دور آليات مستقبلات Orexin-1 في استهلاك الأغذية القهري في نموذج الإفراط في تناول الطعام في الجرذان الإناث (2012)

Neuropsychopharmacology. 2012 Aug؛ 37 (9): 1999 – 2011.

PMCID: PMC3398727

هذه المقالة كانت استشهد بها مقالات أخرى في PMC.

انتقل إلى:

ملخص

تعد Orexins (OX) ومستقبلاتها (OXR) التغذية والإثارة والتوتر وإدمان المخدرات. النظم العصبية التي تحفز وتعزز تعاطي المخدرات قد تكمن أيضا في السعي وراء الغذاء القهري وتناوله. لذلك ، فإن تأثير GSK1059865 (5-bromo-N- [(2S,5S) -1- (3-fluoro-2-methoxybenzoyl) -5-methylpiperidin-2-yl] methyl-pyridin-2-amine) ، وهو OX انتقائي1R antagonist، JNJ-10397049 (N- (2,4-dibromophenyl) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimethyl-4-phenyl-1,3-dioxan-5-yl] اليوريا) ، وهو OX انتقائي2R antagonist و SB-649868 (N- [((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide), a dual OX1/ثور2تم تقييم المضاد R في نموذج الأكل بنهم (BE) في الجرذان الإناث. تم استلهام BE من طعام مستساغ للغاية (HPF) من خلال ثلاث دورات من تقييد الغذاء متبوعة بالضغط ، تم استنباطها من خلال تعريض الفئران إلى HPF ، ولكن منعها من الوصول إليها من أجل 15 دقيقة. تم الحصول على تقييمات حركية الدواء لجميع المركبات تحت نفس الظروف التجريبية المستخدمة في التجارب السلوكية. استُخدم التوبيراميت كمركب مرجعي لأنه يحصر بيولوجيا في الجرذان والبشر. تم قياس العتبات ذات الصلة بالجرعة للآثار التي تحفز النوم من مضادات OXR باستخدام دراسة النوم في التجارب المتوازية. SB-649868 و GSK1059865 ، ولكن ليس JNJ-10397049 ، تم تقليل إنزيم BE لـ HPF بشكل انتقائي دون التأثير على كمية حبيبات الطعام القياسية ، بجرعات لم تحث على النوم. تشير هذه النتائج ، لأول مرة ، إلى دور كبير في OX1آليات R في BE ، مما يوحي بأن العداء الانتقائي في OX1يمكن أن يمثل R علاج دوائي جديد لـ BE وربما بعض اضطرابات الأكل الأخرى مع عنصر قهري.

: الكلمات المفتاحية مضادات مستقبلات orexin-1 ، مضادات مستقبلات orexin-2 ، الأكل المفرط ، أنثى الجرذان ، استهلاك الغذاء القهري

مقدمة

تتميز نوبات الإفراط في الأكل (BE) عند الإنسان باستهلاك قهري ، غير متجانس ، لكمية كبيرة غير معتادة من الطعام الجيد (HPF) في فترة قصيرة من الزمن. على الرغم من أنهم لا يعانون من الجوع ، إلا أن الأشخاص يأكلون بسرعة أكبر من الطبيعي حتى يشعر بالشبع بشكل غير مريح. كما هو موضح من قبل DMS-IV-TR (الجمعية الأمريكية للطب النفسي ، 2000) ، هذه الحلقات مصحوبة بشعور ذاتي بفقدان السيطرة على الأكل ، وترتبط مع الشعور بالضيق ، والاشمئزاز ، والاكتئاب ، والذنب عن الإفراط في الأكل ، وتناول الطعام وحده بسبب الإحراج.

تمثل BE سمة مركزية من الشره المرضي العصبي ، حيث يتم اتباع حلقات BE عن طريق سلوكيات تهدف إلى تجنب زيادة الوزن ، مثل القيء الذاتي. تمثل نوبات BEED المكثفة والمستمرة الظواهر النمطية التي تحدث أيضًا في الأشخاص الذين يعانون من اضطراب الإفراط في تناول الطعام (BED) (والش و Devlin ، 1998). يتميز BED بنوبات متكررة من BE في غياب السلوكيات التعويضية لتجنب زيادة الوزن. تشير معايير التشخيص الخاصة بـ BED في DSM-IV-TR إلى أن حلقات BE يجب أن تحدث على الأقل أيام 2 في الأسبوع للأشهر 6. يرتبط BED بمراضة نفسية طبية ونفسية كبيرة (Javaras وآخرون، 2008; Grucza وآخرون، 2007; فاسينو وآخرون، 2003). تشير التقديرات إلى أن BE يصيب نسبة 5٪ تقريبًا من سكان الولايات المتحدة البالغين في بعض الأوقات خلال حياتهم (فولدس ماثيس وآخرون، 2009) ويساهم في تفاقم السمنة والأمراض المرتبطة بها (هدسون وآخرون، 2007; هيث ، 1998; ديفلين وآخرون، 2000; يانوفسكي ، 2003).

الأدوية الحالية ، مثل توبيراميت (مسيلروي وآخرون، 2007; مسيلروي وآخرون، 2009) أو سيبوترامين (Appolinario وآخرون، 2000; Wilfley وآخرون، 2008) ، تم الإبلاغ عن تقليل BE في الدراسات السريرية. ومع ذلك ، يرتبط إدارتها مع مجموعة متنوعة من الآثار الجانبية الضارة ، والتي تمثل مشاكل خطيرة أثناء العلاج المزمن (مسيلروي وآخرون، 2009; سائق الكارة وآخرون، 2003; Yager ، 2008). على وجه الخصوص ، تم سحب sibutramine مؤخرا من السوق الأوروبية ، في حين أن topiramate معروف جيدا لخصائصه المعرفية. هناك حاجة ماسة إلى علاجات مبتكرة من أجل الشره المرضي العصبي و BED بدون آثار جانبية شديدة.

في 1998 ، حددت مجموعتان بشكل مستقل فئة جديدة من الببتيدات العصبية التي تنشأ في النويات التحتمية (ساكوراي وآخرون، 1998; دي ليسيا وآخرون، 1998). يتم إنتاج هذه الببتيدات ، التي تسمى orexin-A (OXA) و orexin-B (OXB) (التي تدل أيضًا على hypocretin 1 و hypocretin 2) ، من المعالجة البروتينية لبروتيد OX-pre-OX وترتبط ببروتين GPCR ، وهما OX- مستقبلات 1 و OX-2 (OX1R و OX2R) (يُعرف أيضًا باسم HcrtR1 و HcrtR2). ثور1يقترن R بـ Gq / 11 ، بينما تشير الدراسات التي تستخدم الخلايا العصبية إلى أن OX2تقترن R ببروتينات Gq و Gs و Gi. في الجهاز العصبي المركزي ، OX1R و OX2تشير R إلى أنماط توزيع متداخلة جزئياً ولكنها مميزة إلى حد كبير ومتكاملة (ساكوراي ، 2007). تظهر مناطق الدماغ مثل القشرة اللعابية ، الحصين ، والموقع الفروع التعبير عالية من OX1R ، في حين OX2R هو المستقبلة الوحيدة المعبر عنها في النواة المقوسة ، نواة tuberomammillary ، وظهر المهاد الظهري والوحمي (LH). كلا المستقبلين موجودان في قشرة الفص الجبهي ، اللوزة ، نواة السرير من حطام السطور ، النواة المهادية البارافينية ، الرئة الظهرية ، المنطقة القطبية البطنية (VTA) ، نواة نانوية الجُرَحِيَّةُ البُسَنيَّةLu وآخرون، 2000; ماركوس وآخرون، 2001; تريفيدي وآخرون، 1998). تشير هذه النتائج إلى أن من المحتمل أن تلعب OXs ومستقبلاتها دوراً تنظيمياً واسعاً في الجهاز العصبي المركزي.

علم وظائف الأعضاء حالة الاستيقاظ / النوم هي واحدة من المجالات التي تم فيها دراسة دور OXs على نطاق واسع. في الواقع ، أدى اختلال إشارات OX في فئران pre-OO بالضربة القاضية إلى ظهور نمط ظاهري ذي خصائص مشابهة بشكل ملحوظ لتلك الخاصة بالمرضى الذين يعانون من الخدار ، وهو اضطراب مزمن يتميز بالنوم المفرط الذي قد يترافق مع شلل النوم الشديد للغاية ، والهلوسات hypnagogic ، و cataplexy (Chemelli وآخرون، 1999). يبدو النعاس المفرط مظهرا من مظاهر عدم القدرة على الحفاظ على الاستيقاظ الموسعة.

علاوة على ذلك ، فإن العداء المتزامن لكل من OX1R و OX2R أو تثبيط انتقائي OX2R النتائج في تحريض تأثير المنومة قوية (Brisbare روش وآخرون، 2007; Dugovic وآخرون، 2009; دي فابيو وآخرون، 2011).

تدعم البيانات في الأدبيات أيضًا دور نظام OX في سلوك التغذية ، في السيطرة على كل من الطعام المستقر ومكافأ الطعام القائم على المكافأة. بالإضافة إلى عرض النمط الظاهري للخدار ، فإن الفئران المغروسة بالضربة القارضة هي أيضًا ناقصة مقارنة بالوزن والجرذان المتوافقة مع العمر ، مما يدل على دور OXs في تحوير التغذية واستقلاب الطاقة (ويلي وآخرون، 2001). أدى حقن أوكسا في البطين الجانبي للجرذان ، خلال مرحلة الضوء المبكر ، إلى زيادة في استهلاك الجرعة في الجرذان (ساكوراي وآخرون، 1998) ، والتي تم حظرها من قبل المعاملة مع OX1R مضادات SB-334867 (هاينز وآخرون، 2000; رودجرز وآخرون، 2001). وقد تم توثيق دور OXs في المدخول الغذائي القائم على المكافأة في ورقة أخيرة من بيريلو وآخرون (2010)، مما يدل على أن الزيادة في قيمة مكافأة من اتباع نظام غذائي عالي الدهون التي يسببها ghrelin هو OX تعتمد ؛ علاوة على ذلك ، تم الإبلاغ عن SB-334867 لتثبيط الإدارة الذاتية للأطعمة الغنية بالدهون (ناير وآخرون، 2008). تفعيل OX1يعد R عنصرًا ضروريًا للاستجابة أو التحفيز المعزز بالغذاء أو كليهما (شرف وآخرون، 2010). بالإضافة إلى ذلك ، يتم تنشيط الخلايا العصبية LH OX عن طريق الإشارات المرتبطة المكافآت التكميلية مثل الطعام (هاريس وآخرون، 2005) ، مما يشير إلى الدور المحتمل لنظام OX في الاستجابة للإشارات البيئية الخارجية المرتبطة بالجوانب المعرفية للتغذية.

تدعم التقارير الحديثة دورًا في إشارات OX في التأثيرات السلوكية العصبية والتحفيزية لأدوية الإدمان (هاريس وآخرون، 2005; Borgland وآخرون، 2006; يوب وآخرون، 2011. للمراجعة ، انظر Bonci و Borgland ، 2009; مارتن Fardon وآخرون، 2010). وبالتالي ، حصار OX1R يقلل الإيثانول (لورانس وآخرون، 2006) والنيكوتين الإدارة الذاتية (هولاندر وآخرون، 2008) ، يثبط إعادة إنتاج الإيثانول (بالإنجليزية: cit-induced reinstatement of ethanol-)لورانس وآخرون، 2006) ، الكوكايين- (سميث وآخرون، 2010) ، والبحث عن المورفين (هاريس وآخرون، 2005) ، ويخفف من الإرهاق الناتج عن إعادة الكوكايين (Boutrel وآخرون، 2005) والبحث عن الإيثانول (ريتشاردز وآخرون، 2008). علاوة على ذلك ، فإن الأدلة الحديثة ربطت أيضًا OX2R- انتقائية آليات لمكافأة الكحول والسعي إلى السلوك (Shoblock وآخرون، 2011).

تتراكم الأدلة على أن الإفراط في تناول بعض الأطعمة تحت ظروف معينة ينتج عنه سلوكيات وتغيرات في الدماغ تشبه حالة الإدمان شبيهة بالإدمان (ذهبي وآخرون، 2003; كيني ، 2011; Pelchat وآخرون، 2004; الشوفان وآخرون، 2008; Ifland وآخرون، 2009; Gearhardt وآخرون، 2011a). كما تم اقتراح الأنظمة العصبية التي تحفز وتعاطي تعاطي المخدرات ، والتي ترتكز على السلوكيات المرتبطة بالسعي القهري للغذاء وتناول الطعام.جونسون وكيني ، 2010; Hoebel ، 1985; Volkow و Wise ، 2005; كوروين وآخرون، 2011; Gearhardt وآخرون، 2011b; وانغ وآخرون، 2011). تثير هذه النتائج سؤالًا حول ما إذا كان نظام OX قد يكون له دور أيضًا في اضطرابات الأكل التي تتميز بنوبات من النوع الإجباري ، مثل الشره المرضي العصبي و BED.

لذلك ، هدفت هذه الدراسة إلى دراسة تأثير الثنائي المزدوج1/ثور2R مضادات SB-649868 (N-[((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide) (دي فابيو وآخرون، 2011) ، OX الانتقائي1خصم R R GSK1059865 (5-bromo-N- [(2S,5S)-1-(3-fluoro-2-methoxybenzoyl)-5-methylpiperidin-2-yl]methyl-pyridin-2-amine) (Gozzi وآخرون، 2011) ، و OX الانتقائي2R R مناهضة JNJ-10397049 (N- (2,4-dibromophenyl) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimethyl-4-phenyl-1,3-dioxan-5-yl] اليوريا) (McAtee وآخرون، 2004; Dugovic وآخرون، 2009) في نموذج BE الذي وصفه Cifani وآخرون (2009)، والتي يتم فيها إثارة حلقات BE HPF في الفئران الإناث عن طريق دورات لتقييد / إعادة التغذية الغذائية والإجهاد الحاد. تم تقييم الخصوم الثلاثة لأول مرة المختبر في الفئران المؤتلف الفئران1R و OX2R لتحديد مدى فعاليتها وتأكيد انتقائها للأنماط الفرعية المستقبلة. ثم تم تقييم حرائك الدوائية (PKs) وتم تحديد الجرعات القادرة على التأثيرات المنومة في نموذج جرذ النوم. وأخيرًا ، تم اختبار المركبات وفقًا للجرعات المحددة في نموذج BE.

المواد والطرق

أشكال حيوانات

تم إجراء جميع الأبحاث المتعلقة بالحيوانات وفقًا للتوجيه الأوروبي 86/609 / EEC الذي يحكم رعاية الحيوان وحمايته ، والذي أقره المرسوم التشريعي الإيطالي رقم. 116 ، 27 يناير 1992 ، ووفقًا للمراجعة الداخلية التي أجرتها لجنة GlaxoSmithKline لأبحاث الحيوان وأخلاقياته (CARE) وسياسة الشركة بشأن رعاية واستخدام حيوانات المختبر.

المخدرات

SB-649868 (دي فابيو وآخرون، 2011) ، GSK1059865 (Gozzi وآخرون، 2011) و JNJ-10397049 (McAtee وآخرون، 2004) تم تصنيعها في مختبرات GSK. تم توفير OXA بواسطة أبحاث الببتيدات في كاليفورنيا (cat. no. 471-99، CA). Myo- [1,2-3H(N) تم شراء inositol (NET-906 ، نشاط معين: 51 Ci / mol) و yttrium سيليكات RNA حبات ملزمة (RPNQ0013) من Perkin-Elmer (إيطاليا). تم شراء توبيراميت (توباماكس ؛ يانسن سيلاج) من يانسن سيلاج. كان متوفرا في أقراص ، والتي تم تخفيضها إلى مسحوق قبل الإدارة.

Experiment 1: Antagonism of SB-649868، JNJ-10397049، and GSK1059865 at Rat OX1R و Rat OX2R

زراعة الخلايا

خلايا سرطان الخلايا القاعدية الفئران transfected ثابت مع الجرذان OX1R (rOX1R) أو الجرذ OX2R (rOX2R) تم استزراعها في α-MEM (Invitrogen / GIBCO) مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS، PAA) و 100 U / ml penicillin G و 100 U / ml streptomycin (Pen / Strep؛ Invitrogen / GIBCO) و 400 μg / ml geneticin (Invitrogen / GIBCO) ، في 37 ° C مع 5٪ CO2 في جو مرطب.

تراكم [3H] inositol phosphates (IPs)

تراكم [3تم قياس H] inositol phosphates (IPs) كما هو موضح سابقًا (لوح مهددا وآخرون، 2003) مع التعديلات التالية. خطوط الخلية تعبر عن rXX بثبات1R أو rOX2تم زرع R في لوحات زراعة الأنسجة 96-well في 3 × 104 الخلايا لكل بئر و 1.5 × 104 خلايا لكل بئر ، على التوالي ، في α-MEM مع 10٪ FBS و Pen / Strep بدون جينات. بعد 24 h ، تم استنزاف وسط الاستزراع وتمت إضافة 100 ميكرولتر من وسط جديد مكمل مع 10 μCi / ml NET-906 (Perkin-Elmer) إلى الخلايا ؛ وبالتالي ، تم استخدام 1 μCi من إينوسيتول radiolabeled لكل بئر. بعد 16 h من الحضانة ، تم غسل الخلايا مرتين مع المخزن المؤقت للمقايسة (1 × HBSS ، 20 mM HEPES (pH 7.4) ، بالإضافة إلى 0.1٪ من الألبومين المصلي البقري و 10 mM LiCl) ، قبل إضافة ناهضات أو مضادات. تم تحضين المضادات من أجل 30 دقيقة في 37 درجة مئوية قبل التحفيز مع ناهض. تم تنفيذ منحنيات التركيز والاستجابة (CRCs) من OXA تتراوح من 0.0001 إلى 10 ميكرومتر. بعد 1 h من الحضانة عند 37 ° C ، تم سحب المخزن المؤقت للمقايسة ، وأضيفت 80 μl لكل بئر من حمض الفورميك جينيوم 0.1 M ، وخلفت الخلايا من أجل احتضان 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. تمت إضافة مقياس 20 μl لخلاصة الخلية إلى 80 μl من حبيبات سيليتريت الإيتريوم (YSi SPA ؛ Perkin-Elmer ؛ 12.5 mg / ml) ، تم اهتزازها لـ 1 h عند درجة حرارة الغرفة ، وتركها عند 4 ° C لـ 2 h قبل الاعتماد على عداد التلقيم NXT MicroPlay من باكارد.

تم التعبير عن المعطيات كـ٪٪ من ناهض الاستجابة المحسوبة على النحو التالي:٪ استجابة ناهض القصوى = ((cpmخصم-cpmقاعدي) / نسخة في الدقيقةmaxagonistresponse-cpmقاعدي) × 100.

في المختبر تحليل البيانات

تم تركيب CRC بواسطة تحليل الانحدار اللاخطي السيني باستخدام برنامج GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software، San Diego، CA) للحصول على ناهض EC50 (مطلوب تركيز ناهض للحصول على 50٪ من الاستجابة القصوى).

قوة (KBتم تحديد = ثابت تفكك الخصوم) من مضادات غير قابل للقبض من خلال تطبيق معادلة نموذج التشغيل للتعارض غير التنافسي (Kenakin وآخرون، 2006). ال KB تم حساب قيمة الخصوم التي يمكن التغلب عليها من خلال تحليل شيلد (Arunlakshana and Schild، 1959). ل SB-649868 فقط IC المضاد50 تم حساب. رسمنا الاستجابة التي تنتجها 1 μM OXA في غياب وبوجود أربعة تركيزات مختلفة من المضاد. IC50 يُعرَّف بأنه تركيز المضاد المطلوب لتثبيط 50٪ الاستجابة الناتجة عن النغمة. يتم التعبير عن النتائج على النحو pEC50 (-log10 EC50) ، صKB (-log10 KB) أو pIC50 (-log10 IC50) ، ويتم تقديمها كمتوسط ​​± SEM أو كوسط مع حدود الثقة 95٪ (95٪ CL) من ثلاث تجارب مستقلة على الأقل. تمت إذابة جميع الأدوية التي تم اختبارها في ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) وتم تخفيفها أكثر في مخزن الفحص لإعطاء تركيز DMSO نهائي لا يتجاوز 0.5٪.

تجربة 2: PK تحديدات في ذكور وإناث الجرذان

لتقييم PK تعرض الدم للنوم ودراسات BE ، تم تحليل ملامح PK للمركبات في ذكور وإناث الفئران في نفس الظروف التجريبية للنوم وتجارب BE. تم فحص بروفيلات PK بعد إعطاءها عن طريق حقن 3 mg / kg SB-649868 في ذكور وإناث الفئران ، وإعطاء داخل الصفاق من 10 ملغم / كغم في الإناث و 5 ملغم / كغم في ذكور الجرذان من JNJ-10397049 ، والإدارة بالتزقيم في الفئران الإناث وإدارة البريتوني في ذكور الجرذان من 10 ملغم / كغم من GSK1059865. تم جمع عينات الدم عن طريق الوريد الفخذي على فترات تصل إلى 4 h بعد الإعطاء. تم جمع عينات الدماغ في نهاية التجربة. تم تحديد تركيز كل من SB-649868 و JNJ-10397049 و GSK1059865 في عينات الدم والدماغ باستخدام طريقة تعتمد على ترسيب البروتين متبوعًا بتحليل HPLC-MS / MS. تم الحصول على معلمات PK غير جزئية من ملفات تعريف زمن تركيز الدم باستخدام حزمة البرامج WinNonlin v.4.0 (Pharsight، Mountain View، CA). يتم التعبير عن معلمات PK على أنها تعني ± SD (قراءة وبراغيو ، 2010).

تجربة 3: تأثير SB-649868 و JNJ-10397049 و GSK1059865 على نموذج نوم الجرذ

أشكال حيوانات

كانت الجرذان Sprague – Dawley ذكور (275 – 300 g؛ Charles River، Calco، Como، Italy) تؤوي بشكل منفرد في دورة 12-h light-dark (الضوء على 0300 h) 1 قبل الجراحة بأسبوع. تم السماح بالوصول إلى الطعام والماء libitum الإعلانية. لجمع الإشارات الحيوية ، تم زرع جهاز إرسال متعدد القياسات عن بعد متعدد القنوات (TL10M3-F40-EET؛ Data Int Int.) داخل البريتون في الحيوانات. تم تثبيت قطبين كهربائيين بشكل دائم مع اسمنت الأسنان إلى الجمجمة لتسجيل تخطيط كهربية الدماغ (EEG). كانوا على اتصال مباشر مع الأم الجافية من خلال اثنتين من الثقوب المحفورة في المنطقة الأمامية والجدارية. تم تثبيت قطبين كهربائيين آخرين على عضلات الهيكل العظمي في الرقبة ، لتسجيل تخطيط كهربية العضل (EMG) أو في منطقة حول العين حول العين لتسجيل الكهربائي (EOG).

تسجيل

بعد الشفاء من الجراحة ، تم الحفاظ على الحيوانات في قفصها المنزلي في بيئة يتم التحكم بدرجة حرارتها (21 ± 1 ° C) مع إمكانية الوصول إلى الطعام والماء libitum الإعلانية. أظهرت الحيوانات المزروعة ذخيرة سلوكية طبيعية مباشرة بعد الشفاء من الجراحة. ومع ذلك ، للسماح باستخدام أنماط النوم العادية ، تم استخدام الحيوانات بعد فترة أسبوع 3. تم الحفاظ على الظروف البيئية المذكورة أعلاه طوال دراسات النوم. طوال فترة الاختبار ، بقيت الحيوانات تتحرك بحرية في أقفاصها المنزلية على أجهزة الاستقبال الفردية. تم تسجيل إشارات EEG و EMG أو EOG بشكل مستمر باستخدام DSI Dataquest ART تم تحويل أثر تخطيط الدماغ EEG ، المقسم إلى عهود 10-s ، رقميًا (تحويل FFT) لتوفير أطياف الطاقة δ, θ, αو β نطاقات لتمييز ثلاثة أنماط نشاط مختلفة في الفئران (اليقظة ، نوم حركة العين السريعة ، ونوم حركة العين السريعة). تم نقل العلامات التي تم تعيينها من قبل نظام التسجيل الآلي (مرحلة النوم ، DSI) إلى إشارة EEG الرقمية وتم تأكيدها لاحقًا من خلال الفحص البصري لتبعات EEG و EMG / EOG من قبل المشغلين المدربين ، الذين غابوا عن العلاج بالعقاقير. شمل تحليل معلمات النوم: الكمون إلى نوم حركة العين غير السريعة (الفاصل الزمني إلى أول ست ساعات نومية متتالية بعد الحقن) ، والكمون إلى نوم الريم (الفاصل الزمني إلى أول مرحلة نوم الريم بعد الحقن) ، نوم حركة العين غير السريعة ، نوم الريم ، والإجمالي وقت النوم.

العلاج من الإدمان

تم إجراء المعالجات الدوائية وفقاً لتصميم Crossover Crossover العشوائي ، حيث تلقى كل حيوان ، في جلسات تجريبية منفصلة ، معاملة المركبات أو الأدوية. عولجت الفئران بمركب تجريبي أو مركبة خاصة بها ، في حجم 2 مل / كجم ، 6 h بعد إطفاء الضوء (التوقيت الدوري (CT) 18). تم عمل تسجيلات لفترة الاختبار اللاحقة 3-h. تمت إذابة SB-649868 في 0.5٪ HPMC (hydroxy-propyl-methyl-cellulose) (w / v) في الماء المقطر وتمت معالجته بالتزقيم عند جرعات 3 و 10 mg / kg. تم حل JNJ-10397049 في mygliol 812N ، وتم إعطاؤه داخل الصفاق عند جرعات من 5 و 25 mg / kg. تم حل GSK1059865 في 0.5٪ HPMC (w / v) في الماء المقطر وأعطيت داخل الصفاق عند جرعات من 5 و 25 mg / kg.

تحليل البيانات

يتم التعبير عن جميع البيانات على أنها تعني ± SEM. تم تحليل النتائج باستخدام تحليل اتجاه واحد من التباين (ANOVA). بعد خاصة تم إجراء مقارنات مع اختبار دونيت. تم تعيين الدلالة الإحصائية في P

تجربة 4: الشراهة عند تناول الطعام

أشكال حيوانات

تم استخدام أنثى سبراغ داولي الجرذان (نهر تشارلز). كان وزن جسمهم 225-250 g في بداية التجارب. تم تأقلم الجرذان مع الأقفاص الفردية تحت دورة ضوء / الظلام 12-h (الضوء على 0800 h) مع libitum الإعلانية تشاو والماء لأسابيع 2 قبل التجارب. تم الاحتفاظ بها في غرفة بدرجة حرارة ثابتة (20 - 22 ° C) والرطوبة (45 – 55٪). تم الاحتفاظ بالفئران في أقفاص فردية بجدران معدنية ؛ الأرضية والجدار الأمامي مصنوعان من الشبكة المعدنية. كانت أبعاد أرضية القفص 30 cm × 30 cm؛ كان القفص 30 سم عالية. كان الباب الأمامي (30 سم × 20 سم) يتألف من شبكة معدنية موجودة في الجدار الأمامي للقفص للسماح بالوصول إلى داخل القفص. وقد تم تجهيز الجزء المتبقي من الجدار الأمامي بسجادة مياه الشرب.

نظام خاص للتغذية

وقدمت الحيوانات حبيبات طعام الفئران القياسية ، 4RF18 (Mucedola ، Settimo Milanese ، ميلانو ، إيطاليا ؛ 2.6 kcal / g). كان HPF عبارة عن عجينة تم إعدادها عن طريق خلط كريمة الشوكولاتة Nutella (فيريرو ، ألبا ، تورينو ، إيطاليا) (5.33 kcal / g ؛ 56٪ ، 31٪ ، و 7٪ من الكربوهيدرات ، والدهون ، والبروتين ، على التوالي) ، كريات الطعام المطحون ( 4RF18 ؛ Mucedola ؛ Settimo Milanese) ، والماء في نسبة الوزن / الوزن التالية: 52٪ Nutella ، 33٪ حبيبات الطعام ، و 15٪ من الماء. كان النظام الغذائي HPF محتوى السعرات الحرارية من 3.63 kcal / ز. تم تقديم كريات معيارية داخل حاوية شبكية معدنية كانت معلقة على الجدار الأمامي للقفص ؛ تمت إزالته من القفص لقياس وزنه لتحديد مدخول حبيبات الطعام. تم تقديم HPF في فنجان قهوة ؛ تم إدخال مقبض الكأس في الشبكة المعدنية للجدار الأمامي للقفص وثبت على الجدار.

إجهاد الإجهاد

بالنسبة لـ 15 min ، تم وضع فنجان القهوة الصيني الذي يحتوي على HPF داخل حاوية معدنية تغطيها على الجدار الأمامي للقفص. في هذه الظروف ، تمكن الحيوان من رؤية الكأس التي استقبلت بها HPF في أيام 5 و 6 و 13 و 14 من أول دورتين ، وتمكنت من رؤية HPF نفسها ، وكذلك لرائحتها. في فترة 15-min هذه ، شارك الفئران في حركات متكررة من forepaws ، الرأس ، والجذع ، تهدف إلى الحصول على HPF ، لكنه لم يتمكن من الوصول إليها.

هذا نتج عنه ظروف عصبية خفيفة تسبب زيادة كبيرة في مستويات الكورتيكوستيرون في المصل (Cifani وآخرون، 2009). بعد 15 دقيقة ، تم وضع الكأس داخل قفص الفئران لمجموعات الضغط ، بحيث أصبحت HPF متاحة لهم.

العلاج من الإدمان

في يوم 25 ، تم إعطاء المركبات أو المركبات المعنية قبل الوصول إلى HPF. تمت إذابة SB-649868 في 0.5٪ HPMC (w / v) في ماء مقطر وتم إعطاؤه عن طريق أنبوب جرع بجرعات 1 و 3 mg / kg. تم حل التوبيراميت في 0.5٪ HPMC (w / v) في ماء مقطر وتم إعطائه عن طريق التزريع بجرعة 60 mg / kg. تم حل JNJ-10397049 في 0.5٪ HPMC (w / v) في ماء مقطر وتم إعطائه داخل الصفاق عند جرعات من 1 و 3 mg / kg. تمت إذابة GSK1059865 في 0.5٪ HPMC (w / v) في ماء مقطر وتم إعطائه عن طريق الزرعة عند جرعات من 10 و 30 mg / kg. كانت جميع الأدوية أو مركباتها تدار بواسطة 1 h قبل الوصول إلى HPF.

تجربة 4A: تأثير SB-649868 و Topiramate

لتقييم دور مضادات OXR في BE ، تم اختبار مضادات OXR غير الانتقائية ، SB-649868 ، في نموذج BE الخاص بنا.

تم تقسيم الحيوانات إلى أربع مجموعات من حيوانات 27 لكل منها ، متناسبة مع وزن الجسم وتناول الطعام اليومي: (1) المجموعة غير المقيدة وغير المعرضة للتوتر (NR + NS). (2) المقيدة وغير المعرضة لمجموعة الضغط (R + NS) ؛ (3) المجموعة غير المقيدة والمعرضة للإجهاد (NR + S) ؛ و (4) المجموعة المقيدة والمعرضة للتوتر (R + S). وبمجرد تعيينها في إحدى هاتين المجموعتين ، ظلت الفئران في تلك المجموعة طوال فترة الدراسة. تم تأقلم الفئران المعرضة للإجهاد في غرفة مختلفة عن تلك الموجودة في المجموعات غير المعرضة للإجهاد. تعرضت الجرذان لثلاث دورات متتالية يوم 8 يليها الاختبار النهائي في يوم 25 (الجدول 1):

الجدول 1 

الجدول المعتمد لإثارة الشراهة عند تناول الطعام
  1. وكانت مجموعة NR + NS تشاو libitum الإعلانية بالنسبة إلى أيام 4 ، في الأيام 5 و 6 ، حصلوا على chow + HPF لـ 2 h؛ في أيام 7 و 8 كان لديهم تشاو libitum الإعلانية. وفي اليوم 25 لم يتعرضوا للإجهاد.
  2. المجموعة الثانية كانت تشاو و HPF مثل NR + NS ، ولكن في يوم الاختبار (يوم 25) تعرضوا للتوتر (NR + S).
  3. كانت المجموعة الثالثة (R + NS) قد اقتصرت على نسبة 66٪ من الكمية المعتادة خلال أيام 4 ، وتم عرضها على COW و HPF (2 h) في أيام 5 و 6 و Chow فقط في الأيام 7 و 8 ؛ في يوم 25 لم يتعرضوا للإجهاد.
  4. كانت مجموعة R + S مقتصرة على 66٪ من الكمية المعتادة خلال أيام 4 ، حيث تم عرضها على COW و HPF (2 h) في أيام 5 و 6 و Chow فقط في الأيام 7 و 8 ؛ وفي اليوم 25 تعرضوا للإجهاد.

تم تكرار دورة يوم 8 ثلاث مرات ، ولكن في الدورة الثالثة لم تكن الحيوانات قادرة على الوصول إلى طعام HPF.

في يوم 25 ، تم تقسيم كل مجموعة من فئران 27 إلى ثلاث مجموعات فرعية وتمت معالجتها ، على التوالي ، بالمركبة ، SB-649868 ، 1 أو 3 mg / kg ، تم الحصول عليها عن طريق التزوير 1 h قبل الوصول إلى HPF.

تم الإعراب عن تناول HPF كمتوسط ​​للكيلو / كجم مبتلع ± SEM ؛ تم قياس مدخول HPF عند 15 و 30 و 60 و 120 min بعد بداية الوصول. تم قياس كمية بيليه الطعام فقط عند 120 دقيقة ، وذلك بسبب نتائج الدراسات السابقة التي تبين أن تناول حبيبات الطعام كان صغيرا جدا ، وتجنب اضطراب الحيوانات أثناء الاختبار.

توبيراميت ، يستخدم كمركب مرجعي لهذا النموذج التجريبي (Cifani وآخرون، 2009) ، تم اختباره في نفس الفئران ، بعد 10 أيام من نهاية تجربة SB-649868. من هذه الحيوانات 108 ، تم تقسيم 72 إلى نفس المجموعات الأربع (حيوانات 18 لكل مجموعة) التي تم وصفها من قبل. بعد يوم واحد من نهاية الاختبار الأول ، تلقت مجموعات الجرذان هذه دورة إضافية من 8-day: كانت NR + NS و NR + S تحتوي على أيام 8 من الطعام libitum الإعلانية، في حين احتوت مجموعات R + NS و R + S على 4 يومًا مقتصرة على 66٪ من الكمية المعتادة التي تتبعها أيام 4 من الطعام libitum الإعلانية. في هذه الدورة الإضافية ، لم يكن لدى جميع المجموعات حق الوصول إلى HPF. في اليوم التالي ، تعرضت مجموعة NR + S و R + S للإجهاد ، في حين لم تكن مجموعات NR + NS و R + NS كذلك. في هذا اليوم ، تم إعطاء توبيراميت (60 mg / kg) أو سيارته بواسطة أنبوب 1 قبل الوصول إلى HPF.

تجربة 4B: تأثير JNJ-10397049 و GSK1059865

للتحقيق في OXR تشارك في الحد من الحلقات BE ، OX الانتقائي2مضاد R ، و JNJ-10397049 ، و OX الانتقائي1تم اختبار مضاد R ، GSK1059865 ، في نموذج BE الخاص بنا.

تم تقديم فئران 54 إضافية ، مقسمة إلى مجموعتين (NR + NS و R + S) لجرذان 27 ، إلى نفس الإجراء التجريبي كما في التجربة 4A. تم استخدام مجموعتين فقط من الفئران في هذه التجربة حيث لا تظهر كل من فئران NR + S و R + NS BE. في يوم الاختبار (يوم 25) ، 1 h قبل الوصول إلى HPF ، تم علاج الفئران داخل الصفاق مع JNJ-10397049 (1 و 3 mg / kg) أو مركبتها.

بعد يوم واحد من نهاية اختبار JNJ-10397049 ، تلقت مجموعة الجرذان نفس دورة 8-day إضافية متبوعة في اليوم 10 (كما هو موضح في التجربة السابقة) بواسطة GSK1059865. تم إعطاء GSK1059865 (10 و 30 mg / kg) أو سيارتها عن طريق أنبوب 1 قبل الوصول إلى HPF.

تحليل البيانات

يتم التعبير عن جميع البيانات كمتوسط ​​± SEM ولكل قيمة تعكس متوسط ​​عدد الحيوانات لكل مجموعة كما هو موضح في الأساطير. تم تحليل المعطيات بواسطة ANOVA ذات الاتجاهين مع مقارنات بين الموضوع للمجموعات التجريبية أو العلاجات الدوائية ، والمقارنة داخل الموضوع لوقت الملاحظة. بعد خاصة أجريت المقارنات من خلال اختبار بونفيروني. تم تعيين الأهمية الإحصائية في P

النتائج

Experiment 1: Antagonism of SB-649868، JNJ-10397049، and GSK1059865 at rX1R و ROX2R

زاد OXA (0.1 nM – 10 μM) على [3H] تراكم IPs بطريقة تعتمد على التركيز مع PEC50 قيمة 7.79 ± 0.04 (n= 16) و 7.68 ± 0.04 (n= 16) في rX1R و ROX2R ، على التوالي. في rXX1R، JNJ-10397049 (1 μM – 33 μM؛ الشكل 1a) و GSK1059865 (0.3 nM – 10 nM؛ الشكل 2a) أنتجت عداء غير قابل للقبض مع تحول يميني يعتمد على الجرعة من OXA EC50 وما يصاحب ذلك من انخفاض استجابة أقصى ناهضة. المحسوبة صKB كانت القيم 5.73 ± 0.16 (n= 3) و 8.77 ± 0.12 (n= 3) لـ JNJ-10397049 و GSK1059865 ، على التوالي. SB-649868 (0.1 و 0.3 و 0.6 و 1 nM) (الشكل 3a) أنتجت انخفاض كبير في الاستجابة القصوى OXA ، دون حدوث تحول في EC الناهض50. المقدرة الموافقة المسبقة عن علم50 كانت القيمة 9.46 ± 0.02 (n= 3). في rXX2R JNJ-10397049 (10 nM – 0.3 μM) (الشكل 1b) و GSK1059865 (0.1 – 3.3 μM) (الشكل 2b) أنتجت ملفًا جانبيًا قابلاً للتغلب عليه مع التحول المتوازي إلى اليمين لـ OXA EC50 دون اكتئاب من ناهض الاستجابة القصوى. كانت المنحدرات التي تم الحصول عليها من خلال تحليل الانحدار لشيلد 1.17 (95٪ CL 0.92-1.42) و 0.86 (95٪ CL 0.71-1.00) لـ JNJ-10397049 و GSK1059865 ، على التوالي ، ولم تكن مختلفة إحصائيًا عن واحد (P> 0.05). قصر المنحدرات على واحد ، صKB كانت القيم 8.49 (95٪ CL 8.34 – 8.63؛ n= 3) و 6.90 (95٪ CL 6.80 – 6.99؛ n= 3) لـ JNJ-10397049 و GSK1059865 ، على التوالي. SB-649868 (0.1 – 3.3 nM) (الشكل 3b) أنتجت التحول إلى اليمين تعتمد على الجرعة من OXA EC50، يرافقه الحد من استجابة القصوى ناهض. من خلال تطبيق النموذج التشغيلي لتحليل العداء غير التنافسي ، كما هو موضح في المواد والطرق ، ا ف بKB قيمة 9.35 ± 0.15 (n= 3) تم حسابه.

الشكل 1 

[3H] تراكم الفوسفاط (inositol phosphates (IPs)) الناتج عن منحنيات التركيز-الاستجابة (CRC) لـ orexin-A (OXA) (•) في خلايا اللقاح الفئران basophil (RBL) معربا عن: الفأر OX1R (rOX1R) (a) بحضور 1 (Δ) و 3.3 (▾) و 10 ...
الشكل 2 

[3H] تراكم الفوسفاط (inositol phosphates (IPs)) الناتج عن منحنيات التركيز-الاستجابة (CRC) لـ orexin-A (OXA) (•) في خلايا اللقاح الفئران basophil (RBL) معربا عن: rOX1R (a) بحضور 0.3 (▴) و 1 (▾) و 3.3 (♦) ...
الشكل 3 

[3H] تراكم الفوسفاط (inositol phosphates (IPs)) الناتج عن منحنيات التركيز-الاستجابة (CRC) لـ orexin-A (OXA) (•) في خلايا اللقاح الفئران basophil (RBL) معربا عن: الفئران rOX1R (rOX1R) (a) بحضور 0.1 (□) ، 0.3 (Δ) ، ...

تجربة 2: PK تحديدات في ذكور وإناث الجرذان

تم التحقيق في تحديدات PK في ذكور الجرذان في نفس الظروف التجريبية مثل تجربة 3 ، وهي موضحة في الجدول 2.

الجدول 2 

المعلمات الدوائية من SB-649868 و JNJ-10397049 و GSK1059865 في ذكور Sprague – Dawley Rats

Cماكس من SB-649868 في 3 mg / kg كان 333 ± 52 ng / ml و AUC 1260 ± 262 ng*ح / مل.

Cماكس من JNJ-10397049 في 5 mg / kg كان 14.2 ± 1.0 ng / ml و AUC 64 ± 4.3 ng*ح / مل.

Cماكس من GSK1059865 عند 10 mg / kg كان 366 ± 70 ng / ml و AUC 1290 ± 320 ng*ح / مل.

تم التحقيق في تحديدات PK في أنثى الجرذان في نفس الظروف التجريبية مثل التجربة 4 ، وهي موضحة في الجدول 3.

الجدول 3 

معلمات الحركية الدوائية لـ SB-649868 و JNJ-10397049 و GSK1059865 في أنثى Sprague – Dawley Rats

Cماكس من SB-649868 في 3 mg / kg كان 572 ± 115 ng / ml و AUC 1708 ± 331 ng*ح / مل.

Cماكس من JNJ-10397049 في 10 mg / kg كان 369 ± 97 ng / ml و AUC 457 ± 224 ng*ح / مل.

Cماكس من GSK1059865 عند 10 mg / kg كان 268 ± 29 ng / ml و AUC 768 ± 46 ng*ح / مل.

تجربة 3: تأثير SB-649868 و JNJ-10397049 و GSK1059865 على نموذج نوم الجرذ

تم تقييم الملف التنويمى لمضادات OXR خلال فترة 3-h في الطور النشط للفئران ، بدءا من مرحلة التسجيل في CT 18 (إطفاء الأنوار عند CT 12) من دورة ضوء الظلام - الفئران. تم اختيار CT 18 على وجه التحديد للسماح بإطار أقصى لتقييم التأثيرات المنومة للمركبات.

في هذه الظروف التجريبية ، و OX المزدوج1/ثور2تسبب مضادات R SB-649868 (3 و 10 mg / kg ، عن طريق الإزراق) في انخفاض شديد في اليقظة (F (2، 21) = 22.9؛ P<0.01) ، وانخفاض في زمن انتقال النوم (F (2 ، 21) = 9.11 ؛ P<0.01) مقارنة بمجموعة التحكم. أظهر اختبار Dunnett بعد ANOVA تأثيرًا مهمًا إحصائيًا عند 3 و 10 مجم / كجم (P<0.01) في كل من معلمات النوم. يشير تحليل أنماط النوم إلى زيادات في كل من نوم حركة العين غير السريعة وحركة العين السريعة عند كلتا الجرعتين (الجدول شنومكا).

الجدول شنومكا 

تأثير SB-649868 (بواسطة Gavage) على معلمات النوم في الجرذان

الانتقائية OX2أظهر المضاد R JNJ-10397049 (5 و 25 mg / kg، intraperitoneally) تأثيرًا منومًا ، كما يتضح من نقصان اليقظة (F (2، 14) = 18.8؛ P<0.01) ووقت استجابة النوم (F (2، 14) = 4.8 ؛ P<0.05). أظهر اختبار Dunnett بعد ANOVA أن الانخفاض كان ذا دلالة إحصائية عند كل من 5 و 25 مجم / كجم (P<0.01 لليقظة و P<0.05 لوقت استجابة النوم). لوحظ زيادة في نوم حركة العين غير السريعة عند كلتا الجرعتين (P<0.01) ، ولكن لم يلاحظ أي تأثير على نوم حركة العين السريعة (الجدول شنومكسب).

الجدول شنومكسب 

تأثير JNJ-10397049 (ip) على معلمات النوم في الجرذان

الانتقائية OX1أنتجت المضادات R GSK1059865 (5 و 25 mg / kg، intraperitoneally) اتجاهاً نحو تقليل اليقظة (F (2، 14) = 3.27؛ P<0.05) ووقت استجابة النوم (F (2، 20) = 1.73 ؛ P> 0.05). أظهر تحليل أنماط النوم زيادة فقط في نوم حركة العين غير السريعة ، ذات دلالة إحصائية عند أعلى جرعة تم اختبارها (P<0.05 اختبار Dunnett بعد ANOVA) ؛ لم يلاحظ أي تأثير في نوم الريم (جدول 4c).

جدول 4c 

تأثير GSK1059865 (ip) على معلمات النوم في الجرذان

تجربة 4A. BE: تأثير SB-649868 و Topiramate

كشفت ANOVA عن فروق ذات دلالة إحصائية في استهلاك 2-h HPF في المجموعات الأربع من الجرذان بعد إدارة السيارة (F (3، 32) = 13.81؛ P<0.01). كما هو موضح في الشكل 4، بعد إدارة السيارة كان استهلاك HPF في مجموعة R + S أعلى بشكل ملحوظ من مجموعة التحكم (NR + NS). كان ظهور HPF للفئران R + S واضحًا جدًا في أول 15 من الوصول إليه ؛ لم تكن مدخول HPF لمجموعة NR + S مختلفًا بشكل كبير عن المتحكم (NR + NS) ، مما يشير إلى أن الإجهاد لم يكن كافياً لحث BE. علاوةً على ذلك ، لم يكن تناول HPF لمجموعة R + NS مختلفًا بشكل كبير عن مجموعة التحكم (NR + NS) ، مما يشير إلى أن دورات الحد من الأغذية لا تكفي لحث BE. لذلك ، قد يكون سبب ذلك تفاعل فريد بين اتباع نظام غذائي والتوتر.

الشكل 4 

تأثير SB-649868 (1 و 3 mg / kg ، عن طريق الإزراق) أو مركبتها على مدخول غذائي شديد الاستساغة (HPF). يتم التعبير عن القيم كمتوسط ​​± SEM من تسعة فئران. **P<0.01 ، الفرق من الفئران المعالجة بالمركبات ؛ حيث لم تتم الإشارة إليه ، ...

كان الكميات من الكريات الغذائية القياسية صغيرة جدا (حول 3 - 4 ٪ من السعرات الحرارية الكلية في اختبار 2 ح) ، ولم تتأثر من قبل تقييد الغذاء ، والإجهاد ، أو مزيج من الاثنين معا.

كما هو مبين في الشكل 4خفض SB-649868 بشكل كبير من استهلاك HPF في مجموعة R + S (F (2، 24) = 18.63؛ P<0.01) ، ولكن ليس في المجموعات الأخرى: NR + NS (F (2 ، 24) = 0.91 ؛ P> 0.05) ؛ R + NS (F (2 ، 24) = 0.16 ؛ P> 0.05) ؛ NR + S (F (2 ، 24) = 1.1 ؛ P> 0.05). بعد خاصة أظهرت المقارنات أن تأثير SB-649868 في مجموعة R + S كان ذو دلالة إحصائية عند جميع النقاط الزمنية استجابة لأعلى جرعة من 3 mg / kg. أظهرت جرعة 1 mg / kg في المجموعة R + S اتجاهاً نحو خفض لم يكن ذا دلالة إحصائية.

كشف اختبار توبيراميت عن فروق ذات دلالة إحصائية في تناول 2-h HPF (F (3، 32) = 3.93؛ P<0.01) من المجموعات المختلفة التالية لإدارة السيارة. تناول التوبيراميت عند 60 مجم / كجم انتقائية قللت من تناول HPF (F (1 ، 16) = 6.57 ؛ P<0.01) في مجموعة R + S (الشكل 5) ، ولكن ليس في مجموعات NR + NS و NR + S و R + NS. لا يتم عرض بيانات مجموعتي NR + S و R + NS.

الشكل 5 

تأثير توبيراميت (60 ملغم / كغم ، بالتزقيم) أو مركبته على مدخول غذائي مستساغ للغاية (HPF). يتم التعبير عن القيم كمتوسط ​​± SEM من تسعة فئران. *P<0.05 ، الفرق من الفئران المعالجة بالمركبة ؛ حيث لا يشار إلى الفرق ...

التجربة 4B. BE: تأثير JNJ-10397049 و GSK1059865

بالنسبة للتجربة السابقة ، أكدت ANOVA أن مجموعة R + S أظهرت زيادة كبيرة في كمية HPF (F (1، 16) = 16.17؛ P<0.01). لم يؤثر JNJ-10397049 على التغذية سواء في مجموعة NR + NS (F (2 ، 26) = 0.23 ؛ P> 0.05) أو في مجموعة R + S (F (2 ، 24) = 0.49 ؛ P> 0.05) (الشكل 6a).

الشكل 6 

تأثير JNJ-10397049 (1 و 3 mg / kg ، intraperitoneally) (a) أو GSK1059865 (10 و 30 mg / kg ، عن طريق التزويج) (ب) على تناول الطعام الجيد للغاية (HPF). يتم التعبير عن القيم كمتوسط ​​± SEM من تسعة فئران. *P<0.05، فرق ...

النتائج التي تم الحصول عليها تبين أن OX2العداء R لا يؤثر على سلوك التغذية. وبالتالي ، فإن التأثير الذي لوحظ سابقاً مع SB-649868 تم بوساطة من خلال OX1آليات R. لتأكيد هذه النتيجة ، فإن OX الانتقائي1تم اختبار المضاد R GSK1059865 (10 و 30 mg / kg). أظهر ANOVA اختلافًا كبيرًا بين المجموعات استجابةً للمعالجة المركبة (F (1، 16) = 17.1؛ P<0.01) ، مما يؤكد تأثير BE في مجموعة R + S. لم يؤثر GSK1059865 (بجرعات 10 و 30 مجم / كجم) على التغذية في مجموعة NR + NS (F (2 ، 24) = 0.10 ؛ P> 0.05). في مجموعة R + S ، أظهر ANOVA تأثيرًا كبيرًا (F (2 ، 23) = 4.20 ، P<0.05) (الشكل 6b). بعد خاصة أظهرت المقارنات أن تأثير GSK1059865 في مجموعة R + S عند جرعات 10 و 30 mg / kg كان له دلالة إحصائية عند 15 و 30 و 60 min بعد الوصول المجاني إلى HPF.

مناقشة

تشير مجموعة كبيرة من الأدلة إلى أن الحمية الغذائية والإجهاد والحالات العاطفية السلبية تمثل مسببات محتملة لـ BE في المرضى الذين يعانون من BED أو الشره العصبي (اردل وآخرون، 2000; فريمان وجيل ، 2004). في الواقع ، فترات الحمية شائعة في تاريخ آكلات الشراهة ، على الرغم من أن الجوع نفسه لا يبدو كافياً للحث على الإجهاض في غياب الإجهاد والحالة العاطفية السلبية (Polivy وآخرون، 1994; مياه وآخرون، 2001). تشير أدلة كبيرة إلى أن التهاب المفاصل الروماتويدي قد يكون ناجمًا عن تفاعل فريد بين الحمية الغذائية والإجهاد. وبالتالي ، قد يكون الإجهاد البيئي وتاريخ القيود الغذائية الدورية مسؤولاً عن التهطال والصيانة (ستايس وآخرون، 2001; كراوثر وآخرون، 2001; وولف وآخرون، 2000). وفقا لذلك ، باستمرار القيود الغذائية هي أقوى مؤشر على الإفراط في تناول الطعام ردا على الإجهاد (اردل وآخرون، 2000).

كما أن الجمع بين اتباع نظام غذائي والتوتر يلعب دوراً هاماً في تطوير BE في نموذجنا قبل السريري. في النموذج الذي وضعته Cifani وآخرون (2009)، يتم استخراج BE عن طريق اتباع نظام غذائي يو يو والتعرض مرهقة ل HPF. في هذا النموذج ، تتعرض فئران الإناث لدورات متكررة من التقييد وإجراء مجهول يتميز بتعرض الحيوانات إلى HPF دون إمكانية الوصول إليها.

كما ورد في المقدمة ، فقد تم توريط آليات OX في السيطرة على كل من التغذية التماثلية والمكافئة ، وكذلك في الدافع لتعاطي المخدرات (Bonci و Borgland ، 2009). تمشياً مع الفكرة القائلة بأن الأنظمة العصبية التي تحفز وتعاطي تعاطي المخدرات قد تكمن أيضاً في السلوكيات المرتبطة بالسعي إلى الطعام والحصول عليه (Gearhardt وآخرون، 2011b) ، بحثت هذه الدراسة في قدرة مضادات OXR لمنع الحلقات BE وتقييم تورط OX1 و OX2 آليات في السيطرة على الحلقات BE.

لهذا السبب ، ذكرت ثلاثة مركبات في الأدبيات أن لها انتقائية مختلفة vs OX1 و OX2 تم اختبار المستقبلات البشرية: الثنائي المزدوج1/ثور2المضاد R (SB-649868) ، OX الانتقائي2مضاد R (JNJ-10397049) ، و OX الانتقائي1خصم R (GSK1059865). لاستخدام الجرعات الدوائية ذات الصلة ، تم تقييم أول مضادات OXR الثلاثة المختبر في الفئران المؤتلف الفئران1R و OX2R لتحديد قوة وتأكيد انتقائية في هذه الأنواع الحيوانية. مختلف OX1/ثور2تم تأكيد انتقائية R في الفئران باستخدام [3H] inositol مقايسة.

لتقييم PK التعرض للدم لدعم النوم ودراسات BE ، تم تحليل ملامح PK للمركبات في ذكور وإناث الفئران ، حيث كانت هذه الجنس المستخدمة في تجارب النوم و BE ، على التوالي.

بعد ذلك ، تم تحديد الجرعات القادرة على إحداث تأثيرات منومة في نموذج جرذ النوم. وأخيرًا ، تم اختبار المركبات وفقًا للجرعات المحددة في نموذج BE.

OX1R و OX2يتم الإبلاغ عن مضادات R في الأدبيات أن تشارك في التحكم في النوم ، على وجه الخصوص للحث على آثار المنومة (دي فابيو وآخرون، 2011; Gozzi وآخرون، 2011; Dugovic وآخرون، 2009). في نموذج النوم المنوم قبل الإكلينيكي في ذكور الفئران ، أظهرت النتائج التي تم الحصول عليها أن OX المزدوج1/ثور2قام مضاد R ، SB-649868 بتحفيز تأثير منوم قوي ، كلاهما على القدرة على التحريض والحفاظ على النوم ، ليصل إلى تأثير ذو دلالة إحصائية عند 3 mg / kg. على غرار SB-649868 ، OX2أظهر R R مناهض JNJ-10397049 تأثير منوم جيد مع انخفاض كبير في الوقت الذي يقضيه مستيقظًا في 5 mg / kg. على العكس من ذلك ، OX1أظهر المضاد R GSK1059865 قدرة منومة جدا جدا لتحريض والحفاظ على النوم. هذه النتائج تتماشى مع التقارير الأخرى التي تشير إلى أن OX2R قد يكون أكثر أهمية من OX1R في التوسط في تأثير OX على النوم (ساكوراي ، 2007; Brisbare روش وآخرون، 2007; مالرب وآخرون، 2009; Dugovic وآخرون، 2009; دي فابيو وآخرون، 2011).

تم اختبار SB-649868 ، الذي تم اختباره في أربع حالات مختلفة من الإجهاد وتقييد المواد الغذائية (NR + NS ، R + NS ، NR + S ، R + S) ، لتقليل استهلاك HPF فقط في مجموعة R + S. في 3 mg / kg ، كان لـ SB-649868 تأثير مشابه لما لوحظ مع توبيراميت. كما هو الحال مع توبيراميت ، لم تقم SB-649868 بتعديل مدخول HPF في الظروف الأخرى لتقييد الأغذية والإجهاد.

وOX2لم تظهر المضادات R ، JNJ-10397049 ، التي تم اختبارها في نفس الظروف أي تأثير على مدخول HPF في جميع الظروف الأربعة التي تم اختبارها.

هذه النتائج تشير بوضوح إلى أن OX1تشارك R في التحكم في الحلقات BE واقترحت دورًا محتملاً لـ OX1مضادات R لعكس حلقات BE الناجمة عن الإجهاد واتباع نظام غذائي محدود. للتحقق من هذه الفرضية ، فإن OX الانتقائي1تم تقييم R R مناهضة GSK1059865 في الحيوانات المحظورة والضغط. النتائج التي تم الحصول عليها أكدت أن OX1لقد عرقل مضادات R الزيادة في استهلاك HPF في الجرذان R + S دون التأثير على استهلاك الغذاء في أدوات التحكم (NR + NS).

لا يمكن أن يعزى عدم وجود تأثير من JNJ-10397049 إلى تعرض مركب غير كاف في الحيوانات المقدمة إلى نموذج BE. أشار تقييم PK لـ JNJ-10397049 إلى اختلاف في الجنس ، مع تعرض الإناث أكثر من ذكور الجرذان في نفس جرعة JNJ-10397049 (10 mg / kg). قيم AUC المقدرة كانت 64 ng*ح / مل في ذكور الفئران vs 457 ng*ح / مل في الجرذان الإناث (حوالي سبع مرات أعلى). لذلك ، استنتج أن تعرض الحيوانات في نموذج BE في 1 و 3 mg / kg JNJ-10397049 كان أعلى بكثير من تلك التي تم تحقيقها في دراسة النوم في 5 و 25 mg / kg. من ناحية أخرى ، لم تلاحظ أي فروق بين الجنسين في PK لكل من SB-649868 و GSK1059865 ، وكانت التعرّضات إلى المركبين متداخلة في ذكور وإناث الجرذان.

كما هو مذكور في المقدمة ، فإن الإجهاد هو المحدد الرئيسي لـ BE. وقد تم إنتاج العديد من مجموعات البيانات في العقد الماضي لدعم دور الببتيدات OX في حالات الإثارة العالية ، بما في ذلك الإجهاد ، وهذا الأخير يرتبط مع معدلات أعلى بكثير من العصبية أوكسيرجيك. وقد اقترح الخلايا العصبية OX في hypothalamus perursical-dorsomedial للتوسط تنشيط الإجهاد (هاريس وأستون جونز ، 2006، لمراجعة ، انظر Koob ، 2008). ربما ، OXA من هذه المنطقة تحت المخطئة ينشط الخلايا العصبية CRF معربا في النواة بارافينتريكول من الوطاء وفي النواة المركزية من اللوزة (ساكاموتو وآخرون، 2004). وفقا لذلك ، OX1المضادات R تمنع استعادة الإيثانول والسكروز تسعى التي يسببها yohimbine الدوائية الإجهاد (ريتشاردز وآخرون، 2008) و OXA يعيد سلوك البحث عن الكوكايين (Boutrel وآخرون، 2005). مؤخرا، كواكي (2011) وجدت أن نظام OX هو واحد من المضاعفات الأساسية في الدوائر العصبية السيطرة على وظائف اللاإرادي والسلوك العاطفي. النتائج السابقة من قبل جونسون وآخرون (2010) أظهرت أن OX انتقائي1وقد خفّض المضاد R SB334867 السلوك الشبيه بالقلق ، وأوقف الزيادات في الحركة ، ومعدل ضربات القلب ، واستجابات ضغط الدم الناجمة عن تحدي لاكتات الصوديوم في الجرذان.

تشير العديد من الدراسات إلى أن تنظيمًا متغيرًا للدوبامين المخطط (DA) قد يكون موجودًا لدى مرضى الشره المرضي العصبي و BED (Bello و Hajnal و 2010; Broft وآخرون، 2011; وانغ وآخرون، 2011). دراسات Hoebel وزملاء العمل (للمراجعة ، انظر Avena و Bocarsly ، 2011) قد كشفت عن تغييرات في إصدار DA في المخاض وربط المستقبل ، مماثلة لتلك التي شوهدت استجابة لعقاقير الإساءة. النيوروببتيد التي يتم إنتاجها في LH يمكن أن تعدل نشاط VTA – DA والخلايا العصبية القاتلة. الخلايا العصبية التي تحتوي على OX المشروع من LH إلى VTA ، حيث OX1R يلعب دورا رئيسيا في تنظيم انتقال DA mesolimbic والخصائص المجزية من مختلف المخدرات من سوء المعاملة والطعام (كاسون وآخرون، 2010; Uramura وآخرون، 2001; تشنغ وآخرون، 2007). علاوة على ذلك ، يمكن التحكم في نوبات BE عبر تأثير محدد على عمليات المكافأة والتعزيز لـ HPF. في هذا الصدد ، من المثير للاهتمام أن نلاحظ أن الخلايا العصبية OX في LH قد اقترحت للتوسط تفعيل المكافأة (للمراجعة ، انظر Koob ، 2008). وبالتالي ، فمن المقترح أن يتم تنشيط الخلايا العصبية OX في LH عن طريق العظة المرتبطة المكافآت ، مثل الغذاء أو المخدرات ، وتحفيز الخلايا العصبية OX في LH يعيد المخدرات تسعى في الفئران (هاريس وآخرون، 2005).

وقد أظهرت مجموعتنا مؤخرا من خلال نهج التصوير بالرنين المغناطيسي ما قبل السريرية التي OX1R بدلا من OX2تحوير R بشكل انتقائي لمنطقة الدماغ الوسطى والجزء القشري من insula ، المناطق المتضمنة في المعالجة المكافئة (Gozzi وآخرون، 2011). هذه البيانات تؤكد وتوسيع النتائج السابقة التي OX1يلعب R دورًا في معالجة الثواب وتهريب سلوك البحث عن الدواء (Boutrel وآخرون، 2005. لورانس وآخرون، 2006؛ هولاندر وآخرون، 2008; سميث وآخرون، 2010). وبالتالي ، ستكون هناك حاجة إلى مزيد من العمل لتقييم ما إذا كان التأثير القمعي على BE أثاره OX1ترتبط مضادات R بتأثيرها على آليات الإجهاد أو المكافآت ، أو على كليهما.

في الختام ، النتائج التي تم الحصول عليها في هذه الدراسة باستخدام ثلاثة مضادات OXR مع انتقائية مختلفة ل OX1R vs OX2أظهر R بوضوح دور مختلف OXR في السيطرة على الحلقات BE وفي تعديل النوم. أكدت بياناتنا الدور الرئيسي لـ OX2R آليات التحكم في النوم. بالإضافة إلى ذلك ، فإنها تظهر لأول مرة أن OX1تلعب آليات R دورًا رئيسيًا في التحكم في الحلقات BE. هذه النتائج تشير إلى أن استهداف OX1يمكن أن تمثل R نهج صيدلاني جديد مثير للاهتمام لعلاج اضطرابات BE.

شكر وتقدير

نشكر الدكتور تشارلز بيكنز للتصحيح الأسلوبي للمخطوطة.

ملاحظة

EM-P هو موظف بدوام كامل من GSK.

مراجع حسابات

  • الرابطة الأمريكية للطب النفسي . دليل التشخيص والإحصاء للاضطرابات النفسية ، IV-TR. الجمعية الأمريكية للطب النفسي: واشنطن العاصمة ؛ 2000.
  • Appolinario JC، Godoy-Matos A، Fontenelle LF، Carraro L، Cabral M، Vieira A، et al. تجربة مفتوحة من سيبوترامين في المرضى الذين يعانون من السمنة المفرطة مع اضطراب الإفراط في تناول الطعام. ي كلين الطب النفسي. 2000، 63: 8-30. [مجلات]
  • Arunlakshana O، Schild HO. بعض الاستخدامات الكمية لمضادات العقاقير. Br J Pharmacog Chemother. 1959، 14: 48-58. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Avena NM، Bocarsly ME. 2011Dysregulation من نظم مكافأة الدماغ في اضطرابات الأكل: المعلومات الكيميائية العصبية من النماذج الحيوانية من الأكل بنهم ، الشره العصبي ، وفقدان الشهية العصبي Neuropharmacologye-pub قبل الطباعة 27 نوفمبر 2011. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Avena NM، Rada P، Hoebel BG. أدلة لإدمان السكر: التأثيرات السلوكية والعصبية الكيميائية الناجمة عن تناول السكر المفرط والمتقطع. Neurosci Biobehav Rev. 2008 ؛ 32: 20 – 39. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Bello NT، Hajnal A. Dopamine and binge eating behaviors. Pharmacol Bioichem Behav. 2010، 97: 25-33. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Bonci A ، Borgland S. دور orexin / hypocretin و CRF في تشكيل اللدونة متشابك تعتمد على المخدرات في نظام mesolimbic. الفارماكولوجيا العصبية. 2009، 56: 107-111. [مجلات]
  • Borgland SL، Taha SA، Sarti F، Fields HL، Bonci A. Orexin A in the VTA ضروري لتحريض اللدونة متشابك والتوعية السلوكية للكوكايين. الخلايا العصبية. 2006، 49: 589-601. [مجلات]
  • Boutrel B، Kenny PJ، Specio SE، Martin-Fardon R، Markou A، Koob GF، et al. دور hypocretin في التوسط الناجم عن الإجهاد الناجم عن إعادة السلوك الذي يسعى إليه الكوكايين. Proc Natl Acad Sci USA. 2005، 102: 19168-19173. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Brandish PE، Hill LA، Zheng W، Scolnick EM. اختبار قرب التلألؤ من فوسفات إينوسيتول في مستخلصات الخلايا: قياس عالي الإنتاجية لتنشيط مستقبلات G-protein-coupled. الشرج البيوكيم. 2003، 313: 311-318. [مجلات]
  • Brisbare-Roch C، Dingemanse J، Koberstein R، Hoever P، Aissaoui H، Flores S، et al. تعزيز النوم عن طريق استهداف نظام orexin في الفئران والكلاب والبشر. نات ميد. 2007، 13: 50-155. [مجلات]
  • Broft AI، Berner LA، Martinez D، Walsh BT. الشره المرضي العصبي والأدلة على dysregulation مخطط الدوبامين: مراجعة المفاهيم. فيسيول بيهاف. 2011، 104: 122-127. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • كارتر الفسفور الابيض ، هدسون JI ، لالوند JK ، Pindyck L ، Mcelroy SL ، البابا HG. ، الابن العلاج Pharmacolic من اضطراب الأكل بنهم. Int J Eat Disord. 2003 ؛ 34 (Suppl: S74 – S88. [مجلات]
  • Cason AM، Smith RJ، Tahsili-Fahadan P، Moorman DE، Sartor GC، Aston-Jones G. Role of orexin / hypocretin in reward seeking and addiction: implications for obesity. فيسيول بيهاف. 2010، 100: 419-428. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Chemelli RM، Willie JT، Sinton CM، Elmquist JK، Scammell T، Lee C، et al. الخدار في الفئران بأوركسين بالضربة القاضية: علم الوراثة الجزيئي لتنظيم النوم. زنزانة. 1999، 98: 437-451. [مجلات]
  • Cifani C، Polidori C، Melotto S، Ciccocioppo R، Massi MA. نموذج ما قبل السريرية لحفلات تناول الطعام التي يسببها اتباع نظام غذائي يو والتعرض المجهد للغذاء: تأثير سيبوترامين ، فلوكستين ، توبيراميت وميدازولام. علم الأدوية النفسية. 2009، 204: 113-125. [مجلات]
  • Corwin R، Avena NM، Boggiano MM. الشعور والمكافأة: منظور من ثلاثة نماذج الفئران من الشراهة عند تناول الطعام. فيسيول بيهاف. 2011، 104: 87-97. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Crowther JH، Sanftner J، Bonifazi DZ، Shepherd KL. دور متاعب اليومية في الأكل بنهم. Int J Eat Disord. 2001، 29: 449-454. [مجلات]
  • de Lecea L، Kilduff TS، Peyron C، Gao X، Foye PE، Danielson PE، et al. hypocretins: ببتيدات محددة المهاد مع نشاط عصبي. Proc Natl Acad Sci USA. 1998، 95: 322-327. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Devlin MJ، Yanovski SZ، Wilson GT. السمنة: ما الذي يحتاجه اختصاصيو الصحة العقلية. صباحا J Psychiatry. 2000، 157: 854-866. [مجلات]
  • Di Fabio R، Pellacani A، Faedo S، Roth A، Piccoli L، Gerrard P، et al. عملية الاكتشاف والتوصيف الدوائي لرائد مستقبلي ثنائي orexin 1 ومضاد مستقبلات orexin 2 مفيد لعلاج اضطرابات النوم. Biorg Med Chem Lett. 2011، 21: 5562-5567. [مجلات]
  • Dugovic C، Shelton JE، Aluisio LE، Fraser IC، Jiang X، Sutton SW، et al. الحصار لمستقبلات orexin-1 يضعف تأثير النوم المستحث بخصائص المستحثات المستحث في orexin-2 في الجرذان. J Pharmacol Exp Ther. 2009، 330: 142-151. [مجلات]
  • Fassino S، Leombruni P، Pierò A، Abbate-Daga G، Giacomo Rovera G. Mood، eating attitudes، and ager in obese women with and without binge eating disorder. J Psychosom Res. 2003، 54: 559-566. [مجلات]
  • Foulds Mathes W، Brownley KA، Mo X، Bulik CM. بيولوجيا الشراهة عند تناول الطعام. شهية. 2009، 52: 545-553. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Freeman LM، Gil KM. الضغط اليومي ، والتأقلم ، والقيود الغذائية في الأكل بنهم. Int J Eat Disord. 2004، 36: 204-212. [مجلات]
  • Gearhardt AN، Corbin WR، Brownell KD. الإدمان على الغذاء: فحص للمعايير التشخيصية للاعتماد. J Addict Med. 2011a، 3: 1-7. [مجلات]
  • Gearhardt AN، Yokum S، Orr PT، Stice E، Corbin WR، Brownell KD. الارتباطات العصبية من إدمان الغذاء. القوس العام للطب النفسي. 2011b، 68: 808-816. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Gold MS، Frost-Pineda K، Jacobs WS. الإفراط في الأكل ، الشراهة عند تناول الطعام ، واضطرابات الأكل مثل الإدمان. Psychiatr آن. 2003، 33: 112-116.
  • Gozzi A، Turrini G، Piccoli L، Massagrande M، Amantini D، Antolini M، et al. يكشف التصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي عن ركائز عصبية مختلفة لتأثيرات orexin-1 ومضادات مستقبلات orexin-2. بلوس واحد. 2011، 6: e16406. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Grucza RA، Przybeck TR، Cloninger CR. انتشار وارتباط اضطراب الإفراط في الأكل في عينة المجتمع. Compr Psychiatry. 2007، 48: 124-131. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Harris GC، Aston-Jones G. Arousal and reward: a divos in orexin function. اتجاهات neurosci. 2006، 29: 571-577. [مجلات]
  • Harris GC، Wimmer M، Aston-Jones G. A role for hypothalamic orexin neurons in reward seeking. طبيعة. 2005، 437: 556-559. [مجلات]
  • Haynes AC، Jackson B، Chapman H، Tadayyon M، Johns A، Porter RA، et al. يقلل مستقبل انتقائي لمستقبلات orexin-1 من استهلاك الطعام في ذكور وإناث الجرذان. Regul Pept. 2000، 96: 45-51. [مجلات]
  • هيث AC. الإفراط في تناول الطعام والشره المرضي: رؤى محتملة في المسببات والفيزيولوجيا المرضية من خلال الدراسات الوبائية الجينية. بيول الطب النفسي. 1998، 44: 1208-1209. [مجلات]
  • Hoebel BG. الناقلات العصبية الدماغ في الغذاء والدواء مكافأة. Am J Clin Nutr. 1985 ؛ 42 (ملحق: 1133 – 1150. [مجلات]
  • Hollander JA، Lu Q، Cameron MD، Kamenecka TM، Kenny PJ. ينقل انتقال إنزيم hypocretin الجزئي مكافئات النيكوتين. Proc Natl Acad Sci USA. 2008، 105: 19480-19485. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Hudson JI، Hiripi E، Pope HG، Jr، Kessler RC. انتشار وارتباطات اضطرابات الأكل في الاستنساخ المسح التواؤم الوطني. بيول الطب النفسي. 2007، 61: 348-358. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Ifland JR، Preuss HG، Marcus MT، Rourke KM، Taylor WC، Burau K، et al. الإدمان على الأغذية المكررة: اضطراب استخدام مادة كلاسيكي. فرضيات ميد. 2009، 72: 518-526. [مجلات]
  • Kenakin T، Jenkinson S، Watson C. Determining the potency and molecular mechanism of action of non unmmountable antagonists. J Pharmacol Exp Ther. 2006، 319: 710-723. [مجلات]
  • كيني PJ. الآليات الخلوية والجزيئية الشائعة في السمنة وإدمان المخدرات. نات ريف نيوروسكي. 2011، 12: 638-651. [مجلات]
  • Koob GF. دور في نظام الإجهاد الدماغي في الإدمان. الخلايا العصبية. 2008، 59: 11-34. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • يربط Kuwaki T. Orexin بين التوتر العاطفي والوظائف الذاتية. Auton Neurosci. 2011، 161: 20-27. [مجلات]
  • Javaras KN، Pope HG، Lalonde JK، Roberts JL، Nillni YI، Laird NM، et al. حدوث اضطراب الإفراط في الأكل مع الاضطرابات النفسية والطبية. ي كلين الطب النفسي. 2008، 269: 266-273. [مجلات]
  • Johnson PL، Truitt W، Fitz SD، Minick PE، Dietrich A، Sanghani S، et al. دور رئيسي لأوركسين في قلق الهلع. نات ميد. 2010، 16: 111-115. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • جونسون PM ، كيني PJ. مستقبلات الدوبامين D2 في ضعف المكافأة مثل الإدمان والأكل القهري في الجرذان البدينين. نات نيوروسكي. 2010، 13: 635-641. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Jupp B، Krivdic B، Krstew E، Lawrence AJ. ينبذ مضاد مستقبلات orexin1 SB-334867 الخصائص التحفيزية للكحول والسكروز في الجرذان. الدماغ الدقة. 2011، 1391: 54-59. [مجلات]
  • Lawrence AJ، Cowen MS، Yang HJ، Chen F، Oldfield B. ينظم نظام orexin البحث عن الكحول في الجرذان. Br J Pharmacol. 2006، 148: 752-759. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Lu XY، Bagnol D، Burke S، Akil H، Watson SJ. التوزيع التفاضلي والتنظيم لـ OX1 و OX2 orexin / hypocretin receptor messenger RNA في الدماغ عند الصيام. هورم بيهاف. 2000، 37: 335-344. [مجلات]
  • Malherbe P، Borroni E، Pinard E، Wettstein JG، Knoflach F. Biochemical and electrophysiological characterization of almorexant، a dual orexin 1 receptor (OX1) / orexin 2 receptor (OX2) antagonist: compare with selective OX1 and OX2 antagonists. مول Pharmacol. 2009، 76: 618-631. [مجلات]
  • ماركوس JN ، Aschkenasi CJ، Lee CE، Chemelli RM، Saper CB، Yanagisawa M، et al. تعبير تفاضلي لمستقبلات الأوريكسين 1 و 2 في دماغ الفئران. J Comp Neurol. 2001، 435: 6-25. [مجلات]
  • Martin-Fardon R، Zorrilla EP، Ciccocioppo R، Weiss F. Role of inate and drug-induced dysregulation of brain stress and arousal systems in addiction: focus on corticotropin-releaseeasing factor، nociceptin / orphanin FQ، andexex / hypocretin. الدماغ الدقة. 2010، 1314: 145-161. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • McAtee LC، Sutton SW، Rudolph DA، Li X، Aluisio LE، Phuong VK، et al. المستحضر الجديد 4-phenyl- 1,3 dioxanes: مستقبلات orexin الفعالة والانتقائية 2 (OX2R). Bioorg Med Chem Lett. 2004، 14: 4225-4229. [مجلات]
  • McElroy SL، Guerdjikova AI، Martens B، Keck PE، Jr، Pope HG، Hudson JI. دور الأدوية المضادة للصرع في إدارة اضطرابات الأكل. المخدرات CNS. 2009، 23: 139-156. [مجلات]
  • McElroy SL، Hudson JI، Capece JA، Beyers K، Fisher AC، Rosenthal NR. توبيراميت لعلاج اضطراب الأكل بنهم المرتبطة السمنة: دراسة همي تسيطر عليها. بيول الطب النفسي. 2007، 61: 1039-1048. [مجلات]
  • Nair SG ، Golden SA ، Shaham Y. التأثيرات التفاضلية للخصم XCMUM 1 لمستقبلات hypocretin SB على الإدارة الذاتية عالية الدهون الغذاء وإعادة المواد الغذائية التي تسعى في الفئران. Br J Pharmacol. 334867، 2008: 154-406. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Pelchat ML، Johnson A، Chan R، Valdez J، Ragland JD. صور من الرغبة: تنشيط الغذاء حنين خلال الرنين المغناطيسي الوظيفي. NeuroImage. 2004، 23: 1486-1493. [مجلات]
  • Perello M، Sakata I، Birnbaum S، Chuang JC، Osborne-Lawrence S، Rovinsky SA، et al. Ghrelin يزيد من قيمة مكافأة النظام الغذائي عالي الدهون بطريقة تعتمد على orexin. Biol Psych. 2010، 67: 880-886. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Polivy J، Zeitlin SB، Herman CP، Beal AL. تقييد الغذاء والشراهة عند تناول الطعام: دراسة لأسير الحرب السابق. J Abnorm Psychol. 1994، 103: 409-411. [مجلات]
  • قراءة دينار كويتي ، Braggio س. تقييم جزء الدماغ الحر في اكتشاف المخدرات في وقت مبكر. الخبير رأي المخدرات Metab Toxicol. 2010، 6: 337-344. [مجلات]
  • Richards JK، Simms JA، Steensland P، Taha SA، Borgland SL، Bonci A، et al. تثبيط مستقبلات orexin-1 / hypocretin-1 يثبط إعادة إنتاج الإيثانول والسكروز الناتجة عن إنتاج يوهيمبيني في فئران لونغ إيفانز. علم الأدوية النفسية. 2008، 199: 109-117. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Rodgers RJ، Halford JC، Nunes de Souza RL، Canto de Souza AL، Piper DC، Arch JR، et al. SB-334867 ، وهو مضاد مستقبلات orexin-1 انتقائي ، يعزز الشبع السلوكي ويمنع التأثير المفرط ل orexin-A في الجرذان. Eur J Neurosci. 2001، 13: 1444-1452. [مجلات]
  • ساكاموتو إف ، يامادا إس ، أويتا ي. ينظم أوركسين-أ الموضعي مركزياً عامل تحرير الكورتيكوتروبين الذي يحتوي على عصبونات في النواة تحت البطنية الوعائية ونواة مركزية من الفئران: احتمال مشاركة أوركسينات مركزية على الخلايا العصبية المركزية المفعّلة بالضغط العصبي المركزي. ريج ببت. 2004، 118: 183-191. [مجلات]
  • Sakurai T. الدائرة العصبية من orexin (hypocretin): الحفاظ على النوم واليقظة. نات ريف نيوروسكي. 2007، 8: 171-181. [مجلات]
  • Sakurai T، Amemiya A، Ishii M، Matsuzaki I، Chemelli RM، Tanaka H، et al. Orexins ومستقبلات orexin: عائلة من neuropeptides hypothalamic والمستقبلات المرتبط بالبروتين G التي تنظم سلوك التغذية. زنزانة. 1998، 92: 573-585. [مجلات]
  • Sharf R، Sarhan M، Brayton CE، Guarnieri DJ، Taylor JR، DiLeone RJ. تتوسط إشارات Orexin عبر OX1R الاستجابة النشطة من أجل تعزيز الغذاء. بيول الطب النفسي. 2010، 67: 753-760. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Shoblock JR، Welty N، Aluisio L، Fraser I، Motley ST، Morton K، et al. الحصار الانتقائي لمستقبلات orexin-2 يضعف الإدارة الذاتية للإيثانول ، تفضيل المكان ، والإعادة. علم الأدوية النفسية. 2011، 215: 191-203. [مجلات]
  • Smith RJ، Tahsili-Fahadan P، Aston-Jones G. Orexin / hypocretin ضروري للبحث عن الكوكايين. الفارماكولوجيا العصبية. 2010، 58: 179-184. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Stice E، Agras WS، Telch FC، Halmi KA، Mitchell JE، Wilson T. Subtyping binge eating disordered women along Dieting and negative affect negizes. Int J Eat Disord. 2001، 30: 11-27. [مجلات]
  • Trivedi P، Yu H، MacNeil DJ، Van der Ploeg LH، Guan XM. توزيع orRin مستقبلات mRNA في دماغ الفئران. FEBS Lett. 1998، 438: 71-75. [مجلات]
  • أورامورا K، Funahashi H، Muroya S، Shioda S، Takigawa M، Yada T. Orexin-a activates phospholipase C and protein kinase C mediated Ca2+ الإشارات في الخلايا العصبية الدوبامين في المنطقة tegmental بطني. NeuroReport. 2001، 12: 1885-1889. [مجلات]
  • Volkow ND، Wise RA. كيف يساعدنا إدمان المخدرات على فهم السمنة. نات نيوروسكي. 2005، 8: 555-560. [مجلات]
  • Yager J. Binge eating disorder: البحث عن علاجات أفضل. صباحا J Psychiatry. 2008، 165: 4-6. [مجلات]
  • يانوفسكي س. الشراهة في تناول الطعام والسمنة في 2003: يمكن علاج اضطراب الأكل يكون له تأثير إيجابي على وباء السمنة. Int J Eat Disord. 2003 ؛ 34 (Suppl: S117 – S120. [مجلات]
  • Walsh BT، Devlin MJ. اضطرابات الأكل: التقدم والمشاكل. علم. 1998، 280: 1387-1390. [مجلات]
  • Wang GJ، Geliebter A، Volkow ND، Telang FW، Logan J، Jayne MC، et al. تعزيز الافراج عن الدوبامين المخطط أثناء التحفيز الغذائي أثناء اضطراب الإفراط في تناول الطعام. بدانة. 2011، 19: 1601-1608. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  • Wardle J، Steptoe A، Oliver G، Lipsey Z. Stress، diet restraint and food intake. J Psychosom Res. 2000، 48: 195-202. [مجلات]
  • المياه A ، هيل A ، والر G. الداخلية والخارجية من الحلقات الأكل بنهم في مجموعة من النساء مع الشره المرضي العصبي. Int J Eat Disord. 2001، 29: 17-22. [مجلات]
  • Wilfley DE، Crow SJ، Hudson JI، Mitchell JE، Berkowitz RI، Blakesley V، et al. مجموعة البحوث اضطراب الأكل سيبوترامين. فعالية سيبوترامين لعلاج اضطراب الأكل بنهم: دراسة مزدوجة التعمية بالغفل متعددة المراكز العشوائية التي تسيطر عليها. صباحا J Psychiatry. 2008، 165: 51-58. [مجلات]
  • Willie JT، Chemelli RM، Sinton CM، Yanagisawa M. To eat or to sleep؟ Orexin في تنظيم التغذية والاستيقاظ. انو ريف نيوروسكي. 2001، 24: 429-458. [مجلات]
  • Wolff GE، Crosby RD، Roberts JA، Wittrock DA. الاختلافات في الإجهاد اليومي ، والمزاج ، والتأقلم ، وسلوك الأكل في الشراهة عند تناول الطعام وعدم تناول الطعام في الكلية الجامعية. المدمن Behav. 2000، 25: 205-216. [مجلات]
  • Zheng H، Patterson LM، Berthoud HR. مطلوب إشارات Orexin في منطقة tegmental بطني للشهية عالية الدهون الناجمة عن التحفيز الأفيونية من المتكئة نواة. ي Neurosci. 2007، 27: 11075-11082. [مجلات]