टिप्पणियाँ: अध्ययन से पता चलता है कि इनाम सर्किट में न्यूरोप्लास्टिक और व्यवहार परिवर्तन यौन गतिविधि से उत्पन्न हो सकते हैं। इनमें न्यूरॉन शाखाओं की वृद्धि और दवाओं के लिए मजबूत प्रतिक्रिया शामिल है। हमेशा की तरह, प्राकृतिक पुष्टिकरण और दवाओं का मस्तिष्क पर समान प्रभाव पड़ता है।
पिचर्स केके, बालफोर एमई, लेहमैन एमएन, रिचटैंड एनएम, यू एल, कुलेन एलएम।
बायोल मनोरोग। 2010 मई 1; 67 (9): 872-9। Epub 2009 Dec 16।
एनाटॉमी और सेल बायोलॉजी विभाग, Schulich स्कूल ऑफ मेडिसिन एंड डेंटिस्ट्री, यूनिवर्सिटी ऑफ वेस्टर्न ओन्टेरियो, लंदन, ओन्टेरियो, कनाडा।
अमूर्त
पृष्ठभूमि: दुरुपयोग के प्राकृतिक इनाम और ड्रग्स मेसोलिम्बिक सिस्टम पर अभिसरण होते हैं, जहां दुरुपयोग की दवाएं न्यूरोनल परिवर्तन को प्रेरित करती हैं। यहां, हमने प्राकृतिक इनाम और दवा प्रतिक्रियाओं पर बाद के प्रभाव के बाद इस प्रणाली में प्लास्टिसिटी का परीक्षण किया।
विधि: व्यवहार संवेदीकरण और डी-एम्फ़ैटेमिन (एएमपीएच) और गोल्गी-संसेचन डेंड्राइट्स और नाभिक accumbens (NAc) कोशिकाओं की रीढ़ के साथ जुड़े स्थान पर पुरुष चूहों में यौन अनुभव के प्रभाव निर्धारित किए गए थे। इसके अलावा, इन मापदंडों पर अनुभवी पुरुषों में यौन व्यवहार से संयम के प्रभाव का परीक्षण किया गया था।
परिणामों के लिए: सबसे पहले, बार-बार यौन व्यवहार ने एक संवेदनशील लोकोमोटर प्रतिक्रिया को प्रेरित किया AMPH के साथ तुलना में यौन अनुभवहीन नियंत्रण विषयों 1, 7 और 28 दिनों के बाद पिछले संभोग सत्र मनाया। दूसरे, यौन रूप से अनुभवी जानवरों ने यौन रूप से भोले पुरुषों की तुलना में एएमपीएच की कम खुराक के लिए एक सशर्त स्थान वरीयता का गठन किया, एएमपीएच के बढ़ाया इनाम मूल्य का संकेत। अंत में, गोल्गी-कॉक्स विश्लेषण ने यौन अनुभव के साथ NAc कोर और शेल में डेंड्राइट्स और रीढ़ की संख्या में वृद्धि का प्रदर्शन किया। बाद के दो परिवर्तन 7-10 दिनों के संयम की अवधि पर निर्भर थे।
निष्कर्ष: यौन अनुभव मेसोलेम्बिक प्रणाली में कार्यात्मक और रूपात्मक परिवर्तनों को प्रेरित करता है, जो कि मनोचिकित्सकों के दोहराए जाने के समान है। इसके अलावा, बार-बार संभोग के बाद यौन व्यवहार से संयम ड्रग्स और NAc न्यूरॉन्स के डेंड्रिटिक arbors के लिए बढ़े हुए इनाम के लिए आवश्यक था, यह सुझाव देते हुए कि यौन इनाम का नुकसान भी मेसोलिम्बिक सिस्टम के न्यूरोप्लास्टिकिटी में योगदान कर सकता है। इन परिणामों से पता चलता है कि मेसोलेम्बिक प्रणाली में कुछ परिवर्तन प्राकृतिक और नशीली दवाओं के इनाम के लिए आम हैं और सामान्य सुदृढीकरण में भूमिका निभा सकते हैं।
जैविक मानसिक रोग के कॉपीराइट 2010 सोसायटी। Elsevier Inc. द्वारा प्रकाशित सभी अधिकार सुरक्षित।
परिचय
मेसोलिम्बिक डोपामाइन (DA) प्रणाली, नाभिक accumbens (NAc) और औसत दर्जे का प्रीफ्रंटल कॉर्टेक्स (mPFC) के अनुमानों के साथ उदर संबंधी टेक्टेक्टोरल क्षेत्र (VTA) में डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स से मिलकर व्यवहार के प्रेरक और पुरस्कृत पहलुओं में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। आक्रामकता (1), खिला (2-7), पीने (8), संभोग (9-11) और सामाजिक बंधन (12-13)। दुर्व्यवहार की दवाएं मेसोलेम्बिक डीए प्रणाली पर अभिसरित होती हैं (14-15)। इसके अलावा, बार-बार दवा प्रशासन इन मार्गों में न्यूरोनल परिवर्तन को प्रेरित कर सकता है, जो बदले में नशीली दवाओं की लत के लिए संवेदनशीलता बढ़ाने या नशीली दवाओं के उपयोग से नशा करने के लिए संक्रमण में एक भूमिका निभाता है (16-18)। आर के व्यवहार प्रभावएपिस्टेड ड्रग एडमिनिस्ट्रेशन में साइकोस्टिम्युलेंट्स और ओपिएट्स के प्रति संवेदनशील लोकोमोटर प्रतिक्रिया शामिल है (19-21), एक बढ़ा हुआ दवा इनाम (22-24), एकnd पूर्व दवा सेवन के साथ जुड़े cues के लिए संचालक प्रतिक्रियाएं बढ़ीं (25)। इसके अलावा, बार-बार ड्रग एडमिनिस्ट्रेशन के परिणामस्वरूप मेसोलेम्बिक बारूई में डेंड्राइटिक आकृति विज्ञान और रीढ़ की घनत्व में लंबे समय तक चलने वाले परिवर्तन होते हैंटी (16, 26-31), और जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन लाती है (32-35). अंत में, बार-बार ड्रग प्रशासन मिडब्रेन डोपामाइन न्यूरॉन्स पर उत्तेजक और निरोधात्मक synapses में synaptic ताकत बदल देता है (36-41), और एनएके में न्यूरॉन्स (42-44)। वर्तमान में यह स्पष्ट नहीं है कि मेसोलेम्बिक सिस्टम में इसी तरह के परिवर्तन प्राकृतिक पुरस्कारों के लिए बार-बार संपर्क में आते हैं। यह निर्धारित करना कि दुरुपयोग की दवाओं के साथ इस तरह के परिवर्तन ओवरलैप करते हैं या अद्वितीय हैं, सामान्य इनाम सुदृढीकरण बनाम एक विशेष इनाम की अनिवार्य मांग के बीच अंतर को अंतर्निहित सेलुलर तंत्र की बेहतर समझ का कारण बन सकता है।
दवाओं के अलावा उत्तेजनाओं का समर्थन करने वाली परिकल्पना का समर्थन करना मेसोलेम्बिक प्रणाली में न्यूरोनल परिवर्तन का कारण बन सकता है जो तनावपूर्ण उत्तेजनाओं को डोपामाइन सिस्टम को सक्रिय करते हैं (45-47), और साइकोमोटर उत्तेजक उत्तेजना का कारण बनता है (21, 48-50) और स्व-प्रशासन मॉडल में रिलैप्स (51-54)। हालांकि, कुछ अध्ययनों ने जांच की है कि क्या प्राकृतिक पुरस्कृत व्यवहार भी डीए प्रणाली में कार्यात्मक परिवर्तन उत्पन्न कर सकते हैं (6, 55-56). इसलिए, परिकल्पना का परीक्षण किया गया था कि पुरुष यौन अनुभव, लोकोमोटर संवेदीकरण, वातानुकूलित स्थान वरीयता, और NAc न्यूरॉन्स के डेन्ड्राइट आकृति विज्ञान पर यौन अनुभव के प्रभावों के विश्लेषण के माध्यम से मेसोलिम्बिक डीए प्रणाली के भीतर न्यूरोनल परिवर्तन का कारण बनता है।। इसके अलावा, हमने परिकल्पित किया कि इन परिवर्तनों की शुरुआत के लिए यौन व्यवहार (यौन इनाम) से एक संयम अवधि महत्वपूर्ण है, हाल ही में टिप्पणियों के आधार पर कि ड्रग से परहेज तंत्रिका मादक द्रव्य के विकास में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है जो बार-बार नशीली दवाओं के जोखिम से जुड़ा होता है (40, 57-59).
विधि
जानवरों
वयस्क नर स्प्रैग डावली चूहों (एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएक्स ग्राम) को हार्लन लेबोरेटरीज (इंडियानापोलिस, आईएन, यूएसए) या चार्ल्स रिवर लेबोरेटरीज (सेनेविले, क्यूसी, कनाडा) से प्राप्त किया गया था और सुरंग ट्यूबों के साथ पिगिलैल्स पिंजरों में रखा गया था। प्रयोगों (एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएनएक्स) के प्रयोगों के दौरान नर को एक ही सेक्स जोड़े में रखा गया था, केवल एक्सएनयूएमएक्स के अलावा, जिसमें पुरुषों को अध्ययन की शुरुआत में रखा गया था। भोजन और पानी के साथ 210 / 250 घंटा प्रकाश अंधेरे चक्र पर तापमान-नियंत्रित कॉलोनी कमरे को बनाए रखा गया था बिना तैयारी के व्यवहार परीक्षण के दौरान छोड़कर। संभोग व्यवहार सत्रों के लिए स्टिमुलस महिलाओं (210-220 ग्राम) द्विपक्षीय रूप से ovariectomized थे और 5% एस्ट्राडियोल बेंजोएट और 95 कोलेस्ट्रॉल युक्त एक उपचर्म प्रत्यारोपण प्राप्त किया था। यौन ग्रहणशीलता 500 ml तिल के तेल में 0.1μg प्रोजेस्टेरोन के प्रशासन द्वारा परीक्षण से पहले लगभग 4 घंटे से प्रेरित थी। सभी प्रक्रियाओं को सिनसिनाटी विश्वविद्यालय और पश्चिमी ओंटारियो विश्वविद्यालय की पशु देखभाल और उपयोग समितियों द्वारा अनुमोदित किया गया था, और अनुसंधान में कशेरुक जानवरों को शामिल करते हुए NIH और CCAC दिशानिर्देशों के अनुरूप थे।
दवा से इलाज
डी-एम्फेटामाइन (एएमपीएच) सल्फेट (सिग्मा, सेंट लुइस, एमओ) बाँझ एक्सएनयूएमएक्स% खारा (एसएएल) में भंग कर दिया गया था। जानवरों को एक्सएमयूएमएक्स / एक्सएनयूएमएक्स मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन के साथ एएमपीएच खुराक प्राप्त हुई, जो कि नि: शुल्क आधार पर गणना की गई, एक्सएनयूएमएक्सएमएल / किग्रा शरीर के वजन की मात्रा में। नियंत्रण जानवरों SAL प्राप्त किया। व्यवहारिक तंत्र में नियुक्ति से तुरंत पहले प्रकाश चरण (0.9-0.5 घंटे बाद रोशनी पर) के पहले छमाही के दौरान सभी इंजेक्शन चमड़े के नीचे दिए गए थे।
लोकोमोटर गतिविधि परीक्षण
लोकोमोटर गतिविधि को कस्टम-डिज़ाइन किए गए लोकोमोटर गतिविधि कक्षों (LAC) का उपयोग करके मापा गया था, जो सेगल और कुक्ज़ेंस्की द्वारा डिज़ाइन किए गए कक्षों पर आधारित थे (60)। लोकोमोटर गतिविधि को 16 × 16 फोटोबाइम सरणी (सैन डिएगो इंस्ट्रूमेंट्स, सैन डिएगो, सीए) का उपयोग करके मापा गया था और क्रोसोवर्स प्रति मिनट (ओं) के रूप में व्यक्त किया गया था। हर बार जब कोई जानवर चेम्बर के "सक्रिय क्षेत्रों" में प्रवेश करता है, तो एक क्रॉसओवर रिकॉर्ड किया गया था, जिसे छायांकित क्षेत्रों के रूप में दर्शाया गया था चित्रा 1A (61).
यौन व्यवहार परीक्षण
सभी प्रयोगों में, यौन भोले पुरुष चूहों को यादृच्छिक रूप से उन समूहों में विभाजित किया गया था जो या तो यौन अनुभव प्राप्त करते थे या भोले बने रहते थे। अनुभव के लिए, मंद लाल रोशनी के तहत अंधेरे चरण (3-8 घंटे बाद रोशनी) के पहले छमाही के दौरान सभी संभोग परीक्षण किए गए थे। पशु जो यौन रूप से भोले बने हुए थे, उन्हें उसी कमरे में रखा गया था, जो यौन रूप से अनुभवी पुरुषों के समान थे, इसलिए अनुभवी जानवरों के रूप में गड़बड़ी, पर्यावरण नवीनता और दूर की मादा गंधों के समान स्तर के संपर्क में थे। सभी प्रयोगों के लिए, यौन अनुभव वाले पुरुषों के समूहों का यौन अनुभव के लिए मिलान किया गया (स्खलन की संख्या के आधार पर, और पिछले संभोग सत्र के दौरान स्खलन और घुसपैठ के लिए विलंबता)।
प्रयोग 1
आंतरायिक संभोग और पर्यावरण के प्रभावों का परीक्षण करने के लिए 1 और 2 ने अलग-अलग प्रतिमानों का उपयोग किया। 1 के प्रयोग में, यौन रूप से अनुभवी समूहों में जानवरों को 5 रुक-रुक कर मिले सत्रों को 3 – 4 दिनों के अलावा मिला, जिसके दौरान उन्होंने अपने घर के पिंजरों में 3 मैथुनक्रियात्मक श्रृंखला (स्खलन सहित) या 60 मिनटों के साथ ग्रहण किया। पांच से अधिक संचयी मैथुन श्रृंखलाओं को पूरा करने वाले जानवरों को यौन रूप से अनुभवी माना जाता था। यौन भोले जानवरों को महिला साथी नहीं मिली। पिछले संभोग सत्र के बाद एक सप्ताह, यौन अनुभवी और भोले जानवरों को AMPH (0.5 मिलीग्राम / किग्रा) या SAL को चार समूहों के कुल समूहों में विभाजित किया गया (Naïve Amphetamine: NA; अनुभवी Amphetamine: EA; Naïve Saline: NS; और; अनुभवी नमकीन: ES; n = 6 प्रत्येक)।
प्रयोग 2
यह प्रयोग तीन तरीकों से प्रयोग 1 से अलग है: 1। जानवरों को लगातार दिनों के दौरान एक स्खलन के लिए mated; 2। जानवरों को उसी पिंजरे में रखा जाता है, जिसमें उन्हें AMPH (LAC में) प्राप्त हुआ था; 3। एएमपीएच के बाद लोकोमोटर गतिविधि का यौन अनुभव के बाद तीन अलग-अलग समय पर विश्लेषण किया गया था। यौन रूप से अनुभवी जानवरों को एलएसी में लगातार दैनिक संभोग सत्र प्राप्त हुए और एलएसी में प्लेसमेंट और महिला को पेश करने के बीच एक्सएनयूएमएक्स मिनट के दौरान लोकोमोटर गतिविधि दर्ज की गई। संभोग के बिना लगातार सात सत्रों के लिए यौन भोले जानवरों को एलएसी में रखा गया था। अंतिम संभोग सत्र (प्रयोग का दिन 7) के बाद का दिन, जानवरों को तुरंत AMPH (15 mg / kg) या SAL (Naïve Amphetamine: NA: अनुभवी Amphetamine: EA: Naïve Saline: NS) के इंजेक्शन के बाद LAC में रखा गया; और अनुभवी नमकीन: ES; n = 8-0.5 प्रत्येक) और लोकोमोटर गतिविधि दर्ज की गई थी। अंतिम संभोग सत्र (डे 8) के बाद एक सप्ताह में फिर से एलएसी में जानवरों का परीक्षण किया गया। डे 9 पर एएमपीएच प्राप्त करने वाले जानवरों को डे एक्सएनयूएमएक्स पर एसएएल प्राप्त हुआ, और डे एक्सएनयूएमएक्स पर एसएएल प्राप्त करने वाले जानवरों ने एएमएनएच को डे एक्सएनयूएमएक्स पर प्राप्त किया। आरएनए निष्कर्षण (इस रिपोर्ट में शामिल नहीं किए गए डेटा) के लिए एक दिन बाद आधे भोले और अनुभवी जानवरों की बलि दी गई। अंतिम संभोग सत्र (दिन 14) के बाद के एक महीने में, जानवरों के शेष आधे हिस्से (Naïve, n = 8; अनुभवी, n = 14) को AMPH और लोकोमोटर गतिविधि दर्ज की गई।
डेटा विश्लेषण
लोकोमोटर गतिविधि
AMPH या SAL इंजेक्शन के बाद 3 मिनट के लिए 90- मिनट डिब्बे में डेटा एकत्र किया गया था। परिणामों को प्रत्येक समूह के लिए माध्य mean SEM के रूप में दिखाया गया है और दो-तरफ़ा एनोवा (प्रयोग एक्सएनयूएमएक्स, एक्सएनयूएमएक्स दिनों एक्सएनयूएमएक्स-एक्सएनयूएमएनएक्स: कारक: यौन अनुभव, दवा उपचार) या एक तरफ़ा एनोवा (प्रयोग एक्सएनयूएमएक्स दिन एक्सएनयूएमएक्स और गतिविधि का उपयोग करके विश्लेषण किया गया है) संभोग सत्र से पहले; कारक: यौन अनुभव)। पोस्ट-हॉक पी-मूल्य <0.05 पर निर्धारित महत्व के साथ फिशर एलएसडी परीक्षणों का उपयोग करके तुलना की गई थी।
वातानुकूलित स्थान वरीयता (CPP) परीक्षण
उपकरण
CPP को तीन-डिब्बे तंत्र (मेड एसोसिएट्स इंक, सेंट एल्बन्स, वीटी, यूएसए) में प्रदर्शित किया गया था, जिसमें दो बड़े, बाहरी कक्ष (28 × 22 × 21cm) शामिल थे, जो दृश्य और स्पर्शनीय संकेतों से अलग होते थे, एक छोटे केंद्रीय द्वारा अलग होते थे। कम्पार्टमेंट (13 × 12 × 21cm)। लोकोमोटर गतिविधि को ट्रैक करने और मापने के स्वचालित विश्लेषण के लिए उपकरण फोटो-बीम से सुसज्जित था।
कंडीशनिंग और परीक्षण
सीपीपी कंडीशनिंग और परीक्षण प्रकाश अवधि के पहले छमाही के दौरान आयोजित किया गया था। प्रत्येक जानवर की प्रारंभिक वरीयता निर्धारित करने के लिए एक बहाना बनाया गया था। किसी भी कक्ष में बिताए समय के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया गया। अगले दिन, पुरुष चूहों को या तो एएमपीएच-युग्मित कक्ष तक या 30 मिनटों के लिए एसएएल-युग्मित कक्ष तक सीमित कर दिया गया। चूहों ने विपरीत उपचार के बाद प्रति दिन विपरीत उपचार प्राप्त किया। एक पोस्टटेस्ट जो प्रक्रियात्मक रूप से प्रेटेस्ट के समान था, अंतिम दिन आयोजित किया गया था।
प्रयोग 3
यौन अनुभवी समूहों में जानवरों को परीक्षण पिंजरों में लगातार दैनिक संभोग सत्र प्राप्त हुए। डे 5 को पहले संभोग दिवस के लिए सौंपा गया था। नियंत्रण पुरुष यौन रूप से भोले रहे, लेकिन 1 घंटे के लिए लगातार 1 घंटे के लिए एक साफ परीक्षण पिंजरे में रखा गया था। जानवरों को एएमपीएच (मिलीग्राम / किग्रा; एससी) की विभिन्न खुराक प्राप्त करने वाले समूहों में विभाजित किया गया था: (Na intove: N5, N0.5, N1.0 या N2.5, n = 5.0-7 प्रत्येक; अनुभव: E8, E0, E0.5, E1.0, E2.5)। -5.0 प्रत्येक)। प्रीटेस्ट एक्सएनयूएमएक्स, एक्सएनयूएमएक्स और एक्सएनयूएमएक्स पर दिन में कंडीशनिंग ट्रायल हुआ, और एक्सएनयूएमएक्स पर पोस्टटेस्ट हुआ। कंडीशनिंग से पहले यौन व्यवहार से संयम के 6 दिनों के लिए इस अनुसूची की अनुमति है।
प्रयोग 4
एक्सपेरिमेंट एक्सएनयूएमएक्स के समान संभोग के लगातार दिनों के दौरान यौन रूप से अनुभवी पुरुषों ने यौन अनुभव प्राप्त किया। प्रयोग 5 के साथ मुख्य अंतर यह था कि सीपीपी परीक्षण तब हुआ जब जानवर यौन अनुभव प्राप्त कर रहे थे, इस प्रकार यौन व्यवहार से संयम की अवधि नहीं थी। इसके बजाय, पहले 3 संभोग सत्र के बाद कंडीशनिंग परीक्षण शुरू हुआ। जानवरों को एएमपीएच (मिलीग्राम / किग्रा; एससी) की विभिन्न खुराक प्राप्त करने वाले समूहों में विभाजित किया गया था (Na intove: N4, N3, N0.5 या N1.0, n = 2.5-5.0 प्रत्येक; अनुभव: E6, E8, E0, E0.5, E1.0) -2.5 प्रत्येक)।
डेटा विश्लेषण
CPP के स्कोर की गणना प्रत्येक के लिए एक ताल के रूप में की गई (सेकंड) जोड़े गए कक्ष में समय (सेकंड) के बाद माइनस प्रेटेस्ट के दौरान। समूह साधनों की गणना की गई और उनकी तुलना SAL- उपचारित समूह (E0) के बिना अप्रकाशित टी परीक्षणों के साथ की गई। सभी प्रयोगों के लिए महत्व को p-value <0.05 पर सेट किया गया था।
गोल्गी प्रयोग
प्रयोग 5
यौन रूप से अनुभवी समूहों के पुरुषों को एक ग्रहणशील महिला के साथ एक परीक्षण पिंजरे में रखा गया था और एक स्खलन या 60 मिनट तक संभोग करने की अनुमति दी गई थी, जो भी पहले 7 के दौरान लगातार हुआ। नियंत्रण पुरुष यौन रूप से भोले रहे, लेकिन उनके घर के पिंजरे से ले जाया गया और लगातार सात दिनों तक प्रत्येक दिन 30 मिनट के लिए स्वच्छ परीक्षण पिंजरे में रखा गया। अनुभवी या भोले-भाले जानवरों के समूहों को या तो एक दिन (N1; n = 5; E1; n = 7) या 7 दिन (N7, E7; n = 5 प्रत्येक) की बलि दी गई जो अंतिम संभोग सत्र के बाद या परीक्षण पिंजरे के संपर्क में थे। यौन रूप से अनुभवी समूह अनुभव में भिन्न नहीं थे।
ऊतक प्रसंस्करण
अंतिम संभोग सत्र या परीक्षण पिंजरे के संपर्क में आने के बाद एक दिन या एक सप्ताह, जानवरों को सोडियम पेंटोबार्बिटल (आईपी) का ओवरडोज दिया गया था और खारेपन के एक्सएनयूएमएक्स एमएल के साथ सुगंधित किया गया था। पुघ और रोसी से अनुकूलित विधि का उपयोग करके गोलियां-कॉक्स धुंधला करने के लिए दिमागों को संसाधित किया गया था (62)। अधिक जानकारी के लिए देखें अनुपूरक 1.
डेटा विश्लेषण
कैमरा Lucida चित्र प्रत्येक जानवर में दुम NAc कोर और खोल उपसमूह में 5-7 न्यूरॉन्स से बने थे। कोशिकाओं का चयन किया गया था, जिसके लिए पूरे या बहुसंख्यक डेन्ड्रिटिक शाखाएं दिखाई दे रही थीं और पड़ोसी कोशिकाओं से अलग दिखना आसान था। केंद्रापसारक आदेश द्वारा वृक्ष के समान शाखाओं को निर्धारित किया गया था (63) और प्रति जानवर औसत गणना की गई। प्रति सेल (40-4 कोशिकाओं प्रति जानवर) में दो सेकंड ऑर्डर डेंड्राइट्स की 7 μm लंबाई पर डेंड्रिटिक स्पाइन की मात्रा निर्धारित की गई थी। समूह साधनों की तुलना दो-तरफ़ा एनोवा (कारकों: सेक्स अनुभव और संयम अवधि) का उपयोग करके की गई थी और इसके लिए फ़िशर एलएसडी परीक्षण पोस्ट अस्थायी विश्लेषण.
परिणामों
प्रयोग 1
प्रयोग 1 का लक्ष्य यह निर्धारित करना था कि यौन अनुभव पुरुष चूहों में एएमपीएच के लिए लोकोमोटर प्रतिक्रिया को प्रभावित करता है या नहीं। 90-मिनट की अवधि के दौरान लोकोमोटर गतिविधि को 0.5 mg / kg AMPH या SAL के साथ उपचार के बाद यौन अनुभवी और भोले चूहों में मापा गया। एक्सपेरिमेंट 1 के परिणामों का चित्रण किया गया है चित्रा 1। दोनों सेक्स अनुभव (एफ)1,22= 15.88; पी = एक्सएनयूएमएक्स) और दवा उपचार (एफ1,22= 45.00; पी <0.0001) पर लोकोमोटर गतिविधि पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा और यौन अनुभव और नशीली दवाओं के उपचार के बीच दो-तरफा बातचीत देखी गई (एफ1,1,22= 14.27; पी = 0.0010)। विशेष रूप से, दोनों भोले और अनुभवी जानवरों ने उपयुक्त एसएएल नियंत्रणों की तुलना में एएमपीएच के लिए काफी वृद्धि हुई लोकोमोटर प्रतिक्रिया दिखाई। इसके अलावा, यौन अनुभवी चूहों ने भोले जानवरों की तुलना में एएमपीएच के लिए एक बढ़ी हुई लोकोमोटर प्रतिक्रिया प्रदर्शित की। यौन अनुभवी और भोले-भाले चूहों ने एसएएल के प्रति अपनी प्रतिक्रिया में अंतर नहीं किया।
एक्सएमयूएमएक्स मिनट और एक्सएनयूएमएक्स मिनटों के छोटे समय अंतराल में एएमपीएच के लिए लोकोमोटर प्रतिक्रियाओं का विश्लेषण सचित्र है। चित्रा 1, पैनल सीएफ। यौन रूप से अनुभवी पुरुषों ने एक्सएमयूएमएक्स-मिनट परीक्षण अवधि में भोले चूहों की तुलना में एएमपीएच के लिए एक बढ़ी हुई लोकोमोटर प्रतिक्रिया प्रदर्शित की। इसके अलावा, यौन रूप से अनुभवी चूहों ने एक्सएनयूएमएक्स-मिनट की परीक्षण अवधि में अपने एसएएल नियंत्रणों की तुलना में एएमपीएच के लिए एक बढ़ी हुई लोकोमोटर प्रतिक्रिया दिखाई, जबकि भोले जानवरों ने केवल पिछले एक्सएनएक्सएक्स-मिनट के अंतराल के दौरान काफी अधिक लोकोमोटर प्रतिक्रिया प्रदर्शित की (चित्रा 1; पी-मान आंकड़ा किंवदंती में सूचीबद्ध हैं)।
प्रयोग 2
प्रयोग 2 का लक्ष्य यह परीक्षण करना था कि क्या यौन अनुभव जानवरों में लोकोमोटर संवेदीकरण के परिणामस्वरूप होता है, जो लगातार दिनों के दौरान और उसी वातावरण में होते हैं, जिसमें वे एएमपीएच के संपर्क में आते हैं। प्रत्येक संभोग सत्र से पहले 15 मिनट के दौरान सेक्स-युग्मित वातावरण के संपर्क में वृद्धि हुई लोकोमोटर गतिविधि के कारण (चित्रा 1 अनुपूरक में S1), यौन व्यवहार और पर्यावरण के बीच सीखा संघ का चित्रण। इसके अलावा, प्रयोग 2 ने यौन रूप से अनुभवी पुरुष चूहों में एएमपीएच को लोकोमोटर संवेदीकरण के अस्थायी पैटर्न की जांच की। एएमपीएच या एसएएल के लिए लोकोमोटर प्रतिक्रिया को एक दिन (डे एक्सएनयूएमएक्स), एक सप्ताह (डे एक्सएनयूएमएक्स) और एक महीने (डे एक्सएनयूएमएक्स) को पिछले संभोग सत्र के बाद मापा गया था। प्रयोग 8 के रूप में, यौन अनुभवी चूहों ने भोले जानवरों की तुलना में एएमपीएच के लिए अधिक से अधिक लोकोमोटर प्रतिक्रिया प्रदर्शित की। इसके अलावा, तीनों परीक्षण दिनों में यह प्रभाव स्पष्ट था। चित्रा 2 परीक्षणों के अंतिम 60 मिनटों के दौरान लोकोमोटर गतिविधि दिखाता है, जिसके दौरान सबसे मजबूत अंतर देखे गए थे, और पहले 30 मिनटों के लिए डेटा दिखाए गए हैं चित्रा S2 (अनुपूरक 1)। Nave और अनुभवी जानवरों ने किसी भी परीक्षण के दिन एसएएल के प्रति अपनी प्रतिक्रिया में भिन्न नहीं थे, और एएमपीएच प्राप्त करने वाले चूहों ने अपने एसएएल नियंत्रणों की तुलना में, लोकोमोटर गतिविधि को बढ़ाया।चित्रा 2; पी-मान आंकड़ा किंवदंती में सूचीबद्ध हैं)।
प्रयोग 3
प्रयोग एक्सएनयूएमएक्स ने वातानुकूलित एएमपीएच इनाम पर प्रभाव यौन अनुभव की जांच की। एएमपीएच सीपीपी को अंतिम संभोग सत्र के बाद यौन रूप से भोले और अनुभवी पुरुषों 3 दिनों में परीक्षण किया गया था। यौन रूप से अनुभवी जानवर एक उन्नत वातानुकूलित इनाम दिखाते हैं। विशेष रूप से, यौन रूप से अनुभवी पुरुषों ने एक्सएमयूएमएक्स और एक्सएनयूएमएक्स मिलीग्राम / किग्रा की कम खुराक के साथ एएमपीएच-युग्मित कक्ष के लिए एक मजबूत वरीयता का गठन किया, लेकिन उच्च खुराक एक्सएनयूएमएक्स या एक्सएनएक्सएक्स मिलीग्राम / किग्रा के साथ नहीं। इसके विपरीत, यौन भोले पुरुषों ने केवल उच्च खुराक, 10 और 0.5 मिलीग्राम / किग्रा के साथ एएमपीएच-युग्मित कक्ष के लिए एक मजबूत वरीयता का गठन किया, न कि कम खुराक (चित्रा 3A; पी-मान आंकड़ा किंवदंती में सूचीबद्ध हैं)।
प्रयोग 4
प्रयोग 3 ने दिखाया कि संयम की अवधि के बाद यौन अनुभव ने AMPH इनाम को बढ़ाया। प्रयोग 4 ने जांच की कि क्या सशर्त AMPH इनाम पर यौन अनुभव का प्रभाव संयम की इस अवधि पर निर्भर था। परिणामों ने संकेत दिया कि यौन रूप से अनुभवी जानवरों ने एएमपीएच के बढ़े हुए इनाम के मूल्य को नहीं दिखाया। यौन रूप से अनुभवी और भोले जानवरों ने एएमपीएच-युग्मित कक्ष के लिए एक्सएनयूएमएक्स और एक्सएनयूएमएक्स मिलीग्राम / किग्रा की उच्च खुराक के साथ एक मजबूत प्राथमिकता दिखाई। हालांकि, न तो यौन रूप से अनुभवी या भोले पुरुषों ने 2.5 और 5.0 मिलीग्राम / किग्रा खुराक की कम खुराक के साथ एक बढ़ा हुआ सीपीपी स्कोर दिखाया। एक्सएनयूएमएक्स मिलीग्राम / किग्रा की सबसे कम खुराक ने भी प्रतिसाद दिया, लेकिन यह केवल एएमपीएच-युग्मित कक्ष के लिए यौन रूप से अनुभवी जानवरों में महत्व तक पहुंच गया (चित्रा 3B; पी-मान आंकड़ा किंवदंती में सूचीबद्ध हैं)।
प्रयोग 5
एक्सपेरिमेंट एक्सएनयूएमएक्स का उद्देश्य मेसोलेम्बिक सिस्टम में रूपात्मक परिवर्तनों की जांच करना था, विशेष रूप से यौन अनुभव के बाद एनएसी। एक सप्ताह में रूपात्मक परिवर्तन स्पष्ट थे (चित्रा 4H, J और L; पी-मान आंकड़ा किंवदंती में सूचीबद्ध हैं), लेकिन एक दिन नहीं (चित्रा 4G, I और K), पिछले संभोग सत्र के बाद। विशेष रूप से, डेंड्राइट्स की संख्या में उल्लेखनीय वृद्धि (वृद्धि हुई डेंड्रिटिक शाखा का संकेत) एनएसी कोर और (चित्रा 4H और जे)। इसके अलावा, शेल और कोर दोनों क्षेत्रों में एक सप्ताह में डेंड्राइटिक स्पाइन की संख्या में काफी वृद्धि हुई थी, लेकिन एक दिन नहीं, सेक्स अनुभव के बाद (चित्रा 4L).
चर्चा
इस अध्ययन से पता चलता है कि यौन अनुभव और यौन व्यवहार के बाद के अनुभव संयम पुरुष चूहों की मेसोलिम्बिक प्रणाली में कार्यात्मक और रूपात्मक परिवर्तन को प्रेरित करते हैं। कार्यात्मक परिवर्तन एक संवेदी लोकोमोटर प्रतिक्रिया के रूप में स्पष्ट थे और यौन अनुभव के बाद एएमपीएच के साथ एक बढ़ाया वातानुकूलित इनाम।
संवेदीकृत लोकोमोटर प्रतिक्रिया को 1 दिन के रूप में देखा गया और अंतिम संभोग सत्र के बाद 28 दिनों तक बनाए रखा गया. इसके विपरीत, बढ़ाया सशर्त AMPH इनाम केवल यौन व्यवहार से संयम की अवधि के बाद स्पष्ट था। एनएसी के कोर और शेल उप-भाग दोनों में रूपात्मक परिवर्तन 7 दिनों में देखे गए, लेकिन 1 दिन नहीं, यौन रूप से अनुभवी जानवरों में अंतिम संभोग सत्र के बाद। साथ में इन आंकड़ों से पता चलता है कि यौन अनुभव मेसोलेम्बिक प्रणाली में प्लास्टिसिटी को प्रेरित करता है और संभोग से एक संयम की अवधि कुछ के विकास के लिए महत्वपूर्ण है, लेकिन सभी मेसोलिम्बिक प्रणाली में परिवर्तन नहीं होता है।
यह अच्छी तरह से पहचाना जाता है कि प्राकृतिक पुरस्कृत व्यवहार और नशीली दवाओं के दुरुपयोग एक ही तंत्रिका मार्गों के भीतर कार्य करते हैं (64)। वास्तव में, दुर्व्यवहार की दवाओं को पुरस्कृत व्यवहार की अभिव्यक्ति को प्रभावित करने के लिए प्रदर्शित किया गया है (65-67), पुरुष चूहे के यौन व्यवहार सहित (67-70)। बार-बार ड्रग एडमिनिस्ट्रेशन के कारण होने वाले यौन व्यवहार और प्रेरणा में परिवर्तन दवा से वापसी या संयम की अवधि पर निर्भर करता है, साथ ही साथ वातावरण जिसमें दवा प्रस्तुत की गई थी। वर्तमान अध्ययन से पता चला है कि यौन व्यवहार के संपर्क में दुरुपयोग की दवाओं के प्रति जवाबदेही बदल जाती है। यह निर्धारित किया गया था कि यौन रूप से अनुभवी नर चूहों को एएमपीएच के लोकोमोटर प्रभावों के प्रति संवेदनशील किया जाता है, और यह घटना संभोग से लंबे समय तक चलने वाली और संयम की अवधि से स्वतंत्र है। इसके अलावा, संवेदी लोकोमोटर प्रतिक्रिया संभोग अनुसूची या संभोग के माहौल से स्वतंत्र थी और लगातार या रुक-रुक कर संभोग सत्रों का पालन किया गया था जो कि ड्रग एक्सपोजर के रूप में एक ही या अलग वातावरण में हुआ था। एसमहिला हैम्स्टर्स में की गई ट्यूडीज़ से पता चलता है कि यौन रूप से अनुभवी महिला हैमस्टर्स एएमपीएच-प्रेरित स्थानिक प्रतिक्रिया की अधिक तीव्र शुरुआत दिखाती हैं यौन भोले नियंत्रण की तुलना में (71)। हालांकि, कृन्तकों ने साइकोस्टिम्युलंट्स के लिए यौन मंदक प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया (72-73)। इस प्रकार, वर्तमान अध्ययन मादा हैमस्टर में निष्कर्षों का विस्तार करते हैं और पुरुष चूहों में प्रदर्शित होते हैं, तेजी से शुरुआत और यौन व्यवहार के बाद साइकोस्टिम्युलंट्स के लिए विस्तारित लोकोमोटर प्रतिक्रियाओं की लंबी अवधि।
यह वर्तमान अध्ययनों से स्पष्ट नहीं है कि यौन व्यवहार के कौन से तत्व एएमपीएच लोकोमोटर संवेदीकरण में योगदान करते हैं और यदि सामाजिक बातचीत पर्याप्त है। 2 में प्रयोग किए जाने वाले जानवर जो यौन अनुभव के मानदंडों तक पहुंचने में विफल रहे (प्रदर्शित mounts और इंट्रोमिशन, लेकिन संभोग सत्र के दौरान 5 स्खलन के लिए मैथुन नहीं किया) ने एक संवेदनशील प्रतिक्रिया नहीं दिखाई (चित्रा 3 अनुपूरक में S1)। इसलिए, एक अतिरिक्त प्रयोग किया गया था, जिसके दौरान पुरुषों को शारीरिक बातचीत के बिना एक ग्रहणशील महिला से अवगत कराया गया था, या माउंट और इंट्रोमिशन को प्रदर्शित किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप एएमपीएच के प्रति संवेदनशील लोकोमोटर प्रतिक्रियाएं नहीं हुईं (चित्रा 4 अनुपूरक में S1)। इस प्रकार, सामाजिक सहभागिता AMPH संवेदीकरण पर यौन अनुभव के प्रभावों में योगदान करने के लिए प्रकट नहीं होती है, बल्कि स्खलन सहित मैथुन करना प्लास्टिक के इस रूप के लिए आवश्यक प्रतीत होता है।
एक संवेदनशील व्यवहार प्रतिक्रिया के अलावा, यौन अनुभव एएमपीएच के वातानुकूलित इनाम मूल्य को बढ़ाता है, लेकिन केवल यौन पुरस्कार से परहेज के बाद। सीपीपी का उपयोग करने वाले पिछले काम ने दिखाया है कि मनोवैज्ञानिकों को बार-बार एक्सपोजर या ड्रग-प्रेरित लोकोमोटर सेंसिटाइजेशन के अनुरूप दवा-प्रेरित पुरस्कृत प्रभाव को बढ़ाता है (22-24)। या तो कोकीन (5 mg / kg) के 10 दिनों के लिए बार-बार प्रशासन, d- एम्फ़ैटेमिन (0.5 mg / kg) या मॉर्फिन (5 mg / kg) कोकीन के पुरस्कृत प्रभावों को संवेदनशील करता है जब दवा के पूर्व उपचार के बाद 3 दिनों का परीक्षण किया जाता है। । SAL पूर्व-उपचार नियंत्रण जानवरों की तुलना में कम कंडीशनिंग परीक्षणों (3 से 2 तक) और कम दवा खुराक के साथ एक सशर्त वरीयता को देखते हुए संवेदी प्रभाव प्रदर्शित किया गया था। बार-बार कोकेन के कारण होने वाले संवेदी वातानुकूलित इनाम को कोनाइन के अंतिम दिखावा के बाद एक्सएनयूएमएक्स दिन नहीं बल्कि एक्सएनयूएमएक्स दिन मिले।23)। 5 दिनों के मॉर्फिन (5.0 mg / kg) का उपयोग करने वाले एक समान अध्ययन में मॉर्फिन के लिए एक संवर्धित वातानुकूलित प्रतिक्रिया दिखाई देती है जब कंडीशनिंग 3, 10, या 21 ड्रग प्री-ट्रीटमेंट के बाद शुरू होती है। यह संवर्धित प्रतिक्रिया मॉर्फिन पूर्व उपचार के बाद अनुपस्थित 1 दिन थी (24)। एसuch निष्कर्ष बताते हैं कि मनोवैज्ञानिक या अफीम दोनों के लिए संवेदीकृत या क्रॉस-सेंसिटिव कंडीशन इनाम के लिए कम से कम 3 दिनों की दवा वापसी की अवधि आवश्यक हैरों। एसबार-बार दवा प्रशासन की तरह एक्सक्लूसिव अनुभव, इस सेंसिटिव ड्रग रिस्पॉन्सिबिलिटी के लिए जिम्मेदार मेसोलेम्बिक सिस्टम में इसी तरह के न्यूरोडैप्टेशन को एक बार पुरस्कृत करने के बाद हो सकता है। यह वर्तमान में अस्पष्ट है अगर इनाम संयम तनाव के साथ जुड़ा हुआ है और इस प्रकार मनाया तनावों में योगदान देने वाले मनोवैज्ञानिक तनाव के रूप में कार्य करता है।
स्पष्ट रूप से, प्राकृतिक और नशीली दवाओं के इनाम के प्रभावों के बीच एक परस्पर क्रिया है। रिवार्ड क्रॉस-सेंसिटाइजेशन से पता चलता है कि यौन व्यवहार और दवाओं दोनों के लंबे समय तक चलने वाले प्रभावों की मध्यस्थता सामान्य सेलुलर या आणविक तंत्र द्वारा की जाती है। इसलिए, यह परिकल्पित है कि सेक्स व्यवहार-प्रेरित परिवर्तन यौन व्यवहार के मजबूत घटकों को विनियमित करते हैं और इस प्रकार सामान्य रूप से पुरस्कृत व्यवहार के सकारात्मक सुदृढीकरण के लिए महत्वपूर्ण हो सकते हैं। एचजो भी हो, यौन प्रतिफल से बाद में होने वाला परहेज इनाम की बढ़ी हुई स्थिति, या नशे की लत के प्रभाव के समान दुर्बलता की स्थिति पैदा कर सकता है, जो 'नशीली दवाओं की लालसा' का प्रभाव है। (25, 33, 74)। सामान्य तौर पर, पुरुष कृन्तकों में यौन व्यवहार सेक्स के लिए अनिवार्य मांग का कारण नहीं बनता है, मैथुन-अस्वस्थ सहयोगी कंडीशनिंग का उपयोग करके दिखाया गया है (75), हालांकि संयम के प्रभाव का परीक्षण नहीं किया गया है।
सीखने और स्मृति के क्षेत्रों में गहन आकारिकी की गहराई से जांच की गई है (76-77) और लत (59, 78-79), और पर्यावरण से प्रभावित होने के लिए जाना जाता है (80) और हार्मोनल कारक (81-82). चूंकि सिनैप्टिक इनपुट मुख्य रूप से डेंड्राइट्स या डेंड्राइटिक स्पाइन पर होते हैं, वे अनुभव-प्रेरित न्यूरोप्लास्टी के सबसे संभावित लक्ष्य होते हैं (26, 83). प्राकृतिक उतार-चढ़ाव या गोनाडल हार्मोन के प्रशासन में कई घंटों के भीतर डेन्ड्रिटिक परिवर्तन पाए जाते हैं (84-87)। एलएसओ, सिस्टम को गड़बड़ी, इस तरह के तनाव (88) या पुरानी कोकीन (79), 24 घंटों के भीतर पता लगाने योग्य परिवर्तनशील परिवर्तन का कारण।
यहां, NAN कोर और शेल दोनों में मध्यम रीढ़ के न्यूरॉन्स की डेंड्राइटिक आकृति विज्ञान में परिवर्तन 24 घंटे के भीतर नहीं देखे गए थे, और इसके बजाय यौन अनुभव के बाद संयम की अवधि की आवश्यकता थी। यौन अनुभव और बाद में संयम से प्रेरित संरचनात्मक परिवर्तन उन लोगों से मिलते-जुलते हैं, जिन्हें साइकोस्टिमुलेंट के बार-बार उजागर होने के बाद देखा जाता है (16-17, 26, 30)। इसके विपरीत, एनएसी में डीए घटने से शेल में डेन्ड्राइट और जटिलता की संख्या में कमी आती है (18, 89). इसलिए यौन अनुभव-प्रेरित परिवर्तन NAc में अंतर्जात DA क्रिया पर निर्भर हो सकते हैं। हालांकि, संभोग-प्रेरित रूपात्मक परिवर्तन पिछले संभोग सत्र के बाद केवल 7 दिन स्पष्ट थे और यौन रूप से अनुभवी जानवरों में उन्नत सशर्त AMPH इनाम के साथ मेल खाते हैं। इन आंकड़ों से पता चलता है कि ये डेंड्रिटिक आर्बराइजेशन में वृद्धि करते हैं और एएमपीएच, वाई के लिए अल्पकालिक लोकोमोटर संवेदीकरण की अभिव्यक्ति के लिए रीढ़ की आवश्यकता नहीं होती है।एट संवेदीकरण के रखरखाव और दीर्घकालिक अभिव्यक्ति में भूमिका निभा सकता है। बार-बार ड्रग एडमिनिस्ट्रेशन के पिछले अध्ययनों ने भी NAC में दीर्घकालिक संवेदीकरण और रूपात्मक परिवर्तन के बीच एक डिस्कनेक्ट किया है89-94)। यह अस्पष्ट बना हुआ है कि कार्यात्मक प्रासंगिकता रूपात्मक परिवर्तनों की क्या है, लेकिन यह फ़ंक्शन और जीन अभिव्यक्ति में दीर्घकालिक परिवर्तनों में भूमिका निभा सकता है।
सारांश में, यहां प्रस्तुत डेटा यौन व्यवहार को दर्शाता है - एक प्राकृतिक पुरस्कृत उत्तेजना - मेसोलिम्बिक प्रणाली में लंबे समय तक चलने वाले न्यूरोडैप्टेशन को प्रेरित कर सकता है। हमारे निष्कर्ष बताते हैं कि व्यवहारिक प्लास्टिसिटी, विशेष रूप से एक संवेदी लोकोमोटर प्रतिक्रिया, यौन अनुभव का एक तत्काल और दीर्घकालिक परिणाम है। इसके अलावा, एक संयम अवधि NAc में मनाया रूपात्मक परिवर्तनों के लिए महत्वपूर्ण न्यूरोडैप्टेशन के लिए अनुमति दे सकता है और बाद में बढ़ाया दवा इनाम में। यह व्यवहार और तंत्रिका प्लास्टिसिटी एक समान है, लेकिन समान नहीं है, प्रोफ़ाइल जैसा कि नशीली दवाओं के प्रति संवेदनशील जानवरों में देखा जाता है। ये आंकड़े विशेष रुचि रखते हैं क्योंकि हम दिखाते हैं कि प्राकृतिक प्रतिफल से परहेज औषधि प्रशासन के लिए एक असुरक्षित स्थिति पैदा करता है। यह समझने में कि दोनों प्राकृतिक व्यवहार और दुरुपयोग की दवाएं इन प्रणालियों को कैसे सक्रिय करती हैं, जिससे न्यूरोएडेप्टेशन हमें सुदृढीकरण और इनाम की बेहतर समझ प्रदान कर सकते हैं, और नशीली दवाओं की लत के तंत्र में और अधिक जानकारी प्रदान कर सकते हैं।
Acknowledgments
डॉ। रिचटैंड को NIH और वेटरन्स अफेयर्स मेडिकल रिसर्च सर्विस विभाग से अनुदान राशि प्राप्त हुई है। डॉ। रिचटैंड ने फॉरेस्ट फ़ार्मास्यूटिकल्स, ब्रिस्टल-मेयर्स स्क्वीब, और गर्सन लेहरमन ग्रुप के सलाहकार के रूप में कार्य किया है; ब्रिस्टल मेयर के स्क्वीब और शेरिंग-प्लोव कॉर्पोरेशन के स्पीकर ब्यूरो पर; ग्रैंड राउंड्स प्रस्तुतियाँ: दक्षिण डकोटा विश्वविद्यालय और यूनिवर्सिटी ऑफ साइंस्फोर्ड स्कूल ऑफ मेडिसिन, साइन्स, एलएलसी; और से अनुदान सहायता प्राप्त हुई है: जानसेन फार्मासेक्टिक्स रिसर्च फाउंडेशन और एस्ट्रा ज़ेनेका फार्मास्यूटिकल्स (केवल अध्ययन दवा)। अन्य सभी लेखकों ने इस शोध का समर्थन करने के लिए निम्नलिखित अनुदानों को छोड़कर कोई भी बायोमेडिकल वित्तीय हितों या ब्याज की संभावित संघर्षों की रिपोर्ट नहीं की: राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (R01 DA014591), कनाडाई इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ रिसर्च (आरएन एक्सएनएनएक्सएक्स), और नेशनल साइंस एंड इंजीनियरिंग रिसर्च काउंसिल कनाडा (एनएसईआरसी) डिस्कवरी ग्रांट (एक्सएनयूएमएक्स) से डॉ। लिंच कुलेन, और पीजीएस-एम छात्रवृत्ति से एनएसईआरसी (एक्सएनयूएमएक्स) से काइल पिचर्स तक। हम गोगी प्रसंस्करण के साथ उनकी सहायता के लिए सुश्री मौरेन एक्सएनयूएमएक्स फिट्ज़गेराल्ड का धन्यवाद करते हैं और सहायता के लिए डॉ। क्रिस्टीन टेंक पूरक प्रयोग 1.
फुटनोट
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संदर्भ
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