التعليقات: ΔFosB مادة كيميائية ضرورية لإدمان حدوثها. يرتبط كل من إدمان المخدرات والسلوك بتراكم دلتا FosB. كتلة دلتا FosB والإدمان يتوقف. يظهر هنا أن التجربة الجنسية تزيد من دلتا FosB ، وتؤدي إلى توعية مركز المكافآت. يؤدي التحسس إلى إطلاق أعلى للدوبامين يجعل النشاط أو الدواء أكثر جاذبية. في جوهر الجنس هو عملية الإدمان. زادت هذه الدراسة أيضًا وراثياً من FosB Delta ، مما زاد من جوانب مجزية للجنس أعلى من المستويات العادية. هل يمكن أن يؤدي استخدام الاباحية على الإنترنت إلى ارتفاع دلتا فوسب إلى ما بعد المستويات العادية؟ هل سيؤدي هذا إلى إدمان وإعادة تجديد مسارات العصبية؟ يبدو معقولا.
دراسة كاملة: إفراط في تعبير "فوسب" في النواة المتكئة يعزز المكافأة الجنسية لدى الهامستر السوريات
الجينات الدماغ Behav. 2009 يونيو ؛ 8 (4): 442 – 449. doi: 10.1111 / j.1601-183X.2009.00491.x.
VL Hedges و 1 S. Chakravarty و 2 EJ Nestler و 2 و RL Meisel1
ملخص
يؤدي التنشيط المتكرر لنظام الدوبامين mesolimbic إلى حدوث تغييرات سلوكية دائمة مصحوبة بنمط من اللدونة العصبية في النواة المتكئة (NAc). نظرًا لأن تراكم عامل النسخ ΔFosB قد يكون مكونًا مهمًا في هذه اللدونة ، فإن السؤال الذي تم تناوله في بحثنا هو ما إذا كان يتم تنظيم ΔFosB بالتجربة الجنسية في الإناث. لقد أظهرنا أن الهامسترات السوريات اللائي حصلن على تجربة جنسية يحملن العديد من التعديلات السلوكية ، بما في ذلك زيادة الكفاءة الجنسية مع الهامستر الذكري الساذج ، والمكافأة الجنسية ، وتعزيز الاستجابة للمنبهات الحركية (مثل الأمفيتامين).
لقد أظهرنا مؤخرًا أن التجربة الجنسية زادت من مستويات osFosB في NAc من الهامستر السوريات. كان محور هذه الدراسة هو استكشاف النتائج الوظيفية لهذا الاستقراء من خلال تحديد ما إذا كان التعبير الزائد التأسيسي لـ ΔFosB بواسطة ناقلات الفيروسية المرتبطة (aden) المرتبطة في NAc يمكن أن تحاكي الآثار السلوكية للتجربة الجنسية.
أظهرت الحيوانات التي لديها إفراط في تعبير ΔFosB بوساطة AAV في NAc دليلًا على المكافأة الجنسية في تفضيل المكان المشروط نموذج في ظل الظروف التي تحكم الحيوانات تلقي حقن البروتين الفلورسنت الأخضر (GFP) في NAc لم يفعل ذلك. وأظهرت اختبارات السلوك الجنسي كذلك أن الذكور المقترنة بالإناث AAV-osFosB قد زادوا من كفاءة الجماع كما تم قياسه من خلال نسبة التركيبات التي شملت التخثر مقارنة بالذكور الذين تزاوجوا مع إناث AAV-GFP. تدعم هذه النتائج دور ΔFosB في التوسط في السلوكيات ذات الدوافع الطبيعية ، في هذه الحالة السلوك الجنسي للإناث ، وتوفر نظرة جديدة على الإجراءات الداخلية المحتملة لـ ΔFosB.
المُقدّمة
تجربة مع تعاطي المخدرات ، والسلوكيات المحفزة ، وسلوك عجلة القيادة أو التعلم الفعال يؤدي إلى تنشيط نظام الدوبامين mesolimbic والتغيرات المستمرة في النواة المتكئة (NAc) (بيكر وآخرون.، 2001, دي كيارا وآخرون.، 1998, هاريس وآخرون.، 2007, كومار وآخرون.، 2005, ميزل ومولينز ، 2006, Nestler ، 2008, Olausson وآخرون.، 2006, Perrotti وآخرون.، 2008, بيرس وكوماريسان ، 2006, الذئب وآخرون.، 2004). التغييرات الهيكلية ، وخاصة تشكيل العمود الفقري شجيري ، هي عنصر مهم في هذه التجربة اللدونة القائمة (فضائي وآخرون.، 2006, لي وآخرون.، 2006, Li وآخرون.، 2003, ميزل ومولينز ، 2006, Norrholm وآخرون.، 2003, روبنسون وكولب ، 2004) ، والتي تبقى بعد فترة طويلة من توقف التجربة السلوكية أو تعاطي المخدرات (مكلونج ونستلر ، 2008, ميزل ومولينز ، 2006, الذئب وآخرون.، 2004).
يحتوي عامل النسخ ΔFosB على خواص جزيئية تجعله مرشحًا جيدًا للتوسط في التعديلات الهيكلية والسلوكية المستمرة الناتجة عن التجارب السلوكية أو المخدرات (تشين وآخرون.، 1997, تشين وآخرون.، 1995, كولبي وآخرون.، 2003, دوسيه وآخرون.، 1996, هوب وآخرون.، 1994, Kelz وآخرون.، 1999, مكلونج ونستلر ، 2003, McClung وآخرون.، 2004, McDaid وآخرون.، 2006, Nakabeppu & Nathans ، 1991, Nestler ، 2008, ناي وآخرون.، 1995, Olausson وآخرون.، 2006, Perrotti وآخرون.، 2008, والاس وآخرون.، 2008, Werme وآخرون.، 2002, Zachariou وآخرون.، 2006). ΔFosB هو منتج لصق بديل للجين المبكر المباشر منظمات المزارعينب (Mumberg وآخرون.، 1991, Nakabeppu & Nathans ، 1991) وعلى عكس بروتين FosB كامل الطول ، فإن ΔFosB المقطوع لديه استقرار غير عادي مما يؤدي إلى تراكم البروتين بعد التحفيز المتكرر (تشين وآخرون.، 1997, تشين وآخرون.، 1995, هوب وآخرون.، 1994, Kelz وآخرون.، 1999, Perrotti وآخرون.، 2008, Zachariou وآخرون.، 2006). على الرغم من أن الآلية التي منظمات المزارعينالجين B متبادل تقريبًا ولا يزال مجهولًا ، يحمي اقتطاع البروتين مع الفسفرة البروتين من التدهور السريع البروتيني مما ينتج مستوى أكبر من نشاط النسخ مقارنةً بأفراد عائلة FosB الأكثر عابرة للعيش (كارل وآخرون.، 2007, يوليري ونستلر ، 2007, Ulery وآخرون.، 2006). الافتراض هو أن تراكم ΔFosB البروتين ينتج أنماط التعبير الجيني التي قد تكمن وراء آثار التجربة على اللدونة السلوكية والخلوية على المدى الطويل (مكلونج ونستلر ، 2008).
لقد استخدمنا السلوك الجنسي للإناث في الهامستر السوري كنموذج من اللدونة القائمة على الخبرة في الدماغ (برادلي وآخرون.، 2005a, برادلي وآخرون.، 2005b, برادلي وميزل ، 2001, برادلي وآخرون.، 2004, كولرت وميزل ، 1999, Kohlert وآخرون.، 1997, ميزل وآخرون.، 1993, ميزل وجوبا ، 1994, ميزل وآخرون.، 1996, ميزل ومولينز ، 2006). تتمثل ميزة العمل مع السلوك الجنسي في القدرة على التحكم في مستوى تجارب الحيوان من خلال امتلاك حيوانات ساذجة جنسيًا تمامًا ، أو عن طريق تعريض الحيوانات بشكل تفاضلي لمستويات مختلفة من التجربة الجنسية. سبق أن أوضحنا أن التجربة الجنسية المتكررة تؤدي إلى توعية نظام الدوبامين ميزوليمبيك ، مماثلاً للعقاقير المخدرة (برادلي وآخرون.، 2005b, برادلي وميزل ، 2001, برينهاوس وستيلار ، 2006, كادوني ودي كيارا ، 1999, هوب وآخرون.، 1992, Kelz وآخرون.، 1999, كولرت وميزل ، 1999, بيرس وكاليفاس ، 1995, بيرس وكاليفاس ، 1997 أ, بيرس وكاليفاس ، 1997 ب, روبنسون وكولب ، 1999 أ). على سبيل المثال ، مثل آثار المخدرات ، تزيد الخبرة الجنسية المتكررة من العمود الفقري شجيري في الخلايا العصبية المتوسطة الشوكي من NAc (لي وآخرون.، 2006, Li وآخرون.، 2003, ميزل ومولينز ، 2006, Norrholm وآخرون.، 2003, روبنسون وآخرون.، 2001, روبنسون وكولب ، 1997, روبنسون وكولب ، 1999 أ, روبنسون وكولب ، 1999 ب, روبنسون وكولب ، 2004). علاوة على ذلك ، وجدنا أن تلطيخ FosB / FosB مرتفع باستمرار في NAc بعد التجربة الجنسية المتكررة (ميزل ومولينز ، 2006).
بالنظر إلى أن التجربة الجنسية يمكن أن تنتج تعبيرًا طويل الأمد لأفراد عائلة FosB ، كان الغرض من هذه الدراسة هو معالجة تعبير osFosB لتقليد الآثار السلوكية للتجربة الجنسية المتكررة. بعد الإفراط في التعبير عن ΔFosB بوساطة فيروسية في NAc ، تم اختبار الهامستر السوري من الإناث لتحسين تفضيل المكان المكيف وكذلك زيادة الكفاءة copulatory مع الهامستر الذكور الساذج ، نقطتي النهاية التي سبق أن أظهرت تتأثر التجربة الجنسية المتكررة (برادلي وآخرون.، 2005b, ميزل وجوبا ، 1994, ميزل وآخرون.، 1996, ميزل ومولينز ، 2006). Wأذكر هنا أنه من خلال الإفراط في التعبير المستمر عن ΔFosB في NAc من الهامستر الإناث اللاتي يتلقين خبرة جنسية بسيطة ، يمكننا إنتاج تغييرات سلوكية مماثلة لتلك الإناث مع تجارب جنسية أكثر شمولاً.
مواد وطرق
المواد التجريبية
تم تسليم الهامستر السوري من الذكور والإناث في أيام 60 تقريبًا من شركة Charles River Breeding Laboratories، Inc. (Wilmington، MA). تم إيواء الإناث بشكل فردي في أقفاص بلاستيكية (بطول 50.8 × عرض × 40.6 × ارتفاع 20.3 سم) ، في حين كانت حيوانات التحفيز الذكرية موضوعة في مجموعات في أقفاص متطابقة بأعداد من ثلاثة أو أربعة. تم الحفاظ على غرفة الحيوانات عند درجة حرارة يمكن التحكم فيها من 22 ° C مع جدول 14: 10 hr مظلمة بالضوء (الأنوار بين 1: 30 و 11: 30 pm). كان الطعام والماء متاحين للحيوانات libitum الإعلانية.
جميع الإجراءات المستخدمة في هذه التجربة كانت متوافقة مع المعاهد الوطنية للصحة مبادئ توجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان بوردو.
العمليات الجراحية
تم تهيج المبيض الهامستر الأنثوي بشكل ثنائي تحت تخدير بنتوباربيتال الصوديوم (Nembutal ؛ 8.5 ملغ لكل وزن جسم 100 جم ، IP) ، وتم إعطاء مخدر إضافي ثم خضع لعملية جراحية ثنائية التجسيمية لتوصيل ناقلات فيروسية. أثناء جراحة التجسيمي ، كان الرأس يحلق وتراجع الجلد والعضلات. تم حفر ثقب صغير في الجمجمة وتم إنزال حقنة 5 μL Hamilton إلى مستوى NAc من زاوية 2 ° جانبية لضمان خلوص البطينين الدماغيين الجانبيين. تم وضع المحقنة في مكانها لمدة 5 min قبل الحقن ثم تم تسليم الفيروس المرتبط adeno (AAV) -GFP أو AAV- osFosB (0.7 μL) إلى NAc على 7 min ، مع الاحتفاظ بحقنة في مكانه دقيقة 5 إضافية. تكرر هذا الإجراء للجانب المقابل للدماغ.
ناقلات الفيروسية
يتميز AAV من خلال قدرته على نقل الخلايا العصبية بكفاءة وكذلك الحفاظ على تعبير جيني معين لفترات طويلة من الزمن (تشامبرلين وآخرون.، 1998). توجد متجهات AAV في أنماط مصلية مختلفة بناءً على توصيف معطف البروتين القفيزي. استخدمت هذه التجربة AAV2 (النمط المصلي 2) من ستراتاجين مع عيار يزيد عن 108/ μl التعبير عن بروتين الفلورسنت الأخضر (AAV-GFP) وكذلك ناقل AAV الذي لديه بنيات لكل من FosB و GFP (AAV--FosB-GFP). تم حقن النواقل الفيروسية في NAc على الأقل قبل أسابيع 3 من الاختبارات السلوكية للسماح بزيادة إفراط BFosB في التطور. تتجه نواقل AAV هذه للتعبير عن الجينات المحورة في الفئران والجرذان التي تصبح الحد الأقصى خلال أيام 10 من الحقن ثم تستمر عند هذا المستوى لمدة 6 أشهر على الأقل (وينستانلي وآخرون ، 2007, Zachariou وآخرون ، 2006). الأهم من ذلك ، أن الناقلات تصيب الخلايا العصبية فقط ولا تنتج أي سمية أكبر من الحقن في المركبات وحدها. وترد تفاصيل إنتاج واستخدام هذه المتجهات في المنشورات السابقة (وينستانلي وآخرون ، 2007, Zachariou وآخرون ، 2006).
تجربة جنسية
تم تحضير كل الهامستر الأنثوي المبيض للتجربة الجنسية مرة واحدة في الأسبوع عن طريق إعطاء حقنتين يوميًا تحت الجلد من استراديول بنزوات (10 μg في 0.1 ml من زيت بذرة القطن) تقريبًا 48 hr و 24 hr قبل اختبار السلوك الجنسي متبوعًا بالحقن تحت الجلد للبروجسترون (500 ميكروغرام في 0.1 مل من زيت بذرة القطن) 4 – 6 ساعة قبل اختبار السلوك الجنسي. تم تقديم الإناث التي تلقت تجربة جنسية مع الهامستر الذكور ذوي الخبرة الجنسية لجلسة 10 دقيقة 4-6 ساعة بعد حقن هرمون البروجسترون. تم إقران كل ذكر وإناث مرة واحدة فقط خلال مدة اختبارات التجربة الجنسية.
تفضيل المكان المشروط
تم استخدام نموذج تفضيل المكان المكيف المتحيز في هذه التجربة (Tzschentke ، 1998). لدينا جهاز تفضيل المكان مكيفة (ميزل وجوبا ، 1994, ميزل وآخرون.، 1996) يتكون من مقصورة واحدة بيضاء ورمادية واحدة (60 × 45 × 38 سم) متصلة بواسطة مقصورة مركزية واضحة (37 × 22 × 38). تم تمييز الأجزاء الرئيسية بشكل أكبر من خلال مجموعة مفروشات أسبن (Harlan Laboratories، IN) في المقصورة الرمادية وفراش الذروة (Harlan Laboratories، IN) في المربع الأبيض. كانت الهامستر الأنثوية المبيضات تستعد هرمونيا قبل الاختبار المسبق ، وجلسات التكييف الجنسي ، وما بعد الاختبار. أثناء الاختبار القبلي ، تم وضع الحيوان في الغرفة المركزية الصافية وكان حراً في التجول في الأجزاء المختلفة لـ 10 min لتأسيس تفضيل أولي لكل مقصورة. نظرًا لأن جميع الحيوانات أظهرت تفضيلًا أوليًا للغرفة البيضاء ، فقد تم إجراء التكييف في الغرفة الرمادية. تم تكرار تحضير الهرمونات خلال 2 (مجموعات 2 – 5) أو أسابيع 5 (Group 1) للتكييف. أثناء التكييف ، تم إعطاء الإناث تجربة جنسية مع ذكر في المقصورة الرمادية لمدة 10 دقيقة ، مع قياس المعلمات copulatory الإناث (كمون lordosis ومدة الكلور الكلي). ساعة واحدة بعد اختبار التجربة الجنسية ، وضعت الأنثى وحدها في الغرفة البيضاء ل 10 دقيقة. تم إعداد مجموعة مراقبة من الإناث التي لم تتلق تجربة جنسية بشكل هرموني ولكن وضعت وحدها في كل غرفة لمدة 10 دقيقة. بعد أسابيع من تكييف 2 أو 5 ، تم إعطاء الحيوانات اختبارًا لاحقًا ، حيث أصبحوا مجددًا حرًا في تجوال الغرف لمدة 10 دقيقة. بغض النظر عن المجموعة ، أجريت جميع الاختبارات اللاحقة بعد سبعة أسابيع من الجراحة بعد التجسيمي ، وبالتالي تم التضحية بجميع الحيوانات بنفس المستوى من التعبير الفيروسي. كانت هناك مجموعات 5 من الحيوانات في هذه التجربة: تلقت مجموعة تحكم إيجابية من الحيوانات ثنائي AAV-GFP وأعطيت 5 إقران سلوك جنسي أسبوعي مع ذكر (مجموعة 1 ، n = 8). لم يتم إعطاء مجموعتين تحكم سلبية أي تكييف الجنسي لمدة أسابيع 2 ، وتلقى إما AAV-osFosB (المجموعة 2 ، ن = 5) أو AAV-GFP (المجموعة 3 ، ن = 4). أخيرًا ، كانت هناك حيوانات تلقت أسابيع 2 من الاقتران بسلوك جنسي مع ذكر مع حقن ثنائية إما AAV-osFosB (المجموعة 4 ، n = 7) أو AAV-GFP (Group 5 ، n = 7).
تجربة الذكور الساذجة
أظهرت الأبحاث السابقة أن الهامستر من ذوي الخبرة الجنسية يمكن أن يحسن من الكفاءة التعاونية للتفاعلات مع شركائهن الذكور الساذجين جنسياً (برادلي وآخرون.، 2005b). تم إعطاء هذا الاختبار بعد أسبوع تقريبًا من تفضيل المكان المشروط بعد الاختبار لمجموعتي الحيوانات التي تلقت 2 أسابيع من التكييف الجنسي (المجموعتان 4 و 5). كانت الإناث تستعد هرمونيا للتجربة الجنسية كما هو موضح. خلال اختبار 10 min ، تم تقديم الهامستر الساذج جنسيًا إلى القفص المنزلي للإناث وتم تصوير جلسة الاختبار لتحليلها لاحقًا. تم تحديد عدد من يتصاعد و intromissions (بما في ذلك القذف) من قبل الذكور وكذلك نسبة إجمالي يتصاعد التي تضمنت intromission (معدل ضرب) من شريط الفيديو.
المناعية
تم إجراء Immunostaining على جميع الحيوانات للتحقق من كل من موقع حقن الفيروس والمدى التشريحي للتعبير البروتين. أعطيت إناث جرعة زائدة من Sleepaway (0.2 ml ip ، Fort Dodge Laboratories ، Fort Dodge، IA) و perfused داخليا مع 25 mM الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) ل 2 دقيقة (50 مل تقريبا) تليها 4 ٪ بارافورمالدهايد لمدة 25 دقيقة (حوالي 20 مل). تمت إزالة العقول وتثبيتها في 500 ساعة في بارافورمالدهيد 2 ٪ ثم وضعت في محلول سكروز 4 ٪ في PBS بين عشية وضحاها في 10 ° C. تحتوي الحيوانات التي تلقت فقط AAV-GFP الثنائية على مقاطع إكليلية تسلسلية (4 μm) مقطوعة من الأنسجة المجمدة إلى 40 mM PBS بالإضافة إلى 25٪ ألبومين مصل البقري (BSA) (عازلة غسيل) ثم يتم تثبيتها مباشرة على الشرائح وتغطيها ساترة مع 0.1٪ ن بروبيل غالات في الجلسرين. كان للحيوانات التي حصلت على AAV-ΔFosB ثنائية المقاطع الإكليلية التسلسلية (5 μm) مقطوعة من الأنسجة المجمدة ، ثم تشطف مرات 40 لمدة 3 دقيقة في غسل العازلة. تم تحليل حيوانات AAV-ΔFosB فقط لتعبير ΔFosB وبالتالي تم حضنها في الجسم المضاد الأولي لـ ΔFosB / FosB (10: 1 ، SC-10000. Santa Cruz Biotechnology Inc. ، Santa Cruz، CA) في مغسلة عازلة بالإضافة إلى 48٪ Triton-X 0.3 درجة حرارة الغرفة لـ 100 hr ثم انتقل إلى 24 ° C لـ 4 hr. تم اختيار تركيز الجسم المضاد الأولي لأنه ينتج فقط تلطيخ minimalFosB / FosB بالحد الأدنى. بعد الحضانة في الجسم المضاد الأولي ، تم شطف الأقسام مرات 24 لمدة 3 دقيقة في المخزن المؤقت للغسيل ، ثم حضنت في الجسم المضاد الحيوي biotinylated-الثانوية لـ 10 min في درجة حرارة الغرفة (45: 1 ، Vector ، Burlingame ، CA). تم غسل الأقسام بعد ذلك مرات 200 لـ 3 min في المخزن المؤقت للغسيل قبل حضنها في مركبات streptavidin Alexa Fluor 10 (594: 1 ، مجسات Molecular ، يوجين ، OR). بعد هذه الحضانة ، تم غسل الأقسام مرات 500 لمدة 3 دقيقة في المخزن المؤقت للغسل ثم ركبت على الشرائح وساترة بينما لا تزال رطبة مع 10 ٪ ن بروبيل غالات في الجلسرين.
التحليل المجهري
تم تحليل الشرائح بواسطة مجهر الضوء لايكا DM4000B مع قدرة الفلورسنت مقرونة بكاميرا رقمية لايكا DFC500. تم تحليل الصور الرقمية لكل من مواقع الحقن الأيمن والأيسر من كل قسم بشكل تسلسلي بواسطة المجهر مضان لتحديد موضع الحقن في NAc. تم تحليل المقاطع من كل حيوان للعثور على الانتشار المنطقي إلى الذيلي للتعبير الفيروسي وكذلك الموقع التشريحي لأكبر قطر للتعبير. علاوة على ذلك ، داخل هذه الأقسام ، تم حساب أرقام الخلايا الملون FosB في ImageJ من الصور الرقمية المحفوظة. نظرًا لأن هدفنا كان ببساطة الحصول على تعداد خلايا تقريبي ، لم يتم استخدام الطرق المجسمة.
النتائج
دورة زمنية للإفراط في التعبير الفيروسي عن ΔFosB في NAc من الهامستر السوريات
تم استخدام مجموعة منفصلة من الحيوانات في البداية لإيجاد مسار زمني للتعبير الزائد ΔFosB في الهامستر الأنثوي. تحليل تعبير osFosB في 3 (n = 5) ، 6 (n = 6) ، و 9 (n = 2) كشفت نقاط الوقت في الأسبوع أن 3 أسابيع بعد الجراحة التجسيمي أنتجت مستوى من تعبير ΔFosB الزائد الذي استمر من خلال 6 و 9 أسابيع بعد جراحة التجسيمي. كان التعبير الفيروسي في الغالب نوويًا ، ولكنه وجد أيضًا في السيتوبلازم وحتى التشعبات في بعض الخلايا الزائدة. من بين الحيوانات الثلاثة عشر التي شملت تجربة الدورة الزمنية ، كان لدى أربعة حيوانات حقن فيروسية منقولة من نوع NAc ، امتدت إحداها إلى نواة السرير في السطور الطرفية (BNST). أما الحيوانات التسعة المتبقية فقد كان لديها مواضع حقن ذيلية ، وسبعة في قلب الذيلية ، واثنتان في قذيفة الذيلية من NAc. عبرت واحدة فقط من حقن قذيفة الذيلية caudally في BNST ، في حين أن ستة من الحقن في قلب الذيلية عبرت caudally في BNST. تم العثور على متوسط أقطار التعبير الفيروسي لكل نقطة زمنية 0.9 mm و 1.2 mm و 1.0 mm لـ 3 و 6 و 9 أسابيع على التوالي. تعرضت هذه الأقطار المتوسطة لتحليل التباين ولم يتم العثور على أن تكون مختلفة بشكل كبير. لذلك ، في التجارب السلوكية التالية ، بدأ الاختبار السلوكي حوالي 3 أسابيع بعد الجراحة التجسيمي ، وتم التضحية بالحيوانات خلال أسابيع 9 بعد الجراحة التجسيمي لضمان الحفاظ على التعبير الفيروسي على مستوى ثابت.
التحليل المناعي للحقن الفيروسية AAV-osFosB و AAV-GFP
تم تحليل متسلسل أقسام الدماغ من كل حيوان يستخدم في التجارب السلوكية في طائرة الاكليلية للموقع التشريحي للحقن الفيروسي. وقد تم تحليل ما مجموعه حيوانات 12 لتعبيرهم ΔFosB الثنائية عن طريق عدد الخلايا ، ووضع الحقن ، والتي تم تحديدها من خلال تتبع مسارات الإبرة المتبقية. على الرغم من أن موضع الحقن تم تحليله في قسم الاكليلية (الشكل 1) ، تعبير البروتين الممتد في القطع الناقص الذري المنقطي من موقع الحقن ، وينتشر أيضًا في القطع الناقص الظهري البطني من موقع الحقن. من بين الحيوانات الخمسة التي تم تحليلها من المجموعة 2 ، كانت 70.5٪ من الخلايا الزائدة عن الحد في الخلايا NAc (الوسيط = خلايا 16,864 ، الربع السفلي = خلايا 7,551 ، الربع العلوي = خلايا 20,002 ، المدى الرباعي = 12,451). أظهرت الحيوانات السبعة التي تم تحليلها من Group 4 تعبيرًا مفرطًا عن 65.6٪ في التعبير NAc (المتوسط = خلايا 9,972 ، الربع السفلي = خلايا 5,683 ، الربع العلوي = خلايا 11,213 ، المدى البين = 5530.). تمثل تعداد الخلايا هذا زيادة في التعبير الفيروسي بدلاً من تلطيخ داخلي المنشأ بسبب التخفيف الهادف للجسم المضاد الأولي.
من بين مواقع الحقن الثنائية 24 ، كان اثنا عشر منها في صميم المنصة NAc ، ستة منها كان لها تعبير فيروسي انتشر بشكل caudally في BNST. وكانت المواقع الاثني عشر المتبقية للحقن في الذيل NAc. واحدة من اثني عشر حقنة كانت في قذيفة الذيلية وانتشرت الذيلية في BNST. آخر 11 موقعًا للحقن كانت جميعها في قلب الذود من NAc ، ثمانية منها انتشرت ذيليًا في BNST. تركزت جميع الحقن حول المفصل الأمامي باستثناء حقنة واحدة في الغلاف الذيلي من NAc والتي كانت أكثر قليلاً من الوصلة الأمامية (الشكل 2). أظهرت جميع الحيوانات تعبيرًا مفرطًا مناسبًا عن GFP أو osFosB وبالتالي تم استخدامها في التحليل السلوكي اللاحق. تم استبعاد أي حيوانات من الدراسة بسبب ضعف وضع الحقن التشريحي. علاوةً على ذلك ، نظرًا لأن جميع الحقن كانت موجهة إلى قلب العجان وحقنة واحدة فقط شملت القشرة ولم يتم إجراء أي تحليل إحصائي في مواقع الحقن.
AAV ناقلات overexpression من ΔFosB في NAc من الهامستر السوريات النتائج في تعزيز المكافأة الجنسية
لتقييم ما إذا كان التعبير الزائد عن ΔFosB في NAc له تأثير على المكافأة الجنسية ، استخدمنا نموذج تفضيل المكان المشروط. في هذا الاختبار ، خضعت الحيوانات إما لأسابيع 0 ، 2 ، أو 5 من التكيف الجنسي. أثناء التكييف الجنسي ، تم تسجيل الكمون ومدة كل الهامستر الإناث. لا الكمون lordosis (Group 1: 553 sec ± 7 sec، Group 4: 552 sec ± 7 sec، Group 5: 561 sec ± 7 sec،) ولا lordosis (Group 1: 485 sec، 15 sec، Group 4 sec اختلفت 522 sec ، Group 10: 5 sec ± 522 sec) خلال التكييف الجنسي بشكل كبير بين المجموعات خلال الاختبار بغض النظر عن الحقن الفيروسي. لذلك لم يكن للإفراط في التعبير عن GFP و osFosB أي تأثير على السلوك الاستقبالي للإناث.
تم تحليل كل مجموعة من إجراء تفضيل المكان المشروط بشكل فردي من خلال اختبار t قياس متكرر بين مقدار الوقت الذي يقضيه في حجرة التكييف (المقصورة الرمادية) أثناء الاختبار الأولي وبعد الاختبار. لم يمتد التحليل الإحصائي بين المجموعات. أظهرت الأبحاث السابقة أن خمس تجارب جنسية مشروطة تكفي لاكتشاف التغيرات المهمة في تفضيلات المكان (ميزل وجوبا ، 1994, ميزل وآخرون.، 1996). في الواقع ، أمضت المجموعة الضابطة الإيجابية المؤلفة من حيوانات من الإناث تزيد عن GFP في NAc والتي أعطيت خمس تجارب جنسية مشروطة وقتًا أطول بكثير خلال اختبار ما بعد الحجرة الرمادية المقترنة بالتجربة الجنسية مقارنةً بأداء التكييف المسبق ، t (8 ) = N3.13 ، P<0.05. كما كان متوقعًا ، فإن الحيوانات التي لم تعط أي تجارب جنسية تكييفية لم تغير بشكل كبير مقدار الوقت في أي من الغرفتين بغض النظر عن الحقن الفيروسي. لم تُظهر الإناث اللواتي يعانين من الإفراط في التعبير عن GFP اللواتي أعطين تجربتين جنسيتين تكييفيتين تكييفًا للمكان ، في حين أن الإناث اللواتي حصلن على تجربتين جنسيتين مكيفتين مع الإفراط في التعبير عن ΔFosB أمضين وقتًا أطول بكثير في الغرفة مقترنًا بالتجربة الجنسية أثناء هذا الاختبار اللاحق ، t (2) = −7 ، ف <2.48 (الشكل 3).
AAV ناقلات overexpression من ΔFosB في NAc من الهامستر السوري الإناث يحسن كفاءتها copululation مع الذكور الساذجة
بعد أسبوع واحد من اختبار تفضيل المكان المشروط ، تعرضت الإناث مع أسابيع 2 من اختبارات التكييف الجنسي (المجموعتان 4 و 5) لاختبار سلوك جنسي ذكر ساذج. في هذا الاختبار ، حسّنت إناث AAV-osFosB مع اختبارات 2 السابقة للخبرات الجنسية بشكل ملحوظ من كفاءتها الجماعية أكثر من إناث AAV-GFP مع خبرات جنسية سابقة 2 (الشكل 4). كان معدل الضرب (نسبة إجمالي الحركات التي تضمنت الإدخال) للذكور الساذجين جنسياً الذين تم إقرانهم مع الإناث AAV-ΔFosB أعلى بكثير من معدل إصابة الذكور الساذجين المقترنين بإناث AAV-GFP ، t (14) = 4.089 ص <0.005.
مناقشة
وأجريت التجارب السابقة التي استخدمت ناقلات AAV ل overexpression من osFosB في أنظمة الفئران أو نموذج الفأر (والاس وآخرون.، 2008, ينستانلي وآخرون.، 2007, Zachariou وآخرون.، 2006). نحن التحقق من صحة أنماط التعبير الفيروسي في دماغ الهامستر عن طريق تلطيخ المناعي. أظهر هذا التحليل تعبيرًا فعالًا عن ΔFosB الذي ظهر بأسرع 3 بعد الحقن داخل الجمجمة وظل مرتفعًا لمدة أسابيع 9 في تحليل مسارنا الزمني وحتى أسابيع 12 في التجارب السلوكية.
في نموذج تجربتنا الجنسية ، تؤدي التفاعلات الجماعية المتكررة من قبل الذكور إلى توعية بإطلاق الدوبامين في NAc (كولرت وميزل ، 1999, Kohlert وآخرون.، 1997) التي لها عواقب معززة في نموذج تفضيل المكان المشروطم (ميزل وجوبا ، 1994, ميزل وآخرون.، 1996). يوضح هذا التحسس الدوبامين ، وكذلك قدرة الهامستر الإناث على تنظيم نجاح عملية الاقتحام من قبل الذكور المتزايدة نتيجة لقاءات جنسية متكررة ، استجابة الارتباط (برادلي وآخرون.، 2005b). لقد أظهرنا أن هذا السلوك الجنسي المعزز يمكن تعزيزه عن طريق إفراط في تعبير inFosB في NAc في سياق تجربة جنسية دون العتبة ، مماثلة للتحسين في الاستجابات الفعالة للكوكايين أو المورفين أو استهلاك الطعام بعد تعبير مفرط مماثل من ΔFosB (كولبي وآخرون.، 2003, Olausson وآخرون.، 2006, Zachariou وآخرون.، 2006). وقد انعكس هذا التحسن في التفاعلات الجنسية مع الذكور تجربة جنسية التالية من خلال الحصول على تفضيل مكان مشروط. أنامن المعقول اعتبار ΔFosB بمثابة رابط نسبي يتوسط كل من التعديلات طويلة الأجل في السلوك واللدونة العصبية الأساسية الناتجة عن تنشيط أهداف المصب لـ ofFosB.
بالنظر إلى أن ارتفاع osFosB ينتج هذه الآثار ، ينبغي النظر في الآليات الأساسية. هناك عدد قليل جدًا من النتائج الجزيئية المحددة الناتجة عن تراكم ΔFosB. Mأشارت الدراسات التي أجريت على الفحص الجيولوجي للفئران المفرطة في التعبير increasesFosB إلى زيادة في الكيناز- 5 المعتمد على السيكلين / السيريون (Cdk5) والعامل النووي kappa B (NF-)B) والوحدة الفرعية GluR2 لمستقبلات الغلوتامات والدينورفين (آنج وآخرون.، 2001, بيب ، 2003). من غير الواضح كيف يمكن أن تؤثر هذه الأحداث الجزيئية على اللدونة وتشكيل العمود الفقري شجيري ، على الرغم من أن Cdk5 قد عرف دورًا في زيادة كثافة العمود الفقري الشجيري (بيب ، 2003, تشيونغ وآخرون.، 2006, كومار وآخرون.، 2005, Norrholm وآخرون.، 2003) ، ووحدات GluR2 الفرعية أو NF-κB متورطة في متشابك (آنج وآخرون.، 2001, Nestler ، 2001, به Peakman وآخرون.، 2003). في الدراسات المستقبلية ، نخطط للتركيز على هذه الأهداف وغيرها من الأهداف النصية المحتملة للـ osFosB لتحديد كيفية تقلب نشاطهم مع تراكم ΔFosB بعد السلوك الجنسي المتكرر.
هناك أدب واسع يفرض الأدوار المتميزة التي تلعبها قذيفة وجوهر NAc في السلوكيات المحفزة (برينهاوس وستيلار ، 2006, كادوني ودي كيارا ، 1999, Perrotti وآخرون.، 2008, بيرس وكاليفاس ، 1995). حددت الأبحاث السابقة في مختبرنا باستمرار التأثيرات الخلوية للتجربة الجنسية على قلب المتكلفين (برادلي وآخرون.، 2005a, برادلي وآخرون.، 2005b, برادلي وميزل ، 2001, برادلي وآخرون.، 2004, كولرت وميزل ، 1999, Kohlert وآخرون.، 1997, ميزل وآخرون.، 1993) ، وتشكيل الأساس لاستهدافنا لل NAc الأساسية في هذه الدراسة. أوضح تحليلنا للمدى التشريعي للتعبير الزائد لـ ΔFosB أنه على الرغم من أن الحقن كانت مستهدفة بالفعل للنواة الذيلية من NAc ، غالبًا ما ينتشر تعبير osFosB ذيليًا في BNST المنقار. على الرغم من أن NAc الذيلية والمنصة BNST هما بالتأكيد نواة متميزة تشريحيا ، إلا أنهما ليسا متمايزين وظيفيا بالضرورة لأن كلا المنطقتين يعدلان العديد من العناصر الميكانيكية الأساسية للعمليات التحفيزية (على سبيل المثال ، Koob وآخرون ، 2004). في دراساتنا على التحليل الجزئي للهامستر (Kohlert وآخرون.، 1997) ، لاحظنا عدم القدرة على التمييز بين المواضع مسبار BNST المنقار من تلك الموجودة في NAc الذيلية من حيث مستويات الدوبامين القاعدي ، واستجابات الدوبامين للتفاعلات الجنسية مع الذكور ، أو أنماط التعصيب الوريدي الدوبامين. بدلاً من عرض انتشار العدوى في BNST على أنه مشكلة منهجية ، تدعم هذه النتائج فكرة التواصل الوظيفي بين NAc و BNST.
على الرغم من أننا أظهرنا أن الإفراط في التعبير عن ΔFosB في الهامستر الإناث هو كاف لإنتاج تفضيل مكان مشروط للاستجابة الجنسية ولتعزيز التفاعلات القروية مع الذكور ، يبقى مجهولًا ما إذا كان تعبير ΔFosB هو أيضًا ضروري لهذه الآثار السلوكية للتجربة الجنسية. استخدمت الدراسات الحديثة فيروس AAV-unJunD ، الذي يقلل النسخ المتوسط بوساطة ΔFosB عن طريق التغاير المغاير بطريقة تنافسية مع ΔFosB قبل ربط منطقة AP-1 على الجينات (ينستانلي وآخرون.، 2007). باستخدام AAV-unJunD لضربة قاضية ΔFosB النسخ بوساطة ، نأمل أن نحدد ما إذا كان ΔFosB مطلوبًا لللدونة السلوكية التي لاحظناها بعد تجربة السلوك الجنسي ، والتي ستكمل نتائج الدراسة المقدمة هنا. إذا كان تراكم ΔFosB وتنشيطه اللاحق للأهداف اللاحقة يسببان اللدونة السلوكية والخلوية على حد سواء ، فيجب على ضربة قاضية ΔFosB إلغاء هذه الآثار.
شكر وتقدير
نود أن نشكر أماندا مولينز وميليسا ماكورلي وتشيلسي بيكر لمساعدتهم في الاختبارات السلوكية والتكييف ومعالجة الأنسجة. تم دعم هذا العمل من خلال منح NIH DA13680 (RLM) و MH51399 (EJN).
مراجع حسابات
- Allen PB و Zachariou V و Svenningsson P و Lepore AC و Centonze D و Costa C و Rossi S و Bender G و Chen G و Feng J و Snyder GL و Bernardi G و Nestler EJ و Yan Z و Calabresi P و Greengard P. للسبينوفيلين و neurabin في اللدونة بوساطة الدوبامين. علم الأعصاب. 2006.140: 897-911. [مجلات]
- Ang E، Chen J، Zagouras P، Magna H، Holland J، Schaeffer E، Nestler EJ. تحريض عامل الكاباب النووي في النواة المتكئة بالإدارة المزمنة للكوكايين. ي Neurochem. 2001.79: 221-224. [مجلات]
- Becker JB، Rudick CN، Jenkins WJ. دور الدوبامين في النواة يتصاعد و المخطط في السلوك الجنسي لدى الفئران الأنثوية. ي Neurosci. 2001.21: 3236-3241. [مجلات]
- Berton O، Covington HE، 3rd، Ebner K، Tsankova NM، Carle TL، Ulery P، Bhonsle A، Barrot M، Krishnan V، Singewald GM، Singewald N، Birnbaum S، Neve RL، Nestler EJ. تحريض deltaFosB باللون الرمادي المحيط بالإجهاد يشجع على استجابات مواجهة نشطة. الخلايا العصبية. 2007.55: 289-300. [مجلات]
- بيب جا. دور Cdk5 في الإشارات العصبية ، اللدونة ، وتعاطي المخدرات. Neurosignals. 2003.12: 191-199. [مجلات]
- Bradley KC، Boulware MB، Jiang H، Doerge RW، Meisel RL، Mermelstein PG. التغييرات في التعبير الجيني داخل النواة يتكبر و المخطط بعد التجربة الجنسية. الجينات الدماغ Behav. 2005a.4: 31-44. [مجلات]
- Bradley KC، Haas AR، Meisel RL. آفات 6-Hydroxydopamine في الهامستر الأنثوي (Mesocricetus auratus) تلغي الآثار الحساسة للتجارب الجنسية على التفاعلات التكوينية مع الذكور. Behav Neurosci. 2005b.119: 224-232. [مجلات]
- Bradley KC، Meisel RL. يتم تحفيز السلوك الجنسي لتحفيز c-Fos في النواة المتكئة والنشاط الحركي المحفّز بالأمفيتامين عن طريق التجربة الجنسية السابقة في الهامستر السوري الأنثوي. ي Neurosci. 2001.21: 2123-2130. [مجلات]
- Bradley KC، Mullins AJ، Meisel RL، Watts VJ. تغيّر التجربة الجنسية إنتاج AMP الدوري المتوسط بوساطة مستقبلات D1 في النواة المتكاثمة من الهامستر السوريات. تشابك عصبى. 2004.53: 20-27. [مجلات]
- Brenhouse HC، Stellar JR. يتم تغيير تعبير c-Fos و deltaFosB تفاضليًا في المناطق الفرعية المتميزة للنواة المتكاثفة في قشور الفئران الحساسة للكوكايين. علم الأعصاب. 2006.137: 773-780. [مجلات]
- Cadoni C، Di Chiara G. تغيرات متبادلة في استجابة الدوبامين في النواة تتساقط القشرة واللب وفي الظهارة الذيلية في بوتامان في الفئران التي توعية المورفين. علم الأعصاب. 1999.90: 447-455. [مجلات]
- Carle TL، Ohnishi YN، Ohnishi YH، Alibhai IN، Wilkinson MB، Kumar A، Nestler EJ. الآليات المعتمدة على Proteasome والمستقلة لزعزعة FosB: تحديد مجالات FosB degron والتأثيرات على استقرار DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007.25: 3009-3019. [مجلات]
- Chamberlin NL، Du B، de Lacalle S، Saper CB. ناقلات الفيروس المؤتلف المرتبطة adeno: تستخدم للتعبير عن الجينات وتتبع المسالك الخلفية في الجهاز العصبي المركزي. الدماغ الدقة. 1998.793: 169-175. [مجلات]
- Chen J، Kelz MB، Hope BT، Nakabeppu Y، Nestler EJ. المستضدات ذات الصلة Fos المزمنة: المتغيرات المستقرة من deltaFosB المستحثة في الدماغ عن طريق العلاجات المزمنة. ي Neurosci. 1997.17: 4933-4941. [مجلات]
- Chen J، Nye HE، Kelz MB، Hiroi N، Nakabeppu Y، Hope BT، Nestler EJ. تنظيم الدلتا FosB والبروتينات FosB مثل الصرع electroconvulsive والعلاجات الكوكايين. مول Pharmacol. 1995.48: 880-889. [مجلات]
- Cheung ZH، Fu AK، Ip NY. أدوار متشابكة من Cdk5: الآثار المترتبة في وظائف المعرفية العليا وأمراض التنكس العصبي. الخلايا العصبية. 2006.50: 13-18. [مجلات]
- Colby CR، Whisler K، Steffen C، Nestler EJ، Self DW. يعزز overexpression من نوع DeltaRosB الخاص بالخلية القابلة للإستزاف من الحافز للكوكايين. ي Neurosci. 2003.23: 2488-2493. [مجلات]
- Di Chiara G ، Tanda G ، و Cadoni C ، و Acquas E ، و Bassareo V ، و Carboni E. ، التماثلات والاختلافات في عمل تعاطي العقاقير ومُعزز تقليدي (غذائي) على انتقال الدوبامين: إطار تفسيري لآلية الاعتماد على المخدرات. Adv Pharmacol. 1998.42: 983-987. [مجلات]
- Doucet JP، Nakabeppu Y، Bedard PJ، Hope BT، Nestler EJ، Jasmin BJ، Chen JS، Iadarola MJ، St-Jean M، Wigle N، Blanchet P، Grondin R، Robertson GS. تنتج التغيرات المزمنة في النقل العصبي الدوباميني ارتفاعًا مستمرًا في البروتين (البروتينات) الشبيهة بالدلتا في كل من القوارض والرسم المخطط. Eur J Neurosci. 1996.8: 365-381. [مجلات]
- Harris GC، Hummel M، Wimmer M، Mague SD، Aston-Jones G. Elevations of FosB in the nucleus accumbens for c الكوكباني بالإمتناع يرتبط بالتغييرات المتباينة في وظيفة المكافأة. علم الأعصاب. 2007.147: 583-591. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Hope B، Kosofsky B، Hyman SE، Nestler EJ. تنظيم التعبير الجيني الفوري المبكر وربط AP-1 في نواة الفئران المتكئة بالكوكايين المزمن. Proc Natl Acad Sci US A. 1992.89: 5764-5768. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Hope BT، Nye HE، Kelz MB، Self DW، Iadarola MJ، Nakabeppu Y، Duman RS، Nestler EJ. تحريض مركب AP-1 طويل الأمد يتألف من بروتينات شبيهة بفيروس Fos في الدماغ عن طريق الكوكايين المزمن وغيرها من العلاجات المزمنة. الخلايا العصبية. 1994.13: 1235-1244. [مجلات]
- Kelz MB، Chen J، Carlezon WA، Jr، Whisler K، Gilden L، Beckmann AM، Steffen C، Zhang YJ، Marotti L، Self DW، Tkatch T، Baranauskas G، Surmeier DJ، Neve RL، Duman RS، Picciotto MR، Nestler EJ. التعبير عن عامل النسخ deltaFosB في الدماغ يتحكم في الحساسية للكوكايين. طبيعة. 1999.401: 272-276. [مجلات]
- Kohlert JG، Meisel RL. التجربة الجنسية تحسس النواة المتعلقة بالتزاوج متجاوبة الدوبامين الاستجابات من الهامستر السوري الأنثوي. Behav Brain Res. 1999.99: 45-52. [مجلات]
- Kohlert JG، Rowe RK، Meisel RL. يزيد التحفيز الذكري من الذكور من إطلاق الدوبامين خارج الخلية من الخلايا العصبية التي تم التعرف عليها بواسطة الفلورو داخل الدماغ الأوسط من الهامستر الأنثوي. هورم بيهاف. 1997.32: 143-154. [مجلات]
- Koob GF، Ahmed SH، Boutrel B، Chen SA، Kenny PJ، Markou A، O'Dell LE، Parsons LH، Sanna PP. الآليات العصبية الحيوية في الانتقال من تعاطي المخدرات إلى الاعتماد على المخدرات. علم الأعصاب والمراجعات Biobehavior. 2004.27: 739-749. [مجلات]
- كومار A ، Choi KH ، Renthal W ، Tsankova NM ، Theobald DE ، Truong HT، Russo SJ، Laplant Q، Sasaki TS، Whistler KN، Neve RL، Self DW، Nestler EJ. إعادة تشكيل الكروماتين هي آلية رئيسية وراء اللدونة التي يسببها الكوكايين في المخطط. الخلايا العصبية. 2005.48: 303-314. [مجلات]
- Lee KW و Kim Y و Kim AM و Helmin K و Nairn AC و Greengard P. تكوين العمود الفقري الناجم عن الكوكايين في D1 و D2 مستقبلات الدوبامين المحتوية على مستقبلات الدوبامين في النواة المتكئة. Proc Natl Acad Sci US A. 2006.103: 3399-3404. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Li Y، Kolb B، Robinson TE. موقع التغييرات المستمرة التي يسببها الأمفيتامين في كثافة العمود الفقري شجيري على الخلايا العصبية الشوكية المتوسطة في النواة المتكئة و putamen المذنبة. Neuropsychopharmacology. 2003.28: 1082-1085. [مجلات]
- McClung CA، Nestler EJ. تنظيم التعبير الجيني ومكافأة الكوكايين من قبل CREB و DeltaFosB. نات نيوروسكي. 2003.6: 1208-1215. [مجلات]
- McClung CA، Nestler EJ. العصبية بوساطة تغيير التعبير الجيني. Neuropsychopharmacology. 2008.33: 3-17. [مجلات]
- McClung CA، Ulery PG، Perrotti LI، Zachariou V، Berton O، Nestler EJ. DeltaFosB: مفتاح جزيئي للتكيف على المدى الطويل في الدماغ. دماغ الدقة مول 2004.132: 146-154. [مجلات]
- McDaid J، Graham MP، Napier TC. تثير الحساسية التي يسببها الميثامفيتامين بشكل تفاضلي pCREB و DeltaFosB في جميع أنحاء الدائرة الحوفية للدماغ في الثدييات. مول Pharmacol. 2006.70: 2064-2074. [مجلات]
- Meisel RL، Camp DM، Robinson TE. دراسة عن التحليل الدقيق للديوبامين الفتاك البطني أثناء السلوك الجنسي لدى الهامستر السوري. Behav Brain Res. 1993.55: 151-157. [مجلات]
- Meisel RL ، Joppa MA. تفضيل مكان مشروط في الهامستر الإناث بعد مواجهات عدوانية أو جنسية. فيسيول بيهاف. 1994.56: 1115-1118. [مجلات]
- Meisel RL ، Joppa MA ، Rowe RK. مضادات مستقبلات الدوبامين تخفف من تفضيل المكان المشروط بعد السلوك الجنسي لدى الهامستر السوريات. ياء J Pharmacol. 1996.309: 21-24. [مجلات]
- Meisel RL، Mullins AJ. تجربة جنسية في القوارض الأنثوية: آليات خلوية وعواقب وظيفية. الدماغ الدقة. 2006.1126: 56-65. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Mermelstein PG ، Becker JB. زيادة الدوبامين خارج الخلية في النواة المتكئة ومخطط للفأر الأنثوي خلال السلوك الجمعي يسير بخطى. Behav Neurosci. 1995.109: 354-365. [مجلات]
- Mumberg D، Lucibello FC، Schuermann M، Muller R. الربط البديل للنسخ fosB ينتج عنه mRNAs المعبر عنها تفاضليًا والتي تشفر البروتينات المضادة وظيفية. جينات ديف. 1991.5: 1212-1223. [مجلات]
- Nakabeppu Y، Nathans D. شكل مبتور بشكل طبيعي لـ FosB يثبط نشاط النسخ من Fos / Jun. الخلية 1991.64: 751-759. [مجلات]
- Nestler EJ. الأساس الجزيئي لللدونة على المدى الطويل الكامنة وراء الإدمان. نات ريف نيوروسكي. 2001.2: 119-128. [مجلات]
- Nestler EJ. آليات النسخ من الإدمان: دور deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008.363: 3245-3255. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Norrholm SD، Bibb JA، Nestler EJ، Ouimet CC، Taylor JR، Greengard P. Cocin-induced spread of dendritic spines in nucleus accumbens is based on the activity of cycase-dependent kinase-5. علم الأعصاب. 2003.116: 19-22. [مجلات]
- Nye HE، Hope BT، Kelz MB، Iadarola M، Nestler EJ. الدراسات الدوائية لتنظيم التحريض المستضد ذات الصلة FOS المزمنة من الكوكايين في المخطط والنواة المتكئة. J Pharmacol إكسب ذر. 1995.275: 1671-1680. [مجلات]
- Oades RD ، Halliday GM. نظام tegmental البطني (A10): علم الأحياء العصبية. 1. التشريح والاتصال. الدماغ الدقة. 1987.434(2): 117-165. [مجلات]
- Olausson P، Jentsch JD، Tronson N، Neve RL، Nestler EJ، Taylor JR. ينظم DeltaFosB في النواة المتكئة السلوك المعزز بالغذاء والدافع. ي Neurosci. 2006.26: 9196-9204. [مجلات]
- Peakman MC، Colby C، Perrotti LI، Tekumalla P، Carle T، Ulery P، Chao J، Duman C، Steffen C، Monteggia L، Allen MR، Stock JL، Duman RS، McNeish JD، Barrot M، Self DW، Nestler EJ ، شيفر E. محرض ، تعبير منطقة معينة من الدماغ من متحولة سلبية المسيطرة من ج-يونيو في الفئران المعدلة وراثيا يقلل من الحساسية تجاه الكوكايين. الدماغ الدقة. 2003.970: 73-86. [مجلات]
- Perrotti LI، Weaver RR، Robison B، Renthal W، Maze I، Yazdani S، Elmore RG، Knapp DJ، Selley DE، Martin BR، Sim-Selley L، Bachtell RK، Self DW، Nestler EJ. أنماط متميزة من الحث DeltaFosB في الدماغ من تعاطي المخدرات. تشابك عصبى. 2008.62: 358-369. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Pfaus JG، Damsma G، Wenkstern D، Fibiger HC. النشاط الجنسي يزيد من انتقال الدوبامين في النواة المتكئة ومخطط للفئران الإناث. الدماغ الدقة. 1995.693: 21-30. [مجلات]
- Pierce RC، Kalivas PW. ينتج الأمفيتامين زيادات حساسة في الحركة والدوبامين خارج الخلية بشكل تفضيلي في النواة التي تتساقط قذيفة من الفئران التي تدار الكوكايين المتكرر. J Pharmacol إكسب ذر. 1995.275: 1019-1029. [مجلات]
- Pierce RC، Kalivas PW. نموذج دائرى للتعبير عن التوعية السلوكية لمثيرات نفسية تشبه الأمفيتامين. دماغ الدماغ داء الدقة القس. 1997a.25: 192-216. [مجلات]
- Pierce RC، Kalivas PW. يعدّل الكوكايين المتكرر الآلية التي يطلق بها الأمفيتامين الدوبامين. ي Neurosci. 1997b.17: 3254-3261. [مجلات]
- Pierce RC، Kumaresan V. نظام الدوبامين mesolimbic: المسار المشترك النهائي للتأثير المعزز لعقاقير سوء المعاملة؟ Neurosci Biobehav Rev. 2006.30: 215-238. [مجلات]
- Robinson TE ، Gorny G ، Mitton E ، Kolb B. الكوكايين الإدارة الذاتية يغير مورفولوجيا التشعبات والأشواك الشجيري في النواة المتكئة والقشرة المخية الحديثة. تشابك عصبى. 2001.39: 257-266. [مجلات]
- روبنسون TE ، Kolb B. التعديلات الهيكلية المستمرة في النواة المتكئة والخلايا العصبية القشرة الجبهية المنتجة من قبل الخبرة السابقة مع الأمفيتامين. ي Neurosci. 1997.17: 8491-8497. [مجلات]
- روبنسون TE ، Kolb B. التعديلات في مورفولوجيا التشعبات والأشواك الشجيري في النواة المتكئة والقشرة الجبهية الأمامية بعد العلاج المتكرر مع الأمفيتامين أو الكوكايين. Eur J Neurosci. 1999a.11: 1598-1604. [مجلات]
- يغير Robinson TE ، Kolb B. Morphine بنية الخلايا العصبية في النواة المتكئة والقشرة المخية الحديثة. تشابك عصبى. 1999b.33: 160-162. [مجلات]
- روبنسون TE ، Kolb B. اللدونة الهيكلية المرتبطة التعرض لأدوية سوء المعاملة. الفارماكولوجيا العصبية. 2004.47(ملحق 1): 33 – 46. [مجلات]
- Tzschentke TM. قياس مكافأة مع نموذج تفضيل المكان المشروط: مراجعة شاملة للآثار المخدرات ، والتقدم الأخير والقضايا الجديدة. بروغ Neurobiol. 1998.56: 613-672. [مجلات]
- Ulery PG ، Nestler EJ. تنظيم نشاط النسخ من DeltaFosB بواسطة الفسفرة Ser27. Eur J Neurosci. 2007.25: 224-230. [مجلات]
- Ulery PG، Rudenko G، Nestler EJ. تنظيم استقرار دلتا فوسب بواسطة الفسفرة. ي Neurosci. 2006.26: 5131-5142. [مجلات]
- Wallace DL، Vialou V، Rios L، Carle-Florence TL، Chakravarty S، Kumar A، Graham DL، Green TA، Kirk A، Iniguez SD، Perrotti LI، Barrot M، DiLeone RJ، Nestler EJ، Bolanos-Guzman CA. تأثير DeltaFosB في النواة المتكئة على السلوك الطبيعي المرتبط بالثوابت. ي Neurosci. 2008.28: 10272-10277. [بك المادة الحرة] [مجلات]
- Werme M، Messer C، Olson L، Gilden L، Thoren P، Nestler EJ، Brene S. Delta FosB ينظم تشغيل العجلات. ي Neurosci. 2002.22: 8133-8138. [مجلات]
- Winstanley CA، LaPlant Q، Theobald DE، Green TA، Bachtell RK، Perrotti LI، DiLeone RJ، Russo SJ، Garth WJ، Self DW، Nestler EJ. تحريض DeltaFosB في القشرة الأمامية المدارية يتوسط التسامح مع الخلل المعرفي الناجم عن الكوكايين. ي Neurosci. 2007.27: 10497-10507. [مجلات]
- الذئب ME ، الشمس X ، Mangiavacchi S ، تشاو SZ. المنشطات النفسية الحركية واللدونة العصبية. الفارماكولوجيا العصبية. 2004.47(ملحق 1): 61 – 79. [مجلات]
- Zachariou V، Bolanos CA، Selley DE، Theobald D، Cassidy MP، Kelz MB، Shaw-Lutchman T، Berton O، Sim-Selley LJ، Dileone RJ، Kumar A، Nestler EJ. دور أساسي للدلتا فوسب في النواة المتكئة في عمل المورفين. نات نيوروسكي. 2006.9: 205-211. [مجلات]
;