La metanfetamina actua sobre les subpoblacions de neurones que regulen el comportament sexual en rates masculines (2010)

Neurociència. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

font

Departament d'Anatomia i Biologia Cel·lular, Escola de Medicina i Odontologia de Schulich, Universitat de Western Ontario, Londres, ON, Canadà, N6A 5C1.

abstracte

La metamfetamina (Meth) és un estimulant altament addictiu. El mètode d'abús s’associa sovint a la pràctica del comportament de risc sexual i l’augment de la prevalença dels usuaris d’Immunodeficiència Humana i Metàl·lics indiquen un augment del desig sexual, l’excitació i el plaer sexual. La base biològica d’aquest nexe entre drogues i sexes és desconeguda. L’estudi actual demostra que l’administració de Meth en rates rates activa les neurones a les regions del cervell del sistema mesolímbic que estan implicades en la regulació del comportament sexual. Específicament, el mètode i l'aparellament co-activen les cèl·lules del nucli accumbens del nucli i de la closca, l'amígdala basolateral i l'escorça cingulada anterior. Aquests resultats il·lustren que, a diferència de les creences actuals, les drogues d’abús poden activar les mateixes cèl·lules que un reforç natural, és a dir, el comportament sexual i, al seu torn, poden influir en la cerca compulsiva d’aquesta recompensa natural.

Paraules clau: nucli accumbens, amígdala basolateral, escorça prefrontal, abús de substàncies, reproducció, addicció

La motivació i la recompensa estan regulades pel sistema mesolímbic, una xarxa interconnectada de les àrees del cervell que comprèn el nucli accumbens (NAc) de l'àrea tegmental ventral (VTA), l'amígdala basolateral i l'escorça prefrontal medial (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas i Volkow, 2005). Hi ha prou evidència que el sistema mesolímbic s'activa en resposta a les dues substàncies d'abús (Di Chiara i Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) i comportaments naturals gratificants com el comportament sexual (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). El comportament sexual masculí, i en particular l'ejaculació, és molt gratificant i reforçant els models animals (Pfaus et al., 2001). Els rosegadors masculins desenvolupen una preferència de lloc condicionat (CPP) a la copulació (Agmo i Berenfeld, 1990, Martínez i Paredes, 2001, Tenk, 2008), i realitzarà tasques operants per accedir a una dona sexualment receptiva (Everitt et al., 1987, Everitt i Stacey, 1987). Les drogues d'abús també són gratificants i reforçadores, i els animals aprendran a auto-administrar substàncies d'abús, inclosos els opiacis, la nicotina, l'alcohol i els psicoestimulants (Wise, 1996, Pierce i Kumaresan, 2006, Feltenstein i See, 2008). Tot i que se sap que els dos fàrmacs d’abús i de comportament sexual activen les àrees del cervell mesolímbic, actualment no està clar si les drogues d’abús influeixen en les mateixes neurones que intervenen en el comportament sexual.

Els estudis electrofisiològics han demostrat que els aliments i la cocaïna activen les neurones del NAc. No obstant això, els dos reforçadors no activen les mateixes cèl·lules dins del NAc (Carelli et al., 2000, Carelli i Wondolowski, 2003). A més, l’autoadministració de l’alimentació i la sacarosa no causen alteracions a llarg termini de les propietats electrofisiològiques que són induïdes per la cocaïna (Chen et al., 2008). En canvi, una col·lecció d’evidències suggereix que el comportament sexual masculí i les drogues d’abús poden actuar de fet en les mateixes neurones mesolímbiques. Els psicoestimulants i els opioides alteren l'expressió del comportament sexual de les rates masculines (Mitchell i Stewart, 1990, Fiorino i Phillips, 1999a, Fiorino i Phillips, 1999b). Les dades recents del nostre laboratori van mostrar que l’experiència sexual modifica la capacitat de resposta dels psicoestimulants, com ho demostra una resposta locomotora sensibilitzada i la percepció de la percepció de la recompensa a d-anfetamina en animals amb experiència sexual. (Pitchers et al., 2009). S'ha observat anteriorment una resposta similar amb l'exposició repetida a amfetamina o altres drogues d'abús (Lett, 1989, Shippenberg i Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren i Kalivas, 2000). Junts, aquestes troballes suggereixen que el comportament sexual i les respostes a les drogues d’abús són mediades per les mateixes neurones del sistema mesolímbic. Per tant, el primer objectiu del present estudi és investigar l’activació neuronal del sistema mesolímbic per comportament sexual i administració de fàrmacs en el mateix animal. En particular, vam provar la hipòtesi que el psicoestimulant, la metamfetamina (Meth), actua directament a les neurones que normalment sol·liciten un comportament sexual.

Meth és una de les drogues il·lícites més maltractades al món (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) Lai ha estat vinculat amb freqüència a un comportament sexual alterat. Curiosament, els usuaris de Met informen un augment del desig i de l’excitació sexual, així com un plaer sexual millorat (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). D'altra banda, El mètode d’abús s’associa comunament amb un comportament sexual compulsiu (Rawson et al., 2002). Sovint, els usuaris denuncien tenir nombroses parelles sexuals i tenen menys probabilitats d’utilitzar protecció que altres drogodependents (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Per desgràcia, els estudis que indiquen l’ús de la metamorfosi com a predictor del comportament de risc sexual són limitats a mesura que es basen en informes no confirmats.Elifson et al., 2006). Per tant, es requereix una investigació sobre la base cel·lular dels canvis de comportament sexual induïts per mètodes en un model animal per entendre aquest complex nexe farmacèutic.

A la vista de l’evidència esmentada anteriorment, el que suggereix que les drogues d’abús, i especialment Meth, poden actuar sobre neurones normalment implicades en la mediació del comportament sexual, l’objectiu del present estudi va ser investigar l’activació neuronal per comportament sexual i administració del mètode psicoestimulant. Aquest estudi va implementar una tècnica neuroanatòmica, utilitzant la visualització immunohistoquímica dels primers gens immediats Fos i la fosforilada Map Kinase (pERK) per detectar l’activació neuronal concurrent per comportament sexual i Meth respectivament. Fos només s'expressa dins del nucli de les cèl·lules, amb un nivell màxim d'expressió 30 – 90 minuts després de l’activació de la neurona. Hi ha prou evidència que l’activitat sexual indueix l’expressió de Fos al cervell (Pfaus i Heeb, 1997, Veening i Coolen, 1998), incloent el sistema mesocorticolímbic (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). També hi ha evidència que les drogues d’abús indueixen l’expressió de PERK dins del sistema mesocorticolímbic (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). A diferència de l'expressió de Fos, la fosforilació de l'ERK és un procés altament dinàmic i només es produeixen 5 – 20 minuts després de l'activació neuronal. Els diferents perfils temporals de Fos i PERK els converteixen en un conjunt ideal de marcadors per a una posterior activació neuronal per dos estímuls diferents.

PROCEDIMENTS EXPERIMENTALS

Subjectes

Les rates adultes Sprague Dawley (210-225 g) obtingudes de Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canadà) es van allotjar dues per gàbia a les gàbies estàndard de plexiglàs (gàbies). La sala d’animals es va mantenir en un cicle de llum inversa 12 / 12 h (apagat a 10.00 h). El menjar i l’aigua estaven disponibles ad libitum. Totes les proves es van realitzar durant la primera meitat de la fase fosca sota una il·luminació de color vermell fosc. Les femelles d’estimulació utilitzades per al comportament sexual van ser ovariectomizadas bilateralment sota anestèsia profunda (13 mg / kg de ketamina i 87 mg / kg xilazina) i van rebre un implant subcutani que contenia 5% benzoat d’estradiol (EB) i 95% colesterol. La receptivitat sexual va ser induïda per l'administració subcutània (sc) de 500 μg de progesterona en 0.1 ml oli de sèsam 4 h abans de realitzar les proves. Tots els procediments van ser aprovats pel comitè de cura dels animals a la Universitat de Western Ontario i es conformen amb les directrius descrites pel Consell canadenc de cura dels animals.

Dissenys experimentals

Experiments 1 i 2: Les rates masculines (n = 37) es van permetre aparellar-se amb una femella receptiva a una ejaculació (E) o per a 30 min, que va arribar primer a les gàbies de prova neta (60 × 45 × 50 cm) durant cinc vegades -Les sessions d'aparellament previ a la prova setmanal per obtenir experiència sexual. Durant les dues darreres sessions, es van registrar tots els paràmetres estàndard per al rendiment sexual, incloent-hi: latència de muntatge (ML; temps des de la introducció de la femella fins al primer muntatge), latència de la intromissió (IL; temps des de la introducció de la femella fins al primer muntatge amb penetració vaginal), latència de l’ejaculació (EL, temps des de la primera intromissió a l’ejaculació), interval de post ejaculació (PEI; temps de la ejaculació a la primera intromissió posterior), nombre de muntatges (M) i nombre d’intromissions (IM) (Agmo, 1997). Tots els homes van rebre la injecció diària 1 ml / kg de 0.9% NaCl (solució salina; sc) 3 dies consecutius abans del dia de la prova, per a l'habitualització en la manipulació i les injeccions. Un dia abans del dia de la prova, tots els homes estaven sols. En homes amb experiència, Fos pot ser induït per senyals contextuals condicionats associats a l'experiència sexual anterior (Balfour et al, 2004). Per tant, totes les manipulacions d'aparellament i control durant les proves finals es van dur a terme a la gàbia domèstica (evitant indicis condicionats per predicció) per evitar l'activació induïda per indicis condicionats en els mascles de control no relacionats. Els mascles es van distribuir en vuit grups experimentals que no van diferir en cap mesura d’actuació sexual durant les dues darreres sessions d’aparellament (dades no mostrades). Durant la prova final, es va permetre als mascles aparellar-se a la gàbia fins que van mostrar una ejaculació (sexe) o no rebre parella (sense sexe). Tots els mascles aparellats es van perfusar minuts 60 després de l'aparició de l'aparellament per permetre l'anàlisi de l'expressió de Fos induïda per l'aparellament. Els mascles van rebre una injecció de 4 mg / kg Meth o 1 ml / kg de solució salina (sc) (n = 4 cadascun), ja sigui 10 (experiment 1) o 15 (experiment 2) abans de la perfusió, per a l'anàlisi de la fosforilació induïda per fàrmacs. de MAP quinasa. La dosi i el temps abans de la perfusió es basaven en informes anteriors (Choe et al., 2002, Choe i Wang, 2002, Chen i Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Els grups de control van incloure mascles que no es van aparellar, però van rebre la mètode 10 (n = 7) o 15 (n = 5) abans del sacrifici, o injeccions de solució salina 10 (n = 5) o 15 (n = 4) min abans del sacrifici . Després del sacrifici, es van processar cervells per a la immunohistoquímica.

Experiment 3: Atès que es va utilitzar una alta dosi de Meth en l'experiència 1 i 2, es va realitzar un experiment neuroanatòmic addicional per investigar si el comportament sexual i una dosi més baixa de Meth indueixen patrons dependents de la dosi d'activació neural superposada. Aquest estudi es va dur a terme d’una manera idèntica als experiments 1 i 2. No obstant això, a la prova final, els grups aparellats i no units (n = 6 cadascun) van rebre 1 mg / kg Meth (sc) 15 min abans del sacrifici.

Experiment 4: Per provar si l'activació neuronal causada pel sexe i Meth és específica de Meth, aquest experiment va investigar si es podien veure patrons similars d'activació neural superposada amb el psostimulant d-anfetamina (Amph). Aquest experiment es va dur a terme d’una manera idèntica als experiments 1 i 2. No obstant això, en la prova final, es va administrar el mascle Amph (5 mg / kg) o solució salina (1 mg / kg) (sc) 15 min abans del sacrifici (n = 5 cadascun). Controlar els mascles sense relacionar van rebre solució salina o Amph 15 minuts abans del sacrifici. Es proporciona una visió general dels grups experimentals utilitzats en experiments 1 – 4 Taula 1.

Taula 1      

Visió general dels grups experimentals inclosos en els experiments 1 – 4.

Preparació de teixits

Els animals van ser anestesiats amb pentobarbital (270 mg / kg; ip) i perfusats transcardialment amb 5 ml de solució salina seguit de 500 ml 4% paraformaldehid en tampó de fosfat 0.1 M (PB). Els cervells es van retirar i es van fixar posteriorment per a 1 h a temperatura ambient en el mateix fixador, després es van submergir en 20% de sacarosa i 0.01% de sodi de sodi a 0.1 M PB i es van emmagatzemar a 4 ° C. Les seccions coronals (35 μm) es van tallar en un micròtom de congelació (H400R, Micron, Alemanya), recollides en quatre sèries paral·leles en solució crioprotectora (30% de sacarosa i 30% etilenglicol a 0.1 M PB) i emmagatzemades a 20 ° C fins a més processament.

Immunohistoquímica

Totes les incubacions es van realitzar a temperatura ambient amb agitació suau. Les seccions flotants lliures es van rentar àmpliament amb solució salina tamponada amb fosfat 0.1 M (PBS) entre incubacions. Les seccions es van incubar a 1% H2O2 per a 10 min, després bloquejat en solució d'incubació (PBS que conté albumina de sèrum boví 0.1% i 0.4% Triton X-100) per a 1 h.

PERK / Fos

El teixit es va incubar durant la nit amb un anticòs policlonal de conill contra el mapa de p42 i p44 quinases ERK1 i ERK2 (pERK; 1: experiment 400 1 19: 1 experiment 4.000 i 2 3; Cell Signaling Cat # 21;), seguit per Incubacions de 9101 h amb ruc IgG biotinilada (1: 1; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) i complex avoxina-peroxidasa de rave (ABC Elite; 500: 1; Vector Laboratories, Burlingame, CA). A continuació, es va incubar el teixit per a 1000 min amb tyramide biotinylated (BT; 10: 1 en PBS + 250% H2O2; Kit d’amplificació de senyals de Tyramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) i per a 30 min amb estrepavidina conjugada Alexa 488 (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). A continuació, es va incubar el teixit durant la nit amb un anticòs policlonal de conill contra c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), seguit per una incubació de 30 amb Alexa anti-conill de cabra 555 (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Després de la tinció, les seccions es van rentar a fons a 0.1 M PB, muntades en diapositives de vidre amb gelatina 0.3% a ddH20 i tapat amb un mitjà de muntatge aquós (Gelvatol) que conté agent anti-esvaïment 1,4-diazabiciclo (2,2) octan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Els controls immunohistoquímics incloïen l’omissió d’un dels anticossos primaris o dels dos, resultant en l’absència d’etiquetatge en la longitud d’ona adequada.

Anàlisi de Dades

Comportament sexual

Per als quatre experiments, es van registrar paràmetres estàndard per a l’exercici sexual com es va descriure anteriorment i es van analitzar mitjançant l’anàlisi de la variància (ANOVA). L’anàlisi de dades sobre el comportament sexual durant el dia de la prova final no va revelar diferències significatives entre els grups en cap dels paràmetres del rendiment sexual.

PERK / Fos Cell Counts

Les cèl·lules etiquetades dobles i simples per a Fos i PERK es van comptar en els nivells caudals de les subregiones de nucli i closca de NAc, amígdala basolateral (BLA), amígdala medial posterodorsal (MEApd), amígdala central (CeA), nucli preòptic medial (MPN), posteromedial i nucli posterolateral del llit de l'estria terminalis (BNSTpm i BNSTpl), i la subregions de la zona cingulada anterior (ACA), prelimbic (PL) i infralimbic (IL) del mPFC. Les imatges es van capturar utilitzant una càmera CCD refrigerada (Microfire, Optronics) connectada a un microscopi Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanya) i el programari Neurolucida (MicroBrightfield Inc) amb configuració fixa de la càmera per a tots els subjectes (amb objectius 10x). Mitjançant el programari neurolucida, es van definir àrees d’anàlisi basades en fites (Swanson, 1998) únic per a cada regió cerebral (veure figura 1). Les àrees d’anàlisi estàndard es van utilitzar en totes les àrees, excepte en el nucli i la carcassa NAc. En aquestes últimes àrees, l’expressió de PERK i Fos no era homogènia i apareixia en patrons de pegats. Per tant, es va esbossar tot el nucli i la closca basant-se en punts de referència (ventricle lateral, commisure anterior i illes de Calleja). Les àrees d’anàlisi no van diferir entre els grups experimentals i eren 1.3 mm2 al nucli de NAc i al shell. Les àrees d’anàlisi estàndard per a les àrees restants van ser: 1.6 mm2 en el BLA, 2.5 i 2.25 mm2 al MEApd i al CeA respectivament, 1.0 mm2 al MPN, 1.25 mm2 en les subregions BNST i mPFC i 3.15 mm2 a la VTA. Es van comptar dues seccions bilateralment per a cada regió cerebral per animal i es van calcular el nombre de cèl·lules etiquetades dobles i individuals per pERK i Fos, així com els percentatges de cèl·lules pERK que expressaven el marcador Fos. Per als experiments 1, 2 i 4, es van comparar les mitjanes de grup mitjançant ANOVA de dos sentits (factors: aparellament i medicament) i el LSD de Fisher per a post hoc comparacions a un nivell de significació de 0.05. Per a l'experiment 3, es van comparar les mitjanes de grup utilitzant proves de t no aparellades a un nivell de significació de 0.05.

figura 1      

Dibuixos esquemàtics i imatges que il·lustren les àrees d'anàlisi del cervell. Les àrees d’anàlisi indicades es basaven en monuments únics per a cada regió cerebral, i no eren diferents entre els grups experimentals i eren 1.25 mm.2 en subregions mPFC (a), 1.3 mm2 al ...

imatges

Imatges digitals per a figura 3 es van capturar utilitzant una càmera CCD (DFC 340FX, Leica) connectada a un microscopi Leica (DM500B) i es van importar al programari Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). Les imatges no es van alterar de cap manera, excepte per a l’ajust de la brillantor.

figura 3      

Imatges representatives de les seccions NAc immunotegudes per a Fos (vermell; a, d, g, j) i pERK (verd; b, e, h, k) d'animals de cada grup experimental: No Sex + Sal (a, b, c) , Sexe + Sal (d, e, f), No sexe + Meth (g, h, i) i Sexe + Meth (j, k, l). Els panells dret són ...

RESULTATS

Activació neuronal del sistema límbic mitjançant l'administració del comportament i dels mètodes sexuals

Experiment 1: Anàlisi de cèl·lules etiquetades dobles i dobles per a Fos i PERK induïda per aparellament en mascles que van rebre Meth 10 minuts abans del sacrifici i van revelar Fos induït per aparellament a la MPN, BNSTpm, nucli de NAc i shell, BLA, VTA, i totes les subregions de mPFC, coherents amb estudis previs que demostren l'expressió de Fos induïda per l'aparellament en aquestes àrees (Baum i Everitt, 1992, Pfaus i Heeb, 1997, Veening i Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Administració de mètodes 10 minuts abans de sacrificar pERK induït en el nucli de NAc i shell, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl i regions de mPFC, coherents amb els patrons d’activació induïts per altres psicoestimulants (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

A més, es van observar tres patrons de coexpressió de l’activació neuronal per comportament sexual i el mètode: s’han identificat en primer lloc àrees cerebrals on el sexe i els fàrmacs activaven les poblacions neuronals no solapades (Taula 2). Concretament, al CeA, MEApd, BNSTpl i mPFC, augments significatius tant en pERK induït per fàrmacs (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) com en Fos induït per sexe (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16) es van observar. Tanmateix, en aquestes regions no hi va haver augments significatius en les neurones marcades amb doble en homes tractats amb metanfetamina. L'única excepció va ser la MEApd, on es va trobar un efecte de l'aparellament en el nombre de cèl·lules amb doble marcatge (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Tanmateix, no hi va haver cap efecte global del tractament farmacològic i el doble etiquetatge en grups tractats amb metanfetamina no va ser significativament superior al dels grups tractats amb solució salina, per tant no va ser causat pel medicamentTaula 2). En segon lloc, es van identificar àrees cerebrals on només es va induir l’activació neuronal per aparellament (Taula 3). Específicament, les MPN, BNSTpm i VTA només es van activar per aparellament i contenien increments significatius en Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001), però no hi havia PERK induïda per mètodes.

Taula 2      

Visió general de l’expressió de FOS i Met-induïda per induir l'aparell en les zones cerebrals on el sexe i els fàrmacs activen poblacions neurals que no se superposen.
Taula 3      

Descripció general de l'expressió de Fos i Met-induïda per induir l'aparell en pERK en àrees cerebrals on només es va induir l'activació neuronal per aparellament.

Finalment, es van trobar àrees cerebrals on sexe i drogues van activar poblacions de neurones solapades (figura 2 i And3) .3). Al nucli i la closca de NAc, BLA i ACA, hi va haver efectes generals de l’aparellament (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) i tractament farmacològic (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), així com una interacció entre aquests dos factors (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; no hi ha interacció significativa en ACA) en el nombre de cèl·lules que expressen tots dos FOS induït per l’aparellament i PERK induït pel metanfetamina. L’anàlisi post hoc va revelar que el nombre de neurones marcades dualment era significativament superior en els homes injectats de meth aparellats en comparació amb els homes tractats amb meth sense aparellar (p = 0.027- <0.001) o en els homes tractats amb solució salina aparellats (p = 0.001- <0.001) (figura 2 i And3) .3). Quan les dades es van expressar com a percentatges de neurones activades per fàrmacs, 39.2 ± 5.3% al nucli de NAc, 39.2 ± 5.8% a la closca NAc, 40.9 ± 6.3% a la BLA i 50.0 ± 5.3% de les neurones ACA van ser activades per tant d'aparellament com de Meth.

figura 2      

L’expressió de PERK induïda per sexe i FOS en neurones NAc, BLA i ACA 10 min després de l’administració de 4 mg / kg Meth. Nombres mitjans ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), i dobles (c, f, i, l) cel·les marcades al nucli de NAc (a, ...

Una observació inesperada va ser que el comportament sexual va afectar el PERK induït per mètode. Tot i que Meth va induir de manera significativa els nivells de PERK tant en els grups injectats i en mats que no estaven units, al NAc, al BLA i al ACA, l’etiquetatge de pERK era significativament menor en els mascles injectats de Meth en comparació amb els mascles injectats sense identificar (Figura 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Aquesta troballa podria recolzar més la hipòtesi que el sexe i les drogues actuen sobre les mateixes neurones, però també pot ser indicatiu d'alteracions induïdes per l'aparellament en la captació o metabolisme de fàrmacs que al seu torn causen respostes neuronals modificades a Meth. Per investigar si el comportament sexual provoca un patró temporal diferent d’activació induïda per fàrmacs, es van tacar seccions del NAc, BLA i ACA per als mascles sacrificats en un moment posterior (15 min) després d’administració del fàrmac (experiment 2).

Experiment 2: L'anàlisi de cèl·lules etiquetades dobles i soles va confirmar les troballes descrites anteriorment que el comportament sexual i l'exposició posterior a metes 15 abans del sacrifici van donar lloc a increments significatius d'immunotabelatge Fos i pERK al nucli de NAc i al shell, BLA i ACA. A més, es va trobar de nou una co-expressió significativa de Fos i PERK induïda per aparició en aquestes àrees (figura 4; efecte d'aparellament: F (1,12) = 15.93-76.62; p = 0.002- <0.001; efecte medicament: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). El nombre de neurones marcades amb doble en mascles injectats de metge aparellats va ser significativament superior en comparació amb els homes tractats amb metanfetamina no aparellats (p <0.001) o amb homes salats aparellats (p <0.001). Quan les dades s’expressaven com a percentatges de neurones activades per fàrmacs, el 47.2 ± 5.4% (nucli NAc), el 42.7 ± 7.6% (capa NAc), el 36.7 ± 3.7% (BLA) i el 59.5 ± 5.1% (ACA) de neurones activades mitjançant l'aparellament també van ser activats per Meth. A més, el PERK induït per drogues no va diferir entre els animals aparellats i els no aparellats (Figura 4b, e, h, k), a totes les àrees excepte a l’ACA (p <0.001). Aquestes dades indiquen que el comportament sexual de fet provoca una alteració del patró temporal d’inducció de PERK per metanfetamina.

figura 4      

L’expressió de PERK induïda per sexe i FOS en neurones NAc, BLA i ACA 15 min després de l’administració de 4 mg / kg Meth. Nombres mitjans ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), i dobles (c, f, i, l) cel·les marcades al nucli de NAc (a, ...

Activació neuronal després del comportament sexual i 1 mg / kg de metode

Fins ara, els resultats van revelar que el comportament sexual i 4 mg / kg Meth activaven la superposició de poblacions de neurones al nucli de NAc i al shell, BLA i ACA. To Investigar la influència de la dosi de fàrmac en aquest solapament en l’activació, s’han estudiat també els patrons d’activació neuronal utilitzant una dosi més baixa de Meth. El nucli de NAc i el shell, BLA i ACA es van analitzar per activació induïda per sexe i Meth. De fet, el comportament sexual i la posterior exposició a Meth van donar lloc a increments significatius d’immunotabelització de Fos i pERK a les subregions del nucli i del shell de NAc, el BLA, així com a les neurones de la regió ACA del mPFC (figura 5). Curiosament, la menor dosi de Meth va donar lloc a un nombre similar de neurones marcades amb PERK, tal com induïa 4 mg / kg Meth en les quatre regions cerebrals analitzades. Més important encara, el nucli de NAc i el shell, BLA i ACA van mostrar increments significatius en el nombre de cèl·lules amb etiqueta dual.Figura 5c, f, i, l) en comparació amb els homes injectats de metanfetamina no aparellats (p = 0.003- <0.001). Quan les dades s’expressaven com a percentatges de neurones activades per fàrmacs, el 21.1 ± 0.9% i el 20.4 ± 1.8% al nucli NAc i la closca, respectivament, el 41.9 ± 3.9% al BLA i el 49.8 ± 0.8% de les neurones ACA es van activar per sexe i Metanfetamina.

figura 5      

L’expressió de PERK induïda per sexe i FOS en neurones NAc, BLA i ACA 15 min després de l’administració de 1 mg / kg Meth. Nombres mitjans ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), i dobles (c, f, i, l) cel·les marcades al nucli de NAc (a, ...

Activació neuronal després del comportament sexual i l'administració de d-anfetamina

Per provar si els resultats anteriors eren específics de Meth, es va dur a terme un experiment addicional per estudiar l’activació neuronal de l’aparellament i de l’amf. L’anàlisi de cèl·lules etiquetades individuals i dobles per a PERK i Fos va mostrar que el comportament sexual i la posterior exposició a Amph van produir increments significatius d’immunotabelatge Fos i pERK al nucli de NAc i al shell i al BLA (figura 6; efecte d'aparellament: F (1,15) = 7.38-69.71; p = 0.016- <0.001; efecte medicament: F (1,15) = 4.70-46.01; p = 0.047- <0.001). A més, el nombre de neurones marcades dualment va ser significativament més gran en els homes tractats amb Amph en comparació amb els tractats amb Amph no aparellats (p = 0.009- <0.001) o en tractaments salins aparellats (p = 0.015- <0.001) homes (Figura 6c, f, i). Quan les dades es van expressar com a percentatges de neurones activades per fàrmacs, 25.7 ± 2.8% i 18.0 ± 3.2% al nucli de NAc i shell, respectivament, i 31.4 ± 2.0% de neurones BLA van ser activades tant per aparellament com per Amph. La regió ACA del mPFC va mostrar nivells significatius de Fos (induïts per l'aparellament)Figura 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Tanmateix, a diferència de Meth, Amph no va donar lloc a augments significatius dels nivells de PERK induïts per medicaments a l’ACA (Figura 6k) o el nombre de neurones amb etiqueta dual a l’ACA (Figura 6l) en comparació amb els mascles inyectats amb solució salina, igualats i no units.

figura 6      

Expressió de PERK induïda per sexe Fos i Amph a neurones NAc, BLA i ACA 15 min després de l'administració de 5 mg / kg Amph. Nombres mitjans ± sem de Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k), i dobles (c, f, i, l) cel·les marcades al nucli de NAc (a, ...

DISCUSSIÓ

L’estudi actual demostra a nivell cel·lular un solapament entre l’activació neuronal pel comportament sexual del reforç natural i el mètode de psicostimulant. Per tant, aquestes dades mostren que no només les drogues actuen sobre les mateixes regions del cervell que regulen la recompensa natural, sinó que, de fet, les drogues activen les mateixes cèl·lules implicades en la regulació de la recompensa natural. Concretament, es va demostrar aquí que el comportament sexual i Meth van co-activar una població de neurones en el nucli de NAc i la closca, BLA i la regió ACA del mPFC, identificant llocs potencials on Meth pot influir en el comportament sexual.

La conclusió actual que el comportament sexual i l'administració de Meth activen poblacions superposades de neurones al NAc, BLA i ACA és en contrast amb els resultats d'altres estudis que mostren que diferents poblacions de neurones NAc codifiquen la droga i la recompensa natural.

Concretament, els estudis electrofisiològics que van comparar l’activació neuronal durant l’autoadministració de recompenses naturals (aliments i aigua) i la cocaïna intravenosa han indicat que l’autoconstrucció de la cocaïna va activar una població diferent de no obsoletes que generalment no va respondre durant l’acció operant per l’aigua. i reforç dels aliments (92%). Només el 8% de les neurones accumbal va mostrar activació tant per cocaïna com per recompensa natural (Carelli et al., 2000).

En canvi, la majoria (65%) de la cèl·lula de la NAc va mostrar activació per diferents recompenses naturals (menjar i aigua), fins i tot si un reforç era més saborós (sacarosa) (Roop et al., 2002).

Diversos factors poden haver contribuït a la discrepància amb els resultats actuals. En primer lloc, es van utilitzar diferents enfocaments tècnics per investigar l’activitat neuronal. L’estudi actual va utilitzar un mètode neuroanatòmic per a la detecció d’activació neuronal concurrent per dos estímuls diferents utilitzant immunocitoquímics fluorescents dobles per a Fos i PERK, permetent la investigació de l’activació de cèl·lules individuals a grans franges d’àrees cerebrals. Per contra, els estudis realitzats per Carelli i els companys de feina van utilitzar enregistraments electrofisiològics restringits al NAc dels animals que es comportaven per tractar si l'autoadministració de fàrmacs d'abús activa el mateix circuit neural utilitzat per les recompenses naturals.

En segon lloc, l'estudi actual va investigar una diferència natural diferent, és a dir, el comportament sexual en comparació amb els estudis anteriors, que utilitzaven menjar i aigua en les rates restringides (Carelli, 2000). El menjar i l’aigua poden tenir un valor menys gratificant que l’aparellament. El comportament sexual és molt gratificant i les rates formen ràpidament el CPP a la copulació (Agmo i Berenfeld, 1990, Martínez i Paredes, 2001, Tenk, 2008). Tot i que les rates amb dieta limitada formen CPP per aigua (Agmo et al., 1993, Perks i Clifton, 1997) i menjar (Perks i Clifton, 1997), dLes rates no restringides consumeixen preferentment i formen CPP per a menjar més saborós (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

En tercer lloc, els nostres estudis van incloure diferents medicaments d'abús en comparació amb estudis anteriors, utilitzant metanfetamina i anfetamina en lloc de cocaïna. Els resultats actuals demostren que concretament Meth i, en menor mesura, l’amfetamina, van provocar l’activació de neurones també activades per la conducta sexual. És possible que l’experiència de drogues també hagi tingut un paper important en les nostres conclusions. Els estudis actuals van utilitzar animals amb experiència sexual, però amb drogues, ingenus. Per contra, els estudis electrofisiològics de Carelli i els companys de treball van utilitzar animals "ben entrenats" que van rebre exposicions repetides a la cocaïna.

Per tant, és possible que l’activació induïda per mètodes de neurones activada per comportament sexual quedi modificada en rates experimentades amb drogues. No obstant això, els estudis preliminars del nostre laboratori suggereixen que és improbable que l’experiència de drogues sigui un factor important, ja que el comportament sexual i el tractament de metat en homes amb tractament crònic amb Meth co-activen percentatges similars de neurones activades per drogues, com es va informar en l’estudi actual (20.3 ± 2.5% en nucli NAc i 27.8 ± 1.3% en shell NAc; Frohmader i Coolen, observacions no publicades).

Finalment, l’estudi actual va investigar l’acció “directa” de les drogues que utilitzen l’administració passiva. Per tant, l’anàlisi actual no revela informació sobre circuits neuronals implicats en la recerca de fàrmacs o senyals associades a la recompensa de medicaments, sinó que revela l’activitat neuronal causada per l’acció farmacològica de la droga. En els estudis electrofisiològics anteriors, l’activitat neuronal de la NAc que es produeix en qüestió de respostes reforçades no és el resultat de l’acció farmacològica de la cocaïna, sinó que depèn en gran mesura dels factors associatius del paradigma d’administració pròpia (Carelli, 2000, Carelli, 2002). En concret, l'activitat neuronal de la NAc està influïda per presentacions independents de la resposta d'estímuls associats amb el lliurament de cocaïna per via intravenosa, així com per contingències instrumentals (és a dir, pressionant la palanca) inherents a aquest paradigma conductual (Carelli, 2000, Carelli i Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli i Wightman, 2004). En resum, els nostres resultats de la co-activació per recompensa natural i de fàrmacs poden ser específics per a l’activació per comportament sexual i per administració passiva de Meth i Amph.

Les poblacions de neurones que coincideixen amb el mètode i el sexe se superposen en el nucli de NAc i cobreixen de manera depenent de la dosi. Les neurones co-activades a la NAc poden intervenir en efectes potencials de Meth sobre la motivació i les propietats gratificants del comportament sexual, ja que les lesions del NAc interrompen el comportament sexual (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). A més, aquestes neurones són potencialment un lloc per a efectes farmacològics dependents de la dosi en l'aparellament, ja que la menor dosi de Met (1 mg / kg) va reduir el nombre de cèl·lules dual marcades per 50% en comparació de la dosi més alta de Meth (4 mg / kg). Tot i que aquest estudi no identifica el fenotip químic de neurones co-activades, estudis anteriors han demostrat que l’expressió de pERK i Fos induïda per medicaments depèn tant dels receptors de dopamina (DA) com de glutamat (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Tot i que no està clar si l’activació neuronal induïda per l’aparellament a la NAc depèn d’aquests receptors, això s’ha demostrat en altres regions del cervell, particularment a l’àrea preoptica medial (Lumley i Hull, 1999, Dominguez i col., 2007). TMeth, pot actuar sobre neurones també activades durant el comportament sexual mitjançant l’activació de receptors de dopamina i glutamat. El paper del glutamat de NA en el comportament sexual actualment no està clar, però està ben establert que la DA juga un paper crític en la motivació del comportament sexual (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Els estudis de microdialisi van reportar increments de eflux de NAc DA durant les fases apetitives i consumidores del comportament sexual masculí (Fiorino i Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) i el efluvi de mesolímbic DA ha estat correlacionat amb la facilitació de la iniciació i el manteniment del comportament sexual de les rates (Pfaus i Everitt, 1995). A més, els estudis de manipulació de DA mostren que els antagonistes de DA al NAc inhibeixen el comportament sexual, mentre que els agonistes faciliten la iniciació del comportament sexualr (Everitt et al., 1989, Pfaus i Phillips, 1989). Així, Meth pot afectar la motivació del comportament sexual mitjançant l’activació dels receptors DA.

A diferència del NAc, el nombre de cèl·lules d’etiquetatge dual al BLA i l’ACA es va mantenir relativament sense canvis, independentment de la dosi Meth. El BLA és fonamental per a l'aprenentatge associatiu discret i està fortament implicat en el reforç condicionat i l'avaluació premiada durant la resposta instrumental (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Vegeu, 2002). Les rates BLA amb lesions mostren una disminució de la palanca prement per a estímuls condicionats emparellats amb aliments (Everitt et al., 1989) o reforç sexual (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). En canvi, aquesta manipulació no afecta la fase de consumació del comportament sexual i alimentari (Cardinal et al., 2002). El BLA també juga un paper clau en la memòria dels estímuls condicionats associats als estímuls de les drogues (Grace i Rosenkranz, 2002, Laviolette i Grace, 2006). Les lesions o inactivacions farmacològiques del BLA bloquegen l’adquisició (Whitelaw et al., 1996) i expressió (Grimm i See, 2000) Rehabilitació de cocaïna condicionada, sense afectar el procés d’administració de drogues. A més, Amph infós directament a la BLA produeix una reincorporació de drogues potenciada en presència dels senyals condicionats (Vegeu et al., 2003). Per tant, és possible que la transmissió de DA augmentada de psicoestimulants a la BLA produeixi una recerca emocional i potenciada (Ledford et al., 2003) de recompensa sexual, de manera que contribueixen a millorar el desig sexual i el desig que informen els maltractadors de Meth (Semple et al., 2002, Verd i Calcidi, 2006).

A l’ACA, l’activació neuronal de neurones activades pel sexe era independent de la dosi i específica per a Meth, ja que no es va observar amb Amph. Tot i que Meth i Amph tenen propietats estructurals i farmacològiques similars, Meth és un psicoestimulant més potent que Amph amb efectes més duradors (NIDA, 2006). Estudis de Goodwin et al. va demostrar que Meth genera un eflux de DA més gran i inhibeix la depuració de la DA aplicada localment de manera més efectiva en el NAc de la rata que Amph. Aquestes característiques podrien contribuir a les propietats addictives de Meth en comparació amb Amph (Goodwin et al., 2009) i potser les diferències d’activació neuronal observades entre les dues drogues. Tanmateix, no està clar si els diferents patrons de resultats es deuen a diferències d’eficàcia entre els medicaments o els problemes de potència relacionats amb les dosis emprades i es requereix una investigació més detallada.

La co-activació per Meth i sexe no es va observar en altres subregions del mPFC (IL i PL). A la rata, l’ACA ha estat àmpliament estudiada utilitzant tasques apetitives, donant suport a un paper en les associacions d'estímul-reforç (Everitt et al., 1999, Vegeu, 2002, Cardinal et al., 2003). Hi ha prou evidència que el mPFC està involucrat en l’anhel de drogues i en la recaiguda a la recerca de drogues i al comportament de presa de drogues tant en humans com en rates (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin i See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas i Volkow, 2005). JoEn línia amb això, s’ha proposat que la disfunció de mPFC causada per l’exposició repetida a fàrmacs d’abús pot ser responsable de reduir el control d’impuls i augmentar el comportament dirigit per medicaments, com s’ha observat a molts addictes. (Jentsch i Taylor, 1999). Les dades recents del nostre laboratori han demostrat que les lesions de mPFC resulten en la recerca continuada de comportaments sexuals quan es va associar amb un estímul aversiu. (Davis et al., 2003). Tot i que aquest estudi no va investigar l’ACA, dóna suport a la hipòtesi que l’MPFC (i l’ACA específicament) medien els efectes de Meth en una pèrdua de control inhibidor del comportament sexual, segons els informats per Meth abusers (Salo et al., 2007).

En conclusió, tots aquests estudis constitueixen un primer pas crític cap a una millor comprensió de com les drogues d’abús actuen sobre vies neuronals que normalment actuen com a mediadors naturals. A més, aquestes troballes il·lustren que, a diferència de la creença actual que les drogues d'abús no activen les mateixes cèl·lules del sistema mesolímbic com a recompensa natural, Meth i, en menor mesura, Amph, activen les mateixes cèl·lules que el comportament sexual. Al seu torn, aquestes poblacions neuronals co-activades poden influir en la recerca de recompensa natural després de l'exposició a la droga. Finalment, els resultats d’aquest estudi poden contribuir significativament a entendre la base de l’addicció en general. Les comparacions de les similituds i diferències, així com les alteracions de l’activació neural del sistema mesolímbic provocades pel comportament sexual contra les drogues d’abús poden conduir a una millor comprensió de l’abús de substàncies i les alteracions associades a la recompensa natural.

Agraïments

Aquesta investigació va comptar amb el suport de subvencions dels Instituts Nacionals de Salut R01 DA014591 i Instituts de Recerca en Salut de Canadà RN 014705 a LMC.

ABREVIACIONS

  • abecedari
  • complex avidina-biotina-peroxidasa de rave
  • ACA
  • àrea cingulada anterior
  • Amph
  • d-anfetamina
  • BLA
  • amígdala basolateral
  • BNSTpl
  • nucli posterolateral del llit de l'estria terminalis
  • BNSTpm
  • nucli del llit posteromedial de l'estria terminalis
  • BT
  • tiramida biotinilada
  • CeA
  • amígdala cental
  • CPP
  • preferència de lloc condicionat
  • E
  • ejaculació
  • EL
  • latència de l'ejaculació
  • IF
  • àrea infralímbica
  • IL
  • latència de la intromissió
  • IM
  • intromissió
  • M
  • muntar
  • MAP Kinase
  • proteïna quinasa activada per mitogen
  • MEApd
  • amígdala medial posterodorsal
  • Meth
  • metamfetamina
  • ML
  • latència de muntatge
  • mPFC
  • escorça prefrontal medial
  • NMP
  • nucli preòptic medial
  • NAc
  • nucli Accumbens
  • PB
  • tampó fosfat
  • PBS
  • solució salina tamponada amb fosfat
  • PEI
  • interval ejaculatori
  • PERK
  • MAP Kinase fosforilat
  • PL
  • àrea prelimbic
  • VTA
  • àrea tegmental ventral

Notes al peu

Exempció de responsabilitat de l'editor: Aquest és un fitxer PDF d'un manuscrit inèdit que ha estat acceptat per a la publicació. Com a servei als nostres clients, oferim aquesta primera versió del manuscrit. El manuscrit se sotmetrà a la correcció, la composició i la revisió de la prova resultant abans que es publiqui en el seu formulari final. Tingueu en compte que durant el procés de producció es poden descobrir errors que podrien afectar el contingut i que pertanyen a les revistes legals que s’apliquen a la revista.

referències

  1. Agmo A. Comportament sexual masculí de rata. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203 – 209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Propietats de reforç de l'ejaculació en la rata masculina: paper dels opiacis i dopamina. Behav Neurosci. 1990; 104: 177 – 182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Pàdua M, Velázquez G. Recompensa i reforç produïts per l'aigua potable: Paper dels opioides i subtipus de receptors de dopamina. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. El comportament sexual i els senyals ambientals associats al sexe activen el sistema mesolímbic de les rates mascles. Neuropsicofarmacologia. 2004; 29: 718 – 730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Augment de l’expressió de c-fos a l’àrea preoptica medial després de l’aparellament de les rates masculines: el paper de les entrades aferents de l’amigdala medial i del camp tegmental central del cervell mig. Neurociència. 1992; 50: 627 – 646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Un paper per a l'escorça prefrontal a la recuperació de la cocaïna a l'estrès i la cocaïna a la recerca de cocaïna. Psicofarmacologia (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Cardenal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emoció i motivació: el paper de l’amígdala, l’estria ventral i l’escorça prefrontal. Neurociències i ressenyes de comportament biològic. 2002; 26: 321-352. [PubMed]
  8. Cardinal RN, JA Parkinson, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Paper de l'escorça cingulada anterior en el control del comportament per estímuls condicionats de Pavlovià a les rates. Neurociència del comportament. 2003; 117: 566 – 587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Activació del tret de cèl·lules accumbens per estímuls associats amb el lliurament de cocaïna durant l'autogestió. Sinapsis. 2000; 35: 238 – 242. [PubMed]
  10. Carelli RM. El nucli accumbens dispara cèl·lules durant els comportaments dirigits a objectius per a la cocaïna enfront del reforç "natural". Fisiologia i comportament. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Activació selectiva de les neurones accumbens mitjançant estímuls associats a la cocaïna durant un programa d’aigua / cocaïna múltiple. Recerca en cervell. 2001; 907: 156 – 161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Evidència que els circuits neuronals separats al nucli accumbens codifiquen la cocaïna contra la recompensa "natural" (aigua i alimentació). J Neurosci. 2000; 20: 4255 – 4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Microcircuit funcional en la dependència de drogues subjacents: perspectives de senyalització en temps real durant el comportament. Opinió actual sobre neurobiologia. 2004; 14: 763 – 768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. La codificació selectiva de cocaïna contra recompenses naturals per part de les neurones del nucli accumbens no està relacionada amb l'exposició crònica a medicaments. J Neurosci. 2003; 23: 11214 – 11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, DJ Woodward. Les respostes neuronals en l'escorça prefrontal i el nucli accumbens durant l'autogestió de l'heroïna a les rates que es mouen lliurement. Brain Res. 1997; 754: 12 – 20. [PubMed]
  16. Chen BT, MS Bowers, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. La cocaïna, però no l'administració natural de la recompensa ni la infusió passiva de cocaïna, produeix LTP persistent a la VTA. Neurona. 2008; 59: 288 – 297. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Activitat millorada de Cdk5 i translocació de p35 en l'estries ventral de rates tractades de metamfetamina aguda i crònica. Neuropsicofarmacologia. 2004; 30: 538 – 549. [PubMed]
  18. Childress AR, PD de Mozley, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, CP O'Brien. Activació límbica durant el desig de cocaïna induït. Am J Psychiatry. 1999; 156: 11 – 18. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. L’anfetamina augmenta la fosforilació de la quinasa regulada per senyals extracel·lulars i els factors de transcripció en l’estriat de la rata a través dels receptors metabotròpics del grup I de glutamat. Neuropsicofarmacologia. 2002; 27: 565 – 575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII regula la fosforilació ERK1 / 2 induïda per les amfetamina en neurones estriatals. Neuroreport. 2002; 13: 1013 – 1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Societat per a la Neuroendocrinologia del comportament. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: hormones i comportament; 2003. Les lesions de l'escorça prefrontal medial no interrompen el comportament sexual de les rates mascles; p. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Les drogues consumides pels humans augmenten preferentment les concentracions de dopamina sinàptica al sistema mesolímbic de rates que es mouen lliurement. Proc Natl Acad Sci EUA A. 1988; 85: 5274 – 5278. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. L'aparellament activa els receptors NMDA a la zona preoptica medial de les rates mascles. Neurociència del comportament. 2007; 121: 1023 – 1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Predictors de la presa de riscos sexuals entre nous usuaris de drogues Revista de recerca sexual. 2006; 43: 318 – 327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmacoteràpia de la metamfetamina: una actualització. Abús de substàncies. 2008; 29: 31 – 49. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Motivació sexual: una anàlisi neural i conductual dels mecanismes subjacents a les respostes apetitives i copuladores de les rates mascles. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217 – 232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interaccions entre l'amígdala i l'estri ventral en associacions d'estímul-recompensa: estudis que utilitzen un programa de segon ordre de reforç sexual. Neurociència. 1989; 30: 63 – 75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Estudis de comportament instrumental amb reforç sexual en rates masculines (Rattus norvegicus): I. Control per estímuls visuals breus aparellats amb una femella receptiva. J Comp Psychol. 1987; 101: 395 – 406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, JA Parkinson, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Processos associatius en addicció i premiació del paper dels subsistemes estriatals de l'amígdala-ventral. Anals de l'Acadèmia de Ciències de Nova York. 1999; 877: 412 – 438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Estudis de comportament instrumental amb reforç sexual en rates masculines (Rattus norvegicus): II. Efectes de lesions pròpies de la zona, castració i testosterona. J Comp Psychol. 1987; 101: 407 – 419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, vegeu RE. El neurocircuitri de l’addicció: una visió general. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261 – 274. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Expressió de mRNA c-fos evocada per anfetamina en el caudat-putamen: els efectes dels antagonistes dels receptors DA i NMDA varien en funció del fenotip neuronal i del context ambiental. Journal of Neurochemistry. 2003; 86: 33 – 44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Els canvis dinàmics del nucli accumbens a l'eflux de la dopamina durant l'efecte Coolidge en rates mascles. J Neurosci. 1997; 17: 4849 – 4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitació del comportament sexual i eflux de dopamina millorat en el nucli accumbens de les rates masculines després de la sensibilització conductual induïda per la D-anfetamina. J Neurosci. 1999a; 19: 456 – 463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitació del comportament sexual en rates rates després de la sensibilització del comportament induïda per d-anfetamina. Psicofarmacologia. 1999b; 142: 200 – 208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamina i metamfetamina afecten diferencialment els transportistes de dopamina en Vitro i Vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978 – 2989. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulació de les respostes condicionades de les neurones amigdals basolaterals. Fisiologia i comportament. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, ED de Londres, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Activació de circuits de memòria durant el desig de cocaïna. Proc Natl Acad Sci EUA A. 1996; 93: 12040 – 12045. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  39. AI verda, Halkitis PN. Metamfetamina de cristall i socialitat sexual en una subcultura urbana gai: una afinitat electiva. Cultura, salut i sexualitat. 2006; 8: 317-333. [PubMed]
  40. Grimm JW, vegeu RE. Dissociació de nuclis líbics primaris i secundaris de recompensa en un model animal de recaiguda. Neuropsicofarmacologia. 2000; 22: 473 – 479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Les interaccions hormonal-neurotransmissores en el control del comportament sexual. Recerca sobre cervell conductual. 1999; 105: 105 – 116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportament sexual masculí. A: Pfaff DW, et al., Editors. Hormones Brain and Behavior. San Diego, CA: Elsevier Science (EUA); 2002. pp. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamina i serotonina: influències en el comportament sexual masculí. Fisiologia i comportament. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda I, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efectes de l’administració única i repetida de metamfetamina o morfina sobre l’expressió dels gens neuroglucans C al cervell de la rata. The International Journal of Neuropsychopharmacology. 2006; 9: 407 – 415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Preferències de lloc condicionades (CPP) a "snacks" d’alt contingut calòric en soques de rata amb tendència genètica vs. resistents a l'obesitat provocada per la dieta: resistència al bloqueig de naltrexone. Farmacologia Bioquímica i Comportament. 2007; 86: 699 – 704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Els efectes de l’antagonisme opioide en les preferències dels llocs condicionats als menjars. Farmacologia Bioquímica i Comportament. 2006; 83: 257 – 264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivitat resultant de la disfunció frontostriatal en l’abús de drogues: implicacions per al control del comportament per estímuls relacionats amb la recompensa. Psicofarmacologia (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Les bases neuronals de l'addicció: una patologia de la motivació i l'elecció. Am J Psychiatry. 2005; 162: 1403 – 1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Memòria i addicció: circuits neuronals compartits i mecanismes moleculars. Neurona. 2004; 44: 161 – 179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Funcions oposades del nucli accumbens i de l'àrea hipotàlàmica lateral anterior en el control del comportament sexual en la rata masculina. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698 – 704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Els cannabinoides potencien la plasticitat de l'aprenentatge emocional en les neurones del còrtex prefrontal medial a través de les aportacions de l'amígdala basolateral. J Neurosci. 2006; 26: 6458 – 6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, vegeu RE. Rehabilitació potent del comportament que busca la cocaïna després de la infusió de D-anfetamina a l’amígdala basolateral. Neuropsicofarmacologia. 2003; 28: 1721 – 1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Les exposicions repetides s'intensifiquen en lloc de disminuir els efectes gratificants de l'anfetamina, la morfina i la cocaïna. Psicofarmacologia (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Comportament sexual en rates mascles després de les lesions amb radiofreqüència o dopamina en el nucli accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585 – 592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. La serotonina hipotalàmica lateral inhibeix la dopamina del nucli accumbens: implicacions per a la sacietat sexual. J Neurosci. 1999; 19: 7648 – 7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Efectes d’un antagonista de D1 i d’experiència sexual sobre la immuno-reacció similar a Fos que es produeix en la copulació en el nucli preoptic medial. Recerca en cervell. 1999; 829: 55 – 68. [PubMed]
  57. Martínez I, Paredes RG. Només l’aparell de ritme propi és gratificant en les rates de tots dos sexes. Horm Behav. 2001; 40: 510 – 517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, vegeu RE. La inactivació selectiva de l'escorça prefrontal dorsomedial i l’amígdala basolateral atenua el restabliment d’una determinada condició de comportament de cerca de cocaïna extingida en rates. Psicofarmacologia (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Facilitació de comportaments sexuals en la rata masculina en presència d'estímuls prèviament emparellats amb injeccions sistèmiques de morfina. Farmacologia Bioquímica i Comportament. 1990; 35: 367 – 372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda I, Nabeshima T. Normes de recompensa de metamfetamina mitjançant quinasa de senyalització 1 / 2 / ets, regulada per la senya extracel·lular, mitjançant l’activació de la dopamina NIDA ( Sèrie d’informe d’investigació: abús de metamfetamina i informació addicional 1 NIH Número de publicació 2006-06. [PubMed]
  61. Avantatges SM, Clifton PG. Revaloració del reforç i preferència de lloc condicionada. Fisiologia i comportament. 1997; 61: 1-5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Camins del desig sexual. Journal of Sexual Medicine. 2009; 6: 1506 – 1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. La psicofarmacologia del comportament sexual. A: Bloom FE, Kupfer DJ, editors. Psicofarmacologia: la quarta generació de progrés. Nova York: Raven; 1995. pp. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implicacions de la inducció genètica immediata-precoç del cervell després de l'estimulació sexual dels rosegadors femenins i masculins. Butlletí Brain Research. 1997; 44: 397 – 407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condicionament i comportament sexual: una revisió. Horm Behav. 2001; 40: 291 – 321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Efectes diferencials dels antagonistes dels receptors de dopamina sobre el comportament sexual de les rates mascles. Psicofarmacologia. 1989; 98: 363 – 368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. El sistema de dopamina mesolímbica: la via comuna final per a l'efecte reforçant de les drogues d'abús? Neurociències i ressenyes de comportament biològic. 2006; 30: 215-238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. L’experiència sexual indueix la plasticitat funcional i estructural del sistema mesolímbic. Psiquiatria biològica. 2009 En premsa.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, RA sàvia. Les fluctuacions de la dopamina al nucli accumbens durant el manteniment, l'extinció i el restabliment de l'autoadministració de D-anfetamina per via intravenosa. J Neurosci. 1999; 19: 4102 – 4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Drogues i efectes sexuals: paper del tipus de droga i gènere. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 103 – 108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, LJ Atkinson, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. El comportament sexual augmenta l’expressió de c-fos en el cervell anterior del mascle. Brain Res. 1991; 564: 352 – 357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Activitat Accumbens durant un programa múltiple per reforçar l'aigua i la sacarosa a les rates. Sinapsis. 2002; 43: 223 – 226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki I, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Control atencional i nivells de metabolisme cerebral en maltractadors de metamfetamina. Psiquiatria biològica. 2007; 61: 1272 – 1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. La metamfetamina i l'èxtasi cristal·litzats difereixen en relació amb el sexe insegur entre els joves gai. Revista canadenca de salut pública. 2005; 96: 340 – 343. [PubMed]
  75. Vegeu RE. Substrats neuronals de recaiguda condicionada per conduir a la recerca de drogues. Farmacologia Bioquímica i Comportament. 2002; 71: 517 – 529. [PubMed]
  76. Vegeu RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drug Addiction, Relapse i Amygdala. Anals de l'Acadèmia de Ciències de Nova York. 2003; 985: 294 – 307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivacions associades a l'ús de metamfetamina entre homes VIH que tenen sexe amb homes. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 149 – 156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. El model de restabliment de la recaiguda farmacèutica: història, metodologia i resultats principals. Psicofarmacologia (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilització cap als efectes gratificants condicionats de la cocaïna: característiques farmacològiques i temporals. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808 – 815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilització cap als efectes gratificants condicionats de la morfina: farmacologia i característiques temporals. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33 – 39. [PubMed]
  81. Somlai AM, JA Kelly, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Predictors de comportaments de risc sexual per VIH en una mostra comunitària d'home i de dones que utilitzen drogues per injecció. SIDA i comportament. 2003; 7: 383 – 393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Utilització de metamfetamina i comportaments de risc sexual als estudiants de secundària dels EUA: resultats d'una enquesta de comportament de risc nacional. Ciències de la prevenció. 2007; 8: 103 – 113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efectes dels receptors de dopamina i NMDA a l'expressió de Fos induïda per la cocaïna en l'estri de les rates Fischer. Recerca en cervell. 2008; 1243: 1 – 9. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, editor. Mapes cerebrals: estructura del cervell de rata. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Gerra KK, Coolen LM. Recompensa sexual en rates masculines: efectes de l’experiència sexual sobre la preferència d’un lloc condicionat associat a ejaculacions i intromissions. Horm Behav. 2008 [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Pàgines C, MJ Besson, Maldonado R, Caboche J. Implicació de la cascada de cinasa regulada per senyal extracel·lular per a propietats gratificants de cocaïna. J Neurosci. 2000; 20: 8701 – 8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pàgines C, Herve D, Girault, Caboche J. Les drogues addictives i no addictives indueixen patrons diferents i específics d'activació de ERK en el cervell del ratolí. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826 – 1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, P Svenningsson, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, PJ de Lombroso, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. La regulació d'una cascada de proteïna fosfatasa permet signes convergents de dopamina i glutamat per activar ERK en l'estria. Proc Natl Acad Sci EUA A. 2005; 102: 491 – 496. [Article gratuït de PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Alteracions de la transmissió dopaminèrgica i glutamatèrgica en la inducció i expressió de la sensibilització del comportament: una revisió crítica dels estudis preclínics. Psicofarmacologia (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Activació neuronal després del comportament sexual en el cervell de rata masculí i femení. Recerca sobre cervell conductual. 1998; 92: 181 – 193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Les lesions excitotòxiques de l’amígdala basolateral perjudiquen l’adquisició de comportaments que busquen la cocaïna sota un programa de reforç de segon ordre. Psicofarmacologia. 1996; 127: 213 – 224. [PubMed]
  92. RA sàvia. Neurobiologia de l'addicció. Opinió actual sobre neurobiologia. 1996; 6: 243 – 251. [PubMed]