تتوسط Orexin في بدء السلوك الجنسي في ذكور ذكور الفئران ، ولكنها ليست بالغة الأهمية للأداء الجنسي (2011)

هورم بيهاف. مخطوطة المؤلف متاحة في PMC 2011 Aug 1.

نشر في الصيغة النهائية المعدلة على النحو التالي:

PMCID: PMC2917508

تتوفر النسخة النهائية المعدلة للناشر من هذه المقالة على هورم بيهاف

انظر المواد الأخرى في PMC ذلك استشهد المادة المنشورة.

انتقل إلى:

ملخص

يتداخل أوروبيان النوروبيبوتيد تحت المهاد بين سلوكيات الإثارة والنوم والسلوكيات الطبيعية ، بما في ذلك تناول الطعام. يتم تغيير السلوك الجنسي الذكري من قبل ناهضات مستقبلات orexin-1 أو الخصوم ، مما يشير إلى دور ل orexin-A في هذا السلوك المجزي بشكل طبيعي. ومع ذلك ، فإن الدور المحدد لـ orexin-A أو B في العناصر المختلفة للسلوك الجنسي الذكوري غير واضح في الوقت الحالي. لذلك ، استخدمت الدراسات الحالية علامات التنشيط العصبي وآفات الأوركسين الخاصة بالخلايا لاختبار الفرضية القائلة بأن الأوركسين ضروري للدوافع والأداء الجنسي في ذكور الجرذان. أولا ، تم توضيح تعبير cFos في الخلايا العصبية orexin بعد تقديم أنثى متقبلة أو غير متلقية دون مزيد من التنشيط من قبل عناصر مختلفة من التزاوج. بعد ذلك ، تم اختبار الدور الوظيفي لأوركسين باستخدام orexin-B saporin المترافق ، مما أدى إلى آفات جسم الخلية orexin في الوطاء. أجريت الآفات عند الذكور الساذجين جنسياً وسُجل السلوك الجنسي اللاحق خلال أربع تجارب تزاوج. وأظهر الذكور الذين يعانون من آفات اختصارات للتثبيت والتألم خلال التجارب الأولى ، ولكن ليس بعد التزاوج ، مما يوحي بأن الآفات سهلت بدء السلوك الجنسي في السذاجة الجنسية ، ولكن ليس من ذوي الخبرة الذكور. وبالمثل ، لم تؤثر الآفات على الدافع الجنسي لدى الذكور ذوي الخبرة ، والتي تحددها اختبارات المدارج. وأخيرًا ، أظهرت الاختبارات المرتفعة بالإضافة إلى متاهات سلوكًا شبيهًا بسلوك القلق لدى الذكور الذكورين ، مما يدعم دورًا للـ orexin في القلق المرتبط بالتعرض الأولي للأنثى في الحيوانات الساذجة. عموما ، تظهر هذه النتائج أن orexin ليس حاسما للأداء الجنسي أو التحفيز الذكوري ، ولكن قد يلعب دورا في الإثارة والقلق المتعلق بالسلوك الجنسي في الحيوانات الساذجة.

: الكلمات المفتاحية orexin ، hypocretin ، والسلوك الجنسي ، والتجمع ، والتنشيط العصبي ، والدافع ، ما تحت المهاد ، والجدة ، والاستثارة ، والقلق

المُقدّمة

Orexin ، المعروف أيضا باسم hypocretin ، هو neuropeptide الوطاء حاسم لسلوك التغذية ، (de Lecea et al.، 1998; ساكوراي وآخرون 1998, ساكوراي ، 2006; بينوا وآخرون ، 2008الإثارة والنوم (Chemelli وآخرون ، 1999; لين وآخرون ، 1999, ساكوراي ، 2007; Furlong و Carrive ، 2007; Furlong وآخرون ، 2009; كارتر وآخرون ، 2009). يتم توطين الخلايا العصبية Orexin إلى منطقة المهاد الجانبي (LHA) و hypothalamus ظهارة الظهرية (PFA-DMH) وإنتاج اثنين neuropeptides ، orexin-A و B (de Lecea et al.، 1998; ساكوراي وآخرون ، 1998). وقد أظهرت الخلايا العصبية Orexin إلى هياكل الدماغ تشارك في التوسط من الإثارة بما في ذلك coeruleus موضع ، نواة tuberomammillary ونواة tegmental peduculopontine (بيرون وآخرون ، 1998; هاجان وآخرون ، 1999; Horvath وآخرون ، 1999; بالدو وآخرون ، 2003). كما تورطت Orexin في المكافأة والتحفيز ، خاصة فيما يتعلق بالأغذية والمخدرات من الإساءة (أستون جونز وآخرون ، 2009a; أستون جونز وآخرون ، 2009bوقد تبين أن الخلايا العصبية (orexin) تعرض مكافآت بنية الدماغ ذات الصلة في النظام الوسطي بما في ذلك المنطقة القطبية البطنية (VTA) والنواة المتكئة (NAc) (بيرون وآخرون ، 1998; فاضل وديوتش ، 2002; مارتن وآخرون ، 2002; بالدو وآخرون ، 2003). يتم تنشيط الخلايا العصبية Orexin عن طريق الإشارات السياقية المكيفة المرتبطة مكافأة الغذاء والدواء (هاريس وآخرون ، 2005; de Lecea et al.، 2006; Choi et al.، 2010) وقد تبين أن تلعب دورا في سلوك التغذية القائم على المكافأة (Choi et al.، 2010). علاوة على ذلك ، يؤدي إعطاء داخل الصفاق (ICV) أو داخل الصفاق (intraperitoneal) لمضاد مستقبلات الأوريكسين 1 (ORX1) إلى انخفاض الحافز على الطعام المستساغ (Thorpe et al.، 2005; ناير وآخرون ، 2008) ، في حين أن إدارة ICV orexin-A يمكن أن تعيد هذا الدافع (Boutrel et al.، 2005).

دور orexin في السلوكيات المجزية الأخرى غير واضح في الوقت الحالي ، على الرغم من أن العديد من الدراسات قد تورطت دور orexin في السيطرة على السلوك الجنسي في ذكور الفئران. وقد تبين من قبل أنه يتم تنشيط الخلايا العصبية الأوركسن عن طريق الجماع في ذكور الفئران (Muschamp وآخرون ، 2007). بالإضافة إلى ذلك ، أدى إعطاء orexin-A إلى المنطقة preoptic medial (mPOA) إلى تحسين الأداء الجنسي الذي يتضح من خلال تقليل فترات الانتظار لتركيب و intromit ، وزيادة ترددات التثبيت والتداخل (جوليا وآخرون ، 2003). وعلى النقيض من ذلك ، فإن إعطاء ICV لدافع جنسي مخفّض من خلال خفض اختلال الإناث ، على الرغم من أنه فقط في الذكور ذوي الدوافع الجنسية العالية (Bai et al.، 2009). وقد أظهرت الدراسات التي تستخدم مضادات ORX1 أيضًا بيانات متناقضة ، حيث أدى التدبير النظامي لمضاد ORX1 إلى إضعاف الأداء الجنسي قليلاً عن طريق زيادة الكمون للتأثير دون التأثير على معايير السلوك الجنسي الأخرى (Muschamp وآخرون ، 2007) ، في حين أن إدارة ICV لمضاد ORX1 لم يكن لها أي تأثير على التحفيز الجنسي (Bai et al.، 2009). معا تشير هذه الدراسات إلى أن إدارة المنشأ اوتكسين- أ يؤثر على الأداء الجنسي والتحفيز. ومع ذلك ، الأوريكسين الذاتية قد لا تلعب دورا هاما في التوسط السلوك الجنسي (Bai et al.، 2009). لذلك ، كان الهدف من الدراسة الحالية هو تحديد ما إذا كان orexin المنشأ ضروريًا للدافع الجنسي للأدب الذكور.

أولاً ، تم تحديد متى يتم تنشيط الخلايا العصبية orexin أثناء السلوك الجنسي ، واختبار الفرضية القائلة بأن الخلايا العصبية orexin يتم تنشيطها عند إدخال الحافز المكافئ. علاوة على ذلك ، فقد ثبت أن التجربة الجنسية تؤثر على الأداء الجنسي (Dewsbury، 1969) والخصائص المجزية للسلوك الجنسي (تينك وآخرون ، 2009) ، تم تحديد ما إذا كانت التجربة الجنسية تؤثر على تنشيط الخلايا العصبية orexin أثناء التزاوج. وأخيرا ، تم اختبار ما إذا كان orexin يلعب دورا حاسما في الدافع الجنسي والأداء باستخدام آفات الخلايا الجسم محددة من الخلايا العصبية الأوركسين.

مواد وطرق

تم الحصول على فئران ذكور سبراغ داولي البالغين (200 – 250g) من هارلان (إنديانابوليس ، إن أي) أو مختبرات نهر تشارلز (شيربروك ، كيبيك ، كندا) ، وتضم كل منها فردًا أو في أزواج اعتمادًا على التجربة الفردية (انظر أدناه) في أقفاص زجاجي. تم الحفاظ على غرفة المستعمرة على دورة مضيئة داكنة 12 / 12 (أضواء إيقاف في 10 صباحا) وكان الغذاء والماء متوفرة libitum الإعلانية ما عدا خلال الاختبارات السلوكية. تم الحصول على الجرذان Sprague-Dawley من Harlan (إنديانابوليس ، IN) أو مختبرات تشارلز ريفر (شيربروك ، كويبك ، كندا) تم استئصال ovariectomized ثنائياً وزرع تحت الجلد مع كبسولات 5 17-β-estradiol benzoate silastic. تم تحفيز القبول الجنسي عن طريق الحقن تحت الجلد من البروجيسترون (500 µg في 0.1ML من زيت السمسم) تقريبًا قبل 4 h قبل جلسات التزاوج. تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل لجان رعاية الحيوان في جامعة سينسيناتي وجامعة أونتاريو الغربية وتتفق مع المبادئ التوجيهية التي حددها المعهد الوطني للصحة والمجلس الكندي لرعاية الحيوان. تم إجراء جميع الاختبارات السلوكية خلال النصف الأول من المرحلة المظلمة تحت إضاءة حمراء معتمة ، إلا عندما لوحظ خلاف ذلك.

تصميم تجريبي

دراسات التعبير عن cFos

تم إيواء الفئران الذكور (n = 48) بشكل فردي ، واكتسب نصف الحيوانات تجربة جنسية في القفص المنزلي خلال 5 جلسات التزاوج الأسبوعية مرتين. تم إجراء اختبارات التزاوج في القفص المنزلي للتخلص من الإثارة والتعبير cFos الناجم عن التعرّض لحلبة التزاوج المختلفة والتعرض إلى الإشارات المكيفة المرتبطة بالتزاوج المسبق (بلفور وآخرون ، 2004). تم إدخال أنثى متقبلة في القفص المنزلي وتم السماح للذكور بالتزاوج حتى القذف مرة واحدة أو لدقائق 60. خلال كل اختبار لوحظ السلوك الجنسي. تم تسجيل العدد الإجمالي للحوامل والتطعيمات ، بالإضافة إلى فترات التأخير في التركيب الأول والتدخل (الوقت من تقديم الأنثى المتقبلة إلى الحامل الأول أو التداخل) والقذف (الوقت من أول عملية انتقال إلى القذف) ، (Agmo ، 1997). بقي النصف المتبقي من الحيوانات ساذج جنسياً. تم إيواء هذه الحيوانات في نفس الغرفة مثل الذكور ذوي الخبرة الجنسية ، وتم التعامل معها وتعرضها للروائح والأصوات المرتبطة بالتزاوج ، إلا أنها لم تتزاوج. تم تقسيم كل من Naïve والحيوانات ذات الخبرة إلى مجموعات 6 التجريبية (n = 4 لكل مجموعة). وشملت 6 السذاجة والمجموعات من ذوي الخبرة: السيطرة على الذكور دون التعرض لسلوك جنسي (القفص المنزل) ؛ الذكور تتعرض لانثى غير مستقبلة في القفص المنزلي لدقائق 15 (Anestrous Female). يمكن للذكور التحقيق والتفاعل ، لكنهم لم يتزاوجوا بسبب نقص قبول الإناث ؛ ذكور يتعرضون لرائحة أنثى متقبلة موضوعة في صندوق شبكي سلكي أعلى القفص المنزلي لدقائق 15 (إستروس للإناث) ؛ الذكور التي عرضت الجبال ، ولكن ليس التداخل أو القذف مع الإناث المقنعة المهبلية (جبل) ؛ الذكور الذين عرضت التهم والتهديدات فقط (Intromission) ؛ والذكور الذين تزاوجوا لقذف واحد (القذف). بعد ساعة واحدة من نهاية الاختبار ، تمت التضحية بالذكور لتحليل تعبير cFos. تمت مطابقة المجموعات ذات الخبرة الجنسية على معايير السلوك الجنسي ولم تكن هناك اختلافات كبيرة بين المجموعات قبل الاختبار النهائي. علاوة على ذلك ، لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات الساذجة وذات الخبرة في أعداد الحوامل زائد التداخل أثناء الاختبار النهائي.

Perfusions: تعبير cFos

كان جميع الذكور تخدير عميق مع pentobarbitol الصوديوم (270 ملغم / مل) وكان perfused مع transcardially مع 4 ٪ بارافورمالدهيد (500 مل ، PFA). بعد إزالة أدمغة التروية على الفور وبعد إصلاحها لمدة ساعة واحدة في نفس المثبتات ، ثم نقلها إلى محلول السكروز 20 ل cryoprotection. تم تقسيم العقول على مجهر مشبع (Microm ، Walldorf ، ألمانيا) في الأقسام الاكليلية من 35 µm وتم جمعها في الأقسام المتوازية 4 في محلول بروتينات التبريد (30٪ سكروز في 0.1 M PB يحتوي على 30٪ ethylene glycol و 0.01٪ azide) ومخزنة في −20 ° C حتى معالجة أخرى.

المناعية

أجريت جميع التحضيرات في درجة حرارة الغرفة مع التحريض اللطيف. تم غسل الأجزاء العائمة الحرة على نطاق واسع باستخدام 0.1M ملحوم فوسفات الصوديوم (PBS). تم حظر الأقسام باستخدام 1٪ H2O2 (الحل الأسهم 30 ٪) في PBS لدقائق 10 ، ثم شطف على نطاق واسع مرة أخرى مع برنامج تلفزيوني. وحضنت أقسام مع حل الحضانة (PBS تحتوي على 0.1 ٪ ألبومين المصل البقري و 0.4 ٪ تريتون X-100) لساعة 1. أجريت التحضيرات الأولية للجسم المضاد في محلول الحضانة طوال الليل في درجة حرارة الغرفة. تم شطف أقسام تلطيخ في برنامج تلفزيوني ، شنت على الشرائح الزجاجية المشحونة زائدا و coverslipped مع زاي ديبوتيل الفثالات (DPX).

الرؤساء الماليين / أوركسين

تمت معالجة سلسلة واحدة من المقاطع من أجل cFos و orexin. تم تحضين الأقسام بين عشية وضحاها مع جسم مضاد أثير من الأرانب يتعرف على cFos (أرنب مضاد لـ cFos ، sc-52 ؛ 1: 10 000 ، Santa Cruz Biotechnology ، Santa Cruz ، CA) يليه حضانات 1 مع أرنب مضاد لعامل biotinylated (1: 500 ، Vector Laboratories ، Burlingame ، CA) ومجمع avidin الفجل البيروكسيديز (1: 1000 ، ABC kit ، Vector Laboratories ، Burlingame ، CA). تم تحضين الأقسام لدقائق 10 في 0.02٪ diaminobenzidine (DAB) (Sigma، St. Louis، MO) في 0.1M الفوسفات العازلة (PB) التي تحتوي على 0.012٪ hydrogen peroxide و 0.08٪ nickel sulfate ، مما ينتج عنه منتج رد فعل أسود أزرق. ثم تم تحضين الأقسام بين عشية وضحاها مع أضداد مرتبط بالأرانب يتعرف على orexin-A (أرنب مضاد ل orexin-A ، H-003-30 ؛ 1: 20 000 ، Phoenix Pharmaceuticals ، Burlingame ، CA) ، يليه حضانة 1 ساعة مع مضاد حيوي من الماعز biotinylated -rabbit و ABC ، ​​كما هو موضح أعلاه. أخيراً ، تم تحضين المقاطع لدقائق 10 مع 0.02٪ DAB في 0.1M PB التي تحتوي على 0.012٪ فوق أكسيد الهيدروجين ، مما ينتج عنه منتج تفاعل بني محمر.

تم وصف جميع الأجسام المضادة سابقًا (تشن وآخرون ، 1999; Satoh وآخرون ، 2004; Solomon et al.، 2007). وشملت الضوابط immunohistochemical الحذف من الأجسام المضادة الأولية ، تحليل لطخة غربية تدل على فرق واحدة في الوزن المناسب (cFos) ، وفقدان إشارة orexin immunohistochemical مع آفات أوريكسين B-saporin (orexin).

تحليل البيانات

الرؤساء الماليين / أوركسين

تم حساب الخلايا العصبية المسماة orexin أو orexin و cFos على المستوى الثنائي في ثلاثة أقسام تمثيلية لكل حيوان معروف أنها تحتوي على أعلى عدد من السكان العصبيين في orexin (ساكوراي وآخرون ، 1998) تمتد −2.3 ملم إلى −3.6 ملم من bregma (Paxinos و Watson ، 1998()الشكل 1) ، باستخدام أنبوب رسم موصولة إلى مجهر Leica (Leica Microsystems ، Wetzlar Germany) ، من قبل ملاحظ أعمى للمجموعات التجريبية. تم تحديد PFA-DMH و LHA بناءً على موقع fornix (الشكل 1a). تم حساب النسب المئوية من الخلايا العصبية orexin التي تعبر عن cFos ومتوسطها في نصف الكرة الأرضية لكل حيوان ، وتم حساب وسائل المجموعة. تم تحديد الأهمية الإحصائية بين المجموعات باستخدام ANOVA ذات الاتجاهين مع التجربة الجنسية والسلوك الجنسي أثناء الاختبار النهائي كعوامل تليها اختبارات فيشر LSD بمستوى ثقة 95٪.

الشكل 1 

موقع الخلايا العصبية الأوركسن في منطقة ما تحت المهاد. (أ) موقع تشريحي من الخلايا العصبية الأوركسن في منطقة ما تحت المهاد. (Paxinos و Watson ، 1998) ، شريط مقياس: 200 µm. (ب) الخلايا العصبية orexin المسمى واحد في PFA-DMH في حيوان تحكم unmated. (ج) أوريكسين ...

دراسات أوريكسين في الآفة

العمليات الجراحية

تم إيواء الذكور بشكل فردي وأعطوا جلسة تزاوج قبل الاختبار مع أنثى متقبلة قبل الإصابة بالآفة وجراحة شرجية. تم تسجيل السلوك الجنسي كما هو موضح أعلاه وتمت مطابقة المجموعات بناءً على معايير سلوك التزاوج. تم تخدير الفئران الذكور مع isoflurane (مختبرات Abbot ، سانت لوران ، كيبيك ، كندا) باستخدام جهاز الغاز Surgivet Isotec4 (قسم البيطري الطبي سميث ، ماركام ، أونتاريو ، كندا) ووضعها في جهاز التجسيمي (Kopf Instruments ، Tujunga ، CA) مع قناع غاز يغطي الأنف والفم للحفاظ على التخدير. تم إجراء شق لفضح الجمجمة و lambda وجدت bregma وتقرر أن يكون مستوى. تم حفر ثقب في الجمجمة باستخدام مثقاب دريميل (Dremel، Racine، WI) و micropipettes الزجاجية (قطر 40µ، World Precision Instruments Inc، Sarasota، FL) مملوءة بالسموم المستهدف orexin-B saporin (IT-20، Advanced نظم الاستهداف ، سان دييغو ، كاليفورنيا ؛ 200ng / ميكرولتر في برنامج تلفزيوني) ؛ أو خفضت السم غير المقترن BLANK-saporin (IT-21، Advanced Targeting Systems، San Diego، CA؛ 200ng / µL in PBS؛ controls sham) في منطقة ما تحت المهاد. وقد تبين أن هذا السم المستهدف يرتبط ارتباطًا كبيرًا بالخلايا التي تعبر عن مستقبلات الأوركستين 2 (ORX2) ومع تقارب أقل بشكل ملحوظ للخلايا التي تعبر عن ORX1 (Gerashchenko وآخرون ، 2001) ، وقد ثبت أنها تقوم بشكل خاص بإخراج الخلايا العصبية الأويكسينية في منطقة ما تحت المهاد (Frederick-Duus et al.، 2007). تم حقن الحقن الثنائي لـ 1 µL (2 per hemisphere) في الإحداثيات التالية: AP = −2.8 و −3.2؛ ML = 0.7 و 0.8 DV = −9.0 (Paxinos و Watson ، 1998). بعد كل ضخ ، تركت الإبرة في مكانها لمدة دقيقة 3 للسماح بالانتشار. تم إزالة الإبر ببطء وتم إغلاق الجروح بمشابك الجرح. بعد أسبوعين من جراحة الآفة ، تم اختبار جميع الذكور للتجربة الجنسية خلال أربع تجارب التزاوج ، ثم تعرضوا للمدرج و / أو اختبار متاهة زائد زائد (انظر أدناه). أجريت العمليات الجراحية في ثلاث مجموعات مختلفة ، مفصولة عدة أسابيع ، للوصول إلى أعداد كافية من الحيوانات لكل مجموعة.

السلوك الجنسي

تم اختبار جميع الذكور للسلوك الجنسي أثناء جلسات التزاوج 4 التي تجرى كل يومين في القفص المنزلي. خلال كل جلسة ، يتم تقليد الذكور مع أنثى تقبلا لقذف واحد أو لدقائق 60 ، أيهما أتى أولاً. تم تسجيل سلوك التزاوج كما هو موضح أعلاه ، كما تم حساب كفاءة الجمع [أعداد التقاطعات / (أعداد التلال + أعداد التدخلات)]. تمت مقارنة الاختلافات الإحصائية في معايير الأداء الجنسي بين الآفة والمجموعات الزائفة لكل تجربة باستخدام طريقة ANOVA مع جراحة التقرح كعامل ، واختبار فيشر LSD بمستوى ثقة 95٪ ، أو عند الاقتضاء ، تم إجراء اختبارات غير بارامترية باستخدام طريقة ANOVA في اتجاه واحد من Kruskal-Wallis مع جراحة الآفة كعامل واختبار Dunn بمستوى ثقة 95٪. بالإضافة إلى ذلك ، تمت مقارنة بيانات كل مجموعة ببيانات ما قبل الجراحة باستخدام اختبارات t المقترنة.

الدافع الجنسي: اختبار المدرج

بعد اختبار السلوك الجنسي ، تم اختبار مجموعة فرعية من الذكور ذوي الخبرة الجنسية الآن للدوافع الجنسية باستخدام جهاز المدرج المستقيم (MED Associates Inc.، St. Albans، VT) (120 cm long؛ لوبيز وآخرون ، 1999). اعتادت الذكور على جهاز المدرج أكثر من تجربتين في وقت لاحق من 10 أجريت في نفس اليوم. بعد ذلك ، أجريت تجربتان اختبار. خلال التجربة الأولى ، تم وضع حيوان التحفيز (الأنثى الستيرويدية أو الأنثوية أو الذكورية) في صندوق هدف مع فواصل مثقبة في نهاية المدرج. تم استخدام مروحة لتفجير رائحة الحيوانات المنبهة تجاه الذكر. تم وضع الذكور التجريبية في صندوق البداية ، فتح الباب للسماح بالوصول إلى المدرج ، وسجل الوقت للوصول إلى مربع الهدف. بمجرد الوصول إلى مربع الهدف ، تم إعطاء الذكور 30 ثانية للتفاعل مع حيوان التحفيز خلف الشاشة. تبعت التجربة الثانية المماثلة ساعة 1 لاحقًا. تم تحليل الدلالة الإحصائية بين الأوقات للوصول إلى مربع الهدف بين الإصدار التجريبي 1 والتجربة 2 باستخدام اختبارات t المقترنة بمستوى ثقة 95٪. تم تحديد أهمية إحصائية بين المجموعات باستخدام ANOVA في اتجاه واحد مع جراحة الآفة كعامل تليها اختبارات فيشر LSD مع مستوى ثقة 95 ٪.

سلوك يشبه القلق: مرتفع زائد المتاهة

تم اختبار مجموعة فرعية من الذكور من ذوي الخبرة الجنسية الآن لسلوك يشبه القلق لتحديد ما إذا كانت آثار آفات orexin على الأداء الجنسي أو الدافع بسبب التغيرات في القلق أو الإثارة. تعرض الذكور إلى جهاز متاهة زائد مرتفع (EPM؛ MED Associates Inc، St. Albans، VT) في غرفة مضاءة بشكل مشرق خلال نهاية مرحلة الضوء. تألفت EPM من 4 يسلح كل 50 سم في الطول الممتد من تقاطع مركزي وكان ارتفاع 75 سم. كانت ذراعان من المتاهة مفتوحة على البيئة الخارجية واثنين أخرى كانت محاطة بإرتفاع داكن 40 سم. تم وضع الحيوانات على EPM ومراقبتها لمدة خمس دقائق. تم تسجيل الوقت المستغرق في الأذرع المفتوحة والمغلقة ، وإجمالي عدد الإدخالات في كل ذراع باستخدام صفائف photobeam. تم تحديد الأهمية الإحصائية بين المجموعات باستخدام ANOVA في اتجاه واحد مع آفة كعامل تليها اختبارات فيشر LSD مع مستوى ثقة 95 ٪.

perfusions والتزاوج الناجم عن cFos

بعد كل الاختبارات السلوكية ، تم تخدير جميع الذكور بعمق مع البنتوباربيتول الصوديوم (270mg / mL) وتم إعطائهم عن طريق إنزيم مع 500 mL من 4٪ PFA للتحقق من الآفة كما هو موضح سابقا. بالإضافة إلى ذلك ، لاختبار آثار آفات الأوركسين على تعبير cFos الناجم عن التزاوج ، تتزاوج مجموعات من ذكور الشام والذرية حتى القذف واحدة. بعد ساعة واحدة من القذف ، تم استخدام perfcardially الذكور مع 4 ٪ PFA كما هو موضح أعلاه. لم يتم إدخال نصف الذكور في هذه المجموعة إلى أنثى وتمت الاستفادة من القفص المنزلي لتكون بمثابة ضوابط غير مقيدة.

المناعية

تم تجزئة العقول باستخدام مجهر مجمد في سلسلة 4 المتوازية للأجزاء الإكليلية 35 andm وتخزينها كما هو موضح أعلاه. للتحقق من الآفة ، كانت واحدة من المقاطع التي تحتوي على الوطاء من جميع تجارب الآفة مفردة وحيدة لـ orexin باستخدام نفس الأرانب anti-orexin-A و DAB البروتوكول الموصوف أعلاه. تم ملطخة سلسلة من المقاطع من الحيوانات التي تم تزاوجها من أجل cFos و orexin كما هو موضح أعلاه.

التحقق من صحة الآلام

في كل حيوان ، تم حساب عدد من الخلايا العصبية orexin immunoreactive لـ orexin بشكل ثنائي في PFA-DMH و LHA في أقسام 3 معربا عن العدد الأقصى لخلايا orexin في أدوات التحكم غير الجراحية ، −2.3 mm إلى −3.6 mm من bregma كما هو موضح أعلاه. تم حساب متوسط ​​عدد الخلايا لكل نصفي لكل حيوان ، وتم حساب وسائل المجموعة. تم استخدام حيوانات مراقبة غير جراحية (من تجارب cFos) لتحديد أرقام سليمة / خط الأساس من الخلايا العصبية الأوركسين ويتم التعبير عن البيانات كنسب مئوية مقارنة بالذكور غير العمليات الجراحية الذكور (الشكل 2). تم إدراج الذكور التي لديها أقل من 20٪ orexin cells مقارنة بحيوانات مكافحة غير الجراحة في مجموعة الآفة. تم تضمين الحيوانات التي يزيد حجمها عن 20٪ ، ولكن أقل من 80٪ في مجموعة آفات جزئية. لم تتحقق ضوابط الشام تغييرات كبيرة في أعداد خلايا الأوركسين. تم حساب الأهمية الإحصائية بين حيوانات الآفات الشامبة والجزئية والكامل باستخدام اختبار ANOVA أحادي الاتجاه واختبار فيشر LSD بمستوى ثقة 95٪.

الشكل 2 

التحقق من الآفة. صور تمثيلية تظهر orexin (A) و MCH (B) الخلايا في حيوان الآفة الزائفة حقنت مع BLANK-saporin. صور تمثيلية تظهر فقدان خلايا الأوركسين (C) ، ولكن خلايا MCH سليمة (D) في حيوان آفة يتم حقنها مع orexin ...

خصوصية الآفة

للتحقق من أن الآفات كانت مقتصرة على الخلايا العصبية orexin ، فإن سلسلة واحدة من المقاطع التي تحتوي على الوطاء من مجموعة فرعية من الحيوانات الشامخة والآفات (n = 20) كانت مناعية من أجل هرمون تركيز الخلايا الصباغية (MCH) ، وهو ببتيد تحت المهاد يحتوي على مكان متداخل (لكن لا يوجد colocalization) مع الخلايا العصبية orexin (Broberger et al.، 1998) ، باستخدام الأجسام المضادة التي أثيرت أرنب التعرف على صحة الأمومة والطفولة (أرنب anti-MCH ، H-070-47 ؛ 1: 150 000 ، Phoenix Pharmaceuticals ، Burlingame ، CA) و DAB كما هو موضح سابقًا. الخلايا العصبية MCH التعبير عن ORX1 (Bäckberg et al.، 2002) ولكن ليس ORX2 (فولجين وآخرون ، 2004) ، ولم يتم تقليلها بشكل كبير بعد العلاج ب Orexin B-saporin (Frederick-Duus et al.، 2007). تم عد الخلايا المانعة للخلايا (MCH) بشكل ثنائي في قسمين لكل حيوان (شام: n = 7 ؛ الآفة n = 5) ، باستخدام أقسام بديلة لتلك التي تم تحليلها للخلايا العصبية orexin. لم تقلل الآفات بشكل ملحوظ من عدد الخلايا العصبية في MCH إما في PFA-DMH أو LHA (الجدول 1; الشكل 2b ، د. PFA-DMH: p = 0.47؛ LHA: p = 0.33). علاوة على ذلك ، تم حساب تعبير cFos الناجم عن التزاوج بشكل ثنائي في قسم تمثيلي واحد لكل حيوان (sham: n = 4؛ lesion n = 3) ، باستخدام أقسام بديلة لتلك التي تم تحليلها للخلايا العصبية orexin. لم تؤثر الآفات على تعبير cFos الناجم عن التزاوج في PFA-DMH أو LHA (الجدول 1. PFA-DMH: p = 0.53؛ LHA: p = 0.82). وأخيرًا ، كانت المقاطع التمثيلية المستخدمة في تعداد خلايا orexin (الحيوانات: sham: n = 6 ؛ les: n = 6) هي مضاد Nissl باستخدام cesylyl البنفسج (5 g cresyl violet acetate (C-5042، Sigma، St. Louis، MO)، 0.5 g من ثلاثي أسيتات الصوديوم (S209 ، Thermo Fisher Scientific ، أوتاوا ، أونتاريو ، كندا) ، 1L ماء مقطر مزدوج مع حامض الخليك الجليدي (AX0073-6 ، EMD Chemicals ، ميسيسوجا ، أونتاريو ، كندا) عند الرقم الهيدروجيني: 3.14). تم إجراء تعداد الخلايا العصبية الملطخة من Nissl في مناطق تحليل معيارية (250 µm × 200 µm) في الموقع العام لعصبونات orexin. لم تختلف أعداد الخلايا العصبية الملطخة ب (Nissl) بين المجموعتين الشريرة والآفات (الجدول 1. PFA-DMH: p = 0.23؛ LHA: p = 0.33).

الجدول 1 

التحقق من خصوصية الآفة: أظهر تحليل أعداد الخلايا العصبية الملون لنيسل، صحة الأم والطفل أو التزاوج الناجم عن الرؤساء الماليين أنه لم يكن هناك خسارة كبيرة من الخلايا العصبية بشكل عام، وخلايا صحة الأم والطفل، أو التزاوج يسببها تفعيل العصبي في PFA-DMH أو ...

منذ تم عرض نقص في orexin للمساهمة في التغفيق في الفئران (Chemelli وآخرون ، 1999) ، كلاب (لين وآخرون ، 1999) والبشر (سيجل ، 1999; نيشينو وآخرون ، 2000; بيرون وآخرون ، 2000; ثاننيكال وآخرون ، 2000) لوحظت الحيوانات لضمان عدم وجود النمط الظاهري للخدار. تمت ملاحظة الحيوانات طوال مدة الاختبارات السلوكية المذكورة في هذه الدراسة ولم تظهر أي خصائص خاصة بالخدار.

تعبير cFos الناجم عن التزاوج في حيوانات الجروح

احصي عدد الخلايا الرؤساء الماليين-مناعيا ثنائيا في أقسام 3 في الحيوانات في المناطق القياسية للتحليل في المنطقة الجوفية السقيفية (VTA، 900 × 900 ميكرون)، MPOA (400 × 600 ميكرون)؛ النواة المتكئة (بريدا) الأساسية وقذيفة (400 × 600 ميكرون) والحوف، infralimbic والحزامية الأمامية المناطق الفرعية للقشرة الفص الجبهي الأنسي (mPFC) (600 × 800 ميكرون في شبه المنطقة) من قبل احظ أعمى إلى المجموعات التجريبية . تم حساب المتوسطات لكل حيوان ، وتم حساب وسائل المجموعة. تم حساب الأهمية الإحصائية باستخدام ANOVA ذات الاتجاهين مع التجربة الجنسية والآفة كعوامل متبوعة باختبار فيشر LSD بمستوى ثقة 95٪.

النتائج

Orexin تفعيل الخلايا العصبية أثناء السلوك الجنسي

لوحظ وجود زيادة معنوية في تعبير cFos في عصبونات orexin بعد السلوك الجنسي في كل من PFA-DMH (F(5,31) 63.4 ع <0.001 ؛ الشكل 3a) و LHA (F(5,31) 10.4 ع <0.001 ؛ الشكل 3b) ، دون أي تأثير للتجربة الجنسية. على وجه التحديد، في كل من الحيوانات ساذجة جنسيا وذوي الخبرة، وأظهرت جميع المجموعات التجريبية من الذكور عرض معلمات مختلفة من السلوك الجنسي (التحقيق الإناث اودقية، والتعرض لروائح الإناث داقية، عرض المتصاعدة، intromissions، أو القذف) الحث على قدم المساواة من الرؤساء الماليين مقارنة المنزل ضوابط قفص مع نسبة مئوية أعلى من الخلايا أوركسين تفعيلها في PFA-DMH (60-80٪) مقابل LHA (14-33٪)، دون فروق بين المجموعات التجريبية. هذه النتائج تشير إلى أن الخلايا العصبية orexin يتم تفعيلها بعد التعرض للإناث التحفيز دون مزيد من التنشيط أثناء الأداء الجنسي. علاوة على ذلك ، لا يعتمد التنشيط على التحفيز الباعث على التحفيز الأنثوي إذ أن كل من الإناث غير المستقبلة والمستقبلة تحرض التفعيل في الذكور ذوي الخبرة الجنسية.

الشكل 3 

أبدت الخلايا العصبية Orexin في PFA-DMH (A) و LHA (B) cFos بعد كل معالم سلوك التزاوج في الحيوانات الساذجة والخبيرة. الاختصارات: HC ، قفص المنزل. AF: أنثى مشوهة ؛ EF، estrous female؛ م ، جبل. IM ، Intromission ؛ ه ، القذف. ...

آثار الآفات orexin

السلوك الجنسي

أدت آفات Orexin في تسهيل السلوك الجنسي (جبل الكمون: F(2,47) 3.962. ع = 0.034. وقت استجابة intersission: H = 9.104؛ ع = 0.011). خلال تجربة التزاوج الأولى ، أظهر الذكور الآفات اختصارات أقصر للتثبيت والتداخل مقارنة بالحيوانات الشاذة (زمن الانتظار المتراكم: p = 0.03 ؛ زمن الانتقال في التداخل: p = 0.01؛ الشكل 4a –ب) ومقارنة بوقت الاستجابة أثناء تجربة التزاوج ما قبل الجراحة (وقت استجابة mount: p = 0.02 ؛ وقت استجابة intentission: p = 0.03 ؛ لا تظهر البيانات). لم يختلف الذكور الأذيني الجزئي بشكل كبير عن الذكور الشاذين ، ولم تختلف أي مجموعة عن تجربة التزاوج ما قبل الجراحة. تم التخفيف من آثار الآفات على الأذرع المتطايرة والتأجيل مع التجربة الجنسية ، حيث لم تكن هناك اختلافات بين المجموعات ، خلال أي من التجارب اللاحقة (التجربة 4 هو موضح في الشكل 4a –ب). اختطارات القذف (الشكل 4c) ، أعداد من الجبال (الشكل 4d) والتفرقة (الشكل 4e) فضلا عن كفاءة الجمع (الشكل 4f) لم تختلف بشكل كبير بين المجموعات خلال أي من التجارب أو داخل كل مجموعة بين تجربة التزاوج الأولى واختبار ما قبل الجراحة.

الشكل 4 

تقلل آفات Orexin من فترات التأخير للتثبيت والتسلل عند الذكور الساذجين جنسياً أثناء تجربة 1. لم تؤثر آفات Orexin على التزاوج أثناء تجربة 4 ، بعد أن اكتسب الذكور خبرة جنسية. (أ) جبل الكمون. (ب) اختفاء Intranission. (ج) القذف ...
اختبار المدرج

لم تؤثر آفات Orexin على التحفيز الجنسي الذي تم تقييمه في اختبار المدرج المستقيم في الذكور ذوي الخبرة الجنسية. على مدار تجربتين تجريبيتين ، كان ذكور الآفة يتقدمون بشكل أسرع نحو أنثى نادرة في التجربة الثانية مقارنة مع أول تجربة (p = 0.03؛ الشكل 5). مثل وقت التشغيل المتزايد يدل على الدافع الجنسي (لوبيز وآخرون ، 1999). الآفة الجزئية والذكور الشريرين ركضوا بشكل أسرع نحو أنثى نادرة خلال تجربة 2 (p = 0.03) ، على الرغم من أن هذا فشل في الوصول إلى أهمية في الذكور الشام (p = 0.052). أظهر أي من المجموعات سرعة متزايدة لتشغيل نحو الإناث أو الذكور anest خلال an تجربة 2. علاوة على ذلك ، لم تلاحظ أي فروق ذات دلالة إحصائية بين الذكور الخاطئة والجزئية والآفات على السرعة للتوجه نحو أي حيوان محفز في أي من التجارب 1 ولا تجربة 2 ، مما يدل على عدم وجود فروق في النشاط العام على المدرج.

الشكل 5 

لم تؤثر آفات Orexin على التحفيز الجنسي في تجربة الرجال جنسياً. تظهر مرات للوصول إلى أنثى estrous في اختبار المدرج خلال كل من التجارب 1 و 2. * يشير إلى انخفاض كبير في الوقت للوصول إلى الإناث في محاكمة 2 مقارنة ب ...
سلوك شبيه بالقلق

تشير النتائج حتى الآن إلى أن الآفات قد تسهل بدء السلوك الجنسي في الحيوانات الساذجة من خلال تأثير محتمل على الاستجابة لسلوكيات جديدة و / أو شبيهة بالقلق عندما يواجه الذكور أنثى جديدة. في الدعم ، أظهر الذكور الآفة سلوك يشبه القلق على EPM ، وينظر إليه كنسبة مئوية منخفضة من الوقت الذي يقضيه في الأسلحة المغلقة ، (P = 0.012. الشكل 6) ونسبة متزايدة من الوقت على أذرع مفتوحة (p = 0.023؛ الشكل 6) مقارنة مع الذكور الشام. الآفات الجزئية ليس لها تأثير كبير. هذه البيانات تدعم كذلك أن الآفة تقلل السلوك الشبيه بالقلق.

الشكل 6 

خفضت آفات Orexin السلوك الشبيه بالقلق على المتاهة المرتفعة. انخفضت نسبة الوقت الذي يقضيه في الأسلحة المغلقة (يسار) ونسبة من الوقت في أذرع مفتوحة (يمين) تم زيادة في الذكور lesioned. * يشير إلى اختلاف كبير ...
cFos التعبير

لتقييم ما إذا أوركسين الذاتية يساهم في تنشيط الخلايا العصبية التي يسببها التزاوج في مناطق الدماغ معصب أوركسين، تحليل التعبير الرؤساء الماليين الناجم عن التزاوج في قلب VTA، بريدا، وشركة شل، وأجريت MPOA وmPFC. في كل من الآفة والذكور الذكور ، زاد التزاوج بشكل ملحوظ من cFos في جميع مناطق الدماغ التي تم تحليلها مقارنة بالضوابط غير المحددة (الجدول 2). لم تؤثر الآفات على التنشيط العصبي ، حيث لم تختلف حيوانات الشام والأذى في تعبير cFos الأساسي أو التزاوج.

الجدول 2 

التطعيم الناجم عن التزاوج في مجموعات الزائفة والجزئية والآفات مقارنة بضوابط عدم التزاوج في حالة الآفة نفسها.

مناقشة

التحقيق في هذه الدراسات دور orexin الذاتية في الأداء الجنسي والتحفيز في الفئران الذكور. وجد أن orexin ليس ضروريًا للدوافع أو الأداء الجنسي. بدلا من ذلك ، يتم تنشيط الخلايا العصبية الأوركسين من قبل التحفيز الأنثوي ، بغض النظر عن الحالة الهرمونية للتجربة الأنثوية أو الجنسية للذكور. وعلاوة على ذلك ، فإن إزالة الأوريكسين الذاتية المنشأ عن طريق آفات الأكسجين الخاصة بالأكسجين قد قلل من السلوكيات الشبيهة بالقلق وسهل البدء بالسلوك الجنسي لدى الذكور الساذجين جنسياً. وبالتالي ، فإن نتائج هذه الدراسة تدعم دور orexin في الإثارة (de Lecea et al.، 2006; هاريس وأستون جونز ، 2006; ساكوراي ، 2007; Boutrel et al.، 2009; Furlong و Carrive ، 2009; Furlong وآخرون ، 2009) والقلق (سوزوكي وآخرون ، 2005; ديفيس وآخرون ، 2009; لي وآخرون ، 2010) ، ولكن لا تدعم دورًا حيويًا لـ orexin في التحفيز أو الأداء الجنسي.

نتائج هذه الدراسات توضح بشكل أكبر دور الأوريكسين الذاتية والنتائج المتناقضة الظاهرة للدراسات السابقة التي تدرس دور الأوركسين في السلوك الجنسي الذكري باستخدام الأدوات الدوائية. وقد أدى ضخ intoro-mPOA خارجية المنشأ أويكسين- A إلى زيادة الإثارة الجنسية وتحسين الأداء الجنسي ، مما يشير إلى أن orexin قد تعمل في mPOA لزيادة الدافع وأداء السلوك الجنسي (جوليا وآخرون ، 2003). ومع ذلك ، في المقابل ، دفع ICV من orexin-A الدافع الجنسي الموهن والإثارة (Bai et al.، 2009) ، في حين أن مضاد مستقبلات الأوريكسين ليس له أي تأثير على الإثارة الجنسية (Bai et al.، 2009) ، مما يشير إلى الأويكسين الذاتية قد لا تلعب دورا في الدافع الجنسي. وأخيرًا ، تم إظهار حصار ORX1 بواسطة الحقن النظامية ليؤثر فقط على الأداء التوليدي بشكل طفيف (Muschamp وآخرون ، 2007). من هذه الدراسات المتضاربة ، يمكن استخلاص بعض الاستنتاجات. أولاً ، قد يؤثر تطبيق الأكسجين-أ المنشأ الخارجي على السلوك ، ولكن حصار ORX1 لا يخلو من تأثيرات كبيرة ، مما يوحي بدور ثانوي للأوركسين الداخلي في تنظيم السلوك الجنسي الذكري (Bai et al.، 2009). النتائج الحالية تدعم هذا الاحتمال. تشير الدراسات الحالية التي تستخدم إزالة الأوريكسين ، عن طريق الآفات الخاصة بالأكسجين الخاصة بـ orexin إلى أن الأوريكسين الداخلي ليس ضروريًا للدوافع أو الأداء الجنسي ، بما يتماشى مع الملاحظات Bai et al (2009). من المهم ، مع ذلك ، ملاحظة أن عدم وجود آثار جروح الأوريكسين على الدافع الجنسي في المدرج قد يرجع إلى حقيقة أن الحيوانات قد اكتسبت خبرة جنسية قبل اختبار التحفيز الجنسي ، وبالتالي قد يكون عدم وجود تأثير في اختبار المدرج مستحقًا للتجربة الجنسية للذكور. قد تتناول التجارب المستقبلية هذا التحذير من خلال اختبار تأثيرات آفات الأوركسين على الدافع الجنسي لدى الذكور الساذجين.

من الممكن أيضًا أن تكون برمجيتا orexin و النوعين الفرعيين لمستقبلات orexin (ORX1 و ORX2؛ ساكوراي وآخرون ، 1998) قد ينظم السلوك الجنسي في اتجاهين متعاكسين. من خلال استخدام تقنيات آفة الخلية الأويكسين ، تم استبعاد الترابطات لكلا النوعين الفرعيين لمستقبلات الأوريكسين (orexin-A و B) في الدراسة الحالية. يتم التعبير عن النوعين الفرعيين المستقبلين في مناطق الدماغ المختلفة (Trivedi et al.، 1998; ماركوس وآخرون ، 2001) وقد تبين أن تنظيم الذاكرة بشكل تفاضلي لجاذبية الكوكايين المستحث (سميث وآخرون ، 2009). وقد ركزت الدراسات السابقة على السلوك الجنسي في المقام الأول على دور orexin-A و ORX1 (انظر المناقشة أعلاه). يستهدف المضاد لمستقبلات الأوريكسين SB334867 المستخدم في الدراسات حتى الآن على وجه التحديد ، ORX1 الذي له تقارب كبير مع orexin-A وتقارب أقل بشكل ملحوظ مع orexin-B (ساكوراي وآخرون ، 1998). وبالمثل ، تم استخدام orexin-A مثل الأوريكسين الخارجي في الدراسات السابقة (جوليا وآخرون ، 2003; Bai et al.، 2009). هناك حاجة لدراسات مستقبلية لدراسة دور orexin-B و ORX2 في تنظيم السلوك الجنسي للذكور.

اختبرت الدراسة الحالية آثار فقدان الأويكسين على المدى الطويل. Muschamp وآخرون. (2007) اقترح أن الحد من المدى الطويل من الأوريكسين بعد الإخصاء قد يؤدي إلى فقدان الدافع الجنسي والأداء. تناقضت هذه الفرضية مع النتائج الحالية لأن آفات خلايا الأويكسين لم تقلل من الدوافع أو الأداء الجنسي. من الممكن أن يكون فقدان الأويكسين طويل المدى في الدراسة الحالية قد نتج عنه آليات تعويضية ، على الرغم من عدم اكتشاف أي تغيرات في التنشيط العصبي الناجم عن التزاوج داخل الدائرة التي تتوسط السلوك الجنسي. ومع ذلك ، فمن الواضح أن انخفاض أو نقص orexin لا يمنع السلوك الجنسي. علاوة على ذلك ، فإن نتائج الدراسة الحالية لا تدعم دورًا رئيسيًا ل orexin في تحريض تعبير cFos عن طريق السلوك الجنسي. وقد ثبت بوضوح أن orexin يساهم في تنشيط الخلايا العصبية في VTA (Korotkova وآخرون ، 2003; Borgland et al.، 2006; ناريتا وآخرون ، 2006; Vittoz et al.، 2008). ومع ذلك ، فإن آفات أوركسين الخلية لم تمنع التنشيط العصبي الناجم عن التزاوج في VTA ، أو في أي مناطق دماغية أخرى ذات صلة بالمكافأة ، على الرغم من وجود ألياف orenin-immunoreactive على مقربة من الخلايا العصبية المنشطة في الذكور الشام. وهكذا ، لا يبدو أن التفعيل العصبي الناجم عن التزاوج في مناطق الدماغ هذه يعتمد على إجراء orexin.

هناك اكتشاف غير متوقع إلى حد ما للدراسة الحالية هو تأثير جروح orexin على تيسير بدء السلوك الجنسي في السذاجة الجنسية ، ولكن ليس من ذوي الخبرة من الحيوانات. وقد تبين أن هذا يرتبط بانخفاض في السلوكيات الشبيهة بالقلق. لذلك ، قد تكون آثار الآفات orexin على الدافع الجنسي والأداء الثانوي لآثاره على القلق والاستثارة. في الواقع ، أشارت الدراسات السابقة إلى دور للـ orexin في القلق ، حيث قلل الـ ICV من orexin-A الوقت على الأذرع المفتوحة لـ EPM في الفئران (سوزوكي وآخرون ، 2005). انخفض ضخ orexin-A في نواة paraventricular من المهاد من ذكور الفئران الوقت الذي يقضيه في منطقة المركز من غرفة الحقول المفتوحة وانخفاض استكشاف الأجسام الجديدة ، مما يشير إلى أن orexin قد تكون متورطة في توليد السلوك الشبيه بالقلق (لي وآخرون ، 2010). بالإضافة إلى ذلك ، زادت الفئران الذكور المهيمنة التي تظهر زيادة المخاطرة في EPM مستويات ORRNANUMX مرنا في mPFC (Davis وآخرون ، 2009). وقد ثبت أيضا Orexin لتغيير الاستجابات للتوتر (إيدا وآخرون ، 1999; إيدا وآخرون ، 2000) ، وتحفيز مستقبلات الأوركسين يزيد من إفراز عامل إزالة الكورتيكوتروفين (Al-Barazanji et al.، 2001; Singareddy وآخرون ، 2006) ، كورتيكوستيرون (إيدا وآخرون ، 2000; كورو وآخرون ، 2000) هرمون قشر الكظر (adrenocorticotropic hormone)كورو وآخرون ، 2000). مضادات أوريكسين حاليا في التجارب السريرية لعلاج الأرق ، وهو الاضطراب الذي غالبا ما يصاحب اضطرابات القلق (سوليفان ونيريا ، 2009) ، ومن المفترض أن مضادات أوريكسين يمكن أن تستخدم لعلاج اضطرابات القلق (ماثيو وآخرون ، 2008). وبالنظر إلى الدليل المتنامي للدور الذي يلعبه orexin في القلق والاستثارة ، يبدو أن آفات orexin قد تسهل بدء السلوك الجنسي لدى الذكور الساذجين عن طريق تقليل الاستجابات الشبيهة بالقلق المرتبطة بإدخال حافز جديد ، أي الأنثى.

شوهد التنشيط الكبير لعصبونات الأوركسين في أعقاب الاستثارة الجنسية والسلوك الجنسي في كل من الحيوانات الساذجة والحيوانية في كل من PFA-DMH و LHA ، مع 60-80٪ و 14 – 33٪ من خلايا orexin التي تعبر عن cFos ، على التوالي. هناك مجموعة من الأدلة تدعم التقسيم الثنائي في وظيفة أويكسين العصبية ضمن مجموعة خلايا أويكسين ، مع كون PFA-DMH متورطًا بشكل حاسم في الاستثارة و LHA كونهما حاسمين للسلوكيات المرتبطة بالثوابت (هاريس وآخرون ، 2005; هاريس وأستون جونز ، 2006, أستون جونز ، 2009a). ومن ثم ، فإن تنشيط خلايا أوميكسين PFA-DMH بواسطة المنبه الأنثوي يدعم الفرضية القائلة بأن الأويكسين يتم تنشيطه من قبل وهو أمر بالغ الأهمية للإثارة ، بما في ذلك الإثارة الجنسية لدى الذكور ذوي الخبرة والسذاجة ، والقلق المرتبط بحافز الإناث الجديد في الذكور الساذجين. ومع ذلك ، تم تنشيط خلايا PFA-DMH إلى مستويات مماثلة مستقلة عن تجربة الذكور والحالة الهرمونية للإناث ، مما يوحي بأن خلايا PFA-DMH تم تنشيطها أثناء الإثارة العامة وليس بالتحديد عن طريق الإثارة الجنسية. علاوة على ذلك ، لا تدعم دراساتنا بشكل كامل وجود مجموعة من خلايا الأويكسين ثنائية التفرع بالكامل حيث كان هناك تنشيط كبير لـ LHA بعد التعرض لجميع معايير الإثارة الجنسية والأداء ، بغض النظر عما إذا كانت السلوكيات مرتبطة بالمكافأة. وهكذا ، أظهر الذكور من ذوي الخبرة الذين تعرضوا إلى أنثى أندرو مساوي مستويات متساوية من تفعيل خلية أوريكسين في LHA مقارنة مع الذكور من ذوي الخبرة التي تقاربت على القذف. ومع ذلك ، ستشكل المجموعة الأخيرة فقط تفضيلاً مشروطًا للتزاوج (تينك وآخرون ، 2009)؛ مما يوحي بأن الجمع بين القذف أكثر فائدة من العناصر الأخرى للتزاوج. الدراسة الحالية لم تختبر على وجه التحديد دور orexin في المكافأة الجنسية ؛ لذلك هناك حاجة لدراسات مستقبلية لمعالجة هذا السؤال.

وباختصار ، فإن نتائج هذه الدراسات تثبت أن orexin ليس حاسما للأداء أو التحفيز الجنسي. وبدلاً من ذلك ، ثبت أن آفات أوركسين الخلوية تقلل من القلق ، مما يشير إلى أن الأوريكسين الداخلي ينطوي على زيادة القلق. علاوة على ذلك ، أدى إزالة الأوركسين إلى تسهيل بدء السلوك الجنسي لدى الذكور الساذجين جنسياً ، مما يشير إلى أن الأوركسين الداخلي قد يمنع بدء التزاوج ، ربما عن طريق زيادة القلق استجابة للحافز الجديد ، أي الأنثى. هذه النتائج توضح مزيد من الدوائر العصبية المشاركة في الأداء الجنسي والقلق ، وتضيف إلى مجموعة متنامية من الأدب على دور orexin في الوساطة من الإثارة والقلق.

شكر وتقدير

تم دعم هذا البحث من خلال المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة (R01 DA014591) والمعاهد الكندية لأبحاث الصحة (RN 014705) والمجلس الوطني لبحوث العلوم والهندسة في كندا (Discovery Grant (341710) إلى LMC.

الحواشي

إخلاء مسؤولية الناشر: هذا ملف PDF لمخطوطة غير محررة تم قبولها للنشر. كخدمة لعملائنا نحن نقدم هذه النسخة المبكرة من المخطوطة. ستخضع المخطوطة لنسخ وتنضيد ومراجعة الدليل الناتج قبل نشره في شكله النهائي القابل للامتثال. يرجى ملاحظة أنه أثناء اكتشاف أخطاء عملية الإنتاج قد يتم اكتشافها والتي قد تؤثر على المحتوى ، وتتنافي جميع بيانات إخلاء المسؤولية القانونية التي تنطبق على المجلة.

مراجع حسابات

  1. Agmo A. Male rat السلوك الجنسي. دماغ دماغ الدقة. 1997، 1: 203-209. [مجلات]
  2. Al-Barazanji KA، Wilson S، Baker J، Jessop DS، Harbuz MS. ينشط orexin-A المركزي محور الغدة النخامية-الغدة الكظرية ويحفز العامل الخافض لهرمون الكورتيكوتروبين و arginine vasopressin neurones في الفئران الواعية. ي Neuroendocrinol. 2001، 13: 421-424. [مجلات]
  3. Aston-Jones G، Smith RJ، Moorman DE، Richardson KA. دور الخلايا العصبية أونثيناميك الوهمي الوحشي في معالجة المكافأة والإدمان. الفارماكولوجيا العصبية. 2009a و 56 Suppl 1: 112 – 121. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  4. Aston-Jones G، Smith RJ، Sartor GC، Moorman DE، Massi L، Tahsili-Fahadan P، Richardson KA. الخلايا العصبية الموضعية أونكسين / hypocretin: دور في البحث عن المكافأة والإدمان. الدماغ الدقة. 2009b، 1314: 74-90. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  5. Bai YJ، Li YH، Zheng XG، Han J، Yang XY، Sui N. Orexin A impenationed sexual motivation in male male. Pharmacol Biochem Behav. 2009، 91: 581-589. [مجلات]
  6. Bäckberg M، Hervieu G، Wilson S، Meister B. Orexin receptor-1 (OX-R1) immunoreactivity في الخلايا العصبية المحددة كيميائيا في الوطاء: التركيز على أهداف orexin المشاركة في السيطرة على تناول الطعام والماء. Eur J. Neurosci. 2002، 15: 315-328. [مجلات]
  7. Baldo BA، Daniel RA، Berridge CW، Kelley AE. التراكب المتداخلة للأليكسين / hypocretin- والدوبامين-بيتا-هيدروكسيلاز الألياف المناعية في مناطق دماغ الفئران تتوسط الإثارة والتحفيز والتوتر. J Comp Neurol. 2003، 464: 220-237. [مجلات]
  8. Balfour ME، Yu L، Coolen LM. يعمل السلوك الجنسي والعناوين البيئية المرتبطة بالجنس على تنشيط نظام الميزولببيك في ذكور الجرذان. Neuropsychopharmacology. 2004، 29: 718-730. [مجلات]
  9. Benoit SC، Tracy AL، Davis JF، Choi D، Clegg DJ. وظائف الرواية من الببتيدات الوريدية المنومة: من الجينات إلى السلوك. التغذية. 2008، 24: 843-847. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  10. Borgland SL، Taha SASF، Fields HL، Bonci A. Orexin A in the VTA أمر بالغ الأهمية لتحريض اللدونة متشابك والتوعية السلوكية للكوكايين. الخلايا العصبية. 2006، 49 (4): 589-601. [مجلات]
  11. Boutrel B، Cannella N، de Lecea L. The role of hypocretin in driving arousal and goal-oriented behaviors. الدماغ الدقة. 2009 [بك المادة الحرة] [مجلات]
  12. Boutrel B، Kenny PJ، Specio SE، Martin-Fardon R، Markou A، Koob GF، de Lecea L. Role for hypocretin in mediating stress -ducedduced reinstatement of cocaine-seeking behavior. Proc Natl Acad Sci US A. 2005؛ 102: 19168 – 19173. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  13. Broberger C، De Lecea L، Sutcliffe JG، Hokfelt T. Hypocretin / orexin و melanin-concentrating cells-hypering cells تشكل تجمعات متميزة في القنب الجانبي hypothalamus: العلاقة مع neuropeptide Y وأنظمة البروتين agouti المرتبطة بالجين. J Comp Neurol. 1998، 402: 460-474. [مجلات]
  14. Carter ME، Borg JS، de Lecea L. The hypocretins brain and their receptors: mediators of allostatic aous arousal. Curr Opin Pharmacol. 2009، 9: 39-45. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  15. Chemelli RM، Willie JT، Sinton CM، Elmquist JK، Scammell T، Lee C، Richardson JA، Williams SC، Xiong Y، Kisanuki Y، Fitch TE، Nakazato M، Hammer RE، Saper CB، Yanagisawa M. Narcolepsy in orexin knockout mice : علم الوراثة الجزيئي لتنظيم النوم. زنزانة. 1999، 98: 437-451. [مجلات]
  16. Chen CT، Dun SL، Kwok EH، ​​Dun NJ، Chang JK. Orexin A- مثل immunoreactivity في الدماغ الفئران. Neurosci Lett. 1999، 260: 161-164. [مجلات]
  17. Choi DL، Davis JF، Fitzgerald ME، Benoit SC. دور orexin-A في الحافز الغذائي ، وسلوك التغذية القائم على المكافأة وتفعيل الخلايا العصبية التي يسببها الغذاء في الفئران. علم الأعصاب. 2010، 167: 11-20. [مجلات]
  18. Davis JF، Krause EG، Melhorn SJ، Sakai RR، Benoit SC. الفئران المسيطرة هي المخاطرة الطبيعية وعرض زيادة الدافع لمكافأة الطعام. علم الأعصاب. 2009، 162: 23-30. [مجلات]
  19. de Lecea L، Jones BE، Boutrel B، Borgland SL، Nishino S، Bubser M، DiLeone R. Addiction and arousal: alternative roles of hypothalamic peptides. J. نيوروسكي. 2006، 26 (41): 10372-10375. [مجلات]
  20. de Lecea L، Kilduff TS، Peyron C، Gao X، Foye PE، Danielson PE، Fukuhara C، Battenberg EL، Gautvik VT، Bartlett FS، 2nd، Frankel WN، van den Pol AN، Bloom FE، Gautvik KM، Sutcliffe JG. hypocretins: ببتيدات محددة المهاد مع نشاط عصبي. Proc Natl Acad Sci US A. 1998؛ 95: 322 – 327. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  21. Dewsbury DA. السلوك الاستنساخى للفئران (Rattus norvegicus) كدالة ذات خبرة كوبية سابقة. الرسوم المتحركة Behav. 1969، 17: 217-223. [مجلات]
  22. فاضل ي ، داتش أيه. الركائز التشريحية لتفاعلات orexin-dopamine: الإسقاطات الوهادية الوحشية لمنطقة tegmental البطنية. علم الأعصاب. 2002، 111: 379-387. [مجلات]
  23. Frederick-Duus D، Guyton MF، Fadel J. Food-elicited increase in cortical acetylcholine release requires orexin transmission. علم الأعصاب. 2007، 149: 499-507. [مجلات]
  24. Furlong TM، Carrive P. Neurotoxic lesions تتركز على الهايبوطلاماس في الولايات المتحدة ، مما يؤدي إلى إلغاء الاستجابات السلوكية والقلبية والأوعية الدموية للخوف المشروط في سياقها وليس في ضبط النفس. الدماغ الدقة. 2007، 1128: 107-119. [مجلات]
  25. Furlong TM ، Vianna DM ، Liu L ، Carrive P. Hypocretin / orexin يساهم في التعبير عن بعض ولكن ليس كل أشكال التوتر والإثارة. Eur J Neurosci. 2009، 8: 1603-1614. [مجلات]
  26. Gerashchenko D، Kohls MD، Greco M، Waleh NS، Salin-Pascual R، Kilduff TS، Lappi DA، Shiromani PJ. تنتج آفات Hypocretin-2-saporin في الوطاء الجانبي سلوك نوم شبيه بالخدار في الفئران. ي Neurosci. 2001، 21: 7273-7283. [مجلات]
  27. Gulia KK، Mallick HN، Kumar VM. يؤدي تطبيق Orexin A (hypocretin-1) في منطقة ما قبل التقبل الوسطى إلى تقوية السلوك الجنسي الذكري لدى الفئران. علم الأعصاب. 2003، 116: 921-923. [مجلات]
  28. Hagan JJ، Leslie RA، Patel S، Evans ML، Wattam TA، Holmes S، Benham CD، Taylor SG، Routledge C، Hemmati P، Munton RP، Ashmeade TE، Shah AS، Hatcher JP، Hatcher PD، Jones DN، Smith MI ، بايبر DC ، هنتر AJ ، بورتر RA ، أبتون N. Orexin A ينشط إطلاق خلية coeruleus locus ويزيد الإثارة في الفئران. Proc Natl Acad Sci US A. 1999؛ 96: 10911 – 10916. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  29. Harris GC، Aston-Jones G. Arousal and reward: a divos in orexin function. اتجاهات neurosci. 2006، 29: 571-577. [مجلات]
  30. Harris GC، Wimmer M، Aston-Jones G. A role for hypothalamic orexin neurons in reward seeking. طبيعة. 2005، 437 (7058): 556-559. [مجلات]
  31. Horvath TL، Peyron C، Diano S، Ivanov A، Aston-Jones G، Kilduff TS، van Den Pol AN. Hypocretin (orexin) التنشيط والتعصيب متشابك من نظام نورادرينوس coeruleus coeruleus. J Comp Neurol. 1999، 415: 145-159. [مجلات]
  32. Ida T، Nakahara K، Katayama T، Murakami N، Nakazato M. Effect of lateral cerebroventricular injection of the neuropeptide-stimet-appetite، orexin and neuropeptide Y، on various behavioral activities of pats. الدماغ الدقة. 1999، 821: 526-529. [مجلات]
  33. Ida T، Nakahara K، Murakami T، Hanada R، Nakazato M، Murakami N. Possible trained of orexin in the stress reaction in rat. Biochem Biophys Res Commun. 2000، 270: 318-323. [مجلات]
  34. Korotkova TM، Sergeeva OA، Eriksson KS، Haas HL، Brown RE. إثارة المنطقة البطنية الدوبامينية والخلايا العصبية دون نانوبامينية بواسطة orexins / hypocretins. ي Neurosci. 2003، 23 (1): 7-11. [مجلات]
  35. Kuru M، Ueta Y، Serino R، Nakazato M، Yamamoto Y، Shibuya I، Yamashita H. centrallyeded orexin / hypocretin ينشط محور HPA في الجرذان. Neuroreport. 2000، 11: 1977-1980. [مجلات]
  36. Li Y، Li S، Wei C، Wang H، Sui N، Kirouac GJ. التغييرات في السلوك العاطفي التي تنتجها oretin microinjections في النواة بارافينتريكولار المهاد. Pharmacol Biochem Behav. 2010، 95: 121-128. [مجلات]
  37. Lin L، Faraco J، Li R، Kadotani H، Rogers W، Lin X، Qiu X، de Jong PJ، Nishino S، Mignot E. The sleep disorder canine narcolepsy is due by a mututation in the hypocretin (orexin) receptor 2 gene . زنزانة. 1999، 98: 365-376. [مجلات]
  38. Lopez HH، Olster DH، Ettenberg A. Sexual motation in the male rat: the role of primary incentives and copative experience. هورم بيهاف. 1999، 36: 176-185. [مجلات]
  39. ماركوس JN ، Aschkenasi CJ، Lee CE، Chemelli RM، Saper CB، Yanagisawa M، Elmquist JK. تعبير تفاضلي لمستقبلات الأوريكسين 1 و 2 في دماغ الفئران. J Comp Neurol. 2001، 435: 6-25. [مجلات]
  40. Martin G، Fabre V، Siggins GR، de Lecea L. Interaction of hypocretins with neurotransmitters in the nucleus accumbens. Regul Pept. 2002، 104: 111-117. [مجلات]
  41. Mathew SJ، Price RB، Charney DS. التطورات الحديثة في علم الأعصاب اضطرابات القلق: الآثار المترتبة على العلاجات الجديدة. Am J Med Genet C Semin Med Genet. 2008. 148C: 89-98. [مجلات]
  42. Muschamp JW، Dominguez JM، Sato SM، Shen RY، Hull EM. دور hypocretin (orexin) في السلوك الجنسي للذكور. ي Neurosci. 2007، 27: 2837-2845. [مجلات]
  43. Nair SG ، Golden SA ، Shaham Y. التأثيرات التفاضلية للخصم XCMUM 1 لمستقبلات hypocretin SB على الإدارة الذاتية عالية الدهون الغذاء وإعادة المواد الغذائية التي تسعى في الفئران. Br J Pharmacol. 334867، 2008: 154-406. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  44. Narita M، Nagumo Y، Hashimoto S، Khotib J، Miyatake M، Sakurai T، Yanagisawa M، Nakamachi T، Shioda S، Suzuki T. Direct direct of orexinergic systems in the activation of the mesolimbic dopamine pathway and related behaviors induced by morphine. ي Neurosci. 2006، 26: 398-405. [مجلات]
  45. Nishino S، Ripley B، Overeem S، Lammers GJ، Mignot E. Hypocretin (orexin) deficiency in human conccolepsy. انسيت. 2000، 355: 39-40. [مجلات]
  46. Paxinos G ، واتسون C. الدماغ الجرذ في الإحداثيات التجسيمي. San Diego، CA: Academic Press؛ 1998.
  47. Peyron C، Faraco J، Rogers W، Ripley B، Overeem S، Charnay Y، Nevsimalova S، Aldrich M، Reynolds D، Albin R، Li R، Hungs M، Pedrazzoli M، Padigaru M، Kucherlapati M، Fan J، Maki R ، Lammers GJ ، بوراس C ، Kucherlapati R ، نيشينو S ، Mignot E. A طفرة في حالة الخدار بداية مبكرة وغياب عام من الببتيدات hypocretin في أدمغة الخدار الإنسان. نات ميد. 2000، 6: 991-997. [مجلات]
  48. Peyron C، Tighe DK، van den Pol AN، de Lecea L، Heller HC، Sutcliffe JG، Kilduff TS. الخلايا العصبية التي تحتوي على مشروع hypocretin (orexin) للعديد من الأنظمة العصبية. ي Neurosci. 1998، 18: 9996-10015. [مجلات]
  49. ساكوراي T. أدوار orexins ومستقبلات orexin في التنظيم المركزي لسلوك التغذية واستتباب الطاقة. CNS Neurol Disord Drug Object. 2006، 5: 313-325. [مجلات]
  50. Sakurai T. الدائرة العصبية من orexin (hypocretin): الحفاظ على النوم واليقظة. نات ريف نيوروسكي. 2007، 8: 171-181. [مجلات]
  51. Sakurai T، Amemiya A، Ishii M، Matsuzaki I، Chemelli RM، Tanaka H، Williams SC، Richardson JA، Kozlowski GP، Wilson S، Arch JR، Buckingham RE، Haynes AC، Carr SA، Annan RS، McNulty DE، Liu WS Terrett JA، Elshourbagy NA، Bergsma DJ، Yanagisawa M. Orexins and orexin receptors: a family of hypothalamic neuropeptides and G protein-coupled receptors that regulating feed nutrition. زنزانة. 1998، 92: 573-585. [مجلات]
  52. Satoh S ، ماتسومورا H ، فوجيوكا A ، Nakajima T ، Kanbayashi T ، Nishino S ، Shigeyoshi Y ، Yoneda H. FOS تعبير في الخلايا العصبية orexin التالية نضح muscimol من منطقة preoptic. Neuroreport. 2004، 15: 1127-1131. [مجلات]
  53. سيجل جي ام الخدار: دور رئيسي لخلايا hypocretins (orexins). 1999، 98: 409-412. [مجلات]
  54. Singareddy R، Uhde T، Commissaris R. Differential effects of hypocretins on noise-alone versus potentiated ble ignives. فيسيول بيهاف. 2006، 89: 650-655. [مجلات]
  55. Smith RJ، انظر RE، Aston-Jones G. Orexin / hypocretin يشير إلى مستقبلات orexin 1 ينظم البحث عن الكوكايين. Eur J Neurosci. 2009، 30: 493-503. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  56. Solomon A، De Fanti BA، Martinez JA. يتفاعل ghrelin المحيطي مع الخلايا العصبية orexin في إشارات glucostatic. Regul Pept. 2007، 144: 17-24. [مجلات]
  57. Sullivan GM، Neria Y. Pharmacotherapy in an post-traumatic stress disorder: evidence from randomized controlled trials. Curr Opin Investig Drugs. 2009، 10: 35-45. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  58. من المحتمل أن يشارك سوزوكي إم ، بيكمان سي تي ، شيكاتا ك ، أوجورا إتش ، ساواي تي Orexin-A (hypocretin-1) في توليد سلوك شبيه بالقلق. الدماغ الدقة. 2005، 1044: 116-121. [مجلات]
  59. Tenk CM، Wilson H، Zhang Q، Pitchers KK، Coolen LM. المكافأة الجنسية في ذكور الجرذان: آثار التجربة الجنسية على تفضيلات المكان المشروط المرتبطة بالقذف والانفصال. هورم بيهاف. 2009، 55: 93-97. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  60. Thannickal TC، Moore RY، Nienhuis R، Ramanathan L، Gulyani S، Aldrich M، Cornford M، Siegel JM. انخفاض عدد الخلايا العصبية الهيبوكريتين في الخدار البشري. الخلايا العصبية. 2000، 27: 469-474. [مجلات]
  61. Thorpe AJ، Cleary JP، Levine AS، Kotz CM. يزود orexin A ذو الإدارة المركزية الدافع للكريات الحلوة في الجرذان. علم الادوية النفسية (Berl) 2005 ؛ 182: 75 – 83. [مجلات]
  62. Trivedi P، Yu H، MacNeil DJ، Van der Ploeg LH، Guan XM. توزيع orRin مستقبلات mRNA في دماغ الفئران. FEBS Lett. 1998، 438: 71-75. [مجلات]
  63. Vittoz NM، Schmeichel B، Berridge CW. Hypocretin / orexin يقوم بتفعيل الخلايا الجذعية الدوبامين tegmental areaal caudomedial. Eur J Neurosci. 2008، 28: 1629-1640. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  64. Volgin DV، Swan J، Kubin L. وحيد الخلية RT-PCR التعبير الجيني تنميط حاد. فصله وتحديد الخلايا العصبية immunocytochemically المركزي. J. طرائق Neurosci. 2004، 136: 229-236. [مجلات]