Kontribusi motivasi insentif Pavlovian untuk pemberian makan dengan isyarat (2018)

. 2018; 8: 2766.

Diterbitkan secara online 2018 Feb 9. doi:  10.1038/s41598-018-21046-0

PMCID: PMC5807356

Abstrak

Isyarat yang mengindikasikan ketersediaan makanan yang enak mendapatkan kemampuan untuk mempotensiasi pencarian dan konsumsi makanan. Studi saat ini menggunakan kombinasi teknik perilaku, farmakologis, dan analitik untuk menyelidiki peran motivasi insentif Pavlov dalam memberi makan isyarat. Kami menunjukkan bahwa isyarat yang dipasangkan dengan larutan sukrosa (CS +) dapat mentransfer kendali atas makan untuk merangsang konsumsi sukrosa di wadah baru, dan bahwa efek ini tergantung pada aktivasi reseptor dopamin D1, yang diketahui memodulasi bentuk lain dari motivasi isyarat. perilaku tetapi tidak merasakan palatabilitas. Analisis mikro struktural dari perilaku menjilat sukrosa mengungkapkan bahwa CS + cenderung meningkatkan frekuensi dengan tikus yang terlibat dalam serangan aktif perilaku menjilati tanpa memiliki efek yang dapat diandalkan pada durasi serangan menjilati, suatu ukuran yang sebaliknya dikaitkan dengan palatabilitas sukrosa. Selain itu, kami menemukan bahwa perbedaan individu dalam CS + menimbulkan peningkatan frekuensi pertarungan dikaitkan dengan total asupan sukrosa pada tes, mendukung pandangan bahwa proses ini terkait dengan disregulasi perilaku makan yang bermakna. Studi saat ini, oleh karena itu, (1) menunjukkan bahwa proses motivasi insentif Pavlovian yang bergantung pada dopamin dapat memediasi pemberian isyarat-potensiasi, dan (2) menjabarkan pendekatan eksperimental dan analitis untuk menguraikan aspek perilaku ini.

Pengantar

Isyarat lingkungan yang menandakan ketersediaan makanan yang enak dapat memicu keinginan makan yang kuat- dan mempromosikan makan tanpa rasa lapar, efek yang diamati pada tikus, dan manusia-. Pengaruh perilaku ini, yang diyakini memainkan peran penting dalam makan berlebihan dan obesitas-, dapat dipelajari menggunakan tugas cue-potentiated feeding (CPF). Dalam studi CPF yang khas, hewan lapar menjalani pengkondisian Pavlovian yang terdiri dari pasangan berulang antara stimulus terkondisi (CS +; misalnya, nada pendengaran) dan sejumlah kecil makanan atau cairan yang enak, seperti larutan sukrosa, yang mereka konsumsi dari cangkir terletak di posisi tetap di ruang eksperimen. Selanjutnya, mereka diberi akses tidak terbatas ke chow pemeliharaan mereka untuk memastikan bahwa mereka sepenuhnya puas sebelum pengujian. Hewan kemudian dikembalikan ke kamar dan diizinkan untuk secara bebas mengonsumsi sukrosa dari cangkir sementara CS + sebentar-sebentar disajikan dalam cara yang tidak kontingen. Dalam kondisi seperti itu, hewan menunjukkan peningkatan nyata dalam konsumsi makanan selama sesi tes dengan CS + relatif terhadap sesi dengan stimulus tidak berpasangan (CS−).

Sementara temuan seperti itu menunjukkan bahwa isyarat eksternal dapat bertindak secara independen dari kelaparan fisiologis untuk mempromosikan pemberian makan, proses psikologis yang mendasari efek ini tidak mapan. Salah satu kemungkinan adalah bahwa isyarat yang terkait dengan konsumsi makanan yang enak mendapatkan kontrol refleksif atau kebiasaan makan (yaitu, berdasarkan stimulus-respons). Jika ini adalah mekanisme utama mediasi CPF, maka CS + harus merangsang konsumsi dengan memunculkan perilaku makan spesifik yang ditetapkan selama pengkondisian Pavlov. Ini belajar respon Pandangan ini masuk akal ketika sumber makanan diperbaiki di seluruh pelatihan dan pengujian, seperti dalam contoh yang dijelaskan di atas. Meskipun skenario ini berlaku untuk sebagian besar demonstrasi CPF, ada juga laporan bahwa isyarat terkait makanan dapat memicu pemberian makan di lokasi baru-, menunjukkan bahwa mereka dapat mengontrol pemberian makan secara tidak langsung. Salah satu penjelasan yang mungkin adalah bahwa isyarat-isyarat semacam itu mempotensiasi pemberian makanan melalui proses motivasi insentif Pavlov yang sama yang memungkinkan mereka untuk memperoleh dan memperkuat perilaku mencari makanan instrumental.,. Ini pandangan motivasi memperkirakan bahwa CS + memicu keinginan untuk mencari makanan, yang juga akan mengarah pada pemberian makan ketika makanan sudah tersedia. Atau, diberikan bukti bahwa sinyal untuk makanan enak dapat meningkatkan evaluasi hedonis rangsangan rasa-, ada kemungkinan bahwa isyarat mempotensiasi memberi makan sebagian dengan membuat makanan lebih enak. Sementara pandangan hedonis ini secara mekanis berbeda dari pandangan motivasi, akun-akun ini tidak saling eksklusif dan dapat menjelaskan berbagai aspek CPF yang berbeda.,.

Salah satu cara untuk membedakan antara akun motivasi dan hedonis CPF adalah untuk menentukan bagaimana isyarat yang dipasangkan pada makanan mempengaruhi struktur mikro pemberian makan. Ketika tikus diizinkan untuk secara bebas mengkonsumsi larutan sukrosa atau cairan lain yang enak, mereka terlibat dalam menjilat pertarungan dari berbagai durasi yang dipisahkan oleh periode tidak aktif. Sedangkan durasi rata-rata serangan menjilat ini memberikan ukuran palatabilitas cairan yang andal dan selektif,, Diyakini bahwa frekuensi pertarungan ini dikendalikan oleh proses motivasi-. Dengan demikian, jika CS + merangsang pemberian makan dengan meningkatkan palatabilitas sukrosa, maka isyarat itu harus meningkatkan durasi, tetapi tidak harus frekuensi, dari menjilati serangan. Sebaliknya, pandangan motivasi memprediksi bahwa CS + harus memicu pencarian sukrosa dan konsumsi bahkan ketika hewan disibukkan dengan kegiatan lain, yang mengarah ke lebih sering, tetapi tidak selalu lebih lama, serangan menjilat.

Studi saat ini menyelidiki efek dari pengiriman CS + pada mikrostruktur menjilati sukrosa menggunakan dua protokol CPF, satu di mana sukrosa selalu tersedia di lokasi yang sama (Eksperimen 1), dan satu di mana sumber diubah di seluruh pelatihan dan pengujian (Eksperimen 2 dan 3), memungkinkan kami untuk mengevaluasi pengaruh tidak langsung CS +. Pendekatan kami untuk menilai pengaruh respon-independen (umum) dari isyarat berpasangan makanan pada pemberian makan ini dimodelkan setelah tugas Pavlovian-to-instrumental transfer (PIT), yang secara luas digunakan untuk mempelajari dampak motivasi insentif dari isyarat berpasangan pada perilaku mencari hadiah,,. Kami juga mengadopsi pengondisian Pavlovian dan parameter pengujian yang biasa digunakan dalam studi PIT untuk memfasilitasi perbandingan dengan literatur itu. Mengingat bahwa aktivitas reseptor D1 dopamin sangat penting untuk ekspresi PIT dan tindakan perilaku termotivasi isyarat lainnya- tetapi relatif tidak penting untuk aspek hedonis dari perilaku makan,,, kami juga menilai dampak blokade reseptor D1 pada pemukulan sukrosa potensial (Eksperimen 3) sebagai penyelidikan lebih lanjut dari peran motivasi dalam efek ini. Akhirnya, kami menganalisis struktur mikro dari data pemukulan sukrosa dari percobaan ini untuk menguji apakah CPF secara selektif terkait dengan peningkatan baik dalam frekuensi atau durasi serangan sukrosa, seperti yang akan diprediksi oleh pandangan motivasi dan hedonis dari CPF, masing-masing.

Hasil

Memberi isyarat pada isyarat dengan isyarat yang memberi sinyal sumber makanan

Dalam percobaan pertama kami, kami menerapkan desain CPF respons-kongruen konvensional, di mana respons spesifik yang diperlukan untuk mengonsumsi sukrosa sama di seluruh fase pelatihan dan pengujian. Tikus lapar diberi 10 d pengkondisian Pavlovian untuk menetapkan CS + sebagai isyarat untuk ketersediaan sukrosa di cangkir makanan di satu sisi ruangan. Pada hari terakhir pengkondisian, entri cup (± antar-subyek SEM) secara signifikan lebih tinggi selama CS + (23.72 ± 2.79 per menit) dibandingkan dengan interval antar-percobaan [18.27 ± 3.25 per menit; sampel berpasangan t-uji, t(15) = 3.13, p = 0.007]. Cup entri selama CS- (8.60 ± 1.91 per menit) tidak berbeda secara signifikan dari interval antar-percobaan [10.69 ± 2.00 per menit; sampel berpasangan t-uji, t(15) = −1.60, p = 0.130].

Tikus kemudian diberi dua tes CPF dalam keadaan kenyang untuk mengkarakterisasi efek CS + pada pemukulan sukrosa. Dalam setiap tes, tikus memiliki akses gratis ke 2% atau 20% larutan sukrosa, memungkinkan kita untuk menilai pengaruh palatabilitas sukrosa pada CPF. Angka 1a menunjukkan jumlah total jilatan yang diamati selama uji CS sebagai fungsi periode CS, tipe CS, dan konsentrasi sukrosa. Data dianalisis menggunakan model efek campuran linier umum (Tabel Tambahan S1). Yang penting, ada interaksi CS Periode × CS Type yang signifikan, t(116) = 12.70, p <0.001. Analisis lebih lanjut (runtuh di seluruh konsentrasi) mengungkapkan peningkatan yang signifikan untuk uji CS +, p <0.001, tapi bukan percobaan CS, p = 0.118, menunjukkan bahwa CS + lebih efektif daripada CS- dalam meningkatkan penjilatan sukrosa, relatif terhadap level pra-CS. Analisis kami juga menemukan bahwa selektivitas isyarat ini secara signifikan dipengaruhi oleh konsentrasi sukrosa (interaksi 3 arah, p <0.001). Secara khusus, meskipun CS + sangat efektif dalam meningkatkan penjilatan sukrosa dalam kondisi 2% dan 20%, ps <0.001, CS- tidak secara signifikan mempengaruhi tingkat jilat dalam tes 2%, p = 0.309, tetapi memicu peningkatan sederhana namun signifikan dalam pengujian 20%, p = 0.039. Jadi, meskipun isyarat berpasangan makanan secara umum lebih efektif dalam mengontrol pemberian makan, isyarat yang tidak berpasangan tampaknya memberikan pengaruh yang sama ketika tikus diizinkan untuk mengonsumsi larutan sukrosa yang sangat enak saat diuji.

Gambar 1 

Perilaku menjilati total. Hasil Eksperimen 1 – 3 (a – c, masing-masing) menilai dampak isyarat berpasangan sukrosa (CS +) dan isyarat tidak berpasangan (CS−) pada sukrosa menjilati pada (a) cangkir makanan yang sama yang digunakan selama pengkondisian Pavlov, dan ...

Mentransfer pemberian isyarat-potensiasi ke sumber makanan baru

Karena sukrosa tersedia pada sumber yang sama selama pelatihan dan pengujian dalam Eksperimen 1, tidak jelas apakah efek CPF yang diamati tergantung pada kemampuan CS + untuk (1) mendorong tikus untuk mencari dan mengkonsumsi sukrosa atau (2) secara langsung mendapatkan spesifik refleks terkondisi, atau kebiasaan. Eksperimen 2 lebih fokus pada hipotesis sebelumnya dengan menguji apakah CS + yang terkait dengan pengiriman sukrosa ke dalam cangkir makanan dapat memotivasi menjilat sukrosa dari cerat di sisi yang berlawanan dari kamar yang diuji, sebanding dengan fenomena perilaku yang diamati dalam PIT.

Tikus dilatih dengan prosedur pengkondisian Pavlovian yang sama dengan yang digunakan dalam Eksperimen 1, menghasilkan perilaku pendekatan antisipasi spesifik isyarat pada hari terakhir pengkondisian Pavlovian. Pendekatan cangkir makanan (± antar-subyek SEM) lebih besar selama CS + (18.71 ± 1.73 per menit) relatif terhadap interval antar-percobaan [12.49 ± 0.98 per menit; sampel berpasangan t-uji, t(15) = 3.02, p = 0.009]. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara CS- (9.41 ± 0.98 per menit) dan interval antar-percobaan [8.44 ± 0.88 per menit; sampel berpasangan t-uji, t(15) = 0.98, p = 0.341].

Mengingat bahwa efek CS + pada sukrosa menjilati dalam Eksperimen 1 agak lebih jelas ketika tikus diuji dengan 2% sukrosa, pengujian awal kami dengan sukrosa tersedia di sumber baru (semburan, dengan cangkir makanan ditutupi oleh panel buram - Lihat metode) fokus pada kondisi ini. Namun, dalam tes ini, sukrosa menjilati tidak berbeda secara signifikan antara CS + (328.1 ± 84.8 menjilat) dan periode pra-CS + [245.6 ± 45.9 menjilat; sampel berpasangan t-uji, t(15) = 1.07, p = 0.300]. Untuk lebih mencegah kompetisi respons dan memperkuat minum sukrosa dari cerat, tikus diberi 5 sesi pelatihan tambahan untuk dijilat dari cerat untuk sukrosa 20% di bawah kekurangan makanan tanpa adanya CS. Tikus kemudian dipuaskan sepenuhnya dengan makanan rumahan dan diberikan dua tes CPF dengan sukrosa tersedia di cerat logam. Selama tes, tikus memiliki akses terus menerus ke larutan sukrosa 2% atau 20% dalam tes terpisah (dalam subjek, urutan diimbangi).

Angka 1b menunjukkan bahwa selama putaran pengujian ini, CS + efektif dalam mempromosikan minum sukrosa di lokasi baru, meskipun isyarat itu tidak pernah secara langsung dikaitkan dengan perilaku ini. Analisis model efek-campuran (Tabel Tambahan S2) menemukan interaksi Tipe CS × Periode CS yang signifikan, t(120) = 15.16, p <0.001, menunjukkan bahwa CS + lebih efektif dalam meningkatkan sukrosa menjilat di atas level dasar (periode CS vs. sebelum CS, p <0.001) daripada CS− (CS vs. periode pra-CS, p = 0.097), seperti pada Percobaan 1. Konsentrasi sukrosa tidak secara signifikan mempengaruhi selektivitas isyarat dari efek ini (interaksi 3 arah, p = 0.319). Yang penting, sementara tingkat jilat tampaknya meningkat selama pra-CS- relatif terhadap periode pra-CS +, sampel berpasangan t-test menunjukkan bahwa perbedaan ini tidak signifikan secara statistik dalam kondisi 2%, t(15) = 1.66, p = 0.118, atau dalam kondisi 20%, t(15) = 1.56, p = 0.139. Hal ini diharapkan karena struktur uji coba pseudo-random yang digunakan selama pelatihan dan pengujian, yang mencegah efek carryover sistematis (antar-uji coba) dan menghalangi antisipasi jenis (atau waktu) uji coba di masa mendatang. Perlu juga dicatat bahwa hewan yang sama ini menunjukkan peningkatan spesifik CS + yang serupa dalam menjilati di Eksperimen 3 ketika tingkat jilatan sebelum CS- dan sebelum CS + lebih sebanding (lihat Gambar. 1c, kendaraan).

Ketergantungan pada reseptor dopamin tipe D1

Hasil Eksperimen 2 menunjukkan bahwa CS + memperoleh kemampuan untuk mempotensiasi konsumsi sukrosa dengan memicu perilaku makan yang tidak pernah secara langsung dikaitkan dengan isyarat itu, konsisten dengan pengaruh motivasi seperti PIT. Mengingat pentingnya reseptor dopamin tipe D1 dalam motivasi insentif Pavlovian-, Eksperimen 3 memeriksa apakah memblokir aktivitas pada reseptor ini akan mengganggu ekspresi CPF. Tikus yang sama yang digunakan dalam Eksperimen 2 diberi pasangan terakhir tes CPF (20% sukrosa) setelah pretreatment dengan SCH-23390 (0.04 mg / kg), antagonis D1 selektif, atau kendaraan. Hasil tes ditunjukkan pada Gambar. 1c (juga Tabel Tambahan S3).

Analisis mengungkapkan efek utama dari perawatan obat, t(120) = −2.15, p = 0.034, dalam hal menjilati sukrosa secara umum tertekan oleh SCH-23390. Yang penting, kami menemukan interaksi Obat × Periode CS × Jenis CS yang signifikan, t(120) = −20.91, p <0.001, menunjukkan bahwa SCH-23390 secara khusus mengganggu ekspresi CPF. Memang, analisis lebih lanjut mengungkapkan bahwa sementara CS + secara signifikan meningkatkan sukrosa menjilat di atas tingkat pra-CS + dalam uji kendaraan, p <0.001, tidak ada efek CS + dalam tes SCH-23390, p = 0.982. Mirip dengan generalisasi isyarat yang diamati dalam Eksperimen 1, CS- menimbulkan peningkatan yang sedikit signifikan pada sukrosa yang menjilati kedua kondisi obat, ps ≤ 0.049. Dengan demikian, antagonisme reseptor dopamin tipe D1 melalui pemberian SCH-23390 secara signifikan mengganggu pemberian makan CS +, konsisten dengan akun motivasi insentif CPF.

Analisis struktur mikro dari efek isyarat berpasangan sukrosa dan konsentrasi sukrosa pada makan

Hasil Eksperimen 2 dan 3 menunjukkan bahwa protokol mirip PIT yang digunakan di sini mendukung bentuk motivasi insentif CPF, karena isyarat dapat memotivasi perilaku makan di lokasi yang terpisah dari sumber makanan yang ditandai oleh isyarat. Untuk menguji akun ini lebih lanjut, kami memeriksa apakah efek rangsang dari CS + pada minum sukrosa terkait dengan perubahan spesifik dalam organisasi struktur mikro dari perilaku menjilati. Seperti dijelaskan di atas, sedangkan durasi menjilati pertarungan bervariasi dengan palatabilitas cairan,, frekuensi dimana tikus terlibat dalam serangan baru untuk menjilat dianggap mencerminkan proses motivasi yang terpisah-. Kami memvariasikan konsentrasi sukrosa untuk memanipulasi palatabilitasnya, seperti dalam laporan sebelumnya,. Meskipun konsentrasi sukrosa tinggi dan rendah juga berbeda dalam kandungan kalori, penelitian yang luas telah menunjukkan bahwa ukuran durasi pertarungan adalah ukuran sensitif dan selektif dari pengaruh hadiah orosensori dan tidak dapat dipisahkan dari pemrosesan kalori pasca konsumsi.-. Dengan demikian, CS + yang mendorong motivasi insentif harus meningkatkan frekuensi pertarungan, sementara CS + yang meningkatkan asupan dengan membuat sukrosa lebih enak harus mempromosikan durasi pertarungan yang lebih lama.

Untuk memastikan kekuatan statistik yang memadai, kami menciutkan data di semua kondisi uji non-narkoba yang dijelaskan di atas (2% dan 20% tes untuk Eksperimen 1 dan Eksperimen 2, dan kondisi kendaraan untuk Eksperimen 3). Data gabungan ditunjukkan pada Gambar. 2, diplot secara terpisah sebagai total menjilat (a), frekuensi pertarungan (b), dan durasi pertarungan (c). Angka 2d menunjukkan plot raster dari perilaku menjilati dua tikus yang representatif selama periode pra-CS + dan CS + ketika 2% dan 20% sukrosa tersedia saat pengujian. Sesuai dengan interpretasi motivasi CPF, tikus-tikus ini cenderung terlibat lebih banyak serangan menjilat sukrosa selama CS + daripada selama periode pra-CS +. Sebaliknya, durasi pertarungan cenderung lebih lama ketika tikus mengkonsumsi 20% sukrosa solusi yang lebih enak daripada ketika mengkonsumsi 2% sukrosa, efek yang terlihat selama periode pra-CS + dan CS +. Dengan demikian, durasi pertarungan tidak sangat dipengaruhi oleh isyarat berpasangan sukrosa. Memang, pola terlihat pada Gambar. 2d dikuatkan oleh model efek campuran linier umum dari kumpulan data gabungan (lihat Gambar. 2a – c dan Tabel Tambahan S4). Analisis efek campuran sekunder mengungkapkan bahwa faktor kategori “Eksperimen” (1, 2, 3) tidak memoderasi interaksi CS Periode × CS Type secara signifikan pada frekuensi atau durasi pertarungan, ps ≥ 0.293, memungkinkan kami untuk menggabungkan data ini untuk analisis selanjutnya. Menariknya, kemampuan CS + untuk memotivasi perilaku menjilat juga tercermin dalam latensi yang jauh lebih cepat untuk memulai menjilati.- setelah onset CS + vs. CS− [model efek-campuran linier umum (distribusi respons = gamma, fungsi tautan = log); t(306) = −2.71, p = 0.007], meskipun perbedaan mentah dalam latensi relatif sederhana (CS +: 1.16 detik ± 0.47; CS−: 2.79 detik ± 0.79).

Gambar 2 

Komponen mikro struktural dari perilaku menjilati. Data yang terkumpul dari semua kondisi non-obat dari Eksperimen 1-3 menilai dampak isyarat berpasangan sukrosa (CS +) dan isyarat tidak berpasangan (CS−) pada konsumsi sukrosa. Data ini mewakili ...

Analisis mediasional efek periode CS

Mengingat temuan tersebut, kami melakukan analisis mediasi statistik pada data gabungan (Gbr. 2) untuk menentukan apakah CS + yang memicu minum sukrosa lebih disukai terkait dengan perubahan dalam frekuensi atau durasi pertarungan. Angka 3a menunjukkan struktur model mediasi ganda untuk analisis ini (Periode CS). Ada efek keseluruhan yang signifikan (Total; c) periode CS tentang perilaku menjilati, t(156) = 4.11, p <0.001, c = 5.22 [2.71, 7.73], di mana ada lebih banyak jilatan selama CS + daripada sebelum periode CS +. Kami kemudian menguji apakah CS + sama-sama memengaruhi mikrostruktur penjilatan, dan menemukan peningkatan signifikan yang diinduksi isyarat dalam frekuensi pertarungan (M2), t(156) = 3.27, p = 0.001, a2 = 0.70 [0.28, 1.12], tetapi tidak dengan durasi pertandingan (M1), t(141) = 1.89, p = 0.061, a1 = 0.34 [−0.02, 0.69]. Jadi, pada tingkat grup, efek CS + pada frekuensi pertandingan, tetapi bukan durasi pertandingan, lebih mirip efeknya pada menjilat.

Gambar 3 

Mediasi CPF oleh karakteristik struktur mikro dari perilaku menjilati. (a) Model Periode CS yang menjelaskan efek periode CS pada total jilatan dengan mediator durasi pertarungan dan frekuensi pertarungan. (b) Model Konsentrasi yang menggambarkan efek sukrosa ...

Jika efek CS + pada menjilati dimediasi oleh efeknya pada frekuensi pertarungan, maka (1) langkah-langkah ini harus dikorelasikan, dan (2) efek CS + pada frekuensi pertarungan harus menjelaskan efek CS + pada total ukuran jilatan. Penilaian dari prediksi pertama menemukan bahwa, mengabaikan periode CS, baik frekuensi pertarungan dan durasi pertarungan secara signifikan berkorelasi dengan total jilatan, ps <0.001, yang tidak mengejutkan mengingat bahwa ukuran mikrostruktural ini memiliki hubungan intrinsik dengan total lick. Penilaian kami tentang prediksi kedua, bagaimanapun, lebih mengungkapkan. Kami membangun model mediasi ganda untuk memeriksa apakah langkah-langkah mikrostruktur ini menjelaskan varian terkait CS + dalam ukuran total lick dengan memasukkan frekuensi pertandingan dan durasi pertandingan sebagai efek tetap, bersama dengan periode CS. Dengan kata lain, kami menanyakan apakah mengontrol varians dalam langkah-langkah pertarungan jilat ini melemahkan efek CS +, relatif terhadap kekuatannya dalam model yang lebih sederhana (dikurangi) yang dijelaskan di atas. Konsisten dengan mediasi, kami menemukan bahwa ini langsung efek periode CS pada menjilat (c') tidak signifikan, t(139) = 0.90, p = 0.370, c'= 0.41 [−0.49, 1.30], saat mengontrol frekuensi dan durasi pertarungan. Kami kemudian memperkirakan pengaruh CS + pada penjilatan melalui masing-masing mediator potensial ini, dan menemukan bahwa ada efek tidak langsung yang signifikan dari frekuensi pertarungan pada jilatan, a2b2 = 2.90 [1.18, 4.76], tetapi tidak dari durasi pertandingan, a1b1 = 1.71 [−0.09, 3.35]. Dengan demikian, data ini menunjukkan bahwa peningkatan yang diinduksi CS + dalam menjilati terutama didorong oleh peningkatan frekuensi pertarungan sebagai lawan dari peningkatan durasi pertarungan, konsisten dengan motivasi daripada akun hedonis CPF.

Analisis mediasional efek konsentrasi sukrosa

Kami melakukan analisis mediasional kedua pada data gabungan (Gbr. 2) untuk mengkonfirmasi bahwa palatabilitas sukrosa (konsentrasi) terkait dengan peningkatan selektif dalam durasi pertarungan (Gbr. 3b, Konsentrasi). Model yang disederhanakan (tidak ada efek tetap untuk frekuensi atau durasi pertarungan) menemukan bahwa efek total konsentrasi pada total jilatan tidak signifikan, t(156) = 0.42, p = 0.678, c = 0.57 [−2.13, 3.27], menunjukkan bahwa keseluruhan tingkat sukrosa yang dijilati pada pengujian tidak terlalu bergantung pada konsentrasi sukrosa. Hal ini diharapkan, karena efek palatabilitas sukrosa pada menjilat paling jelas terlihat selama 2–3 menit awal konsumsi., jauh sebelum periode pra-CS pertama di sesi pengujian kami. Namun demikian, konsentrasi sukrosa memang berpengaruh signifikan terhadap durasi pertarungan (M1), t(141) = 5.20, p <0.001, a1 = 0.88 [0.54, 1.21], dengan 20% sukrosa mendukung minum lebih lama dari sukrosa 2%. Menariknya, konsentrasi sukrosa memiliki efek penekan yang signifikan pada frekuensi pertarungan (M2), t(156) = −3.84, p <0.001, a2 = −0.83 [−1.26, −0.40], di mana tikus cenderung melakukan serangan lebih sedikit saat meminum larutan yang lebih enak. Jadi, peningkatan terkait konsentrasi dalam durasi pertandingan diimbangi dengan penurunan frekuensi pertandingan. Konsisten dengan ini, model mediasi lengkap kami, yang mencakup efek tetap untuk durasi dan frekuensi pertandingan, menunjukkan tidak ada efek langsung konsentrasi pada lick, t(139) = 0.45, p = 0.650, c'= 0.23 [−0.76, 1.22]. Namun, ada efek tidak langsung yang signifikan, tetapi berlawanan, dari frekuensi pertarungan, a2b2 = −3.49 [−5.50, −1.58], dan durasi pertandingan, a1b1 = 4.46 [2.96, 5.95], tentang perilaku menjilati total.

Perbedaan individu dalam pengaruh periode CS dan konsentrasi pada struktur mikro yang menjilati

Model mediasi mengungkapkan bahwa frekuensi dan durasi pertarungan memainkan peran yang berbeda dalam memediasi efek CS + dan konsentrasi sukrosa pada pemukulan pada tingkat kelompok, tetapi tidak membahas bagaimana efek tersebut diekspresikan pada tikus individu, yang mungkin penting untuk memahami individu kerentanan terhadap makan berlebihan. Mengingat hasil analisis mediasi, kami memperkirakan bahwa masing-masing tikus akan menunjukkan peningkatan bersih dalam frekuensi pertarungan selama periode CS +, relatif terhadap baseline, tetapi tidak akan menunjukkan perubahan yang konsisten atau dapat diandalkan dalam durasi pertarungan. Lebih lanjut, tikus individual diprediksi menunjukkan serangan menjilati lebih lama, tetapi lebih jarang, ketika mengonsumsi 20% sukrosa, relatif terhadap tes 2%. Ara. 3c dan d menunjukkan perbedaan individu dalam efek periode CS (CS + - pra-CS +) dan konsentrasi sukrosa (20% -2%), masing-masing, pada frekuensi dan durasi pertarungan (analisis kumpulan data gabungan pada Gambar. 2). CS + meningkatkan frekuensi pertarungan dalam 67% tikus (Gbr. 3c), dengan jumlah yang kira-kira sama dari tikus-tikus ini juga menunjukkan peningkatan durasi pertarungan (34%) atau tidak (33%). Good-of-test chi-squared dengan asumsi titik data terdistribusi secara merata di empat kuadran mengungkapkan asimetri distribusi yang signifikan, χ2(3) = 10.91, p = 0.012. Memang, arti dari ΔFrekuensi distribusi secara signifikan lebih besar dari 0, t(66) = 4.80, p <0.001, sedangkan rata-rata ΔDurasi distribusi tidak berbeda secara signifikan dari 0, t(66) = 1.80, p = 0.076. Berkenaan dengan efek konsentrasi (Gbr. 3d), mayoritas tikus (58%) dipamerkan lebih lama dan kurang sering serangan dengan 20% versus 2% sukrosa, dan uji good-of-square mengkonfirmasikan bahwa data tidak terdistribusi secara merata di seluruh kuadran, χ2(3) = 31.85, p <0.001. Memang, kami menemukan bahwa arti dari ΔFrekuensi distribusi secara signifikan kurang dari 0, t(51) = −4.22, p <0.001, sedangkan rata-rata ΔDurasi distribusi secara signifikan lebih besar dari 0, t(51) = 4.18, p <0.001.

Prediktor mikrostruktur konsumsi sukrosa

Data dalam Gambar. 3c menunjukkan bahwa ada variabilitas yang cukup besar dalam efek CS + pada frekuensi pertarungan, dan bahwa beberapa tikus sangat sensitif terhadap pengaruh motivasi ini. Meskipun ada kemungkinan bahwa tikus-tikus ini mampu mengendalikan asupan sukrosa total mereka dengan minum lebih sedikit tanpa adanya CS +, analisis lebih lanjut dari kumpulan data gabungan (Gbr. 2) mengonfirmasi bahwa peningkatan frekuensi pertarungan CS + yang dipicu ini terkait dengan makan berlebihan. Secara khusus, kami menemukan bahwa tikus yang dipamerkan positif ΔFrekuensi skor selama uji coba CS + (subkelompok Frekuensi ↑, Dur ↓ dan Frekuensi ↑, Dur ↑ pada Gambar. 3C) mengkonsumsi sukrosa secara signifikan lebih banyak daripada tikus yang tidak (subkelompok Frek ↓, Dur ↓ dan Frek ↓, Dur ↑), t(63) = 2.27, p = 0.026 (Gbr. 4a). Hubungan ini dipertahankan ketika ΔFrekuensi diperlakukan sebagai variabel kontinu, t(63) = 2.19, p = 0.032 (Gbr. 4b), dan tidak bergantung pada konsentrasi sukrosa, Konsentrasi × ​​ΔFrekuensi, t(63) = 0.64, p = 0.528.

Gambar 4 

Volume larutan sukrosa (ml) yang dikonsumsi sebagai fungsi CS + membangkitkan perubahan dalam frekuensi dan durasi pertarungan. (a) Data ini mewakili konsumsi sukrosa sebagai fungsi dari kelompok kategori, ditentukan oleh peningkatan yang ditimbulkan CS + (↑) atau menurun (↓) ...

Diskusi

Kami menemukan bahwa isyarat pensinyalan ketersediaan sukrosa mampu mempotensiasi asupan sukrosa pada tikus terlepas dari apakah isyarat itu juga menandakan tindakan spesifik yang diperlukan untuk mendapatkan sukrosa (Eksperimen 1) atau tidak (Eksperimen 2 dan 3). Temuan terakhir adalah kepentingan khusus karena tidak mungkin tergantung pada pelaksanaan tanggapan makanan yang sudah ada sebelumnya (atau kebiasaan stimulus-respons), dan sebaliknya menunjukkan bahwa isyarat tersebut memperoleh sifat afektif dan / atau motivasi yang memungkinkan mereka untuk secara fleksibel mentransfer kontrol mereka di seluruh tindakan makan. Kecenderungan rangsangan lingkungan untuk mempromosikan konsumsi makanan bahkan ketika rutinitas makan yang sudah mapan tidak tersedia karena itu tampaknya memberikan model hewan yang berguna dan selektif dari proses Pavlovian yang mendukung mengidam makanan yang diidam-idamkan dan makan berlebih pada manusia-. Sementara ada laporan sebelumnya bahwa rangsangan yang dipasangkan dengan makanan dapat mempromosikan pemberian makan secara mandiri-, sebagian besar percobaan CPF menjaga sumber makanan tetap pada fase pelatihan dan pengujian, dan oleh karena itu hanya memberikan informasi terbatas tentang sifat proses psikologis yang mendasari efek ini. Studi saat ini memberikan demonstrasi pengaruh rangsangan umum dari isyarat berpasangan makanan pada perilaku makan menggunakan prosedur yang dimodelkan setelah tugas PIT, yang secara luas digunakan untuk mempelajari pengaruh motivasi umum dari isyarat berpasangan pada perilaku mencari makanan. Misalnya, seperti dalam PIT, tugas saat ini dapat digunakan untuk menilai kecenderungan isyarat untuk memperoleh sifat motivasi yang menggeneralisasi ke lokasi baru. Kami juga meminjam parameter pelatihan dan pengujian (misalnya, durasi cue, interval antar-sidang, dan jadwal penguatan) yang biasanya digunakan untuk PIT, memfasilitasi perbandingan antar studi. Oleh karena itu pendekatan ini dapat memberikan kontrol eksperimental yang lebih besar untuk investigasi di masa depan dari perbedaan potensial dalam proses psikologis dan / atau biologis yang mendasari kontrol Pavlovian atas perilaku instrumental vs.

Studi saat ini menemukan bahwa aktivasi reseptor dopamin D1 sangat penting untuk ekspresi bentuk CPF yang independen-respons ini, yang membantu mendukung interpretasi motivasi insentif mengingat pentingnya pensinyalan dopamin secara umum, dan aktivasi reseptor D1 khusus dalam ekspresi Pavlovian- transfer ke instrumental,-,,. Diberikan bukti bahwa dopamin relatif tidak penting untuk memproses sifat hedonis dari rangsangan makanan,,, tampaknya tidak mungkin bahwa antagonis D1 memiliki efeknya dengan mengganggu kapasitas CS + untuk mengubah palatabilitas sukrosa pada pengujian. Interpretasi motivasi ini juga didukung oleh analisis menjilat mikrostruktur kami, yang menemukan bahwa isyarat meningkatkan pemberian makan terutama dengan memunculkan lebih banyak serangan menjilati, daripada dengan memperpanjang durasi serangan itu. Sebaliknya, durasi pertarungan bervariasi dengan palatabilitas sukrosa, seperti yang telah ditetapkan,,,. Menariknya, analisis mediasi statistik kami mengungkapkan bahwa meskipun tikus terlibat dalam pertarungan yang lebih lama ketika menjilat 20% vs 2% sukrosa, mereka juga menunjukkan penurunan kompensasi dalam frekuensi pertarungan. Oleh karena itu, manipulasi palatabilitas ini tampaknya memengaruhi cara tikus memodelkan asupan sukrosa tanpa mempengaruhi tingkat pemberian makan secara keseluruhan. Sebaliknya, tidak ada efek kompensasi seperti itu terbukti selama uji coba dengan CS +, yang tampaknya memperhitungkan peningkatan bersih dalam perilaku menjilati yang diamati pada uji coba dengan isyarat itu. Selain itu, tikus yang menunjukkan peningkatan frekuensi pertarungan selama uji coba CS + juga menunjukkan peningkatan jumlah asupan sukrosa total. Temuan tersebut menunjukkan bahwa isyarat berpasangan makanan (1) dapat menghilangkan perilaku makan, dan (2) lebih efektif dalam mendorong makan berlebihan daripada manipulasi kelezatan sukrosa, setidaknya dalam kondisi yang diuji di sini.

Hasil saat ini juga menjelaskan peran dopamin dalam regulasi perilaku makan tanpa adanya isyarat pasangan makanan yang eksplisit. Studi sebelumnya telah menunjukkan bahwa pemberian sistemik dari antagonis dopamin D1 SCH23390 menekan tidak disebutkan konsumsi sukrosa dengan mengurangi frekuensi pertarungan tanpa mengubah durasi pertarungan,, yang mirip dengan pola pemukulan yang ditunjukkan oleh tikus yang kekurangan dopamin. Meskipun mekanisme psikologis yang mengendalikan frekuensi pertarungan dalam situasi seperti itu tidak jelas, telah disarankan bahwa isyarat kontekstual dan / atau interoceptive yang telah dikaitkan dengan pemberian makanan memperoleh kemampuan untuk secara diam-diam memotivasi serangan baru dalam pencarian dan konsumsi makanan.,. Hasil kami memberikan beberapa dukungan untuk masuk akal interpretasi ini dengan menunjukkan bahwa serangan menjilati baru dapat ditimbulkan oleh isyarat berpasangan makanan eksplisit dan bahwa efek ini juga tergantung pada aktivasi reseptor dopamin D1.

Seperti dicatat di tempat lain,, ada penelitian sebelumnya yang relatif sedikit tentang peran dopamin dalam CPF. Namun, satu studi awal menemukan bahwa pemberian antagonis reseptor dopamin nonspesifik α-flupenthixol melemahkan pencarian makanan yang ditimbulkan CS + tetapi dibiarkan utuh yang memberi petunjuk bahwa kemampuan isyarat untuk meningkatkan konsumsi makanan, yang tampaknya bertentangan dengan temuan kami bahwa antagonisme D1 mengganggu pemukulan sukrosa yang diinduksi oleh isyarat. Ada banyak perbedaan prosedural di kedua studi yang dapat menjelaskan perbedaan yang jelas ini. Sebagai contoh, mungkin saja manipulasi selektif dari transmisi dopamin D1 lebih efektif dalam mengganggu pengaruh CS + pada asupan makanan. Selanjutnya dalam penelitian sebelumnya ini, tikus yang kekurangan makanan dilatih dan diuji di kandang mereka menggunakan prosedur pengkondisian Pavlovian yang unik di mana sebuah isyarat digunakan untuk memberi sinyal sesi makan yang didistribusikan secara intermiten sepanjang hari. Kemudian, isyarat itu terbukti efektif dalam mempromosikan pemberian makan bahkan ketika tikus diuji dalam keadaan tidak siap. Sifat dan tingkat pelatihan ini dan fakta bahwa respons pemberian makanan yang diperlukan tidak berubah di seluruh fase pelatihan dan pengujian menunjukkan bahwa protokol CPF ini mungkin telah mendorong penggunaan respons makan kebiasaan (stimulus-respons) selama pengujian. Mengingat bahwa overtraining dapat membuat makanan cue-evoked mencari tidak sensitif terhadap manipulasi pensinyalan dopamin, mungkin bentuk CPF yang berpotensi berdasarkan kebiasaan ini kurang tergantung pada dopamin daripada bentuk motivasi yang dijelaskan di sini.

Meskipun masih banyak yang harus ditentukan tentang peran dopamin dalam CPF, fenomena perilaku ini diketahui bergantung pada ghrelin.- dan hormon pemekat melanin sistem neuropeptida, yang secara fundamental terlibat dalam mengatur kedua perilaku makan dan pensinyalan dopamin-. Menariknya, efek perangsang nafsu makan ghrelin bergantung pada kemampuan hormon ini untuk memodulasi pensinyalan dopamin mesolimbik.-. Misalnya, kecenderungan ghrelin untuk meningkatkan pencarian dan konsumsi makanan tanpa memengaruhi kelezatan makanan (licking bout lout) dapat dihambat dengan ikut mengelola D1 antagonis reseptor dopamin SCH-23390. Berdasarkan temuan tersebut, orang mungkin berharap bahwa interaksi yang serupa antara ghrelin dan dopamin dapat mendasari pengaruh motivasi isyarat pasangan makanan terhadap pemberian makan.

Sementara temuan saat ini menunjukkan bahwa isyarat yang dipasangkan dengan makanan dapat merangsang makan berlebih dengan memotivasi serangan makan baru, isyarat seperti itu juga cenderung memengaruhi pemberian makanan melalui proses lain. Tersirat dalam pendekatan transfer-of-control kami adalah pengakuan bahwa isyarat makan dapat memicu asupan dengan langsung memunculkan perilaku makan tertentu. Lebih lanjut, meskipun CS + tidak secara andal mengubah durasi pertarungan dalam studi saat ini, sebuah penelitian baru-baru ini yang menggunakan protokol CPF yang lebih konvensional dengan sumber makanan tetap menemukan bukti bahwa isyarat makan dapat memperpanjang jilatan serangan menjilat.. Sejalan dengan ini, ada laporan sebelumnya bahwa isyarat yang terkait dengan makanan yang enak dapat meningkatkan ekspresi reaksi orofacial terhadap selera terhadap rangsangan rasa-, ukuran lain dari rasa hedonik atau "suka". Dengan demikian, ada kemungkinan bahwa isyarat makanan dapat mendorong pemberian makanan melalui berbagai rute, dengan menyebabkan ngidam, dengan memicu respons makan tertentu, dan / atau dengan membuat rasa makanan lebih baik. Proses-proses ini mungkin mendasari kerentanan yang berbeda terhadap isyarat makan berlebih, mungkin menjelaskan perbedaan individu dalam kerentanan terhadap efek ini.,,. Temuan saat ini menunjukkan pendekatan yang efektif untuk secara selektif mengurai komponen motivasi CPF pada tikus.

metode

Subjek dan peralatan

Tikus Long Evans jantan dewasa (N = 32 total tikus; n = 16 untuk Eksperimen 1 dan n = 16 untuk Eksperimen 2 dan 3), dengan berat 370–400 g pada saat kedatangan, dipasangkan dalam kandang plastik transparan pada suhu dan kelembaban. -Vivarium terkontrol. Tikus punya ad libitum akses ke air di kandang mereka selama percobaan. Tikus ditempatkan pada jadwal pembatasan makanan selama fase tertentu dari percobaan, seperti yang ditentukan di bawah ini. Peternakan dan prosedur eksperimental telah disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Institusional UC Irvine (IACUC) dan sesuai dengan Panduan Dewan Riset Nasional untuk Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium.

Prosedur perilaku dilakukan di ruang yang identik (ENV-007, Med Associates, St Albans, VT, USA), bertempat di bilik-bilik suara dan cahaya yang dilemahkan. Solusi sukrosa dapat dikirim melalui pompa jarum suntik ke dalam cangkir plastik tersembunyi yang terletak di pusat di salah satu ujung dinding setiap ruang, 2.5 cm di atas lantai kotak stainless-steel. Detektor photobeam diposisikan di pintu masuk wadah makanan digunakan untuk memantau entri kepala yang terkait dengan konsumsi sukrosa, serta tanggapan pendekatan terkondisi selama sesi pengkondisian Pavlovian. Dalam sesi tes tertentu (Eksperimen 2 dan 3), larutan sukrosa dapat diperoleh dengan menjilati cerat minum logam yang diumpankan gravitasi yang diposisikan ~ 0.5 cm ke dalam lubang 1.3 cm yang terletak di dinding ujung yang berseberangan dengan cangkir makanan. Jilatan individu dari cangkir makanan dan cerat logam direkam secara terus-menerus selama sesi uji menggunakan perangkat lickometer kontak (ENV-250B, Med Associates, St Albans, VT, USA). Panel kaca plexiglass putih diposisikan di depan dinding ujung yang menampung cangkir makanan selama semua sesi ketika sukrosa dapat diperoleh dari cerat logam. Lampu rumah (3 W, 24 V) memberikan penerangan dan kipas memberikan ventilasi dan kebisingan latar belakang.

Pengondisian Pavlov

Tikus ditempatkan pada jadwal pembatasan makanan untuk mempertahankan berat badan mereka di sekitar 85% dari bobot tubuh yang diberi makan gratis sebelum menjalani 2 d pelatihan majalah, di mana mereka menerima pengiriman 60 dari larutan sukrosa 20% (0.1 ml) di masing-masing sesi harian (1 h). Tikus kemudian menerima 10 d pengkondisian Pavlovian. Setiap sesi pengkondisian harian terdiri dari serangkaian presentasi 6 dari isyarat audio 2-min (CS +; baik white noise 80-dB atau clicker 10-Hz), dengan uji coba dipisahkan oleh variabel 3-min interval (rentang 2-4) . Selama setiap percobaan CS +, 0.1 ml alikuot (dikirim melalui 2 dt) dari larutan sukrosa 20% (b / v) dikirim ke dalam mangkuk makanan sesuai dengan jadwal waktu acak 30-dtk, menghasilkan rata-rata empat pengiriman sukrosa per percobaan . Pada hari terakhir pengkondisian, tikus juga diberi sesi kedua di mana isyarat alternatif (CS−; stimulus pendengaran alternatif) disajikan dengan cara yang sama dengan CS + tetapi tidak dipasangkan dengan larutan sukrosa. Perilaku antisipatif diukur dengan membandingkan tingkat pendekatan cangkir (istirahat photobeam) selama periode antara onset CS dan pengiriman sukrosa pertama (untuk menghindari deteksi perilaku pemberian makanan tanpa syarat), yang kontras dengan tingkat pendekatan cangkir selama interaksi. interval uji coba. Semua tikus diberi waktu lima hari ad libitum akses ke diet pemeliharaan mereka setelah sesi terakhir Pavlovian conditioning sebelum menjalani pengujian tambahan.

Uji pemberian isyarat dengan isyarat

percobaan 1

Eksperimen ini menilai dampak CS + pada konsumsi larutan sukrosa dari cangkir makanan yang sama yang digunakan selama pelatihan, sedemikian rupa sehingga respons terkondisi terhadap isyarat tersebut (yaitu, pendekatan cangkir) kompatibel dengan perilaku yang diperlukan untuk mendapatkan sukrosa pada pengujian. Setelah mendapatkan kembali penurunan berat badan selama pengkondisian Pavlovian, tikus menerima sepasang tes CPF, yang dipisahkan oleh 48 jam, di mana tikus tetap tidak terganggu di rumah mereka. Selama setiap sesi CPF (86 menit dalam durasi total), 2% atau 20% larutan sukrosa terus tersedia dalam cangkir makanan dengan mengisi ulang cangkir itu dengan 0.1 ml sukrosa setiap kali tikus menyeberangi photobeam (pendekatan cangkir). Namun, untuk mencegah kelebihan pengisian cangkir, pengiriman sukrosa hanya diberikan jika setidaknya 4 s telah berlalu sejak pengiriman sukrosa terakhir dan jika tikus telah melakukan setidaknya lima jilatan selama periode intervensi. Selama sesi ini, masing-masing rangsangan pendengaran 2-min tidak disajikan secara kontinu 4 kali dalam urutan pseudorandom (ABBABAAB), dipisahkan oleh interval 8-min tetap. Percobaan pertama dimulai min 8 setelah dimulainya sesi untuk memungkinkan induksi rasa kenyang sebelum menilai pengaruh perilaku dari isyarat. Urutan percobaan diimbangi dengan kondisi pelatihan Pavlovian, sehingga CS pertama yang disajikan adalah CS + untuk setengah dari subjek dan CS− untuk setengah dari subyek yang tersisa. Urutan pengujian konsentrasi sukrosa juga diimbangi, dengan setengah dari setiap kondisi menerima tes 2% pertama dan tes 20% kedua, dan setengah menerima pengaturan yang berlawanan (yaitu, semua hewan menerima kedua konsentrasi dalam tes terpisah).

percobaan 2

Dalam percobaan ini, kami menyelidiki efek CS + pada konsumsi larutan sukrosa dari sumber yang berbeda dari cangkir yang digunakan selama pengkondisian Pavlovian, sedemikian sehingga respon terkondisi terhadap isyarat itu tidak sesuai dengan perilaku yang diperlukan untuk mengkonsumsi sukrosa saat pengujian. Tes pertama yang kami lakukan hanya memasukkan kondisi sukrosa 2%. Setelah memungkinkan tikus untuk mendapatkan kembali berat badan yang turun selama pengkondisian Pavlovian, mereka diberi dua sesi harian (durasi 86 min) di mana mereka memiliki akses tidak terbatas ke 2% larutan sukrosa dari cerat logam (pengumpanan gravitasi melalui botol) diposisikan dalam lubang kecil di dinding di seberang cangkir makanan. Panel Plexiglas putih diposisikan di depan dinding untuk menampung cangkir makanan selama sesi dengan akses semprotan (termasuk tes CPF berikutnya) untuk mencegah hewan mencari sukrosa di lokasi ini. Sesi ini dirancang untuk memberikan pengalaman tikus minum sukrosa dari sumber baru tanpa adanya isyarat pendengaran. Pada hari berikutnya, tikus menerima sesi uji CPF tunggal seperti yang dijelaskan dalam Eksperimen 1, kecuali bahwa 2% sukrosa terus tersedia di cerat logam, bukan di cangkir.

Karena ada sedikit bukti CPF dalam tes pertama ini, mungkin karena kompetisi respon antara CS + membangkitkan cawan makanan dan perilaku pendekatan semburan, kami memberikan tikus pelatihan tambahan cerat (dengan tidak adanya CS +) untuk memperkuat pencarian sukrosa di cerat dan mencegah cangkir makanan mendekati ketika cerat tersedia (karena ditutupi dengan panel). Oleh karena itu tikus ditempatkan kembali pada jadwal pembatasan makanan (sama seperti selama fase pengkondisian Pavlovian) sebelum diberi 5 d sesi pelatihan moncong tambahan, dengan masing-masing sesi ini terdiri dari 10 menit akses ke 20% larutan sukrosa. Tikus kemudian diberi 4 d ad libitum akses ke chow rumah untuk memungkinkan mereka mendapatkan kembali berat badan yang hilang selama fase ini. Selanjutnya, tikus secara akut kekurangan makanan (20 h) sebelum menerima sesi pelatihan ulang Pavlovian dengan CS + dan CS−, seperti pada hari terakhir pelatihan awal (yaitu, dengan 20% sukrosa dikirim ke cangkir makanan selama uji coba CS +). Perhatikan bahwa cerat sudah dikeluarkan dari ruang selama ini dan semua sesi pelatihan ulang Pavlov berikutnya. Tikus kemudian diberikan ~ 20 h dari ad libitum akses ke chow rumah sebelum menjalani dua tes CPF menggunakan cerat logam, yang identik dengan tes pertama, kecuali bahwa tikus diberi akses ke 2% atau 20% dalam dua tes terpisah (seperti dalam Eksperimen 1).

percobaan 3

Setelah menemukan bukti yang lebih besar dari CPF selama putaran terakhir pengujian dengan semburan, tikus dari Eksperimen 2 diberi pengujian tambahan untuk menilai ketergantungan efek ini pada pensinyalan dopamin pada reseptor dopamin D1. Tikus pertama-tama diberi sesi pelatihan ulang moncong 10-menit di mana mereka diberi akses ke larutan sukrosa 20%. Karena tikus dengan cepat kembali ke berat badan normal ketika kembali ke ad libitum home chow setelah kekurangan makanan akut 20-h, kami menggunakan prosedur ini untuk memastikan bahwa tikus lapar selama sesi pelatihan moncong dan selama pelatihan ulang Pavlovian berikutnya (sesi CS + dan CS−, seperti sebelumnya), yang dilakukan pada hari sebelum masing-masing dua tes CPF akhir. Tikus diberi setidaknya 20 jam ad libitum akses home chow sebelum setiap sesi tes. Selama putaran terakhir pengujian CPF ini, tikus memiliki akses berkelanjutan ke sukrosa 20% dari semburan selama kedua sesi pengujian. Lima belas menit sebelum setiap tes, tikus diberi injeksi ip (1 ml / kg) dari saline steril atau SCH-23390 (antagonis reseptor dopamin selektif D1) menggunakan dosis (0.04 mg / kg) yang diketahui cukup untuk menekan konsumsi sukrosa.,,. Tikus diuji di kedua kondisi obat, penyeimbang untuk urutan tes.

Analisis data

Ukuran dependen utama adalah jilatan individu, yang direkam dengan resolusi 10 md menggunakan lickometer kontak selama semua sesi CPF. Sangat jarang, kami mendeteksi artefak dalam pengukuran lickometer kami yang disebabkan oleh kontak berkelanjutan antara tikus (kaki atau mulut) dan sukrosa (atau cerat logam). Artefak ini berupa respons lickometer frekuensi tinggi (> 20 Hz). Mengingat tikus menunjukkan kecepatan menjilati maksimal <10 Hz, kami mengecualikan semua respons menjilat potensial yang terjadi dalam 0.05 dtk dari jilid terakhir (non-artefak), yang terkait dengan frekuensi cutoff 20-Hz. Sesi di mana setidaknya 20% dari tanggapan menjilat dikeluarkan karena kriteria ini sama sekali dihapus dari analisis (sesi 1 dari 1 tikus dalam Eksperimen 1).

Perilaku menjilati

Untuk setiap sesi, kami menentukan jumlah total dari berbagai jenis periode (Pra-CS +, CS +, Pra-CS Pre, CS−). Karena ukuran dependen utama kami (total licks) adalah variabel jumlah, data ini dianalisis menggunakan model efek campuran linier umum dengan distribusi respons Poisson dan fungsi tautan log -. Pendekatan statistik ini memungkinkan untuk estimasi parameter sebagai fungsi dari kondisi (efek tetap) dan individu (efek acak). Dalam Eksperimen 1 dan 2, struktur efek tetap termasuk intersep keseluruhan, interaksi tiga arah antara Periode CS (Pra, CS) × Tipe CS (CS−, CS +) × Konsentrasi (2%, 20%), dan semua efek dan interaksi utama tingkat rendah. Untuk Eksperimen 3, Obat (Kendaraan, SCH) diganti untuk Konsentrasi untuk mengakomodasi perubahan dalam desain eksperimental. Variabel-variabel ini adalah semua variabel dalam-subyek, diperlakukan sebagai prediktor kategoris, dan efek-kode. Pemilihan model efek-acak melibatkan penentuan model yang meminimalkan kriteria informasi Akaike , sementara juga memastikan bahwa jumlah titik data per parameter tidak jatuh di bawah 10 ,. Dengan menggunakan kriteria ini, struktur efek-acak terbaik di seluruh eksperimen termasuk subyek yang tidak saling berhubungan yang disesuaikan untuk Periode CS, Jenis CS, dan Konsentrasi (atau Obat). Semua analisis statistik dilakukan di MATLAB (The Math Works; Natick, MA). Level alfa untuk semua tes adalah 0.05. Karena semua prediktor adalah kategori, ukuran efek diwakili oleh koefisien regresi yang tidak standar , dilaporkan sebagai b dalam teks dan dalam tabel output model. Analisis interaksi post hoc dilakukan menggunakan post hoc F-menguji efek sederhana dalam analisis omnibus menggunakan coefTest fungsi dalam MATLAB.

Analisis mikro struktural dari perilaku menjilati

Menjilat individu dikategorikan sebagai awal atau melanjutkan pertarungan menjilat. Sebuah pertarungan dibatasi sebagai beberapa kali jilatan berturut-turut di mana interval interlick (ILI) tidak melebihi 1 s. Ketika setidaknya 1 s telah lulus dari jilatan terakhir, jilatan berikutnya ditetapkan sebagai awal pertarungan baru. Frekuensi dan durasi pertarungan dihitung dengan terlebih dahulu mempartisi sesi ke periode pra-CS dan CS, seperti yang dilakukan untuk menjilat total dalam analisis di atas. Dalam periode itu, setiap jilatan yang didahului dengan periode setidaknya 1 ditetapkan sebagai pertarungan. Durasi setiap pertarungan dihitung sebagai interval waktu antara jilatan pertama dan terakhir dalam pertarungan itu. Jilatan individu yang terjadi dalam isolasi tidak dihitung sebagai bagian dari pertarungan. Untuk memaksimalkan ukuran sampel untuk analisis mediasional berikutnya, frekuensi pertarungan dan data durasi pertarungan runtuh melintasi eksperimen untuk mengevaluasi efek umum periode CS, tipe CS, dan konsentrasi pada tindakan mikrostruktur ini. Data dari kondisi SCH-23390 dalam Eksperimen 3 tidak termasuk dalam analisis ini.

Data-data ini dianalisis melalui model efek campuran linier umum yang menggabungkan struktur efek-tetap Periode CS × Tipe CS × Konsentrasi (dan semua interaksi tingkat rendah dan efek utama) dan struktur efek-acak dari subyek yang tidak berkorelasi yang disesuaikan dengan periode CS. , Tipe CS, dan Konsentrasi. Seperti dalam analisis perilaku menjilati total, satu sesi untuk satu tikus dari Eksperimen 1 telah dihapus dari analisis. Analisis frekuensi pertarungan menggunakan distribusi respons Poisson dengan fungsi tautan log karena sifat jumlah-jenis data frekuensi. Analisis durasi pertarungan menggunakan distribusi respons gamma dengan fungsi tautan log karena durasi pertarungan adalah ukuran berkelanjutan yang dibatasi antara 0 dan + ∞. Sebagai perbandingan, analisis yang sama ini dijalankan pada total jilatan yang runtuh di seluruh eksperimen, di mana analisis tersebut mengasumsikan distribusi respons Poisson dengan fungsi tautan log seperti dalam analisis jilid total eksperimen individu. Untuk memastikan bahwa periode kritis CS × interaksi Tipe CS tidak tergantung pada percobaan masing-masing tikus, seri kedua model dijalankan pada frekuensi pertarungan dan durasi pertarungan, identik dengan analisis yang baru saja dijelaskan tetapi dengan tambahan prediktor efek tetap. dari Eksperimen × Periode CS × Jenis CS. Eksperimen adalah faktor kategorikal. Terakhir, sebagai ukuran konfirmasi dari pemukulan termotivasi-, kami menganalisis latensi ke jilatan pertama setelah onset CS menggunakan model efek campuran linier umum dengan distribusi respons gamma dan fungsi tautan log (n = 310). Model ini menyertakan struktur efek tetap dari CS Type × Concentration (dan semua interaksi tingkat rendah dan efek utama) dan struktur efek acak dari intersep subjek yang disesuaikan untuk CS Type, Concentration, dan CS Type × Concentration.

Analisis mediasional dari frekuensi pertarungan dan durasi pertarungan

Dua model mediasi ganda,, dilakukan untuk menentukan apakah efek (atau ketiadaan) periode CS (Pra, CS) dan konsentrasi (2%, 20%) pada CPF secara signifikan dimediasi oleh frekuensi pertarungan dan / atau durasi pertarungan. Dalam Model Periode CS, variabel X adalah periode CS (Pra, CS), variabel hasil Y adalah jumlah total dari jilatan pada periode itu, dan mediator adalah frekuensi pertarungan (M1) dan durasi pertarungan (M2). Dalam Model Konsentrasi, variabel X adalah konsentrasi sukrosa. Karena menjilat yang membangkitkan isyarat terutama terbukti untuk uji coba CS + (lihat Hasil), hanya uji coba CS + yang dianalisis. Untuk setiap tikus dan untuk setiap sesi tes, jumlah rata-rata jilat dan pertarungan dan durasi rata-rata setiap pertarungan ditentukan untuk periode pra-CS + dan CS +. Analisis ini mencakup semua tikus dari Eksperimen 1 dan 2 (tikus 16 per percobaan × percobaan 2 × konsentrasi 2 periode 2 CS = titik data 128) dan data kondisi kendaraan dari Eksperimen 3 (16 periode CS = 2 periode CS = 32 periode CS = 1 titik CS) = . Seperti dalam analisis perilaku menjilati total, satu sesi untuk satu tikus dari Eksperimen 158 telah dihapus dari analisis, meninggalkan total poin data 9. Jarang, tikus tidak menjilat selama periode pra-CS + atau CS + selama sesi (158 / 9.5; 0%). Dalam hal ini, jumlah rata-rata jilatan dan serangan dikodekan sebagai "95" dan nilai untuk durasi pertarungan rata-rata dibiarkan sebagai sel kosong. Ketika model yang sama dijalankan dengan asumsi penghapusan listwise (yaitu, menghapus baris di mana durasi pertarungan adalah sel kosong), pola yang sama diadakan. Karena analisis ini melibatkan model linier umum (yaitu, regresi linier sederhana atau berganda), frekuensi pertarungan dan total data jilatan ditransformasikan dengan akar kuadrat dan data durasi pertarungan ditransformasi log untuk mengoreksi kemiringan positif. Signifikansi dari efek tidak langsung ditentukan oleh 10,000% bootstrap persentil dengan iterasi XNUMX. Koefisien regresi dilaporkan dalam korespondensi dengan laporan analisis mediasional tradisional (misalnya, c'= efek langsung dari X on Y),.

Perbedaan individu dalam perubahan isyarat yang ditimbulkan dalam frekuensi dan durasi pertarungan

Analisis yang disebutkan di atas memungkinkan kami untuk menilai efek CS + pada mikro menjilati di tingkat kelompok. Kami juga menandai perbedaan individu dalam ekspresi efek ini. Untuk setiap tikus, dua skor perbedaan dihitung untuk ukuran frekuensi pertandingan dan durasi pertandingan. Sebagai paralel dengan Model Periode CS, frekuensi pertandingan selama periode pra-CS + dikurangi dari nilai frekuensi pertandingan selama periode CS + (yaitu, CS + - sebelum CS +); untuk Model Konsentrasi, frekuensi pertarungan selama uji sukrosa 2% dikurangi dari nilai yang sesuai selama uji 20% (yaitu, 20% -2%). Perhitungan ini menghasilkan ukuran yang menggambarkan perubahan frekuensi pertarungan (ΔFrekuensi). Perhitungan yang sama ini dilakukan untuk durasi pertarungan (yaitu, ΔDurasi). Dengan demikian, untuk setiap pasangan poin data Pra-CS + / CS + dan 2% / 20%, perubahan dalam frekuensi pertarungan dan durasi pertarungan ditentukan. Cara distribusi ini dibandingkan dengan 0 melalui satu sampel t-test (α = 0.05) untuk mengevaluasi pergeseran distribusi menjauh dari tidak ada perubahan umum. Masing-masing titik data dikategorikan oleh peningkatan dan / atau penurunan frekuensi dan durasi pertarungan dan diwakili oleh plot sebar bivariat (mis., Peningkatan frekuensi pertarungan / penurunan durasi pertarungan saat onset CS +), memungkinkan penentuan proporsi data poin di setiap kuadran 2 × 2 (frekuensi pertarungan / durasi × ​​kenaikan / penurunan). Poin data di mana skor selisihnya sama dengan nol dikategorikan sebagai penurunan (yaitu, bukan peningkatan). Chi-squared (χ2) uji goodness of fit untuk periode CS dan data konsentrasi menentukan apakah distribusi titik-titik data ini berbeda dari data yang didistribusikan secara seragam di keempat kategori ini (α = 0.05). Untuk menentukan apakah ada distribusi yang kurang lebih sama dari titik-titik data ini di keempat kuadran untuk setiap percobaan, analisis korelasional sederhana untuk Periode CS dan data Konsentrasi dilakukan untuk mengevaluasi hubungan antara jumlah titik data di setiap kuadran dalam setiap percobaan dan jumlah yang diharapkan dari titik data, seperti yang diperkirakan oleh proporsi keseluruhan di setiap kuadran.

Prediktor mikrostruktur konsumsi sukrosa

Serangkaian akhir dari analisis efek campuran linier umum dilakukan untuk menentukan apakah volume total larutan sukrosa yang dikonsumsi di seluruh sesi tes diprediksi oleh perubahan tikus dalam frekuensi dan durasi pertarungan dari periode pra-CS + ke CS +. Analisis meliputi data dari semua kondisi non-obat, (yaitu, tes sukrosa 2% dan 20% untuk Eksperimen 1 dan 2, dan kondisi kendaraan dari Eksperimen 3). Analisis mengasumsikan distribusi respons gamma dengan fungsi tautan log. Analisis pertama diregresikan larutan sukrosa total yang dikonsumsi (mL) pada efek utama dan interaksi antara pengelompokan kategori 2 × 2 kenaikan / penurunan frekuensi / durasi pertarungan seperti dijelaskan di atas. Analisis kedua merevisi konsumsi sukrosa total pada efek utama dan interaksi antara nilai kontinu ΔFrekuensi dan konsentrasi sukrosa.

Ketersediaan data

Kumpulan data yang dianalisis selama percobaan saat ini tersedia dari penulis terkait berdasarkan permintaan yang masuk akal.

Bahan pelengkap elektronik

Ucapan Terima Kasih

Penelitian ini didukung oleh hibah NIH AG045380, DK098709, DA029035, dan MH106972 ke SBO. Para penyandang dana tidak memiliki peran dalam desain studi, pengumpulan dan analisis data, keputusan untuk menerbitkan, atau persiapan naskah.

Kontribusi Penulis

SBO menyusun dan merancang eksperimen; BH dan ATL melakukan eksperimen; ATM dan SBO menganalisis data. Semua penulis menulis artikel dan meninjau ulang naskah.

Catatan

Bersaing Minat

Para penulis menyatakan tidak ada kepentingan yang bersaing.

Catatan kaki

Bahan pelengkap elektronik

Informasi tambahan menyertai makalah ini di 10.1038 / s41598-018-21046-0.

Catatan penerbit: Springer Nature tetap netral sehubungan dengan klaim yurisdiksi dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi institusional.

Informasi Kontributor

Andrew T. Marshall, Email: ude.icu@1aahsram.

Sean B. Ostlund, Email: ude.icu@dnultsos.

Referensi

1. Fedoroff I, Polivy J, Herman CP. Spesifisitas respons pemakan yang ditahan versus yang tidak terkendali terhadap isyarat makanan: keinginan umum untuk makan, atau keinginan akan makanan yang diberi tanda? Nafsu makan. 2003; 41: 7 – 13. doi: 10.1016 / S0195-6663 (03) 00026-6. [PubMed] [Cross Ref]
2. Pelchat ML, Schaefer S. Diet monoton dan mengidam makanan pada orang dewasa muda dan tua. Physiol Behav. 2000; 68: 353 – 359. doi: 10.1016 / S0031-9384 (99) 00190-0. [PubMed] [Cross Ref]
3. Jansen A. Model pembelajaran pesta makan: reaktivitas isyarat dan paparan isyarat. Behav Res Ther. 1998; 36: 257 – 272. doi: 10.1016 / S0005-7967 (98) 00055-2. [PubMed] [Cross Ref]
4. Weingarten HP. Inisiasi makan dikendalikan oleh isyarat yang dipelajari: sifat perilaku dasar. Nafsu makan. 1984; 5: 147 – 158. doi: 10.1016 / S0195-6663 (84) 80035-5. [PubMed] [Cross Ref]
5. Petrovich GD, Ross CA, Gallagher M, Holland PC. Isyarat kontekstual yang dipelajari mempotensiasi makan pada tikus. Physiol Behav. 2007; 90: 362 – 367. doi: 10.1016 / j.physbeh.2006.09.031. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
6. Birch LL, McPhee L, Sullivan S, inisiasi makan Johnson S. pada anak-anak. Nafsu makan. 1989; 13: 105 – 113. doi: 10.1016 / 0195-6663 (89) 90108-6. [PubMed] [Cross Ref]
7. Fedoroff IC, Polivy J, Herman CP. Efek pra-paparan isyarat makanan pada perilaku makan pemakan yang terkendali dan tidak terkendali. Nafsu makan. 1997; 28: 33 – 47. doi: 10.1006 / appe.1996.0057. [PubMed] [Cross Ref]
8. Halford JC, Gillespie J, Brown V, Pontin EE, Dovey TM. Pengaruh iklan televisi untuk makanan pada konsumsi makanan pada anak-anak. Nafsu makan. 2004; 42: 221 – 225. doi: 10.1016 / j.appet.2003.11.006. [PubMed] [Cross Ref]
9. Cornell CE, Rodin J, makan yang diinduksi Weingarten H. Stimulus ketika kenyang. Physiol Behav. 1989; 45: 695 – 704. doi: 10.1016 / 0031-9384 (89) 90281-3. [PubMed] [Cross Ref]
10. Johnson AW. Makan di luar kebutuhan metabolisme: bagaimana isyarat lingkungan memengaruhi perilaku makan. Tren Neurosci. 2013; 36: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.tins.2013.01.002. [PubMed] [Cross Ref]
11. Kenny PJ. Mekanisme hadiah dalam obesitas: wawasan baru dan arah masa depan. Neuron. 2011; 69: 664 – 679. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.02.016. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
12. Petrovich GD. Jaringan otak depan dan kontrol makan dengan isyarat lingkungan yang dipelajari. Physiol Behav. 2013; 121: 10 – 18. doi: 10.1016 / j.physbeh.2013.03.024. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
13. Boswell RG, Kober H. Reaktivitas isyarat makanan dan keinginan memprediksi makan dan kenaikan berat badan: tinjauan meta-analitik. Obes Rev. 2016; 17: 159 – 177. doi: 10.1111 / obr.12354. [PubMed] [Cross Ref]
14. Holland PC, Gallagher M. Disosiasi ganda dari efek lesi amoldala basolateral dan sentral pada pemberian makan yang dikuatkan dengan stimulus dan transfer instrumental Pavlovian. Eur J Neurosci. 2003; 17: 1680 – 1694. doi: 10.1046 / j.1460-9568.2003.02585.x. [PubMed] [Cross Ref]
15. Holland PC, Petrovich GD, Gallagher M. Efek dari lesi amigdala pada stimulus terkondisiasi makan potensial pada tikus. Physiol Behav. 2002; 76: 117 – 129. doi: 10.1016 / S0031-9384 (02) 00688-1. [PubMed] [Cross Ref]
16. Reppucci CJ, Petrovich GD. Isyarat makanan yang dipelajari merangsang pemberian makan terus-menerus pada tikus yang puas. Nafsu makan. 2012; 59: 437 – 447. doi: 10.1016 / j.appet.2012.06.007. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
17. Rescorla RA, Solomon RL. Teori belajar dua proses: Hubungan antara pengkondisian Pavlovian dan pembelajaran instrumental. Psychol Rev. 1967; 74: 151 – 182. doi: 10.1037 / h0024475. [PubMed] [Cross Ref]
18. Dickinson A, Smith J, Mirenowicz J. Dissociation of Pavlovian dan pembelajaran insentif instrumental di bawah antagonis dopamin. Behav Neurosci. 2000; 114: 468 – 483. doi: 10.1037 / 0735-7044.114.3.468. [PubMed] [Cross Ref]
19. Delamater AR, LoLordo VM, Berridge KC. Kontrol palatabilitas cairan oleh sinyal Pavlovian exteroceptive. J Exp Psychol Anim Behav Process. 1986; 12: 143 – 152. doi: 10.1037 / 0097-7403.12.2.143. [PubMed] [Cross Ref]
20. Holland PC, Lasseter H, Agarwal I. Jumlah pelatihan dan reaktivitas rasa isyarat yang ditimbulkan dalam devaluasi penguat. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2008; 34: 119 – 132. doi: 10.1037 / 0097-7403.34.1.119. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
21. Kerfoot EC, Agarwal I, Lee HJ, Holland PC. Kontrol respons reaktifitas selera dan permusuhan dengan stimulus terkondisi pendengaran dalam tugas devaluasi: FOS dan analisis perilaku. Belajar Mem. 2007; 14: 581 – 589. doi: 10.1101 / lm.627007. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
22. Holland PC, Petrovich GD. Analisis sistem saraf dari potensi makan dengan rangsangan terkondisi. Physiol Behav. 2005; 86: 747 – 761. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.08.062. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
23. Davis JD, Smith GP. Analisis struktur mikro dari gerakan lidah ritmis tikus yang menelan larutan maltosa dan sukrosa. Behav Neurosci. 1992; 106: 217 – 228. doi: 10.1037 / 0735-7044.106.1.217. [PubMed] [Cross Ref]
24. Higgs S, Cooper SJ. Bukti modulasi opioid awal dari respons menjilati sukrosa dan intralipid: analisis mikrostruktur pada tikus. Psikofarmakologi (Berl) 1998; 139: 342 – 355. doi: 10.1007 / s002130050725. [PubMed] [Cross Ref]
25. D'Aquila PS. Dopamin pada reseptor D2-like "reboosts" dopamine D1-like aktivasi perilaku yang dimediasi reseptor pada tikus yang menjilat sukrosa. Neurofarmakologi. 2010; 58: 1085 – 1096. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2010.01.017. [PubMed] [Cross Ref]
26. Ostlund SB, Kosheleff A, Maidment NT, Murphy NP. Berkurangnya konsumsi cairan manis pada tikus knockout reseptor opioid mu: analisis struktur mikro dari perilaku menjilati. Psikofarmakologi (Berl) 2013; 229: 105 – 113. doi: 10.1007 / s00213-013-3077-x. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
27. Mendez IA, Ostlund SB, Maidment NT, Murphy NP. Keterlibatan Enkephalins Endogen dan beta-Endorphin dalam Makanan dan Obesitas yang Diinduksi Pola Makan. Neuropsikofarmakologi. 2015; 40: 2103 – 2112. doi: 10.1038 / npp.2015.67. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
28. Galistu A, D'Aquila PS. Efek antagonis reseptor D1 seperti dopamin SCH 23390 pada struktur mikro perilaku menelan pada tikus yang kekurangan air yang menjilat air dan larutan NaCl. Physiol Behav. 2012; 105: 230 – 233. doi: 10.1016 / j.physbeh.2011.08.006. [PubMed] [Cross Ref]
29. Ostlund SB, Maidment NT. Blokade reseptor dopamin melemahkan efek motivasi insentif umum dari pemberian hadiah dan isyarat berpasangan yang tidak diikuti tanpa mempengaruhi kemampuan mereka untuk membiaskan pemilihan tindakan. Neuropsikofarmakologi. 2012; 37: 508 – 519. doi: 10.1038 / npp.2011.217. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
30. Wassum KM, Ostlund SB, Balleine BW, Maidment NT. Ketergantungan diferensial motivasi Pavlovian insentif dan proses pembelajaran insentif instrumental pada pensinyalan dopamin. Belajar Mem. 2011; 18: 475 – 483. doi: 10.1101 / lm.2229311. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
31. Laurent V, Bertran-Gonzalez J, Chieng BC, Balleine BW delta-opioid dan proses dopaminergik pada kulit accumbens memodulasi kontrol kolinergik pembelajaran prediktif dan pilihan. J Neurosci. 2014; 34: 1358 – 1369. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4592-13.2014. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
32. Reseptor Lex A, Hauber W. Dopamine D1 dan D2 di dalam nukleus accumbens core dan shell memediasi transfer instrumental Pavlovian. Belajar Mem. 2008; 15: 483 – 491. doi: 10.1101 / lm.978708. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
33. Yun IA, Nicola SM, Fields HL. Efek kontras dari injeksi antagonis reseptor dopamin dan glutamat pada nukleus accumbens menunjukkan mekanisme saraf yang mendasari perilaku yang diarahkan pada petunjuk yang diarahkan pada isyarat. Eur J Neurosci. 2004; 20: 249 – 263. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2004.03476.x. [PubMed] [Cross Ref]
34. Liao RM, Ko MC. Efek kronis haloperidol dan SCH23390 pada perilaku operan dan pemukulan pada tikus. Chin J Physiol. 1995; 38: 65 – 73. [PubMed]
35. Davis JD. Struktur mikro perilaku menelan. APA SAJA. 1989; 575: 106 – 121. doi: 10.1111 / j.1749-6632.1989.tb53236.x. [PubMed] [Cross Ref]
36. Breslin PAS, Davis JD, Rosenak R. Saccharin meningkatkan efektivitas glukosa dalam merangsang konsumsi pada tikus tetapi memiliki sedikit efek pada umpan balik negatif. Fisiologi & Perilaku. 1996; 60: 411–416. doi: 10.1016 / S0031-9384 (96) 80012-6. [PubMed] [Cross Ref]
37. Davis JD, Smith GP, Singh B, McCann DL. Dampak dari umpan balik negatif tanpa syarat dan kondisi turunan sukrosa pada mikrostruktur perilaku menelan. Fisiologi & Perilaku. 2001; 72: 392–402. doi: 10.1016 / S0031-9384 (00) 00442-X. [PubMed] [Cross Ref]
38. Asin KE, Davis JD, Bednarz L. Efek diferensial obat serotonergik dan katekolaminergik terhadap perilaku menelan. Psikofarmakologi. 1992; 109: 415 – 421. doi: 10.1007 / BF02247717. [PubMed] [Cross Ref]
39. Fritz MS, Mackinnon DP. Diperlukan ukuran sampel untuk mendeteksi efek yang dimediasi. Sci Psikol. 2007; 18: 233 – 239. doi: 10.1111 / j.1467-9280.2007.01882.x. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
40. Allison J, Castellan NJ. Karakteristik temporal dari minum nutrisi pada tikus dan manusia. Jurnal Psikologi Perbandingan dan Fisiologis. 1970; 70: 116 – 125. doi: 10.1037 / h0028402. [Cross Ref]
41. Bolles RC. Kesiapan untuk makan dan minum: efek dari kondisi kekurangan. Jurnal Psikologi Perbandingan dan Fisiologis. 1962; 55: 230 – 234. doi: 10.1037 / h0048338. [PubMed] [Cross Ref]
42. Davis JD, Perez MC. Kurangnya perubahan struktur mikro yang disebabkan oleh kekurangan makanan dan palatabilitas dalam perilaku menelan. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1993; 264: R97 – R103. doi: 10.1152 / ajpregu.1993.264.1.R97. [PubMed] [Cross Ref]
43. Hayes, Mediasi AF, Moderasi, dan Analisis Proses Bersyarat: Pendekatan Berbasis Regresi. (The Guilford Press, 2013).
44. Smith GP. John Davis dan arti menjilati. Nafsu makan. 2001; 36: 84 – 92. doi: 10.1006 / appe.2000.0371. [PubMed] [Cross Ref]
45. Aitken TJ, Greenfield VY, Wassum KM. Nucleus accumbens core dopamine pensinyalan melacak nilai motivasi berdasarkan kebutuhan dari isyarat yang dipasangkan dengan makanan. J Neurochem. 2016; 136: 1026 – 1036. doi: 10.1111 / jnc.13494. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
46. Wassum KM, Ostlund SB, Loewinger GC, Maidment NT. Pelepasan dopamin mesolimbik phasic melacak pencarian hadiah selama ekspresi transfer Pavlovian-ke-instrumental. Psikiatri Biol. 2013; 73: 747 – 755. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.12.005. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
47. Cannon CM, Palmiter RD. Hadiahi tanpa dopamin. J Neurosci. 2003; 23: 10827 – 10831. [PubMed]
48. Weingarten HP, Martin GM. Mekanisme inisiasi makan terkondisi. Physiol Behav. 1989; 45: 735 – 740. doi: 10.1016 / 0031-9384 (89) 90287-4. [PubMed] [Cross Ref]
49. Choi WY, Balsam PD, Horvitz JC. Pelatihan kebiasaan yang lama mengurangi mediasi dopamin dari ekspresi respon selera. J Neurosci. 2005; 25: 6729 – 6733. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1498-05.2005. [PubMed] [Cross Ref]
50. Dailey MJ, Moran TH, PC Holland, Johnson AW. Antagonisme ghrelin mengubah respon selera terhadap isyarat yang dipelajari terkait dengan makanan. Behav Brain Res. 2016; 303: 191 – 200. doi: 10.1016 / j.bbr.2016.01.040. [PubMed] [Cross Ref]
51. Walker AK, Ibia IE, Zigman JM. Gangguan pemberian isyarat-potensiasi pada tikus dengan pensinyalan ghrelin yang tersumbat. Physiol Behav. 2012; 108: 34 – 43. doi: 10.1016 / j.physbeh.2012.10.003. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
52. Kanoski SE, Fortin SM, Ricks KM, Grill HJ. Pensinyalan Ghrelin di ventral hippocampus merangsang aspek pembelajaran dan motivasi makan melalui pensinyalan PI3K-Akt. Psikiatri Biol. 2013; 73: 915 – 923. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.07.002. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
53. Sherwood A, PC Holland, Adamantidis A, Johnson AW. Penghapusan Melanin Konsentrasi Hormon Reseptor-1 mengganggu makan berlebihan di hadapan isyarat makanan. Physiol Behav. 2015; 152: 402 – 407. doi: 10.1016 / j.physbeh.2015.05.037. [PubMed] [Cross Ref]
54. Domingos AI, dkk. Neuron hormon konsentrat melanin hipotalamus mengkomunikasikan nilai gizi gula. eLife. 2013; 2: e01462. doi: 10.7554 / eLife.01462. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
55. Smith DG, et al. Sensitivitas super dopamin mesolimbik pada mencit-hormon konsentrasi-1 yang kekurangan melanin. Jurnal Neuroscience. 2005; 25: 914 – 922. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4079-04.2005. [PubMed] [Cross Ref]
56. Liu S, Borgland SL. Pengaturan sirkuit dopamin mesolimbik dengan memberi makan peptida. Ilmu saraf. 2015; 289: 19 – 42. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2014.12.046. [PubMed] [Cross Ref]
57. Kerucut JJ, Roitman JD, Roitman MF. Ghrelin mengatur pensinyalan dopamin fasik dan nukleus accumbens yang ditimbulkan oleh rangsangan prediksi makanan. J Neurochem. 2015; 133: 844 – 856. doi: 10.1111 / jnc.13080. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
58. Cone JJ, McCutcheon JE, Roitman MF. Ghrelin bertindak sebagai antarmuka antara keadaan fisiologis dan pensinyalan dopamin fasik. J Neurosci. 2014; 34: 4905 – 4913. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4404-13.2014. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
59. Abizaid A, et al. Ghrelin memodulasi aktivitas dan organisasi input sinaptik dari neuron dopamin otak tengah sambil meningkatkan nafsu makan. J Clin Invest. 2006; 116: 3229 – 3239. doi: 10.1172 / JCI29867. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
60. Overduin J, Figlewicz DP, Bennett-Jay J, Kittleson S, Cummings DE. Ghrelin meningkatkan motivasi untuk makan, tetapi tidak mengubah kelezatan makanan. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2012; 303: R259 – 269. doi: 10.1152 / ajpregu.00488.2011. [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
61. Ferriday D, Brunstrom JM. 'Saya tidak bisa menahan diri': efek dari paparan makanan pada individu yang kelebihan berat badan dan kurus. Int J Obes (Lond) 2011; 35: 142 – 149. doi: 10.1038 / ijo.2010.117. [PubMed] [Cross Ref]
62. Tetley A, Brunstrom J, Griffiths P. Perbedaan individu dalam reaktivitas isyarat makanan. Peran BMI dan pilihan ukuran porsi harian. Nafsu makan. 2009; 52: 614 – 620. doi: 10.1016 / j.appet.2009.02.005. [PubMed] [Cross Ref]
63. Schneider LH, Greenberg D, Smith GP. Perbandingan Efek Selektif D1 dan Antagonis Reseptor D2 pada Sukam Pakan Makan dan Minum Air Sham. Ann Ny Acad Sci. 1988; 537: 534 – 537. doi: 10.1111 / j.1749-6632.1988.tb42151.x. [Cross Ref]
64. Weijnen JAWM, Wouters J, van Hest JMHH. Interaksi antara menjilati dan menelan pada tikus minum. Otak, Perilaku, dan Evolusi. 1984; 25: 117 – 127. doi: 10.1159 / 000118857. [PubMed] [Cross Ref]
65. Boisgontier MP, Cheval B. Anova untuk transisi model campuran. Ulasan Neuroscience & Biobehavioral. 2016; 68: 1004–1005. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2016.05.034. [PubMed] [Cross Ref]
66. Bolker BM, dkk. Model campuran linier umum: panduan praktis untuk ekologi dan evolusi. Tren Ekologi & Evolusi. 2008; 24: 127–135. doi: 10.1016 / j.tree.2008.10.008. [PubMed] [Cross Ref]
67. Coxe S, SG Barat, Aiken LS. Analisis data jumlah: Pengantar lembut untuk regresi Poisson dan alternatifnya. Jurnal Penilaian Kepribadian. 2009; 91: 121 – 136. doi: 10.1080 / 00223890802634175. [PubMed] [Cross Ref]
68. Pinheiro, J. & Bates, D. Model efek campuran di S dan S-Plus. (Springer, 2000).
69. Burnham, KP & Anderson, DR Pemilihan Model dan Inferensi: Pendekatan Informasi-Teori Praktis. (Springer, 1998).
70. Babyak MA. Apa yang Anda lihat mungkin bukan apa yang Anda dapatkan: Pengantar singkat, nonteknis untuk overfitting dalam model tipe regresi. Pengobatan Psikosomatik. 2004; 66: 411 – 421. [PubMed]
71. Peduzzi P, Concato J, Kemper E, Holford TR, Feinstein AR. Sebuah studi simulasi tentang jumlah kejadian per variabel dalam analisis regresi logistik. Jurnal Epidemiologi Klinik. 1996; 49: 1373 – 1379. doi: 10.1016 / S0895-4356 (96) 00236-3. [PubMed] [Cross Ref]
72. Bates D, Kliegl R, Vasishth S, Baayen H. Parsimonious model campuran. ar Xiv pracetak arXiv. 2015; 1506: 04967.
73. Baguley T. Ukuran efek terstandarisasi atau sederhana: apa yang harus dilaporkan? British Journal of Psychology. 2009; 100: 603 – 617. doi: 10.1348 / 000712608X377117. [PubMed] [Cross Ref]
74. Spector AC, Klumpp PA, Kaplan JM. Masalah analitis dalam evaluasi kekurangan makanan dan efek konsentrasi sukrosa pada struktur mikro perilaku menjilati tikus. Behavioral Neuroscience. 1998; 112: 678 – 694. doi: 10.1037 / 0735-7044.112.3.678. [PubMed] [Cross Ref]
75. Hayes AF. Beyond Baron dan Kenny: Analisis mediasi statistik di milenium baru. Monografi Komunikasi. 2009; 76: 408 – 420. doi: 10.1080 / 03637750903310360. [Cross Ref]
76. Pengkhotbah KJ, Hayes AF. Prosedur SPSS dan SAS untuk memperkirakan efek tidak langsung dalam model mediasi sederhana. Metode, Instrumen, & Komputer Penelitian Perilaku. 2004; 36: 717–731. doi: 10.3758 / BF03206553. [PubMed] [Cross Ref]