ไกล่เกลี่ย Orexin เริ่มต้นของพฤติกรรมทางเพศในหนูหนูเพศผู้ แต่ไม่สำคัญต่อประสิทธิภาพทางเพศ (2011)

Behav Horm ต้นฉบับผู้เขียน; พร้อมใช้งานใน PMC 2011 ส.ค. 1

เผยแพร่ในแบบฟอร์มการแก้ไขขั้นสุดท้ายเป็น:

PMCID: PMC2917508

ฉบับแก้ไขล่าสุดของผู้เผยแพร่บทความนี้มีอยู่ที่ Behav Horm

ดูบทความอื่น ๆ ใน PMC ที่ กล่าวถึง บทความที่ตีพิมพ์

ไปที่:

นามธรรม

hypothalamic neuropeptide orexin เป็นสื่อกลางในการกระตุ้นการนอนหลับและพฤติกรรมที่ให้รางวัลตามธรรมชาติรวมถึงการรับประทานอาหาร พฤติกรรมทางเพศของชายนั้นได้รับการเปลี่ยนแปลงโดย orexin receptor-1 agonists หรือคู่ปรับตัวฉกาจซึ่งแนะนำให้มีบทบาทสำหรับ orexin-A ในพฤติกรรมการให้รางวัลตามธรรมชาตินี้ อย่างไรก็ตามบทบาทที่เฉพาะเจาะจงของ endogenous orexin-A หรือ B ในองค์ประกอบต่าง ๆ ของพฤติกรรมทางเพศของผู้ชายยังไม่ชัดเจน ดังนั้นการศึกษาในปัจจุบันจึงใช้เครื่องหมายสำหรับการกระตุ้นระบบประสาทและรอยโรคเฉพาะเซลล์ orexin เพื่อทดสอบสมมติฐานที่ว่า orexin มีความสำคัญต่อแรงจูงใจและสมรรถภาพทางเพศของหนูเพศผู้ อย่างแรกการแสดงออกของ cFos ในเซลล์ประสาท orexin นั้นแสดงให้เห็นว่าต่อไปนี้เป็นการนำเสนอของหญิงที่เปิดกว้างหรือไม่รับได้โดยไม่ต้องกระตุ้นโดยองค์ประกอบอื่นของการผสมพันธุ์ ถัดไปบทบาทการทำงานของ orexin ได้รับการทดสอบโดยใช้ orexin-B conjugated saporin ทำให้เกิดรอยโรคในร่างกายของเซลล์ orexin ในมลรัฐ hypothalamus แผลถูกดำเนินการในเพศชายไร้เดียงสาและพฤติกรรมทางเพศที่ตามมาถูกบันทึกไว้ในระหว่างการทดลองการผสมพันธุ์สี่ Lesion เพศชายมีเวลาแฝงที่สั้นกว่าในการติดเชื้อและไม่คาดคิดในช่วงแรก แต่ไม่ใช่การทดสอบการผสมพันธุ์ที่ตามมาการแนะนำรอยโรคช่วยให้เริ่มต้นพฤติกรรมทางเพศในเพศที่ไร้เดียงสา แต่ไม่มีประสบการณ์ รอยโรคไม่ส่งผลต่อแรงจูงใจทางเพศในผู้ชายที่มีประสบการณ์ซึ่งพิจารณาจากการทดสอบทางวิ่ง ในที่สุดการทดสอบยกระดับและเขาวงกตแสดงให้เห็นถึงพฤติกรรมที่คล้ายความวิตกกังวลที่ลดลงในเพศผู้ซึ่งได้รับการสนับสนุนบทบาทสำหรับ orexin ในความวิตกกังวลที่เกี่ยวข้องกับการสัมผัสเริ่มต้นกับหญิงในสัตว์ไร้เดียงสา โดยรวมแล้วการค้นพบเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า orexin ไม่สำคัญต่อสมรรถภาพทางเพศของผู้ชายหรือแรงจูงใจ แต่อาจมีบทบาทในการเร้าอารมณ์และความวิตกกังวลที่เกี่ยวข้องกับพฤติกรรมทางเพศในสัตว์ไร้เดียงสา

คำสำคัญ: orexin, hypocretin, พฤติกรรมทางเพศ, การมีเพศสัมพันธ์, การกระตุ้นระบบประสาท, แรงจูงใจ, ไฮโปทาลามัส, ความแปลกใหม่, เร้าอารมณ์, ความวิตกกังวล

บทนำ

Orexin หรือที่เรียกว่า hypocretin เป็น neuropeptide hypothalamic ที่สำคัญสำหรับพฤติกรรมการให้อาหาร (de Lecea et al., 1998; ซากุไรและคณะ 1998, ซากุไร 2006; เบอนัวต์และคณะ 2008) ความเร้าอารมณ์และการนอนหลับ (Chemelli และคณะ, 1999; หลินและคณะ, 1999, ซากุไร 2007; Furlong และ Carrive, 2007; Furlong และคณะ, 2009; Carter และคณะ 2009) เซลล์ Orexin มีการแปลเป็นพื้นที่ด้านข้าง hypothalamic (LHA) และ perifornical dorsomedial hypothalamus (PFA-DMH) และผลิต neuropeptides สองชนิด orexin-A และ B (de Lecea et al., 1998; Sakurai และคณะ, 1998) เซลล์ประสาทของ Orexin ได้แสดงให้เห็นว่ามีโครงร่างของสมองที่เกี่ยวข้องกับการไกล่เกลี่ยของความเร้ารวมไปถึง locus coeruleus นิวเคลียส tuberomammillary และ peduculopontine tegmental nucleus (Peyron et al., 1998; Hagan et al., 1999; Horvath และคณะ, 1999; Baldo et al., 2003) Orexin มีส่วนเกี่ยวข้องในการให้รางวัลและแรงจูงใจโดยเฉพาะที่เกี่ยวข้องกับอาหารและยาเสพติด (แอสตันโจนส์และอัล 2009a; แอสตันโจนส์และอัล 2009b) และเซลล์ประสาท orexin ได้รับการแสดงเพื่อให้รางวัลแก่โครงสร้างสมองที่เกี่ยวข้องในระบบ mesolimbic รวมถึงพื้นที่หน้าท้องส่วนล่าง (VTA) และนิวเคลียส accumbens (NAc) (Peyron et al., 1998; Fadel และ Deutch, 2002; Martin et al., 2002; Baldo et al., 2003) เซลล์ประสาท Orexin ถูกกระตุ้นโดยการชี้นำตามบริบทที่เกี่ยวข้องกับรางวัลอาหารและยา (แฮร์ริสและคณะ 2005; de Lecea et al., 2006; Choi และคณะ, 2010) และแสดงให้เห็นว่ามีบทบาทในพฤติกรรมการให้อาหารตามรางวัล (Choi และคณะ, 2010) ยิ่งไปกว่านั้น intracerebroventricular (ICV) หรือการจัดการ intraperitoneal ของตัวรับ orexin 1 (ORX1) คู่ต่อสู้ส่งผลให้เกิดแรงจูงใจที่ลดลงสำหรับอาหารอร่อย (Thorpe et al., 2005; Nair et al., 2008) ในขณะที่การบริหาร ICV orexin-A สามารถคืนแรงจูงใจนี้ (Boutrel et al., 2005).

บทบาทของ orexin ในพฤติกรรมการให้รางวัลอื่น ๆ ยังไม่ชัดเจนในขณะนี้แม้ว่าการศึกษาหลายครั้งได้มีส่วนเกี่ยวข้องกับบทบาทของ orexin ในการควบคุมพฤติกรรมทางเพศในหนูเพศผู้ ก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ประสาท orexin ถูกกระตุ้นโดยการมีเพศสัมพันธ์ในหนูตัวผู้ (Muschamp และคณะ, 2007) นอกจากนี้การบริหาร orexin-A ในพื้นที่ preoptic medial (mPOA) ส่งผลให้สมรรถภาพทางเพศเพิ่มขึ้นเห็นได้จากการลดระยะเวลาในการติดตั้งและ intromit และเพิ่มความถี่ของการติดตั้งและ intromission (Gulia และคณะ, 2003) ในทางตรงกันข้ามการบริหาร ICV ของ orexin-A ลดทอนแรงจูงใจทางเพศโดยลดการตั้งค่าเพศหญิงแม้ว่าจะอยู่ในเพศชายที่มีแรงจูงใจทางเพศสูงเท่านั้น (Bai et al., 2009) การศึกษาโดยใช้ ORX1 คู่อริแสดงให้เห็นถึงข้อมูลที่ขัดแย้งเช่นกันเนื่องจากการบริหารระบบของศัตรู ORX1 ทำให้ประสิทธิภาพทางเพศลดลงเล็กน้อยโดยเพิ่มความล่าช้าในการ intromit โดยไม่ส่งผลต่อพฤติกรรมทางเพศอื่น ๆ (Muschamp และคณะ, 2007) ในขณะที่การบริหาร ICV ของคู่ต่อสู้ ORX1 ไม่มีผลต่อแรงจูงใจทางเพศ (Bai et al., 2009) การศึกษาเหล่านี้ร่วมกันชี้ให้เห็นว่าการบริหาร orexin-A จากภายนอกมีผลต่อสมรรถภาพทางเพศและแรงจูงใจ อย่างไรก็ตามภายนอก orexin อาจไม่ได้มีบทบาทสำคัญในการไกล่เกลี่ยพฤติกรรมทางเพศ (Bai et al., 2009) ดังนั้นเป้าหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการตรวจสอบว่า orexin ภายนอกเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับแรงจูงใจทางเพศและประสิทธิภาพการทำงานของหนูเพศชาย

ประการแรกมันถูกกำหนดเมื่อในระหว่างพฤติกรรมทางเพศเซลล์ประสาท orexin ถูกเปิดใช้งานการทดสอบสมมติฐานที่ว่าเซลล์ประสาท orexin จะเปิดใช้งานเมื่อมีการแนะนำของการกระตุ้นเศรษฐกิจที่คุ้มค่า ยิ่งกว่านั้นตามที่แสดงให้เห็นว่าประสบการณ์ทางเพศมีอิทธิพลต่อการมีเพศสัมพันธ์Dewsbury, 1969) และคุณสมบัติที่คุ้มค่าของพฤติกรรมทางเพศ (Tenk et al., 2009) มันถูกกำหนดว่าประสบการณ์ทางเพศมีผลต่อการกระตุ้นเซลล์ประสาท orexin ในระหว่างการผสมพันธุ์ ในที่สุดก็มีการทดสอบว่า orexin มีบทบาทสำคัญในการสร้างแรงจูงใจทางเพศและประสิทธิภาพโดยใช้รอยโรคเฉพาะของเซลล์ร่างกายของเซลล์ประสาท orexin

วัสดุและวิธีการ

ตัวเต็มวัย Sprague Dawley rats (200 – 250g) ได้มาจาก Harlan (Indianapolis, IN) หรือ Charles River Laboratories (Sherbrooke, Quebec, Canada) และตั้งอยู่แยกกันเป็นคู่หรือเป็นคู่ตามการทดลองแต่ละครั้ง ห้องอาณานิคมได้รับการดูแลใน 12 / 12 ย้อนกลับวงจรแสงมืด (ไฟปิดที่ 10 am) และมีอาหารและน้ำ โฆษณาฟรี ยกเว้นในระหว่างการทดสอบพฤติกรรม หนู Sprague-Dawley ตัวเมียได้รับจาก Harlan (Indianapolis, IN) หรือ Charles River Laboratories (Sherbrooke, Quebec, Canada) ได้รับการตัดรังไข่ทั้งสองข้างและฝังใต้ผิวหนังด้วย 5% 17-β-estradiol benzoate silastic capsules การเปิดรับทางเพศเกิดจากการฉีดฮอร์โมนโปรเจสเตอโรน (500 µg ใน 0.1ml ของน้ำมันงา) ประมาณ 4 ชั่วโมงก่อนการผสมพันธุ์ ขั้นตอนทั้งหมดได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการดูแลสัตว์ที่มหาวิทยาลัยซินซินนาติและมหาวิทยาลัยเวสเทิร์นออนทาริโอและปฏิบัติตามแนวทางที่กำหนดโดยสถาบันสุขภาพแห่งชาติและสภาแคนาดาด้านการดูแลสัตว์ การทดสอบพฤติกรรมทั้งหมดได้ดำเนินการในช่วงครึ่งแรกของเฟสมืดภายใต้แสงไฟสลัวแดงยกเว้นเมื่อระบุไว้เป็นอย่างอื่น

การออกแบบการทดลอง

การศึกษาการแสดงออกของ cFos

หนูตัวผู้ (n = 48) ถูกกักตัวเป็นรายบุคคลและสัตว์ครึ่งหนึ่งได้รับประสบการณ์ทางเพศในกรงที่บ้านในช่วง 5 สองครั้งในการผสมพันธุ์สัปดาห์ละครั้ง การทดสอบการผสมพันธุ์ในกรงที่บ้านเพื่อกำจัดความเร้าอารมณ์และการแสดงออกของ cFos ที่เกิดจากการสัมผัสกับเวทีการผสมพันธุ์ที่แตกต่างกันและการสัมผัสกับตัวชี้นำปรับอากาศที่เกี่ยวข้องกับการผสมพันธุ์ก่อนหน้า (Balfour et al., 2004) ผู้หญิงที่เปิดกว้างได้รับการแนะนำให้รู้จักกับกรงที่บ้านและตัวผู้ได้รับอนุญาตให้ผสมพันธุ์จนกว่าจะถึงการพุ่งออกมาหนึ่งครั้งหรือเป็นเวลา 60 นาที ระหว่างการทดสอบพฤติกรรมทางเพศแต่ละครั้งพบว่า จำนวนรวมของการเมานต์และการแจ้งเตือนรวมถึงเวลาในการตอบสนองต่อการเมานท์ครั้งแรกและการแจ้งเตือน (เวลาจากการนำเสนอของหญิงที่เปิดกว้างต่อการติดตั้งครั้งแรกหรือการฉีดเข้า) และการหลั่ง (เวลาตั้งแต่การบุกรุกครั้งแรกจนถึงการหลั่ง) (Agmo, 1997) สัตว์ที่เหลืออยู่ครึ่งหนึ่งยังคงมีเพศสัมพันธ์ไร้เดียงสา สัตว์เหล่านี้ตั้งอยู่ในห้องเดียวกับเพศชายที่มีประสบการณ์ทางเพศถูกจัดการและสัมผัสกับกลิ่นและเสียงที่เกี่ยวข้องกับการผสมพันธุ์ แต่ไม่ได้ผสมพันธุ์ สัตว์ที่ไร้เดียงสาและมีประสบการณ์ถูกแบ่งย่อยออกเป็นกลุ่มทดลอง 6 เพิ่มเติม (n = 4 ต่อกลุ่ม) 6 ไร้เดียงสาและกลุ่มที่มีประสบการณ์รวม: ควบคุมเพศชายโดยไม่ต้องสัมผัสกับพฤติกรรมทางเพศ (Home Cage); ตัวผู้สัมผัสกับตัวเมียที่ไม่รับเชื้อในกรงที่บ้านเป็นเวลา 15 นาที (Anestrous Female) เพศชายสามารถตรวจสอบและมีปฏิสัมพันธ์ แต่ไม่ได้ผสมพันธุ์เนื่องจากการขาดการเปิดกว้างของเพศหญิง; ตัวผู้สัมผัสกับกลิ่นของตัวเมียที่เปิดกว้างซึ่งวางอยู่ในกล่องลวดตาข่ายที่ด้านบนของกรงที่บ้านเป็นเวลา 15 นาที (ตัวเมีย Estrous); เพศชายที่แสดงขึ้น แต่ไม่ intromissions หรือพุ่งออกมาจากเพศหญิงสวมหน้ากาก (ภูเขา); เพศชายที่แสดงการเมานต์และการแจ้งเตือนเท่านั้น (Intromission); และเพศชายที่แต่งงานแล้วกับการพุ่งออกมาหนึ่งครั้ง (อุทาน) หนึ่งชั่วโมงหลังจากสิ้นสุดการทดสอบผู้ชายถูกเสียสละเพื่อวิเคราะห์การแสดงออกของ cFos กลุ่มที่มีประสบการณ์ทางเพศสัมพันธ์กับพารามิเตอร์ของพฤติกรรมทางเพศและไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มก่อนการทดสอบครั้งสุดท้าย ยิ่งไปกว่านั้นไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มไร้เดียงสาและกลุ่มที่มีประสบการณ์ในจำนวนเมานต์รวมถึงความคาดหวังระหว่างการทดสอบครั้งสุดท้าย

perfusions: การแสดงออกของ cFos

เพศชายทุกคนได้รับการดมยาสลบอย่างล้ำลึกด้วยโซเดียม pentobarbitol (270 mg / mL) และถูกทำให้เป็น transcardially-perfused ด้วย 4% paraformaldehyde (500 mL; PFA) ต่อไปนี้สมองกระจายไปถูกลบออกทันทีและโพสต์คงที่เป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงในตรึงเดียวกันแล้วโอนไปยังสารละลายซูโครส 20% สำหรับการแช่แข็ง สมองถูกเก็บไว้ใน microtome แช่แข็ง (Microm, Walldorf, ประเทศเยอรมนี) ในส่วนโคโรนาของ 35 µm และเก็บไว้ในส่วน 4 แบบขนานในสารละลาย cryoprotectant (30% sucrose ใน 0.1% ethylene glycol และ 30% sodium azide) ที่ −0.01 ° C จนกระทั่งประมวลผลต่อไป

immunohistochemistry

ทำการบ่มที่อุณหภูมิห้องด้วยความปั่นป่วนเบา ๆ ส่วนที่ลอยฟรีถูกล้างอย่างกว้างขวางด้วย 0.1M เกลือโซเดียมบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) ส่วนถูกปิดกั้นด้วย 1% H2O2 (โซลูชันสต็อค 30%) ใน PBS เป็นเวลา 10 นาทีจากนั้นล้างออกด้วย PBS อีกครั้ง ส่วนถูกบ่มด้วยวิธีการบ่ม (PBS ที่มี 0.1% bovine serum albumin และ 0.4% Triton X-100) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง การบ่มแอนติบอดีปฐมภูมิได้ดำเนินการในสารละลายบ่มค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง ส่วนการย้อมสีดังต่อไปนี้ถูกล้างใน PBS ติดตั้งลงบนแผ่นแก้วบวกที่มีประจุและครอบคลุมด้วย dibutyl phthalate xylene (DPX)

cFos / Orexin

ส่วนหนึ่งของชุดถูก immunoprocessed สำหรับ cFos และ orexin ส่วนถูกบ่มเพาะในชั่วข้ามคืนโดยมีแอนติบอดีที่เลี้ยงกระต่ายที่รับรู้ cFos (กระต่ายต่อต้าน cFos, sc-52; 1: 10 000, เทคโนโลยีชีวภาพของ Santa Cruz, Santa Cruz, CA) ตามด้วย 1 ชั่วโมงบ่มด้วย biotinylated goat anti-rabbit (1: 500: 1: 1000 , Vector Laboratories, Burlingame, CA) และคอมเพล็ค avidin horseradish peroxidase complex (10: 0.02, ชุด ABC, ห้องปฏิบัติการ Vector, Burlingame, CA) ส่วนถูกบ่มเป็นเวลา 0.1 นาทีใน 0.012% diaminobenzidine (DAB) (Sigma, St. Louis, MO) ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.08M (PB) ที่มีไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 003% และ 30% นิกเกิลซัลเฟตส่งผลให้เกิดปฏิกิริยาสีน้ำเงิน - ดำ ส่วนนั้นถูกบ่มในชั่วข้ามคืนด้วยแอนติบอดีที่เลี้ยงกระต่ายโดยใช้ orexin-A (กระต่ายต่อต้าน - orexin-A, H-1 – 20; 000: 1 10, ฟีนิกซ์ฟาร์มาซูติคอล, Burlingame, CA) ตามด้วย 0.02 ชั่วโมง incubation -rabbit และ ABC ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ในที่สุดส่วนที่ถูกบ่มเป็นเวลา 0.1 นาทีด้วย 0.012% DAB ใน XNUMXM PB ที่มีไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ XNUMX% ทำให้เกิดผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาสีน้ำตาลแดง

แอนติบอดีทั้งหมดมีลักษณะก่อนหน้านี้ (เฉินและคณะ, 1999; Satoh และคณะ, 2004; โซโลมอนและคณะ, 2007) การควบคุมอิมมูโนฮิสโตเคมีรวมถึงการละเว้นของแอนติบอดีปฐมภูมิ, การวิเคราะห์บล็อตตะวันตกแสดงให้เห็นถึงวงดนตรีเดี่ยวที่น้ำหนักที่เหมาะสม (cFos) และการสูญเสียสัญญาณอิมมูโนฮิสโตเคมีเคมิคอลด้วย orexin B-saporin

การวิเคราะห์ข้อมูล

cFos / Orexin

เซลล์ประสาทที่มีป้ายกำกับสำหรับ orexin หรือ orexin และ cFos นั้นถูกนับทั้งสองด้านในสามส่วนต่อสัตว์ที่รู้กันว่ามีจำนวนสูงสุดของประชากรเซลล์ประสาท orexin (Sakurai และคณะ, 1998) การขยาย −2.3 mm ถึง to3.6 mm จาก bregma (Paxinos และ Watson, 1998) (รูป 1) ใช้หลอดภาพวาดที่ติดอยู่กับกล้องจุลทรรศน์ Leica (Leica Microsystems; Wetzlar Germany) โดยผู้สังเกตการณ์ตาบอดกลุ่มทดลอง PFA-DMH และ LHA ถูกวิเคราะห์โดยอิงตามตำแหน่งของ fornix (รูปที่ 1a) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ประสาท orexin ที่แสดง cFos ถูกคำนวณและหาค่าเฉลี่ยต่อซีกโลกสำหรับสัตว์แต่ละตัวและคำนวณค่าเฉลี่ยกลุ่ม สถิติอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มถูกกำหนดโดยใช้ ANOVA แบบสองทางกับประสบการณ์ทางเพศและพฤติกรรมทางเพศในระหว่างการทดสอบขั้นสุดท้ายเป็นปัจจัยตามมาด้วยการทดสอบ LSD ของฟิชเชอร์ที่มีระดับความเชื่อมั่น 95%

รูป 1 

สถานที่ตั้งของเซลล์ประสาท orexin ในมลรัฐ (A) ตำแหน่งทางกายวิภาคของเซลล์ประสาท orexin ในมลรัฐ (Paxinos และ Watson, 1998), Scale bar: 200 µm (B) เซลล์ประสาท orexin ที่มีป้ายกำกับเดียวใน PFA-DMH ในสัตว์ควบคุมที่ไม่ได้รับการควบคุม (C) Orexin ...

การศึกษา Orexin Lesion

ศัลยกรรม

เพศผู้ถูกเก็บแยกเป็นรายบุคคลและได้รับการผสมพันธุ์ก่อนการทดสอบหนึ่งครั้งกับผู้หญิงที่เปิดกว้างก่อนที่จะทำการผ่าตัดแผลและเสแสร้ง พฤติกรรมทางเพศถูกบันทึกไว้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและกลุ่มถูกจับคู่ตามพารามิเตอร์ของพฤติกรรมการผสมพันธุ์ หนูตัวผู้ถูกดมยาสลบด้วย isoflurane (เจ้าอาวาสห้องปฏิบัติการ, เซนต์ลอเรนต์, ควิเบก, แคนาดา) โดยใช้เครื่องใช้ก๊าซ Surgivet Isotec4 (กองการแพทย์สมิ ธ ส์แพทย์, มาร์คัมออนแทรีโอแคนาดา) และวางไว้ในเครื่อง stereotaxic (Kopf Instruments, Tujunga, CA) ด้วยหน้ากากป้องกันแก๊สพิษที่ครอบจมูกและปากเพื่อคงการดมยาสลบ แผลถูกสร้างขึ้นเพื่อเปิดเผยกะโหลกศีรษะและแลมบ์ดาและ bregma พบและมุ่งมั่นที่จะระดับ เจาะรูในกะโหลกศีรษะโดยใช้ดอกสว่าน dremel (Dremel, Racine, WI) และแก้วขนาดเล็ก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 40µm, World Precision Instruments Inc, Sarasota, FL) ที่เต็มไปด้วยสารพิษเป้าหมาย orexin-B saporin (IT-20 ขั้นสูง ระบบการกำหนดเป้าหมายซานดิเอโก, แคลิฟอร์เนีย; 200ng / µL ใน PBS); หรือปลอดสารพิษ BLANK-saporin (IT-21, ระบบการตั้งเป้าหมายขั้นสูง, ซานดิเอโก, แคลิฟอร์เนีย; 200ng / µL ใน PBS; ตัวควบคุมเสแสร้ง) ถูกลดระดับลงสู่ระดับไฮโปทาลามัส สารพิษที่เป็นเป้าหมายนี้ได้รับการแสดงที่จะผูกกับความสัมพันธ์ที่สูงต่อเซลล์ที่แสดงตัวรับ orexin 2 (ORX2) และมีความสัมพันธ์ที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญสำหรับเซลล์ที่แสดง ORX1 (Gerashchenko และคณะ, 2001) และได้รับการแสดงโดยเฉพาะเซลล์ประสาท orexin ระเหยใน hypothalamus (Frederick-Duus และคณะ, 2007) การฉีดทวิภาคีของ 1 µL (2 ต่อซีกโลก) ถูกฉีดที่พิกัดต่อไปนี้: AP = −2.8 และ −3.2; ML = 0.7 และ 0.8; DV = −9.0 (Paxinos และ Watson, 1998) หลังจากการแช่แต่ละครั้งเข็มจะถูกทิ้งไว้ประมาณ 3 นาทีเพื่อให้การแพร่กระจาย เข็มถูกนำออกอย่างช้าๆและแผลถูกปิดด้วยคลิปแผล สองสัปดาห์หลังการผ่าตัดแผลผู้ชายทุกคนได้รับการทดสอบเพื่อหาประสบการณ์ทางเพศในระหว่างการทดสอบการผสมพันธุ์สี่ครั้งและถูกส่งไปยังรันเวย์และ / หรือการทดสอบทางบวกและเขาวงกตสูง (ดูด้านล่าง) มีการผ่าตัดในกลุ่มที่แตกต่างกันสามกลุ่มแยกจากกันเป็นเวลาหลายสัปดาห์เพื่อให้ได้จำนวนสัตว์ต่อกลุ่มที่เพียงพอ

พฤติกรรมทางเพศ

ผู้ชายทุกคนถูกทดสอบพฤติกรรมทางเพศในช่วงการผสมพันธุ์ 4 ดำเนินการทุกวันที่สองในกรงที่บ้าน ในระหว่างแต่ละเซสชั่นเพศชายแต่งงานกับผู้หญิงที่อ่อนไหวต่อการพุ่งออกมาหนึ่งครั้งหรือเป็นเวลา 60 นาทีแล้วแต่ระยะใดถึงก่อน พฤติกรรมการผสมพันธุ์ถูกบันทึกไว้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและประสิทธิภาพการมีเพศสัมพันธ์ก็คำนวณด้วยเช่นกัน [จำนวน intromissions / (จำนวนการเมานต์ + จำนวนการบุกรุก)] ความแตกต่างทางสถิติในพารามิเตอร์ของสมรรถภาพทางเพศถูกนำมาเปรียบเทียบระหว่างกลุ่มแผลและเสแสร้งสำหรับการทดลองแต่ละครั้งโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวกับปัจจัยและการทดสอบ LSD ของฟิชเชอร์ด้วยระดับความเชื่อมั่น 95% หรือทดสอบแบบไม่อิงพารามิเตอร์ การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวแบบ Kruskal-Wallis กับการผ่าตัดแผลเป็นปัจจัยและการทดสอบของ Dunn ด้วยระดับความเชื่อมั่น 95% นอกจากนี้ข้อมูลของแต่ละกลุ่มถูกนำมาเปรียบเทียบกับข้อมูลก่อนการผ่าตัดโดยใช้การทดสอบแบบจับคู่

แรงจูงใจทางเพศ: การทดสอบรันเวย์

หลังจากการทดสอบพฤติกรรมทางเพศกลุ่มย่อยของเพศชายที่มีประสบการณ์ทางเพศตอนนี้ได้รับการทดสอบสำหรับแรงจูงใจทางเพศโดยใช้อุปกรณ์ทางวิ่งตรง (MED Associates Inc. , St. Albans, VT) (ยาว 120 ซม.; Lopez et al., 1999) เพศผู้เคยเข้าสู่อุปกรณ์รันเวย์ในช่วงทดลอง 10 นาทีสองครั้งที่ดำเนินการในวันเดียวกัน ถัดไปได้ทำการทดสอบสองครั้ง ในระหว่างการพิจารณาคดีครั้งแรกมีการวางสัตว์กระตุ้น (เพศหญิงที่เป็น estrous, anestrous female หรือ male) ไว้ในกล่องเป้าหมายโดยมีตัวแบ่งแบบพรุนในตอนท้ายของรันเวย์ พัดลมถูกใช้เพื่อเป่ากลิ่นของสัตว์กระตุ้นต่อชาย มีการวางตัวผู้ทดลองไว้ในกล่องเริ่มประตูเปิดเพื่อให้สามารถเข้าถึงรันเวย์ได้และมีการบันทึกเวลาในการเข้าถึงกล่องเป้าหมาย เมื่อไปถึงกล่องเป้าหมายผู้ชายจะได้รับ 30 วินาทีในการโต้ตอบกับสัตว์กระตุ้นหลังหน้าจอ การทดลองที่สองเหมือนกันได้ติดตาม 1 ชั่วโมงต่อมา นัยสำคัญทางสถิติระหว่างเวลาในการเข้าถึงกล่องเป้าหมายระหว่างการทดลอง 1 และการทดลอง 2 ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้การทดสอบทีจับคู่กับระดับความเชื่อมั่น 95% นัยสำคัญทางสถิติระหว่างกลุ่มถูกกำหนดโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวกับการผ่าตัดแผลซึ่งเป็นปัจจัยตามด้วยการทดสอบ LSD ของฟิชเชอร์ด้วยระดับความเชื่อมั่น 95%

พฤติกรรมความวิตกกังวล: Elevated Plus Maze

กลุ่มย่อยของเพศชายที่มีประสบการณ์ทางเพศตอนนี้ได้รับการทดสอบพฤติกรรมคล้ายความวิตกกังวลเพื่อตรวจสอบว่าผลกระทบของแผล orexin ต่อประสิทธิภาพทางเพศหรือแรงจูงใจเกิดจากการเปลี่ยนแปลงในความวิตกกังวลหรือความตื่นตัว เพศชายถูกสัมผัสกับอุปกรณ์ยกระดับเขาวงกต (EPM; MED Associates Inc. , St. Albans, VT) ในห้องที่มีแสงสว่างจ้าในช่วงสิ้นสุดระยะแสง EPM ประกอบด้วยแขน 4 แต่ละความยาว 50 ซม. ที่ยื่นออกมาจากทางแยกกลางและยกระดับ 75 ซม. แขนสองข้างของเขาวงกตถูกเปิดออกสู่สภาพแวดล้อมภายนอกและอีกสองแห่งถูกล้อมรอบด้วยผนังที่มืด 40 ซม. สัตว์ถูกวางไว้บน EPM และตรวจสอบเป็นเวลาห้านาที เวลาที่ใช้ในแขนที่เปิดและปิดและจำนวนทั้งหมดของการบันทึกลงในแขนแต่ละข้างถูกบันทึกโดยใช้อาร์เรย์ photobeam นัยสำคัญทางสถิติระหว่างกลุ่มถูกกำหนดโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวกับแผลเป็นปัจจัยตามด้วยการทดสอบ LSD ของฟิชเชอร์ด้วยระดับความเชื่อมั่น 95%

cFos และการเหนี่ยวนำให้เกิดการผสมพันธุ์

จากการทดสอบพฤติกรรมทั้งหมดพบว่าผู้ชายทุกคนได้รับยาสลบอย่างเข้มข้นด้วยโซเดียม pentobarbitol (270mg / mL) และถูกนำไปใช้อย่างสมบูรณ์ด้วย 500 mL ของ 4% PFA สำหรับการตรวจสอบรอยโรคตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ นอกจากนี้เพื่อทดสอบผลกระทบของรอยโรค orexin ต่อการแสดงออกของ cFos ที่เกิดจากการผสมพันธุ์กลุ่มของเพศผู้ที่มีเพศสัมพันธ์และมีเพศสัมพันธ์จะได้รับการผสมพันธุ์จนกระทั่งมีการหลั่งหนึ่งครั้ง หนึ่งชั่วโมงหลังจากการพุ่งออกมาผู้ชายได้รับการอาถรรพณ์ด้วย 4% PFA transcardially ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ครึ่งหนึ่งของผู้ชายในกลุ่มนี้ไม่ได้รับการแนะนำให้รู้จักกับผู้หญิงคนหนึ่งและถูกนำออกจากกรงบ้านเพื่อทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม

immunohistochemistry

สมองถูกแบ่งส่วนโดยใช้ microtome แช่แข็งในชุด 4 ขนานของส่วนโคโรนา 35 µm และเก็บไว้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น สำหรับการตรวจสอบรอยโรคส่วนหนึ่งของชุดที่มี hypothalamus จากการทดลองรอยโรคทั้งหมดนั้นมีป้ายกำกับเดียวสำหรับ orexin โดยใช้โปรโตคอล anti-orexin-A และ DAB เดียวกันกับกระต่ายที่ได้อธิบายไว้ข้างต้น ส่วนหนึ่งจากสัตว์ที่แต่งงานแล้วมีการย้อมสีสำหรับ cFos และ orexin ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น

การตรวจสอบ Lesion

ในสัตว์แต่ละตัวจำนวนเซลล์ประสาท orexin immunoreactive สำหรับ orexin ถูกนับทั้งสองข้างใน PFA-DMH และ LHA ในส่วน 3 ที่แสดงจำนวนเซลล์ orexin สูงสุดในการควบคุมที่ไม่ผ่าตัด −2.3 mm ถึง −3.6 mm จาก bregma เซลล์ต่อซีกโลกนั้นมีค่าเฉลี่ยสำหรับสัตว์แต่ละตัวและคำนวณหากลุ่ม สัตว์ที่ไม่ได้รับการผ่าตัด (จากการทดลองของ cFos) ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์โอริซินและข้อมูลที่ครบถ้วน / ข้อมูลพื้นฐานแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์เมื่อเทียบกับผู้ชายที่ไม่ผ่าตัดรูป 2) ผู้ชายที่มีเซลล์ orexin น้อยกว่า 20% เมื่อเปรียบเทียบกับสัตว์ที่ไม่ได้รับการผ่าตัดถูกรวมอยู่ในกลุ่มแผล สัตว์ที่มีมากกว่า 20% แต่น้อยกว่า 80% ถูกรวมอยู่ในกลุ่มแผลบางส่วน การควบคุมเสแสร้งไม่ได้มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในจำนวนของเซลล์ orexin นัยสำคัญทางสถิติระหว่างการเสแสร้งสัตว์ที่มีรอยโรคบางส่วนและครบถ้วนถูกคำนวณโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวและการทดสอบ LSD ของฟิชเชอร์ด้วยระดับความเชื่อมั่น 95%

รูป 2 

การตรวจสอบรอยโรค ภาพตัวแทนแสดงเซลล์ orexin (A) และ MCH (B) ในสัตว์ที่มีรอยโรคเสแสร้งที่ฉีดด้วย BLANK-saporin ภาพตัวแทนแสดงการสูญเสียเซลล์ orexin (C) แต่เซลล์ MCH ที่ไม่สมบูรณ์ (D) ในสัตว์ที่เป็นแผลถูกฉีดด้วย orexin ...

ความจำเพาะ Lesion

เพื่อตรวจสอบว่ารอยโรคนั้นถูก จำกัด ให้อยู่ใน orexin neurons ส่วนหนึ่งของชุดที่มี hypothalamus จากเซตย่อยของสัตว์จำพวกเสแสร้งและรอยโรค (n = 20) นั้นได้รับการกระตุ้นด้วยภูมิคุ้มกันสำหรับ melanocyte เปปไทด์ฮอร์โมน (MCH) colocalization) ด้วย orexin เซลล์ประสาท (Broberger et al., 1998) ใช้แอนติบอดีที่เลี้ยงด้วยกระต่ายซึ่งรู้จัก MCH (กระต่ายต่อต้าน MCH, H-070-47; 1: 150 000, ฟีนิกซ์ฟาร์มาซูติคอล, เบอร์ลิน) และ DAB ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า เซลล์ประสาท MCH แสดง ORX1 (Bäckbergและคณะ, 2002) แต่ไม่ใช่ ORX2 (Volgin และคณะ, 2004) และไม่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญหลังจากการรักษา orexin B-saporin (Frederick-Duus และคณะ, 2007) เซลล์ภูมิคุ้มกัน MCH ถูกนับทั้งสองส่วนในสัตว์สองชนิดต่อสัตว์ (sham: n = 7; lesion n = 5) โดยใช้ส่วนอื่น ๆ เพื่อวิเคราะห์เซลล์ประสาท Orexin รอยโรคไม่ลดจำนวนของเซลล์ประสาท MCH ใน PFA-DMH หรือ LHA อย่างมีนัยสำคัญ (1 ตาราง; รูปที่ 2b, d; PFA-DMH: p = 0.47; LHA: p = 0.33) นอกจากนี้การแสดงออกของ cFos ที่เกิดจากการผสมพันธุ์จะถูกนับทั้งสองข้างในส่วนที่เป็นตัวแทนต่อสัตว์ (sham: n = 4; lesion n = 3) โดยใช้ส่วนทางเลือกในการวิเคราะห์เซลล์ประสาท orexin แผลไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการแสดงออก cFos ผสมพันธุ์ใน PFA-DMH หรือ LHA (1 ตาราง; PFA-DMH: p = 0.53; LHA: p = 0.82) ในที่สุดส่วนตัวแทนที่ใช้สำหรับการนับเซลล์ orexin (สัตว์: เสแสร้ง: n = 6; แผล: n = 6) ถูก Nissl โต้กลับโดยใช้ cresyl violet (5 g cresyl violet acetate (C-5042, Sigma, St. Louis, MO), 0.5 g ของโซเดียมอะซิเตทไตรไฮเดรต (S209, วิทยาศาสตร์เทอร์โมฟิชเชอร์, ออตตาวา, ออนแทรีโอ, แคนาดา), 1L น้ำกลั่นสองเท่าด้วยกรดอะซิติก (AX0073-6, EMD Chemicals, Mississauga, Ontario, Canada) ที่ pH: 3.14) จำนวนของเซลล์ประสาทสี Nissl ถูกดำเนินการในพื้นที่มาตรฐานของการวิเคราะห์ (250 µm × 200 µm) ในตำแหน่งทั่วไปของเซลล์ประสาท orexin จำนวนของเซลล์ประสาทที่มีสี Nissl ไม่แตกต่างกันระหว่างกลุ่มเสแสร้งและกลุ่มแผล (1 ตาราง; PFA-DMH: p = 0.23; LHA: p = 0.33)

1 ตาราง 

การตรวจสอบความจำเพาะของรอยโรค: การวิเคราะห์จำนวนของเซลล์ประสาทที่ย้อมสีสำหรับ Nissl, MCH หรือ cFos เหนี่ยวนำให้เกิดการผสมพันธุ์แสดงให้เห็นว่าไม่มีการสูญเสียอย่างมีนัยสำคัญของเซลล์ประสาทโดยทั่วไปเซลล์ MCH หรือการกระตุ้นเซลล์ประสาทใน PFA-DMH หรือ ...

เนื่องจากข้อบกพร่องใน orexin ได้รับการแสดงเพื่อมีส่วนร่วมในการ narcolepsy ในหนู (Chemelli และคณะ, 1999) สุนัข (หลินและคณะ, 1999) และมนุษย์ (ซีเกล 1999; Nishino และคณะ, 2000; Peyron et al., 2000; Thannickal et al., 2000) สัตว์ถูกตรวจสอบเพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีฟีโนไทป์ของนาร์โคเลพติค สัตว์ถูกสังเกตในช่วงระยะเวลาของการทดสอบพฤติกรรมทั้งหมดที่รายงานในการศึกษานี้และไม่ได้แสดงลักษณะของนาร์โคเลย์

การแสดงออกของ cFos ในการผสมพันธุ์ในสัตว์ที่มีแผล

จำนวนเซลล์ cFos-immunoreactive ถูกนับทั้งสองด้านในส่วน 3 ต่อสัตว์ในพื้นที่มาตรฐานของการวิเคราะห์ในพื้นที่หน้าท้อง (VTA; 900 × 900 µm), mPOA (400 × 600 µm); นิวเคลียส accumbens (NAc) แกนกลางและเปลือก (400 × 600 µm) และกลุ่มที่ได้รับการตรวจก่อนและหลังการย่อยของเยื่อหุ้มสมอง prefrontal cortex (mPFC) (600 × 800 µm ต่อภูมิภาคย่อย) . การนับมีค่าเฉลี่ยสำหรับสัตว์แต่ละตัวและคำนวณค่าเฉลี่ยกลุ่ม สถิติอย่างมีนัยสำคัญถูกคำนวณโดยใช้ ANOVA แบบสองทางกับประสบการณ์ทางเพศและรอยโรคเป็นปัจจัยตามมาด้วยการทดสอบ LSD ของฟิชเชอร์ด้วยระดับความเชื่อมั่น 95%

ผลสอบ

การกระตุ้นเซลล์ประสาท Orexin ระหว่างพฤติกรรมทางเพศ

การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของ cFos ในเซลล์ประสาท orexin พบว่ามีพฤติกรรมทางเพศทั้งใน PFA-DMH (F(5,31) 63.4; หน้า <0.001; รูปที่ 3a) และ LHA (F(5,31) 10.4; หน้า <0.001; รูปที่ 3b) โดยไม่มีผลกระทบจากประสบการณ์ทางเพศ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสัตว์ที่ไร้เดียงสาและสัตว์ที่มีประสบการณ์กลุ่มทดลองทั้งหมดของผู้ชายแสดงพารามิเตอร์ทางเพศที่แตกต่างกันของพฤติกรรมทางเพศ (การตรวจสอบของเพศหญิง anestrous, การสัมผัสกับกลิ่นเหม็นของผู้หญิง Estrous, การติดตั้ง, intromissions หรืออุทาน) การควบคุมกรงที่มีเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ orexin ที่สูงขึ้นจะทำงานใน PFA-DMH (60 – 80%) เมื่อเทียบกับ LHA (14 – 33%) โดยไม่มีความแตกต่างระหว่างกลุ่มทดลอง ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าเซลล์ประสาท orexin ถูกเปิดใช้งานหลังจากได้รับสัมผัสกับสิ่งเร้าเพศหญิง ยิ่งไปกว่านั้นการเปิดใช้งานไม่ได้ขึ้นอยู่กับแรงกระตุ้นจากการกระตุ้นของผู้หญิงเนื่องจากการกระตุ้นให้เกิดการกระตุ้นการเปิดใช้งานในเพศชายที่มีประสบการณ์ทางเพศ

รูป 3 

เซลล์ Orexin ใน PFA-DMH (A) และ LHA (B) แสดง cFos ตามพารามิเตอร์ทั้งหมดของพฤติกรรมการผสมพันธุ์ในสัตว์ที่ไร้เดียงสาและมีประสบการณ์ ตัวย่อ: HC, กรงบ้าน; AF: เพศหญิงที่ไม่มีการรับรู้; EF, ผู้หญิงที่เป็นสัด; M, ภูเขา; IM, Intromission; E พุ่งออกมา ...

ผลกระทบของแผล orexin

พฤติกรรมทางเพศ

แผล Orexin ส่งผลให้เกิดพฤติกรรมทางเพศ (ความล่าช้าในการติด: F(2,47) 3.962; p = 0.034; เวลาแฝง intromission: H = 9.104; p = 0.011) ในระหว่างการทดลองครั้งแรกของการผสมพันธุ์ตัวผู้มีรอยโรคแสดงเวลาแฝงที่สั้นกว่าในการเมานและการฉีดเข้าเทียบกับสัตว์ที่หลอกลวง (p = 0.03; latency แฝงตัว: p = 0.01; รูปที่ 4a – b) และเปรียบเทียบกับเวลาแฝงในระหว่างการทดลองการผสมพันธุ์ก่อนการผ่าตัด (ความล่าช้าในการติด: p = 0.02; เวลาแฝง intromission: p = 0.03; ไม่แสดงข้อมูล) ผู้ชายที่มีรอยโรคบางส่วนไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากผู้ชายที่มีการเสแสร้งและไม่มีกลุ่มที่แตกต่างจากการทดลองก่อนการผสมพันธุ์ก่อนการผ่าตัด ผลกระทบของรอยโรคบนระยะเวลาการติดเชื้อและระยะเวลาในการหายใจลดลงจากประสบการณ์ทางเพศเนื่องจากไม่มีความแตกต่างระหว่างกลุ่มในระหว่างการทดลองใด ๆ ที่ตามมา (การทดลอง 4 แสดงใน รูปที่ 4a – b) ความล่าช้าในการหลั่ง (รูปที่ 4c) จำนวนการติดตั้ง (รูปที่ 4d) และ intromissions (รูปที่ 4e) เช่นเดียวกับประสิทธิภาพการสังวาส (รูปที่ 4f) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มในระหว่างการทดลองใด ๆ หรือภายในแต่ละกลุ่มระหว่างการทดลองการผสมพันธุ์ครั้งแรกและการทดสอบก่อนการผ่าตัด

รูป 4 

รอยโรคของ Orexin ทำให้เวลาในการตอบสนองสั้นลงเพื่อติดเชื้อและการหายใจในเพศชายที่ไร้เดียงสาทางเพศในระหว่างการทดลอง 1 แผล Orexin ไม่ส่งผลกระทบต่อการผสมพันธุ์ระหว่างการทดลอง 4 หลังจากที่เพศชายได้รับประสบการณ์ทางเพศ (A) Mount Latency (B) Intromission Latency (C) การพุ่งออกมา ...
ทดสอบรันเวย์

แผล Orexin ไม่ส่งผลกระทบต่อแรงจูงใจทางเพศประเมินในการทดสอบรันเวย์ตรงในเพศชายที่มีประสบการณ์ทางเพศ ในช่วงเวลาของการทดสอบทดสอบสองครั้งผู้ชายที่เป็นแผลจะวิ่งเร็วขึ้นอย่างรวดเร็วต่อหญิงที่เป็นสัดในการทดลองที่สองเมื่อเทียบกับการทดลองครั้งแรก (p = 0.03; รูป 5) เวลาที่เพิ่มขึ้นดังกล่าวเป็นสิ่งบ่งบอกถึงแรงจูงใจทางเพศ (Lopez et al., 1999) บาดแผลบางส่วนและตัวผู้ที่หลอกลวงก็วิ่งเร็วขึ้นไปทางเพศหญิงที่เป็นสัดในระหว่างการทดลอง 2 (p = 0.03) แม้ว่าสิ่งนี้จะล้มเหลวในการเข้าถึงความสำคัญในตัวผู้เสแสร้ง (p = 0.052) ไม่มีกลุ่มใดที่แสดงความเร็วที่เพิ่มขึ้นเพื่อวิ่งไปหาหญิงสาวหรือผู้ชายในระหว่างการทดลอง 2 นอกจากนี้ยังพบว่าไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการเสแสร้งเพศผู้บางส่วนและรอยโรคบนความเร็วเพื่อวิ่งไปหาสัตว์กระตุ้นใด ๆ ในการทดลอง 1 หรือการทดลอง 2 ซึ่งแสดงให้เห็นถึงการขาดความแตกต่างในกิจกรรมทั่วไปบนรันเวย์

รูป 5 

แผล Orexin ไม่ส่งผลต่อแรงจูงใจทางเพศในผู้ชายที่มีเพศสัมพันธ์ แสดงให้เห็นถึงเวลาที่จะไปถึงตัวเมียในการทดสอบรันเวย์ระหว่างการทดลอง 1 และ 2 * หมายถึงการลดเวลาในการเข้าถึงหญิงในการทดลอง 2 อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับ ...
พฤติกรรมคล้ายความวิตกกังวล

ผลลัพธ์ที่ผ่านมาชี้ให้เห็นว่ารอยโรคอาจช่วยให้เริ่มต้นพฤติกรรมทางเพศในสัตว์ไร้เดียงสาได้โดยอาจส่งผลต่อการตอบสนองต่อความแปลกใหม่และ / หรือพฤติกรรมที่คล้ายความวิตกกังวลเมื่อผู้ชายพบผู้หญิงที่แปลกใหม่ ในการสนับสนุนรอยโรคแสดงให้เห็นว่าพฤติกรรมที่คล้ายกับความวิตกกังวลลดลงใน EPM ซึ่งเห็นว่าเป็นเปอร์เซ็นต์ที่ลดลงของเวลาที่ใช้ในแขนปิด (p = 0.012; รูป 6) และเปอร์เซ็นต์ที่เพิ่มขึ้นของเวลาบนอาวุธที่เปิด (p = 0.023; รูป 6) เปรียบเทียบกับผู้ชายที่หลอกลวง แผลบางส่วนไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญ ข้อมูลเหล่านี้สนับสนุนเพิ่มเติมว่าแผลลดพฤติกรรมคล้ายความวิตกกังวล

รูป 6 

แผล Orexin ลดพฤติกรรมเช่นความวิตกกังวลบนเขาวงกตบวกสูง เปอร์เซ็นต์ของเวลาที่ใช้ในแขนปิด (ซ้าย) ลดลงและร้อยละของเวลาในแขนเปิด (ขวา) เพิ่มขึ้นในผู้ป่วยที่มีรอยโรค * บ่งบอกถึงความแตกต่างที่สำคัญ ...
นิพจน์ cFos

เพื่อประเมินว่า endogenous orexin มีส่วนช่วยในการกระตุ้นการทำงานของเซลล์ประสาทในบริเวณ orexin-innervated ในสมองการวิเคราะห์การแสดงออกของ cFos ที่เกิดจากการผสมพันธุ์ใน VTA, แกนและเปลือก, mPOA และ mPFC ในผู้ป่วยที่มีทั้งแผลและเสแสร้งการผสมพันธุ์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในทุกพื้นที่สมองที่ได้รับการวิเคราะห์เมื่อเทียบกับการควบคุมแบบไม่มีการควบคุม (2 ตาราง) รอยโรคไม่ได้ส่งผลต่อการกระตุ้นประสาทเนื่องจากสัตว์ที่มีการเสแสร้งและแผลไม่แตกต่างกันในการแสดงออกของ cFos พื้นฐานหรือการชักนำให้เกิดการผสมพันธุ์

2 ตาราง 

cFos เหนี่ยวนำการผสมพันธุ์ในเสแสร้ง, บางส่วนและกลุ่มแผลเมื่อเทียบกับการควบคุมที่ไม่ใช่การผสมพันธุ์ของสถานะแผลเดียวกัน

การสนทนา

การศึกษาเหล่านี้ตรวจสอบบทบาทของ orexin ภายนอกในสมรรถภาพทางเพศและแรงจูงใจในหนูชาย พบว่า orexin ไม่จำเป็นสำหรับแรงจูงใจทางเพศหรือประสิทธิภาพ เซลล์ประสาทของโอริซินถูกกระตุ้นโดยการกระตุ้นของผู้หญิงโดยไม่ขึ้นกับสถานะของฮอร์โมนของเพศหญิงหรือประสบการณ์ทางเพศของผู้ชาย ยิ่งกว่านั้นการกำจัดภายนอก orexin ด้วยรอยโรคเฉพาะเซลล์ orexin ลดพฤติกรรมเช่นความวิตกกังวลและอำนวยความสะดวกในการเริ่มต้นของพฤติกรรมทางเพศในเพศชายไร้เดียงสาทางเพศ ดังนั้นผลลัพธ์ของการศึกษาครั้งนี้จึงสนับสนุนบทบาทของ orexin ในการเร้าอารมณ์ (de Lecea et al., 2006; แฮร์ริสและแอสตันโจนส์ 2006; ซากุไร 2007; Boutrel et al., 2009; Furlong และ Carrive, 2009; Furlong และคณะ, 2009) และความวิตกกังวล (ซูซูกิและคณะ 2005; เดวิสและคณะ, 2009; Li et al., 2010) แต่ไม่สนับสนุนบทบาทที่สำคัญสำหรับ orexin ในเรื่องแรงจูงใจหรือประสิทธิภาพทางเพศ

ผลของการศึกษาเหล่านี้ทำให้บทบาทของ orexin ภายนอกและการค้นพบที่แตกต่างชัดเจนของการศึกษาก่อนหน้านี้ตรวจสอบบทบาทของ orexin ในพฤติกรรมทางเพศของผู้ชายโดยใช้เครื่องมือทางเภสัชวิทยา Intra-mPOA infusions จากภายนอก orexin-A นำไปสู่การเร้าอารมณ์ทางเพศที่เพิ่มขึ้นและประสิทธิภาพทางเพศที่ดีขึ้นแนะนำว่า orexin อาจทำหน้าที่ใน mPOA เพื่อเพิ่มแรงจูงใจและประสิทธิภาพของพฤติกรรมทางเพศ (Gulia และคณะ, 2003) อย่างไรก็ตามในทางตรงข้ามการฉีด ICV ของ orexin-A ได้ลดทอนแรงจูงใจทางเพศและความเร้าอารมณ์ (Bai et al., 2009) ในขณะที่ศัตรูรับ orexin ไม่มีผลต่อความเร้าอารมณ์ทางเพศ (Bai et al., 2009) การระบุ orexin ภายนอกอาจไม่ได้มีบทบาทในการกระตุ้นทางเพศ ในที่สุดการปิดล้อม ORX1 โดยการฉีดแบบระบบแสดงให้เห็นว่าประสิทธิภาพการทำงานของโคพอลินลดลงเล็กน้อยเท่านั้น (Muschamp และคณะ, 2007) จากการศึกษาที่ขัดแย้งกันเหล่านี้สามารถสรุปได้ไม่กี่ข้อ ขั้นแรกการใช้ orexin-A จากภายนอกอาจส่งผลกระทบต่อพฤติกรรม แต่การปิดล้อม ORX1 นั้นไม่มีผลกระทบที่สำคัญแนะนำให้มีบทบาทเล็กน้อยสำหรับ orexin ภายนอกในการควบคุมพฤติกรรมทางเพศของผู้ชาย (Bai et al., 2009) ผลลัพธ์ปัจจุบันสนับสนุนความเป็นไปได้นี้ การศึกษาในปัจจุบันโดยใช้การกำจัด orexin โดยรอยโรคเฉพาะเซลล์ orexin บ่งชี้ว่าภายนอก orexin ไม่จำเป็นสำหรับแรงจูงใจทางเพศหรือประสิทธิภาพการทำงานสอดคล้องกับการสังเกตโดย Bai et al (2009). อย่างไรก็ตามสิ่งสำคัญคือการขาดผลกระทบของรอยโรค orexin ต่อแรงจูงใจทางเพศในทางวิ่งอาจเป็นเพราะสัตว์ได้รับประสบการณ์ทางเพศก่อนการทดสอบแรงจูงใจทางเพศดังนั้นจึงไม่มีผลในการทดสอบทางวิ่ง เพื่อประสบการณ์ทางเพศของผู้ชาย การทดลองในอนาคตอาจแก้ไขข้อแม้นี้โดยการทดสอบผลกระทบของรอยโรค orexin ต่อแรงจูงใจทางเพศในผู้ชายที่ไร้เดียงสา

อาจเป็นไปได้ว่าแกนด์ orexin สองตัวและตัวรับ orexin สองชนิด (ORX1 และ ORX2; Sakurai และคณะ, 1998) อาจควบคุมพฤติกรรมทางเพศในทิศทางตรงกันข้าม ด้วยการใช้เทคนิคการทำลายเซลล์ orexin ทำให้แกนด์สำหรับตัวรับ orexin ทั้งสองชนิด (orexin-A และ B) ถูกกำจัดในการศึกษาปัจจุบัน ชนิดย่อยตัวรับสองตัวจะแสดงในพื้นที่สมองที่แตกต่างกัน (Trivedi et al., 1998; Marcus และคณะ, 2001) และได้รับการแสดงเพื่อควบคุมหน่วยความจำที่แตกต่างกันสำหรับการค้นหาโคเคนที่เกิดจากคิวSmith และคณะ, 2009) การศึกษาก่อนหน้านี้เกี่ยวกับพฤติกรรมทางเพศได้เน้นไปที่บทบาทของ orexin-A และ ORX1 เป็นหลัก (ดูการอภิปรายด้านบน) ตัวรับ orexin ตัวรับ SB334867 ที่ใช้ในการศึกษาในขณะนี้มีเป้าหมายเฉพาะ ORX1 ซึ่งมีความสัมพันธ์สูงสำหรับ orexin-A และ affinity ต่ำกว่าอย่างมากสำหรับ orexin-B (Sakurai และคณะ, 1998) ในทำนองเดียวกัน orexin-A ถูกใช้เป็น orexin ภายนอกในการศึกษาก่อนหน้า (Gulia และคณะ, 2003; Bai et al., 2009) การศึกษาในอนาคตมีความจำเป็นเพื่อตรวจสอบบทบาทของ orexin-B และ ORX2 ในการควบคุมพฤติกรรมทางเพศของผู้ชาย

การศึกษาปัจจุบันทดสอบผลกระทบของการสูญเสีย orexin ในระยะยาว Muschamp และคณะ (2007) ชี้ให้เห็นว่าการลดระยะยาวของ orexin หลังจากการตัดอัณฑะอาจเป็นสาเหตุของการสูญเสียแรงจูงใจและสมรรถภาพทางเพศ สมมติฐานนี้ขัดแย้งกับการค้นพบในปัจจุบันเนื่องจากรอยโรคของเซลล์ orexin ไม่ได้ลดแรงจูงใจหรือสมรรถภาพทางเพศ มีความเป็นไปได้ว่าการสูญเสีย orexin ในระยะยาวในการศึกษาในปัจจุบันอาจส่งผลให้เกิดกลไกชดเชยแม้ว่าจะไม่พบการเปลี่ยนแปลงในการกระตุ้นการทำงานของระบบประสาทที่เกิดจากการผสมพันธุ์ภายในวงจรพฤติกรรมทางเพศ อย่างไรก็ตามมันเป็นที่ชัดเจนว่าการลดลงหรือการขาด orexin ไม่ได้ป้องกันพฤติกรรมทางเพศ นอกจากนี้ผลของการศึกษาในปัจจุบันไม่สนับสนุนบทบาทที่สำคัญสำหรับ orexin ในการเหนี่ยวนำการแสดงออกของ cFos โดยพฤติกรรมทางเพศ มีหลักฐานชัดเจนว่า orexin มีส่วนช่วยกระตุ้นการทำงานของเซลล์ประสาทใน VTA (Korotkova และคณะ, 2003; Borgland และคณะ, 2006; นาริตะและคณะ, 2006; Vittoz et al., 2008) อย่างไรก็ตามรอยโรคของเซลล์ orexin ไม่ได้ปิดกั้นการกระตุ้นระบบประสาทในการผสมพันธุ์ใน VTA หรือในบริเวณอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องกับผลตอบแทนของสมองที่ได้รับการวิเคราะห์แม้จะมีเส้นใย orexin-immunoreactive อยู่ใกล้กับเซลล์ประสาทที่เปิดใช้งานในผู้ชาย ดังนั้นการกระตุ้นการทำงานของระบบประสาทในการผสมพันธุ์ในบริเวณสมองเหล่านี้จึงไม่ขึ้นอยู่กับการกระทำของ orexin

การค้นพบที่ค่อนข้างคาดไม่ถึงของการศึกษาในปัจจุบันคือผลของรอยโรค orexin ในการอำนวยความสะดวกในการเริ่มต้นของพฤติกรรมทางเพศในสัตว์ที่ไร้สมรรถภาพ สิ่งนี้แสดงว่ามีความสัมพันธ์กับการลดพฤติกรรมที่คล้ายกับความวิตกกังวล ดังนั้นผลกระทบของแผล orexin ที่มีต่อแรงจูงใจและสมรรถภาพทางเพศอาจมีผลรองจากความวิตกกังวลและความเร้าอารมณ์ การศึกษาก่อนหน้านี้ได้แนะนำบทบาทของ orexin ในความวิตกกังวลเนื่องจากการฉีด ICV ของ orexin-A ลดเวลาบนแขนที่เปิดของ EPM ในหนู (ซูซูกิและคณะ 2005) การแช่ orexin-A เข้าสู่นิวเคลียส paraventricular ของฐานดอกของหนูเพศชายลดเวลาที่ใช้ในบริเวณศูนย์กลางของห้องเปิดโล่งและลดการสำรวจวัตถุแปลกใหม่แสดงว่า orexin อาจเกี่ยวข้องกับการสร้างพฤติกรรมที่น่าวิตกกังวล (Li et al., 2010) นอกจากนี้หนูเพศผู้ที่เด่นชัดที่แสดงความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นต่อ EPM ได้เพิ่มระดับ ORX1 mRNA ใน mPFC (Davis et al., 2009) ยังแสดงให้เห็นว่า Orexin เปลี่ยนการตอบสนองต่อความเครียด (Ida และคณะ, 1999; Ida และคณะ, 2000), และการกระตุ้นการรับ orexin เพิ่มการปลดปล่อยของ corticotrophin ปล่อยปัจจัย (Al-Barazanji และคณะ, 2001; Singareddy et al., 2006), corticosterone (Ida และคณะ, 2000; Kuru และคณะ, 2000) และฮอร์โมน adrenocorticotropic (Kuru และคณะ, 2000) คู่อริ Orexin ขณะนี้อยู่ในการทดลองทางคลินิกสำหรับการรักษาโรคนอนไม่หลับซึ่งเป็นโรคที่มักจะ comorbid กับโรควิตกกังวล (ซัลลิแวนและเนเรีย 2009) และมีการตั้งสมมติฐานว่าอาจมีการใช้ orexin antagonists ในการรักษาโรควิตกกังวล (แม็ตธิวและอัล 2008) จากหลักฐานที่แสดงถึงบทบาทของ orexin ในความวิตกกังวลและความตื่นตัวปรากฏว่ารอยโรค orexin อาจช่วยให้เกิดการเริ่มต้นพฤติกรรมทางเพศในเพศชายที่ไร้เดียงสาโดยลดการตอบสนองต่อความวิตกกังวลที่เกี่ยวข้องกับการแนะนำสิ่งเร้าใหม่ ๆ

การเปิดใช้งานเซลล์ประสาท orexin อย่างมีนัยสำคัญเกิดขึ้นหลังจากการกระตุ้นอารมณ์และพฤติกรรมทางเพศในสัตว์ที่ไร้เดียงสาทางเพศและสัตว์ที่มีประสบการณ์ทั้งใน PFA-DMH และ LHA ด้วย 60 – 80% และ 14 – 33% ของเซลล์ orexin ที่แสดง cFos ตามลำดับ มีหลักฐานสนับสนุนการแบ่งขั้วในการทำงานของเซลล์ประสาท orexin ในประชากรเซลล์ orexin โดย PFA-DMH มีส่วนร่วมอย่างมากในการเร้าอารมณ์และ LHA เป็นสิ่งสำคัญสำหรับพฤติกรรมที่เกี่ยวข้องกับการให้รางวัล (แฮร์ริสและคณะ 2005; แฮร์ริสและแอสตันโจนส์ 2006, แอสตันโจนส์ 2009a) ดังนั้นการเปิดใช้งานเซลล์ PEX-DMH orexin โดยการกระตุ้นของผู้หญิงจึงสนับสนุนสมมติฐานที่ว่า orexin เปิดใช้งานและมีความสำคัญต่อความเร้าอารมณ์รวมถึงความเร้าอารมณ์ทางเพศในเพศชายที่ไร้ประสบการณ์และมีประสบการณ์และความวิตกกังวลที่เกี่ยวข้องกับ อย่างไรก็ตามเซลล์ PFA-DMH ถูกเปิดใช้งานในระดับที่ใกล้เคียงกันโดยไม่ขึ้นกับประสบการณ์ของเพศชายและสถานะฮอร์โมนของเพศหญิงแนะนำว่าเซลล์ PFA-DMH นั้นถูกเปิดใช้งานในระหว่างการกระตุ้นทั่วไปและไม่เฉพาะเจาะจงโดยการกระตุ้นทางเพศ ยิ่งไปกว่านั้นการศึกษาของเราไม่สนับสนุนการมีอยู่ของประชากรในเซลล์ dichotomous orexin อย่างสมบูรณ์เนื่องจากมีการเปิดใช้งาน LHA อย่างมีนัยสำคัญหลังจากได้รับการสัมผัสกับพารามิเตอร์ทั้งหมดของการเร้าอารมณ์ทางเพศและประสิทธิภาพโดยไม่คำนึงว่าพฤติกรรมนั้นสัมพันธ์กับรางวัล ดังนั้นเพศชายที่มีประสบการณ์ที่สัมผัสกับเพศหญิงจะแสดงระดับการกระตุ้นเซลล์ Orexin ใน LHA ที่เท่ากันเมื่อเทียบกับเพศชายที่มีประสบการณ์ซึ่งเกี่ยวข้องกับการหลั่ง อย่างไรก็ตามมีเพียงกลุ่มหลังเท่านั้นที่จะสร้างสถานที่ที่เหมาะสำหรับการผสมพันธุ์Tenk et al, 2009); แนะนำว่าการมีเพศสัมพันธ์เพื่ออุทานเป็นรางวัลมากกว่าองค์ประกอบอื่น ๆ ของการผสมพันธุ์ การศึกษาในปัจจุบันไม่ได้ทดสอบบทบาทของ orexin เป็นพิเศษในเรื่องรางวัลทางเพศ ดังนั้นการศึกษาในอนาคตจึงจำเป็นต้องตอบคำถามนี้

โดยสรุปแล้วผลการศึกษาเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า orexin ไม่สำคัญต่อประสิทธิภาพทางเพศหรือแรงจูงใจ แทนที่จะแสดงให้เห็นว่ารอยโรคของเซลล์ orexin ช่วยลดความวิตกกังวลโดยบอกว่า orexin ภายนอกนั้นมีส่วนเกี่ยวข้องในการเพิ่มความวิตกกังวล ยิ่งไปกว่านั้นการถอน orexin ส่งผลให้เกิดการอำนวยความสะดวกในการเริ่มต้นพฤติกรรมทางเพศในเพศชายไร้เดียงสาบอกว่า endogenous orexin อาจยับยั้งการเริ่มต้นของการผสมพันธุ์อาจเพิ่มความวิตกกังวลในการตอบสนองต่อการกระตุ้นใหม่เช่นผู้หญิง การค้นพบเหล่านี้อธิบายเพิ่มเติมเกี่ยวกับวงจรประสาทที่เกี่ยวข้องกับสมรรถภาพทางเพศและความวิตกกังวลและเพิ่มเนื้อหาของวรรณกรรมที่เพิ่มขึ้นเกี่ยวกับบทบาทของ orexin ในการไกล่เกลี่ยของความเร้าอารมณ์และความวิตกกังวล

กิตติกรรมประกาศ

งานวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนจากสถาบันสุขภาพแห่งชาติ (R01 DA014591) สถาบันวิจัยสุขภาพแห่งแคนาดา (RN 014705) และสภาวิจัยวิทยาศาสตร์และวิศวกรรมแห่งชาติของแคนาดา (Discovery Grant (341710)) ถึง LMC

เชิงอรรถ

ข้อจำกัดความรับผิดชอบของผู้จัดพิมพ์: นี่เป็นไฟล์ PDF ของต้นฉบับที่ไม่มีการแก้ไขซึ่งได้รับการยอมรับให้ตีพิมพ์ เพื่อเป็นการบริการลูกค้าของเราเรากำลังจัดทำต้นฉบับฉบับแรกนี้ ต้นฉบับจะได้รับการคัดลอกเรียงพิมพ์และตรวจสอบหลักฐานที่เป็นผลลัพธ์ก่อนที่จะเผยแพร่ในรูปแบบที่อ้างอิงได้สุดท้าย โปรดทราบว่าในระหว่างกระบวนการผลิตข้อผิดพลาดอาจถูกค้นพบซึ่งอาจส่งผลกระทบต่อเนื้อหาและการปฏิเสธความรับผิดชอบทางกฎหมายทั้งหมดที่ใช้กับวารสารที่เกี่ยวข้อง

อ้างอิง

  1. Agmo A. พฤติกรรมทางเพศของหนูชาย Brain Res Protoc สมอง 1997; 1: 203 209- [PubMed]
  2. Al-Barazanji KA, Wilson S, Baker J, Jessop DS, Harbuz MS Central orexin-A กระตุ้นการทำงานของแกน hypothalamic-pituitary-adrenal และกระตุ้นการทำงานของ hypothalamic corticotropin โดยการปลดปล่อยปัจจัยและเซลล์ประสาทอาร์จินีน vasopressin ในหนูที่มีสติ J Neuroendocrinol 2001; 13: 421 424- [PubMed]
  3. Aston-Jones G, Smith RJ, Moorman DE, Richardson KA บทบาทของเซลล์ประสาท hypothalamic orexin ด้านข้างในกระบวนการผลิตและติดยาเสพติด Neuropharmacology 2009a; 56 Suppl 1: 112 – 121 [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  4. Aston-Jones G, Smith RJ, Sartor GC, Moorman DE, Massi L, Tahsili-Fahadan P, Richardson KA เซลล์ประสาทด้านนอก hypothalamic orexin / hypocretin: บทบาทในการแสวงหารางวัลและการเสพติด ความต้านทานของสมอง 2009b; 1314: 74 90- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  5. Bai YJ, Li YH, Zheng XG, Han J, Yang XY, Sui N. Orexin ช่วยลดแรงจูงใจทางเพศที่ไม่มีเงื่อนไขในหนูตัวผู้ Pharmacol Biochem Behav 2009; 91: 581 589- [PubMed]
  6. Bäckberg M, Hervieu G, Wilson S, Meister B. รับ Orexin-1 (OX-R1) immunoreactivity ในเซลล์ประสาทที่ระบุทางเคมีของมลรัฐ: มุ่งเน้นไปที่เป้าหมาย orexin ที่เกี่ยวข้องในการควบคุมการบริโภคอาหารและน้ำ Eur J. Neurosci 2002; 15: 315 328- [PubMed]
  7. Baldo BA, Daniel RA, Berridge CW, Kelley AE การกระจายตัวของ orexin / hypocretin- และ dopamine-beta-hydroxylase immunoreactive ในพื้นที่สมองของหนูที่เป็นสื่อกลางในการกระตุ้นอารมณ์และความเครียด J Comp Neurol 2003; 464: 220 237- [PubMed]
  8. ฟอร์ ME, Yu L, Coolen LM พฤติกรรมทางเพศและการชี้นำด้านสิ่งแวดล้อมที่เกี่ยวข้องกับเพศเปิดใช้ระบบ mesolimbic ในหนูตัวผู้ Neuropsychopharmacology 2004; 29: 718 730- [PubMed]
  9. Benoit SC, Tracy AL, Davis JF, Choi D, Clegg DJ ฟังก์ชั่นใหม่ของเปปไทด์ orexigenic hypothalamic เปปไทด์: จากยีนไปสู่พฤติกรรม อาหารการกิน 2008; 24: 843 847- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  10. Borgland SL, Taha SASF, เขตข้อมูล HL, Bonci A. Orexin A ใน VTA เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการเหนี่ยวนำของพลาสติกซินแนปและความไวต่อพฤติกรรมต่อโคเคน เซลล์ประสาท 2006; 49 (4): 589 601- [PubMed]
  11. Boutrel B, Cannella N, de Lecea L. บทบาทของไฮโปครีตินในการผลักดันความตื่นตัวและพฤติกรรมเชิงเป้าหมาย ความต้านทานของสมอง 2009 [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  12. Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF, de Lecea L. บทบาทของ hypocretin ในการเป็นสื่อกลางในการฟื้นฟูพฤติกรรมการแสวงหาโคเคนจากความเครียด Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 19168 – 19173 [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  13. Broberger C, De Lecea L, Sutcliffe JG, Hokfelt T. Hypocretin / orexin- และเซลล์สร้างฮอร์โมนที่สร้างเมลานินที่เน้นการสร้างเมลานินในประชากรที่แตกต่างกันในมลรัฐด้านข้างของหนูและความสัมพันธ์กับระบบประสาทของยีน neuropeptide Y J Comp Neurol 1998; 402: 460 474- [PubMed]
  14. Carter ME, Borg JS, de Lecea L. hypocretins สมองและผู้รับ: ผู้ไกล่เกลี่ยของความตื่นตัวทั้งหมด Pharmacol Curr Minnes 2009; 9: 39 45- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  15. Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, J ริชาร์ดสัน JA, Williams SC, Xiong Y, Kisanuki Y, ฟิทช์ TE, Nakazato M, ค้อน RE, Saper CB, Yanagisawa M. Narcolepsy ใน orexin : อณูพันธุศาสตร์ของการควบคุมการนอนหลับ เซลล์ 1999; 98: 437 451- [PubMed]
  16. เฉิน CT, Dun SL, Kwok EH, Dun NJ, Chang JK immunoreactivity A Orexin ในสมองหนู Neurosci Lett 1999; 260: 161 164- [PubMed]
  17. Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC บทบาทของ orexin-A ในแรงจูงใจด้านอาหารพฤติกรรมการกินอาหารที่ได้รับรางวัลและการกระตุ้นเซลล์ประสาทที่เกิดจากอาหารในหนู ประสาท 2010; 167: 11 20- [PubMed]
  18. Davis JF, Krause EG, Melhorn SJ, Sakai RR, Benoit SC หนูที่โดดเด่นเป็นผู้รับความเสี่ยงตามธรรมชาติและแสดงแรงจูงใจที่เพิ่มขึ้นสำหรับรางวัลอาหาร ประสาท 2009; 162: 23 30- [PubMed]
  19. de Lecea L, Jones BE, Boutrel B, Borgland SL, Nishino S, Bubser M, DiLeone R. ติดยาเสพติดและเร้าอารมณ์: บทบาททางเลือกของเปปไทด์ hypothalamic J. Neurosci 2006; 26 (41): 10372 10375- [PubMed]
  20. de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, Fukuhara C, Battenberg EL, Gautvik VT, Gautvik VT, Bartlett FS, 2nd, Frankel WN, Van Den Pol AN, Bloom FE KM, Sautcliffe JG hypocretins: เปปไทด์เฉพาะในมลรัฐที่มีกิจกรรม neuroexcitatory Proc Natl Acad Sci US A. 1998; 95: 322 – 327 [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  21. Dewsbury DA พฤติกรรมการมีเพศสัมพันธ์ของหนู (Rattus norvegicus) เป็นหน้าที่ของประสบการณ์การมีเพศสัมพันธ์ก่อน Anim Behav 1969; 17: 217 223- [PubMed]
  22. Fadel J, Deutch AY พื้นผิวทางกายวิภาคของปฏิสัมพันธ์ orexin-dopamine: การคาดคะเน hypothalamic ด้านข้างไปยังพื้นที่ tegmental หน้าท้อง ประสาท 2002; 111: 379 387- [PubMed]
  23. Frederick-Duus D, Guyton MF, Fadel J. การเพิ่มขึ้นของอาหารที่ได้รับจาก acetylcholine เยื่อหุ้มสมองต้องมีการส่ง orexin ประสาท 2007; 149: 499 507- [PubMed]
  24. Furlong TM, Carrive P. Neurotoxic lesions โดยมีศูนย์กลางอยู่ที่มลรัฐ perifornical hypothalamus จะยกเลิกการตอบสนองของระบบหัวใจและหลอดเลือดและพฤติกรรมของความกลัวที่มีเงื่อนไขต่อบริบท แต่ไม่ใช่ความยับยั้งชั่งใจ ความต้านทานของสมอง 2007; 1128: 107 119- [PubMed]
  25. Furlong TM, Vianna DM, Liu L, Carrive P. Hypocretin / orexin มีส่วนช่วยในการแสดงออกของความเครียดและความเร้าอารมณ์บางรูปแบบ แต่ไม่ใช่ทั้งหมด Eur J Neurosci 2009; 8: 1603 1614- [PubMed]
  26. Gerashchenko D, Kohls MD, Greco M, Waleh NS, Salin-Pascual R, Kilduff TS, Lappi DA, Shiromani PJ Hypocretin-2-saporin รอยโรคของ hypothalamus ด้านข้างก่อให้เกิดพฤติกรรมการนอนหลับที่เหมือน narcoleptic ในหนู J Neurosci 2001; 21: 7273 7283- [PubMed]
  27. Gulia KK, Mallick HN, Kumar VM แอปพลิเคชัน Orexin A (hypocretin-1) ที่บริเวณจุดศูนย์กลาง preoptic potentiates พฤติกรรมทางเพศของผู้ชายในหนู ประสาท 2003; 116: 921 923- [PubMed]
  28. Hagan JJ, Leslie RA, Patel S, Evans ML, Wattam TA, Holmes S, Benham CD, Taylor SG, เลดจ์ SG, Hemmati P, Munton RP, Ashtonade TE, Shah AS, Hatcher JP, Hatcher PD, โจนส์ DN, Smith MI ไพเพอร์ดีซี, ฮันเตอร์ AJ, พอร์เตอร์ RA, อัพตันเอ็นโอซินสกระตุ้นการเคลื่อนที่ของเซลล์ coeruleus และเพิ่มความเร้าในหนู Proc Natl Acad Sci US A. 1999; 96: 10911 – 10916 [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  29. Harris GC, Aston-Jones G. Arousal และรางวัล: การแบ่งขั้วในฟังก์ชันของ orexin เทรนด์ Neurosci 2006; 29: 571 577- [PubMed]
  30. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. บทบาทของเซลล์ประสาท hypothalamic orexin ด้านข้างในการแสวงหารางวัล ธรรมชาติ. 2005; 437 (7058): 556 559- [PubMed]
  31. Horvath TL, Peyron C, Diano S, Ivanov A, Aston-Jones G, Kilduff TS, Van Den Pol AN Hypocretin (orexin) การกระตุ้นและการปกคลุมด้วยเส้น synaptic ของระบบ locus coeruleus noradrenergic J Comp Neurol 1999; 415: 145 159- [PubMed]
  32. Ida T, Nakahara K, Katayama T, Murakami N, Nakazato M. ผลของการฉีด cerebroventricular ด้านข้างของ neuropeptide กระตุ้นความอยากอาหาร, orexin และ neuropeptide Y ในกิจกรรมพฤติกรรมต่างๆของหนู ความต้านทานของสมอง 1999; 821: 526 529- [PubMed]
  33. Ida T, Nakahara K, Murakami T, Hanada R, Nakazato M, Murakami N. การมีส่วนร่วมที่เป็นไปได้ของ orexin ในการเกิดปฏิกิริยาความเครียดในหนู ชุมชน Biochem Biophys Res 2000; 270: 318 323- [PubMed]
  34. Korotkova TM, Sergeeva OA, Eriksson KS, Haas HL, Brown RE การกระตุ้นของ dopaminergic และ nondopaminergic พื้นที่หน้าท้องส่วนล่างโดย orexins / hypocretins J Neurosci 2003; 23 (1): 7 11- [PubMed]
  35. Kuru M, Ueta Y, Serino R, Nakazato M, Yamamoto Y, Shibuya I, Yamashita H. Orexin / hypocretin บริหารงานส่วนกลางจากแกน HPA ในหนู Neuroreport 2000; 11: 1977 1980- [PubMed]
  36. Li Y, Li S, Wei C, Wang H, Sui N, Kirouac GJ การเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมทางอารมณ์ที่เกิดจากการฉีดไมโครโอริซินในนิวเคลียส paraventricular ของฐานดอก Pharmacol Biochem Behav 2010; 95: 121 128- [PubMed]
  37. หลิน L, Faraco J, Li R, Kadotani H, Rogers W, Lin X, Qiu X, de Jong PJ, Nishino S, Mignot E ความผิดปกติของการนอนหลับ Narcolepsy สุนัขเกิดจากการกลายพันธุ์ใน hypocretin (orexin) receptor 2 ยีน . เซลล์ 1999; 98: 365 376- [PubMed]
  38. Lopez HH, Olster DH, Ettenberg A. แรงจูงใจทางเพศในหนูตัวผู้: บทบาทของแรงจูงใจหลักและประสบการณ์การมีเพศสัมพันธ์ Behav Horm 1999; 36: 176 185- [PubMed]
  39. Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, Elmquist JK การแสดงออกที่แตกต่างของตัวรับ orexin 1 และ 2 ในสมองหนู J Comp Neurol 2001; 435: 6 25- [PubMed]
  40. Martin G, Fabre V, Siggins GR, de Lecea L. ปฏิกิริยาของ hypocretins กับสารสื่อประสาทในนิวเคลียส accumbens Regul Pept 2002; 104: 111 117- [PubMed]
  41. Mathew SJ, ราคา RB, Charney DS ความก้าวหน้าล่าสุดในทางชีววิทยาของความผิดปกติของความวิตกกังวล: ผลกระทบสำหรับการบำบัดแบบใหม่ Am J Med Genet C Semin Med Genet 2008; 148C: 89 98- [PubMed]
  42. Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM บทบาทของ hypocretin (orexin) ในพฤติกรรมทางเพศชาย J Neurosci 2007; 27: 2837 2845- [PubMed]
  43. Nair SG, Golden SA, Shaham Y. ผลที่แตกต่างของ hypocretin 1 ผู้รับปฏิปักษ์ SB 334867 ต่ออาหารไขมันสูงการควบคุมตนเองและการกลับคืนสภาพของอาหารในหนู Br J Pharmacol 2008; 154: 406 416- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  44. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. การมีส่วนร่วมโดยตรงของระบบ orexinergic ในการเปิดใช้งานของโดปามีน mesolimbic dopamine และพฤติกรรมที่เกี่ยวข้องที่เกิดจากมอร์ฟีน J Neurosci 2006; 26: 398 405- [PubMed]
  45. Nishino S, Ripley B, เอาชนะ S, Lammers GJ, Mignot E. Hypocretin (orexin) ที่ขาดไปใน narcolepsy ของมนุษย์ มีดหมอ 2000; 355: 39 40- [PubMed]
  46. Paxinos G, Watson C. สมองหนูในพิกัด Stereotaxic ซานดิเอโก, แคลิฟอร์เนีย: Academic Press; 1998
  47. Peyron C, Faraco J, Rogers W, Ripley B, S, Charnay Y, Nevsimalova S, Aldrich M, Reynolds D, Albin R, Li R, Hungs M, Pedrazzoli M, Padigaru M, Kucherlapati M , Lammers GJ, Bouras C, Kucherlapati R, Nishino S, Mignot E. การกลายพันธุ์ในกรณีที่มีการเริ่มต้น narcolepsy และไม่มีการขาด hypocretin เปปไทด์ในสมองมนุษย์ narcoleptic ชัยนาทเมธา 2000; 6: 991 997- [PubMed]
  48. Peyron C, Tighe DK, Van den Pol AN, De Lecea L, Heller HC, Sutcliffe JG, Kilduff TS เซลล์ประสาทที่มีโครงการ hypocretin (orexin) ไปยังระบบประสาทหลายระบบ J Neurosci 1998; 18: 9996 10015- [PubMed]
  49. Sakurai T. บทบาทของ orexins และตัวรับ orexin ในการควบคุมส่วนกลางของพฤติกรรมการกินอาหารและสภาวะสมดุลของพลังงาน ระบบประสาทส่วนกลางผิดปกติของระบบประสาทส่วนกลาง 2006; 5: 313 325- [PubMed]
  50. Sakurai T. วงจรประสาทของ orexin (hypocretin): รักษาการนอนหลับและตื่นตัว Nat Rev Neurosci 2007; 8: 171 181- [PubMed]
  51. Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​Williams SC, Richardson JA, Kozlowski GP, Wilson S, Arch JR, Buckingham RE, Haynes AC, Carr SA, Annan RS, McNulty DE, Liu WS , Terrett JA, Elshourbagy NA, Bergsma DJ, Yanagisawa M. Orexins และตัวรับ orexin: ครอบครัวของ neuropeptides hypothalamic และ G-receptors คู่โปรตีนที่ควบคุมพฤติกรรมการกินอาหาร เซลล์ 1998; 92: 573 585- [PubMed]
  52. Satoh S, Matsumura H, Fujioka A, Nakajima T, Kanbayashi T, Nishino S, Shigeyoshi Y, Yoneda H. FOS แสดงออกในเซลล์ Orexin ตามการกระจายของกล้ามเนื้อบริเวณ preoptic Neuroreport 2004; 15: 1127 1131- [PubMed]
  53. Siegel JM Narcolepsy: บทบาทสำคัญสำหรับเซลล์ hypocretins (orexins) 1999; 98: 409 412- [PubMed]
  54. Singareddy R, Uhde T, Commissaris R. ผลที่ต่างกันของ hypocretins ต่อการตอบสนองต่อเสียงรบกวนเพียงอย่างเดียว Behiol Behav 2006; 89: 650 655- [PubMed]
  55. Smith RJ, ดู RE, Aston-Jones G. Orexin / hypocretin การส่งสัญญาณที่ตัวรับ 1 ของ orexin ควบคุมการค้นหาโคเคน Eur J Neurosci 2009; 30: 493 503- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  56. โซโลมอน A, De Fanti BA, Martinez JA อุปกรณ์ต่อพ่วง ghrelin โต้ตอบกับเซลล์ประสาท orexin ในการส่งสัญญาณกลูเตน Regul Pept 2007; 144: 17 24- [PubMed]
  57. ซัลลิแวนจีเอ็ม Neria Y. เภสัชบำบัดในโรคเครียดหลังบาดแผล: หลักฐานจากการทดลองควบคุมแบบสุ่ม Curr Minnes สืบสวนยาเสพติด 2009; 10: 35 45- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  58. Suzuki M, Beuckmann CT, Shikata K, Ogura H, Sawai T. Orexin-A (hypocretin-1) มีส่วนร่วมในการสร้างพฤติกรรมที่น่าวิตกกังวล ความต้านทานของสมอง 2005; 1044: 116 121- [PubMed]
  59. CM Tenk, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM รางวัลทางเพศสำหรับหนูเพศผู้: ผลของประสบการณ์ทางเพศต่อการตั้งค่าตามสถานที่ที่สัมพันธ์กับการหลั่งและการเกิดอาการไม่พึงประสงค์ Behav Horm 2009; 55: 93 97- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  60. Thannickal TC, Moore RY, Nienhuis R, Ramanathan L, Gulyani S, Aldrich M, Cornford M, Siegel JM จำนวนเซลล์ประสาทลดลงของ hypocretin ใน narcolepsy ของมนุษย์ เซลล์ประสาท 2000; 27: 469 474- [PubMed]
  61. Thorpe AJ, เคลียร์ JP, Levine AS, Kotz CM orexin บริหารส่วนกลาง A เพิ่มแรงจูงใจในการอัดเม็ดของหนูในหนู Psychopharmacology (Berl) 2005; 182: 75 – 83 [PubMed]
  62. Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, กวน XM การแพร่กระจายของ mRNA ของ orexin receptor ในสมองของหนู FEBS Lett 1998; 438: 71 75- [PubMed]
  63. Vittoz NM, Schmeichel B, Berridge CW Hypocretin / orexin จะกระตุ้นการทำงานของเซลล์ประสาทตาคอมีนในพื้นที่หน้าท้องของโดปามีน Eur J Neurosci 2008; 28: 1629 1640- [บทความฟรี PMC] [PubMed]
  64. Volgin DV, Swan J, Kubin L. เซลล์เดียว RT-PCR การแสดงออกของยีนการทำโปรไฟล์อย่างละเอียด เซลล์ประสาทส่วนกลางที่แยกตัวออกจากเซลล์และถูกระบุทางภูมิคุ้มกัน J. วิธีการ Neurosci 2004; 136: 229 236- [PubMed]