Prekomerna uporaba kokaina je posledica zmanjšane fazne signalizacije dopamina v striatumu (2014).

Nat Neurosci. Avtorski rokopis; na voljo v PMC 2016 Jan 15.

Objavljeno v končni obliki:

PMCID: PMC4714770

NIHMSID: NIHMS574802

Končno urejena različica tega članka založnika je na voljo na Nat Neurosci

Glej komentarIzguba faznega signala dopamina: nov označevalec odvisnosti"V Nat Neurosci, zvezek 17 na strani 644.

Oglejte si druge članke v PMC quote objavljeni članek.

Minimalizem

Zasvojenost z drogami je nevropsihiatrična motnja, ki jo zaznamuje stopnjevanje uživanja drog. Nevrotransmisija dopamina v ventromedialnem striatumu (VMS) posreduje akutne okrepitvene učinke zlorabljenih zdravil, vendar naj bi pri dolgotrajni uporabi dorsolateralni striatum (DLS) prevzel nadzor nad iskanjem drog. Izmerili smo strijalno sproščanje dopamina med režimom dajanja kokaina, ki je povzročil stopnjevanje jemanja drog pri podganah. Presenetljivo smo ugotovili, da se je fazni dopamin zmanjšal v obeh regijah, ko se je hitrost uživanja kokaina povečala; pri čemer je znižanje dopamina v VMS znatno povezano s hitrostjo stopnjevanja. Dajanje prekurzorja dopamina L-DOPA v odmerku, ki je obnavljal dopaminsko signalizacijo v VMS, je spremenil stopnjevanje in s tem pokazal vzročno zvezo med zmanjšanim prenašanjem dopamina in prekomerno uporabo drog. Tako skupaj ti podatki zagotavljajo mehanični in terapevtski vpogled v čezmerni vnos drog, ki se pojavi po dolgotrajni uporabi.

UVOD

Zloraba drog je tesno povezana z sproščanjem dopamina v striatumu,. Vendar pa se z uživanjem drog v nevrotransmisiji dopamina razlikujejo po trajanju in podregiji-. Počasi narašča zunajcelična koncentracija dopamina v ventromedialnem striatumu (VMS), ki ga spodbujajo številna zloraba drog, vključno s kokainomse domneva, da odražajo okrepitvene lastnosti zdravil, saj živali uravnavajo hitrost kokaina, da bi ohranile povišano koncentracijo dopamina v okolju. V okviru VMS so poročali o prekrivajočih se domnevnih vlogah dopaminskega signalizacije v jedru in lupini podregij nukleusov, vendar s poudarkom na lupini za posredovanje primarne nagrade za zdravilo in jedru, ki deluje kot substrat za pogojeno okrepitev. Dejansko je fazno sproščanje dopamina v jedru jedra, ki traja nekaj sekund, pogojeno s predstavitvijo okoljskih dražljajev, ki so bili večkrat seznanjeni z zdravilom- in je sposoben nadzirati iskanje in jemanje drog. Kodiranje tako pogojenih dražljajev z sproščanjem dopamina najdemo tudi v senzimotornih vidikih striatuma (dorsolateralni striatum, DLS)striatalno podregijo, ki je bila povezana z razvojem običajnega in kompulzivnega iskanja drog-. Tako se šteje, da napredovanje drog, ki presegajo rekreacijsko uporabo, odraža vključitev signala dopamina v različnih progastnih podregijah,, s poudarkom na prehodu iz limbičnega (VMS) v senzimotornega (DLS) striatuma med razvojem ustaljenega vedenja, ki išče drogo,. Vendar ni znano, ali se kodiranje ukrepov, povezanih z drogami, ali dražljajev s faznimi spremembami dopamina, ko se zmerno vedenje drog stopnjeva.

Paradigme glodavcev, za katere velja, da najbolje modelirajo prehod od zmerne uporabe drog do zasvojenosti, uporabljajo dolgotrajnejši dostop do droge,, kot je razširitev dostopa z ene (kratek dostop, ShA) na šest ur (dolg dostop, LgA) na dan v obdobju nekaj tednov. Takšen režim samo-dajanja zdravil lahko povzroči stopnjevanje in kompulzivno iskanje drog, med drugimi kardinalnimi simptomi, ki so značilni za odvisnost od snovi pri ljudeh. Tu smo preizkusili, kako LgA do kokaina vpliva na regionalno dinamiko faznega signala dopamina v striatumu, ki je bil prej značilen med stabilno uporabo drog ShA za boljše razumevanje nevrobioloških mehanizmov, na katerih temelji eskalacija uživanja drog.

REZULTATI

Moške podgane Wistar z nameščenimi intravenskimi katetri so bile usposobljene za samoprimerno dajanje kokaina med vsakodnevnimi sejami SHA, po pridobitvi pa so bile preusmerjene na seje LgA v komorah, opremljenih z dvema odprtinama z nosom. Nosni tlak v aktivno pristanišče je sprožil infuzijo kokaina (0.5 mg / kg / infuzija) in 20-jevo predstavitev dražljaja s svetlobnim tonom v določenem časovnem obdobju okrepitve (FI) 20. Odzivi v drugem (neaktivnem) pristanišču z nosom ali v aktivnem pristanišču med predstavitvijo dražljaja (časovni izid 20-a) niso bili programirani. Za namene poročanja se odzivi iz nosnega pokosa v aktivnem pristanišču zunaj časovnega obdobja (tj. Tisti, ki so sprožili infuzijo kokaina) označujejo kot „aktivni pokrovi iz nosu“, tisti v neaktivnem pristanišču zunaj časovnega obdobja pa kot „neaktivni nos pokuka ”. Število aktivnih udarcev v nosu je znatno preseglo neaktivne nosne udarce (glavni učinek vratnega potisnega nosu: F(1, 23) = 383.226, P <0.001; Slika 1) vsak teden (P <0.001). Po prehodu s ShA na LgA se je vnos kokaina sčasoma znatno povečal (glavni učinek tedna: F(3, 69) = 25.504, P <0.001; Slika 1), kot dosledno poročajo številni drugi.

Slika 1 

Eskalacija drog v tednih

Za oceno dolgoročne dinamike prenosa dopamina so bili izvedeni vzdolžni nevrokemični posnetki hkrati v jedru jedra VMS in v DLS na kronično vgrajenih mikrosenzorjih z uporabo ciklične voltammetrije s hitrim skeniranjem (gl Dodatna slika 1 za histološko preverjanje namestitve elektrod). V prvem tednu LgA smo opazili prehodno povečanje koncentracije zunajceličnega dopamina v VMS po aktivnih odzivih (P <0.001; Slika 2a). Ta vzorec aktivacije se je zmanjšal med LgA, kjer je bilo sproščanje dopamina v tretjem tednu bistveno manjše kot v prvem (P <0.001) in drugi (P = 0.030) tednov (glavni učinek tedna: F(2,72) = 10.230, P <0.001; Slika 2b). Fazično sproščanje dopamina v DLS se je pojavilo v drugem tednu (P = 0.006; Slika 2c), vendar je bil odsoten v tretjem tednu LgA (glavni učinek tedna: F(2,51) = 3.474, P = 0.039; interakcija med poker × tedni: F(2,51) = 4.021, P = 0.024; Sl. 2c, d). Ti podatki kažejo, da fazni signali dopamina v VMS in DLS nastajajo zaporedno v različnih fazah jemanja drog, podobno tistemu, kar smo poročali za SHA režim. Vendar se je ta signalizacija v LgA v obeh regijah zmanjšala, to je obdobje, v katerem je znano, da se farmakokinetika intravensko danega kokaina ne spreminja,.

Slika 2 

Dopaminska signalizacija v VMS in DLS tekom tednov

Da bi preizkusili razmerje med izgubo dopaminske signalizacije in stopnjevanjem porabe drog, smo izkoristili posamezne razlike v dovzetnosti za stopnjevanje samo-dajanja zdravil med režimom LgA tako, da smo živali ločili v dve skupini, odvisno od tega, ali so pokazali znatno stopnjevanje na podlagi linearne regresija uživanja drog med sejami LgA ali ne (Sl. 3a, b). Validacija te ločitve živali je pokazala, da živali, ki niso eskalirane, v treh tednih LgA niso pokazale večjega povečanja aktivnih nosnih nos (glavni učinek v tednu: F(2,18) = 0.633, P = 0.542; Slika 3b, levo), medtem ko so stopnjevane podgane znatno povečale svoj vnos (glavni učinek v tednu: F(2,26) = 14.826, P <0.001; Slika 3b, prav; vnos × tedenska interakcija: F(2,44) = 4.674, P = 0.014), ki v tretjem tednu LgA ustvarja bolj aktivne nosne trse kot neeskalirane živali (t(22) = 2.307, P = 0.031; Slika 3b). Zlasti so stopnjevane živali pokazale povečano motivacijo za pridobivanje kokaina, kar je razvidno iz naloge progresivnega razmerja (P = 0.028; Dodatna slika 2). Pri eskaliranih podganah je prišlo do občutnega upada sproščanja dopamina v VMS (glavni učinek v tednu: F(2,51) = 15.507, P <0.001; Slika 3c, prav in Dodatna slika 3a). Vendar je bilo sproščanje dopamina VMS stabilno pri podganah, ki niso eskalirane (glavni učinek v tednu: F(2,18) = 0.057, P = 0.945; Slika 3c, levo in Dodatna slika 4a) dodelitev bistveno več faznega dopamina v tretjem tednu v primerjavi z eskaliranimi podganami (glavni učinek vnosa: F(1,69) = 6.444, P = 0; Slika 3d, levo; vnos × tedenska interakcija: F(1,70) = 4.303, P = 0.042). Ta razlika v sproščanju dopamina med podganimi eskaliranimi in neeskaliranimi podganami je bila opazna v celotnih šestih urah samo-dajanja (t(43) = 2.599, P = 0.013). Pomembno je, da do te razlike ni prišlo zaradi splošnega upada funkcije dopamina pri eskaliranih živalih, saj se sproščanje dopamina po infuzijah kokaina, ki niso posledica pogoja, s poskusi, ni razlikovalo med neeskaliranimi in eskaliranimi živalmi (P = 0; Dodatna slika 5a).

Slika 3 

Posamezne razlike v vedenju jemanja drog in strijalne dopaminske signalizacije

V nasprotju z vzdrževanim faznim sproščanjem dopamina v VMS neeskalirajočih podgan smo prej poročali, da je pri živalih, ki so bile tri tedne omejenega dostopa do kokaina (SHA), le eno uro na dan, zmanjšalo sproščanje dopamina. Zato smo izvedli dodatne analize podatkov, pridobljenih pri teh podganah SHA, da bi omogočili podrobno opredelitev razmerja med delovanjem dopamina in zaužitjem drog med živalmi, ki so bile pod samo-dajanjem kokaina s SHA ali LgA. Medtem ko ni opaziti bistvenega povečanja povprečnega uživanja drog med živalmi med SHA, so bile posamezne razlike pri podskupini živali (6 16), ki so pokazale znatno povečanje vnosa drog v treh tednih samo-dajanja kokaina ShA. Zanimivo je, da se fazni dopamin VMS v tretjem tednu samokopiranja kokaina SHA v skupini živali, ki so ohranile stabilno uživanje drog (tj. Niso pokazale znatnega stopnjevanja), ni bistveno razlikoval od tistega, ki ni bil eskaliran v tretjem tednu LgA (P = 0.741; Dopolnilna slika 5b). Živali ShA, ki so povečale vnos drog, so pokazale nižje stopnje uživanja drog (32.7 ± 3.9 v primerjavi z infuzijami 43.9 ± 3.1 v prvi uri, P = 0.017) in manj oslabljeno sproščanje dopamina (P = 0.049; Dopolnilna slika 5b) kot živali, ki so povečale svoj vnos pod LgA pogoji. Kljub temu pa je prišlo do nepomembnega trenda za zmanjšanje dopamina VMS v primerjavi z njihovimi neeskalirajočimi kolegami (P = 0.094) in ni bilo pomembne interakcije za sproščanje dopamina sčasoma med podganimi eskalirajočimi podganami SHA in LgA (brez interakcije v režimu vnosa ×: F(1,57) = 0.111 P = 0.740; Dopolnilna slika 5b). Glede na te individualne razlike smo izvedli regresijsko analizo pri vseh podganah ShA in LgA, da bi preverili, ali obstaja neposredna povezava med ravni dopamina in stopnjo stopnjevanja in ugotovili pomembno negativno povezanost (podgane ShA in LgA skupaj; r = −0.628 , P = 0.005) z največjim stopnjevanjem pri živalih, ki so imele najnižji izpust dopamina v tednu 3 (Slika 3e, levo). Zato je oslabitev signala dopamina v VMS napovedovala stopnjevanje režimov samoopravljanja drog prek režimov LgA in ShA za dostop do zdravil. Ti podatki poudarjajo, da je germanski vidik, povezan s spremembami sproščanja dopamina, ne glede na to, ali živali eskalirajo ali ne, ne pa s samoplačniškim režimom, ki so jim bili izpostavljeni po sebi. Prav tako ugotavljamo, da je stopnjevanje pri vseh podganah pomemben napovedovalec večje motivacije za kokain (P = 0.037, Dodatna slika 6a), vendar LgA / ShA režima ni, kot je ocenjeno v načrtu progresivnega razmerja (P = 0.340, Dopolnilna slika 6b).

V nasprotju z VMS se sproščanje dopamina, ki je pogojeno z odzivom, v DLS ni razlikovalo med eskaliranimi in neeskaliranimi LgA živalmi (glavni učinek vnosa: F(1,48) = 0.472, P = 0; Slika 3d, prav in Dopolnilne fige. 3b in 4b) niti ni bilo bistvenega razmerja med naklonom eskalacije in sproščanjem dopamina med živalmi, ki so bile podvržene SHA ali LgA kokainu (r = −0.112, P = 0.649; Slika 3e, prav). Torej, medtem ko je dopamin v VMS koreliral s stopnjevanjem jemanja drog, podobne korelacije ni bilo opaziti v DLS, možganskem predelu, ki je bil široko povezan s podaljšano samo-dajanjem zdravil.,,,.

Glede na to provokativno povezavo med nevrokemijo in vedenjem smo domnevali, da je upad faznega signala dopamina vzrok za povečanje jemanja drog, podobno povečanju jemanja zdravil, ki jih proizvajajo antagonisti receptorjev dopamina.-in tako obnovitev bi povzročila preobrat v stopnjevanju (Slika 4a). Zato smo obravnavali stopnjevane živali (P = 0.024; Slika 4b) z L-DOPA pred sejo začnite povečati fazno sproščanje dopamina. Odvisno od odmerka L-DOPA (0, 10, 30 in 90 mg / kg, intravensko) se je zmanjšal vnos kokaina (glavni učinek L-DOPA: F(3,53) = 5.053, P = 0.004; Slika 4b), z 30 mg / kg, ki vrača vnos na predhodno stopnjo. Pomembno je, da je odmerek L-DOPA 30 mg / kg zadostoval za popolno obnovo fazne signalizacije dopamina v VMS (glejte Dodatna slika 7 za mesta snemanja) med jemanjem drog (F(2,8) = 6.316, P = 0.023; Slika 4c), učinek opažen tudi v polnih šestih urah samoupravljanja (F(2,8) = 7.610, P = 0.0141). Tako je količina faznega sproščanja dopamina v VMS napovedala količino zaužitega zdravila med sejo samo-dajanja kokaina (r = −0.525, P = 0.046; Slika 4d). Tega vedenjskega učinka L-DOPA ni mogoče razložiti s spremembami farmakološkega odziva na kokain, saj počasne spremembe koncentracije dopamina VMS po infundiranju pogojnih drog niso bile spremenjene z zdravljenjem z L-DOPA in se dejansko niso razlikovale med stopnjevanje, stopnjevanje in stopnjevali L-DOPA zdravljenih stanj (F(2,8) = 0.020, P = 0.980; Dodatna slika 8). Poleg tega so vpliv L-DOPA na uživanje drog opazili tudi, ko je bil L-DOPA lokalno infuziran v VMS (glej Dodatna slika 9 za mesta infuzije eskaliranih podgan pred sejo (t(7) = 6.517, P <0.001; Slika 4e). Skupaj ta skup študij dokazuje, da je en odmerek L-DOPA, uporabljen pred dostopom do drog, učinkovit pri obnavljanju signala dopamina in normalizaciji uporabe kokaina v predhodno stopnjevano stanje.

Slika 4 

L-DOPA zmanjšuje stopnjevani vnos drog z obnavljanjem sproščanja dopamina VMS

Nato smo preizkusili, ali bi bila uporaba L-DOPA učinkovita pri zmanjševanju stopnjevanega uživanja zdravil v dolgoročnih režimih odmerjanja, bolj pomembnih za klinične aplikacije. Najprej smo izvedli poskuse, ki so uvedli ponavljajočo infuzijo L-DOPA zaporedno dni med indukcijo eskalacije. Živali so bili usposobljeni za stabilno samo-dajanje kokaina, nato pa bodisi preklopili na LgA ali ostali na SHA, v tem času pa so jim pred vsakim odborom dva tedna injicirali L-DOPA (30 mg / kg, intravensko) ali fiziološko raztopino (Slika 5a). L-DOPA je pomembno vplival na vnos zdravil na način, ki je odvisen od režima (glavni učinek zdravljenja: F(1,53) = 9.297, P = 0.004; glavni učinek režima: F(1,53) = 5.968, P = 0.018; Slika 5a) z zmanjšanim vnosom kokaina pri živalih z LgA (P = 0.004), ne pa živali SHA (P = 0.170; Slika 5a) in brez vpliva na neaktivne pokrčke iz nosu (LgA, P = 0.202; ShA, P = 0.101; podatki niso prikazani). Zato je bilo zdravljenje z L-DOPA učinkovito pri preprečevanju stopnjevanja porabe drog med LgA. Vendar po prenehanju zdravljenja ta učinek ni trajal (P = 0.789; Slika 5a). Drugič, večkrat smo dajali L-DOPA zaporedno pri živalih z ugotovljenim stopnjevanim uživanjem drog. Živali so bili usposobljeni za stabilno samo-dajanje kokaina in so nato bodisi prešli na LgA bodisi tri tedne ostali na SHA. Te živali so bile v tretjem tednu zdravljene z L-DOPA ali fiziološko raztopino pred samozdravljenjem (Slika 5b). Živali, trenirane z LgA, so v prvih dveh tednih znatno povečale uporabo kokaina v primerjavi z živalmi, treniranimi s SHA (glavni učinek režima: F(1,51) = 15.706, P <0.001; podatki niso prikazani). Zdravljenje z L-DOPA je povzročilo režim, specifičen učinek (glavni učinek zdravljenja: F(1,51) = 5.303, P = 0.025; glavni učinek režima: F(1,51) = 11.884, P = 0.001; Slika 5b), zmanjšuje vnos kokaina pri živalih z LgA (P = 0.048), ne pa živali SHA (P = 0.210; Slika 5b) brez neučinkovitega odzivanja (LgA, P = 0.641; ShA, P = 0.664). Pomembno je, da je bil diferencialni učinek L-DOPA na aktivne nosne trse močnejši, ko so bile živali razvrščene v stopnjevane in neeskalirane, namesto ShA in LgA (eskalirane živali, P = 0.005; neeskalirane živali, P = 0.421; Slika 5c), kar kaže, da je L-DOPA prednostno zmanjšal povečan vnos kokaina, ne pa da bi vplival na uživanje drog po sebi, interakcija, ki se je razvila skozi dneve (vnos × zdravljenje (dan 1) interakcija: F(1,51) = 0.562, P = 0.457; toda vnos × zdravljenje (dnevni 5) interakcija: F(1,51) = 4.091, P = 0.048). Pomembno je, da se te razlike med eskaliranimi in neeskaliranimi podpopulacijami, kot tudi učinki odstranjevanja akutne in kronično vodene L-DOPA opažajo tudi v vseh šestih urah samo-dajanja (Dodatna slika 10). Skupaj te ugotovitve kažejo, da se pri živalih, ki povečujejo vnos kokaina, povečuje fazično sproščanje dopamina in ga obnovijo s ponavljajočim se dajanjem predhodnika dopamina, L-DOPA, prepreči in obrne to stopnjevanje, kar zagotavlja dokaze, da zmanjšano dopamin poganja stopnjevanje samo-dajanja drog.

Slika 5 

L-DOPA preprečuje in obrne stopnjevanje vnosa drog

DISKUSIJA

V tej študiji smo raziskovali fazno sproščanje dopamina v VMS in DLS med stopnjevanjem vnosa drog, pojav, ki modelira ključni diagnostični kriterij odvisnosti od drog,. Naše ugotovitve kažejo, da je stopnjevanje povezano z zmanjšano signalizacijo dopamina tako v VMS kot DLS, pri čemer je znižanje dopamina v VMS znatno povezano s hitrostjo stopnjevanja. Videti je, da je ta učinek selektiven za fazni dopamin, saj v trenutni študiji, ki je uporabljala enak režim pri podganah, v tonik dopaminu niso opazili primerljivih sprememb. ali s tem povezane paradigme samoupravljanja pri primatih razen človeka,. Obstajalo je več poročil o zmanjšanem delovanju faznega dopamina med odtegnitvijo drog (testirano med urami 18 in sedmimi dnevi od zadnje seje za samoplačniško uporabo), kar je povezano z zmanjšano občutljivostjo na kokain-. Medtem ko smo opazili podobno zmanjšanje odziva na dopamin na kokain med podganami SHA in LgA (Dodatna slika 5a) se zdi, da ta učinek ni pomemben za stopnjevanje, saj se nevrokemični odziv na nepredvideni kokain ne razlikuje med podganami, ki so se stopnjevale, in tistimi, ki niso (brez interakcije v režimu vnosa ×: F(1,34) = 1.964 P = 0.170; Dodatna slika 5a). Podobno se največje spremembe koncentracije tonika dopamina do 90 sekunde po kontingentu kokaina, verjetno zaradi farmakoloških ukrepov kokaina, niso razlikovale med predhodno eskaliranim in eskaliranim stanjem pri istih živalih (Dodatna slika 8). Tako je bil edini vidik prenosa dopamina, ki smo ga opazili, ki je napovedoval stopnjevanje vnosa drog, fazni odziv, ki se je pojavil takoj po aktivnem pokoku iz nosu, kar je pogojen odziv predvsem na zdravila, povezane z drogami,,. Ta nevrokemični odziv se je pri živalih, ki so povečali vnos drog, zmanjšal, kar spominja na običajni proces učenja, kjer se sproščanje dopamina v VMS, ki ga povzroči spodbuda, povezana z nagradami, zmanjša, ko postane dražljaj časovno predviden,. Vendar pa se slabljenje sproščanja dopamina med samo-dajanjem zgodi veliko pozneje v učnem procesu, kot bi bilo pričakovati pri učenju ob nepredvidenih dogodkih, dolgo po pridobitvi ustaljenega jemanja drog. Poleg tega pri živalih, ki ne povečujejo vnosa drog, ne pride do zmanjšanja faznega sproščanja dopamina, čeprav imajo te živali asimptotično diskriminatorno instrumentalno vedenje.

Zdi se, da so naša opažanja upadajočega sproščanja dopamina med napredovanjem uživanja drog v nasprotju z nekaterimi sodobnimi teorijami zasvojenosti. Teorije, ki se osredotočajo na procese spodbujevalne stimulacije, povzročene z drogami, predpostavljajo povečanje reaktivnosti dopaminskega sistema VMS ob večkratni izpostavljenosti zlorabam drog, ki posredujejo senzibilizirani odziv na izpostavljenost drogam in iztočnic, pojav, ki je po LgA posebej močan. Konceptualizacije vloge odklonskega učenja in oblikovanja navad pri odvisnosti od drog kažejo, da nastajajoča dopaminska signalizacija v DLS vedno bolj prevzame nadzor nad iskanjem drog,,. Poleg tega ugledni računski modeli zasvojenosti izrecno implicirajo povečano signalizacijo dopamina na table, povezane z drogami, kot gonilno silo k zasvojenosti,. Nasprotno pa se zdi, da so naše ugotovitve bolj skladne s hipotezo o odvisnosti od izločanja dopamina, ki sta jo predlagala Dackis in Goldin z njimi povezane teorije nasprotniškega procesa ki poudarjajo zatiranje postopkov, povezanih z nagrajevanjem, zaradi zlorabe drog. Takšno zatiranje je domnevalo, da povzroča kompenzacijsko samoregulacijo uživanja drog, da bi se ohranila prednostna stopnja zastrupitve z drogami. Zlasti ljudje in živali kompenzirajo znižane odmerke kokaina s povečanim odzivom,. Ta postopek ureja prenos dopamina v VMS in posledično znižanje prenosa dopamina (npr. z antagonizmom dopaminskih receptorjev) povzroči povečanje hitrosti uživanja drog,. Zato lahko zmanjšanje signala dopamina, ki smo ga opazili med LgA, spodbudi kompenzacijsko uravnavanje vnosa drog za dosego želene stopnje zastrupitve. V podporo tej hipotezi je bilo zmanjšanje dopamina v VMS najbolj izrazito pri živalih, ki so imele večje stopnje jemanja drog.

Tako smo sklenili, da bi obnova prenosa dopamina zmanjšala stopnjevanje. Dejansko je bila uporaba zdravila L-DOPA učinkovita tako pri preprečevanju kot tudi pri preobrazbi stopnjevanja vnosa zdravil. Zlasti učinki L-DOPA na uporabo drog niso prenehali po prekinitvi zdravljenja, kar kaže na to, da ne preprečuje osnovne nevroadaptacije. Zato naši podatki kažejo, da stopnjevanje posreduje proces, ki se kaže skozi zmanjšanje faznega dopamina med jemanjem drog. Te ugotovitve zagotavljajo mehanistične informacije o uporabi L-DOPA pri kliničnem zdravljenju zlorabe psihostimulantov, strategije, ki je prinesla nekaj obetavnih, a na splošno mešanih rezultatov v majhnem številu zadnjih kliničnih preskušanj. Ker je L-DOPA zmanjšal stopnjevanje uporabe drog, ne da bi povzročal abstinenco, predlagamo, da je bolj primeren za pristope k zmanjševanju škode in zlasti odvisnikom omogoči, da ob vstopu v programe vedenjske terapije ponovno obvladajo stopnjo nadzora nad svojo uporabo. Na splošno naše ugotovitve kažejo na zmanjšanje faznega sproščanja dopamina med dolgotrajnim dostopom drog, ki posreduje premik od rekreacijske do nenadzorovane uporabe drog.

Metode

živali

Odrasle moške podgane Wistar iz reke Charles (Hollister, Kalifornija, ZDA), ki tehtajo med 300g in 400g, so bile nameščene posamično in jih hranijo v temenskem ciklu 12-h / 12-h (prižge se pri 0700) z nadzorovano temperaturo in vlažnostjo s hrano in voda na voljo ad libitum. Vso uporabo živali je odobril Odbor za institucionalno oskrbo in uporabo živali Univerze v Washingtonu, kirurški posegi pa so bili izvedeni v aseptičnih pogojih. V eksperimentih z voltammetrijo so bile živali z operacijo 50, pri katerih je 29 v celotnih poskusih ohranil prehodnost katetra, imel vsaj eno funkcionalno in histološko preverjeno elektrodo in opravil vedenjska merila (glej spodaj). Za farmakološki eksperiment so v raziskavi uporabili zdravilo 28 podgan 32, ki so opravili implantacijo katetra, ohranili intravensko prehodnost katetra. Živali so bile uravnovešene v eksperimentalne skupine glede na stopnjo njihove samouprave med pred eksperimentalnim treningom SHA. Velikosti vzorcev so podobne tistim, ki so jih poročali v prejšnjih publikacijah.

Stereotaksična kirurgija

Podgane so anestezirali z izofluranom, postavili v stereotaksični okvir, dajali so mu nesteroidni protivnetni karprofen (5 mg / kg, subkutano) in postavili na izotermalno blazinico za vzdrževanje telesne temperature. Lasišče smo brisali z alkoholom in betadinom, kopali z mešanico lidokaina (0.5 mg / kg) in bupivakaina (0.5 mg / kg) ter sekali, da bi izločili lobanjo. V lobanji so bile izvrtane luknje in trta maternica je bila očiščena za ciljanje DLS (1.2-mm spredaj, 3.1-mm bočno in 4.8-mm ventral do Bregme) in jedro akumulira jedro VMS (1.3-mm spredaj, 1.3-mm bočno in 7.2-mm ventralno do Bregme). Eden mikroelektrov iz ogljikovih vlaken, ki so ga izdelali sami je bila nameščena v VMS in druga v DLS, v ločen del sprednje možgane pa je bila vsadljena Ag / AgCl elektroda. Pri drugem nizu živali so bile vodilne kanilole (merilnik 26; Plastics One, Roanoke, VA, ZDA), zamašene s "lutkastimi" kanelami enake dolžine, dvostransko vsadljene za ciljanje na VMS. Elektrode in vodilne kanile so bili z vijaki pritrjeni s kranioplastičnim cementom, pritrjenim na lobanjo. Po operaciji so podganam dodelili nesteroidni protivnetni karprofen z dolgotrajnim delovanjem (5 mg / kg, subkutano) in ga namestili na izotermalno blazinico za vzdrževanje telesne temperature do ambulantne terapije. Vsem živalim so vsadili intravenske katetre med ločenim operativnim posegom teden dni kasneje.

Implantacija intravenskih katetrov

Podgane so anestezirali z izofluranom, jih dajali z nesteroidnim protivnetnim karprofenom (5 mg / kg, subkutano) in jih polagali na izotermično blazinico za vzdrževanje telesne temperature. Katetri so bili izdelani iz silastičnih cevi z zunanjim premerom 0.6 mm in pritrjeni na "pesto" na enem koncu (distalno od vstavitve ven; Plastics One, VA, ZDA) za povezavo z infuzijsko črpalko. Katetri so bili podkožno potisnjeni skozi rez na hrbtu med rameni do sprednjega dela telesa in pritrjeni v desno vratno veno s pomočjo kroglice iz silikonske gume v bližini proksimalnega konca katetra. Optimalno postavitev katetra je bila preverjena z odvzemom krvi vanj z negativnim tlakom. Nato je bilo pesto pritrjeno s kosom teflonske mreže, prišit na okoliško tkivo, in rezi so bili zaprti, pesta pa so štrleli iz hrbta podgane. Nato se kateter spere z raztopino heparina (80 U / ml v fiziološki raztopini) in napolni z viskozno raztopino polivinilpirolidona (PVP) in heparina (1000 U / ml). Pesta katetra je bila zaprta s kratkim, stisnjenim kosom polietilenskih cevi, raztopina PVP pa je ostala v katetru, da se zagotovi prehodnost. Po operaciji so lahko podgane okrevale vsaj pet dni.

Samoupravljanje kokaina

Seje za samo-administracijo so potekale med 0900 in 1700 hr. Podgane so se naučile samoupravljanja kokaina (Sigma, St. Louis, MO, ZDA) v modularni operacijski dvorani (Med Associates, VT, ZDA), opremljeni z dvema napravama za odziv na nos (pot z vgrajenimi lučmi), nameščenimi na sosednjih ploščah iste stene, hišna lučka in zvočniki za zagotavljanje dražljajev čistega tona in belega hrupa. Izvajalska komora je bila nameščena znotraj zvočno oslabljene zunanje komore. Podgane (stare 3 – 4 mesece) so bile usposobljene za pridobivanje kokaina po operativnem odzivu na načrtu okrepitve FI20. Zatiranje nosu v aktivnem pristanišču (stransko uravnovešeno med živalmi) je povzročilo takojšnjo intravensko infuzijo kokaina (0.5 mg / kg v približno desetih sekundah), povezano s 20-drugo predstavitvijo avdiovizualnega dražljaja (osvetlitev svetlobe znotraj nosu luk za pokanje in ton; pogojen dražljaj, CS). Med predstavitvijo CS-ja je bil uveden drugi izid 20, med katerim pokadanje nosu ni povzročilo nadaljnjih infuzij drog ali drugih programiranih posledic. Razpoložljivost zdravil med sejo je bila označena z belim hrupom in osvetlitvijo hišne luči. Da bi nadzirali specifičnost odziva, smo spremljali nosno pot drugega (neaktivnega) pristanišča, vendar ga nikoli nismo okrepili. Po predhodnih treningih s kriterijem petih ali več aktivnih odzivov na sejo na dveh zaporednih sejah za vključitev v študijo so podgane dnevno dobivale dostop do kokaina po eno uro na dan (kratek dostop; ShA) en teden in nato šest ure na dan (dolg dostop; LgA) tri tedne (pet dni na teden). Število sej za dosego merila je bilo med živalmi od dveh do petih sej. Rezultati vedenja predhodno poročane kontrolne skupine so bili uporabljeni kot izhodiščna točka za primerjavo vedenjskih podatkov pri podganah, ki so bile pod samoodvajanjem kokaina LgA, in podganami, usposobljenimi v režimu SHA v enakem številu dni.

Po treh tednih SHA ali LgA samo-dajanja kokaina FI20 je bila podvrsta podgan testiranje progresivnega razmerja. Te seje so bile enake sejam FI20, le da so morale živali med to sejo opraviti vse več operacijskih odzivov na zaporedne infuzije kokaina. Zahteva za operaterja za vsako preskušanje (T) je zaokroženo navzdol celo število 1.4(T - 1) vzvod stiskalnice, ki se začne na 1 vzvodne pritiskom (ki je, 1, 1, 1, 2, 3, 5, 7, 10, 14, 20, 28, 40, 56, 79, 111, 155, 217, 304, 426) . Ta delovna zahteva postane tako velika, da se živali sčasoma nehajo odzivati ​​in dosežejo „prelomno točko“. Točka preloma je bila operativno določena kot skupno število infuzij, prejetih pred tridesetminutnim obdobjem, v katerem niso bile pridobljene nobene infuzije.

Uporaba L-DOPA / Benserazida

L-DOPA (L-3,4-dihidroksifenilalanin) je bil dodeljen v kombinaciji s periferno delujočim zaviralcem DOPA dekarboksilaze Benserazid, da se zmanjša periferni razpad L-DOPA (oba iz Sigma, St. Louis, MO, ZDA). Obe zdravili sta bili raztopljeni v fiziološki raztopini in infundirani intravensko v prostornini 1 ml / kg telesne teže. L-DOPA so dajali 30 minut pred začetkom seje pri 0, 10, 30 ali 90 mg / kg, medtem ko so Benserazid dosledno dajali pri 2 mg / kg, ne glede na odmerjeni odmerek L-DOPA. V prvem sklopu študij (odziv na odmerek) so podgane zdravili z L-DOPA en sam dan (Slika 4). Noben od uporabljenih odmerkov L-DOPA ni zaviral splošne učinkovitosti ali povzročil diskinezije. Da bi se izognili potencialno zmedenim učinkom ponavljajočega dajanja L-DOPA, so podgane po »seji L-DOPA« usposabljali brez zdravljenja z L-DOPA. V drugem nizu raziskav so živali zdravile s temi L-DOPA pred vsako sejo samo-dajanja v obdobju do dveh tednov (Slika 5). V tretjem nizu raziskav, pri podganah, ki so med LgA pokazale stopnjevano samokokacijo kokaina, so bili učinki dvostranske infuzije L-DOPA (25 – 50 µg, raztopljene v 0.5 µl ACSF v vsako poloblo; 0.25 µl / min; Sigma, St. Louis, MO, ZDA) in ACSF v VMS o obnašanju drog. V dneh infuzije je bila lutka kanile nadomeščena z infuzijsko kanilo kalibra 33, ki štrli 1.0 mm čez vodilno kanilo. Infuzije so bile dane deset minut pred začetkom seje. Po infuziji so kanile dve uri pred odstranitvijo pustili na mestu, da je omogočila difuzijo zdravila.

Voltammetrične meritve in analize

Za odkrivanje dopamina s hitrim skeniranjem ciklične voltammetrije med poskusnimi sejami (posnetki, opravljeni med dvema sedanjima na teden), so bili kronično vsadljeni mikrosenzorji iz ogljikovih vlaken povezani z glavo vgrajenim voltammetričnim ojačevalnikom, povezanim s sistemom za zajem in analizo podatkov, ki ga poganja računalnik. (National Instruments, TX, ZDA) s pomočjo električnega vrtenja (Med Associates, VT, ZDA), ki je bil nameščen nad preskusno komoro. Voltammetrične preglede smo ponavljali vsakih 100 ms, da smo dosegli hitrost vzorčenja 10 Hz. Med vsakim voltammetričnim pregledom je bil potencial na elektrodi iz ogljikovih vlaken linearno povečan od −0.4 V proti Ag / AgCl do + 1.3 V (anodni posnetek) in nazaj (katodni zamah) pri 400 V / s (skupni čas skeniranja 8.5-ms) ) in se hrani med −0.4 V med pregledovanjem. Kadar je dopamin prisoten na površini elektrode, se med anodnim pomikom oksidira, da tvori dopamin-o-kinon (najvišjo reakcijo odkrijemo pri približno + 0.7 V), ki se v katodnem pomiku zmanjša v dopamin (pik reakcija je zaznana pri približno –0.3 V). Nastali tok elektronov se meri kot tok in je sorazmeren številu molekul, ki so podvržene elektrolizi. Voltammetrični podatki so filtrirali pasovno frekvenco pri 0.025 - 2,000 Hz. Odšteta, časovno ločena tok, dobljena pri vsakem pregledu, je dala kemijski podpis, ki je značilen za analit, kar omogoča ločitev dopamina iz drugih snovi. Dopamin smo izolirali iz voltammetričnega signala s kemometrično analizo s standardnim vadbenim setom temelji na električno stimuliranem sproščanju dopamina, ki ga zaznajo kronično vsadljene elektrode. Koncentracija dopamina je bila ocenjena na podlagi povprečne občutljivosti elektrod po implantaciji. Pred analizo povprečne koncentracije so bili vsi podatki zglajeni s točko 5 v preskusnem tekočem povprečju. Koncentracija dopamina je bila povprečna v sedmih sekundah (približno trajanje opazovanega faznega signala) po operativnem odzivu (po odzivu) ali nepredvideni predstavitvi CS in je bila primerjana s povprečno koncentracijo v dveh sekundah pred operantom odziv (izhodišče). CS je bil predstavljen brezpogojno med vsako snemanje, ki je bilo opravljeno v drugem in tretjem tednu (dvakrat na sejo po 20 sekund vsak), vendar ne v prvem tednu, da bi se izognili motnjam asociativnega pogoja med dostavo drog in iztočnico v obdobju kjer se je verjetno to združenje še razvijalo.

Statistična analiza

Posamezne elektrokemijske signale smo povprečno upoštevali med samo-dajanjem, nato pa preko živali in tednov, da bi povečali statistično moč. Signale smo primerjali z uporabo multivariatnih ANOVA z odzivom, možgansko regijo, vnosom kokaina in tednom kot dejavniki. Za primerjavo z elektrokemičnimi podatki so bili vedenjski podatki razvrščeni tudi v tedne. Pri eksperimentih z L-DOPA so bili vedenjski podatki (v povprečju čez dneve, če jih dajemo zaporedoma) ustreznega zdravljenja z zdravili (brez zdravljenja, odmerka L-DOPA ali nosilca) analizirali z uporabo multivariatnih ANOVA z zdravljenjem z drogami, režimom treninga, vnosom kokaina, in teden kot dejavniki. V primeru pomembnih glavnih učinkov ali interakcij so bile opravljene post-hoc analize in P vrednosti so bile za večkratno testiranje prilagojene po metodi korekcije Holm-Bonferroni. Načrti so bili narejeni s pomočjo Prism (GraphPad Software, La Jolla, CA, ZDA). Statistične analize so bile izvedene z uporabo SPSS, različice 17.0 (Chicago, IL, ZDA) in Prism. Podatki so primerni za parametrično statistično analizo. Zbiranje in analiza podatkov ni bila izvedena slepo za pogoje poskusov.

Histološka verifikacija snemalnih mest

Po zaključku eksperimentiranja smo živali anestezirali z intraperitonealno injekcijo ketamina (100 mg / kg) in ksilazina (20 mg / kg). Pri živalih z elektronskimi vsadki so bila mesta pred zapisovanjem perkardijalne perfuzije s fiziološko raztopino označena z elektrolitično lezijo (300 V), ki ji je sledil 4% -paraformaldehid. Možgani so bili odstranjeni in pritrjeni v paraformaldehidu štiriindvajset ur in nato hitro zamrznjeni v izopentanski kopeli, narezani na kriostat (50-µm koronalni odseki, −20 ° C) in obarvani z vijolico krezilom, da pomagajo pri vizualizaciji anatomske strukture in mesta, ki jih povzročajo elektrode, lezije ali infuzije.

Priznanja

Zahvaljujemo se Scottu Ng-Evansu, Christini Akers Sanford, Chadu Zietzu, Nicole Murray in Danielu Hadidiju za tehnično podporo ter Monici Arnold in Jeremyju Clarku za koristne povratne informacije. To delo je podprla Nemška raziskovalna fundacija (Deutsche Forschungsgemeinschaft, DFG), štipendija WI 3643 / 1-1 (IW), nagrade Inštituta za alkohol in droge (PEMP) ter prostojnik Univerze v Washingtonu (PEMP) in Nacionalni inštituti zdravstvenih donacij T32-DA027858 (LMB), F32-DA033004 (PAG), P01-DA015916 (PEMP), R21-DA021793 (PEMP) in R01-DA027858 (PEMP).

Opombe

Avtorski prispevki

IW in PEMP sta zasnovali raziskave, IW, LMB in PAG izvajali raziskave in IW analizirali podatke; IW in PEMP sta prispevek napisala.

 

Podatki o avtorju

Avtorji ne izražajo navzkrižja interesov.

 

Reference

1. Everitt BJ, Robbins TW. Okrepitev nevronskih sistemov zaradi odvisnosti od drog: od dejanj do navad do prisile. Naravna nevroznanost. 2005; 8: 1481 – 1489. [PubMed]
2. Di Chiara G, Bassareo V. Sistem nagrajevanja in zasvojenost: kaj dopamin počne in česa ne. Trenutno mnenje v farmakologiji. 2007; 7: 69–76. [PubMed]
3. Di Chiara G. Nucleus obdaja lupino in jedro dopamina: diferencialna vloga v vedenju in odvisnosti. Vedenjske raziskave možganov. 2002; 137: 75 – 114. [PubMed]
4. Ito R, Dalley JW, Howes SR, Robbins TW, Everitt BJ. Disocijacija pri pogojnem sproščanju dopamina v jedru in jedru obdaja odziv na odziv na kokain in med obnašanjem kokaina pri podganah. J Nevrosci. 2000; 20: 7489 – 7495. [PubMed]
5. Ito R, Dalley JW, Robbins TW, Everitt BJ. Sprostitev dopamina v dorzalnem striatumu med vedenjem kokaina pod nadzorom izvlečka droge. Časopis za nevroznanost: uradna revija Društva za nevroznanost. 2002; 22: 6247 – 6253. [PubMed]
6. Di Chiara G, Imperato A. Zdravila, ki jih ljudje zlorabljajo, prednostno povečujejo sinaptične koncentracije dopamina v mezolimbičnem sistemu prosto gibajočih se podgan. Zbornik Nacionalne akademije znanosti Združenih držav Amerike. 1988; 85: 5274 – 5278. [PMC brez članka] [PubMed]
7. Wise RA, MA Bozarth. Teorija odvisnosti od psihomotornih stimulansov. Psihološki pregled. 1987; 94: 469 – 492. [PubMed]
8. Wise RA, et al. Nihanja v jedru zmanjšujejo koncentracijo dopamina med intravenskim dajanjem kokaina pri podganah. Psihoparmakologija. 1995; 120: 10 – 20. [PubMed]
9. Phillips PEM, Stuber GD, Heien ML, Wightman RM, Carelli RM. Podsekunda sproščanja dopamina spodbuja iskanje kokaina. Narava. 2003; 422: 614 – 618. [PubMed]
10. Stuber GD, Roitman MF, Phillips PEM, Carelli RM, Wightman RM. Hitro dopaminsko signaliziranje v jedru se pojavlja med dajanjem kokaina zaradi pogojnih in nekvalitetnih snovi. Nevropsihoparmakologija. 2005; 30: 853 – 863. [PubMed]
11. Stuber GD, Wightman RM, Carelli RM. Izumrtje kokaina, ki ga dajemo sami, razkriva funkcionalno in časovno ločene dopaminergične signale v jedru jedra. Neuron. 2005; 46: 661 – 669. [PubMed]
12. Owesson-White CA, et al. Nevronsko kodiranje vedenja, ki išče kokain, sovpada s faznim sproščanjem dopamina v jedru in lupini. Eur J Nevrosci. 2009; 30: 1117 – 1127. [PMC brez članka] [PubMed]
13. Willuhn I, Burgeno LM, Everitt BJ, Phillips PEM. Hierarhično novačenje faznih signalov dopamina v striatumu med napredovanjem uživanja kokaina. Zbornik Nacionalne akademije znanosti Združenih držav Amerike. 2012; 109: 20703 – 20708. [PMC brez članka] [PubMed]
14. Bela NM. Zasvojenost z drogami kot ojačevalci: več delnih ukrepov na spominske sisteme Zasvojenost 1996; 91: 921 – 949. razprava 951 – 965. [PubMed]
15. Robbins TW, Everitt BJ. Zasvojenost z drogami: seštevajo se slabe navade. Narava. 1999; 398: 567 – 570. [PubMed]
16. Berke JD, Hyman SE. Zasvojenost, dopamin in molekularni mehanizmi spomina. Neuron. 2000; 25: 515 – 532. [PubMed]
17. Kalivas PW, Volkow ND. Nevronska osnova zasvojenosti: patologija motivacije in izbire. Ameriški časopis za psihiatrijo. 2005; 162: 1403 – 1413. [PubMed]
18. Porrino LJ, Smith HR, Nader MA, Beveridge TJ. Učinki kokaina: spreminjajoča se tarča v času odvisnosti. Napredek na področju nevro-psihofarmakologije in biološke psihiatrije. 2007; 31: 1593–1600. [PMC brez članka] [PubMed]
19. Deroche-Gamonet V, Belin D, Piazza PV. Dokazi za podobnost odvisnosti pri podganah. Znanost. 2004; 305: 1014 – 1017. [PubMed]
20. Vanderschuren LJ, Everitt BJ. Iskanje mamil postane dolgotrajno vsiljeno po dolgotrajni uporabi kokaina. Znanost. 2004; 305: 1017 – 1019. [PubMed]
21. Ahmed SH, Koob GF. Prehod z zmernega na prekomerni vnos drog: sprememba hedonske nastavljene vrednosti. Znanost. 1998; 282: 298 – 300. [PubMed]
22. Jonkman S, Pelloux Y, Everitt BJ. Vnos drog zadostuje, vendar kondicioniranje ni potrebno za pojav kompulzivnega kokaina po dolgotrajni uporabi. Nevropsihoparmakologija. 2012; 37: 1612 – 1619. [PMC brez članka] [PubMed]
23. DSM-IV-TR. Diagnostični in statistični priročnik duševnih motenj. Vol. IV. Ameriško psihiatrično združenje; 2000.
24. Zernig G in sod. Pojasnitev stopnjevanja uporabe drog v odvisnosti od snovi: modeli in ustrezni laboratorijski testi na živalih. Farmakologija. 2007; 80: 65 – 119. [PubMed]
25. Clark JJ in sod. Kronični mikrosenzorji za vzdolžno, subsekundno odkrivanje dopamina pri živalih, ki se obnašajo. Naravne metode. 2010; 7: 126 – 129. [PMC brez članka] [PubMed]
26. Pan HT, Menacherry S, Justice JB., Jr Razlike v farmakokinetiki kokaina pri podivjanih in kokainskih podganah. Časopis za nevrokemijo. 1991; 56: 1299 – 1306. [PubMed]
27. Ahmed SH, Lin D, Koob GF, Parsons LH. Eskalacija samokopiranja kokaina ni odvisna od spremenjenega jedra, ki ga povzroča kokain, povečuje raven dopamina. Časopis za nevrokemijo. 2003; 86: 102 – 113. [PubMed]
28. De Wit H, Wise RA. Blokada okrepitve kokaina pri podganah z zaviralcem dopaminskih receptorjev pimozidom, vendar ne z noradrenergičnimi zaviralci fenolaminom ali fenoksibenzaminom. Kanadski časopis za psihologijo. 1977; 31: 195 – 203. [PubMed]
29. Ettenberg A, Pettit HO, Bloom FE, Koob GF. Intravensko dajanje heroina in kokaina pri podganah: posredovanje po ločenih nevronskih sistemih. Psihoparmakologija. 1982; 78: 204 – 209. [PubMed]
30. Robledo P, Maldonado-Lopez R, Koob GF. Vloga dopaminskih receptorjev v jedru se pojavlja v koristnih lastnostih kokaina. Anali newyorške akademije znanosti. 1992; 654: 509 – 512. [PubMed]
31. Wightman RM in sod. V realnem času karakterizacija preliva in vnosa dopamina v striatumu podgane. Nevroznanost. 1988; 25: 513 – 523. [PubMed]
32. Bradberry CW. Akutna in kronična dinamika dopamina v nečloveškem modelu primatov rekreacijske uporabe kokaina. J Nevrosci. 2000; 20: 7109 – 7115. [PubMed]
33. Kirkland Henry P, Davis M, Howell LL. Vplivi anamneze kokaina na zgodovino pod omejenimi in podaljšanimi pogoji dostopa na in vivo strikalno nepametrijo dopamina in akustični zastoj pri rezijanskih opicah. Psihoparmakologija. 2009; 205: 237 – 247. [PMC brez članka] [PubMed]
34. Mateo Y, pomanjkanje CM, Morgan D, Roberts DC, Jones SR. Zmanjšana terminalna funkcija dopamina in neobčutljivost za kokain, ki se uporablja za samoocenjevanje in pomanjkanje kokaina. Nevropsihoparmakologija. 2005; 30: 1455 – 1463. [PubMed]
35. Ferris MJ in sod. Kokainska samoporaba povzroča farmakodinamično toleranco: različni učinki na učinkovitost zaviralcev, dovajalcev za prenašanje dopamina in metilfenidata. Nevropsihoparmakologija. 2012; 37: 1708 – 1716. [PMC brez članka] [PubMed]
36. Calipari ES in sod. Metilfenidat in kokainska samoporaba povzročata izrazite spremembe dopaminskih terminalov. Biologija odvisnosti 2012 [PMC brez članka] [PubMed]
37. Calipari ES, Ferris MJ, Zimmer BA, Roberts DC, Jones SR. Časovni vzorec vnosa kokaina določa toleranco proti občutljivosti učinkov na kokain pri prevozniku dopamina. Nevropsihoparmakologija. 2013; 38 [PMC brez članka] [PubMed]
38. Schultz W, Dayan P, Montague PR. Nevronski substrat napovedovanja in nagrajevanja. Znanost. 1997; 275: 1593 – 1599. [PubMed]
39. Clark JJ, Collins AL, Sanford CA, Phillips PEM. Kodiranje dopamina s Pavlovilovimi spodbujevalnimi dražljaji se s podaljšanim treningom zmanjšuje. J Nevrosci. 2013; 33: 3526 – 3532. [PMC brez članka] [PubMed]
40. Robinson TE, Berridge KC. Nevronska osnova hrepenenja po drogah: spodbujevalno-senzibilizacijska teorija odvisnosti. Raziskave možganov Pregledi možganskih raziskav. 1993; 18: 247 – 291. [PubMed]
41. Ferrario CR, et al. Nevronska in vedenjska plastičnost, povezana s prehodom od nadzorovane do stopnjevane uporabe kokaina. Biološka psihiatrija. 2005; 58: 751 – 759. [PubMed]
42. Rdečkasto AD. Zasvojenost kot računalniški postopek je šla zgrešena. Znanost. 2004; 306: 1944 – 1947. [PubMed]
43. Keramati M, Gutkin B. Neuravnotežena hierarhija odločanja pri odvisnikih, ki izhajajo iz spiralnega vezja dopamina, ugrabljenega z drogami. PloS ena. 2013; 8: e61489. [PMC brez članka] [PubMed]
44. Dackis CA, Gold MS. Novi koncepti v odvisnosti od kokaina: hipoteza o izčrpanju dopamina. Nevroznanost in biobehevioralni pregledi. 1985; 9: 469 – 477. [PubMed]
45. Lynch WJ in sod. Paradigma za raziskovanje regulacije samoupravljanja kokaina pri ljudeh, ki uživajo kokain: naključno preskušanje. Psihoparmakologija. 2006; 185: 306 – 314. [PubMed]
46. Pickens R, Thompson T. Obnašanje s podpornimi kokainom pri podganah: učinki velikosti ojačitve in velikosti s fiksnim razmerjem. Časopis za farmakologijo in eksperimentalne terapevtike. 1968; 161: 122 – 129. [PubMed]
47. Mariani JJ, Levin FR. Psihostimulantno zdravljenje odvisnosti od kokaina. Psihiatrične klinike Severne Amerike. 2012; 35: 425 – 439. [PMC brez članka] [PubMed]