التباين في كثافة مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة له آثار تفاضلية على السلوكيات التابعة في أحادي الزوجة و متعدد الزوجات (2009)

ي Neurosci. مخطوطة المؤلف متاحة في PMC Oct 27 ، 2009.

نشر في الصيغة النهائية المعدلة على النحو التالي:

PMCID: PMC2768419

NIHMSID: NIHMS93410

النسخة النهائية المحررة للناشر من هذه المقالة متاحة مجانًا على J Neurosci

انظر المواد الأخرى في PMC ذلك استشهد المادة المنشورة.

انتقل إلى:

ملخص

تورطت مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة في تنظيم السلوك الوريدي وتشكيل الرابطة الزوجية في فيراري البراري أحادي الزواج. ترتبط كثافة مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة إيجابيا مع الوبيبات في فتحات البراري للأحداث والبالغين ، ومضاد مستقبلات الأوكسيتوسين المتغلغل في النواة يكتل هذا السلوك. علاوة على ذلك ، تتميز شحوب البراري بكثافة أعلى لمستقبلات الأوكسيتوسين في المستكمل مقارنة بأنواع القوارض غير الأحادية ، كما أن منع مستقبلات الأوكسيتوسين المتوازية يمنع تكوين تفضيل الشريك الناجم عن التزاوج. استخدمنا هنا نقل الجينات الفيروسية المرتبطة بالدينو لفحص العلاقة الوظيفية بين كثافة مستقبلات الأوكسيتوسين المتوازية والسلوك الاجتماعي في فئران المرج والمروج. أظهرت فتحات البراري الأنثوية البالغة التي تزيد من مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة عرضًا لتفضيل الشريك المتسارع بعد التعايش مع ذكر ، ولكن لم يعرض السلوك الوراثي المعزز. ومع ذلك ، لم يتم تسهيل تفضيل الشريك في فتحات المروج أحادية الزوجة عن طريق إدخال مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة. تؤكد هذه البيانات دور مستقبلات الأوكسيتوسين في المتكئين في تنظيم تفضيلات الشريك في فئران البراري الأنثوية ، وتشير إلى أن تعبير مستقبلات الأوكسيتوسين في المتكملات ليس كافيًا لتعزيز تفضيلات الشريك في الأنواع غير الأحادية. هذه البيانات هي الأولى لإثبات وجود علاقة مباشرة بين كثافة مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة والاختلاف في سلوكيات الارتباط الاجتماعي. وهكذا ، فإن الاختلاف الفردي في التعبير عن مستقبلات الأوكسيتوسين في المخطط قد يساهم في التنوع الطبيعي في السلوكيات الاجتماعية.

: الكلمات المفتاحية الأم ، والفيروس ، والأفضلية ، نيوببتيد ، والإدراك ، والأشعة السينية

مقدمة

تُظهر القوارض الصغيرة تنوعًا ملحوظًا في السلوكيات الاجتماعية ، بدءًا من الارتباطات الشديدة الانحدار والأزواج اجتماعيًا ، إلى استراتيجيات التزاوج غير الاجتماعي نسبيًا (Gruderadams و Getz ، 1985). اجتماعي أحادي الزوجة البراري (ميكروتوس ochrogaster) تشكل مرفقات اجتماعية دائمة ، أو روابط زوجية ، لشريك معادٍ للجنس بعد المعاشرة والتزاوج ، بينما فتحات مرج غير أحادية الزواج (Microtus pennsylvanicus) عادة لا. تُظهر فتحات البراري الأنثوية الساذجة جنسيًا تنوعًا كبيرًا في سلوكها التنبوي التلقائي ، أو السلوك الوهمي ، مع ما يقرب من نصفهن يظهرن سلوكًا يشبه الأمهات تجاه الجراء بينما يتجاهل الباقون أو يهاجمون الجراء (لونشتاين ودي فريس ، 1999; بالز وكارتر ، 2003; أولازابال ويونغ ، إكسنومكس). وهكذا ، توفر الشروع فرصة ممتازة لدراسة الآليات البيولوجية العصبية الكامنة وراء الارتباط الاجتماعي والرعاية الوبائية ، وكذلك الآليات التي تؤدي إلى التنوع في هذه السلوكيات عبر الأنواع وبين الأفراد.

وقد تورط الأوكسيتوسين nonapeptide (OT) في تنظيم كل من تكوين تفضيل الشريك والسلوك الوهمي في فئران البراري. التسريب لمضاد مستقبلات الأوكسيتوسين (OTR) في النواة المتكئة (NAcc) ، ولكن ليس في كتل بوتامين السد المجاورة المجاورة لتكوين تفضيل الشريك الناجم عن التزاوج ، وكيل مختبري لتشكيل رابطة الزوج (يونغ وآخرون ، 2001). دفعات مماثلة من خصم OTR في NAcc أيضا منع السلوك الوهمي في الإناث البكر (Olazabal و Young ، 2006b). وبالتالي تفعيل OTRs في NAcc يسهل كل من تكوين تفضيل الشريك والسلوك الوهمي في فئران البراري الأنثوية.

تم افتراض التباين في كثافة OTR في NAcc للمساهمة في اختلافات الأنواع في التنظيم الاجتماعي والسلوك الوريدي. تحتوي فئران البراري على كثافة عالية من OTR في NAcc ، في حين أن فئران المروج أحادية الزوجة والفئران والجرذان لا (Insel و Shapiro ، 1992; أولازابال ويونغ ، إكسنومكسا). تعرض فئران المرج أيضًا مستويات أعلى من السلوك الوهمي مقارنةً بفئران المرج أو الفئران أو الفئران (أولازابال ويونغ ، إكسنومكسا). وبالتوازي مع هذه العلاقة بين الأنواع بين كثافة OTR في NAcc والسلوك الأبوي ، ترتبط كثافة OTR في NAcc بشكل إيجابي مع السلوك الوريدي في كل من فئران البراري للأحداث والبالغين (Olazabal و Young ، 2006b, a). في هذه الدراسة ، استخدمنا نقل الجينات الناقلة للعدوى الفيروسية (AAV) المرتبطة مباشرة لاختبار الفرضية القائلة بأن الاختلاف في كثافة NAcc OTR يمكن أن يسهم في الاختلاف في الارتباط الاجتماعي والسلوك الوريدي. تم ترسيب فئران البراري الأنثوية البالغة في NAcc مع AAV الذي يشفر جين OTR البراري ، مما أدى إلى ارتفاع كبير في ربط OTR. ثم تم اختبار الحيوانات لسلوك alloparental وتشكيل تفضيل الشريك. ثم قمنا باختبار الفرضية القائلة بأن تعبير OTR في NAcc كان كافياً لتسهيل تكوين تفضيل الشريك عن طريق غرس فوهات مرج الإناث بنفس المتجه. لقد توقعنا أنه مقارنةً بالضوابط ، فإن فئران البراري المفرطة في التعبير عن OTR ستظهر زيادة في السلوك الوراثي وتشكيل تفضيل الشريك المتسارع. علاوةً على ذلك ، توقعنا أن تقوم إناث المروج التي تعبر عن OTR في NAcc بتطوير تفضيلات الشريك تجاه الشركاء الذكور.

المواد والطرق

أشكال حيوانات

تم وضع فئران المرج والمروج في مجموعات الجنس نفسها مع فئران / قفص 2-3 من وقت الفطام في أيام 21-23. يتكون السكن من قفص زجاجي شبكي ذو تهوية 36 × 18 × 19cm مليء بفراش الحيوان المختبر Bed-ocobbs تحت 14: 10 ساعة / ضوء دورة مظلمة في 22 ° C مع إمكانية الوصول إلى الطعام (الأرنب LabDiet و Richmond و IN) و libitum . تم الحصول على فئران البراري من مستعمرة التربية المختبرية التي اشتُقت في الأصل من فئران استولت عليها الحقول في إلينوي. تم اشتقاق فوهات المرج من مخزون تم الحصول عليه من مستعمرة تكاثر في جامعة ولاية فلوريدا. وكانت الموضوعات 2-5 الشهر الشهر سليمة voles الإناث ساذجة جنسيا. وكانت الحيوانات المحفز جنسيا voles الذكور البالغين. خدم كل ذكر "شريك" و "غريب" خلال اختبار تفضيل شريك (انظر أدناه). تم تعيين الفضلات لمجموعات العلاج المختلفة للسيطرة على التباين داخل الفضلات وداخل الأقفاص. تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل لجنة رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام جامعة إيموري.

ناقلات الفيروسة المرتبطة بالغدة

تم إنشاء تسلسل ترميز OTR من خلال لصق أول إكسون لاستنساخ الجينوم OTR ذي البراري الذي يشفر أول نطاقات عبر الغشاء الخمسة (رقم انضمام Genbank) AF079980) ونهاية 3 من OTR تضخيمها من البراري فأر الرحم الرحم [كدنا]. تمت إعادة صياغة تسلسل الترميز باستخدام PCR للتخلص من UTRs وتوفير مواقع جديدة لتقييد الجناح لتسهيل الاستنساخ في البلازميد المتجه AAV. تم بعد ذلك استنساخ الجين المعدل في بلازميد ناقل AAV2 بين مروج 0.6 kb cytomegalovirus (CMV) وجزء الحمض النووي SV40 يحتوي على إشارة intron SV40 الصغيرة وإشارة polyA. تم تجميع AAV2-OTR في AAV9 بواسطة ترنسفكأيشن ثلاثي البلازميد في خلايا AAV-293 (ستراتاجين ، لا جولا ، كاليفورنيا) باستخدام طريقة قياسية لترسيب فوسفات الكالسيوم. لم يعمل فيروس مساعد. تم تغليف بلازميد AAV2-eGFP بشكل متوازٍ في AAV9 كمتجه تحكم سالب. باختصار ، كل بلازميد متجه AAV ، بلازميد rep / cap AAV2 / 9 يوفر وظائف النسخ المتماثل AAV2 و AAV9 capsid ، و 3rd ترميز البلازميد وظائف مساعد Adenovirus ، pHelper (ستراتاجين) ، وشارك في نقلها إلى خلايا 293 في نسبة المولي من 1: 1: 1. تم حصاد الخلايا 48 ساعة بعد ترنسفكأيشن. ثم أعيد تعليق كريات الخلية في DMEM ، وجزيئات الفيروس داخل الخلايا التي أطلقتها ثلاث جولات متتالية من ذوبان الجليد بالتجميد ، وأعقبها الطرد المركزي عند 13,000 rpm لمدة 10 min على جهاز طرد مركزي على سطح الطاولة لإزالة الجسيمات. تم تخزين مخزون ناقلات في −80 C ، وعيار من PCR في الوقت الحقيقي باستخدام نظام الكشف تسلسل ABI Prism 7700 من Perkin-Elmer Applied Biosystems (فوستر سيتي ، كاليفورنيا). كانت التتر حسب ترتيب 1012 DRP / مل. (DRP = جزيئات مقاومة دنيز).

تسريب المتجهات الفيروسية

تم إجراء الحقن التجسيمي بالتخدير تحت التخدير الأيزوفلورين في التجسيم التجريبي Kopf المجهز بتقنية Ultra Micro Pump II (أدوات الدقة العالمية ، Sarasota ، FL) وحقنة هاميلتون قياس 26. تم حقن الإناث ثنائياً في غلاف NAcc (فئران المرج: AP + 1.7mm ، ML .9mm ، DV −4.5mm ، فوهات المرج: AP + 1.6mm ، ML .9mm ، DV −4.3mm) مع 750nl مستقبلات الأوكسيتوسين (CMV-OTR ، N = 12) ، أو متجه eGFP معبر عن ناقل (CMV-GFP ، N = 16). تم غرس الفيروس بمعدل 93.8nl / دقيقة. تم ترك المحقنة في مكانها لمدة 5 min بعد التسريب لتقليل انتشار المتجه إلى أعلى مسار الإبرة. تم تخدير الحيوانات التي تديرها الشام (N = 9) وتم شق فروة رأسها وخيطها. بعد الجراحة ، تم إيواء الحيوانات في مجموعة حتى وقت اختبار سلوك تفضيل الشريك. أشارت الدراسات الأولية إلى أن تعبير OTR في موقع الحقن كان مستقراً بعد أيام 10.

اختبار السلوك الوريدي

بعد شهر واحد من الحقن ، تم اختبار فئران البراري للسلوك الخيفي. تم الاختبار بين الساعة 0800 والساعة 1800. تم وضع حيوانات الاختبار في قفص نظيف كبير (45.5 × 24 × 20 سم) وسمح لها بالتأقلم لمدة 15 دقيقة. تم وضع اثنين من الجراء (بعمر 2-5 أيام) على أحد طرفي القفص. تم تسجيل وقت الاستجابة للاقتراب من الجراء ، وعدد الحيوانات التي هاجمت الجراء ، ومقدار الوقت الذي يقضيه في الاستمالة ، والتحليق ، واستعادة الجراء. تم تخصيص زمن انتقال قدره 900 ثانية للحيوانات التي لم تقترب من الجراء خلال الاختبار لمدة 15 دقيقة لغرض التحليل الإحصائي. تم إيقاف الاختبار على الفور إذا هاجمت الأنثى الجراء. تم تصنيف الحيوانات على أنها أبوية إذا أمضوا أكثر من 30 ثانية في لعق الجراء دون مهاجمة. بناءً على نتائج التجربة مع فئران البراري ، لم يتم اختبار فئران المرج للسلوك الخيفي.

اختبار تفضيلات الشركاء (Prairie Vole)

بعد شهر واحد من اختبار السلوك الوهمي ، وبعد شهرين من ضخ AAV ، تم إعطاء الإناث 4 μg من استراديول بنزوات (EB ؛ فيشر ، بيتسبيرغ ، بنسيلفانيا) الذائب في 0.1ml من زيت السمسم IP يوميًا لمدة 3 قبل التزاوج لتحفيز التقبل الجنسي . تم وضع 16 ساعة بعد آخر حقن للحيوان EB في قفص نظيف (28 × 17 × 12cm) مع ذكر بالغ من ذوي الخبرة الجنسية لساعات 6 ثم عاد إلى سكن جماعي. تم تسجيل سلوك التزاوج خلال فترة السكن الأولي 6. تم تسجيل زمن الوصول إلى الإدخال الأول وعدد نوبات التزاوج في الساعة الأولى. تم تعيين زمن وصول 3600 ثانية إلى الحيوانات التي لم تتزاوج خلال فترة ساعة 1 بغرض التحليل الإحصائي. في صباح اليوم التالي (14 ساعة بعد المعاشرة) ، تم اختبار الحيوانات لتفضيل شريك. في اختبار تفضيل الشريك ، توضع الأنثى التجريبية في غرفة مركزية محايدة بجهاز مكون من ثلاث غرف ، حيث يتم ربط الذكر الشريك في غرفة واحدة ويربط ذكر "غريب" جديد في الآخر (Williams et al.، 1992). يتمتع الحيوان التجريبي بحرية الحركة في جميع أنحاء الغرف ويتم تسجيل الوقت الذي يقضيه على مقربة من كل ذكر باستخدام نظام كسر شعاع الآلي (كورتيس وانغ ، 2005b, a; ليم وآخرون، 2007).

بعد يوم ، تمت إعادة إقران الإناث مع نفس الشريك لمدة ساعات إضافية من التعايش مع 12. ثم تم اختبار الإناث مرة أخرى لتفضيل الشريك (إجمالي وقت الاتصال بساعة 18). تم استخدام هذا النموذج من مرحلتين لزيادة اكتشافنا لتيسير اختبار تفضيل الشريك إلى الحد الأقصى ، نظرًا لوجود تباين في وقت العتبة اللازم لتكوين تفضيل الشريك. كانت الحيوانات تعتبر شريكًا مفضلاً إذا قضى ضعف الوقت على مقربة من الشريك مقارنة بالغريب.

اختبار تفضيلات الشركاء (مرج مرج)

عادة لن تشكل فوهات المرج من مستعمرتنا رابطة زوجية بعد 24hrs من التعرض للزميل. لذلك ، بالنسبة إلى هذه التجربة ، تم إجراء اختبارات تفضيلات الشركاء بعد تعايش 24 و 48 ساعة إضافية (إجمالي 72 ساعة). جميع طرق العلاج والاختبار الأخرى هي نفسها على النحو الوارد أعلاه.

جمع الأنسجة ومعالجتها

بعد التجارب السلوكية تم قطع رأس الحيوانات بعد التخدير العميق مع الايزوفلووران. ثم تم جمع العقول وتجميدها على الثلج الجاف المسحوق. تم تقسيم العقول من خلال NAcc في سلسلة 6 في 20μm ، على ناظم البرد ، على شرائح Fisher Frost-plus. تم تخزين الشرائح في N80C حتى تستخدم في التصوير الإشعاعي.

أوت أوتراديوجرافي

تم استخدام تصوير مستقبلات OTR لتقييم الربط OTR في الحيوانات المحقونة AAV. تم إجراء تصوير الإشعاع التلقائي كما هو موضح سابقًا مع تعديلات طفيفة (Insel et al.، 1991; وانغ ويونغ ، 1997). تمت إزالة المقاطع من التخزين -80C ، المسموح به في الهواء ، والمغمورة في بارافورمالدهيد 0.1٪ في محلول ملحي بالفوسفات (pH 7.4) ، وشطفها مرتين في المخزن المؤقت 50 mM Tris (pH 7.4). التالي تم تحضين النسيج في 50 pM 125I-OVTA (NEX 254050UC PerkinElmer، Waltham، MA) لمدة ساعة واحدة. تمت إزالة radioligand غير المنضم بواسطة أربعة أجهزة غسل في 50mM Tris plus 2٪ MgCl2 (الرقم الهيدروجيني 7.4) ثم انخفض إلى درهم20 والهواء المجفف تحت تيار من الهواء البارد. بمجرد جفافها ، تعرضت الشرائح لفيلم BioMax MR (كوداك ، روتشستر ، نيويورك) لمدة 72 ساعة. تم استبعاد اثنين من CMV-OTR والحيوانات CMV-GFP واحد من التحليل السلوكي بسبب يخطئ الحقن.

GFP المناعية

تم إبطال مجموعة فرعية من الحيوانات (N = 5) التي تم حقنها بـ CMV-GFP ، بشكل عابر مع 50 ml من PBS ، تليها 50 ml من 4٪ بارافورمالديهايد في 0.1 M الفوسفات المحتوي على 2.5٪ acrolein (Polysciences ، Warrington ، PA). مباشرة بعد التروية ، تمت إزالة العقول وتخزينها في 4 ° C في محلول سكروز 30٪ حتى التقسيم. تم قطع العقول إلى أقسام 25μm الاكليلية مع مشراح تجميد وتخزينها مجانا العائمة في حل cryoprotectant في −20 ° C حتى المعالجة الكيميائية المناعية.

تمت معالجة سلسلة 1: 6 من خلال محور rostrocaudal لكل مخ من أجل GFP. باختصار ، تمت إزالة المقاطع من محلول البروتيكتور ، وتم شطفها على نطاق واسع في محلول ملحي بفوسفات البوتاسيوم (pH 7.4) ، ثم تفاعلت لمدة 15 في دقائق بوروميدريد الصوديوم 1٪ لإزالة الألدهيدات الزائدة. تم تحضين المقاطع في محلول جسم مضاد أولي موجه ضد GFP في محلول ملحي بفوسفات البوتاسيوم (KPBS) يحتوي على 0.1٪ Triton-X لمدة 1 في درجة حرارة الغرفة متبوعة بساعات 48 عند 4 ° C. تم تحديد الخلايا التي تحتوي على GFP باستخدام جسم مضاد للأرنب متعدد النسيلة (Cat. رقم A6455 ، Invitrogen ، كارلسباد ، كاليفورنيا) بتركيز 1: 100,000. بعد حضانة الجسم المضاد الأولية ، تم شطف النسيج في KPBS ، واحتضانه لمدة ساعة في 1 في IgG لمكافحة الماعز المضاد للأرانب (Jackson Immunoresearch ، West Grove ، PA) بتركيز 1: 600 ، ثم شطفه في KPBS ساعة حضانة في مجمع أفيدين - البيوتين بيروكسيديز (ABC Elite Kit PK-1 Vector ، Burlingame ، CA) بتركيز 6100: 1. بعد الشطف في KPBS وتريس العازلة (الرقم الهيدروجيني 200) ، تم تصور GFP كمنتج رد فعل بني باستخدام 7.2′- ديامينوبنزيدين يحتوي على 3,3 ٪ بيروكسيد الهيدروجين في المخزن المؤقت تريس. تم إنهاء منتج التفاعل بعد حوالي 0.08 دقيقة عن طريق الشطف في المخزن المؤقت Tris. تم تركيب المقاطع خارج المياه المالحة على شرائح الجيلاتين السفلية ، مجففة بالهواء ، مجففة في سلسلة من المشروبات الكحولية المتدرجة ، وتم تطهيرها في هيستوكلير (National Diagnostics ، أتلانتا ، جورجيا) ، ومغطاة باستخدام Krystalon (EMD Chemicals، Gibbstown، NJ).

التحليل الإحصائي

يتم تقديم البيانات على أنها تعني ± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM). تم تشغيل RM ANOVA ثنائي الاتجاه باستخدام الوقت الذي يقضيه مع كل حيوان محفز كمتغير تابع ، والعامل الداخلي هو شريك أو غريب ، ومجموعة العلاج كعامل بين الموضوع. تم استخدام اختبار Holm-Sidak لإجراء مقارنات زوجية لاحقة عندما تم اكتشاف تأثير تفاعل كبير. طريقة واحدة تم تشغيل ANOVA على سلوكيات alloparental والتزاوج لفئران البراري. تم تحليل تلك السلوكيات التي لا تستوفي معايير الحياة الطبيعية باستخدام تحليل Kruskal-Wallis One Way للتباين في الرتب. تم استخدام اختبار فيشر الدقيق لتحديد الفروق الجماعية في نسبة الحيوانات التي تظهر سلوكًا خيفيًا. تم تحليل سلوك تزاوج فئران المروج باستخدام اختبار t واختبار مجموع تصنيف مان ويتني عندما فشل اختبار الحالة الطبيعية.

النتائج

السلوك الوهمي في براغيات البراري

لم تختلف نسبة فئران البراري الأنثوية المحقونة بـ CMV-OTR والتي تظهر سلوكًا خيفيًا (3/9) عن المجموعة الضابطة (4/15) أو الفأر الزائفة (3/10) (p> 0.5 ؛ الشكل شنومكسا). هاجم الجراء اثنين من CMV-OTR ، وأربعة تحكم CMV-GFP ، واثنين من الإناث الشام ، والتي صنفت على أنها غير alloparental. الكمون لمقاربة الجراء (الشكل شنومكسب) والوقت الذي يقضيه اللعق / الاستمالة لم يختلف أيضًا بشكل كبير بين المجموعات (H = 0.31 ، P> 0.8 لوقت الاستجابة ، H = 0.40 ، P> 0.8 للاستمالة). عندما تمت مقارنة الحيوانات التي وصلت إلى معايير كونها أبوية فقط ، لم يكن زمن الوصول إلى الجراء للإناث CMV-OTR (140.2 ± 65.2 ثانية) مختلفًا عن CMV-GFP (62.5 ± 39.3 ثانية) أو الوهم (169.4 ± 51.7 ثانية ) الإناث (F (2,7،1.27) = 0.3 ، p> 2,7). لم يكن هناك أيضًا اختلاف في مقدار الوقت الذي تقضيه إناث CMV-OTR الخيفي في لعق الجراء مقارنةً بالإناث الوبائية CMV-GFP أو الإناث الشام (F (1.94،0.2) = XNUMX، p> XNUMX ؛ الشكل شنومك). لم يكن إجمالي الوقت الذي قضته كل مجموعة في لعق / الاستمالة والتحليق وحمل الجراء مختلفًا أيضًا بين CMV-OTR (695.2 ± 77.1 ثانية) CMV-GFP (387.5 ± 132.7 ثانية) أو الوهمية (503.8 ± 82.8 ثانية) ) الحيوانات (F (2,7،1.98) = 0.2، p> XNUMX).

الشكل 1  

السلوك الوريدي في فئران البراري CMV-GFP و CMV-OTR. لم يكن هناك أي تأثير للعلاج على نسبة الإناث في كل مجموعة العلاج التي عرضت السلوك alloparental. القضبان المظلمة تمثل النسبة المئوية للحيوانات التي ...

تزاوج السلوك في مرج فرس

لم يتأثر سلوك التزاوج بشكل كبير بالعلاج الجراحي السابق للإناث. لم يكن زمن الوصول إلى الإدخال الأول مختلفًا بشكل كبير في الذكور المقترنين بإناث CMV-OTR مقارنة بالذكور المتزاوجين بـ CMV-GFP أو الإناث الشام (H = 5.043 ، p = .08 ؛ الشكل شنومكسا). على الرغم من أن مجموعة CMV-OTR كانت تميل إلى التزاوج في وقت أقرب من المجموعات الأخرى ، إلا أنها لم تتزاوج كثيرًا. لم يختلف عدد نوبات التزاوج في الساعة الأولى في الأزواج التي تحتوي على إناث CMV-OTR من أزواج تحتوي على CMV-GFP أو إناث زائفة (F (2,31،0.46) = 0.6 ، p> XNUMX ؛ الشكل شنومكسب).

الشكل 2  

التزاوج والسلوك المفضل للشريك في فئران البراري الأنثوية CMV-GFP و CMV-OTR. لم يكن الكمون للتدخل الأول (A) وعدد نوبات التزاوج (B) لا تختلف اختلافًا كبيرًا بين المجموعتين. C) بعد فترة المعاشرة ساعة 6 ، ...

سلوك تفضيل الشريك في براير فولس

بعد فترة التعايش مع 6 hr ، لم تعرض أي من المجموعات تفضيل شريك مهم (الشكل شنومك). لم يكن هناك تأثير رئيسي للعلاج (F (2,31،0.56) = 0.5، p> 1,31) أو الوقت الذي يقضيه مع الشريك مقابل الغريب (F (0.46،0.5) = 12، p> 2,29). بعد 78 ساعة إضافية من التعايش ، لم يكن هناك تأثير رئيسي للعلاج (F (0.5،1,29) = .3.71 ، p = 0.06) أو مقدار الوقت الذي يقضيه مع الشريك مقابل شخص غريب (F (2,29،5.56) = 0.009 ، ص = 0.001). ومع ذلك ، كان هناك تأثير تفاعل كبير (F (XNUMX،XNUMX) = XNUMX ، ع = XNUMX). كشف اختبار ما بعد المخصص أن الإناث CMV-OTR يقضين وقتًا أطول بكثير على مقربة من الشريك مقارنة بالشريك الغريب (p <XNUMX ؛ الشكل 2D). ومع ذلك ، فشلت CMV-GFP والإناث الزائفة في إظهار تفضيل الشريك بعد هذه الفترة الزمنية (p> 0.05 ؛ الشكل 2D). بالإضافة إلى ذلك ، وصلت 80٪ من فوهات الحقن المحقونة CMV-OTR إلى معايير الحصول على تفضيل شريك ، أي قضاء ضعف الوقت مع الشريك مقارنة مع الشخص الغريب ، مقارنة بـ 31٪ فقط من حقن CMV-GFP و 44٪ من الحيوانات الخبيثة (الشكل 2E ، F).

OTR و GFP Expression في NAcc of Prairie Voles

تم إجراء تصوير الإشعاع التلقائي لتحديد موضع حقن AAV وللتحقق من أن ناقل CMV-OTR أدى إلى زيادة ارتباط OTR مقارنة بعناصر التحكم. كما ذكرت سابقا ، كان هناك تباين فردي كبير في الربط OTR في NAcc من السيطرة CMV-GFP voles البراري (الشكل 3A ، ب). تم الكشف عن ارتفاعات مميزة في ربط OTR في NAcc لـ Vv براعم البراري بحقن CMV-OTR (الشكل شنومك). بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء GFP المناعي GFP على أقسام الدماغ من الحيوانات CMV-GFP لتحديد مدى التعبير في الخلايا العصبية من NAcc. تم الكشف عن علامات واضحة للخلايا ذات الخصائص العصبية ، مما يؤكد أن ناقلات CMV AAV دفعت التعبير في الخلايا العصبية (الشكل 3E ، F).

الشكل 3  

تحليل OTR والتعبير GFP في CMV-OTR و CMV-GFP vol مرج الأنثى. تم تحديد كثافة OTR باستخدام تصوير مستقبلات المستقبل. A ، B) كان هناك تباين كبير في كثافة ملزمة OTR في NAcc للإناث CMV-GFP. هذا في المقابل ...

التزاوج في سلوك مرج فوط

لم تلاحظ فروق ذات دلالة إحصائية في سلوك التزاوج بين مجموعات العلاج في فئران المرج. لم يكن زمن الوصول إلى الإدخال الأول مختلفًا في الذكور المقترنين بإناث CMV-OTR (1245.1 ± 1465.9 ثانية) مقارنة بالذكور المتزاوجين للتحكم في CMV-GFP (566.6 ± 989.8 ثانية) للإناث (T = 128.0 ، p> 0.2). لم يختلف عدد نوبات التزاوج في الساعة الأولى أيضًا في أزواج تحتوي على CMV-OTR (6.8 ± 5.1) إناث من أزواج تحتوي على CMV-GFP (9.5 ± 4.4) إناث (t = 1.42 ، p> 0.1).

تفضيل الشريك في مرج Voles

بعد فترة التعايش مع 24hr ، لم تعرض أي من المجموعات تفضيل شريك مهم (الشكل شنومكسا). لم يكن هناك تأثير رئيسي للعلاج (F (1,20،0.19) = 0.6، p> 1,20) أو الوقت الذي يقضيه مع الشريك مقابل شخص غريب (F (0.09،0.7) = 48، p> 1,19). بعد 65 ساعة إضافية من التعايش ، لم يكن هناك مرة أخرى أي تأثير رئيسي مهم للعلاج (F (0.4،1,19) =. 0.62، p> 4) أو الوقت الذي يقضيه مع أي من الإناث (F (XNUMX،XNUMX) = XNUMX، p> .XNUMX ؛ الشكل شنومكسب).

الشكل 4  

سلوك تفضيل الشريك لفئران المرج الأنثوية بعد فترة سكن مشتركة لـ 24 (A) وبعد فترة إقامة مشتركة تبلغ 72 ساعة (B). لم تظهر إناث CMV-OTR و CMV-GFP المحقونة تفضيل شريك. قضوا كميات متساوية من الوقت مع الشريك ...

التعبير OTR في NAcc من مرج Voles

CMV-GFP voles مرج حقنة كان قليل أو معدوم OTR ملزمة في NAcc (Figure5A). على النقيض من ذلك ، كان لفوم المروج المحقونة CMV-OTR ارتباطًا مهمًا بترميز OTR في NAcc ، مشابهًا لنسج البراري (الشكل شنومكسب).

الشكل 5  

تصوير الإشعاع الذاتي للمستقبل يوضح كثافة ربط OTR في فتحات مرج CMV-OTR (A) و CMV-GFP (B). لاحظ أن فتحات مرج الإناث CMV-GFP كانت قليلة أو معدومة OTR ملزمة في NAcc. ومع ذلك ، كانت OTR ملزمة في NAcc مرتفعة بشكل كبير ...

مناقشة

ارتبطت اختلافات الأنواع في كثافة OTR في NAcc باختلافات الأنواع في استراتيجية التزاوج (الزواج الأحادي الاجتماعي مقابل تعدد الزوجات) والسلوك الوراثي ، مما يشير إلى أن الاختلاف في تعبير مستقبلات OTR قد يكمن وراء اختلافات الأنواع في التنظيم والسلوك الاجتماعي (Insel et al.، 1991; يونغ وانغ ، 2004; Olazabal و Young ، 2006b). تتميز فئران البراري أحادية الزوجة بكثافة أعلى من OTR في NAcc مقارنةً بالمروج غير المنفردة وفئران المونتان ، كما يمنع الحصار الدوائي لتلك المستقبلات تكوين تفضيلات الشريك الناجم عن التزاوج (يونغ وآخرون ، 2001; Olazabal و Young ، 2006b). هناك أيضًا تباين فردي كبير في كثافة OTR في NAcc داخل فئران البراري (الشكل 3A ، ب). ترتبط كثافة OTR في هذه المنطقة بشكل إيجابي مع التباين الفردي في السلوك الوريدي لفئران البراري الإناث الساذجة جنسياً (يونغ ، 1999. Olazabal 2006) وإدارة المضاد OTR في NAcc يلغي هذا السلوك (أولازابال ويونغ ، إكسنومكسا). لذلك ، في هذه الدراسة سعينا لاختبار مباشرة العلاقة بين كثافة المستقبلات في NAcc والسلوكيات التابعة لها في voles ، باستخدام نقل الجينات AAV.

تظهر نتائجنا أنه ، كما كان متوقعًا ، فئران البراري الأنثوية ذات المستويات المرتفعة من OTR في NAcc تعرض تشكيل تفضيل الشريك المعجل مقارنة بالإناث ذات كثافة OTR المنخفضة (CMV-GFP أو shams). Cعلى عكس تنبؤنا ، لم يكن هناك اختلاف في السلوك الوريدي بين المجموعات ، مما يشير إلى آليات تفاضلية ينظم بها OTR accumbal تشكيل تفضيل الشريك والسلوك الوريدي. تدعم نتائجنا الفرضية القائلة بأن الاختلافات الفردية في تعبير OTR تساهم في تباين الأنواع في بعض جوانب السلوك التابع. ومع ذلك ، فإن زيادة تعبير OTR في NAcc لم يكن كافيًا للحث على تكوين تفضيل الشريك في فوهات المرج ، حتى بعد ساعات 72 من المعاشرة ، مما يشير إلى أن الاختلافات بين الأنواع في OTR accumbal وحدها لا تكفي لشرح الاختلافات بين الأنواع في القدرة على تكوين شريك التفضيلات. من المهم ملاحظة أنه لا توجد فروق جماعية في سلوك التزاوج في أي من المعلمات التي تم فحصها. لذلك ، لا يمكن أن يعزى تفضيل الشريك المحسن في فئران البراري التجريبية إلى زيادة النشاط الجنسي خلال فترة المعاشرة الأولية.

تظهر فئران البراري الأنثوية الكبار تباين فردي ملحوظ في عرضهم للرعاية الوبائية. حوالي 50٪ من الإناث ساذجة جنسياً ستسترجع بشكل عفوي ، ولعق / العريس ، وتحوم فوق الجراء المقدمة لهم (لونشتاين ودي فريس ، 1999; بالز وكارتر ، 2003; أولازابال ويونغ ، إكسنومكس). هناك أيضًا تباين فردي كبير في كثافة OTR في NAcc بين فئران البراري (يونغ ، 1999). الإناث مع كثافة أعلى من OTR في NAcc هم أكثر عرضة لإظهار استجابة alloparental من الحيوانات مع OTR أقل في هذا المجال. وبالتالي كان من المستغرب أن رفع كثافة OTR في NAcc من فئران البراري لم يعزز السلوك الوهمي. تشير حقيقة أن هذه الحيوانات أظهرت تكوين تفضيل الشريك المتسارع أن OTR المستمدة من ناقل الجينات الفيروسية كان مقترنًا وظيفيًا للإشارة إلى مسارات الانتقال في NAcc.

نحن نفترض أن الاختلاف الفردي في تنشيط OTR في NAcc أثناء التطوير قد يلعب دورًا أكثر أهمية في إنتاج تباين بين الأنواع في السلوك الوراثي. تم إظهار الارتباط الإيجابي في كثافة OTR في NAcc والسلوك الوريدي في فئران البراري للأحداث وكذلك البالغين (Olazabal و Young ، 2006b, a). يبدو أن السلوك الوريدي في فئران البراري حساس بشكل خاص للاضطرابات أثناء التطور. على سبيل المثال ، يؤدي التعرض لفترة ما حول الولادة إلى OT إلى تغيير السلوك الوريدي في فئران البراري الأنثوية (باليس وآخرون ، 2007). لذلك ، قد يعاني الأفراد الذين يعانون من كثرة أعلى من OTR أثناء التطوير من زيادة إشارات OTR في NAcc ، مما يؤدي إلى تغييرات كيميائية عصبية طويلة الأمد تزيد من احتمال عرض السلوك الوراثي عندما يصبحون بالغين. إذا كانت هذه الفرضية صحيحة ، فإننا نتوقع أن زيادة التعبير OTR في NAcc حديثي الولادة من شأنه أن يزيد من وتيرة السلوك الوهمي.

التفسير الآخر لفشل تعزيز تعبير OTR في NAcc لزيادة السلوك الوهمي هو أن الاختلاف في تعبير OTR في مناطق متعددة في المخ قد يكون ضروريًا لإنتاج التنوع المتوقع في السلوك. على سبيل المثال ، يرتبط تعبير OTR في الحاجز الجانبي بشكل سلبي بالسلوك الوراثي (أولازابال ويونغ ، إكسنومكسا). أخيرًا ، من الممكن أيضًا أن يؤثر التباين في التعرض للهرمونات أو التجربة الاجتماعية على كثافة OTR في NAcc بالإضافة إلى تغيير السلوك الوراثي. على سبيل المثال ، يمكن لوجود أو غياب الأب أثناء النمو أو التلاعب بالهرمونات الستيرويدية في الفترة المحيطة بالولادة أن يؤثر على عرض الاستجابة الوراثية في فئران البراري الأنثوية (روبرتس وآخرون ، 1996; روبرتس وآخرون ، 1998; لونشتاين ودي فريس ، 2000).

في فئران البراري الذكرية ، يلعب الفازوبريسين دورًا حاسمًا في عرض سلوك الأبوة وكذلك تكوين تفضيل الشريك ، موازٍ لدور الأوكسيتوسين في الإناث (وينسلو وآخرون ، 1993; وانغ وآخرون ، 1994). تثبت الدراسات الدوائية الخاصة بالموقع أن V1aR في الشريان البطني ، وهو ناتج رئيسي من NAcc ، يعد أمرًا ضروريًا في تكوين رابطة الزوج (ليم ويونغ ، 2004). زيادة V1aR في الشريان البطني باستخدام نقل الجينات بوساطة ناقلات الفيروسية يسرع تكوين تفضيل شريك من فئران البراري الذكور (Pitkow وآخرون ، 2001) ، وهي النتيجة التي توازي الدراسة الحالية. على الرغم من أن الإفراط في التعبير عن V1aR في الشريان البطني لأفراس المرج المرجانية لم يكن كافيًا للحث على سلوك الأب ، إلا أنه شجع تفضيل الشريك (ليم وآخرون، 2004)؛ في المقابل ، في الدراسة الحالية ، فإن الإفراط في التعبير عن OTR في NaCC لم يحفز تكوين تفضيل الشريك في فئران مرج الإناث.

هناك العديد من التفسيرات المحتملة لفشل فوهات مرج الإناث مع ارتفاع OTR في NAcc لتشكيل تفضيلات الشريك. أولاً ، قد تختلف الاختلافات بين الأنواع في إطلاق OT داخل NAcc أثناء التزاوج بين فئران البراري الأنثوية وفئران المرج. على الرغم من أن توطين OTR يختلف بين الأنواع ، فإن كل من فئران البراري وفئران المرج لهما ألياف مناعية OT في NAcc (Ross and Young ، بيانات غير منشورة). في الجسم الحي لقد أظهرت تجارب التحليل الجزئي أن التزاوج يحفز إطلاق OT في NAcc لفئران البراري الأنثوية ، ولكن لم يتم إجراء دراسات موازية في فئران المرج (CD Cole and Young ، بيانات غير منشورة). من الممكن أن تسريب OT في الحيوانات المعالجة CMV-OTR من شأنه أن يسهل تكوين تفضيل الشريك في فوهات المرج. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن التحفيز المهبلي في الفئران والأغنام يزيد من إطلاق OT المركزي (كندريك وآخرون ، 1986; Sansone et al.، 2002). لذلك من المحتمل أن تكون فتحات المروج تعاني بالفعل من زيادة في التزاوج العفوي بالتزاوج. وهناك تفسير آخر لفشل تعبير NAcc OTR في تحفيز تكوين تفضيل الشريك في فئران مرج الإناث هو أن فروق الأنواع في تعبير OTR في مناطق المخ الأخرى ضرورية أيضًا لترابط الزوج. على سبيل المثال ، تكون كثافة OTR أعلى أيضًا في قشرة الفص الجبهي واللوزة الجانبية في فئران البراري مقارنة بالأنواع الموجودة في فصيلة البروتينات غير الموسمية (Insel et al.، 1991; يونغ وآخرون ، 1996; Smeltzer وآخرون ، 2006). لذلك ، قد يكون رفع تعبير OTR في مواقع متعددة ضروريًا لتحفيز تفضيلات الشريك الناجم عن التزاوج في فتحات المرج. أخيرًا ، من المحتمل أن تكون الاختلافات الكيميائية العصبية المتعددة بين الأنواع مسؤولة عن اختلافات الأنواع في السلوك (مثل عامل إطلاق الدوبامين ، الكورتيوتروبين) (غينغريتش وآخرون ، 2000; ليو وانغ ، 2003; Smeltzer وآخرون ، 2006; ليم وآخرون، 2007).

هناك العديد من المحاذير المهمة في مقاربتنا التجريبية التي تستدعي المناقشة. أولاً ، من المحتمل أن يزيد CMV-OTR من تعبير OTR في جميع أنواع الخلايا في المنطقة المحقونة ، بما في ذلك المجموعات العصبية التي لا تستجيب عادة إلى OT. ومع ذلك ، فمن الممكن أن يكون OTR المحوَّر جينيا قد أدى إلى زيادة الإشارة في الخلايا العصبية التي تعبر عادة عن OTR الداخلي بسبب التحسّن المحسّن لـ OT المنطلق على تلك الخلايا العصبية ، أو وجود جزيئات الإشارات المناسبة المصب. ثانياً ، لم يتم التعبير بشكل موحد عن منطقة تعبير الجينات المحورة بواسطة تسريب ناقلات الفيروس عبر كامل نطاق المنصة الذيلية أو الوسطية الجانبية لـ NAcc. في إناث CMV-OTR ، كان التعبير OTR مرتفعًا بشكل ثابت في الصدفة والمناطق الأساسية المجاورة لـ NAcc. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن shell of NAcc قد تورطت أكثر في تنظيم تكوين تفضيل الشريك وكثافة OTR في هذه المنطقة نفسها مرتبطة بشكل كبير بالسلوك الوراثي عن المنطقة الأساسية.

هذه هي الدراسة الأولى التي توضح بشكل قاطع أن الاختلاف في تعبير OTR في الدماغ يمكن أن يسهم في تباين السلوك الاجتماعي. تورط OT على نطاق واسع في تنظيم العديد من السلوكيات ، بما في ذلك معالجة المعلومات الاجتماعية والذاكرة ، واختيار رفيقة ، ورعاية الأمهات والتعلق (Dantzer et al.، 1987; كيندريك ، 2000; فيرغسون وآخرون ، 2001; كافالييرز وآخرون ، 2003). يوجد الآن دليل واضح على أن OT يعدل الإدراك الاجتماعي للإنسان أيضًا ، بما في ذلك الثقة الشخصية ، ونظر العين ، وذاكرة الوجه ، وتصور العاطفة (Kosfeld et al.، 2005; Domes et al.، 2007; Guastella وآخرون ، 2008; سافاسكان وآخرون ، 2008). تزيد إدارة OT من الإبقاء على الإدراك الاجتماعي في مهمة التجويد الصوتي في الأشخاص المصابين بالتوحد (هولاندر وآخرون ، 2007) ، وقد أبلغت العديد من الدراسات الجينية عن وجود ارتباطات متواضعة بين الأشكال غير المشفرة لجين OTR واضطراب طيف التوحد (وو آخرون ، 2005; يعقوب وآخرون ، 2007; Lerer et al.، 2007; Yrigollen et al.، 2008). توجد معلومات محدودة حول توزيع OTR ، ولا يوجد شيء معروف فيما يتعلق بالاختلاف الفردي في كثافة OTR في الدماغ البشري. نتائجنا تشير إلى أن الاختلاف في كثافة OTR في مناطق معينة من الدماغ قد تسهم في الاختلافات الفردية في الوظيفة الإدراكية الاجتماعية في البشر.

شكر وتقدير

يريد المؤلفون أن يشكروا لورا ماثيوز على وظيفتها الممتازة في إدارة مستعمرة الفول لدينا. وأيد هذه الدراسة من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح MH064692 ل LJY ، RR00165 لمركز بحوث ييركس الرئيسيات الوطنية ، و NSF STC IBN-9876754.

المراجع

  1. Bales KL، Carter CS. الاختلافات الجنسية والآثار التنموية للأوكسيتوسين على العدوان والسلوك الاجتماعي في فئران البراري (ميكروتوس ochrogaster) هورم بيهاف. 2003، 44: 178-184. [مجلات]
  2. Bales KL، van Westerhuyzen JA، Lewis-Reese AD، Grotte ND، Lanter JA، Carter CS. الأوكسيتوسين له آثار تنموية تعتمد على الجرعة على الترابط بين الزوجين والرعاية الوراثية في فئران البراري الأنثوية. هرم بيهاف. 2007، 52: 274-279. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  3. كورتيس JT ، وانغ Z. تورنتال منطقة tegmental المنطقة في الزوج الترابط في فئران المرج الذكور. Physiol Behav. 2005a، 86: 338-346. [مجلات]
  4. Curtis JT ، وانغ زد. مشاركة مستقبلات الجلوكورتيكويد في الترابط الزوجي في فئران البراري الأنثوية: آثار الحصار الحاد والتفاعلات مع أنظمة مكافأة الدوبامين المركزية. علم الأعصاب. 2005b، 134: 369-376. [مجلات]
  5. Dantzer R، Bluthe RM، Koob GF، Le Moal M. تعديل الذاكرة الاجتماعية لدى الفئران الذكور عن طريق الببتيدات العصبية الفسيولوجية. علم الأدوية النفسية (بيرل) 1987 ؛ 91: 363 – 368. [مجلات]
  6. Domes G، Heinrichs M، Michel A، Berger C، Herpertz SC. الأوكسيتوسين يحسن "قراءة العقل" في البشر. بيول الطب النفسي. 2007، 61: 731-733. [مجلات]
  7. Ferguson JN، Aldag JM، Insel TR، Young LJ. الأوكسيتوسين في اللوزة الإنسي أمر ضروري للاعتراف الاجتماعي في الماوس. J Neurosci. 2001، 21: 8278-8285. [مجلات]
  8. Gingrich B، Liu Y، Cascio C، Wang Z، Insel TR. تعتبر مستقبلات الدوبامين D2 في النواة المتكئة مهمة للتعلق الاجتماعي في فئران البراري الأنثوية (ميكروتوس ochrogasterBehav Neurosci. 2000، 114: 173-183. [مجلات]
  9. Gruderadams S، Getz LL. مقارنة بين نظام التزاوج والسلوك الأبوي في ميكروتوس ochrogaster و Microtus pennsylvanicus. مجلة الثدييات. 1985، 66: 165-167.
  10. Guastella AJ، Mitchell PB، Dadds MR. الأوكسيتوسين يزيد من النظر إلى منطقة العين من الوجوه البشرية. بيول الطب النفسي. 2008، 63: 3-5. [مجلات]
  11. Hollander E، Bartz J، Chaplin W، Phillips A، Sumner J، Soorya L، Anagnostou E، Wasserman S. Oxytocin يزيد من الحفاظ على الإدراك الاجتماعي في مرض التوحد. بيول الطب النفسي. 2007، 61: 498-503. [مجلات]
  12. Insel TR، Shapiro LE. يعكس توزيع مستقبلات الأوكسيتوسين التنظيم الاجتماعي في فئران الزواج الأحادي ومتعدد الزوجات. Proc Natl Acad Sci US A. 1992؛ 89: 5981 – 5985. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  13. Insel TR، Gelhard R، Shapiro LE. التوزيع المقارن لمستقبلات الدماغ الأمامي لببتيدات الفصيلة العصبية في الفئران أحادية الزواج ومتعددة الزوجات. علم الأعصاب. 1991، 43: 623-630. [مجلات]
  14. Jacob S، Brune CW، Carter CS، Leventhal BL، Lord C، Cook EH.، Jr Association of the genytocin مستقبلات الجينات (OXTR) في الأطفال القوقازيين والمراهقين المصابين بالتوحد. نيوروسيت ليت. 2007، 417: 6-9. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  15. Kavaliers M، Colwell DD، Choleris E، Agmo A، Muglia LJ، Ogawa S، Pfaff DW. تمييز ضعيف ونفور من روائح الذكور المتطفلة من قِبل الفئران القاضية للأوكسيتوسين. الجينات الدماغ Behav. 2003، 2: 220-230. [مجلات]
  16. كيندريك KM. الأوكسيتوسين ، الأمومة والارتباط. Exp Physiol. 2000 ؛ 85 (Spec No): 111S – 124S. [مجلات]
  17. Kendrick KM، Keverne EB، Baldwin BA، Sharman DF. مستويات السائل النخاعي من أستيل كولين إستراز ، أحادي الأمين وأوكسيتوسين أثناء المخاض والولادة وتحفيز عنق الرحم المهبلي وفصل الخروف والرضاعة في الأغنام. Neuroendocrinology. 1986، 44: 149-156. [مجلات]
  18. Kosfeld M، Heinrichs M، Zak PJ، Fischbacher U، Fehr E. Oxytocin يزيد من الثقة في البشر. طبيعة. 2005، 435: 673-676. [مجلات]
  19. Lerer E، Levi S، Salomon S، Darvasi A، Yirmiya N، Ebstein RP. العلاقة بين جين مستقبلات الأوكسيتوسين (OXTR) والتوحد: العلاقة بمقاييس السلوك التكيفي لـ Vineland والإدراك. مول الطب النفسي. 2007 [مجلات]
  20. ليم MM ، يونغ LJ. الدوائر العصبية المعتمدة على فاسوبريسين الكامنة وراء تشكيل رابطة الزوج في أحادي البراري أحادي الزوجة. علم الأعصاب. 2004، 125: 35-45. [مجلات]
  21. Lim MM، Wang Z، Olazabal DE، Ren X، Terwilliger EF، Young LJ. تفضيل الشريك المحسن في نوع مختلط عن طريق معالجة التعبير عن جين واحد. طبيعة. 2004، 429: 754-757. [مجلات]
  22. Lim MM، Liu Y، Ryabinin AE، Bai Y، Wang Z، Young LJ. مستقبلات CRF في النواة تتكتم بتحوير تفضيلات الشريك في فئران البراري. هرم بيهاف. 2007، 51: 508-515. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  23. ليو Y ، وانغ ZX. تتفاعل النواة المتكئة مع الأوكسيتوسين والدوبامين لتنظيم تكوين الرابطة الزوجية في أنثى البراري. علم الأعصاب. 2003، 121: 537-544. [مجلات]
  24. Lonstein JS ، De Vries GJ. الاختلافات بين الجنسين في السلوك الأبوي لفئران البراري البكر البالغة: الاستقلال عن هرمونات الغدد التناسلية والفاسوبريسين. ياء الغدد الصم العصبية. 1999، 11: 441-449. [مجلات]
  25. Lonstein JS ، De Vries GJ. تأثير هرمونات الغدد التناسلية على تطور سلوك الوالدين في فئران البراري البكر البالغة (ميكروتوس ochrogaster) Behav الدماغ الدقة. 2000، 114: 79-87. [مجلات]
  26. Olazabal DE، Young LJ. يرتبط التباين في سلوك الأم "العفوي" بسلوك يشبه القلق والانتماء في سُرَج البراري للأحداث والبالغين الساذجة (ميكروتوس ochrogasterديف سيكوبيول. 2005، 47: 166-178. [مجلات]
  27. Olazabal DE، Young LJ. وترتبط الأنواع والاختلافات الفردية في رعاية جنيني الأحداث الإناث مع كثافة مستقبلات الأوكسيتوسين في المخطط والحاجز الجانبي. هرم بيهاف. 2006a، 49: 681-687. [مجلات]
  28. Olazabal DE، Young LJ. مستقبلات الأوكسيتوسين في النواة المتكئة تسهل سلوك الأم "العفوي" في فئران البراري الأنثوية البالغة. علم الأعصاب. 2006b، 141: 559-568. [مجلات]
  29. Paxinos G، Watson C. الدماغ الفئران في إحداثيات التجسيمي. الطبعة الرابعة سان دييغو ، كاليفورنيا: 1998.
  30. Pitkow LJ، Sharer CA، Ren X، Insel TR، Terwilliger EF، Young LJ. تسهيل الانتساب وتكوين رابطة الزوج عن طريق نقل مستقبلات الأوعية vasopressin إلى الدماغ الأمامي البطني لفردة أحادية الزوجة. ي Neurosci. 2001، 21: 7392-7396. [مجلات]
  31. Roberts RL، Zullo A، Gustafson EA، Carter CS. تغيّر علاجات الستيرويد في الفترة المحيطة بالولادة السلوك الوريدي والتبعي في فوهات البراري. هرم بيهاف. 1996، 30: 576-582. [مجلات]
  32. Roberts RL، Williams JR، Wang AK، Carter CS. التربية التعاونية و الزواج الأحادي في فئران البراري: التأثيرات في المولى والاختلاف الجغرافي. الرسوم المتحركة Behav. 1998، 55: 1131-1140. [مجلات]
  33. Sansone GR، Gerdes CA، Steinman JL، Winslow JT، Ottenweller JE، Komisaruk BR، Insel TR. يحفز التحفيز المهبلي الأوكسيتوسين داخل الحبل الشوكي لدى الفئران. Neuroendocrinology. 2002، 75: 306-315. [مجلات]
  34. يقوم كل من Savaskan E و Ehrhardt R و Schulz A و Walter M و Schachinger H. الأوكسيتوسين عن طريق الأنف بعد التعلم بتعديل الذاكرة البشرية لهوية الوجه. Psychoneuroendocrinology. 2008، 33: 368-374. [مجلات]
  35. Smeltzer MD، Curtis JT، Aragona BJ، Wang Z. Dopamine، oxytocin، and vasopressin receptor binding in the medial preternal cortex of monogamous and defiscuous voles. Neurosci Lett. 2006، 394: 146-151. [مجلات]
  36. وانغ Z ، يونغ LJ. انسداد الأوكسيتوسين ومستقبلات فاسوبريسين ملزمة في الحاجز الجانبي في فتحات البراري والمونتان. الدماغ الدقة ديف الدماغ الدقة. 1997، 104: 191-195. [مجلات]
  37. Wang Z، Ferris CF، De Vries GJ. دور تعصيب فاسوبريسين الحاجز في سلوك الأب في فئران البراري (ميكروتوس ochrogaster) Proc Natl Acad Sci US A. 1994؛ 91: 400-404. [بك المادة الحرة] [مجلات]
  38. Williams JR، Catania KC، Carter CS. تنمية تفضيلات الشريك في فئران البراري الأنثوية (ميكروتوس ochrogaster): دور التجربة الاجتماعية والجنسية. هرم بيهاف. 1992، 26: 339-349. [مجلات]
  39. Winslow JT، Hastings N، Carter CS، Harbaugh CR، Insel TR. وهناك دور ل vasopressin المركزية في الزوج الترابط في الأحاديات praarie الأحادي. طبيعة. 1993، 365: 545-548. [مجلات]
  40. Wu S، Jia M، Ruan Y، Liu J، Guo Y، Shuang M، Gong X، Zhang Y، Yang X، Zhang D. بيول الطب النفسي. 2005، 58: 74-77. [مجلات]
  41. يونغ LJ. جائزة Frank A. Beach. مستقبلات الأوكسيتوسين و vasopressin والسلوكيات الاجتماعية النموذجية. هورم بيهاف. 1999، 36: 212-221. [مجلات]
  42. يونغ LJ ، وانغ Z. علم الأعصاب من الترابط الزوج. نات نيوروسكي. 2004، 7: 1048-1054. [مجلات]
  43. Young LJ، Lim MM، Gingrich B، Insel TR. الآليات الخلوية للتعلق الاجتماعي. هرم بيهاف. 2001، 40: 133-138. [مجلات]
  44. Young LJ، Huot B، Nilsen R، Wang Z، Insel TR. الاختلافات في الأنواع في التعبير الجيني لمستقبلات الأوكسيتوسين المركزية: التحليل المقارن لتسلسل المروج. ي Neuroendocrinol. 1996، 8: 777-783. [مجلات]
  45. Yrigollen CM، Han SS، Kochetkova A، Babitz T، Chang JT، Volkmar FR، Leckman JF، Grigorenko EL. الجينات التي تتحكم في السلوك التابع كجينات مرشحة للتوحد. بيول الطب النفسي. 2008، 63: 911-916. [بك المادة الحرة] [مجلات]