DeltaFosB ў прылеглым ядры мае вырашальнае значэнне для ўзмацнення наступстваў сэксуальнага ўзнагароджання. (2010)

КАМЕНТАРЫІ: Delta FosB - гэта маркер усіх залежнасцей, як паводніцкіх, так і хімічных. Паколькі гэтая малекула павялічваецца ў ланцугу ўзнагароджання, павялічваецца і прывыканне. Гэта адна з малекул, якая ўдзельнічае ў нейрапластычных зменах. Гэты эксперымент паказвае, што ён павялічваецца з сэксуальным досведам, аналагічна таму, як гэта адбываецца пры наркаманіі. У эксперыменце яны выкарыстоўвалі генную інжынерыю, каб павысіць яе ўзровень за межамі "нармальнага". Гэта прывяло да ўзмацнення садзейнічання сэксуальнай актыўнасці. Мы лічым, што гэта адбываецца з порнанаркаманіяй.

поўнае даследаванне

Збаны К.К., Frohmader К.С., Vialou У, музон Е, Нестлер Е.Ю., Леман М.Н., Coolen Л.М ..

Гены мозгу Behav. 2010 кастрычнiка; 9 (7): 831-40 DOI: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 жніўня 16.

Кафедры анатоміі і клетачнай біялогіі, Schulich школы медыцыны і стаматалогіі, Універсітэт Заходняга Антарыё, Лондан, Антарыё, Канада.

РЭЗЮМЭ

Сэксуальнае паводзіны ў самцоў пацукоў карыснае і армавальны. Аднак мала вядома аб спецыфічных клеткавых і малекулярных механізмаў, опосредует сэксуальнае ўзнагароджанне або ўзмацняюць эфектаў узнагароды на наступнае выраз сэксуальнага паводзінаў. Дадзенае даследаванне правярае гіпотэзу аб тым, што ΔFosB, стабільна выяўляюцца скарочаная форма FosB, гуляе вырашальную ролю ва ўзмацненні сэксуальнага паводзінаў і вопыт індукаванага палягчэння сэксуальнай матывацыі і прадукцыйнасці.

Палавой вопыт быў паказаны, каб выклікаць назапашванне ΔFosB ў некалькіх лімфавай абласцях мозгу, у тым ліку прылеглым ядры (NAC), медыяльнай префронтальной кары, вентральной вобласці покрыўкі і хвастатых шкарлупіне, але не медыяльнай преоптической ядра.

Далей, індукцыя з-Fos, уніз па плыні (падушанай) мішэні ΔFosB, была вымераная ў сэксуальна вопытных і наіўных жывёл. Колькасць сопрягаемых індукаванага з-Фос-иммунореактивных клеткі было значна зніжана ў сэксуальна дасведчаныя жывёл у параўнанні з палавым наіўнага кантролю.

І, нарэшце, ΔFosB узроўняў і яго актыўнасць у NAc маніпулявалі з дапамогай вірусна-апасродкаванага пераносу гена для вывучэння яго патэнцыйная ролі ў опосредованность сэксуальнага вопыту і вопыт індукаванага палягчэння сэксуальнай прадукцыйнасці. Жывёлы з ΔFosB сверхэкспрессии адлюстровываюцца ўзмоцненае садзейнічаннем сэксуальнай дзейнасці з сэксуальным досведам ў сферы кантролю. У супрацьлегласць гэтаму, экспрэсія ΔJunD, дамінантны негатыўны злучае партнёр ΔFosB, саслабляецца сэксуальны вопыт індукаваных палёгку сэксуальнай прадукцыйнасці і нізкарослымі доўгатэрміновае захаванне спрашчэння у параўнанні з зялёнай флуарэсцэнцыі і бялку ΔFosB сверхэкспрессирующих груп.

Разам гэтыя дадзеныя пацвярджаюць важную ролю для выражэння ΔFosB ў НКСЕ для ўзмацняюць эфектаў сэксуальнага паводзінаў і сэксуальнага вопытам індукаванага палягчэння сэксуальнай дзейнасці.

УВОДЗІНЫ

Сэксуальныя паводзіны з'яўляецца вельмі карысным і армавальным для мужчын грызуноў (Coolen і інш. 2004; Пфаус і інш. 2001). Больш за тое, сэксуальны вопыт змяняе наступнае сэксуальнае паводзіны і ўзнагароджанне (Tenk і інш. 2009). Пры паўторным вопыце спарвання, сэксуальнае паводзіны спрыяе або «ўзмоцнены», пра што сведчыць знізіліся латэнтнасьць пачаць спарванне і садзейнічанне сэксуальнай дзейнасці (Бальфур і інш. 2004; Пфаус і інш. 2001). Тым не менш, якія ляжаць у аснове клеткавыя і малекулярныя механізмы палавога ўзнагароджання і ўзмацнення мала вывучаныя. Сэксуальныя паводзіны і ўмоўныя сігналы, якія прадказваюць спарванне былі паказаны, што Транзістарных індукуюць экспрэсію неадкладнага ранняга ген з-FOS ў сістэме мезолимбических самцоў пацукоў (Бальфур і інш. 2004; Пфаус і інш. 2001). Акрамя таго, нядаўна было паказана, што сэксуальны вопыт індукуе працяглую нейропластичность ў мезолимбическом сістэме пацукоў мужчынскага полу (Frohmader і інш. 2009; збаны і інш. 2010). Акрамя таго, у самцоў пацукоў, сэксуальны вопыт, як было паказана, каб выклікаць ΔFosB, a член сям'і Фос, у прылеглым ядры (NAC) (Уоллес і інш. 2008). ΔFosB, усечаны варыянт сплайсинга FosB, з'яўляецца унікальным членам сямейства Fos з-за яго большай стабільнасці (Carle і інш. 2007; Ulery Рейнолдс- і інш. 2008; Ulery і інш. 2006) І мае ролю ў падвышанай матывацыі і ўзнагароджанне за злоўжыванне наркотыкаў і доўгатэрміновая нейронавая пластычнасць пасрэдніцкай наркаманіі (Нестлер і інш. 2001). ΔFosB ўтварае комплекс фактару транскрыпцыі гетеромерной (актыватар бялок-1 (AP-1)) с Jun вавёркамі, пераважна Джундом (Chen і інш. 1995; Hiroi і інш. 1998). Праз индуцируемый залішняя экспрэсія ΔFosB, у першую чаргу абмяжоўваецца стриатуме з выкарыстаннем бі-трансгенных мышэй, прэпарат захапляюцца-падобны фенатып паводніцкая вырабляецца, нягледзячы на ​​адсутнасць папярэдняга ўздзеяння наркотыкаў (McClung і інш. 2004). Гэты паводніцкі фенатып ўключае ў сябе сенсібілізаванай адказ рухальнага да какаіну (КЭЛЗ і інш. 1999), Павелічэнне перавагі для какаіну (КЭЛЗ і інш. 1999) І марфін (Zachariou і інш. 2006), І павелічэнне какаіну самакіраванне (Колбі і інш. 2003).

Падобна ўзнагароджанне наркотыкаў, ΔFosB актывуюцца натуральнымі карыснымі паводзіны і опосредует экспрэсію гэтых паводзін. Залішняя экспрэсія ΔFosB ў НССЕ з выкарыстаннем мадэляў грызуна павялічвае добраахвотнае кола, якое ідзе (Werme і інш. 2002), інструментальнае адказваючы на ​​прадукты харчавання (Olausson і інш. 2006), спажыванне цукрозы (Уоллес і інш. 2008), і палягчае мужчына (Уоллес і інш. 2008) і жанчына (Брэдлі і інш. 2005) сэксуальныя паводзіны. Такім чынам, ΔFosB можа быць уцягнуты ў опосредованность наступстваў стыхійных карысных падзей. Tён Сапраўднае даследаванне пашырае папярэднія даследаванні, у прыватнасці, вывучэнне ролі ΔFosB ў НССЕ ў доўгатэрміновых выніках сэксуальнага вопыту на наступным шлюбныя паводзіны і нервовай актывацыі ў сістэме мезолимбической.

  • Па-першае, было ўстаноўлена, якія вобласці галаўнога мозгу, залучаныя ў схеме ўзнагароджання і сэксуальнага паводзінаў выказаць вопыт сэксу індукаваных ΔFosB.
  • Далей, эфект вопыт сэксу індукаваны ΔFosB на спалучаныя-індукаваны экспрэсіі з-Fos, уніз па плыні ад мішэні падушанай ΔFosB (Renthal і інш. 2008), Была даследавана.
  • І, нарэшце, эфект маніпулявання актыўнасці ΔFosB ў NAC (ген сверхэкспрессия і экспрэсіі дамінантнага негатыўнага-злучае партнёр) на сэксуальныя паводзіны і вопыт індукаванага палягчэння сэксуальнай матывацыі і прадукцыйнасці была вызначаны з выкарыстаннем віруснай вектара тэхналогіі дастаўка.
Перайсці да:

МЕТАДЫ

жывёлы

Дарослыя самцы Sprague Dawley пацукоў (200-225 г) былі атрыманы з Charles River Laboratories (Senneville, QC, Канада). Жывёл ўтрымлівалі ў клетках з плексігласа з тунэльным люлькай аднаполымі парамі на працягу эксперыментаў. Нумар калоніі тэмпературы рэгулюецца і падтрымліваецца на 12 / 12 ч светлага цёмнага цыклу з ежай і вадой даступнай ўволю за выключэннем тэставання паводзін. Стымул самкі (210-220 грам) для ношкі сеансаў падскурна ўводзілі імплантат, які змяшчае 5% эстрадиола бензаат і% халестэрыну 95 наступныя двухбаковай овариэктомии пад глыбокай анестэзіі (кетамін 0.35g / 0.052g Ксилазин). Палавая ўспрымальнасць індукаванага увядзеннем 500μg прогестерона ў 0.1 мл кунжутное масла прыкладна 4 гадзін перад выпрабаваннем. Усе працэдуры былі адобраны сыходам і выкарыстанне жывёл камітэтамі Універсітэта Заходняга Антарыё і адпавядаюць рэкамендацыям ССАС з удзелам пазваночных жывёл у навуковых даследаваннях.

сэксуальныя паводзіны

Спарванне сеансы адбыліся падчас ранняй цёмнай фазы (паміж 2-6 гадзінамі пасля пачатку перыяду цемры) пры слабым чырвоным асвятленні. Да пачатку эксперыменту жывёлы былі выпадковым чынам падзеленыя на групы. Падчас шлюбных сеансаў самцоў пацукі дазволілі паруецца да эякуляцыі або 1 гадзіне, а параметры сэксуальнага паводзін не былі запісаныя ў тым ліку: ўсталяваць затрымку (ML, час ад увядзення самкі да першай мантыроўкі), ўпуск латэнтнага (IL, час ад ўкаранення самка да першага мантажу з вагінальным пранікненнем), семявывяржэнне затрымка (ЭЛ; час ад першай интромиссии да эякуляцыі), пасля інтэрвалу эякуляцыі (АЯ, час ад эякуляцыі да першай наступнай интромиссии), колькасць апора (M; тазавых падштурхоўвання без вагінальнага пранікненне), колькасць intromissions (IM; змантаваць у тым ліку вагінальнага пранікнення) і эфектыўнасць копуляции (СЕ = IM / (М + IM)) (Agmo 1997). Лік мантуе і intromissions не былі ўключаныя ў аналіз для жывёл, якія не адлюстроўваюць эякуляцыю. Мацаванне і интромиссия латэнтнасьць ўяўляе сабой параметры, якія паказваюць на сэксуальную матывацыю, у той час эякуляцыі затрымкі, колькасць апор і эфектыўнасці сукуплення адлюстроўвае сэксуальную прадукцыйнасць (Халл 2002).

Эксперымент 1: Экспрэсія ΔFosB

Сэксуальна наіўныя самцоў пацукоў дазволілі спарвацца ў чыстых выпрабавальных клетак (60 × 45 × 50 см) для 5 запар, штодня спалучаныя сесій або заставаліся сэксуальна наіўным. Дадатковая табліца 1 акрэслівае паводніцкую парадыгму для эксперыментальных груп: ня наіўным ніякага сэксу (наплыў; п = 5), наіўным сэкс (NS; п = 5), не адчуваў ніякага сэксу (ENS, п = 5) і дасведчаны сэкс (ES; п = 4). NS і ES жывёлу рэзалі 1 гадзіну пасля эякуляцыі ў апошні дзень спарвання, каб даследаваць спалучаныя-індукаваныя экспрэсію з-Fos. NNS жывёлы забівалі адначасова з ENS жывёламі 24 гадзін пасля заключнай сесіі спарвання, каб вывучыць вопыт сэксу індукаваны ΔFosB. Сэксуальна дасведчаныя групы былі супастаўныя за сэксуальнае паводзіны перад наступным тэставаннем. Ніякіх істотных адрозненняў не было выяўлена паміж групамі для любых паводніцкіх мерапрыемстваў у рамках адпаведнай спарванне сесіі і сэкс вопытам індукаваны палягчэння сэксуальнага паводзінаў выяўляла як вопытных груп (Дадатковая табліца 2). Кантроль ўключае сэксуальна наіўныя мужчына апрацоўваных адначасова з спарваннем жывёл, забяспечваючы ўздзеянне жаночых пахаў і вакалізацыі без непасрэднага кантакту жаночага.

Для ахвяры, жывёлы былі глыбока анестэзуе з дапамогай пентобарбитала натрыю (270mg / кг; ф) і перфузии внутрисердечна з 50 мл 0.9% фізіялагічнага раствора, а затым 500 мл 4% параформальдегида ў 0.1 М фасфатнай буфера (PB). Мазгі былі выдалены, і фіксавалі на працягу 1 ч пры пакаёвай тэмпературы, у той жа фіксатара, затым апускалі ў 20% цукрозы і 0.01 азіду натрыю ў% 0.1 M PB і захоўвалі пры 4 ° С. Каранарныя зрэзы (35 мкм) былі выразаныя з маразільных микротомом (H400R, мікрон, Германія), сабраныя ў чатырох паралельных шэрагах у растворы криопротектора (30% цукрозы і 30% этиленгликоль ў 0.1 M PB) і захоўвалі пры -20 ° С. Свабодныя плаваюць зрэзы старанна прамываюць 0.1 М фасфатнай-солевага буфернага раствора (PBS, рн 7.3-7.4) паміж инкубирования. Зрэзы ўздзеяння 1% H2O2 для 10 мін пры пакаёвай тэмпературы, каб разбурыць эндагенныя пероксидазы, затым блакавалі ў PBS + растворы інкубацыі, які з'яўляецца PBS, які змяшчае 0.1% бычынага сыроватачна альбуміна (каталог элемент 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) і 0.4% Трытон Х -100 (каталог пункт BP151-500, Sigma-Aldrich) на працягу 1 ч. Затым зрэзы інкубаваць на працягу ночы пры 4 ° С у пан-FosB трусіныя поликлональные антыцелы (1: 5K; SC-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Антыцелы паноў-FosB было паднята супраць ўнутранай вобласці падзяляе FosB і ΔFosB. Клеткі ΔFosB-IR былі спецыяльна ΔFosB-станоўчым, таму што ў той час пост-стымул (24 гадзін) усяго выяўляецца стымул-індукаваны FosB пагаршаецца (Perrotti і інш. 2004; Perrotti і інш. 2008). Акрамя таго, у гэтым эксперыменце, жывёлы спарвання ў апошні дзень (NS, ES) былі забітыя 1 ч пасля спарвання, такім чынам, да выказвання FosB. Вестэрн-блот-аналіз пацвердзіў выяўленне ΔFosB прыблізна 37 кд. Пасля першаснай інкубацыі антыцелаў, зрэзы інкубаваць на працягу 1 ч у біятын-кан'югаванага казінага анты-трусінага IgG (1: 500 ў PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA), а затым 1 ч у авидин-біятын-hoseradish пероксидазы (АВС элітнага ; 1: 1K ў PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Пасля гэтай інкубацыі зрэзы апрацаванай ў адным з наступных спосабаў:

1. Адно этыкетаванне пероксидаза

Раздзелы Н і ENS жывёл былі выкарыстаныя для аналізу мозгу вопыту індукаванага назапашвання сэксуальнага ΔFosB. Пасля інкубацыі ABC, комплекс пероксидазы візуалізавалі пасля апрацоўкі на працягу 10 хвілін да раствора, які змяшчае хромогена 0.02% 3,3'-диаминобензидин тетрагидрохлорид (DAB, Sigma-Aldrich, St. Louis, МО) з павышаным 0.02% нікель сульфатам ў 0.1 М PB з перакіс вадароду (0.015%). Зрэзы старанна прамываюць у 0.1 M PB, каб скончыць рэакцыю, і ўсталяваны на закадаваныя SUPERFROST плюс шкле (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) з 0.3% жэлаціну ў DDH20. Пасля абязводжвання, усе слайды былі кавер-замазалі DPX (дибутилфталат ксілол).

2. Двайная иммунофлюоресценция

Урыўкі з усіх чатырох эксперыментальных груп, якія змяшчаюць NAC і MPFC былі выкарыстаныя для аналізу ΔFosB і з-Fos. Пасля інкубацыі ABC, зрэзы інкубаваць на працягу 10 хвілін з биотинилированным tyramide (BT; 1: 250 ў PBS + 0.003% H2O2 Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) і 30 мін з Alexa 488-кан'югаванага стрептавидин (1: 100; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA). Затым зрэзы інкубаваць на працягу ночы з трусіныя поликлональные антыцелы, спецыфічна распазнавальныя з-Fos (1: 150; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), а затым 30 мін інкубацыі з казіныя антыцеламі труса Cy3-кан'югаванага другаснага антыцелы (1: 200; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, Пэнсыльванія, ЗША). Пасля афарбоўвання зрэзы старанна прамываюць у 0.1 M PB, усталяваны на закадаваныя прадметныя шкла з 0.3% жэлаціну ў DDH20 і вечка-паслізнуліся з водным асяроддзем (мантажнай Gelvatol), якая ўтрымлівае анты-выцвітанні агента 1,4-диазабицикнули (2,2) октан (DABCO; 50 мг / мл, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Иммуногистохимические кантроль ўключалі пропуск аднаго або абодва першасных антыцелаў, што прыводзіць да адсутнасці маркіроўкі на адпаведнай даўжыні хвалі.

Аналіз дадзеных

Brain аналіз ΔFosB

Два эксперыментатары сьляпых на лячэнне праводзілі мозг шырокага сканаванне Кадаваць слайдаў. ΔFosB-иммунореактивный (-ИК) клетка па ўсім мозгу былі падлогу-колькасна аналізавалі з выкарыстаннем шкалы, каб прадставіць лік ΔFosB-пазітыўныя клеткі, як апісана ў Табліца 1, Акрамя таго, на аснове полуколичественных вынікаў, колькасць ΔFosB ВК-клеткі падлічвалі з выкарыстаннем стандартных абласцей аналізу ў абласцях мозгу, якія ўдзельнічаюць у узнагародзе і сексуальных паводзінах з дапамогай камеры Lucida малюнак трубкі, прымацаванай да мікраскопу Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Германія): NAC (ядро (З) і абалонак (S); 400 × 600μm) аналізавалі ў тры Ростральных-каудальный узроўнях (Бальфур і інш. 2004); вентральная вобласць покрыўкі (ВТ; 1000 × 800μm) аналізавала ў тры Ростральных-каудальный узроўнях (Бальфур і інш. 2004) І ВТА хвост (Perrotti і інш. 2005); префронтальной кара (пярэдняя вобласць cinglulate (АС); прелимбальная кара галаўнога мозг (ЛП); infralimbic кортекс (Ілы); 600 × 800μm кожны); хвастатая шкарлупіна (СР; 800 × 800μm); і медыяльны преоптическое ядро ​​(MPN; 400 × 600 мкм) (Дадатковыя лічбы 1-3). Дзве секцыі былі падлічаны на подобластей, і ў сярэднім на адну жывёлу для разліку сярэдняй групы. Сэксуальна параўноўваў наіўныя і вопытных групы сярэдніх ΔFosB ВК-клеткі для кожнага субрэгіёну з выкарыстаннем няпарных т-тэстаў.

Табліца 1    

Рэзюмэ выразы ΔFosB ў сэксуальна наіўных і вопытных жывёл
Аналіз ΔFosB і з-Фос

Выявы былі атрыманы з дапамогай охлаждаемого ПЗС-камеры (Microfire, Optronics), прымацаваны да мікраскопу Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Германія) і праграмнае забеспячэнне (Neurolucida MicroBrightfield Inc) з наладамі фіксаванай камеры для ўсіх суб'ектаў (з выкарыстаннем мэтаў 10x). Колькасць клетак, экспрессирующих з-Фос-IR або ΔFosB-IR ў стандартных абласцях аналізу ў NAc ядра і абалонкі (400 × 600μm кожнага; Дадатковае Малюнак 1) І АС з MPFC (600 × 800μm; Дадатковае Малюнак 3) Былі ўручную падлічваюць назіральнікам сляпым да эксперыментальным групам, у раздзелах 2 на адно жывёла з выкарыстаннем праграмнага забеспячэння Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) і ў сярэднім на адну жывёлу. Група сярэднія з-Fos або клетак ΔFosB параўноўваліся з выкарыстаннем двухбаковай ANOVA (фактары: сэксуальны вопыт і сэкс дзейнасць) і LSD Фішэра для постфактум параўнанняў на ўзроўні значнасці 0.05.

Эксперымент 2: ΔFosB маніпуляцыя выраз

Вірусны вектар-апасродкаваны перанос генаў

У сэксе наіўным самцоў пацукоў лініі Sprague Dawley былі выпадковым чынам падзеленыя на групы перад стереотаксис. Усе жывёлы атрымлівалі двухбаковыя микроинъекции рэкамбінантныя адено-асацыяванага Вірусны (Рааў) вектараў, кадавальныя GFP (кантроль; п = 12), дзікага тыпу ΔFosB (п = 11) або дамінантна-негатыўны злучае партнёр ΔFosB называецца ΔJunD (п = 9) у NAC. ΔJunD памяншае ΔFosB апасродкаванай транскрыпцыі шляхам канкурэнтнага heterodimerizing з ΔFosB перад тым звязвання АР-1 вобласць ўнутры промоторов генаў (Winstanley і інш. 2007). Тытр Вірус быў вызначаны КПЦР і ацэненыя у натуральных умовах да пачатку даследавання пачатку. Тытр быў 1-2 × 1011 інфекцыйныя часціцы на мл. вектары Рааў ўводзілі ў аб'ёме 1.5 мкл / бакавой сценкі над 7 хвілін (каардынаты: АР + 1.5, ML +/- 1.2 ад брегмы; Д.У. -7.6 ад паверхні чэрапа ў адпаведнасці з Paxinos і Watson, 1998) з дапамогай шпрыца Гамільтана (5μL ; Harvard Apparatus, Холлистон, MA, USA). Вектары вырабляюць адсутнасць таксічнасці больш, чым толькі кантрольныя інфузорыя (Уинстэнли і інш, 2007; Падрабязную інфармацыю аб падрыхтоўцы AAV см Хоммел і інш., 2003). Паводніцкія эксперыменты пачалі 3 тыдні пасля ін'екцыі вектара дазваляюць для аптымальнай і стабільнай віруснай інфекцыі (Уоллес і інш. 2008). экспрэсія трансгена ў мышыных піках відаў у 10 дзён і застаецца падвышанай на працягу па меншай меры 6 месяцаў (Winstanley і інш. 2007). У канцы эксперыменту жывёлы былі транскардиальная перфузия і секцыя NAC былі імунаферментнымі апрацаваны для GFP (1: 20K; трусінае анты-GFP антыцела; Molecular Probes) з выкарыстаннем рэакцыі ABC-пероксидаза DAB (як апісана вышэй), каб гісталагічныя праверыць ін'екцыі сайтаў з выкарыстаннем GFP ў якасці маркераў (Дадатковае Малюнак 4). ΔFosB і ΔJunD вектары таксама ўтрымліваюць сегмент, экспрессирующий GFP, падзеленую ўнутранага ўчастак рибосомального ўваходу, што дазваляюць для праверкі месца ін'екцыі з дапамогай візуалізацыі GFP ва ўсіх жывёл. Толькі жывёлы з месцам ін'екцый і распаўсюджваннем віруса абмяжоўваецца НКС былі ўключаныя ў статыстычным аналізе. Распаўсюджванне віруса звычайна абмяжоўваецца часткай НССА і не распаўсюдзілася ростральной-каудальный па ўсім ядру. Акрамя таго, распаўсюджванне віруса з'явілася ў асноўным абмежаваным альбо абалонка або ядро. Аднак, змена месца ін'екцый і распаўсюджвання ўнутры НКС не ўплываюць ўплыву на паводзіны. Нарэшце, GFP ін'екцыя не ўплывае на сэксуальнае паводзіны або вопыт індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў, у параўнанні з не-хірургіяй жывёл з папярэдніх даследаванняў (Бальфур і інш. 2004).

сэксуальныя паводзіны

Праз тры тыдні пасля віруснага вектару дастаўкі, жывёл у пару з адной эякуляцыі (або 1 гадзіны) для 4 паслядоўныя, штодзённыя спалучаныя сеансы, каб атрымаць сэксуальны досвед (досвед сеансаў), а затым былі пратэставаныя на доўгатэрміновае выраз вопыту, індукаванага спрашчэнне сэксуальнага паводзінаў 1 і 2 тыдняў (тэставыя сеансы 1 і 2) пасля заключнага пасяджэння вопыту. Палавыя параметры паводзін былі запісаныя ва ўсіх сопрягаемых сесіях, як апісана вышэй. Статыстычныя розніцы для ўсіх параметраў падчас кожных спалучаных сесій былі супастаўленыя ўнутры і паміж групамі з выкарыстаннем двухбаковы паўторных вымярэнняў ANOVA, (фактары: лячэнне і спарванне сесія), альбо ў адзін боку ANOVAs (семявывяржэнне затрымкі, колькасць апор і intromissions; фактар: лячэнне або спарванне сесія), а затым Fisher LSD ці Ньюмэн-Кеулс тэстаў для постфактум параўнанняў на ўзроўні значнасці 0.05. У прыватнасці, былі супастаўленыя стымуляваннем эфектаў сэксуальнага вопыту па параметрах спалучаных паміж вопытам сеансам 1 (наіўным) і вопытам сесіямі 2, 3 або 4 кожны, а таксама паміж эксперыментальнымі групамі ў межах кожнай вопыт сесіі. Больш за тое, каб прааналізаваць эфекты лячэння (вектар) па доўгатэрміновым аблягчэнні сэксуальных паводзінаў, параметры сопрягаемых былі супастаўленыя паміж вопытам сеансам 4 і тэставай сэсіяй 1 і 2 ў межах кожнай групы апрацоўкі і параўноўвалі паміж эксперыментальнымі групамі ў межах кожнай тэставай сесіі.

Перайсці да:

ВЫНІКІ

Палавой вопыт выклікае назапашванне ΔFosB

Першапачаткова было праведзена полуколичественное даследаванне назапашвання ΔFosB па ўсім мозгу ў сэксуальна дасведчаныя мужчын у параўнанні з сэксуальна наіўных кантролю. Кароткі выклад агульных высноў прыводзяцца ў Табліца 1, ΔFosB-ВК аналіз быў прасунулі шляхам вызначэння колькасці ΔFosB ВК-клеткі ў некалькіх лімфавай-асацыіраваных абласцях галаўнога мозгу з выкарыстаннем стандартных абласцей аналізу. Малюнак 1 дэманструе прадстаўнічыя малюнка DAB-Ni афарбоўвання NAC сэксуальна наіўных і вопытных жывёл. Значнае ΔFosB якая падвышае рэгуляцыя была знойдзена ў MPFC субрэгіёне (малюнак 2A), NAc ядро ​​і абалонкі (2B), хвастатая шкарлупіна (2B) і ВТ (2C). У NAc, значныя адрозненні існавалі на ўсіх узроўнях rostral- каудальный ў ядры НСС і абалонкі, а таксама дадзеныя прыведзеныя ў Малюнак 2 гэта сярэдняе па ўсіх узроўнях РоСтра-хваставых. У супрацьлегласць гэтаму, не было ніякага істотнага павелічэння ΔFosB-IR ў гипоталамической медыяльнай преоптической ядра (NNS Сярэдні 1.8 +/- 0.26; Энс Сярэдні 6.0 +/- 1.86).

Малюнак 1    

 

Тыповыя выявы, якія паказваюць ΔFosB-ВК-клеткі (чорныя) у NAc наіўнага ніякага сэксу (А) і не адчуваюць сэкс (B) групы. ACO: пярэдняя спайка шкала паласа паказвае 100 мкм.
Малюнак 2     

Колькасць ΔFosB ВК-клетак у: A. infralimbic (IL), прелимбальной (PL) і пярэдняй часткі пасавай звіліны кары галаўнога мозгу (ACA) подобластей медыяльнай префронтальной кары; Б. прылеглага ядро ​​ядра і абалонкі, і хвастатае ядро ​​(CP); С. ростральной, сярэдні, хваставой і хвост ...

Палавой вопыт згасае спалучаныя індукаваны з-Fos

Эфект сэксуальнага вопыту на ўзроўні ΔFosB ў NAc былі пацверджаны з выкарыстаннем метадаў флуарэсцэнцыі афарбоўвання. Акрамя таго, былі прааналізаваны эфекты сэксуальнага вопыту на экспрэсію з-Fos. Малюнак 3 дэманструе тыповыя ладу ΔFosB- (зялёны) і з-Fos (чырвоны) -ИК клеткі ва ўсіх эксперыментальных групах (А, Н; У, NS; З, Энс, D, ES). Палавой вопыт значна павышаную экспрэсію ΔFosB ў ядры NAC (малюнак 4A: F1,15 = 12.0; р = 0.003) і абалонкі (малюнак 4C: F1,15 = 9.3; р = 0.008). Наадварот, спарванне 1 гадзіну да перфузии, не ўплывае на экспрэсію ΔFosB (Малюнак 4A, З) І ніякага ўзаемадзеяння паміж сэксуальным вопытам і спарваннем непасрэдна перад перфузией выяўлена не было. Быў агульны эфект спарвання перад перфузией на экспрэсію з-Fos як у ядры NAC (малюнак 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) і абалонка (малюнак 4D: F1,15 = 39.4; р <0.001). Акрамя таго, агульны эфект сэксуальнага досведу быў выяўлены ў ядры NAc (малюнак 4B: F1,15 = 6.1; р = 0.026) і абалонкі (малюнак 4D: F1,15 = 1.7; р = 0.211) і ўзаемадзеянне паміж сэксуальным вопытам і спарваннем перад перфузией быў знойдзены ў ядры NAC (Р1,15 = 6.5; р = 0.022), з тэндэнцыяй у абалонцы (Р1,15 = 1.7; р = 0.211; F1,15 = 3.4; р = 0.084). Паведамленне спецыяльных аналізаў паказалі, спалучаныя-індукаваныя экспрэсію з-Fos ў ядры і абалонцы сэксуальна наіўных мужчын (Малюнак 4B, D). Тым не менш, у сэксуальна вопытных мужчын, з-Fos не была значна павялічана ў ядры NAC (малюнак 4B) І значна саслабляецца ў абалонцы (малюнак 4D). Такім чынам, сэксуальны вопыт выклікаў зніжэнне спалучаныя-індукаваны экспрэсіі з-Fos. P-значэння для канкрэтных парамі параўнанняў у малюнках.

Малюнак 3     

Тыповыя выявы, якія паказваюць ΔFosB (зялёны) і з-Fos (чырвоны) у NAc для кожнай эксперыментальнай групы. Маштаб паласа паказвае 100 мкм.
Малюнак 4     

Пол вопыт індукаваных ΔFosB і спалучаныя індукаваны з-Fos. Колькасці ΔFosB (Core, A, Shell, C; Аса, Е) або з-Fos (ядро, B, Shell, D; Аса, F), иммунореактивных клетак для кожнай групы: NNS (п = 5), NS (N = 5), Энс (п = 5) або ES (п = 4). дадзеныя выяўленыя ...

Эфект сэксуальнага вопыту на спалучаных індукаваных узроўнях, з-Fos не абмяжоўваецца NAC. Аналагічнае паслабленне экспрэсіі з-Fos назіралася ў ОУДЕ у сэксуальна дасведчаныя жывёл у параўнанні з палавым наіўнага кантролю. Палавой вопыт аказаў значны ўплыў на экспрэсію ΔFosB ў ACA (малюнак 4E: F1,15 = 154.2; р <0.001). Спарванне да перфузіі не ўплывала на экспрэсію ΔFosB (малюнак 4C), Але значна павялічылася з-Фос (малюнак 4F: F1,15 = 203.4; р <0.001) у ACA. Больш за тое, выкліканая спарваннем экспрэсія c-Fos ў АСА была значна зніжана сэксуальным вопытам (малюнак 4F: F1,15 = 15.8; р = 0.001). Двухбаковае ўзаемадзеянне паміж сэксуальным вопытам і спарваннем перад перфузией было выяўлена для экспрэсіі з-Fos (малюнак 4F: F1,15 = 15.1; р <0.001). Значэнні P для канкрэтных парных параўнанняў прыведзены ў легендах на малюнку. Нарэшце, не адбылося значнага зніжэння экспрэсіі c-Fos, выкліканай спарваннем, у медыяльным прэаптычнага ядры (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), вобласці, дзе вопыт спарвання не выклікаў значнага павелічэнне экспрэсіі ΔFosB, што паказвае на тое, што выкліканая спарваннем экспрэсія c-Fos не была закранута ва ўсіх абласцях мозгу.

ΔFosB ў НСС опосредует ўзмацненне палавога паводзінаў

Для таго, каб даследаваць патэнцыйны малекулярны механізм для ўзмацнення сэксуальных паводзінаў, як сведчыць вопыт індукаваных палягчэння сэксуальнага паводзінаў, былі вызначаны эфекты лакальнага маніпулявання узроўняў ΔFosB і яго транскрыпцыйных актыўнасці. Палавой вопыт на працягу чатырох сесій запар вопыт аказаў значны ўплыў на гары латэнтнасці (малюнак 5A: F1,23 = 13.8; р = 0.001), ўпуск затрымкі (малюнак 5B: F1,23 = 18.1; р <0.001) і затрымка эякуляцыі (малюнак 5C: GFP, F11,45 = 3.8; р = 0.006). кантроль GFP жывёлы адлюстровываюцца чаканым вопытам індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў і адлюстроўваюцца значна ніжэй латэнтнасьць спачатку змантаваць, першы ўпуск і эякуляцыю падчас сеансу вопыту 4 у параўнанні з вопытам сесіі 1 (Малюнак 5A-З; см малюнак ўмоўныя абазначэння для р-значэнняў). Гэты вопыт індукаваных палёгку сэксуальнага паводзінаў таксама назіралася ў групе ΔFosB для мантавання і интромиссии затрымак, але не было выяўлена значнай розніцы ў эякуляцыі затрымкі (Малюнак 5A-З). У супрацьлегласць гэтаму, ΔJunD жывёлы праяўлялі чэзлымі палёгку; нават калі латэнтнасьць для ездавых intromissions і эякуляцый зрабіла зніжэнне з паўторным сеансамі спарвання, ні адзін з гэтых параметраў не дасягнуў статыстычнай значнасць пры параўнанні паміж вопытам сесіямі 1 і 4 (Малюнак 5A-З). Паміж групавымі параўнанняў для кожнага вопыт сесіі паказвае, што ΔJunD мелі значна больш доўгія затрымкі для мантавання, intromit і эякулята падчас вопыту сесій у параўнанні з ΔFosB і GFP (Малюнак 5A-З). Акрамя таго, як сэксуальны вопыт і лячэнне мелі значны ўплыў на эфектыўнасць сукуплення (малюнак 5F: Сэксуальны вопыт, F1,12 = 22.5; р <0.001; лячэнне, Ф1,12 = 3.3; р = 0.049). ΔFosB мужчыны павялічыліся эфектыўнасць сукуплення падчас сеансу вопыту 4 у параўнанні з вопытам сесіі 1 (малюнак 5F). Акрамя таго, ΔFosB жывёл было значна менш мантуе папярэднічаюць эякуляцыю падчас вопыту сесіі дзень 4, у параўнанні з вопытам сеансу 1 (малюнак 5D: F10,43 = 4.1; р = 0.004), і што ΔJunD самцы мелі значна больш мантуе папярэдняга эякуляцыі, такім чынам, значна знізілася эфектыўнасць копуляции, чым любы з двух іншых груп (Малюнак 5D і Р). Такім чынам, GFP і ΔFosB жывёлы адлюстроўваюцца вопыт індукаванага палягчэння ініцыяцыі сэксуальнага паводзінаў і сэксуальнай актыўнасці, тады як ΔJunD жывёлы не былі.

Малюнак 5     

Сэксуальныя паводзіны GFP (п = 12), ΔFosB (п = 11) і ΔJunD (п = 9) жывёл: усталяваць затрымку (A), ўпуск затрымкі (У), семявывяржэння затрымкі (С), колькасць апор (D) колькасць intromissions (Е) і эфектыўнасці сукуплення (F). дадзеныя выяўленыя ...

Для таго, каб праверыць гіпотэзу аб тым, што выраз ΔFosB мае вырашальнае значэнне для доўгатэрміновага выразы вопыту індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў, жывёлы тэставалі 1 тыдня (тэставую сесію 1) і 2 тыдня (тэставая сесія 2) пасля апошняй сесіі вопыту. На самай справе, палягчаюцца сэксуальнае паводзіны падтрымлівалася ў абодвух GFP і ΔFosB груп, як ні адзін з паводніцкіх параметраў не адрозніваўся паміж тэстам-сеансамі 1 або 2 і канчатковым вопытам сэсіяй 4, у GFP і ΔFosB груп (Малюнак 5A-З; для семявывяржэння латэнтнасці і эфектыўнасці сукуплення ў тэставай сесіі 1 для ΔFosB жывёл). Значныя адрозненні паміж ΔJunD жывёламі і GFP або ΔFosB групамі былі выяўленыя ў абодвух тэстах для ўсіх параметраў сэксуальнага паводзінаў (Малюнак 5A-F,). Там не было выяўлена паміж або ўнутры груп пры параўнанні колькасці intromissions, PEI, або працэнтаў ад жывёл, якія эякулировали (100% мужчын ва ўсіх групах эякулировали на працягу апошніх чатырох сопрягаемых сесій) адрозненні.

Перайсці да:

Абмеркаванне

Дадзенае даследаванне паказала, што сэксуальны вопыт выклікае назапашванне ΔFosB ў некалькіх лімфавай-асацыіраваных абласцях галаўнога мозгу, у тым ліку ядра і абалонкі NAc, MPFC, ВТ і хвастатай шкарлупіны. Акрамя таго, сэксуальны вопыт саслабляецца спалучаныя-індукаваныя экспрэсія з-Fos ў НССЕ і ACA. І, нарэшце, ΔFosB ў NAc было паказана, што вырашальную ролю ў опосредованность палягчэння спарвання падчас набыцця сэксуальнага вопыту і доўгатэрміновага выразы вопыту індукаваных палягчэння сэксуальнага паводзінаў. У прыватнасці, памяншэнне ΔFosB-апасродкавана транскрыпцыя саслабляецца вопыт індукаванага палягчэння сэксуальнай матывацыі і прадукцыйнасці, у той час як залішняя экспрэсія ΔFosB ў НКС выклікала ўзмоцненае палёгку сэксуальных паводзінаў, з пунктам гледжання павелічэння сэксуальнай прадукцыйнасці з меншым вопытам. Разам бягучыя дадзеныя пацвярджаюць гіпотэзу аб тым, што ΔFosB з'яўляецца крытычным малекулярнай медыятарам для доўгачасовых нервовага і паводніцкай пластычнасці, выкліканай сэксуальным вопытам.

Бягучыя дадзеныя праходзяць папярэднія даследаванні, якія паказваюць вопыт сэксу індукаваны ΔFosB ў NAc ў самцоў пацукоў (Уоллес і інш. 2008) і жаночыя хамякі (Хэджаванне і інш. 2009). Уоллес і інш. (2008) паказаў, што rAAV-ΔFosB залішняй экспрэсіі ў NAc ўзмацняецца сэксуальнае паводзіны ў сэксуальна наіўныя жывёл падчас першай сесіі спарвання, пра што сведчыць меншая колькасць intromissions да эякуляцыі і кароткіх пост-семявыбрасывающих інтэрвалы, але не мелі ніякага эфекту ў сэксуальна вопытных мужчын (Уоллес і інш. 2008).

У адрозненне ад гэтага, дадзенае даследаванне прадэманстравала адсутнасць ўплыву ΔFosB сверхэкспрессии у сэксуальна наіўных мужчын падчас першага выпрабаванні, а падчас і пасля набыцця сэксуальнага вопыту. ΔFosB над-Экспрессорами прадэманстравалі павышаную сексуальную актыўнасць (падвышэнне эфектыўнасці Copulation) у параўнанні з GFP жывёл.

Акрамя таго, цяперашні даследаванне пратэставалі ролю ΔFosB шляхам блакавання ΔFosB-апасродкаванай транскрыпцыі з выкарыстаннем ΔJunD-экспрессирующих віруснага вектару. Прадухіленне павелічэння вопыту індукаваны экспрэсія ў ΔFosB інгібіруе індукаваны вопыт палягчэння сэксуальнай матывацыі (павелічэнне мацавання і интромиссию латэнтнасці), а таксама сэксуальную прадукцыйнасць (павелічэнне затрымкі эякуляцыі і колькасці мацаванняў) і далейшае доўгатэрміновае выраз палегчанага сэксуальнага паводзінаў.

Такім чынам, гэтыя дадзеныя з'яўляюцца першымі, каб паказаць на абавязковую ролю ΔFosB ў набыцці досведу індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў. Акрамя таго, гэтыя дадзеныя паказваюць, што ΔFosB таксама крытычна удзельнічае ў доўгатэрміновай экспрэсіі вопыту індукаваных палегчанага паводзін. Мы лічым, што гэтая доўгатэрміновая экспрэсія палегчанага паводзінаў ўяўляе сабой форму памяці для натуральнага ўзнагароджання, такім чынам, ΔFosB ў NAc з'яўляецца медыятарам ўзнагароджання памяці. Палавой вопыт таксама павышаны ўзровень ΔFosB ў ВТЕ і MPFC, вобласць замяшаная ў узнагародзе і памяці (Бальфур і інш. 2004; Філіпс і інш. 2008). Далейшыя даследаванні неабходныя для высвятлення патэнцыйнай значнасці ΔFosB уверх-рэгулявання ў гэтых абласцях за ўзнагароджанне памяці.

Выраз ΔFosB валодае высокай стабільнасцю, такім чынам, ён мае вялікі патэнцыял у якасці малекулярнага медыятара стойкіх адаптацый мозгу наступных хранічных абурэнняў (Нестлер і інш. 2001). ΔFosB было паказана паступовае павелічэнне НКС на працягу некалькіх ін'екцый какаіну і захоўвацца на працягу некалькіх тыдняў (Спадзявацца і інш. 1992; Спадзявацца і інш. 1994). Гэтыя змены ў экспрэсіі NAc ΔFosB звязаныя з узнагародай наркотыкаў сенсібілізацыі і наркаманіі (Чао і Нестлер 2004; McClung & Nestler 2003; McClung і інш. 2004; Нестлер 2004, 2005, 2008; Нестлер і інш. 2001; Zachariou і інш. 2006). У супрацьлегласць гэтаму, ролю ΔFosB ў опосредованность натуральнае ўзнагароджанне было вывучана недастаткова. Апошнія дадзеныя ўсплылі мяркуючы, што ΔFosB індукцыя ў НСС ўдзельнічае ў натуральным ўзнагароджанне. Ўзроўні ΔFosB аналагічным чынам павялічваецца ў наступным NAc спажыванне цукрозы і колы ходу, Залішняя экспрэсія ΔFosB ў стриатуме з выкарыстаннем bitransgenic мышэй або вірусныя вектары ў пацукоў выклікае павелічэнне спажывання цукрозы, павышана матывацыя для ежы і павелічэнне ходу спантанага колы (Olausson і інш. 2006; Уоллес і інш. 2008; Werme і інш. 2002). У цяперашні час дадзеныя па сутнасці дадаць да гэтых паведамленнях, і ў далейшым падтрымліваюць ідэю аб тым, што ΔFosB з'яўляецца асноўным медыятарам для заахвочванняў арматуры і натуральнай памяці ўзнагароды.

ΔFosB можа апасродкавана вопыт індукаванага ўзмацнення сэксуальнага паводзінаў з дапамогай індукцыі пластычнасці ў мезолимбическом сістэме. Сапраўды, сэксуальны вопыт выклікае шэраг працяглых змяненняў мезолимбической сістэмы (Брэдлі і Мейзел 2001; Frohmader і інш. 2009; збаны і інш. 2010). т паводніцкага ўзроўню, сенсібілізаванай адказ апорна-рухальны апарат з амфетамінам і пашыраная ўзнагарода амфетаміну, як былі паказаны ў сэксуальныя вопытных самцоў пацукоў (збаны і інш. 2010); зменены адказ апорна-рухальны апарат з амфетамінам таксама назіраліся з жаночымі хамякамі (Брэдлі і Мейзел 2001). Акрамя таго, павелічэнне колькасці дендрітных шыпоў і складанасці дендрітных аправак былі выяўлена пасля перыяду абстыненцыі ад сэксуальнага вопыту ў самцоў пацукоў (збаны і інш. 2010). Цяперашні даследаванне мяркуе ΔFosB можа быць спецыфічным малекулярнай медыятарам доўгатэрміновых вынікаў сэксуальнага вопыту. У пагадненні, ΔFosB нядаўна быў паказаны, што важна для індукцыі дендрітных змяненняў пазваночніка ў адказ на хранічнае ўвядзенне какаіну (Dietz і інш. 2009; Лабірынт і інш. 2010).

Не зразумела, якой перад нейрамедыятара (s) адказвае за індукаваць ΔFosB ў НСС, але DA быў прапанаваны ў якасці кандыдата (най і інш. 1995). Практычна ўсе наркотыкі злоўжыванні, уключаючы какаін, амфетамін, апіяты, канабіноіды і этанол, а таксама прыродныя ўзнагароды, павелічэнне ΔFosB ў НКС (Perrotti і інш. 2005; Уоллес і інш. 2008; Werme і інш. 2002). Абодва злоўжыванне наркотыкаў і прыродных заахвочванняў павялічыць сінаптычную канцэнтрацыю дофаміна ў NAc (Damsma і інш. 1992; Эрнандэс і Хёбель 1988а, b; Jenkins & Becker 2003). ΔFosB індукцыя наркатычных рэчываў было паказана ў DA рэцэптар, які змяшчае клеткі і какаін-індуцыраванае ΔFosB блакуюць рэцэптар антаганіст D1 DAт (най і інш. 1995). Такім чынам, выпуск Д. Мяркуецца, каб стымуляваць экспрэсію ΔFosB і тым самым опосредует ўзнагароджанне, звязаныя з нейропластичностью. Далей падтрымліваючы ідэю, што ўзроўні ΔFosB з'яўляюцца DA-залежным выснову, што вобласці мозгу, дзе сэксуальнага вопыт змененых узроўняў ΔFosB сапраўды атрымліваюць істотны ўклад дофаминергического ад ВТА, у тым ліку і медыяльнай префронтальной кары і базолатеральной міндаліны.

Аднак, у адрозненне ад гэтага, ΔFosB не павялічваецца ў медыяльнай преоптической вобласці, нават калі гэтая вобласць атрымлівае ўваходныя дадзеныя дофаминергические, хоць і з гипоталамических крыніц (Мілер і Лонштайн 2009). Будучыя даследаванні неабходныя, каб праверыць, ці з'яўляецца спарванне-індукаваныя экспрэсію ΔFosB і эфекты сэксуальнага вопыту на сэксуальнай матывацыі і прадукцыйнасці залежаць ад DA дзеянні. Ролю ДА ў сэксуальным узнагародзе ў самцоў пацукоў у цяперашні час не зусім ясна (Agmo & Berenfeld 1990; Пфаус 2009). Існуе дастаткова доказаў таго, што DA вызваляецца ў НКС падчас уздзеяння на жаночы або ношкі (Damsma і інш. 1992) І DA нейроны актывуюцца падчас сэксуальнага паводзінаў (Бальфур і інш. 2004). Тым не менш, сістэмныя ін'екцыі антаганіста рэцэптара DA не прадухіляюць сэксуальнае ўзнагароду індукаваных кандыцыянаванага месца перавагі (Agmo & Berenfeld 1990) І гіпотэза, што DA мае вырашальнае значэнне для вопыту індукаванага ўзмацнення спарвання ня тэсціравалі.

Таксама незразумела, якія ніжэйстаячыя медыятары ΔFosB ўплыву на сэксуальнае паводзіны. ΔFosB было паказана, дзейнічаць і як транскрыпцыйных актыватар і репрессоры праз AP-1 залежнага механізму (McClung & Nestler 2003; Peakman і інш. 2003). Шматлікія гены-мішэні былі ідэнтыфікаваныя, у тым ліку непасрэдных ранніх генаў з-FOS (Спадзявацца і інш. 1992; Спадзявацца і інш. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal і інш. 2008; Zhang і інш. 2006), cdk5 (затычка і інш. 2001), динорфин (Zachariou і інш. 2006), Sirtuin-1 (Renthal і інш. 2009), субадзінак NF-kB (Анг і інш. 2001)га рэцэптара Амра глутаматных GluR2 субадзінак (КЭЛЗ і інш. 1999). Бягучыя вынікі паказваюць, што спарванне індукаваных узроўняў з-Fos былі зніжаны на сексуальным вопыце ў галіне галаўнога мозгу з падвышанай ΔFosB (NAC і асам). Падаўленне з-Fos з'яўляецца ў залежнасці ад перыяду з моманту апошняга спарвання і паўторнымі сеансаў спарвання, як і ў папярэдніх даследаваннях, такое зніжэнне з-Fos не было выяўлена ў самцоў пацукоў тэстоўванай 1 тыдні пасля апошняй спалучаныя сесіі (Бальфур і інш. 2004) Ці пасля сэксуальнага вопыту, які складаецца толькі з аднаго спалучаныя сесіі (Лопес і Этэнберг 2002). Акрамя таго, у цяперашні час дадзеныя адпавядаюць з доказамі, што ΔFosB рэпрэсуе C-FOS гена пасля ўздзеяння хранічнага амфетаміну (Renthal і інш. 2008). У адпаведнасці з гэтымі вынікамі, індукцыі некалькіх непасрэдных мРНК ранняга гена (C-FOS, fosB, з-JUN, junB і zif268) быў паменшаны пасля неаднаразовых ін'екцый какаіну ў параўнанні з вострымі ін'екцый наркотыкаў (Спадзявацца і інш. 1992; Спадзявацца і інш. 1994), І амфетамін-індукаваныя з-FOS быў падаўлены пасля сыходу з хранічнага ўвядзення амфетаміну (Джабер і інш. 1995; Renthal і інш. 2008). Функцыянальная значнасць паніжальнай рэгуляцыі экспрэсіі з-Fos пасля хранічнага медыкаментознага лячэння або сэксуальнага вопыту, застаецца нявызначанай, і была прапанавана, каб быць важным гомеастатычнага механізм для рэгулявання адчувальнасці жывёльнага да паўторнай экспазіцыі ўзнагароджання (Renthal і інш. 2008).

У заключэнне, дадзенае даследаванне паказвае, што ΔFosB ў НКС гуляе важную ролю ў памяці сэксуальнага ўзнагароджання, падтрымліваючы магчымасць таго, што ΔFosB мае важнае значэнне для агульнага ўмацавання заахвочванняў і памяці, Дадзеныя, атрыманыя ў дадзеным даследаванні дадаткова растлумачыць наша разуменне клеткавых і малекулярных механізмаў, якія забяспечваюць сэксуальнае ўзнагароджанне і матывацыю, а таксама дадаць да цела літаратуры паказваючы, што ΔFosB з'яўляецца важным гульцом у развіцці наркаманіі, дэманструючы ролю для ΔFosB ў натуральнай ўзнагароды армаванне.

Перайсці да:

дадатковы матэрыял

Supp Мал. S1-S4 & Табліца S1-S2

Перайсці да:

Падзякі

Гэта даследаванне было падтрымана грантамі ад Канадскага інстытута даследаванняў у галіне аховы здароўя ў БМО, Нацыянальны інстытут псіхічнага здароўя да EJN і натуральных навук і інжынерных даследаванняў Савета Канады ККП і БМО.

Перайсці да:

Спасылкі

  • Agmo A. Мужчына пацук сэксуальнае паводзіны. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Agmo A, Беренфельд R. Армаванне ўласцівасці эякуляцыі у пацука-самца: роля апіоідаў і дофаміна. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Анг Е, Чэн Дж, Zagouras Р, Н Магна, Галандыя Дж, Шеффер Е, Нестлер EJ. Індукцыя ядзернага фактару-kappaB ў прылеглым ядры хранічным увядзеннем какаіну. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Бальфур ME, Ю.Л., Coolen LM. Сэксуальныя паводзіны і сэкс-асацыяванага средовые сігналы актывацыя мезолимбическом сістэмы ў самцоў пацукоў. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Бибб JA, Чэн J, Тэйлар JR, Svenningsson Р, Ниси А, Снайдэр Г. Л., Ян Z, Сагава ЗК, Оуимет CC, Наирн пераменнага току, Нестлер Е.Ю., Грингард П. Уплыў хранічнага ўздзеяння какаіну рэгулююцца нейронавага бялку Cdk5. Прырода. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Брэдлі KC, Haas AR, Майзель RL. 6-гидроксидопамин паразы ў самак хамякоў (Mesocricetus Auratus) адмяніць сенсібілізаванай эфекты сэксуальнага вопыту на совокупительном ўзаемадзеянні з мужчынамі. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Брэдлі KC, Майзель RL. Сэксуальныя паводзіны індукцыі з-Fos ў прылеглым ядры і рухальную актыўнасць амфетаміну стымуляванай сенсибилизируются папярэднім сэксуальным вопытам у жаночых сірыйскіх хамякоў. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Карла TL, Ohnishi Ю.М., Ohnishi YH, Алибхайте IN, Wilkinson MB, Kumar A, Нестлер EJ. Протеасомы-залежныя і -независимые механізмы для дэстабілізацыі FosB: ідэнтыфікацыя FosB degron даменаў і наступствы для стабільнасці DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Чао-J, Нестлер EJ. Малекулярная нейробиология наркаманіі. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Най HE, КЭЛЗ MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Надзея BT, Нестлер EJ. Рэгуляванне дэльта FosB і FosB-падобных бялкоў электрашокавай эпілепсіяй і какаіну лячэння. Малекулярная фармакалогія. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Колбі CR, Whisler Да, Штэфэн З, Нестлер Е.Ю., Self DW. Стриатальные тыпу клетак канкрэтнай суперэкспрессии DeltaFosB павышае стымул для какаіну. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen Л.М., Аллард Дж, Трюитт WA, Mckenna КА. Цэнтральнае рэгуляванне эякуляцыі. Фізіялогія Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Пфаус JG, Wenkstern D, Phillips AG, Фибигер HC. Сэксуальныя паводзіны павялічвае перадачу дофаміна ў прылеглым ядры і стриатуме самцоў пацукоў: параўнанне з навізной і локомоции. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Диетц ДМ, лабірынт я, механік М, Vialou У, Диетц KC, Иньигес С.Д., Laplant Q, Русо SJ, Фергюсон D, Нестлер EJ. Істотная роля для ΔFosB ў рэгуляцыі какаіну дендрітных шипиков прылеглага ядра нейронаў. Грамадства Neuroscience Анатацыя. 2009
  • Frohmader KS, Збаны KK, Бальфур ME, Coolen LM. Змешвальныя задавальнення: Агляд ўздзеяння наркотыкаў на сексуальных паводзінах у людзей і жывёлы мадэляў. Horm Behav. 2009 У прэсе.
  • Hedges В.Л., Чакраварти S, Нестлер EJ, Майзель RL. Дэльта FosB суперэкспрессия ў прылеглым ядры ўзмацняе сэксуальнае ўзнагароду ў жаночых сірыйскіх хамякоў. Гены мозгу Behav. 2009;8: 442-449. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Hernandez л, Hoebel БГ. Кармленне і гипоталамо стымуляванне павелічэння абароту дофаміна ў прылеглым. Фізіялогія Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez л, Hoebel БГ. ўзнагароджанне ежы і какаін павялічыць пазаклеткавай дофаміна ў прылеглым ядры, як вымеранае микродиализом. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, карычневы JR, Е. Н, Saudou F, Вайда В.А., думайце RS, Грынберг ME, Нестлер EJ. Істотная роля гена fosB ў малекулярных, клетачных і паводніцкіх дзеяннях хранічнай электрашокавай курчаў. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Георгеску D, Сіманс DL, DiLeone RJ. Лакальны накдаўн гена ў мозгу з дапамогай вірусна-апасродкаванага РНК-інтэрферэнцыі. Нат Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Надзея B, Kosofsky B, Хайман SE, Нестлер EJ. Рэгуляванне неадкладнага пачатку экспрэсіі генаў і AP-1 звязвання ў прылеглым ядры пацукоў хранічнага какаінам. Proc Natl Acad Sci ЗША А. 1992;89: 5764-5768. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Надзея BT, Най HE, КЭЛЗ MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, думайце RS, Нестлер EJ. Індукцыя працяглага комплексу AP-1, які складаецца з змененых Фос-падобных бялкоў ў мозгу пры хранічным какаіне і іншым хранічным лячэннем. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Халл А.М., Майзель RL, Сакс BD. Мужчынскае сэксуальнае паводзіны. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
  • Джабер М, Cador М, Dumartin У, Нормэнд Е, Stinus л, Блох В. Вострыя і хранічныя лячэння амфетаміну па-рознаму рэгулююць ўзроўні РНК мессенджера і нейропептида Fos иммунореактивности ў нейронных паласатага цела пацукоў. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Джэнкінс WJ, Becker JB. Дынамічныя павелічэнне дофаміна падчас стымуляваць сукуплення ў самак пацукоў. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • КЭЛЗ МБ, Чэн Дж, Carlezon WA, малодшы, Whisler Да, Gilden л, Бекмана А.М., Штэфэн З, Чжан YJ, Marotti л, Self DW, Tkatch Т, Баранаўскас G, Surmeier ды-джэй, Ніў RL, думайце РС, Пиччиотто МР, Нестлер EJ. Экспрэсія фактару транскрыпцыі deltaFosB ў мозгу кантралюе адчувальнасць да какаіну. Прырода. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Лопес HH, Ettenberg А. Уздзеянне самак пацукоў выклікае адрозненні ў з-FOS індукцыі паміж сэксуальна наіўных і дасведчаных пацукоў-самцоў. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Лабірынт я, Ковингтон ЁН, 3rd, Диетц Д.М., LaPlant Q, Renthal Вт, руска SJ, механік М, музон Е, Нівы RL, Haggarty SJ, Рэн Y, Сампатй СК, Херд Ю.Л., Грингард Р, Тараховский А, Шэфер А, Нестлер EJ. Істотная роля ў гистона метилтрансферазе G9a ў какаіне-індукаваны пластычнасці. Навук. 2010;327: 213-216. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • McClung CA, Нестлер EJ. Рэгуляванне экспрэсіі генаў і ўзнагароджанне какаіну на CREB і DeltaFosB. Нат Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • МакКланг СА, Ulery П.Г., Perrotti Л.І., Zachariou У, Berton О, Нестлер EJ. DeltaFosB: малекулярны перамыкач для доўгачасовай адаптацыі ў мозгу. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Мілер С.М., Lonstein JS. Допаминергические праекцыі на медыяльны преоптическое пацукоў пасля родаў. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Morgan JI, кары Т. Стымул-транскрыпцыя сувязі ў нейронных: роля клеткавых генаў ранняга адказу. Trends Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Нестлер EJ. Малекулярныя механізмы наркаманіі. Нейрофармакология. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
  • Нестлер EJ. Нейробиология кокаиновой наркаманіі. Sci практ Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Нестлер EJ. Агляд. Транскрипциональные механізмы наркаманіі: роля DeltaFosB. Філас Транс R Soc Лонд У Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Нестлер EJ, Баро M, Self DW. DeltaFosB: ўстойлівы малекулярны перамыкач для прывыкання. Proc Natl Acad Sci ЗША А. 2001;98: 11042-11046. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Най HE, Надзея BT, КЭЛЗ MB, Iadarola M, Нестлер EJ. Фармакалагічныя даследаванні рэгуляцыі хранічнага FOS-антыгена, звязанага індукцыі з дапамогай какаіну ў стриатуме і прылеглым ядры. J фармакалагічнай і эксперыментальнай тэрапіі. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Олоссон Р, Jentsch JD, Tronson N, Ніў RL, Нестлер Е.Ю., Тэйлар JR. DeltaFosB ў прылеглым ядры рэгулюе харчовай армаваны інструментальнае паводзіны і матывацыю. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman МС, Колбі З, Perrotti Л.І., Tekumalla Р, Карле Т, Ulery Р, Чао Дж, думайце З, Штэфэн З, Monteggia л, Ален МР, са ДЛ, думайце RS, McNeish JD, Баррот М, Self DW, Нестлер Е.Ю. , Шеффер Е. Индуцибельный, мозг канкрэтнага рэгіёну экспрэсія дамінантнага негатыўнага мутанта з-Jun ў трансгенных мышах прыводзяць да зніжэння адчувальнасці да какаіну. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti Л.І., Боланос СА, Чой К. Х., руска SJ, Эдвардс S, Ulery PG, Уоллес DL, Self DW, Нестлер Е.Ю., Баро М. DeltaFosB назапашваецца ў папуляцыі ГАМКергических клетак у задняй частцы хваста вентральной вобласці покрыўкі пасля псіхостімуляторов лячэння. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Баро M, L Monteggia, думайце RS, Нестлер EJ. Індукцыя deltaFosB ва ўзнагароду звязаных структур галаўнога мозгу пасля хранічнага стрэсу. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Робисона B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Элмор RG, Кнапп DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Нестлер EJ. Асобныя мадэлі DeltaFosB індукцыі ў мозгу з дапамогай наркатычных рэчываў. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Пфаус JG. Шляху сэксуальнага жадання. J Med Пол. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Пфаус JG, Kippin TE, Centeno S. Кандыцыянаванне і сэксуальнае паводзіны: агляд. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Phillips AG, Вакка G, Ahn S. зверху ўніз перспектыва на допаміна, матывацыі і памяці. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Збаны KK, Бальфур ME, Леман М.Н., Richtand Н.М., Ю.Л., Coolen LM. Нейропластичность ў мезолимбическом сістэме, выкліканай натуральнай узнагародай і наступнага ўзнагароджання абстыненцыі. Biol псіхіятрыі. 2010;67: 872-879. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Renthal Вт, Карла Т.Л., Лабірынт я, Ковингтон ЁН, 3rd, Труонг HT, Алибхай я, Кумар А, Мантгомеры RL, Олсон Е.Н., Нестлер EJ. Дэльта FosB опосредует эпигенетические дэсенсібілізацыі з-FOS гену пасля хранічнага ўздзеяння амфетаміну. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Renthal Вт, Кумар А, Сяо G, Вилкинсон М, Ковингтон ЁН, 3rd, Лабірынт я, Sikder D, Робисона AJ, LaPlant Q, Диетц ДМ, Русо SJ, Vialou У, Чакраварти S, Kodadek TJ, укладваюць, Каббадж М, Нестлер EJ. Геному аналіз рэгуляцыі храмаціне какаін паказвае ролю сиртуиных. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Tenk СМ, Уілсан Н, Чжан Q, Збаны К.К., Coolen Л.М .. Палавая ўзнагарода ў самцоў пацукоў: уплыў сэксуальнага вопыту на месцы умоўных пераваг, звязаныя з эякуляцыяй і intromissions. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Ulery-Рейнольдс П.Г., Касціла М.А., Vialou У, Русо SJ, Нестлер EJ. Фасфараляванне DeltaFosB опосредует яго ўстойлівасць ў натуральных умовах. Neuroscience. 2008
  • Ulery PG, Рудэнка G, Нестлер EJ. Рэгуляванне стабільнасці DeltaFosB фасфаралявання. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Уоллес Д.Л., Vialou У, Рыас л, Карла-Флорэнс Т.Л., Чакравартите S, Кумар А, Грэхэй Д.Л., зялёны ТОЙ, Кірк А, Иньигес С.Д., Perrotti Л.І., Баррот М, DiLeone RJ, Нестлер Е.Ю., Боланос-Гусман CA. Ўплыў DeltaFosB ў прылеглым ядры на натуральным паводзінах узнагародай звязаных. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC бясплатна артыкула] [PubMed]
  • Werme М, Месер З, Олсон л, Gilden л, пракладзены Р, Нестлер Е.Ю., Brene С. Дэльта FosB рэгулюе ход колы. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Тэабалда DE, зялёны TA, Bachtell РК, Perrotti Л.І., DiLeone RJ, Russo SJ, Гарт WJ, Self DW, Нестлер EJ. DeltaFosB індукцыі ў кары орбитофронтальную опосредует талерантнасць да какаіну-індукаваны кагнітыўнай дысфункцыі. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Zachariou У, Боланос СА, Selley ДЭ, Теобальдъ Д, Кассиди М.П., ​​КЭЛЗ МБ, Шоу-Lutchman Т, Berton О, сім-Selley LJ, RJ Dileone, Кумар А, Нестлер EJ. Істотную ролю для DeltaFosB ў прылеглым ядры ў марфін дзеянні. Нат Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Чжан Дж, Чжан л, цзяо Н, Чжан Q, Чжан D, Л D, Katz ДЛ, вось гэтая М. з-Фос палягчае набыццё і знікненне какаіну індукаваных стойкіх змяненняў. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]