Sistem Reseptor CRF-CRF1 di Inti Tengah dan Basolateral dari Amygdala Diferensial Memediasi Makan Berlebihan dari Makanan Palatable (2013)

. 2013 November; 38 (12): 2456 – 2466.

Diterbitkan secara online, 2013, Jul 10. 2013 online yang telah dipublikasikan Jun 10. doi:  10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Abstrak

Makanan yang sangat enak dan diet adalah faktor utama untuk pengembangan makan kompulsif pada obesitas dan gangguan makan. Kami sebelumnya menunjukkan bahwa akses intermiten ke makanan yang enak menghasilkan faktor pelepas kortikotropin-1 (CRF1) perilaku reseptor antagonis-reversibel, yang meliputi asupan makanan lezat yang berlebihan, hypophagia chow reguler, dan perilaku seperti kecemasan. Namun, area otak yang menengahi efek ini masih belum diketahui. Tikus Wistar jantan diberi makan chow terus menerus selama 7 hari / minggu (Chow / Chow kelompok), atau diberi makan chow secara berkala 5 hari / minggu, diikuti oleh sukrosa, diet yang enak 2 hari / minggu (Chow / Palatable kelompok). Setelah pergantian pola makan kronis, efek microinfusing CRF1 antagonis reseptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sisi) dalam inti pusat amygdala (CeA), inti basolateral dari amygdala (BlA), atau inti tempat tidur dari stria terminalis (BNST) dievaluasi pada asupan yang berlebihan diet enak, chow hypophagia, dan perilaku seperti kecemasan. Selanjutnya, imunostaining CRF dievaluasi dalam otak tikus yang bersepeda. Intra-CeA R121919 memblokir asupan makanan yang enak dan perilaku yang gelisah Chow / Palatable tikus, tanpa mempengaruhi chow hypophagia. Sebaliknya, intra-BlA R121919 mengurangi hypophagia chow Chow / Palatable tikus, tanpa mempengaruhi asupan makanan yang enak atau perilaku seperti kecemasan. Perawatan intra-BNST tidak berpengaruh. Perawatan tidak mengubah perilaku Chow / Chow tikus. Imunohistokimia mengungkapkan peningkatan jumlah sel positif-CRF di CeA — tetapi tidak pada BlA atau BNST — dari Chow / Palatable tikus, selama penarikan dan akses baru ke diet enak, dibandingkan dengan kontrol. Hasil ini memberikan bukti fungsional bahwa CRF-CRF1 sistem reseptor di CeA dan BlA memiliki peran diferensial dalam memediasi perilaku maladaptif yang dihasilkan dari siklus diet yang enak.

Kata kunci: faktor pelepas kortikotropin, BNST, kecanduan, kecemasan, hipofagia, tikus

PENGANTAR

Makanan yang sangat enak (misalnya, makanan yang kaya akan gula dan / atau lemak) diyakini sebagai faktor utama dalam munculnya makan kompulsif dalam bentuk tertentu dari obesitas dan gangguan makan (; ). Banyak analogi yang ada antara kecanduan obat dan asupan makanan yang sangat enak, termasuk kehilangan kendali atas obat / makanan, ketidakmampuan untuk menghentikan penggunaan / makan meskipun ada konsekuensi negatif, kesusahan, dan disforia ketika mencoba menjauhkan diri dari obat / makanan (; ). Gejala-gejala umum ini telah diusulkan muncul dari disfungsi sirkuit otak, yang tumpang tindih dalam kecanduan narkoba dan makan kompulsif.

Tipe faktor pelepas kortikotropin 1 (CRF1) antagonis reseptor telah diusulkan sebagai target terapi baru untuk gangguan kecanduan karena kemampuan mereka untuk mengurangi efek motivasi penarikan (). CRF adalah mediator kritis respon endokrin, simpatik, dan perilaku terhadap stres (; ). CRF dalam nukleus paraventrikular hipotalamus mengendalikan respons hipotalamus-hipofisis-adrenal (HPA) terhadap stres, sedangkan efek perilaku CRF adalah HPA independen dan dimediasi oleh daerah otak ekstrahipotalamikus (). CRF ekstrahipothalamik-CRF1 sistem reseptor direkrut dalam ketergantungan pada semua obat penyalahgunaan yang diketahui melalui siklus intoksikasi / penarikan, dan hiperaktifasi ini dianggap sebagai elemen umum, mempromosikan asupan obat yang berlebihan melalui mekanisme yang diperkuat secara negatif (yaitu, asupan obat kompulsif yang dihasilkan oleh penghapusan penarikan). diinduksi keadaan emosi negatif; ; ; ).

Meskipun kesamaan antara obat-obatan pelecehan dan makanan telah dipelajari secara luas sehubungan dengan sifat penguat positif mereka (yaitu, asupan makanan yang berlebihan dihasilkan dengan memperoleh efek yang menyenangkan; ; ; ; ; ), hipotesis bahwa asupan makanan yang berlebihan dapat terjadi sebagai bentuk 'pengobatan sendiri' untuk meredakan keadaan emosi negatif yang terkait dengan penarikan dari makanan yang sangat lezat masih belum banyak dipelajari (; ; ).

Kami sebelumnya telah menunjukkan bahwa penarikan dari akses kronis dan intermiten ke makanan yang sangat enak menyebabkan perekrutan sistem CRF ekstrahypothalamic dan munculnya CRF1 perilaku maladaptif yang bergantung pada reseptor, yang meliputi asupan makanan berlebih pada saat akses baru ke diet yang sangat enak, hipofagia dari diet chow yang dapat diterima, dan perilaku seperti kecemasan selama pantang ().

Namun, bukti fungsional langsung mengenai area otak mana yang bertanggung jawab untuk CRF1 adaptasi perilaku tergantung-reseptor yang disebabkan oleh siklus diet yang enak tidak ada. Penelitian ini, oleh karena itu, bertujuan untuk menentukan apakah antagonisme spesifik lokasi CRF1 reseptor dalam inti pusat amigdala (CeA), inti basolateral amigdala (BlA) atau inti unggun dari stria terminalis (BNST) mampu memblokir asupan berlebihan makanan yang sangat enak, penarikan hipofagia yang diinduksi oleh reguler. chow, dan perilaku seperti kecemasan. Selain itu, penelitian ini bertujuan untuk menentukan apakah ekspresi CRF di CeA, BlA, dan BNST meningkat pada tikus-tikus yang bersepeda dalam diet dibandingkan dengan kontrol, menggunakan imunohistokimia. Meskipun kami sebelumnya telah menunjukkan bahwa penarikan dari makanan yang enak dikaitkan dengan peningkatan ekspresi CRF di CeA, bagaimana BlA dan BNST dipengaruhi oleh siklus diet saat ini tidak diketahui.

BAHAN DAN METODE

Subjek

Tikus Wistar jantan (n= 140, di antaranya tikus 33 untuk percobaan CeA, tikus 46 untuk percobaan BlA, tikus 39 untuk percobaan BNST, dan tikus 22 untuk percobaan imunohistokimia; Tabel Tambahan 1), dengan berat 180 – 230 g dan 41 – 47 hari pada saat kedatangan (Charles River, Wilmington, MA, USA), adalah satu kandang bertempat di atasnya, kandang plastik (27 × 48 × 20 cm) pada lampu mundur 12-h siklus (mati pada jam 1100), dalam kelembaban yang disetujui-AAALAC- (60%) dan vivarium yang dikontrol suhu (22 ° C). Tikus pernah ad libitum akses ke chow berbasis jagung (Harlan Teklad LM-485 Diet 7012; 65% kkal karbohidrat, 13% lemak, 21% protein, energi yang dapat dimetabolisasi 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, USA) dan air, kecuali dinyatakan lain . Prosedur yang digunakan dalam penelitian ini dipatuhi Panduan Institut Kesehatan Nasional untuk Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium (nomor publikasi NIH 85-23, revisi 1996) dan Prinsip-prinsip Perawatan Hewan Laboratorium, dan telah disetujui oleh Boston University Medical Campus Institutional Komite Pemeliharaan dan Penggunaan Hewan.

Obat-obatan

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropyl-pyrazolo [2,3-a] pyrimidin-7-amine, NBI 30775) disintesis seperti yang dijelaskan dalam ). R121919 adalah CRF kuat, non-peptida, berafinitas tinggi1 antagonis reseptor (Ki= 2 – 5 nM), yang menunjukkan lebih dari 1000 lipat aktivitas yang lebih lemah di CRF2 reseptor, protein pengikat CRF, atau 70 jenis reseptor lainnya (). R121919 dilarutkan menggunakan 18: 1: 1 campuran saline: ethanol: cremophor.

Tes Perilaku

Ad libitum akses diet alternatif enak

Akses ke ad libitum pergantian diet enak dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya (, , ; ). Secara singkat, setelah aklimasiasi, tikus dibagi menjadi dua kelompok yang cocok untuk asupan makanan, berat badan, dan efisiensi pakan dari hari-hari 3-4 sebelumnya. Satu kelompok kemudian diberi ad libitum akses ke diet chow (Chow) selama 7 hari seminggu (Chow / Chow, kelompok kontrol penelitian ini) sedangkan kelompok kedua diberikan akses gratis ke chow selama 5 hari seminggu, diikuti oleh 2 hari ad libitum untuk diet yang sangat enak, rasa coklat, sukrosa tinggi (Palatable; Chow / Palatable kelompok). Semua tes perilaku dilakukan pada tikus yang telah menjalani diet siklik selama minimal 7 minggu. Diet 'chow' adalah makanan berbasis jagung dari Harlan yang dijelaskan di atas, sedangkan diet yang enak adalah diet lengkap bergizi, rasa coklat, sukrosa tinggi (50% kkal), diet berbasis AIN-76A yang sebanding dengan makronutrien. proporsi dan kepadatan energi untuk diet makanan (formula rasa coklat 5TUL: 66.7% kkal karbohidrat, 12.7% lemak, 20.6% protein, energi yang dapat dimetabolisme 344 kkal / 100 g (Test Diet, Richmond, IN, USA) diformulasikan sebagai presisi 45 mg pelet makanan untuk meningkatkan kesukaannya). Untuk singkatnya, 5 hari pertama (makanan saja) dan 2 hari terakhir (makanan atau enak menurut kelompok eksperimen) setiap minggu dirujuk di semua eksperimen sebagai C dan P fase. Makanan yang enak diberikan di GPF20 'J'-feeders (Ancare, Bellmore, NY, USA). Makanan tidak pernah tersedia secara bersamaan.

Eksperimen asupan makanan

Tikus diberi makanan pra-ditimbang di kandang mereka di awal siklus gelap. Perawatan diberikan pada tikus yang menjalani siklus diet setidaknya selama 7 minggu setelah memperbarui akses ke diet yang enak (C→P fase), atau ke chow diet (P→C tahap). R121919 diinfuskan secara mikro dalam CeA, BlA, atau BNST (0, 0.5, dan 1.5 μg / sisi, 0.5 μl / sisi, 30-mnt waktu pra-perawatan) menggunakan desain acak dalam subjek Latin square.

Tes kotak terang-gelap

Tikus diuji untuk 10 min dalam kotak persegi panjang terang-gelap (50 × 100 × 35 cm) di mana kompartemen cahaya permusuhan (50 × 70 × 35 cm) diterangi oleh cahaya 60 lux. Sisi gelap (50 × 30 × 35 cm) memiliki penutup buram dan ∼0 lux cahaya. Kedua kompartemen dihubungkan oleh pintu terbuka, yang memungkinkan subjek untuk bergerak bebas di antara keduanya. Pengujian dilakukan setelah setidaknya 7 minggu pergantian diet, 5-9 h setelah beralih dari diet yang enak ke chow diet (P→C tahap); titik waktu ini memastikan terjadinya perilaku seperti kecemasan yang disebabkan oleh penarikan dari makanan enak di Chow / Palatable tikus (, ). Tikus disimpan di ruang tunggu yang gelap dan tenang selama setidaknya 2 jam sebelum pengujian. Kebisingan putih hadir selama pembiasaan dan pengujian. Pada hari pengujian, tikus diininfus secara bilateral dengan R121919 di dalam CEA, BlA, atau BNST (0, 0.5, dan 1.5 μg / sisi, 0.5 μl / sisi) 30 mnt sebelum ditempatkan ke kompartemen gelap yang menghadap pintu. dan perilaku adalah video yang direkam untuk penilaian selanjutnya. Perawatan diberikan menggunakan desain antar subjek. Waktu yang dihabiskan di kompartemen terbuka diukur sebagai indeks perilaku seperti kecemasan. Peralatan dibersihkan dengan air dan dikeringkan setelah setiap subjek.

Bedah Intrakranial, Prosedur Mikroinfusi, dan Penempatan Kanula

Operasi intrakranial

Tikus ditanamkan secara stereotoksik dengan kanula bilateral intrakranial seperti yang dijelaskan sebelumnya (; ; ). Singkatnya, baja tahan karat, kanula pemandu (24 gauge, Plastics One, Roanoke, VA, USA) diturunkan secara bilateral 2.0 mm di atas CeA, BlA, atau BNST. Empat sekrup perhiasan baja tahan karat diikat ke tengkorak tikus di sekitar kanula. Resin yang diisi restoratif gigi (Henry Schein, Melville, NY, USA) dan semen akrilik diaplikasikan, membentuk alas yang kokoh untuk menahan kanula. Koordinat kanula dari bregma yang digunakan untuk CeA adalah: AP +0.2, ML ± 4.2, DV -7 (dari tengkorak) dengan batang gigi seri 5.0 mm di atas garis interaural, menurut atlas ). Koordinat kanula yang digunakan untuk BlA adalah: AP −2.64, ML ± 4.8, DV −6.5 (dari tengkorak) dengan tengkorak datar, menurut ). Koordinat kanula yang digunakan untuk BNST adalah: AP −0.6, ML ± 3.5, DV −4.8 (dari tengkorak) dengan tengkorak datar dan sudut kemiringan 14 °. Stylet dummy stainless steel (Plastics One) mempertahankan paten kanula. Setelah operasi, tikus diizinkan masa pemulihan 7-hari, di mana mereka ditangani setiap hari.

Prosedur infus mikro

Obat diinfuskan mikro dalam otak tikus seperti yang dijelaskan sebelumnya (; ). Untuk mikroinfusi intrakranial, stylet dummy dikeluarkan dari kanula pemandu, dan diganti dengan injektor baja stainless pengukur 31 yang memproyeksikan 2 mm di luar ujung kanula pemandu; injektor dihubungkan melalui pipa PE 20 ke Hamilton microsyringe (Hamilton, Reno, Nevada) yang digerakkan oleh pompa mikroinfusi multi-jarum suntik (Instrumen Ilmiah / Biologis KD, Holliston, MA, USA). Mikroinfusi dilakukan dalam 0.5 μl volume yang dikirim melalui 2 min; injektor dibiarkan di tempat selama 1 menit tambahan untuk meminimalkan aliran balik.

Penempatan kanula

Penempatan kanula diverifikasi di akhir semua pengujian (lihat Gambar 1). Subjek dianestesi (isoflurane, 2-3% dalam oksigen) dan secara perfusi disemprot dengan es-4% paraformaldehyde (PFA) dingin dalam air (pH 7.4) dan diinfuskan mikro dengan Cresyl violet (0.5 μl / sisi). Otak kemudian diperbaiki dalam semalam di 4% PFA dan diseimbangkan dalam 30% sukrosa dalam PFA. Bagian koron 40 μm dikumpulkan menggunakan cryostat (Thermo Scientific HM-525) dan penempatan diverifikasi di bawah mikroskop. Empat puluh subjek (14 untuk CeA, 16 untuk BlA, dan 10 untuk BNST) dikeluarkan dari analisis karena penempatan kanula yang salah. Data dari penempatan yang salah dianalisis untuk membantu menafsirkan kekhususan situs efek.

Gambar 1 

Menggambar irisan otak tikus koronal. Titik mewakili tempat injeksi di inti pusat amigdala (CeA) (a), inti basolateral amigdala (BlA) (b) dan inti lapisan stria terminalis (BNST) (c) termasuk dalam analisis data. ...

Immunohistokimia CRF

Prosedur perilaku, perfusi, dan imunohistokimia

Tikus (n= 22) adalah diet yang didaur ulang selama 7 minggu, dibius, dan diperfusikan 2 – 4 h setelah dialihkan dari diet yang enak ke chow diet (P→C fase) atau dari chow diet ke diet enak (C→P tahap). Tikus dianestesi dan kemudian diperfusi transcardial dengan saline + 2% (b / v) natrium nitrit (pH = 7.4) terlebih dahulu, dan dengan 4% paraformaldehyde yang disangga dalam Borax (pH = 9.5) berikutnya. Tikus kemudian dipenggal kepalanya dan otak segera dikumpulkan, ditempatkan di ∼20 ml 4% PFA, dan disimpan dalam 30% sukrosa dalam larutan 4% PFA pada 4 ° C hingga saturasi.

Untuk visualisasi CRF, otak dipotong menjadi 40 μm bagian koronal menggunakan cryostat dan kemudian disimpan dalam cryoprotectant pada suhu -20 ° C. Setiap bagian keenam (terpisah 240 μm) dari seluruh CeA, BlA, dan BNST dipilih secara acak sistematis dan diproses untuk imunositokimia. Bagian yang mengambang bebas dicuci dalam larutan garam penyangga kalium fosfat (KPBS). Setelah pencucian awal, bagian-bagian tersebut menerima inkubasi dalam larutan KPBS hidrogen peroksida 0.3% selama 30 menit untuk memblokir peroksidase endogen. Bagian kemudian dicuci lagi dan ditempatkan dalam larutan pemblokiran (serum kambing normal 3%, Triton X0.25 100%, dan albumin serum sapi 0.1%) selama 2 jam. Bagian-bagian tersebut kemudian dipindahkan ke antibodi primer (pengenceran 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) dalam larutan pemblokiran dan diinkubasi selama 72 jam pada suhu 4 ° C. Setelah pencucian tambahan, bagian diinkubasi ke dalam antibodi sekunder (pengenceran 1: 1000, Laboratorium Vektor anti-kelinci (BA-1000) yang dibiotinilasi, Burlingame, California) dalam larutan pemblokiran selama 2 jam pada suhu kamar. Bagian dicuci dan kemudian diinkubasi dalam larutan avidin-biotin lobak peroksidase ABC (Laboratorium Vektor) dalam larutan pemblokiran selama 1 jam. Bagian kemudian diinkubasi menggunakan kit substrat diaminobenzidine (Vector Laboratories) sesuai dengan instruksi pabrik dan setelah reaksi selesai, bagian dibilas di KPBS, dipasang pada slide dan dibiarkan kering semalaman. Keesokan harinya, slide didehidrasi menggunakan konsentrasi alkohol bertingkat dan ditutup dengan penutup DPX (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, USA).

Kuantifikasi badan sel CRF +

Kuantifikasi badan sel CRF + dilakukan sesuai dengan pendekatan stereologi yang tidak bias. Serangkaian bagian dianalisis untuk setiap batch pewarnaan. Bagian dianalisis menggunakan Olympus (Center Valley, PA, USA) BX-51 mikroskop dilengkapi dengan kamera video langsung Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Kanada), tahap bermotor tiga sumbu MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, AS), dan stasiun kerja komputer pribadi. Semua jumlah sel dibuat pada slide kode oleh penyelidik yang buta terhadap kondisi pengobatan. Setiap wilayah diuraikan secara virtual pada gambar digital dari setiap bagian yang dipilih secara acak menggunakan modul alur kerja fraksionator optik dari perangkat lunak Investigator Stereo (MicroBrightField, Williston, VT, USA). Semua kontur digambar pada perbesaran rendah menggunakan Olympus PlanApo N 2X objektif dengan bukaan numerik 0.08 dan dihitung menggunakan Olympus UPlanFL N 40X objektif dengan bukaan numerik 0.75. Frame grid dan frame penghitungan diatur ke 275 × 160 μm. Zona penjaga 2 μm dan ketinggian dissector 20 μm digunakan. Bagian beku awalnya dipotong pada ketebalan nominal 40 μm. Imunostaining dan pemasangan menghasilkan ketebalan bagian yang diubah, yang diukur pada setiap lokasi penghitungan. Ketebalan bagian rata-rata dihitung oleh perangkat lunak dan digunakan untuk memperkirakan volume total wilayah sampel dan jumlah total sel CRF +.

Analisis Statistik

Mahasiswa t-test digunakan untuk menganalisis faktor dengan dua level. ANOVA dilakukan untuk menganalisis faktor dengan lebih dari dua level. Mengikuti efek omnibus yang signifikan dari ANOVA (p<0.05), Fisher's LSD post hoc tes perbandingan digunakan. Tes Dunnett digunakan untuk menentukan apakah R121919 menormalkan asupan Chow / Palatable tikus untuk dirawat di kendaraan Chow / Chowtingkat -Fed. Paket perangkat lunak / grafik yang digunakan adalah Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Perangkat Lunak Systat, Chicago, IL, USA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, USA), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, USA), dan PASW Statistik 18.0 (SPSS, Chicago, IL, USA).

HASIL

Efek Microinfusion dari R121919 ke dalam CEA

Asupan makanan enak yang berlebihan

Untuk menentukan apakah CRF1 reseptor di CeA memediasi asupan berlebih dari makanan yang enak pada tikus yang bersepeda siklus, kami situs yang diinfuskan secara mikro khususnya CRF selektif1 reseptor antagonis R121919 ke area otak ini dan mengukur asupan makanan di awal P tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2a, asupan makanan yang enak dimakan kendaraan Chow / Palatable tikus dua kali lipat lebih tinggi dari kontrol chow-fed Chow / Chow tikus. Antagonisme dari CEA CRF1 reseptor sepenuhnya memblokir makan berlebihan makanan enak ini Chow / Palatable tikus, tanpa mempengaruhi asupan makanan pada tikus kontrol (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p<0.05). Pos hoc perbandingan mengungkapkan bahwa dosis tertinggi R121919 (1.5 μg / sisi) secara signifikan mengurangi asupan makanan yang enak dibandingkan dengan kendaraan di Chow / Palatable tikus. Asupan Chow / Palatable tikus yang mengikuti mikroinfusi dosis 1.5 μg / samping tidak berbeda secara signifikan dari asupan kendaraan yang diobati Chow / Chow tikus. Mengonfirmasi kekhususan efek untuk CRF1 reseptor di CEA, tidak ada efek yang diamati pada asupan makanan subyek dengan kanula salah tempat (Chow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Gambar 2 

Efek mikroinfusi faktor pelepas kortikotropin selektif-1 (CRF1) antagonis reseptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sisi) di inti pusat amygdala (CeA) pada makan berlebihan makanan enak, hipofagia teratur ...

Hipofagia dari diet chow biasa

Untuk menentukan apakah CRF1 reseptor di CeA memediasi hipofagia dari diet chow pada tikus yang bersepeda, kami memasukkan R121919 ke dalam area otak ini dan mengukur asupan makanan pada awal C tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2b, asupan kendaraan yang dirawat Chow / Palatable tikus adalah ∼1 / 3 dari asupan kendaraan yang dirawat Chow / Chow tikus (hipofagia). Perawatan R121919 tidak mempengaruhi hipofagia chow biasa Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). Mengonfirmasi hasil yang diperoleh di P fase, mikroinfusi R121919 di CEA tidak mempengaruhi asupan chow dalam kontrol Chow / Chow tikus (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Perilaku seperti kecemasan yang diinduksi penarikan akut

Untuk menentukan apakah CEA CRF1 reseptor memediasi keadaan emosi negatif yang diinduksi dengan menarik makanan yang enak pada tikus yang dikendarai, kami tempat yang diinfuskan secara mikro R121919 ke dalam area otak ini dan mengukur perilaku seperti kecemasan menggunakan uji kotak terang-gelap 5 ke dalam C tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2c, tikus yang ditarik secara akut dari kronis, akses intermiten ke makanan yang sangat enak menunjukkan penurunan yang signifikan dalam waktu yang dihabiskan di kompartemen cahaya dari kotak terang-gelap. Mikroinfusi 1.5 μg / sisi R121919 dalam CeA, dosis yang secara efektif mengurangi makan berlebihan makanan yang enak, sepenuhnya memblokir perilaku seperti kecemasan dengan meningkatkan waktu yang dihabiskan di area cahaya kotak di Chow / Palatable tikus, tanpa mempengaruhi perilaku Chow / Chow tikus (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Mengonfirmasi kekhususan efek untuk CRF1 reseptor di CEA, tidak ada efek yang diamati pada asupan makanan subyek dengan kanula salah tempat (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Efek Microinfusion dari R121919 ke dalam BlA

Asupan makanan enak yang berlebihan

Untuk menentukan apakah BlA CRF1 reseptor memediasi makan berlebih dari makanan lezat dalam siklus diet tikus, kami menginfeksi situs R121919 khusus ke area otak ini dan mengukur asupan makanan pada awal P tahap. Berbeda dengan apa yang diamati setelah pemberian R1219191 ke dalam CEA, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3a mikroinfusi bilateral CRF selektif1 antagonis reseptor ke dalam BlA tidak secara signifikan mempengaruhi asupan makanan yang enak di Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). Demikian pula konsumsi chow reguler di Chow / Chow tikus tidak terpengaruh oleh mikroinfusi R121919 (Chow / Chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Gambar 3 

Efek mikroinfusi faktor pelepas kortikotropin selektif-1 (CRF1) antagonis reseptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sisi) dalam nukleus basolateral amygdala (BlA) pada makan berlebihan makanan yang enak, hipofagia teratur ...

Hipofagia dari diet chow biasa

Untuk menentukan apakah CRF1 reseptor di BlA memediasi hipofagia chow pada tikus bersepeda, kami menginfeksi R121919 ke dalam area otak ini dan mengukur asupan makanan pada awal C tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3b, peningkatan yang signifikan dalam asupan chow teratur diamati setelah microinfusion CRF1 antagonis reseptor dalam BlA of Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Memang, dosis tertinggi (1.5 μg) dari mikro-infus R121919 di BlA selama C fase secara signifikan meningkatkan konsumsi diet chow reguler sebesar 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) persen jika dibandingkan dengan kendaraan yang dirawat Chow / Chow tikus. R121919 dilemahkan, tetapi tidak sepenuhnya memblokir, hipofagia yang diinduksi penarikan pada dosis tertinggi yang disuntikkan. Mengonfirmasi data yang diperoleh di P fase, mikroinfusi R121919 tidak mempengaruhi asupan chow reguler di Chow / Chow tikus (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.25, NS). Mengonfirmasi kekhususan efek untuk CRF1 reseptor di BlA, tidak ada efek yang diamati pada asupan makanan subyek dengan kanula salah tempat (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Perilaku seperti kecemasan yang diinduksi penarikan akut

Untuk menentukan apakah BlA CRF1 reseptor memediasi keadaan emosi negatif yang diinduksi dengan secara akut menarik makanan yang enak pada tikus yang bersepeda, kami tempat yang diinfuskan mikro secara khusus R121919 ke dalam area otak ini dan diukur perilaku seperti kecemasan 5 h ke dalam C tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3c, enak dimakan makanan Chow / Palatable tikus menghabiskan lebih sedikit waktu di kompartemen cahaya dibandingkan dengan Chow / Chow tikus (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, dimasukkan mikro ke dalam BlA, tidak secara signifikan mempengaruhi waktu yang dihabiskan di area terang (DOSE: F (1, 39) = 0.01, NS).

Efek Microinfusion dari R121919 ke dalam BNST

Asupan makanan enak yang berlebihan

Untuk menentukan apakah BNST CRF1 reseptor memediasi makan berlebih dari makanan yang enak pada tikus diet, R121919 adalah situs yang secara khusus diinfuskan ke dalam area otak ini dan asupan makanan diukur pada awal penelitian. P tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4b, mikroinfusi bilateral CRF selektif1 antagonis reseptor ke BNST tidak secara signifikan mempengaruhi asupan makanan yang enak di Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). Demikian pula konsumsi chow reguler di Chow / Chow tikus tidak terpengaruh oleh mikroinfusi R121919 (Chow / Chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Gambar 4 

Efek mikroinfusi faktor pelepas kortikotropin selektif-1 (CRF1) antagonis reseptor R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / sisi) pada nukleus inti stria terminalis (BNST) pada makan berlebihan makanan enak, hipofagia dari ...

Hipofagia dari diet chow biasa

Untuk menentukan apakah BNST CRF1 reseptor memediasi hipofagia diet chow pada tikus bersepeda, kami memasukkan R121919 ke dalam area otak ini dan mengukur asupan makanan pada awal C tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4a, Mikroinfusi R121919 tidak mempengaruhi asupan chow reguler di Chow / Chow tikus (Chow / Chow, F (2, 14) = 0.03, NS). Demikian pula, pengobatan R121919 tidak mempengaruhi hipofagia chow biasa Chow / Palatable tikus (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Perilaku seperti kecemasan yang diinduksi penarikan akut

Untuk menentukan apakah BNST CRF1 reseptor memediasi keadaan emosi negatif yang diinduksi dengan secara akut menarik makanan yang enak pada tikus yang bersepeda, kami tempat yang di-mikroinfeksikan secara khusus R121919 ke dalam area otak ini dan mengukur perilaku seperti kecemasan 5 setelah perubahan dari P→C tahap. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4c, enak dimakan makanan Chow / Palatable tikus menghabiskan lebih sedikit waktu di kompartemen cahaya dibandingkan dengan kontrol Chow / Chow tikus (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, mikroinfus bilateral dengan dosis 1.5 μg / sisi ke dalam BNST tidak secara signifikan mempengaruhi waktu yang dihabiskan di area terang (DOSE: F (1, 33) = 0.47, NS).

Immunohistokimia CRF

Gambar 5 menggambarkan mikrograf representatif dari sel CRF + di CeA, BlA, dan BNST di Chow / Chow dan Chow / Palatable tikus, mengikuti ad libitum prosedur pergantian diet yang enak. Analisis immunoreaktivitas CRF dari CEA mengungkapkan bahwa perbedaan yang signifikan antara Chow / Palatable dan Chow / Chow tikus selama keduanya C dan P fase (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Tidak ada perbedaan yang signifikan secara statistik antara kelompok yang diamati baik pada BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) atau BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Gambar 5 

Mikrograf representatif dari kortorotropin-releasing factor (CRF) immunoreactivity di inti pusat amygdala (CeA) (a-d), inti basolateral dari amygdala (BlA) (e-h), dan inti tempat tidur dari stria terminalis (BNST) ) (i – l) ...

PEMBAHASAN

Penelitian ini dirancang untuk secara fungsional mengidentifikasi situs otak yang bertanggung jawab atas asupan berlebih yang dimediasi CRF pada makanan yang sangat enak pada tikus yang menjalani diet alternatif. Temuan kami membuktikan peran utama CeA dalam memediasi makan berlebihan makanan yang sangat enak. Selain itu, kami menunjukkan bahwa sistem CRF di BlA, berbeda dari CeA, memiliki peran dalam proses devaluasi yang terjadi ketika penurunan dalam besarnya hadiah makanan.

Kami sebelumnya telah menunjukkan bahwa siklus akses berulang dan penarikan akut dari makanan bergula, sangat enak menyebabkan makan berlebihan makanan enak serta hipofagia yang bergantung pada penarikan secara teratur dari diet chow reguler dan perilaku seperti kecemasan (; , ). Makan berlebihan yang diamati di sini dihipotesiskan akan didorong oleh keadaan emosi negatif yang disebabkan oleh episode berulang dari penarikan akut dari makanan yang sangat enak melalui CRF-CRF ekstrahypothalamic1 mekanisme yang dimediasi oleh sistem reseptor, yang menyerupai proses seperti 'kindling' yang mendasari gangguan kecanduan (; ; ; ).

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa CRF1 reseptor dari CeA dan BlA memediasi adaptasi makan berbeda dan perilaku seperti kecemasan tikus diet siklus kronis. Administrasi CRF selektif1 reseptor antagonis dalam CEA memblokir perilaku makan berlebihan dan kecemasan seperti di Australia Chow / Palatable tikus, tanpa mempengaruhi hipofagia dari diet teratur yang kurang diterima. Menariknya, pemberian R121919 ke dalam BlA, melemahkan hipofagia dari diet chow kurang selera (yaitu, meningkatkan asupan chow reguler) di Chow / Palatable tikus, tanpa mempengaruhi makan berlebihan atau perilaku seperti kecemasan. Ketika diinfuskan secara mikro di BNST, R121919 tidak memengaruhi variabel mana pun yang diukur Chow / Palatable tikus (makan berlebihan dari makanan yang sangat enak, asupan makanan chow reguler dan perilaku seperti kecemasan yang diinduksi penarikan akut). Efek farmakologis yang diamati selektif untuk Chow / Palatable tikus karena R121919, yang diinfuskan mikro dalam CeA, BlA, atau BNST Chow / Chow kontrol tikus, diberikan tidak berpengaruh. Karena itu, CRF – CRF1 sistem reseptor dari CEA dan BlA tampaknya memediasi secara berbeda hasil perilaku yang dihasilkan dari siklus diet palatable kronis. Di sisi lain, CRF – CRF1 sistem reseptor BNST tampaknya tidak terlibat dalam adaptasi perilaku yang disebabkan oleh pergantian diet yang enak.

Temuan perilaku dan farmakologis kami didukung oleh pengamatan bahwa immunoreaktivitas CRF dalam CEA Chow / Palatable tikus meningkat secara signifikan dibandingkan dengan Chow / Chow kontrol tikus, selama penarikan dari dan mengikuti akses baru ke diet yang sangat enak (). Menariknya, tidak ada perbedaan yang signifikan dalam imunoreaktivitas CRF antara kelompok yang diamati dalam BlA atau BNST. Peningkatan imunoreaktivitas CRF diamati di CeA Chow / Palatable tikus konsisten dengan temuan kami sebelumnya bahwa penarikan akut dari diet yang enak dikaitkan dengan peningkatan pelepasan CRF di CeA (). Namun, berlawanan dengan apa yang ditunjukkan sebelumnya, memperbaharui akses ke diet yang enak tidak menyebabkan kembalinya ekspresi CRF di CeA ke level kontrol. Perbedaan antara hasil yang diperoleh di sini dan pengamatan sebelumnya mungkin terkait dengan titik waktu yang berbeda dari pengumpulan otak, dan resolusi anatomi yang berbeda dari teknik yang diadopsi untuk mengukur ekspresi CRF. Meskipun demikian, peningkatan yang diamati dalam ekspresi CRF di CEA selama penarikan dan mengikuti akses baru ke diet lezat konsisten dengan efek selektif dari blokade perilaku seperti kecemasan (selama penarikan) dan makan berlebihan (akses baru) di Chow / Palatable tikus. Oleh karena itu, ketidakkonsistenan yang jelas antara kedua penelitian ini dapat ditafsirkan secara kolektif sebagai berikut: selama penarikan makanan yang enak, ekspresi CRF meningkat dalam CeA dari tikus yang bersepeda siklus dibandingkan dengan kontrol dan bertanggung jawab atas munculnya pengaruh negatif. Ekspresi CeA CRF tetap diubah hingga jam-jam pertama dari akses yang sangat enak, mendorong makan berlebihan. Namun, setelah mengonsumsi makanan yang terlalu enak, CRF kembali ke tingkat kontrol ().

Hasil perilaku, farmakologis dan molekuler yang ditunjukkan mendukung hipotesis bahwa CRF-CRF1 sistem reseptor di CeA memiliki peran penting dalam memediasi keadaan afektif negatif dan asupan makanan yang enak di tikus diet, seperti halnya apa yang telah ditunjukkan secara luas untuk alkohol dan ketergantungan obat (). Memang, tikus yang tergantung etanol menunjukkan peningkatan pelepasan CRF ekstraseluler dalam CEA selama penarikan dan pemberian antagonis reseptor CRF ke dalam CEA mampu memblokir peningkatan administrasi diri etanol yang meningkat selama penarikan (; ). Secara analog, hewan yang tergantung pada opiat menunjukkan peningkatan ekspresi CRF di CeA selama penarikan () dan blokade reseptor CRF di CEA, tetapi bukan BNST, mengurangi tanda-tanda perilaku penarikan (; ). Peran kunci untuk CRF – CRF1 sistem dalam CEA juga telah ditunjukkan dalam ketergantungan nikotin. Memang, penarikan nikotin yang diendapkan mecamylamine dikaitkan dengan hiperaktifasi CRF-CRF1 sistem reseptor di CeA (), dan infus intra-CeA, tetapi bukan intra-BlA, dari CRF1 reseptor antagonis mengurangi peningkatan ketergantungan-nikotin pada ambang batas penghargaan otak (). Pada tikus yang tergantung kanabinoid, penarikan yang diendapkan dikaitkan dengan peningkatan konsentrasi CRF ekstraseluler di CeA (). Secara keseluruhan, bukti ini sangat mendukung hipotesis bahwa CRF-CRF1 sistem reseptor di CEA adalah mediator kunci dari pengaruh negatif akut akibat penarikan, bersama dengan konsumsi obat dan alkohol yang berlebihan selama ketergantungan. Hasil kami memperluas pengetahuan ini untuk makan berlebihan makanan yang sangat enak, menunjukkan bahwa neuroadaptations analog terjadi.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa hipofagia yang bergantung pada penarikan makanan yang enak dari diet chow yang kurang selera dilemahkan oleh mikroinfusi dalam BlA selektif CRF.1 antagonis reseptor, sedangkan makan berlebihan dan perilaku seperti kecemasan tidak terpengaruh oleh terapi obat intra-BlA. Keterlibatan diferensial dari BlA CRF-CRF1 sistem reseptor dalam hasil siklus makanan menunjukkan bahwa hipofagia chow dapat mewakili proses perilaku independen dari perilaku seperti kecemasan. Sebaliknya, temuan ini konsisten dengan hipotesis bahwa BlA memediasi aspek sensorik dan insentif dari peristiwa yang menonjol secara motivasi. Memang, ada cukup banyak bukti bahwa BlA sangat penting dalam memediasi proses devaluasi dan respons permusuhan terhadap pengurangan hadiah (yaitu, efek Crespi, kontras negatif berturut-turut, devaluasi hadiah, dan sebagainya; ; ; ), dan, oleh karena itu, hipofagia yang dihasilkan dari peralihan dari diet yang sangat enak ke makanan chow yang kurang selera dapat mewakili proses devaluasi hedonis, daripada mekanisme yang bergantung pada energi homeostasis (yaitu, independen dari asupan energi sebelumnya atau penambahan berat badan) ; , ). Blokade CRF1 reseptor dalam BlA, oleh karena itu, dihipotesiskan untuk mengurangi chow hypophagia (yaitu, untuk meningkatkan asupan chow) dengan melemahkan proses devaluasi yang terjadi ketika beralih dari makanan yang sangat enak ke chow kurang selera. Relevan dengan konteks ini juga merupakan inkonsistensi yang jelas antara molekul dan hasil perilaku / farmakologis yang diperoleh dalam BlA. Meskipun CRF1 antagonis reseptor mampu mengurangi besarnya hipofagia chow ketika disuntikkan dalam BlA, tidak ada perbedaan yang signifikan dalam imunoreaktivitas CRF yang diamati di daerah ini ketika membandingkan kontrol dan diet tikus bersepeda. Perbedaan yang jelas ini dapat dijelaskan dengan mempertimbangkan bahwa proses devaluasi yang bergantung pada BlA atas penghargaan alternatif terjadi secara fisiologis dan memiliki signifikansi evolusi yang penting dalam pemilihan makanan yang menghasilkan nilai energi / hadiah tertinggi (). Dengan demikian, dapat diperdebatkan bahwa mediasi proses ini dalam BlA tidak memerlukan neuroadaptations dalam sistem CRF (mirip dengan yang diamati dalam CEA). Untuk mendukung hipotesis ini, sementara makan berlebihan membutuhkan siklus diet kronis untuk berkembang, hipofagia dari chow alternatif yang kurang disukai terjadi setelah perubahan pertama dari diet yang sangat enak kembali ke chow biasa (). Selain itu, penting untuk menekankan bahwa, berdasarkan hasil yang diperoleh dengan menyuntikkan antagonis reseptor CRF1 ke dalam BlA dan CeA, CRF1 hipofagia yang bergantung pada reseptor yang diamati di sini nampaknya merupakan proses perilaku yang berbeda dari anhedonia yang terlihat pada penghentian obat. Namun demikian, penarikan akut dari akses intermiten ke makanan yang enak telah dibuktikan untuk menginduksi respon seperti hypohedonic lainnya seperti peningkatan imobilitas dalam uji berenang paksa dan penurunan respon dalam jadwal rasio penguatan progresif (; ).

Perlu dicatat untuk menyebutkan itu, meskipun Chow / Palatable tikus telah secara kronis menjalani siklus bersepeda, perubahan perilaku dan neurokimia yang ditunjukkan di sini terjadi selama penarikan akut, bukan kronis, dari diet yang enak. Menekankan aspek ini sangat relevan seperti dalam penelitian kecanduan perbedaan mendalam dalam konsekuensi perilaku, farmakologis, dan neurokimia akut. vs pantang berkepanjangan telah diamati (; ). Studi di masa depan akan berharga untuk menentukan bagaimana penarikan berlarut-larut dapat mempengaruhi hasil siklus diet.

Poin diskusi yang relevan adalah apakah perilaku asupan makanan enak yang berlebihan yang kita amati dalam konteks model hewan ini dapat dianggap 'kompulsif'. Dalam penelitian kecanduan praklinis, istilah 'kompulsif' telah banyak digunakan untuk menggambarkan asupan obat yang berlebihan selama putus obat, yang didorong oleh keadaan afektif negatif dan berkurang setelah memperbarui akses ke obat (; ). Akseptasi istilah 'kompulsif' ini didasarkan pada kerangka konseptual bahwa gangguan kompulsif ditandai dengan kecemasan dan stres sebelum melakukan perilaku kompulsif, dan menghilangkan stres dengan melakukan perilaku kompulsif (; ). Dalam konteks model hewan yang digunakan di sini, perilaku makan yang berlebihan dapat diartikan sebagai bentuk perilaku 'kompulsif' mengingat bukti yang diterbitkan sebelumnya bahwa tikus dengan akses intermiten ke makanan yang enak menunjukkan keadaan emosi negatif selama penarikan makanan yang enak, ditandai dengan perilaku seperti kecemasan dan depresi, yang berkurang dengan memperbarui akses (, ; ).

Singkatnya, hasil penelitian ini memberikan bukti fungsional kritis bahwa CRF-CRF1 sistem reseptor dari CEA dan BlA memiliki peran yang berbeda dalam memediasi perilaku maladaptif yang dihasilkan dari akses intermiten ke makanan yang enak. Di dalam CEA, CRF – CRF1 Sistem reseptor adalah mediator kunci dari makan makanan enak yang berlebihan dan pengaruh negatif yang bergantung pada penarikan, sedangkan di BlA itu menengahi respon permusuhan subjek yang ditimbulkan oleh pengurangan hadiah.

PENDANAAN DAN PENGUNGKAPAN

Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Ucapan Terima Kasih

Kami berterima kasih kepada Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jina Kwak untuk bantuan teknis, dan Tamara Zeric untuk bantuan teknis dan editorial. Kami juga berterima kasih kepada Elena F Crawford atas saran berguna terkait CRF imunohistokimia. Publikasi ini dimungkinkan oleh nomor hibah DA023680, DA030425, MH091945, MH093650, dan AA016731, dari National Institute on Drug Abuse (NIDA), National Institute of Mental Health (NIMH), dan National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism ( NIAAA), oleh Peter Paul Career Development Professorship (PC) dan oleh Program Peluang Penelitian Sarjana (UROP) Universitas Boston. Riset ini juga didukung oleh NIH Intramural Research Programs dari National Institute on Drug Abuse, dan National Institute of Alcohol Abuse and Alcoholism, NIH, DHHS. Isinya sepenuhnya menjadi tanggung jawab penulis dan tidak selalu mewakili pandangan resmi dari National Institutes of Health.

Catatan kaki

 

Informasi tambahan menyertai makalah di situs web Neuropsychopharmacology (http://www.nature.com/npp)

 

 

Materi tambahan

Informasi tambahan

Referensi

  • Ahmed SH, Koob GF. Transisi ke kecanduan narkoba: model penguatan negatif berdasarkan penurunan fungsi hadiah allostatic. Psikofarmakologi (Berl) 2005; 180: 473 – 490. [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Model hewan dari pesta gula dan lemak: hubungan dengan kecanduan makanan dan peningkatan berat badan. Metode Mol Biol. 2012; 829: 351 – 365. [PubMed]
  • Bakshi VP, Kalin NH. Hormon pelepas kortikotropin dan model kecemasan hewan: interaksi gen-lingkungan. Psikiatri Biol. 2000; 48: 1175 – 1198. [PubMed]
  • Bale TL. Sensitivitas terhadap stres: disregulasi jalur CRF dan perkembangan penyakit. Horm Behav. 2005; 48: 1 – 10. [PubMed]
  • Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant memicu kecemasan pada tikus yang ditarik dari makanan yang enak: peran amygdala pusat Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioid sistem di medial prefrontal cortex memediasi makan seperti pesta makan Addict Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Kerangka konseptual untuk etiologi alkoholisme: hipotesis 'kindling' / stres. Psikofarmakologi (Berl) 2005; 178: 367–380. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M, dkk. Blokade reseptor CRF1 di nukleus sentral amigdala melemahkan disforia terkait dengan penarikan nikotin pada tikus. Pharmacol Biochem Behav. 2012; 101: 62 – 68. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, dkk. Desain 2,5-dimethyl-3- (6-dimethyl-4-methylpyridin-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] py rimidine (NBI 30775 / R121919) dan struktur — serangkaian hubungan atau rangkaian kegiatan dari serangkaian hubungan atau rangkaian kegiatan dengan serangkaian hubungan atau serangkaian kegiatan secara berurutan antagonis reseptor faktor pelepas kortikotropin aktif. J Med Chem. 2004; 47: 4787 – 4798. [PubMed]
  • Corwin RL. Bingeing rats: model perilaku berlebihan intermiten. Nafsu makan. 2006; 46: 11 – 15. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Corwin RL, Grigson PS. Tinjauan simposium — kecanduan makanan: fakta atau fiksi. J Nutr. 2009; 139: 617 – 619. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Memberi makan mikrostruktur pada diet yang diinduksi obesitas rentan terhadap tikus resisten: efek sentral dari urocortin 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 – 504. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, dkk. Rekrutmen sistem CRF memediasi sisi gelap dari makan kompulsif. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a; 106: 20016 – 20020. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Akses terputus-putus ke makanan pilihan mengurangi khasiat penguat chow pada tikus. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066 – R1076. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Adaptasi konsumtif, terkait kecemasan dan metabolisme pada tikus betina dengan akses bergantian ke makanan pilihan. Psikoneuroendokrinologi. 2009b; 34: 38 – 49. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, dkk. Antagonisme reseptor sigma-1 menghambat makan yang kompulsif. Neuropsikofarmakologi. 2012; 37: 2593 – 2604. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF memediasi ansiogenik dan anti-penghargaan, tetapi bukan efek anorektik dari PACAP Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.113 [Artikel gratis PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Faktor pelepas kortikotropin dalam nukleus sentral dari amigdala memediasi pemberian etanol secara mandiri pada tikus yang ditarik dan tergantung etanol. J Neurosci. 2006; 26: 11324 – 11332. [PubMed]
  • George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, EP Zorrilla, Parsons LH, dkk. Aktivasi sistem CRF-CRF1 memediasi peningkatan yang diinduksi oleh penarikan nikotin secara mandiri pada tikus yang tergantung pada nikotin. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 17198 – 17203. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, dkk. Secara in vitro karakterisasi R121919: antagonis reseptor kortikotropin non-peptida novel1 (CRF1) reseptor antagonis untuk pengobatan potensial depresi dan gangguan terkait kecemasan. Masyarakat untuk Ilmu Saraf. 2000; Abstrak 807: 4 – 9.
  • Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Peran makanan enak dan kelaparan sebagai faktor pemicu dalam model hewan stres yang disebabkan makan pesta. Int J Eat Disord. 2003; 34: 183 – 197. [PubMed]
  • Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Neurotoksik lesi basolateral, tetapi tidak sentral, amigdala mengganggu pengkondisian orde kedua Pavlovian dan efek devaluasi penguatan. J Neurosci. 1996; 16: 5256 – 5265. [PubMed]
  • Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Penarikan akut, pantang berlarut-larut dan pengaruh negatif dalam alkoholisme: apakah mereka terkait. Addict Biol. 2010; 15: 169 – 184. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Heilig M, Koob GF. Peran kunci untuk faktor pelepas kortikotropin dalam ketergantungan alkohol. Tren Neurosci. 2007; 30: 399 – 406. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Penekanan faktor pelepasan kortikotropin dalam amigdala melemahkan konsekuensi permusuhan dari penarikan morfin. Behav Pharmacol. 1995; 6: 74 – 80. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, L Tozier, CM Knapp, Kornetsky C, Steardo L, dkk. Mundur dari kronis, akses intermiten ke makanan yang sangat enak menginduksi perilaku seperti depresi pada tikus makan kompulsif. Behav Pharmacol. 2012; 23: 593 – 602. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Peran sistem stres otak dalam kecanduan. Neuron. 2008; 59: 11 – 34. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Substrat neurobiologis untuk sisi gelap kompulsif dalam kecanduan. Neurofarmakologi. 2009; 56 (Suppl 1: 18 – 31. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Peran peptida terkait CRF dan CRF dalam sisi gelap kecanduan. Res Otak. 2010; 1314: 3 – 14. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Koob GF, Heinrichs SC. Peran faktor pelepas kortikotropin dan urokortin dalam respons perilaku terhadap stresor. Res Otak. 1999; 848: 141 – 152. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Plastisitas penghargaan neurocircuitry dan 'sisi gelap' dari kecanduan narkoba. Nat Neurosci. 2005; 8: 1442 – 1444. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Ulasan. Mekanisme neurobiologis untuk proses motivasi lawan dalam kecanduan. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113 – 3123. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry of addiction. Neuropsikofarmakologi. 2010; 35: 217 – 238. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Peran faktor pelepas kortikotropin dalam kecanduan obat: potensi untuk intervensi farmakologis. Obat-obatan CNS. 2011; 25: 271 – 287. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morfin dan pengaruh kokain pada biosintesis CRF dalam nukleus sentral amigdala tikus. Neuropeptida. 2003; 37: 105 – 110. [PubMed]
  • McNally GP, Akil H. Peran hormon pelepas kortikotropin dalam amigdala dan inti unggun dari stria terminalis dalam perilaku, modulasi nyeri, dan konsekuensi endokrin dari penghentian opiat. Ilmu saraf. 2002; 112: 605 – 617. [PubMed]
  • Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF, dkk. Peningkatan kadar immunoreaktivitas seperti faktor pelepas kortikotropin ekstraseluler dalam amigdala tikus yang terjaga selama stres tertahan dan penarikan etanol yang diukur dengan mikrodialisis. J Neurosci. 1995; 15: 5439 – 5447. [PubMed]
  • Murray E, Wise S, Rhodes S. 2011Apa yang dapat dilakukan otak yang berbeda dengan hadiah In Gottfried JA (eds) .Neurobiologi Sensation and Reward, Bab 4 CRC Press: Boca Raton, FL, USA [PubMed]
  • Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Sisi gelap kecanduan makanan. Physiol Behav. 2011; 104: 149 – 156. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. 2007 Otak Tikus di Koordinat Stereotaxik 6th edn. Press Akademik
  • Pellegrino A. Atlas Stereotaxic Otak Tikus. Pleno: New York; 1979.
  • Rodriguez de Fonseca F, MR Carrera, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Aktivasi faktor pelepasan kortikotropin dalam sistem limbik selama penarikan cannabinoid. Ilmu. 1997; 276: 2050 – 2054. [PubMed]
  • Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Methoxymetopon, agonis opioid mu yang sangat kuat, secara biphas mempengaruhi asupan etanol pada tikus yang menyukai alkohol Sardinia. Psikofarmakologi (Berl) 2007; 192: 537 – 546. [PubMed]
  • Salinas JA, Parent MB, McGaugh JL. Lesi asam Ibotenik dari kompleks basolateral amigdala atau nukleus sentral secara berbeda mempengaruhi respons terhadap pengurangan hadiah. Res Otak. 1996; 742: 283 – 293. [PubMed]
  • Shalev U, Erb S, Shaham Y. Peran CRF dan neuropeptida lain dalam pemulihan yang diinduksi stres dari pencarian obat. Res Otak. 2010; 1314: 15 – 28. [Artikel gratis PMC] [PubMed]
  • Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Karakterisasi peptida hipotalamus ovum residu 41 yang merangsang sekresi kortikotropin dan beta-endorphin. Ilmu. 1981; 213: 1394 – 1397. [PubMed]
  • Volkow ND, O'Brien CP. Masalah untuk DSM-V: apakah obesitas harus dimasukkan sebagai gangguan otak. Am J psikiatri. 2007; 164: 708–710. [PubMed]
  • Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA menghambat mediasi amigdala blok basolateral sebagai penghargaan devaluasi pada kera. J Neurosci. 2005; 25: 4577 – 4586. [PubMed]
  • Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Konsekuensi epidemiologis dan ekonomi dari epidemi global obesitas dan diabetes. Nat Med. 2006; 12: 62 – 66. [PubMed]