The Journal of Neuroscience, 6 de setembre de 2006, 26(36): 9196-9204; doi: 10.1523/JNEUROSCI.1124-06.2006
Pere Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Raquel L. Neve3, Eric J. Nestler4i Jane R. Taylor1
1.La correspondència s'ha d'adreçar a Jane R. Taylor, Departament de Psiquiatria, Divisió de Psiquiatria Molecular, Yale University School of Medicine, Ribicoff Research Facilities, Connecticut Mental Health Center, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[protegit per correu electrònic]
abstracte
Les alteracions en la motivació s'han implicat en la fisiopatologia de diversos trastorns psiquiàtrics, inclòs l'abús de substàncies i la depressió. Se sap que l'exposició repetida a drogues d'abús o d'estrès indueix de manera persistent el factor de transcripció ΔFosB al nucli accumbens (NAc) i l'estriat dorsal, efectes que se suposa que contribueixen a les neuroadaptacions en la senyalització regulada per la dopamina.. No obstant això, se sap poc sobre la implicació específica de ΔFosB en la desregulació de comportaments motivats per apetit. Mostrem aquí que la sobreexpressió inductible de ΔFosB en NAc i estriat dorsal de ratolins bitransgènics, o específicament al nucli NAc de rates mitjançant l'ús de transferència de gens mediada per virals, millora el rendiment instrumental reforçat amb aliments i resposta progressiva. Es van trobar efectes de comportament molt similars després d'una exposició repetida prèvia a cocaïna, amfetamina, MDMA [(+)-3,4-metilendioximetanfetamina] o nicotina en rates. Aquests resultats revelen la potent regulació dels processos motivacionals per ΔFosB i proporcionen evidència que les alteracions induïdes per fàrmacs en l'expressió gènica mitjançant la inducció de ΔFosB dins del nucli NAc poden tenir un paper crític en l'impacte de les influències motivacionals en el comportament instrumental.
introducció
L'exposició repetida a fàrmacs provoca alteracions temporalment dinàmiques en la transcripció gènica que produeixen neuroadaptacions duradores dins del nucli accumbens (NAc) (Nestler, 2004). Aquesta regió cerebral té un paper crític tant en els processos de reforç de drogues com en els naturals (Kelley i Berridge, 2002), tot i que se sap poc sobre els factors de transcripció que afecten la conducta motivada per reforçadors de l'apetit no farmacèutics com els aliments. ΔFosB és un factor de transcripció activat dins del NAc i l'estriat dorsal per exposició crònica a fàrmacs (Konradi et al., 1994; Nye et al., 1995; Chen et al., 1997; Pich et al., 1997; Shaw-Lutchman et al., 2003) i la marxa compulsiva de les rodes (Werme et al., 2002). També és induït en aquestes regions per diverses formes d'estrès crònic (Perrotti et al., 2004). La millora dels processos de reforç de fàrmacs associats amb la inducció de ΔFosB estriatal està ben establerta (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Zachariou et al., 2006). Tanmateix, no es coneixen les conseqüències dels nivells elevats de ΔFosB en aquestes regions sobre el comportament instrumental motivat per reforços naturals.
La realització de respostes instrumentals és un component necessari de la conducta de consum de drogues que pot arribar a ser desregulada o inflexible a mesura que avança la transició a l'addicció (Jentsch i Taylor, 1999; Berke i Hyman, 2000; Berridge i Robinson, 2003; Everitt i Robbins, 2005). El NAc està implicat en múltiples aspectes del comportament instrumental amb rellevància per a l'addicció (Balleine i Killcross, 1994; Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002; Di Ciano i Everitt, 2004b; Everitt i Robbins, 2005). Per tant, és probable que les neuroadaptacions induïdes per fàrmacs dins del NAc puguin afectar el rendiment de les accions instrumentals. De fet, l'exposició crònica a la cocaïna millora el rendiment instrumental reforçat amb sacarosa (Miles et al., 2004) i manipulacions que es creu que bloquegen la neuroplasticitat dins del nucli NAc, inclosa la inhibició de la PKA (proteïna quinasa A) o la síntesi de proteïnes, interfereixen amb les respostes instrumentals recompensades amb aliments (Baldwin et al., 2002a; Hernández et al., 2002). El nucli NAc també media l'impacte motivacional de les influències condicionades en el comportament instrumental (Parkinson et al., 1999; Corbit et al., 2001; Hall et al., 2001; Di Ciano i Everitt, 2004a; Ito et al., 2004), proporcionant un substrat neurobiològic pel qual la inducció de ΔFosB podria afectar poderosament el rendiment instrumental i la motivació de reforçadors apetitius com ara menjar, aigua o drogues d'abús.
Aquí, vam investigar els efectes de ΔFosB sobre el comportament instrumental motivat pels aliments mitjançant dos enfocaments genètics complementaris: (1) sobreexpressió induïble de ΔFosB dins del NAc i l'estriat dorsal de ratolins bitransgènics (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) i (2) sobreexpressió. de ΔFosB al nucli de NAc, específicament mitjançant l'ús de la transferència de gens mediada per virus en rates. També vam avaluar si l'exposició repetida prèvia a cocaïna, amfetamina, (+)-3,4-metilendioximetanfetamina (MDMA) o nicotina, en condicions que s'informa que augmenten ΔFosB, milloraria la resposta i/o la motivació instrumental reforçada amb aliments mitjançant una proporció progressiva. calendari, com s'ha demostrat per a l'autoadministració reforçada amb fàrmacs (Horger et al., 1990, 1992; Piazza et al., 1990; Vezina et al., 2002; Miles et al., 2004). Els nostres resultats demostren efectes persistents de ΔFosB sobre el comportament instrumental i suggereixen que aquest factor de transcripció pot actuar al nucli NAc com a regulador de la funció motivacional.
Materials i mètodes
Animals i cura dels animals
Les rates Sprague Dawley experimentalment ingènues es van adquirir de Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Els ratolins 11A bitransgènics masculins es van derivar d'un encreuament entre ratolins transgènics homozigots que expressaven una proteïna transactivadora de tetraciclina enolasa (NSE)-tTA (línia A) i ratolins que expressaven TetOp (promotor sensible a la tetraciclina) -ΔFosB (línia 11); les línies parentals es van mantenir en un fons mixt (50% ICR i 50% C57BL6 × SJL) (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Aquests ratolins bitransgènics 11A expressen ΔFosB només quan: (1) els dos transgens estan presents a la mateixa cèl·lula i (2) l'activació transcripcional per tTA no s'inhibeix per la presència d'antibiòtics de tetraciclina com la doxiciclina. Així, l'administració de doxiciclina a aquests ratolins pot exercir un control temporal sobre l'expressió de ΔFosB i s'utilitza per prevenir l'expressió durant el desenvolupament; de fet, l'administració de doxiciclina està associada a cap expressió de fuites detectable de ΔFosB (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). A més, es va triar la línia 11A de ratolins bitransgènics per als presents experiments, perquè mostren un patró d'expressió que es restringeix principalment a les neurones estriatals que contenen dinorfina (tant NAc com l'estriat dorsal), molt similar al patró d'inducció de ΔFosB per fàrmacs crònics. exposició (Kelz et al., 1999). A més, la quantificació d'aquesta expressió estriatal de ΔFosB s'ha quantificat prèviament (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Els ratolins es van generar a la Universitat de Texas Southwestern i es van mantenir i provar a les instal·lacions de Yale. Durant la gestació i el desenvolupament, tots els ratolins es van mantenir amb doxiciclina fins a les 8-9 setmanes d'edat a una concentració de 100 μg/ml a l'aigua de beure, condicions que se sap que mantenen els transgens impulsats per TetOp en estat "desactivat", i s'utilitzen a partir del 6. setmanes de doxiciclina quan l'expressió ΔFosB esdevé màxima (Kelz et al., 1999). Tots els experiments van implicar la comparació de ratolins bitransgènics de camada amb doxiciclina activada versus desactivada, que per si mateixa no té cap efecte sobre el comportament motivat (Kelz et al., 1999; McClung i Nestler, 2003; Zachariou et al., 2006).
Tots els subjectes experimentals es van allotjar en parelles (rates) o en grups (ratolins; de quatre a cinc per gàbia) en condicions de temperatura i humitat controlades sota un cicle de llum/foscor de 12 h (llum encès a les 7:00 a. m. i apagat a les 7:00 h). PM). Se'ls va permetre com a mínim 7 dies per adaptar-se a les instal·lacions de l'habitatge abans de qualsevol estudi. Els animals tenien accés ad libitum a l'aigua en tot moment i un accés limitat als aliments, tal com es detalla a continuació. Tot l'ús d'animals es va dur a terme d'acord amb la Guia dels Instituts Nacionals de Salut per a la cura i l'ús d'animals de laboratori i va ser aprovat pels Comitès de cura i ús d'animals de la Universitat de Texas Southwestern i la Universitat de Yale.
Drogues
Clorhidrat de cocaïna [amablement proporcionat per l'Institut Nacional sobre Abús de Drogues (NIDA)], sulfat de d-amfetamina (Sigma, St. Louis, MO), clorhidrat de MDMA (proporcionat amablement per NIDA) i tartrat d'hidrogen (-)-nicotina (Sigma). ) es van dissoldre en solució salina fisiològica estèril (0.9, 5%) i es van injectar intraperitonalment a un volum de 2 ml/kg (ratolins) o XNUMX ml/kg (rates). El pH de la solució de nicotina es va ajustar amb bicarbonat de sodi abans de la injecció.
Vectors virals
La transferència de gens mediada per virus es va realitzar tal com es va descriure anteriorment (Carlezon et al., 1998; Perrotti et al., 2004). En resum, els ADNc que codificaven les proteïnes específiques es van inserir a l'amplicó HSV-PrPUC del virus de l'herpes simple (HSV) i es van empaquetar al virus mitjançant l'ajudant 5dl1.2. Els vectors que impulsen l'expressió de HSV-LacZ, que codificaven per a la proteïna de control β-galactosidasa, o HSV-ΔFosB, que codificaven per ΔFosB, es van infondre posteriorment al nucli NAc segons el protocol experimental.
Procediment experimental
Esquema.
L'experiment 1 va examinar els efectes de l'exposició repetida anterior a fàrmacs sobre el rendiment instrumental reforçat amb aliments i la resposta progressiva. Les rates es van dividir aleatòriament en cinc grups experimentals (n = 9-10/grup). Aquests grups van rebre injeccions dues vegades al dia (per via intraperitoneal; a les 9:00 i a les 5:00) amb solució salina o amb un dels fàrmacs següents: nicotina, 0.35 mg/kg; MDMA, 2.5 mg/kg; cocaïna, 15 mg/kg; o amfetamina, 2.5 mg/kg durant 15 dies consecutius. Les dosis es van seleccionar a partir de les nostres dades publicades anteriorment (Taylor i Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), i l'estimulació locomotora induïda per fàrmacs es va controlar els dies 1 i 15 de tractament. Després de 5 dies d'abstinència, els animals van ser entrenats en la resposta instrumental durant 10 dies consecutius i posteriorment es van provar la proporció progressiva que responia l'endemà. Dos animals van ser exclosos de l'anàlisi estadística perquè no van adquirir la resposta instrumental i no van fer més d'una resposta de palanca activa en cadascuna de les tres sessions d'entrenament finals.
Els experiments 2 i 3 van examinar els efectes de la sobreexpressió estriatal induïble de ΔFosB en ratolins bitransgènics sobre el rendiment instrumental i responent a una proporció progressiva de reforç. Anteriorment s'ha demostrat que la sobreexpressió induïble de ΔFosB en aquests ratolins imita els efectes de l'exposició repetida a fàrmacs en l'activitat locomotora i els paradigmes de preferència de llocs condicionats (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Aquests ratolins poden proporcionar informació crítica sobre la contribució de ΔFosB estriatal a processos de comportament específics. Els ratolins mascles genotipats es van mantenir amb doxiciclina o es van canviar a l'aigua de l'aixeta a les 8 setmanes d'edat. Els experiments es van iniciar després de 6 setmanes de retirada de doxiciclina, moment en què l'expressió transgènica és màxima (Kelz et al., 1999). A l'experiment 2, els animals (n = 16) van ser restringits i entrenats en els aliments amb el procediment instrumental descrit a continuació (vegeu a continuació, Resposta instrumental i proves de proporció progressiva) durant 10 dies consecutius. Després de completar les proves instrumentals, es va avaluar l'estimulació locomotora induïda per la cocaïna en aquests ratolins. A l'experiment 3, es va entrenar un grup separat de ratolins (n = 18) sobre la resposta instrumental durant 10 dies consecutius en condicions durant les quals es van lliurar un màxim de 50 reforços. El dia 11, es van provar tots els ratolins amb una proporció progressiva de resposta. El dia 12, vam determinar els efectes de la devaluació del reforç mitjançant l'alimentació prèvia sobre la resposta progressiva.
Els experiments 4 i 5 van examinar els efectes de la sobreexpressió de ΔFosB mediada per virals específicament dins del NAc. L'experiment 4 va provar els efectes de la sobreexpressió ΔFosB sobre el rendiment instrumental. Aquí, les rates es van infondre amb HSV-ΔFosB (n = 8) o HSV-LacZ (n = 8) al nucli de NAc i es van entrenar en el procediment instrumental a partir de 40 h més tard. Després de 10 sessions d'entrenament diàries, es van avaluar els nivells d'activitat inicial de tots els animals de l'equip de control de l'activitat locomotora tal com es descriu a continuació (vegeu a continuació, Activitat locomotora). L'experiment 5 va avaluar els efectes de la sobreexpressió NAc ΔFosB específicament en la resposta progressiva de la proporció. Aquí, les rates es van entrenar inicialment durant 15 dies consecutius, assignades a grups experimentals i, posteriorment, infusionades amb HSV-ΔFosB (n = 8) o HSV-LacZ (n = 7) al nucli NAc. Els animals es van deixar sense provar i sense tractar durant 4 dies per permetre que l'expressió ΔFosB assoleixi el màxim. El dia 5 després de la infusió, tots els animals van ser provats per pressionar la palanca en el programa de proporció progressiva. Després de l'últim dia de proves, es van matar totes les rates i es va verificar histoquímicament la col·locació de cànules d'infusió al nucli de NAc. A partir de la col·locació de cànules d'infusió, es van excloure dues rates de l'experiment 4 i una rata de l'experiment 5.
La caracterització de l'expressió gènica es va fer en un grup separat d'animals. Aquí, HSV-LacZ es va infondre al nucli de NAc i els animals van ser assassinats 3 d després. L'expressió de β-galactosidasa es va avaluar posteriorment immunohistoquímicament.
Activitat locomotora.
L'activitat locomotora es va mesurar mitjançant mesuradors d'activitat (monitor d'activitat animal Digiscan; Omnitech Electronics, Columbus, OH). Els mesuradors d'activitat estaven equipats amb dues files de fotosensors infrarojos, cada fila constava de 16 sensors situats a 2.5 cm de distància. Els mesuradors d'activitat eren controlats i dades dels mesuradors d'activitat recollides per un ordinador PC mitjançant el programari Micropro (Omnitech Electronics).
Els animals d'experimentació es van col·locar en caixes de plàstic transparent (25 × 45 × 20 cm) que es van posar als mesuradors d'activitat. Inicialment, es va permetre que els animals s'habituessin a l'equip de registre de l'activitat locomotora durant 30 min. En alguns experiments, els animals van ser posteriorment extrets, injectats amb cocaïna, amfetamina, nicotina o vehicle segons el disseny experimental i es van tornar a col·locar a les caixes. L'activitat locomotora es va registrar durant 60 minuts, començant 5 minuts després de la injecció de fàrmacs per evitar la hipermotilitat induïda per la injecció inespecífica. Tots els experiments es van realitzar durant la fase de llum dels animals (entre les 9:00 i les 6:00).
Resposta instrumental i proves de proporció progressiva.
La resposta instrumental es va avaluar mitjançant cambres operants estàndard per a rates (30 × 20 × 25 cm) o ratolins (16 × 14 × 13 cm) controlades pel programari MedPC (Med Associates, St. Albans, VT). Cada cambra estava allotjada en una cambra exterior atenuant el so equipada amb un generador de soroll blanc i un ventilador per reduir l'impacte del soroll extern. Una llum de la casa muntada a la paret del darrere il·luminava la cambra. Un dispensador de pellets va lliurar pellets d'aliments (20 o 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) com a reforç a la revista. Les entrades del cap es van detectar mitjançant una fotocèl·lula muntada per sobre del receptacle del reforç. En aquesta revista hi havia una llum d'estímul. Per a les rates, es col·locava una palanca a cada costat de la revista. Per als ratolins, es van col·locar dues obertures del nas a la paret posterior de les cambres (és a dir, oposada a la revista de reforç).
Durant els 5 d immediatament abans de l'inici de l'entrenament, els animals estaven restringits a l'accés al menjar durant 90 minuts al dia i es van exposar a pellets d'aliments a base de gra (ratolins, 20 mg; rates, 45 mg) a les seves gàbies domèstiques. Durant el període de prova, els pellets d'aliments estaven disponibles de manera intermitent a les cambres operants segons el protocol de comportament (vegeu més avall), així com en quantitats il·limitades a la gàbia domèstica durant 90 minuts, començant 30 minuts després de la sessió de prova diària. Aquest horari d'accés als aliments permet que cada animal individual arribi al seu punt de sacietat individual i redueix la variabilitat provocada per la competència entre els animals dominants i els subordinats. A les nostres mans, aquest horari permet un augment de pes lent després de la pèrdua de pes inicial ~85-90% dels pesos d'alimentació lliure. El pes dels animals es va controlar durant tot l'experiment.
Tots els subjectes es van habituar inicialment a l'aparell de prova durant 2 dies; durant aquestes sessions, els pellets d'aliments es van lliurar a la revista de reforç en un horari fix de 15 s (FT-15). A partir de l'endemà, els subjectes van rebre sessions d'entrenament diàries durant 10 dies consecutius. La resposta als aliments es va provar basant-se en procediments de condicionament instrumental publicats anteriorment (Baldwin et al., 2002b). Es va reforçar la resposta amb la palanca/nosepoke correcta (és a dir, activa), mentre que respondre amb l'altra palanca/nosepoke (inactiva) no tenia conseqüències programades. La posició de la palanca o de la palanca activa (esquerra/dreta) es va equilibrar per a tots els grups experimentals. La realització del requisit de resposta (vegeu a continuació) va donar lloc a l'aparició de la llum d'estímul de la revista, seguida 1 s després del lliurament d'un sol pellet d'aliment. Dos segons més tard, la llum d'estímul es va apagar. Els primers 10 reforços es van obtenir després d'haver completat amb èxit la resposta d'acord amb un programa de relació fixa (FR1), després del qual els pellets estaven disponibles després de respondre en un programa de relació variable (VR2). La sessió va durar 15 min.
Els experiments 3 (ratolins) i 5 (rates) van utilitzar programes d'entrenament alternatius per evitar l'impacte potencial de les diferències en el rendiment instrumental durant l'entrenament en la resposta progressiva posterior (es detalla a continuació). A l'experiment 3, els ratolins es van entrenar amb un programa FR1 durant 2 dies i després amb un programa FR2 durant 8 d. Els primers 3 dies de prova van utilitzar sessions de 60 minuts. En els darrers 7 dies d'entrenament, la sessió es va acabar quan s'havien adquirit 50 reforços. A l'experiment 5, les rates es van entrenar amb el programa FR1/VR2 en sessions de 15 minuts, tal com es descriu anteriorment per a tots els altres experiments amb dues excepcions. En primer lloc, es va lliurar un nombre màxim de 150 pellets/sessió. En segon lloc, aquests animals van rebre 5 dies addicionals d'entrenament (és a dir, un total de 15 d) per permetre l'establiment d'un rendiment estable abans de qualsevol manipulació experimental.
També es van provar els animals per respondre al menjar amb un programa de reforç progressiu. En aquesta prova, el requisit de resposta per obtenir aliments es va iniciar com un programa FR1 però va augmentar progressivament en 2 per obtenir un reforç posterior (és a dir, 1, 3, 5, 7..., X + 2 respostes). En l'experiment de tractament farmacològic amb rates, el calendari es va augmentar progressivament en 5, donant lloc a un calendari final d'1, 6, 11, 16..., X + 5. Tots els altres paràmetres es van mantenir idèntics al procediment d'entrenament detallat anteriorment. La prova es va acabar quan no s'havia fet cap resposta activa durant 5 minuts.
Devaluació del reforç.
L'efecte de la devaluació del reforç es va examinar mitjançant l'alimentació prèvia específica del reforç. Aquí, es va permetre als ratolins menjar pellets d'aliments a base de gra il·limitats a la seva gàbia domèstica durant 3 hores abans de provar el programa de reforç progressiu tal com es descriu anteriorment.
Tècniques quirúrgiques.
Els animals van ser anestesiats amb Equithesin [una mescla que contenia pentobarbital (35 mg/kg) i hidrat de cloral (183.6 mg/kg) en etanol (10% v/v) i propilenglicol (39% v/v); administrat a 4.32 ml/kg, ip]. Les cànules (Plastics One, Roanoke, VA) es van implantar quirúrgicament dirigides per sobre del nucli NAc, utilitzant equips estereotàctics Kopf. Les coordenades estereotàctiques utilitzades respecte al bregma van ser les següents: anterior/posterior, +1.5 mm; lateral/medial, ±1.5 mm; ventral/dorsal, −6.0 mm (Paxinos i Watson, 1986). Les cànules es van ancorar al crani mitjançant cargols i ciment dental. Es van col·locar obturadors a les cànules guia per evitar el bloqueig. Després de la cirurgia, els animals van ser sotmesos a cures postoperatòries estàndard i se'ls va permetre recuperar-se durant 5 dies abans de l'inici de qualsevol experiment.
Infusions.
Les infusions intracerebrals de vectors virals es van realitzar bilateralment 40 h abans de l'inici de l'entrenament (vegeu a continuació). Les xeringues d'injecció (calibre 31), que s'estenen 1 mm per sota de la punta de les cànules guia, es van baixar lentament simultàniament al NAc esquerre i dret, i es va infondre 1.0, 4 μl / costat durant un període de 0.25 minuts a una velocitat d'infusió de 5000, 1 μl / min mitjançant una bomba de microinfusió (PHD-6; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Les agulles d'infusió es van deixar al seu lloc durant XNUMX min després de completar la infusió i es van substituir les cànules simulades. Les col·locacions de cànules es van verificar histològicament després de la finalització dels experiments de comportament (vegeu la figura XNUMXB) i només es van incloure animals amb cànules col·locades correctament a l'anàlisi estadística de les dades experimentals.
Anàlisis histològics i immunotinció.
Després de la finalització dels experiments, els animals que havien rebut cirurgies com a part de l'experiment van ser anestesiats amb equithesin i perfusats transcardialment amb 0.1, 5 m de PBS (10 min) i formalina al 10% (30 min) segons procediments estàndard. Els cervells es van fixar en formalina i posteriorment es van col·locar en una solució de sacarosa tamponada amb fosfat (40%). A continuació, tots els cervells es van tallar en seccions de XNUMX μm en un micròtom i es van utilitzar per a anàlisis histològiques de la col·locació de la cànula i l'expressió de proteïnes.
La col·locació de la cànula es va fer en seccions contrastades amb vermell neutre i es va muntar en portaobjectes de microscopi en plastificant de distirè i xilè (DPX) després de la deshidratació d'etanol. La immunohistoquímica es va realitzar tal com es va descriure anteriorment (Hommel et al., 2003). En resum, l'expressió de β-galactosidasa després de la infusió de HSV-LacZ es va determinar mitjançant una tinció immunofluorescent mitjançant un anticòs primari anti-β-galactosidasa de cabra (1: 5000; Biogènesi, Kingston, NH). Després d'una nit d'incubació, les seccions es van esbandir i es van incubar posteriorment amb un anticòs secundari anti-cabra fluorescent conjugat a Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Es van tornar a rentar les seccions seguits de la deshidratació d'etanol i el muntatge en DPX. Les seccions de control adjacents es van tractar de manera idèntica sense la inclusió d'anticossos primaris. La immunofluorescència es va avaluar a 520 nm mitjançant a Zeiss (Oberkochen, Alemanya) microscopi amb filtre FITC i imatges capturades a temps d'exposició idèntics amb Zeiss Sistema d'imatge digital Axiovision.
Estadística
Les dades de tots els experiments es van avaluar mitjançant un ANOVA d'una, dues o tres vies seguit de la prova post hoc de Scheffe o Dunnett, corregint-se per a múltiples comparacions quan escaigués mitjançant la prova de rebuig seqüencial de Holm. Un valor de p ≤ 0.05 es va considerar estadísticament significatiu.
Resultats
Experiment 1: efectes de l'exposició repetida a fàrmacs sobre el rendiment instrumental i la resposta progressiva
Per confirmar que el nostre paradigma d'exposició repetida a fàrmacs va produir neuroadaptacions funcionalment significatives, primer vam avaluar la sensibilització locomotora com a mesura conductual prototípica de l'acció crònica dels fàrmacs. Les rates van rebre dues injeccions diàries de nicotina (0.35 mg/kg), MDMA (5 mg/kg), cocaïna (15 mg/kg) o amfetamina (2.5 mg/kg) i es va provar l'activitat locomotora després de la primera injecció el dies de tractament 1 i 15 (figura suplementària 1A-E, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari). L'anàlisi estadística va revelar un tractament significatiu per interacció diària (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Amb l'excepció de l'MDMA (p = 0.62), totes les drogues van induir una activitat locomotora significativament més gran (és a dir, sensibilització) el dia 15 en comparació amb el dia 1 (nicotina, p ≤ 0.001; cocaïna, p ≤ 0.001; amfetamina, p ≤ 0.01). Les injeccions salines repetides no van tenir cap efecte. Cap dels tractaments farmacològics va alterar l'activitat locomotora inicial mesurada durant el període d'habituació el dia 15 (figura suplementària 2A, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari).
Cinc dies després de l'última injecció de drogues, vam examinar els efectes de l'exposició repetida prèvia a la nicotina, MDMA, cocaïna o amfetamines sobre el comportament instrumental reforçat amb aliments. Les dades es presenten per a cada fàrmac per separat a figura 1A–H utilitzant el mateix grup de control salí per a comparacions. Vam trobar que l'exposició prèvia a cadascun d'aquests fàrmacs va augmentar de manera significativa i selectiva la resposta instrumental reforçada amb aliments (tractament per palanca el dia d'entrenament, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; anàlisi post hoc: nicotina, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; cocaïna, p ≤ 0.01; amfetamina, p ≤ 0.001). L'elevació persistent de la resposta instrumental observada en el rendiment asimptòtic va suggerir una possible millora de la motivació, d'acord amb els augments reportats anteriorment després d'una exposició repetida a psicoestimulants (vegeu Discussió). Per tant, vam provar si l'exposició prèvia repetida a medicaments millorava la motivació mitjançant un programa de proporció progressiva. Hi va haver un efecte estadístic de l'exposició prèvia al fàrmac en la resposta a la palanca activa (tractament per interacció de palanca, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (. Figura 2A) així com el punt de ruptura final (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (. Figura 2B). L'anàlisi addicional va mostrar que tots els tractaments van augmentar tant el nombre de respostes actives (nicotina, p ≤ 0.001; MDMA, p ≤ 0.05; cocaïna, p ≤ 0.001; amfetamina, p ≤ 0.001) i el punt de ruptura (nicotina, p ≤ 0.001; MDMA; 0.01). , p ≤ 0.0001; cocaïna, p ≤ 0.0001; amfetamina, p ≤ XNUMX) d'acord amb un efecte d'aquests tractaments sobre la motivació. Donada la manca d'efecte dels fàrmacs sobre l'activitat locomotora inicial i la manca d'efecte sobre les premses de palanca inactives, és poc probable que l'augment de la resposta als aliments en aquestes condicions reflecteixi augments inespecífics de l'activitat motora.
Figura 1.
Efecte de les injeccions repetides anteriors de nicotina (0.35 mg/kg), MDMA (2.5 mg/kg), cocaïna (15 mg/kg) o amfetamina (2.5 mg/kg) dues vegades al dia durant 15 dies sobre el comportament instrumental posterior. Els animals es van provar junts, però per a més claredat els efectes de cada fàrmac es presenten per separat, utilitzant el mateix grup control tractat amb solució salina. A (respostes actives) i B (respostes inactives) mostren els efectes de l'exposició prèvia a la nicotina; C, D, MDMA; E, F, cocaïna; G, H, amfetamina. Les dades es representen com a mitjanes ± SEM.
Figura 2.
Efecte del tractament anterior repetit (dos cops al dia, 15 dies) amb solució salina, nicotina (0.35 mg/kg), MDMA (2.5 mg/kg), cocaïna (15 mg/kg) o amfetamina (2.5 mg/kg) en la resposta instrumental en un calendari de ràtio progressiu de reforç. Les dades es representen com a mitjanes ± SEM. ***p <0.001; **p <0.01; *p <0.05. Sal, Saline; Nic, nicotina; Coc, cocaïna; Amph, amfetamina; PR, proporció progressiva.
L'exposició prèvia a medicaments tampoc va tenir cap efecte sobre el pes corporal registrat abans de la restricció alimentària, el primer o l'últim dia d'entrenament instrumental, o immediatament abans de la prova de proporció progressiva (figura suplementària 2B, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari). L'accés restringit als aliments durant 3 dies va reduir inicialment el pes corporal a una mitjana del 91 al 92% dels pesos d'alimentació lliure. Al final de les proves de comportament, els pesos havien tornat al 97-99% del pes corporal previ a la restricció i no es van observar diferències entre els animals exposats a fàrmacs i els tractats amb solució salina. Per tant, les alteracions en el pes corporal i les diferències en la gana o la gana no haurien de contribuir significativament a la millora observada del rendiment o de la motivació instrumental.
Experiment 2: sobreexpressió induïble de ΔFosB en ratolins bitransgènics; actuació instrumental
A continuació, vam examinar si també es va augmentar el rendiment instrumental en ratolins bitransgènics que sobreexpressen inductiblement ΔFosB amb una selectivitat marcada en el NAc i l'estriat dorsal (Kelz et al., 1999). En aquest experiment, es van comparar ratolins que sobreexpressen ΔFosB amb controls de camarada que no sobreexpressen ΔFosB perquè es mantenen a la doxiciclina (vegeu Materials i mètodes). Vam trobar que la sobreexpressió de ΔFosB va augmentar significativament la resposta reforçada amb aliments (expressió gènica per palanca el dia d'entrenament, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (. Figura 3A). El nombre de respostes del nas fetes a l'obertura inactiva no va ser diferent entre els dos grups (. Figura 3B). En conjunt, aquestes dades indiquen que la sobreexpressió de ΔFosB en NAc i estriat dorsal va augmentar selectivament el rendiment instrumental
figura 3
Efecte de la sobreexpressió estriatal induïble de ΔFosB en ratolins bitransgènics sobre el rendiment instrumental. A, Respostes actives. B, Respostes inactives. Les dades es representen com a mitjanes ± SEM.
Per descartar que la millora del rendiment instrumental en animals que sobreexpressen ΔFosB es pogués explicar per alteracions de la gana o la gana, es va registrar el pes corporal abans de la restricció alimentària i els primers i últims dies d'entrenament. ΔFosB no va tenir cap efecte sobre el pes corporal abans de la restricció d'aliments, ni hi va haver cap efecte sobre el pes corporal durant les proves de comportament. Aquí, l'accés restringit als aliments durant 3 dies va reduir el pes corporal a una mitjana del 87 al 89% dels pesos d'alimentació lliure. Al final de les proves de comportament, els pes dels animals eren del 97 al 99% del pes corporal previ a la restricció, amb canvis equivalents observats en els ratolins ΔFosB i control (figura suplementària 3A, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari). Per tant, és poc probable que els efectes potencials de la sobreexpressió de ΔFosB sobre la gana o la gana puguin explicar millores en la resposta instrumental observada.
Quan s'havien completat les proves del rendiment instrumental, la sobreexpressió de ΔFosB no va alterar l'activitat locomotora inicial mesurada durant un període de 30 minuts (figura suplementària 3B, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari). Aquesta observació dóna suport a l'opinió que l'alteració inespecífica de l'activitat no contribueix al rendiment instrumental millorat observat en aquests animals. Tanmateix, s'ha informat que els ratolins bitransgènics que sobreexpressen ΔFosB presenten respostes locomotores millorades a la cocaïna aguda i repetida (Kelz et al., 1999). Com que vam utilitzar un programa de retirada lleugerament diferent de la doxiciclina per induir l'expressió gènica (6 setmanes amb restricció alimentària), ens vam proposar confirmar aquest fenotip. De fet, els ratolins que sobreexpressen ΔFosB van demostrar un augment significativament més gran de l'activitat locomotora quan s'injecta amb cocaïna en comparació amb els controls de camarada mantinguda amb doxiciclina (tractament per expressió gènica, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (figura suplementària 3C, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari).
Experiment 3: sobreexpressió induïble de ΔFosB en ratolins bitransgènics; proporció progressiva
Atès que l'exposició prèvia al fàrmac indueix ΔFosB estriatal (Nestler et al., 2001) i es va trobar aquí per augmentar la resposta progressiva de la proporció, a continuació vam provar si la sobreexpressió estriatal transgènica de ΔFosB també augmenta el rendiment en un programa de reforç de proporció progressiva. Es va entrenar un nou grup de ratolins sobre la resposta instrumental en condicions (vegeu Materials i mètodes) que no produïen diferències significatives en el rendiment instrumental abans de provar la resposta progressiva (F).(1,16) <1). Tanmateix, a la prova de proporció progressiva vam observar una expressió gènica significativa per interacció de palanca (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (. Figura 4A) i va trobar que els ratolins que sobreexpressen ΔFosB, en comparació amb els ratolins de control de camarada mantinguts amb doxiciclina, van fer un nombre més gran de respostes actives (p ≤ 0.05, XNUMX), mentre que el nombre de respostes de palanca inactives no va ser diferent. Els ratolins que sobreexpressen ΔFosB també van assolir un punt de ruptura més alt (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (. Figura 4B). Aquestes dades suggereixen que, com l'exposició prèvia a psicoestimulants, la sobreexpressió estriatal de ΔFosB augmenta la motivació. Com que el nombre de respostes inactives no es va alterar en els ratolins que sobreexpressen ΔFosB, és probable que els augments inespecífics de l'activitat no contribueixin a aquests efectes. Aquesta visió va ser recolzada a més per avaluacions de l'activitat locomotora inicial en què no hi havia cap diferència entre els ratolins que sobreexpressaven ΔFosB i els ratolins de control de la camada mantinguda amb doxiciclina. No es van evidenciar diferències brutes en el pes corporal entre els animals que sobreexpressen ΔFosB i els de control tal com es van mesurar el dia de la prova. Així, tot i que els animals que sobreexpressen ΔFosB emetran respostes instrumentals més motivades pels aliments, no sembla que consumeixin més aliments quan estiguin disponibles gratuïtament. L'explicació més probable d'aquesta observació és que, tot i que la motivació determina la força que treballarà un animal per adquirir un reforç, nombrosos factors addicionals (apetit, sacietat, estat metabòlic, etc.) influeixen en el comportament alimentari i el consum real d'aliments.
Figura 4.
Efecte de la sobreexpressió induïble de FosB en ratolins bitransgènics en la resposta instrumental en un programa de reforç progressiu, abans i després de la devaluació del reforç induïda per la sacietat. A, B, Línia de base: respostes de palanca (A), punt de ruptura (B). C, D, Després de la devaluació del reforç: respostes de palanca (C), punt de ruptura (D). Les dades es representen com a mitjanes ± SEM. *p <0.05.
Els ratolins bitransgènics ΔFosB utilitzats aquí expressen ΔFosB a tot l'estriat. Mentre que l'estriat ventral (inclòs el NAc) ha estat implicat en processos motivacionals, es diu que l'estriat dorsal està implicat en l'adquisició d'hàbits instrumentals (Yin et al., 2004; Faure et al., 2005). Tot i que no vam observar diferències en el rendiment instrumental durant la fase d'entrenament utilitzant un programa de ràtio baix amb límits màxims de reforç, condicions relativament resistents al desenvolupament d'hàbits instrumentals (Dickinson, 1985), és possible que l'establiment d'hàbits pugui influir en la resposta sota el calendari de ràtio progressiu. Aquesta possibilitat es va provar directament avaluant l'efecte de la devaluació del reforç mitjançant l'alimentació prèvia sobre la resposta progressiva de la proporció. Aquesta prealimentació va obliterar l'efecte de ΔFosB en la resposta progressiva de la proporció, sense que s'observessin diferències en els punts de resposta o de ruptura entre els ratolins que sobreexpressen ΔFosB i els de control (F(1,16) <1) (. Figura 4C, D). En conjunt, aquestes dades suggereixen que la sobreexpressió estriatal de ΔFosB no va alterar la sensibilitat als canvis en el valor dels resultats recompensats mitjançant aquest programa de proves. Més aviat, la resposta instrumental observada a la prova de proporció progressiva sembla estar dirigida a un objectiu i l'augment del punt de ruptura observat en els ratolins que sobreexpressen ΔFosB és probable que s'atribueixi a una motivació augmentada i no a una resposta elevada com a hàbit.
Experiment 4: sobreexpressió mediada per virus de ΔFosB al nucli NAc: rendiment instrumental
Per avaluar si la sobreexpressió de ΔFosB selectivament al NAc podria tenir en compte el comportament observat en els ratolins bitransgènics, hem infusionat HSV-ΔFosB o HSV-LacZ com a control, selectivament al nucli de NAc de les rates i hem estudiat l'efecte d'aquesta manipulació sobre els aliments. -actuació instrumental reforçada (. Figura 5A, B). Després de l'entrenament de la revista, es va infondre HSV-ΔFosB o HSV-LacZ al nucli NAc 40 h abans de l'inici de les proves de comportament. Es mostra la ubicació de la infusió i l'extensió de l'expressió gènica mediada pel virus figura 6, A i B. Les infusions de NAc de HSV-ΔFosB van produir un augment sostingut del nombre de respostes actives realitzades (expressió gènica per palanca, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (. Figura 5A), que va persistir durant tot l'experiment. Aquests efectes van ser selectius, perquè no hi va haver efectes significatius de la sobreexpressió de ΔFosB dins del nucli NAc sobre el nombre de respostes inactives (. Figura 5B) o en l'activitat locomotora inicial registrada l'endemà de la finalització de l'experiment (dades no mostrades). La sobreexpressió de ΔFosB al NAc va imitar així els efectes del comportament de l'exposició prèvia a fàrmacs o la sobreexpressió estriatal de ΔFosB.
Figura 5.
Efecte de les infusions de HSV-ΔFosB al nucli NAc abans de l'entrenament sobre la resposta instrumental. A, Respostes actives. B, Respostes inactives. Les dades es representen com a mitjanes ± SEM.
Figura 6.
A, Col·locacions de llocs d'infusió per als experiments de vectors virals. A dalt, els cercles negres plens corresponen al lloc d'infusió previst. Només les infusions fetes en ∼0.5 mm d'aquesta àrea (és a dir, dins del nucli NAc), tal com indica el cercle, es van considerar acceptables. Els animals amb infusions fetes fora d'aquesta zona es van excloure de les anàlisis estadístiques. A baix, lloc d'infusió dins del NAc en un animal representatiu. B, Verificació immunohistoquímica de l'expressió de proteïnes després de la infusió de HSV-LacZ. Els panells superiors mostren l'expressió de β-galactosidasa dins del nucli de NAc (augment de 2.5, 10 i XNUMX ×). Els panells inferiors demostren la manca d'immunofluorescència a les seccions de control adjacents utilitzant el mateix procediment immunohistoquímic sense la inclusió de l'anticòs primari.
Experiment 5: sobreexpressió mediada per virus de ΔFosB al nucli NAc: proporció progressiva
L'experiment final va determinar directament si la sobreexpressió restringida de ΔFosB al nucli de NAc mitjançant l'enfocament de transferència de gens mediada per virus era suficient per millorar la motivació a les rates. Aquí, HSV-ΔFosB es va infondre només després de completar l'entrenament instrumental, eliminant qualsevol influència potencial de la sobreexpressió de ΔFosB durant l'entrenament a la prova de proporció progressiva posterior. Es va entrenar un nou grup de rates, com abans, i es va dividir en grups experimentals equilibrats en funció del seu rendiment en els darrers dies d'entrenament. Els animals van rebre posteriorment infusions bilaterals de HSV-ΔFosB o HSV-LacZ al nucli de NAc i es van provar amb una proporció progressiva que responia després de 5 d de sobreexpressió. L'anàlisi estadística va revelar una expressió gènica significativa per interacció de palanca (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (. Figura 7A). Les rates infusionades amb HSV-ΔFosB van fer respostes més actives (p ≤ 0.01, XNUMX) en comparació amb les infusionades amb HSV-LacZ, mentre que la resposta a la palanca inactiva no es va veure afectada. D'acord amb aquest augment, les rates infusionades amb HSV-ΔFosB també tenien un punt de ruptura més alt (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (. Figura 7B) que els animals infusionats amb HSV-LacZ. No hi va haver cap efecte de ΔFosB sobre l'activitat locomotora basal provada 1 h abans de la prova de proporció progressiva (figura suplementària 4A, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari). Tampoc hi va haver diferències en el pes corporal el dia de la prova de proporció progressiva (figura suplementària 4B, disponible a www.jneurosci.org com a material complementari). Aquestes troballes donen suport a les nostres observacions amb ratolins transgènics que sobreexpressen ΔFosB i indiquen que la sobreexpressió selectiva de ΔFosB al NAc és suficient per millorar la motivació associada als aliments.
Figura 7.
Efecte de les infusions de HSV-ΔFosB 5 d abans de provar la resposta instrumental en un programa de reforç progressiu. A, Respostes de palanca. B, punt de ruptura. Les dades es representen com a mitjanes ± SEM. ***p <0.001; **p <0.01.
Discussion
El present estudi demostra que la sobreexpressió de ΔFosB dins del NAc millora el comportament instrumental reforçat amb alimentsr. L'exposició prèvia a cocaïna, amfetamina, MDMA o nicotina millorada va produir un augment durador del rendiment instrumental posterior. Aquestes exposicions a fàrmacs també van augmentar el comportament motivat pels aliments sota un programa de reforç progressiu. Aquests efectes de l'exposició prèvia a fàrmacs es van imitar mitjançant la sobreexpressió restringida de ΔFosB a l'estriat, utilitzant ratolins bitransgènics inducibles (NSE-tTA × TetOP-ΔFosB) o utilitzant un nou vector viral per expressar ΔFosB selectivament al NAc.. En particular, la sobreexpressió de ΔFosB al nucli NAc, després que ja s'hagués adquirit la resposta instrumental, va millorar la motivació per als aliments sota el programa de proporció progressiva. En conjunt, les nostres troballes identifiquen ΔFosB al nucli NAc com un potencial mediador de les neuroadaptacions induïdes per fàrmacs que poden promoure el comportament instrumental, ampliant el paper d'aquest factor de transcripció per incloure processos rellevants per a les influències motivacionals en el rendiment del comportament reforçat amb aliments. També plantegen la possibilitat que les condicions que indueixen l'expressió ΔFosB al NAc puguin influir en les propietats motivacionals dels reforçadors naturals i de drogues..
ΔFosB s'acumula a les neurones espinoses mitjanes que expressen dinorfina tant del NAc com de l'estriat dorsal després d'una exposició crònica, però no aguda, a drogues d'abús. Aquest patró d'expressió regional es reprodueix en els ratolins bitransgènics que sobreexpressen ΔFosB que s'utilitzen aquí. En aquests ratolins, nivells estriatals elevats de ΔFosB augmenten la sensibilitat dels animals a la cocaïna i la morfina mesurada per la preferència de lloc condicionat (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). També augmenta la proporció progressiva que respon a la cocaïna, cosa que suggereix que la motivació per autoadministrar-se cocaïna es veu millorada per la sobreexpressió de ΔFosB estriatal.Colby et al., 2003). Aquí, vam trobar que la sobreexpressió estriatal de ΔFosB en aquests ratolins també va augmentar la proporció progressiva responent a un reforç d'aliments i que aquests efectes es van reproduir per una sobreexpressió de ΔFosB mediada per viral restringida al nucli de NAc a la rata. Les nostres dades suggereixen que ΔFosB pot actuar com un modulador transcripcional de la motivació per als reforçadors primaris, ja siguin aliments, drogues o potser exercici, una idea coherent amb les observacions preliminars que l'expressió estriatal de ΔFosB augmenta després de la circulació crònica de la roda o el consum de sacarosa.McClung et al., 2004). Aquestes dades suggereixen que la sobreexpressió NAc de ΔFosB pot millorar l'impacte motivacional tant dels reforçadors naturals com dels fàrmacs.
S'ha argumentat que les subregions del NAc medien de manera diferenciada la influència dels processos d'incentius pavlovians o instrumentals en el rendiment instrumental. (Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002), mentre que les influències motivacionals més generals en el rendiment instrumental poden ser codificades per altres regions com el nucli central de l'amígdala. (Corbit i Balleine, 2005). Tanmateix, també s'ha proposat que el nucli NAc sigui un lloc crític per a l'adquisició d'aprenentatge instrumental dirigit a objectius (Smith-Roe i Kelley, 2000; Baldwin et al., 2002a,b; Kelley, 2004). Mostrem efectes equivalents de les exposicions anteriors a fàrmacs i la sobreexpressió estriatal transgènica de ΔFosB en la millora del comportament instrumental. Les infusions de HSV-ΔFosB restringides al nucli NAc també van augmentar la resposta instrumental reforçada amb aliments. Tot i que aquests experiments no exclouen una contribució de l'estriat dorsal en aquests comportaments, suggereixen fortament que les alteracions induïdes per ΔFosB en l'expressió gènica dins del NAc són suficients per augmentar la resposta motivada pels aliments. Com que la resposta progressiva de la proporció també es va millorar quan es va expressar ΔFosB després que prèviament s'hagués aconseguit un rendiment instrumental estable, sembla probable que hi hagi un paper per a les influències motivacionals en el comportament instrumental. La possibilitat que les nostres manipulacions també afectin els processos d'aprenentatge instrumental, però, no es pot excloure del tot. En suport de les nostres conclusions, l'augment del rendiment instrumental observat després d'una exposició oral prèvia a la cocaïna (Miles et al., 2004) s'ha argumentat que implica alteracions motivacionals consistents amb la capacitat del tractament crònic de nicotina per augmentar la proporció progressiva de resposta en ratolins (Brunzell et al., 2006). A més, els ratolins eliminadors del transportador de dopamina, en els quals s'augmenten els nivells extracel·lulars de dopamina, mostren tant una immunoreactivitat millorada ΔFosB com una motivació reforçada pels aliments, però no un aprenentatge alterat.Cagniard et al., 2006). Per altra banda, vam trobar que la sobreexpressió de ΔFosB estriatal en ratolins no va afectar el rendiment quan els aliments es van "devaluar" per prealimentació.. Aquestes dades indiquen que els animals eren sensibles al valor motivacional del reforç i que respondre es va dirigir a un objectiu.
L'exposició repetida prèvia a fàrmacs també pot millorar el control del comportament exercit per estímuls condicionats associats a reforçadors naturals, mesurats per enfocament pavlovià.Harmer i Phillips, 1998; Taylor i Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), reforç condicionat (Taylor i Horger, 1999; Olausson et al., 2004), i transferència de pavlovià a instrumental (Wyvell i Berridge, 2001). Ara hi ha proves convincents que el nucli NAc, a diferència de la closca, està implicat en el control del comportament motivat per drogues per estímuls condicionats pavlovians (Parkinson et al., 1999, 2002; Hall et al., 2001; Dalley et al., 2002; Ito et al., 2004). Els nostres resultats poden suggerir que la inducció de ΔFosB induïda per fàrmacs al NAc pot ser un mecanisme pel qual es millora el control del comportament en aquests procediments. També és possible que els estímuls condicionats pavlovians, actuant com a reforçadors condicionats, contribueixin als efectes conductuals actuals. Un control millorat sobre el comportament d'aquests estímuls condicionats mediat per augments de ΔFosB estriatal també pot contribuir a l'efecte de la proteïna sobre la preferència de llocs condicionats induïda per fàrmacs. (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006) i ràtio progressiu de resposta a la cocaïna (Colby et al., 2003). S'ha plantejat la hipòtesi que les alteracions en els processos motivacionals contribueixen al desenvolupament i al manteniment de la conducta addictiva (Robinson i Berridge, 1993; Jentsch i Taylor, 1999; Robbins i Everitt, 1999; Nestler, 2004). Les dades actuals també són coherents amb altres teories que emfatitzen múltiples processos instrumentals i pavlovians en el comportament addictiu (Everitt i Robbins, 2005). Ara es necessita treball addicional per definir el paper de les neuroadaptacions induïdes per fàrmacs i ΔFosB en NAc i altres subregions límbic-estriatals pel que fa als factors associatius o motivacionals específics que poden facilitar el rendiment instrumental i contribuir al comportament compulsiu.
Encara que no es coneixen els mecanismes moleculars precisos pels quals els canvis dins del NAc influeixen en el comportament motivat per reforçadors primaris o condicionats (Kelley i Berridge, 2002), les neurones espinoses mitjanes GABAèrgiques del NAc es consideren un substrat crític per a la plasticitat dependent de fàrmacs i experiència. Aquí, l'entrada dopaminèrgica de l'àrea tegmental ventral i l'entrada glutamatèrgica de les aferents corticolímbiques convergeixen en dendrites i espines dendrítiques comunes. (Sesack i Pickel, 1990; Smith i Bolam, 1990). Exposició crònica a psicoestimulants augmenta la densitat d'aquestes espines a les neurones de la closca i el nucli de NAc (Robinson i Kolb, 1999; Robinson et al., 2001; Li et al., 2003, 2004). Recentment, la inducció de la sensibilització del comportament es va associar específicament amb un augment de les espines dendrítiques dins del nucli NAc (Li et al., 2004). En particular, els augments induïts per la cocaïna en la densitat de la columna vertebral només persisteixen a D1-neurones positives que coexpressen ΔFosB (Robinson i Kolb, 1999; Lee et al., 2006). Així, ΔFosB al nucli NAc pot contribuir a una plasticitat sinàptica duradora que podria afectar el comportament instrumental.. De fet, un paper crític per a la neurotransmissió de dopamina-glutamat (Smith-Roe i Kelley, 2000), activitat de la proteïna cinasa A (Baldwin et al., 2002a), i síntesi de proteïnes de novo (Hernández et al., 2002) dins del nucli NAc sobre rendiment instrumental s'han informat anteriorment. Ara identifiquem ΔFosB com un factor de transcripció que pot millorar de manera persistent la resposta reforçada amb aliments quan es sobreexpressa al nucli NAc. Queda per definir amb precisió els gens o proteïnes específics implicats en aquests efectes. ΔFosB regula l'expressió de múltiples proteïnes al NAc implicades en la neuroplasticitat (McClung i Nestler, 2003). Una anàlisi recent de microarrays va caracteritzar els patrons d'expressió gènica en el NAc dels ratolins bitransgènics que expressaven ΔFosB utilitzats aquí i va identificar un subconjunt de gens que estaven regulats per l'expressió relativament a curt termini de ΔFosB (McClung i Nestler, 2003). El BDNF era un d'aquests gens, i se sap que el BDNF en aquest circuit neuronal millora la resposta a les indicacions associades a drogues i aliments (Horger et al., 1999; Grimm et al., 2003; Lu et al., 2004). Un gen addicional d'interès és quinasa dependent de ciclina 5 (Bibb et al., 2001), que també és induïda per ΔFosB, i pot regular tant la plasticitat estructural induïda per la cocaïna (Norrholm et al., 2003) i la motivació mesurada per la proporció progressiva que respon als reforços naturals o de drogues (JR Taylor, observacions no publicades). Encara candidats addicionals són la subunitat GluR2 dels receptors de glutamat AMPA (Kelz et al., 1999) i el factor de transcripció NFκB (factor nuclear κB) (Ang et al., 2001). Seria important avaluar aquestes i altres proteïnes regulades a les subregions NAc com a candidates per mediar els efectes conductuals de ΔFosB sobre el rendiment i la motivació instrumentals.
El La sèrie d'experiments actuals proporciona proves que la sobreexpressió de ΔFosB dins del NAc pot millorar el comportament motivat pels aliments i, per tant, regular el rendiment instrumental, com s'ha demostrat anteriorment per a les recompenses de drogues. Aquestes dades proporcionen noves evidències que ΔFosB pot actuar com un interruptor molecular general associat amb millores en els aspectes motivacionals dels reforços en el comportament dirigit a objectius. Els nostres resultats plantegen la possibilitat que la inducció de NAc ΔFosB per, per exemple, drogues addictives, estrès o potser aliments altament gratificants, pugui ser un mecanisme crític pel qual els estats motivacionals disfuncionals donen lloc a trastorns psiquiàtrics associats a un comportament compulsiu..
Notes al peu
o Rebut el 15 de març de 2006.
o Revisió rebuda el 23 de juny de 2006.
o Acceptat August 2, 2006.
Aquest treball va comptar amb el suport de subvencions de l'Institut Nacional sobre Abús de Drogues, l'Institut Nacional de Salut Mental i l'Institut Nacional d'Abús d'Alcohol i Alcoholisme. Agraïm la valuosa ajuda de Dilja Krueger, Drew Kiraly, el doctor Ralph DiLeone, Robert Sears i el doctor Jonathan Hommel del Departament de Psiquiatria de la Universitat de Yale. També agraïm a la doctora Jennifer Quinn i al doctor Paul Hitchcott els comentaris útils sobre aquest manuscrit.
La correspondència s'ha d'adreçar a Jane R. Taylor, Departament de Psiquiatria, Divisió de Psiquiatria Molecular, Yale University School of Medicine, Ribicoff Research Facilities, Connecticut Mental Health Center, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[protegit per correu electrònic]
Copyright © 2006 Society for Neuroscience 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
referències
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) Inducció de NFκB al nucli accumbens per administració crònica de cocaïna. J Neurochem 79:221–224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Hola, senyor
4. Kelley AE
(2002a) L'aprenentatge instrumental apetitiu es veu afectat per la inhibició de la proteïna cinasa dependent de cAMP dins del nucli accumbens. Neurobiol Learn Mem 77:44–62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002b) L'aprenentatge instrumental apetitiu requereix l'activació coincident de NMDA i dopamina D1 receptors dins de l'escorça prefrontal medial. J Neurosci 22:1063–1071.
Text complet abstracte / GRATUÏT
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) Efectes de lesions d'àcid ibotènic del nucli accumbens sobre l'acció instrumental. Behav Brain Res 65:181–193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) Addicció, dopamina i els mecanismes moleculars de la memòria. Neurona 25:515–532.
6. ↵
1. Berridge KC,
2. Robinson TE
(2003) Recompensa d'anàlisi. Trends Neurosci 26:507–513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ,
12. Greengard P.
(2001) Els efectes de l'exposició crònica a la cocaïna estan regulats per la proteïna neuronal Cdk5. Nature 410:376–380.
8. ↵
1. Brunzell DH,
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto Sr
(2006) Els receptors nicotínics d'acetilcolina que contenen subunitats beta2 estan implicats en augments induïts per la nicotina en el reforç condicionat, però no en la proporció progressiva que respon al menjar en ratolins C57BL/6. Psychopharmacology (Berl) 184:328–338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Bàlsam PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) Els ratolins amb una dopamina elevada crònicament presenten una motivació millorada, però no un aprenentatge, per obtenir una recompensa alimentària. Neuropsicofarmacologia 31: 1362–1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Regulació de la recompensa de cocaïna pel CREB. Science 282:2272–2275.
Text complet abstracte / GRATUÏT
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Hope BT,
4. Nakabeppu I,
5. Nestler EJ
(1997) Antígens crònics relacionats amb Fos: variants estables de ΔFosB induïdes al cervell per tractaments crònics. J Neurosci 17:4933–4941.
Text complet abstracte / GRATUÏT
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR,
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Animals transgènics amb expressió gènica inductible i dirigida al cervell. Mol Pharmacol 54:495–503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Self DW
(2003) La sobreexpressió específica del tipus de cèl·lula estriatal de ΔFosB millora l'incentiu per a la cocaïna. J Neurosci 23:2488–2493.
Text complet abstracte / GRATUÏT
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Doble dissociació de lesions de l'amígdala basolateral i central sobre les formes generals i específiques de resultats de transferència instrumental-pavloviana. J Neurosci 25:962–970.
Text complet abstracte / GRATUÏT
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) El paper del nucli accumbens en el condicionament instrumental: evidència d'una dissociació funcional entre el nucli accumbens i la closca. J Neurosci 21:3251–3260.
Text complet abstracte / GRATUÏT
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y,
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamina i aprenentatge d'enfocament discriminat: efectes interactius de lesions de 6-hidroxidopamina i administració sistèmica d'apomorfina. Psychopharmacology (Berl) 161:425–433.
17. ↵
1. de Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Dickinson A,
4. Balleine BW
(2002) Efectes de les lesions del nucli citotòxic accumbens sobre el condicionament instrumental en rates. Exp Brain Res 144:50–68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Les interaccions directes entre l'amígdala basolateral i el nucli del nucli accumbens són la base del comportament de recerca de cocaïna de les rates. J Neurosci 24:7167–7173.
Text complet abstracte / GRATUÏT
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Propietats de reforç condicionades dels estímuls combinats amb cocaïna, heroïna o sacarosa autoadministrades: implicacions per a la persistència del comportament addictiu. Neurofarmacologia 47([Suppl 1]) 202–213.
20. ↵
1. Dickinson A
(1985) Accions i hàbits: el desenvolupament de l'autonomia conductual. Philos Trans R Lond B Biol Sci 308:67–78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Sistemes neuronals de reforç per a la drogodependència: de les accions als hàbits a la compulsió. Nat Neurosci 8:1481–1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Haberland U,
3. Conde F,
4. El Massioui N
(2005) La lesió del sistema de dopamina nigrostriatal altera la formació d'hàbits estímul-resposta. J Neurosci 25:2771–2780.
Text complet abstracte / GRATUÏT
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T,
4. Hope BT,
5. Su TP,
6. Shaham Y
(2003) Augments depenents del temps dels nivells de proteïnes del factor neurotròfic derivats del cervell dins del sistema mesolímbic de dopamina després de la retirada de la cocaïna: implicacions per a la incubació del desig de cocaïna. J Neurosci 23:742–747.
Text complet abstracte / GRATUÏT
24. ↵
1. Hall J,
2. JA del Parkinson,
3. Connor TM,
4. Dickinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Implicació del nucli central de l'amígdala i del nucli del nucli accumbens en la mediació de les influències de Pavlovian en el comportament instrumental. Eur J Neurosci 13:1984–1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Condicionament apetitiu millorat després d'un pretractament repetit amb d-amfetamina. Behav Pharmacol 9:299–308.
26. ↵
1. Hernández PJ,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002) La consolidació primerenca de l'aprenentatge instrumental requereix la síntesi de proteïnes al nucli accumbens. Nat Neurosci 5:1327–1331.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Derrocament de gens locals al cervell mitjançant interferència d'ARN mediada per virus. Nat Med 9:1539–1544.
28. ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) La preexposició sensibilitza les rates als efectes gratificants de la cocaïna. Pharmacol Biochem Behav 37:707–711.
29. ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK,
3. Schenk S
(1992) La preexposició a l'amfetamina i la nicotina predisposa les rates a autoadministrar-se una dosi baixa de cocaïna. Psychopharmacology (Berl) 107:271–276.
30. ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(1999) Millora de l'activitat locomotora i recompensa condicionada a la cocaïna pel factor neurotròfic derivat del cervell. J Neurosci 19:4110–4122.
Text complet abstracte / GRATUÏT
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Control diferencial sobre el comportament de recerca de cocaïna pel nucli i la closca del nucli accumbens. Nat Neurosci 7:389–397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Impulsivitat resultant de la disfunció frontostriatal en l'abús de drogues: implicacions per al control del comportament mitjançant estímuls relacionats amb la recompensa. Psychopharmacology (Berl) 146:373–390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Control estriatal ventral de la motivació apetitiva: paper en la conducta ingestiva i l'aprenentatge relacionat amb la recompensa. Neurosci Biobehav Rev 27:765–776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) La neurociència de les recompenses naturals: rellevància per a les drogues addictives. J Neurosci 22:3306–3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Self DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. DJ Surmeier,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) L'expressió del factor de transcripció BFosB al cervell controla la sensibilitat a la cocaïna. Natura 401: 272 – 276.
36. ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) L'amfetamina regula l'expressió gènica a l'estriat de rata mitjançant el factor de transcripció CREB. J Neurosci 14:5623–5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P.
(2006) Formació d'espina dendrítica induïda per cocaïna en neurones espinoses mitjanes que contenen receptors de dopamina D1 i D2 al nucli accumbens. Proc Natl Acad Sci USA 103:3399–3404.
Text complet abstracte / GRATUÏT
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) La ubicació dels canvis persistents induïts per amfetamines en la densitat de les espines dendrítiques en neurones espinoses mitjanes al nucli accumbens i al caudat-putamen. Neuropsicofarmacologia 28:1082–1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) La inducció de la sensibilització del comportament s'associa amb la plasticitat estructural induïda per la cocaïna al nucli (però no a la closca) del nucli accumbens. Eur J Neurosci 20:1647–1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Una única infusió de factor neurotròfic derivat del cervell a l'àrea tegmental ventral indueix una potenciació duradora de la recerca de cocaïna després de la retirada. J Neurosci 24:1604–1611.
Text complet abstracte / GRATUÏT
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) Regulació de l'expressió gènica i la recompensa de la cocaïna per CREB i ΔFosB. Nat Neurosci 6:1208–1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: un interruptor molecular per a l'adaptació a llarg termini al cervell. Brain Res Mol Brain Res 132:146–154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Activitat condicionada i reforç instrumental després del consum oral a llarg termini de cocaïna per part de rates. Behav Neurosci 118:1331–1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Mecanismes moleculars de la drogodependència. Neurofarmacologia 47([Suppl 1]) 24–32.
45. ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Self DW
(2001) ΔFosB: un interruptor molecular sostingut per a l'addicció. Proc Natl Acad Sci USA 98:11042–11046.
Text complet abstracte / GRATUÏT
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P.
(2003) La proliferació d'espines dendrítiques induïda per la cocaïna al nucli accumbens depèn de l'activitat de la quinasa-5 dependent de la ciclina. Neurociència 116:19–22.
47. ↵
1. Nye HE,
2. Hope BT,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Estudis farmacològics de la regulació de la inducció crònica d'antigen relacionada amb FOS per part de la cocaïna a l'estriat i el nucli accumbens. J Pharmacol Exp Ther 275:1671–1680.
Text complet abstracte / GRATUÏT
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) L'exposició repetida a la nicotina millora l'aprenentatge relacionat amb la recompensa a la rata. Neuropsicofarmacologia 28:1264–1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) L'exposició repetida a la nicotina millora la resposta amb reforç condicionat. Psychopharmacology (Berl) 173:98–104.
50. ↵
1. JA del Parkinson,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) La dissociació dels efectes de les lesions del nucli i la closca del nucli accumbens sobre el comportament d'aproximació pavlovià apetitiva i la potenciació del reforç condicionat i l'activitat locomotora per la d-amfetamina. J Neurosci 19:2401–2411.
Text complet abstracte / GRATUÏT
51. ↵
1. JA del Parkinson,
2. Dalley JW,
3. Cardenal RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) L'esgotament de la dopamina del nucli accumbens perjudica tant l'adquisició com el rendiment del comportament apetitiu de l'enfocament pavlovià: implicacions per a la funció de dopamina mesoaccumbens. Behav Brain Res 137:149–163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) El cervell de rata en coordenades estereotàxiques (Academic, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi I,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Inducció de ΔFosB en estructures cerebrals relacionades amb la recompensa després de l'estrès crònic. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
Text complet abstracte / GRATUÏT
54. ↵
1. Plaça PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simon H
(1990) La sensibilització conductual induïda per l'estrès i farmacològic augmenta la vulnerabilitat a l'adquisició de l'autoadministració d'amfetamines. Brain Res 514:22–26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Substrats neuronals comuns per a les propietats addictives de la nicotina i la cocaïna. Science 275:83–86.
Text complet abstracte / GRATUÏT
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Drogodependència: els mals hàbits sumen. Nature 398:567–570.
57. ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) La base neuronal del desig de drogues: una teoria d'incentius-sensibilització de l'addicció. Brain Res Brain Res Rev 18:247–291.
58. ↵
1. Robinson TE,
2. Kolb B
(1999) Alteracions en la morfologia de les dendrites i les espines dendrítiques al nucli accumbens i a l'escorça prefrontal després del tractament repetit amb amfetamina o cocaïna. Eur J Neurosci 11:1598–1604.
59. ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
(2001) L'autoadministració de cocaïna altera la morfologia de les dendrites i les espines dendrítiques al nucli accumbens i al neocòrtex. Sinapsi 39:257–266.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) Al nucli medial accumbens de la rata, els terminals de l'hipocamp i els catecolaminèrgics convergeixen en les neurones espinoses i estan en aposició entre si. Brain Res 527:266–279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Tempesta D,
4. Nestler EJ
(2003) Regulació de la transcripció mediada per CRE al cervell del ratolí per amfetamina. Sinapsi 48:10–17.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) La xarxa neuronal dels ganglis basals revelada per l'estudi de les connexions sinàptiques de les neurones identificades. Trends Neurosci 13:259–265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) Activació coincident de NMDA i dopamina D1 Els receptors dins del nucli del nucli accumbens són necessaris per a un aprenentatge instrumental apetitiu. J Neurosci 20:7737–7742.
Text complet abstracte / GRATUÏT
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) La resposta millorada per a la recompensa condicionada produïda per l'amfetamina intra-accumbens es potencia després de la sensibilització a la cocaïna. Psicofarmacologia (Berl) 142:31–40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) L'administració intermitent repetida de fàrmacs estimulants psicomotors altera l'adquisició del comportament d'enfocament pavlovià a les rates: efectes diferencials de la cocaïna, d-amfetamina i 3,4-metilendioximetanfetamina ("Èxtasi") Biol Psychiatry 50:137-143.
66. ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS,
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) La sensibilització de la reactivitat de la neurona de la dopamina del cervell mitjà promou la recerca d'amfetamina. J Neurosci 22:4654–4662.
Text complet abstracte / GRATUÏT
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) ΔFosB regula el funcionament de les rodes. J Neurosci 22:8133–8138.
Text complet abstracte / GRATUÏT
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Sensibilització d'incentius per exposició prèvia a anfetamines: augment del "desig" provocat per la recompensa de sacarosa. J Neurosci 21:7831–7840.
Text complet abstracte / GRATUÏT
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Les lesions de l'estriat dorsolateral conserven l'esperança de resultats, però pertorben la formació d'hàbits en l'aprenentatge instrumental. Eur J Neurosci 19:181–189.
70. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) Un paper essencial per a ΔFosB al nucli accumbens en l'acció de la morfina. Nat Neurosci 9:205–211.
;
