Sinirbilim Dergisi, 6 Eylül 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4, ve Jane R. Taylor1
1.Yazışmalar, Yale Üniversitesi Tıp Fakültesi, Ribicoff Araştırma Tesisleri, Connecticut Ruh Sağlığı Merkezi, 34 Park Caddesi, New Haven, CT 06508, Psikiyatri Anabilim Dalı, Moleküler Psikiyatri Anabilim Dalı, Jane R. Taylor'a iletilmelidir.[e-posta korumalı]
Özet
Motivasyondaki değişiklikler, madde kötüye kullanımı ve depresyon da dahil olmak üzere çeşitli psikiyatrik bozuklukların patofizyolojisinde yer almıştır. Kötüye kullanım ya da stres ilaçlarına tekrar tekrar maruz kalmanın, çekirdekli accumbens (NAc) ve dorsal striatumdaki BFosB transkripsiyon faktörünü ısrarla indüklediği, dopaminle düzenlenmiş sinyallemede nöroadaptasyonlara katkıda bulunacağı varsayılan etkiler. Bununla birlikte, ΔFosB'un iştah açıcı motivasyonlu davranışların düzenlenmesi konusundaki spesifik katılımı hakkında çok az şey bilinmektedir. Burada NAc'de ΔFosB'nin ve bitransgenik farelerin dorsal striatumunda veya spesifik olarak farelerin NAc çekirdeğinde, viral aracılı gen transferi, geliştirilmiş gıda takviyeli enstrüman performansı ve progresif oran kullanılarak indüklenebilir aşırı ekspresyonunun gösterildiğini gösterdik. Sıçanlardaki kokain, amfetamin, MDMA [(+) - 3,4-metilendioksimethamphetamin] veya nikotine tekrar tekrar maruz kaldıktan sonra çok benzer davranışsal etkiler bulundu. Bu sonuçlar, motivasyonel süreçlerin ationalFosB tarafından güçlü bir şekilde düzenlendiğini ortaya koymaktadır ve NAc çekirdeğinde ΔFosB'nin indüklenmesi yoluyla gen ekspresyonunda ilaca bağlı değişikliklerin, motivasyonel etkilerin enstrümantal davranışlar üzerindeki etkisinde kritik bir rol oynayabileceğinin kanıtını sunmaktadır.
Giriş
Tekrarlanan ilaca maruz kalma, gen transkripsiyonunda, çekirdek akumbensinde (NAc) kalıcı nöroadaptasyonlar üreten geçici olarak dinamik değişikliklere neden olur (NAc).Nestler, 2004). Bu beyin bölgesi hem ilaç hem de doğal takviye işlemlerinde kritik bir rol oynar (Kelley ve Berridge, 2002) Uyuşturucunun motive ettiği davranışı etkileyen transkripsiyon faktörleri hakkında çok az şey bilinmesine rağmen, gıda gibi iştah açıcı takviyeler. OsFosB, NAc ve dorsal striatum içinde kronik ilaca maruz kalma ile aktive olan bir transkripsiyon faktörüdür (Konradi ve diğerleri, 1994; Nye ve diğerleri, 1995; Chen ve arkadaşları, 1997; Pich ve diğerleri, 1997; Shaw-Lutchman ve diğ., 2003) ve zorunlu tekerlekli sürüş (Werme ve diğerleri, 2002). Ayrıca bu bölgelerde, çeşitli kronik stres biçimleri tarafından da indüklenir (Perrotti ve arkadaşları, 2004). Striatal ΔFosB indüksiyonu ile ilişkili ilaç takviye işlemlerinin geliştirilmesi iyi kurulmuştur (Kelz ve diğerleri, 1999; Colby ve diğerleri, 2003; Zachariou ve arkadaşları, 2006). Bununla birlikte, bu bölgelerdeki yüksek ΔFosB seviyelerinin, doğal takviye ediciler tarafından motive edilen araçsal davranış üzerindeki sonuçları bilinmemektedir.
Enstrümantal yanıtların performansı, bağımlılığa geçiş ilerledikçe düzensiz veya esnek olmayan ilaç alma davranışının gerekli bir bileşenidir (Jentsch ve Taylor, 1999; Berke ve Hyman, 2000; Berridge ve Robinson, 2003; Everitt ve Robbins, 2005). Ulusal Yetkilendirme Aracı, bağımlılık yapmayla ilgili araçsal davranışın birçok yönüne katılmaktadır. (Balle ve Killcross, 1994; Corbit ve diğerleri, 2001; de Borchgrave ve diğerleri, 2002; Di Ciano ve Everitt, 2004b; Everitt ve Robbins, 2005). Bu nedenle NAc içindeki ilaca bağlı nöroadaptasyonların enstrümantal eylemlerin performansını etkilemesi muhtemeldir. Gerçekten de, kronik kokaine maruz kalma sakroz ile güçlendirilmiş enstrümantal performansı arttırır (Miles ve diğerleri, 2004) ve NAc çekirdeğindeki nöroplastisiteyi, PKA'nın inhibisyonu (protein kinaz A) veya protein sentezi de dahil olmak üzere, gıda tarafından ödüllendirilmiş enstrümantal tepkilere müdahale eden,Baldwin ve arkadaşları, 2002a; Hernandez ve arkadaşları, 2002). NAc çekirdeği ayrıca koşullu etkilerin araçsal davranış üzerindeki motive edici etkisine de aracılık eder (Parkinson ve arkadaşları, 1999; Corbit ve diğerleri, 2001; Hall ve arkadaşları, 2001; Di Ciano ve Everitt, 2004a; Ito ve arkadaşları, 2004) BFosB indüksiyonunun gıda, su veya suiistimal ilaçları gibi iştah açıcı takviyeler için araçsal performansı ve motivasyonu güçlü bir şekilde etkileyebileceği bir nörobiyolojik substrat sağlanması.
Burada, iki tamamlayıcı genetik yaklaşım kullanarak ΔFosB'nin gıdaya dayalı enstrümantal davranışlar üzerindeki etkilerini araştırdık: (1) NAC ve bitransgenik farelerin (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) ve (2) aşırı ekspresyonu içindeki ΔFosB'nin aşırı aşırı ekspresyonu. NAc çekirdeğinde ΔFosB'nin spesifik olarak sıçanlarda viral aracılı gen transferi kullanılmasıyla. Ayrıca, ΔFosB'u arttırdığı bildirilen koşullar altında kokaine, amfetamine, (+) - 3,4-metilendioksimethamphetamine (MDMA) veya nikotine tekrar tekrar maruz kalmanın, progresif bir oran çizelgesi kullanarak gıda takviyeli enstrüman yanıtı ve / veya motivasyonu arttırıp arttırmayacağını değerlendirdik. ilaçla güçlendirilmiş kendi kendine uygulama için gösterildiği gibi (Horger ve diğerleri, 1990, 1992; Piazza ve diğerleri, 1990; Vezina ve diğerleri, 2002; Miles ve diğerleri, 2004). Sonuçlarımız, ΔFosB'un enstrümantal davranış üzerindeki kalıcı etkilerini göstermektedir ve bu transkripsiyon faktörünün NAc çekirdeğinde motivasyonel fonksiyonun düzenleyicisi olarak rol oynayabileceğini öne sürmektedir.
Malzemeler ve yöntemler
Hayvanlar ve hayvan bakımı
Deneysel olarak saf Sprague Dawley fareleri, Charles River Laboratories'den (Wilmington, MA) elde edildi. Erkek bitransgenik 11A fareleri, bir nöron spesifik enolaz (NSE) -tTA tetrasiklin transaktivatör protein (çizgi A) ifade eden homozigot transgenik fareler ve TetOp (tetrasikline cevap veren promotör) -ΔFosB (çizgi 11); Ebeveyn çizgileri, kabarık karışık bir arka planda (50% ICR ve% 50% C57BL6 × SJL) (Chen ve arkadaşları, 1998; Kelz ve diğerleri, 1999). Bu bitransgenik 11A fareleri, sadece aşağıdaki durumlarda ΔFosB eksprese ederler: (1), her iki transgen de aynı hücrede bulunur ve (2), tTA ile transkripsiyonel aktivasyon, doksisiklin gibi tetrasiklin antibiyotiklerinin varlığında inhibe edilmez. Doksisiklinin bu farelere uygulanması, bu nedenle, ΔFosB ifadesi üzerinde geçici bir kontrol uygulayabilir ve gelişme sırasında ifadeyi önlemek için kullanılabilir; Gerçekten de, doksisiklin uygulaması, ΔFosB (Chen ve arkadaşları, 1998; Kelz ve diğerleri, 1999). Dahası, 11A bitrangenik fareler dizisi, mevcut deneyler için seçildi, çünkü bunlar, esasen, dynorphin içeren striatal nöronlar (hem NAc hem dorsal striatum) ile sınırlı, kronik ilaç tarafından ΔFosB indüksiyon modeline çok benzeyen bir ekspresyon paterni sergiliyorlar. poz (Kelz ve diğerleri, 1999). Dahası, ΔFosB'nin bu striatal ekspresyonunun ölçümü daha önce ölçülmüştür (Chen ve arkadaşları, 1998; Kelz ve diğerleri, 1999). Fareler, Southwestern Teksas Üniversitesi'nde üretildi ve Yale tesislerinde muhafaza edildi ve test edildi. Gebelik ve gelişme boyunca, bütün fareler, içme suyunda 8 μg / ml konsantrasyonunda 9 – 100 haftalık haftalara kadar, "kapalı" durumda TetOp tarafından tahrik edilen transgenleri koruduğu bilinen koşullar ve 6'in başlatılmasında kullanılan koşullar altında, doksisiklin üzerinde tutuldu. BFosB ifadesi maksimuma ulaştığında doksisikline haftalar kaldı (Kelz ve diğerleri, 1999). Tüm deneyler, littermate bitransgenic farelerin doksisikline karşı kendileri tarafından motive edilmiş davranışlar üzerinde etkisi olmayan karşılaştırılmasını içermiştir (Kelz ve diğerleri, 1999; McClung ve Nestler, 2003; Zachariou ve arkadaşları, 2006).
Tüm deney denekleri, bir 12 h ışık / karanlık döngüsü (7: 00 AM'de açık ve 7: 00'da açık ve kapalı) altında kontrollü sıcaklık ve nem koşulları altında çiftler (sıçanlar) veya gruplar halinde (fareler; kafes başına dört ila beş) tutuldu. PM). Herhangi bir çalışmadan önce en az 7 d konut olanaklarına uyum sağlamasına izin verildi. Hayvanlar, her zaman suya ad libitum erişimine sahipti ve aşağıda ayrıntılı olarak açıklandığı gibi gıdalara sınırlı erişime sahipti. Tüm hayvan kullanımı, Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Ulusal Sağlık Enstitüleri Kılavuzu'na uygun olarak gerçekleştirildi ve Teksas Güneybatı ve Yale Üniversitesi'ndeki Hayvan Bakım ve Kullanım Komiteleri tarafından onaylandı.
İlaçlar
Kokain hidroklorür [Ulusal Uyuşturucu Bağımlılığı Enstitüsü (NIDA) tarafından nazikçe sağlandı], d-amfetamin sülfat (Sigma, St. Louis, MO), MDMA hidroklorür (nazikçe NIDA tarafından sağlandı) ve (-) - nikotin hidrojen tartrat (Sigma ) steril fizyolojik salin (% 0.9) içinde eritildi ve bir 5 ml / kg (fareler) veya 2 ml / kg (sıçanlar) hacminde periton içine enjekte edildi. Nikotin çözeltisinin pH'ı enjeksiyondan önce sodyum bikarbonat ile ayarlandı.
Viral vektörler
Viral aracılı gen transferi daha önce tarif edildiği gibi yapıldı (Carlezon ve diğerleri, 1998; Perrotti ve arkadaşları, 2004). Kısacası, spesifik proteinleri kodlayan cDNA'lar, herpes simpleks virüsü (HSV) amplikon HSV-PrPUC'ye sokuldu ve yardımcı 5dl1.2 kullanılarak virüse paketlendi. Kontrol proteini β-galaktosidaz kodlayan HSV-LacZ veya ekspresyona neden olan vektörler veya ΔFosB'yi kodlayan HSV-ΔFosB, deney protokolüne göre NAc çekirdeğine infüzyon edildi.
deneysel prosedür
Anahat.
Deney 1, önceki tekrarlanan ilaca maruz kalmanın gıda ile güçlendirilmiş enstrümantal performans ve progresif oran üzerindeki etkilerini inceledi. Ratlar rastgele beş deney grubuna ayrıldı (n = 9 – 10 / grup). Bu gruplar, günde iki kez (intraperitoneal olarak; 9: 00 AM ve 5: 00 PM'de) salin veya aşağıdaki ilaçlardan biri ile enjeksiyon aldı: nikotin, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokain, 15 mg / kg; veya arka arkaya 2.5 günleri için amfetamin, 15 mg / kg'dir. Dozlar daha önce yayınlanmış verilerimize dayanarak seçilmiştir (Taylor ve Jentsch, 2001; Olausson ve diğerleri, 2003ve ilaca bağlı lokomotor stimülasyonu, 1 ve 15 tedavi günlerinde izlendi. 5 d çekilmesinden sonra hayvanlar, art arda 10 günlerinde enstrümantal cevap verme konusunda eğitildi ve ardından ertesi gün yanıt veren ilerici oran üzerinde test edildi. İki hayvan, istatistiksel analizin dışında tutuldu, çünkü enstrümantal yanıtı almadılar, son üç eğitim seansının her birinde birden fazla aktif kaldıraç yanıtı yapmadılar.
Deneyler 2 ve 3, bitransgenik farelerde indüklenebilir striatal overFosB ekspresyonunun enstrümantal performans üzerindeki etkilerini ve ilerleyici bir takviye oranına tepkilerini incelemiştir. Bu farelerde ΔFosB'nin indüklenebilir aşırı ekspresyonunun, lokomotor aktivitesinde tekrarlanan ilaca maruz kalmanın ve şartlandırılmış yer tercihi paradigmalarının etkilerini taklit ettiği daha önce gösterilmiştir.Kelz ve diğerleri, 1999; Zachariou ve arkadaşları, 2006). Bu fareler, striatal ΔFosB'in spesifik davranışsal süreçlere katkısı hakkında kritik bilgiler sağlayabilir. Genotipli erkek fareler doksisiklin üzerinde tutuldu veya 8 haftalıkken musluk suyuna geçirildi. Deneyler, 6 haftalık doksisiklin çekilmesinin ardından başlatıldı, bu sırada transgen ifadesi maksimum oldu (Kelz ve diğerleri, 1999). 2 deneyinde, hayvanlar (n = 16), yiyecekleri kısıtladı ve ardışık 10 günleri için aşağıda tarif edilen enstrümantal prosedürde (aşağıya bakınız, Enstrümantal yanıt ve ilerleyici oran testi) eğitildi. Enstrümantal testlerin tamamlanmasından sonra, bu farelerde kokainin neden olduğu lokomotor stimülasyonu değerlendirildi. 3 deneyinde, bir maksimum 18 güçlendirici madde iletildiği koşullar altında ardışık günlerde 10'in enstrümantal tepkisi üzerinde ayrı bir fare grubu (n = 50) yetiştirildi. 11 gününde, tüm fareler yanıt veren artan oranlarda test edildi. 12 gününde, güçlendirici devalüasyonun önceden beslenerek ilerleme oranına yanıt vermedeki etkilerini belirledik.
Deneyler 4 ve 5, özellikle NAc içerisinde viral aracılı ΔFosB aşırı ekspresyonunun etkilerini inceledi. Deney 4, ΔFosB aşırı ifadesinin enstrümantal performans üzerindeki etkilerini test etti. Burada, sıçanlar NAc çekirdeğinde HSV-ΔFosB (n = 8) veya HSV-LacZ (n = 8) ile enfekte edildi ve daha sonra 40 saat sonra başlayan enstrümantal prosedür üzerinde eğitildi. 10 günlük antrenman seanslarından sonra, lokomotor aktivite izleme ekipmanındaki tüm hayvanlar için temel aktivite seviyeleri aşağıda tarif edildiği gibi değerlendirildi (aşağıya bakınız, Lokomotor etkinliği). Deney 5, NAc ΔFosB aşırı ekspresyonunun, özellikle yanıt veren progresif oran üzerindeki etkilerini değerlendirdi. Burada, sıçanlar başlangıçta 15 ardışık günler için eğitildi, deney gruplarına atandı ve daha sonra NAc çekirdeğinde HSV-ΔFosB (n = 8) veya HSV-LacZ (n = 7) ile aşılandı. BFosB ekspresyonunun doruğa çıkmasını sağlamak için hayvanlar 4 d için test edilmemiş ve tedavi edilmemişlerdir. İnfüzyondan sonraki 5 gününde, bütün hayvanlar, ilerici oran çizelgesinde kaldıraç baskısı için test edildi. Testin son gününden sonra, bütün sıçanlar öldürüldü ve NAc çekirdeğine infüzyon kanüllerinin yerleştirilmesi histokimyasal olarak doğrulandı. İnfüzyon kanüllerinin yerleştirilmesine dayanarak, iki sıçan deney 4 ve bir sıçan deney 5 dışında bırakılmıştır.
Gen ekspresyonunun karakterizasyonu, ayrı bir hayvan grubunda yapıldı. Burada, HSV-LacZ NAc çekirdeğine infüze edildi ve hayvanlar daha sonra 3 öldürüldü. P-galaktosidaz ekspresyonu daha sonra immünohistokimyasal olarak değerlendirildi.
Lokomotor etkinliği.
Lokomotor aktivite, aktivite sayaçları (Digiscan hayvan aktivite monitörü; Omnitech Electronics, Columbus, OH) kullanılarak ölçülmüştür. Aktivite sayaçları, her biri birbirinden ayrı 16 cm yerleştirilmiş 2.5 sensörlerinden oluşan iki sıra kızılötesi ışığa sahipti. Aktivite sayaçları, Micropro yazılımı (Omnitech Electronics) kullanılarak bir PC bilgisayarı tarafından toplanan aktivite sayaçlarından kontrol edildi ve verilerden elde edildi.
Deney hayvanları, etkinlik sayaçlarına konulan şeffaf plastik kutulara (25 × 45 × 20 cm) yerleştirildi. Hayvanların başlangıçta 30 dakika boyunca lokomotor aktivite kayıt ekipmanına alışmalarına izin verildi. Bazı deneylerde hayvanlar daha sonra deney tasarımına göre kokain, amfetamin, nikotin veya taşıt enjekte edildi ve tekrar kutulara kondu. Lokomotor aktivitesi, spesifik olmayan enjeksiyonun neden olduğu hipermotiliteyi önlemek için ilaç enjeksiyonundan sonra 60 dk başlayarak 5 dakika boyunca kaydedildi. Tüm deneyler hayvanların hafif fazlarında (9: 00 AM ve 6: 00 PM arasında) yapıldı.
Araçsal cevap ve ilerici oran testi.
Enstrümantal yanıt, MedPC yazılımı (Med Associates, St. Albans, VT) tarafından kontrol edilen sıçanlar (30 x 20 x 25 cm) veya fareler (16 × 14 x 13 cm) için standart işlem odaları kullanılarak değerlendirildi. Her oda, dış gürültünün etkisini azaltmak için beyaz bir gürültü üreteci ve bir fan ile donatılmış ses zayıflatıcı bir dış odaya yerleştirildi. Arka duvara monte edilmiş bir ev ışık odayı aydınlattı. Bir topak dağıtıcısı, yiyecek topaklarını (20 veya 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ), dergiye takviye edici olarak verdi. Baş girişleri, takviye haznesinin üstüne monte edilmiş bir fotosel ile tespit edildi. Bu dergide uyaran ışığı vardı. Sıçanlar için, derginin her iki tarafına bir kol yerleştirildi. Fareler için, odaların arka duvarına (yani, takviye dergisi karşısına) iki burun boşluğu deliği yerleştirilmiştir.
Eğitimin başlamasından hemen önce 5 gün boyunca, hayvanlar günlük 90 dakikaya yiyecekle sınırlandırıldı ve ev kafeslerinde tahıl bazlı yiyecek topaklarına (fareler, 20 mg; sıçanlar, 45 mg) maruz bırakıldı. Test periyodu boyunca, gıda topakları, çalışma odasındaki davranış protokolüne göre (aşağıya bakınız) aralıklı olarak ve 90 dk için günlük kafesteki 30 dk.dan başlayarak sınırsız miktarda mevcuttu. Bu gıda erişim programı, her bir hayvanın kendi doyma noktasına ulaşmasına izin verir ve baskın ve alt hayvanlar arasındaki rekabetin neden olduğu değişkenliği azaltır. Elimizde, bu program ilk kilo kaybının ardından yavaş kilo alımına izin veriyor. -85 - 90 serbest besleme ağırlıklarının% 'si. Deney boyunca hayvan ağırlıkları izlendi.
Tüm denekler başlangıçta 2 d; Bu seanslar sırasında, gıda peletleri sabit zamanlı bir 15 (FT-15) programında takviye dergisine teslim edildi. Ertesi günden itibaren, deneklere 10 ardışık günleri için günlük eğitim seansları verildi. Yiyeceklere cevap vermek, daha önce yayınlanmış enstrümantal şartlandırma prosedürlerine dayanarak test edildi (Baldwin ve arkadaşları, 2002b). Doğru (yani aktif) kol / nosepoke'a cevap vermek güçlenirken, diğer (etkin olmayan) kol / nosepoke'ye cevap vermek programlanmış bir sonuç vermedi. Tüm burun kanaması veya kolun konumu (sol / sağ) tüm deney grupları için dengelendi. Tepki gereksiniminin tamamlanması (aşağıya bakınız), dergi uyaran ışığının başlamasıyla sonuçlandı, ardından 1'i daha sonra tek bir gıda peleti teslim edildi. İki saniye sonra uyarıcı ışık kapatıldı. İlk 10 güçlendirici, sabit oranlı (FR1) bir programa göre başarılı bir şekilde cevaplandıktan sonra, değişken oranlı (VR2) bir programa cevap verdikten sonra peletler elde edildi. Seans 15 dakika sürdü.
Deneyler 3 (fareler) ve 5 (sıçanlar), eğitim sırasındaki enstrümantal performanstaki farklılıkların müteakip ilerleyen oranlara cevap verme üzerindeki olası etkilerini önlemek için alternatif eğitim programları kullandı (aşağıda ayrıntılı olarak verilmiştir). 3 deneyinde fareler, 1 d için bir FR2 programında ve daha sonra 2 d için bir FR8 programında eğitildi. Testin ilk 3 d'si, 60 dakika oturumlarını kullandı. Son 7 eğitim günlerinde, 50 güçlendiricileri elde edildiğinde oturum sonlandırıldı. 5 deneyinde, fareler, iki istisna dışında tüm diğer deneyler için yukarıda açıklandığı gibi 1 dk oturumlarında FR2 / VR15 programında eğitildi. İlk önce, maksimum sayıda 150 peleti / oturumu verildi. İkincisi, bu hayvanlar herhangi bir deneysel manipülasyondan önce stabil performansın oluşturulmasına izin vermek için ek eğitim günleri (yani toplam 5 d) aldı.
Hayvanlar ayrıca, ilerleyici oranda bir takviye takvimi programında gıdalara cevap verme konusunda test edildi. Bu testte, yiyecek elde etme yanıtı gereksinimi bir FR1 programı olarak başlatılmış, ancak daha sonra bir takviye maddesi elde etmek için (örneğin, 2, 1, 3, 5, X + 7 yanıtları) 2 tarafından kademeli olarak arttırılmıştır. Sıçanlar kullanılarak yapılan ilaç muamele deneyinde, program 5 ile aşamalı olarak arttırıldı ve 1, 6, 11, 16, X + 5'in nihai bir programı elde edildi. Diğer tüm parametreler yukarıda açıklanan eğitim prosedürüyle aynı tutuldu. 5 dakika boyunca aktif bir cevap alınmadığında test sonlandırıldı.
Güçlendirici devalüasyon.
Donatının devalüasyonunun etkisi, donatıya özgü ön besleme kullanılarak incelenmiştir. Burada, farelerin 3 saat boyunca kendi kafeslerinde sınırsız tahıl bazlı yiyecek topakları yemelerine izin verildi, yukarıda tarif edildiği gibi takviyenin aşamalı oran çizelgesini test etmeden önce.
Cerrahi teknikleri.
Hayvanlar Equithesin [pentobarbital (35 mg / kg) içeren bir karışım ve kloral hidrat (183.6 mg / kg içeren bir karışım) ve etanol (% 10% v / v) ve propilen glikol (% 39% v / v) kullanılarak anestezi edildi; 4.32 ml / kg, ip] de verilir. Kanüller (Plastics One, Roanoke, VA), NAc çekirdeğinin yukarısına, Kopf stereotaktik ekipmanı kullanılarak cerrahi olarak implante edildi. Bregmaya göre kullanılan stereotaktik koordinatlar aşağıdaki gibidir: anterior / posterior, + 1.5 mm; yanal / medial, ± 1.5 mm; ventral / dorsal, −6.0 mm (Paxinos ve Watson, 1986). Kanüller, vidalar ve dental çimento kullanılarak kafatasına sabitlendi. Tıkanmayı önlemek için tıkaçlar kılavuz kanüllere yerleştirildi. Ameliyattan sonra, hayvanlar ameliyat sonrası standart bakıma tabi tutuldu ve herhangi bir deneyin başlamasından önce 5 d için iyileşmeye bırakıldı.
İnfüzyonları.
Viral vektörlerin intraserebral infüzyonları, eğitim başlamadan önce bilateral olarak 40 saat (aşağıya bakınız) yapıldı. Kılavuz kanüllerin ucunun altında 31 mm'yi uzatan enjeksiyon şırıngaları (1 göstergesi), sol ve sağ NAc'ye aynı anda yavaşça indirildi ve 1.0 ul / tarafı, 4 ul / X infüzyon hızında bir 0.25 dakika boyunca infüzyon edildi. Bir mikro-infüzyon pompası (min. PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA) kullanılarak min. İnfüzyon bittikten sonra infüzyon iğneleri 1 dakika boyunca yerinde bırakılmış ve sahte kanüller değiştirilmiştir. Kanül yerleşimleri, davranışsal deneylerin tamamlanmasından sonra histolojik olarak doğrulandı (bakınız Şekil 6B) ve deney verilerinin istatistiksel analizine sadece doğru yerleştirilmiş kanülleri olan hayvanlar dahil edildi.
Histolojik analizler ve immün boyama.
Deneylerin tamamlanmasından sonra, deneyin bir parçası olarak ameliyat edilmiş olan hayvanlara Equithesin ile anestezi uygulandı ve standart prosedürlere göre 0.1 m PBS (5 dakika) ve% 10% formalin (10 dakika) ile transkardiyal olarak perfüze edildi. Beyinler formaline eklenmiş ve daha sonra bir fosfat tamponlu sukroz çözeltisine (% 30) yerleştirilmiştir. Tüm beyin daha sonra bir mikrotom üzerinde 40 Xm bölümlerinde kesildi ve kanül yerleşimi ve protein ekspresyonu histolojik analizleri için kullanıldı.
Kanül yerleştirme, nötr kırmızı ile zıt kısımlara yapıldı ve etanolün dehidrasyonundan sonra distilen plastikleştirici ve ksilen (DPX) içindeki mikroskop lamlarına monte edildi. İmmünohistokimya daha önce tarif edildiği gibi yapıldı (Hommel ve arkadaşları, 2003). Kısaca, HSV-LacZ infüzyonundan sonra β-galaktosidaz ekspresyonu, bir keçi anti-β-galaktosidaz primer antikoru (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH) kullanılarak immünofloresan boyama ile belirlendi. Gece boyunca inkübasyondan sonra, bölümler durulandı ve ardından Cy2'e (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) konjüge edilmiş bir flüoresan eşek anti-keçi sekonder antikoru ile inkübe edildi. Kesitler tekrar yıkandıktan sonra etanol dehidrasyon ve DPX içerisine monte edildi. Bitişik kontrol bölümleri, birincil antikorlar dahil edilmeden aynı şekilde muamele edildi. İmmünofloresans, 520 nm'de bir kullanılarak değerlendirildi. Zeiss (Oberkochen, Germany) FITC filtreli mikroskop ve aynı pozlama sürelerinde çekilmiş görüntüler Zeiss Axiovision dijital görüntüleme sistemi.
İstatistikler
Tüm deneylerden elde edilen veriler, bir, iki veya üç yollu ANOVA ve ardından Scheffe'nin veya Dunnett'in post hoc testi kullanılarak değerlendirildi ve uygun olduğunda, Holm'un sıralı reddetme testi kullanılarak çoklu karşılaştırmalar düzeltildi. P <0.05 değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Sonuçlar
Deney 1: Tekrarlanan ilaca maruz kalmanın enstrümantal performans ve progresif oran üzerindeki etkileri
Tekrarlanan ilaç maruz kalma paradigmamızın fonksiyonel olarak anlamlı nöroadaptasyonlar ürettiğini doğrulamak için, ilk önce lokomotor hassasiyetini prototipik bir kronik ilaç etkisinin davranışsal ölçüsü olarak değerlendirdik. Günde iki kez nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokain (15 mg / kg), veya amfetamin (2.5 mg / kg) enjeksiyonları yapıldı ve lokomotor aktivitesi ilk enjeksiyondan sonra yapıldı. tedavi günleri 1 ve 15 (ilave Şek. 1A – E, adresinde bulunabilir). www.jneurosci.org ek malzeme olarak). İstatistiksel analiz gün etkileşimi ile önemli bir tedavi ortaya koydu (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). MDMA hariç (p = 0.62), tüm ilaçlar, 15 gününde 1 günü (nikotin, p <0.001; kokain, p = 0.001; amfetamin, p-0.01) ile karşılaştırıldığında belirgin şekilde daha büyük lokomotor aktivitesini (yani, duyarlılık) indüklemiştir. Tekrarlanan salin enjeksiyonlarının etkisi yoktu. İlaç tedavilerinin hiçbiri, 15 günü alışkanlık döneminde ölçülen baz lokomotor aktivitesini değiştirmedi (ek Şek. 2A, www.jneurosci.org ek malzeme olarak).
Son ilaç enjeksiyonundan beş gün sonra, önceki tekrarlanan nikotin, MDMA, kokain veya amfetamin maruziyetinin gıda takviyeli enstrüman davranışları üzerindeki etkilerini inceledik. Veriler her ilaç için ayrı ayrı sunulmuştur. Şekil 1A – H, karşılaştırmalar için aynı salin kontrol grubunu kullanarak. Bu ilaçların her birine daha önce maruz kalmanın, gıda takviyeli enstrüman yanıtını önemli ölçüde ve seçici bir şekilde arttırdığını bulduk (antrenman günü kaldırarak tedavi,(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; hoc sonrası analiz: nikotin, p ≤ 0.01; MDMA, p, 0.05; kokain, p ≤ 0.01; amfetamin, p ≤ 0.001). Asimptotik performansta gözlenen enstrümental cevapta ısrarlı yükselme, tekrarlanan psikostimulanın maruz kalmasından sonra önceden bildirilen artışlarla tutarlı olarak, motivasyonda olası bir artış olduğunu göstermiştir (Tartışma bölümüne bakınız). Bu nedenle, önceki tekrarlanan ilaca maruz kalmanın ilerici bir oran programı kullanarak motivasyonu arttırıp artırmadığını test ettik. Aktif ilaca cevap verme üzerine önceki ilaç maruziyetinin istatistiksel bir etkisi vardı (kol etkileşimi ile tedavi, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (İncir. 2A) ve son kırılma noktası (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (İncir. 2B). Ek analiz, tüm tedavilerin hem aktif yanıtların sayısını (nikotin, p ≤ 0.001; MDMA, p ≤ 0.05; kokain, p ≤ 0.001; amfetamin, p≤ 0.001) ve kırılma noktasını (nikotin, p ≤ 0.001; MDMA) arttırdığını gösterdi , p ≤ 0.01; kokain, p ≤ 0.0001; amfetamin, p ≤ 0.0001) bu tedavilerin motivasyona etkisiyle uyumludur. İlaçların bazal lokomotor aktivitesi üzerindeki etkisinin olmaması ve inaktif kaldıraç preslerinde etkisinin olmaması göz önüne alındığında, bu koşullar altında gıdaya verilen yanıtın artmasının motor aktivitedeki spesifik olmayan artışları yansıtması muhtemel değildir.
Şekil 1.
Daha önce yapılan cihaz davranışları üzerine, daha önce tekrarlanan nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokain (15 mg / kg) veya amfetamin (2.5 mg / kg) enjeksiyonlarının, 15 d için günde iki kez etkisi. Hayvanlar birlikte test edildi, ancak netlik sağlamak için her ilacın etkileri aynı salinle muamele edilen kontrol grubu kullanılarak ayrı ayrı sunuldu. A (aktif tepkiler) ve B (etkin olmayan tepkiler) önceki nikotin maruziyetinin etkilerini göstermektedir; C, D, MDMA; E, F, kokain; G, H, amfetamin. Veriler ortalama ± SEM olarak gösterilmiştir.
Şekil 2.
Salin, nikotin (15 mg / kg), MDMA (0.35 mg / kg), kokain (2.5 mg / kg) veya amfetamin (15 mg / kg) ile önceki tekrarlanan tedavinin (günde iki kez, 2.5 gün) araçsal yanıt üzerindeki etkisi artan oranlı bir takviye programında. Veriler, ortalama ± SEM olarak temsil edilir. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, Saline; Nic, nikotin; Coc, kokain; Amph, amfetamin; PR, aşamalı oran.
Önceki ilaca maruz kalmanın ayrıca, gıda kısıtlamasından önce, enstrümantal eğitimin ilk veya son gününde veya progresif oran testinden hemen önce kaydedilen vücut ağırlığı üzerinde bir etkisi olmamıştır (ek Şek. 2B, www.jneurosci.org ek malzeme olarak). 3 d için kısıtlı gıda erişimi başlangıçta vücut ağırlığını ortalama olarak serbest besleme ağırlıklarının ortalama 91 - 92'ine düşürdü. Davranış testi sonunda ağırlıklar, önceden ölçülmüş vücut ağırlığının% 97-99'ine geri döndü ve ilaca maruz kalan ve salinle tedavi edilen hayvanlar arasında hiçbir fark gözlenmedi. Bu nedenle, vücut ağırlığındaki değişiklikler ve açlık veya iştahtaki farklılıklar, araçsal performansın veya motivasyonun gözlenen artışına önemli ölçüde katkıda bulunmamalıdır.
Deney 2: bitransgenik farelerde ΔFosB'nin indüklenebilir aşırı ifadesi; enstrümantal performans
Daha sonra, NAc ve dorsal striatumda belirgin bir seçiciliği olan ΔFosB'yi indüklenebilen aşırı eksprese eden bitransgenik farelerde enstrümantal performansın da artmış olup olmadığını inceledik (Kelz ve diğerleri, 1999). Bu deneyde, ΔFosB-aşırı eksprese eden fareler, xyFosB'yi aşırı eksprese etmeyen, alt doksisiklin üzerinde tutuldukları için fazla eksprese etmeyen çöp arkadaşı kontrolleriyle karşılaştırıldı (bakınız Malzemeler ve Yöntemler). BFosB'nin aşırı ekspresyonunun gıda ile güçlendirilmiş yanıt vermeyi önemli ölçüde arttırdığını bulduk (antrenman günü kaldırarak gen ekspresyonu, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (İncir. 3A). Etkin olmayan diyafram açıklığında yapılan nosepoke yanıtlarının sayısı iki grup arasında farklı değildi (İncir. 3B). Birlikte, bu veriler, NAc ve dorsal striatumda ΔFosB aşırı ekspresyonunun seçici olarak enstrümantal performansı arttırdığını gösterir.
Şekil 3
Bitrangenik farelerde indüklenebilir striatal expressFosB'nin aşırı ekspresyonunun enstrümantal performans üzerine etkisi. A, Aktif cevaplar. B, Aktif olmayan cevaplar. Veriler ortalama ± SEM olarak gösterilmiştir.
BFosB aşırı eksprese eden hayvanlarda enstrümantal performansın artmasının iştah veya açlıktaki değişiklikler ile açıklanabileceğini dışlamak için, vücut ağırlığı gıda kısıtlamasından önce ve eğitimin ilk ve son günlerinde kaydedildi. OsFOSB, gıda kısıtlamalarından önce vücut ağırlığını etkilemedi ve davranış testi sırasında vücut ağırlığını etkilemedi. Burada, 3 d için kısıtlı gıda erişimi, vücut ağırlığını ortalama 87 - 89 serbest besleme ağırlığının% 'üne düşürdü. Davranışsal testlerin sonunda, hayvan ağırlıkları, ΔFosB ve kontrol farelerinde görülen eşdeğer değişikliklerle (ek Şek. 97A'da bulunabilir) eşdeğer önleyici vücut ağırlıklarının% 99-3'i idi. www.jneurosci.org ek malzeme olarak). Bu nedenle, ΔFosB aşırı ekspresyonunun açlık veya iştah üzerindeki potansiyel etkilerinin, gözlenen araçsal cevap verme konusundaki gelişmeleri hesaba katması muhtemel değildir.
Enstrümantal performans üzerinde test tamamlandığında, ΔFosB aşırı ekspresyonu, bir 30 dakika boyunca ölçülen bazal lokomotor aktivitesini değiştirmedi (tamamlayıcı Şekil 3B, www.jneurosci.org ek malzeme olarak). Bu gözlem, aktivitedeki spesifik olmayan değişikliğin, bu hayvanlarda gözlenen gelişmiş araç performansına katkıda bulunmadığı görüşünü desteklemektedir. Bununla birlikte, BFosB'yi aşırı eksprese eden bitransgenik farelerin, akut ve tekrarlanan kokaine karşı artan lokomotor tepkileri sergiledikleri bildirilmiştir (Kelz ve diğerleri, 1999). Gen ekspresyonunu indüklemek için doksisiklinden biraz farklı bir çekme programı kullandığımızdan (6 haftalarında gıda kısıtlaması) bu fenotipi onaylamak için yola çıktık. Gerçekten de, ΔFosB-aşırı eksprese edici fareler, doksisiklin üzerinde tutulan alt-madde kontrolleri ile karşılaştırıldığında kokain enjekte edildiğinde lokomotor aktivitesinde anlamlı bir artış göstermiştir (gen ekspresyonu, F ile muamele(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (tamamlayıcı Fig. 3C, www.jneurosci.org ek malzeme olarak).
Deney 3: bitransgenik farelerde ΔFosB'nin indüklenebilir aşırı ifadesi; ilerici oran
Önceki ilaç maruz kalma striatal ΔFosB (Nestler ve arkadaşları, 2001) ve burada artan yanıt oranını arttırdığı tespit edildi, daha sonra ΔFosB'nin transgenik striatal aşırı ekspresyonunun aynı zamanda, bir takviye oranının artan oran takvimi üzerindeki performansı arttırıp arttırmadığını test ettik. İlerici oran yanıtı üzerinde test etmeden önce, enstrümantal performansta önemli farklılıklar üretmeyen koşullar altında (bakınız Materyaller ve Metotlar) enstrümantal yanıtlama üzerine yeni bir fare grubu eğitilmiştir (F(1,16) <1). Bununla birlikte, aşamalı oran testinde kaldıraç etkileşimi ile önemli bir gen ifadesi gözlemledik (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (İncir. 4A) ve xyFosB-aşırı eksprese eden farelerin, doksisiklin üzerinde muhafaza edilen littermate kontrol fareleri ile karşılaştırıldığında, daha fazla sayıda aktif cevap verdiğini (p UM 0.05) iken aktif olmayan kol cevaplarının sayısının farklı olmadığını keşfetti. OsFosB-aşırı ifade eden fareler de daha yüksek bir kırılma noktasına (F) ulaştı(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (İncir. 4B). Bu veriler, önceki psikostimulanın maruz kalması gibi ΔFosB'nin striatal aşırı ekspresyonunun motivasyonu arttırdığını göstermektedir. Etkin olmayan cevapların sayısı, BFosB-aşırı eksprese eden farelerde değişmediğinden, aktivitedeki spesifik olmayan artışın bu etkilere katkıda bulunma olasılığı yoktur. Bu görüş ayrıca, ΔFosB'yi aşırı eksprese eden fareler ile doksisiklin üzerinde tutulan littermat kontrol fareleri arasında bir fark bulunmadığı bazal lokomotor aktivitesinin değerlendirilmesiyle desteklendi. Test gününde ölçüldüğü gibi ΔFosB aşırı ifade eden ve kontrol hayvanları arasında vücut ağırlığında hiçbir brüt farklılık görülmedi. Bu nedenle, ΔFosB-aşırı ifade eden hayvanlar daha fazla gıda-motivasyonlu enstrümantal cevaplar yaysalar da, serbestçe temin edilebildiklerinde daha fazla yiyecek tüketmezler. Bu gözlem için en muhtemel açıklama, motivasyon, bir hayvanın bir takviye almak için ne kadar zor olacağını belirlese de, sayısız ek faktörün (iştah, tokluk, metabolik durum vb.) Beslenme davranışını ve gerçek gıda tüketimini etkilediğini göstermesidir.
Şekil 4.
Bitransgenik farelerde FosB'nin indüklenebilir aşırı ekspresyonunun, tokluk ile indüklenen güçlendirici devalüasyonundan önce ve sonra, artan oranlı takviye programına araçsal yanıt verme üzerindeki etkisi. A, B, Taban Çizgisi: kaldıraç yanıtları (A), kırılma noktası (B). C, D, Pekiştirici devalüasyonundan sonra: kaldıraç tepkileri (C), kırılma noktası (D). Veriler, ortalama ± SEM olarak temsil edilir. * p <0.05.
Burada kullanılan ΔFosB bitransgenik fareler, striatum boyunca ΔFosB ifade eder. Ventral striatum (NAc dahil) motivasyonel süreçlerde yer almasına rağmen, dorsal striatum'un araçsal alışkanlıkların kazanılmasında rol oynadığı iddia edilmektedir (Yin ve arkadaşları, 2004; Faure ve diğerleri, 2005). Azami takviye sınırlarına sahip düşük oranlı bir program kullanarak eğitim aşamasında enstrümantal performanstaki farklılıkları gözlemlememize rağmen, enstrümantal alışkanlıkların gelişimine nispeten dirençli koşullar (Dickinson, 1985), alışkanlıkların kurulmasının, ilerici oran çizelgesi kapsamında cevap vermeyi etkilemesi muhtemeldir. Bu olasılık, donatı devalüasyonunun, ilerleyen oranın ilerleyen oranlara yanıt vermesini önleyerek etkisini değerlendirerek doğrudan test edilmiştir. Bu tür bir ön besleme, ΔFosB'nin aşırı eksprese etme ve kontrol fareleri (F) arasında gözlemlenen yanıtlama veya kopma noktalarında hiçbir fark olmadan, BFosB'nin yanıt verme oranındaki ilerlemeci oran üzerindeki etkisini ortadan kaldırmıştır.(1,16) <1) (İncir. 4CD). Birlikte, bu veriler, ΔFosB'nin striatal aşırı ekspresyonunun, bu test çizelgesini kullanarak ödüllendirilmiş sonuçların değerindeki değişikliklere duyarlılığı değiştirmediğini göstermektedir. Aksine, progresif oran testinde gözlemlenen araçsal yanıt, hedefe yönelik görünmektedir ve ΔFosB aşırı eksprese eden farelerde gözlenen artmış kırılma noktasının, arttırılmış motivasyona bağlı olduğu ve yüksek alışkanlık benzeri yanıt verme ile ilişkilendirilemediği muhtemeldir.
Deney 4: NAc çekirdeğinde ΔFosB'nin viral aracılı aşırı ifadesi: enstrümantal performans
NAc'de ΔFosB aşırı ekspresyonunun seçici olarak bitransgenik farelerde gözlenen davranışı hesaba katabildiğini değerlendirmek için, HSV-ΔFosB veya HSV-LacZ'yi bir kontrol olarak, seçici olarak sıçanların NAc çekirdeğine aşıladık ve bu manipülasyonun gıda üzerindeki etkisini araştırdık destekli enstrümantal performansİncir. 5A, B). Dergi eğitiminden sonra, HSV-ΔFosB veya HSV-LacZ, davranış testinin başlamasından önce NAc çekirdeği 40 saat içine infüze edildi. İnfüzyonun yeri ve viral aracılı gen ekspresyonunun kapsamı, Şekil 6, A ve B. HSV-ΔFosB'nin NAc infüzyonları, yapılan aktif cevapların sayısında sürekli bir artış meydana getirmiştir (kol tarafından gen ifadesi, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (İncir. 5A), deney boyunca devam eden. Bu etkiler seçicidir, çünkü NAc çekirdeğinde ΔFosB aşırı ekspresyonunun aktif olmayan yanıtların sayısı üzerinde önemli bir etkisi olmamıştır (İncir. 5B) veya deneyin tamamlanmasından bir gün sonra kaydedilen baz lokomotor etkinliği (veriler gösterilmemiştir). NAc'de BFosB'nin aşırı ekspresyonu böylece önceki ilaca maruz kalmanın veya ΔFosB'nin striatal aşırı ekspresyonunun davranışsal etkilerini taklit etti.
Şekil 5.
Enstrümantal cevap verme üzerine eğitim öncesi HSV-ΔFosB infüzyonlarının NAc çekirdeğine etkisi. A, Aktif cevaplar. B, Aktif olmayan cevaplar. Veriler ortalama ± SEM olarak gösterilmiştir.
Şekil 6.
A, viral vektör deneyleri için infüzyon bölgelerinin yerleşimleri. Sayfanın Üstü, Doldurulmuş siyah daireler amaçlanan infüzyon bölgesine karşılık gelir. Sadece ∼ dahilinde yapılan infüzyonlarBu alanın 0.5 mm'si (yani NAc çekirdeği içinde), daire tarafından belirtildiği gibi kabul edilebilir olarak kabul edildi. Bu alanın dışında yapılan infüzyonlu hayvanlar istatistiksel analizlerin dışında bırakıldı. Altta, temsili bir hayvandaki NAc içindeki infüzyon bölgesi. B, HSV-LacZ infüzyonu sonrası protein ekspresyonunun immünohistokimyasal olarak doğrulanması. Üst paneller NAc çekirdeğinde β-galaktosidaz ekspresyonu gösterir (2.5 ve 10 × büyütme). Alt paneller, primer antikor dahil edilmeden aynı immünohistokimyasal prosedürü kullanarak bitişik kontrol bölümlerinde immünofloresans eksikliğini göstermektedir.
Deney 5: NAc çekirdeğinde ΔFosB'nin viral aracılı aşırı ifadesi: aşamalı oran
Son deney doğrudan viral aracılı gen aktarma yaklaşımı kullanılarak NAc çekirdeğinde ΔFosB'nin aşırı ekspresyonunun, sıçanlarda motivasyonu artırmak için yeterli olup olmadığını belirledi. Burada, HSV-ΔFosB sadece enstrümantal eğitim tamamlandıktan sonra infüze edildi ve duringFosB aşırı ekspresyonunun, sonraki ilerici oran testi üzerindeki antrenman üzerindeki olası etkisini ortadan kaldırdı. Daha önce olduğu gibi yeni bir sıçan grubu eğitildi ve eğitimin son günlerindeki performanslarına göre dengeli deney gruplarına ayrıldı. Hayvanlar daha sonra NAc çekirdeğine bilateral HSV-ΔFosB veya HSV-LacZ infüzyonları aldı ve aşırı ekspresyonun 5 d'sinden sonra yanıt veren progresif oran üzerinde test edildi. İstatistiksel analiz, kol etkileşimi ile önemli bir gen ekspresyonunu gösterdi (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (İncir. 7A). HSV-ΔFosB ile aşılanmış sıçanlar, HSV-LacZ ile aşılananlara kıyasla daha aktif tepkiler (p ≤ 0.01) yaptı, oysa aktif olmayan kola cevap verme etkilenmedi. Bu artışla tutarlı olarak, HSV-ΔFosB ile aşılanmış sıçanlarda daha yüksek kırılma noktalarına (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (İncir. 7B) HSV-LacZ ile aşılanmış hayvanlardan daha. ΔFosB’in, aşamalı oran testinden önce 1 h tarafından test edilen baz lokomotor aktivitesi üzerinde bir etkisi olmamıştır (ek Şek. 4A, www.jneurosci.org ek malzeme olarak). Ayrıca ilerici oran testinin yapıldığı gün vücut ağırlığında da bir farklılık yoktu (ek Şek. 4B, www.jneurosci.org ek malzeme olarak). Bu bulgular, transgenik ΔFosB-aşırı ifade eden fareler ile gözlemlerimizi desteklemektedir ve NAc'da ΔFosB'nin seçici aşırı ifadesinin gıdaya bağlı motivasyonu arttırmak için yeterli olduğunu göstermektedir.
Şekil 7.
Test edilmeden önce HSV-ΔFosB 5 d infüzyonlarının, artan oranlı takviye programında araçsal yanıt verme üzerindeki etkisi. A, Kaldıraç yanıtları. B, Kırılma noktası. Veriler, ortalama ± SEM olarak temsil edilir. *** p <0.001; ** p <0.01.
Tartışma
Bu çalışma, NAc içindeki ΔFosB'nin aşırı ekspresyonunun gıda takviyeli enstrümantal davranışları arttırdığını göstermektedirr. Gelişmiş kokain, amfetamin, MDMA veya nikotine maruz kalma, daha sonraki enstrümantal performansta kalıcı bir artış sağladı. Bu ilaç riskleri ayrıca, ilerleyici oranda bir takviye takvimi programı altında, gıdaya dayalı davranışları arttırdı.. Önceki ilaca maruz kalmanın bu etkileri, striatumda ΔFosB'nin aşırı eksprese edilmesi, indüklenebilir bitransgenik (NSE-tTA × TetOP-ΔFosB) fareler kullanılarak veya NAc'da seçici olarak ΔFosB'yi eksprese etmek için yeni bir viral vektör kullanılarak taklit edildi.. Özellikle, NAc çekirdeğinde ΔFosB'nin aşırı ekspresyonu, enstrümantal yanıt verdikten sonra, ilerici oran çizelgesi altında gıda için motivasyon arttırıldı. Birlikte, bulgularımız NAc çekirdeğindeki BFosB'yi enstrümantal davranışı destekleyebilecek ilaç kaynaklı nöroadaptasyonların potansiyel bir aracı aracı olarak tanımlayarak, bu transkripsiyon faktörünün gıda takviyeli davranışların performansı üzerindeki motivasyonel etkilerle ilgili süreçleri içerme rolünü genişletmektedir. Aynı zamanda, NAc'de ΔFosB ifadesini indükleyen koşulların, hem doğal hem de ilaç güçlendirici maddelerin motivasyon özelliklerini etkileyebilme ihtimalini arttırır..
OsFOSB, hem NAc hem de dorsal striatumun kronik, ancak akut olmayan, kötüye kullanılan ilaçlara maruz kalmasından sonra dynorphin ifade eden orta dikenli nöronlarda birikir. Bu bölgesel ekspresyon paterni, burada kullanılan indüklenebilir bit transgenik ΔFosB-aşırı eksprese eden farelerde üretilir. Bu farelerde ΔFosB'nin yüksek striatal seviyeleri, koşullu yer tercihi ile ölçüldüğü üzere hayvanların kokain ve morfine duyarlılığını artırır. (Kelz ve diğerleri, 1999; Zachariou ve arkadaşları, 2006). Aynı zamanda, kokaine cevap verme oranını arttırmaktadır, bu da kendi kendine kokain için motivasyonun striatal ΔFosB aşırı ifadesiyle arttırıldığını göstermektedir (Colby ve diğerleri, 2003). Burada, bu farelerde striatal ΔFosB aşırı ifadesinin, bir gıda takviyesine cevap veren ilerleyici oranı arttırdığını ve bu etkilerin, sıçanda NAc çekirdeğindeki kısıtlı viral-aracılı iralFosB ekspresyonu ile üretildiğini tespit ettik. Verilerimiz ΔFosB'nin birincil güçlendirici maddeler için motivasyonun transkripsiyonel bir modülatörü olarak hareket edebileceğini, yiyecek, ilaç veya belki egzersiz yapması gerektiğini, kronik tekerlekli koşu veya sakaroz içmeden sonra ΔFosB'nin striatal ekspresyonunun arttığını düşündüğü ön gözlemlerle tutarlı bir fikir olduğunu düşündürmektedir.McClung ve arkadaşları, 2004). Bu veriler NAc'nin ΔFosB'nin aşırı ekspresyonunun hem doğal hem de ilaç güçlendirici maddelerin motivasyonel etkisini artırabileceğini göstermektedir.
NAc'nin alt bölgelerinin, Pavlovya ya da araçsal teşvik süreçlerinin enstrümantal performans üzerindeki etkisine farklı şekilde aracılık ettiği iddia edildi. (Corbit ve diğerleri, 2001; de Borchgrave ve diğerleri, 2002), enstrümantal performans üzerindeki daha genel motivasyonel etkiler, amigdalanın merkezi çekirdeği gibi diğer bölgeler tarafından kodlanabilir (Corbit ve Balleine, 2005). NAc çekirdeğinin, hedefe yönelik araçsal öğrenmenin kazanılması için kritik bir alan olduğu da öne sürüldü (Smith-Roe ve Kelley, 2000; Baldwin ve arkadaşları, 2002a,b; Kelley, 2004). Önceki ilaç risklerinin ve transgenik striatal ΔFosB aşırı ekspresyonunun eşdeğer etkilerini enstrümantal davranışın arttırılması üzerine gösteririz. NAc çekirdeği ile sınırlanan HSV-BFosB infüzyonları, gıda ile güçlendirilmiş enstrümantal yanıtı da arttırdı. Bu deneyler, dorsal striatumun bu davranışlara katkısını dışlamamasına rağmen, NAc içindeki gen ekspresyonundaki BFOSB kaynaklı değişikliklerin, gıda motivasyonlu yanıtı artırmak için yeterli olduğunu kuvvetle önerirler. BFosB, daha önce istikrarlı enstrümantal performans elde edildikten sonra ifade edildiğinde, artan oranlı yanıt da arttığı için, enstrümantal davranış üzerindeki motivasyonel etkilerin rolü muhtemel görünmektedir. Bununla birlikte, manipülasyonlarımızın araçsal öğrenme süreçlerini de etkileme olasılığı tamamen dışlanamaz. Sonuçlarımızı destekleyen, önceki oral kokain maruziyetinden sonra gözlenen enstrümantal performanstaki artış (Miles ve diğerleri, 2004Kronik nikotin tedavisinin farelerde yanıt veren progresif oranını arttırma kabiliyetine uygun motivasyonel değişiklikler içerdiği ileri sürülmüştür (Brunzell ve arkadaşları, 2006). Ayrıca, hücre dışı dopamin seviyelerinin arttırıldığı dopamin taşıyıcı nakavt fareler, hem arttırılmış ΔFosB immünoreaktivitesi hem de gıda takviyeli motivasyon sergilerler ancak değişmiş öğrenmezler (Cagniard ve diğerleri, 2006). Dahası, farelerde striatal ΔFosB'nin aşırı ekspresyonunun, yiyeceklerin önceden beslenmeyle "devalüe edildiğinde" performansı etkilemediğini tespit ettik.. Bu veriler, hayvanların takviyenin motivasyonel değerine duyarlı olduğunu ve cevap vermenin hedefe yönelik olduğunu göstermektedir..
Önceden tekrarlanan ilaca maruz kalma aynı zamanda, Pavlovian yaklaşımı ile ölçülen, doğal takviye edici maddelerle ilişkili koşullandırılmış uyaranlarla uygulanan davranış kontrolünü de artırabilir (Harmer ve Phillips, 1998; Taylor ve Jentsch, 2001; Olausson ve diğerleri, 2003), şartlandırılmış donatı (Taylor ve Horger, 1999; Olausson ve diğerleri, 2004) ve pavlovian-enstrümantal aktarım (Wyvell ve Berridge, 2001). NAc çekirdeğinin kabuk yerine, çekirdeğin şartlandırdığı uyaranlar tarafından uyuşturucuyla motive edilmiş davranışların kontrolünde yer aldığına dair güçlü kanıtlar var (Parkinson ve arkadaşları, 1999, 2002; Hall ve arkadaşları, 2001; Dalley ve diğerleri, 2002; Ito ve arkadaşları, 2004). Sonuçlarımız, NAc'de ilaca bağlı ΔFosB indüksiyonunun, bu prosedürlerde davranış kontrolünün arttırıldığı bir mekanizma olabileceğini düşündürmektedir. Ayrıca, şartlandırılmış güçlendirici olarak görev yapan Pavlovian koşullu uyarıcıların mevcut davranışsal etkilere katkıda bulunması da mümkündür. Striatal ΔFosB'deki artışlara aracılık eden bu tür uyarılmış uyarıcılar tarafından davranış üzerinde gelişmiş kontrol, proteinin ilaca bağlı şartlandırılmış yer tercihi üzerindeki etkisine de katkıda bulunabilir. (Kelz ve diğerleri, 1999; Zachariou ve arkadaşları, 2006) ve kokaine cevap veren ilerici oran (Colby ve diğerleri, 2003). Motivasyonel süreçlerdeki değişiklikler, bağımlılık yapan davranışların gelişimine ve korunmasına katkıda bulunmak için varsayılmıştır (Robinson ve Berridge, 1993; Jentsch ve Taylor, 1999; Robbins ve Everitt, 1999; Nestler, 2004). Mevcut veriler aynı zamanda bağımlılık davranışında çok sayıda araçsal ve pavlovian süreci vurgulayan diğer teorilerle de tutarlıdır (Everitt ve Robbins, 2005). İlaç ve ΔFosB kaynaklı nöroadaptasyonların NAc'de ve diğer limbik-striatal alt bölgelerinde, enstrümantal performansı kolaylaştırabilen ve kompulsif davranışa katkıda bulunan spesifik ilişkisel veya motivasyonel faktörlere göre rolünü tanımlamak için ek çalışmalara ihtiyaç vardır.
NAc içindeki değişikliklerin birincil veya şartlandırılmış kuvvetlendiriciler tarafından motive edilen davranışı etkilediği kesin moleküler mekanizmalar bilinmemesine rağmen (Kelley ve Berridge, 2002), NAc'nin GABAerjik orta dikenli nöronları, ilaca ve deneyime bağlı plastiklik için kritik bir substrat olarak kabul edilir. Burada, ventral tegmental alandan dopaminerjik girdi ve kortikolitik afferentlerden glutamaterjik girdi, ortak dendritlere ve dendritik dikenlere yakınlaşır. (Sesack ve Pickel, 1990; Smith ve Bolam, 1990). Kronik psikostimulanın maruz kalması NAc kabuğundaki ve çekirdekteki nöronlardaki bu tür dikenlerin yoğunluğunu arttırır (Robinson ve Kolb, 1999; Robinson ve diğerleri, 2001; Li ve diğ., 2003, 2004). Son zamanlarda, davranışsal duyarlılığın uyarılması, NAc çekirdeğindeki dendritik dikenlerdeki bir artışla özellikle ilişkiliydi (Li ve diğ., 2004). Özellikle, omurga yoğunluğunda kokainin neden olduğu artışlar sadece D1BFosB'yi eksprese eden pozitif nöronlarRobinson ve Kolb, 1999; Lee ve arkadaşları, 2006). NAc çekirdeğindeki BFosB bu nedenle enstrümantal davranışı etkileyebilecek kalıcı sinaptik plastisiteye katkıda bulunabilir. Gerçekten de, dopamin-glutamat nörotransmisyonu için kritik bir rol (Smith-Roe ve Kelley, 2000), protein kinaz A aktivitesi (Baldwin ve arkadaşları, 2002a) ve de novo protein sentezi (Hernandez ve arkadaşları, 2002) NAc çekirdeğinde enstrümantal performans konusunda daha önce bildirilmiştir. Şimdi BFosB'yi NAc çekirdeğinde aşırı eksprese edildiğinde gıda takviyeli yanıtı ısrarla artırabilecek bir transkripsiyon faktörü olarak tespit ediyoruz. Bu etkilere katılan spesifik genler veya proteinler kesin olarak tanımlanmış olarak kalır. BFosB, nöroplastisitede yer alan NAc içindeki çoklu proteinlerin ekspresyonunu düzenler (McClung ve Nestler, 2003). Yeni bir mikrodizi analizi, burada kullanılan BFosB'yi eksprese eden bitransgenik farelerin NAc'sindeki gen ekspresyon modellerini tanımladı ve nispeten kısa süreli ΔFosB ekspresyonu ile düzenlenen bir gen alt kümesini tanımladı (McClung ve Nestler, 2003). BDNF böyle bir gendi ve bu sinir devresindeki BDNF'nin ilaç ve gıda ile ilgili ipuçlarına cevap vermeyi arttırdığı bilinmektedir (Horger ve diğerleri, 1999; Grimm ve diğerleri, 2003; Lu ve arkadaşları, 2004). Ek bir ilgi alanı geni sikline bağımlı kinaz 5 (Bibb ve arkadaşları, 2001) ΔFosB tarafından da indüklenen, ve hem kokaine bağlı yapısal plastikliği düzenleyebilir (Norrholm ve arkadaşları, 2003) ve doğal veya ilaç takviyeleri için cevap veren progresif oranla ölçülen motivasyon (JR Taylor, yayınlanmamış gözlemler). Yine ek adaylar, AMPA glutamat reseptörlerinin GluR2 alt birimidir. (Kelz ve diğerleri, 1999) ve transkripsiyon faktörü NFκB (nükleer faktör κB) (Ang ve arkadaşları, 2001). Bu ve diğer düzenlenmiş proteinlerin NAc alt bölgelerinde, ΔFosB'nin enstrümantal performans ve motivasyon üzerindeki davranışsal etkilerine aracılık eden adaylar olarak değerlendirilmesi önemlidir.
The Mevcut deneyler dizisi, NAc içinde ΔFosB'nin aşırı ekspresyonunun gıdaya bağlı davranışı artırabildiğine ve böylece daha önce ilaç ödülleri için gösterildiği gibi araçsal performansı düzenlediğine dair kanıt sağlar. Bu veriler, ΔFosB'un, amaca yönelik davranışlarda takviyelerin motivasyonel yönündeki gelişmelere bağlı genel bir moleküler anahtar olarak hareket edebileceğine dair yeni kanıtlar sunmaktadır. Bulgularımız, NAc ΔFosB'nin, örneğin bağımlılık yapan ilaçlar, stres veya belki de oldukça ödüllendirici yiyecekler tarafından uyarılmasının, işlevsel olmayan motivasyonel durumların, zorunlu davranışla ilişkili psikiyatrik bozukluklara neden olduğu kritik bir mekanizma olabileceği ihtimalini arttırmaktadır.
Dipnotlar
o Mart 15, 2006 alındı.
o Revizyon Haziran 23, 2006 aldı.
o Ağustos 2, 2006 kabul edildi.
Bu çalışma, Ulusal Uyuşturucu Bağımlılığı Enstitüsü, Ulusal Akıl Sağlığı Enstitüsü ve Ulusal Alkol Bağımlılığı ve Alkolciliği Enstitüsü tarafından verilen hibeler ile desteklenmiştir. Dilja Krueger, Drew Kiraly, Dr. Ralph DiLeone, Robert Sears ve Dr. Jonathan Hommel'in Yale Üniversitesi Psikiyatri Bölümü'ndeki değerli yardımlarını minnetle kabul ediyoruz. Jennifer Quinn ve Dr. Paul Hitchcott'a bu yazıyla ilgili faydalı yorumlar yaptıkları için minnettarız.
Yazışmalar, Yale Üniversitesi Tıp Fakültesi, Ribicoff Araştırma Tesisleri, Connecticut Ruh Sağlığı Merkezi, 34 Park Caddesi, New Haven, CT 06508, Psikiyatri Anabilim Dalı, Moleküler Psikiyatri Anabilim Dalı, Jane R. Taylor'a iletilmelidir.[e-posta korumalı]
Telif Hakkı © 2006 Sinirbilim Derneği 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Referanslar
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) Çekirdekte NFκB'nin indüklenmesi, kronik kokain uygulaması ile aksar. J Neurochem 79: 221 – 224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Holahan MR,
4. Kelley AE
(2002a) İştah açıcı enstrümental öğrenme, çekirdek akumbens içindeki cAMP'ye bağlı protein kinazın inhibisyonu ile bozulur. Neurobiol Öğrenim Mem 77: 44 – 62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002b) İştah açıcı enstrümantal öğrenme NMDA ve dopamin D'nin tesadüfî aktivasyonunu gerektirir1 medial prefrontal korteks içindeki reseptörler. J Neurosci 22: 1063 – 1071.
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) Çekirdeğin ibotenik asit lezyonlarının enstrümantal etki üzerindeki etkileri. Behav Brain Beyin Res 65: 181 – 193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) Bağımlılık, dopamin ve belleğin moleküler mekanizmaları. Nöron 25: 515 – 532.
6. ↵
1. Berridge KC,
2. Robinson TE
(2003) Ayrıştırma ödülü. Trendler Neurosci 26: 507 – 513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10 Nairn AC,
11 Nestler EJ,
12 Greengard P
(2001) Kronik kokaine maruz kalmanın etkileri nöronal protein Cdk5 tarafından düzenlenir. Doğa 410: 376 – 380.
8. ↵
1. Brunzell DH,
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) beta2-Alt ünite içeren nikotinik asetilkolin reseptörleri, şartlandırılmış takviyede nikotin kaynaklı artışlarda rol oynar, ancak C57BL / 6 farelerinde gıda için yanıt veren progresif oran değildir. Psikofarmakoloji (Berl) 184: 328 – 338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balsam PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) Kronik olarak yükseltilmiş dopaminli fareler, bir gıda ödülü için daha fazla motivasyon sergiler ancak öğrenmezler. Nöropsikofarmakoloji 31: 1362 – 1370.
10 ↵
1. Carlezon WA Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Kokain ödülünün CREB tarafından düzenlenmesi. Bilim 282: 2272 – 2275.
11 ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. BT umut,
4. Nakabeppu Y,
5. Nestler EJ
(1997) Kronik Fos-ilişkili antijenler: Kronik tedavilerle beyinde indüklenen ΔFosB değişken varyantları. J Neurosci 17: 4933 – 4941.
12 ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR,
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Beyinde uyarılabilir, hedeflenmiş gen ekspresyonu olan transgenik hayvanlar. Mol Pharmacol 54: 495 – 503.
13 ↵
1. Colby CR,
2. Fısıltı K,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Öz DW
(2003) riaFosB'nin striatal hücre tipine spesifik aşırı ekspresyonu, kokain için teşviği arttırır. J Neurosci 23: 2488 – 2493.
14 ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Pavlovian-enstrümantal transferin genel ve sonuca özgü formlarında bazolateral ve santral amigdala lezyonlarının çift ayrışması. J Neurosci 25: 962 – 970.
15 ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Çekirdeğin enstrümantal koşullanmadaki rolü vardır: Accumbens göbeği ve kabuğu arasındaki fonksiyonel ayrışmanın kanıtı. J Neurosci 21: 3251 – 3260.
16 ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y,
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus, dopamini alıştırır ve ayırt edici yaklaşım öğrenmesini sağlar: 6-hidroksidopamin lezyonlarının etkileşimli etkileri ve sistemik apomorfin uygulamasının. Psikofarmakoloji (Berl) 161: 425 – 433.
17 ↵
1. de Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Dickinson A,
4. Balleine BW
(2002) Sitotoksik çekirdeğin lezyonları farelerde enstrümantal kondisyonlama üzerine etkisi. Exp Brain Res 144: 50 – 68.
18 ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Bazolateral amigdala ve çekirdek arasındaki doğrudan etkileşimler, farelerin kokain arama davranışını çekirdeğin altında toplar. J Neurosci 24: 7167 – 7173.
19 ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Kendi kendine verilen kokain, eroin veya sukroz ile eşleştirilmiş uyaranların koşullandırıcı güçlendirici özellikleri: bağımlılık davranışının sürekliliği için çıkarımlar. Nörofarmakoloji 47 ([Özel Sayı 1]) 202 – 213.
20 ↵
1. Dickinson A
(1985) Eylemler ve alışkanlıklar: davranışsal özerkliğin gelişimi. Philos Trans R Lond B Biol Bilim 308: 67 – 78.
21 ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Uyuşturucu bağımlılığı için sinirsel pekiştirici sistemler: eylemlerden alışkanlıklara ve zorlamalara. Nat Neurosci 8: 1481 – 1489.
22 ↵
1. Faure,
2. Haberland U,
3. Conde F,
4. El Massioui N
(2005) Nigrostriatal dopamin sistemine lezyon, uyaran-tepki alışkanlığı oluşumunu bozar. J Neurosci 25: 2771 – 2780.
23 ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T,
4. BT umut,
5. Su tp,
6. Shaham Y
(2003) Kokainden çekildikten sonra mesolimbik dopamin sistemindeki beyinden türetilmiş nörotrofik faktör protein seviyelerinde zamana bağlı artışlar: kokain özleminin inkübasyonunun etkileri. J Neurosci 23: 742 – 747.
24 ↵
1. Salon J,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Amigdala ve çekirdeğin merkezi çekirdeğinin dahil edilmesi, çekirdeğin enstrümantal davranış üzerindeki Pavlovian etkilerine aracılık etmesine neden olur. Eur J Neurosci 13: 1984 – 1992.
25 ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) d-amfetaminle tekrarlanan ön işlemden sonra iştah açıcı iyileştirme. Behav Pharmacol 9: 299 – 308.
26 ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002) Enstrümantal öğrenmenin erken pekiştirilmesi, çekirdekteki akümenlerde protein sentezi gerektirir. Nat Neurosci 5: 1327 – 1331.
27 ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Viral aracılı RNA enterferansı kullanarak beyinde lokal gen yıkımı. Nat Med 9: 1539 – 1544.
28 ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) Ön hazırlık fareleri kokainin ödüllendirici etkilerine karşı hassaslaştırır. Farmakol Biyokimya Davranışı 37: 707 – 711.
29 ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK,
3. Schenk S
(1992) Amfetamin ve nikotinin önceden hazırlığı, düşük dozda kokain almak için farelere yatkınlığı sağlar. Psikofarmakoloji (Berl) 107: 271 – 276.
30 ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(1999) Beyin kaynaklı nörotrofik faktörle lokomotor aktivitesinin ve koşullandırılmış ödülün kokaine iyileştirilmesi. J Neurosci 19: 4110 – 4122.
31 ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Çekirdek tarafından kokain arama davranışı üzerinde diferansiyel kontrol, çekirdeği ve kabuğu alır. Nat Neurosci 7: 389 – 397.
32 ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Uyuşturucu bağımlılığında frontostriatal disfonksiyondan kaynaklanan dürtüsellik: ödülle ilgili uyaranlarla davranış kontrolünün etkileri. Psikofarmakoloji (Berl) 146: 373 – 390.
33 ↵
1. Kelley AE
(2004) İştahlı motivasyonun ventral striatal kontrolü: Sindirim davranışındaki rol ve ödülle ilgili öğrenme. Neurosci Biobehav Rev 27: 765 – 776.
34 ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Doğal ödüllerin sinirbilimi: bağımlılık yapan uyuşturucularla ilgisi. J Neurosci 22: 3306 – 3311.
35 ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Fısıltı K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10 Öz DW,
11 Tkatch T,
12 Baranauskas G,
13 Surmeier DJ,
14 Neve RL,
15 Duman RS,
16 Picciotto MR,
17 Nestler EJ
(1999) Beyindeki ΔFosB transkripsiyon faktörünün ifadesi kokaine duyarlılığı kontrol eder. Doğa 401: 272 – 276.
36 ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Amfetamin, transkripsiyon faktörü CREB ile sıçan striatumundaki gen ekspresyonunu düzenler. J Neurosci 14: 5623 – 5634.
37 ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P
(2006) Çekirdek akümelerinde D1 ve D2 dopamin reseptörü içeren besiyeri nöronlarında kokainin neden olduğu dendritik omurga oluşumu. Proc Natl Acad Sci ABD 103: 3399 – 3404.
38 ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) Çekirdek amidleri ve kaudat-putamenlerde orta dikenli nöronlar üzerindeki dendritik dikenlerin yoğunluğundaki inatçı amfetamin ile indüklenen değişikliklerin yeri. Nöropsikofarmakoloji 28: 1082 – 1085.
39 ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) Davranışsal duyarlılığın uyarılması, çekirdeğin Accumbens'in çekirdeğindeki (ancak kabuk değil) kokaine bağlı yapısal plastisite ile ilişkilidir. Eur J Neurosci 20: 1647 – 1654.
40 ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Beyin kaynaklı nörotrofik faktörün ventral tegmental alana tek bir infüzyonu, geri çekildikten sonra uzun süreli kokain güçlenmesi potansiyeline neden olur. J Neurosci 24: 1604 – 1611.
41 ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) CREB ve ΔFosB tarafından gen ekspresyonu ve kokain ödülünün düzenlenmesi. Nat Neurosci 6: 1208 – 1215.
42 ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: Beyinde uzun süreli adaptasyon için moleküler bir anahtar. Beyin Res Mol Beyin Res 132: 146 – 154.
43 ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Sıçanlar tarafından uzun süreli oral kokain tüketimini takiben koşullandırılmış aktivite ve enstrümantal takviye. Behav Neurosci 118: 1331 – 1339.
44 ↵
1. Nestler EJ
(2004) Uyuşturucu bağımlılığının moleküler mekanizmaları. Nörofarmakoloji 47 ([Özel Sayı 1]) 24 – 32.
45 ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Öz DW
(2001) osFosB: bağımlılık için sürekli bir moleküler anahtar. Proc Natl Acad Sci ABD 98: 11042 – 11046.
46 ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) Çekirdek accumbensinde kokain kaynaklı dendritik dikenlerin çoğalması, sikline bağımlı kinaz-5'in aktivitesine bağlıdır. Sinirbilim 116: 19 – 22.
47 ↵
1. Nye HE,
2. BT umut,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) striatum ve çekirdekte kokain tarafından kronik FOS ile ilişkili antijen indüksiyonunun düzenlenmesinin farmakolojik çalışmaları. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671 – 1680.
48 ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Tekrarlanan nikotin maruziyeti sıçandaki ödülle ilgili öğrenmeyi arttırır. Nöropsikofarmakoloji 28: 1264 – 1271.
49 ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Tekrarlanan nikotin maruziyeti, şartlandırılmış takviye ile yanıt vermeyi arttırır. Psikofarmakoloji (Berl) 173: 98 – 104.
50 ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Çekirdek ve kabuğun lezyonlarının etkilerini çekirdeğin ve kabuğun iştah açıcı pavlovian yaklaşım davranışı ve koşullu takviye ve lokomotor aktivitesinin d-amfetamin ile güçlendirilmesi üzerindeki etkisinin ayrılması. J Neurosci 19: 2401 – 2411.
51 ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Kardinal RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10 Everitt BJ
(2002) Nucleus, dopamin tükenmesinin, iştah açıcı Pavlovian yaklaşım davranışının hem edinilmesini hem de performansını bozmasına neden olur: mesoaccumbens dopamin fonksiyonunun etkileri Behav Brain Beyin Res 137: 149 – 163.
52 ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Stereotaksik koordinatlardaki sıçan beyni (Academic, Sydney).
53 ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Kronik stres sonrası ödülle ilgili beyin yapılarında BFosB'nin uyarılması. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
54 ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simon H
(1990) Stres ve farmakolojik olarak indüklenen davranışsal duyarlılık, amfetamin kendi kendine verilişine karşı hassasiyeti arttırır. Beyin Res 514: 22 – 26.
55 ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Nikotin ve kokainin bağımlılık özellikleri için ortak nöral substratlar. Bilim 275: 83 – 86.
56 ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Uyuşturucu bağımlılığı: Kötü alışkanlıklar artar. Doğa 398: 567 – 570.
57 ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) İlaç arzusunun sinirsel temeli: bir teşvik-duyarlılık bağımlılığı teorisi. Beyin Res Beyin Res Rev 18: 247 – 291.
58 ↵
1. Robinson TE,
2. B pistonu
(1999) Çekirdekteki dendritlerin ve dendritik dikenlerin morfolojisindeki değişiklikler, amfetamin veya kokain ile tekrarlanan muameleden sonra akumbens ve prefrontal korteks. Eur J Neurosci 11: 1598 – 1604.
59 ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. B pistonu
(2001) Kokain kendi kendine tatbikatı, çekirdeklerdeki accumbens ve neocortex'teki dendritlerin ve dendritik dikenlerin morfolojisini değiştirir. Synapse 39: 257 – 266.
60 ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) Sıçan medial çekirdeğinde accumbens, hipokampal ve katekolaminerjik terminaller dikenli nöronlar üzerinde birleşir ve birbirlerinin içinde bulunurlar. Beyin Res 527: 266 – 279.
61 ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Fırtına D,
4. Nestler EJ
(2003) Fare beynindeki CRE aracılı transkripsiyonun amfetamin tarafından düzenlenmesi. Synapse 48: 10 – 17.
62 ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) Tanımlanan nöronların sinaptik bağlantılarının çalışılmasıyla ortaya çıkarılan bazal ganglionların sinir ağı. Trendler Neurosci 13: 259 – 265.
63 ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) NMDA ve dopamin D'nin çakışan aktivasyonu1 Çekirdek içindeki accumbens çekirdeğindeki reseptörler, iştah açıcı araçsal öğrenme için gereklidir. J Neurosci 20: 7737 – 7742.
64 ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) İç-katmanlar amfetamin tarafından üretilen koşullandırılmış ödül için verilen cevap, kokain hassaslaştırılmasından sonra kuvvetlendirilir. Psikofarmakoloji (Berl) 142: 31 – 40.
65 ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Psikomotor uyarıcı ilaçların aralıklı olarak tekrarlanması, sıçanlarda pavlovian yaklaşım davranışının kazanılmasını değiştirir: kokain, d-amfetamin ve 3,4-metilendioksimethamphetamin (“Ecstasy”) 'in farklı etkileri 50:
66 ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS,
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) Orta beyin dopamin nöron reaktivitesinin duyarlılaşması, amfetamin arayışını arttırır. J Neurosci 22: 4654 – 4662.
67 ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L.
4. Gilden L,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) osFosB tekerlek çalışmasını düzenler. J Neurosci 22: 8133 – 8138.
68 ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Önceki amfetamine maruz kalmanın teşvik edici duyarlılığı: sakaroz ödülü için artan işaret-tetiklemeli “isteme”. J Neurosci 21: 7831 – 7840.
69 ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Dorsolateral striatum lezyonları sonuç beklentisini korur ancak araçsal öğrenmede alışkanlık oluşumunu bozar. Eur J Neurosci 19: 181 – 189.
70 ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley DE,
4. Teobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10 Dileone RJ,
11 Kumar A,
12 Nestler EJ
(2006) Çekirdekteki BFosB için morfin etkisinde rol oynayan önemli bir rol. Nat Neurosci 9: 205 – 211.
;