Sistem opioidov v medialnem prefrontalnem korteksu posreduje v prehranjevalni obliki (2013).

Addict Biol. 2013 Jan 24. doi: 10.1111 / adb.12033.

Blasio A, Steardo L, Sabino V, Koton P.

vir

Laboratorij za Zasvojenost Motnje, Oddelki za farmakologijo in psihiatrijo, Medicinska šola Univerze v Bostonu, Boston, MA, ZDA.

Minimalizem

Binge eating disorder je bolezen zasvojenostipodobne motnje, za katero je značilna prekomerna hrana porabi v določenih časovnih obdobjih.

Ta študija je bila namenjena razumevanju vloge opioidnega sistema v medialnem prefrontalnem korteksu (mPFC) v konzumatornih in motivacijskih vidikih prehranjevanja. V ta namen smo izurili moške podgane, da dobimo sladko, zelo okusno hrano (Podkladljive podgane) ali hrano (Chow podgane) za 1 uro / dan.

Potem eovrednotili učinke antagonista opioidnega receptorja, naltreksona, danega bodisi sistemsko ali lokalno specifično v nucleus accumbens (NAcc) ali mPFC na fiksno razmerje 1 (FR1) in progresivni razpored razmerja ojačitve za hrana.

Končno smo ocenili ekspresijo genov proopiomelanokortin (POMC), pro-dinorfina (PDyn) in pro-enkefalina (PEnk), ki kodirajo peptide opioidov v NAcc in mPFC v obeh skupinah.

Okusne podgane so svoj vnos hitro povečale za štirikrat. Naltrekson pri sistemski uporabi v NAcc zmanjšuje odzivnost FR1 hrana in motivacija za jedo pod progresivnim razmerjem tako pri podganah Chow kot pri Palatable; nasprotno, pri dajanju v mPFC so bili učinki zelo selektivni za podgane, ki so jedle podgane. Poleg tega smo ugotovili dvojno povečanje POMC in ∼50% zmanjšanje izražanja gena PDyn v mPFC Palatable podgan v primerjavi s kontrolnimi podganami; vendar v NAcc niso opazili sprememb.

Naši podatki kažejo, da se nevroadaptacije opioidnega sistema v mPFC pojavljajo po prekinitvi dostopa do zelo prijetnih okusov hrana, ki so lahko odgovorni za razvoj prehranjevanja.

Predstavitev

Motnjo prehranjevanja je značilno prekomerno in nenadzorovano uživanje hrane zelo okusne hrane v kratkem času (; ; ). Preiskovanci, ki se soočajo s popivanjem, opisujejo kot izgubo nadzora med prekomerno porabo hrane, kar vodi v neprijetno polnost in intenzivne občutke gnusa in zadrege (). Motnja hranjenja zaradi napitkov se pogosto pojavlja v sočasni bolezni z več boleznimi, kot so debelost, sladkorna bolezen, bolezni srca in ožilja ter druge psihične motnje (; ).

Veliko je bilo vloženega v poskus izoliranja dejavnikov, ki prispevajo k razvoju prejedanja (; ). Splošno sprejeta hipoteza o etiologiji prenajedanja temelji na kvalitativni izmeni okusnosti hrane. Dejansko lahko omejitev na "varno" hrano z nizko okusno hrano, ki jo običajno zaznavajo kulturne norme za tankost ali zdravje, lahko spodbudi hrepenenje po bolj privlačni okusni hrani in spodbuja prenajedanje. Sistematična izmenjava okusnih okusov torej povzroči samostojen začaran krog porabe vzorcev pihanja / omejitve (; ), ki postavlja vprašanje, ali lahko motnjo hranjenja zaradi prenajedanja štejemo za motnjo odvisnosti od podobnosti (; ; ; ).

Trenutno ni na voljo učinkovitih farmakoterapij za motnje prehranjevanja, čeprav so predlagani različni eksperimentalni cilji (; ). Opioidni sistem velja za eno glavnih tarč zdravljenja motenj hranjenja že od 1970-ov zaradi zgodnjih opazovanj, da so opioidni antagonisti, kot sta naltrekson in nalokson, lahko zmanjšali vnos hrane (). Poznejši dokazi so pokazali, da je opioidni sistem sodeloval pri dvosmerni modulaciji prehranjevalnega vedenja, glede na sposobnost morfija, da poveča apetit pri podganah s hrano in brez prikrajšanja (). Od teh začetnih opažanj je bila razjasnjena pomembna vloga opioidnega sistema pri posredovanju okusnosti hrane, obširni dokazi pa kažejo, da je jedro accumens (NAcc) ključno območje, ki posreduje pri teh učinkih (). Novejše študije kažejo, da je opioidna modulacija hedonske porabe hrane v NAcc del bolj zapletene mreže, ki vključuje več možganskih struktur, vključno s predfronto-kortikalnimi regijami ().

Čeprav obsežna raziskava poudarja primarno vlogo opioidnega sistema pri modulaciji okusnosti in hedonskemu hranjenju, specifično območje možganov, pri katerem opioidni sistem posreduje jedi, podobno prehranjevanju, še vedno ni znano.

Zato je bil cilj te študije ugotoviti, ali lahko opioidni antagonist naltrekson, ki ga sistemsko dajemo, zmožen zaužiti uživanje in motivacijo za pridobivanje zelo okusne hrane v modelu prehranjevanja, podobnega piku podgan. V ta namen smo uporabili na novo razvit model operantov, kjer podgane samoupravljajo zelo okusno, sladko prehrano pod omejenimi pogoji dostopa (1 h / dan), ki posnemajo potrošniške in motivacijske značilnosti, opažene pri motnji prehranjevanja s popivanjem (). Nato smo ugotovili, katero možgansko območje je odgovorno za sistemske učinke naltreksona pri zatiranju uživanja in motivaciji za pridobivanje sladke, zelo prijetne prehrane. V ta namen smo mikroinfuzirali mesto posebej z opioidnim antagonistom v lupino NAcc in mPFC. Nazadnje smo ovrednotili izražanje genov preOpioMelanoCortin (POMC), Pro-Dynorphin (PDyn) in Pro-Enkephalin (PEnk), pri čemer smo kodirali opioidne peptide v NAcc in mPFC po zgodovini prehranjevanja, podobnega piju.

Material in metode

Predmeti

Moški podganji Wistar (n= 70), stari dnevi 41 – 47 po prihodu (Charles River, Wilmington, MA) so bili nameščeni v žičnih, standardnih plastičnih kletkah v vzvratni svetlobni ciklu 12: 12 h (lučke ugasnejo v 10: 00 h), v vlaga- (60%) in temperaturno kontroliran (22 ° C) vivarij. Ob prihodu so podgane imele koru na osnovi koruze (Harlan Teklad LM-485 dieta 7012 (65% (kcal) ogljikovih hidratov, 13% maščobe, 21% beljakovin, 341 cal / 100 g); Harlan, Indianapolis, IN) in vode ad libitum ves čas. Postopki, ki jih spoštujejo Nacionalni inštituti za zdravje Priročnik za nego in uporabo laboratorijskih živali (Številka publikacije NIH 85-23, spremenjeni 1996) in Načela oskrbe laboratorijskih živali (http://www.nap.edu/readingroom/bookslabrats), odobril pa jih je Odbor za institucionalno oskrbo in uporabo živali Univerze v Bostonu (IACUC). Poskusni postopki niso vključevali omejitve / pomanjkanja hrane ali vode, če ni določeno drugače.

Droge

Naltrekson, (5α) -17- (ciklopropilmetil) -4,5-epoksi-3,14-dihidromorffin-6-one hidroklorid je bil kupljen pri Abcam (Cambridge, MA). Naltrekson je bil na dan preskusa sveže raztopljen v izotonično filtrirani fiziološki raztopini (0.9%). Naltrekson so aplicirali subkutano (0, 0.03, 0.1 in 0.3 mg / kg, 1 ml / kg) 30 minut pred sejo in posebej na mestu v lupino NAcc in mPFC (0, 5 in 25 ug / stran, dvostransko) sejo. Odmerki in čas pred zdravljenjem so temeljili na literaturi (; ; ).

Postopek prehranjevanja, podoben napitku

Preiskovanci so bili usposobljeni za samozdravljenje hrane in vode v posameznih preskusnih komorah, ki so bile podrobno opisane v (; ). Za nadaljnje podrobnosti glej Dopolnilni materiali in metode.

usposabljanje

Operacijski model prehranjevanja s pičem je bil izveden, kot je bilo opisano prej (). Podgane (n= 70) so v domači kletki hranili standardno prehrano Harlan Teklad. Po obdobju aklimatizacije je bila hrana nadomeščena s prehrano na osnovi AIN-76A, v nadaljevanju imenovana "Chow A / I" (dieta 5TUM, formulirana kot 4 – 5 g ekstrudirane pelete, 65.5% (kcal) ogljikovih hidratov, 10.4% maščobe , 24.1% beljakovin, 330 cal / 100 g; TestDiet, Richmond, IN). Podgane so usposobljene za pridobivanje operativnega samoupravljanja s hrano (45 mg natančne pelete hrane (Chow A / I)) in vodo (100 µl) v fiksnem razmerju 1 urnika okrepitve (). Razdeljevalec je dostavil natančno kroglico 45 mg, ki je enaka domači kletki ~ 5g ekstrudirana prehrana, da bi zagotovili, da Chow podgane hrane so podprle samo homeostatske potrebe (; ). Dnevne seje so potekale pred začetkom temnega cikla in so trajale 1 h.

Testiranje

Po stabilnih izhodiščnih zmogljivostih na sejah 1 h za samo-administracijo je bil sprožen postopek testiranja. Podgane, ki ustrezajo telesni teži, dnevnemu vnosu hrane, učinkovitosti krme ter vodi in hrani, ki se odzivajo v samoupravi, so bile dodeljene bodisi „Chow"Kontrolna skupina, ki je v okencih za prejemnike prejela iste 45 mg čredne pelete, ponujene v fazi usposabljanja, aliPalatable", Ki je namesto tega prejela prehransko popolno prehrano na osnovi AIN-50A na osnovi čokolade z visoko vsebnostjo saharoze (76% kcal), ki je primerljiva po makronutrientni sestavi in ​​energijski gostoti s prehrano z žrebom (čokolada z okusom čokolade 5TUL: 66.7% [kcal ] ogljikovi hidrati, 12.7% maščobe, 20.6% beljakovin, metabolizabilna energija 344 cal / 100g; formulirano kot 45 mg natančne prehranske kroglice; TestDiet, Richmond, IN). Vse podgane imajo to prehrano z okusom čokolade močno prednost (, ). Seje so potekale vsak dan.

Načrt progresivnega razmerja okrepitve za hrano

Po stabilizaciji vnosa v postopku prehranjevanja, ki je podoben popivanju, podgane (n= 53) so bili usposobljeni za progresivno razmerje za ojačevalce hrane (45 mg mg natančno določene kroglice za Chow skupine in 45 mg mg čokolade, visoko precizne pelete za saharozo za Palatable skupina). Načrt progresivnega razmerja okrepitve za hrano je bil izveden, kot je opisano prej (; ; ). Za nadaljnje podrobnosti glej Dopolnilni materiali in metode. Na koncu vsake seje so bili subjekti vrnjeni v domačo kletko, kjer je bil Chow A / I vedno na voljo ad libitum; seje so potekale vsak dan.

Intrakranialne operacije in mikroinfuzijski postopek

Intrakranialne operacije

Po stabilizaciji vnosa na operacijskih sejah so podgane vsadili z intrakranialnimi kanili. Stereotaksične operacije so bile izvedene, kot je bilo predhodno opisano (; ; ). Za nadaljnje podrobnosti glej Dopolnilni materiali in metode. Koordinate kanile, uporabljene za lupino NAcc in mPFC, so bile A / P +1.06 mm, M / L ± 0.75 mm, D / V −6.0 mm in A / P +3.2 mm, M / L ± 0.65 mm, D / V −3.5 mm. Medvladna palica je bila postavljena na ravno lobanjo (hrbtna / ventralna: bregma = lambda); koordinate temeljile na atlasu Paxinos & Watson (). Nalepka iz nerjavečega jekla (Plastics One, Inc., Roanoke, VA, ZDA) je ohranila prehodnost. Po operaciji so podgane po operativnem posegu lahko opustile 1 teden pred začetkom eksperimentalnega postopka.

Postopek mikroinfuzije

Za mikroinfuzijo naltreksona je bil preskusni model odstranjen iz vodilne kanile in nadomeščen z injektorjem iz nerjavečega jekla, ki štrli 1.0 mm za lupino NAcc in 1.5 mm za mPFC onkraj konice vodilne kanile; injektor je bil povezan z PE 20 cevjo v mikroskopilo Hamilton, ki ga poganja mikroinfuzijska črpalka (Kd Scientifics / Biological Instruments, Holliston, MA, ZDA). Mikroinfuzije so oddale volumen 0.5 µl v 2 min; injektorji so bili na mestu še dodatno minuto, da zmanjšajo povratni tok. Tretmaji so bili v celoti oblikovani v latinsko kvadratnih oblikah, z 1 – 3 pa so bili opravljeni preskusni dnevi brez zdravljenja, v katerih se je vnos hrane vrnil na izhodiščne ravni. Podgane so bile deležne 3 dni privajanja na vsakodnevne lažne injekcije, pred začetkom zdravljenja z zdravili. Namestitev kanil (Slika 4) je bilo preverjeno na koncu vseh testiranj z mikroinfuziranjem India Ink (0.5 µl v 2 minutah). Rezine 40 µm smo zbrali s kriostatom in umestitve preverili pod mikroskopom. Od podgan 68, ki so bile uporabljene za raziskave mikroinfuzije, je bil 3 izključen iz postopkovnih razlogov, ki so vključevali izgubo ali okluzijo kanile ali nezmožnost ohranjanja stabilnih lastnosti. Pri 14 preostalih podgan 65 je bil položaj kanile zunaj ciljnega mesta.

Slika 4 

Risba možganskih rezin koronalnih podgan. Pike predstavljajo mesta injiciranja v () Lupina NAcc in (B) mPFC vključen v analizo podatkov.

Kvantitativni PCR v realnem času

Ena kohorta Chow in Palatable podgane (n= 15) smo uporabili za količinsko določanje mRNA POMC, PDyn in PEnk peptidov. Živali so žrtvovali 24 h po zadnjem dnevnem pojedu, ki je bilo podobno popivanju. Udarci medialne prefrontalne skorje vključujejo tako predlimbično kot infralimbično regijo. Udarki jedrnih jezgrov vključujejo lupinsko in jedrno regijo. Postopki so bili izvedeni, kot je opisano prej (). Za podrobnosti glej Dopolnilni materiali in metode.

Statistična analiza

Učinki naltreksona na vnos hrane, vnos vode in prelomno točko so bili analizirani z dvosmernim mešanim oblikovanjem ANOVA, z analizo prehrane kot dejavnikom med osebami in z zdravljenjem kot dejavnikom, za katerega so sledili ponovljeni ukrepi enosmerni ANOVA. Učinki prehrane na anamnezo mRNA so bili analizirani s pomočjo neparnih študentov t-testov. Spremenljivke, ki niso uspele preizkusu normalnosti, so bile analizirane kot uvrščene (). Uporabljeni statistični paketi so bili Instat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA) in Systat 11.0 (SPSS, Chicago, IL).

Rezultati

Učinki sistemskega dajanja opioidnega antagonista naltreksona na prehrano, podobno operantu

Sistemsko dajanje naltreksona v odvisnosti od zmanjšanja odmerka FR1 za hrano v obeh Chow in Palatable skupine (Slika 1A; Zdravljenje: F(3,54) = 25.00, p<0.001; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(3,54) = 0.64, ns) Enosmerni ANOVA so potrdili učinek zdravljenja pri obeh Chow (Zdravljenje: F(3,27) = 7.62, p<0.0008) in Palatable podgane (zdravljenje: F(3,27) = 16.78 p<0.0001). Post hoc analiza je pokazala, da medtem ko je bil odmerek 0.03 mg / kg neučinkovit, sta odmerek 0.1 in 0.3 mg / kg bistveno zmanjšala samo-dajanje hrane v obeh skupinah v primerjavi s stanjem vehikla. Poleg tega je zdravljenje vplivalo na vnos vode (Tabela 1; Zdravljenje: F(3,54) = 8.46, p<0.0001; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(3,54) = 0.76, ns). Enosmerni ANOVA so potrdili učinek zdravljenja pri obeh Chow (Zdravljenje: F(3,27) = 4.97, p<0.007) in Palatable (Zdravljenje: F(3,27) = 3.76, p<0.022) podgane. Post hoc analiza je pokazala znatno zmanjšanje vnosa vode po dajanju odmerkov 0.1 in 0.3 mg / kg v Chow podgane in odmerek 0.3 mg / kg v Palatable podgane v primerjavi s stanjem vozila.

Slika 1 

Učinki sistemskega zdravljenja z naltreksonom (0, 0.03, 0.1, 0.3 mg / kg, subkutano) na () samouprava hrane (n= 20) in (B) točka preloma v progresivnem razmerju razmerja okrepitve (n= 19) pri samcih podgan Wistar. Plošče predstavljajo M± SEM. ...
Tabela 1 

Učinki dajanja naltreksona na vnos vode

Učinki sistemskega dajanja opioidnega antagonista naltreksona na progresivno razmerje okrepitve za hrano

Naltrekson, ki ga sistemsko dajemo, je odvisno od odmerka zmanjšal prelomno točko pri obeh Chow in Palatable podgane (Slika 1B; Zdravljenje: F(3,51) = 41.31, p<0.0001; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(3,51) = 1.96, ns). Po pomembnem glavnem učinku zdravljenja (Chow skupina; Zdravljenje: F(3,27) = 5.99, p<0.003; Palatable skupina; Zdravljenje: F(3,24) = 6.87, p<0.002), post hoc analiza je pokazala, da je odmerek 0.3 mg / kg znatno zmanjšal mejno vrednost v obeh skupinah.

Učinki mikroinfuzije naltreksona v lupino NAcc na prehranjevanje, ki je podobno operantu

Mikroinfuzija naltreksona v odmerek NAcc se je glede na odmerek hrane zmanjšala tako pri obeh Chow in Palatable skupina (Slika 2A; Zdravljenje: F(2,32) = 10.76, p<0.0001; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(2,32) = 4.36, p<0.02). Enosmerni ANOVA so razkrili učinek zdravljenja drog pri obeh Chow (Zdravljenje: F(2,18) = 5.72, p<0.01) in Palatable podgane (zdravljenje: F(2,18) = 5.344, p<0.02). Poleg tega je post hoc analiza razkrila znatno zmanjšanje samo-dajanja hrane po zdravljenju z največjim odmerkom (25 µg) pri obeh Chow in Palatable skupine. Zdravljenje z zdravili ni vplivalo na porabo vode (Tabela 1; Zdravljenje: F(2,32) = 2.48, ns; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(2,32) = 0.65, ns).

Slika 2 

Vpliv mikroinfuzije z naltreksonom (0, 5, 25 µg / stran) v lupini NAcc na () samouprava hrane (n= 18) in (B) točka preloma v progresivnem razmerju razmerja okrepitve (n= 17) pri samcih podgan Wistar. Panel predstavlja M± SEM. Simboli ...

Učinki mikroinfuzije naltreksona v lupino NAcc na časovno razporeditev okrepitve za hrano

Ko je bil naltrekson na mestu mikroinfuziran v NAcc, se je močno zmanjšalo prelomno točko obeh Chow in Palatable skupina je bila opažena (Slika 2B; Zdravljenje: F(2,30) = 16.72, p<0.0001; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(2,30) = 5.22, p<0.01). Ta rezultat je potrdil en način, kako so ANOVA izvedli posamično v vsaki od obeh skupin (Chow skupina; Zdravljenje: F(2,16) = 6.11, p<0.01; Palatable skupina; Zdravljenje: F(2,14) = 10.62, p<0.001). Post-hoc analiza je pokazala, da se je v obeh skupinah pri mikroinfuziji odmerkov 5 in 25 µg znatno zmanjšalo mejno vrednost. Zmanjšanje mejne vrednosti je bilo med seboj primerljivo po velikosti Chow in Palatable podgane (50.8% in 53.2% v primerjavi s pogoji v vozilu).

Učinki mikroinfuzije naltreksona v mPFC na prehrano podobno piko na i

Naltrexone, posebej mikroinfuziran v mPFC, na katero se je odzivala različna hrana Chow in Palatable podgane, kot je razkrila pomembna interakcija (Slika 3A; Zdravljenje: F(2,30) = 4.77, p<0.02; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(2,30) = 5.08, p<0.01). Medtem ko naltrekson ni vplival na odziv na prehrano Chow podgane (zdravljenje: F(2,12) = 0.68, ns), je odvisno od odmerka zmanjšano popivanje, kot je Palatable podgane (zdravljenje: F(2,18) = 9.25, p<0.002), pri čemer post hoc analiza kaže znatno zmanjšanje po odmerku 25 µg v primerjavi s stanjem vozila. Zato je naltrekson, mikroinfundiran v mPFC, selektivno vplival na popivanje Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na hranjenje pri kontrolnih podganah. Poleg tega naltrekson ni vplival na vnos vode (Tabela 1; Zdravljenje: F(2,30) = 1.89, ns; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F(2,30) = 0.69, ns).

Slika 3 

Vpliv mikroinfuzije z naltreksonom (0, 5, 25 µg / stran) v mPFC na (A) samoupravljanje s hrano (n= 17) in (B) točka preloma v načrtu progresivnega razmerja okrepitve (n= 17) pri samcih podgan Wistar. Panel predstavlja M± SEM. Simboli označujejo: ...

Učinki mikroinfuzije naltreksona v mPFC na progresivno razmerje okrepitve za hrano

Dvostranska ANOVA je nastopila na prelomu letališča Chow in Palatable podgane po mikroinfuziji naltreksona v mPFC so pokazale glavni učinek zdravljenja z zdravili (Slika 3B; Zdravljenje: F(2,30) = 9.057, p<0.001; Zgodovina prehrane X Zdravljenje: F (2,30) = 1.84, ns). Kljub temu, da je enosmerna analiza ANOVA pokazala učinek zdravljenja z zdravili v Chow skupina (zdravljenje: F(2,18) = 4.43, p<0.027), se po post-hoc analizi odmerek 5 µg ali 25 µg ni bistveno razlikoval od stanja nosilca. Verjetno je pomemben učinek zdravljenja, ki ga navaja ANOVA, povzročil trend k povečanju mejne vrednosti po odmerku 5 µg v primerjavi s stanjem vehikla. Po drugi strani pa v Palatable skupina lahko opazi pomemben glavni učinek zdravljenja z zdravili (zdravljenje: F(2,12) = 5.31, p<0.02) in največji odmerek, mikroinfundiran v mPFC, je znatno zmanjšal mejno vrednost v primerjavi s stanjem vozila.

Kvantitativni PCR v realnem času

Kvantitativni PCR v realnem času je pokazal, da 24 h po zadnji seji samozdravljenja s hrano ni bistvenih razlik v izražanju POMC, PDyn in PEnk med Chow in Palatable podgane so opazili pri NAcc (Številke 5A, 5B in 5C). Vendar pa so bile vrednosti POMC mRNA bistveno višje pri PFC od Palatable podgane v primerjavi s Chow podgane (117.9% porast; Slika 5D). Poleg tega so nivoji izražanja PDyn v PFC od Palatable podgane so bile v primerjavi z Chow podgane (49.3% znižanje; Slika 5E). V nivoju PEnk mRNA v PFC niso opazili razlike med obema skupinama (Slika 5F).

Slika 5 

Ekspresija mRNA POMC, PDyn in PEnk v NAcc (A, B in C) in v mPFC (D, E in F) samcev podgan Wistar. Območja možganov so bila zbrana 24 h po zadnjem dnevnem sestanku jemanja. Podatki predstavljajo M± SEM, izraženo v odstotkih Chow skupina; ...

Razprava

V tej raziskavi smo pokazali, da je opioidni antagonist naltrekson, ki ga sistemsko dajemo, nespecifično zmanjšal porabo in motivacijo za pridobivanje hrane, pa tudi zmanjšal vnos vode pri obeh podganah, ki so samoplačniško dajale redno prehrano in podganah zelo okusna prehrana. Pomembno je bilo, da so se ob hkratnem vlivanju naltreksona v lupino NAcc ohranili učinki tako na zaužitje hrane kot tudi na okusno hrano, opioidni antagonist pa je pri mikroinfuziji v mPFC selektivno zmanjšal porabo in motivacijo za pridobivanje zelo prijetne hrane, ne pa tudi redne prigrizke. Poleg tega je potrditev selektivnosti vedenjskih učinkov, opaženih po mikroinfuziji naltreksona v mPFC, izraz mRNA POMC in PDyn disreguliran v mPFC, ne pa v NAcc, podgan, ki so jele podgane v primerjavi s podganimi kontrolnimi podganami. Na nobenem od regij niso opazili nobenega učinka pri ekspresiji gena PEnk.

Sistemsko dani naltrekson je torej odvisno od odmerka zmanjšal porabo hrane Palatable in Chow podgane. Sistemsko zdravljenje z drogami je tudi zmanjšalo motivacijo za delo, da bi pridobili tako hrenovko kot okusno prehrano v progresivnem razmerju okrepitve, validirano vedenjsko paradigmo, ki se uporablja za oceno motivacijske moči za pridobivanje ojačevalcev (; ). Po subkutanem dajanju naltreksona z največjim odmerkom je bil obseg največjih učinkov pri zmanjšanju odziva FR1 in prelomna točka progresivnega razmerja okrepitve podoben v obeh skupinah (FR1: 58.2% in 54.0%; progresivno razmerje: 40.5 % in 43.3% v primerjavi s pogoji v vozilu v Chow in Palatable podgane oz.). Zato so učinki sistemskega naltreksona na vnos hrane verjetno vključevali zatiranje tako homeostatskega kot hedonskega obnašanja hranjenja (). Zanimivo je, da učinki subkutanega dajanja naltreksona niso bili selektivni za hrano, saj je zdravljenje z zdravili zmanjšalo tudi vnos vode tako pri podganah kot pri prehranjevanju. Skupaj so ta začetna opazovanja predlagala splošen zaviralni učinek na zaužitje, po sistemski uporabi z opioidnim antagonistom ().

V tej raziskavi smo želeli ugotoviti, ali opioidni receptorji v lupini NAcc posredujejo pri potrošniških in motivacijskih vidikih prehranjevanja, ki je podobno pivu. Dejansko se predlaga, da je opioidni sistem na tem področju vključen v modulacijo koristnih lastnosti hrane (). Tukaj prikazujemo, da naltrekson, ki je mikroinfuziran v lupini NAcc, ni zmanjšal samo pojesti zelo okusne prehrane, ampak tudi vnos rednega zajtrka. Podoben izid smo dosegli, ko smo testirali učinke mikroinfuzije naltreksona v lupino NAcc na prelomno točko progresivnega razmerja okrepitve za hrano. Dejansko je zdravljenje z drogami brez dvoma zmanjšalo motivacijo za pridobivanje hrane tako pri prenajedanju kot pri podganah. Te ugotovitve kažejo, da opioidni receptorji v lupini NAcc izvajajo splošno modulacijo prehranjevanja in povečujejo učinkovitost hrane, neodvisno od vrste ali spodbujevalne značilnosti prehrane. V podporo tej hipotezi so Kelley in sodelavci dokazali, da blokada µ-opioidnih receptorjev znotraj NAcc zmanjšuje vnos tako običajne prehrane z zajtrkom kot raztopine saharoze (). V nasprotju s tistim, kar smo opazili po sistemski uporabi naltreksona, mikroinfuzija zdravila z lupino NAcc ni vplivala na vnos vode, kar kaže na to, da so opioidni receptorji v tej možganski regiji posebej vključeni v modulacijo prehranjevalnega vedenja, namesto bolj na splošno pri zaužitnem vedenju oz. da so za zaviranje vnosa vode potrebni višji odmerki.

Raziskali smo tudi, ali je opioidni sistem znotraj mPFC pomemben pri posredovanju pojesti zelo okusne hrane. V naši raziskavi je mikroinfuzija opioidnega antagonista mPFC selektivno in odvisno od odmerka zmanjšala tako porabo kot motivacijo za pridobitev zelo prijetne prehrane pri podganah, ki so jedle podgane, ne da bi to vplivalo na vnos rednega črevesja pri kontrolnih podganah. V nobeni od skupin zdravljenje z zdravili ni vplivalo na vnos vode, kar kaže na to, da so učinki izbirni za vedenje pri hranjenju. Fronto-kortikalna področja možganov so vključena v modulacijo prehranjevalnega vedenja (). Nedavno poročilo je tudi pokazalo, da μ-opioidni receptorji znotraj mPFC igrajo pomembno vlogo pri spodbujanju prenajedanja ().

Pomembno je razpravljati o alternativni razlagi, da so učinki naltreksona lahko posledica njegove hitre difuzije po možganih in na periferiji, v nasprotju z drugimi kvartarnimi derivati ​​opijatnimi antagonisti (; ), ki imajo nizko stopnjo difuzije (). V nasprotju s to razlago obstajajo dokazi, da se je v tej študiji naltrekson mikroinfuziral na dva različna področja možganov (NAcc in PFC) v Chow podgane so imele različne učinke. Poleg tega je časovna analiza odziva na hrano pokazala, da je naltrekson, injiciran v mPFC, zmanjšal odziv hrane v Palatable podgane po samo 6 minutah po mikroinfuziji (M± SEM: 84.3 ± 7.5 v primerjavi z 75.3 ± 6.6, vozilo v primerjavi z 25 µg / stran, p<0.05). Zaradi kratkega časa je zelo malo verjetna alternativna razlaga, da bi lahko opaženi učinek izhajal bodisi iz centralne živčne celice bodisi iz periferne blokade opioidnih receptorjev. Poleg tega v podporo veljavnosti podatkov, pridobljenih v tej študiji, literatura obširno poroča o učinkih naltreksona, mikroinfuziranega na določenih področjih možganov (). Kljub temu hipoteze, da je učinek naltreksona lahko odvisen tudi od rahle difuzije na možganskih območjih, ki so sočasne z Nacsovo lupino ali PFC, ni mogoče izključiti.

Alternativna razlaga pomanjkanja učinkov na vnos hrane po mikroinfuziji naltreksona v predfrontalno skorjo Chow Podgane je, da je opaženi učinek lahko posledica sočasne blokade mu in kappa opioidnih receptorjev. Čeprav je bilo dokazano, da oba sistema imata nasprotne modulacijske učinke v več postopkih, vključno z nagrajevanjem, so pokazali, da modulirajo homeostatsko hranjenje (kot vnos hrane v Chow živali te študije) na podoben način. Dokazano je, da aktiviranje opioidnih receptorjev za mu in kap povečuje vnos hrane, medtem ko je bilo dokazano, da njihova blokada povzroča anorektične učinke (; ) Zato naše ugotovitve kažejo na različno vlogo pri modulaciji prehranjevalnega vedenja opioidnega sistema v NAcc in mPFC; medtem ko se zdi, da so opioidni receptorji NAcc vključeni v splošno modulacijo hranjenja, neodvisno od vrste zaužite hrane () se zdi, da se opioidni sistem mPFC nabira le po omejenem dostopu do sladke, prijetne prehrane, ko podgane izgubijo zaviralni nadzor nad hrano. Ta hipoteza je v skladu z višjo kognitivno funkcijo in kompleksnim nadzorom ocenjevanja nagrade, ki ga izvaja mPFC.

Hipotezo o bolj posplošeni, za hrano specifični vlogi opiidnih receptorjev NAcc pri posredovanju prehranjevanja in selektivnem rekrutiranju mPFC je podprla analiza genske ekspresije POMC, PDyn in PEnk. Pri primerjavi z NAcc niso opazili bistvene razlike v izražanju treh genov pri primerjavi s prehranjenimi podganami, ki so jih jedli in kontrolirali. Nasprotno, pri mPFC so podgane, ki so jedle pivo, pokazale več kot dvakratno povečanje ravni mRNA POMC, ki ga je spremljalo ~ 50% znižanje nivoja mRNA PDyn v primerjavi s krmnimi podganjimi podganami.

Pokazalo se je, da sta gena POMC in PDyn izražena na obeh možganskih območjih (; ; ). (Vendar dokazi kažejo, da opioidni peptidi, ki se sproščajo v mPFC, lahko izvirajo tudi iz celičnih teles, ki štrlijo iz različnih možganskih regij (tj. Ventralno tegmentalno območje ()), kar pove možnosti, da učinki, opaženi v tej študiji po mikroinfuziji naltreksona znotraj mPFC, niso povezani z variacijo izražanja POMC in Pdyna v istem možganskem območju. POMC je predhodnik endorfinov, ki prednostno vežejo μ (pa tudi δ) opioidne receptorje (), medtem ko je PDyn predhodnik dinnorfinov, ki prednostno vežejo k-opioidne receptorje (). Obsežni dokazi kažejo na nasprotno vlogo μ- in κ-opioidnih receptorjev pri modulaciji različnih procesov v možganih, vključno z analgezijo, toleranco, spominskimi procesi in nagrajevanjem (; ). Zlasti in skladno s to hipotezo je bilo dokazano, da so µ-opioidni receptorji obširno dokazani, da posredujejo koristne lastnosti hrane in nekaterih zdravil zaradi zlorabe (); po drugi strani je dokazano, da κ-opioidni receptorji posredujejo njihove averzivne in disforične učinke in so bili predlagani kot del sistema proti nagrajevanju (). Še pomembneje je, da je v okviru te študije dokazano, da farmakološka aktivacija bodisi μ- ali κ-opioidnih receptorjev v predfrontalni skorji povzroča nasprotne koristne učinke: mikroinfuzije selektivnega µ-opioidnega receptorja povzročajo prednost, medtem ko mikroinfuzije agonista κ-opioidnih receptorjev povzroči odvračanje od mesta ().

Pomembna točka razprave je, ali so spremembe v izražanju mRNA, opažene v tej študiji, odvisne od razlik v kumulativnem vnosu kalorij ali telesni teži med Chow in Palatable podgane. Čeprav zaužitje hrane in telesna teža nista bila zabeležena v kohorti živali, ki se uporabljajo za količinski PCR v realnem času, smo že pred tem dokazali, da postopek prehranjevanja, kot je uporabljen tukaj, ne vpliva na kumulativni vnos hrane niti na telesno težo. Podgane, ki pojedo podgane, pokažejo prekomerni vnos med dostopom do zelo prijetne prehrane 1h, vendar v preostalih urah 23 na dan nadoknadite s podcenjevanjem redne prehrane z zajtrkom (). Ta odstopni vzorec vnosa torej ne povzroči razlike v kumulativnem vnosu kalorij ali telesni teži med pojestimi piki in kontrolnimi podganami ().

Čeprav so bile predlagane podobnosti med vzorcem prenajedanja / omejitve pri motnji hranjenja zaradi prekomernega uživanja in vzorcem zastrupitve / odvzema zlorabe drog (), ali bi bil živalski model, uporabljen v tej študiji, lahko koristen tudi za študijo, negativna simptomatologija, povezana z odtegnitvijo iz zelo prijetne hrane, ni znano. Povečano izražanje POMC (sistem „nagrajevanja“) in zmanjšano izražanje Pdyna („sistema proti nagrajevanju“), ki ga opazimo po umiku zdravila 24h iz okusne prehrane, kažejo, da živali verjetno ne bodo imele negativnega čustvenega stanja. Za reševanje tega pomembnega vidika prehranjevalnega kolesarjenja bodo potrebne nadaljnje študije, ki ocenjujejo čustvenost in potencialno vključenost stresnih sistemov (npr. Faktor, ki sprošča kortikotropin). Zato lahko diferencialne spremembe v genskem izražanju POMC in Pdyna, opažene v mPFC, resnično razlagamo kot splošno potenciranje koristnih lastnosti okusne hrane, ki so lahko posledica ali pojenjajo prejedanja pri teh osebah.

Rezultati te študije v celoti podpirajo hipotezo, da je opioidni sistem v predfronto-kortikalnih regijah možganov vključen v nadzor nad obnašanjem hranjenja in ga razširil na specifičen kontekst neustreznega pretiranega vnosa zelo prijetne hrane, ki jo opazimo pri pojedavcih (). Fronto-kortikalne regije možganov igrajo pomembno vlogo pri ocenjevanju nagrade in odločanju (); obširna literatura dokazuje, da preiskovanci, ki jih prizadene odvisnost in motnja prehranjevanja, kažejo disfunkcije v mPFC, ki so povezane s spremenjenim ocenjevanjem nagrade (). Naša vedenjska, farmakološka in molekularna opazovanja zato podpirajo hipotezo, da je opioidni sistem ključni posrednik hedonskega hranjenja () in predlagajo, da so nevroadaptacije opioidnega sistema v mPFC morda odgovorne za hipervalvacijo zelo okusne hrane, kar vodi do izgube nadzora nad prehranjevanjem.

 

Dodatni material

Supp Material

Priznanja

Zahvaljujemo se Stephenu St. Cyru, Aditi R. Narayan, Vamseeju Neerukondi, Noah Kelleyju, Jin Won Parku, Anoopu Ravilli in Sishirju Yeetyju za tehnično pomoč, pa tudi Tamari Zerič za uredniško pomoč. To objavo so omogočile številke donacij DA023680, DA030425, MH091945, MH093650A1 in AA016731 ​​Nacionalnega inštituta za zlorabo drog (NIDA), Nacionalnega inštituta za duševno zdravje (NIMH) in Nacionalnega inštituta za zlorabo alkohola in alkoholizem (NIAAA) , Peter Paul Paul Career Development Professorship (PC) in dodiplomski program raziskovalnih možnosti (UROP) na univerzi v Bostonu. Za njegovo vsebino so odgovorni izključno avtorji in ne predstavlja nujno uradnih stališč Nacionalnega inštituta za zdravje.

Opombe

Prispevek avtorjev

Za koncept in zasnovo študije so bili odgovorni AB, PC in VS. AB, PC in VS so izvajali vedenjske in molekularne poskuse. AB in PC sta opravila analizo podatkov. PC, VS in LS so pomagali pri razlagi ugotovitev. AB in PC sta napisala rokopis. PC, VS in LS so kritično pregledali rokopis za pomembne intelektualne vsebine. Vsi avtorji so kritično pregledali vsebino in odobrili končno različico za objavo.

 

Reference

  • Akritas MG. Metoda pretvorbe ranga v nekaterih dvofaktorskih izvedbah. Časopis Ameriškega statističnega združenja. 1990; 85 (409): 73 – 78.
  • Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Dokazi za odvisnost od sladkorja: vedenjski in nevrokemični učinki prekinitve, prekomernega vnosa sladkorja. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32 (1): 20 – 39. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bals-Kubik R, Ableitner A, Herz A, Shippenberg TS. Nevroanatomska mesta, ki posredujejo motivacijske učinke opioidov, kakor jih preslikava paradigma preferenčnih pogojev za pogoje na mestu podgan. J Pharmacol Exp Ther. 1993; 264 (1): 489 – 495. [PubMed]
  • Blasio A, Narayan AR, Kaminski BJ, Steardo L, Sabino V, Cotton P. Spremenjena prilagoditvena naloga za oceno impulzivne izbire med izokaloričnimi ojačevalci pri samskih podganah, ki niso prikrajšani: učinki 5-HT (2) A / C in 5 Agonisti receptorjev -HT (1) A. Psihoparmakologija (Berl) 2012; 219 (2): 377 – 386. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bodnar RJ, Glass MJ, Ragnauth A, Cooper ML. Splošni antagonisti opiidov, mu in kappa v jedru spreminjajo vnos hrane v pomanjkanju, glukoprivičnih in paličnih pogojih. Možgani Res. 1995; 700 (1 – 2): 205 – 212. [PubMed]
  • Bodnar RJ, Lamonte N, Izrael Y, Kandov Y, Ackerman TF, Khaimova E. Vzajemni opioidno-opioidni medsebojni vplivi med ventralno tegmentalnim območjem in jedri, ki se pojavljajo v medijih, ki jih povzroča hranjenje, ki ga povzroča agonist. Peptidi. 2005; 26 (4): 621 – 629. [PubMed]
  • Boeka AG, Lokken KL. Prefrontalni sistemi sodelujejo pri prehranjevanju s popivanjem. Jejte težo. 2011; 16 (2): e121 – e126. [PubMed]
  • Carlezon WA, Jr, Devine DP, Wise RA. Dejavnosti nomifensina v nastajanju jedra v navadi. Psihoparmakologija (Berl) 1995; 122 (2): 194 – 197. [PubMed]
  • Clark L, Bechara A, Damasio H, Aitken MR, Sahakian BJ, Robbins TW. Diferencialni učinki otožnih in ventromedialnih prefrontalnih lezij možganske skorje na tvegano odločanje. Možgani 2008; 131 (Pt 5): 1311 – 1322. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Cooper SJ, Jackson A, Kirkham TC. Endorfini in vnos hrane: agonisti oppaidnih receptorjev kappa in hiperfagija. Farmakol Biochem Behav. 1985; 23 (5): 889 – 901. [PubMed]
  • Corwin RL. Bingeing podgane: model pretiranega pretiranega vedenja? Apetit. 2006; 46 (1): 11 – 15. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Corwin RL, Grigson PS. Pregled simpozija - zasvojenost s hrano: dejstvo ali izmišljotina? J Nutr. 2009; 139 (3): 617–619. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Krmna mikrostruktura pri podganah, ki so dovzetne za debelost in proti odpornim podganam: osrednji učinki urokorortina 2 J Physiol. 2007; 583 (Pt 2): 487 – 504. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, Fekete EM, Steardo L, Rice KC, Grigoriadis DE, Conti B, Koob GF, Zorrilla EP. Zaposlovanje v sistemu CRF posreduje temno plat kompulzivnega prehranjevanja. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106 (47): 20016 – 20020. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Vmesni dostop do želene hrane zmanjšuje krepitev učinkovitosti prigrizka pri podganah. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008a; 295 (4): R1066 – R1076. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Pričakovani negativni kontrast, odvisen od opioidov, in podgana jesti pri podganah z omejenim dostopom do zelo zaželene hrane. Nevropsihoparmakologija. 2008b; 33 (3): 524 – 535. [PubMed]
  • Bombaž P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, Iyer MR, Steardo L, Rice KC, Hayashi T, Sabino V. Antagonizem receptorjev Sigma-1 blokira jedo obvezno podobno prehranjevanje. Nevropsihoparmakologija. 2012 [PMC brez članka] [PubMed]
  • Day R, Lazure C, Basak A, Boudreault A, Limperis P, Dong W, Lindberg I. Predelava prodynorfina s proprotein konvertazo 2. Razcep v posameznih osnovnih ostankih in izboljšana predelava ob prisotnosti karboksipeptidazne aktivnosti. J Biol Chem. 1998; 273 (2): 829 – 836. [PubMed]
  • Podgane Epstein DH, Shaham Y. Cheesecake-jedo podgane in vprašanje odvisnosti od hrane. Nat Neurosci. 2010; 13 (5): 529 – 531. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Frenk H, Rogers GH. Zaviralni učinki naloksona na vnos hrane in vode pri podganah. Behav nevronski biol. 1979; 26 (1): 23 – 40. [PubMed]
  • Garzon M, Pickel VM. Ultrastrukturna lokalizacija imunoreaktivnosti Leu5-enkefalina v mezokortikalnih nevronih in njihovih vhodnih terminalov v tegmentalnem območju podgan. Sinopsija. 2004; 52 (1): 38 – 52. [PubMed]
  • Gosnell BA, Levine AS, Morley JE. Spodbujanje vnosa hrane s selektivnimi agonisti mu, kappa in delta opioidnih receptorjev. Life Sci. 1986; 38 (12): 1081 – 1088. [PubMed]
  • Hagan MM, Moss DE. Vztrajanje vzorcev prejedanja po omejevanju v anamnezi s prekinitvami privajanja na okusno hrano pri podganah: posledice za bulimijo nervozo. Int J Jejte neskladje. 1997; 22 (4): 411 – 420. [PubMed]
  • Holtzman SG. Vedenjski učinki ločenega in kombiniranega dajanja naloksona in d-amfetamina. J Pharmacol Exp Ther. 1974; 189 (1): 51 – 60. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, Sabino V, Cottone P. Umik iz kroničnega, občasnega dostopa do zelo prijetne hrane povzroča depresivno vedenje pri kompulzivnem prehranjevanju podgan. Behav Pharmacol. 2012; 23 (5 – 6): 593 – 602. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Javaras KN, Pope HG, Lalonde JK, Roberts JL, Nillni YI, Laird NM, Bulik CM, Crow SJ, McElroy SL, Walsh BT, Tsuang MT, Rosenthal NR, Hudson JI. Sočasna motnja prehranjevanja s psihiatričnimi in medicinskimi motnjami. J Clin Psihiatrija. 2008; 69 (2): 266 – 273. [PubMed]
  • Kelley AE, Bless EP, Swanson CJ. Raziskava učinkov antagonistov opiatov, infundiranih v jedro jeder na hranjenje in pitje saharoze pri podganah. J Pharmacol Exp Ther. 1996; 278 (3): 1499 – 1507. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Zasvojenost z drogami, disregulacija nagrade in alostaza. Nevropsihoparmakologija. 2001; 24 (2): 97 – 129. [PubMed]
  • Laessle RG, Tuschl RJ, Kotthaus BC, Pirke KM. Vedenjski in biološki korelati prehranske omejitve v običajnem življenju. Apetit 1989; 12 (2): 83 – 94. [PubMed]
  • Le Merrer J, Becker JA, Befort K, Kieffer BL. Predelava opioidnega sistema v možganih. Physiol Rev. 2009; 89 (4): 1379 – 1412. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Leriche M, Cote-Velez A, Mendez M. Prisotnost mRNA pro-opiomelanokortina v medialnem predfrontalnem korteksu podgane, nukleusnih jezerih in ventralnem tegmentalnem območju: študije z RT-PCR in hibridizacijskimi tehnikami in situ. Nevropeptidi. 2007; 41 (6): 421 – 431. [PubMed]
  • MacDonald AF, Billington CJ, Levine AS. Učinki opioidnega antagonista naltreksona na hranjenje, ki ga inducira DAMGO, na ventralnem tegmentalnem območju in na območju lupine jedra, ki se nahaja v podganah. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 285 (5): R999 – R1004. [PubMed]
  • Mansour A, Fox CA, Akil H, Watson SJ. Ekspresija mRNA opioidnega receptorja v CNS podgane: anatomske in funkcionalne posledice Trendi Nevrosci. 1995; 18 (1): 22 – 29. [PubMed]
  • Mena JD, Sadeghian K, Baldo BA. Indukcija hiperfagije in vnosa ogljikovih hidratov z stimulacijo mu-opioidnih receptorjev v omejenih predelih čelne skorje. J Nevrosci. 2011; 31 (9): 3249 – 3260. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Moran TH, Westerterp-Plantenga M. Potencialna vloga in primanjkljaj v prednjih možganskih kortikalnih predelih, ki sta vključena v nadzor nad vnosom hrane. Int J Obes (Lond) 2012; 36 (5): 625 – 626. [PubMed]
  • Nathan PJ, Bullmore ET. Od hedonike okusa do motivacijske vožnje: osrednji mu-opioidni receptorji in vedenje. Int J Neuropsychopharmacol. 2009; 12 (7): 995 – 1008. [PubMed]
  • Pan ZZ. mu-nasprotna dejanja kappa-opioidnega receptorja. Trendi Pharmacol Sci. 1998; 19 (3): 94 – 98. [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. Mož podgane v stereotaksičnih koordinatah. Drugi izd. Orlando: Akademska tiska; 1986.
  • Polivy J, Herman CP. Prehrana in popivanje. Vzročna analiza. Am Psychol. 1985; 40 (2): 193 – 201. [PubMed]
  • Sabino V, Bombaž P, Blasio A, Iyer MR, Steardo L, Rice KC, Conti B, Koob GF, Zorrilla EP. Aktivacija sigma-receptorjev povzroča pitje podobno piju pri sardinskih podpornih alkoholih. Nevropsihoparmakologija. 2011; 36 (6): 1207 – 1218. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Sabino V, bombaž P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Metoksimetopon, zelo močan mu opioidni agonist, dvofazno vpliva na vnos etanola pri podganah, ki so raje alkohol. Psihoparmakologija (Berl) 2007; 192 (4): 537 – 546. [PubMed]
  • Sabino V, Cotton P, Zhao Y, Iyer MR, Steardo L, Jr, Steardo L, Rice KC, Conti B, Koob GF, Zorrilla EP. Antagonist sigma-receptorjev BD-1063 zmanjšuje vnos in okrepitev etanola v živalskih modelih prekomernega pitja. Nevropsihoparmakologija. 2009; 34 (6): 1482 – 1493. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Sanger DJ, McCarthy PS. Diferencialni učinki morfija na vnos hrane in vode pri podganah s hrano in prosto hranjenjem. Psihoparmakologija (Berl) 1980; 72 (1): 103 – 106. [PubMed]
  • Schroeder RL, Weinger MB, Vakassian L, Koob GF. Metilnaloksonij razhaja iz možganov podgane počasneje kot nalokson po neposredni intracerebralni injekciji. Nevrosci Lett. 1991; 121 (1 – 2): 173 – 177. [PubMed]
  • Stein RI, Kenardy J, Wiseman CV, Dounchis JZ, Arnow BA, Wilfley DE. Kaj spodbuja prenapetost pri motnjah prehranjevanja?: Prospektivni pregled predhodnih sestavin in posledic. Int J Eat Disord. 2007; 40 (3): 195–203. [PubMed]
  • Taqi MM, Bazov I, Watanabe H, Nyberg F, Yakovleva T, Bakalkin G. Promotor prodinorfinskih SNP, povezanih z odvisnostjo od alkohola, tvori nekanonično mesto vezave AP-1, ki lahko vpliva na izražanje genov v človeških možganih. Možgani Res. 2011; 1385: 18 – 25. [PubMed]
  • Vaccarino FJ, Bloom FE, Koob GF. Blokada jedrskih receptorjev opiata zmanjšuje intravensko nagrado heroina pri podganah. Psihoparmakologija (Berl) 1985; 86 (1 – 2): 37 – 42. [PubMed]
  • Vaccarino FJ, Pettit HO, Bloom FE, Koob GF. Učinki intracerebroventrikularne aplikacije metil naloksonijevega klorida na samo dajanje heroina pri podganah. Farmakol Biochem Behav. 1985; 23 (3): 495 – 498. [PubMed]
  • Wilfley D, Berkowitz R, Goebel-Fabbri A, Hirst K, Ievers-Landis C, Lipman TH, Marcus M, Ng D, Pham T, Saletsky R, Schanuel J, Van Buren D. Binge prehranjevanje, razpoloženje in kakovost življenja pri mladostnikih s sladkorno boleznijo tipa 2: osnovni podatki današnje študije. Nega sladkorne bolezni. 2011; 34 (4): 858 – 860. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Williams KL, Broadbridge CL. Potencial naltreksona za zmanjšanje samo dajanja etanola pri podganah je večji za subkutano in intraperitonealno injiciranje. Alkohol. 2009; 43 (2): 119 – 126. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Woolley JD, Lee BS, Kim B, Fields HL. Nasprotni učinki intra-jedrskih akonis mu in kappa opioidnih agonistov na senzorično specifično sitost. Nevroznanost. 2007; 146 (4): 1445 – 1452. [PubMed]
  • Zhang M, Kelley AE. Povečan vnos hrane z veliko maščob po striatalni mu-opioidni stimulaciji: kartiranje z mikroinjekcijo in izražanje fos. Nevroznanost. 2000; 99 (2): 267 – 277. [PubMed]
  • Ziolkowska B, Stefanski R, Mierzejewski P, Zapart G, Kostowski W, Przewlocki R. Nepredvideni prispevki ne vplivajo na učinke kokaina na uporabo prodinnorfina in gena proenkefalina v prednjem možganu podgane. Možgani Res. 2006; 1069 (1): 1 – 9. [PubMed]