دور hypocretin (orexin) في السلوك الجنسي الذكري (2007)

ي Neurosci. 2007 Mar 14;27(11):2837-45.

Muschamp JW1, Dominguez JM, ساتو س, شين راي, هال EM.

ملخص

دور الخلايا العصبية في hypocretin (orexin ؛ hcrt / orx) في تنظيم الإثارة هو أمر راسخ.

في الآونة الأخيرة ، تورط hcrt / orx في المكافآت الغذائية والسلوكيات التي تبحث عن المخدرات. نذكر هنا أنه في الفئران الذكورية ، تزداد فعالية المناعة المناعية (ir) في الخلايا العصبية hcrt / orx بشكل ملحوظ أثناء التزاوج ، بينما ينتج الإخصاء انخفاضًا في تعداد خلايا الخلايا العصبية hcrt / orx ومستويات البروتين في دورة زمنية تتسق مع اختلالات ما بعد البث في السلوك الدوري.

تم عكس هذا التأثير عن طريق استبدال استراديول. لم يكشف الوسم المناعي لمستقبلات الأندروجين (AR) والإستروجين (ER alpha) عن أي تزاوج بين hcrt / orx مع AR وعدد قليل من الخلايا العصبية hcrt / orx التي تعبر عن ألفا ER ، مما يشير إلى أن التنظيم الهرموني لتعبير hcrt / orx يتم عبر وارد من الخلايا العصبية التي تحتوي على تلك المستقبلات. نوضح أيضًا أن الإدارة المنهجية لمضاد مستقبلات orexin-1 SB 334867 [N- (2-methyl-6-benzoxazolyl) -N "-1,5،4-naphthyridin-1-yl urea] يضعف السلوك الجماعي. قد يكون أحد الأماكن للتأثيرات الجنسية لـ hcrt / orx هو المنطقة السقيفية البطنية (VTA). نوضح هنا أن hcrt-XNUMX / orx-A ينتج زيادات تعتمد على الجرعة في معدل إطلاق النار والنشاط السكاني للخلايا العصبية VTA الدوبامين (DA) في الجسم الحي. قد يساهم تنشيط hcrt / orx أثناء الجماع ، وبالتالي إثارة الخلايا العصبية VTA DA بواسطة hcrt / orx ، في الزيادات القوية في النواة المتكئة DA التي لوحظت سابقًا أثناء السلوك الجنسي للذكور. أظهر الوسم المناعي الثلاثي اللاحق في VTA الأمامي أن Fos-ir في الخلايا العصبية الإيجابية للتيروزين هيدروكسيلاز المطبقة على ألياف hcrt / orx تزداد أثناء الجماع.

تدعم هذه البيانات مجتمعة الرأي القائل بأن الببتيدات hcrt / orx قد تعمل بطريقة حساسة للستيرويد لتسهيل السعي وراء تنشيط المكافآت الطبيعية مثل الجنس عن طريق تنشيط نظام DA mesolimbic.

المُقدّمة

منذ اكتشافه في 1990s (de Lecea et al.، 1998; ساكوراي وآخرون ، 1998) ، تم النظر في نظام hypocretin (orexin ؛ hcrt / orx) بشكل رئيسي في سياق السلوك الاستثنائي والابتلاعي (Sutcliffe and de Lecea، 2002; سيجل ، 2004). تعرض الفئران المسوخية ذات إشارة hcrt / orx الضعيفة أنماطًا غير متساوية من الإثارة تتميز بتحولات متكررة بين النوم واليقظة (موتشيزوكي وآخرون ، 2004). يُعتقد أن الببتيدات hcrt / orx تسهل الإثارة غير المنقطعة من خلال الإسقاطات القوية لمجموعات الخلايا الأمينية النشطة في أعقاب الدماغ (على سبيل المثال ، locus ceruleus ، raphe) (بيرون وآخرون ، 1998; نامبو وآخرون ، 1999; Saper et al.، 2005). بالإضافة إلى توقعاتهم للمواقع التي تنظم اليقظة والإثارة ، فإن الخلايا العصبية hcrt / orx تتنبأ أيضًا بأصل مسار الدوبامين mesolimbic dopamine (DA) في منطقة tegmental البطنية (VTA) (فاضل وديوتش ، 2002). دفع هذا النمط من الاتصال عددًا من مجموعات البحث لتقييم دور hcrt / orx في التعزيزات المتعلقة بالمكافآت (DiLeone et al.، 2003; هاريس وآخرون ، 2005; هاريس وأستون جونز ، 2006).

دراسات على الحيوانات المتحركة libitum الإعلانية تبين أن الخلايا العصبية hcrt / orx تزيد من معدل إطلاقها خلال فترات السلوك الاستكشافي المنشط (Mileykovskiy et al.، 2005) وهذا المخرج الحركي المحسن بعد ضخ hcrt / orx داخل البطينات يتم تخفيفه بواسطة حصار مستقبلات DA (ناكامورا وآخرون ، 2000). أظهرت دراسات أخرى زيادة نشاط خلية DA المختبر بواسطة hcrt / orx (Korotkova وآخرون ، 2003) ، وكذلك النواة المعززه تتكلف (NAc) DA الافراج في الجسم الحي بعد تطبيق hcrt / orx إلى VTA (ناريتا وآخرون ، 2006). في الآونة الأخيرة ، وجدت الدراسات السلوكية أن تنشيط نظام hcrt / orx قد يكون جزءًا لا يتجزأ من الدافع لعقاقير سوء المعاملة (Boutrel et al.، 2005; هاريس وآخرون ، 2005; Borgland et al.، 2006) ، بالإضافة إلى المكافآت الغذائية الطبيعية التي يتم تحديد قوتها التعزيزية بشكل متماثل من خلال الهياكل المهاد (Hoebel ، 1969; Rolls et al.، 1980; فولتون وآخرون ، 2000; Thorpe et al.، 2005).

مثلما يمكن لـ hcrt / orx الخارجية تعزيز التغذية والبحث عن الطعام (كوتز ، 2006) ، التسريب داخل المقلة من hcrt / orx يسهل السلوك الجنسي لدى الفئران الذكور (جوليا وآخرون ، 2003). في ضوء الدراسات الكلاسيكية التي نشأت فيها التغذية أو السلوك الذكري الجمعي عن طريق التحفيز الكهربائي للمواقع في منطقة ما تحت المهاد الجانبية (LHA) والتي يُعرف الآن أنها تحتوي على الخلايا العصبية hcrt / orx (فوجان وفيشر ، 1962; Caggiula و Hoebel ، 1966; سوانسون وآخرون ، 2005) ، سعينا للحصول على أدلة لتفعيل الخلايا العصبية hcrt / orx أثناء الجماع ولضعف السلوك عن طريق مستقبلات orexin-1 (OX1الحصار. قمنا أيضًا بتقييم تنظيم الغدد الصم العصبية لنظام hcrt / orx عن طريق قياس تأثيرات الإخصاء واستبدال الهرمونات على محتوى hcrt / orx المركزي وبمضاعفة التطعيم المناعي لمستقبلات hcrt / orx وهرمونات الستيرويد. أخيرًا ، قمنا بتقييم مدى إمكانية تنشيط نظام DA mesolimbic بواسطة hcrt / orx في الجسم الحي وما إذا كانت الخلايا العصبية DA في VTA التي تتلقى مدخلات hcrt / orx تُظهر زيادة في نشاط المناعة (IR) أثناء التزاوج.

مواد وطرق

فوس المناعية ، والسلوك ، وعدد الخلايا.

تم الاحتفاظ بالبالغين (N325 g) ، ذكور الفئران الطويلة ذات الخبرة الجنسية (هارلان ، إنديانابوليس ، إنديانا) واستخدامها وفقًا للمعاهد الوطنية للصحة مبادئ توجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية، وتمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل اللجان المؤسسية لرعاية الحيوان واستخدامه في الجامعات. في الأسبوع السابق للاختبار ، سُمح لجميع الحيوانات بإجراء أربع جلسات تجربة جنسية لمدة ساعة واحدة يوميًا مع أنثى مستأصلة المبيض تم إحضارها إلى الشبق بواسطة إستراديول بنزوات (1 ميكروغرام ، شمسي) والبروجسترون بعد 10 ساعة (48 ميكروغرام ، sc ؛ أعطيت قبل 400 ساعات الاختبار ؛ سيجما ، سانت لويس ، ميزوري). تم إجراء الاختبار السلوكي في جميع التجارب لمدة ساعتين في الفترة الليلية المعتادة للحيوانات في قفص منزلهم تحت ضوء لمبة متوهجة حمراء 4 وات. لتجارب الجماع ، مجموعة واحدة (n = 6) من الذكور تم السماح لهم بالجماع في قفصهم المنزلي مع أنثى شبق لقذف واحد ، وبعد ذلك تمت إزالة الأنثى. ركبت جميع الحيوانات على الفور تقريبًا ودخلت في أقل من 4 دقائق كان متوسط ​​زمن انتقال القذف لهذه المجموعة 632.6 ± 169.64 ثانية (يعني ± SEM ؛ n = 6). مجموعة تحكم (n = 6) للسيطرة على مستوى النشاط. تمت مراقبة هذه الحيوانات بصريًا للتحقق من أنها كانت مستيقظة ونشطة لمدة 15 دقيقة ، والتي تتوافق مع مدة فترة اختبار الجماع للمجموعة التجريبية. تم فتح أغطية الأقفاص وإغلاقها في بداية ونهاية فترة الـ 15 دقيقة هذه ، ولكن بخلاف ذلك ، تركت الحيوانات دون إزعاج. لم يتم استخدام الحيوانات الضابطة التي كانت هادئة خلال هذه الفترة. تم الحكم على الحيوانات بأنها هادئة إذا بدت وكأنها تستريح على جناحها أو في وضعية رأس لأسفل (مقتبس من Espana et al.، 2003). بعد ستين دقيقة من بدء جلسات الجماع أو ملاحظات المراقبة ، تم تخدير الحيوانات بعمق مع الصوديوم بنتوباربيتال (100 ملغ / كلغ) و perfused مع 0.1 m PBS ، الرقم الهيدروجيني 7.4 ، و 4 ٪ بارافورمالدهايد في PBS. كانت العقول محمية بالبرودة في 20٪ السكروز- PBS ، وكان كل مقطع 40 μm ناظم البرد (30 لكل حيوان) من المنطقة المجاورة لسكان خلايا hcrt / orx تحت المهاد مناعيًا لمناطق التحضير المسبق للهرمونات / orx (1: 100؛ ميليبورو Billerica، MA) و Fos (1: 10,000؛ EMD Biosciences، San Diego، CA) مع 3 ′ و 3′-diaminobenzidine (DAB) و DAB المكثفة بالنيكل ، على التوالي ، وفقًا لإجراءات الكيمياء المناعية الموصوفة مسبقًا (Espana et al.، 2003; ساتو وآخرون، 2005). تم إجراء تعداد الخلايا تحت التكبير العالي باستخدام مجهر أوليمبوس (طوكيو ، اليابان) وكاميرا على قسم واحد بمستوى ثابت rostrocaudal (انظر التين 1B,C) (2.45 مم الخلفي إلى bregma) (سوانسون ، 2004). في كل نصف الكرة الأرضية ، تم وضع علامة على الخلايا التي تقع ضمن حقلين لحساب 470 × 630 usingm باستخدام برنامج تحليل الصور الرقمي (Image-Pro Plus ؛ و Media Cybernetics ، و Silver Spring ، MD) ، بواسطة فاحص أعمى لظروف تجريبية. في كل من نصفي الكرة الأرضية ، استخدمت حقول الفرز الجانبية الحدود الخارجية كحدودها الوسطى. تستخدم حقول العد الإنسي الفروسية كحدودها الجانبية. تم تسجيل أعداد خلايا Fos فقط و hcrt / orx فقط وخلايا مزدوجة المسمى مع كل من hcrt / orx و Fos-ir.

الرقم 1. 

زيادة فوس المناعية في الخلايا العصبية hcrt / orx أثناء الجماع. A، Hcrt / orx neuron (على اليمين) تُظهر Fos-ir. شريط النطاق ، 25 ميكرون. Bصورة مجهرية تمثيلية من حقل العد الأيمن في نصف الكرة الأيسر من الذكور غير المحتل. شريط النطاق (في A) ، 200 ميكرون. Cصورة مجهرية من ذكر الذكر. شريط النطاق ، 200 ميكرون. تشير الأسهم إلى الخلايا العصبية hcrt / orx التي تظهر Fos-ir؛ تشير العلامات النجمية إلى نوى Fos-ir في الخلايا غير hcrt / orx ؛ الفوركس ، fornix.

تجارب الإخصاء و immunoblotting.

ذكور بالغ (∼325 g في بداية التجارب) تم تخدير فئران Long-Evans (75 mg / kg ketamine HCl و 10 mg / kg xylazine HCl، ip) ومخصي. سمح للحيوانات 7 ، 14 ، أو 28 d بفترة البقاء على قيد الحياة بعد الجراحة قبل تخديرها و perfused وتمتعت عقولهم المناعية لل prepro-hrt / orx كما هو مذكور أعلاه (جميع المجموعات ، n = 5). وتمت مقارنة هذه الحيوانات مع مجموعة جراحة الشام التي تلقت شق كيس الصفن تحت التخدير متطابقة (n = 5). قتل شمس أيضا في 28 د. تم إجراء تعداد الخلايا على النحو الوارد أعلاه في نفس الطائرة الإكليلية تحت التكبير السفلي.

في تجربة منفصلة ، يقوم 28 d بإخصاء (n = 5) والضوابط المعاملة الشام (n = 5) تم تخديرها بعمق باستخدام بنتوباربيتال الصوديوم (100 مجم / كجم) ، وتمت إزالة أدمغتهم وتجميدها بسرعة في 2 ميثيل بوتان مبردة بالثلج الجاف. بعد ذلك تم حظر ما تحت المهاد المتجمد من خلال قطعتين إكليليتين ، أحدهما من خلال منطقة ما قبل الجراحة الإنسي (mPOA) فقط منقاري إلى فك المفصل الأمامي ، والآخر من خلال نواة الوطاء الخلفية فقط والذيلية لتقسيم البطين الثالث إلى منطقة تحت المهاد و تجاويف الثدي. تم قطع الكتل بعد ذلك بقطعين سهميين في الطرف الإنسي لأي من السويقة الدماغية وبقطع أفقي عند الطرف الظهري للبطين الثالث العطلة تحت المهاد. تم بعد ذلك تجانس كتل الأنسجة مع صوتنة ، وتم استخراج البروتين في محلول ترسيب مناعي إشعاعي معدل ، درجة الحموضة 8.0 ، مع مثبطات الأنزيم البروتيني (خليط بروتياز Roche Complete Mini ؛ Roche Diagnostics ، Indianapolis ، IN) ، وتم اقتطاع المستخلصات بعد الطرد المركزي. بعد تحديد تركيز البروتين الكلي للمستخلصات من كل موضوع ، تم تحميل 40 ميكروغرام من البروتين من كل حيوان في آبار منفصلة من هلام SDS-PAGE 15٪. تم إجراء الفصل الكهربي ، النقل إلى أغشية البولي فينيلدين ثنائي فلوريد (Bio-Rad ، Hercules ، CA) ، ووضع العلامات المناعية وفقًا لطريقة Laemmli (كليفلاند وآخرون ، 1977) ، باستخدام 1: 1000 من الجسم المضاد المضاد لـ prepro-hrt / orx المُشار إليه سابقًا ، ولاحقًا 1: 2000 anti-β-actin (Sigma) و 1: 5000: goat anti-rabbit IgG (Santa Cruz Biotechnology، Santa Cruz، Technology ) في الحليب المجفف 5 ٪ في المياه المالحة تريس مخزنة. تم تصوير أشرطة البروتين من خلال مجموعة التلألؤ المعزز (ECL ، GE Healthcare ، Piscataway ، NJ) و Kodak (Rochester ، NY) BioMax. تم الكشف عن أفلام 40 s وتم مسحها ضوئيًا ، وتم قياس الكثافة الضوئية باستخدام برنامج ImageJ المتاح للجمهور. لكل حيوان ، تم تحديد قيم الكثافة البصرية لـ hcrt / orx كنسبة مئوية من التحكم في تحميل β-actin وتخضع للتحليل الإحصائي.

في تجربة ثالثة ، تم إعطاء الفئران الذكور كما هو موضح أعلاه عمليات جراحية صورية (n = 3) أو مخصي وحقن كل يوم ثاني من أجل 28 d مع dihydrotestosterone (500 μg، sc؛ n = 4) ، استراديول بنزوات (20 μg، sc؛ n = 3) ، أو مركبة زيتية (0.1 μl ؛ n = 3). تم شراء كل من الهرمونات من سيغما. تم اختيار جرعات هرمون لقدرتها في الدراسات السابقة على الحفاظ على الجمود في الخصية (بوتنام وآخرون ، 2005). في اليوم 28th بعد العمليات الجراحية ، تم قتل الحيوانات ، وتم حظر ما تحت المهاد من قبلهم لقياس محتوى ما قبل البروتينات السرطانية / السرطانية من قبل immunoblot الغربي كما هو موضح أعلاه.

مستقبلات هرمون الستيرويد و hcrt / orx مزدوجة المناعية.

كانت أقسام الدماغ من LHA من الذكور البالغين ساذجة جنسيا (∼350 ز) الفئران طويلة إيفانز تم immunolabeled لمستقبلات الاندروجين (AR) (1: 750 ؛ n = 6 ؛ Santa Cruz Biotechnology) أو مستقبلات هرمون الاستروجين (ERα) (1: 2500 ؛ n = 9 ؛ Santa Cruz Biotechnology) باستخدام DAB المكثف بالنيكل. بعد ذلك ، تم تمييز الأقسام ذات العلامات AR بشكل مسبق لـ prepro-hcrt / orx (كما هو مذكور أعلاه) ، وكانت الأقسام التي تحمل علامة ERα مزدوجة الملون لـ prepro-hcrt / orx (n = 5). بعد التركيب ، المقاطع التي تطابقت بشكل وثيق واحدة من أربع طبقات الاكليلية من LHA في أطلس سوانسون (2004) تم رسمها يدوياً تحت المجهر باستخدام ملحق كاميرا لوسيدا ، وتم وضع علامة على خلايا مزدوجة ومفردة في كل قسم. تم مسح الرسومات رقميًا وتثبيتها على مستويات الأطلس باستخدام Adobe (San Jose، CA) Illustrator ، وتم تعيين كل مجموعة من الخلايا على الرسوم التوضيحية أطلس (سوانسون ، 2004). في حالة أقسام ERα-plus-hcrt / orx المسمى ، تم حساب أعداد الخلايا العصبية hcrt / orx المزدوجة والمفردة.

علم الادوية والسلوك الجماعى.

ذكور بالغ (∼350 g في بداية التجارب) جرذان طويلة إيفانز (n = 9) تم إعطاؤهم أربع جلسات تجربة جنسية لمدة ساعة واحدة مع أنثى متقبلة جنسيًا خلال الأسبوع الذي يسبق الاختبار السلوكي. تم استبعاد الحيوانات التي فشلت في القذف مرة واحدة على الأقل خلال أول 1 دقيقة من الاختبار النهائي من التجربة. تم إجراء جلسات الخبرة والاختبار السلوكي تحت 30 وات من الضوء المتوهج الأحمر لمدة ساعتين في الفترة الليلية للحيوان. تم إجراء اختبارات السلوك الجماعي في قفص منزل الذكر واستغرقت 40 دقيقة. تم تسجيل السمات المميزة لسلوك الجماع الذكوري (على سبيل المثال ، الحركات ، والدخول ، والقذف) بواسطة مراقب أعمى عن العلاجات التجريبية باستخدام برنامج كمبيوتر مخصص يسجل بيانات التردد والكمون لكل حدث سلوكي. قبل ثلاثين دقيقة من الاختبار السلوكي ، تم حقن الحيوانات إما بـ OX1 خصم N- (2 ميثيل 6-benzoxazolyl) -N "-1,5،4-naphthyridin-334867-yl اليوريا (SB 20) (0.5 مجم / كجم ، IP) أو مركبة DMSO (48 مل / كجم). اتبعت التجربة تصميمًا بسيطًا متوازنًا داخل الأشخاص ، بحيث تلقت خمسة حيوانات حقنًا بالمخدرات في اختبار اليوم الأول ، بينما تلقت الحيوانات الأربعة المتبقية سيارة. بعد XNUMX ساعة من غسل المخدرات ، أعطيت الحيوانات التي عولجت بالمخدرات في اليوم الأول سيارة والعكس صحيح.

الكهربية.

تم تخدير فئران Sprague Dawley الذكور البالغة (∼350 g) مع هيدرات كلورال (400 mg / kg ، ip للتحريض ؛ 100 mg · kg-1 · ح-1 بعد ذلك للصيانة) والتي شنت على أداة التجسيمي. تمت إزالة الجمجمة والجافية فوق منطقة جذع الدماغ التي تحتوي على VTA. تلقى كل حيوان لأول مرة ضخ CSF الاصطناعي (aCSF) [0.5 μl / 5 min؛ من لامدا ، الأمامي الخلفي ، + 2.6 أو + 3.4 ؛ متعدد الأضلاع ، ± 0.8 mm ؛ dorsoventral ، N7.0 مم ؛ جمجمة مسطحة وفقًا لأطلس التجسيمي (Paxinos و Watson ، 1998)] ، مع حقنة هاميلتون 32 ga (0.5 μl / 5 دقيقة) على جانب واحد من VTA. بعد ذلك ، بعد 10 دقيقة ، تم إجراء أخذ عينات الخلايا لكل مسار على الجانب المماثل من VTA. تلقت الحيوانات بعد ذلك ضخ hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol ، n = 4 ؛ 1.4 nmol ، n = 5 ؛ أو 140 nmol ، n = تم حل 6 في aCSF ؛ الببتيد الأمريكي ، سانيفيل ، كاليفورنيا) في VTA المقابل قبل تكرار إجراء الخلايا لكل مسار على هذا الجانب. تمت موازنة الحقن بنصف الكرة وبموقع الحقن الأمامي أو الخلفي. تم إجراء تسجيلات وحدة واحدة خارج الخلية مع micropipettes الزجاج أحادية البرميل (القطر الخارجي 1.5 ملم قبل سحب ؛ الآلات الدقيقة العالمية ، Sarasota ، FL) مليئة 2 m NaCl وكسر الظهر. تراوحت مقاومة القطب من 2 إلى 4 MΩ عند 135 Hz. تم تحديد الخلايا العصبية DA من قبل إمكانات العمل خارج الخلية الإيجابية-السلبية ، والتي غالبا ما يكون كسر الأولي / الحسية الجسدية (IS / SD) بارزة ، ومدة العمل المحتملة واسعة ، ومعدل إطلاق بطيئة ، ونمط إطلاق النار انفجر واحد أو غير منتظمة (نعمة وبني ، 1983). لإجراء تجربة خلايا لكل مسار ، تم تمرير إلكترود التسجيل عبر كتلة محددة تجسيريًا في VTA (2.8-3.4 mm الأمامي إلى lambda ؛ 0.6 - 1.0 mm الجانبي إلى المنتصف ؛ 6.5 - 8.5 مم أسفل سطح الدماغ) ست مرات. تم تسجيل كل الخلايا العصبية DA التي تم تحديدها ل 2 – 5 دقيقة على الإنترنت باستخدام نظام الحصول على البيانات الرسم البياني (أدوات م، ماونتن فيو ، كاليفورنيا). كان متوسط ​​عدد الخلايا العصبية النشطة DA التي تتم مواجهتها تلقائيًا لكل مسار قطبي من كل حيوان (خلايا لكل مسار) هو مؤشر النشاط السكاني للخلايا العصبية VTA DA. تم تحديد متوسط ​​معدل إطلاق الخلايا العصبية DA من جميع الخلايا العصبية DA أخذ عينات من جميع الحيوانات داخل كل مجموعة.

لاختبار إلغاء الاستقطاب في مجموعة 140 nmol hcrt / orx ، أبومورفين حمض الهيدروكلوريك (20 μg / kg، ip؛ n = 4 ؛ كانت تدار Sigma) مباشرة بعد الانتهاء من أخذ العينات بعد hcrt-1 / orx-A. بعد عشر دقائق من حقن الأبومورفين ، تم أخذ عينات من ستة قطب كهربائي إضافي في جانب VTA التي تلقت سابقًا hcrt-1 / orx-A.

السلوك ، ثلاثية المناعية التسمية ، وعدد الخلايا.

تم إعطاء فئران Long-Evans من الذكور البالغين (∼300 g) أربع جلسات خبرة جنسية 1 h مع أنثى تقريبية على النحو الوارد أعلاه. قبل (1 ح) التخدير ، نضح ، وتحضير الأنسجة للتوسيم المناعي ، والحيوانات (n تم السماح = 6) جامع إلى القذف واحد. على النحو الوارد أعلاه ، شنت الحيوانات ودخلت على الفور تقريبا ، وكان يعني الكمون القذف لهذه المجموعة 588.50 ± 85.03 s (يعني ± SEM). تمت مقارنة المجموعة التجريبية مع عناصر التحكم ذات الخبرة الجنسية التي لم يتم منحها إمكانية الوصول إلى الإناث الشهيقية للتزاوج (n = 6). على النحو الوارد أعلاه ، تم إجراء الاختبار لمدة ساعتين في الفترة الليلية المعتادة للحيوان تحت الضوء المتوهج الأحمر. بعد قتل الحيوانات وتثبيتها وتقطيعها على البارد (كما هو مذكور أعلاه) ، تم اختيار أربعة أقسام من كل حيوان تمثل أربعة مستويات من الروستروكاودال من VTA للكيمياء المناعية. لعدد الموضوعات (n) تستخدم لتعداد الخلايا في كل مستوى ، انظر الجدول 4. تم تصنيف الأقسام لـ Fos (1: 7500 ؛ Santa Cruz Biotechnology) مع DAB على النحو الوارد أعلاه. بعد ذلك ، تم وضع علامات على الأقسام لمادة prepro-hcrt / orx (1: 500) وهيدروكسيلاز التيروزين (TH ؛ 1: 2000 ؛ ميليبور) مع الأجسام المضادة الثانوية السيانين مترافق (1: 200 ؛ Cy3 و Cy2 ، على التوالي ؛ جاكسون ImmunoResearch ، ويست جروف ، PA). أجريت تعداد الخلايا تحت التكبير (40 ×) عالية على لايكا (Nussloch ، ألمانيا) باستخدام مجهر DM 4000B محقق ستيريو برنامج (MBF Bioscience، Williston، VT) بواسطة مجرب أعمى لظروف العلاج. محقق ستيريو تم استخدام البرنامج لتحديد حقل العد الذي تضمن جميع خلايا DA داخل كل مستوى من VTA. على طول بؤري واحد في كل من المستويات الأربعة المنبثقة من VTA ، تم وضع علامة على خمسة أنواع من الخلايا: الخلايا العصبية الإيجابية TH ، الخلايا العصبية الموجبة TH التي تظهر Fos-ir ، الخلايا العصبية الموجبة TH والتي تظهر مباشرة (على البلازمالما الجسدية) بواسطة hcrt / ألياف orx ، الخلايا العصبية الموجبة TH تظهر كلاً من Fos-ir و hcrt / orx ، وأخيراً ، نوى موجبة Fos إيجابية ليست في الخلايا العصبية TH.

تحليل البيانات.

وتمت مقارنة الوسائل الجماعية لتعداد الخلايا في تجربة Fos ومقاييس الكثافة البصرية للبقع الغربية من التجربة الأولى بواسطة عينات مستقلة t اختبار. المطابقة عينات t تم إجراء الاختبار على وسائل من OX1 تجربة سلوكية معادية. تعرض تعداد الخلايا في الإخصاء ، وتجارب وضع العلامات الثلاثية ، وتعني معدل إطلاق النار وتدابير الخلايا لكل مسار لأنوفا.

النتائج

يزيد الجماع من نقص المناعة في الخلايا العصبية hcrt / orx

اختلفت النسبة المئوية لخلايا hcrt / orx-ir التي أظهرت Fos-ir بشكل كبير بين المجموعات ، حيث أظهرت الحيوانات المنتقلة زيادة Fos-ir في خلايا hcrt / orx (t(10) = 7.71؛ p <0.01) (الجدول 1, التين 1). اختلف متوسط ​​عدد hcrt / orx مزدوج المسمى أيضًا بشكل كبير بين المجموعات (t(10) = 6.03؛ p <0.001). بشكل ملحوظ ، في تزاوج الحيوانات ، لم يتم الكشف عن أي اختلاف في عدد الخلايا العصبية hcrt / orx إيجابية Fos بين حقول العد الإنسي والجانبي (البيانات غير معروضة) (هاريس وأستون جونز ، 2006). كان العدد الإجمالي لمتوسط ​​نوى Fos-ir (الخلايا العصبية hcrt / orx التي تحتوي على فوس فقط ووسم مزدوج التسمية) أكبر بشكل كبير في الحيوانات المتولدة مقارنة بالضوابط غير المحصنة (t(10) = 16.97؛ p <0.001) (الجدول 1).

الجدول 1. 

زيادة Fos-ir خلال الجماع في الخلايا العصبية hxrt / orx من الفئران الذكور

الإخصاء يقلل من نقص نشاط البروتين hcrt / orx والبروتين في منطقة ما تحت المهاد

عند مقارنتها بالضوابط المعالجة بشكل خبيث ، أظهرت تعداد الخلايا العصبية hcrt / orx-ir انخفاضًا كبيرًا في عدد الخلايا 28 d بعد الإخصاء (التين 2A()F(3,16) = 7.60؛ p <0.005). يمثل هذا انخفاضًا بنسبة 31.8٪ في عدد الخلايا في المجموعة السكانية المرصودة. وظيفة كشف اختبار (توكي) عن عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين تهم الفئران التي عولجت بطريقة غير مشروعة أو قواقع 7 أو 14 d. وجد التحليل اللاحق للغربي المناعي الغربي لما قبل الهيبرت / أوركس ما تحت المهاد انخفاضًا كبيرًا في متوسط ​​الكثافة البصرية لنطاقات hcrt / orx من خواص 28 d بالمقارنة مع عناصر التحكم المعالجة بالشام (التين 2B()t(8) = 2.99؛ p <0.05.).

الرقم 2. 

الإخصاء يقلل hcrt / orx-ir في المهاد الجرثومي الذكري. A، صورة مجهرية تمثيلية من الخلايا العصبية المسمى بـ hcrt / orx في نصف كرة واحد تظهر انخفاضات كبيرة في عدد الخلايا بواسطة 28 d بعد الإخصاء. القيم الداخلية هي متوسط ​​عدد الخلايا لكل من نصفي الكرة الأرضية ؛ **p <0.005. شريط النطاق ، 200 ميكرومتر ؛ fx ، fornix. B، تُظهر الكُتَب المناعية الغربية انخفاضًا كبيرًا في ما قبل البلوتونيوم / hxrt / orx لـ 28 d. تمثل كل فرقة إشارة من حيوان واحد في أي من المجموعتين. القيم هي متوسط ​​الكثافة الضوئية (SEM) لوحدات hcrt / orx بالنسبة لـ act-actin ؛ *p <0.05. C، Immunoblots for prepro-hcrt / orx in 28 d castates show E2 للحفاظ على محتوى hcrt / orx مهاد معادل لمحتوى الشمس عند مقارنته مع عناصر التحكم المعالجة بالزيت. المجموعات التي لها نفس الحرف الصغير لا تختلف اختلافًا كبيرًا (p <0.05).

استراديول يستعيد مستويات البروتين hcrt / orx المهاد

في 28 d بعد عملية الإخصاء أو الجراحة الخبيثة ، كانت مستويات ما قبل المعالجة بـ hcrt / orx في الحيوانات المعالجة بالزيت أقل بكثير من تلك الخاصة بالشام والإستراديول (E2) المجموعات المعالجة (F(3,9) = 8.47؛ p <0.005) (التين 2C). ANOVA في اتجاه واحد مع اللاحق وجدت اختبارات (Tukey) أن مستويات prec-hcrt / orx تقاس بالشام والعين2- الحيوانات المعالجة لم تختلف عن بعضها البعض وأن E2 لم مجموعة لا تختلف عن الحيوانات المعالجة DHT.

ERα مترابط مع hcrt / orx ويتعايش في مجتمع متميز تشريحيا من خلايا hcrt / orx العصبية

تمت إزالة AR النووية بطنيًا من مجموعة الخلايا العصبية hcrt / orx الرئيسية ، وتنتشر بشكل متوسط ​​من النواة المقوسة إلى السبيل البصري. لم يتم العثور على ARs النووية و hcrt / orx في نفس الخلية العصبية في أي حالة (البيانات غير معروضة). على الرغم من أن ERα أظهرت نمطًا مشابهًا للتوزيع في المدى البطني لمنطقة ما تحت المهاد ، إلا أن وضع العلامات على ERα كان أكثر شمولاً في النواة البطنية. بشكل أكثر ظهريًا ، تم العثور على علامات ERα في نطاقات مدببة من الخلايا التي امتدت وسطيًا من الكبسولة الداخلية أسفل المنطقة الداخلية إلى منطقة ما تحت المهاد الظهري (DMH). نادراً ما تم العثور على ملصق ERα في الخلايا العصبية hcrt / orx (<1 ٪ من السكان الذين شملهم الاستطلاع). عندما شوهد أن ERα تتجمع مع hcrt / orx ، كان عادةً في الخلايا العصبية داخل أو مجرد منقاري إلى DMH (التين 3). وهكذا ، على الرغم من قلة عدد الخلايا العصبية التي تحتوي على hcrt / orx في منطقة ما تحت المهاد ، فإنها تعبر عن ERα ، إلا أن نسبة عالية (∼65٪) من تلك الموجودة في DMH أو بالقرب منها (التين 3).

الرقم 3. 

ERα هو coextensive مع hcrt / orx. يتم تمثيل نوى ERα بدوائر مغلقة ، ويتم تمثيل الخلايا العصبية hcrt / orx بدوائر مفتوحة ، ويتم تمثيل خلايا ERα plus hcrt / orx ذات التسمية المزدوجة بالنجوم. الأرقام في ملليمتر الذيلية إلى bregma. AHN ، نواة المهاد الأمامية. الفوركس ، fornix. بعد التمديد ، القناة البصرية. PVN ، النواة شبه البطينية. VMH ، تحت المهاد البطني. 3v ، البطين الثالث.

Hcrt / orx الحصار مستقبلات يضعف الجماع

مقارنة مع السيارة ، والمعالجة المسبقة مع OX1 زاد مضادات SB 334867 متوسط ​​زمن الانتقال إلى الاختراق وانخفض معدل تكرار القذف (الجدول 2). إقران عينات t كشفت الاختبارات عن وجود تأثير كبير لـ SB 334867 على اختفاء التداخلt(8) = 3.31؛ p <0.05) وتكرار القذف (t(8) = 2.40؛ p <0.05). يبدو أن العلاج بالعقاقير ينتج عنه زيادات غير مهمة في متوسط ​​زمن الوصول إلى الارتفاع والقذف وانخفاض متوسط ​​عدد المداخل (الجدول 2).

الجدول 2. 

OX1 الخصم X SBNNX يضعف سلوك الجماع الذكري

يزيد Hcrt-1 / orx-A من معدل إطلاق الخلايا العصبية VTA DA ونشاط السكان ويؤدي إلى تعطيل الاستقطاب

أقل جرعة من hcrt-1 / orx-A (0.014 nmol) زادت معدل إطلاق الخلايا العصبية VTA DA مقارنة مع أدوات التحكم في السيارة (التين 4B,C) (وأنا أتفق مع المشاركات السابقة؛ F(1,18) = 13.83، p <0.01 ؛ بعد أنوفا 2 × 3 مختلطة ، F(1,10) = 13.67، p <0.005) ، ولكن لم يكن لجرعة أخرى من hcrt-1 / orx-A هذا التأثير. تبدو هذه الجرعة مسؤولة عن التأثير الرئيسي الهام لـ hcrt / orx على معدل إطلاق النار المكتشف في 2 × 3 ANOVA. أ اللاحق (توكي) كشف اختبار عدم وجود فرق كبير في معدل بين مجموعات المراقبة aCSF المعالجة عبر الجرعة. زادت جرعة 1.4 nmol من hcrt-1 / orx-A زيادة كبيرة في نشاط الخلايا العصبية VTA DA (عدد الخلايا العصبية النشطة تلقائيًا المكتشفة في كل مسار قطبي كهربائي)التين 4D) (وأنا أتفق مع المشاركات السابقة، F(1,24) = 6.42، p <0.05 ؛ بعد تفاعل كبير في أنوفا مختلطة 2 × 3 ، F(2,10) = 16.71، p <.001). أدت أعلى جرعة من hcrt-1 / orx-A التي تم اختبارها (140 نانومول) إلى انخفاض كبير في النشاط السكاني للخلايا العصبية DA (الخلايا لكل مسار) (التين 4D) (التدابير المتكررة أحادية الاتجاه ANOVA على جرعة NNOL من 140 ، F(2,6) = 12.20؛ p <0.01). تم عكس هذا الانخفاض عن طريق الحقن الجهازي للأبومورفين (Tukey's اللاحق اختبار).

الرقم 4. 

Hcrt / orx ينظم نشاط الخلايا العصبية VTA DA في الجسم الحي. A، شكل موجة من الخلايا العصبية VTA DA نموذجية تظهر إمكانات عمل واسعة مميزة وكسر IS / SD. B، أعلى ، معدل إطلاق النار ونمط الخلايا العصبية التي عولجت بنفس السيارة والتي تظهر نشاط انفجار نموذجي ؛ في الأسفل ، لوحظ وجود عصبون سريع النيران بعد التسريب الموضعي لـ 0.014 nmol من hcrt 1 / orx A (n = 4). C, Dعلاقة الجرعة بـ hcrt-1 / orx-A المصبوبة محلياً على معدل إطلاق النار والخلايا السكانية لخلايا VTA DA. Hcrt-1 / orx-A (1.4 nmol؛ n = 5) يزيد النشاط السكاني. انخفاض النشاط السكاني بعد 140 nmol من hcrt 1 / orx A (n = تم عكس 4) بواسطة الأبومورفين النظامي (20 ميكروغرام / كجم). يوضح الرقم الموجود داخل كل شريط عدد الخلايا العصبية المسجلة. تظهر وسائل means SEM. *p <0.05 ؛ **p <0.01.

تظهر الخلايا العصبية VTA الموجبة مع TH hcrt / orx تطبيقات زيادة في Fos-ir بعد الجماع

وأظهرت ANOVA في اتجاهين على متوسط ​​عدد نوى Fos-ir في الخلايا العصبية غير TH الإيجابية آثار كبيرة من العلاج (F(1,38) = 38.88؛ p <0.001) والمستوى التشريحي (F(7,38) = 12.59؛ p <0.001) ، بالإضافة إلى تفاعل كبير بين هذين العاملين (F(7,38) = 7.45؛ p <0.001) ، مما يشير إلى أن Fos المستحث أثناء الجماع يظهر بشكل تفضيلي في مستويات العد الأمامي. تم تأكيد ذلك من خلال ANOVA و اللاحق اختبارات (Tukey) ، والتي تكشف عن مستويي anteriormost ("rostral" و "1 الأوسط") للحصول على أعداد أكبر بكثير من نوى Fos الإيجابية (F(3,24) = 9.48؛ p <0.001). لم يكن الأمر نفسه صحيحًا بالنسبة لعناصر التحكم غير السكانية ، حيث لم تختلف Fos-ir القاعدية حسب المستوى (الجدول 3). لم تختلف النسبة المئوية للخلايا العصبية المسمى بـ TH مع تطبيقات hcrt / orx عن طريق المعالجة التجريبية ؛ ومع ذلك ، فإن هذا التدبير أظهر تدرجًا مستقيماً ملحوظاً ، مع وجود مستوى أعلى بكثير من هذه الخلايا العصبية في هذه المجموعات العصبية في كلا المجموعتين (الجدول 4()F(3,38) = 133.57؛ p <0.001). تتوافق هذه النتيجة مع الكثافة العالية لألياف hcrt / orx التي لاحظناها في VTA الأمامي. لا تختلف النسبة المئوية للخلايا العصبية التي تحمل علامة TH والتي تظهر Fos-ir (ولكن ليس لها توصيفات hcrt / orx) عن طريق العلاج أو مستوى rostrocaudal. أظهرت النسبة المئوية للخلايا العصبية في TH التي تُظهر توصيفات Fos و hcrt / orx تأثيرًا كبيرًا في العلاج (F(1,38) = 8.62؛ p <0.01) ، المستوى (F(3,38) = 4.53؛ p <0.01) ، وتفاعلهم (F(3,38) = 4.53؛ p <0.01). يشير ANOVA أحادي الاتجاه على الوسائل من المجموعة التجريبية إلى أن Fos-ir الناجم عن الجماع في الخلايا العصبية TH مع تطبيقات hcrt / orx يحدث بشكل بارز داخل الخلايا الموجودة في المنقار VTA (F(3,24) = 4.85؛ p <0.05).

الجدول 3. 

عدد نوى Fos-ir في خلايا VTA غير الإيجابية في أربعة مستويات rostrocaudal

الجدول 4. 

النسبة المئوية للخلايا العصبية TH التي تعرض تطبيقات hcrt / orx أو Fos أو كليهما

مناقشة

تشير زيادة Fos-ir في الخلايا العصبية hcrt / orx في LHA بعد التزاوج إلى أن تنشيط هذه الخلايا يصاحب السلوك التناسلي الذكري (مورغان و كوران ، 1991). تتوافق هذه المعطيات مع دراسات 2-deoxyglucose المبكرة التي أبلغت عن زيادة نشاط التمثيل الغذائي في LHA بعد التعرض لرائحة الإناث الشهية (Orsini et al.، 1985). قد يعكس هذا التأثير انتقال hcrt / orx معززًا في المناطق الطرفية للخلايا العصبية hcrt / orx مثل mPOA ، حيث تم إظهار hcrt / orx لتسهيل سلوك copulatory للذكور (جوليا وآخرون ، 2003). يتوافق تحريض Fos المرتبط بالجنس في الخلايا العصبية hcrt / orx مع فكرة أن الخلايا العصبية hcrt / orx حساسة للمعززات الطبيعية. أظهرت دراسة حديثة أن Fos-ir زادت في الخلايا العصبية hcrt / orx للفئران التي تم تكييفها لتوقع مكافأة غذائية وأن هذه الزيادة في Fos-ir مرتبطة بدرجة تفضيل الحيوانات في نموذج تفضيل المكان المشروط (هاريس وآخرون ، 2005). قد يكون تنشيط الخلايا العصبية لـ hcrt / orx ظاهرة مرتبطة بالمكافأة ، لأن الدراسة المذكورة أعلاه أظهرت نقصًا في الزيادات القوية في خلايا Fos-ir hcrt / orx في الحيوانات المعرضة لتحفيز جسم جديد. يبلغ هؤلاء المؤلفون أيضًا عن نسب مئوية من الخلايا العصبية hcrt / orx التي تعبر عن القاعدية (15٪) ، والمستحدثة (18٪) ، والمكيفة (50٪) Fos-ir التي تتوافق مع تلك التي أبلغنا عنها هنا (12٪ basal vs 40 ٪ التي يسببها الجماع). تشير هذه الملاحظات إلى أن الخلايا العصبية hcrt / orx يتم تنشيطها عن طريق المكافآت الطبيعية مثل الطعام والجنس.

يوفر التنظيم الاستروجيني لـ hcrt / orx الموصوف هنا دليلًا إضافيًا على إمكانية التحكم في قصور الكرياتين في السلوك الجنسي الذكري. من الجدير بالذكر أن الدورة الزمنية لفقدان hcrt / orx المبلغ عنها هنا متوافقة مع البيانات السلوكية الكلاسيكية التي توضح أن السلوك الجنسي للذكور يستغرق أسابيع لأسفل بعد الإخصاء ، علاوة على ذلك2 بدلاً من DHT المطلوب لاستعادة السلوك (هول وآخرون ، 2006). بدون تجربة إضافية ، لا يمكننا إلا التكهن بالآليات الكامنة وراء استمرار وجود hcrt / orx في غياب E2. قد يكون أبسط تفسير هو أن الوقت المتأخر لخفض مستويات hcrt / orx يعكس زمن الانتقال لنضوب قابل للقياس الكمي بسهولة في المخازن الحويصلية للمرسل. كما هو موضح أدناه ، فإن غياب ERS في الخلايا العصبية hcrt / orx يوحي بتنظيم التعبير hcrt / orx بواسطة مدخلات من الخلايا العصبية التي تحتوي على تلك المستقبلات. لأن تخليق الببتيد العصبي (Enyeart et al.، 1987) ، الحركة (Shakiryanova et al.، 2005) والإصدار ظواهر تعتمد على النشاط (Fulop et al.، 2005) ، أي انخفاض بعد البث في الاستثارة العصبية hcrt / orx (سميث وآخرون ، 2002) قد يؤثر سلبًا على هذه العمليات ، مما يؤدي إلى إبطاء حركية إطلاق الببتيد بحيث لا تكون مستويات التخليق المنخفضة واضحة لبعض الوقت. بأي طريقة كانت ، يبدو من المرجح أن عمل الستيرويد هو العنصر الأول في سلسلة معقدة مسؤولة عن الحفاظ على المستويات القاعدية من الببتيد.

تمامًا كما يبدو أن الخلايا العصبية hcrt / orx تنظم كمية الغذاء المستجيبة استجابة للعوامل الخلطية المتعلقة بتوازن الطاقة (Olszewski وآخرون ، 2003; Burdakov et al.، 2006) ، يبدو أن الخلايا العصبية hcrt / orx حساسة للوسط الهرموني وقد تسهل السلوك الإنجابي بطريقة مماثلة. تشير البيانات المقدمة هنا إلى أن تعبير hcrt / orx الأساسي يتم الحفاظ عليه بواسطة E2. في الحيوانات السليمة معربًا عن التعبير الكامل عن hcrt / orx ، يُفترض أن هذا المرسل سوف يسهل المعالجة في الهياكل المهمة لسلوك الذكور الجنسي ومكافأته. تتمتع الخلايا العصبية hcrt / orx بعلاقات متبادلة كبيرة مع مناطق مثل mPOA ، ونواة السرير في السطور الطرفية (BNST) ، و VTA (بيرون وآخرون ، 1998; ساكوراي وآخرون ، 2005) ، والمعروف أنها مهمة للتعبير عن السلوك الجنسي الذكري (للمراجعة ، راجع هول وآخرون ، 2006). من المتوقع أن يؤدي الانخفاض في hcrt / orx بعد الإخصاء إلى تقليل مصدر مهم من المدخلات المثيرة لهذه الهياكل ، مما يضعف السلوك.

الطريقة التي يحافظ بها تنشيط ER على التعبير hcrt / orx القاعدي في انتظار دراسة إضافية ؛ ومع ذلك ، من المحتمل أن يكون الدافع وراء ذلك من قِبل وكلاء من مناطق الدماغ التي تعبر عن ERα والتي تتجه إلى LHA (Simerly et al.، 1990; يوشيدا وآخرون ، 2006) ، لا سيما تلك الهياكل التي وجدت أن لديها بعض التوقعات المثيرة [على سبيل المثال ، BNST و mPOA (جورج وأستون جونز ، 2002; هيني وجونز ، 2006)]. نحن لا نبلغ عن وجود تراكب في AR مع hcrt / orx ، وعلى الرغم من أن عددًا قليلًا من الخلايا العصبية لـ hcrt / orx كانت مناعية من نوع ERα ، فإن هذه الخلايا ليست عديدة بما يكفي لشرح الآثار الملحوظة للخصاء ، كما أنها لا تسجل مع تلك التي يُرى أنها تقلل من تأثيرها. محتوى hcrt / orx بعد الإخصاء (تين. 2A, 3). نذكر أيضًا أن نوى ERα-ir وخلايا hcrt / orx العصبية غالبًا ما يكونان متشابكين ، مما يزيد من إمكانية التنظيم المحلي لنشاط التعبير الجيني / orx العصبي ونشاط التعبير الجيني بواسطة خلايا تحتوي على ERα المجاورة. تم وصف أهمية نشاط الدائرة المحلية المثير لهذا النوع في نظام hcrt / orx (لي وآخرون ، 2002). ومع ذلك ، إلى أن تُظهر التجارب التشريحية المطلوبة المشابك المثيرة التي صنعتها الخلايا المحتوية على ERα على الخلايا العصبية hcrt / orx ، لا يمكن افتراض تعبير هرمون / hx المعتمد على الهرمونات والتعبير الواثق عن hcrt / orx. Hcrt التعبير يتقلب نهاري (طاهري وآخرون ، 2000)، أثناء الحمل (Kanenishi وآخرون ، 2004) ، واستجابة لمختلف التلاعب الغذائية (Cai et al.، 1999; غريفوند وآخرون ، 1999). الآليات الجزيئية التي تنظم ديناميات hcrt لم يتم توصيف التعبير ، وبالتالي تتبع مسار من النواة إلى الغشاء ، وتسمية جزيئات الإشارة المرشحة التي قد تؤثر على تعبير hcrt / orx أمر صعب في هذا الوقت.

يتم دعم فكرة أن إشارات hcrt / orx في تعزيز السلوكيات مثل الجنس تدعمها أيضًا البيانات التي تظهر ضعفًا في السلوك الجنسي بعد العلاج باستخدام OX1 خصم SB SBNNXالجدول 2). بجرعة مماثلة لتلك المستخدمة لمنع عودة الإجهاد الناجم عن الإجهاد الذاتي للإدارة الذاتية للكوكايين (Boutrel et al.، 2005) ، زادت SB 334867 بشكل كبير من زمن انتقال الإختزال وتناقصت أعداد القذف ، مما يشير إلى أن الحصار المفروض على انتقال hcrt / orx قد يؤثر على خواص الحافز للإناث الأنثوية.

DA هو ناقل عصبي مهم للمكافأة ، والدافع الحافز ، والسلوك التكيفي (Berridge and Robinson، 1998; Ikemoto و Panksepp ، 1999; الحكمة ، 2004). لاحظنا تأثير مثير تعتمد على جرعة قوية من hcrt / orx على نشاط الخلايا العصبية VTA DA. يدعم هذا الاكتشاف دور hcrt / orx في التعزيز ، ويشير إلى أن نظام DA mesolimbic هو موضع خارج mPOA حيث قد تعمل hcrt / orx الإسقاطات على تعزيز السلوك الجنسي الذكري. في أقل جرعة تم اختبارها (0.014 nmol) ، زاد hcrt / orx من معدل إطلاق النار دون التأثير على نشاط السكان (الخلايا / المسار) (التين 4C). عند زيادة الجرعة الوسيطة (1.4 nmol) ، تم زيادة النشاط السكاني للخلايا العصبية DA ، مما يشير إلى أنه تم تنشيط الخلايا العصبية الهادئة القطبية سابقًا (التين 4D). في أعلى جرعة (140 nmol) ، انخفض النشاط السكاني للخلايا العصبية VTA DA. ومن المثير للاهتمام ، أن الانعكاس الناجم عن hcrt / orx في نشاط الخلايا العصبية VTA DA تم عكسه عن طريق الإعطاء الحاد لأبومورفين ناهض DA (التين 4D). في الحيوانات الطبيعية ، يفرز الأبومورفين الخلايا العصبية DA عن طريق تنشيط المستقبلات الذاتية ويقلل من معدل إطلاق النار والنشاط السكاني. ومع ذلك ، بعد العلاج المضاد للذهان المزمن أو العلاج المتكرر بأدوية تعاطي المخدرات ، يمكن للأبومورفين عكس النقص الناتج عن المخدرات في النشاط السكاني (Grace et al.، 1997; شين وتشونغ ، 2006). يُعتقد أن الأبومورفين يعطل عملية إلغاء الاستقطاب عن طريق إعادة استقطاب الخلايا المفرطة في الإثارة بما يكفي لاستئناف إطلاق النار. تشير هذه البيانات معًا إلى أن hcrt / orx يمارس تأثيرًا مثيرًا يعتمد على الجرعة على الخلايا العصبية VTA DA ، بما يتفق مع السابق المختبر عمل (Korotkova وآخرون ، 2003).

تم استكشاف أهمية مسارات الهبوط من LHA إلى VTA في عدد من التجارب (بيلاجو وشيزغال ، 1986; شيزغال ، 1989; أنت وآخرون ، 2001). هذه البيانات تشير إلى أن الزيادات في NA DA خلال السلوكيات المحفزة بوساطة المهاد مثل الجماع (Pfaus وآخرون ، 1990; Wenkstern وآخرون ، 1993) أو التغذية (Hernandez و Hoebel ، 1988; رادا وآخرون ، 2005) قد تعتمد على هذه التوقعات الهبوطية. أن مثل هذه الإسقاطات تحتوي على hcrt / orx مدعومة بالتجارب التي يُرى فيها زيادة تدفق NAc DA بعد الحقن داخل VTA لـ hcrt / orx (ناريتا وآخرون ، 2006). داخل ما تحت المهاد ، يمكن للسيروتونين [5-hydroxytryptamine (5-HT)] زيادة فرط استقطاب الخلايا العصبية hcrt / orx في LHA (لي وآخرون ، 2002). مثبطات إعادة امتصاص السيروتونين الانتقائية أو 5-HT نفسها ، والتي يتم تحويلها عكسيًا إلى LHA بالقرب من السكان الرئيسيين للخلايا المعبرة عن hcrt / orx ، وتقلل من إطلاق NAc DA القاعدي والمثير للإناث وتضعف من التكاثر (لوران وآخرون ، 1997, 1999). في ضوء البيانات المقدمة أعلاه والتي تبين تنشيط الخلايا العصبية hcrt / orx أثناء التوليف والخلايا العصبية VTA DA بواسطة hcrt / orx ، نجادل بأن توقعات hcrt / orx التنازلي إلى VTA يمكن أن تتوسط في إطلاق NA DA المتعلق بالجنس. علاوة على ذلك ، قد يثبط تثبيط هذه الإسقاطات عن طريق LN 5-HT التأثير المثبط لـ 5-HT على إطلاق NAc DA والسلوك الجنسي.

من الواضح أن الركيزة التشريحية للتفاعلات hcrt / orx-DA واضحة في اكتشافنا أن الخلايا العصبية VTA الموجبة معوية بواسطة نظام hcrt / orx وتظهر زيادة Fos-ir مع التعرض لمحفزات مجزية مثل copulation (التين 5, الجدول 4). أظهر هذا التأثير كلاً من الأهمية السلوكية والخصوصية المكانية ، حيث تم الكشف عن تحريض Fos في الخلايا العصبية TH hcrt / orx-apposed فقط في VTA الأمامي للحيوانات المتجمعة. قد يكون من غير الملحوظ أن يظهر هذا النمط من التنشيط في هذا الجزء من VTA ، حيث أن خلايا DA تكمن فقط الذيلية إلى السكان الرئيسيين للخلايا العصبية hcrt / orx ، الذين تجتاز أليافهم الهابطة هذه المنطقة قبل صرفها إلى أهداف بعيدة في جذع الدماغ (بيرون وآخرون ، 1998).

الرقم 5. 

يستحث الجماع Fos-ir في الخلايا العصبية VTA DA hcrt / orx-apposed. Aو Micrographs تظهر علامات TH و hcrt / orx و Fos في VTA. الأسهم تدل على الخلايا العصبية TH إيجابية Fos مع hcrt / orx appositions ؛ العلامات النجمية علامة الخلايا العصبية ذات العلامات المزدوجة دون إعتدال. شريط النطاق ، 45 ميكرون. B، التفاصيل من الخلايا العصبية TH إيجابية Fos مع السهام تشير إلى مواقع من hcrt / orx بوتونات في apposition. C، أقسام الاكليلية تظهر مستويات rostrocaudal من VTA المستخدمة في العد (مظلمة الظلام). الأرقام في الجزء العلوي الأيسر من كل قسم هي في ملليمتر من bregma. الأرقام في أعلى اليمين تعني تقديرات SEM لكثافة الخلية عند هذا المستوى. يشير المربع إلى مساحة micrographs في A.

تقترح هذه البيانات مسارًا جديدًا يمكن أن تؤثر به المنشطات الغدد التناسلية على إدخال ما تحت المهاد لأنظمة DA المتورطة في السلوك المحفّز (التين 6). كما أنها تضيف السلوك الجنسي إلى قائمة السلوكيات المتزايدة التي ينظمها hcrt / orx ، بما في ذلك الإثارة وسلوك الابتلاع والسعي إلى المخدرات.

الرقم 6. 

نموذج لتنظيم hcrt / orx بواسطة المنشطات الغدد التناسلية و VTA DA بواسطة hcrt / orx. يعمل استراديول ، الذي تم توليفه من هرمون التستوستيرون الغدد التناسلية بواسطة أروماتيز ، على الخلايا العصبية المحتوية على ERα في BNST و mPOA و LHA هذه الهياكل مشروع لالخلايا العصبية hcrt / orx المهاد. قد تؤثر الإسقاطات المثيرة من هذه الهياكل على نشاط التعبير عن hcrt / orx العصبي والجيني بطريقة حساسة للستيرويد. Hcrt / orx التوقعات إلى VTA تعزيز نشاط الخلايا العصبية DA الدماغ المتوسط ​​أثناء السلوك الجنسي للذكور. قد يتم حظر هذا التأثير عن طريق الحقن داخل LHA من 5-HT التي تمنع نشاط hcrt / orx ، مما يضعف السلوك الجنسي وإطلاق NAc DA.

الحواشي

  • تم تلقيه في أبريل 21 و 2006.
  • تلقى مراجعة يناير 23 ، 2007.
  • تم قبوله في فبراير 8 و 2007.

  • تم دعم هذا العمل من قِبل منح الصحة العامة بالولايات المتحدة MH073314 (JWM) و MH40826 و MH01714 (EMH) و AA12435 (R.-YS). نشكر الدكتور سمير الحاج دحمان على نصيحته المفيدة والدكتور زوكسين وانج لتأثيث معدات الفحص المجهري.

  • يجب إرسال المراسلات إلى جون موسشام ، قسم علم النفس ، جامعة ولاية فلوريدا ، تالاهاسي ، فلوريدا 32306-1270. [البريد الإلكتروني محمي]

مراجع حسابات

  1. ↵
    1. Berridge KC،
    2. روبنسون تي

    (1998) ما هو دور الدوبامين في المكافأة: تأثير المتعة ، أو مكافأة التعلم ، أو التحفيز؟ بحوث الدماغ بحوث الدماغ القس 28: 309-369.

  2. ↵
    1. بيلاجو سي ،
    2. شيزغال ف

    (1986) دليل على تورط الألياف الهابطة في التحفيز الذاتي لحزمة الدماغ الأمامي الإنسي. J Neurosci 6: 919-929.

  3. ↵
    1. بورجلاند إس إل ،
    2. طه ش.
    3. سارتي واو ،
    4. الحقول HL ،
    5. بونسي أ

    (2006) Orexin A في VTA أمر بالغ الأهمية لتحريض اللدونة متشابك والتوعية السلوكية للكوكايين. الخلايا العصبية 49: 589-601.

  4. ↵
    1. Boutrel B ،
    2. كيني PJ ،
    3. سبيسيو SE ،
    4. مارتن-فردون آر ،
    5. ماركو أ ،
    6. Koob GF ،
    7. de Lecea L

    (2005) دور hypocretin في التوسط الناجم عن الإجهاد في سلوك التماس الكوكايين. Proc Natl Acad Sci USA 102: 19168-19173.

  5. ↵
    1. بورداكوف د ،
    2. جنسن LT ،
    3. Alexopoulos H ،
    4. وليامز آر إتش ،
    5. Fearon IM ،
    6. أوكيلي الأول ،
    7. غيراسيمينكو
    8. Fugger L ،
    9. Verkhratsky A

    (2006) قنوات ترادفية المسام K + تتوسط تثبيط الخلايا العصبية orexin بواسطة الجلوكوز. الخلايا العصبية 50: 711-722.

  6. ↵
    1. Caggiula AR ،
    2. Hoebel BG

    (1966) "موقع التجميع - المكافأة" في ما تحت المهاد الخلفي. علوم 153: 1284-1285.

  7. ↵
    1. تساى جى جى ،
    2. Widdowson PS ،
    3. هارولد جي ،
    4. ويلسون س ،
    5. باكنجهام RE ،
    6. القوس JR ،
    7. Tadayyon M ،
    8. كلافام جيه سي ،
    9. وايلدنج J ،
    10. ويليامز جي

    (1999) التعبير أوركسين تحت المهاد: تعديل بواسطة الجلوكوز في الدم والتغذية. مرض السكري 48: 2132-2137.

  8. ↵
    1. كليفلاند دي دبليو ،
    2. فيشر سان جرمان ،
    3. كيرشنر ميغاواط ،
    4. ليملي المملكة المتحدة

    (1977) رسم خرائط الببتيد عن طريق التحلل البروتيني المحدود في كبريتات دوديسيل الصوديوم وتحليل بواسطة الكهربائي الكهربائي للهلام. J بيول كيم 252: 1102-1106.

  9. ↵
    1. دي ليسيا لام ،
    2. كيلدوف TS ،
    3. بيرون سي ،
    4. قاو العاشر ،
    5. فوي بي ،
    6. دانيلسون بي ،
    7. فوكوهارا سي ،
    8. باتنبرغ EL ،
    9. غوتفيك
    10. بارتليت FS II. ،
    11. فرانكل و.
    12. فان دن بول آن ،
    13. بلوم FE ،
    14. غوتفيك KM ،
    15. ساتكليف جي

    (1998) و hypocretins: الببتيدات محددة تحت المهاد مع النشاط العصبي. Proc Natl Acad Sci USA 95: 322-327.

  10. ↵
    1. DiLeone RJ ،
    2. Georgescu D ،
    3. Nestler EJ

    (2003) neuropeptides الأفقي السفلي في المكافأة وإدمان المخدرات. علوم الحياة 73: 759-768.

  11. ↵
    1. Enyeart JJ ،
    2. شو اس اس ،
    3. رئيس Hinkle

    (1987) تقوم معدلات ديهيدروبيريدين لقنوات Ca2 + الحساسة للجهد بتنظيم إنتاج البرولاكتين على وجه التحديد بواسطة خلايا الورم النخامية GH4C1. J بيول كيم 262: 3154-3159.

  12. ↵
    1. Espana RA ،
    2. فالنتينو RJ ،
    3. Berridge CW

    (2003) فوس المناعية في توليف نيتريكريتين وخلايا عصبية معبرة عن مستقبلات هرمون النوكريتين- 1: آثار الاستيقاظ التلقائي النهاري والليلي ، والإجهاد وإدارة ناقص الكرياتين. علم الأعصاب 121: 201-217.

  13. ↵
    1. فاضل ي ،
    2. Deutch AY

    (2002) ركائز التشريحية للتفاعلات orexin- الدوبامين: الإسقاط المهاد الجانبي الوحشي لمنطقة tegmental البطنية. علم الأعصاب 111: 379-387.

  14. ↵
    1. فولوب تي ،
    2. رادابو S ،
    3. سميث سي

    (2005) الافراج عن الارسال التفاضلية التي تعتمد على النشاط في خلايا chromaffin الكظرية الماوس. J Neurosci 25: 7324-7332.

  15. ↵
    1. فولتون اس ،
    2. وودسايد ب ،
    3. شيزغال ف

    (2000) تعديل الدوائر مكافأة الدماغ بواسطة اللبتين. علوم 287: 125-128.

  16. ↵
    1. جورج اف ،
    2. استون جونز جي

    (2002) تنشيط خلايا منطقة tegmental البطنية من قبل نواة السرير من السطور الطرفية: مدخلات جديدة من حمض أميني مثير الإثارة إلى الخلايا العصبية الدوبامين الدماغ المتوسط. J Neurosci 22: 5173-5187.

  17. ↵
    1. جريس AA ،
    2. Bunney BS

    (1983) الكهربية داخل الخلوية وخارج الخلية من الخلايا العصبية الدوبامينية nigral. 1. تحديد وتوصيف. علم الأعصاب 10: 301-315.

  18. ↵
    1. جريس AA ،
    2. Bunney BS ،
    3. مور ح ،
    4. تود CL

    (1997) كتلة الاستقطاب الدوبامين كنموذج للإجراءات العلاجية للأدوية المضادة للذهان. اتجاهات neurosci 20: 31-37.

  19. ↵
    1. غريفوند ب ،
    2. ريزولد PY ،
    3. جاكيمارد سي ،
    4. كولارد سي ،
    5. فيلمان د

    (1999) نقص السكر في الدم الناجم عن الأنسولين يزيد من هرمون البروبوهيبوكريتين (الأوركسين) في منطقة المهاد الجانبية للفئران. Neurosci بادئة رسالة 262: 77-80.

  20. ↵
    1. جوليا ك. ك.
    2. ماليك HN ،
    3. كومار VM

    (2003) تطبيق Orexin A (hypocretin-1) في منطقة ما قبل الجراحة الإنسي يعزز السلوك الجنسي لدى الذكور في الفئران. علم الأعصاب 116: 921-923.

  21. ↵
    1. هاريس GC ،
    2. استون جونز جي

    (2006) الإثارة والمكافأة: انفصام في وظيفة orexin. اتجاهات neurosci 29: 571-577.

  22. ↵
    1. هاريس GC ،
    2. ويمر م ،
    3. استون جونز جي

    (2005) دور للخلايا العصبية الأوركسين تحت المهاد الجانبي في البحث عن المكافآت. الطبيعة 437: 556-559.

  23. ↵
    1. هيني ف ،
    2. جونز BE

    (2006) الحفاظ على الخلايا العصبية orexin / hypocretin بواسطة المحطات الأمامية الدماغية القاعدية glutamatergic أو cholinergic يتضح من immunostaining لالناقل الحويصلي قبل المشبكي والبروتينات سقالة بعد المشبكي. J Comp Neurol 499: 645-661.

  24. ↵
    1. هيرنانديز إل ،
    2. Hoebel BG

    (1988) المكافأة الغذائية والكوكايين تزيد الدوبامين خارج الخلوي في النواة المتكئة كما تم قياسها بواسطة الحبيبات المجهرية. علوم الحياة 42: 1705-1712.

  25. ↵
    1. Hoebel BG

    (1969) التغذية والتحفيز الذاتي. Ann NY Acad Sci 157: 758-778.

  26. ↵
    1. هال EM ،
    2. وود ري ،
    3. ماكينا كي

    (2006) في فسيولوجيا نوبيل ونيل للتكاثر ، علم الأعصاب للسلوك الجنسي الذكوري ، إد نيل جيه دي (إلسفير ، نيويورك) ، إد 3 ، ص 1729-1824.

  27. ↵
    1. إيكيموتو إس ،
    2. بانكسيب جيه

    (1999) دور النواة يتكثف الدوبامين في السلوك المحفّز: تفسير موحد مع إشارة خاصة إلى السعي إلى المكافأة. بحوث الدماغ بحوث الدماغ القس 31: 6-41.

  28. ↵
    1. كانينيشي ك ،
    2. أوينو م ،
    3. Momose S ،
    4. Kuwabara H ،
    5. تاناكا ح ،
    6. ساتو C ،
    7. كوباياشي تي ،
    8. هينو يا ،
    9. ساكاموتو ح ،
    10. هاتا تي

    (2004) يتم زيادة التعبير Prepro-orexin mRNA في دماغ الفئران أثناء الحمل. Neurosci بادئة رسالة 368: 73-77.

  29. ↵
    1. Korotkova TM ،
    2. سيرجيفا الزراعة العضوية ،
    3. إريكسون كانساس ،
    4. هاس HL ،
    5. براون RE

    (2003) إثارة الخلايا العصبية الدوبامينية و nondopaminergic المنطقة البطنية بواسطة orexins / hypocretins. J Neurosci 23: 7-11.

  30. ↵
    1. Kotz CM

    (2006) دمج التغذية والنشاط البدني التلقائي: دور orexin. فيسيول بيهاف 88: 294-301.

  31. ↵
    1. لى يى
    2. قاو XB ،
    3. ساكوراي تي ،
    4. فان دن بول آن

    (2002) يفرز الهيبوكريتين / الأوريكسين الخلايا العصبية التي تحتوي على الهيبوكريتين عبر الخلايا العصبية المحلية من الغلوتامات ، وهي آلية محتملة لتدبير نظام الإثارة المهاد. الخلايا العصبية 36: 1169-1181.

  32. ↵
    1. لوران دي إس ،
    2. Matuszewich L ،
    3. فريدمان RD ،
    4. هال EM

    (1997) يزداد السيروتونين خارج الخلية في منطقة المهاد السفلية الجانبية خلال فترة ما بعد القذف ويعيق التكاثر في الفئران الذكور. J Neurosci 17: 9361-9366.

  33. ↵
    1. لوران دي إس ،
    2. ريولو JV ،
    3. Matuszewich L ،
    4. هال EM

    (1999) يمنع السيروتونين المهاد الجانبي النواة التي تتسبب في حدوث الدوبامين: الآثار المترتبة على الشبع الجنسي. J Neurosci 19: 7648-7652.

  34. ↵
    1. Mileykovskiy BY ،
    2. كياشينكو ،
    3. سيجل JM

    (2005) يرتبط السلوكية للنشاط في الخلايا العصبية التي يتم تحديدها في hypocretin / orexin. الخلايا العصبية 46: 787-798.

  35. ↵
    1. موتشيزوكي تي ،
    2. كروكر أ ،
    3. ماكورماك اس ،
    4. ياناجيساوا م ،
    5. ساكوراي تي ،
    6. سكاميل TE

    (2004) عدم الاستقرار الحالة السلوكية في الفئران الضاربة orexin. J Neurosci 24: 6291-6300.

  36. ↵
    1. مورغان جي ،
    2. كوران تي

    (1991) اقتران التحفيز-النسخ في الجهاز العصبي: تورط الجينات المسببة للحث بروتيني محث fos ويونيو. انو ريف نيوروسكي 14: 421-451.

  37. ↵
    1. ناكامورا تي ،
    2. أورامورا ك ،
    3. نامبو تي ،
    4. يادا تي ،
    5. غوتو ك ،
    6. ياناجيساوا م ،
    7. ساكوراي تي

    (2000) التوسط الناجم عن الزعفران أو النمط النمطي يتوسطه نظام الدوبامين. الدماغ الدقة 873: 181-187.

  38. ↵
    1. نامبو تي ،
    2. ساكوراي تي ،
    3. ميزوكامي ك ،
    4. هوسويا واي ،
    5. ياناجيساوا م ،
    6. غوتو ك

    (1999) توزيع الخلايا العصبية orexin في الدماغ الفئران البالغين. الدماغ الدقة 827: 243-260.

  39. ↵
    1. ناريتا م ،
    2. ناجومو واي ،
    3. هاشيموتو ،
    4. خطيب ج.
    5. مياتاكي م ،
    6. ساكوراي تي ،
    7. ياناجيساوا م ،
    8. ناكاماتشي تي ،
    9. شيودا S ،
    10. سوزوكي تي

    (2006) المشاركة المباشرة للأنظمة orexinergic في تنشيط مسار الدوبامين mesolimbic والسلوكيات ذات الصلة الناجمة عن المورفين. J Neurosci 26: 398-405.

  40. ↵
    1. أولسوفسكي PK ،
    2. جفن العين،
    3. غريس MK ،
    4. بيلينجتون سي جيه ،
    5. كوتز CM ،
    6. Levine AS

    (2003) الأساس العصبي للتأثيرات التماثلية للجريلين التي تعمل داخل المهاد الجانبي. الببتيدات 24: 597-602.

  41. ↵
    1. أورسيني JC ،
    2. جوردان ف ،
    3. كوبر جلالة الملك ،
    4. مونمور ف

    (1985) تأثير الروائح الأنثوية على ما تحت المهاد الجانبي في الفئران الذكرية. تحليل الدوكسيلوز شبه الدلالي. فيسيول بيهاف 35: 509-516.

  42. ↵
    1. Paxinos G ،
    2. واتسون ج

    (1998) الدماغ الفئران في الإحداثيات التجسيمي (الأكاديمية ، نيويورك) ، إد 4.

  43. ↵
    1. بيرون سي ،
    2. Tighe DK ،
    3. فان دن بول آن ،
    4. دي ليسيا لام ،
    5. هيلر HC ،
    6. ساتكليف جي جي ،
    7. كيلدوف TS

    (1998) الخلايا العصبية التي تحتوي على hypocretin (orexin) المشروع إلى أنظمة عصبية متعددة. J Neurosci 18: 9996-10015.

  44. ↵
    1. Pfaus JG ،
    2. Damsma G ،
    3. نوميكوس جى جى
    4. Wenkstern DG،
    5. بلاها سي دي
    6. Phillips AG،
    7. Fibiger HC

    (1990) يعزز السلوك الجنسي من انتقال الدوبامين المركزي في الجرذ الذكر. الدماغ الدقة 530: 345-348.

  45. ↵
    1. بوتنام SK ،
    2. ساتو س ،
    3. ريولو JV ،
    4. هال EM

    (2005) آثار الأيض التيستوستيرون على التزاوج ، الدوبامين قبل الإنسي الإنسي ، وإبطال المناعة NOS في الفئران الذكور المخصية. هورم بيهاف 47: 513-522.

  46. ↵
    1. رادا ب ،
    2. Avena NM ،
    3. Hoebel BG

    (2005) الإفلات اليومي من السكر يطلق الدوبامين مرارًا وتكرارًا في الغلاف المتكثف. علم الأعصاب 134: 737-744.

  47. ↵
    1. Rolls ET ،
    2. Burton MJ ،
    3. مورا ف

    (1980) تحليل الفيزيولوجيا العصبية مكافأة تحفيز الدماغ في القرد. الدماغ الدقة 194: 339-357.

  48. ↵
    1. ساكوراي تي ،
    2. Amemiya A ،
    3. إيشي م ،
    4. ماتسوزاكي الأول ،
    5. Chemelli RM ،
    6. تاناكا ح ،
    7. وليامز SC ،
    8. ريتشاردسون JA ،
    9. Kozlowski GP ،
    10. ويلسون س ،
    11. القوس JR ،
    12. باكنجهام RE ،
    13. هاينز AC ،
    14. كار سا ،
    15. عنان RS
    16. ماكنولتي دي ،
    17. ليو و. س.
    18. Terrett JA ،
    19. الشوربجى
    20. بيرجسما دي جي
    21. وآخرون.

    (1998) مستقبلات الأوركسين والأوريكسين: عائلة من المبيدات العصبية السفلية ومستقبلات البروتين G التي تنظم سلوك التغذية. الموبايل 92: 573-585.

  49. ↵
    1. ساكوراي تي ،
    2. ناجاتا آر ،
    3. ياماناكا أ ،
    4. كاوامورا ح ،
    5. تسوجينو ن ،
    6. موراكي واي ،
    7. كاجياما ح ،
    8. كونيتا اس ،
    9. تاكاهاشي س ،
    10. غوتو ك ،
    11. كوياما واي ،
    12. شيودا S ،
    13. ياناجيساوا م

    (2005) إدخال الخلايا العصبية orexin / hypocretin كشفت عن طريق تتبع ترميز وراثيا في الفئران. الخلايا العصبية 46: 297-308.

  50. ↵
    1. صابر CB ،
    2. سكاميل TE ،
    3. لو جيه

    (2005) التنظيم المهاد للنوم والإيقاعات اليومية. الطبيعة 437: 1257-1263.

  51. ↵
    1. ساتو س ،
    2. براهام CS ،
    3. بوتنام SK ،
    4. هال EM

    (2005) سينسيز أكسيد النيتريك العصبي والتفاعل الستيرويد الغدد التناسلية في MPOA من الفئران الذكور: التوطين المشترك واستعادة التي يسببها التستوستيرون من copulation و immunoreactivity. الدماغ الدقة 1043: 205-213.

  52. ↵
    1. شاكريانوفا د ،
    2. تالي أ ،
    3. هيوز RS ،
    4. ديتشير DL ،
    5. ليفيتان ES

    (2005) التحرير المعتمد على النشاط للحويصلات العصبية المتشابكة. نات نيوروسكي 8: 173-178.

  53. ↵
    1. شين RY ،
    2. Choong KC

    (2006) تكيفات مختلفة في الخلايا العصبية الدوبامين منطقة tegmental في السيطرة على الفئران والإيثانول يتعرض بعد العلاج الميثيلفينيديت. بيول الطب النفسي 59: 635-642.

  54. ↵
    1. شيزغال ف

    (1989) نحو تحليل الخلوي من التحفيز الذاتي داخل الجمجمة: مساهمات دراسات الاصطدام. Neurosci Biobehav Rev 13: 81-90.

  55. ↵
    1. سيجل JM

    (2004) Hypocretin (orexin): دور في السلوك الطبيعي وعلم الأمراض العصبية. انو القس Psychol 55: 125-148.

  56. ↵
    1. سيميرلي ر. ب.
    2. تشانغ سي ،
    3. موراتسو م ،
    4. سوانسون إل دبليو

    (1990) توزيع الخلايا التي تحتوي على مرنا مستقبلات الاندروجين وهرمون الاستروجين في الدماغ الفئران: دراسة التهجين في الموقع. J Comp Neurol 294: 76-95.

  57. ↵
    1. سميث MD ،
    2. جونز LS ،
    3. ويلسون ماجستير

    (2002) الاختلافات الجنسية في استثارة شريحة الحصين: دور التستوستيرون. علم الأعصاب 109: 517-530.

  58. ↵
    1. ساتكليف جي جي ،
    2. de Lecea L

    (2002) و hypocretins: تحديد عتبة الإثارة. نات ريف نيوروسكي 3: 339-349.

  59. ↵
    1. سوانسون إل دبليو

    (2004) خرائط الدماغ III: بنية دماغ الفئران (Elsevier ، نيويورك) ، Ed 3.

  60. ↵
    1. سوانسون LW ،
    2. سانشيز واتس ،
    3. واتس ايه جي

    (2005) مقارنة هرمون تركيز الميلانين وأنماط التعبير هيبوكريتين / أوركسين مرنا في مخطط الطرود الجديد للمنطقة المهاد الجانبي. Neurosci بادئة رسالة 387: 80-84.

  61. ↵
    1. تاهري س ،
    2. سونتر د ،
    3. داكين C ،
    4. مويز اس ،
    5. ختم L ،
    6. غاردينر J ،
    7. روسي م ،
    8. غاتي م ،
    9. بلوم اس

    (2000) التباين النهاري في الأوركسين A immunoreactivity و prepro-orexin mRNA في الفئران الجهاز العصبي المركزي. Neurosci بادئة رسالة 279: 109-112.

  62. ↵
    1. ثورب AJ ،
    2. كليري JP ،
    3. ليفين ع ،
    4. Kotz CM

    (2005) orexin A تدار مركزيا يزيد من الدافع للكريات الحلوة في الفئران. علم الادوية النفسية (بيرل) 182: 75-83.

  63. ↵
    1. فوجان إي ،
    2. فيشر AE

    (1962) السلوك الجنسي الذكري الناجم عن التحفيز الكهربائي داخل الجمجمة. علوم 137: 758-760.

  64. ↵
    1. Wenkstern D ،
    2. Pfaus JG ،
    3. Fibiger HC

    (1993) يزداد انتقال الدوبامين في النواة المتكئة لدى ذكور الجرذان أثناء تعرضها لأول مرة لجرذان الإناث المتلقّين جنسياً. الدماغ الدقة 618: 41-46.

  65. ↵
    1. الحكيمة RA

    (2004) الدوبامين ، التعلم والتحفيز. نات ريف نيوروسكي 5: 483-494.

  66. ↵
    1. يوشيدا ك ،
    2. ماكورماك اس ،
    3. Espana RA ،
    4. كروكر أ ،
    5. سكاميل TE

    (2006) ينتسب إلى الخلايا العصبية orexin للدماغ الفئران. J Comp Neurol 494: 845-861.

  67. ↵
    1. أنت زب ،
    2. تشن YQ ،
    3. الحكيمة RA

    (2001) إطلاق الدوبامين والغلوتامات في النواة المتكئة والمنطقة tegmental البطنية من الفئران بعد التحفيز الذاتي تحت المهاد الأفقي. علم الأعصاب 107: 629-639.

المقالات التي تستشهد من هذا المقال

  • التخفيف الكامل من متلازمة SUNCT الحرارية المقاومة للعلاج مع سترات كلوميفين (المشكل المهاد الطبي العميق في المخ) Cephalalgia ، 1 October 2014 ، 34 (12): 1021-1024
  • يسهل Hypocretin (orexin) المكافأة من خلال تخفيف التأثيرات المضادة للظواهر الناتجة عن دينورفين ناقل الحركة في منطقة tegmental البطنية PNAS ، 22 أبريل 2014 ، 111 (16): E1648-E1655
  • Orexin / Hypocretin ينظم استجابة الخلايا العصبية الدوبامين Tigmental البطنية لتنشيط Prefrontal: التأثيرات النهارية Journal of Neuroscience، 17 November 2010، 30 (46): 15585-15599
  • Orexin A / Hypocretin-1 بشكل انتقائي يعزز التحفيز من أجل مصلحات إيجابية Journal of Neuroscience، 9 September 2009، 29 (36): 11215-11225
  • يتم تنشيط شلالات كيناز MAP المُحفزة بواسطة Orexin من خلال مسارات متعددة لإشارات البروتين G في الخلايا الكظرية القشرية البشرية H295R: أدوار متنوعة لأوريكسين A و B مجلة الغدد الصماء ، 1 August 2009 ، 202 (2): 249-261