Metamfetamin deluje na subpopulacije nevronov, ki uravnavajo spolno vedenje pri samcih podgan (2010)

Nevroznanosti. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

vir

Oddelek za anatomijo in biologijo celic, Schulichova šola za medicino in zobozdravstvo, Univerza zahodnega Ontarija, London, ON, Kanada, N6A 5C1.

Minimalizem

Metamfetamin (Meth) je zelo zasvojen stimulans. Meth zloraba je pogosto povezana s prakso spolno tveganje vedenje in povečano razširjenost humanega imunske pomanjkljivosti Virus in Meth uporabniki poročajo povečano spolno željo, vzburjenost in spolni užitek. Biološka osnova za to povezavo med spoloma ni znana. Sedanja študija dokazuje, da uporaba Metha pri podganjih samcih aktivira nevrone v regijah možganov mezolimbičnega sistema, ki sodelujejo pri regulaciji spolnega vedenja. Natančneje, Meth in parjenje so-aktivirajo celice v jedru in lupini nucleus accumbens, bazolateralni amigdali in anterni cingularni skorji. Te ugotovitve kažejo, da lahko v nasprotju s trenutnim prepričanjem droge zlorabe aktivirajo iste celice kot naravni ojačevalec, to je spolno vedenje, in lahko vplivajo na kompulzivno iskanje te naravne nagrade.

ključne besede: nucleus accumbens, bazolateralna amigdala, prefrontalni korteks, zloraba snovi, razmnoževanje, zasvojenost

Motivacijo in nagrajevanje ureja mezolimbični sistem, med seboj povezano omrežje možganskih področij, ki ga sestavljajo ventralno tegmentalno območje (VTA) nucleus accumbens (NAc), bazolateralna amigdala in medialni prefrontalni korteks (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas in Volkow, 2005). Obstajajo številni dokazi, da se mezolimbični sistem aktivira kot odziv na obe snovi zlorabe (Di Chiara in Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) in naravno nagrajevanje vedenja, kot je spolno vedenje (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Spolno vedenje moških, zlasti ejakulacija, je zelo koristno in okrepljeno pri živalskih modelih (Pfaus et al., 2001). Moški glodalci razvijejo kondicionirano preferenco (CPP) do kopulacije (Agmo in Berenfeld, 1990, Martinez in Paredes, 2001, Tenk, 2008), in bo opravljal operantske naloge za dostop do spolno dovzetne ženske (Everitt et al., 1987, Everitt in Stacey, 1987). Droge zlorabe prav tako nagrajujejo in krepijo, živali pa se bodo naučile samoupravljati z zlorabo, vključno z opiati, nikotinom, alkoholom in psihostimulanti (Wise, 1996, Pierce in Kumaresan, 2006, Feltenstein in See, 2008). Čeprav je znano, da tako zloraba kot spolno vedenje aktivirata mezolimbična področja možganov, je trenutno nejasno, ali droge vplivajo na iste nevrone, ki posredujejo spolno vedenje.

Elektrofiziološke študije so pokazale, da hrana in kokain oba aktivirata nevrone v NAc. Vendar pa dva ojačevalca ne aktivirata istih celic znotraj NAc (Carelli et al., 2000, Carelli in Wondolowski, 2003). Poleg tega hrana in saharoza ne povzročata dolgotrajnih sprememb elektrofizioloških lastnosti, ki jih povzroča kokain (Chen et al., 2008). V nasprotju s tem zbirka dokazov kaže, da moško spolno vedenje in zlorabe drog morda dejansko delujejo na iste mezolimbične nevrone. Psihostimulanti in opioidi spreminjajo izražanje spolnega vedenja pri samcih podgan (Mitchell in Stewart, 1990, Fiorino in Phillips, 1999a, Fiorino in Phillips, 1999b). Nedavni podatki iz našega laboratorija so pokazali, da spolna izkušnja spremeni odzivnost na psihostimulante, kar dokazuje senzibiliziran lokomotorni odziv in senzibilizirano dojemanje nagrajevanja d-amfetamina pri spolno izkušenih živalih. (Pitchers et al., 2009). Podoben odziv so predhodno opazili pri ponavljajoči se izpostavljenosti amfetaminu ali drugim zlorabam drog (Lett, 1989, Shippenberg in Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren in Kalivas, 2000). Skupaj te ugotovitve kažejo, da spolno vedenje in odzivi na zlorabo drog posredujejo isti nevroni v mezolimbičnem sistemu. Zato je prvi cilj te študije raziskati živčno aktivacijo mezolimbičnega sistema s spolnim vedenjem in dajanjem zdravila v isti živali. Predvsem smo testirali hipotezo, da psihostimulant, metamfetamin (Meth) deluje neposredno na nevrone, ki običajno posredujejo spolno vedenje.

Meth je ena najbolj zlorabljenih prepovedanih drog na svetu (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008)je bila pogosto povezana s spremenjenim spolnim vedenjem. Zanimivo je, da uporabniki Meth-a poročajo o večji spolni želji in vzburjenosti, pa tudi o povečanem spolnem užitku (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Poleg tega, Zloraba meta je pogosto povezana s spolno kompulzivnim vedenjem (Rawson et al., 2002). Uporabniki pogosto poročajo o številnih spolnih partnerjih in so manj verjetno, da bodo uporabljali zaščito kot drugi uživalci drog (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Žal so študije, ki kažejo na uporabo Meth kot napovedovalca spolnega tveganega vedenja, omejene, saj se zanašajo na nepotrjena samoocenitev (Elifson et al., 2006). Zato je potrebna raziskava celične podlage Meth-induciranih sprememb v spolnem vedenju v živalskem modelu za razumevanje te kompleksne povezave med spoloma.

Glede na zgoraj navedene dokaze, ki kažejo, da lahko droge zlorabe, zlasti Meth, delujejo na nevrone, ki so normalno vključeni v posredovanje spolnega vedenja, je bil cilj te študije raziskati živčno aktivacijo s spolnim vedenjem in dajanjem psihostimulanta Meth. Ta študija je izvedla nevroanatomsko tehniko z uporabo imunohistokemične vizualizacije zgodnjih genov Fos in fosforilirane Map kinaze (pERK) za odkrivanje hkratne nevralne aktivacije s spolnim vedenjem in Meth. Fos se izraža samo znotraj jedra celic, z maksimalno stopnjo ekspresije 30 – 90 minut po aktivaciji nevrona. Obstaja veliko dokazov, da spolna aktivnost povzroča Fosovo izražanje v možganih (Pfaus in Heeb, 1997, Veening in Coolen, 1998), vključno z mezokortikolimbičnim sistemom (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Obstajajo tudi dokazi, da droge, ki povzročajo zlorabo, povzročajo izražanje pERK v mezokortikolimbičnem sistemu (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). V nasprotju z izrazom Fos, je fosforilacija ERK zelo dinamičen proces in se po 5-20 pojavlja šele po nevronski aktivaciji. Različni časovni profili Fos in pERK so idealen nabor markerjev za nadaljnje nevronske aktivacije z dvema različnima dražljajema.

EKSPERIMENTALNI POSTOPKI

Predmeti

Odrasli samci podgane Sprague Dawley (210-225 g), pridobljene iz Charles River Laboratories (Montreal, QC, Kanada), so bile nameščene dve na kletko v standardnih kletkah iz pleksiglasa (domače kletke). Živalska soba je bila vzdrževana na obrnjenem ciklu 12 / 12 h (luči ugasnejo pri 10.00 h). Hrana in voda sta bili na voljo ad libitum. Vsa testiranja so bila izvedena v prvi polovici temne faze pod temno rdečo osvetlitvijo. Ženke spodbud, uporabljene za spolno vedenje, so bile dvostransko ovariektomirane pod globoko anestezijo (13 mg / kg ketamina in 87 mg / kg ksilazina) in so prejele subkutani implantat, ki je vseboval 5% estradiol benzoat (EB) in 95% holesterol. Spolno dovzetnost je bila inducirana s subkutanim (sc) dajanjem 500 μg progesterona v 0.1 ml sezamovega olja 4 h pred testiranjem. Vse postopke je odobril Odbor za nego živali na Univerzi zahodnega Ontarija in so v skladu s smernicami, ki jih je določil Kanadski svet za nego živali.

Eksperimentalni načrti

Poskusi 1 in 2: samcem podgan (n = 37) je bilo dovoljeno, da se parijo z dovzetno žensko na eno ejakulacijo (E) ali za 30 min, ki je bila prvič v čistih testnih kletkah (60 × 45 × 50 cm) v petih dvakrat - tedensko predtestiranje, da bi pridobili spolno izkušnjo. Med zadnjima dvema sejama so bili zabeleženi vsi standardni parametri za spolno uspešnost, vključno z: latenco gnezdenja (ML; čas od uvedbe ženske do prvega gnezdenja), latenco intromisije (IL; čas od vnosa ženske do prvega gnezdenja). vaginalna penetracija), latenca ejakulacije (EL; čas od prvega vdora v ejakulacijo), interval po ejakulaciji (PEI; čas od ejakulacije do prvega naknadnega vdora), število grebenov (M) in število vnosov (IM) (Agmo, 1997). Vsi moški so prejemali 1 ml / kg dnevno injekcijo 0.9% NaCl (fiziološka raztopina; sc) 3 zaporednih dni pred preskusnim dnem, za prilagoditev na rokovanje in injekcije. En dan pred testnim dnevom so bili vsi samci nastanjeni. Pri izkušenih moških lahko Fos povzročijo pogojeni kontekstualni znaki, povezani s predhodnimi spolnimi izkušnjami (Balfour et al, 2004). Zato so bile vse konjske in kontrolne manipulacije med končnimi testi izvedene v domači kletki (izogibanje napovednim pogojem), da bi se preprečila kondicionirana inducirana aktivacija pri nedokončanih moških. Samci so bili razdeljeni v osem eksperimentalnih skupin, ki se niso razlikovale v nobenem merilu spolne uspešnosti v zadnjih dveh parih (podatki niso prikazani). Med končnim preskusom so moškim bodisi dovolili, da so se parili v svoji domači kletki, dokler niso pokazali ejakulacije (spol) ali niso prejeli partnerice (brez seksa). Vse parjene samce smo perfundirali 60 minut po začetku parjenja, da smo omogočili analizo Fos-ekspresije, ki je bila inducirana s parjenjem. Moški so prejeli injekcijo 4 mg / kg Meth ali 1 ml / kg fiziološke raztopine (sc) (n = 4 vsaka), bodisi 10 (eksperiment 1) ali 15 (eksperiment 2) min pred perfuzijo, za analizo fosforilacije, ki jo povzroča zdravilo. MAP kinaze. Odmerjanje in čas pred perfuzijo sta temeljila na prejšnjih poročilih (Choe et al., 2002, Choe in Wang, 2002, Chen in Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Kontrolne skupine so vključevale moške, ki se niso parile, vendar so prejele Meth 10 (n = 7) ali 15 (n = 5) min pred žrtvovanjem, ali injekcije 10 (n = 5) ali 15 (n = 4) min. . Po žrtvovanju so bili možgani obdelani za imunohistokemijo.

Eksperiment 3: Ker smo v eksperimentu 1 in 2 uporabili visok odmerek Meth, smo izvedli dodatni nevroanatomski poskus, da bi raziskali, ali spolno vedenje in nižji odmerek Met inducira od odmerka odvisne vzorce prekrivanja živčne aktivacije. Ta študija je bila izvedena na enak način kot eksperimenti 1 in 2. Vendar pa so na končnem testu parjene in nedeminirane skupine (n = 6 vsaka) prejele 1 mg / kg Meth (sc) 15 min pred žrtvovanjem.

Eksperiment 4: Da bi preverili, ali je živčna aktivacija, ki jo povzroča spol, in Meth, specifična za Meth, je ta poskus preučil, ali so podobni vzorci prekrivanja živčne aktivacije vidni s psihostimulantom d-amfetamin (Amph). Ta poskus smo izvedli na enak način kot eksperimente 1 in 2. Vendar so pri končnem preskusu moškim dajali bodisi Amph (5 mg / kg) ali fiziološko raztopino (1 mg / kg) (sc) 15 min pred žrtvovanjem (n = 5 vsaka). Kontrolni nedokončani moški so pred žrtvovanjem prejeli slanico ali Amph 15 minut. Pregled poskusnih skupin, uporabljenih v poskusih 1-4, je podan v Tabela 1.

Tabela 1      

Pregled poskusnih skupin, vključenih v eksperimente 1 – 4.

Priprava tkiva

Živali smo anestezirali s pentobarbitalom (270 mg / kg; ip) in perfundirali transkardialno z 5 ml fiziološke raztopine, ki mu je sledila 500 ml 4% paraformaldehida v 0.1 M fosfatnem pufru (PB). Možgane smo odstranili in po fiksiranju za 1 h pri sobni temperaturi v istem fiksativu, nato potopili v 20% saharozo in 0.01% natrijev azid v 0.1 M PB in shranili na 4 ° C. Koronalne odseke (35 μm) smo razrezali na zamrzovalni mikrotom (H400R, Micron, Nemčija), zbrali v štirih vzporednih serijah v raztopini krioprotektantov (30% saharoze in 30% etilen glikola v 0.1 M PB) in shranili na 20 ° C do nadaljnjega obravnavati.

Imunohistokemija

Vse inkubacije izvedemo pri sobni temperaturi z rahlim stresanjem. Proste plavajoče sekcije so bile med inkubacijami temeljito oprane z 0.1 M fosfatno pufrano slanico (PBS). Sekcije so bile inkubirane v 1% H2O2 za 10 min, nato blokiramo v inkubacijski raztopini (PBS, ki vsebuje 0.1% goveji serumski albumin in 0.4% Triton X-100) za 1 h.

pERK / Fos

Tkivo smo inkubirali preko noči s kunčjim poliklonskim protitelesom proti p42 in p44 mapama kinaz ERK1 in ERK2 (pERK; 1: 400 eksperiment 1 in 19 lot 1; Cell Signal Cat # 4.000;), ki mu sledi 2 h inkubacije z biotiniliranim oslovskim anti-kunčjim IgG (3: 21; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) in kompleks avidin-hren peroksidaze (ABC Elite; 9101: 1; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Nato smo tkivo inkubirali za 1 min z biotiniliranim tiramidom (BT; 500: 1 v PBS + 1000% H2O2; Komplet za ojačanje signala tiramidov, NEN Life Sciences, Boston, MA) in za 30 min s konjugiranim strepavidinom Alexa 488 (1: 100; Laboratoriji Jackson Immunoresearch, West Grove, PA). Nato smo tkivo inkubirali preko noči s kunčjim poliklonskim protitelesom proti c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), čemur je sledila inkubacija 30 min z kozjim anti-kunčjem Alexa 555 (1: 200, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Po barvanju smo sekance temeljito spirali z 0.1 M PB, nameščene na steklena stekelca z 0.3% želatino v ddH20 in prekrijemo z vodnim nosilnim medijem (Gelvatol), ki vsebuje sredstvo proti bledenju 1,4-diazabiciklo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Imunohistokemične kontrole so vključevale opustitev enega ali obeh primarnih protiteles, kar je povzročilo odsotnost označevanja v ustrezni valovni dolžini.

Analiza podatkov

Spolno obnašanje

Za vse štiri poskuse so bili standardni parametri za spolno uspešnost zabeleženi, kot je opisano zgoraj, in analizirani z analizo variance (ANOVA). Analiza podatkov o spolnem obnašanju med zadnjim testnim dnevom ni pokazala bistvenih razlik med skupinami pri katerem koli parametru spolne uspešnosti.

Število pERK / Fos celic

Enotne in dvojno označene celice za Fos in pERK so bile preštete v repni ravni NAc jedrnih in lupinskih subregij, bazolateralna amigdala (BLA), posterodorsalna medialna amigdala (MEApd), centralna amigdala (CeA), medialno preoptično jedro (MPN), posteromedial in posterolateralno jedro strie terminalis (BNSTpm in BNSTpl) in prednja cingulirana površina (ACA), prelimbna (PL) in infralimbična (IL) podregija mPFC. Slike so bile zajete z ohlajeno CCD kamero (Microfire, Optronics), priključeno na mikroskop Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Nemčija) in programsko opremo Neurolucida (MicroBrightfield Inc) s fiksnimi nastavitvami kamere za vse predmete (z uporabo ciljev 10x). Z uporabo programske opreme neurolucida so bila določena področja analize na podlagi orientacijskih točk (Swanson, 1998) edinstveno za vsako regijo možganov (glej Slika 1). Standardna področja analize so bila uporabljena na vseh področjih, razen na jedru in lupini NAc. V slednjih področjih izraz pERK in Fos ni bil homogen in se je pojavil v vzorcih, podobnih obližem. Celotno jedro in lupina sta bila zato opisana na podlagi mejnih vrednosti (lateralni prekat, anteriorni prosti čas in otoki Calleja). Področja analize se med eksperimentalnimi skupinami niso razlikovala in so bila 1.3 mm2 v jedru in lupini NAc. Standardna področja analize za preostala področja so bila: 1.6 mm2 v BLA, 2.5 in 2.25 mm2 v MEApd oz. CeA, 1.0 mm2 v MPN, 1.25 mm2 v podregijah BNST in mPFC ter 3.15 mm2 v VTA. Dva odseka smo šteli dvostransko za vsako možgansko regijo na žival in izračunali smo število enojnih in dvojno označenih celic za pERK in Fos ter odstotke pERK celic, ki so izražale Fos marker. Za poskuse 1, 2 in 4 smo primerjali povprečne vrednosti skupin z uporabo dvosmerne ANOVA (faktorji: parjenje in zdravilo) in Fisherjev LSD za naknadnega primerjave na ravni pomembnosti 0.05. Za eksperiment 3 smo primerjali povprečne vrednosti skupin s pomočjo neparnih t-testov na ravni pomembnosti 0.05.

Slika 1      

Shematske risbe in slike, ki prikazujejo možna področja analize. Navedena območja analize so temeljila na mejah, ki so edinstvene za vsako možgansko regijo, pri poskusnih skupinah se niso razlikovale in so bile 1.25 mm2 v podregijah mPFC (a), 1.3 mm2 v ...

slike

Digitalne slike za Slika 3 smo zajeli s CCD kamero (DFC 340FX, Leica), ki je bila pritrjena na mikroskop Leica (DM500B) in uvožena v programsko opremo Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). Slike niso bile spremenjene na noben način, razen za prilagoditev svetlosti.

Slika 3      

Reprezentativne slike sekcij NAc, imunsko obarvanih za Fos (rdeče; a, d, g, j) in pERK (zelene; b, e, h, k) živali vsake poskusne skupine: št. Sex + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), No Sex + Meth (g, h, i) in Sex + Meth (j, k, l). Desne plošče so ...

REZULTATI

Nevronska aktivacija limbičnega sistema s spolnim vedenjem in upravljanjem z metom

Eksperiment 1: Analiza enojnih in dvojno označenih celic za parjenje induciranega FOS in Meth-induciranega pERK pri moških, ki so prejeli Meth 10 minut pred žrtvovanjem, so pokazali Fos v MPN, BNSTpm, NAc jedro in lupino, BLA, VTA, in vse podregije mPFC, skladne s predhodnimi študijami, ki dokazujejo Fosovo izražanje s parjenjem na teh območjih (Baum in Everitt, 1992, Pfaus in Heeb, 1997, Veening in Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Methovo dajanje 10 minut pred žrtvovanjem induciranega pERK v NAc jedru in lupini, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl in regijah mPFC, v skladu z aktivacijskimi vzorci, ki jih povzročajo drugi psihostimulanti (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Poleg tega so opazili tri vzorce skupnega izražanja nevralne aktivacije s spolnim obnašanjem in metom: Najprej so bila določena področja možganov, kjer so spol in droge sprožila neprekrivanje nevralnih populacij (Tabela 2). Natančneje, v CeA, MEApd, BNSTpl in mPFC se je znatno povečalo pERK, ki ga povzročajo zdravila (F (1,16) = 7.39–48.8; p = 0.015– <0.001), in fos, ki ga povzroča spol (F (1,16, 16.53) = 158.83–0.001; p <1,16). Vendar v teh regijah ni prišlo do pomembnega povečanja dvojno označenih nevronov pri parjenih moških, zdravljenih z metom. Edina izjema je bil MEApd, kjer so ugotovili učinek parjenja na število dvojno označenih celic (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Vendar skupnega učinka zdravljenja z zdravili ni bilo in dvojno označevanje v skupinah, ki so prejemale met, ni bilo bistveno večje kot v skupinah, ki so prejemale fiziološko raztopino, zato zdravilo ni povzročaloTabela 2). Drugič, ugotovljena so bila področja možganov, kjer je živčna aktivacija povzročena le s parjenjem (Tabela 3). Natančneje, MPN, BNSTpm in VTA so bili aktivirani samo s parjenjem in so vsebovali znatno povečanje Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001), inducirane s parjenjem, vendar brez PETK, induciranega z Met.

Tabela 2      

Pregled ekspresije pERK, inducirane s parjenjem Fos in Meth, v možganskih področjih, kjer spol in droge aktivirajo neprekrivajo nevralne populacije.
Tabela 3      

Pregled pEr-induciranega ekspresije pERK, inducirane s parjenjem, v možganskih področjih, kjer je živčna aktivacija povzročena samo s parjenjem.

Končno so bila ugotovljena možganska področja, kjer so spol in droge sprožila prekrivanje populacij nevronov (Slika 2 in In3) .3). V jedru in lupini NAc, BLA in ACA so bili skupni učinki parjenja (F (1,16) = 7.87–48.43; p = 0.013– <0.001) in zdravljenja z zdravili (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), pa tudi interakcija med tema dvema dejavnikoma (F (1,16) = 5.082–47.27; p = 0.04– <0.001; brez pomembne interakcije pri ACA) na številu celic, ki izražata oba parjenje-inducirani Fos in met-inducirani pERK. Post hoc analiza je pokazala, da je bilo število dvojno označenih nevronov bistveno večje pri parjenih samcih, ki so jim injicirali met, v primerjavi s parjenimi moškimi, ki so bili zdravljeni z metom (p = 0.027- <0.001), ali parjenimi s fiziološko raztopino (p = 0.001- <0.001)Slika 2 in In3) .3). Kadar so bili podatki izraženi kot odstotki nevronov, aktiviranih z zdravilom, je 39.2 ± 5.3% v jedru NAc, 39.2 ± 5.8% v lupini NAc, 40.9 ± 6.3% v BLA in 50.0 ± 5.3% nevronov ACA. tako parjenje kot Meth.

Slika 2      

Ekspresija FOS in Meth induciranega s spolom povzročena pERK ekspresija v NAc, BLA in ACA nevroni 10 min po dajanju 4 mg / kg Meth. Povprečne številke ± sem iz Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) in dvojne (c, f, i, l) označene celice v jedru NAc ( ...

Nepričakovano opazovanje je bilo, da je spolno vedenje vplivalo na pERK, ki ga je povzročil Meth. Čeprav je Meth pomembno induciral koncentracijo pERK v parih in nedeminiranih skupinah, ki so jih injicirali meth, je bilo v NAc, BLA in ACA označevanje s pERK bistveno nižje pri samcih, ki so jih vbrizgali Meth, v primerjavi z moškimi, ki so jih vbrizgali Meth. (Slika 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Ta ugotovitev lahko dodatno podpira hipotezo, da spol in zdravila delujejo na iste nevrone, lahko pa tudi kažejo na spremembe v privzemanju ali presnovi zdravil, ki povzročajo parjenje, kar povzroča spremenjene nevralne odzive na Meth. Da bi raziskali, ali spolno vedenje povzroča drugačen časovni vzorec aktivacije, ki jo povzroči zdravilo, so bili odseki NAc, BLA in ACA obarvani za moške žrtvovane v kasnejši časovni točki (15 min) po dajanju zdravila (eksperiment 2).

Eksperiment 2: Analiza enojnih in dvojno označenih celic je potrdila zgoraj opisane ugotovitve, da je spolno vedenje in kasnejša izpostavljenost Meth 15 minutam pred žrtvovanjem povzročilo znatno povečanje imunološkega označevanja Fos in pERK v jedrnem jedru in lupini, BLA in ACA. Poleg tega so bila na teh območjih ponovno ugotovljena pomembna so-izražanje pECK, induciranih s parjenjem, Fos in Meth (Slika 4; paritveni učinek: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; učinek zdravila: F (1,12) = 14.11–54.41; p = 0.003- <0.001). Število dvojno označenih nevronov pri parjenih samcih, ki so jim injicirali met, je bilo znatno večje v primerjavi s parjenimi moškimi, zdravljenimi z metom (p <0.001), ali parjenimi s fiziološko raztopino (p <0.001). Ko so bili podatki izraženi v odstotkih nevronov, aktiviranih z zdravili, 47.2 ± 5.4% (jedro NAc), 42.7 ± 7.6% (lupina NAc), 36.7 ± 3.7% (BLA) in 59.5 ± 5.1% (ACA) aktiviranih nevronov s parjenjem aktiviral tudi Meth. Poleg tega se pERK, ki ga povzročajo zdravila, ni razlikoval med parjenimi in neparjenimi živalmi (Slika 4b, e, h, k), na vseh področjih, razen za ACA (p <0.001). Ti podatki kažejo, da spolno vedenje resnično povzroči spremembo časovnega vzorca indukcije pERK s strani Metha.

Slika 4      

Ekspresija FOS in Meth induciranega s spolom povzročena pERK ekspresija v NAc, BLA in ACA nevroni 15 min po dajanju 4 mg / kg Meth. Povprečne številke ± sem iz Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) in dvojne (c, f, i, l) označene celice v jedru NAc ( ...

Nevralna aktivacija po spolnem vedenju in 1 mg / kg met

Dosedanji rezultati so pokazali, da spolno vedenje in 4 mg / kg Meth aktivirata prekrivanje populacij nevronov v jedru NAc in lupini, BLA in ACA. To raziskati vpliv odmerjanja zdravila na to prekrivanje pri aktivaciji, preučevali smo tudi vzorce nevralne aktivacije z uporabo nižjega odmerka Meth. NAc jedro in lupino, BLA in ACA smo analizirali za aktivacijo, inducirano s spolom, in Meth. Dejansko sta spolno vedenje in kasnejša izpostavljenost Methu povzročila znatno povečanje imunološkega označevanja Fos in pERK v NAc jedrnih in lupinskih subregijah, BLA in nevronih v ACA regiji mPFC (Slika 5). Zanimivo je, da je nižji odmerek Met-a privedel do podobnega števila pERK-označenih nevronov, ki so bili inducirani z 4 mg / kg Meth v štirih analiziranih možganskih regijah. Še pomembneje, jedro NAc in lupina, BLA in ACA so pokazali znatno povečanje števila celic z dvojnim označevanjem (Slika 5c, f, i, l) v primerjavi z neparjenimi moškimi, ki so jim injicirali met (p = 0.003- <0.001). Ko so bili podatki izraženi v odstotkih nevronov, aktiviranih z zdravili, je bilo 21.1 ± 0.9% oziroma 20.4 ± 1.8% v jedru in lupini NAc, 41.9 ± 3.9% v BLA in 49.8 ± 0.8% nevronov ACA po spolu. in Meth.

Slika 5      

Ekspresija FOS in Meth induciranega s spolom povzročena pERK ekspresija v NAc, BLA in ACA nevroni 15 min po dajanju 1 mg / kg Meth. Povprečne številke ± sem iz Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) in dvojne (c, f, i, l) označene celice v jedru NAc ( ...

Nevronska aktivacija po spolnem vedenju in dajanje d-amfetamina

Da bi preverili, ali so zgornji rezultati specifični za Meth, je bil izveden dodatni poskus za proučevanje nevronske aktivacije, ki jo povzroča parjenje in Amph. Analiza enojnih in dvojno označenih celic za pERK in Fos je pokazala, da je spolno vedenje in kasnejša izpostavljenost Amphu povzročilo znatno povečanje imunološkega označevanja Fos in pERK v jedru NAc in lupini ter BLA (Slika 6; paritveni učinek: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016- <0.001; učinek zdravila: F (1,15) = 4.70-46.01; p = 0.047- <0.001). Poleg tega je bilo število dvojno označenih nevronov znatno večje pri parjenih, zdravljenih z Amph, v primerjavi z neparjenimi, zdravljenih z Amph (p = 0.009- <0.001), ali parjenih moških, zdravljenih s fiziološko raztopino (p = 0.015- <0.001) (Slika 6c, f, i). Kadar so bili podatki izraženi kot odstotki nevronov, aktiviranih z zdravilom, so bili 25.7 ± 2.8% in 18.0 ± 3.2% v NAc jedru in lupini oz. 31.4 ± 2.0% nevronov BLA aktivirani s parjenjem in Amph. Regija ACA za mPFC je pokazala pomembne ravni Fos-a, ki je povzročil parjenje (Slika 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Vendar pa Amph v nasprotju z metom ni povzročil znatnega povečanja ravni pERK, ki jo povzročajo zdravila, v ACA (Slika 6k) ali število dvojno označenih nevronov v ACA (Slika 6l) v primerjavi z moškimi, ki so bile vbrizgane s parjenim in nedomačenim slanicama.

Slika 6      

Ekspresija FOS in Amph-inducirana pERK, inducirana s spolom, v NAc, BLA in ACA nevroni 15 min po dajanju 5 mg / kg Amph. Povprečne številke ± sem iz Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) in dvojne (c, f, i, l) označene celice v jedru NAc ( ...

DISKUSIJA

Trenutna študija na celični ravni dokazuje prekrivanje med živčno aktivacijo z naravnim ojačitvenim spolnim vedenjem in psihostimulantom Meth. Zato ti podatki kažejo, da ne le droge delujejo na istih možganskih regijah, ki urejajo naravno nagrajevanje, ampak v resnici droge aktivirajo iste celice, ki sodelujejo pri regulaciji naravne nagrade. Natančneje, tukaj je bilo prikazano, da je spolno vedenje in Meth ko-aktiviralo populacijo nevronov v jedru NAc in lupini, BLA in ACA regiji mPFC, s čimer so identificirali potencialna mesta, kjer lahko Meth vpliva na spolno vedenje.

Trenutna ugotovitev, da spolno vedenje in dajanje Metha aktivira prekrivanje populacij nevronov v NAc, BLA in ACA, je v nasprotju z ugotovitvami iz drugih študij, ki kažejo, da različne populacije NAc nevronov kodirajo zdravilo in naravno nagrado.

Natančneje, elektrofiziološke študije, ki so primerjale živčno aktivacijo med samodejnim dajanjem naravnih nagrad (hrana in voda) in intravenskim kokainom, so pokazale, da je samouprava kokaina aktivirala diferencialno, neprekrivno populacijo nevronov, ki se na splošno ni odzivala med operantnim odzivom na vodo. in okrepitev hrane (92%). Samo 8% akumalnih nevronov je pokazalo aktivacijo s kokainom in naravno nagrado (Carelli et al., 2000).

Nasprotno, večina (65%) celic v NAc je pokazala aktivacijo z različnimi naravnimi nagradami (hrana in voda), tudi če je bil en ojačevalnik bolj okusen (saharoza) (Roop et al., 2002).

Nekateri dejavniki so morda prispevali k neskladju s trenutnimi rezultati. Najprej so bili uporabljeni različni tehnični pristopi za raziskovanje živčne dejavnosti. Sedanja študija je uporabila nevroanatomsko metodo za odkrivanje hkratne nevronske aktivacije z dvema različnima dražljajema z dvojno fluorescenčno imunocitokemijo za Fos in pERK, kar omogoča raziskovanje aktivacije posameznih celic v večjem razponu možganskih področij. V nasprotju s tem pa so študije, ki so jih izvedli Carelli in sodelavci, uporabljale elektrofiziološke posnetke, ki so bili omejeni na NAc živali, ki so se obnašale, da bi obravnavale, ali samouporaba drog zlorabe aktivira isto živčno vezje, ki ga uporabljajo naravne nagrade.

Drugič, sedanja študija je preučevala drugačno naravno nagrado, tj. Spolno obnašanje v primerjavi s prejšnjimi študijami, ki so uporabljale hrano in vodo v omejenih podganah (Carelli, 2000). Hrana in voda imajo lahko manjšo vrednost kot parjenje. Spolno obnašanje je zelo koristno in podgane zlahka oblikujejo CPP na kopulacijo (Agmo in Berenfeld, 1990, Martinez in Paredes, 2001, Tenk, 2008). Čeprav podgane z omejeno prehrano oblikujejo CPP za vodo (Agmo et al., 1993, Perks in Clifton, 1997) in hrano (Perks in Clifton, 1997), diet neomejene podgane po možnosti porabijo in oblikujejo CPP za bolj okusna živila (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

Tretjič, naše študije so vključevale različne zlorabe zdravil v primerjavi s prejšnjimi študijami, pri čemer so metamfetamin in amfetamin uporabljali namesto kokaina. Predstavljeni rezultati kažejo, da je specifično Meth in v manjši meri amfetamin povzročilo aktiviranje nevronov, ki se aktivirajo tudi s spolnim vedenjem. Tudi izkušnje z drogami so lahko vplivale na naše ugotovitve. V trenutnih študijah so uporabili živali, ki so bile spolno izkušene, vendar niso bile zdravljene. V nasprotju s tem pa so elektrofiziološke študije Carellija in sodelavcev uporabljale „dobro usposobljene“ živali, ki so bile ponovno izpostavljene kokainu.

Zato je možno, da se Meth-inducirana aktivacija nevronov, ki jih aktivira spolno vedenje, spremeni v podganah, ki so doživeli drogo. Vendar pa predhodne študije iz našega laboratorija kažejo, da izkušnja z drogami verjetno ne bo pomemben dejavnik, kot sta spolno vedenje in zdravljenje z metom pri moških, ki so kronično zdravljeni z Meth, ki so sočasno aktivirali podobne deleže nevronov, ki jih zdravi zdravilo, kot so poročali v sedanji študiji. (20.3 ± 2.5% v NAc jedru in 27.8 ± 1.3% v NAc lupini; Frohmader in Coolen, neobjavljena opazovanja).

Nazadnje, sedanja študija je raziskala "neposredno" delovanje zdravil, ki uporabljajo pasivno administracijo. Zato trenutna analiza ne razkriva informacij v zvezi z nevronskimi vezji, ki sodelujejo pri iskanju drog ali namigih, povezanih z nagrado za zdravila, ampak razkriva živčno aktivnost, ki jo povzroča farmakološko delovanje zdravila.. V prejšnjih elektrofizioloških študijah živčna aktivnost NAc, ki se pojavi v sekundah okrepljenih odzivov, ni posledica farmakološkega delovanja kokaina, ampak je močno odvisna od asociativnih dejavnikov znotraj paradigme samoupravljanja (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Natančno, na živčno aktivnost NAc vplivajo odzivi neodvisne predstavitve dražljajev, povezanih z intravensko dostavo kokaina, kot tudi z instrumentalnimi nepredvidenimi dogodki (tj. Pritiski vzvoda), ki so del te vedenjske paradigme (Carelli, 2000, Carelli in Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli in Wightman, 2004). Če povzamemo, so naše ugotovitve o ko-aktivaciji z naravno in zdravilno nagrado lahko specifične za aktivacijo s spolnim vedenjem in pasivno dajanje Meth in Amph.

Met in spol sta aktivirala prekrivanje populacij nevronov v jedru NAc in lupini na način, ki je odvisen od odmerka. Ko-aktivirani nevroni v NAc lahko posredujejo možne učinke Metha na motivacijo in nagrajevanje lastnosti spolnega vedenja, saj lezije NAc motijo ​​spolno vedenje (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Poleg tega so ti nevroni potencialno lokus za odvisne od odmerka učinkov zdravil na parjenje, ker je nižja doza Meth (1 mg / kg) zmanjšala število dvojno označenih celic z 50% v primerjavi z višjim odmerkom Meth (4 mg / kg). Čeprav ta študija ne opredeljuje kemičnega fenotipa so-aktiviranih nevronov, so prejšnje študije pokazale, da je izražanje pERK in Fos, povzročeno z zdravilom v NAc, odvisno od receptorjev dopamina (DA) in glutamata (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Čeprav ni jasno, ali je neuralna aktivacija v NAc odvisna od teh receptorjev, je bilo to dokazano na drugih področjih možganov, zlasti v medialnem predoptičnem območju (Lumley in Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). TMet, lahko deluje na nevrone, ki se aktivirajo tudi med spolnim vedenjem z aktiviranjem dopaminskih in glutamatnih receptorjev. Vloga NAc glutamata pri spolnem vedenju je trenutno nejasna, vendar je dobro ugotovljeno, da ima DA pomembno vlogo pri motivaciji za spolno vedenje. (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Študije mikrodialize so poročale o povečanju iztoka NAc DA med apetitivno in končno fazo spolnega vedenja pri moških (Fiorino in Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) in mezolimbični iztok DA je povezan z olajšanjem začetka in vzdrževanja spolnega vedenja pri podganah (Pfaus in Everitt, 1995). Nadalje, DA manipulacijske študije kažejo DA antagoniste v NAc inhibirajo spolno vedenje, medtem ko agonisti olajšujejo začetek spolnega vedenjar (Everitt et al., 1989, Pfaus in Phillips, 1989). Tako lahko Meth vpliva na motivacijo za spolno vedenje z aktivacijo DA receptorjev.

V nasprotju z NAc je število dvojno označenih celic v BLA in ACA ostalo relativno nespremenjeno ne glede na odmerek Met. BLA je kritična za diskretno asociativno učenje in je močno vključena v pogojno okrepitev in vrednotenje nagrajevanja med instrumentalnim odzivom (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Glej, 2002). Pri podganah, okuženih z BLA, je prišlo do zmanjšanja pritiska vzvoda za kondicionirane dražljaje, povezane s hranoEveritt et al., 1989) ali spolne ojačitve (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). V nasprotju s tem ta manipulacija ne vpliva na končno fazo hranjenja in spolnega vedenja (Cardinal et al., 2002). BLA ima tudi ključno vlogo v spominu pogojenih dražljajev, povezanih z draženjem drog (Grace in Rosenkranz, 2002, Laviolette in Grace, 2006). Lezije ali farmakološke inaktivacije BLA zavirajo pridobitev (Whitelaw et al., 1996) in izraz (Grimm in See, 2000) kondicirano kokainsko ponovno vzpostavitev, pri tem pa ne vpliva na proces uporabe drog. Poleg tega, Amph, infundiran neposredno v BLA, povzroči okrepljeno ponovno vzpostavitev zdravil ob prisotnosti pogojev (Glej et al., 2003). Zato je možno, da prenos DA DA, ki ga spodbuja psihostimulant, povzroči okrepljeno čustveno vidnost in iskanje (Ledford et al., 2003) spolnega nagrajevanja, s čimer prispevajo k povečanemu spolnemu nagonu in želji, o kateri poročajo zlorabniki Metha (Semple et al., 2002, Green in Halkitis, 2006).

V ACA je živčna aktivacija nevronov, aktiviranih s spolom, neodvisna od odmerka in specifična za Meth, saj ni bila opažena pri Amph. Čeprav imata Meth in Amph podobne strukturne in farmakološke lastnosti, je Meth močnejši psihostimulant kot Amph z dolgotrajnejšimi učinki (NIDA, 2006). Raziskave, ki so jih opravili Goodwin et al. je pokazalo, da Meth proizvaja večji iztok DA in bolj učinkovito zavira očistek lokalno uporabljenega DA pri podganah NAc kot Amph. Te lastnosti lahko prispevajo k zasvojenostim Meth v primerjavi z Amph (Goodwin et al., 2009) in morda nevronske aktivacijske razlike med obema zdraviloma. Vendar ni jasno, ali so različni vzorci rezultatov posledica razlik v učinkovitosti med zdravili ali vprašanji glede moči v zvezi z uporabljenimi odmerki in je potrebna nadaljnja preiskava.

Sočasna aktivacija z metom in spolom ni bila opažena v drugih subregijah mPFC (IL in PL). Pri podganah je bila ACA obsežno preučevana z apetitnimi nalogami, kar je prispevalo k vlogi v združenjih spodbud in ojačitev (Everitt et al., 1999, Glej, 2002, Cardinal et al., 2003). Obstajajo številni dokazi, da je mPFC vpleten v hrepenenje po drogah in ponovni pojav pri iskanju drog in obnašanju pri jemanju zdravil pri ljudeh in podganah. (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin in See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas in Volkow, 2005). V skladu s tem je bilo predlagano, da bi motnje v delovanju mPFC, ki jih povzroča ponavljajoča se izpostavljenost drogam, povzročilo zmanjšan nadzor impulzov in povečano vedenje, usmerjeno v droge, kot ga opazimo pri številnih odvisnikih. (Jentsch in Taylor, 1999). Nedavni podatki iz našega laboratorija so pokazali, da mPFC lezije vodijo v nadaljnje iskanje spolnega vedenja, kadar je to povezano z averzivno stimulacijo. (Davis et al., 2003). Čeprav ta študija ni raziskala ACA, podpira hipotezo, da mPFC (in ACA posebej) posredujeta učinke Metha na izgubo inhibitornega nadzora nad spolnim vedenjem, kot poročajo zlorabniki Meth (Salo et al., 2007).

Skratka, te študije skupaj predstavljajo ključni prvi korak k boljšemu razumevanju, kako zlorabe zdravil delujejo na živčne poti, ki običajno posredujejo naravne nagrade. Poleg tega te ugotovitve kažejo, da v nasprotju s trenutnim prepričanjem, da zloraba drog ne aktivira enakih celic v mezolimbičnem sistemu kot naravna nagrada, Meth in v manjši meri Amph aktivira iste celice kot spolno vedenje. Po drugi strani pa lahko te so-aktivirane nevronske populacije vplivajo na iskanje naravne nagrade po izpostavljenosti zdravilu. Končno, rezultati te študije lahko bistveno prispevajo k našem razumevanju temeljev odvisnosti na splošno. Primerjave podobnosti in razlik, pa tudi spremembe nevronske aktivacije mezolimbičnega sistema, ki jih sproži spolno vedenje v primerjavi z zlorabo drog, lahko vodijo k boljšemu razumevanju zlorabe snovi in ​​s tem povezanih sprememb v naravni nagradi.

Priznanja

To raziskavo so podprli štipendije Nacionalnih inštitutov za zdravje R01 DA014591 in kanadski inštituti za raziskave na področju zdravja RN 014705 za LMC.

KRATICE

  • ABC
  • kompleks avidin-biotin – hren peroksidaza
  • ACA
  • anteriorno področje cingulacije
  • Amph
  • d-amfetamin
  • BLA
  • bazolateralna amigdala
  • BNSTpl
  • posterolateralno jedro strie terminalis
  • BNSTpm
  • posteromedialno jedro strie terminalis
  • BT
  • biotiniliranega tiramida
  • CeA
  • cental amygdala
  • CPP
  • želeno mesto
  • E
  • ejakulacija
  • EL
  • latence ejakulacije
  • IF
  • infralimbično območje
  • IL
  • latenca za intromisijo
  • IM
  • vnašanje
  • M
  • mount
  • MAP kinaza
  • protein-aktivirana proteinska kinaza
  • MEApd
  • posterodorsalna medialna amigdala
  • meto
  • metamfetamin
  • ML
  • latence za mount
  • mPFC
  • medialna predfrontalna skorja
  • MPN
  • medialno preoptično jedro
  • NAc
  • nucleus Accumbens
  • PB
  • fosfatni pufer
  • PBS
  • fosfatni pufer
  • PEI
  • po ejakulacijskem intervalu
  • pERK
  • fosforilirane MAP kinaze
  • PL
  • predhodno območje
  • VTA
  • ventralno tegmentalno območje

Opombe

Omejitev odgovornosti založnika: To je PDF datoteka neurejenega rokopisa, ki je bil sprejet za objavo. Kot storitev za naše stranke nudimo to zgodnjo različico rokopisa. Rokopis bo podvržen kopiranju, stavljanju in pregledu dobljenega dokaza, preden bo objavljen v končni obliki. Upoštevajte, da se med proizvodnim procesom lahko odkrijejo napake, ki bi lahko vplivale na vsebino, in vse pravne omejitve, ki veljajo za revijo.

Reference

  1. Agmo A. Spolno vedenje samcev. Brain Res Brain Res Protoc. 1997, 1: 203 – 209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Okrepitev lastnosti ejakulacije pri samcih podgan: vloga opioidov in dopamina. Behav Neurosci. 1990, 104: 177 – 182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padova M, Velazquez G. Nagrada in okrepitev, pridobljena s pitno vodo: Vloga opioidov in podtipov dopaminskih receptorjev. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Spolno vedenje in spolni vplivi na okolje sprožijo mezolimbični sistem pri samcih podgan. Nevropsihofarmakologija. 2004, 29: 718 – 730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Povečana ekspresija c-fos v medialnem preoptičnem območju po parjenju pri samcih podgan: Vloga aferentnih vnosov iz medialne amigdale in osrednjega tegmentalnega polja srednjih možganov. Nevroznanost. 1992, 50: 627 – 646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Vloga prefrontalnega korteksa pri ponovni vzpostavitvi kokaina pri podganah zaradi stresa in kokaina. Psihofarmakologija (Berl) 2003, 168: 66 – 74. [PubMed]
  7. Kardinal RN, Parkinson JA, dvorana J, Everitt BJ. Čustva in motivacija: vloga amigdale, ventralnega striatuma in predfrontalne skorje. Nevroznanost in biološko vedenjski pregledi. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Kardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Vloga anterne cingularne skorje pri nadzoru obnašanja Pavlovih pogojenih dražljajev pri podganah. Vedenjska nevroznanost. 2003, 117: 566 – 587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Aktiviranje akumbensovega žganja celic z dražljaji, povezanimi z dostavo kokaina med samoupravo. Synapse. 2000, 35: 238 – 242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens sproži celice med ciljno usmerjenim vedenjem kokaina v primerjavi z "naravno" okrepitvijo. Fiziologija in vedenje. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selektivna aktivacija akumbensovih nevronov z dražljaji, povezanimi s kokainom, med večkratnim urnikom vode / kokaina. Raziskave možganov. 2001, 907: 156 – 161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Dokazi, da ločeni živčni krogi v nucleus accumbens kodirajo kokain v primerjavi z „naravno“ (vodo in hrano) nagrado. J Neurosci. 2000, 20: 4255 – 4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funkcionalna mikrocirkurnost v akumbensih, ki so osnova za zasvojenost z drogami: spoznanja iz signalizacije v realnem času med vedenjem. Trenutno mnenje o nevrobiologiji. 2004, 14: 763 – 768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selektivno kodiranje kokaina proti naravnim nagradam s strani nevronov nucleus accumbens ni povezano s kronično izpostavljenostjo zdravilom. J Neurosci. 2003, 23: 11214 – 11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Nevronski odzivi v prefrontalnem korteksu in nukleusnem akumbensu med samoupravljanjem heroina v prosto gibajočih se podganah. Brain Res. 1997, 754: 12 – 20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokain, vendar ne naravna nagrada Samouprava in pasivna infuzija kokaina zagotavlja trajno LTP v VTA. Neuron. 2008, 59: 288 – 297. [PMC brez članka] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Okrepljena Cdk5 aktivnost in p35 translokacija v Ventralnem Striatumu akutnih in kroničnih metamfetaminskih podgan. Nevropsihofarmakologija. 2004, 30: 538 – 549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbična aktivacija med kokainsko hrepenenjem, ki jo povzroča cue. Am J Psychiatry. 1999, 156: 11 – 18. [PMC brez članka] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamin poveča fosforilacijo zunajceličnih signal-reguliranih kinaznih in transkripcijskih faktorjev v striatumu podgane s pomočjo metabotropnih glutamatnih receptorjev skupine I. Nevropsihofarmakologija. 2002, 27: 565 – 575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII uravnava fosforilacijo, povzročeno z amfetaminom ERK1 / 2 v striatnih nevronih. Nevroport. 2002, 13: 1013 – 1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Društvo za vedenjsko nevroendokrinologijo. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoni in vedenje; 2003. Lezije medialnega prefrontalnega korteksa ne motijo ​​spolnega vedenja pri samcih podgan; str. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Zdravila, ki jih ljudje zlorabljajo, prednostno povečajo koncentracijo sinaptičnih dopamina v mezolimbičnem sistemu prosto gibajočih se podgan. Proc Natl Acad Sci US A. 1988, 85: 5274-5278. [PMC brez članka] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Parjenje aktivira receptorje NMDA v medialnem preoptičnem območju samcev podgan. Vedenjska nevroznanost. 2007, 121: 1023 – 1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Napovedniki spolnega tveganja pri novih uživalcih drog. Journal of sex research. 2006, 43: 318 – 327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmakoterapija zasvojenosti z metamfetaminom: posodobitev. Zloraba substanc. 2008, 29: 31 – 49. [PMC brez članka] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Spolna motivacija: nevronska in vedenjska analiza mehanizmov, na katerih temeljijo apetitni in kopulatorski odzivi moških podgan. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217 – 232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interakcije med amigdalo in ventralnim striatumom v asociacijah med stimulacijo in nagrajevanjem: Študije, ki uporabljajo urnik seksualnega ojačanja drugega reda. Nevroznanost. 1989, 30: 63 – 75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Študije o instrumentalnem obnašanju pri spolni ojačitvi pri samcih podgan (Rattus norvegicus): I. Kontrola s kratkimi vizualnimi dražljaji v kombinaciji s sprejemljivo žensko. J Comp Psychol. 1987, 101: 395 – 406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Pridružitveni procesi v odvisnosti in nagradi Vloga amigdala-ventralnih stratatalnih podsistemov. Anali Akademije znanosti v New Yorku. 1999, 877: 412 – 438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Študije o instrumentalnem obnašanju pri spolni ojačitvi pri samcih podgan (Rattus norvegicus): II. Učinki lezij predoptičnega območja, kastracija in testosteron. J Comp Psychol. 1987, 101: 407 – 419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, glej RE. Nevroskopi zasvojenosti: pregled. Br J Pharmacol. 2008, 154: 261 – 274. [PMC brez članka] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Ekspresija c-fos mRNA, ki jo povzroča amfetamin, v caudate-putamenu: učinki antagonistov receptorjev DA in NMDA variirajo kot funkcija nevronskega fenotipa in okoljskega konteksta. Journal of Neurochemistry. 2003, 86: 33 – 44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dinamične spremembe v izločanju dopamina iz jedrske celice pri učinku Coolidge pri samcih podgan. J Neurosci. 1997, 17: 4849 – 4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Spodbujanje spolnega obnašanja in povečanega dopaminskega iztoka v jedrnih akumulacijah moških podgan po pojavi senzibilizacije D-amfetamina. J Neurosci. 1999a, 19: 456 – 463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Spodbujanje spolnega vedenja pri podganjih samcih zaradi draženja vedenjske senzibilizacije, povzročene z d-amfetaminom. Psihofarmakologija. 1999b; 142: 200 – 208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamin in metamfetamin različno vplivata na dopaminske transporterje in vitro in in vivo. J Biol Chem. 2009, 284: 2978 – 2989. [PMC brez članka] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulacija pogojenih odzivov nevronov bazolateralne amigdale. Fiziologija in vedenje. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktiviranje pomnilniških vezij med kokainsko hrepenenjem. Proc Natl Acad Sci US A. 1996, 93: 12040-12045. [PMC brez članka] [PubMed]
  39. Zelena AI, Halkitis PN. Kristalni metamfetamin in spolna družbenost v urbani gejevski subkulturi: volilna afiniteta. Kultura, zdravje in spolnost. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, glej RE. Disociacija primarnih in sekundarnih limbičnih jeder, ki so pomembni za nagrajevanje, v živalskem modelu relapsa. Nevropsihofarmakologija. 2000, 22: 473 – 479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interakcije med hormoni in nevrotransmiterji pri nadzoru spolnega vedenja. Vedenjsko raziskovanje možganov. 1999, 105: 105 – 116. [PubMed]
  42. Trup EM, Meisel RL, Sachs BD. Moški spolno vedenje. V: Pfaff DW, et al., Uredniki. Hormoni Brain and Behavior. San Diego, CA: Elsevier Science (ZDA); 2002. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamin in serotonin: vplivi na moško spolno vedenje. Fiziologija in vedenje. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Učinki enkratne in ponavljajoče se dajanja metamfetamina ali morfina na izražanje negrogana C v podganjih možganih. International Journal of Neuropsychopharmacology. 2006, 9: 407 – 415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Kondicionirane preferencialne lokacije (CPP) za visoko kalorične „prigrizke“ v sevih podgan, genetsko nagnjene proti odpornosti proti debelosti, ki jo povzroča prehrana: Odpornost na blokado naltreksona. Farmakologija Biokemija in vedenje. 2007, 86: 699 – 704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Vpliv antagonizma opioidov na pogojene krajevne preference pri prigrizkih. Farmakologija Biokemija in vedenje. 2006, 83: 257 – 264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulzivnost, ki je posledica frontostriatne disfunkcije pri zlorabi drog: posledice za nadzor obnašanja s spodbudami, povezanimi z nagrajevanjem. Psihofarmakologija (Berl) 1999, 146: 373 – 390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Nevronske osnove odvisnosti: patologija motivacije in izbire. Am J Psychiatry. 2005, 162: 1403 – 1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Spomin in zasvojenost: skupna živčna vezja in molekularni mehanizmi. Neuron. 2004, 44: 161 – 179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. V nasprotju z vlogo nukleusa accumbens in anteriorno lateralne hipotalamične površine pri nadzoru spolnega vedenja pri samcih podgan. European Journal of Neuroscience. 2004, 19: 698 – 704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Kanabinoidi ojačajo emocionalno učno plastičnost v nevronah medialnega prefrontalnega korteksa skozi bazolateralne vhode amigdale. J Neurosci. 2006, 26: 6458 – 6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, glej RE. Okrepitev ponovne vzpostavitve kokainskega obnašanja po infuziji d-amfetamina v bazolateralno amigdalo. Nevropsihofarmakologija. 2003, 28: 1721 – 1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Ponavljajoče se izpostavljenosti namesto zmanjšujejo nagrajevalne učinke amfetamina, morfina in kokaina. Psihofarmakologija (Berl) 1989, 98: 357 – 362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Spolno obnašanje pri samcih podgan po radiofrekvenčnih ali dopaminskih poškodbah v nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998, 60: 585 – 592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Lateralni hipotalamični serotonin zavira nuklearne akumulacije Dopamin: posledice za spolno strpnost. J Neurosci. 1999, 19: 7648 – 7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Učinki antagonista D1 in spolne izkušnje na kopulacijsko inducirano imunološko reaktivnost Fos v medialnem preoptičnem jedru. Raziskave možganov. 1999, 829: 55 – 68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Samo podgane se nagrajujejo pri podganah obeh spolov. Horm Behav. 2001, 40: 510 – 517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, glej RE. Selektivna inaktivacija dorsomedialnega prefrontalnega korteksa in bazolateralne amigdale oslabi pogojeno obnavljanje ponavljajočega se vedenja pri iskanju kokaina pri podganah. Psihofarmakologija (Berl) 2003, 168: 57 – 65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Spodbujanje spolnega vedenja pri podganjih samcih v prisotnosti dražljajev, predhodno seznanjenih s sistemskimi injekcijami morfija. Farmakologija Biokemija in vedenje. 1990, 35: 367 – 372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Pravilnik o nagrajevanju metamfetamina s signalizacijsko potjo zunajcelične signalizirane kinaze 1 / 2 / ets-like Gene-1 z aktivacijo dopamin NIDA ( Serija poročil o raziskavah: zloraba metamfetamina in dodajanje 2006 NIH številka objave 06-4210.PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Prevrednotenje ojačevalnika in pogojena prednost kraja. Fiziologija in vedenje. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Poti spolne želje. Revija za spolno medicino. 2009, 6: 1506 – 1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psihofarmakologija spolnega vedenja. V: Bloom FE, Kupfer DJ, uredniki. Psihofarmakologija: četrta generacija napredka. New York: Raven; 1995. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Posledice takojšnje indukcije genov v možganih po spolni stimulaciji ženskih in moških glodalcev. Brain Research Bulletin. 1997, 44: 397 – 407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicioniranje in spolno vedenje: pregled. Horm Behav. 2001, 40: 291 – 321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Diferencialni učinki antagonistov dopaminskih receptorjev na spolno vedenje samcev podgan. Psihofarmakologija. 1989, 98: 363 – 368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Mezolimbični dopaminski sistem: zadnja skupna pot za okrepitev učinka zlorabe drog? Nevroznanost in biološko vedenjski pregledi. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Pitcher KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Spolne izkušnje povzročajo funkcionalno in strukturno plastičnost v mezolimbičnem sistemu. Biološka psihiatrija. 2009 V tiskalniku.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Nihanje dopamina v nukleusu accumbens med vzdrževanjem, izumrtjem in ponovno uvedbo intravenskega dajanja D-amfetamina. J Neurosci. 1999, 19: 4102 – 4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Droge in spolni učinki: vloga vrste droge in spol. Revija za zdravljenje zlorabe snovi. 2002, 22: 103 – 108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Spolno obnašanje poveča izražanje c-fos v predelu možganov samca. Brain Res. 1991, 564: 352 – 357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Aktivnost akumensov pri večkratnem urniku za ojačitev vode in saharoze pri podganah. Synapse. 2002, 43: 223 – 226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Kontrola pozornosti in nivoji možganskih presnovkov pri uživalcih metamfetamina. Biološka psihiatrija. 2007, 61: 1272 – 1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Kristalni metamfetamin in ekstazi se razlikujeta v odnosu do varnega seksa med mladimi geji. Kanadska revija javnega zdravja. 2005, 96: 340 – 343. [PubMed]
  75. Glejte RE. Nevronski substrati pogojene povratne reakcije na vedenje, ki išče zdravilo. Farmakologija Biokemija in vedenje. 2002, 71: 517 – 529. [PubMed]
  76. Glej RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Zasvojenost z drogami, relaps in amigdala. Anali Akademije znanosti v New Yorku. 2003, 985: 294 – 307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivacije, povezane z uporabo metamfetamina med moškimi, ki imajo spolne odnose z moškimi. Revija za zdravljenje zlorabe snovi. 2002, 22: 149 – 156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Povratni model ponovitve zdravil: zgodovina, metodologija in glavne ugotovitve. Psihofarmakologija (Berl) 2003, 168: 3 – 20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Preobčutljivost na pogojene učinke kokaina: farmakološke in časovne značilnosti. J Pharmacol Exp Ther. 1995, 273: 808 – 815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Preobčutljivost na pogojene učinke morfina: farmakologija in časovne značilnosti. Eur J Pharmacol. 1996, 299: 33 – 39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Napovedniki tveganega vedenja proti virusu HIV v skupnostnem vzorcu moških in žensk, ki uporabljajo droge. AIDS in vedenje. 2003, 7: 383 – 393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, bela D, Kelder S. Uporaba metamfetamina in spolno tveganje v srednješolskih učencih v ZDA: ugotovitve iz nacionalne raziskave tveganja obnašanja. Preprečevanje znanosti. 2007, 8: 103 – 113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Učinki dopaminskih in NMDA receptorjev na kokainsko inducirano Fos ekspresijo v striatumu Fischerjevih podgan. Raziskave možganov. 2008, 1243: 1 – 9. [PMC brez članka] [PubMed]
  84. Swanson LW, urednik. Zemljevidi možganov: struktura možganov pri podganah. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Spolna nagrada pri samcih podgan: Učinki spolnih izkušenj na pogojene pogoje, povezane z ejakulacijami in intromisijami. Horm Behav. 2008 [PMC brez članka] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Strani C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Vključevanje ekstracelularne signalno regulirane kaskade kinaze za lastnosti, ki nagrajujejo kokain. J Neurosci. 2000, 20: 8701 – 8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Strani C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Zdravila, ki povzročajo odvisnost, in zdravila, ki ne povzročajo zasvojenosti, povzročajo posebne in specifične vzorce aktivacije ERK v mišjih možganih. Eur J Neurosci. 2004, 19: 1826 – 1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Regulacija kaskade proteinske fosfataze omogoča konvergentne dopaminske in glutamatne signale za aktiviranje ERK v striatumu. Proc Natl Acad Sci US A. 2005, 102: 491-496. [PMC brez članka] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Spremembe dopaminergičnega in glutamatergičnega prenosa pri indukciji in izražanju vedenjske senzibilizacije: kritični pregled predkliničnih študij. Psihofarmakologija (Berl) 2000, 151: 99 – 120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Nevronska aktivacija po spolnem vedenju v možganih samcev in samic. Vedenjsko raziskovanje možganov. 1998, 92: 181 – 193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Eksitotoksične spremembe bazolateralne amigdale ovirajo pridobivanje obnašanja, ki išče kokain, po urniku okrepitve drugega reda. Psihofarmakologija. 1996, 127: 213 – 224. [PubMed]
  92. Wise RA. Nevrobiologija odvisnosti. Trenutno mnenje o nevrobiologiji. 1996, 6: 243 – 251. [PubMed]