Dopamien, Noradrenalien en Verskille in Seksuele Gedrag tussen Romeinse Hoë en Lae Vermyding Manlike Rotte: 'n Mikro-dialise-studie in die Mediale Prefrontale Cortex

Inleiding

Die Romeinse Hoë- (RHA) en Lae-Vermydings (RLA) uitgewasse ratlyne, wat oorspronklik gekies is vir onderskeidelik vinnige en swak verkryging van die aktiewe vermydingsreaksie in die pendeldoos (Bignami, 1965; Broadhurst en Bignami, 1965; Driscoll en Bättig, 1982; Fernández-Teruel et al., 2002; Giorgi et al., 2007) toon beduidende verskille in seksuele aktiwiteit wanneer dit in die teenwoordigheid van 'n seksueel ontvanklike vroulike rot is. Inderdaad, RHA-rotte toon hoër vlakke van seksuele motivering as RLA-rotte, soos onthul deur die hoër aantal nie-kontak-penile ereksies wat deur hierdie rotte getoon word wanneer dit in die teenwoordigheid van 'n ontoeganklike ontvanklike vroulike en beter kopulatoriese optredes as RLA-rotte plaasvind, soos geopenbaar deur die beduidende verskille in talle copulatoriese parameters wat hoofsaaklik in die eerste samestellingstoets tussen die twee ratlyne gevind is, maar ook na vyf kopulatoriese toetse, alhoewel gedemp (Sanna et al., 2014a). Onder die mees uitgesproke verskille wat tussen RHA en RLA-rotte aangetref word, is die persentasie rotte wat begin monteer en intrigerende en wat in die eerste kopulatoriese toets, 80% RHA rotte, teen 40% van RLA rotte onderskeidelik uitsak (Sanna et al., 2014a). 'N Groot aantal eksperimentele bewyse dui daarop dat 'n funksioneel verskillende dopaminerge toon betrokke is in die samestellingsverskille tussen RHA en RLA rotte. Trouens, die verskillende copulatoriese patrone van RHA- en RLA-rotte is anders gewysig deur apomorfien, 'n gemengde D1 / D2 dopamienreseptoragonist wat toegedien word by dosisse wat seksuele gedrag fasiliteer, en deur haloperidol, 'n D2 dopamienreseptor antagonis, toegedien by lae dosisse wat seksuele gedrag inhibeer (Sanna et al., 2014b). Gevolglik is RLA-rotte meer sensitief vir die fasilitering en remming van seksuele gedrag geïnduceerd deur apomorfien en haloperidol onderskeidelik, soos aangetoon deur die groter modifikasies wat deur die twee geneesmiddels veroorsaak word, hoofsaaklik wanneer dit by die laer dosisse in verskillende copulatoriese parameters toegedien word. RLA rotte met betrekking tot RHA rotte (Sanna et al., 2014b). Miskien meer belangrik vir hierdie studie, is die verskillende copulatoriese patrone van RHA- en RLA-rotte ook verwant aan verskille in die aktiwiteit van die mesolimbiese dopaminerge neurone, waarvan die aktiwiteit bekend is om te verhoog tydens seksuele gedrag (Pfaus et al., 1990; Pleim et al., 1990; Pfaus en Phillips, 1991; Damsma et al., 1992; Wenkstern et al., 1993; Balfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010, 2013; Beloate et al., 2016). Ondanks die feit dat seksueel-naïewe en seksueel ervare RHA- en RLA-rotte soortgelyke basale waardes het van ekstrasellulêre dopamien in die dialisaat vanaf die kernblusse, is die konsentrasies van ekstrasellulêre dopamien en 3,4-dihydroksifenylaceticzuur (DOPAC, een van sy hoofmetaboliete ), het bevind dat dit differensieel in dialysate verkry word wat verkry is uit die nukleusakkapselskulp van naïef en seksueel ervare RHA- en RLA-rotte in beide die voorspellende en verbruiksfase van seksuele gedrag. Bogenoemde verskille was meer gemerk tussen seksueel-naïewe RHA- en RLA-rotte, maar het voortgegaan tussen seksueel ervare RHA- en RLA-rotte, hoewel dit in hierdie rotte neig om te verminder, soos gevind met die verskille in seksuele gedrag (Sanna et al., 2015).

Die funksionele rol van die toename in dopaminerge aktiwiteit in die kernkloppers wat tydens seksuele aktiwiteit gesien word (hetsy in die aptyt- en verbruiksfases van seksuele gedrag) is steeds 'n saak van debat sowel as wat gesien word tydens die voeding wat, soos seksuele aktiwiteit, 'n sterk motivering valensie. Dus, alhoewel dopamien in die nucleus accumbens betrokke is by motivering en mesolimbiese dopaminerge neurone, word gewoonlik verwys as belonende neurone. In die laaste 15-jare ondersteun onlangse studies die hipotese dat mesolimbiese dopamien nie betrokke is by die primêre uitdrukking van gemotiveerde of belonende gedrag nie, maar eerder met leer en geheue van stimulus-beloning verenigings (Agmo et al., 1995; Berridge en Robinson, 1998; Ikemoto en Panksepp, 1999; Pitchers et al., 2013, 2014; Beloate et al., 2016; Salamone et al., 2016). In ooreenstemming met hierdie hipotese is die blokkade van dopamienreseptore in die nukleus-accumbens of inaktivering van dopaminerge neurone in die ventrale tegmentale gebied onlangs nie in staat om die uitdrukking van aptyt- en verbruiksaspekte van copulatoriese gedrag by manlike rotte te verander nie (Pitchers et al., 2013, 2014; Beloate et al., 2016).

'N Rol van ander breinareas wat dopamien bevat in die bogenoemde verskille in seksuele gedrag tussen RHA- en RLA-rotte kan egter nie uitgesluit word nie. Gevolglik is dit welbekend dat dopamien fasilitatiewe effekte op die verwagtende en die verbruikende fases van seksuele gedrag in laboratoriumdiere uitoefen en ook in die mens nie net in die nukleusakkapente nie (Everitt, 1990; Pfaus et al., 1990; Hull et al., 1991; Pfaus en Everitt, 1995; Melis en Argiolas, 2011), maar ook in ander breinareas, soos die mediale preoptiese area, die hipotalamus en sy kerne (dws paraventrikulêre kern (PVN); Pfaus en Phillips, 1991; Argiolas en Melis, 1995, 2005, 2013; Hull et al., 1995, 1999; Melis en Argiolas, 1995; Melis et al., 2003; Succu et al., 2007; Pfaus, 2010). Nog 'n gebied wat dopamien bevat en 'n rol kan speel in seksuele gedrag, is die mediale prefrontale korteks (mPFC; Fernández-Guasti et al., 1994; Agmo en Villalpando, 1995; Agmo et al., 1995; Hernández-Gonzáles et al., 1998, 2007; Kakeyama et al., 2003; Balfour et al., 2006; Afonso et al., 2007; Davis et al., 2010; Febo, 2011). Trouens, in hierdie breinarea word die senuwee-eindpunte van die mesokortiese dopamienneurone aangetref, met hul selliggame in die ventrale tegmentale area as mesolimbiese dopamienneurone. Wat die kernkwaliteit betref, is die presiese rol van hierdie breinarea in seksuele gedrag ver van duidelikheid. Inderdaad, letsels van die mPFC word gewoonlik nie in staat om seksuele gedrag van manlike rotte met 'n seksueel ontvanklike vrou te verander nie (Fernández-Guasti et al., 1994; Agmo en Villalpando, 1995; Agmo et al., 1995; Hernández-Gonzáles et al., 1998, 2007; Kakeyama et al., 2003; Balfour et al., 2006; Afonso et al., 2007), of die uitdrukking van gekondisioneerde plekvoorkeur vir seksuele beloning (Davis et al., 2010). Maar mPFC-letsels, wat nie die voorkoms van gekondisioneerde plekvoorkeur vir seksuele beloning verander het nie, het in dieselfde diere afgeskaf die vermoë om gekondisioneerde afkeer van seksuele aktiwiteit te vorm wanneer dit gepaard gaan met aversive stimuli (Davis et al., 2010) en selektiewe selontsteking tydens die benaderende gedrag van 'n manlike rat teenoor 'n ontoeganklike seksueel ontvanklike vrou is in die mPFC van manlike rotte gemeet (Febo, 2011). Hierdie bevindings het daartoe gelei dat mPFC-aktivering tydens seksuele gedrag 'n rol speel in die integrasie van eksterne en interne inligting vir die uitvoering en beheer van doelgerigte gedrag, eerder as in die uitdrukking van aangebore response op natuurlike versterkers (sien Gaan en Grace, 2005). Gevolglik is die mPFC saam met die kernkomponente deel van 'n komplekse neurale sisteem wat betrokke is by die modulering van gemotiveerde gedrag (doelgerigte gedrag), wat die integrasie van kognitiewe inligting van die mPFC vereis, emosionele inligting uit die amygdala en konteks- verwante inligting van die hippocampus, in die nucleus accumbens (Gaan en Grace, 2005).

Eksperimentele bewyse dui daarop dat dopamien-vrystelling in die mPFC betrokke is by die aanpassende regulering van gemotiveerde gedrag, en 'n deregulering van hierdie meganismes word beskou as 'n rol in patologiese of wanadaptiewe toestande, soos psigiatriese versteurings soos skisofrenie, aandagstekort en hiperaktiewe versteurings ( ADHD), depressie (Dunlop en Nemeroff, 2007; Masana et al., 2011), of dwelmmisbruik en dobbelgedrag (Everitt en Robbins, 2005). Interessant genoeg kan die aktiwiteit van dopamien wat in die mPFC vrygestel word, beïnvloed word deur noradrenalien (NA), wat teen hoër vlakke as dopamien teenwoordig is, en veral deur die NA-vervoerder (NET), wat nie net meer volop is as die dopamien transporter (DAT) in die mPFC (Carboni et al., 1990, 2006; Gresch et al., 1995; Westernik et al., 1998), maar toon ook 'n affiniteit vir dopamien wat selfs hoër is as dié vir NA (Horn, 1973). Aangesien dopamien en NA dikwels saamwerk in baie mPFC funksies, vanaf werkgeheue en aandagige vorming en verskuiwing na omkering, reaksie inhibisie en reaksie op stres (sien Robbins en Arnsten, 2009) verhoog dit die moontlikheid dat dopamien, alleen of saam met NA, in die mPFC ook 'n rol kan speel in die gedragsverskille tussen RHA- en RLA-rotte, insluitend dié wat in seksuele gedrag voorkom.

Ten einde hierdie hipotese te toets, is die aktiwiteit van die mesokortiese dopaminerge sisteem en van die noradrenergiese stelsel in die mPFC in die twee RHA- en RLA-ratlyne deur middel van intracerebrale mikrodialise bestudeer. Kortliks is dopamien (en sy hoofmetaboliet DOPAC) en NA gemeet in dialysate verkry uit die prelimbiese (PrL) en infralimbiese (IL) kompartemente van die mPFC van seksueel naïef (bv. Nooit blootgestel aan 'n ontvanklike vrou nie) en seksueel ervare RHA en RLA-rotte (bv. Wat vyf voorlopige samestellingstoetse ondergaan en konstante vlakke van copulatoriese aktiwiteit ondergaan het) wanneer hulle in teenwoordigheid van 'n ontoeganklike ontvanklike vroulike vrou en tydens direkte seksuele interaksie deur middel van hoëdruk vloeistofchromatografie gekoppel aan elektrochemiese opsporing (HPLC-ECD) gebruik word.

Materiaal en metodes

diere

Uitgebore RHA en RLA manlike rotte (N = 30 vir elke lyn, weeg ≈300 g aan die begin van die eksperimentele werk) was almal van die kolonie gestig in 1998 aan die Universiteit van Cagliari, Italië (Giorgi et al., 2007). Die prosedures wat gebruik word vir die selektiewe teling van die Sardynse kolonie is reeds in detail beskryf (Giorgi et al., 2005).

Ovariectomized stimulus SD vroulike rotte (250-300 g aan die begin van die eksperimentele werk) wat in al die eksperimente gebruik is, is verkry van Envigo (San Pietro al Natisone, Italië). Diere is vir die minimum van 38 dae voor die aanvang van die eksperimente by 60 ° C, humiditeit, vier per hok (20 cm × 10 cm × 24 cm) by die Departement van Biomediese Wetenskappe van die Universiteit van Cagliari gekeur. 60%, omgekeer 12 h lig / donker siklus (ligte af van 08: 00 h na 20: 00 h), water en standaard laboratoriumvoedsel ad libitum. Diere word daagliks hanteer vir 1-2-min gedurende die aanwasperiode om manipulasie stres tydens die eksperimente te beperk; Daarbenewens was kontak met die instandhoudingspersoneel van dierehuis beperk tot 'n enkelbediende en beddegoed in die huishokke is nooit die dag voor of op die dag van die eksperimente verander nie. Al die eksperimente is uitgevoer tussen 10: 00 h en 18: 00 h. Hierdie studie is uitgevoer ooreenkomstig die aanbevelings van die riglyne van die Europese Gemeenschappen, die richtlijn van September 22, 2010 (2010 / 63 / EU) en die Italiaanse wetgewing (DL March 4, 2014, n. 26). Die protokol is goedgekeur deur die Etiese Komitee vir Dierproefneming van die Universiteit van Cagliari (Magtiging No. 361 / 2016-PR, April 08, 2016 tot FS).

Eksperimentele groepe

Seksueel-naïewe en seksueel ervare manlike RHA- en RLA-rotte is gebruik. Seksueel-naïewe rotte was rotte wat nooit blootgestel is aan 'n seksueel ontvanklike-ovariectomized en estradiol + progesteroon primed-vrou nie; seksueel ervare rotte was rotte wat reeds vyf opeenvolgende kopuleringstoetse van 60 min met tussenposes van 3 dae ondergaan het met 'n ontvanklike vrou (Sanna et al., 2014a,b). Vroue is in oestrus gebring deur behandeling met subkutane estradiolbenzoaat (200 μg / rat in grondboontjie-olie) en progesteroon (0.5 mg / rat in grondboontjie-olie), 48 h en 6 h voor onderskeidelik die samestellingstoetse. Oestrus is geverifieer deur May-Grunwald-Giemsa kleur en mikroskopiese ondersoek van vaginale smeer 1 h voor die eksperimente. In ooreenstemming met vorige studies (Sanna et al., 2014a,b, 2015) Vyf voorlopige samestellingstoetse is bevind dat dit voldoende is om manlike Romeinse rotte van albei lyne te hê wat konstante vlakke van copulatoriese aktiwiteit toon: bv. seksueel ervare RHA- en RLA-rotte het die kriterium van ten minste een ejakulasie wat in elk van die laaste twee toetse behaal is, bevredig. (een RHA-rat en twee RLA-rotte wat nie aan hierdie maatstaf voldoen het nie, is in hierdie fase weggegooi). Twee dae na hierdie voorlopige kopulatoriese toetse het seksueel ervare Romeinse rotte stereotaksiese chirurgie ondergaan vir die inplantaat van 'n mikrodialise sonde in die mPFC soos hieronder beskryf (Sanna et al., 2015).

Mikro dialise in die mPFC tydens seksuele gedrag

Die dag voor mikrodialise was seksueel-naïewe of ervare RHA- en RLA-rotte in 'n stereotaksiese apparaat (Stoelting Co., Wood Dale, IL, VSA) onder isoflurane-narkose (1.5% -2%; Harvard Apparatus, Holliston, MA, VSA) en ingeplant met 'n vertikale tuisgemaakte mikrodialise sonde (dialise membraan ≈3 mm vrye oppervlak; Melis et al., 2003), en eenmalig gerig op die mPFC, PrL en IL kompartemente (koördinate: 3.0 mm anterior en 0.7 mm laterale tot bregma, en 5.5 mm ventrale tot dura; Paxinos en Watson, 2004). Op die dag van die eksperiment is die diere tydens die donker fase van die siklus na die parkeerhok oorgedra (45 cm × 30 cm × 24 cm), wat in 'n klankdigte kamer geleë was wat verlig is deur 'n dowwe rooi lig en binne in 'n ander klein plexiglaskooi (15 cm × 15 cm × 15 cm) met 25-gate (Ø 2 mm) in die vertikale mure om visuele, olfaktoriese en akoestiese maar nie direkte interaksie toe te laat nie. Na 'n habituation periode van 2 h, was die mikrodialise sonde verbind met 'n CMA / 100 mikroinfusiepomp (Harvard Apparatus, Holliston, MA, VSA) met poliëtileenpype en perfuseer met 'n Ringer se oplossing (147 mM NaCl, 3 mM KCl en 1.2 mM CaCl₂, pH 6.5), teen 'n vloeitempo van 2.5 μl / min. Na 'n ewewigstydperk van 2 h van die perfusiemedium met die ekstrasellulêre vloeistof, is dialysaat-alikotte van 37.5 μL elke 15-min tydens die eksperiment in yskoel-poliëtileenbuisies ingesamel vir die meting van die konsentrasie van dopamien, DOPAC en NA, soos beskryf hieronder. Na die versameling van ten minste vier dialysaat-alikotte, is 'n ontvanklike vroulike rat in die klein hok in die parkeerhok vir 30 min ingevoer. Gedurende hierdie 30-min is ander twee dialysaat-hoeveelhede versamel. In hierdie toestande kan manlike rotte nie direk met die vroulike interaksie reageer nie, maar vertoon geen kontak ereksies (sien onder). Na hierdie tydperk is die klein hok verwyder, copulasie is toegelaat vir 75 min, en ander vyf dialisaat-porties is ingesamel. Aan die einde van hierdie tydperk is die wyfie dan uit die paringshok verwyder en 'n ekstra dialysaat-aliquot is versamel (Pfaus en Everitt, 1995; Melis et al., 2003; Sanna et al., 2015). Seksuele parameters wat verband hou met die verwagte en verbruikende fases van seksuele gedrag, is regdeur die eksperiment aangeteken (sien hieronder).

Seksuele gedrag

Verskeie parameters van seksuele motivering en copulatoriese prestasie wat verband hou met die verwagtende en verbruikende fases van seksuele gedrag, is deur die waarnemer opgeteken deur 'n waarnemer wat nie bewus was van die spesifieke eksperimentele toestande nie, bv. Wie het nie die lyn en die vlak van seksuele ervaring geken nie van die diere wat in daardie eksperiment gebruik is (sien hieronder). Kortliks, die latensie vir die eerste nie-kontak-oprigting (NCPEL, afgetakel van die bekendstelling van die ontvanklike vroulike in die binneste klein hok) en hul frekwensie (NCPEF, die aantal nie-kontak penile ereksies wat voorkom in die tydperk waarin die vrou is teenwoordig in die binneste hok) is aangeteken. Hierdie feromoon-gemedieerde penis ereksies, wat voorkom in seksueel sterk manlike rotte in die teenwoordigheid van 'n ontoeganklike ontvanklike vrou, word beskou as 'n belangrike indeks van seksuele opwinding (Sachs et al., 1994; Sachs, 2000; Melis et al., 2003). Wanneer seksuele interaksie toegelaat word, bv. Tydens samestelling, latensie om te berg en intromitief (ML en IL, afgetrek van die verwydering van die binneste kleintjie tot die eerste berg of eerste intromissie onderskeidelik); frekwensie van montering en intromitting (MF en IF, die aantal mounts en intromissies, respektiewelik, in die eerste reeks copulatoriese aktiwiteit en gedurende die hele samestellingsperiode); latensie tot ejakulasie (EL, gereeld vanaf die eerste intromissie van die eerste reeks tot ejakulasie); Die frekwensie van ejakulasie (EF, die totale aantal ejakulasies tydens die kopulasietoets) en die post-ejakulatoriese interval (PEI, getimuleer vanaf die eerste ejakulasie tot die volgende intromissie), is aangeteken. Verder, copulatoriese effektiwiteit (CE; die aantal intromissies van 'n gegewe reeks gedeel deur die som van die aantal mounts en intromissies in dieselfde reeks) en inter-intromissie interval (III; die verhouding tussen die ejakulasie latensie van 'n gegewe reeks en die aantal intromissies in daardie reeks) is ook bereken vir die eerste reeks copulatoriese aktiwiteit (Sachs en Barfield, 1976; Meisel en Sachs, 1994; Melis et al., 2003; Sanna et al., 2014a,b, 2015).

Bepaling van Dopamien-, DOPAC- en Noradrenalienkonsentrasies in die Dialysaat vanaf die MPFC

Dopamien-, DOPAC- en NA-konsentrasies is gemeet in 20 μL van dieselfde dialisaat-aliquot uit die mPFC deur hoëdrukvloeistofchromatografie (HPLC) gekoppel aan elektrochemiese opsporing met behulp van 'n 4011-dubbele sel (Coulochem II, ESA, Cambridge, MA, VSA) as reeds beskryf (Melis et al., 2003). Deteksie is uitgevoer in reduksie af by + 350 en -180 mV. Die HPLC is toegerus met 'n Supelcosil C18-kolom (7.5 cm × 3.0 mm-ID, 3 μm deeltjiegrootte, Supelco, Supelchem, Milaan, Italië), geëlueer met 0.06 M sitraat / asetaat pH 4.2, wat metanol 20% v / v, 0.1 mM EDTA, 1 μM triëthylamine, en 0.03 mM natriumdodecilsulfaat as 'n mobiele fase, teen 'n vloeitempo van 0.6 ml / min en kamertemperatuur. Die sensitiwiteit van die toets was 0.125 pg vir dopamien, 0.1 pg vir DOPAC en 0.2 pg vir NA.

histologie

Aan die einde van die eksperimente is rotte doodgemaak deur deapapitasie, die brein is dadelik van die skedel verwyder en in 4% waterige formaldehied vir 12-15 dae gedompel. Na hierdie tydperk is 40 μm koronale breinafdelings voorberei met 'n vries mikrotoom, gekleur met Neutraal Rooi en geïnspekteer op 'n fasekontrastmikroskoop. Die posisie van die punt van die sonde is dan in die mPFC gelokaliseer deur die trak van die sonde deur 'n reeks breinafdelings te volg (sien Figuur 1). Slegs rotte het bevind dat die aktiewe deel van die dialysemembraan korrek geposisioneer is in die PrL- en IL-kompartemente van die mPFC, vir die statistiese evaluering van die resultate (een rot van elke eksperimentele groep is in hierdie fase weggegooi).

Statistiek

Statistiese ontledings van biochemiese (dopamien-, DOPAC- en NA) en gedrags- (NCPEL- en NCPEF-, ML-, IL- en EL-, MF-, IF- en EF- en PEI-) data is ook uitgevoer, insluitende alle eksperimentele vakke (soos tradisioneel in studie van manlike rat copulatoriese gedrag) of uitgesluit die vakke wat nie gesakuleer het met ejakulasie tydens die mikrodialise-eksperiment. In die eerste geval, toe alle diere in die ontledings ingesluit was, het diere wat nie NCPE vertoon het binne die tyd wat die wyfie ontoeganklik was nie of nie met die beskikbare vroulike baba geberg of intromit of ejakulasie gehad het nie. die man het nie NCPE in die 1800-min vertoon waarin die vrou ontoeganklik was nie; 30 s vir ML en IL indien die man nie by die beskikbare vroulike berge of intromiet gehad het nie; 900 s vir EL indien die man nie ejakulasie en 1800 s vir PEI bereik het as die man nie na die eerste ejakulasie intromiteer nie. In die tweede geval is die diere wat nie aan ejakulasie kopieer nie, uitgesluit van die ontledings. Dit is gedoen om te bepaal of die verskille in seksuele gedrag korreleer kan word met verskille in ekstrasellulêre dopamien, DOPAC en NA in die mPFC van die Romeinse ratlyne tydens die twee fases van seksuele aktiwiteit wat moontlike verwarrende inmenging uit die weg ruim van die insluiting van vakke wat nie seksuele gedrag toon nie deur hulle vaste waardes toe te ken vir die ontleedde seksuele parameters.

Verskeie statistiese ontledings is uitgevoer met ANOVAs om moontlike verskille tussen die gebruiklike eksperimentele toestande te identifiseer en beter te identifiseer. Voordat ANOVA's uitgevoer word, is datastelle van elk van die verskillende eksperimentele veranderlikes geïnspekteer vir homogeniteit van afwykings onder die vier eksperimentele groepe (gedoen met alle diere of met rotte wat slegs na ejakulasie kopieer) met die Bartlett- of Levine-toets afhangende van die geval. Wanneer beduidende verskille in afwykings gevind is, is datastelle logaritme getransformeer (dws eksperimentele Y-waardes verander na Log Y-waardes), hersien vir homogeniteit van afwykings en dan geanaliseer deur ANOVAs. Kortliks, gedragsparameters behaal voor (bv. Met die ontoeganklike vrou) en tydens die eerste reeks copulatoriese aktiwiteit (van die eerste berg / intromissie na die eerste berg / intromissie na die eerste ejakulasie) van naïef en seksueel ervare manlike RHA- en RLA-rotte tydens mikrodialise is geanaliseer deur twee rigtings ANOVAs, deur die ratlyn en die seksuele ervaringsvlak te gebruik tussen vakkefaktore (die gemiddelde waardes van die gedragsparameters word in Tabel aangegee. 1 en die F waardes en betekenisvlakke van ANOVA ontledings in Tabel 2).

Daarbenewens is 'n algehele analise van die data wat van elke rat verkry is tydens mikrodialise, gedoen deur eers die AUC's te bereken wat verkry is deur die waardes van die konsentrasies dopamien, DOPAC of NA of die aantal niekontak-ereksies, bande, intromissies en ejakulasies te skets. Tyd (begin 1 h na die bekendstelling van die manlike rat in die paringshok tot aan die einde van die eksperiment. -180 min verdeel in breuke van 15 min vir die neurochemiese waardes - of op die tydstip toe die vroulike in die parkeerhok bekendgestel is. vir die gedragsparameters) en dan deur die berekende waardes te vergelyk deur tweerigting-ANOVA's deur die ratlyn en die seksuele ervaringsvlak te gebruik tussen vakkefaktore (gemiddelde waardes van die AUCs van neurochemiese en gedragsparameters word in Tabel aangegee 4 en die F waardes en betekenisvlakke van ANOVA ontledings in Tabel 5). Ten slotte is 'n meer gedetailleerde punt-punt-analise van elke stel data (dws die waardes van die konsentrasies dopamien, DOPAC, NA en die aantal nie-kontak-ereksies, mounts, intromissies en ejakulasies teen tyd) uitgevoer deur faktoriaal ANOVA's vir herhaalde maatstawwe, deur die ratlyn en die vlak van seksuele ervaring tussen vakfaktore en tyd (dws dialysaat breuke) te gebruik, soos binne vakke faktor (die F waardes en betekenisvlakke van hierdie ANOVA-ontledings word in Tabel aangegee 6). Soortgelyke ontledings is uitgevoer met inagneming van slegs basale waardes van neurochemiese parameters (laaste vier dialysaat-alikotte wat versamel is voor die bekendstelling in die paringshok van die ontvanklike vroulike vrou), waarvan die gemiddelde waardes in Tabel gerapporteer word. 3. As eerste, maar nie tweede orde interaksies is gevind wanneer die algemene faktoriale ANOVA's vir herhaalde maatreëls uitgevoer word nie, veral Line × Tyd en Ervaring × Tydinteraksies vir neurochemiese parameters (sien tabel 6), tweerigting-ANOVA's met die lyn of die vlak van seksuele ondervinding tussen vakkefaktor en tyd soos binne vakfaktor, is op hierdie stelle data uitgevoer deur direk seksuele naïewe of ervare RHA versus RLA-rotte te vergelyk, of seksueel ervare vs. naïewe RHA-rotte of seksueel ervare versus naïewe RLA-rotte. Die resultate van die post hoc paar wyse kontraste wat uitgevoer word deur die Tukey se HSD-toets op belangrike interaksies te gebruik wat deur hierdie tweerigting-ANOVA's onthul word, word in Figuur 2. In al die ander gevalle, post hoc Vergelykings is nie aangemeld nie, aangesien ANOVAs nie enige beduidende interaksie tussen die ratlyn, die seksuele ervaringsvlak en die tyd ontbloot het nie. Statistiese ontledings is almal uitgevoer met Grafiek Pad 5 (PRISM, San Diego, CA, VSA) en STATISTICA 12 (Statsoft, Tulsa, OK, VSA) met die betekenisvlak wat ingestel is op P <0.05.

Results

RHA- en RLA-rotte toon 'n verskillende aantal nie-kontak-ereksies en verskillende patrone van copulatoriese gedrag

In lyn met vorige studies (Sanna et al., 2014a,b, 2015), het 'n ander aantal seksueel-naïewe manlike RHA- en RLA-rotte betrokke geraak by seksuele aktiwiteit wanneer hulle saam met 'n ontvanklike vroulike vrou tydens die versameling dialysaat-alikotte van die mPFC by intracerebrale mikrodialise saamgestel is. Kortliks, in hierdie studie, het 10 uit 12 seksueel-naïef-manlike RHA-rotte (83%) in die eerste samestellingstoets geëxploiteer teen slegs 6 uit 12 naïewe RLA-rotte (50%) tydens die mikrodialise-eksperiment. Hierdie verskil is ook gevind in seksueel ervare manlike RHA- en RLA-rotte (na vyf kopulatoriese toetse), alhoewel verswak, met alle 12 RHA-rotte wat ejakulasie teen 9 uit 12 RLA-rotte tydens mikrodialise bereik. Altyd in ooreenstemming met vorige studies, ook in hierdie studie, het die twee Romeinse rottelyne verskillende latensies en frekwensies van nie-kontak-penile ereksies vertoon wanneer hulle blootgestel is aan 'n ontoeganklike ontvanklike vroulike sowel as verskillende patrone van copulatoriese gedrag tydens seksuele interaksie. Hierdie verskille is gevind by die oorweging van die data van alle eksperimentele diere van 'n gegewe groep, ongeag of hulle gesakuleer het tot ejakulasie of nie (bv. Deur volle tellings aan die diere toe te ken wat nie die gedrag getoon het nie, dit is rotte wat nie gekopuleer het nie ejakulasie) of by die oorweging van die data van die diere wat slegs die gedrag van 'n gegewe groep toon (bv. diere wat na die ejakulasie gekopuleer het; Tabel 1). Gevolglik het statistiese ontledings van die waardes van niekontak-ereksies (NCPE) en van die copulatoriese parameters wat in die eerste reeks copulatoriese aktiwiteit gemeet is deur twee-rigting-ANOVA's, betekenisvolle verskille tussen die twee ratlyne onthul, óf by die oorweging van alle eksperimentele rotte of slegs roterende rotte in die vier eksperimentele groepe (sien tabel 2). Trouens, wanneer die data wat van alle eksperimentele diere verkry is, oorweeg is, was die aantal niekontaktie-ereksies hoër en die NCPEL, ML, IL en PEI was aansienlik korter in RHA-rotte in vergelyking met RLA-rotte. Verder was die EF en die CE hoër, terwyl die III aansienlik korter was in RHA-rotte in vergelyking met RLA-rotte. Sommige van die bogenoemde verskille tussen die twee Romeinse ratlyne het geneig om te verminder of te verdwyn met herhaalde kopulatoriese toetse. Nietemin was sommige van hierdie verskille nog steeds teenwoordig nadat seksuele gedrag gestabiliseer is deur herhaalde seksuele ondervinding. Soortgelyke resultate is verkry wanneer slegs die waardes van die diere van die vier eksperimentele groepe wat na ejakulasie gekopuleer is, oorweeg word, behalwe vir die EF (sien Tabelle 1, 2).

Basale konsentrasies van ekstracellulêre dopamien, DOPAC en Noradrenalien in mPFC Dialysate van Seksueel Naïewe en Ervare RHA en RLA Rotte

Onder die huidige eksperimentele toestande was die hoeveelheid dopamien, DOPAC en NA in die dialisate wat verkry is van die mPFC van almal (bv. Ongeag of hulle gesakuleer het tot ejakulasie of nie) seksueel-naïewe RHA- en RLA-rotte, 2.32 pg en 2.11 pg vir dopamien, 322.56 pg en 124.42 pg vir DOPAC en 6.05 pg en 2.24 pg vir NA, onderskeidelik, in 20 μl dialysaat. Soortgelyke hoeveelhede is gemeet in die dialysate wat onderskeidelik verkry is uit die mPFC van onderskeidelik seksueel ervare RHA en RLA rotte (dopamien: 3.73 pg en 3.33 pg, DOPAC: 353.62 pg en 133.32 pg, NA: 7.17 pg en 2.78 pg in RHA en RLA rotte) . Hierdie waardes dui op 'n konsentrasie van χ0.8-1.2 nM en Ũ95-100 nM vir ekstracellulêre dopamien en DOPAC onderskeidelik, en Ũ1.8-2.2 nM vir ekstrasellulêre NA, in die mPFC van RHA rotte, en 'n konsentrasie Ũ0.8-1.2 nM en Ũ35-40 nM vir ekstracellulêre dopamien en DOPAC onderskeidelik, en Ũ0.6-0.9 nM vir ekstrasellulêre NA, in die mPFC van RLA-rotte (Table 3). Bogenoemde waardes is verkry na 'n 2 h ewewigstydperk van die dialise buffer met die mPFC ekstracellulêre vloeistof. As die herstel van outentieke dopamien is DOPAC en NA van die dialise probes naastenby 20%, ekstrasellulêre dopamien, DOPAC en NA-konsentrasies geraam, kan naastenby Ũ4-5 nM in beide lyne vir dopamien, Ũ500 en ≅ 200 nM vir DOPAC en Ũ10 en Ũ4 nM vir NA in die mPFC van RHA en RLA rotte onderskeidelik. Faktoriese ANOVA's vir herhaalde maatreëls wat op bogenoemde waardes gedoen is na logaritmiese transformasie, het beduidende verskille in die basale vlakke van dopamien tussen seksueel-naïewe en seksueel ervare rotte geopenbaar (F_(1,44,132) = 26.05, P <0.001), en in die basale vlakke van DOPAC (F_(1,44,132) = 63.36, P <0.001) en van NA (F_(1,44,132) = 42.14, P <0.001) tussen RHA- en RLA-rotte (laaste vier monsters wat versamel is voordat die wyfie in die klein hok ingebring is). Soortgelyke waardes is gevind as slegs rotte in ag geneem is wat tydens die mikrodialise-eksperiment tot ejakulasie gekopuleer het (tabel 3). Ook in hierdie geval het faktoriale ANOVA's vir herhaalde maatreëls wat op die waardes na logaritmiese transformasie gedoen is, betekenisvolle verskille in die basale vlakke van dopamien tussen seksueel-naïewe en seksueel ervare rotte geopenbaar (F_(1,33,99) = 26.97, P <0.001), en in die basale vlakke van DOPAC (F_(1,33,99) = 42.95, P <0.001) en van NA (F_(1,33,99) = 27.63, P <0.001) tussen RHA- en RLA-rotte.

Die konsentrasies van ekstracellulêre dopamien, DOPAC en Noradrenalien in mPFC Dialysate van Seksueel Naïewe en Ervare RHA en RLA-rotte verander differensiaal tydens seksuele aktiwiteit.

Die teenwoordigheid van ontoeganklike ontvanklike vroulike in die binneste klein hok en daaropvolgende direkte seksuele interaksie het die konsentrasies van ekstrasellulêre dopamien, DOPAC en NA in die mPFC dialysate verkry van beide seksueel naïewe en ervare manlike RHA- en RLA-rotte verhoog, alhoewel met beduidende verskille tussen die twee ratlyne en vlak van ondervindingstoestande, óf wanneer al die eksperimentele diere oorweeg word of slegs dié wat na ejakulasie gekopuleer het (Figuur 2). Trouens, tweerigting-ANOVA's van die AUC's van die konsentrasies dopamien, DOPAC en NA, het getoon dat die algehele inhoud van dopamien, DOPAC en NA van die hele toets, aansienlik hoër was in RHA-rotte in vergelyking met RLA-rotte, en in seksueel ervare in vergelyking met naïewe rotte (sien tabel 4 vir AUC se waardes en Tabel 5 vir F waardes en betekenisvlak). Hierdie verskille is verder bevestig deur puntige ANOVA's te wys vir herhaalde metodes van dopamien-, DOPAC- en NA-hoeveelhede van die twee seksueel-naïewe en ervare ratlyne langs die eksperiment wat belangrike beduidende effekte van lyn, ervaring, tyd en beduidende lyn × tyd en ervaring × Tyd eerste-orde interaksies (sien Tabel 6 vir F waardes en betekenisvlak).

Die konsentrasies van ekstracellulêre dopamien, DOPAC en Noradrenalien in mPFC dialysate verkry vanaf Seksueel Naïewe RHA en RLA rotte verander verskillend tydens seksuele aktiwiteit

By seksueel-naïewe RHA- en RLA-rotte het ekstrasellulêre dopamien, maar nie DOPAC, eers toegeneem wanneer dit in die teenwoordigheid van die ontoeganklike vrou was nie, terwyl NA slegs in RHA-rotte toegeneem het. By naïewe RHA-rotte het ekstracellulêre dopamien verder toegeneem in die eerste 15-min van seksuele interaksie soos aangetref by DOPAC en NA. Die inkremente in ekstrasellulêre dopamien, DOPAC en NA het geduur vir al die samestellingstyd, met dopamien, DOPAC en NA wat 'n piekwaarde bereik by onderskeidelik 60 min, 75 min en 75 min, dan ekstrasellulêre dopamien en in mindere mate DOPAC en NA , verminder na waardes soortgelyk aan die basale na verwydering van die wyfie.

Aan die ander kant, die eerste beduidende toename en piekwaarde, in ekstrasellulêre dopamien, DOPAC en NA, het voorgekom in naïewe RLA-rotte tydens die eerste 15-min van kopulasie. Afwykend van RHA-rotte, in RLA-rotte, het ekstracellulêre dopamien, DOPAC en NA egter geneig om terug te keer na waardes soortgelyk aan die basale binne die eerste 30 min van direkte interaksie met die vroulike (sien figure 2A, C, E).

Laastens was die inkremente in ekstrasellulêre dopamien tydens sampulasie groter en meer aanhoudend by seksueel-naïef-RHA as RLA-rotte (sien Figuur 2A) terwyl hulle in die afwesigheid van die vroulike vrou hul konsentrasies dieselfde was, alhoewel nie identies nie, oor die twee ratlyne (sien hierbo en Tabel 3). Interessant genoeg was daar geen verskil tussen die twee Romeinse lyne in die persentasie toename van DOPAC en, in 'n mindere mate, NA konsentrasies tydens die teenwoordige vrou, 'n verskil van meer as twee vou in absolute waardes van DOPAC en NA konsentrasies is waargeneem tussen die twee ratlyne, beide in basale toestande (sien Tabel 3) en deur die toets met die ontvanklike vrou (sien Fig 2C, E).

Die konsentrasies van ekstracellulêre dopamien, DOPAC en Noradrenalien in mPFC dialysate verkry van Seksueel Ervare RHA en RLA rotte verander verskillend tydens seksuele aktiwiteit

Soos aangetref in seksueel-naïewe RHA- en RLA-rotte, het die teenwoordigheid van die ontoeganklike vroulike en daaropvolgende direkte seksuele interaksie gelei tot 'n toename in ekstracellulêre dopamien en DOPAC in die mPFC dialysaat verkry van seksueel ervare manlike RHA- en RLA-rotte. Maar in hierdie geval is ook ratlynverwante verskille gevind, hetsy wanneer al die eksperimentele diere of, in 'n mindere mate, diegene wat na ejakulasie gekopuleer het, oorweeg het (Figuur 2). By seksueel ervare RHA- en RLA-rotte het die eerste toename in ekstrasellulêre dopamien plaasgevind met die ontoeganklike vroulike. Daarna het dopamien konsentrasies tydens die samestelling in beide ratlyne toegeneem. Dopamien konsentrasies het hul piekwaardes na 45-60 min kopulasie bereik, en stadig afgeneem na basale waardes aan die einde van die kopulatoriese toets (sien Figuur 2B). Net so aan seksueel-naïewe rotte, was ekstracellulêre dopamien konsentrasies hoër in seksueel ervare RHA rotte in vergelyking met RLA rotte hoofsaaklik in die aliquots dialysaat wat gedurende die sentrale deel van die copulasiefase versamel is (na 30-45 min kopulasie). DOPAC konsentrasies het toegeneem tydens die teenwoordigheid van die ontoeganklike wyfie slegs in RHA-rotte, terwyl dit in dieselfde mate in beide ratlyne tydens kopulasie (piekwaardes by 75-90 min) toegeneem het en geneig was om terug te keer na basale waardes aan die einde van die kopulatoriese toets (sien Figuur 2D). NA konsentrasies het ook toegeneem in beide seksueel ervare ratlyne na die bekendstelling van die vroulike bereik piekwaardes by 90 min in RHA rotte en by 45 min in RLA rotte (sien Figuur 2F). Afwykend van dopamien (sien bogenoemde), is die verskil in DOPAC- en NA-konsentrasies by seksueel ervare rotte van albei lyne gevind as alle diere teen diere oorweeg is wat slegs ejakulasie bereik het. Soos aangetoon in seksueel-naïewe rotte, alhoewel die persentasie van DOPAC en NA konsentrasies vergelyk, was daar betekenisvolle verskille in absolute waardes van DOPAC en NA tussen seksueel ervare RHA- en RLA-rotte gedurende die toets (di voor, gedurende en na die teenwoordigheid van die ontvanklike vrou), met RHA-rotte wat hoër waardes as RLA-rotte toon (sien Tabel 3 vir basale waardes en figure 2D, F vir die waardes langs die hele toets).

Seksuele ervaring beïnvloed die veranderinge in dopamien- en noradrenalien konsentrasies in mPFC dialysate verkry vanaf RHA en RLA rotte tydens seksuele aktiwiteit

'N Vergelyking van die konsentrasies van ekstracellulêre dopamien en NA by seksueel-naïewe en ervare RHA- en RLA-rotte het getoon dat seksuele ervaring die konsentrasie van ekstrasellulêre dopamien en, in 'n mindere mate, van NA in beide ratlyne verander het, hetsy al die eksperimentele diere of diegene wat net na die ejakulasie gekopuleer het (Fig 2A, B, E, F). Gevolglik het beduidende verskille in die basale waardes van dopamien tussen seksueel naïewe en ervare rotte van albei lyne plaasgevind (sien tabel 3) en die dopamienwaardes tydens kopulatoriese aktiwiteit was oor die algemeen hoër in seksueel ervare RHA- en RLA-rotte in vergelyking met hul naïef-eweknieë (sien Figuur 2B). Verder, by seksueel ervare RHA-rotte, het die dopamienverhoging tydens die teenwoordigheid van die ontoeganklike vroulike dieselfde temporale patroon in seksueel-naïewe rotte gevolg, terwyl daar tydens die samestelling verskille in die temporale patroon gevind is. Trouens, in hierdie geval, in teenstelling met wat waargeneem word in seksueel-naïewe RHA-rotte (een hoofspits by 60 min), is twee hoofpiekwaardes gevind, die eerste na 15 min en die tweede na 45 min kopulasie. Na hierdie laaste toename het dopamienwaardes geneig om terug te keer na basale waardes (sien Figuur 2B).

'N Soortgelyke prentjie is gevind in seksueel-naïef versus ervare RLA-rotte. Trouens, in vergelyking met wat in RHA-rotte aangetref is, is ook in ervare RLA-rotte 'n temporale patroon gekenmerk deur drie hoofstygings in ekstrasellulêre dopamien gevind: die eerste met die ontoeganklike vroulike en die ander twee tydens kopulasie, dws na 15 min en 60 min copulasie (sien figure 2A, B). Oor die algemeen blyk seksuele ervaring om meer langdurige veranderinge in die temporale patroon van dopamien vrystelling in beide ratlyne te lewer wanneer dit van die seksueel naïef na die ervare toestand oorgaan.

Soos in figure getoon 2C-F, is slegs klein verskille opgespoor in DOPAC en NA konsentrasie tussen naïef en ervare rotte van albei lyne. 'N Onbeduidende tendens in ekstrasellulêre NA teenoor hoër waardes in ervare in vergelyking met naïewe rotte is egter in basale waargeneem (voor die bekendstelling van die ontvanklike vrou, sien tabel 3) en in die totale NA-bedrae, soos aangetoon deur AUC se waardes (sien Tabel 4) bereken op ekstrasellulêre konsentrasies verkry uit die hele toets (voor en tydens die teenwoordigheid van die ontvanklike vrou). Ten slotte was die temporale patroon van NA-konsentrasies baie soortgelyk as vergelyking van ervare rotte van beide ratlyne na hul naïewe eweknieë, wat aandui dat seksuele ondervinding kan lei tot 'n algemene toename in ekstrasellulêre NA eerder as om te verander in die patroon van die toename daarvan (sien figure 2E, F).

Veranderinge in die konsentrasies van ekstracellulêre dopamien en noradrenalien in mPFC dialysate verkry van seksueel naïewe en ervare RHA- en RLA-rotte kom gelyktydig met veranderinge in seksuele gedrag voor.

Die verskille in die konsentrasies van ekstrasellulêre dopamien, DOPAC en NA in die dialisate wat verkry is uit die mPFC, is in beide die seksueel-naïewe en ervare RHA- en RLA-rotte tydens die toets aangetref. (Figuur 2) het plaasgevind tesame met veranderinge in verskillende seksuele parameters wat tydens die twee hooffases van die eksperimente gemeet is (dws wyfie ontoeganklik en beskikbaar vir die mannetjie), wat onder andere ook nie-penile ereksies insluit nie (figure 3A, B), mounts (Fig 3C, D), intromissies (figure 3E, F) en ejakulasies (figure 3G, H). Hierdie verskille is gevind by die oorweging van al die eksperimentele diere of diegene wat slegs na ejakulasie gekopuleer het. Trouens, 'n voorlopige analise van die AUC se waardes van hierdie parameters deur tweerigting-ANOVA's (sien tabel 4 vir AUC se waardes en Tabel 5 vir F waardes en betekenisvlak) gevolg deur 'n punt-tot-punt-analise van die waardes van hierdie parameters langs die eksperiment deur faktoriale ANOVA vir herhaalde maatstawwe, onthul belangrike impak van lyn, ervaring, tyd, beduidende eerste orde lyn × tyd en ervaring × tydinteraksies, en 'n beduidende tweede orde interaksie vir skroewe (sien Tabel 6 vir F waardes en betekenisvlak). Gevolglik, in lyn met vorige studies (Sanna et al., 2015): (i) seksueel-naïewe RHA-rotte het meer nie-kontak penile ereksies, beroertes, intromissies en ejakulasies as hul RLA-eweknieë getoon; (ii) seksueel ervare RHA-rotte het 'n hoër aantal nie-kontak penile ereksies, intromissies en ejakulasies as hul RLA-eweknieë getoon; en (iii) seksueel ervare rotte van albei lyne, en veral RLA-rotte, het meer nie-kontak penile ereksies, intromissies en ejakulasies as hul seksueel-naïewe eweknieë getoon. Trouens, in RHA-rotte het die grootste deel van die veranderinge wat deur seksuele ervaring plaasgevind het, plaasgevind in die tydskursus eerder as in die frekwensie van die gedragsparameters (bv. Ervare rotte het hoofsaaklik in die eerste helfte van die toets gekopieer, terwyl naïewe rotte getoon het 'n soortgelyke copulatoriese tendens dwarsdeur die toets), in RLA-rotte is 'n meer gemerkte algemene verbetering van seksuele gedrag, hoofsaaklik in seksuele prestasie, geproduseer deur seksuele ervaring, soos onthul deur die veranderinge van die waardes van copulatoriese parameters in ervare RLA-rotte in vergelyking met hul naïef eweknieë.

Bespreking

Hierdie studie bevestig en brei die bevindinge van vorige studies uit wat toon dat RHA- en RLA-rotte, wat opvallend verskillende hanteringstyle toon in reaksie op aversive toestande (Driscoll en Bättig, 1982; Giorgi et al., 2003a; Steimer en Driscoll, 2003), toon duidelike gedragspatrone in die teenwoordigheid van 'n ontoeganklike ontvanklike vroulike en tydens klassieke kopulatoriese toetse (Sanna et al., 2014a,b, 2015). Gevolglik toon hierdie studie ook dat seksueel-naïewe RHA-rotte (nooit blootgestel aan 'n ontvanklike vroulike vrou voorheen) hoër seksuele motivering en beter seksuele prestasie uitgestal het in vergelyking met seksueel-naïewe RLA-rotte, bv. RHA-rotte toon hoër aantal nie-kontak-penile ereksies (feromoon- geïnduseerde penile ereksies beskou as 'n indeks van seksuele opwinding; Sachs et al., 1994; Sachs, 2000) en verskillende pro-seksuele veranderinge in verskeie copulatoriese parameters soos gevind in vorige studies (Sanna et al., 2014a,b, 2015). Hierdie verskille het steeds in beide Romeinse ratlyne voortgesit ná die verkryging van seksuele ondervinding, dit wil sê na die stabilisering van seksuele gedrag met vyf eksposisies en kopulasietoetse met 'n ontvanklike vrou. Hierdie studie toon ook vir die eerste keer dat in beide RHA- en RLA-ratlyne, in die naïewe of ervare toestand, nie-penile ereksies en seksuele interaksies plaasgevind het, gelyktydig plaasgevind het tot 'n toename in die konsentrasies van ekstrasellulêre dopamien (en die hoofmetaboliet DOPAC ) en NA in die dialysate verkry deur intracerebrale mikrodialise vanaf die mPFC van beide Romeinse ratlyne. Interessant genoeg blyk dit dat hierdie toenames in ekstrasellulêre dopamien en NA in die mPFC verband hou met verskille, hetsy in die ratfenotipe of in die vlak van seksuele ervaring. Gevolglik het beide seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte, soos breedvoerig getoon, hoër en langdurige toenames in ekstrasellulêre dopamien en NA in vergelyking met hul RLA-eweknieë in beide die aptitiewe en verbruikende fase van seksuele gedrag. Daarbenewens het seksuele ervare rotte van beide Romeinse lyne hoër en langdurige toenames in ekstrasellulêre dopamien en NA in die mPFC in beide fases van seksuele gedrag in vergelyking met hul naïefse eweknieë getoon. Laastens was al die bogenoemde verskille in ekstrasellulêre dopamien en NA in die mPFC blykbaar verband hou met verskille in die gedragsparameters van seksuele gedrag, bv. Seksueel ervare rotte van beide Romeinse lyne het hoër seksuele motivering en beter kopulatoriese vertonings vertoon in vergelyking met hul naïef eweknieë en seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte het hoër seksuele motivering en beter copulatoriese vertonings vertoon in vergelyking met hul seksueel-naïewe en ervare RLA-eweknieë.

Met betrekking tot die toenames in ekstracellulêre dopamien wat in die mPFC dialysaat tydens seksuele aktiwiteit gevind is, het die eerste toename in die eerste 15-min plaasgevind ná die bekendstelling van die seksueel ontvanklike vrou in die paringsapparaat, toe die wyfie ontoeganklik was vir die mannetjie wat gewoonlik toon In hierdie toestand, kontak nie penile ereksies nie. 'N Tweede en groter toename in ekstracellulêre dopamien het gedurende die eerste 15-min plaasgevind nadat die wyfie vir die mannetjie toeganklik gemaak is vir copulasie. Interessant genoeg, terwyl ekstrasellulêre dopamien in die naïeftoestand hoofsaaklik in die eerste deel van die toets met die toeganklike vrou toegeneem het met die neiging om terug te keer na die basale waardes in die tweede deel, het die dopamien in die seksuele ervare toestand verhef deur die toets wat piekwaardes bereik het na 45-60 min copulasie in beide Romeinse ratlyne.

Afgesien van die bogenoemde verskille in ekstrasellulêre dopamien tydens die verskillende fases van seksuele aktiwiteit tussen RHA- en RLA-rotte in die seksueel-naïewe en ervare toestand, toon hierdie studie ook onverwagte belangrike en hoogs betekenisvolle verskille in ekstracellulêre DOPAC-konsentrasie tussen die twee Romeinse ratlyne voor (dws , basale waardes) en na die bekendstelling van die ontvanklike vrou in die paringsapparaat. Gevolglik is basale waardes van ekstrasellulêre DOPAC in die mPFC dialysaat in RHA-rotte aangetref om ongeveer 2.6-vou hoër te wees as dié wat in RLA-rotte voorkom. Hierdie verskil tussen RHA- en RLA-rotte het voorgekom en in die seksueel-naïewe en ervare toestande voortgeduur, ten spyte van baie beskeie verskille in die basale waardes van ekstrasellulêre dopamien in die mPFC dialysate wat in hierdie eksperimentele toestande van die twee Romeinse ratlyne verkry is. Saam met mekaar kan hierdie verskille dui op 'n ander dopamienomset op die vlak van die mPFC tussen die twee Romeinse ratlyne. Gevolglik weerspieël DOPAC konsentrasies gewoonlik die hoeveelheid dopamien vrygestel en dan herwin deur dopaminerge senuweesterminale en omskep na DOPAC deur monoaminooksidase (MAO; Carlsson, 1975). Dus, die hoër basale DOPAC konsentrasies wat in RHA rotte voorkom, dui daarop dat hoër dosisse dopamien vrygestel en herwin word deur dopaminerge senuwee eindes in die mPFC van RHA rotte, bv. 'N hoër basale aktiwiteit van die mesokortiese dopaminerge sisteem van RHA rotte in vergelyking met RLA rotte. 'N Hoër mesokortiese dopaminerge toon in RHA-rotte as in RLA-rotte word ook ondersteun deur die hoër ekstrasellulêre dopamien konsentrasies wat tydens seksuele aktiwiteit in die mPFC dialysaat van beide seksueel-naïewe en ervare RHA rotte aangetref word ten opsigte van dié van hul RLA-eweknieë. In hierdie verband is dit belangrik om te onthou dat 'n hoër dopaminerge stemtoon ten minste gedeeltelik verantwoordelik is vir baie van die verskillende en selfs teenstaande gedragseienskappe wat teenwoordig is in RHA- en RLA-rotte. Gevolglik is RHA-rotte aktiewe copers, hoogs impulsiewe, nuwigheids- en sensasie-soekers en is geneig tot die inname en misbruik van verskeie klasse van verslaafmiddels. RLA-rotte is reaktiewe copers, hiperemotionele en is geneig om depressiewe simptome te ontwikkel (Zeier et al., 1978; Giorgi et al., 1994, 2003b, 2007; Corda et al., 1997, 2014; Escorihuela et al., 1999; Steimer en Driscoll, 2003; Lecca et al., 2004; Gimenez-Llort et al., 2005; Carrasco et al., 2008; Fattore et al., 2009; Moreno et al., 2010; Coppens et al., 2012; Díaz-Morán et al., 2012; Sabariego et al., 2013; Manzo et al., 2014a,b; Oliveras et al., 2015), insluitend die hoër seksuele motivering en beter copulatoriese prestasie van seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte teen RHA-rotte (Sanna et al., 2015). Die hoër toename in die konsentrasies van ekstrasellulêre dopamien wat in die dialysaat van die mPFK van seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte voorkom, lyk op die hoër ekstrasellulêre dopamien konsentrasies wat in die dialisaat gevind word uit die nukleus-accumbens van seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte met betrekking tot hul RLA-eweknieë (Sanna et al., 2015). Afwykend van die mPFC, het die basale vlakke van ekstracellulêre dopamien en DOPAC in die dialysaat van die nukleusakkoule van beide seksueel-naïewe en ervare RHA- en RLA-rotte egter nie beduidend verskil nie (Sanna et al., 2015). Dus kan die hoër mesolimbiese dopaminergiese toon in die nukleus-accumbens van seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte slegs afgelei word deur die hoër ekstrasellulêre dopamien konsentrasies wat in die dialisate gevind word vanaf die nukleus-accumbens van RHA-rotte in vergelyking met RLA-eweknieë in die teenwoordigheid van die ontvanklike wyfie, en nie deur 'n ander basale dopaminerge aktiwiteit wat deur die hoër en laer basale vlakke van DOPAC-konsentrasie in RHA-rotte en RLA-rotte onderskeidelik aangetoon word nie, soos gevind in die mPFC in hierdie studie. Dit is ook in ooreenstemming met die resultate van vroeëre verslae wat toon dat ekstrasellulêre dopamienvlakke in die dialisaat van die mPFC van RHA-rotte hoër as dié van RLA-rotte gevind is, terwyl soortgelyke dopamienvlakke in die dialisaat van die dop van die nucleus accumbens gevind is van beide RHA- en RLA-rotte onder verskillende eksperimentele toestande (D'Angio et al., 1988; Scatton et al., 1988; Willig et al., 1991; Giorgi et al., 2003a, 2007). Ten spyte van die bogenoemde verskille tussen mPFC en die nucleus accumbens, blyk dit dat seksuele ondervinding in die mPFC blywende stygings in die temporale patroon van dopamien vrylating in beide Romeinse ratlyne veroorsaak wanneer dit van die seksueel naïef na die ervare toestand verloop, alhoewel sulke toenames was gewoonlik hoër in RHA-rotte as RLA-rotte. Dit is ietwat anders as wat in die nukleusakkapente gevind is, waar seksuele ondervinding geneig was om ekstrasellulêre dopamien te verhoog na die eerste deel van die kopulatoriese toets in RHA-rotte, terwyl dit gedurende die hele samestellingstoets in RLA-rotte toegeneem het (Sanna et al., 2015).

Volgens ons studie toon hierdie studie ook vir die eerste keer dat nie net ekstrasellulêre dopamien nie, maar ook ekstrasellulêre NA tydens seksuele aktiwiteit in die dialisaat van die mPFC van beide RHA- en RLA-rotte verhoog, soos aangetref by dopamien, maar ook in hierdie geval met verskille wat verband hou met die Romeinse ratlyn en seksuele ondervinding. In die besonder was die basale vlakke van ekstracellulêre NA in die dialysaat van die mPFC van RHA rotte aansienlik hoër (ongeveer 2,5-vou), in teenstelling met basale dopamienvlakke wat baie soortgelyk was in die dialisaat van die mPFC van beide RHA- en RLA-rotte. ) as dié van RLA-rotte. Die redes vir hierdie verskille is onbekend, maar soos hierbo bespreek vir dopamien en DOPAC, kan hierdie resultate aandui dat 'n hoër basale noradrenergiese toon ten minste in die mPFC-korteks van RHA-rotte voorkom in vergelyking met RLA-rotte. So 'n hoër noradrenergiese toon kan ook betrokke wees by die verskillende en dikwels teenoorgestelde gedragstrekke wat teenwoordig is in RHA- en RLA-rotte, soos hierbo bespreek vir dopamien. Verdere ondersteuning vir 'n hoër noradrenergiese toon in RHA-rotte as in RLA-rotte in die mPFC kom uit die resultate wat toon dat die verskille in basale ekstracellulêre NA-vlakke ook tydens seksuele aktiwiteit in beide seksueel-naïewe en ervare toestande voortduur, bv. Ekstracellulêre NA-vlakke het toegeneem in die mPFC dialysateer in RHA-rotte wanneer dit blootgestel word aan die ontoeganklike vroulike en gedurende die hele samestellingsperiode veel meer as in RLA-rotte, waarin NA-vlakke slegs in die eerste 15 min van die samestellingstydperk toegeneem het, waarna NA-vlakke teruggekeer het na basale waardes . Hierdie veranderinge in ekstrasellulêre NA-vlakke is in beide die seksueel-naïewe en ervare toestand gesien, maar die toenames in NA-vlakke was hoër in seksueel ervare RHA- en RLA-rotte in vergelyking met hul seksueel-naïewe eweknieë. So, seksuele ervaring lei skynbaar 'n verdere potensering van die noradrenergiese aktiwiteit in die mPFC van RHA-rotte en, in 'n mindere mate, van RLA-rotte, soos reeds bespreek vir dopamien. Die gepaardgaande hoër noradrenerge en dopaminerge tones in die mPFC van RHA rotte in vergelyking met RLA rotte verdien 'n mate van kommentaar. Trouens, dit is gerapporteer dat noradreneriese aktiwiteit in die mPFC dopamien vrystelling kan beïnvloed deur verskillende meganismes (byvoorbeeld sien Carboni et al., 1990, 2006; Gresch et al., 1995; Westernik et al., 1998 en verwysings daarin). Een hiervan is verwant aan die aktiwiteit van die NET, wat getoon is om dopamien te bind met 'n affiniteit wat selfs hoër is as vir NA in sinaptosome verkry uit homogenate van die PFCHorn, 1973). As dit in die mPFC sou plaasvind in vivo, dopamien vrygestel in die mPFC kan herwin word nie net deur dopaminerge, maar ook deur noradrenergiese senuweesterminale met 'n spoed wat selfs hoër is as dié van NA. Dit kan op sy beurt 'n toename in dopamien vrystelling van dopaminerge terminale veroorsaak (bv. 'N verhoogde dopaminerge toon) om die hoeveelheid dopamien wat uit die sinaptiese kloof verwyder word, te vergoed; Dus, die hoër noradrenergiese toon wat in RHA-rotte voorkom, kan ten minste gedeeltelik bydra tot die hoër dopaminerge toon wat in die mPFC van RHA-rotte aangetref word in vergelyking met RLA-rotte. Verdere studies word vereis om hierdie moontlikheid te verifieer. Die verskil in noradrenergiese aktiwiteit wat in hierdie studie geïdentifiseer is in die mPFC tussen RHA- en RLA-rotte, kan ook 'n rol speel in hul verskillende reaksie op antidepressante behandeling. Trouens, RHA-rotte word beskou as 'n model van veerkragtigheid en RLA-rotte is 'n model van kwesbaarheid vir depressie. Gevolglik het akute of chroniese behandeling met antidepressante soos desipramien, fluoksetien en chlorimipramien al die gedragsreaksies in die gedwonge swemtoets in RLA-rotte aansienlik verbeter sonder om die response van RHA-rotte te beïnvloed (Piras et al., 2010, 2014).

Ten slotte bevestig en brei hierdie studie vorige bevindinge uit wat toon dat die mPFK betrokke is by die beheer van seksuele gedrag, hoewel die breinarea se presiese rol in seksuele gedrag verreweg nie duidelik is nie (Fernández-Guasti et al., 1994; Agmo en Villalpando, 1995; Agmo et al., 1995; Hernández-Gonzáles et al., 1998, 2007; Kakeyama et al., 2003; Balfour et al., 2006; Afonso et al., 2007; Davis et al., 2010; Febo, 2011). Onlangs het selektiewe selontbranding in die mPFC tydens die benaderende gedrag van 'n manlike rat teenoor 'n ontoeganklike seksueel ontvanklike vroulike vrou getoon deur gebruik te maak van 'n enkele-sel-opname-paradigma (Febo, 2011). Interessant genoeg het neurone wat nie tydens die eerste uiteensetting van die mannetjie aan die ontoeganklike ontvanklike vroulike reaksie gereageer het nie, aktief geword tydens die tweede uiteensetting, asof die vorige ervaring in staat was om plastiese veranderinge te veroorsaak wat lei tot variasie in die gedragsreaksies. Nietemin is letsels met ibotiensuur van die mPFC gevind dat dit nie die seksuele gedrag van manlike rotte met 'n seksueel ontvanklike vrou kan verander nie, en ook nie die uitdrukking van gekondisioneerde plekvoorkeur vir seksuele beloning nie. Die vermoë om gekondisioneerde afkeer van seksuele aktiwiteit te vorm wanneer dit gepaard gaan met aversive stimuli, is egter heeltemal afgeskaf in hierdie letsels wat aangetas is (Davis et al., 2010). Dit dui daarop dat mPFC-aktivering tydens seksuele gedrag 'n rol speel in die integrasie van eksterne en interne inligting vir die uitvoering en beheer van doelgerigte gedrag, eerder as in die uitdrukking van aangebore response op natuurlike versterkers (sien Gaan en Grace, 2005). Meer belangrik vir hierdie werk, het verskeie studies getoon dat breinareas wat betrokke is by seksuele motivering en seksuele gedrag, soos die nukleusgebit, ventrale tegmentale area, mediale preoptiese area, bedkern van die stria terminale, basolaterale amygdala en parvocellulêre subparafaskulêre talamienkern, insette ontvang van die mPFC tydens seksuele aktiwiteit (sien Balfour et al., 2006). Baie van hierdie breinareas neem deel aan 'n komplekse neurale kring betrokke by die beheer van seksuele gedrag, van seksuele motivering en beloning vir seksuele prestasie. Hierdie stroombaan sluit in oksitokinergiese neurone wat ontstaan ​​in die PVN van die hipotalamus (PVN) en projek na die ventrale tegmentale area, kernakkoue, hippokampus, amygdala, PFC, bedkern van die stria terminus, medulla oblongata en rugmurg, mesolimbiese / mesokortiese dopaminerge neurone wat uit die ventrale tegmentale area na die nucleus accumbens en PFC, incertohypothalamiese dopaminerge neurone en glutamatergiese neurone produseer wat op verskillende vlakke van die kring deelneem (sien Melis en Argiolas, 1995, 2011; Melis et al., 2003, 2007, 2009, 2010; Succu et al., 2007, 2008, 2011). Dus, die toename van ekstracellulêre dopamien (maar ook van NA) in die dialisate van die mPFC wat tydens seksuele aktiwiteit gesien word, kan aandui dat die mPFC 'n aktiewe deel van hierdie kring is, dit wil sê, mesokortale dopaminerge neurone neem deel aan die beheer van seksuele aktiwiteit met noradrenerge, mesolimbiese dopaminerge, oksitosinergiese en glutamatergiese neurone, hoewel dit nie streng vir die uitdrukking van seksuele gedrag lyk nie (Davis et al., 2010). In ooreenstemming met hierdie hipotese, toon hierdie studie dat die verskille in dopamien- en NA-vrystelling in die mPFC tydens seksuele aktiwiteit gelyktydig met verskille in die aantal nie-kontak penile ereksies en veranderinge in copulatoriese parameters plaasgevind het, met 'n hoër vrystelling van dopamien en NA gedurende die aptyt- en verbruiksfases wat verband hou met hoër seksuele motivering en beter copulatoriese optredes in beide Romeinse ratlyne en in beide die seksueel-naïewe en ervare toestande.

Die bespreking wat hierbo gegee word, is hoofsaaklik gebaseer op die bekende toename in ekstracellulêre dopamien wat voorkom in die nukleusakkapsel van manlike rotte tydens seksuele aktiwiteit (Pfaus et al., 1990; Pleim et al., 1990; Pfaus en Phillips, 1991; Damsma et al., 1992; Wenkstern et al., 1993). Dopamien en ander neurotransmitters kan egter in ander eksperimentele toestande in die mPFC (en in die kernkampusse) vrygestel word, soos tydens stres of omgaan daarmee (Thierry et al., 1976; Fadda et al., 1978), wat nie streng verband hou met seksuele gedrag nie. So kan mens argumenteer dat die dopamienverhoging in ekstrasellulêre dopamien in die mPFC (hierdie studie) of in die kernklemmatuur (Sanna et al., 2015), is meer verwant aan die stres wat sekondêr is of aan die hantering van die teenwoordigheid van en / of interaksie met die seksueel ontvanklike vrou eerder as seksuele aktiwiteit. Dit kan 'n mate van relevansie hê in RHA- en RLA-rotte, wat opvallend verskillende hanteringstyle toon en verskillende hipotalamus-pituïtêre-bynaas-aktivering in reaksie op aversive toestande (RLA-rotte toon 'n aktivering van hierdie as baie hoër as dié van RHA-rotte; Carrasco et al., 2008; Díaz-Morán et al., 2012). Dit verhoog ook die moontlikheid dat streshormone (di kortikosteroïede) ook dopaminerge aktiwiteit in die mPFC en ander breinareas kan beïnvloed. Inderdaad, RLA-rotte is reaktiewe copers en toon hiperemotionele gedrag wat gekenmerk word deur hipomotiliteit en bevriesing, terwyl RHA-rotte proaktiewe coping gedrag toon wat daarop gemik is om beheer oor die stressor te verkry (Driscoll en Bättig, 1982; Willig et al., 1991; Escorihuela et al., 1999; Steimer en Driscoll, 2003; Giorgi et al., 2007). Alhoewel dit onmoontlik is om heeltemal uit te sluit dat dit kan voorkom by seksueel naïewe rotte (wat nooit voorheen met 'n ontvanklike wyfie gekommunikeer het nie) en veral in seksueel naïewe RLA-rotte (sien hierbo), is dit onwaarskynlik. In ons eksperimentele omstandighede word alles moontlik gedoen om alle vorme van spanning te vermy (sien 'Materiaal en metodes') en eksperimente word so georganiseer dat mans nie onmiddellik met die vrou interaksie het nie, maar eers na 30 minute blootstelling aan haar , waartydens die gemete toename in dopamien baie laer is as wat tydens seksuele interaksie plaasvind. As die toename van dopamien in die mPFC (en in die nucleus accumbens) van Romeinse rotte (seksueel naïewe RHA- en RLA-rotte basale vlakke van ekstrasellulêre dopamien in die dialisaat vanaf die mPFC het, en die nucleus accumbens, baie soortgelyk) regtig sekondêr was aan die spanning as gevolg van, of die hantering van die aanwesigheid van / interaksie met die vrou: (i) die toename van dopamien sou baie hoër gevind word in die eerste periode wanneer die mannetjies in die teenwoordigheid van die wyfie geplaas word en nie later nie, soos gevind tydens kopulasie; en (ii) die toename van dopamien sal na verwagting verdwyn of sterk verminder word na die verkryging van 'n stabiele seksuele aktiwiteit, dit wil sê wanneer leerprosesse (insluitend die hantering van nuutheid) voltooi is en slegs 'n klein rol speel in die uitvoering van seksuele aktiwiteit, terwyl dit daarenteen steeds voorkom wanneer seksuele aktiwiteit herhaal word. Met ander woorde, ekstrasellulêre dopamien in die mPFC (en in die nucleus accumbens) neem altyd toe tydens kopulasie, selfs nadat seksuele gedrag aangeleer is. Verdere studies is nodig om die funksionele rol van hierdie toename in dopamienaktiwiteit in die mPFC (en in die nucleus accumbens, duidelik te maak; sien die afdeling "Inleiding en verwysings" daarin).

Ten slotte toon hierdie studie vir die eerste keer dat die teenwoordigheid van en selfs meer die interaksie met 'n seksueel ontvanklike vrou lei tot 'n toename in ekstrasellulêre dopamien en NA in die dialysaat van die mPFC van seksueel naïef (nooit blootgestel aan seksuele stimuli nie ) en seksueel ervare (wat vyf voorlopige samestellingstoetse ondergaan het en stabiele seksuele optredes ondergaan het) RHA- en RLA-rotte, wat opvallend verskillende hanteringstyle toon in reaksie op aversive toestande en verskillende patrone van copulatoriese gedrag met 'n seksueel ontvanklike vrou. Gevolglik is dopamien- en NA-konsentrasies hoër in die dialisaat van seksueel-naïewe en ervare RHA-rotte gevind in vergelyking met hul RLA-eweknieë gedurende beide die aanvanklike en verbruikende fases van seksuele aktiwiteit. Hierdie resultate kan te wyte wees aan 'n dopaminerge en noradrenergiese toon in die mPFC van RHA-rotte hoër as dié van RLA-rotte, soos gerapporteer vir dopamien in die nucleus accumbens (Sanna et al., 2015). Daarbenewens was ekstracellulêre mPFC dopamien en NA ook hoër in seksueel ervare RHA en, in mindere mate, RLA-rotte in vergelyking met hul seksueel-naïef-eweknieë in basale toestande sowel as tydens die aptyt- en verbruiksfases van seksuele gedrag. Dit dui daarop dat seksuele ervaring induksie van plastiese prosesse wat dopamien- en NA-neurotransmissie in die mPFC verder versterk, soos aangetoon vir dopamien in die kernakkapensie van beide Romeinse ratlyne (Sanna et al., 2015). Die bogenoemde verskille in dopaminerge en noradrenerge neurotransmissie in die mPFC van die twee Romeinse lyne kan nie net in die verskillende patrone van seksuele gedrag speel nie, maar ook in die verskillende en dikwels teenoorgestelde gedragseienskappe wat hierdie twee ratlyne kenmerk.

Skrywer Bydraes

FS, AA, MRM, OG en MGC het die projek ontwerp. FS en JB ontwerp, uitgevoer en ontleed die data van seksuele gedrag en mikrodialise eksperimente. MAP, OG en MGC het Romeinse rotte gekies en geteel. FS, AA, MRM, OG en MGC het toesig gehou oor die studie. FS, AA, MRM, OG en MGC het die manuskrip geskryf. Alle skrywers het die uitslae bespreek en die manuskrip geplaas.

Befondsing

Hierdie werk is gedeeltelik ondersteun deur toekennings van die Italiaanse Ministerie van die Universiteit en Navorsing (MIUR) (Wetenskaplike Onafhanklikheid van jong navorsers, SIR 2014, Kode nr. RBSI14IUX7) na FS, uit die outonome streek Sardinië (ARS) (LR 7 / 2007 , "Bevordering van wetenskaplike navorsing en tegnologiese innovasie in Sardinië", Europees Sociaal Fonds, 2007-2013, Projek Kode No. CRP-59842) aan OG, en van die Universiteit van Cagliari tot AA, MRM, FS, OG en MGC.

Konflik van belangstelling

Die skrywers verklaar dat die navorsing gedoen is in die afwesigheid van enige kommersiële of finansiële verhoudings wat as 'n potensiële botsing van belange beskou kan word.

Erkennings

Dr Barbara Tuveri, Universiteit van Cagliari, vir behuising en versorging van diere.

Verwysings