- STUDI LENGKAP
- scicurious penjelasan - Untuk Ketahanan Stres, terima kasih DeltaFosB
Nat Neurosci. 2010 Juni; 13(6): 745-752. Diterbitkan secara online, 2010, Mei 16. doi: 10.1038 / nn.2551
Vincent Vialou,1 Alfred J. Robison,1, * Quincey C. LaPlant,1, * Herb E. Covington, III,1 David M. Dietz,1 Yoshinori N. Ohnishi,1 Ezekiell Mouzon,1 Augustus J. Rush, III,2 Emily L. Watts,1 Deanna L. Wallace,2, § Sergio D. Iniguez,3 Yoko H. Ohnishi,1 Michel A. Steiner,4 Brandon Warren,3 Vaishnav Krishnan,2 Rachael L. Neve,5 Subroto Ghose,2 Olivier Berton,2, § Carol A. Tamminga,2 dan Eric J. Nestler1
Informasi penulis ► Informasi Hak Cipta dan Lisensi ►
Versi editan terakhir penerbit untuk artikel ini tersedia di Nat Neurosci
Lihat artikel lain di PMC itu mengutip artikel yang diterbitkan.
Abstrak
Berbeda dengan literatur yang luas tentang efek stres pada otak, relatif sedikit yang diketahui tentang mekanisme molekuler ketahanan, kemampuan beberapa individu untuk melarikan diri dari efek buruk stres. HSebelum kami menunjukkan bahwa faktor transkripsi, osFosB, memediasi mekanisme penting ketahanan pada tikus. Induksi osFosB dalam nukleus accumbens, wilayah hadiah otak utama, dalam menanggapi stres kekalahan sosial kronis diperlukan dan cukup untuk ketahanan. Ind Induksi FOSB juga diperlukan untuk kemampuan antidepresan standar, fluoxetine, untuk membalikkan patologi perilaku yang disebabkan oleh kekalahan sosial. ΔFosB menghasilkan efek ini melalui induksi subunit reseptor GluR2 AMPA glutamat, yang mengurangi respons nukleus accumbens neuron untuk glutamat, dan melalui protein sinaptik lainnya. Bersama-sama, temuan ini membentuk jalur molekuler baru yang mendasari aksi ketahanan dan antidepresan.
PENGANTAR
Orang yang mengalami stres parah menunjukkan respons yang sangat berbeda, dengan beberapa mampu mengatasi krisis sementara yang lain mengembangkan psikopatologi berat seperti depresi atau gangguan stres pasca-trauma (PTSD). Kemampuan untuk mengatasi situasi stres, yaitu ketahanan, tergantung pada pengembangan adaptasi perilaku dan psikologis yang memadai terhadap stres kronis.1,2. Konstruksi psikologis yang mempromosikan ketahanan mencakup komitmen, kesabaran, optimisme, dan harga diri, serta kapasitas untuk memodulasi emosi dan mengembangkan perilaku sosial adaptif. Ciri-ciri ini berimplikasi pada sirkuit hadiah otak, yang tampaknya menjadi penentu penting bagi munculnya fenotipe patologis vs ulet.3,4. Korelasi neurobiologis dari kerentanan atau resistensi terhadap stres telah diidentifikasi oleh 2 pada manusia, tetapi sejauh mana mereka menjadi penyebab atau konsekuensi kerentanan masih belum diketahui.5.
Di antara model tikus saat ini depresi dan PTSD, stres kekalahan sosial kronis adalah pendekatan etologis yang valid, yang menginduksi fisiologis jangka panjang.6-8 dan perilaku9-11 perubahan, termasuk penghindaran sosial, anhedonia, dan gejala seperti kecemasan, yang melibatkan aktivasi beberapa sirkuit saraf dan sistem neurokimia12-15. Normalisasi penghindaran sosial dengan perawatan antidepresan kronis, tetapi tidak akut membuatnya menjadi model yang berharga untuk memeriksa aspek depresi dan PTSD pada manusia.11,16. Proporsi yang signifikan (~ 30%) dari tikus yang dikalahkan secara kronis menghindari sebagian besar gejala sisa negatif dari kekalahan10, dengan demikian memungkinkan untuk penyelidikan eksperimental ketahanan. Sementara induksi beberapa protein dalam nucleus accumbens (NAc), wilayah otak utama, telah terbukti penting untuk ekspresi perilaku seperti depresi setelah kekalahan.10,11,17,18, apalagi yang diketahui tentang dasar molekuler dari daya tahan yang dimediasi oleh daerah otak ini. Di sini, kami menjawab pertanyaan ini dengan berfokus pada osFosB, faktor transkripsi keluarga Fos yang diinduksi dalam NAc oleh obat-obatan pelecehan, imbalan alami, dan beberapa jenis stres19-21.
HASIL
ΔFosB di NAc mempromosikan ketahanan terhadap stres kekalahan sosial
Tikus jantan C57BL / 6J menjadi sasaran kekalahan sosial selama sepuluh hari berturut-turut10,11, dan kemudian dipisahkan menjadi populasi yang rentan dan tangguh berdasarkan ukuran penghindaran sosial (Fig. 1a), yang berkorelasi dengan beberapa perilaku seperti depresi lainnya10. Kami menemukan peningkatan ΔFosB, diukur dengan imunohistokimia, dalam NAc setelah kekalahan sosial kronis (Gambar. 1b, c), dengan tikus tangguh yang menunjukkan induksi ΔFosB terbesar di subregional NAC core dan shell (Gambar. 1b, c). Selain itu, kami mengamati korelasi yang kuat (p <0.01) antara tingkat ΔFosB dan interaksi sosial (r = 0.80, NAc shell; r = 0.85, NAc core; r = 0.86, seluruh NAc), menunjukkan bahwa derajat induksi ΔFosB di NAc mungkin menjadi penentu penting apakah hewan menunjukkan fenotipe yang rentan vs. tangguh. Analisis Western blot pada pembedahan NAc yang mengandung subkawasan inti dan cangkang mengkonfirmasi induksi ΔFosB hanya pada tikus yang tahan uji (lihat Gambar Tambahan. 1).
Ind Induksi FOSB dalam NAc oleh kekalahan sosial memediasi ketahanan
Untuk menguji konsekuensi fungsional dari induksi ΔFosB, kami menggunakan tikus bitransgenik yang secara berlebih mengekspresikan pressFosB secara spesifik pada NAc dewasa dan striatum punggung.22. Tikus-tikus ini menunjukkan kecenderungan berkurang untuk mengembangkan penghindaran sosial setelah empat atau sepuluh hari kekalahan sosial (Fig. 1d), dengan demikian menyatakan bahwa ΔFosB memberikan tindakan perlindungan terhadap tekanan sosial. Sebaliknya, kami menggunakan tikus bitransgenik yang secara berlebih mengekpresikan ΔcJun, mutan cJun terpotong yang tidak aktif secara transkripsi yang memusuhi aktivitas ΔFosB23,24. Berbeda dengan tikus yang mengekspresikan ΔFosB, tikus yang mengekspresi berlebihan JcJun lebih rentan terhadap kekalahan sosial kronis daripada mengontrol teman litter dan menunjukkan perilaku penghindaran yang maksimal setelah hari kekalahan 4 (Fig. 1e). Tikus ΔcJun juga menunjukkan peningkatan imobilitas dalam tes berenang paksa satu hari, serta mengurangi preferensi sukrosa, keduanya ditafsirkan sebagai peningkatan perilaku seperti depresi (Gambar Tambahan 2a, b). Namun, exFosB atau JcJun overexpression tidak mengubah beberapa ukuran dasar aktivitas lokomotor atau perilaku seperti kecemasan (Gambar Tambahan 2c-f). Bersama-sama, temuan ini menunjukkan bahwa pengurangan aktivitas osFosB di NAc dan dorsal striatum mengurangi respon positif dan adaptif, disimpulkan sebagai “mengatasi7”, Hingga stres kronis.
Mengurangi osFosB dalam NAc meningkatkan kerentanan terhadap stres
Untuk mendapatkan wawasan lebih lanjut tentang tindakan perilaku ΔFosB setelah stres kronis, kami menggunakan periode lama isolasi sosial selama masa dewasa, yang menginduksi kelainan seperti depresi pada tikus.25 dan merupakan faktor risiko utama untuk depresi klinis. Kami mengamati penurunan kadar osFosB dalam NAc tikus yang terisolasi secara sosial (Fig. 2a, b). Kami juga menemukan bahwa isolasi membuat tikus secara dramatis lebih rentan terhadap kekalahan sosial, dan bahwa kerentanan yang disebabkan oleh isolasi ini dibalik sepenuhnya dengan mengekspres secara berlebihan ΔFosB secara selektif dalam NAc (Fig. 2c). Sebaliknya, blokade fungsi osFosB di NAc, dengan ekspresi berlebih dari virus ΔJunD, pada tikus kontrol grup yang dipromosikan meningkatkan kerentanan terhadap kekalahan sosial (Fig. 2c). ΔJunD, seperti ΔcJun, adalah mutan terputus-terminal N yang bertindak sebagai antagonis dominan-negatif dari ΔFosB (Gambar Tambahan. 3)23. Temuan ini secara langsung berimplikasi pada tingkat basal osFosB dalam NAc dalam kerentanan stres.
Pengaruh isolasi sosial pada ΔFosB dan pada kerentanan terhadap kekalahan sosial
Untuk mempelajari relevansi klinis dari temuan ini, ΔFosB tingkat diukur dalam sampel NAc manusia manusia postmortem yang diperoleh dari pasien yang depresi dan kontrol yang cocok secara luas. Kami menemukan ~ 50% penurunan kadar ΔFosB pada pasien depresi (Fig. 2d), mendukung peran ΔFosB dalam depresi manusia. Manusia yang mengalami depresi dianalisis termasuk individu baik yang hidup atau mati antidepresan pada saat kematiannya (Tabel Tambahan 1), dan kami tidak menemukan korelasi antara kadar osFosB dan paparan antidepresan. Berdasarkan pengamatan kami bahwa pengobatan antidepresan meningkatkan ΔFosB dalam NAc tikus (lihat di bawah), temuan ini menunjukkan bahwa kegagalan untuk menginduksi ΔFosB dalam NAc mungkin menjadi penentu penting karena kurangnya respon antidepresan pada manusia.
ΔFosB dalam NAc memediasi aksi antidepresan
Perawatan antidepresan kronis membalikkan penghindaran sosial yang disebabkan oleh kekalahan yang terlihat pada tikus yang rentan11. Oleh karena itu kami memeriksa apakah induksi osFosB pada NAc dapat menjadi mekanisme tidak hanya untuk ketahanan tetapi juga untuk tindakan antidepresan. Tikus kontrol tanpa kekalahan yang diobati dengan fluoxetine selama 20 hari menunjukkan tidak ada perubahan dalam perilaku sosial, tetapi menunjukkan akumulasi ΔFosB dalam cangkang NAc (Fig. 3a, b) dan inti (Gambar Tambahan. 4). Pengobatan fluoxetine pada tikus yang rentan membalikkan penghindaran sosial mereka (Fig. 3a), seperti yang dilaporkan sebelumnya, dan selanjutnya meningkatkan level osFosB dalam NAc (Fig. 3b, Gambar Tambahan. 4).
Δ Induksi FOSB dalam NAc memediasi efek antidepresan fluoxetine
Untuk secara langsung menguji keterlibatan induksi ΔFosB tersebut dalam efek perilaku fluoxetine, kami diekspresikan secara berlebihan ΔJunD atau GFP saja (sebagai kontrol) di NAc dari tikus yang sebelumnya dikalahkan. Setengah dari tikus di masing-masing kelompok kemudian dirawat selama tiga minggu tambahan dengan fluoxetine atau kendaraan. Seperti yang diharapkan, pengobatan fluoxetine pada tikus yang mengekspresikan GFP berlebih pada NAc menunjukkan pembalikan penghindaran sosial yang disebabkan oleh kekalahan sosial kronis. Sebaliknya, ekspresi berlebih dari ΔJunD memblokir efek terapi fluoxetine ini (Fig. 3c), mendukung hipotesis bahwa induksi osFosB dalam NAc diperlukan untuk tindakan antidepresan. Selain itu, ekspresi berlebih dari ΔFosB yang dimediasi virus dalam tikus menghasilkan efek seperti antidepresan yang signifikan yang diukur dengan penurunan waktu imobilitas pada hari 2 dari uji berenang paksa (Gambar Tambahan 5a). Analisis lebih lanjut dari perilaku selama tes ini mengungkapkan ΔFosB peningkatan yang diinduksi dalam berenang dan memanjat (Gambar Tambahan 5b – d), fitur yang terkait dengan perubahan mekanisme serotonergik dan noradrenergik26. Menariknya, tikus yang mengekspresikan ΔFosB dalam NAc menunjukkan penurunan waktu imobilitas pada hari pertama pengujian, yang ditafsirkan sebagai efek pro-motivasi (lihat Metode Online dan Gambar Tambahan 5e – h).
Regulasi reseptor AMPA di NAc memediasi ketahanan
ΔFosB mengatur transkripsi berbagai gen dalam NAc24,27. Salah satu gen target yang ditetapkan adalah subunit reseptor glutamat AMPA GluR2: tikus yang mengekspresikan exFosB dalam NAc memiliki kadar GluR2 yang meningkat, tanpa efek pada subunit reseptor glutamat lainnya.22. Peningkatan regulasi GluR2 selektif dalam NAc ini telah dikaitkan dengan peningkatan obat dan penghargaan alami22,28. Untuk mengatasi kemungkinan bahwa modulasi GluR2 berkontribusi terhadap tindakan pro-resilien osFosB, kami mempelajari ekspresi GluR2 dalam NAc setelah kekalahan sosial yang kronis. Tikus yang rentan menunjukkan penurunan kadar GluR2 yang signifikan di wilayah otak ini dibandingkan dengan kontrol, sedangkan tikus yang tangguh menunjukkan peningkatan kadar GluR2 (Fig. 4a). Sementara mekanisme yang mendasari penekanan ekspresi GluR2 pada tikus yang rentan masih belum diketahui, induksi GluR2 yang terlihat pada tikus tangguh tampaknya mencerminkan efek langsung ΔFosB pada gen GluR2, karena kami menemukan peningkatan ikatan bindingFosB ke promotor GluR2 dengan menggunakan chromatin imunopresipitasi (ChIP) (Fig. 4b), dan PCR kuantitatif (qPCR) mengungkapkan induksi berkelanjutan tingkat GluR2 mRNA dalam NAc tikus tangguh (Fig. 4c), yang sejajar dengan induksi berkelanjutan ΔFosB. Menariknya, GluR1 secara berlawanan diatur setelah kekalahan sosial: kami mengamati peningkatan ekspresi pada tikus yang rentan dan penurunan ekspresi pada tikus yang tangguh (Fig. 4a). Namun, tidak ada perubahan yang sesuai terlihat pada ekspresi mRNA GluR1, yang menyarankan mekanisme pasca-translasi. Selain itu, pengobatan fluoxetine kronis pada tikus yang tidak dikalahkan meningkatkan kadar GluR2 di NAc (Fig. 4d), dan analisis jaringan NAc postmortem manusia dari pasien depresi mengungkapkan penurunan kadar GluR2 dibandingkan dengan kontrol (Fig. 4e). Tidak ada perubahan dalam level GluR1 yang terdeteksi (Fig. 4e).
Pro-resiliensi, efek mirip antidepresan dari GluR2 dalam NAc
Kehadiran GluR2 memiliki efek mendalam pada reseptor AMPA: reseptor AMPA yang kurang GluR2 adalah2+-permeable, dan menampilkan konduktansi reseptor yang lebih besar dan arus koreksi yang kuat ke dalam, dibandingkan dengan reseptor yang mengandung GluR229. Untuk melengkapi hasil biokimia kami, oleh karena itu kami melakukan rekaman klem-tegangan seluruh sel dari neuron berduri sedang di NAc dari tikus yang tidak dikalahkan dan setelah kekalahan sosial pada hewan yang ulet dan rentan. Hubungan tegangan-saat-AMPA-mediated membangkitkan arus postsinaptik (EPSCs) mengungkapkan pembetulan ke dalam yang lebih besar secara signifikan pada tikus yang rentan (Fig. 5a – c) dibandingkan dengan kontrol, konsisten dengan peningkatan rasio GluR1: GluR2 terlihat dalam kondisi ini. Meskipun tingkat perbaikan dalam sel yang direkam dari tikus yang rentan adalah variabel, kami mengamati perubahan yang sangat signifikan dalam perbaikan dibandingkan dengan kelompok kontrol dan kelompok yang ulet. Konsistensi dari temuan ini ditunjukkan oleh fakta bahwa tingkat perbaikan semua sel dari tikus yang rentan melebihi nilai rata-rata yang terlihat untuk sel kontrol. Selain itu, kami menemukan bahwa tingkat perbaikan secara tidak langsung berkorelasi dengan penghindaran sosial (Fig. 5d), menyarankan bahwa perubahan dalam rasio GluR1: GluR2 dapat sebagian mendorong perilaku ini. Untuk mengkonfirmasi prevalensi yang lebih besar dari reseptor yang kekurangan GluR2 pada tikus yang rentan, kami menginkubasi irisan dari kontrol dan tikus yang rentan dengan 1-naphtylacetylsperimine (NASPM), sebuah blocker selektif dari reseptor AMPA yang kekurangan GluR2. EPSC yang muncul dalam neuron dicatat dari tikus yang rentan (Gbr. 5e – f) secara signifikan dikurangi oleh NASPM, menunjukkan bahwa reseptor AMPA yang kurang GluR2 berkontribusi lebih signifikan terhadap transmisi glutamatergik pada tikus yang rentan daripada kontrol. Dari catatan, efek NASPM pada tikus yang rentan kurang dari yang diperkirakan mengingat perubahan yang lebih besar diamati pada rektifikasi. Akan tetapi, perbedaan ini tidak pernah terjadi sebelumnya30 dan dapat dihasilkan dari modifikasi pasca-translasi atau interaksi protein-protein yang melibatkan GluR2 (lihat Diskusi), atau hanya sejauh paparan NASPM. Peningkatan yang diinduksi stres dalam rektifikasi ke dalam diamati pada tikus rentan tidak ada pada tikus tangguh (Gbr. 5a – d), konsisten dengan penurunan GluR1 yang diamati dan peningkatan GluR2 dalam kondisi ini. Namun, kami tidak melihat penurunan rektifikasi ke dalam pada tikus yang resilien dibandingkan dengan kontrol (lihat Diskusi).
Komposisi reseptor AMPA diatur secara berbeda pada tikus yang rentan dan tangguh
Efek antidepresan seperti blokade reseptor AMPA di NAc
Data ini menunjukkan bahwa peningkatan fungsi reseptor AMPA (peningkatan rasio GluR1: GluR2) pada NAc pada tikus yang rentan meningkatkan penghindaran sosial, sedangkan penurunan fungsi AMPA (penurunan rasio GluR1: GluR2) berkontribusi pada ketahanan. Untuk menguji hipotesis ini, kami memasukkan antagonis reseptor AMPA NBQX langsung ke dalam NAc tikus yang dikalahkan segera sebelum tes penghindaran sosial. NBQX meningkatkan waktu interaksi sosial (Fig. 4f), menunjukkan bahwa blokade input rangsang cepat ke NAc menentang ekspresi efek buruk dari tekanan sosial kronis ini. NBQX tidak mengubah aktivitas alat gerak umum (Gambar Tambahan. 6). Selain itu, efek seperti antidepresan dari infus tunggal NBQX pada penghindaran sosial tahan lama karena tikus diuji ulang satu minggu kemudian menunjukkan peningkatan interaksi sosial lebih lanjut.
Kami selanjutnya mengekspresi secara berlebihan GluR2 secara selektif pada NAc dari tikus yang rentan. Ekspresi GluR2 sepenuhnya membalikkan penghindaran sosial yang disebabkan oleh kekalahan sosial kronis (Fig. 4g), mendukung pandangan bahwa upregulasi GluR2 dalam NAc adalah mekanisme kunci ketahanan. Menariknya, efek dari overekspresi GluR2 bertahan selama setidaknya 10 hari setelah operasi (Fig. 4g) ketika ekspresi GluR2 yang dimediasi-virus telah sepenuhnya hilang. Sebaliknya, pada tikus tangguh, ekspresi berlebih dari GluR2 versi yang tidak diedit, GluR2Q, yang menyerupai GluR1 dalam studi fungsional, menjadikan tikus lebih rentan terhadap kekalahan sosial (Gambar 4g), mendukung pandangan bahwa peningkatan fungsi reseptor AMPA pada NAc berkontribusi terhadap kerentanan.
SC1, target ΔFosB lain, juga merupakan mediator ketahanan
Untuk mengidentifikasi tambahan gen target ΔFosB yang berkontribusi terhadap ketahanan, kami membandingkan set data array ekspresi gen yang diperoleh dari NAc dari tikus-tikus bitransgenik yang mengekspresikan ΔFosB dan dari tikus-tikus C57Bl / 6J 48 beberapa jam setelah kekalahan sosial kronis yang menampilkan fenotipe yang tangguh vs.10,24. Fig. 6a menunjukkan banyak (> 75%) tumpang tindih antara gen yang diinduksi di NAc baik oleh ΔFosB dan oleh ketahanan. Di antara gen ini (tercantum dalam Tabel Tambahan 2), kami memilih untuk analisis lebih lanjut SC1, berdasarkan besarnya induksi di kedua ketahanan dan pada ΔFosB overexpression. SC1, juga dikenal sebagai Sparc (protein yang disekresikan, asam, kaya akan sistein) -seperti 1 atau hevin, adalah molekul matriks anti-adhesif yang sangat diekspresikan dalam otak orang dewasa, di mana ia berada dalam kepadatan pascasinaps dan terlibat dalam sinaptik keliatan31. Untuk menilai secara langsung peran potensial SC1 dalam resiliensi, kami mengekspres SC1 yang virally pada NAc tikus yang rentan. SC1 secara signifikan membalikkan penghindaran sosial yang disebabkan oleh kekalahan sosial kronis (Fig. 6b). Ekspresi berlebih SC1 juga memberikan efek seperti antidepresan pada hari 2 dari tes berenang paksa tikus (Fig. 6c dan Gambar Tambahan 7a – c), tetapi tidak berpengaruh pada aktivitas alat gerak basal dan perilaku yang berhubungan dengan kecemasan (Gambar Tambahan. 7d-g). Selain itu, kami menemukan tren yang kuat untuk penurunan kadar SC1 dalam jaringan NA postmortem manusia dari pasien yang depresi (Fig. 6d).
Pro-resiliensi, efek seperti antidepresan dari SC1 di NAc
PEMBAHASAN
Hasil penelitian ini memberikan bukti pertama adaptasi molekuler yang terjadi pada neuron berduri sedang dari NAc yang mendasari respons ulet terhadap stres kronis dan yang berkontribusi terhadap efek terapeutik dari pengobatan antidepresan kronis. Kami menunjukkan bahwa tingkat basal ΔFosB dalam NAc menentukan kerentanan awal individu terhadap stres kekalahan sosial, dan bahwa tingkat induksi ΔFosB sebagai respons terhadap stres kronis menentukan respons yang rentan dan tangguh terhadap stres tersebut. Kami menunjukkan lebih lanjut bahwa pembalikan yang sukses dari kelainan perilaku yang diinduksi pada hewan yang rentan oleh pemberian fluoxetine kronis memerlukan induksi obat ΔFosB di wilayah otak ini. Temuan-temuan ini menunjukkan bahwa induksi osFosB pada NAc merupakan mekanisme ketahanan dan respon antidepresan yang memadai dan cukup. Temuan tingkat ΔFosB yang lebih rendah dalam NAc manusia yang tertekan mendukung relevansi pengamatan ini dalam model tikus dengan depresi klinis. ΔFosB mengatur fungsi NAc dengan menginduksi atau menekan sejumlah gen target24,27. Kami mengidentifikasi dua gen targetnya, subunit reseptor AMPA GluR2 dan SC1, protein matriks ekstraseluler, dan secara langsung mengimplikasikan mereka dalam memediasi ketahanan terhadap stres kekalahan sosial.
Peran pro-resiliensi untuk ΔFosB dalam konteks stres kronis sangat menarik mengingat banyaknya bukti untuk ΔFosB terlibat dalam mengatur respons terhadap obat-obatan pelecehan dan imbalan alami seperti makanan, seks, dan olahraga.19. OsFosB diinduksi dalam NAc oleh obat dan imbalan alami, dan meningkatkan respons yang bermanfaat terhadap rangsangan ini. Oleh karena itu, ia terlibat sebagai mediator aspek-aspek tertentu dari kecanduan narkoba. Temuan saat ini dalam model stres memberikan wawasan baru yang fundamental tentang peran protein ini dalam regulasi perilaku emosional yang kompleks. Dalam kondisi normal, osFosB diekspresikan pada level tertinggi dalam NAc dibandingkan dengan semua wilayah otak lainnya19. Kami berhipotesis bahwa tingkat ΔFosB dalam NAc memainkan peran penting dalam menetapkan tingkat motivasi individu dan dalam mengarahkan perilaku termotivasi menuju rangsangan bermanfaat yang menonjol. Penghapusan stimulasi lingkungan selama isolasi berkepanjangan mengurangi tingkat basal ΔFosB pada tikus NAc, mengganggu motivasi mereka dan meningkatkan kerentanan mereka terhadap tekanan sosial kronis, seperti yang kami tunjukkan di sini. Penurunan yang diamati pada tingkat osFosB dalam NA postmortem pasien depresi sejalan dengan hipotesis ini, dan menunjukkan peran ΔFosB dalam gangguan motivasi dan penghargaan yang terlihat pada banyak orang dengan depresi. Sebaliknya, kemampuan untuk menginduksi osFosB dalam NAc sebagai respons terhadap stres kronis memungkinkan seseorang untuk meningkatkan motivasi dan penghargaan alami meskipun stres sedang berlangsung, sebuah hipotesis yang konsisten dengan pandangan terkini tentang ketahanan pada manusia.1,2. Kami berhipotesis lebih lanjut bahwa induksi ΔFosB dalam NAc oleh paparan kronis terhadap penyalahgunaan obat-obatan, yang jauh lebih besar dalam besarnya daripada yang terlihat dengan stres atau imbalan alami19, menghasilkan tingkat patologis dari motivasi yang ditingkatkan dengan cara yang merusak sirkuit hadiah menuju stimulasi obat yang lebih kuati.
Jelas, fitur spesifik dari hipotesis ini memerlukan penyelidikan lebih lanjut. Induksi osFosB dalam NAc oleh stres kronis atau oleh fluoxetine mungkin diharapkan meningkatkan imbalan obat. Memang, komorbiditas depresi dan kecanduan sudah mapan pada manusia, dan sensitisasi silang antara obat pelecehan dan stres telah ditunjukkan pada tikus.32-34. Di sisi lain, depresi dan kecanduan adalah sindrom yang sangat kompleks, heterogen dan kebanyakan orang dengan depresi tidak memiliki kecanduan dan sebaliknya. Selain itu, fluoxetine tidak memberikan efek yang jelas pada respons obat pada hewan, juga bukan pengobatan yang efektif untuk kecanduan pada pecandu yang tidak juga mengalami depresi. Konsisten dengan kompleksitas ini, kami telah menemukan bahwa tikus yang rentan, bukan tikus yang tangguh, dalam paradigma kekalahan sosial menunjukkan peningkatan respons terhadap obat-obatan pelecehan.10. Ini akan menunjukkan bahwa peningkatan kerentanan tikus yang rentan terhadap penyalahgunaan obat dimediasi melalui banyak adaptasi lain yang diinduksi dalam NAc dan di tempat lain, sebagai hanya satu contoh, BDNF, yang diinduksi dalam tikus yang rentan, tidak ulet, di NAc dan meningkatkan mekanisme imbalan obat.melihat 10.
Interpretasi bahwa osFosB mempromosikan aspek kecanduan, sementara mempromosikan ketahanan terhadap stres, tidak mengejutkan mengingat hubungan kompleks yang diamati antara peran protein yang diberikan dalam NAc dalam model kecanduan vs depresi. Beberapa protein (misalnya, BDNF) mempromosikan respons terhadap obat-obatan pelecehan dan terhadap stres, sementara banyak protein lain memberikan efek yang berlawanan dalam dua kondisi ini: misalnya, CREB dalam NAc menghasilkan fenotip pro-depresi, namun menumpulkan respons terhadap obat-obatan pelecehan. melihat 4,10.
Temuan-temuan ini menekankan perlunya penelitian lebih lanjut dalam menggambarkan dasar-dasar molekuler dari perilaku emosional yang kompleks, dan pentingnya menggunakan serangkaian tes perilaku seluas mungkin dalam penyelidikan tersebut. Hasilnya juga menunjukkan bahwa, seperti yang diharapkan, osFosB sendiri tidak dapat menjelaskan fenomena penuh depresi dan kecanduan, melainkan merupakan pengatur utama mekanisme imbalan yang bergantung pada NAc dan dengan demikian penting dalam memediasi aspek-aspek tertentu dari kedua kondisi tersebut..
Namun, peringatan utama dari diskusi ini adalah berbagai jenis sel dalam NAc di mana osFosB diinduksi dalam model stres dan kecanduan. Obat-obatan pelecehan dan penghargaan alami menginduksi ΔFosB terutama di subkelas neuron berduri menengah di NAc yang mengekspresikan D1 reseptor dopamin19,22, sementara stres menginduksi osFosB kira-kira sama dalam D1 dan D2 neuron berduri medium yang mengandung reseptor20. Induksi diferensial ini dapat memiliki konsekuensi fungsional yang dramatis, karena kemampuan ΔFosB untuk meningkatkan hadiah telah ditunjukkan untuk D1 hanya neuron kelas19.
Identifikasi GluR2 sebagai gen target yang terlibat dalam mediasi efek pro-resiliensi ΔFB memberikan beberapa pertimbangan. Kami menunjukkan bahwa kerentanan pada tikus, dan depresi manusia, terkait dengan peningkatan rasio GluR1: GluR2 dalam NAc, yang menunjukkan peningkatan rangsangan neuron berduri sedang dalam menanggapi glutamat.
NAc menerima input glutamatergic dari beberapa daerah otak, khususnya, prefrontal cortex, amygdala, dan hippocampus35. Input glutamatergik seperti itu memodulasi valensi dan arti-penting rangsangan yang memberi penghargaan dan permusuhan dan dengan demikian mengendalikan perilaku yang termotivasi.36-38. Studi terbaru konsisten dengan hipotesis kami bahwa peningkatan rangsangan NAc dapat meningkatkan kerentanan stres. Tekanan berenang paksa meningkatkan kekuatan sinaptik dan fungsi reseptor AMPA dalam NAc39, sementara infus glutamat ke dalam NAc mengurangi perilaku berenang dalam uji berenang paksa, efek seperti pro-depresi40. Secara lebih umum, peningkatan penembakan NAc mengkodekan status permusuhan dalam beberapa model hewan41. Perubahan dalam aktivitas NAc telah diamati pada pasien dengan depresi berat42 dan dalam pasukan khusus, prajurit yang dipilih dan dilatih untuk menjadi tangguh dalam menghadapi trauma yang parah43. Demikian juga, stimulasi otak dalam korteks cingulate subgenual atau NAc (target utama kortulat cingulate subgenual), sebuah intervensi yang diperkirakan mengurangi rangsangan daerah otak yang distimulasi, mengurangi gejala depresi pada pasien yang refrakter terhadap pengobatan.3,44.
Seperti model stres, peningkatan respons glutamatergik pada NAc juga terlibat dalam kecanduan obat30,45-47. Ini termasuk peningkatan reseptor AMPA yang kurang GluR2 di daerah otak ini30,47, mirip dengan apa yang kami laporkan di sini untuk kerentanan stres. Bersama-sama, pengamatan ini meningkatkan kemungkinan menarik bahwa peningkatan transmisi glutamatergik dalam NAc meningkatkan kerentanan terhadap kecanduan dan depresi. Perubahan sebaliknya, yaitu, penurunan rasio GluR1: GluR2, yang ditunjukkan di sini dalam NAc tikus tangguh, menunjukkan bahwa berkurangnya fungsi glutamatergik dapat melindungi terhadap efek buruk dari stres kronis. Ini konsisten dengan pengamatan yang meningkatkan aktivitas GluR2, atau mengurangi aktivitas GluR1, di NAc meningkatkan penghargaan dan motivasi28,37,48. Kemampuan fluoxetine untuk menginduksi ekspresi GluR2 yang serupa pada NAc meningkatkan kemungkinan bahwa berkurangnya persarafan glutamat pada daerah otak ini juga dapat berkontribusi terhadap respons antidepresan. Memang, kami menunjukkan di sini bahwa penghambatan fungsi reseptor AMPA di dalam NAc menghasilkan respons antidepresan yang kuat dan berumur panjang.
Sementara perubahan yang kami tunjukkan dalam ekspresi reseptor AMPA pada NAc pada tikus yang rentan konsisten dengan pengamatan elektrofisiologis kami, perubahan yang diamati dalam ketahanan lebih kompleks. Kami tidak mendapatkan bukti elektrofisiologis untuk penurunan reseptor AMPA yang kurang GluR2 pada NAc tikus yang resilien dibandingkan dengan kontrol. Kami berhipotesis bahwa induksi GluR2 yang dimediasi osFosB hanya salah satu dari banyak adaptasi yang terjadi pada NAc yang mempengaruhi transmisi glutamatergik dan bahwa, sementara adaptasi ini cukup untuk membalikkan fungsi reseptor AMPA berlebihan yang terlihat dalam kerentanan, itu tidak menginduksi perubahan bersih. dalam arah yang berlawanan. Memang, data kami mengungkapkan regulasi kompleks transmisi glutamatergik dalam NAc setelah stres kekalahan sosial kronis. Perubahan sebaliknya dalam ekspresi GluR1 di wilayah otak ini dalam kerentanan vs ketahanan tidak terlihat pada tingkat mRNA, juga tidak ada penurunan tingkat GluR2 dalam kerentanan terlihat pada tingkat mRNA. Ini konsisten dengan modifikasi pasca-translasi, termasuk perubahan dalam perdagangan reseptor AMPA, juga memainkan peran penting, seperti yang telah diamati dalam model penyalahgunaan narkoba30,47.
Regulasi kompleks transmisi glutamatergik dalam NAc oleh stres kronis disorot oleh penemuan kami tentang SC1 sebagai gen target lain untuk ΔFosB, yang, seperti induksi GluR2, memediasi ketahanan. SC1 dikenal untuk mengatur plastisitas sinaptik31. Sebagai hasil dari sifat anti-adhesifnya, induksi SC1 dalam NAc dapat menghasilkan lingkungan yang lebih permisif untuk perubahan struktural yang menyertai plastisitas pada sinapsis glutamatergik yang nampak penting untuk ketahanan. Sebagai contoh, bukti terbaru menunjukkan bahwa penghilangan matriks ekstraseluler memungkinkan difusi reseptor AMPA dan dengan demikian meningkatkan plastisitas sinaptik.49.
Singkatnya, hasil kami mendukung skema di mana ΔFosB di NAc memediasi ketahanan dalam menghadapi stres kronis sebagian dengan menginduksi bentuk plastisitas sinaptik yang menangkal pembelajaran asosiatif negatif yang kuat yang terjadi pada tikus yang rentan. Sebagai contoh, peningkatan reseptor AMPA yang kurang GluR2 di NAc, yang kita lihat pada tikus yang rentan, telah terbukti memperburuk respons terhadap isyarat terkait kokain yang mendorong keinginan dan kambuh dalam model kecanduan30,47. Sebaliknya, peredam nada glutamatergik pada tikus tangguh, melalui peningkatan GluR2 dan mungkin induksi SC1, mungkin membuat stimulus yang menonjol, seperti mouse baru dalam paradigma kekalahan sosial, kurang mampu mengaktifkan neuron NAc, dan dengan demikian memungkinkan tujuan Perilaku yang diarahkan untuk melanjutkan meskipun stres. Susunan gen kami menunjukkan kemungkinan keterlibatan banyak target tambahan ΔFosB yang berkontribusi terhadap ketahanan juga. Peran dominan yang dimainkan oleh BFosB dan targetnya dalam kemampuan individu untuk beradaptasi secara positif terhadap stres kronis meningkatkan cara baru yang fundamental untuk pengembangan pengobatan antidepresan baru.
METODE
Metode dan referensi terkait tersedia dalam versi online makalah ini di http://www.nature.com/natureneuroscience/.
Materi tambahan
Suppl
Klik di sini untuk melihat.(1024K, doc)
Klik di sini untuk melihat.(136K, pdf)
Ucapan Terima Kasih
Pekerjaan ini didukung oleh hibah dari National Institute of Mental Health dan oleh aliansi penelitian dengan AstraZeneca. Kami berterima kasih kepada Drs. P. McKinnon dan H. Russell atas hadiah murah hati dari cDNA SC1. Kami juga berterima kasih kepada saya. Maze, Drs. R. Oosting, S. Gautron dan D. Vialou untuk diskusi yang bermanfaat dan komentar pada naskah.
Catatan kaki
Kontribusi Penulis VV dan EJN bertanggung jawab untuk desain studi secara keseluruhan. QL dan VV merancang, melakukan, dan menganalisis percobaan RNA dan ChIP. AJ Robison merancang, melakukan, dan menganalisis studi elektrofisiologi. HEC dan VV merancang dan melakukan eksperimen farmakologis NBQX. QL, DMD, ELW, dan VV melakukan operasi stereotaxic. YNO mengkloning cDNA SC1 ke dalam vektor HSV. YHO melakukan uji AP1 luciferase. QL, DMD, DW, dan VV merancang dan melakukan eksperimen isolasi sosial. VV, ELW, dan AJ Rush melakukan tes kekalahan sosial dan kuantifikasi imunohistokimia. SI, QL, BW, dan VV melakukan dan menganalisis operasi tikus dan uji berenang paksa. EM dan RN menyediakan vektor virus untuk transgenesis virus. MAS, VK, dan OB melatih VV dalam kekalahan sosial dan analisis biokimia dan memberikan kontrol kualitas atas data kekalahan sosial. SG dan CAT menyediakan jaringan otak post-mortem manusia. VV dan EJN menulis makalah dengan bantuan penulis lain.
Informasi Penulis Informasi cetak ulang dan izin tersedia di www.nature.com/reprints.
Tambahan Informasi tambahan ditautkan ke versi online makalah ini di www.nature.com/natureneuroscience/.
Referensi
1. McEwen BS. Fisiologi dan neurobiologi stres dan adaptasi: peran sentral otak. Physiol Rev. 2007; 87: 873 – 904. [PubMed]
2. Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Psikobiologi dan genetika ketahanan molekuler. Nat Rev Neurosci. 2009; 10: 446 – 457. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
3. Ressler KJ, Mayberg HS. Menargetkan sirkuit neural yang abnormal pada gangguan mood dan kecemasan: dari laboratorium ke klinik. Nat Neurosci. 2007; 10: 1116 – 1124. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
4. Krishnan V, Nestler EJ. Neurobiologi molekuler dari depresi. Alam. 2008; 455: 894 – 902. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
5. Yehuda R, Flory JD, Southwick S, Charney DS. Mengembangkan agenda untuk studi translasi ketahanan dan kerentanan setelah paparan trauma. Ann NY Acad Sci. 2006; 1071: 379 – 396. [PubMed]
6. Tornatzky W, Miczek KA. Kerusakan jangka panjang dari ritme sirkadian otonom setelah tekanan sosial berselang singkat. Physiol Behav. 1993; 53: 983 – 993. [PubMed]
7. Koolhaas JM, Meerlo P, De Boer SF, Strubbe JH, Bohus B. Dinamika temporal dari respons stres. Neurosci Biobehav Rev. 1997; 21: 775 – 782. [PubMed]
8. De Kloet ER. Hormon dan otak yang stres. Ann NY Acad Sci. 2004; 1018: 1 – 15. [PubMed]
9. Rygula R, et al. Anhedonia dan defisit motivasi pada tikus: dampak stres sosial kronis. Behav Brain Res. 2005; 162: 127 – 134. [PubMed]
10. Krishnan V, dkk. Adaptasi molekuler yang mendasari kerentanan dan resistensi terhadap kekalahan sosial di daerah hadiah otak. Sel. 2007; 131: 391 – 404. [PubMed]
11. Berton O, dkk. Peran penting BDNF dalam jalur dopamin mesolimbik dalam stres kekalahan sosial. Ilmu. 2006; 311: 864 – 868. [PubMed]
12. Tidey JW, Miczek KA. Akuisisi administrasi kokain setelah stres sosial: peran accumbens dopamine. Psikofarmakologi (Berl) 1997; 130: 203 – 212. [PubMed]
13. Martinez M, Calvo-Torrent A, Herbert J. Memetakan respons otak terhadap stres sosial pada tikus dengan ekspresi c-fos: ulasan. Menekankan. 2002; 5: 3 – 13. [PubMed]
14. Kollack-Walker S, Don C, Watson SJ, Akil H. Ekspresi diferensial dari c-fos mRNA dalam neurocircuits hamster jantan yang terkena kekalahan akut atau kronis. J Neuroendocrinol. 1999; 11: 547 – 559. [PubMed]
15. Becker C, dkk. Peningkatan kadar ekstraseluler kortikal bahan seperti kolesistokinin dalam model antisipasi kekalahan sosial pada tikus. J Neurosci. 2001; 21: 262 – 269. [PubMed]
16. Rygula R, Abumaria N, Domenici E, Hiemke C, Fuchs E. Efek fluoxetine pada defisit perilaku yang ditimbulkan oleh stres sosial kronis pada tikus. Behav Brain Res. 2006; 174: 188 – 192. [PubMed]
17. Wilkinson MB, dkk. Perawatan imipramine dan ketahanan menunjukkan regulasi kromatin yang serupa pada nukleus accumbens pada model depresi. J Neurosci. 2009; 29: 7820 – 7832. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
18. Covington HE, 3rd, dkk. Tindakan antidepresan inhibitor histone deacetylase. J Neurosci. 2009; 22: 11451 – 11460. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
19. Nestler EJ. Ulasan. Mekanisme transkripsi kecanduan: peran DeltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3245 – 3255. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
20. Perrotti LI, et al. Induksi deltaFosB dalam struktur otak yang berhubungan dengan hadiah setelah stres kronis. J Neurosci. 2004; 24: 10594 – 10602. [PubMed]
21. Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Perubahan jangka panjang dalam struktur mesocorticolimbic setelah berulang kali mengalami tekanan sosial pada tikus: perjalanan waktu reseptor mu-opioid mRNA dan imunoreaktivitas FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272 – 2284. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
22. Kelz MB, dkk. Ekspresi faktor transkripsi deltaFosB di otak mengontrol sensitivitas terhadap kokain. Alam. 1999; 401: 272 – 276. [PubMed]
23. Peakman MC, et al. Ekspresi spesifik wilayah otak yang dapat diinduksi dari mutan negatif dominan c-Jun pada tikus transgenik menurunkan sensitivitas terhadap kokain. Res Otak. 2003; 970: 73 – 86. [PubMed]
24. McClung CA, Nestler EJ. Regulasi ekspresi gen dan hadiah kokain oleh CREB dan DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. [PubMed]
25. Wallace DL, dkk. Regulasi CREB dari nucleus accumbens rangsangan memediasi defisit perilaku yang diinduksi isolasi sosial. Nat Neurosci. 2009; 12: 200 – 209. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
26. Detke MJ, Rickels M, Lucki I. Perilaku aktif pada tikus uji berenang paksa diproduksi secara berbeda oleh antidepresan serotonergik dan noradrenergik. Psikofarmakologi (Berl) 1995; 121: 66 – 72. [PubMed]
27. Renthal W, et al. Analisis genome luas regulasi kromatin oleh kokain mengungkapkan peran untuk sirtuins. Neuron. 2009; 62: 335 – 348. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
28. Todtenkopf MS, et al. Imbalan otak diatur oleh subunit reseptor AMPA di nukleus accumbens shell. J Neurosci. 2006; 26: 11665 – 11669. [PubMed]
29. Bredt DS, Nicoll RA. Perdagangan reseptor AMPA di sinapsis rangsang. Neuron. 2003; 40: 361 – 379. [PubMed]
30. Conrad KL, et al. Pembentukan accumbens reseptor AMPA yang kekurangan GluR2 memediasi inkubasi keinginan kokain. Alam. 2008; 454: 118 – 121. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
31. Lively S, Brown IR. Protein matriks ekstraseluler SC1 / hevin melokalisasi ke sinapsis rangsang setelah status epilepticus dalam model kejang lithium-pilocarpine tikus. J Neurosci Res. 2008; 86: 2895 – 2905. [PubMed]
32. Nikulina EM, Covington HE, 3rd, Ganschow L, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Sensitisasi silang perilaku dan neuron jangka panjang untuk amfetamin yang diinduksi oleh stres kekalahan sosial singkat yang berulang: Fos di daerah ventral tegmental dan amigdala. Ilmu saraf. 2004; 123: 857 – 865. [PubMed]
33. Koob GF. Peran sistem stres otak dalam kecanduan. Neuron. 2008; 59: 11 – 34. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
34. Haney M, Maccari S, Le Moal M, Simon H, Piazza PV. Stres sosial meningkatkan perolehan administrasi kokain pada tikus jantan dan betina. Res Otak. 1995; 698: 46 – 52. [PubMed]
35. Sesack SR, Grace AA. Jaringan hadiah Cortico-Basal Ganglia: mikrosirkuit. Neuropsikofarmakologi. 2010; 35: 27 – 47. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
36. Kalivas PW, Volkow N, Seamans J. Motivasi yang tidak terkendali dalam kecanduan: patologi dalam transmisi glutamat prefrontal-accumbens. Neuron. 2005; 45: 647 – 650. [PubMed]
37. Reynolds SM, Berridge KC. Ansambel motivasi glutamat dalam nucleus accumbens: gradien kulit rostrocaudal dari rasa takut dan makan. Eur J Neurosci. 2003; 17: 2187 – 2200. [PubMed]
38. Grace AA, Floresco SB, Goto Y, Lodge DJ. Regulasi penembakan neuron dopaminergik dan kontrol perilaku yang diarahkan pada tujuan. Tren Neurosci. 2007; 30: 220 – 227. [PubMed]
39. Campioni M, Xu M, McGehee DS. Perubahan Akibat Induksi pada Nucleus Accumbens Glutamate Synaptic Plasticity. J Neurophysiol. 2009 [PubMed]
40. Rada P, dkk. Pelepasan glutamat dalam nucleus accumbens terlibat dalam depresi perilaku selama tes berenang PORSOLT. Ilmu saraf. 2003; 119: 557 – 565. [PubMed]
41. Roitman MF, Wheeler RA, Carelli RM. Nucleus accumbens neuron secara alami disetel untuk memberi rangsangan rasa dan kebencian, menyandikan prediktornya, dan terkait dengan output motor. Neuron. 2005; 45: 587 – 597. [PubMed]
42. Tremblay LK, et al. Substrat neuroanatomi fungsional dari pemrosesan hadiah yang diubah pada gangguan depresi mayor yang diungkapkan oleh pemeriksaan dopaminergik. Psikiatri Arch Gen. 2005; 62: 1228 – 1236. [PubMed]
43. Vythilingam M, et al. Sirkuit hadiah dalam ketahanan terhadap trauma parah: Investigasi fMRI terhadap pasukan pasukan khusus yang tangguh. Res Psikiatri. 2009; 172: 75 – 77. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
44. Schlaepfer TE, et al. Stimulasi otak yang dalam untuk menghargai sirkuit mengurangi anhedonia dalam depresi berat yang sulit disembuhkan. Neuropsikofarmakologi. 2008; 33: 368 – 377. [PubMed]
45. Churchill L, Swanson CJ, Urbina M, Kalivas PW. Kokain yang diulang mengubah level subunit reseptor glutamat pada nukleus accumbens dan area tegmental ventral tikus yang mengembangkan kepekaan terhadap perilaku. J Neurochem. 1999; 72: 2397 – 2403. [PubMed]
46. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME. Reseptor AMPA permukaan sel dalam nukleus accumbens meningkat selama penarikan kokain tetapi diinternalisasi setelah tantangan kokain dalam kaitannya dengan perubahan aktivasi protein kinase yang diaktifkan-mitogen. J Neurosci. 2007; 27: 10621 – 10635. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
47. Anderson SM, dkk. CaMKII: jembatan biokimia yang menghubungkan accumbens dopamine dan sistem glutamat dalam pencarian kokain. Nat Neurosci. 2008; 11: 344 – 353. [PubMed]
48. Taha SA, Fields HL. Penghambatan nukleus accumbens neuron mengkodekan sinyal gating untuk perilaku yang diarahkan pada hadiah. J Neurosci. 2006; 26: 217 – 222. [PubMed]
49. Frischknecht R, et al. Matriks ekstraseluler otak mempengaruhi mobilitas lateral reseptor AMPA dan plastisitas sinaptik jangka pendek. Nat Neurosci. 2009; 12: 897 – 904. [PubMed]
50. Chen J, dkk. Hewan transgenik dengan ekspresi gen target yang dapat diinduksi di otak. Mol Pharmacol. 1998; 54: 495 – 503. [PubMed]
;