan sexFosB yang disebabkan oleh pengalaman seks.
  • Selanjutnya, efek sexFosB yang diinduksi oleh pengalaman seks pada ekspresi c-Fos yang diinduksi kawin, target hilir yang ditekan oleh ΔFosB (Renthal et al. 2008), diselidiki.
  • Akhirnya, efek memanipulasi aktivitas osFosB dalam NAc (ekspresi berlebih dan ekspresi dari pasangan yang mengikat negatif dominan) pada perilaku seksual dan fasilitasi yang dipicu oleh motivasi dan kinerja seksual ditentukan dengan menggunakan teknologi pengiriman vektor virus.
Pergi ke:

METODE

hewan

Tikus Sprague Dawley jantan jantan dewasa (200-225 gram) diperoleh dari Laboratorium Charles River (Senneville, QC, Kanada). Hewan-hewan ditempatkan di kandang Plexiglas dengan tabung terowongan dalam pasangan jenis kelamin yang sama selama percobaan. Ruang koloni diatur suhu dan dipertahankan pada siklus gelap terang 12 / 12 jam dengan makanan dan air tersedia ad libitum kecuali selama pengujian perilaku. Stimulus betina (210-220 gram) untuk sesi perkawinan menerima implan subkutan yang mengandung 5% estradiol benzoat dan kolesterol 95% setelah ovariektomi bilateral dengan anestesi dalam (0.35g ketamine / 0.052g Xylazine). Penerimaan seksual diinduksi oleh pemberian 500µg progesteron dalam 0.1 mL minyak wijen sekitar 4 jam sebelum pengujian. Semua prosedur disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan dari University of Western Ontario dan mematuhi pedoman CCAC yang melibatkan hewan vertebrata dalam penelitian.

Perilaku Seksual

Sesi kawin terjadi selama fase gelap awal (antara 2-6 jam setelah permulaan periode gelap) di bawah pencahayaan red redup. Sebelum mulai bereksperimen, hewan dibagi secara acak ke dalam kelompok. Selama sesi kawin, tikus jantan diizinkan untuk bersanggama dengan ejakulasi atau jam 1, dan parameter untuk perilaku seksual dicatat termasuk: tingkat latensi (ML; waktu dari pengenalan betina hingga tingkat pertama), latensi intromisi (IL; waktu sejak pengenalan perempuan sampai pemasangan pertama dengan penetrasi vagina), latensi ejakulasi (EL; waktu dari intromisi pertama ke ejakulasi), interval pasca ejakulasi (PEI; waktu dari ejakulasi ke intromisi berikutnya berikutnya), jumlah tunggangan (M; pelvic menyodorkan tanpa vagina penetrasi), jumlah intromisi (IM; tingkat termasuk penetrasi vagina) dan efisiensi sanggama (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Jumlah tunggangan dan intromisi tidak dimasukkan dalam analisis untuk hewan yang tidak menampilkan ejakulasi. Mount dan latensi intromisi adalah parameter yang menunjukkan motivasi seksual, sedangkan latensi ejakulasi, jumlah gunung dan efisiensi kopulasi mencerminkan kinerja seksual (Hull 2002).

Eksperimen 1: Ekspresi ΔFosB

Tikus jantan yang naif secara seksual diizinkan kawin di kandang uji yang bersih (60 × 45 × 50 cm) untuk 5 berturut-turut, sesi kawin harian atau tetap naif secara seksual. Tabel Tambahan 1 menguraikan paradigma perilaku untuk kelompok eksperimen: naif tidak ada jenis kelamin (NNS; n = 5), jenis kelamin naif (NS; n = 5), tidak mengalami seks (ENS; n = 5) dan mengalami hubungan seks (ES; n = 4). Hewan NS dan ES dikorbankan jam 1 setelah ejakulasi pada hari terakhir kawin untuk menyelidiki ekspresi c-Fos yang diinduksi kawin. Hewan NNS dikorbankan bersamaan dengan hewan ENS 24 jam setelah sesi perkawinan terakhir untuk memeriksa sexFOSB yang disebabkan oleh pengalaman seks. Kelompok yang berpengalaman secara seksual dicocokkan untuk perilaku seksual sebelum pengujian berikutnya. Tidak ada perbedaan signifikan yang terdeteksi antara kelompok untuk setiap tindakan perilaku dalam sesi perkawinan yang sesuai dan fasilitasi perilaku seksual yang diinduksi pengalaman ditampilkan oleh kedua kelompok yang berpengalaman (Tabel Tambahan 2). Kontrol termasuk laki-laki yang naif secara seksual yang ditangani bersamaan dengan hewan kawin yang memastikan terpapar pada bau dan vokalisasi perempuan tanpa kontak langsung dengan perempuan.

Untuk pengorbanan, hewan dibius secara mendalam menggunakan natrium pentobarbital (270mg / kg; ip) dan diperfusi intrakardial dengan 50 mL salin 0.9%%, diikuti oleh 500 mL 4% paraformaldehyde dalam buffer 0.1 M fosfat (PB). Otak dilepas dan dipasang kembali selama 1 h pada suhu kamar dalam fiksatif yang sama, kemudian direndam dalam 20% sukrosa dan 0.01% natrium azida dalam 0.1 M PB dan disimpan pada 4 ° C. Bagian koronal (35 µm) dipotong dengan mikrotom pembekuan (H400R, Micron, Jerman), dikumpulkan dalam empat seri paralel dalam larutan krioprotektan (30% sukrosa dan 30% etilen glikol dalam 0.1 M PB) dan disimpan pada −20 ° C. Bagian mengambang bebas dicuci secara luas dengan saline 0.1 M-buffered fosfat (PBS; pH 7.3-7.4) di antara inkubasi. Bagian terkena 1% H2O2 untuk 10 menit pada suhu kamar untuk menghancurkan peroksidase endogen, kemudian diblokir dalam larutan inkubasi PBS +, yaitu PBS yang mengandung 0.1% albumin serum sapi (item katalog 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) dan 0.4% Triton X -100 (item katalog BP151-500; Sigma-Aldrich) untuk 1 h. Bagian kemudian diinkubasi semalam di 4 ° C dalam antibodi poliklonal pan-FosB kelinci (1: 5K; sc-48 Bioteknologi Santa Cruz, Santa Cruz, CA, USA). Antibodi pan-FosB ditingkatkan terhadap wilayah internal yang dimiliki oleh FosB dan ΔFosB. Sel-sel ΔFosB-IR secara khusus ΔFosB-positif karena pada waktu pasca-stimulus (jam 24) semua FosB yang diinduksi oleh stimulus yang terdeteksi terdegradasi (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Selain itu, dalam percobaan ini, hewan yang kawin pada hari terakhir (NS, ES) dikorbankan 1 jam setelah kawin, sehingga sebelum ekspresi FosB. Analisis Western blot mengkonfirmasi deteksi ΔFosB pada sekitar 37 kD. Setelah inkubasi antibodi primer, bagian diinkubasi untuk 1 h dalam IgG anti-kelinci konjugasi biotin (1: 500 dalam PBS +; Laboratorium Vektor, Burlingame, CA, USA) dan kemudian 1 h dalam avidin-biotin-hoseradish peroxidase (elit ABC) ; 1: 1K di PBS; Laboratorium Vektor, Burlingame, CA, USA). Mengikuti bagian inkubasi ini diproses dengan salah satu cara berikut:

1. Pelabelan peroksidase tunggal

Bagian hewan NNS dan ENS digunakan untuk analisis otak akumulasi ΔFosB yang disebabkan oleh pengalaman seksual. Setelah inkubasi ABC, kompleks peroksidase divisualisasikan setelah perawatan selama 10 menit ke larutan kromogen yang mengandung 0.02% 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) yang ditingkatkan dengan 0.02% nikel sulfat dalam 0.1 M PB dengan hidrogen peroksida (0.015%). Bagian dicuci secara menyeluruh dalam 0.1 M PB untuk mengakhiri reaksi dan dipasang ke Superfrost ditambah slide kaca (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) dengan 0.3% gelatin dalam ddH20. Setelah dehidrasi, semua slide ditutup dengan DPX (dibutyl phthalate xylene).

2. Imunofluoresensi ganda

Bagian dari keempat kelompok eksperimen yang mengandung NAc dan mPFC digunakan untuk analisis osFosB dan c-Fos. Setelah inkubasi ABC, bagian diinkubasi selama 10 min dengan tyramide terbiotinilasi (BT; 1: 250 dalam PBS + 0.003% H2O2 Kit Amplifikasi Sinyal Tyramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) dan untuk 30 menit dengan Alexa 488-conjugated strepavidin (1: 100; Laboratorium Laboratorium Jackson Immunoresearch, West Grove, PA). Bagian kemudian diinkubasi semalaman dengan antibodi poliklonal kelinci khusus mengenali c-Fos (1: 150; sc-52; Bioteknologi Santa Cruz, Santa Cruz, CA), diikuti oleh inkubasi 30 min dengan antibodi kambing anti-kelinci Cy3-konjugasi antibodi sekunder (1: 200; Laboratorium Jackson Immunoresearch, West Grove, PA, USA). Setelah pewarnaan, bagian dicuci secara menyeluruh dalam 0.1 M PB, dipasang pada slide kaca berkode dengan 0.3% gelatin dalam ddH20 dan penutup-selip dengan media pemasangan berair (Gelvatol) yang mengandung agen anti-fading 1,4-diazabicyclo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Kontrol imunohistokimia termasuk penghilangan salah satu atau kedua antibodi primer, sehingga tidak ada label pada panjang gelombang yang sesuai.

Analisis Data

Analisis otak ΔFosB

Dua peneliti yang buta terhadap pengobatan melakukan pemindaian lebar otak pada slide kode. Sel-sel immunFosB-immunoreactive (-IR) di seluruh otak dianalisis secara semi-kuantitatif dengan menggunakan skala untuk mewakili jumlah sel ΔFosB-positif seperti yang diuraikan dalam Tabel 1. Selain itu, berdasarkan temuan semi-kuantitatif, jumlah sel ΔFosB-IR dihitung menggunakan area analisis standar di area otak yang terlibat dalam penghargaan dan perilaku seksual menggunakan tabung gambar kamera lucida yang terpasang pada mikroskop Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Jerman): NAc (inti (C) dan shell (S); 400 × 600µm) dianalisis pada tiga tingkat rostral-ekor (Balfour et al. 2004); daerah tegmental ventral (VTA; 1000 × 800µm) dianalisis pada tiga tingkat rostral-ekor (Balfour et al. 2004) dan VTA tail (Perrotti et al. 2005); korteks prefrontal (daerah cinglulate anterior (ACA); korteks prelimbik (PL); korteks infralimbik (IL); masing-masing 600 × 800µm)); caudate putamen (CP; 800 × 800µm); dan nukleus preoptik medial (MPN; 400 × 600 µm) (Angka Tambahan 1 – 3). Dua bagian dihitung per subkawasan, dan rata-rata per hewan untuk perhitungan rata-rata grup. Rata-rata kelompok yang naif dan berpengalaman secara seksual dari sel ΔFosB-IR dibandingkan untuk setiap subregion menggunakan uji-t yang tidak berpasangan.

Tabel 1    

Ringkasan ekspresi osFosB pada hewan yang naif dan berpengalaman secara seksual
Analisis ΔFosB dan c-Fos

Gambar ditangkap menggunakan kamera CCD yang didinginkan (Microfire, Optronics) yang terpasang pada mikroskop Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Jerman) dan perangkat lunak Neurolucida (MicroBrightfield Inc) dengan pengaturan kamera tetap untuk semua subjek (menggunakan tujuan 10x). Jumlah sel yang mengekspresikan c-Fos-IR atau osFosB-IR dalam bidang standar analisis dalam inti dan kulit NAc (masing-masing 400 × 600µm; Gambar Tambahan 1) dan ACA dari mPFC (600 × 800µm; Gambar Tambahan 3) secara manual dihitung oleh pengamat yang buta terhadap kelompok eksperimen, dalam bagian 2 per hewan menggunakan perangkat lunak Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) dan rata-rata per hewan. Rata-rata kelompok sel c-Fos atau osFosB dibandingkan dengan menggunakan ANOVA dua arah (Faktor: pengalaman seksual dan aktivitas seks) dan Fisher LSD untuk perbandingan post hoc pada tingkat signifikansi 0.05.

Eksperimen 2: Δ manipulasi ekspresi FB

Pemindahan Gen yang Dimediasi Vektor Virus

Tikus Sprague Dawley jantan yang secara seksual naif secara acak dibagi menjadi kelompok-kelompok sebelum operasi stereotaxic. Semua hewan menerima injeksi mikro bilateral dari vektor rekombinan adeno-related viral (rAAV) yang mengkode GFP (kontrol; n = 12), wild type ΔFosB (n = 11) atau mitra pengikatan dominan-negatif ΔFosB disebut ΔJunD (n = 9) ke dalam NAc. ΔJunD mengurangi ΔFosB yang dimediasi transkripsi dengan heterodimerisasi kompetitif dengan osFosB sebelum mengikat wilayah AP-1 dalam promotor gen (Winstanley et al. 2007). Titer virus ditentukan oleh qPCR dan dievaluasi in vivo sebelum mempelajari onset. Titer adalah 1 – 2 × 1011 partikel infeksius per mL. vektor rAAV disuntikkan dalam volume 1.5 µL / sisi selama menit 7 (koordinat: AP + 1.5, ML +/− 1.2 dari Bregma; DV −7.6 dari permukaan tengkorak menurut Paxinos dan Watson, 1998) menggunakan syringe Hamilton (5µL) ; Perangkat Harvard, Holliston, MA, AS). Vektor tidak menghasilkan toksisitas lebih besar dari infus kontrol saja (Winstanley et al, 2007; untuk perincian persiapan AAV, lihat Hommel et al., 2003). Eksperimen perilaku dimulai 3 minggu setelah injeksi vektor memungkinkan untuk infeksi virus yang optimal dan stabil (Wallace et al. 2008). Ekspresi transgen pada spesies murine memuncak pada hari-hari 10 dan tetap meningkat selama setidaknya 6 bulan (Winstanley et al. 2007). Pada akhir percobaan, hewan-hewan itu diperfusi secara transcardially dan bagian NAc diproses secara immuno untuk GFP (1: 20K; antibodi anti-GFP kelinci; Probe Molekul) menggunakan reaksi ABC-peroxidase-DAB (seperti dijelaskan di atas) untuk secara histologis memverifikasi situs injeksi menggunakan GFP sebagai penanda (Gambar Tambahan 4). ΔFosB dan ΔJunD vektor juga mengandung segmen yang mengekspresikan GFP yang dipisahkan oleh situs entri ribosom internal, memungkinkan untuk verifikasi situs injeksi dengan visualisasi GFP pada semua hewan. Hanya hewan dengan situs injeksi dan penyebaran virus terbatas pada NAc yang dimasukkan dalam analisis statistik. Penyebaran virus umumnya terbatas pada sebagian NAc dan tidak menyebar rostral-kaudal ke seluruh nukleus. Selain itu, penyebaran virus tampaknya sebagian besar terbatas pada cangkang atau inti. Namun, variasi situs injeksi dan penyebaran dalam NAc tidak mempengaruhi efek pada perilaku. Akhirnya, suntikan GFP tidak mempengaruhi perilaku seksual atau fasilitasi perilaku seksual yang diinduksi pengalaman dibandingkan dengan hewan non-bedah dari penelitian sebelumnya (Balfour et al. 2004).

Perilaku Seksual

Tiga minggu setelah pengiriman vektor virus, hewan dikawinkan dengan satu ejakulasi (atau selama 1 jam) selama 4 berturut-turut, sesi kawin harian untuk mendapatkan pengalaman seksual (sesi pengalaman) dan kemudian diuji untuk ekspresi pengalaman jangka panjang yang diinduksi fasilitasi perilaku seksual 1. dan 2 minggu (sesi tes 1 dan 2) setelah sesi pengalaman akhir. Parameter perilaku seksual dicatat selama semua sesi perkawinan seperti dijelaskan di atas. Perbedaan statistik untuk semua parameter selama setiap sesi perkawinan dibandingkan di dalam dan di antara kelompok yang menggunakan tindakan dua arah berulang ANOVA (Faktor: sesi perawatan dan kawin) atau ANOVA satu arah (latensi ejakulasi, jumlah pemasangan dan intromisi; Faktor: perawatan atau perkawinan; sesi) diikuti oleh uji Fisher LSD atau Newman-Keuls untuk perbandingan post hoc pada tingkat signifikansi 0.05. Secara khusus, efek fasilitatif pengalaman seksual pada parameter kawin dibandingkan antara sesi pengalaman 1 (naif) dan sesi pengalaman masing-masing 2, 3, atau 4, serta antara kelompok eksperimen dalam setiap sesi pengalaman. Selain itu, untuk menganalisis efek pengobatan (vektor) pada fasilitasi jangka panjang dari perilaku seksual, parameter kawin dibandingkan antara sesi pengalaman 4 dan sesi tes 1 dan 2 dalam setiap kelompok perlakuan, dan dibandingkan antara kelompok eksperimen dalam setiap sesi tes.

Pergi ke:

HASIL

Pengalaman seksual menyebabkan akumulasi osFosB

Awalnya, penyelidikan semi-kuantitatif akumulasi ΔFosB di seluruh otak pada laki-laki yang berpengalaman secara seksual dibandingkan dengan kontrol naif seksual dilakukan. Ringkasan dari keseluruhan temuan disediakan di Tabel 1. Analisis osFosB-IR dilanjutkan dengan menentukan jumlah ΔFosB-IR sel di beberapa daerah otak terkait limbik menggunakan area analisis standar. Gambar 1 menunjukkan gambar representatif DAB-Ni yang menodai NAc hewan yang naif dan berpengalaman secara seksual. Regulasi ΔFosB yang signifikan ditemukan di subregion mPFC (Gambar 2A), Inti dan cangkang NAc (2B), putamen caudate (2B) dan VTA (2C). Dalam NAc, perbedaan signifikan ada di semua tingkat rostral-caudal di inti dan shell NAc, dan data ditunjukkan dalam Gambar 2 adalah rata-rata dari semua tingkat rostro-ekor. Sebaliknya, tidak ada peningkatan yang signifikan dalam ΔFosB-IR dalam nukleus preoptik medial hipotalamus (NNS: Avg 1.8 +/− 0.26; ENS: Avg 6.0 +/− 1.86).

Gambar 1    

 

Gambar representatif menunjukkan cellsFosB-IR sel (hitam) di NAc dari naif tanpa jenis kelamin (A) dan tidak mengalami jenis kelamin (B). aco: commissure anterior Skala bar menunjukkan 100 µm.
Gambar 2     

Jumlah sel ΔFosB-IR dalam: A. infralimbic (IL), prelimbic (PL) dan subregion cingulate cortex (ACA) anterior dari korteks prefrontal medial; B. Inti accumbens core dan shell, dan caudate putamen (CP); C. Rostral, tengah, ekor dan ekor ...

Pengalaman seksual melemahkan c-Fos yang disebabkan oleh kawin

Efek pengalaman seksual pada tingkat osFosB di NAc dikonfirmasi menggunakan teknik pewarnaan fluoresensi. Selain itu, efek pengalaman seksual pada ekspresi c-Fos dianalisis. Gambar 3 menunjukkan gambar representatif sel ΔFosB- (hijau) dan c-Fos (merah) -IR di semua kelompok eksperimen (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). Pengalaman seksual secara signifikan meningkatkan ekspresi osFosB di inti NAc (Gambar 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) dan shell (Gambar 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Sebaliknya, mengawinkan 1 jam sebelum perfusi, tidak berpengaruh pada ekspresi osFosB (Gambar 4A, C) dan tidak ada interaksi antara pengalaman seksual dan perkawinan segera sebelum perfusi terdeteksi. Ada efek keseluruhan kawin sebelum perfusi pada ekspresi c-Fos di kedua inti NAc (Gambar 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) dan shell (Gambar 4D: F1,15 = 39.4; p <0.001). Selain itu, efek keseluruhan dari pengalaman seksual terdeteksi di inti NAc (Gambar 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) dan shell (Gambar 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) dan interaksi antara pengalaman seksual dan perkawinan sebelum perfusi terdeteksi pada inti NAc (F1,15 = 6.5; p = 0.022), dengan tren di shell (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Analisis post hoc menunjukkan ekspresi c-Fos yang diinduksi oleh pasangan dalam inti dan kulit jantan yang naif secara seksual (Gambar 4B, D). Namun, pada laki-laki yang berpengalaman secara seksual, c-Fos tidak meningkat secara signifikan pada inti NAc (Gambar 4B) dan secara signifikan dilemahkan dalam shell (Gambar 4D). Dengan demikian, pengalaman seksual menyebabkan pengurangan ekspresi c-Fos yang diinduksi kawin. Nilai-P untuk perbandingan pasangan-bijaksana tertentu ada dalam legenda gambar.

Gambar 3     

Gambar representatif menunjukkan ΔFosB (hijau) dan c-Fos (merah) dalam NAc untuk setiap kelompok eksperimen. Bilah skala menunjukkan 100 µm.
Gambar 4     

ΔFosB dan c-Fos yang diinduksi oleh pengalaman seks. Jumlah ΔFosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) atau c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) sel imunoreaktif untuk setiap kelompok: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) atau ES (n = 4). Data diungkapkan ...

Efek dari pengalaman seksual pada level c-Fos yang diinduksi kawin tidak terbatas pada NAc. Redaman serupa dari ekspresi c-Fos diamati dalam ACA pada hewan yang berpengalaman secara seksual dibandingkan dengan kontrol yang naif secara seksual. Pengalaman seksual memiliki efek signifikan pada ekspresi ΔFosB di ACA (Gambar 4E: F1,15 = 154.2; p <0.001). Perkawinan sebelum perfusi tidak berpengaruh pada ekspresi ΔFosB (Gambar 4C) tetapi secara signifikan meningkatkan c-Fos (Gambar 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) di ACA. Selain itu, ekspresi c-Fos yang disebabkan oleh kawin di ACA secara signifikan menurun oleh pengalaman seksual (Gambar 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). Interaksi dua arah antara pengalaman seksual dan perkawinan sebelum perfusi terdeteksi untuk ekspresi c-Fos (Gambar 4F: F1,15 = 15.1; p <0.001). Nilai-P untuk perbandingan berpasangan tertentu ada di legenda gambar. Akhirnya, tidak ada penurunan yang signifikan dalam ekspresi c-Fos yang diinduksi oleh kawin dalam nukleus preoptik medial (NS: Rata-rata 63.5 +/− 4.0; ES: Rata-rata 41.4 +/− 10.09), area di mana pengalaman kawin tidak menyebabkan perubahan yang signifikan. peningkatan ekspresi ΔFosB, menunjukkan bahwa ekspresi c-Fos yang diinduksi oleh kawin tidak terpengaruh di semua area otak.

ΔFosB di NAc memediasi penguatan perilaku seksual

Untuk mengeksplorasi mekanisme molekuler potensial untuk penguatan perilaku seksual seperti yang ditunjukkan oleh fasilitasi perilaku seksual yang diinduksi oleh pengalaman, efek manipulasi lokal tingkat ΔFosB dan aktivitas transkripsi ditentukan. Pengalaman seksual selama empat sesi pengalaman berturut-turut memiliki efek signifikan pada latensi pemasangan (Gambar 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), latensi intromission (Gambar 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001), dan latensi ejakulasi (Gambar 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). Hewan kontrol GFP menampilkan fasilitasi perilaku seksual yang diinduksi pengalaman yang diharapkan dan menampilkan latensi yang jauh lebih rendah untuk pemasangan pertama, intromisi pertama dan ejakulasi selama sesi pengalaman 4 dibandingkan dengan sesi pengalaman 1 (Gambar 5A – C; lihat legenda angka untuk nilai-p). Fasilitasi perilaku seksual yang diinduksi oleh pengalaman ini juga diamati pada kelompok ΔFosB untuk pemasangan dan latensi intromisi, tetapi tidak ada perbedaan signifikan yang terdeteksi dalam latensi ejakulasi (Gambar 5A – C). Sebaliknya, ΔJunD animals menunjukkan fasilitasi terhambat; meskipun latensi untuk pemasangan, intromisi, dan ejakulasi memang menurun dengan sesi kawin berulang, tidak ada parameter ini yang mencapai signifikansi statistik bila dibandingkan antara sesi pengalaman 1 dan 4 (Gambar 5A – C). Antara perbandingan kelompok untuk setiap sesi pengalaman menunjukkan bahwa unJunD memiliki latensi yang jauh lebih lama untuk dipasang, intromit dan ejakulasi selama sesi pengalaman dibandingkan dengan osFosB dan GFP (Gambar 5A – C). Selain itu, baik pengalaman seksual dan pengobatan memiliki efek signifikan pada efisiensi sanggama (Gambar 5F: pengalaman seksual, F1,12 = 22.5; p <0.001; pengobatan, F1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB jantan memiliki peningkatan efisiensi sanggama selama sesi pengalaman 4 dibandingkan dengan sesi pengalaman 1 (Gambar 5F). Selain itu, hewan osFosB memiliki jumlah kuda yang jauh lebih sedikit sebelum ejakulasi selama hari sesi pengalaman 4, dibandingkan dengan sesi pengalaman 1 (Gambar 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004), dan bahwa ΔJunDes jantan memiliki lebih banyak tunggangan sebelum ejakulasi, dengan demikian secara signifikan mengurangi efisiensi sanggama, daripada salah satu dari dua kelompok lainnya (Gambar 5D dan F). Dengan demikian, GFP dan ΔFosB hewan menunjukkan fasilitasi inisiasi perilaku seksual dan kinerja seksual yang disebabkan oleh pengalaman, sedangkan ΔJunD hewan tidak.

Gambar 5     

Perilaku seksual GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) dan ΔJunD (n = 9) hewan: latensi pemasangan (A), latensi intromisi (B), latensi ejakulasi (C), jumlah tunggangan (D), jumlah intromisi (E) dan efisiensi sanggama (F). Data diungkapkan ...

Untuk menguji hipotesis bahwa ekspresi expressionFosB sangat penting untuk ekspresi jangka panjang dari fasilitasi perilaku seksual yang diinduksi pengalaman, hewan diuji minggu 1 (sesi tes 1) dan minggu 2 (sesi tes 2) setelah sesi pengalaman akhir. Memang, perilaku seksual yang difasilitasi dipertahankan baik dalam kelompok GFP dan ΔFosB karena tidak ada parameter perilaku yang berbeda antara sesi tes 1 atau 2 dan sesi pengalaman akhir 4, dalam kelompok GFP dan ΔFosB (Gambar 5A – C; kecuali untuk latensi ejakulasi dan efisiensi sanggama pada sesi uji 1 untuk ΔFosB hewan). Perbedaan yang signifikan antara animalsJunD animals dan GFP atau ΔFosB kelompok terdeteksi di kedua sesi tes untuk semua parameter perilaku seksual (Gambar 5A – F). Tidak ada perbedaan yang terdeteksi antara atau di dalam kelompok ketika membandingkan jumlah intromisi, PEI, atau persentase hewan yang mengalami ejakulasi (100% pejantan dalam semua kelompok yang mengalami ejakulasi selama empat sesi perkawinan terakhir).

Pergi ke:

PEMBAHASAN

Studi saat ini menunjukkan bahwa pengalaman seksual menyebabkan akumulasi ΔFosB di beberapa daerah otak terkait limbik, termasuk inti dan cangkang NAc, mPFC, VTA dan putamen berekor. Selain itu, pengalaman seksual melemahkan ekspresi c-Fos yang diinduksi kawin dalam NAc dan ACA. Akhirnya, osFosB di NAc terbukti sangat penting dalam memediasi fasilitasi kawin selama perolehan pengalaman seksual dan ekspresi jangka panjang dari fasilitasi perilaku perilaku seksual yang diinduksi oleh pengalaman.. Secara khusus, mengurangi criptionFosB yang dimediasi oleh fasilitasi melemahkan pengalaman yang dipicu oleh motivasi dan kinerja seksual, sementara ekspresi berlebihan ΔFosB di NAc menyebabkan peningkatan fasilitasi perilaku seksual, dalam hal peningkatan kinerja seksual dengan lebih sedikit pengalaman. Bersama-sama, temuan saat ini mendukung hipotesis bahwa ΔFosB adalah mediator molekul penting untuk plastisitas saraf dan perilaku jangka panjang yang disebabkan oleh pengalaman seksual.

Temuan saat ini memperluas studi sebelumnya yang menunjukkan sexFOSB yang diinduksi oleh pengalaman seks pada tikus jantan (Wallace et al. 2008) dan hamster betina (Pagar tanaman et al. 2009). Wallace et al. (2008) menunjukkan bahwa rAAV-ΔFosB ekspresi berlebihan dalam NAc meningkatkan perilaku seksual pada hewan yang naif secara seksual selama sesi perkawinan pertama, sebagaimana dibuktikan oleh intromisi yang lebih sedikit terhadap ejakulasi dan interval pasca ejakulasi yang lebih pendek, tetapi tidak memiliki efek pada pria yang berpengalaman secara seksual (Wallace et al. 2008).

Sebaliknya, penelitian ini tidak menunjukkan efek ekspresi berlebihan ΔFosB pada laki-laki yang naif secara seksual selama tes pertama, melainkan selama dan mengikuti perolehan pengalaman seksual. ΔFosB ekspresi berlebihan menunjukkan peningkatan kinerja seksual (peningkatan efisiensi persetubuhan) dibandingkan dengan hewan GFP.

Selain itu, penelitian ini menguji peran ΔFosB dengan memblokir ΔFosB-mediated transcription menggunakan vektor virus yang mengekspresikan unJunD. Pencegahan peningkatan yang diinduksi pengalaman dalam ekspresi osFosB menghambat fasilitasi motivasi seksual yang diinduksi oleh pengalaman (peningkatan tingkat latensi dan intromisi) serta kinerja seksual (peningkatan latensi ejakulasi dan jumlah tingkat) dan selanjutnya ekspresi jangka panjang dari perilaku seksual yang difasilitasi.

Oleh karena itu, data ini adalah yang pertama untuk menunjukkan peran wajib untuk ΔFosB dalam perolehan fasilitasi perilaku seksual yang disebabkan oleh pengalaman. Selain itu, data ini menunjukkan bahwa osFosB juga secara kritis terlibat dalam ekspresi jangka panjang dari perilaku yang difasilitasi oleh pengalaman. Kami mengusulkan bahwa ungkapan jangka panjang dari perilaku yang difasilitasi ini mewakili bentuk memori untuk imbalan alami, karenanya ΔFosB dalam NAc adalah mediator memori hadiah. Pengalaman seksual juga meningkatkan level osFosB di VTA dan mPFC, area yang terlibat dalam penghargaan dan memori (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Penelitian di masa depan diperlukan untuk menjelaskan signifikansi potensial dari upFosB up-regulation di area ini untuk memori hadiah.

Ekspresi osFB sangat stabil, sehingga memiliki potensi besar sebagai mediator molekuler dari adaptasi otak yang persisten setelah gangguan kronis (Nestler et al. 2001). OsFosB telah terbukti secara bertahap meningkatkan NAc selama beberapa injeksi kokain dan bertahan hingga beberapa minggu (Pengharapan et al. 1992; Pengharapan et al. 1994). Perubahan dalam ekspresi NAc ΔFosB ini dikaitkan dengan kepekaan dan kecanduan hadiah obat (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). Sebaliknya, peran ΔFosB dalam memediasi hadiah alami telah dipahami. Bukti terbaru telah muncul menunjukkan bahwa induksi osFosB di NAc terlibat dalam hadiah alami. Levels Tingkat FOSB juga meningkat pada NAc setelah asupan sukrosa dan roda berjalan. Over-ekspresi ΔFosB di striatum menggunakan bitransgenic mouse atau vektor virus pada tikus menyebabkan peningkatan asupan sukrosa, meningkatkan motivasi untuk makanan dan meningkatkan roda berjalan spontan (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Data saat ini secara substansial menambah laporan ini dan lebih lanjut mendukung gagasan bahwa osFosB adalah mediator penting untuk penguatan hadiah dan memori hadiah alami.

ΔFosB dapat memediasi penguatan perilaku seksual yang diinduksi oleh pengalaman melalui induksi plastisitas dalam sistem mesolimbik. Memang, pengalaman seksual menyebabkan sejumlah perubahan jangka panjang pada sistem mesolimbik (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; Pitcher et al. 2010). Itupada tingkat perilaku, respons alat gerak yang peka terhadap amfetamin dan peningkatan hadiah amfetamin telah ditunjukkan pada tikus jantan yang berpengalaman secara seksual (Pitcher et al. 2010); respons alat gerak yang diubah terhadap amfetamin juga telah diamati dengan hamster betina (Bradley & Meisel 2001). Selain itu, peningkatan jumlah duri dendritik dan kompleksitas dendritik telah ditemukan setelah periode pantang dari pengalaman seksual pada tikus jantan (Pitcher et al. 2010). Studi saat ini menunjukkan ΔFosB mungkin merupakan mediator molekuler spesifik dari hasil jangka panjang dari pengalaman seksual. Dalam perjanjian, osFosB baru-baru ini terbukti penting untuk mendorong perubahan tulang belakang dendritik sebagai respons terhadap pemberian kokain kronis. (Dietz et al. 2009; Membingungkan et al. 2010).

Tidak jelas neurotransmitter hulu mana yang bertanggung jawab untuk menginduksi osFosB dalam NAc, tetapi DA telah diusulkan sebagai kandidat (Nye et al. 1995). Hampir semua obat pelecehan, termasuk kokain, amfetamin, opiat, kanabinoid, dan etanol, serta hadiah alami, meningkatkan osFosB dalam NAc (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Kedua obat pelecehan dan imbalan alami meningkatkan konsentrasi DA sinaptik di NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). Δ Induksi FOSB oleh obat-obatan pelecehan telah ditunjukkan pada sel yang mengandung reseptor DA dan andFosB yang diinduksi kokain diblokir oleh antagonis reseptor D1 DAt (Nye et al. 1995). Oleh karena itu, pelepasan DA dihipotesiskan untuk merangsang ekspresi osFosB dan dengan demikian memediasi neuroplastisitas terkait hadiah. Lebih lanjut mendukung gagasan bahwa ΔKadar FOSB tergantung pada DA adalah temuan bahwa area otak tempat pengalaman seksual berubah levelsKadar FOSB menerima input dopaminergik yang kuat dari VTA, termasuk korteks prefrontal medial dan amigdala basolateral.

Namun, sebaliknya, osFosB tidak meningkat di daerah preoptik medial meskipun daerah ini menerima input dopaminergik, meskipun dari sumber hipotalamus (Miller & Lonstein 2009). Penelitian di masa depan diperlukan untuk menguji apakah ekspresi BFB yang diinduksi oleh pasangan dan efek pengalaman seksual pada motivasi dan kinerja seksual tergantung pada tindakan DA. Peran DA dalam hadiah seksual pada tikus jantan saat ini tidak sepenuhnya jelas (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Ada banyak bukti bahwa DA dilepaskan dalam NAc selama paparan terhadap wanita atau kawin (Damsma et al. 1992) dan neuron DA diaktifkan selama perilaku seksual (Balfour et al. 2004). Namun, suntikan sistemik dari antagonis reseptor DA tidak mencegah preferensi tempat yang dikondisikan imbalan seksual (Agmo & Berenfeld 1990) dan hipotesis bahwa DA sangat penting untuk penguatan kawin yang diinduksi pengalaman tidak diuji.

Tidak jelas juga apa mediator hilir efek ΔFB pada perilaku seksual. ΔFosB telah terbukti bertindak sebagai aktivator transkripsional dan penekan melalui mekanisme bergantung AP-1 (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Sejumlah gen target telah diidentifikasi, termasuk gen awal c-fos (Pengharapan et al. 1992; Pengharapan et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Sumbat et al. 2001), dynorphin (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), Subunit NFkB (Ang et al. 2001) Daridan subunit GluR2 reseptor AMPA glutamat (Kelz et al. 1999). Hasil saat ini menunjukkan bahwa kadar c-Fos yang diinduksi kawin berkurang oleh pengalaman seksual di area otak dengan peningkatan osFosB (NAc dan ACA). Penindasan c-Fos tampaknya tergantung pada periode sejak kawin terakhir dan sesi kawin berulang, seperti dalam penelitian sebelumnya, penurunan c-Fos tidak terdeteksi pada tikus jantan yang diuji 1 minggu setelah sesi perkawinan terakhir (Balfour et al. 2004) atau setelah pengalaman seksual yang hanya terdiri dari satu sesi kawin (Lopez & Ettenberg 2002). Selain itu, temuan saat ini konsisten dengan bukti bahwa ΔFosB menekan gen c-fos setelah paparan amfetamin kronis (Renthal et al. 2008). Sejalan dengan temuan ini, induksi beberapa mRNA gen awal langsung (c-fos, fosB, c-jun, junB, dan zif268) berkurang setelah injeksi kokain berulang dibandingkan dengan injeksi obat akut (Pengharapan et al. 1992; Pengharapan et al. 1994), dan c-fos yang diinduksi amfetamin ditekan setelah penarikan dari pemberian amfetamin kronis (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Relevansi fungsional regulasi penurunan ekspresi c-Fos setelah perawatan obat kronis atau pengalaman seksual masih belum jelas, dan telah disarankan sebagai mekanisme homeostatik yang penting untuk mengatur sensitivitas hewan terhadap paparan hadiah berulang (Renthal et al. 2008).

Sebagai kesimpulan, penelitian ini menunjukkan bahwa ΔFosB di NAc memainkan peran integral dalam memori hadiah seksual, mendukung kemungkinan bahwa ΔFosB penting untuk penguatan dan memori hadiah umum. Temuan dari penelitian ini lebih lanjut menjelaskan pemahaman kita tentang mekanisme seluler dan molekuler yang memediasi penghargaan dan motivasi seksual, dan menambah literatur yang menunjukkan bahwa BFosB adalah pemain penting dalam pengembangan kecanduan, dengan menunjukkan peran ΔFosB dalam hadiah alami penguatan.

Pergi ke:

Materi tambahan

Supp Gambar S1-S4 & Tabel S1-S2

Pergi ke:

Ucapan Terima Kasih

Penelitian ini didukung oleh hibah dari Canadian Instituteutes of Health Research untuk LMC, Institut Nasional Kesehatan Mental untuk EJN, dan Dewan Riset Ilmu Pengetahuan Alam dan Rekayasa Kanada untuk KKP dan LMC.

Pergi ke:

REFERENSI

  • Agmo A. Perilaku seksual tikus jantan. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Agmo A, Berenfeld R. Memperkuat sifat ejakulasi pada tikus jantan: peran opioid dan dopamin. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, P Zagouras, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induksi faktor-kappaB nuklir dalam nukleus accumbens oleh pemberian kokain kronis. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Perilaku seksual dan isyarat lingkungan terkait seks mengaktifkan sistem mesolimbik pada tikus jantan. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Efek paparan kronis terhadap kokain diatur oleh protein neuron Cdk5. Alam. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. Lesi 6-Hydroxydopamine pada hamster betina (Mesocricetus auratus) menghapuskan efek peka dari pengalaman seksual pada interaksi sanggama dengan jantan. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Induksi perilaku seksual c-Fos dalam nucleus accumbens dan aktivitas lokomotor yang distimulasi amfetamin dipengaruhi oleh pengalaman seksual sebelumnya pada hamster Suriah betina. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, IN Alibhai, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Mekanisme yang bergantung pada protein dan tidak tergantung pada destabilisasi FosB: identifikasi domain degron FosB dan implikasinya bagi stabilitas DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chao J, Nestler EJ. Neurobiologi molekuler kecanduan obat. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, MB Kelz, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulasi delta FosB dan protein mirip-FosB dengan kejang elektrokonvulsif dan perawatan kokain. Farmakologi molekuler. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Ekspresi DeltaFosB tipe spesifik sel striatal meningkatkan insentif untuk kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Peraturan pusat ejakulasi. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Perilaku seksual meningkatkan penularan dopamin dalam nukleus accumbens dan striatum tikus jantan: perbandingan dengan kebaruan dan penggerak. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Dietz DM, Labirin I, Mekanik M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Peran penting ΔFosB dalam regulasi kokain dendritik nukleus accumbens neuron. Abstrak Society for Neuroscience. 2009
  • Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Mencampur kesenangan: Ulasan efek obat pada perilaku seks pada manusia dan model hewan. Horm Behav. 2009 Dalam pers.
  • Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Ekspresi Delta FosB yang berlebihan di nucleus accumbens meningkatkan imbalan seksual pada hamster Suriah perempuan. Gen Otak Behav. 2009;8: 442-449. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Makan dan stimulasi hipotalamus meningkatkan pergantian dopamin di accumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Imbalan makanan dan kokain meningkatkan dopamin ekstraseluler dalam nukleus accumbens yang diukur dengan mikrodialisis. Sci hidup. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, RS Duman, Greenberg ME, Nestler EJ. Peran penting gen fosB dalam aksi molekuler, seluler, dan perilaku kejang electroconvulsive kronis. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Gen knockdown lokal di otak menggunakan interferensi RNA yang dimediasi virus. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulasi ekspresi gen awal segera dan pengikatan AP-1 dalam nukleus tikus accumbens oleh kokain kronis. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, MB Kelz, DW Sendiri, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, RS Duman, Nestler EJ. Induksi kompleks AP-1 yang tahan lama terdiri dari perubahan protein mirip-Fos di otak oleh kokain kronis dan perawatan kronis lainnya. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Perilaku Seksual Pria. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
  • Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Perawatan amfetamin akut dan kronis berbeda mengatur tingkat RNA messenger neuropeptida dan imunoreaktivitas Fos dalam neuron striatal tikus. Ilmu saraf. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Jenkins WJ, Becker JB. Peningkatan dinamis dopamin selama kopulasi mondar-mandir pada tikus betina. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • MB Kelz, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, DW Diri, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Ekspresi faktor transkripsi deltaFosB di otak mengontrol sensitivitas terhadap kokain. Alam. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Lopez HH, Ettenberg A. Paparan terhadap tikus betina menghasilkan perbedaan dalam induksi c-fos antara tikus jantan yang naif secara seksual dan yang berpengalaman. Res otak. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Labirin I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mekanik M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Peran penting dari histone methyltransferase G9a dalam plastisitas yang diinduksi kokain. Science. 2010;327: 213-216. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulasi ekspresi gen dan hadiah kokain oleh CREB dan DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, PG Ulery, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: saklar molekuler untuk adaptasi jangka panjang di otak. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Miller SM, Lonstein JS. Proyeksi dopaminergik ke area medial preoptik tikus postpartum. Ilmu saraf. 2009;159: 1384-1396. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkripsi kopling dalam neuron: peran gen awal-seluler. Tren Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Nestler EJ. Mekanisme molekuler dari kecanduan narkoba. Neurofarmakologi. 2004;47 Suppl 1: 24 – 32. [PubMed]
  • Nestler EJ. Neurobiologi kecanduan kokain. Perspektif Praktisi Sains. 2005;3: 4-10. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Nestler EJ. Ulasan. Mekanisme transkripsi kecanduan: peran DeltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: saklar molekuler berkelanjutan untuk kecanduan. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Studi farmakologis tentang regulasi induksi antigen terkait FOS kronis oleh kokain di striatum dan nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB dalam nucleus accumbens mengatur perilaku dan motivasi instrumental yang diperkuat makanan. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, P Ulery, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Ekspresi spesifik wilayah otak yang dapat diinduksi dari mutan negatif dominan c-Jun pada tikus transgenik menurunkan sensitivitas terhadap kokain. Res otak. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, PG Ulery, Wallace DL, DW Sendiri, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB terakumulasi dalam populasi sel GABAergik di ekor posterior area ventral tegmental setelah perawatan psikostimulan. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, PG Ulery, Barrot M, Monteggia L, RS Duman, Nestler EJ. Induksi deltaFosB dalam struktur otak yang berhubungan dengan hadiah setelah stres kronis. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Penenun RR, Robison B, Renthal W, Labirin I, Yazdani S, Elmore RG, DJ Knapp, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Pola yang berbeda dari induksi DeltaFosB di otak oleh obat-obatan pelecehan. Sinaps. 2008;62: 358-369. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Pfaus JG. Jalur hasrat seksual. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Pengkondisian dan perilaku seksual: ulasan. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Perspektif top-down tentang dopamin, motivasi dan memori. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplastisitas dalam sistem mesolimbik yang diinduksi oleh ganjaran alami dan ganjaran ganjaran berikutnya. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Labirin I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB memediasi desensitisasi epigenetik dari gen c-fos setelah paparan amfetamin kronis. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Labirin I, Sikder D, AJ Robison, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M Nestler EJ. Analisis genome luas regulasi kromatin oleh kokain mengungkapkan peran untuk sirtuins. Neuron. 2009;62: 335-348. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Penghargaan seksual pada tikus jantan: efek dari pengalaman seksual pada preferensi tempat yang berhubungan dengan ejakulasi dan intromisi. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforilasi DeltaFosB memediasi stabilitas in vivo. Ilmu saraf. 2008
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulasi stabilitas DeltaFosB oleh fosforilasi. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, TA Hijau, Kirk A, SD Iniguez, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Pengaruh DeltaFosB dalam nukleus accumbens pada perilaku yang berhubungan dengan penghargaan alami. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB mengatur roda berjalan. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, TA Hijau, Bachtell RK, Perrotti LI, RJ DiLeone, Russo SJ, Garth WJ, DW Sendiri, Nestler EJ. Induksi DeltaFosB dalam korteks orbitofrontal memediasi toleransi terhadap disfungsi kognitif yang diinduksi kokain. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Peran penting untuk DeltaFosB dalam nukleus accumbens dalam aksi morfin. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos memfasilitasi akuisisi dan kepunahan perubahan persisten yang disebabkan kokain. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]