Amfetamin spreminja obnašanje in izraža mezokortikolimbično dopaminsko receptorje v monogamni ženski voluhi prerije (2011)

Brain Res. Avtorski rokopis; na voljo v PMC Jul 25, 2011.

Objavljeno v končni obliki:

PMCID: PMC3143067

NIHMSID: NIHMS312646

Končno urejena različica tega članka založnika je na voljo na Brain Res

Oglejte si druge članke v PMC quote objavljeni članek.

Pojdi na:

Minimalizem

Pred kratkim smo ustanovili socialno monogamno prerijsko voluhino (Microtus ochrogaster) kot živalski model, s katerim se raziskuje vpletenost mezokortikolimbičnega dopamina (DA) v amfetamin (AMPH), povzročeno poslabšanje socialnega vedenja. Ker se je večina našega dela do zdaj osredotočila na moške in razlike v spolnosti so pogosto poročane v vedenjskih in nevrobioloških odzivih na AMPH, je bila trenutna študija zasnovana za preučevanje vedenjskih in nevrobioloških učinkov zdravljenja AMPH v ženskih prerijskih voluharjih. Za določitev krivulje odmerek-odziv za vedenjske učinke AMPH pri ženskih prerijskih voluharjih smo uporabili paradigmo pogojenih mestnih preferenc (CPP) in ugotovili, da kondicioniranje z nizko do vmesno (0.2 in 1.0 mg / kg), vendar ne zelo nizko ( 0.1 mg / kg), odmerki AMPH so povzročili CPP. Ugotovili smo tudi, da je izpostavljenost vedenjsko relevantnemu odmerku AMPH (1.0 mg / kg) povzročila povečanje koncentracije DA v nukleusu accumbens (NAcc) in kaudatnem putamenu, ne pa v medialni prefrontalni korteks ali ventralni tegmentalni predel (VTA). Nazadnje, ponavljajoča se izpostavljenost AMPH (1.0 mg / kg enkrat na dan v zaporednih 3 dneh; paradigma injekcije, ki je bila pred kratkim dokazana, da spremeni ekspresijo DA receptorja in poslabša socialno vez v moški prerijski voluharici), je povečala D1, vendar ne D2, receptor mRNA NAcc, in zmanjšano D2 receptorsko mRNA in D2-podobno vezavo receptorjev v VTA. Ti podatki skupaj kažejo, da AMPH spremeni nevrotransmisijo mezokortikolimbnega DA na način, ki je specifičen za regijo in receptorje, kar bi lahko imelo globoke posledice za družbeno vedenje ženskih prerijskih voluharic.

ključne besede: Psihostimulant, Nukleus akumbens, Ventral tegmental območje, Autoreceptor, Pair vezava, Conditioned mesto preference \ t

1. Predstavitev

Domneva se, da droge zlorabljajo svoj močan nadzor nad obnašanjem, delno, s svojimi učinki na mezokortikolimbični sistem dopamina (DA) (Kelley in Berridge, 2002; Nesse in Berridge, 1997; Nestler, 2004, 2005; Panksepp et al., 2002), nevronsko vezje, ki je sestavljeno iz celic, ki proizvajajo DA, in izvirajo iz ventralnega tegmentalnega območja (VTA) in projektirajo v različne predelne regije, vključno z medialno prefrontalno skorjo (PFC) in nucleus accumbens (NAcc). To zelo ohranjeno nevronsko vezje, ki igra pomembno vlogo pri ustvarjanju prilagodljivega ciljno usmerjenega vedenja (Zahm, 2000) - vključno z vedenjem, ki je razširjeno na vse živali (npr. Hranjenje (Narayanan et al., 2010; Palmiter, 2007)) in tiste, ki so specifične za vrsto (npr. vezava parov v monogamnih vrstah (Aragona in Wang, 2009; Curtis et al., 2006; Young et al., 2010)) - se znatno spremeni zaradi izpostavljenosti zlorabam drog. Na primer, akutna in / ali ponavljajoča se izpostavljenost psihostimulantnim zdravilom, kot so kokain ali amfetamin (AMPH), povzroči spremenjeno sproščanje DA, ekspresijo in občutljivost DA receptorjev ter nevronsko morfologijo v mezokortikolimbičnih regijah možganov (Henry et al., 1989; Henry in White, 1995; Hu et al., 2002; Nestler, 2005; Pierce in Kalivas, 1997; Robinson et al., 2001, 1988; Robinson in Kolb, 1997; Bela in Kalivas, 1998). Menijo, da lahko te nevroadaptacije temeljijo na spremembah v vedenju živali, ki jih povzročajo droge (Robinson in Becker, 1986), vključno s socialnim vedenjem (za pregled, glejYoung et al., 2011)).

Nedavno delo našega laboratorija je vzpostavilo prerijsko voluhino kot živalski model za raziskovanje vpletenosti mezokortikolimbnega DA pri učinkih zlorabe drog na socialno vedenje (Liu et al., 2010). Prarijske voluharice so socialno monogamni glodalci, ki po razširjenem sobivanju in / ali parjenju oblikujejo preference za znanega partnerja (tj. Partnerske preference)Insel et al., 1995; Williams et al., 1992; Winslow et al., 1993), in mezokortikolimbični DA - zlasti nevrotransmisija DA v NAcc - je bistvenega pomena za ta proces (Aragona et al., 2003, 2006; Aragona in Wang, 2009; Curtis et al., 2006; Gingrich et al., 2000; Liu in Wang, 2003; Wang et al., 1999; Young et al., 2010). Zanimivo je, da izpostavljenost AMPH pomembno spremeni mezokortikolimbično aktivnost DA in nevrotransmisijo pri moških prerijskih voluharjih. Na primer, ena injekcija AMPH je znatno povečala raven zunajcelične DA v NAcc (Curtis in Wang, 2007). Dodatno, tri dni izpostavljenosti AMPH, ki je sprožila tvorbo pogojene prednostne lokacije (CPP), ko je bila seznanjena z okoljskim kontekstom, spremenila ekspresijo DA receptorja v NAcc na receptorsko specifičen način (Liu et al., 2010). Pomembno je, da to isto zdravljenje z zdravili zavira nastanek partnerskih preferenc, ki jih povzroči parjenje, kar kaže, da lahko AMPH-inducirane spremembe v nevrotransmisiji mezokortikolimbičnega DA vplivajo na AMPH-inducirano poslabšanje vezave parov pri tej vrsti (Liu et al., 2010).

Čeprav so zgoraj opisane študije dokazale, da je prerijska voluhica odličen model, s katerim bi preučevali AMPH-povzročeno poslabšanje socialne povezanosti in njenih osnovnih živčnih mehanizmov, so bili izvedeni izključno pri moških. Zato vemo zelo malo o vedenjskih in nevrobioloških učinkih AMPH v ženskih prerijskih voluharjih. Obstajajo dokazi, ki kažejo, da so ženske prerijske voluharice bolj občutljive za AMPH kot moški prairiji (Aragona et al., 2007) in študije na drugih vrstah navadno poročajo o spolnih razlikah v vedenjskih in nevrobioloških učinkih AMPH in drugih psihostimulacijskih zdravil (\ tBecker in Hu, 2008; Fattore et al., 2008; Lynch, 2006). Ženske podgane na primer kažejo večjo lokomotorno aktivnost in hitrejšo indukcijo vedenjske senzibilizacije kot odziv na AMPH (Camp in Robinson, 1988) hitreje pridobivajo samo-dajanje kokaina in metamfetamina (Hu et al., 2004; Lynch, 2006; Lynch in Carroll, 1999; Roth in Carroll, 2004) in dokazati višjo stopnjo motivacije za pridobitev psihostimulantov (Roberts et al., 1989; Roth in Carroll, 2004) kot samci. Poleg tega so bile zabeležene razlike v spolu v nevrobiološkem odzivu na psihostimulante, vključno z razlikami v AMPH-induciranem sproščanju DA (Becker, 1990; Becker in Ramirez, 1981), Metabolizem DA (Camp in Robinson, 1988) in takojšnje zgodnje izražanje genov (Castner in Becker, 1996). Raziskava nevrobioloških učinkov AMPH v ženskih prerijskih voluharjih je zato bistvenega pomena za popolno vzpostavitev modela prairne voluharice za študije, ki preučujejo razmerja med zlorabami drog, socialnim obnašanjem in mezokortikolimbičnim DA.

Sedanja študija je bila zasnovana za preučevanje vedenjskih in nevrobioloških učinkov izpostavljenosti AMPH v ženski voluharici prarij. Uporabili smo paradigmo CPP, ki je bila predhodno določena v moških prerijskih volih (Liu et al., 2010) preučiti vedenjski pomen različnih odmerkov AMPH pri ženskah. Ker ženske kažejo večjo vedenjsko občutljivost za AMPH kot moški (Aragona et al., 2007; Becker et al., 2001; Camp in Robinson, 1988), smo domnevali, da bi ženske prerijske voluharice tvorile CPP pri nižjih odmerkih AMPH od tistih za moške. Preučili smo tudi vpliv izpostavljenosti AMPH na koncentracijo DA in ekspresijo genov DA receptorjev in vezavo v različnih mezokortikolimbičnih regijah možganov. Domnevali smo, da bi izpostavljenost AMPH spremenila koncentracijo DA in ekspresijo DA receptorja na način, specifičen za receptor in regijo. Rezultati trenutne študije bodo zagotovili koristen vpogled v prihodnje delo, ki preučuje učinke AMPH na družbeno vedenje pri ženskah te vrste.

2. Rezultati

2.1. Eksperiment 1: AMP kondicionirani CPP

Eksperiment 1 je določil krivuljo odmerek-odziv za AMP-inducirano CPP v ženskih prerijskih voluhah. Da bi končno primerjali krivuljo odmerek-odziv žensk in moških, smo uporabili klimatizacijsko paradigmo, ki je bila identična tistemu, ki se je pred kratkim razvil v moških prerijskih voluhah (Liu et al., 2010). Subjekti so bili naključno razporejeni v eno od štirih eksperimentalnih skupin, ki so bile diferencirane po koncentraciji AMPH [0.0 (n= 20), 0.1 (n= 8), 0.2 (n= 12) ali 1.0 mg / kg (n= 13)], ki so jih prejeli med sejami AMPH (glej Eksperimentalni postopki za podrobnosti). Vsi subjekti so bili testirani na prisotnost CPP v stanju brez drog na dan po končni seji kondicioniranja. CPP je bil določen z znatnim povečanjem časa, preživetega v kletki med zdravilom in med testom v primerjavi s pred-testom.

Subjekti, zdravljeni samo s fiziološko raztopino [0.0 mg / kg; t(19)= 1.65; p<0.12] ali fiziološka raztopina, ki vsebuje najmanj [0.1 mg / kg; t(7)= 1.89; p<0.90] koncentracija AMPH preživela statistično enako količino časa v komori, seznanjeni z zdravili, pred in po kondicioniranju, zato ni tvorila CPP (Slika 1A). Namesto tega subjekti, zdravljeni z 0.2 [t(11)= 2.77; p<0.02] ali 1.0 mg / kg [t(12)= 2.53; p<0.03] AMPH je pokazala močan CPP, saj so med post-testom v komori, ki je seznanjena z drogami, preživele bistveno več časa (Slika 1A). V skupini ali med skupinami, pred ali po zdravljenju z zdravili, niso opazili razlik v lokomotorni aktivnosti.Slika 1B).

Slika 1 

Amfetamin (AMPH), inducirana kondicionalna preferenca prostora (CPP) in lokomotorna aktivnost pri ženskih prerijskih voluhah. Samice, ki so prejele 0.0 (samo fiziološka raztopina) ali 0.1 mg / kg AMPH v času 3 dni kondicioniranja, niso tvorile CPP, ker so porabile enako količino časa ...

2.2. Poskus 2: AMPH zdravljenje je spremenilo mezokortikolimbično koncentracijo DA

Poskus 2 je preučil učinek posamezne obdelave AMPH na koncentracijo DA v izbranih možganskih področjih, vključno s PFC, NAcc, kaudatnim putamenom (CP) in VTA (VTA)Slika 2A). Osebe so bile naključno razporejene v eno od dveh poskusnih skupin, ki so prejele bodisi eno samo injekcijo 0.9% fiziološke raztopine (n= 6) ali 1.0 mg / kg AMPH, raztopljenega v slanici (n= 6). Ta odmerek je bil izbran, ker je zadostoval za induciranje CPP v ženskih (eksperiment 1) in moških prerijskih volovcih (Aragona et al., 2007; Liu et al., 2010), kar kaže na vedenjski pomen za oba spola. Vsi subjekti so bili po injiciranju žrtvovani 30 min in koncentracija DA v možganskem tkivu je bila izmerjena z uporabo tekočinske kromatografije visoke ločljivosti z elektrokemično detekcijo (HPLC-ECD).

Slika 2 

Učinki enkratne injekcije AMPH (1 mg / kg) na koncentracijo DA v mezokortikolimbičnih regijah možganov. Shematski prikaz tkivnih mest za medialni prefrontalni korteks (PFC), nucleus accumbens (NAcc), kaudatni putamen (CP) in ventralno ...

Enotno zdravljenje AMPH je spremenilo koncentracijo DA v regiji, specifični za mezokortikolimbični sistem DA (Slika 2B). Pri osebah, zdravljenih z AMPH, je bila koncentracija DA v NAcc [t(10) = 2.06; p<0.03] in CP [t(10)= 2.07, p<0.03] kot kontrolne skupine, vbrizgane s fiziološko raztopino. Vendar pa v PFC [t(10)= 0.03; p<0.49] ali VTA [t(10)= 1.41; p<0.09].

2.3. Poskusi 3 in 4: ponavljajoča se izpostavljenost AMPH spremeni ekspresijo in vezavo mRNA DA receptorja

Eksperimenti 3 in 4 sta preučevali učinke ponovljenega zdravljenja AMPH na izražanje D1 receptorja in D2 receptorja mRNA in D1-podobno in D2-podobno vezavo receptorjev. Prejšnji poskusi pri moških prerijskih volovcih so pokazali, da ponavljajoča se izpostavljenost AMPH (1.0 mg / kg enkrat na dan za 3 zaporedne dni) znatno spremeni ekspresijo DA receptorja v NAcc 24 h po končni injekciji in da lahko ta sprememba temelji na AMPH-inducirani okvari. socialnih vezi (Liu et al., 2010). Zato smo uporabili to paradigmo za injiciranje zdravil, da bi raziskali nevrobiološke učinke ponovljene izpostavljenosti AMPH pri ženskah. Osebe so bile naključno razporejene v eno od dveh skupin, ki so prejele ip injekcije slanice (kontrola, n= 6) ali fiziološko raztopino, ki vsebuje 1.0 mg / kg AMPH (n= 8), enkrat na dan tri zaporedne dni. Po končani injekciji so vse osebe žrtvovali 24 h. Gostota mRNA receptorja D1 in D1-podobne receptorske vezave so bili izmerjeni v NAcc in CP, medtem ko sta bili mRNA receptorja D2 in D2 podobni receptor vezani v NAcc, CP in VTA. D1R mRNA in D1-podobne receptorske vezave niso bile izmerjene v VTA zaradi pomanjkanja njihove prisotnosti v tej možganski regiji (Weiner in sod., 1991).

Ponavljajoča izpostavljenost AMPH je spremenila ekspresijo mRNA DA receptorja na način, specifičen za receptor in regijo. Subjekti, ki so prejemali ponavljajoče se zdravljenje AMPH, so pokazali bistveno višjo stopnjo označevanja mRNA D1 receptorjev v NAcc.t(12)= 2.85; p <0.01], ne pa tudi CP [t(12)= 1.96; p <0.07], kot kontrolne vbrizgane fiziološke raztopine (Sl. 3A in B). Pri označevanju mRNA D2 receptorjev v NAcc ni bilo ugotovljenih razlik v skupini.t(12)= 1.56; p <0.14] ali CP [t(12)= 1.79; p <0.10] (Sl. 3C in D). Vendar pa je ponavljajoče se zdravljenje AMPH bistveno zmanjšalo raven mRNA D2 receptorjev v VTA.t(12)= 3.11; p <0.01] (Sl. 3E in F).

Slika 3 

Učinki ponavljajoče se dajanja AMPH (1 mg / kg / dan za 3 zaporednih dni) na označevanje mRNA dopaminskega receptorja v ženskem prašnjaku. Ponovljeno zdravljenje z AMPH je povečalo označevanje mRNA D1 receptorja (D1R) v nucleus accumbens (NAcc), vendar ne ...

Ponavljajoča izpostavljenost AMPH ni vplivala na receptor, podoben D1 (Sl. 4A in B) ali D2-podoben receptor (Sl. 4C in D) zavezujoče ravni v NAcc [D1-like: t(12)= 0.40; p <0.35, D2 podoben: t(12)= 0.77; p<0.23] ali CP [D1 podoben: t(12)= 0.63; p<0.27, D2 podoben: t(12)= 0.91; p<0.19]. Vendar pa so preiskovanci, zdravljeni z AMPH, imeli bistveno nižjo stopnjo vezave na receptorje, podobne D2, v VTA kot kontrolniki, injicirani s fiziološko raztopino [t(12)= 1.91; p<0.04] (Sl. 4E in F).

Slika 4 

Učinki ponavljajoče se dajanja AMPH (1 mg / kg / dan za 3 zaporednih dni) na ravni vezave dopaminskih receptorjev v ženski voluharici. Ponavljajoče zdravljenje z AMPH ni spremenilo ravni vezave receptorjev D1 (A in B) ali D2 (C in D) v ...

3. Diskusija

Sedanja študija je raziskala vedenjske in nevrobiološke učinke izpostavljenosti AMPH v ženskih prerijskih voluharjih. Skupaj naši podatki kažejo, da ima AMPH od odmerka odvisne učinke na obnašanje, poveča koncentracijo DA v NAcc in CP ter spremeni izražanje genov DA receptorjev in vezavo na receptorsko in regijsko specifičen način. Ti podatki lahko na koncu zagotovijo koristen vpogled v prihodnje študije, ki preučujejo učinke AMPH na družbeno vedenje pri ženskah te vrste.

CPP odraža prednost okoljskega konteksta, ki je bil združen s primarnim ojačevanjem (Bardo in Bevins, 2000) - v tem primeru AMPH - in se pogosto uporablja kot vedenjsko relevantno, čeprav posredno, merilo za nagrado za droge. Naši rezultati kažejo, da ženske prerijske voluharice po zdravljenju z nizkimi do vmesnimi odmerki AMPH tvorijo CPP. V primerjavi z našimi nedavnimi rezultati pri moških prerijskih voluharjih, ki so bili doseženi z isto paradigmo CPP (Liu et al., 2010), ti podatki skupaj kažejo premik v levo v krivulji odmerek-odziv za CPP pri ženskih prerijskih voluharjih. Natančneje, 0.2 mg / kg ali višji odmerki AMPH so povzročili CPP pri ženskah, medtem ko so bili 1.0 mg / kg ali višji odmerki AMPH potrebni za indukcijo CPP pri moških (Liu et al., 2010). Ta levi premik krivulje odmerek-odziv pri ženskah je v skladu s predhodno študijo v prarijskih voluharjih, ki je uporabljala drugačno paradigmo kondicioniranja (Aragona et al., 2007), in predlaga, da so ženske bolj občutljive na vedenjske učinke, in morda bolj ranljive za učinke nagrajevanja, AMPH kot moški - ugotovitev, ki je bila dosledno dokazana pri drugih vrstah (Camp in Robinson, 1988; Hu et al., 2004; Lynch, 2006; Lynch in Carroll, 1999; Roberts et al., 1989; Roth in Carroll, 2004) in ki imajo lahko pomembne posledice za učinke AMPH na družbeno vedenje ženskih prerijskih voluharjev.

V tej študiji smo ugotovili tudi, da je uporaba AMPH - pri vedenjsko pomembnem odmerku (1.0 mg / kg) za ženske volitve prerij - povečana koncentracija DA v NAcc in CP, ne pa v PFC ali VTA. Ti rezultati kažejo na regijsko specifično AMPH-inducirano povečanje koncentracije DA. Kot so prejšnje študije pri številnih vrstah pokazale indukcijo izvenceličnega sproščanja DA v NAcc in CP kmalu po injiciranju AMPH (Cho et al., 1999; Clausing in Bowyer, 1999; Curtis in Wang, 2007; Di Chiara et al., 1993; Drevets et al., 2001povečana koncentracija DA v teh regijah v tej študiji je lahko posledica AMPH-induciranega povečanja sproščanja DA. Ker pa na koncentracijo DA vplivata tudi sinteza DA in presnova, je treba te spekulacije preizkusiti v nadaljnjih poskusih. Poleg tega je bil opazen trend proti zmanjšanju koncentracije DA v VTA po izpostavljenosti AMPH v ženskih prerijskih voluharjih. Čeprav ta učinek ni bil pomemben (p <0.09), so potrebna nadaljnja eksperimentiranja, da se izključi ali izključi učinek AMPH na koncentracijo DA v tej možganski regiji.

Za nadaljnje razumevanje nevrobioloških posledic izpostavljenosti AMPH pri ženskih prerijskih voluharjih smo raziskali učinke ponovljenega zdravljenja AMPH na izražanje mRNA DA receptorja in vezavo v različnih regijah možganov. Uporabili smo AMPH dozo in injekcijsko paradigmo, za katero smo nedavno dokazali, da spreminja ekspresijo DA receptorjev in poslabšuje socialno vedenje moških prerijskih voluharjev (Liu et al., 2010). Naši podatki kažejo, da je ponovna izpostavljenost AMPH bistveno povečala raven mRNA D1 receptorjev v NAcc. Podobno, vendar ne pomembno (p <0.07), je bil v CP opažen učinek, kar kaže, da ima AMPH vpliv tudi na izražanje mRNA D1R v tej regiji. Kljub tem spremembam v ekspresiji genov izpostavljenost AMPH ni spremenila ravni vezave D1 podobnih receptorjev v NAcc ali CP. Obstajata dve vrsti D1 podobnih receptorjev - D1 receptorji in D5 receptorji - oba sta lahko označena z D1-podobnim ligandom, ki se uporablja v našem eksperimentu vezave na receptorje. Ker pa receptorjev D5 v NAcc in CP tako rekoč ni (Missale et al., 1998; Tiberi et al., 1991), naši podatki kažejo na pomanjkanje sprememb, zlasti na ravni D1 receptorskih proteinov. Podobno so prejšnja poročila pri drugih vrstah glodalcev pokazala, da ponavljajoča se izpostavljenost AMPH ali drugim psihostimulantom ne more zanesljivo spremeniti afinitete ali gostote receptorjev D1 v teh regijah možganov (za pregled glej (Pierce in Kalivas, 1997; Bela in Kalivas, 1998)), kljub izboljšanju odzivnosti NAcc nevronov na agoniste D1 receptorjev do enega meseca po zdravljenju z zdravilom (Henry et al., 1989; Henry in White, 1991, 1995). Prav tako ne poročamo o spremembah mRNA ali D2 receptorskih vezavnih receptorjev D2 receptorjev v NAcc ali CP pri ženskih prerijskih volih po zdravljenju AMPH, kar je skladno s tistimi pri podganah in miših (Richtand et al., 1997; Sora et al., 1992) in predlog, da imajo receptorji NAcc D1 večjo vlogo pri odzivu na ponavljajočo se izpostavljenost AMPH (Berke in Hyman, 2000).

Zanimiva ugotovitev v tej študiji je, da je ponavljajoče se zdravljenje AMPH bistveno zmanjšalo raven izražanja genov D2 receptorja in vezavo D2 receptorjev v VTA ženskih prerijskih voluharjev. D2 receptorji v VTA se nahajajo na somatodendritičnih območjih A10 DA nevronov (projekcijski nevroni DA, ki izvirajo iz VTA in projektirajo v mezokortikolimbično območje) (Aghajanian in Bunney, 1977; Mercuri et al., 1997; Oades in Halliday, 1987; Bela in Wang, 1984b). Ti receptorji delujejo kot avtoreceptorji in njihova aktivacija vodi v hiperpolarizacijo celične membrane in inhibicijo žganja celic (Mercuri et al., 1997) (za pregled glejte (Mercuri et al., 1992)), zmanjšanje količine DA, sproščenega v ciljne regije, kot je NAcc (Usiello et al., 2000). V skladu s tem blokada D2 receptorja ali delecija gena povzroči pomanjkanje inhibicije celic A10 in naknadno prelivanje DA v NAcc kot odziv na različne dražljaje (Mercuri et al., 1997; Rouge-Pont et al., 2002). Zato lahko zmanjšanje D2 receptorjev v VTA, ugotovljeno v tej študiji, kaže na AMPH-inducirano navzdol somatodendritično avtoreceptorje v ženski voluharici. Ker je gostota avto receptorjev obratno sorazmerna s hitrostjo delovanja nevronov A10 DA (Bela in Wang, 1984a), ta učinek lahko vodi v povečano sproščanje DA in nevrotransmisijo v NAcc. Podobno so prejšnje raziskave pokazale, da so somatodendritični avtoreceptorji na A10 DA nevronih po ponavljajoči izpostavljenosti psihostimulantom podcenjeni, kar ima za posledico večjo spontano aktivnost in bazalno hitrost A10 DA celic (Henry et al., 1989), ki lahko trajajo dni po koncu zdravljenja z drogami (Ackerman in White, 1990). Pomembno pa je omeniti, da sta receptorja D2 in D3 izražena v VTA in lokalizirana presinaptično na dopaminergične nevrone (Diaz et al., 1995; Mercuri et al., 1997), kar kaže, da je trenutno zmanjšanje D2-podobnega receptorskega vezanja mogoče pripisati spremembam v obeh ali obeh podtipih receptorjev. Poznavanje specifičnega receptorskega podtipa, ki ga prizadene izpostavljenost AMPH, je pomembno za našo interpretacijo podatkov, saj so D2, vendar ne D3, receptorji, potrebni za inhibicijo avtoreceptorja nevronov DA (Mercuri et al., 1997; Rouge-Pont et al., 2002). Kljub temu je ekspresija D3 receptorjev v VTA izredno nizka kot pri receptorjih D2 (Bouthenet et al., 1991), in spiperon kaže višjo afiniteto za D2 kot receptor D3 (Missale et al., 1998), verjetno je, da trenutni učinki na vezavo D2 podobnih receptorjev predstavljajo specifično zmanjšanje ravni D2, namesto D3 receptorjev.

Medtem ko nevrobiološki učinki ponavljajoče se izpostavljenosti AMPH pri ženskah kažejo nekaj podobnosti s tistimi, ki so bile predhodno ugotovljene pri moških prerijskih voluharjih (Liu et al., 2010), sta vidni dve pomembni razliki. Prvič, čeprav je AMPH doživela povečanje mRNA D1 receptorjev v NAcc pri obeh spolih, so se funkcionalne posledice tega prepisovanja le še ohranile pri moških (tj. Ženske niso pokazale nobenih sprememb v vezavah receptorjev, podobnih D1, medtem ko je AMPH povečal nivoje receptorjev proteina NAcc D1 moških). Te razlike so lahko posledica uporabe različnih kvantitativnih tehnik za odkrivanje teh funkcionalnih posledic (tj. Vezava receptorjev je bila uporabljena pri ženskah, medtem ko je bil Western uporabljen pri moških) ali lahko kažejo na spol specifične učinke ponovljenega zdravljenja AMPH na receptorjih D1 v NAcc. prerijskih voluharjev. Drugič, zdravljenje AMPH ni imelo učinkov na izražanje mRNA D2 receptorjev v VTA pri moških prerijskih volih (Liu et al., 2010), vendar ga je pri ženskah občutno zmanjšala, pa tudi ravni vezave na D2 receptorje, kar še kaže, da so nevrobiološki učinki AMPH specifični za spol. Ta ideja je podprta z ugotovitvami v drugih vrstah, ki kažejo razlike v spolni izraženosti gena po zdravljenju AMPH (Castner in Becker, 1996).

AMPH-inducirane spremembe v mezokortikolimbičnem sistemu DA imajo lahko pomembne posledice za družbeno vedenje v prerijskih voluhah. Kot prej omenjeno odrasle moške in ženske prerijske voluharice tvorijo trajne vezi po parjenju (Carter et al., 1995; Williams et al., 1992; Winslow et al., 1993) in NAcc DA regulira to obnašanje pri obeh spolih na način, ki je specifičen za receptor: D2-podobne aktivacijske receptorje olajšuje in D1-podobne receptorske aktivacije zavirajo nastajanje partnerskih preferenc (Aragona et al., 2003, 2006; Aragona in Wang, 2009; Gingrich et al., 2000; Liu in Wang, 2003; Wang et al., 1999). AMF-inducirane spremembe mezokortikolimbičnih regij možganov, vključno s tistimi, o katerih so poročali tukaj, bi lahko imele globoke posledice za povezovanje parov v prerijski voluhi. Pri moških, na primer, AMPH-inducirana povišanja D1-podobnih receptorjev v NAcc temeljijo na AMPH-induciranem poslabšanju oblikovanja partnerskih preferenc (Liu et al., 2010), ker aktivacija receptorja NAcc D1 zavira partnerske preference, ki jih povzroči parjenje (Aragona et al., 2006). Poleg tega je farmakološka blokada receptorjev D1 med zdravljenjem z AMPH odmerek, odvisen od odmerka, izločila AMPH-inducirano poslabšanje oblikovanja partnerskih preferenc, kar je še pokazalo, da AMPH lahko poslabša vezavo parov prek mehanizma, posredovanega z D1 receptorjem (Liu et al., 2010). Pri ženskah namesto tega zaradi pomanjkanja inhibicije avtoreceptorja, ki ga kažejo trenutne ugotovitve (tj. Zmanjšana ekspresija D2 receptorja v VTA), bi se sproščanje DA, sproženo s parjenjem v NAcc, verjetno povečalo pri voluhah, zdravljenih z AMPH. Ker robustno povišanje koncentracije DA aktivira D1 receptorje z nizko afiniteto (Richfield et al., 1989), ta nevroadaptacija lahko ima pomembne vedenjske posledice za družbene vezi pri ženskah.

Skratka, trenutna študija dokazuje, da vedenjsko relevanten odmerek AMPH spreminja koncentracijo DA in ekspresijo receptorjev znotraj mezokortikolimbičnega sistema DA ženskih prerijskih voluharjev, kar je ključno vezje, ki je vključeno v monogamno družbeno vedenje te vrste. Ti rezultati zagotavljajo temelj za prihodnje študije ženskih prerijskih voluharic za preučevanje učinkov AMPH na vezavo parov in vključenih nevrokemičnih mehanizmih.

4. Eksperimentalni postopki

4.1. Živali

Ženske prerijske voluharice, vzrejene v ujetništvu (Microtus ochrogaster) potomci populacij v južnem Illinoisu so bili odstavljeni ob 21 starostnih dnevih in nato shranjeni v istospolnih bratovskih parih v plastičnih kletkah (29 × 18 × 13 cm), ki so vsebovale steljo cedrovih čipov. Vzdrževali so jih na ciklu 14: 10: temno (prižgana ob 0700 h) s ad libitum dostop do hrane in vode. Temperaturo vzdržujemo pri 21 ± 1 ° C. Vse živali, uporabljene v tej študiji, so bile med 90 in 120 starostjo. Poskusi so bili izvedeni v skladu s smernicami Odbora za institucionalno oskrbo živali in uporabo na državni univerzi v Floridi.

4.2. Pogojna paradigma za preferenco kraja

CPP aparat je bil identičen predhodno opisanemu in je sestavljen iz dveh plastičnih kletk, ki sta bili vizualno ločeni (bela od črne) in povezani med seboj s votlo cevko (Aragona et al., 2007; Liu et al., 2010). Uporabili smo klimatizacijsko paradigmo, ki smo jo nedavno razvili pri moških prerijskih voluharjih (Liu et al., 2010). Na kratko, vsem subjektom smo dali 30 min pred-test na dan 1 in količino časa, porabljenega v vsaki kletki, kvantificirali. Kletka, v kateri je posameznik preživel manj časa med pred-testom, je bila označena kot kletka, ki je bila zdravljena z zdravilom, druga pa je bila označena kot kletka s slanico. V naslednjih treh dneh (dnevi 40 – 2) je prišlo do kondicioniranja med dvema sejma 4 na dan. Med jutranjim zasedanjem (0900 h) so prejeli intraperitonealni (ip) injekcije 0.0, 0.1, 0.2 ali 1.0 mg / kg d-AMPH sulfata (Sigma, St. Louis, MO, ZDA), raztopljenega v slanici, tik pred namestitvijo. v kletko z zdravilom. Med popoldanskimi sejami (1500 h) so preiskovanci prejeli ip injekcijo fiziološke raztopine neposredno pred dajanjem v kletko s parno raztopino. Ta dva urnika na dan je bila uporabljena pri podganah (Campbell in Spear, 1999; Zhou et al., 2010) in je bila uporabljena v naši prejšnji študiji v moški prerijski voluharji (Liu et al., 2010). Poleg tega je bila ta paradigma izbrana zato, ker naši pilotni podatki niso pokazali razlik v obnašanju med subjekti, ki so bili zdravljeni z uravnoteženimi in fiksnimi paradigmami za injiciranje / kondicioniranje (neobjavljeni podatki), in ker so bili standardizirani načini injiciranja in zbiranja tkiv pomembni za merjenje izražanja DA markerja v nadaljnjih poskusih. kot tudi za neposredne primerjave s podatki iz moških prerijskih volov (Liu et al., 2010). Na dan 5 so bili vsi subjekti testirani na prisotnost CPP v post-testu 30 min. Število prehodov živali med kletkami je bilo zabeleženo med pred- in post-testom in uporabljeno kot indeks lokomotorne aktivnosti.

4.3. Priprava tkiva

Osebe so bile po injiciranju v eksperimentu 30 in 2 h hitro odtrgane 24 min po injiciranju v poskusih 3 in 4. Njihovi možgani so bili hitro odstranjeni in takoj zamrznjeni na suhem ledu, preden so bili shranjeni pri -80 ° C. Možgani iz eksperimenta 2 so bili razdeljeni koronalno na 300 μm, sekcije pa so bile odmrznjene na Superfrost / plus tobogane. Atlas možganov podgane Paxinos in Watson (Paxinos in Watson, 1998) je bila uporabljena za identifikacijo različnih regij možganov, vključno s PFC (plošče 8 – 10), NAcc (plošče 9 – 11), CP (plošče 10 – 12) in VTA (plošče 40 – 43), iz katerih so bilateralni udarci \ t Premer 1 mm je bil odvzet (Slika 2A) in shranjene pri -80 ° C do obdelave. Čeprav ni bila mezokortikolimbična regija možganov, je bila CP vključena v našo analizo, ker, tako kot NAcc in PFC, prejema DAergic vložek iz VTA (Oades in Halliday, 1987), vendar se ne zdi, da je vključen v ureditev DAergic za prerijo partnerske preferenceAragona et al., 2003, 2006; Liu in Wang, 2003). Za eksperimente 3 in 4 so bili možgani odrezani koronalno v 10 nizov 14 μm odsekov, ki so bili odtaljeni na Superfrost / plus diapozitive.

4.4. DA ekstrakcija in HPLC-ECD analiza

Ekstrakcija DA je bila izvedena, kot je opisano prej (Aragona et al., 2002), razen da so bili vzorci tkiva sonificirani v 50 μL perklorne kisline 0.1 M z 0.02% EDTA. Koncentracija DA je bila ocenjena z uporabo tekočinske kromatografije visoke ločljivosti z elektrokemično detekcijo (HPLC-ECD), kot je opisano prej (Curtis et al., 2003) z naslednjimi izjemami. Mobilno fazo sestavljajo 75 mM natrijev dihidrogenfosfat monohidrat, natrijeva sol 1.7 mM 1-oktansulfonske kisline, 0.01% trietilamin, 25 um EDTA in 7% acetonitril in pH je prilagojen na 3.0 z 85% fosforno kislino. Stopnja pretoka je bila 0.5 ml / min. Standardna krivulja in površina vrha sta izračunana, kot je opisano prej (Aragona et al., 2003). Meja zaznavnosti je bila ~ 10 pg na vzorec.

4.5. Hibridizacija in situ za D1 in D2 receptorsko mRNA

Nadomestni nizi razdelkov možganov iz eksperimenta 3 so bili obdelani situ hibridizacijsko označevanje mRNA DA receptorja. Antisense in sense riboprobes (velikodušno, ki jih dr. O. Civelli na University of California, Irvine, CA), so bili uporabljeni za D1 in D2 receptor mRNA označevanje in pripravljeni, kot je opisano prej (Liu et al., 2010). Sonde so bile označene posamično pri 37 ° C za 1 h v pufru, optimiziranem za transkripcijo, ki je sestavljen iz 0.5 μg / μl ustrezne DNA vzorca, [35S] -CTP, 4 mM ATP, UTP in GTP, 0.2 M ditiotreitol (DTT), RNasin (40 U / μl) in RNA polimeraza (20 U / μl). Predloga DNA je bila nato prebavljena z 1 U / μl DNaseI. Sonde smo očistili s kromatografskimi kolonami (Bio-Rad, Hercules, CA) in nato razredčili v hibridizacijskem pufru, sestavljenem iz 50% deioniziranega formamida, 10% dekstran sulfata, 3 × SSC, 10 mM natrijevega fosfatnega pufra (PB, pH 7.4), 1 × Denhardtova raztopina, 0.2 mg / ml tRNA kvasa in 10 mM DTT, da dobimo 5 × 106 cpm / ml.

Odseki možganov so bili fiksirani v 4% paraformaldehidu v 0.1 M fosfatnem pufru (PBS) pri 4 ° C za 20 min, sprani v PBS za 10 min in obdelani z 0.25% anhidrida ocetne kisline v trietanolaminu (pH 8.0) za 15 min za zmanjšanje nespecifična vezava. Predmete smo nato sprali v natrijevem citratu 2 × slanice (SSC), dehidrirali skozi povečane koncentracije etanola (ETOH) (70, 95 in 100%) in sušili na zraku.

Vsak zdrob je prejel 100 μl hibridizacijsko raztopino, ki je vsebovala ustrezno 35S-označena sonda, je bila pokrita z drsenjem in nato inkubirana pri 55 ° C v vlažni komori čez noč. Po inkubaciji smo odstranili pokrovne lističe v 2 × SSC, preparate smo dvakrat sprali v 2 × SSC za 5 min in nato sprali pri 37 ° C za 1 h v RNaznem pufru (8 mM Tris-HCl, 0.8 mM EDTA in 0.4 mM Tris-HCl, 8.0 mM EDTA in 25 M NaCl, pH 2), ki vsebuje 1 mg / ml RNaseA. Nato smo preparate izprali s padajočimi koncentracijami SSC (0.5 × SSC, 5 × SSC in 0.1 × SSC) za vsak 65 min in inkubirali v 60 × SSC pri 1 ° C za 2 min. Končno smo stekelca dali na sobno temperaturo, dehidrirali skozi povečane koncentracije ETOH in jih posušili na zraku. Odseki so bili naneseni na BioMax MR film (Kodak, Rochester, NY) za različna časovna obdobja, odvisno od sonde in območja, ki nas zanima, da bi ustvarili optimalne avtoradiograme. Za NAcc in CP, D14R in D60R mRNA označene sekcije so bile nanesene na film za 1 oz. 2 h, medtem ko so sekcije označene za D15-podobno in D6.5-podobne receptorske vezave aplicirane za 2 oziroma 60 h. Za VTA so bili za 2 h dodani odseki, označeni za mRNA D40R, tisti, ki so označeni za povezavo, podobno DXNUMX, pa so bili dodani za XNUMX h. Za vsako sondo smo testirali tudi senzorsko RNK kontrolo in ni pričakovali nobenega označevanja.

4.6. Avtoradiografija DA receptorjev

Za eksperiment 4 smo obdelali nadomestne sklope možganskih odsekov za D1-podobno in D2-receptorsko avtoradiografijo. Ligand, podoben D1 [125I] SCH23982 in ligand, podoben D2 [125I] 2′-jodospiperon so bili pridobljeni iz PerkinElmer (Waltham, MA). Avtoradiografija DA receptorja je bila izvedena, kot je opisano prej (Aragona et al., 2006).

4.7. Analiza podatkov

Za eksperiment 1 je bila CPP definirana s precejšnjim povečanjem časa, porabljenega v kletki med zdravilom, med post-testom v primerjavi s predhodnim testom, merjeno s paro t-test. Lokomotorno aktivnost smo analizirali z dvosmernimi ponovljivimi merami ANOVA, pri čemer smo primerjali pred- in post-testno lokomocijo (znotraj spremenljivke) in lokomocijo z zdravljenjem (spremenljivka med posamezniki). Za eksperiment 2 je bila koncentracija DA vsakega vzorca normalizirana z uporabo koncentracije celotnega proteina tega vzorca za kontrolo količine zbranega tkiva. Normalizirana vrednost koncentracije DA (pg / μg tkiva) je bila nato pretvorjena v odstotek povprečne koncentracije DA v kontroli slanice. Za vsako področje možganov smo primerjali odstotek koncentracije DA med skupinami z a t-test. V poskusih 3 in 4 so avtoradiogrami analizirali optične gostote označevanja mRNA ali vezave receptorjev v NAcc, CP in VTA z računalniškim programom slik (NIH IMAGE 1.60) (PFC ni bil vključen v analizo, ker ta regija ni pokazala odziva) AMPH v eksperimentu 2). Rastralni / kaudalni obseg analize slike za NAcc, CP in VTA je bil enak kot je opisan za eksperiment 2. Neuroanatomsko razlikovanje med NAcc in CP je bilo izvedeno z uporabo atlasov možganov Paxinos in Watson (Paxinos in Watson, 1998) kot vodilo, ki se nanaša tako na obliko označevanja kot tudi na položaj prednje komisije. Sekcije za vsako področje možganov so bile anatomsko usklajene med posamezniki in posamezna sredstva za vsakega posameznika so bila pridobljena z merjenjem optične gostote na dvostranski ravni v treh odsekih iz vsake možganske regije na žival. Gostota ozadja je bila odšteta od meritve vsakega odseka. Končne optične gostote smo pretvorili v odstotek kontrolne vrednosti slanice. Razlike v skupinah mRNA ali veznih ravneh znotraj možganske regije smo analizirali za vsak DA receptor z uporabo a t-test. Raven pomembnosti je bila določena na p

Priznanja

Zahvaljujemo se Kevinu Youngu in Adamu Smithu za kritično branje rokopisa. To delo so podprli nacionalni inštituti za zdravje DAF31-25570 za KAY, MHF31-79600 za KLG in DAR01-19627, DAK02-23048 in MHR01-58616 za ZXW.

Opombe

Okrajšave: AMPH, amfetamin; ANOVA, analiza variance; CP, repni putamen; CPP, pogojena preferenca kraja; DTT, ditiotreitol; DA, dopamin; ETOH, etanol; HPLC, tekočinska kromatografija visoke ločljivosti; ip, intraperitonealno; PCF, medialni prefrontalni korteks; NAcc, nucleus accumbens; PBS, fosfatni pufer; SSC, slan natrijev citrat; PB, natrijev fosfatni pufer; VTA, ventralno tegmentalno območje

VIRI

  1. Ackerman JM, Beli FJ. Občutljivost na avtoceptor A10 somatodendritičnega dopamina po prenehanju zdravljenja s kokainom. Neurosci. Lett. 1990, 117: 181 – 187. [PubMed]
  2. Aghajanian GK, Bunney BS. Dopaminski "autoreceptorji": farmakološka karakterizacija z mikroiontoforetičnimi študijami posamičnega zapisovanja celic. Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1977, 297: 1 – 7. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Wang Z. Dopaminska regulacija družbene izbire pri monogamni vrsti glodalcev. Spredaj. Behav. Neurosci. 2009, 3: 1 – 11.
  4. Aragona BJ, Curtis JT, Davidson AJ, Wang Z, Stephan FK. Vedenjska in nevrokemična preiskava cirkadianega učenja na kraju samem na podganah. J. Biol. Ritmi. 2002, 17: 330 – 344. [PubMed]
  5. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. Kritična vloga za nucleus accumbens dopamin pri oblikovanju partnerskih preferenc pri moških prerijskih voluharjih. J. Neurosci. 2003, 23: 3483 – 3490. [PubMed]
  6. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nucleus accumbens dopamin različno posreduje nastajanje in vzdrževanje vezav monogamnih parov. Nat. Neurosci. 2006, 9: 133 – 139. [PubMed]
  7. Aragona BJ, Detwiler JM, Wang Z. Nagrada za amfetamin v monogamni prerijski voluharici. Neurosci. Lett. 2007, 418: 190 – 194. [PMC brez članka] [PubMed]
  8. Bardo MT, Bevins RA. Kondicionalna prednostna izbira kraja: kaj prispeva k predkliničnemu razumevanju nagrade za droge? Psihofarmakologija (Berl.) 2000; 153: 31 – 43. [PubMed]
  9. Becker JB. Neposredni učinek beta-estradiola 17 na striatum: razlike med spoloma pri sproščanju dopamina. Synapse. 1990, 5: 157 – 164. [PubMed]
  10. Becker JB, Hu M. Spolne razlike v zlorabi drog. Spredaj. Neuroendocrinol. 2008, 29: 36 – 47. [PMC brez članka] [PubMed]
  11. Becker JB, Ramirez VD. Razlike v spolu v amfetaminu so stimulirale sproščanje kateholaminov iz tkiva striatnih podgan iz in vitro. Brain Res. 1981, 204: 361 – 372. [PubMed]
  12. Becker JB, Molenda H, Hummer DL. Razlike med spoloma v vedenjskih odzivih na kokain in amfetamin. Posledice za mehanizme, ki posredujejo razlike med spoloma pri zlorabi drog. Ann. NY Acad. Sci. 2001, 937: 172 – 187. [PubMed]
  13. Berke JD, Hyman SE. Odvisnost, dopamin in molekularni mehanizmi spomina. Neuron. 2000, 25: 515 – 532. [PubMed]
  14. Bouthenet ML, Souil E, Martres MP, Sokoloff P, Giros B, Schwartz JC. Lokalizacija dopamin D3 receptorske mRNA v podganjih možganih z uporabo in situ hibridizacijske histokemije: primerjava z dopaminsko D2 receptorsko mRNA. Brain Res. 1991, 564: 203 – 219. [PubMed]
  15. Kamp DM, Robinson TE. Občutljivost na preobčutljivost. I. Spolne razlike v trajnih učinkih kroničnega zdravljenja D-amfetamina na gibanje, stereotipno vedenje in možganske monoamine. Behav. Brain Res. 1988, 30: 55 – 68. [PubMed]
  16. Campbell J, Spear LP. Učinki zgodnjega rokovanja na aktivacijo lokomotorja, ki jo povzroča amfetamin, in kondicionalno preferenco kraja pri odrasli podgani. Psihofarmakologija (Berl.) 1999; 143: 183 – 189. [PubMed]
  17. Carter CS, DeVries AC, Getz LL. Fiziološki substrati monogamije sesalcev: model prerijske volčice. Neurosci. Biobehav. 1995: 19: 303-314. [PubMed]
  18. Castner SA, Becker JB. Spolne razlike v učinku amfetamina na takojšnje zgodnje izražanje genov v podganjem striatumu podgan. Brain Res. 1996, 712: 245 – 257. [PubMed]
  19. Cho AK, Melega WP, Kuczenski R, Segal DS, Schmitz DA. Profili kaudat-putamen dopamina in stereotipni odziv po intravenskem in subkutanem amfetaminu. Synapse. 1999, 31: 125 – 133. [PubMed]
  20. Clausing P, Bowyer JF. Časovni potek možganske temperature in caudate / putamen mikrodializata ravni amfetamina in dopamina pri podganah po večkratnih odmerkih D-amfetamina. Ann. NY Acad. Sci. 1999, 890: 495 – 504. [PubMed]
  21. Curtis JT, Wang Z. Učinki amfetamina na mikrotine glodalce: primerjalna študija z uporabo monogamnih in promiskuitetnih voluharjev. Nevroznanost. 2007, 148: 857 – 866. [PMC brez članka] [PubMed]
  22. Curtis JT, Stowe JR, Wang Z. Diferencialni učinki intraspecifičnih interakcij na striatni dopaminski sistem v socialnih in nesocialnih voluhah. Nevroznanost. 2003, 118: 1165 – 1173. [PubMed]
  23. Curtis JT, Liu Y, Aragona BJ, Wang Z. Dopamin in monogamija. Brain Res. 2006, 1126: 76 – 90. [PubMed]
  24. Di Chiara G, Tanda G, Frau R, Carboni E. O prednostni sproščanju dopamina v nucleus accumbens z amfetaminom: nadaljnji dokazi, pridobljeni z vertikalno vsajenimi koncentričnimi dializnimi sondami. Psihofarmakologija (Berl.) 1993; 112: 398 – 402. [PubMed]
  25. Diaz J, Levesque D, Lammers CH, Griffon N, Martres MP, Schwartz JC, Sokoloff P. Fenotipska karakterizacija nevronov, ki izražajo receptor dopamina D3 v možganih podgan. Nevroznanost. 1995, 65: 731 – 745. [PubMed]
  26. Drevets WC, Gautier C, cena JC, Kupfer DJ, Kinahan PE, Grace AA, cena JL, Mathis CA. Amfetaminsko inducirano sproščanje dopamina v človeškem ventralnem striatumu je povezano z evforijo. Biol. Psihiatrija. 2001, 49: 81 – 96. [PubMed]
  27. Fattore L, Altea S, Fratta W. Spolne razlike v odvisnosti od drog: pregled študij na živalih in ljudi. Zdravje žensk (Lond. Engl.) 2008; 4: 51 – 65. [PubMed]
  28. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Receptorji dopamina D2 v nucleus accumbens so pomembni za družbeno vezanost pri ženskih prerijskih voluharjih (Microtus ochrogaster) Behav. Neurosci. 2000, 114: 173 – 183. [PubMed]
  29. Henry DJ, White FJ. Ponavljajoča uporaba kokaina povzroča trajno povečanje občutljivosti dopaminskih receptorjev D1 v podganah. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991, 258: 882 – 890. [PubMed]
  30. Henry DJ, White FJ. Vztrajnost vedenjske preobčutljivosti na kokain vzporedno povečuje zaviranje nevronov nucleus accumbens. J. Neurosci. 1995, 15: 6287 – 6299. [PubMed]
  31. Henry DJ, Greene MA, Beli FJ. Elektrofiziološki učinki kokaina v sistemu mezokovinskega dopamina: večkratna uporaba. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1989, 251: 833 – 839. [PubMed]
  32. Hu XT, Koeltzow TE, Cooper DC, Robertson GS, White FJ, Vezina P. Ponavljajoča administracija amfetamina na področju ventralnega tegmentalnega področja spreminja signalizacijo dopaminskega D1 receptorja v nucleus accumbens. Synapse. 2002, 45: 159 – 170. [PubMed]
  33. Hu M, Crombag HS, Robinson TE, Becker JB. Biološke osnove spolnih razlik v nagnjenosti k samokontroli kokaina. Nevropsihofarmakologija. 2004, 29: 81 – 85. [PubMed]
  34. Insel TR, Preston S, Winslow JT. Parjenje v monogamnem moškem: vedenjske posledice. Fiziol. Behav. 1995, 57: 615 – 627. [PubMed]
  35. Kelley AE, Berridge KC. Nevroznanost naravnih nagrad: pomen za odvisne droge. J. Neurosci. 2002, 22: 3306 – 3311. [PubMed]
  36. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oksitocin in dopamin medsebojno delujeta, da uravnavata nastanek vezave paric v ženskih prerijskih voluhah. Nevroznanost. 2003, 121: 537 – 544. [PubMed]
  37. Liu Y, Aragona BJ, Young KA, Dietz DM, Kabbaj M, Mazei-Robison M, Nestler EJ, Wang Z. Nucleus accumbens dopamin posreduje amfetaminom povzročeno poslabšanje socialne povezanosti v monogamni vrsti glodalcev. Proc.Natl. Acn.Sci.USA 2010; 107: 1217 – 1222. [PMC brez članka] [PubMed]
  38. Lynch WJ. Razlike med spoloma v ranljivosti za samo-dajanje zdravil. Exp. Clin. Psychopharmacol. 2006, 14: 34 – 41. [PubMed]
  39. Lynch WJ, Carroll ME. Spolne razlike pri pridobivanju intravensko uporabljenega kokaina in heroina pri podganah. Psihofarmakologija (Berl.) 1999; 144: 77 – 82. [PubMed]
  40. Mercuri NB, Calabresi P, Bernardi G. Elektrofiziološka dejanja dopaminskih in dopaminergičnih zdravil na nevronih particije in ventralne tegmentalne površine. Life Sci. 1992, 51: 711 – 718. [PubMed]
  41. Mercuri NB, Saiardi A, Bonci A, Picetti R, Calabresi P, Bernardi G, Borrelli E. Izguba avtoreceptorske funkcije pri dopaminergičnih nevronih pri miših z pomanjkanjem receptorjev dopamin D2. Nevroznanost. 1997, 79: 323 – 327. [PubMed]
  42. Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Dopaminski receptorji: od strukture do delovanja. Fiziol. 1998: 78: 189-225. [PubMed]
  43. Narayanan NS, Guarnieri DJ, DiLeone RJ. Metabolični hormoni, krogi dopamina in krmljenje. Spredaj. Neuroendocrinol. 2010, 31: 104 – 112. [PMC brez članka] [PubMed]
  44. Nesse RM, Berridge KC. Uporaba psihoaktivnih drog v evolucijski perspektivi. Znanost. 1997, 278: 63 – 66. [PubMed]
  45. Nestler EJ. Molekularni mehanizmi odvisnosti od drog. Nevrofarmakologija. 2004; 47 (dodatek 1): 24 – 32. [PubMed]
  46. Nestler EJ. Ali obstaja skupna molekularna pot za zasvojenost? Nat. Neurosci. 2005, 8: 1445 – 1449. [PubMed]
  47. Oades RD, Halliday GM. Ventralni tegmentalni (A10) sistem: nevrobiologija. 1. Anatomija in povezljivost. Brain Res. 1987, 434: 117 – 165. [PubMed]
  48. Palmiter RD. Je dopamin fiziološko pomemben posrednik prehranjevalnega vedenja? Trendi Neurosci. 2007, 30: 375 – 381. [PubMed]
  49. Panksepp J, Knutson B, Burgdorf J. Vloga možganskih čustvenih sistemov pri odvisnostih: nevro-evolucijska perspektiva in nov model "samoprijave" živali. Zasvojenost. 2002; 97: 459-469. [PubMed]
  50. Paxinos G, Watson C. Možgani podgan v stereotaksičnih koordinatah. Academic Press; San Diego, CA: 1998.
  51. Pierce RC, Kalivas PW. Model vezja za izražanje vedenjske senzibilizacije do amfetaminskih podobnih psihostimulantov. Brain Res. Brain Res. 1997: 25: 192-216. [PubMed]
  52. Richfield EK, Penney JB, Young AB. Primerjave anatomskih in afinitetnih stanj med receptorji dopamin D1 in D2 v osrednjem živčnem sistemu podgane. Nevroznanost. 1989, 30: 767 – 777. [PubMed]
  53. Richtand NM, Kelsoe JR, Kuczenski R, Segal DS. Kvantifikacija ravni mRNA receptorjev dopamin D1 in D2, povezanih z razvojem vedenjske senzibilizacije pri podganah, zdravljenih z amfetaminom. Neurochem. Int. 1997, 31: 131 – 137. [PubMed]
  54. Roberts DC, Bennett SA, Vickers GJ. Estrous cikel vpliva na samo-dajanje kokaina po progresivnem urniku podgan pri podganah. Psihofarmakologija (Berl.) 1989; 98: 408 – 411. [PubMed]
  55. Robinson TE, Becker JB. Dolgotrajne spremembe v možganih in obnašanje, ki ga povzroča kronična uporaba amfetamina: pregled in ocena živalskih modelov amfetaminske psihoze. Brain Res. 1986, 396: 157 – 198. [PubMed]
  56. Robinson TE, Kolb B. Stalne strukturne spremembe v nukleus akumbensih in prefrontalnih nevronih v korteksu, ki jih proizvajajo predhodne izkušnje z amfetamini. J. Neurosci. 1997, 17: 8491 – 8497. [PubMed]
  57. Robinson TE, Jurson PA, Bennett JA, Bentgen KM. Trajna preobčutljivost dopaminske nevrotransmisije v ventralnem striatumu (nucleus accumbens), ki je nastala po predhodnih izkušnjah z (+) - amfetaminom: mikrodializna študija pri prosto gibljivih podganah. Brain Res. 1988, 462: 211 – 222. [PubMed]
  58. Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Samokontrola kokaina spreminja morfologijo dendritov in dendritičnih bodic v nucleus accumbens in neokorteksu. Synapse. 2001, 39: 257 – 266. [PubMed]
  59. Roth ME, Carroll ME. Spolne razlike pri pridobivanju IV metamfetamina samoiniciacije in kasnejše vzdrževanje pod progresivnim razmerjem pri podganah. Psihofarmakologija (Berl.) 2004; 172: 443 – 449. [PubMed]
  60. Rouge-Pont F, Usiello A, Benoit-Marand M, Gonon F, Piazza PV, Borrelli E. Spremembe v zunajceličnem dopaminu, ki ga povzroča morfin in kokain: ključni nadzor z D2 receptorji. J. Neurosci. 2002, 22: 3293 – 3301. [PubMed]
  61. Sora I, Fujiwara Y, Tomita H, Ishizu H, Akiyama K, Otsuki S, Yamamura HI. Pomanjkanje učinka zdravljenja s haloperidolom ali metamfetaminom na ravni mRNA dveh izooblik receptorjev dopamin D2 v možganih podgan. Jpn. J. Psychiatry Neurol. 1992, 46: 967 – 973. [PubMed]
  62. Tiberi M, Jarvie KR, Silvia C, Falardeau P, Gingrich JA, Godinot N, Bertrand L, Yang-Feng TL, Fremeau RT, Jr, Caron MG. Kloniranje, molekularna karakterizacija in kromosomska določitev gena, ki kodira drugi podtip D1 dopaminskega receptorja: diferencialni vzorec ekspresije v možganih podgan v primerjavi z D1A receptorjem. Proc. Natl. Acad. Sci. 1991: 88: 7491 – 7495. [PMC brez članka] [PubMed]
  63. Usiello A, Baik JH, Rouge-Pont F, Picetti R, Dierich A, LeMeur M, Piazza PV, Borrelli E. Različne funkcije obeh izooblik receptorjev dopamin D2. Narava. 2000, 408: 199 – 203. [PubMed]
  64. Wang Z, Yu G, Cascio C, Liu Y, Gingrich B, Insel TR. Dopamin D2 receptorsko uravnavanje partnerskih preferenc pri ženskih prerijskih voluharjih (Microtus ochrogaster): mehanizem za vezavo par? Behav. Neurosci. 1999, 113: 602 – 611. [PubMed]
  65. Weiner DM, Levey AI, Sunahara RK, Niznik HB, O'Dowd BF, Seeman P, Brann MR. MRNA dopaminskih receptorjev D1 in D2 v možganih podgan. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 1991; 88: 1859–1863. [PMC brez članka] [PubMed]
  66. Beli FJ, Kalivas PW. Nevroadaptacije, ki so vključene v odvisnost od amfetamina in kokaina. Od alkohola odvisni. 1998, 51: 141 – 153. [PubMed]
  67. White FJ, Wang RY. A10 dopaminski nevroni: vloga avtoreceptorjev pri določanju hitrosti pečenja in občutljivosti na agoniste dopamina. Life Sci. 1984a, 34: 1161 – 1170. [PubMed]
  68. White FJ, Wang RY. Farmakološka karakterizacija dopaminskih avtoreceptorjev v podganah s podganah podgane: mikroiontoforetske študije. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1984b, 231: 275 – 280. [PubMed]
  69. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Razvoj partnerskih preferenc pri ženskih prerijskih voluharjih (Microtus ochrogaster): vloga socialne in spolne izkušnje. Horm. Behav. 1992, 26: 339 – 349. [PubMed]
  70. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. vloga centralnega vazopresina v vezavi parov v monogamni volfrini. Narava. 1993, 365: 545 – 548. [PubMed]
  71. Mladi KA, Gobrogge KL, Liu Y, Wang Z. Nevrobiologija vezave parov: spoznanja iz socialno monogamnega glodalca. Spredaj. Neuroendocrinol. 2010 doi: 10.1016 / j.yfrne.2010.07.006. [PMC brez članka] [PubMed]
  72. Mladi KA, Gobrogge KL, Wang ZX. Vloga mezokortikolimbičnega dopamina pri uravnavanju interakcij med zlorabami drog in socialnim vedenjem. Neurosci. Biobehav. 2011: 35: 498-515. [PMC brez članka] [PubMed]
  73. Zahm DS. Integrativna nevroanatomska perspektiva na nekaterih subkortikalnih substratih adaptivnega odziva s poudarkom na nucleus accumbens. Neurosci. Biobehav. 2000: 24: 85-105. [PubMed]
  74. Zhou JY, Mo ZX, Zhou SW. Vpliv rhinhofilina na koncentracije osrednjih nevrotransmiterjev v pogojenih pogojih na mestu možganov pod vplivom amfetamina. Fitoterapia. 2010; 81 (7): 844-848. [PubMed]