Metamfetamin bekerja pada subpopulasi neuron yang mengatur perilaku seksual pada tikus jantan (2010)

Ilmu saraf. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, RA yang bijaksana, Lehman MN, Kencangkan LM.

sumber

Departemen Anatomi dan Biologi Sel, Sekolah Kedokteran dan Kedokteran Gigi Schulich, Universitas Ontario Barat, London, ON, Kanada, N6A 5C1.

Abstrak

Metamfetamin (Meth) adalah stimulan yang sangat adiktif. Penyalahgunaan Meth biasanya dikaitkan dengan praktik perilaku berisiko seksual dan peningkatan prevalensi Human Immunodeficiency Virus dan pengguna Meth melaporkan peningkatan gairah seksual, gairah, dan kenikmatan seksual. Dasar biologis untuk hubungan seks antar jenis obat ini tidak diketahui. Studi saat ini menunjukkan bahwa pemberian Meth pada tikus jantan mengaktifkan neuron di daerah otak sistem mesolimbik yang terlibat dalam pengaturan perilaku seksual. Secara khusus, Meth dan kawin mengaktifkan sel-sel dalam nukleus accumbens core dan shell, amigdala basolateral, dan korteks cingulate anterior. Temuan ini menggambarkan bahwa berbeda dengan keyakinan saat ini, penyalahgunaan obat dapat mengaktifkan sel yang sama dengan penguat alami, yaitu perilaku seksual, dan pada gilirannya dapat memengaruhi pencarian kompulsif dari imbalan alami ini.

Kata kunci: nucleus accumbens, amigdala basolateral, korteks prefrontal, penyalahgunaan zat, reproduksi, kecanduan

Motivasi dan penghargaan diatur oleh sistem mesolimbik, jaringan yang saling berhubungan dari area otak yang terdiri dari area ventral tegmental (VTA) nucleus accumbens (NAc), amygdala basolateral, dan medial prefrontal cortex (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas dan Volkow, 2005). Ada banyak bukti bahwa sistem mesolimbik diaktifkan sebagai respons terhadap kedua zat pelecehan (Di Chiara dan Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) dan untuk perilaku yang bermanfaat secara alami seperti perilaku seksual (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Perilaku seksual pria, dan khususnya ejakulasi, sangat bermanfaat dan menguatkan pada model hewan (Pfaus et al., 2001). Tikus jantan mengembangkan preferensi tempat yang dikondisikan (CPP) untuk persetubuhan (Agmo dan Berenfeld, 1990, Martinez dan Paredes, 2001, Tenk, 2008), dan akan melakukan tugas operan untuk mendapatkan akses ke wanita yang reseptif secara seksual (Everitt et al., 1987, Everitt dan Stacey, 1987). Obat-obatan pelecehan juga bermanfaat dan menguat, dan hewan akan belajar mengatur sendiri zat pelecehan, termasuk opiat, nikotin, alkohol, dan psikostimulan (Bijaksana, 1996, Pierce dan Kumaresan, 2006, Feltenstein dan See, 2008). Meskipun diketahui bahwa kedua obat pelecehan dan perilaku seksual mengaktifkan area otak mesolimbik, saat ini tidak jelas apakah obat pelecehan mempengaruhi neuron yang sama yang memediasi perilaku seksual.

Studi elektrofisiologis telah menunjukkan bahwa makanan dan kokain sama-sama mengaktifkan neuron di NAc. Namun, dua penguat tidak mengaktifkan sel yang sama di dalam NAc (Carelli et al., 2000, Carelli dan Wondolowski, 2003). Selain itu, pemberian makanan dan sukrosa tidak menyebabkan perubahan jangka panjang sifat elektrofisiologis seperti yang diinduksi oleh kokain (Chen et al., 2008). Sebaliknya, kumpulan bukti menunjukkan bahwa perilaku seksual pria dan obat-obatan pelecehan memang mungkin bertindak pada neuron mesolimbik yang sama. Psikostimulan dan opioid mengubah ekspresi perilaku seksual pada tikus jantan (Mitchell dan Stewart, 1990, Fiorino dan Phillips, 1999a, Fiorino dan Phillips, 1999b). Data terbaru dari lab kami menunjukkan bahwa pengalaman seksual mengubah respons terhadap psikostimulan yang dibuktikan dengan respons alat gerak yang peka dan persepsi penghargaan yang peka terhadap d-amfetamin pada hewan yang berpengalaman secara seksual. (Pitchers et al., 2009). Respons serupa sebelumnya telah diamati dengan paparan berulang terhadap amfetamin atau penyalahgunaan obat lain (Lett, 1989, Shippenberg dan Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren dan Kalivas, 2000). Bersama-sama, temuan ini menunjukkan bahwa perilaku seksual dan respons terhadap obat-obatan pelecehan dimediasi oleh neuron yang sama dalam sistem mesolimbik. Oleh karena itu, tujuan pertama dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki aktivasi saraf sistem mesolimbik oleh perilaku seksual dan pemberian obat pada hewan yang sama. Secara khusus, kami menguji hipotesis bahwa psikostimulan, metamfetamin (Meth), bertindak langsung pada neuron yang biasanya memediasi perilaku seksual.

Meth adalah salah satu obat terlarang yang paling banyak disalahgunakan di Dunia (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) Thedan sering dikaitkan dengan perubahan perilaku seksual. Yang menarik, pengguna Meth melaporkan hasrat dan gairah seksual yang meningkat, serta kenikmatan seksual yang meningkat (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Bahkan, Pelecehan seksual biasanya dikaitkan dengan perilaku kompulsif seksual (Rawson et al., 2002). Pengguna sering melaporkan memiliki banyak pasangan seksual dan kecil kemungkinannya untuk menggunakan perlindungan dibandingkan dengan pengguna narkoba lainnya (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Sayangnya, penelitian yang menunjukkan penggunaan Meth sebagai prediktor perilaku risiko seksual terbatas karena mereka mengandalkan laporan diri yang tidak dikonfirmasi (Elifson et al., 2006). Oleh karena itu, penyelidikan terhadap dasar seluler dari perubahan perilaku seksual yang diinduksi oleh Meth dalam model hewan diperlukan untuk memahami hubungan seks-seks yang rumit ini.

Mengingat bukti yang diuraikan di atas menunjukkan bahwa obat-obatan pelecehan, dan khususnya Meth, dapat bertindak terhadap neuron yang biasanya terlibat dalam mediasi perilaku seksual, tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki aktivasi saraf oleh perilaku seksual dan pemberian Meth psychostimulant.. Penelitian ini menerapkan teknik neuroanatomical, memanfaatkan visualisasi imunohistokimia dari gen awal langsung Fos dan Map Kinase terfosforilasi (pERK) untuk mendeteksi aktivasi saraf bersamaan dengan perilaku seksual dan Meth. Fos hanya diekspresikan dalam nukleus sel, dengan tingkat ekspresi maksimal 30-90 menit setelah aktivasi neuron. Ada banyak bukti bahwa aktivitas seksual menginduksi ekspresi Fos di otak (Pfaus dan Heeb, 1997, Veening dan Coolen, 1998), termasuk sistem mesokortikolimbik (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Ada juga bukti bahwa penyalahgunaan obat-obatan menginduksi ekspresi pERK dalam sistem mesocorticolimbic (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). Berbeda dengan ekspresi Fos, fosforilasi ERK adalah proses yang sangat dinamis dan hanya terjadi 5-20 menit setelah aktivasi neuron. Profil temporal Fos dan pERK yang berbeda menjadikannya satu set penanda ideal untuk aktivasi neuron selanjutnya dengan dua rangsangan berbeda.

PROSEDUR PERCOBAAN

Subjek

Tikus Sprague Dawley jantan jantan dewasa (210-225 g) yang diperoleh dari Laboratorium Charles River (Montreal, QC, Kanada) ditempatkan dua per kandang di kandang plexiglas standar (kandang rumah). Ruang hewan dipertahankan pada 12 / 12 h siklus cahaya terbalik (lampu dimatikan di 10.00 h). Makanan dan air tersedia ad libitum. Semua pengujian dilakukan selama paruh pertama fase gelap di bawah pencahayaan red redup. Stimulus betina yang digunakan untuk perilaku seksual secara bilateral diovariektomi dengan anestesi dalam (13 mg / kg ketamin dan 87 mg / kg xylazine) dan menerima implan subkutan yang mengandung 5% estradiol benzoate (EB) dan 95% kolesterol. Penerimaan seksual diinduksi oleh pemberian subkutan (sc) dari 500 μg progesteron dalam 0.1 ml minyak wijen 4 h sebelum pengujian. Semua prosedur telah disetujui oleh Komite Perawatan Hewan di University of Western Ontario dan mematuhi pedoman yang digariskan oleh Dewan Kanada untuk Perawatan Hewan.

Desain Eksperimental

Eksperimen 1 dan 2: Tikus jantan (n = 37) diizinkan untuk kawin dengan betina reseptif dengan satu ejakulasi (E) atau selama 30 min, yang pernah didahulukan dalam kandang uji bersih (60 × 45 × 50 cm) selama lima kali dua kali Sesi kawin pra-tes setiap minggu, untuk mendapatkan pengalaman seksual. Selama dua sesi terakhir, semua parameter standar untuk kinerja seksual dicatat, termasuk: tingkat latensi (ML; waktu dari pengenalan wanita sampai tingkat pertama), latensi intromisi (IL; waktu dari pengenalan wanita sampai tingkat pertama dengan penetrasi vagina), latensi ejakulasi (EL; waktu dari intromisi pertama ke ejakulasi), interval pasca ejakulasi (PEI; waktu dari ejakulasi ke intromisi berikutnya berikutnya), jumlah gunung (M), dan jumlah intromisi (IM) (Agmo, 1997). Semua laki-laki menerima 1 ml / kg 0.9% NaCl (saline; sc) 3 setiap hari setiap hari berturut-turut sebelum hari tes, untuk pembiasaan penanganan dan injeksi. Satu hari sebelum hari tes, semua laki-laki tinggal sendiri. Pada pria yang berpengalaman, Fos dapat diinduksi oleh isyarat kontekstual terkondisi terkait dengan pengalaman seksual sebelumnya (Balfour et al, 2004). Oleh karena itu, semua manipulasi kawin dan kontrol selama tes akhir dilakukan di kandang rumah (menghindari isyarat terkondisi prediktif) untuk mencegah aktivasi yang diinduksi isyarat-isyarat pada pria kontrol yang tidak dikawinkan. Laki-laki didistribusikan ke dalam delapan kelompok eksperimen yang tidak berbeda dalam ukuran kinerja seksual selama dua sesi perkawinan terakhir (data tidak ditampilkan). Selama tes akhir, laki-laki diizinkan untuk kawin di kandang rumah mereka sampai mereka menunjukkan ejakulasi (jenis kelamin) atau tidak menerima pasangan perempuan (tanpa jenis kelamin). Semua jantan dikawinkan dengan 60 menit setelah dimulainya kawin untuk memungkinkan analisis ekspresi Fos yang diinduksi kawin. Laki-laki menerima suntikan 4 mg / kg Meth atau 1 ml / kg saline (sc) (n = 4 masing-masing), baik 10 (percobaan 1) atau 15 (percobaan 2) min sebelum perfusi, untuk analisis fosforilasi yang diinduksi oleh obat dari MAP kinase. Dosis dan waktu sebelum perfusi didasarkan pada laporan sebelumnya (Choe et al., 2002, Choe dan Wang, 2002, Chen dan Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Kelompok kontrol termasuk laki-laki yang tidak kawin, tetapi menerima Meth 10 (n = 7) atau 15 (n = 5) min sebelum pengorbanan, atau injeksi salin 10 (n = 5) atau 15 (n = 4) min sebelum pengorbanan . Setelah pengorbanan, otak diproses untuk imunohistokimia.

Eksperimen 3: Karena Meth dosis tinggi digunakan dalam eksperimen 1 dan 2, percobaan neuroanatomi tambahan dilakukan untuk menyelidiki apakah perilaku seksual dan dosis Meth yang lebih rendah menginduksi pola ketergantungan dosis terhadap aktivasi saraf yang tumpang tindih. Penelitian ini dilakukan dengan cara yang identik dengan eksperimen 1 dan 2. Namun, pada tes akhir, kelompok yang dikawinkan dan tidak dikawinkan (n = 6 masing-masing) menerima 1 mg / kg Meth (sc) 15 menit sebelum pengorbanan.

Eksperimen 4: Untuk menguji apakah aktivasi saraf yang disebabkan oleh jenis kelamin dan Meth spesifik untuk Meth, percobaan ini menyelidiki apakah pola yang sama dari aktivasi saraf yang tumpang tindih dapat dilihat dengan psychostimulant d-amphetamine (Amph). Eksperimen ini dilakukan dengan cara yang identik dengan eksperimen 1 dan 2. Namun, pada tes akhir, laki-laki diberikan Amph (5 mg / kg) atau saline (1 mg / kg) (sc) 15 min sebelum pengorbanan (n = masing-masing 5). Kontrol laki-laki yang belum menikah menerima saline atau Amph 15 menit sebelum pengorbanan. Tinjauan umum tentang kelompok eksperimen yang digunakan dalam percobaan 1 – 4 disediakan di Tabel 1.

Tabel 1      

Gambaran umum kelompok eksperimen yang termasuk dalam percobaan 1 – 4.

Persiapan Jaringan

Hewan dibius dengan pentobarbital (270 mg / kg; ip) dan diperfusi transkartial dengan 5 ml saline diikuti oleh 500 ml 4% paraformaldehyde dalam 0.1 M buffer fosfat (PB). Otak dilepas dan dipasang kembali selama 1 h pada suhu kamar dalam fiksatif yang sama, kemudian direndam dalam 20% sukrosa dan 0.01% Sodium Azide dalam 0.1 M PB dan disimpan pada 4 ° C. Bagian coronal (35 μm) dipotong pada mikrotom pembekuan (H400R, Micron, Jerman), dikumpulkan dalam empat seri paralel dalam larutan krioprotektan (30% sukrosa dan 30% etilena glikol dalam 0.1 M PB) dan disimpan pada 20 ° C sampai lebih jauh pengolahan.

Imunohistokimia

Semua inkubasi dilakukan pada suhu kamar dengan agitasi yang lembut. Bagian mengambang bebas dicuci secara luas dengan 0.1 M Phine-buffered saline (PBS) di antara inkubasi. Bagian diinkubasi dalam 1% H2O2 untuk 10 min, kemudian diblokir dalam larutan inkubasi (PBS yang mengandung 0.1% albumin serum sapi dan 0.4% Triton X-100) untuk 1 h.

pERK / Fos

Jaringan diinkubasi semalaman dengan antibodi poliklonal kelinci terhadap p42 dan p44 peta kinase ERK1 dan ERK2 (pERK; 1: 400 percobaan 1 lot 19; 1: 4.000 percobaan 2 dan 3; 21 diikuti dengan 9101; banyak diikuti dengan 1; 1 h inkubasi dengan keledai biotinylated anti-kelinci IgG (500: 1; Laboratorium Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) dan kompleks peroksidase avidin-horseradish (ABC Elite; 1000: 10; Laboratorium Vektor, Burlingame, CA). Kemudian, jaringan diinkubasi selama 1 min dengan tyramide terbiotinilasi (BT; 250: 0.003 dalam PBS + XNUMX% H2O2; Kit Amplifikasi Sinyal Tyramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) dan untuk 30 min dengan Alexa 488 strugavidin terkonjugasi (1: 100; Laboratorium Laboratorium Jackson Immunoresearch, West Grove, PA). Selanjutnya, jaringan diinkubasi semalaman dengan antibodi poliklonal kelinci terhadap c-Fos (1: 500; SC-52; Bioteknologi Santa Cruz, Santa Cruz, CA), diikuti oleh inkubasi 30 min dengan anti-kelinci kambing Alexa 555 (1: 200; Laboratorium Jackson Immunoresearch, West Grove, PA). Setelah pewarnaan, bagian dicuci secara menyeluruh dalam 0.1 M PB, dipasang ke slide kaca dengan 0.3% gelatin dalam ddH20 dan coverslipped dengan media pemasangan berair (Gelvatol) yang mengandung agen anti-fading 1,4-diazabicyclo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Kontrol imunohistokimia termasuk penghilangan salah satu atau kedua antibodi primer, sehingga tidak ada label pada panjang gelombang yang sesuai.

Analisis Data

Perilaku seksual

Untuk keempat percobaan, parameter standar untuk kinerja seksual dicatat seperti yang dijelaskan di atas dan dianalisis menggunakan analisis varians (ANOVA). Analisis data perilaku seksual selama hari tes akhir mengungkapkan tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dalam parameter kinerja seksual.

pERK / Hitungan Sel Fos

Sel berlabel tunggal dan ganda untuk Fos dan pERK dihitung dalam tingkat ekor dari subkelompok inti dan sel NAc, amigdala basolateral (BLA), amygdala medial posterodorsal (MEApd), amygdala pusat (CeA), nukleus medial preoptik (MPN), posteromedial dan nukleus posterolateral inti stria terminalis (BNSTpm dan BNSTpl), dan daerah cingulated anterior (ACA), prelimbik (PL), dan sub regional infralimbic (IL) dari mPFC. Gambar ditangkap menggunakan kamera CCD yang didinginkan (Microfire, Optronics) yang terpasang pada mikroskop Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Jerman) dan perangkat lunak Neurolucida (MicroBrightfield Inc) dengan pengaturan kamera tetap untuk semua subjek (menggunakan tujuan 10x). Menggunakan perangkat lunak neurolucida, bidang analisis didefinisikan berdasarkan landmark (Swanson, 1998) unik untuk setiap wilayah otak (lihat Gambar 1). Area analisis standar digunakan di semua area kecuali core dan shell NAc. Di daerah yang terakhir, ekspresi pERK dan Fos tidak homogen dan muncul dalam pola mirip tambalan. Oleh karena itu, seluruh inti dan cangkang diuraikan berdasarkan landmark (ventrikel lateral, anterior commisure, dan pulau-pulau Calleja). Area analisis tidak berbeda antara kelompok eksperimen, dan 1.3 mm2 dalam inti dan shell NAc. Area analisis standar untuk area yang tersisa adalah: 1.6 mm2 dalam BLA, 2.5 dan 2.25 mm2 di MEAPd dan CEA masing-masing, 1.0 mm2 di MPN, 1.25 mm2 di subregasi BNST dan mPFC, dan 3.15 mm2 dalam VTA. Dua bagian dihitung secara bilateral untuk setiap daerah otak per hewan, dan jumlah sel berlabel tunggal dan ganda untuk pERK dan Fos serta persentase sel pERK yang mengekspresikan penanda Fos dihitung. Untuk percobaan 1, 2, dan 4, rata-rata kelompok dibandingkan dengan menggunakan ANOVA dua arah (faktor: kawin dan narkoba) dan Fisher's LSD untuk post hoc perbandingan pada tingkat signifikansi 0.05. Untuk eksperimen 3, rata-rata grup dibandingkan menggunakan uji-t tidak berpasangan pada tingkat signifikansi 0.05.

Gambar 1      

Gambar dan gambar skematik yang menggambarkan area analisis otak. Area analisis yang ditunjukkan didasarkan pada landmark unik untuk setiap wilayah otak, tidak berbeda antara kelompok eksperimen, dan 1.25 mm2 di subregional mPFC (a), 1.3 mm2 dalam ...

Images

Gambar digital untuk Gambar 3 ditangkap menggunakan kamera CCD (DFC 340FX, Leica) yang terpasang pada mikroskop Leica (DM500B) dan diimpor ke perangkat lunak Adobe Photoshop 9.0 (Sistem Adobe, San Jose, CA). Gambar tidak diubah dengan cara apa pun kecuali untuk penyesuaian kecerahan.

Gambar 3      

Gambar representatif dari bagian NAc yang diimunisasi untuk Fos (merah; a, d, g, j) dan pERK (hijau; b, e, h, k) hewan dari masing-masing kelompok eksperimen: No Sex + Sal (a, b, c) , Jenis Kelamin + Sal (d, e, f), Tanpa Jenis Kelamin + Meth (g, h, i), dan Jenis Kelamin + Meth (j, k, l). Panel yang tepat adalah ...

HASIL

Aktivasi Saraf Sistem Limbik dengan Perilaku Seksual dan Administrasi Meth

Eksperimen 1: Analisis sel berlabel tunggal dan ganda untuk pERK yang diinduksi kawin dan pERK yang diinduksi oleh Meth pada pria yang menerima Meth 10 menit sebelum pengorbanan mengungkapkan Fos yang diinduksi kawin di MPN, BNSTpm, inti dan cangkang NAA, BLA, VTA, dan semua subregional mPFC, konsisten dengan penelitian sebelumnya yang menunjukkan ekspresi Fos yang diinduksi kawin di area ini (Baum dan Everitt, 1992, Pfaus dan Heeb, 1997, Veening dan Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Meth administrasi 10 menit sebelum mengorbankan pERK yang diinduksi dalam inti dan shell NAc, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl, dan daerah mPFC, konsisten dengan pola aktivasi yang diinduksi oleh psikostimulan lain (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Selain itu, tiga pola koekspresi aktivasi saraf oleh perilaku seksual dan Meth diamati: Pertama, area otak diidentifikasi di mana seks dan obat-obatan mengaktifkan populasi saraf yang tidak tumpang tindih (Tabel 2). Secara khusus, dalam CeA, MEApd, BNSTpl, dan mPFC, peningkatan yang signifikan pada pERK yang diinduksi obat (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) dan Fos yang diinduksi oleh seks (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16) diamati. Namun, di daerah ini tidak ada peningkatan yang signifikan pada neuron berlabel ganda pada laki-laki yang diobati dengan Meth. Satu-satunya pengecualian adalah MEApd, di mana efek kawin pada jumlah sel berlabel ganda ditemukan (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Namun, tidak ada efek keseluruhan dari pengobatan obat dan pelabelan ganda pada kelompok yang diobati dengan Meth tidak secara signifikan lebih tinggi daripada kelompok yang diobati dengan garam, sehingga tidak disebabkan oleh obat tersebut (Tabel 2). Kedua, area otak diidentifikasi di mana aktivasi saraf hanya disebabkan oleh kawin (Tabel 3). Khususnya, MPN, BNSTpm, dan VTA diaktifkan hanya dengan kawin, dan mengandung peningkatan signifikan dalam Fos yang diinduksi kawin (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001), tetapi tidak ada pERK yang diinduksi oleh Meth.

Tabel 2      

Tinjauan umum ekspresi pERK yang diinduksi kawin dan yang diinduksi Meth di area otak tempat seks dan obat-obatan mengaktifkan populasi saraf yang tidak tumpang tindih.
Tabel 3      

Gambaran umum ekspresi pERK yang diinduksi kawin dan Meth di area otak di mana aktivasi saraf diinduksi hanya dengan kawin.

Akhirnya, area otak ditemukan di mana seks dan obat-obatan mengaktifkan populasi neuron yang tumpang tindih (Gambar 2 dan And3) .3). Dalam inti dan cangkang NAc, BLA, dan ACA, terdapat efek keseluruhan dari kawin (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) dan terapi obat (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), serta interaksi antara kedua faktor ini (F (1,16) = 5.082–47.27; p = 0.04- <0.001; tidak ada interaksi yang signifikan dalam ACA) pada jumlah sel yang mengekspresikan keduanya Fos yang diinduksi kawin dan pERK yang diinduksi oleh Meth. Analisis post hoc mengungkapkan bahwa jumlah neuron berlabel ganda secara signifikan lebih tinggi pada laki-laki yang disuntik Meth kawin dibandingkan dengan laki-laki yang diobati dengan Meth yang tidak kawin (p = 0.027- <0.001), atau yang diobati dengan garam kawin (p = 0.001- <0.001) (Gambar 2 dan And3) .3). Ketika data dinyatakan sebagai persentase neuron yang diaktifkan obat, 39.2 ± 5.3% dalam inti NAc, 39.2 ± 5.8% dalam shell NAc, 40.9 ± 6.3% dalam BLA, dan 50.0 ± 5.3% dari neuron ACA diaktifkan oleh keduanya kawin dan Meth.

Gambar 2      

Ekspresi pERK yang diinduksi oleh Seks dan Meth yang diinduksi dalam neuron NAc, BLA, dan ACA 10 min setelah pemberian 4 mg / kg Meth. Angka rata-rata ± sem dari Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), dan sel berlabel ganda (c, f, i, l) dalam inti NAc (a, ...

Pengamatan yang tidak terduga adalah bahwa perilaku seksual mempengaruhi pERK yang diinduksi oleh Meth. Meskipun Meth secara signifikan menginduksi level pERK pada kelompok yang disuntik Meth dan yang tidak dikawinkan, pada NAc, BLA, dan ACA, pelabelan pERK secara signifikan lebih rendah pada pria yang disuntik Meth yang dikawinkan jika dibandingkan dengan pria Meth-injected yang tidak dikawinkan. (Gambar 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Temuan ini lebih lanjut dapat mendukung hipotesis bahwa seks dan obat-obatan bekerja pada neuron yang sama, tetapi juga dapat menjadi indikasi perubahan kawin yang diinduksi dalam penyerapan obat atau metabolisme yang pada gilirannya menyebabkan perubahan respons saraf terhadap Meth. Untuk menyelidiki apakah perilaku seksual menyebabkan pola temporal yang berbeda dari aktivasi yang diinduksi obat, bagian dari NAc, BLA, dan ACA diwarnai untuk laki-laki yang dikorbankan pada titik waktu kemudian (15 min) setelah pemberian obat (percobaan 2).

Eksperimen 2: Analisis sel berlabel tunggal dan ganda mengkonfirmasi temuan yang dijelaskan di atas bahwa perilaku seksual dan paparan Meth 15 menit sebelum pengorbanan menghasilkan peningkatan yang signifikan dari fosfol dan imunolabeling pERK dalam inti dan kulit, BLA, dan ACA. Selain itu, ko-ekspresi yang signifikan dari pERK yang diinduksi kawin dan pERK yang diinduksi lagi ditemukan di daerah ini (Gambar 4; efek kawin: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; efek obat: F (1,12) = 14.11–54.41; p = 0.003- <0.001). Jumlah neuron berlabel ganda pada laki-laki kawin yang disuntik Meth secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan laki-laki yang diobati dengan Meth yang tidak kawin (p <0.001) atau yang diobati dengan garam (p <0.001). Ketika data dinyatakan sebagai persentase neuron yang diaktivasi obat, 47.2 ± 5.4% (inti NAc), 42.7 ± 7.6% (NAc shell), 36.7 ± 3.7% (BLA), dan 59.5 ± 5.1% (ACA) neuron diaktifkan dengan kawin juga diaktifkan oleh Meth. Selain itu, pERK yang diinduksi obat tidak berbeda antara hewan kawin dan hewan tidak kawin (Gambar 4b, e, h, k), di semua area kecuali ACA (p <0.001). Data ini menunjukkan bahwa perilaku seksual memang menyebabkan perubahan pola temporal induksi pERK oleh Meth.

Gambar 4      

Ekspresi pERK yang diinduksi oleh Seks dan Meth yang diinduksi dalam neuron NAc, BLA, dan ACA 15 min setelah pemberian 4 mg / kg Meth. Angka rata-rata ± sem dari Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), dan sel berlabel ganda (c, f, i, l) dalam inti NAc (a, ...

Aktivasi Saraf berikut Perilaku Seksual dan 1 mg / kg Meth

Sejauh ini hasil mengungkapkan bahwa perilaku seksual dan 4 mg / kg Meth mengaktifkan populasi neuron yang tumpang tindih dalam inti dan kulit NAc, BLA, dan ACA. To Selidiki pengaruh dosis obat pada tumpang tindih ini dalam aktivasi, pola aktivasi saraf juga dipelajari menggunakan Meth dosis yang lebih rendah. Inti dan kulit NAc, BLA, dan ACA dianalisis untuk aktivasi yang disebabkan oleh jenis kelamin dan Meth. Memang, perilaku seksual dan paparan Meth berikutnya menghasilkan peningkatan yang signifikan dari imunolabeling Fos dan pERK di subkelompok inti dan tempurung kepala, BLA, serta neuron di wilayah ACA mPFC (Gambar 5). Yang menarik, dosis Meth yang lebih rendah menghasilkan jumlah neuron berlabel pERK yang sama seperti yang diinduksi oleh 4 mg / kg Meth di empat wilayah otak yang dianalisis. Lebih penting lagi, inti dan cangkang NAc, BLA, dan ACA menunjukkan peningkatan signifikan dalam jumlah sel berlabel ganda (Gambar 5c, f, i, l) dibandingkan dengan laki-laki yang tidak disuntik Meth (p = 0.003- <0.001). Ketika data dinyatakan sebagai persentase neuron yang diaktivasi obat, 21.1 ± 0.9% dan 20.4 ± 1.8% di inti dan cangkang NAc masing-masing, 41.9 ± 3.9% di BLA, dan 49.8 ± 0.8% neuron ACA diaktifkan berdasarkan jenis kelamin. dan Meth.

Gambar 5      

Ekspresi pERK yang diinduksi oleh Seks dan Meth yang diinduksi dalam neuron NAc, BLA, dan ACA 15 min setelah pemberian 1 mg / kg Meth. Angka rata-rata ± sem dari Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), dan sel berlabel ganda (c, f, i, l) dalam inti NAc (a, ...

Aktivasi Saraf berikut perilaku seksual dan pemberian d-Amphetamine

Untuk menguji apakah hasil di atas spesifik untuk Meth, percobaan tambahan dilakukan untuk mempelajari aktivasi saraf yang diinduksi kawin dan Amph. Analisis sel berlabel tunggal dan ganda untuk pERK dan Fos menunjukkan bahwa perilaku seksual dan pajanan berikutnya terhadap Amph menghasilkan peningkatan signifikan imunolabeling Fos dan pERK dalam inti dan cangkang NAc dan BLA (Gambar 6; efek kawin: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016- <0.001; efek obat: F (1,15) = 4.70–46.01; p = 0.047- <0.001). Selain itu, jumlah neuron berlabel ganda secara signifikan lebih tinggi pada laki-laki yang diberi Amph kawin dibandingkan dengan Amph yang tidak diberi perlakuan (p = 0.009- <0.001), atau yang diobati dengan garam kawin (p = 0.015- <0.001) laki-laki (Gambar 6c, f, i). Ketika data dinyatakan sebagai persentase neuron yang diaktifkan obat, 25.7 ± 2.8% dan 18.0 ± 3.2% masing-masing dalam inti dan kulit NAc, dan 31.4 ± 2.0% dari neuron BLA diaktifkan oleh perkawinan dan Amph. Wilayah ACA dari mPFC menampilkan tingkat signifikan Fos yang diinduksi kawin (Gambar 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Namun, tidak seperti Meth, Amph tidak menghasilkan peningkatan yang signifikan pada tingkat pERK yang diinduksi obat di ACA (Gambar 6k) atau jumlah neuron berlabel ganda dalam ACA (Gambar 6l) bila dibandingkan dengan laki-laki yang disuntik dengan salin dan yang belum kawin.

Gambar 6      

Ekspresi pERK yang diinduksi oleh Fos dan Amph berdasarkan jenis kelamin pada neuron NAc, BLA, dan ACA 15 min setelah pemberian 5 mg / kg Amph. Angka rata-rata ± sem dari Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), dan sel berlabel ganda (c, f, i, l) dalam inti NAc (a, ...

PEMBAHASAN

Penelitian saat ini menunjukkan pada tingkat seluler tumpang tindih antara aktivasi saraf oleh perilaku seksual penguat alami dan Meth psikostimulan. Oleh karena itu, data ini menunjukkan bahwa obat tidak hanya bekerja pada daerah otak yang sama yang mengatur imbalan alami, tetapi pada kenyataannya, obat mengaktifkan sel yang sama yang terlibat dalam pengaturan imbalan alami. Secara khusus, ditunjukkan di sini bahwa perilaku seksual dan Meth bersama-sama mengaktifkan populasi neuron dalam inti dan cangkang NAc, BLA, dan ACA dari mPFC, mengidentifikasi situs potensial di mana Meth dapat mempengaruhi perilaku seksual.

Temuan saat ini bahwa perilaku seksual dan pemberian Meth mengaktifkan populasi neuron yang tumpang tindih di NAc, BLA, dan ACA berbeda dengan temuan dari penelitian lain yang menunjukkan bahwa populasi yang berbeda dari neuron NAc menyandikan obat dan imbalan alami.

Secara khusus, studi elektrofisiologi yang membandingkan aktivasi saraf selama pemberian sendiri hadiah alami (makanan dan air) dan kokain intravena telah menunjukkan bahwa pemberian sendiri kokain mengaktifkan populasi neuron yang berbeda dan tidak tumpang tindih yang umumnya tidak responsif selama operan menanggapi air dan penguatan makanan (92%). Hanya 8% neuron akumbal yang menunjukkan aktivasi oleh kokain dan imbalan alami (Carelli et al., 2000).

Sebaliknya, sebagian besar (65%) sel dalam NAc menunjukkan aktivasi oleh berbagai penghargaan alami (makanan dan air), bahkan jika satu penguat lebih enak (sukrosa) (Roop et al., 2002).

Beberapa faktor mungkin berkontribusi terhadap perbedaan dengan hasil saat ini. Pertama, berbagai pendekatan teknis digunakan untuk menyelidiki aktivitas saraf. Penelitian saat ini menggunakan metode neuroanatomical untuk mendeteksi aktivasi saraf bersamaan dengan dua rangsangan yang berbeda menggunakan immunocytochemisty fluoresen ganda untuk Fos dan pERK, memungkinkan untuk penyelidikan aktivasi sel tunggal pada rentang besar area otak. Sebaliknya, penelitian oleh Carelli dan rekan kerja menggunakan rekaman electrophysiological terbatas pada NAc yang berperilaku hewan untuk mengatasi apakah pemberian sendiri penyalahgunaan obat mengaktifkan sirkuit saraf yang sama yang digunakan oleh imbalan alami.

Kedua, penelitian saat ini menyelidiki hadiah alami yang berbeda yaitu perilaku seksual dibandingkan dengan penelitian sebelumnya, yang menggunakan makanan dan air pada tikus yang dibatasi (Carelli, 2000). Makanan dan air mungkin memiliki nilai hadiah yang lebih rendah daripada kawin. Perilaku seksual sangat bermanfaat dan tikus dengan mudah membentuk CPP hingga sanggama (Agmo dan Berenfeld, 1990, Martinez dan Paredes, 2001, Tenk, 2008). Meskipun demikian, tikus yang diet terbatas membentuk CPP untuk air (Agmo et al., 1993, Perks and Clifton, 1997) dan makanan (Perks and Clifton, 1997), dbiarkan tikus yang tidak dibatasi lebih disukai mengonsumsi dan membentuk CPP untuk makanan yang lebih enak (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

Ketiga, penelitian kami mencakup berbagai penyalahgunaan obat dibandingkan dengan penelitian sebelumnya, menggunakan metamfetamin dan amfetamin alih-alih kokain.. Hasil ini menunjukkan bahwa secara khusus Meth, dan pada tingkat lebih rendah amfetamin, menghasilkan aktivasi neuron yang juga diaktifkan oleh perilaku seksual. Pengalaman narkoba mungkin juga memainkan faktor dalam temuan kami. Studi saat ini menggunakan hewan yang berpengalaman secara seksual, tetapi masih naif. Sebaliknya, studi elektrofisiologis Carelli dan rekan kerja menggunakan hewan "terlatih" yang menerima paparan berulang untuk kokain.

Oleh karena itu, ada kemungkinan bahwa aktivasi neuron yang diinduksi oleh Meth yang diaktifkan oleh perilaku seksual diubah pada tikus yang mengalami narkoba. Namun, studi pendahuluan dari lab kami menunjukkan bahwa pengalaman obat tidak mungkin menjadi faktor utama karena perilaku seksual dan pengobatan Meth pada laki-laki yang diobati secara kronis dengan Meth yang sama mengaktifkan persentase neuron yang diaktifkan obat seperti yang dilaporkan dalam penelitian ini. (20.3 ± 2.5% dalam inti NAc dan 27.8 ± 1.3% dalam shell NAc; Frohmader dan Coolen, pengamatan yang tidak dipublikasikan).

Akhirnya, penelitian ini menyelidiki tindakan "langsung" dari obat yang menggunakan pemberian pasif. Oleh karena itu, analisis saat ini tidak mengungkapkan informasi mengenai sirkuit saraf yang terlibat dalam pencarian obat atau isyarat yang terkait dengan hadiah obat, tetapi lebih mengungkapkan aktivitas saraf yang disebabkan oleh tindakan farmakologis obat.. Dalam studi elektrofisiologi sebelumnya, aktivitas saraf NAc yang terjadi dalam hitungan detik dari respon yang diperkuat bukan hasil dari tindakan farmakologis kokain, tetapi sangat tergantung pada faktor asosiatif dalam paradigma administrasi diri (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Secara khusus, aktivitas saraf NAc dipengaruhi oleh presentasi respon-independen dari rangsangan yang terkait dengan pemberian kokain intravena serta oleh kontingensi instrumental (yaitu, tuas pengepresan) yang melekat dalam paradigma perilaku ini (Carelli, 2000, Carelli dan Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli dan Wightman, 2004). Singkatnya, temuan kami dari aktivasi bersama oleh hadiah alami dan obat-obatan mungkin spesifik untuk aktivasi oleh perilaku seksual dan Meth dan Amph yang diberikan secara pasif.

Meth dan jenis kelamin mengaktifkan populasi neuron yang tumpang tindih di inti NAc dan cangkang dengan cara yang tergantung pada dosis. Neuron yang diaktifkan bersama dalam NAc dapat memediasi efek potensial dari Meth pada motivasi dan sifat-sifat bermanfaat dari perilaku seksual sebagai lesi dari NAc yang mengganggu perilaku seksual (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Selain itu, neuron ini berpotensi menjadi lokus untuk efek obat yang tergantung dosis pada perkawinan, karena dosis Meth yang lebih rendah (1 mg / kg) mengurangi jumlah sel berlabel ganda sebanyak 50% dibandingkan dengan dosis Meth yang lebih tinggi (4 mg / kg). Meskipun penelitian ini tidak mengidentifikasi fenotip kimia dari neuron yang diaktifkan bersama, penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa pERK dan ekspresi Fos yang diinduksi oleh obat dalam NAc tergantung pada reseptor dopamin (DA) dan glutamat (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Meskipun tidak jelas apakah aktivasi saraf yang diinduksi kawin pada NAc tergantung pada reseptor ini, ini telah ditunjukkan pada daerah otak lain, terutama di daerah medial preoptik (Lumley dan Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). THus, Meth dapat bertindak pada neuron yang juga diaktifkan selama perilaku seksual melalui aktivasi reseptor dopamin dan glutamat. Peran NAc glutamat dalam perilaku seksual saat ini tidak jelas, tetapi sudah pasti bahwa DA memainkan peran penting dalam motivasi untuk perilaku seksual. (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Studi mikrodialisis melaporkan peningkatan efflux DA NAc selama fase nafsu makan dan penyempurnaan perilaku seksual pria (Fiorino dan Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) dan eflux mesolimbik DA telah berkorelasi dengan fasilitasi inisiasi dan pemeliharaan perilaku seksual tikus (Pfaus dan Everitt, 1995). Selain itu, studi manipulasi DA menunjukkan antagonis DA dalam NAc menghambat perilaku seksual, sementara agonis memfasilitasi inisiasi perilaku seksual.r (Everitt et al., 1989, Pfaus dan Phillips, 1989). Dengan demikian, Meth dapat mempengaruhi motivasi untuk perilaku seksual melalui aktivasi reseptor DA.

Berbeda dengan NAc, jumlah sel berlabel ganda dalam BLA dan ACA tetap relatif tidak berubah terlepas dari dosis Meth. BLA sangat penting untuk pembelajaran asosiatif diskrit dan sangat terlibat dalam penguatan dan evaluasi penghargaan selama respon instrumental (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Lihat, 2002). Tikus lesi BLA menunjukkan penurunan tuas menekan untuk stimuli terkondisi dipasangkan dengan makanan (Everitt et al., 1989) atau penguatan seksual (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). Sebaliknya, manipulasi ini tidak mempengaruhi fase menyusui dan perilaku seksual (Cardinal et al., 2002). BLA juga memainkan peran penting dalam memori rangsangan terkondisi terkait dengan rangsangan obat (Grace dan Rosenkranz, 2002, Laviolette dan Grace, 2006). Lesi atau inaktivasi farmakologis dari BLA menghalangi akuisisi (Whitelaw et al., 1996) dan ekspresi (Grimm dan See, 2000) pemulihan kokain yang dikondisikan, sementara tidak memengaruhi proses pemberian obat. Selanjutnya, Amph yang dimasukkan secara langsung ke dalam BLA menghasilkan pemulihan obat yang dipotensiasi dengan adanya isyarat yang dikondisikan (Lihat et al., 2003). Oleh karena itu, ada kemungkinan bahwa penularan DA yang ditingkatkan secara psikostimulan di BLA menghasilkan peningkatan arti emosional dan pencarian. (Ledford et al., 2003) imbalan seksual, sehingga berkontribusi pada dorongan seksual yang meningkat dan keinginan yang dilaporkan oleh para pelanggar Meth (Semple et al., 2002, Hijau dan Halkitis, 2006).

Dalam ACA, aktivasi saraf neuron yang diaktivasi-seks adalah dosis-independen dan spesifik untuk Meth, karena tidak diamati dengan Amph. Meskipun Meth dan Amph memiliki sifat struktural dan farmakologis yang serupa, Meth adalah psikostimulan yang lebih kuat daripada Amph dengan efek yang lebih tahan lama (NIDA, 2006). Studi oleh Goodwin et al. menunjukkan bahwa Meth menghasilkan eflux DA yang lebih besar dan menghambat pembersihan DA yang diterapkan secara lokal lebih efektif pada NAc tikus daripada Amph. Karakteristik ini dapat berkontribusi pada sifat adiktif Meth dibandingkan dengan Amph (Goodwin et al., 2009) dan mungkin perbedaan aktivasi saraf yang diamati antara kedua obat. Namun, tidak jelas apakah perbedaan pola hasil disebabkan oleh perbedaan efikasi antara obat atau potensi masalah terkait dengan dosis yang digunakan dan penyelidikan lebih lanjut diperlukan.

Aktivasi bersama oleh Meth dan jenis kelamin tidak diamati pada subkawasan mPFC lainnya (IL dan PL). Pada tikus, ACA telah dipelajari secara ekstensif menggunakan tugas-tugas selera, mendukung peran dalam asosiasi stimulus-penguat (Everitt et al., 1999, Lihat, 2002, Cardinal et al., 2003). Ada banyak bukti bahwa mPFC terlibat dalam ketagihan obat dan kambuh kembali pada perilaku mencari dan mengambil obat pada manusia dan tikus. (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin dan See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas dan Volkow, 2005). sayan sejalan dengan ini, telah diusulkan bahwa disfungsi mPFC yang disebabkan oleh paparan berulang terhadap penyalahgunaan obat-obatan mungkin bertanggung jawab untuk mengurangi kontrol impuls dan meningkatkan perilaku yang diarahkan pada obat seperti yang diamati pada banyak pecandu (Jentsch dan Taylor, 1999). Data terbaru dari laboratorium kami menunjukkan bahwa lesi mPFC menghasilkan pencarian perilaku seksual yang berkelanjutan ketika ini dikaitkan dengan stimulus permusuhan (Davis et al., 2003). Meskipun penelitian ini tidak menyelidiki ACA, penelitian ini mendukung hipotesis bahwa mPFC (dan ACA secara spesifik) memediasi efek Meth pada hilangnya kontrol penghambatan atas perilaku seksual seperti yang dilaporkan oleh para pelanggar Meth (Salo et al., 2007).

Sebagai kesimpulan, bersama-sama studi ini membentuk langkah pertama yang kritis menuju pemahaman yang lebih baik tentang bagaimana obat penyalahgunaan bertindak pada jalur saraf yang biasanya memediasi imbalan alami. Selain itu, temuan ini menggambarkan bahwa berbeda dengan keyakinan saat ini bahwa obat penyalahgunaan tidak mengaktifkan sel yang sama dalam sistem mesolimbik sebagai hadiah alami, Meth, dan pada tingkat yang lebih rendah, Amph, mengaktifkan sel yang sama dengan perilaku seksual. Pada gilirannya, populasi saraf yang terkoordinasi ini dapat memengaruhi pencarian imbalan alami setelah paparan obat. Akhirnya, hasil penelitian ini dapat berkontribusi secara signifikan terhadap pemahaman kita tentang dasar kecanduan secara umum. Perbandingan persamaan dan perbedaan, serta perubahan dalam aktivasi saraf sistem mesolimbik yang ditimbulkan oleh perilaku seksual versus obat-obatan pelecehan dapat menyebabkan pemahaman yang lebih baik tentang penyalahgunaan zat dan perubahan terkait dalam hadiah alami.

Ucapan Terima Kasih

Penelitian ini didukung oleh hibah dari National Institutes of Health R01 DA014591 dan Canadian Institutes of Health Research RN 014705 untuk LMC.

SINGKATAN

  • ABC
  • avidin-biotin-horseradish kompleks peroksidase
  • ACA
  • daerah cingulate anterior
  • Amph
  • d-amfetamin
  • BLA
  • amigdala basolateral
  • BNSTpl
  • inti posterolateral inti stria terminalis
  • BNSTpm
  • nukleus posteromedial bed dari stria terminalis
  • BT
  • tyramide terbiotinilasi
  • CeA
  • amigdala mental
  • CPP
  • preferensi tempat yang dikondisikan
  • E
  • ejakulasi
  • EL
  • latensi ejakulasi
  • IF
  • daerah infralimbik
  • IL
  • latensi intromission
  • IM
  • jalan masuk
  • M
  • meningkat
  • PETA Kinase
  • protein kinase yang diaktifkan mitogen
  • MEAPD
  • amigdala medial posterodorsal
  • Meth
  • methamphetamine
  • ML
  • tingkatkan latensi
  • mPFC
  • korteks prefrontal medial
  • MPN
  • nukleus preoptik medial
  • Tidak
  • nukleus Accumbens
  • PB
  • buffer fosfat
  • PBS
  • salin dapar fosfat
  • PEI
  • interval post ejakulasi
  • merembes
  • PETA Kinase terfosforilasi
  • PL
  • daerah prelimbik
  • VTA
  • daerah tegmental ventral

Catatan kaki

Penafian Penerbit: Ini adalah file PDF dari manuskrip yang belum diedit yang telah diterima untuk publikasi. Sebagai layanan kepada pelanggan kami, kami menyediakan naskah versi awal ini. Naskah akan menjalani penyalinan, penyusunan huruf, dan peninjauan bukti yang dihasilkan sebelum diterbitkan dalam bentuk citable akhir. Harap perhatikan bahwa selama proses produksi, kesalahan dapat ditemukan yang dapat memengaruhi konten, dan semua penafian hukum yang berlaku untuk jurnal tersebut.

Referensi

  1. Agmo A. Perilaku seksual tikus jantan. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203 – 209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Memperkuat sifat ejakulasi pada tikus jantan: peran opioid dan dopamin. Behav Neurosci. 1990; 104: 177 – 182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Hadiah dan penguatan yang dihasilkan oleh air minum: Peran subtipe opioid dan reseptor dopamin. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Perilaku seksual dan isyarat lingkungan terkait seks mengaktifkan sistem mesolimbik pada tikus jantan. Neuropsikofarmakologi. 2004; 29: 718 – 730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Peningkatan ekspresi c-fos di daerah preoptik medial setelah kawin pada tikus jantan: Peran input aferen dari amigdala medial dan bidang tegmental pusat otak tengah. Ilmu saraf. 1992; 50: 627 – 646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Peran untuk korteks prefrontal dalam pemulihan kokain yang diinduksi stres dan kokain pada tikus. Psikofarmakologi (Berl) 2003; 168: 66 – 74. [PubMed]
  7. Kardinal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emosi dan motivasi: peran amigdala, ventral striatum, dan korteks prefrontal. Ulasan Neuroscience & Biobehavioral. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Kardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Peran korteks cingulate anterior dalam kontrol atas perilaku oleh rangsangan terkondisi Pavlovian pada tikus. Behavioral Neuroscience. 2003; 117: 566 – 587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Aktivasi penembakan sel accumbens oleh rangsangan yang terkait dengan pengiriman kokain selama pemberian sendiri. Sinaps. 2000; 35: 238 – 242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Penembakan sel nukleus accumbens selama perilaku yang diarahkan pada tujuan untuk kokain vs. penguatan 'alami'. Fisiologi & Perilaku. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Aktivasi selektif neuron accumbens secara selektif oleh rangsangan yang terkait dengan kokain selama beberapa jadwal air / kokain. Penelitian Otak. 2001; 907: 156 – 161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, AJ runtuh. Bukti yang memisahkan sirkuit saraf dalam nukleus accumbens mengkodekan kokain versus hadiah "alami" (air dan makanan). J Neurosci. 2000; 20: 4255 – 4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Microcircuitry fungsional dalam accumbens yang mendasari kecanduan obat: wawasan dari pensinyalan real-time selama perilaku. Opini Saat Ini dalam Neurobiologi. 2004; 14: 763 – 768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Pengkodean kokain selektif versus penghargaan alami oleh nukleus accumbens neuron tidak terkait dengan paparan obat kronis. J Neurosci. 2003; 23: 11214 – 11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Respons neuron pada korteks prefrontal dan nukleus accumbens selama pemberian heroin secara mandiri pada tikus yang bergerak bebas. Res Otak. 1997; 754: 12 – 20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokain, tetapi Bukan Pemberian Penghargaan Alami Sendiri atau Infus Kokain Pasif Menghasilkan LTP persisten di VTA. Neuron. 2008; 59: 288 – 297. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Peningkatan Aktivitas Cdk5 dan Translokasi p35 di Ventral Striatum Tikus yang Diberi Metamfetamin Akut dan Kronis. Neuropsikofarmakologi. 2004; 30: 538 – 549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Aktivasi limbik selama keinginan isyarat kokain diinduksi. Am J Psikiatri. 1999; 156: 11 – 18. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amphetamine meningkatkan fosforilasi kinase yang diatur sinyal ekstraseluler dan faktor transkripsi dalam striatum tikus melalui reseptor metabotropik glutamat kelompok I. Neuropsikofarmakologi. 2002; 27: 565 – 575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII mengatur fosforilasi ERK1 / 2 yang diinduksi amfetamin dalam neuron striatal. Neuroreport. 2002; 13: 1013 – 1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Masyarakat untuk Neuroendokrinologi Perilaku. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormon dan Perilaku; 2003. Lesi korteks prefrontal medial tidak mengganggu perilaku seksual pada tikus jantan; hal. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Obat yang disalahgunakan oleh manusia secara istimewa meningkatkan konsentrasi dopamin sinaptik dalam sistem mesolimbik tikus yang bergerak bebas. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274 – 5278. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Perkawinan mengaktifkan reseptor NMDA di daerah medial preoptik tikus jantan. Behavioral Neuroscience. 2007; 121: 1023 – 1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Prediktor pengambilan risiko seksual di kalangan pengguna narkoba baru. Jurnal penelitian seks. 2006; 43: 318 – 327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmakoterapi Ketergantungan Metamfetamin: Pembaruan. Penyalahgunaan Zat. 2008; 29: 31 – 49. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Motivasi seksual: analisis neural dan perilaku dari mekanisme yang mendasari respon nafsu dan sanggama tikus jantan. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217 – 232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interaksi antara amygdala dan ventral striatum dalam asosiasi stimulus-hadiah: Studi menggunakan jadwal orde kedua dari penguatan seksual. Ilmu saraf. 1989; 30: 63 – 75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studi tentang perilaku instrumental dengan penguatan seksual pada tikus jantan (Rattus norvegicus): I. Kontrol dengan stimuli visual singkat dipasangkan dengan wanita reseptif. J Comp Psychol. 1987; 101: 395 – 406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Proses Asosiatif dalam Kecanduan dan Imbalan Peran Subsistem Striatal Amygdala-Ventral. Sejarah Akademi Ilmu Pengetahuan New York. 1999; 877: 412 – 438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studi tentang perilaku instrumental dengan penguatan seksual pada tikus jantan (Rattus norvegicus): II. Efek lesi area preoptik, pengebirian, dan testosteron. J Comp Psychol. 1987; 101: 407 – 419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, Lihat RE. Neurocircuitry of addiction: tinjauan umum. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261 – 274. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, SJ Watson, H Akil, Robinson TE. Ekspresi mRNA c-fos amphetamine yang ditimbulkan dalam caudate-putamen: efek antagonis reseptor DA dan NMDA bervariasi sebagai fungsi fenotip neuron dan konteks lingkungan. Jurnal Neurokimia. 2003; 86: 33 – 44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Perubahan dinamis pada nukleus mengakumulasi dopamin efflux selama efek Coolidge pada tikus jantan. J Neurosci. 1997; 17: 4849 – 4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Fasilitasi Perilaku Seksual dan Peningkatan Efflux Dopamin dalam Nucleus Accumbens Tikus Jantan setelah Sensitisasi Perilaku yang Dipicu-D-Amphetamine. J Neurosci. 1999a; 19: 456 – 463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Fasilitasi perilaku seksual pada tikus jantan setelah sensitisasi perilaku yang diinduksi d-amfetamin. Psikofarmakologi. 1999b; 142: 200 – 208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amphetamine dan Methamphetamine Berbeda Mempengaruhi Transporter Dopamin di Vitro dan di Vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978 – 2989. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulasi respons terkondisi neuron amigdala basolateral. Fisiologi & Perilaku. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, DB Newlin, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktivasi sirkuit memori selama cue-cue-caine craving craving-craving. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040 – 12045. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  39. AI Hijau, Halkitis PN. Metamfetamin kristal dan sosialitas seksual dalam subkultur gay perkotaan: Afinitas elektif. Budaya, Kesehatan & Seksualitas. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, Lihat RE. Disosiasi nuklei limbik primer dan sekunder yang relevan dengan hadiah pada model hewan yang kambuh. Neuropsikofarmakologi. 2000; 22: 473 – 479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, SK Putnam, Moses J. Hormone-neurotransmitter interaksi dalam kontrol perilaku seksual. Penelitian Otak Perilaku. 1999; 105: 105 – 116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Perilaku seksual pria. Di: Pfaff DW, et al., Editor. Otak dan Perilaku Hormon. San Diego, CA: Elsevier Science (USA); 2002. hlm. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamin dan serotonin: pengaruh pada perilaku seksual pria. Fisiologi & Perilaku. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efek pemberian metamfetamin atau morfin tunggal dan berulang pada ekspresi gen neuroglikan C pada otak tikus. Jurnal Internasional Neuropsikofarmakologi. 2006; 9: 407 – 415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Preferensi tempat yang dikondisikan (CPP) untuk "makanan ringan" kalori tinggi dalam galur tikus yang secara genetik cenderung vs resisten terhadap obesitas yang disebabkan oleh diet: Resistensi terhadap blokade naltrexone. Farmakologi Biokimia dan Perilaku. 2007; 86: 699 – 704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Pengaruh antagonisme opioid pada preferensi tempat yang dikondisikan untuk makanan ringan. Farmakologi Biokimia dan Perilaku. 2006; 83: 257 – 264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsif akibat disfungsi frontostriatal dalam penyalahgunaan narkoba: implikasi untuk kontrol perilaku oleh rangsangan yang berhubungan dengan hadiah. Psikofarmakologi (Berl) 1999; 146: 373 – 390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Dasar kecanduan saraf: patologi motivasi dan pilihan. Am J Psikiatri. 2005; 162: 1403 – 1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Memori dan kecanduan: sirkuit saraf dan mekanisme molekuler bersama. Neuron. 2004; 44: 161 – 179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Menentang peran nukleus accumbens dan daerah hipotalamus lateral anterior dalam pengendalian perilaku seksual pada tikus jantan. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698 – 704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Cannabinoid Mempotensiasi Plastisitas Pembelajaran Emosional dalam Neuron Korteks Prefrontal Medial melalui Input Amygdala Basolateral. J Neurosci. 2006; 26: 6458 – 6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, Lihat RE. Potensi Penguatan kembali Perilaku Pencarian-Kokain Setelah D-amfetamin diinfus ke Amygdala Basolateral. Neuropsikofarmakologi. 2003; 28: 1721 – 1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Eksposur yang berulang-ulang diintensifkan daripada mengurangi efek bermanfaat dari amfetamin, morfin, dan kokain. Psikofarmakologi (Berl) 1989; 98: 357 – 362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Perilaku seksual pada tikus jantan setelah radiofrekuensi atau lesi penipisan dopamin pada nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585 – 592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Serotonin Lateral Hypothalamic Menghambat Nukleus Accumbens Dopamine: Implikasi untuk Kesenangan Seksual. J Neurosci. 1999; 19: 7648 – 7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Efek dari antagonis D1 dan pengalaman seksual pada imunoreaktivitas seperti-Fos yang diinduksi-sopulasi pada nukleus preoptik medial. Penelitian Otak. 1999; 829: 55 – 68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Hanya kawin mandiri yang memberi imbalan pada tikus dari kedua jenis kelamin. Horm Behav. 2001; 40: 510 – 517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, Lihat RE. Inaktivasi selektif dari korteks prefrontal dorsomedial dan amigdala basolateral melemahkan pemulihan kondisi perilaku mencari kokain yang dipadamkan pada tikus. Psikofarmakologi (Berl) 2003; 168: 57 – 65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Fasilitasi perilaku seksual pada tikus jantan di hadapan rangsangan yang sebelumnya dipasangkan dengan suntikan morfin sistemik. Farmakologi Biokimia dan Perilaku. 1990; 35: 367 – 372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Peraturan Imbalan Metamfetamin dengan Sinyal yang Diatur Seluler-Diatur Kinase 1 / 2 / ets-Like Gene-1 Signaling Pathway melalui Aktivasi Dopamine NIDA ( Seri Laporan Penelitian: Penyalahgunaan dan penambahan Metamfetamin. 2006 NIH Nomor publikasi 06-4210. [PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Revaluasi penguatan dan preferensi tempat yang dikondisikan. Fisiologi & Perilaku. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Jalur Keinginan Seksual. Jurnal Pengobatan Seksual. 2009; 6: 1506 – 1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psikofarmakologi perilaku seksual. Dalam: Bloom FE, Kupfer DJ, editor. Psikofarmakologi: generasi keempat dari kemajuan. New York: Raven; 1995. hlm. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implikasi Induksi Gen Awal-Awal di Otak Mengikuti Stimulasi Seksual Tikus Jantan dan betina. Buletin Penelitian Otak. 1997; 44: 397 – 407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Pengkondisian dan perilaku seksual: ulasan. Horm Behav. 2001; 40: 291 – 321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Efek diferensial dari antagonis reseptor dopamin pada perilaku seksual tikus jantan. Psikofarmakologi. 1989; 98: 363 – 368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Sistem dopamin mesolimbik: Jalur umum terakhir untuk memperkuat efek penyalahgunaan obat? Ulasan Neuroscience & Biobehavioral. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Pengalaman seksual menginduksi plastisitas fungsional dan struktural dalam sistem mesolimbik. Psikiatri Biologis. 2009 Di tekan.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Fluktuasi dopamin dalam nukleus accumbens selama pemeliharaan, kepunahan, dan pemulihan kembali pemberian D-amfetamin intravena. J Neurosci. 1999; 19: 4102 – 4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Obat-obatan dan efek seksual: peran jenis obat dan jenis kelamin. Jurnal Perawatan Penyalahgunaan Zat. 2002; 22: 103 – 108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Perilaku seksual meningkatkan ekspresi c-fos di otak depan tikus jantan. Res Otak. 1991; 564: 352 – 357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Menghancurkan aktivitas selama beberapa jadwal untuk penguatan air dan sukrosa pada tikus. Sinaps. 2002; 43: 223 – 226. [PubMed]
  73. Salo R, TE Nordahl, Natsuaki Y, Leamon MH, GP Galloway, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Kontrol Perhatian dan Level Metabolit Otak pada Pelaku Metamfetamin. Psikiatri Biologis. 2007; 61: 1272 – 1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Metamfetamin kristal dan ekstasi berbeda dalam kaitannya dengan seks yang tidak aman di antara pria gay muda. Jurnal kesehatan masyarakat Kanada. 2005; 96: 340 – 343. [PubMed]
  75. Lihat RE. Substrat saraf dari isyarat relaps ke perilaku mencari obat. Farmakologi Biokimia dan Perilaku. 2002; 71: 517 – 529. [PubMed]
  76. Lihat RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Ketergantungan Narkoba, Kambuh, dan Amygdala. Sejarah Akademi Ilmu Pengetahuan New York. 2003; 985: 294 – 307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivasi yang terkait dengan penggunaan metamfetamin di antara laki-laki HIV yang berhubungan seks dengan laki-laki. Jurnal Perawatan Penyalahgunaan Zat. 2002; 22: 149 – 156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Model pemulihan obat kambuh: sejarah, metodologi dan temuan utama. Psikofarmakologi (Berl) 2003; 168: 3 – 20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensitisasi terhadap efek menguntungkan dari kokain: karakteristik farmakologis dan temporal. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808 – 815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensitisasi terhadap efek menguntungkan dari morfin: farmakologi dan karakteristik temporal. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33 – 39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Prediktor perilaku seksual berisiko HIV dalam sampel komunitas pria dan wanita pengguna narkoba suntikan. AIDS dan perilaku. 2003; 7: 383 – 393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Methamphetamine, Penggunaan dan Perilaku Risiko Seksual pada Siswa-Siswa Sekolah Menengah AS: Temuan-temuan dari Survei Perilaku Risiko Nasional. Ilmu Pencegahan. 2007; 8: 103 – 113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efek reseptor dopamin dan NMDA pada ekspresi Fos yang diinduksi kokain dalam striatum tikus Fischer. Penelitian Otak. 2008; 1243: 1 – 9. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, editor. Peta Otak: Struktur Otak Tikus. Amsterdam: Ilmu Pengetahuan Elsevier; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Penghargaan seksual pada tikus jantan: Efek pengalaman seksual pada preferensi tempat yang dikondisikan terkait dengan ejakulasi dan intromisi. Horm Behav. 2008 [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Halaman C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Keterlibatan kaskade kinase yang diatur oleh sinyal ekstraseluler untuk properti yang menghasilkan kokain. J Neurosci. 2000; 20: 8701 – 8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Halaman C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Obat adiktif dan non-adiktif menginduksi pola aktivasi ERK yang berbeda dan spesifik di otak tikus. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826 – 1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Regulasi kaskade protein fosfatase memungkinkan sinyal dopamin dan glutamat konvergen untuk mengaktifkan ERK di striatum. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491 – 496. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Perubahan pada transmisi dopaminergik dan glutamatergik dalam induksi dan ekspresi kepekaan terhadap perilaku: tinjauan kritis studi praklinis. Psikofarmakologi (Berl) 2000; 151: 99 – 120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Aktivasi saraf mengikuti perilaku seksual pada otak tikus jantan dan betina. Penelitian Otak Perilaku. 1998; 92: 181 – 193. [PubMed]
  91. Daftar Putih RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Lesi eksitotoksik dari amigdala basolateral mengganggu akuisisi perilaku mencari kokain di bawah jadwal penguatan kedua. Psikofarmakologi. 1996; 127: 213 – 224. [PubMed]
  92. RA yang bijaksana. Neurobiologi kecanduan. Opini Saat Ini dalam Neurobiologi. 1996; 6: 243 – 251. [PubMed]