font
Wagoner Centre for Alcoholism and Addicció Investigació, Institut de Neurociència, Universitat de Texas a Austin, Austin, TX, 78712, EUA. [protegit per correu electrònic].
abstracte
RESUM:
ANTECEDENTS:
La impossibilitat de reduir o regular la ingesta d’alcohol és un símptoma característic dels trastorns d’ús d’alcohol. La investigació sobre nous models de comportament i genètics de canvis en l’experiència induïts per l’experiència augmentarà el nostre coneixement sobre els trastorns d’ús d’alcohol. Es van observar prèviament comportaments d’autogestió d’alcohol diferents en comparar dues soques híbrides de ratolins F1: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) mostren una preferència alcohòlica reduïda després d’experiència amb altes concentracions d’alcohol i períodes d’abstinència mentre que C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) mostren preferències d'alcohol sostingudes. Aquests fenotips són interessants, ja que aquests híbrids demostren l’aparició d’additivitat genètica (BxN) i la sobredinència (BxF) en la ingesta d’etanol en forma dependent de l’experiència.
Concretament, BxF mostra una preferència alcohòlica sostinguda i BxN mostra una preferència alcohòlica reduïda després de l'experiència amb altes concentracions d'etanol; no obstant això, l’experiència amb baixes concentracions d’etanol produeix preferència alcohòlica sostinguda per als dos híbrids.
En el present estudi, vam provar la hipòtesi que aquests fenotips estan representats per la producció diferencial del factor de transcripció induïble, ΔFosB, en regions cerebrals de recompensa, aversió i estrès.
RESULTATS:
Els canvis en la plasticitat neuronal (mesurats pels nivells de BFosB) van ser dependents de l’experiència, així com de la regió cerebral i del genotip específic, donant suport encara més al fet que els circuits neuronals estiguin sota els aspectes motivacionals del consum d’etanol..
Els ratolins BxN amb una preferència alcohòlica reduïda tenien nivells baixos de osFosB en el nucli Edinger-Westphal que els ratolins que presentaven preferència alcohòlica sostinguda i augmentaven els nivells de ΔFosB a l'amígdala medial central en comparació amb els ratolins control.
Els ratolins BxN amb preferència alcohòlica sostinguda van mostrar nivells més alts de FosB a l'àrea tegmental ventral, Nucli Edinger-Westphal i amígdala (divisions centrals i laterals).
A més, a Ratolins BxN in Els nivells de FOSB al nucli d'Edinger-Westphal i les regions tegmentals ventrales es van relacionar significativament positivament amb la preferència i la ingesta d'etanol. A més, l'anàlisi jeràrquica de clúster va revelar que molts ratolins sense etanol amb nivells globals de ΔFosB baixos es troben en un clúster, mentre que molts ratolins que mostren preferència alcohòlica sostinguda amb nivells elevats de ΔFosB en general es troben en un clúster.
CONCLUSIONS:
Comparant i contrastant dos fenotips alcohòlics, aquest estudi demostra que els circuits relacionats amb la recompensa i l'estrès (incloent el nucli Edinger-Westphal, l'àrea tegmental ventral, l’amígdala) experimenten una plasticitat important que es manifesta com a preferència alcohòlica reduïda.
Fons
Hi ha factors de susceptibilitat coneguts, mediambientals i genètics, associats a l'abús d'alcohol i l'alcoholisme. La capacitat de beure abundant quantitat d'alcohol amb poques conseqüències per a l'individu és un símptoma primordial en molts alcohòlics, el que indica que un baix nivell de resposta a l'alcohol és un factor important de vulnerabilitat en el desenvolupament de l'alcoholisme [1,2]. La definició de factors neurobiològics que contribueixin a la moderació de l’alcohol ajudarà a entendre l’ús i l’abús de l’alcohol, i és una estratègia eficaç per al desenvolupament de tractaments millorats per a persones diagnosticades de trastorns d’alcoholisme. L’ús de models de rosegadors per imitar malalties humanes ha estat una poderosa eina per avançar en entendre aquesta malaltia i millorar els tractaments. Existeixen diversos models de rosegadors per estudiar aspectes de l’abús de l’alcoholisme i l’alcoholisme, però no modela l’alcoholisme completament. El grau en què un ratolí s'autocontrolarà oralment amb solucions d’etanol en condicions ambientals similars depèn en gran mesura del seu fons genètic [3].
Recentment, hem trobat que els ratolins híbrids C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) i FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) s'autogestionen amb nivells inusuals d’alcohol durant les proves de preferència de dues ampolles (les dones consumeixen 1 – 20 g / kg / dia i els mascles 35 – 7 g / kg / dia, depenent de la concentració i el paradigma) [4]. Aquest nou model genètic té un avantatge significatiu en comparació amb les soques consanguines existents, incloent proves d’un fenotip sobredominant i el consum d'alcoholèmia en nivells elevats de sang.4]. A més, l’elevat consum d’etanol mostrat pels ratolins BxF es veu en dos paradigmes addicionals de consum d’etanol (beure a la foscor i acceptar l’etanol durant l’accés de líquid programat) [4]. Després es van observar diferents comportaments d’administració pròpia de l’alcohol quan es compara dues varietats de ratolins híbrids de F1: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) mostren una preferència alcohòlica reduïda després de l’experiència amb altes concentracions d’alcohol i els períodes d’abstinència i la preferència alcohòlica de BxF5]. Utilitzant una bateria de proves de comportament, hem demostrat que BxN és més sensible que els ratolins BxF a efectes aversius i sedants, però no gratificants, de l’etanol [6].
La investigació bàsica sobre nous models de comportament i genètica de consum elevat d’alcohol i canvis en l’experiència produïts pel consum de begudes alcohòliques augmentaran els nostres coneixements sobre l’abús d’alcohol i l’alcoholisme. El fenotip de preferència alcohòlica reduïda és interessant perquè els ratolins BxN inicialment mostren una alta preferència per les solucions d’etanol. Tot i que no es coneix l’aspecte motivacional de la reducció de la ingesta d’alcohol després d’experiències amb concentracions elevades d’etanol i abstinència, els ratolins BxN es poden comparar amb els consumidors moderats d’alcohol, ja que encara consumeixen solucions d’etanol a un nivell reduït, probablement a causa d’una experiència aversiva.
El model de preferència alcohòlica sostinguda també és interessant, ja que els ratolins BxF consumeixen de manera estable nivells extremadament alts d’etanol, independentment de l’experiència anterior. La preferència alcohòlica sostinguda i reduïda pot estar relacionada amb un efecte de privació d’alcohol, un fenomen on els animals presenten un consum d’alcohol significativament augmentat després d’un període d’abstinència forçada.e [7]. L’efecte de la privació d’alcohol és un fenomen útil per estudiar l’augment de la conducta alcohòlica. Tot i que el programa experimental conegut per induir l’efecte de la privació d’alcohol és bastant diferent del que s’utilitza aquí, la comparació de la preferència alcohòlica sostinguda i reduïda cap a l’efecte de privació d’alcohol relaciona els diferents fenotips conductuals que es discuteixen aquí amb un fenomen important en els models de recerca d’alcohol de rosegadors. La reducció de la preferència alcohòlica seria el contrari d’un efecte de privació d’alcohol i es podria descriure com a absència d’un efecte de privació d’alcohol. L’ús de diversos models animals genètics, com BxF i BxN, contribueix en gran mesura al progrés del camp, ja que es creu que els trastorns d’ús d’alcohol provenen de complexes interaccions entre la genètica i el medi ambient. La identificació de l’expressió genètica immediata diferencial immediata d’aquests híbrids ofereix informació sobre els circuits cerebrals importants per a les propietats gratificants i aversives de l’etanol.
S'han estudiat etanol i altres neurocircuits relacionats amb la droga en models específics de rosegadors mitjançant marcadors moleculars de plasticitat i / o activitat neuronal.8-15]. L’etanol administrat per si mateix i experimentat per administrador no provoca mapes metabòlics cerebrals equivalents, el que suggereix que els circuits específics subordinats als efectes de reforç de l’etanol [8,9].
Un component clau, que encara no s’hagi d’explorar àmpliament en la investigació sobre l’alcohol, és l’examen de comportaments de preferència alcohòlica sostinguts i reduïts i l’identificació de circuits neuronals dedicats durant aquests comportaments. L’objectiu d’aquest experiment era identificar les regions del cervell implicades per la preferència alcohòlica sostinguda i reduïda. Com s'ha demostrat que l’administració alcohòlica crònica (juntament amb altres drogues d’abús) provoca diferències regionals cerebrals en els nivells de BFosB, vam provar la hipòtesi que aquests fenotips de comportament estan representats per la producció diferencial del factor de transcripció induïble, ΔFosB, en regions del cervell conegudes per participar en recompensa, aversió i estrès [10].
Els estímuls crònics que causen diferències regionals en els nivells de BFosB inclouen drogues d'abús (alcohol, cocaïna, anfetamina, nicotina, morfina i antipsicòtics), estrès crònic (estrès de contenció, xoc imprevisible per als peus, convulsions electroconvulsives) i rodes compulsives [11]. Com a mediador potencial d’adaptacions a llarg termini al cervell, la identificació de la variant dominant de FosB (FosB o ΔFosB) en resposta al tractament crònic d’etanol és una distinció important.
Hi ha diversos estudis que van mesurar FosB i ΔFosB després d'estímuls crònics pels quals no s'ha comprovat que ΔFosB sigui la isoforma dominant (com les descrites a continuació). No obstant això, hi ha una forta evidència que FosB, no FosB, és la isoforma dominant després d'estímuls crònics [10-12]. Un estudi realitzat per Ryabinin i Wang (1998) va descobrir que en ratolins DBA / 2J preferits amb baix contingut en alcohol, quatre dies d’injeccions repetides d’etanol van produir un augment robust de l’expressió de FosB a les següents regions cerebrals: nucli amygdaloid cortical anterior, ventral septum lateral, amígdala central , amígdala lateral, hipotàlem lateral, petxina del nucli accumbens, nucli del llit de l'estria terminal i nucli paraventricular del tàlem [13]. Els seus resultats identifiquen un neurocircuit que respon a l’etanol. L’expressió FosB també s’ha mesurat en el ratolí C57BL / 6J preferent d’alcohol elevat durant l’adquisició i el manteniment de l’autoadministració de l’etanol en condicions d’accés limitat. No es van produir canvis en els nivells de FosB durant l’adquisició d’autoadministració [14]. No obstant això, després de dues setmanes d’administració limitada d’autoadministració d’etanol, els nivells de FosB van augmentar al nucli central central de l’amígdala i del nucli d’Edinger-Westphal [15]. En general, els informes identifiquen noves regions dedicades a l’autoadministració de l’etanol, així com implicar un paper per a la via mesocorticolímbica i l’amígdala estesa.16]. Tanmateix, és important assenyalar que els canvis en els nivells de BFosB depenen de la ruta de l’administració de l’etanol, la dosi i el temps exposat a un tractament o al calendari [13-15].
Les soques de ratolí utilitzades en aquest estudi proporcionen models interessants per a la comparació de preferències alcohòliques sostingudes i reduïdes i dels mecanismes subjacents responsables d'aquestes respostes alcohòliques diferents. Aquest estudi demostra que els ratolins amb preferència alcohòlica reduïda també mostren una plasticitat significativa en circuits relacionats amb la recompensa i l'estrès (incloent el nucli Edinger-Westphal, l'àrea tegmental ventral, l'amígdala, el nucli accumbens i la còrtex cingulada).
Resultats
L'efecte de les concentracions d'alcohol i els períodes d'abstinència en l'autogestió en ratolins BxF i BxN
Per demostrar que les diferents concentracions d’etanol i / o períodes d’abstinència van canviar el consum d’etanol, es van dissenyar quatre calendaris (grups) per mesurar el consum d’etanol (figura) (Figura 1a, b).1a, b). Hi va haver quatre grups experimentals per a cada híbrid: altes concentracions, altes concentracions amb períodes d'abstinència, baixes concentracions i baixes concentracions amb períodes d'abstinència. Dades completes per a la preferència d'etanol (figura (Figure2)2) i el consum (figura (Figure3)3) Les dades (per a tots els grups i els dos genotips) es presenten com a referència. Per establir i il·lustrar els fenotips de comportament de preferència alcohòlica sostinguda i reduïda, es presenten les dades de preferència i consum de l’etanol% 9 Figures44 i and5.5. Aquests fenotips de comportament es basen en la comparació de la preferència i el consum d’etanol% de 9 a partir de la primera, segona, tercera i quarta presentació en els grups d’alta concentració i els dies experimentals corresponents per als grups de baixa concentració. Es va realitzar un ANOVA de dues vies (temps de genotip x) de preferència i consum d’etanol% de 9. Per al grup d’alta concentració, preferència d’etanol (figura (Figura4a)4a) i el consum (figura (Figura5a)5a) eren més grans per BxF que BxN, i BxF mostrava una preferència i un consum d'alcohol sostinguts, mentre que BxN presentava una preferència i un consum d'alcohol reduïts (PREFERÈNCIA D'ETANOL - interacció F (3,54) = 4.83, P <0 01, genotip F (1,54, 24.10) = 0.001, P <3,54, temps F (9.92) = 0.0001, P <1,54; CONSUM D'ETANOL - interacció N / S, genotip F (50.73) = 0.0001, P <3,54, temps F (11.68, 0.0001) = XNUMX, P <XNUMX). Per al grup amb concentracions elevades amb abstinència, preferència d’etanol (Figura (Figura 4b)4b) i el consum (figura (Figura 5b)5b) van ser majors per BxF que BxN, i BxF va mostrar una preferència i un consum d'alcohol sostinguts, mentre que BxN va mostrar una preferència i un consum d'alcohol reduïts (PREFERÈNCIA D'ETANOL - interacció F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotip F (1,132) = 250.43, P <0.0001, temps F (3,132) = 27.48, P <0.0001; CONSUM D'ETANOL - interacció F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotip F (1,132) = 510.88, P <0.0001, temps F (3,132) = 22.42, P <0.0001). Per al grup de concentracions baixes, preferència d’etanol (Figura (Figura 4c)4c) i el consum (figura (Figura 5c)5c) van ser majors per BxF que BxN, i tots dos híbrids van mostrar preferència i consum d'alcohol sostinguts (PREFERÈNCIA ETANOL - interacció N / S, genotip F (1,54) = 12.2, P <0.01, temps N / S; CONSUM ETANOL - interacció N / S, genotip F (1,54) = 74.83, P <0.0001, temps N / S). Per al grup de concentracions baixes amb abstinència, preferència d’etanol (Figura (Figura4d)4d) i el consum (figura (Figura5d)5d) van ser majors per BxF que BxN, i ambdós híbrids van presentar reduccions moderades en la preferència i el consum d’alcohol (PREFERÈNCIA ETANOL - interacció N / S, genotip F (1,132) = 166.58, P <0.0001, temps N / S; CONSUM ETANOL - interacció F (3,132) = 3.61, P <0.05, genotip F (1,132) = 480.64, P <0.0001, temps F (3,132) = 7.87, P <0.0001). En resum, en grups amb concentracions elevades (sense abstinència), BxF presentava preferència alcohòlica sostinguda, mentre que BxN mostrava preferència reduïda d’alcohol i en els grups de concentracions baixes (sense abstinència), tant BxF com B6xN presentaven preferència alcohòlica sostinguda. Atès que els fenotips d’interès es capturen millor en grups sense abstinència, són el focus de la resta de l’estudi.
.FosB Nivells
La quantificació i anàlisi de FosB es va utilitzar per identificar el neurocircuitri activat crònicament durant la preferència alcohòlica sostinguda i reduïda. Hi va haver tres grups experimentals per a cada híbrid: altes concentracions, baixes concentracions i aigua (control). Les dades de FosB es presenten com a percentatge de [FosB de neurones positives [(# de ΔFosB neurones positives) / (# de osFosB neurones positives + # de neurones positives de Nissl)] (Taula (Table1).1). Els treballs previs han demostrat que l’experiència de l’etanol pot induir la neurodegeneració [17]. Per tant, hem investigat els números neuronals en aquest estudi i no informem de diferències significatives basades en el genotip o el grup de les regions del cervell quantificades en aquest estudi. Es van realitzar les tres anàlisis següents de les dades de BFosB: 1) ANOVA de tres vies (genotip x grup x regió del cervell), 2) Es van desenvolupar matrius de correlació ANOVA (regió cerebral x grup) per a cada genotip i 3 per mapar la correlació xarxes.
Les mesures repetides ANOVA a tres bandes (genotip x grup x regió cerebral) van revelar una interacció del genotip x regió cerebral [F (15,375) = 2.01, P <.05], una interacció del grup x cervell [F (15.375) = 1.99, P <0.01], i un efecte principal de la regió cerebral [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Les mesures repetides ANOVA bidireccional (regió cerebral x grup) per a cada genotip van mostrar que hi havia un efecte principal del grup i la regió cerebral tant per BxF com per BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, efecte principal de grup; F (15,374) = 25.64, P <.0001, efecte principal de la regió cerebral; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, efecte principal del grup; F (15,360) = 23.73, P <.0001, efecte principal del genotip]. L’anàlisi post-hoc va revelar sis diferències significatives de grup per a BxN (Figura (Figura 6a-c).6AC). El percentatge de ΔFosB nivells eren més alts en el grup de concentracions baixes que al grup d'aigües de La, CeC / CeL, EW i VTA. El percentatge ΔFosB va ser més alt al grup de concentracions altes que al grup d’aigua de CeMPV. El percentatge ΔFosB va ser més alt al grup de concentracions baixes que al grup de concentracions altes a EW. Les dades de inFosB per a totes les altres regions cerebrals quantificades es presenten a la Taula Taula1.1. L'anàlisi correlacional de Pearson es va utilitzar per determinar si el% de neurones ΔFosB positives en una regió cerebral determinada es correlacionava amb el consum o la preferència d'etanol. El consum i la preferència d’etanol van mostrar una correlació positiva significativa amb% ΔFosB en EW i VTA de ratolins BxN (CONSUM D’ETANOL - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; PREFERÈNCIA ETANOL - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 per a tot).
La relació complexa entre l’expressió FosB, el genotip, la regió cerebral i el consum d’etanol s’ha explorat encara més amb l’anàlisi de components bàsics i l’agrupació jeràrquica. L’anàlisi dels components principals va revelar que la majoria de la variabilitat (~ 80%) de les dades estava representada per components 5. Després es va realitzar i ordenar l’agrupació jeràrquica no supervisada (agrupada per individus i regions del cervell) utilitzant el primer component principal (figura) (Figure7).7). L'agrupament individual va revelar patrons d'agrupament forts, però no perfectes, basats en el consum d'etanol, independentment del genotip. Molts dels ratolins sense etanol agrupats junts i mostren menys BFosB en general que la mitjana i molts dels ratolins que van mostrar una preferència alcohòlica sostinguda agrupats junts i van mostrar més overallFosB global que la mitjana. Aquests dos grups eren els més divergents. Els tres grups intermedis representaven una barreja superior a, inferior a, i mitjana de valors BFosB i fenotips bevent d'etanol.
Discussion
Es van observar diferents comportaments d’administració pròpia d’alcohol quan es van comparar dos tipus de ratolins híbrids de F1: BxN mostra una preferència alcohòlica reduïda després d’experiència amb altes concentracions d’alcohol i períodes d’abstinència, mentre que BxF mostra preferències alcohòliques sostingudes.. Els models BxF estables, de gran consum (preferència alcohòlica sostinguda) i BxN modifiquen la potència (preferència alcohòlica reduïda). La plasticitat neuronal (o activitat, mesurada pels nivells de BFosB) va ser diferent segons l’experiència de l’etanol, donant suport a un paper subjacent del circuit neuronal específic en la preferència d'alcohol sostinguda i reduïda.
Per a la soca elevada que consumeix alcohol, C57BL / 6, la preferència i el consum d’etanol depenen molt de la concentració inicial d’etanol, de la durada de l’abstinència i de la sub-cep (C57BL / 6Cr o C57BL / 6J) [7,18]. Hem trobat que la preferència d’etanol i el consum vist en ratolins BxF eren constantment més elevats (i més estables que a BxN) en els quatre diferents horaris provats. La preferència moderada d’etanol i el consum en BxN només es van mantenir amb un horari de consum crònic (baixes concentracions sense abstinència), mentre que es van observar reduccions de preferència i consum amb la resta d’horaris crònics de consum. La preferència alcohòlica reduïda per BxN ofereix un nou model d’animals en què l’experiència (presentació repetida d’etanol després d’experiència amb múltiples altes concentracions d’etanol i / o diversos períodes curts d’abstinència) redueix dràsticament la seva resposta a una concentració d’etanol prèviament molt preferida.
L’etanol autoadministrat i experimentat per administrar produeix diferents mapes metabòlics cerebrals, el que suggereix que els circuits específics subordinats als efectes de reforç de l’etanol [8,9]. Hem provat la hipòtesi que els fenotips de comportament de preferència alcohòlica sostinguts i reduïts estan representats per la producció diferencial del factor de transcripció induïble, BFosB, en regions del cervell que es coneixen com a recompensa, aversió i estrès. ΔFosB és un factor de transcripció amb una única estabilitat a llarg termini i no desensibilitza els estímuls tal com fa el c-Fos, sinó que s'acumula durant els tractaments crònics. Els augments de FosB es deuen a l'augment de l'activitat neuronal i es creu que reflecteixen la plasticitat neuronal de llarga durada. Hem trobat que el percentatge de inFosB de les neurones positives a les regions del cervell depèn del genotip (BxF i BxN) i del grup (control de l’aigua, baixes concentracions i altes concentracions).
Fo BxN, l'anàlisi post-hoc va revelar que el consum voluntari d'etanol va provocar un augment del BFosB en el nucli EW, VTA i amígdala: indicant una major plasticitat neuronal en regions del cervell que es coneix com a implicades en respostes d'etanol, recompensa i estrès. Els ratolins BxN del grup de concentracions elevades (preferència alcohòlica reduïda) han reduït la plasticitat neuronal a l'EW, suggerint que aquestes neurones responen a la ingesta d'alcohol amb una plasticitat dependent de l'experiència. Al grup de baixes concentracions (que mostren una preferència alcohòlica sostinguda), la plasticitat neuronal a l'EW és més gran que en els grups d'alta concentració i control de l'aigua. Tot i que es realitzen amb diferents paradigmes de consum d’etanol i models genètics de ratolí, els nostres resultats a l’EW dels ratolins BxN coincideixen amb els estudis previs sobre el consum d’etanol [14,15]. L’EW no preganglionar ha estat recentment caracteritzat per contenir neurones que conté urocortina perioculomotora (Ucn) [19]. Ucn1 és un pèptid similar al factor de despreniment de corticotropina (CRF) que uneix els receptors CRF1 i CRF2. Estudis previs amb mètodes genètics, farmacològics i de lesions han demostrat que Ucn1 està implicat en la regulació del consum d’alcohol.19-22]. TAquí hi ha una predisposició genètica coneguda per al consum elevat d'alcohol en rosegadors que es correlaciona amb nivells basals més alts de Ucn1 a EW i LSi [23]. Per tant, la inesperada era la manca d’importància post-hoc que vam observar a l’EW per a ratolins BxF de gran preferència i consum d'alcohol. Potser això es deu al percentatge lleugerament elevat de ΔFosB en el grup d’aigua BxF en comparació amb el grup d’aigua BxN. De fet, els percentatges de ΔFosB per a tots els ratolins que presentaven preferència alcohòlica sostinguda (grup de concentracions altes de BxF, grup de concentracions baixes de BxF i grup de concentracions baixes de BxN) eren bastant similars.
Per a BxN, el consum d’etanol a les concentracions baixes va augmentar la plasticitat neuronal a la VTA (major que en els grups d’alta concentració i control de l’aigua). La preferència i el consum d’etanol també van ser majors per al grup de concentracions baixes. La manca d’importància post-hoc que vam observar a la VTA per a ratolins BxF de preferència alcohòlica alta era inesperada i pot ser deguda a nivells basals lleugerament més alts de BFosB al grup de control de l’aigua. El percentatge de nivells de wereFosB van ser lleugerament elevats al grup d’aigua BxF en comparació amb el grup d’aigua BxN, mentre que els percentatges de ΔFosB eren bastant similars per a tots els ratolins amb preferència alcohòlica sostinguda (grup de concentracions altes de BxF, grup de concentracions baixes de BxF i grup de concentracions baixes de BxN) . El sistema de dopamina VTA juga un paper important en la mediació dels efectes de reforç de l'etanol i participa en moltes connexions recíproques importants per a comportaments relacionats amb l'etanol i la recompensa [24-26]. A més, el VTA es projecta al nucli de l’amígdala i l’EW. S'ha demostrat que les rates autoadministren etanol directament a la VTA [27]. A més, l’exposició a l’etanol augmenta la velocitat de cocció de les neurones dopaminèrgiques a l’ATV [28,29]. L’augment de la taxa d’acomiadament podria estar relacionat amb la inducció de FosB a l’ATV que vam observar després de l’administració voluntària crònica d’etanol en BxN.
La dependència de l’alcohol indueix neuroadaptacions a llarg termini, resultant en estats emocionals negatius; un mecanisme important en el reforç negatiu és la senyalització del factor que allibera la corticotropina (CRF) a l’amígdala [30]. Les manipulacions farmacològiques de les neurones del CeA s'han dirigit als receptors GABA, CRF, opioides, serotonina, dinorfina i norepinefrina [25,31-34]. GEls antagonistes de l’ABA, així com els antagonistes de la CRF, disminueixen el consum d’etanol [32,33,35]. Les lesions del CeA disminueixen l’accés continu al consum voluntari d’etanol [36]. Les nostres troballes donen suport més a un paper del CeA en la regulació del comportament de consum d'alcohol. Les neurones GABAèrgiques de l’amígdala central formen una població heterogènia que té connexions relacionades amb el seu contingut de pèptids. Aquestes neurones GABAergic integren l’activitat de sortida del CeA. Tal com es va revisar a [Wee i Koob (2010]), sEls estudis eterns han identificat un paper per als receptors opioides de dinorfina i kappa en el manteniment i escalada de l’etanole [37]. Més recentment, Walker et al han demostrat que l’antagonista del receptor κ-opiáceu, nor-binaltorfimina, dins l’amígdala estesa redueix selectivament l’autoadministració de l’etanol en animals dependents [38]. La senyalització del receptor opioide Kappa continua sent un interès clau de la investigació a la intersecció de l'estrès, la recompensa i l'aversió. També s'ha demostrat que l’autoadministració d’etanol induïda per estrès està mediada per la senyalització del receptor opioide kappa [39]. El CeA central es pot subdividir en el ventral posterior-capsular (CeL / CeC) i medial posterior. Les neurones GABAergic del CeL / CeC reben innervacions dopaminèrgiques de la VTA; Com es va assenyalar anteriorment, aquestes neurones s’activen després d’administració aguda d’etanol i mostren un augment dels ratolins BFosB que mostren preferència alcohòlica sostinguda. També vegeu Mc [Núvia (2002]) per a una excel·lent revisió sobre el CeA i els efectes de l’alcohol [40]. En el nostre estudi, els ratolins BxN amb preferència alcohòlica sostinguda (grup de concentracions baixes) van mostrar un augment de la plasticitat neuronal en els ratolins CeC / CeL i La i BxN amb preferència alcohòlica reduïda (grup de concentracions altes) que presenten un augment de la plasticitat neuronal al CeMPV. Aquests resultats suggereixen que l’experiència específica en etanol implica la plasticitat de les neurones GABAèrgiques de l’amígdala. Amb aquestes dades, juntament amb els canvis de plasticitat neuronal corresponents a VTA i EW, proposem que aquest circuit experimenti una plasticitat significativa sota condicions de preferència alcohòlica sostingudes.
Les investigacions anteriors han demostrat que els ratolins C57BL / 6J poden aconseguir nivells elevats d’alcohol de la sang a través d’una selecció de dues ampolles; no obstant, aquests nivells d’alcohol de la sang no es mantenen i sovint el consum no compleix els criteris de motivació farmacològica establerts per Dole i Gentry (1984)41,42]. Els ratolins BxN amb una preferència alcohòlica reduïda van consumir menys del que s'esperava d'un típic ratolí C57BL / 6J [1]. Per tant, encara que no hem pres mostres d’alcohol de la sang, no és probable que els ratolins BxN que mostrin una preferència reduïda d’alcohol aconseguissin nivells d’alcohol de sang rellevants farmacològicament, cosa que suggereix que les concentracions d’alcohol de sang elevades no són necessàries per induir plasticitat en aquestes regions cerebrals. És important assenyalar que també hi ha un efecte molt significatiu del grup en BxF, tot i que els resultats post-hoc (corregits per comparacions múltiples) per a regions del cervell de BxF no van indicar canvis significatius en percentatge de forFosB de neurones positives per a qualsevol regió després del consum d'etanol crònic amb aquests diferents horaris.
Per visualitzar les relacions potencials entre les variables es va realitzar un agrupament jeràrquic. El mapa de calor de l’anàlisi resultant mostra una tendència general entre els nivells de BFosB i el consum d’etanol, independentment del genotip. Els nivells més alts de FosB es van associar amb un consum elevat i els nivells baixos de FosB es van associar amb els animals de control; no obstant això, la força de la relació no era suficient per predir amb precisió els fenotips de consum basats únicament en els .FOSB.
Conclusions
Es van observar diferents comportaments d’administració pròpia d’alcohol amb dos cossos híbrids de ratolins F1: la BxN mostra una preferència alcohòlica reduïda després d’experiència amb altes concentracions d’alcohol mentre que BxF mostra preferències alcohòliques sostingudes. Els models BxF estables, de gran consum (preferència alcohòlica sostinguda) i BxN modifiquen la potència (preferència alcohòlica reduïda). Els canvis en la plasticitat neuronal (mesurats pels nivells de BFosB) depenien de l’experiència, així com de la regió i el genotip específics del cervell, i la definició de la circuiteria neuronal es basa en els aspectes motivacionals del consum d’etanol. Aquests resultats mostren que el canvi d’una línia parental en els ratolins híbrids comporta canvis en els patrons de consum d’alcohol i canvis marcats en els patrons d’expressió de FosB, el que suggereix que diferents xarxes cerebrals es dediquen a aquests diferents ratolins híbrids.
Mètodes
ètica
Aquest estudi es va dur a terme en estreta conformitat amb les recomanacions de la Guia per a la cura i ús dels animals de laboratori dels instituts nacionals de salut. El protocol va ser aprovat pel comitè institucional de cura i ús dels animals de la Universitat de Texas a Austin (AUP 2010 – 00028). Tota la cirurgia es va realitzar sota anestèsia de pentobarbital sòdic i es va fer tot el possible per minimitzar el patiment.
Animals
Els estudis es van dur a terme utilitzant ratolins híbrids F1 femenins que es creuaven derivats de C57BL / 6J i els ratolins FVB / NJ o NZB / B1NJ (BxF F1 i BxN F1, soca materna x paternitat). Els criadors C57BL / 6J, FVB / NJ i NZB / B1NJ es van comprar al Laboratori Jackson (Bar Harbor, ME) i es van aparellar a les setmanes 7-8. Els descendents van ser deslletats en grups isosexuals de cadascun dels genotips (BxF F1, BxN F1). Hem provat només ratolins femenins per facilitar la comparació amb dades recopilades anteriorment [1,5,6]. Els ratolins es van allotjar en gàbies estàndard amb menjar i aigua ad libitum. La sala de colònies i la sala de proves estaven en un cicle fosc 12 h light: 12 h (s'encén a 07: 00).
Prova de preferència d'etanol de dues ampolles
El mètode de selecció de dues ampolles es va utilitzar per determinar els patrons voluntaris d’autoadministració d’etanol en ratolins BxF femenins i BxN.1,6]. Els ratolins femenins híbrids F1 (dies 63 d'edat) es van allotjar individualment en gàbies estàndard mentre s'habituaven durant una setmana a les ampolles amb tubs de sorra que contenien aigua abans de la introducció d'una solució d'etanol. Després de la costum, els ratolins tenien accés a dues ampolles idèntiques: una amb aigua i l'altra amb una solució d'etanol. Les posicions dels tubs es van canviar diàriament per controlar les preferències de posició. Per tenir en compte el possible vessament i l'evaporació, es va restar cada dia el pes mitjà dels tubs de les gàbies de control sense ratolins. Els ratolins van ser pesats cada dia durant tota l’experiment. Tot el consum de fluids es va mesurar diàriament durant l’experiment. La quantitat d’etanol consumida i la preferència d’etanol es van calcular per a cada ratolí, i aquests valors es van fer per a totes les concentracions d’etanol. L’efecte de les concentracions d’alcohol i els períodes d’abstinència en l’autoadministració en ratolins BxF i BxN s’ha demostrat mitjançant la designació d’un grup experimental amb accés a concentracions altes (accés progressiu a solucions 4-3% d’etanol, seguit de cicles repetits de 35, 3, 9, i 18% etanol, que acaba amb una presentació final d’etanol 27%) i un altre grup amb concentracions baixes (augment de l’accés a l’etanol 9-3%, amb la resta de l’experiment realitzat amb accés a 9% d’etanol). Cadascun d’aquests grups tenia un subgrup que feia o no experimentava tres períodes d’abstinència d’una setmana. Els ratolins de control van experimentar condicions similars al mateix temps que els ratolins experimentals, però només se'ls va oferir una ampolla d'aigua.
En total, hi havia cinc grups per a cada híbrid: aigua (n = 14-16), altes concentracions (n = 10), altes concentracions amb períodes d'abstinència (n = 20), baixes concentracions (n = 10) i baixes concentracions amb períodes d'abstinència (n = 20). Consulteu la figura Figura11 per a programes detallats de grups de dos tipus d'ampolles.
ΔFosB Immunohistoquímica i quantificació
La immunohistoquímica osFosB (IHC) es va mesurar en 16 regions cerebrals de ratolins que van experimentar 72 dies d'accés continu a l'aigua (control) o a l'aigua i l'alcohol [concentracions elevades i concentracions baixes]. L’efecte de les altes concentracions sobre la preferència i el consum d’etanol va ser molt superior a l’efecte de l’abstinència; per tant, els grups que van experimentar períodes d'abstinència no van ser inclosos en les mesures de HFosB IHC. A més, l'experiment es va dur a terme més enllà de la primera aparició de preferència alcohòlica sostinguda o reduïda per mostrar que els fenotips de comportament són estables amb cicles repetits de canvis en la concentració d'etanol per examinar els efectes del consum crònic d'etanol. Quatre a vuit hores després d’eliminar l’alcohol el 73è dia de l’experiment, els ratolins van ser profundament anestesiats (175 mg / kg de pentobarbital sòdic) i perfusats intracardialment amb 20 ml de solució salina tamponada amb fosfat 0.01 M (PBS), seguida de 100 ml de 4% paraformaldehid a PBS. Els cervells es van eliminar, es van fixar en paraformaldehid al 4% a 4 ° C, incrustats en un 3% d’agarosa, seccionats (50 um, coronal) en un vibrador, col·locats en crioprotector (30% sacarosa, 30% etilenglicol i 0.1% de polivinil pirrolidona a PBS) durant la nit a 4 ° C i emmagatzemada a -20 ° C fins que es processi per IHC. Les seccions descongelades es van rentar amb PBS, es van tractar amb H0.3O2 al 2% i es van incubar durant una hora en sèrum normal de cabra al 3% per minimitzar l’etiquetatge no específic. Les seccions de teixits es van incubar durant la nit a 4 ° C en sèrum de cabra normal al 3% i anti-FosB (SC-48, dilució 1: 5000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Les seccions es van rentar, incubar en Ig de cabra biotinilada anti-conill (dilució 1: 200, Vector Laboratories, Burlingame, CA) durant una hora, es van rentar i es van incubar en complex avidina-biotina (dilució 1: 200, kit Elite-Laboratories Vector) . L’activitat de la peroxidasa es va visualitzar mitjançant la reacció amb un 0.05% de diaminobenzidina (que contenia un 0.015% d’H2O2). Les seccions de teixits eren contraposades amb Nissl (utilitzant blau de metilè / azur II). Les diapositives van ser codificades per al recompte cec. Les neurones ΔFosB-IR es van comptar a l’augment de 50X (oli) utilitzant el mètode fraccionador òptic i el programari informàtic StereoInvestigator. Informació del paràmetre de mostreig: el marc de recompte (50um x 50um x 10um) era el mateix per a totes les regions quantificades; no obstant això, es va determinar la grandària de la graella per a cada regió cerebral per assegurar-se que el nombre total de cèl·lules bilaterals seria igual a 100 – 300 per tal d'aconseguir un coeficient de variació inferior al 0.1. Les dades es van calcular com a percentatge de nuclis positius de FosB (nombre de nuclis positius ΔFosB / nombre de neurones) per a cada regió.
Els anticossos FosB utilitzats en aquest estudi (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) es van crear contra una regió interna de FosB i reconeix tant FosB com ΔFosB. Tot i que aquest anticòs reconeix tant FosB com ΔFosB, les neurones immunopositives quantificades en aquest estudi seran anomenades neurones positives de BFosB, ja que s'ha demostrat que les neurones, especialment l'alcohol, indueixen BFosB, no FosB, a les neurones. Perrotti et al. ([2008]) mesurava la inducció de BFosB (en resposta a l'administració crònica de fàrmacs d'abús, inclòs l'alcohol) utilitzant dos anticossos: un que reconeix FosB i ΔFosB (SC-48) i un selectiu per a ΔFosB (no disponible comercialment) estudiat, l’immunoreactivitat observada amb l’anticòs FosB (SC-48) és deguda a ΔFosB, ja que no van detectar cap neurona reactiva amb un anticòs selectiu per a FosB de longitud completa [10]. A més, se sap que ΔFosB s'indueix en una forma específica del tipus de regió i cèl·lula cerebral, mitjançant diversos tractaments crònics i es poden obtenir excel·lents revisions sobre aquest tema [11,43,44].
Abreviatures i localitzacions d’estructures neuroanatòmiques
Il - escorça infralímbica (+1.70 mm); Cg1 - escorça cingulada 1 (+1.1 mm); Cg2 - escorça cingulada 1 (+1.10 mm); Nucli NAcc: nucli accumbens (+1.10 mm); NAcc shell: nucli accumbens shell (+1.10 mm); LSi - envà lateral intermedi (+1.10 mm); La - amígdala lateral (-1.22 mm); Bla - amígdala basolateral (-1.22 mm); CeC / CeL: amígdala central capsular i lateral central (-1.22 mm); CeMPV: porció posterioventral medial del nucli central de l’amígdala (-1.22 mm); PAG - gris periaquaductal (−3.64 mm); EW - Nucli Edinger-Westphal (−3.64 mm); VTA - zona tegmental ventral (−3.64 mm); DR - rafe dorsal (- 4.60 mm); PBN - nucli parabraquial (−5.2 mm); NTS: nucli tractus solitari (−6.96 mm). El cervell del ratolí a les coordenades estereotàxiques[45] s’utilitzava per relacionar subjectivament un a tres seccions per quantificar cada regió cerebral.
Procediments estadístics
Les dades es reporten com a mitjana ± SEM, excepte quan s'indica d'una altra manera. Normalment es van distribuir dades. Les estadístiques es van realitzar utilitzant la versió Statistica 6 (StatSoft, Tulsa, OK, EUA) i la versió GraphPad Prism 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, EUA). Es van realitzar mesures repetides d’ANOVA de dos sentits per al consum d’etanol i les dades de preferència per avaluar les diferències entre grups. Es van realitzar ANOVA de dos i tres vies per a les dades de ΔFosB per avaluar les interaccions i els efectes principals del grup (altes concentracions, baixes concentracions i aigua), la regió cerebral i el genotip. La correcció de Bonferroni per a múltiples comparacions i el post-hoc de Bonferroni es va dur a terme quan era apropiat. Concretament, es va plantejar la hipòtesi que els circuits d’estrès i de recompensa haurien augmentat el FosB en ratolins que mostressin una preferència alcohòlica reduïda. Per a cada creu híbrid, es va utilitzar la Pearson r per identificar la presència de correlacions significatives entre els nivells ΔFosB i la preferència d'etanol i el consum en ratolins experimentats amb etanol.
Es va dur a terme un agrupament jeràrquic per visualitzar com les dades varien i avaluen com s'agrupen les dades. Els valors mitjans imputats van reemplaçar les dades percentuals perdudes de dataFosB que no excedien el 15% de dades. Tot i que hi ha un major grau d’incertesa que si s’haguessin observat els valors imputats, l’anàlisi jeràrquica de l’agrupació requereix la pertinença completa o la supressió completa per a comparacions entre casos. El clúster jeràrquic es va realitzar utilitzant el mètode de Ward i els clústers resultants van ser ordenats pel primer component d’una anàlisi de components principals (JMP®, versió 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). Per a grups experimentats amb aigua i etanol, les dades de ΔFosB per a cada regió cerebral van ser transformades en puntuació z i es van dur a terme anàlisis de components principals per determinar el nombre de grups. Les dades es van agrupar després per regions i individus del cervell mitjançant l’anàlisi jerarquitzada supervisada de l’agrupació.
Contribucions dels autors
ARO, YAB, RAH, TAJ van contribuir al disseny de l'estudi. ARO va adquirir les dades. ARO, IP, RDM va analitzar les dades. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB i RAH van participar en la redacció i revisió del manuscrit. Tots els autors han llegit i aprovat el manuscrit final.
Agraïments
Ens agradaria donar les gràcies als Drs. Jody Mayfield i Colleen McClung per a discussions útils i Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour i Darshan Pandya per assistència tècnica. Aquesta investigació va comptar amb el suport de la beca AA13520 de la Iniciativa Integrativa de Neurociències sobre l'Alcoholisme Consorci, i les subvencions AA06399-S i AA16424 de l'Institut Nacional de l'Alcoholisme i l'Alcoholisme.
referències
- Garcia-Andrade C, paret TL, Ehlers CL. El mite d'afegit i la resposta a l'alcohol als indis de la missió. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Conclusions a través de subgrups sobre el nivell de resposta a l’alcoholisme com a factor de risc per als trastorns d’ús d’alcohol: una població universitària de dones i llatins. Alcohol Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Consum voluntari d’etanol en les soques endollades del ratolí 15. Psicofarmacologia. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Cross Ref]
- Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Els ratolins híbrids C57BL / 6J x FVB / NJ beuen més alcohol que els ratolins C57BL / 6J. Alcohol Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Ratolins híbrids com a models genètics d'alt consum de alcohol. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. Diferències de comportament entre ratolins híbrids C57BL / 6JxFVB / NJ i C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1: relació amb el control de la ingesta d'etanol. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Desenvolupament d'un efecte de privació i escalada d'alcohol en C57BL / 6J. Alcohol Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Efectes de l’autoadministració d’etanol i etanol / sacarosa en les taxes d’utilització local de glucosa cerebral a les rates. Cervell Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ. Les dosis baixes i moderades d’etanol produeixen patrons diferents de canvis metabòlics cerebrals a les rates. Alcohol Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Patrons distints d'inducció de DeltaFosB en el cervell per drogues d'abús. Sinapsis. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: un interruptor molecular per a l'adaptació a llarg termini al cervell. Cervell Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, EJ de Nestler, Barrot M. DeltaFosB s'acumula en una població de cèl·lules GABAergic a la cua posterior de l'àrea tegmental ventral després del tractament psicostimulant. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Wang YM. L’administració repetida d’alcohol afecta diferencialment l’immunoreactivitat de la proteïna c-Fos i FosB en ratolins DBA / 2J. Alcohol Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Bachkell RK, Freeman P, Risinger FO. Expressió de la ITF en cervell de ratolí durant l'adquisició de l'autogestió de l'alcohol. Cervell Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Cross Ref]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. El consum d'alcohol produeix canvis selectius a la regió cerebral en l’expressió de factors de transcripció induïbles. Cervell Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Kalivas PW. Com es determina quins són els canvis neuroplàstics induïts per fàrmacs? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Cross Ref]
- Tripulacions FT, Nixon K. Mecanismes de neurodegeneració i regeneració en alcoholisme. L'alcohol. 2009;44: 115 – 127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Cross Ref]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Caracterització de l’efecte de privació d’etanol en substrains de ratolins C57BL / 6. L'alcohol. 2006;40: 119 – 126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. La distribució de l'ucocortina 1 en el cervell del ratolí depèn de la tensió. Neurociència. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE. Les lesions del nucli Edinger-Westphal en ratolins C57BL / 6J interrompen la hipotèrmia i el consum d'etanol induïts per etanol. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. La microinjecció d'urocortina 1 al septum lateral del ratolí regula l'adquisició i expressió del consum d'alcohol. Neurociència. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyyty P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Expressió urocortina 1 en cinc parells de línies de rata criades selectivament per diferències en l'alcoholisme. Psicofarmacologia. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Weitemier AZ. La urocortina 1 neurocircuit: sensibilitat a l’etanol i implicació potencial en el consum d’alcohol. Cervell Res Rev. 2006;52: 368 – 380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Cross Ref]
- Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Autoadministració d'alcohol: paper de la dopamina mesolímbica. Ann NY Acad Sci 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Cross Ref]
- McBride WJ, Li TK. Models animals d'alcoholisme: neurobiologia d'un elevat comportament de consum d'alcohol en rosegadors. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Cross Ref]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Objectius Neurocircuitri en recompensa i dependència d'etanol. Alcohol Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Autoadministració intracranial d'etanol dins de l'àrea tegmental ventral de les rates Wistar masculines: evidència de la implicació de neurones dopaminèrgiques. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Cross Ref]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Les baixes dosis d’etanol activen les neurones dopaminèrgiques a la zona tegmental ventral. Cervell Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Cross Ref]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. L'etanol augmenta la velocitat de cocció de les neurones de dopamina de la zona tegmental ventral de la rata in vitro. Cervell Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Cross Ref]
- Heilig M, Koob GF. Un paper clau per al factor d'alliberament de corticotropina en la dependència de l'alcohol. Tendències Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Dyr W, Kostowski W. Evidència que l’amígdala està implicada en els efectes inhibidors dels antagonistes dels receptors 5-HT3 sobre el consum d'alcohol a les rates. L'alcohol. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Cross Ref]
- Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. Efectes del receptor CRF1 i dels antagonistes dels receptors opioides sobre els increments induïts per la dependència del consum d'alcohol a les rates que prefereixen l'alcohol (P). Alcohol Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Hyytiä P, Koob GF. L’antagonisme dels receptors GABAA en l’amígdala estesa disminueix l’administració de l’etanol en rates. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Cross Ref]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. L'etanol augmenta la transmissió de GABAergic en els dos llocs pre i postsinàptics de les neurones de l'amígdala del centre. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF. El muscimol intraamígdal disminueix l'autoadministració de l'etanol en rates dependents. Alcohol Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Disminució de l'ansietat experimental i consum voluntari d'etanol a les rates després de lesions centrals però no basolaterals de l'amígdala. Cervell Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Cross Ref]
- Wee S, Koob GF. El paper del sistema opioide dinorfina-kappa en els efectes reforçadors de les drogues d'abús. Psicofarmacologia (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Orientant sistemes de receptors opioides de dinorfina / kappa per tractar l'abús i la dependència de l'alcohol. L'alcohol. 2012;46: 359 – 370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Mediació kapopopiòde endògena de la potenciació induïda per l'estrès de la preferència de lloc amb condició d'etanol i autoadministració. Psicofarmacologia (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Cross Ref]
- McBride WJ. Nucli central de l'amígdala i els efectes del comportament de l'alcohol i l'alcohol en rosegadors. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Cap a un analògic de l'alcoholisme en ratolins: Factors d'escala en el model. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Cap a un anàleg de l'alcoholisme als ratolins: criteris per al reconeixement de la beguda motivada farmacològicament. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [Article gratuït de PMC] [PubMed] [Cross Ref]
- Nestler EJ. Neurobiologia molecular de l'addicció. Am J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Cross Ref]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: un mediador molecular de la plasticitat neuronal i conductual a llarg termini. Cervell Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Franklin KJ, Paxinos G. El cervell del ratolí en coordenades estereotàxiques. 2. San Diego, CA: acadèmic; 2001.
;