CRF reseptore in die nucleus accumbens moduleer vennoot voorkeur in prairie voles (2007)

Horm Behav. Skrywer manuskrip; beskikbaar in PMC Dec 10, 2007.

Gepubliseer in finale geredigeerde vorm as:

PMCID: PMC2128037

NIHMSID: NIHMS22254

Die uitgewery se finale geredigeerde weergawe van hierdie artikel is beskikbaar by Horm Behav

Sien ander artikels in PMC dat noem die gepubliseerde artikel.

Spring na:

Abstract

Onlangse bewyse dui op 'n rol vir kortikotropien-vrystelling faktor (CRF) in die regulering van koppeling in prairie voles. Ons het voorheen getoon dat monogame en nie-monogame voelspesies dramaties verskillende verspreidings van CRF-reseptortipe 1 (CRF1) en CRF reseptor tipe 2 (CRF2) in die brein, en dat CRF1 en CRF2 reseptor digtheid in die kern accumbens (NAcc) is gekorreleer met sosiale organisasie. Monogame prairie en dennevolumes het aansienlik laer vlakke van CRF-reseptortipe 1 (CRF1), en aansienlik hoër vlakke van tipe 2 (CRF2) bindend, in NAcc as nie-monogame weide en montane voles. Hier rapporteer ons daardie mikroinjecties van CRF direk in die NAcc versnelde vennoot voorkeurvorming in manlike prairie voles. Beheer inspuitings van CSF in NAcc, en CRF in caudate-putamen, het nie die voorkeur van die vennoot geslaag nie. Net so het CRF-inspuitings in NAcc van nie-monogame weide voles ook nie die voorkeur van die vennootskap vergemaklik nie. In prairie voles is hierdie CRF-fasiliterings-effek geblokkeer deur mede-inspuiting van óf CRF1 of CRF2 reseptor antagoniste in NAcc. Immunocytochemiese kleuring vir CRF en Urocortin-1 (Ucn-1), twee endogene ligande vir CRF1 of CRF2 reseptore in die brein, het bevind dat CRF, maar nie Ucn-1, immunoreaktiewe vesels teenwoordig was in NAcc. Dit ondersteun die hipotese dat plaaslike CRF vrystel in NAcc CRF kan aktiveer1 of CRF2 reseptore in die streek. Saam is ons resultate 'n nuwe rol vir akkumulale CRF-stelsels in sosiale gedrag.

sleutelwoorde: nukleus accumbens, aanhangsel, CRF1, CRF2, kortikotropien-vrystelling faktor, kortikotrofien-vrystelling hormoon, vole, neuropeptide reseptore, paar binding, sosiale gedrag, monogamie, spesies verskille

Die corticotropin-releasing factor (CRF) stelsel is betrokke by die neurobiologie onderliggende spanning en angs, maar veel minder is bekend oor sy rol in sosiale gedrag. Mikrotien knaagdiere vertoon diverse sosiale organisasies en bied dus 'n uitstekende vergelykende benadering in die studie van die neurobiologie van sosiale gedrag (Jong en Wang, 2004). Prairie (Microtus ochrogaster) en dennevlerkies (Microtus pinetorum) is monogaam; Volwasse maats vorm langdurige selektiewe paarbande in die veld en die laboratorium (Getz, Carter en Gavish, 1981; Salo, Shapiro, en Dewsbury, 1993). In teenstelling, nou verwante weide (Microtus pennsylvanicus) en montane voles (Microtus montanus) is losbandig en alleenlik (Gruder-Adams en Getz, 1985; Shapiro en Dewsbury, 1990). Verlede navorsing het getoon dat die breinverspreiding van neuropeptide-reseptore vir oksitosien en vasopressien blykbaar verantwoordelik is vir die spesiesverskille in sosiale organisasie (Insel en Shapiro, 1992; Insel, Wang en Ferris, 1994; Lim, Wang, Olazabal, Ren, Terwilliger, en Young, 2004b). Meer onlangse bewyse dui egter daarop dat 'n ander neuropeptiedstelsel, CRF, ook paring in prairie voles voorkom (DeVries, Guptaa, Cardillo, Cho en Carter, 2002).

Daar is relatief min studies wat die rol van streshormone in sosiale gedrag ondersoek. Een studie het bevind dat die toediening van eksogene kortikosteroon tot manlike prairie voles gefasiliteer het vir die vorming van 'n paar bindings met 'n nuwe vrou (DeVries, DeVries, Taymans, en Carter, 1996). 'N Volgende studie het bevind dat CRF intracerebroventricularly (icv) gefasiliteerde vennoot voorkeur in manlike prairie voles toegedien het, selfs by uiters lae dosisse wat nie die lokomotoriese aktiwiteit of angsagtige gedrag beïnvloed het nie (DeVries et al., 2002). Verder is die voorkeure van die vennoot geblokkeer deur die oordrag van alfa-heliese CRF wat nie selektief CRF-reseptore in die brein blokkeer nie (DeVries et al., 2002). Hierdie data dui daarop dat CRF 'n rol kan speel in 'n paar verbandvorming via angs-onafhanklike meganismes deur middel van die betrokkenheid van sentraalwerkende breinreseptore. Dit kan egter met 'n aantal breinstreke met behulp van die ICV-geïnfuseerde CRF optree om die voorkeur van die vennoot te fasiliteer, en dit is tans onbekend watter breinstreke spesifiek betrokke is.

Aangesien die CRF-stelsel geïmpliseer is in die regulering van paarbinding, het ons voorspel dat neurale stroombane vir hierdie stelsel verskil tussen monogame en nie-monogame spesies. Ons het voorheen getoon dat hoewel die verspreidings van CRF mRNA en peptied hoogs bewaar word onder vole spesies, die verdelings van CRF reseptor tipes 1 en 2 (CRF1 en CRF2) wissel dramaties in die brein in vier voëlspesies wat wisselende sosiale organisasies vertoon (Lim, Nair en Young, 2005; Lim, Tsivkovskaia, Bai, Young, en Ryabinin, 2006). Receptor binding blyk te stem met monogame sosiale struktuur in verskeie brein streke; egter, slegs die nukleus accumbens (NAcc) konsekwent geskei met beide monogame vole spesies en beide nie-monogame vole spesies. Monogame prairie en dennevolumes het aansienlik laer vlakke van CRF-reseptortipe 1 (CRF 1), en aansienlik hoër vlakke van tipe 2 (CRF2) bindend, in NAcc as nie-monogame weide en montane voles (Lim et al., 2005).

Gebaseer op ons neuroanatomiese studies wat spesieverskille in CRF toon1 en CRF2 digtheid in NAcc, het ons veronderstel dat CRF-aksie binne NAcc veral belangrik was vir monogame sosiale gedrag in prairie voles. Eerstens het ons vasgestel of CRF direk in NAcc ingespuit kan word om die voorkeursvorming van die vennoot te vergemaklik ná 'n verkorte samelewingstyd by die vennoot. Vervolgens het ons die identiese eksperiment in nie-monogame weide voles uitgevoer. Dan het ons CRF gemanipuleer1 en CRF2 in NAcc met farmakologiese antagoniste om hul relatiewe bydraes tot CRF-gefasiliteerde vennootvoorkeurvorming te bepaal. Laastens, ons toon bewyse vir immunoreaktiewe kleuring van twee endogene ligande vir CRF1 en CRF2 reseptore in die brein, CRF- en Urocortin-1 (Ucn-1), in NAcc in prairie voles. Die resultate van hierdie studies toon vir die eerste keer dat CRF, wat in die NAcc optree, sosiale aanhangsel kan bevorder, en verder dat beide CRF1 en CRF2 reseptore is betrokke by hierdie proses.

METODES

onderwerpe

Diere was volwasse, seksueel-naïewe, manlike en vroulike prairie (70-100-dae van ouderdom) van 'n laboratorium-teelkolonie aan die Florida State University wat oorspronklik afkomstig was van veldopvolgende voles in Illinois, VSA. Volwasse seksueel-naïewe weivelde was van die laboratorium-teelkolonie by Emory Universiteit. Na speen op 21 dae van ouderdom, was vakke gehuisves in dieselfde geslag broers en susters of trio's en water en Purina konyntjies het ad libitum verskaf. Alle hokke is gehandhaaf op 'n 14: 10-lig: donker siklus met die temperatuur by 20 ° C. Data van 87 manlike prairie voles is ingesluit in die CRF farmakologie eksperimente, tesame met gelyke getalle stimulus vroulike prairie voles vir die pair binding assay. Data van 10 manlike weivelde is ook gebruik, tesame met die gelyke aantal stimulus-vroulike weivelde. Agt prairie voles is gebruik in die CRF immuno-cytochemistry studies (n = 4 vir elke seks).

CRF fasilitering van vennoot voorkeur

Volwasse manlike prairie voles (n = 31) is bilateraal in NAcc kan ingeënt met behulp van stereotaksiese metodes soos voorheen beskryf (Aragona, Liu, Curtis, Stephan en Wang, 2003a; Liu en Wang, 2003). Onderwerpe was narkose met natriumpentobarbital (2.5 mg per 40 gm liggaamsgewig), en 26-gauge bilaterale geleiderkanyle (Plastics One, Roanoke, VA) gerig op die NAcc is stereotaksies geïmplanteer (Anterior 1.7 mm, Bilaterale ± 1 mm, Ventral-4.0 mm na bregma). Beheer inspuitings (n = 6) was gemik op die caudate-putamen (Anterior 1.7 mm, Bilaterale ± 1 mm, Ventral -2.5 mm tot bregma). Na die herstel van 3-5 dae het vakke mikroinjecties (200 nl per kant) van óf kunsmatige CSF of geneesmiddel opgelos in CSF ontvang. Inspuitings is gemaak met 'n 33-gauge-naald wat 1 mm onder die geleidingskanaal in die teikenarea uitgebrei het. Die naald was gekoppel aan 'n Hamilton-spuit (Hamilton, Reno, NV) via poliëtileen-20-buise, waardeur die oplossing stadig deur 'n pomp (MasterFlex L / S-standaardrit, Model 7016-21) met 'n spoed van 200 nl / min, per kant. Menslike / rot CRF is verkry uit Sigma (St. Louis, MO).

Diere is in een van vier groepe verdeel: CSF beheer (n = 7), 0.01 pg CRF in NAcc (n = 9), 0.1 pg CRF in NAcc (n = 15) en 0.1 pg CRF in caudate putamen (n = 6). Die caudate-putamen (CP) is 'n brein streek net dorsaal na die NAcc en bevat ook CRF2 reseptore, dus dien as 'n anatomiese beheer streek vir CRF effekte. Elke dier het bilaterale inspuitings van 200 nl volume ontvang voor 'n verkorte 6-uur saamwoon met 'n nuwe vrou. Die konsentrasie van 0.01 pg CRF in 200 nL is 10 nM, terwyl die konsentrasie van 0.1 pg CRF in 200 nL 100 nM is. Die berekende Ki vir CRF1 is 11 nM, terwyl die berekende Ki vir CRF2 is 25 nM relatief tot 125I-sauvagine (Primus, Yevich, Baltazar, en Gallager, 1997). Samevatting vir 6 ure sonder konsekwente paring veroorsaak nie vennoot voorkeur nie, soos aangetoon in vorige studies (Aragona et al., 2003a; Aragona, Liu, Yu, Curtis, Detwiler, Insel en Wang, 2006). Onmiddellik na samevatting, is vakke getoets vir vennoot voorkeur.

Vennoot voorkeur toetse het bestaan ​​uit die manlike in 'n 3-kamerapparaat te plaas waarin die vroulike vennoot in een hok vasgebind is, en 'n nuwe vroulike ("vreemdeling") van dieselfde ouderdom en sosio-seksuele ervaring is in 'n tweede hok vasgemaak soos voorheen beskryf (Carter, DeVries, en Getz, 1995). Elke stimulusvrou is in twee afsonderlike vennoot voorkeur toetse gebruik, een keer as die vennoot en weer as 'n ander vak se vreemdeling en daarom het elke vrou gelyke sosiale en seksuele blootstelling tydens die 20-uur se samelewing gehad. Vakke is toegelaat om vrylik dwarsdeur die apparaat te beweeg, en die tyd wat in kontak met die maat en vreemdeling spandeer is, is in die loop van die 3-uur toets gekwantifiseer.

Lokomotoriese aktiwiteit is tydens die vennoot voorkeurtoets gemeet om te bepaal of gekose dosisse CRF-behandeling algemene lokomotoriese aktiwiteit of angsagtige gedrag beïnvloed het, soos voorheen beskryf (Hotta, Shibasaki, Arai, en Demura, 1999). Die aantal kuiskruisings deur beide tonnels van die vennoot voorkeur apparaat is beoordeel deur gebruik te maak van infrarooi detectoren. Daar is vier infrarooi balke oor die drie hokke van die vennoot voorkeur apparaat, met twee balke wat elke tonnel flank wat twee hokke verbind. Die totale aantal foto-breekbrekings is gedurende die drie-uur-tydperk vir elke dier bereken. Na gedrags toetsing is vakke geoffer en inspuitingsterreine is histologies geverifieer.

Volwasse manlike weivelde (n = 10) is ook getoets vir CRF-fasilitering van vennoot voorkeur. Diere is bilateraal gekanuleer in NAcc soos hierbo beskryf en is ewekansig toegeken aan een van twee groepe: CSF control (n = 4), of CRF 0.1 pg (n = 6). Samevatting en vennoot voorkeur toetse is uitgevoer presies soos hierbo beskryf vir prairie voles. Volwasse manlike weivelde uit ons kolonie vorm tipies nie vennootvoorkeure wanneer hulle saam met 'n vrou is nie (Lim et al., 2004b).

CRF1- en CRF2-selektiewe farmakologie en vennoot voorkeur

Volwasse prairie voles is bilateraal gekanuleer in NAcc soos hierbo beskryf en verdeel in een van drie groepe: 0.1 pg CRF (n = 10), 0.1 pg CRF plus 10 pg CRF1 antagonis (CP-154,526) (n = 25), en 0.1 pg CRF plus 10 pg CRF2 antagonist (anti-sauvagine-30) (n = 15). Anti-sauvagine-30 is verkry uit Sigma (St. Louis, MO), en die CP-154,526 van Michael Owens, Ph.D. (Emory Universiteit, Atlanta, GA). Die konsentrasie van 10 pg CRF1 antagonis (CP-154,526) in 200 nL-oplossing is 100 nM, terwyl die konsentrasie van 10 pg CRF2 antagonist (anti-sauvagine-30) in 200 nL-oplossing is 10 nM. Elke dier het bilaterale inspuitings van 200 nl volume direk in NAcc ontvang voor 'n verkorte 6-uur saamwoon met 'n nuwe vrou. Onmiddellik na samevatting, is vakke getoets vir vennoot voorkeur soos hierbo beskryf. Na gedrags toetsing is vakke geoffer en inspuitingsterreine is histologies geverifieer. Diere wie se kanuleringsplekke buite die NAcc geplaas is, is uitgesluit van data-ontleding en word nie weerspieël in die totale aantal diere wat gebruik word nie.

Data-analise

Data uit die vennoot voorkeur toets vir elke eksperiment is geanaliseer met behulp van 'n 2 manier ANOVA in watter stimulus (vennoot of vreemdeling) en behandeling faktore was. Daarbenewens is studente se t-toetse gebruik om tyd in kontak met die vennoot en vreemdeling binne elke behandelingsgroep te vergelyk. Bonferroni-korreksies vir die vlak van betekenis is vir elke eksperiment gemaak ten einde die risiko van tipe I-foutrisiko te verminder as gevolg van veelvuldige vergelykings. Mans is gekategoriseer as 'n vennoot voorkeur geskep het as hulle meer as twee keer soveel tyd in kontak met die vennoot as die vreemdeling spandeer.

Data wat vir lokomotoriese aktiwiteit ingesamel is, is bereken as die aantal infrarooi bundels vir elke dier breek, en gemiddeld binne elke behandelingsgroep. Die resultate is geanaliseer met behulp van 'n eenrigting ANOVA met behandeling as die onafhanklike faktor.

CRF en Urocortin-1 Immunohistochemistry

Volwasse prairie voles was diep narkose tussen die ure van 10: 00 en 14: 00 met isofluraan en perfuseer met soutoplossing gevolg deur 2% paraformaldehied in 10 mM (pH 7.4) fosfaatgebufferde sout (PBS). Dissected brain is oornag in die 2% paraformaldehyde / PBS oplossing vasgelê en in 30% sucrose / PBS beskerm. Dertig μm dik vry-drywende koronale afdelings is gesny op 'n cryostat en verwerk vir immunohistochemie volgens standaard protokolle (Ryabinin, Criado, Henriksen, Bloom, en Wilson, 1997; Weitemier, Tsivkovskaia, en Ryabinin, 2005) met aanpassings vir vole weefsel gemaak in vorige eksperimente (Lim et al., 2006). Kortliks, endogene peroksidase-aktiwiteit is geblus deur 15-minuut inkubasie met 0.3% waterstofperoksied. Vir die Urocortin-1-spesifieke teenliggaam is blokkering uitgevoer met 'n vyf uur inkubasie met 2% Bovine Serum Albumin, 0.1% heparien, 0.01% Triton X-100 in PBS. Vir die CRF-spesifieke teenliggaampie is blokkering uitgevoer deur 'n vyf uur inkubasie met 4.5% boksserum, 0.3% Triton X-100 in PBS. Die primêre konyn teenliggaampies wat Urocortin-1 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) herken, is in verdunning 1: 5,000 gebruik. Die primêre teenliggaampies wat CRF erken het (Peninsula Laboratories, San Carlos, CA) is in verdunning 1: 15,000 gebruik. Biotinyleerde anti-konyn sekondêre teenliggaampies (Vector Laboratory Inc., Burlingame, CA) is gebruik om die primêre teenliggame op te spoor. Deteksie van die sekondêre teenliggaampies is gemaak met behulp van Vectastain ABC kit (Vector), en ensimatiese ontwikkeling is gedoen met die Meta Enhanced DAB kit (Pierce, Rockford, IL, VSA). Die spesifisiteit van immunostaining is beoordeel deur 'n volledige gebrek aan immunoreaktiwiteit in gebiede wat nie bekend is om CRF of Urocortin-1 uit te druk nie. Verder is voorafsorptie eksperimente vir hierdie teenliggaampies voorheen uitgevoer (Bachtell, Weitemier, Galvan-Rosas, Tsivkovskaia, Risinger, Phillips, Grahame, en Ryabinin, 2003).

Kwalitatiewe beeldontleding is uitgevoer met behulp van 'n stelsel wat bestaan ​​uit 'n Olympus BX40-mikroskoop en 'n hoë resolusie digitale videocamera (Olympus Qcolor3) gekoppel aan 'n Macintosh-persoonlike rekenaar wat OS-X bedryf. Beelde uit 'n enkele gedeelte wat die beste vir elke brein streek pas, is digitaal versamel teen dieselfde beligtingsintensiteit. Aangesien geen immunopositiewe kleuring in selliggame in NAcc waargeneem is nie, is die aantal immunoreaktiewe neurone nie kwantitatief getel nie.

RESULTATE

Farmakologiese manipulasie van CRF reseptore in NAcc

Daar is voorheen gedemonstreer dat die infusie van CRF icv maklike voorkeur in prairie voles bevorder (DeVries et al., 2002). Gebaseer op ons neuroanatomiese data wat spesieverskille in CRF demonstreer1 en CRF2 in NAcc het ons vermoed dat die NAcc die aksiepunt was vir die CRF-fasilitering van vennoot voorkeur. Die vroeëre studie het getoon dat dosis-afhanklike ICV-administrasie van CRF vennote se voorkeure in manlike prairie voles kan fasiliteer na 'n verkorte samelewing met 'n vroulike (DeVries et al., 2002). Gebaseer op hierdie studie, het ons CRF-dosisse ontwerp vir terreinspesifieke inspuitings in NAcc. Die dosisse wat ons gebruik het, 0.1 pg en 0.01 pg CRF opgelos in 200 nL isotoniese oplossing (respektiewelik 100 nM en 10 nM) was goed onder die minimum effektiewe ICV dosisse van 0.1 ng en 1 ng CRF opgelos in 1 μL (of 210 nM en 2.1 μM onderskeidelik) (DeVries et al., 2002). Alhoewel CRF getoon is om voorkeur te gee aan CRF1, dit bind ook aan CRF2 met aansienlike affiniteit (Ki gelyk aan 11 en 25, onderskeidelik) (Primus et al., 1997).

Analise van die algehele datastel met behulp van 'n 2-rigting ANOVA het 'n beduidende hoofeffek van stimulusdier getoon (F (1,66) = 6.77, p <0.05), maar geen ander belangrikste effekte of interaksies is opgespoor nie. Om vas te stel watter groepe verkieslik tyd in kontak met die vennote oor vreemdelinge deurgebring het, is Student se t-toetse uitgevoer met Bonferroni-regstellings van die p-waarde. Beheer prairie voles met bilaterale inspuitings van kunsmatige CSF in die NAcc septumpaal, of 0.1 pg CRF in die caudate-putamen, het nie beduidend meer tyd in kontak met die maat spandeer as die vreemde stimulusdier nie (p> 0.3, Student se t-toets , Bonferroni-vlak ingestel op p <0.01) (Figuur 1A). Prairievolke wat met die onderste CRF-dosis, 0.01 pg, ingespuit is, het geneig om meer tyd in kontak met die maat te spandeer as die vreemdeling (p> 0.08, Student se t-toets, Bonferroni-vlak ingestel op p <0.01). Daarenteen het prêrie-voles wat bilaterale inspuitings van die 10-voudige hoër CRF-dosis, 0.1 pg in die NAcc-septumpaal, ontvang, aansienlik meer tyd spandeer in kontak met die maat as die vreemdeling (p <0.01, Student se t-toets, Bonferroni-vlak gestel by p <0.01) (Figuur 1A). Verder, terwyl slegs 6 van die 13-beheermiddels 'n vennootvoorkeur vertoon het, gedefinieer as twee keer soveel tyd in kontak met die vennoot in vergelyking met die vreemdeling, het 12 van die 15-diere wat 0.1 pg CRF ontvang het, 'n vennoot voorkeur vertoon (Figuur 1B). Die 3-diere wat nie 'n vennoot voorkeur gehad het nie, het sterk vreemdeling voorkeure, wat waarskynlik bygedra het tot die gebrek aan 'n hoof effek van behandeling of 'n interaksie effek op die 2-manier ANOVA. Dus, terwyl CRF-infusies in die NAcc die tyd in kontak met die vennoot relatief tot die vreemdeling aansienlik verhoog het, het dit nie 'n algehele toename in kontaktyd met die vennoot tot gevolg gehad nie.

Figuur 1 

Bilaterale mikroinjecties van CRF na NAcc vergemaklik vennoot voorkeur in manlike prairie voles. (A) Beheerdiere wat kunsmatige CSF in die NAcc, of 0.1 pg CRF in die caudate-putamen (CP) ontvang het, het die vennoot nie beduidend verkies nie. ...

As gevolg van dramatiese spesieverskille in CRF1 en CRF2 digthede in NAcc, het ons veronderstel dat CRF-optrede binne NAcc slegs die vorming van vennote se voorkeur in prairie-volke sou vergemaklik, en nie in nie-monogame grasvlaktes nie. Inderdaad, weivolke wat met CSF ingespuit is, of die hoë dosis 0.1 pg CRF, het nie veel meer tyd in kontak met die maat spandeer as die vreemdeling nie (p> 0.5, Student se t-toets) (Figuur 2).

Figuur 2 

Bilaterale mikro-inspuitings van CRF in NAcc versuim om vennoot voorkeur in nie-monogame manlike weide voles te fasiliteer. Volwasse weivelde wat met kunsmatige CSF, of 0.1 pg CRF in NAcc geïnspireer is, het nie meer tyd in kontak met die vennoot spandeer as ...

Gebaseer op die spesies verskille in CRF1 en CRF2 verspreiding in NAcc, het ons veronderstel dat beide CRF1 en CRF2 die gedrag van maat van voorkeure sou moduleer, miskien in teenoorgestelde rigtings. Analise van die algehele datastel met behulp van 'n 2-rigting ANOVA het 'n beduidende hoofeffek van stimulusdier getoon (F (1,94) = 7.52, p <0.05), maar geen ander hoofeffekte of interaksies is opgespoor nie. Prairievlakke ingespuit met 'n skemerkelkie van 0.1 pg CRF, plus 10 pg selektiewe CRF2 antagonis anti-sauvagine-30, het nie veel meer tyd saam met die maat of die vreemdeling deurgebring nie (p> 0.3, Student se t-toets, Bonferroni-vlak ingestel op p <0.016) (Figuur 3A). Interessant genoeg is prairie voles ingespuit met 'n cocktail van 0.1 pg CRF, plus 10 pg selektiewe CRF1 antagonis CP-154,526-1, het ook 'n blokkade getoon van die voorkeur van vennote (p> 0.5, Student se t-toets, Bonferroni-vlak ingestel op p <0.016) (Figuur 3A). Kontrole-prairievolke wat met 0.1 pg CRF in die NAcc ingespuit is, is gelyktydig getoets en daar is gevind dat dit die oorspronklike resultate van die fasilitering van maatvoorkeur herhaal (p <0.01, Student se t-toets, Bonferroni-vlak ingestel op p <0.016) (Figuur 3A). Daarbenewens, terwyl 8 uit die 10 CRF-behandelde prairie voles vertoon 'n vennoot voorkeur, slegs 11 van die 25 diere ontvang CRF1 antagonis en 6 uit 15 diere wat CRF ontvang2 antagonis, het 'n vennoot voorkeur gewys (Figuur 3B). Ons resultate dui daarop dat die aktivering van beide CRF1 en CRF2 reseptore in NAcc is nodig vir CRF-geïnduseerde fasilitering van vennoot voorkeur in prairie voles.

Figuur 3 

Beide CRF1 en CRF2 reseptore in die NAcc is nodig vir CRF-gefasiliteerde vorming van vennootvoorkeure in prairie-volke. (A) Diere wat met 0.1 pg CRF in NAcc ingespuit is, het meer tyd in kontak met die maat deurgebring as die vreemdeling (p <0.01, Student se ...

Lokomotoriese aktiwiteit het nie beduidend verskil tussen behandelingsgroepe nie (F (1,80) = 1.37, p> 0.05, eenrigting-ANOVA), alhoewel lokomotoriese aktiwiteit geneig was om laer te wees by die diere wat CRF in die NAcc ontvang het. Resultate word getoon in Tabel 1. 'N Verteenwoordigende histologie afdeling wat die kannuleringswerf vir die NAcc toon, word aangetoon in Figuur 4.

Figuur 4 

Histologiese verifikasie van kanulaplacement. (a) Reseptor autoradiogram aan die linkerkantste helfte toon die ligging van CRF2 in prairie vole nach. (b) Verteenwoordigende fotomikrograaf van Nissl-gekleurde breinafdeling wat canuleplasing uitwys wat binne ...
Tabel 1 

Bewegingsaktiwiteit verteenwoordig deur die totale aantal infrarooi straalbreuke of hokkruisings, gemiddeld binne elke behandelingsgroep. Daar is geen beduidende verskille tussen behandelingsgroepe nie (F = 1.37, p> 0.05, eenrigting-ANOVA).

CRF- en Ucn-1 immunoreaktiwiteit in NAcc

Om fotomikrograwe te toon waarvan endogene CRF reseptor ligande teenwoordig is in NAcc, het ons immunoreaktiwiteit van CRF- en Urocortin-1 (Ucn-1) in volwasse prairie voles uitgevoer. Verteenwoordigende breinafdelings verwerk vir CRF immuno-cytochemie word getoon in Figuur 5. CRF-immunoreaktiewe vesels is gesien in NAcc in beide geslagte sonder voor die hand liggende verskille in verspreiding of digtheid van vesels (Figuur 5b). Ucn-1-vesels is nie in NAcc opgespoor in manlike of vroulike prairie voles nie (Figuur 5c). Dit is dus moontlik dat CRF een van die endogene ligande is wat CRF fisiologies kan bind1 en CRF2 reseptore in die vole NAcc om die voorkeur van die vennoot te fasiliteer. Van die nota, CRF is getoon om te bind tot beide CRF1 en CRF2, met ongeveer twee- tot tien-voudige affiniteit hoër affiniteit vir CRF1 (Primus et al., 1997). Ons kan egter nie die moontlikheid uitsluit dat ander endogene ligande soos Urocortin-2 of Urocortin-3 ook kan bydra tot die neurale beheer van paarbindingvorming nie.

Figuur 5 

CRF en Ucn-1 immunoreaktiwiteit in prairie voles. (a) Ratatlas skematiese toon die area van 10x vergroting van NAcc (sien reghoek) (Paxinos en Watson, 1998). (b) Prairie vole afdeling wat CRF immunoreaktiewe vesels in NAcc (sien pyle) toon. (c) Prairie ...

BESPREKING

In die vorige studies het ons spesiesverskille in akkumulale CRF geïdentifiseer1- en CRF2 uitdrukking wat verband hou met sosiale organisasie oor vier vole spesies. Monogame prairie en dennevlokkies het hoër vlakke van CRF gehad2 in NAcc, en laer vlakke van CRF1 in NAcc, in vergelyking met nie-monogame weide en bergagtige voëlspesies (Lim et al., 2005). Op grond van hierdie data het ons vermoed dat CRF-aksie binne NAcc krities was vir monogame sosiale gedrag in prairie voles. In die huidige studie wys ons vir die eerste keer dat mikro-inspuitings van CRF direk in NAcc in werklikheid maklike voorkeur vir mans in prairie voles bevorder. Twee-rigting ANOVA-analise het 'n hoof-effek van stimulusdier bespeur, dws algehele meer tyd is in kontak met die maat as die vreemdeling bestee, maar geen hoof-effek van behandeling of interaksie is opgespoor nie. Sterk vreemdeling voorkeure in 3 diere van die 0.1 pg CRF NAcc groep het die variansie opgeblaas, wat die opsporing van 'n interaksie-effek voorkom. Afsonderlike vergelykings van tyd wat spandeer is met vennootverse, vreemdeling, het egter beduidende voorkeure vir die vennoot in die 0.1 pg CRF NAcc-groep geopenbaar. Hierdie effek is herhaal in die antagonist studie, wat bevestig die robuustheid van die effek. Hierdie verskuiwing in vennootvoorkeure is nie geassosieer met 'n statisties beduidende toename in tyd spandeer met die vennoot of 'n afname in die tyd wat met vreemdeling spandeer is nie, maar eerder as gevolg van 'n algehele verhoogde voorkeur vir die vennoot in verhouding tot die vreemdeling. In teenstelling hiermee, CRF het geen effek op vennoot voorkeur in nie-monogame weide voles. Daarbenewens wys ons dat hierdie fasiliterings effek gemoduleer word deur aksie van CRF by beide CRF1 en CRF2 reseptore. Laastens, ons toon fotomikrografiese bewyse dat CRF-immunoreaktiewe vesels teenwoordig is binne die prairie vole NAcc, wat aandui dat CRF een van die endogene ligande kan wees wat op CRF reageer.1 en CRF2 reseptore in NAcc tydens vennoot voorkeur voorkeurvorming. Saam met hierdie data, toon hierdie data 'n nuwe rol vir CRF-stelsels wat binne NAcc in sosiale gedrag optree.

Ons data wat aantoon dat CRF in NAcc fasiliteer vennoot voorkeur verkies ons aanvanklike hipotese dat accumbal CRF stelsels betrokke is in die vorming van 'n paar binding in prairie voles. Ons het verder bevind dat CRF2 Reseptore, in die besonder, was krities gegewe die oorvloed van CRF2 reseptore in die twee monogame voelspesies, maar nie die twee nie-monogame voelspesies (Lim et al., 2005). Die resultate van die weide-eksperiment ondersteun hierdie hipotese, want CRF-infusie het geen effek op vennoot voorkeur in 'n spesie wat effektief CRF mis2 reseptore in NAcc. Daarbenewens het ons gevind dat mede-administrasie van 'n CRF2-selektiewe antagonis blokke vennoot voorkeur in prairie voles. Hierdie data toon 'n potensieel kritieke rol vir CRF2 reseptore in koppeling van paar bindings.

Ons het egter ook gevind dat mede-administrasie van 'n CRF1-selektiewe antagonist geblokkeerde vennoot voorkeur in prairie voles. Hierdie resultaat was meer verbasend, gegewe dat CRF1 reseptore word uitgedruk in NAcc in beide nie-monogame en monogame spesies. Saam met hierdie data word die belangrikheid van beide reseptor subtipes vir die uitdrukking van vennoot voorkeur, en wys op die moontlikheid dat reseptor spesifisiteit 'n komplekse probleem is wat kan baat by verdere eksplorasie. Dit is moontlik dat daar dinamiese wisselwerking tussen die twee reseptor subtipes in NAcc tydens paar bindingsgedrag kan wees, en dit kan interessant wees om die sellulêre fenotipes van CRF verder te verken.1- en CRF2-uitdrukking van neurone, of om te sien of CRF1 en CRF2 reseptore kan selfs na dieselfde neurone kolokaliseer. Dit is ook moontlik dat ander middels soos die CRF bindende proteïen, wat as 'n reservoir vir endogene CRF mag optree, betrokke kan wees (Jahn, Eckart, Brauns, Tezval, en Spiess, 2002).

Die effektiewe CRF-dosisse vir terreinspesifieke inspuitings in NAcc wat die voorkeur van die vennootskap vergemaklik het, het geen beduidende effek van geneesmiddelbehandeling op lokomotoriese aktiwiteit tot gevolg gehad nie, wat gewoonlik as angsagtige gedrag geïnterpreteer word. DeVries en Carter (2002) effektiewe CRF icv dosisse gevind vir vennoot voorkeur by 0.1 en 1.0 ng (210 nM en 2.1 μM respektiewelik), en het nie verskille in lokomotoriese aktiwiteit tussen behandelingsgroepe opgespoor nie (DeVries et al., 2002). Hul dosisse was 1000 tot 10,000 vou groter en ten minste twee keer tot twintig keer hoër in konsentrasie as die dosisse wat ons spesifiek in NAcc (10 nM en 100 nM) gebruik het. In ons studie, hoewel ons nie beduidende verskille in lokomotoriese aktiwiteit regdeur behandelingsgroepe opgespoor het nie, was daar egter 'n effense neiging tot minder kuiskruisings in die diere wat CRF alleen in NAcc ontvang. Alhoewel dit moontlik is dat die CRF subtiele effekte op angsagtige gedrag kan uitoefen en dus voortbeweging, wat op sy beurt vennootvoorkeurvorming kan beïnvloed, glo ons dat die meer waarskynlike verduideliking is dat verlaagde kagekruisings in die CRF-alleengroep 'n byproduk is van verhoogde Vennoot voorkeur, dit wil sê, tyd spandeer net in die vennoot se hok. Dit ondersteun die hipotese dat CRF 'n nuwe, afsonderlike rol kan hê in die regulering van sosiale gedrag, moontlik onafhanklik van HPA-as-effekte op angs.

Ons toon ook fotomikrografiese bewyse van CRF-immunoreaktiwiteit in NAcc in dieselfde streek as CRF2 reseptore in monogame prairie voles. Dit dui daarop dat CRF een van die endogene ligande kan wees wat op CRF handel1 en CRF2 reseptore in NAcc. Alhoewel CRF getoon is om voorkeur te gee aan CRF1, dit bind ook aan CRF2 met aansienlike affiniteit (Primus et al., 1997). Ucn-1-immunoreaktiewe vesels is nie in NAcc gesien nie, maar is waargeneem in ander streke van die brein soos die Edinger-Westphal-kern (Lim et al., 2006). Ons kon nie Urocortin-2- of Urocortin-3-vesels in die vole brein kaarteer weens 'n gebrek aan spesifieke immunostaining nie; Dit sal egter interessant wees om vas te stel of hierdie potensiële ligande, wat ook CRF bind2 reseptore met hoë affiniteit, is ook teenwoordig in NAcc saam met CRF2 reseptore.

Die ventrale voorkoms, en veral die NAcc, is herhaaldelik geïdentifiseer as die kritiese breinstreek vir die vorming van paarbinding in prairie voles. Gegewe die rol van NAcc in die mesolimbiese dopamienbeloningsroete, is daar veronderstel dat natuurlike beloning en versterkingsmeganismes onderliggend is aan die vorming van 'n paar bindings, sodat die vennoot selektief met beloning geassosieer word (Aragona et al., 2003a; Lim, Murphy en Young, 2004a). Ons het voorheen getoon deur farmakologiese en genetiese manipulasies dat ventrale voorhoede vasopressien V1a-reseptore nodig is vir manlike bindingsvorming, selfs wanneer dit uitgedruk word in nie-monogame voelspesies (Lim et al., 2004b; Lim en Young, 2004). Oksitosienreseptore in die NAcc is noodsaaklik vir vennoot voorkeur in vroulike prairie voles (Young, Lim, Gingrich, en Insel, 2001). Accumbal dopamien D1- en D2-reseptore is ook getoon om vennootvoorkeurvorming en -onderhouding te modelleer in mans en vroue, en in werklikheid wissel dopamien met oksitosien tydens hierdie gedragsproses (Aragona et al., 2003a; Aragona et al., 2006; Aragona, Liu, Yu, Damron, Perlman, en Wang, 2003b; Liu en Wang, 2003). Dus, CRF reseptor aktivering dra waarskynlik by tot 'n groter kring wat in die NAcc konvergeer om hierdie komplekse sosiale gedrag te produseer. In ooreenstemming met hierdie hipotese is daar bewyse dat CRF reseptore in die NAcc dopamien vrystelling in die striatum kan moduleer (Lu, Liu, Huang en Zhang, 2003), en onlangse voorlopige getuienis wat daarop dui dat NAcc CRF reseptor aktivering bar kan stimuleer vir natuurlike versterking (Berridge, Pecine, en Schulkin, 2004). Nog 'n studie het getoon dat CRF2 reseptore in die ventrale tegmentale area, wat dopaminerge projeksies na NAcc stuur, kan langtermynversterking, 'n fisiologiese korrelaat van gedragsleer en beloningvereniging veroorsaak (Jonglose, Singh, Crowder, Yaka, Ron, en Bonci, 2003). Aangesien vennootvoorkeur gepostuleer word om 'n vorm van natuurlike beloning te wees, kan CRF-reseptore in NAcc 'n soortgelyke rol speel in die onderliggende sinaptiese potensiëring tydens die vorming van paarbinding in prairie voles.

Pairbandvorming in die natuur is 'n komplekse kognitiewe proses wat die integrasie van baie eksterne stimuli en interne toestande verg. Pairbandvorming is die gevolg van die sintese van verskeie gedragsprosesse, insluitend sosiale erkenning, benadering en sosiale motivering, en behels leer en geheue. Oksitosien en vasopressien is integraal betrokke by die neurale prosessering van sosiale stimuli en die vorming van sosiale herinneringe (Bielsky, Hu, Szegda, Westphal, en Young, 2004; Ferguson, Young, Hearn, Matzuk, Insel, en Winslow, 2000). Dopamien kan betrokke wees by die verhoogde motiverende toestand wat sosiale interaksie met die maat van 'n vennoot bestuur, en die versterking wat nodig is om 'n vennoot voorkeur te vestig. CRF kan 'n meganisme verskaf waarmee die interne stresstatus die voorkeur van die vennoot moduleer. CRF-signalering kan ook die langtermynveranderinge in neurale plastisiteit tydens die vorming van twee bindings moontlik maak. Elke neurotransmitterstelsel speel 'n ander, maar belangrike rol in die komplekse gedrag van koppeling, en blokkade van enige een stelsel sal die vorming van 'n paar binding ontwrig.

Die rol van CRF in die regulering van sosiale gedrag is minimaal bestudeer, ten spyte van die oorvloed van studies met betrekking tot CRF vir stres- en angsgedrag. Daar is sterk bewyse dat CRF2 reseptor-aktiveringsfunksies om angs en depressie-agtige gedrag in muise te verminder (Bale, Contarino, Smith, Chan, Gold, Sawchenko, Koob, Vale en Lee, 2000; Bale en Vale, 2003). Sosiale gedrag, stres en angs is sterk onderling, veral in gedrag wat sosiale ondersteuning behels of omgaan met sosiale isolasie. Prairie voles wat gevorm het paar bande toon verhoogde plasma kortikosteroon vlakke tydens sosiale skeiding van die vennoot, en reünie met die vennoot gee hierdie vlakke terug na die basislyn (Carter, DeVries, Taymans, Roberts, Williams en Getz, 1997). Manlike prairie voles ondergaan gedwonge swem, 'n sielkundige stressor, toon 'n fasilitering van die koppeling van 'n paar bindings na 'n verkorte samelewing met die vennoot (DeVries et al., 1996). Laastens, paar-gebinde mans wat van hul vennote geskei word, toon meer passiewe hanteringstrategieë in die gedwonge swemtoets as hul broers en geskeie eweknieë. Sulke gedragsveranderings word gepaard met 'n toename in CRF mRNA in die NAcc (Bosch, Nair, Neumann en Young, 2005).

Hierdie data dui daarop dat sosiale en stresgedrag 'n wederkerige verhouding het, en voorts speel dieselfde molekules in stres en angs ook 'n belangrike rol in sosiale gedrag. Trouens, daar is bewyse dat die "sosiale" neuropeptiede vasopressien en oksitosien spanning en angs gedrag kan moduleer (Bielsky et al., 2004; Landgraf, Gerstberger, Montkowski, Probst, Wotjak, Holsboer, en Engelmann, 1995; Liebsch, Wotjak, Landgraf, en Engelmann, 1996; Mantella, Vollmer, Li en Amico, 2003; Ring, Malberg, Potestio, Ping, Boikess, Luo, Schechter, Rizzo, Rahman, en Rosenzweig-Lipson, 2006; Windle, Shanks, Lightman, en Ingram, 1997). So, dieselfde molekules wat die interne spanningstoestand kan moduleer, kan bydra tot die regulering van sosiale gedrag, soos die vorming van twee bindings, en dat die molekules en stroombane wat ontwikkel word vir die doel van een gedrag, die ander dinamies kan beheer.

Erkennings

By Emory Universiteit wil ons dr. Michael J. Owens bedank vir die genotvolle verskaffing van die CP-154,526-verbinding. Ons wil ook graag Lorra Miller en Meera Modi bedank vir hul hulp met die weide-eksperiment. Laastens wil ons Drs bedank. A. Courtney DeVries aan die Ohio State University en C. Sue Carter aan die Universiteit van Illinois, Chicago vir hul pionierswerk op CRF in prairie voles en dr. DeVries se korrespondensie oor die farmakologiese eksperimente.

Grant-ondersteuning: Hierdie navorsing is ondersteun deur NIH-toekennings MH65050 tot MML, AA13738 tot AER, MH58616 tot ZXW, MH64692 tot LJY, en NSF STC IBN-9876754 en die Yerkes Centre Grant RR00165.

voetnote

Disclaimer van die uitgewer: Hierdie is 'n PDF-lêer van 'n ongeredigeerde manuskrip wat aanvaar is vir publikasie. As 'n diens aan ons kliënte voorsien ons hierdie vroeë weergawe van die manuskrip. Die manuskrip sal kopieëring, tikwerk en hersiening van die gevolglike bewys ondergaan voordat dit in sy finale citable vorm gepubliseer word. Let asseblief daarop dat tydens die produksieproses foute ontdek kan word wat die inhoud kan beïnvloed, en alle wettige disklaimers wat van toepassing is op die tydskrif betrekking het.

Verwysings

  1. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. 'n Kritiese rol vir die kern van dopamien, word in vennoot-voorkeurvorming in manlike prairie voles. J Neurosci. 2003a; 23 (8): 3483-90. [PubMed]
  2. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nucleus accumbens dopamien bemiddel differensieel die vorming en instandhouding van monogame paar bindings. Nat Neurosci. 2006; 9 (1): 133-9. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Damron A, Perlman G, Wang ZX. Oorkoepelende modulasie van sosiale aanhegting deur D1- en D2-tipe dopamien-reseptoraktivering in nukleus-accumbens-dop. Horm Behav. 2003b; 44: 37.
  4. Bachtell RK, Weitemier AZ, Galvan-Rosas A, Tsivkovskaia NO, Risinger FO, Phillips TJ, Grahame NJ, Ryabinin AE. Die Edinger-Westphal-laterale septum urokortienweg en die verhouding daarvan tot alkoholverbruik. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2477-87. [PubMed]
  5. Bale TL, Contarino A, Smith GW, Chan R, Goud LH, Sawchenko PE, Koob GF, Vale WW, Lee KF. Muise wat tekortkomend is aan kortikotropien-vrystelling van hormoonreseptor-2, toon angsagtige gedrag en is hipersensitief vir stres. Nat Genet. 2000; 24 (4): 410-4. [PubMed]
  6. Bale TL, Vale WW. Verhoogde depressie-agtige gedrag in kortikotropien-vrystelling faktor reseptor-2-defekte muise: seksueel digotome response. J Neurosci. 2003; 23 (12): 5295-301. [PubMed]
  7. Berridge KK, Pecine S, Schulkin J. Appetitiewe effek van CRF in accumbens dop op gekondisioneerde benadering vir sukrose beloning. Genootskap vir Neurowetenschappen Abstract Viewer / Route Planner. 2004: 437.12.
  8. Bielsky IF, Hu SB, Szegda KL, Westphal H, Young LJ. Dwaalde inkorting in sosiale erkenning en vermindering in angsagtige gedrag in vasopressien V1a reseptor knockout muise. Neuropsychopharmacology. 2004; 29 (3): 483-93. [PubMed]
  9. Bosch OJ, Nair HP, Neumann ID, Young LJ. Depressiewe-agtige gedrag na isolasie van 'n vroulike vennoot word geassosieer met veranderde brein CRF mRNA en HPA-as aktiwiteit in die manlike prairie vole. Genootskap vir Neurowetenschappen Abstract Viewer / Routeplanner; 2005. (Program No. 420.4)
  10. Carter CS, DeVries AC, Getz LL. Fisiologiese substraten van soogdier monogamie: die prairie vole model. Neurosci Biobehav Eerw. 1995; 19 (2): 303-14. [PubMed]
  11. Carter CS, DeVries AC, Taymans SE, Roberts RL, Williams JR, Getz LL. Peptiede, steroïede en koppelstukke. Ann NY Acad Sci. 1997; 807: 260-72. [PubMed]
  12. DeVries AC, DeVries MB, Taymans SE, Carter CS. Die uitwerking van stres op sosiale voorkeure is seksueel dimorfies in prairie voles. Proc Natl Acad Sci VSA A. 1996; 93 (21): 11980-4. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  13. DeVries AC, Guptaa T, Cardillo S, Cho M, Carter CS. Cortikotropien-vrystelling faktor veroorsaak sosiale voorkeure in manlike prairie voles. Psychoneuroendocrinology. 2002; 27 (6): 705-14. [PubMed]
  14. Ferguson JN, Young LJ, Hearn EF, Matzuk MM, Insel TR, Winslow JT. Sosiale amnesie in muise wat die oksitosien geen ontbreek. Nat Genet. 2000; 25 (3): 284-8. [PubMed]
  15. Getz LL, Carter CS, Gavish L. Die paringstelsel van die prairie vole Microtus ochragaster: Veld- en laboratoriumbewyse vir koppeling. Gedragsekologie en Sosiobiologie. 1981; 8: 189-194.
  16. Gruder-Adams S, Getz LL. Vergelyking van die paringstelsel en vaderlike gedrag in Microtus ochragaster en M. pennsylvanicus. Blaar van Soogdierkunde. 1985; 66 (1): 165-167.
  17. Hotta M, Shibasaki T, Arai K, Demura H. Cortikotropieneverspreiding faktor reseptor tipe 1 bemiddel emosionele stres-geïnduseerde inhibisie van voedsel inname en gedragsveranderinge by rotte. Brein Res. 1999; 823 (1-2): 221-5. [PubMed]
  18. Insel TR, Shapiro LE. Oksitosien reseptor verspreiding weerspieël sosiale organisasie in monogame en poligame volumes. Proc Natl Acad Sci VSA A. 1992; 89 (13): 5981-5. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  19. Insel TR, Wang ZX, Ferris CF. Patrone van brein vasopressien reseptor verspreiding geassosieer met sosiale organisasie in mikrotien knaagdiere. J Neurosci. 1994; 14 (9): 5381-92. [PubMed]
  20. Jahn O, Eckart K, Brauns O, Tezval H, Spiess J. Die bindende proteïen van kortikotropien-vrymakende faktor: ligandbindende plek en subeenheidstruktuur. Proc Natl Acad Sci VSA A. 2002; 99 (19): 12055-60. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  21. Landgraf R, Gerstberger R, Montkowski A, Probst JC, Wotjak CT, Holsboer F, Engelmann M. V1 vasopressienreseptor antisense oligodeoksynukleotied in septum verminder vasopressien binding, sosiale diskriminasie vermoëns en angsverwante gedrag by rotte. J Neurosci. 1995; 15 (6): 4250-8. [PubMed]
  22. Liebsch G, Wotjak CT, Landgraf R, Engelmann M. Septal vasopressin moduleer angsverwante gedrag by rotte. Neurosci Lett. 1996; 217 (2-3): 101-4. [PubMed]
  23. Lim MM, Murphy AZ, Young LJ. Ventrale striatopallidale oksitosien en vasopressien V1a-reseptore in die monogame prairie vole (Microtus ochrogaster) J Comp Neurol. 2004a; 468 (4): 555-70. [PubMed]
  24. Lim MM, Nair HP, Young LJ. Spesies en geslagsverskille in breinverspreiding van kortikotropieneverspreiding faktorreceptor subtipes 1 en 2 in monogame en promiskuuse voelspesies. J Comp Neurol. 2005; 487 (1): 75-92. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  25. Lim MM, Tsivkovskaia NO, Bai Y, Young LJ, Ryabinin AE. Verdeling van Cortikotropien-Releasing Factor en Urocortin 1 in die Vole Brein. Brein Behav Evol. 2006; 68 (4): 229-240. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  26. Lim MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Young LJ. Verbeterde vennoot voorkeur in 'n promiskuuse spesie deur die uitdrukking van 'n enkele geen te manipuleer. Aard. 2004b; 429 (6993): 754-7. [PubMed]
  27. Lim MM, Young LJ. Vasopressin-afhanklike neurale stroombane onderliggend aan koppeling van koppelings in die monogame prairie vole. Neuroscience. 2004; 125 (1): 35-45. [PubMed]
  28. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oksitosien en dopamien wisselwerking om die bindingsvorming in vroulike prairie voles te reguleer. Neuroscience. 2003; 121 (3): 537-44. [PubMed]
  29. Lu L, Liu Z, Huang M, Zhang Z. Dopamien-afhanklike reaksies op kokaïen is afhanklik van kortikotropien-vrystelling faktor reseptor subtipes. J Neurochem. 2003; 84 (6): 1378-86. [PubMed]
  30. Mantella RC, Vollmer RR, Li X, Amico JA. Vroulike oksitosien-defekte muise vertoon verhoogde angsverwante gedrag. Endokrinologie. 2003; 144 (6): 2291-6. [PubMed]
  31. Paxinos G, Watson C. Die rotbrein in stereotaksiese koördinate. 4. Akademiese Pers; 1998.
  32. Primus RJ, Yevich E, Baltazar C, Gallager DW. Outoradiografiese lokalisering van CRF1 en CRF2 bindingsplekke in volwasse rotbrein. Neuropsychopharmacology. 1997; 17 (5): 308-16. [PubMed]
  33. Ring RH, Malberg JE, Potestio L, Ping J, Boikess S, Luo B, Schechter LE, Rizzo S, Rahman Z, Rosenzweig-Lipson S. Anxiolitiese aktiwiteit van oksitosien in manlike muise: gedrags- en outonome bewyse, terapeutiese implikasies. Psigofarmakologie (Berl) 2006: 1-8. [PubMed]
  34. Ryabinin AE, Criado JR, Henriksen SJ, Bloom FE, Wilson MC. Differensiële sensitiwiteit van c-Fos-uitdrukking in hippokampus en ander breinstreke tot matige en lae dosisse alkohol. Mol Psigiatrie. 1997; 2 (1): 32-43. [PubMed]
  35. Salo AL, Shapiro LE, Dewsbury DA. Affiliatiewe gedrag in verskillende spesies volke (Microtus) Psychol Rep. 1993; 72 (1): 316-8. [PubMed]
  36. Shapiro LE, Dewsbury DA. Verskille in affiliatiewe gedrag, paar binding en vaginale sitologie in twee spesies voël (Microtus ochrogaster en M. montanus) J Comp Psychol. 1990; 104 (3): 268-74. [PubMed]
  37. Jonglose MA, Singh V, Crowder TL, Yaka R, Ron D, Bonci A. Cortikotropieneverspreidende faktor benodig CRF bindende proteïen om NMDA-reseptore via CRF-reseptor 2 in dopamienneurone te potensieer. Neuron. 2003; 39 (3): 401-7. [PubMed]
  38. Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Urocortin 1 verspreiding in die muis brein is stam afhanklik. Neuroscience. 2005; 132 (3): 729-40. [PubMed]
  39. Windle RJ, Shanks N, Lightman SL, Ingram CD. Sentrale oksitosienadministrasie verminder spanning-geïnduseerde kortikosteroon vrylating en angs gedrag by rotte. Endokrinologie. 1997; 138 (7): 2829-34. [PubMed]
  40. Jong LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Sellulêre meganismes van sosiale aanhegting. Horm Behav. 2001; 40 (2): 133-8. [PubMed]
  41. Young LJ, Wang Z. Die neurobiologie van paar binding. Nat Neurosci. 2004; 7 (10): 1048-54. [PubMed]