Indukcija DeltaFosB-a u orbitofrontalnom korteksu pojačava lokomotornu senzibilizaciju unatoč ublažavanju kognitivne disfunkcije uzrokovane kokainom.

KOMENTARI: Studija pokazuje da DelatFosB kandidira oboje senzibilizacija i desenzibilizacija (tolerancija). 
 
Pharmacol Biochem Behav. 2009 rujna; 93 (3): 278-84. Epub 2008 prosinca 16.
 
Winstanley CA, Green TA, Theobald DE, Renthal W, LaPlant Q, DiLeone RJ, Chakravarty S, Nestler EJ.

izvor

Odjel za psihijatriju, Sveučilište u Teksasu, jugozapadni medicinski centar, 5323 Harry Hines Boulevard, Dallas, TX 75390-9070, Sjedinjene Države. [e-pošta zaštićena]

Sažetak

Učinci ovisnost lijekovi se mijenjaju opetovanom uporabom: mnogi pojedinci postaju tolerantni na svoje ugodne učinke, ali su također osjetljiviji na negativne posljedice (npr. anksioznost, paranoja i žudnja za drogama). Razumijevanje mehanizama na kojima se temelji takva tolerancija i osjetljivost može pružiti dragocjen uvid u osnove ovisnosti o drogama i predanost, Nedavno smo pokazali da kronično uzimanje kokaina smanjuje sposobnost akutne injekcije kokaina da utječe na impulsivnost kod štakora. Međutim, životinje postaju impulsivnije tijekom povlačenja iz kokaina. Također smo pokazali da kronična primjena kokaina povećava ekspresiju transkripcijskog faktora DeltaFosB u orbitofrontalnom korteksu (OFC). Istikujući ovo povišenje izazvano drogom u OFC DeltaFosB virusno posredovanim prijenosom gena oponaša ove promjene ponašanja: DeltaFosB prekomjerna ekspresija u OFC izaziva toleranciju na učinke akutnog izazova na kokain, ali senzibilizira štakore na kognitivne posljedice povlačenja., Ovdje izvješćujemo nove podatke koji pokazuju da povećanje DeltaFosB u OFC-u također senzibilizira životinje na lokomotorno-stimulirajuće osobine kokaina. naliza tkiva jezgre jezgre uzeta od štakora prekomjerno eksprimirajući DeltaFosB u OFC-u i kronično obrađena fiziološkom otopinom ili kokainom ne pruža potporu hipotezi da povećanje OFC DeltaFosB potencira senzibilizaciju putem nucleus accumbens. Ovi podaci sugeriraju da se tolerancija i senzibilizacija na brojne učinke kokaina, iako naizgled suprotstavljeni procesi, mogu paralelno inducirati istim biološkim mehanizmom u istoj regiji mozga, te da promjene u ekspresiji gena u OFC igraju važnu ulogu izazvane lijekovima u više aspekata predanost.

1. Uvod

TOn je fenomen tolerancije i senzibilizacije u središtu aktualnih teorija o ovisnosti o drogama, Uzimajući u obzir kriterije dijagnostičkog i statističkog priručnika (Američko psihijatrijsko udruženje DSM IV) (1994) za poremećaj zlouporabe tvari, jedan od ključnih simptoma je da korisnik droga postane tolerantan na ugodne učinke lijeka i treba mu više lijeka da postigne isto „high”. Međutim, tolerancija se ne razvija s jednakom brzinom prema svim učincima lijeka, što dovodi do fatalnog predoziranja dok korisnici eskaliraju unos droge. Kronični korisnici droga također postaju osjetljivi na druge aspekte iskustva s drogom, umjesto da toleriraju. Iako se užitak stečen unosom droga neprestano smanjuje, želja za uzimanjem droga povećava se, a ovisnici o drogama često senzibiliziraju na negativne učinke droge (npr. Anksioznost, paranoju), kao i na snagu znakova uparenih s drogom da aktiviraju drogu - žudnja i - traženje ponašanja (Robinson i Berridge, 1993). Kroz razumijevanje bioloških mehanizama na kojima se temelji senzibilizacija i tolerancija na lijek, nada se da će se naći načina da preokrenu ili inhibiraju proces ovisnosti.

Kao rezultat toga, pojava senzibilizacije lokomotora intenzivno se istražujeposebno u laboratorijskih glodavaca (vidjeti (Pierce i Kalivas, 1997) za pregled). Psihostimulantni lijekovi poput kokaina i amfetamina povećavaju lokomotornu aktivnost. Nakon opetovane primjene, ovaj odgovor postaje osjetljiv i životinja postaje značajno hiperaktivnija nakon akutnog izazivanja lijekom. Sada je dobro utvrđeno da je lokomotorna senzibilizacija crovisi o promjenama u dopaminergičkoj i glutamatergičkoj signalizaciji unutar nucleus accumbens (NAc) (vidi (Kalivas i Stewart, 1991; Karler i sur., 1994; Wolf, 1998). Identificirana je i mnoštvo molekularnih proteina koji mogu pridonijeti izražavanju ovog senzibiliziranog motoričkog odgovora. Jedan od takvih proteina je transkripcijski faktor ΔFosB koji se povećava u NAc i dorzalnom striatumu nakon kronične, ali ne akutne primjene brojnih lijekova ovisnosti (Nestler, 2008). japovećanje razine NAc ΔFosB povećava osjetljivost lokomotora na kokain, povećava preferiranu drogu na uvjetnom mjestu, a također olakšava primjenu kokaina (Colby i sur., 2003; Kelz i sur., 1999). Stoga bi se činilo da indukcija ΔFosB u NAc olakšava razvoj ovisnog stanja.

Sve se više prepoznaje da opetovana izloženost ovisničkim lijekovima utječe na kognitivne funkcije višeg reda poput odlučivanja i kontrole impulsa te da to ima presudni utjecaj na povratak tražitelja lijekova (Bechara, 2005; Garavan i Hester, 2007; Jentsch i Taylor, 1999). Nedostaci u kontroli impulsa primijećeni su kod nedavno apstinentnih ovisnika o kokainu, kao i kod korisnika drugih droga (npr. (Hanson i sur., 2008; Lejuez i sur., 2005; Moeller i sur., 2005; Verdejo-Garcia i sur., 2007). Pretpostavljeno je da ova impulzivnost proizlazi iz hipoaktivnosti u orbitofrontalnom korteksu (OFC) koja je opažena u takvim populacijama (Kalivas i Volkow, 2005; Rogers i sur., 1999; Schoenbaum i sur., 2006; Volkow i Fowler, 2000). Nedavno smo primijetili da opetovana primjena kokaina povećava razinu ΔFosB unutar OFC-a, a da oponaša ovu indukciju infuzijom adeno-povezanog virusa (AAV) dizajniranog da ekspresije ΔFosB u OFC (virusni posredovani prijenos gena) čini se da aktivira lokalni inhibitor krugovi (Winstanley i sur., 2007). Stoga visoka razina OFC ΔFosB može teoretski pridonijeti promjenama u kontroli impulsa izazvanim lijekovima.

Nedavno smo dovršili niz studija kako bismo testirali ovu hipotezu i utvrdili učinke akutne i kronične primjene kokaina na dvije mjere impulzivnosti kod štakora: razinu preuranjene (impulzivne) reakcije na zadatak serijskog vremena reakcije pet izbora ( 5CSRT) i odabir male odmah preko veće odgodene nagrade u zadatku s popustom (Winstanley i sur., 2007). Primijetili smo da akutni kokain povećava impulzivno reagiranje na 5CSRT, ali je umanjio impulzivan izbor male neposredne nagrade u paradigmi snižavanja kašnjenja, oponašajući učinke amfetamina. Ovaj obrazac ponašanja - porast impulzivnog djelovanja, a istovremeno smanjenje impulzivnog izbora - tumači se kao porast poticajne motivacije za nagradu (Uslaner i Robinson, 2006). Međutim, nakon opetovane primjene kokaina, štakori više nisu pokazivali tako izražene promjene impulzivnosti, kao da su postale tolerantne na te kognitivne učinke lijeka. To je u velikoj suprotnosti s senzibiliziranim lokomotornim odgovorom na kokain uočenim nakon gore spomenute kronične primjene. Nadalje, prekomjerna ekspresija ΔFosB u OFC-u oponašala je učinke kroničnog liječenja kokainom: učinci akutnog kokaina na izvršavanje oba 5CSRT i zadatka diskontiranja bili su umanjeni kod ovih životinja, kao da su već razvili toleranciju na droge 'efekti.

Međutim, dok je povećanje ΔFosB u OFC-u spriječilo da akutni kokain poveća impulsivnost, ta ista manipulacija zapravo povećala impulzivnost tijekom povlačenja iz režima samouprave kokaina s dugim pristupom (Winstanley i sur., 2008). Kognitivne performanse ovih životinja bile su, dakle, manje pogođene kada je kokain bio na brodu, a ipak su bile podložnije deficitima kontrole impulsa tijekom povlačenja. Ista manipulacija - povećanje ΔFosB u OFC-u - može stoga povećati toleranciju ili osjetljivost na aspekte učinka kokaina. Ovdje navodimo nove dodatne podatke koji pokazuju da su životinje koje su pokazale naglu reakciju na akutni izazov na kokain u testovima impulzivnosti nakon prekomjerne ekspresije ΔFosB u OFC-u također bile osjetljive na djelovanje lokomotornih stimulatora kokaina. Dakle, primijećena je tolerancija i osjetljivost na različite aspekte djelovanja kokaina kod istih ispitanika. S obzirom na naglašenu ulogu NAc u posredovanju lokomotorne senzibilizacije i nepostojanje podataka koji impliciraju OFC na motornu regulaciju, hipotetirali smo da povećanje ΔFosB u OFC-u može poboljšati motorički odgovor na kokain mijenjanjem funkcije u ovoj strijatalnoj regiji. Stoga smo proveli zasebni eksperiment pomoću PCR-a u stvarnom vremenu kako bismo ispitali da li povećanje ΔFosB u OFC-u mijenja ekspresiju gena u NAc na način koji pokazuje pojačanje senzibilizacije lokomotora.

Idi na:

2. metode

Svi su pokusi izvedeni u strogom skladu s NIH Vodičem za njegu i upotrebu laboratorijskih životinja, a odobren je od strane Institucionalnog odbora za njegu i upotrebu životinja na UT Southwestern.

2.1. teme

Muški štakori Long Evans (početna težina: 275 – 300 g; Charles River, Kingston, RI) bili su smješteni u parovima u ciklusu obrnutog svjetla (svjetla upaljena od 21.00-09.00) u sobi s kolonijom pod kontrolom klime. Životinje u pokusnom ponašanju (n= 84) su bili ograničeni na hranu na 85% njihove težine slobodnog hranjenja i održavali su se na 14 g pacova dnevno. Voda je bila dostupna ad libitum, Testiranje ponašanja odvijalo se između 09.00 i 19.00 pet dana u tjednu. Životinje koje su korištene za stvaranje moždanog tkiva za eksperimente qPCR-a imale su slobodan pristup i hrani i vodi (n= 16). Te su životinje imale slobodan pristup i hrani i vodi.

2.2. Kirurgija

Štakore su primale intra-OFC injekcije bilo AAV-GFP, AAV-ΔFosB, ili AAV-ΔJunD koristeći standardne stereotaksične tehnike kako je opisano (Winstanley i sur., 2007). Štakori su bili anestezirani ketaminom (Ketaset, 100 mg / kg intramuskularne (im) injekcije) i ksilazinom (10 mg / kg im; oba lijeka iz Henryja Scheina, Melville, NY). AAV-ovi su infuzirani u OFC pomoću 31 mlaznog nehrđajućeg čelika (Small Parts, Florida, USA) pričvršćenog na Hamilton mikroinfuzijsku pumpu polietilenskim cijevima (Instech Solomon, Pennsylvania, USA). Virusni vektori infuzirani su brzinom 0.1 µl / min prema sljedećim koordinatama uzetim iz stereotaksičnog atlasa (Paxinos i Watson, 1998): mjesto 1 AP + 4.0, L ± 0.8, DV −3.4, 0.4 μl: mjesto 2 AP + 3.7, L ± 2.0, DV −3.6, 0.6 μl: mjesto 3 AP ± 3.2, L ± 2.6, DV −4.4, DV 0.6 μl (vidi (Hommel i sur., 2003) za detalje o pripremi AAV-a). AP (anteroposteriorna) koordinata uzeta je iz bregme, L (bočna) koordinata iz srednje linije, a DV (dorsoventralna) koordinata iz dura. Životinjama je omogućen jedan tjedan da se oporave od operacije prije nego što su započeli bilo koji test ponašanja (eksperiment 1) ili primjena lijeka (eksperiment 2).

2.3. Eksperimentalni dizajn

Podaci o senzibilizaciji lokomotora dobiveni su od životinja koje su prošle niz testova ponašanja kako bi izmjerile kognitivne posljedice kronične izloženosti lijekovima, a ti su podaci ranije objavljeni (Winstanley i sur., 2007). Ukratko, štakori su osposobljeni za obavljanje 5CSRT ili zadatka sa popuštanjem. Zatim su podijeljeni u tri skupine koje su se podudarale s osnovnim performansama. Adeno-pridruženi virus (AAV2) pretjerano ekspresionirajući ΔFosB (Zachariou i sur., 2006) infiltrirano je selektivno u OFC jedne skupine koristeći standardne stereotaksične kirurške tehnike (vidi dolje) i na taj način oponaša indukciju ovog proteina kroničnom primjenom kokaina. Druga skupina primila je intra-OFC infuzije AAV-ΔJunD. Za kontrolnu skupinu korišten je AAV-GFP (zeleni fluorescentni protein). Jednom kada je uspostavljena stabilna pooperativna početna vrijednost, učinci akutnog kokaina (0, 5, 10, 20 mg / kg ip) određeni su na zadatku. Da bi se procijenilo mijenja li kronična primjena kokaina kognitivne učinke akutne izloženosti kokainu, unutar i između njihovih operativnih skupina u dva jednaka skupa. Jedna je skupina kronično tretirana fiziološkom otopinom, a druga kokainom (2 × 15 mg / kg) tijekom 21 dana. Dva tjedna nakon što je prestalo kronično liječenje drogama, akutni izazovi kokaina ponovljeni su na zadatku. Tjedan dana kasnije procijenjen je lokomotorni odgovor na kokain.

2.4. Lokomotorni odgovor na kokain

Lokomotorna aktivnost procijenjena je u pojedinim kavezima (25 cm × 45 cm × 21 cm) koristeći sustav aktivnosti foto-zračenja (PAS: San Diego Instruments, San Diego, CA). Aktivnost u svakom kavezu izmjerena je 7 foto-zracima koje su prelazile širinu kaveza, razmak 6 cm i 3 cm od dna kaveza. Podaci su prikupljeni tijekom 5 min kanti koristeći PAS softver (verzija 2, San Diego Instruments, San Diego, CA). Nakon 30 min, životinjama je ubrizgan kokain (15 mg / kg ip) i lokomotorna aktivnost praćena daljnjim 60 min.

2.5. Kvantifikacija mRNA

Štakore su primale intra-OFC injekcije AAV-GFP ili AAV-ΔFosB, nakon čega su slijedile 21 dvaput dnevno injekcije fiziološke otopine ili kokaina, točno onako kako je opisano u eksperimentima s ponašanjem. Životinje su korištene 24 h nakon posljednje injekcije fiziološke otopine ili kokaina. Štakori su ubijeni odglasavanjem. Mozak je brzo izdvojen i dobivene su dvostrane 1 mm debljine 12 probijača NAc i odmah smrznute i pohranjene na -80 ° C do izolacije RNA. Udarci iz OFC-a uklonjeni su i na analizu DNA mikrorezomom koji je potvrdio uspješan prijenos virusa posredovanih u ovoj regiji (vidi (Winstanley i sur., 2007) za detaljnije rezultate). RNA je ekstrahirana iz uzoraka NAc pomoću RNA Stat-60 reagensa (Teltest, Houston, TX) u skladu s uputama proizvođača. Kontaminirajuća DNA uklonjena je s DNase tretmanom (DNA-free, kataloški br. 1906, Ambion, Austin TX). Pročišćena RNA je reverzno transkribirana u cDNA (Superscript First Strand Synthesis, Kataloški br. 12371-019; Invitrogen). Transkripti gena koji su od interesa kvantificirani su korištenjem qPCR-a u stvarnom vremenu (SYBR Green; Applied Biosystems, Foster City, CA) na stratagene-u (La Jolla, CA) Mx5000p 96-well termocikler. Sve primere je sintetizirao Operon (Huntsville, AL; vidi) Tablica 1 za nizove) i potvrđeno za linearnost i specifičnost prije pokusa. Svi PCR podaci normalizirani su na razine gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH), koja nije izmijenjena tretmanom kokainom, prema sljedećoj formuli: ΔCt =Ct(gen interesa) - Ct (GAPDH). Prilagođene razine ekspresije za AAV-ΔFosB i AAV-GFP štakore koji su primili kokain, te za AAV-ΔFosB štakore koji su primali kronični fiziološki rast, zatim su izračunati u odnosu na kontrole (AAV-GFP grupi koja je davala kroničnu fiziološku otopinu) kako slijedi: ΔΔCt = ΔCt - ΔCt (kontrolna skupina). U skladu s preporučenom praksom na terenu (Livak i Schmittgen, 2001), razina ekspresije u odnosu na kontrole tada je izračunata korištenjem sljedećeg izraza: 2-ΔΔCt.

Tablica 1  

Tablica 1

Slijed primera koji se koriste za kvantificiranje nivoa cDNA putem PCR-a u stvarnom vremenu.

2.6. lijekovi

Kokain HCl (Sigma, St. Louis, MO) otopljen je u 0.9% fiziološkoj otopini u volumenu 1 ml / kg i primijenjen putem ip injekcije. Doze su izračunate kao sol.

2.7. Analiza podataka

Svi su podaci analizirani pomoću SPSS softvera (SPSS, Chicago, IL). Podaci lokomotora podvrgnuti su multifaktorijalnoj ANOVA operativnim zahvatima (dvije razine: GFP vs ΔFosB ili ΔJunD) i kroničnim liječenjem (dvije razine, kronična fiziološka otopina i kronični kokain) kao faktorima ispitanika, a vremenski okvir kao faktor subjekta. Podaci iz PCR eksperimenata u stvarnom vremenu analizirani su univarijantnom ANOVA operacijom (dvije razine: GFP vs ΔFosB) i kroničnim liječenjem (dvije razine, kronična fiziološka otopina i kronični kokain) kao fiksni faktori. Glavni efekti praćeni su neovisnim uzorcima t-testi gdje je to prikladno.

Idi na:

3. Rezultati

Eksperiment 1

Kronična primjena kokaina proizvodi osjetljivost na hiperlokomotorne učinke akutnog kokaina koji oponaša ΔFosB

Kao što bi se moglo očekivati, snažna senzibilizacija lokomotora zabilježena je kod kontrolnih životinja nakon kronične izloženosti kokainu, a životinje koje su kronično tretirane kokainom pokazuju povećanu hiperaktivnost kao odgovor na akutni izazov kokaina (Slika 1A, kronično liječenje: F1,34 = 4.325, p<0.045). Životinje prekomjerno izražavaju ΔJunD, dominantni negativni mutant JunD koji djeluje kao antagonist ΔFosB (Zachariou i sur., 2006), u OFC-u nisu se razlikovali od kontrolnih životinja (Slika 1C, GFP vs ΔJunD, grupa: F1, 56 = 1.509, NS). Međutim, životinje koje su prekomjerno eksprimirale ΔFosB u OFC-u koje su primale ponovljene injekcije fiziološke otopine izgledale su „presenzibilizirane“: pokazale su pojačani lokomotorni odgovor na akutni kokain koji se nije razlikovao od senzibiliziranog odgovora njihovih kolega liječenih kroničnim kokainom (Slika 1B, GFP vs operacija ΔFosB × kronični tretman: F1, 56 = 3.926, p<0.052; Samo ΔFosB: kronično liječenje: F1,22 = 0.664, NS). ΔFosB životinje bile su lagano hiperaktivne tijekom prvih 15 min nakon što su ih smjestili u lokomotorne kutije (GFP vs ΔFosB, operacija: F1,56 = 4.229, p <0.04), ali razine lokomotorne aktivnosti bile su usporedive s kontrolama u 15 minuta prije primjene kokaina (operacija: F1, 56 = 0.138, NS).

Slika 1  

Slika 1

Lokomotorna osjetljivost na kokain. Akutni kokain stvorio je veći porast lokomotorne aktivnosti kod kontrolnih životinja koje su kronično liječene kokainom nasuprot fiziološkoj otopini (ploča A). Kod životinja koje prekomjerno eksprimiraju ΔFosB (ploča B), one dobivaju ponovljenu fiziološku otopinu (više…)

Uzimajući u obzir da su, kada su davale kokain tijekom 5CSRT, iste životinje pokazale relativno poboljšanu sposobnost za odustajanje od preuranjenih reakcija motora, ta se hiperaktivnost čini specifičnom za ambulantnu lokomotaciju, tj. Vrstu kretanja koja se obično bilježi u studijama senzibilizacije lokomotora. Iako bi pojačana aktivnost kao odgovor na stimulansne lijekove mogla odražavati anksiogeni profil, intra-OFC prekomjerna ekspresija ΔFosB ne povećava anksioznost mjereno pomoću ispitivanja s povišenim plusom labirinta ili ispitivanja na otvorenom terenu (podaci nisu prikazani). Životinje su također bile dobro naviknute na IP ubrizgavanje, a injekcije fiziološke otopine nisu promijenile njihove kognitivne performanse (Winstanley i sur., 2007), stoga se ovaj motorički učinak ne može pripisati općem odgovoru na IP ubrizgavanje. Ukratko, ovi nalazi pokazuju da je indukcija ΔFosB u OFC-u dovoljna (ali nije nužna) za senzibilizirani lokomotor koji reagira na kokain, iako ΔFosB u istoj regiji izaziva toleranciju na učinke kokaina na motivaciju i impulzivnost (Winstanley i sur., 2007).

Eksperiment 2

Kronična primjena kokaina modulira ekspresiju gena u NAc

Ako je određena molekula u NAc pridonosila presenzibiliziranom odgovoru viđenom u grupi tretiranom s fiziološkom otopinom AAV-ΔFosB, tada bismo očekivali sličan biokemijski odgovor u ovih životinja u usporedbi sa životinjama u AAV-GFP i AAV-ΔFosB grupe koje su kronično tretirane kokainom. Nadalje, životinje iz skupine AAV-GFP liječene fiziološkom otopinom ne bi trebale pokazati ovaj odgovor, jer te životinje nisu osjetljive na kokain. Ovaj obrazac rezultata ogledao bi se u značajnoj interakciji lijeka × kirurgija, poduprtom značajnim neovisnim uzorcima t-najbolje uspoređujući skupine AAV-GFP i AAV-ΔFosB fiziološke skupine, plus AAV-ΔFosB i AAV-GFP kokainske skupine. Glavni učinci liječenja ili operacije lijeka potvrdili bi da kronični kokain ili prekomjerna ekspresija ΔFosB u OFC-u mogu modulirati ciljanu molekulu u NAc, ali ovo je opažanje nedovoljno za objašnjenje osjetljivog lokomotornog odgovora opaženo u grupi tretiranoj s AAV-ΔFosB fiziološkom otopinom , Tkivo jedne životinje koja je primala intra-OFC infuzije AAV-GFP-a i opetovane injekcije kokaina nije se mogla analizirati zbog neuobičajeno niskog prinosa RNA. U ovom smo se eksperimentu fokusirali na nekoliko gena koji su uključeni u osjetljivost lokomotora na kokain (vidi Raspravu).

3.1. ΔFosB / FosB

Razine FosB mRNA u NAc nisu izmijenjene niti jednim kroničnim liječenjem (Slika 2A, droga: F1,14 = 1.179, ns) ili izraz ΔFosB u OFC-u (operacija: F1, 14 = 0.235, ns). Međutim, razine ΔFosB bile su značajno veće kod životinja koje su kronično tretirane kokainom u skladu s prethodnim izvještajima (Chen i sur., 1997); Slika 2B, droga: F1,14 = 7.140, p<0.022). Zanimljivo je da je količina ΔFosB mRNA u NAc životinja liječenih fiziološkom otopinom bila niža kod onih kod kojih je ovaj faktor transkripcije bio prekomjerno izražen u OFC (lijek: F1,14 = 9.362, p<0.011). Međutim, odsutnost interakcije lijek × operacija ukazuje na to da je liječenje kroničnim kokainom imalo jednak učinak u skupinama liječenim AAV-GFP i AAV-ΔFosB, proporcionalno podižući razine ΔFosB u sličnoj mjeri (lijek × operacija: F1, 14 = 0.302, ns).

Slika 2  

Slika 2

Promjene mRNA unutar NAc životinja pretjerano eksprimiraju ili GFP ili ΔFosB u OFC, te su kronično tretirane ili fiziološkom otopinom ili kokainom. Podaci pokazuju linearne promjene nabora u izrazu kao udio kontrolnih vrijednosti. Prikazani podaci su (više…)

3.2. Arc / CREB / PSD95

Nije bilo dokaza o povećanoj ekspresiji Arc (proteina koji je povezan sa citoskeletom) 24 h nakon posljednje izloženosti lijeku, niti je povećanje ΔFosB u OFC promijenilo nivo Arc mRNA u NAc (Slika 2C, droga: F1.14 = 1.416, ns; kirurgija: F1,14 = 1.304, ns). Slično tome, nisu primijećene promjene u ekspresiji CREB (proteina koji veže element cAMP) (Slika 2D, droga: F1,14 = 0.004, ns; kirurgija: F1,14 = 0.053, ns). Međutim, kronična primjena kokaina značajno je povećala razinu mRNA za PSD95 (protein postinaptičke gustoće 95 kD) (Slika 2E, droga: F1,14 = 11.275, p <0.006), ali je ovo povećanje bilo slično i u skupinama AAV-GFP i AAV-ΔFosB (operacija: F1, 14 = 0.680, ns; lijek × operacija: F1,14 = 0.094, ns).

3.3. D2/ GABAB/ GluR1 / GluR2

Razine mRNA za dopamin D2 receptori se povećavaju nakon kronične primjene kokaina (Slika 2F, droga: F1,14 = 7.994, p<0.016), ali na ovo povećanje nije utjecala pretjerana ekspresija ΔFosB u OFC (operacija: F1, 14 = 0.524, ns; lijek × operacija: F1,14 = 0.291, ns). mRNA razina GABAB receptor je imao sličan profil, a razine su porasle za malu, ali značajnu količinu nakon opetovanog izlaganja kokainu bez obzira na manipulaciju virusom (Slika 2G, droga: F1,14 = 5.644, p <0.037; operacija: F1, 14 = 0.000, ns; lijek × operacija: F1,14 = 0.463, ns). Međutim, na razine podjedinica receptora glutamata AMPA GluR1 i GluR2 nisu utjecale nikakve manipulacije, iako je postojao blagi trend povećanja GluR2 nakon kroničnog liječenja kokainom (Slika 2H, GluR1: lijek: F1,14 = 0.285, ns; kirurgija: F1, 14 = 0.323, ns; lijek × operacija: F1,14 = 0.224, ns; Slika 2I, GluR2: lijek: F1,14 = 3.399, p <0.092; operacija: F1, 14 = 0.981, ns; lijek × operacija: F1,14 = 0.449, ns).

Ukratko, iako je kronično liječenje kokainom izmijenilo razinu mRNA za niz gena testiranih u NAc, nismo primijetili porast ekspresije tih gena kod štakora tretiranih fiziološkom otopinom, koji prekomjerno eksprimiraju ΔFosB u OFC. Ovi nalazi sugeriraju da ti određeni geni nisu uključeni u pojačani lokomotorni odgovor primijećen u ovoj skupini.

Idi na:

4. Rasprava

Ovdje pokazujemo da prekomjerna ekspresija ΔFosB u štakorima osjetljivim na OFC na akcije kokaina koje stimulišu lokomotorno tijelo oponašajući djelovanje kronične primjene kokaina. Prethodno smo pokazali da je učinak istih životinja na 5CSRT paradigmi s popuštanjem kašnjenja manje pogođen akutnim kokainom i da je sličan učinak sličan toleranciji uočen nakon opetovane izloženosti kokainu. Dakle, osjetljivost i tolerancija na različita djelovanja kokaina mogu se primijetiti kod istih životinja, s obje prilagodbe posredovane istom molekulom, ΔFosB, koja djeluje u istoj regiji mozga. Činjenica da se oba fenomena mogu istovremeno izazvati oponašanjem jednog od djelovanja kokaina na jednom frontokortikalnom lokusu, ukazuje na važnost kortikalnih regija u posljedicama kroničnog unosa droga, Nadalje, ovi podaci sugeriraju da tolerancija i osjetljivost odražavaju dva naizgled kontrastna, ali usko povezana aspekta odgovora na lijekove ovisnosti.

S obzirom da je povećana ekspresija ΔFosB u NAc kritično uključena u razvoj senzibilizacije lokomotora, jedna bi vjerojatna hipoteza bila da prekomjerno izražavanje ΔFosB u OFC presenzibilizira životinje na kokain povećavajući razinu ΔFosB u NAc. Ipak, nađen je obrnuti rezultat: razine ΔFosB u NAc bile su značajno niže u životinjama pretjerano ekspresivnih ΔFosB u OFC. Posljedice smanjenja NAc ΔFosB u ponašanju je teško interpretirati, jer inhibiranje djelovanja ΔFosB prekomjernom ekspresijom ΔJunD na ovom području smanjuje mnoge učinke kokaina na miševima (Peakman i sur., 2003). Postoje određene paralele između ovih opažanja i onih izrađenih u odnosu na dopaminski sustav. Na primjer, djelomično iscrpljivanje dopamina u NAc može dovesti do hiperaktivnosti, kao što može usmjeriti primjenu agonista dopamina u ovom području (Bachtell i sur., 2005; Costall i sur., 1984; Parkinson i sur., 2002; Winstanley i sur., 2005b). Isto tako, činjenica da povećanje razine kortikalnih ΔFosB može smanjiti potkortikalnu ekspresiju nalikuje dobro utvrđenom nalazu da povećanje prefrontalnog dopaminergičkog prijenosa često prati recipročni pad nivoa strijatalnog dopamina (Deutch i sur., 1990; Mitchell i Gratton, 1992). Kako takav mehanizam povratnih informacija može djelovati na intracelularne signalne molekule trenutno je nejasno, ali može odražavati promjene u općoj aktivnosti određenih neuronskih mreža uzrokovanih promjenom transkripcije gena. Na primjer, povećanje ΔFosB u OFC dovodi do povećanja lokalne inhibicijske aktivnosti, o čemu svjedoči porast razine GABAA receptor, mGluR5 receptor i tvar P, što je utvrđeno mikroarray analizom (Winstanley i sur., 2007). Ova promjena u OFC aktivnosti može tada utjecati na aktivnost u ostalim područjima mozga, što bi zauzvrat moglo dovesti do lokalne promjene u ekspresiji ΔFosB. Odnose li razine ΔFosB relativne promjene u aktivnosti dopamina, pitanje koje zahtijeva daljnje istraživanje.

Sve su životinje pokazale značajno povećanje razine ΔFosB mRNA u NAc nakon kroničnog liječenja kokainom, u skladu s prethodnim izvještajima o povećanoj razini proteina (Chen i sur., 1997; Hope i sur., 1992; Nye i sur., 1995). Međutim, nedavno izvješće otkrilo je da razine ΔFosB mRNA više nisu značajno povišene 24 h nakon kroničnog liječenja amfetaminom, iako su primijećena značajna povećanja 3 h nakon posljednje injekcije (Alibhai i dr., 2007). To odstupanje može biti posljedica razlike u korištenom psihostimulantnom lijeku (kokain vs amfetamin), ali s obzirom na kraći poluživot kokaina, bilo bi razumno očekivati ​​da će se njegovi učinci na ekspresiju gena normalizirati brže od učinaka amfetamina, a ne obrnuto. Vjerojatniji razlog ovih različitih rezultata je taj što su životinje u trenutnoj studiji ubrizgavale umjerenu dozu lijeka dva puta dnevno tijekom 21 dana u usporedbi s jednom injekcijom visoke doze tijekom 7 dana (Alibhai i dr., 2007). Prošireniji režim liječenja mogao je dovesti do ovdje izraženijih promjena.

Iako su promjene u ekspresiji gena primijećene unutar NAc nakon kroničnog kokaina općenito u skladu s prethodno prijavljenim nalazima, veličina učinaka je manja u trenutnoj studiji. Jedan od potencijalnih razloga za to je to što su životinje žrtvovane samo 24 h nakon posljednje injekcije kokaina, dok je većina studija koristila tkivo dobiveno dva tjedna od posljednje izloženosti drogi. Studije koje istražuju vremenski tijek senzibilizacije lokomotora pokazuju da su u ovom kasnijem razdoblju primijećene izraženije promjene i u ponašanju i u ekspresiji gena / proteina. Iako izvješćujemo o neznatnom porastu mRNA za dopamin D2 receptora u NAc, opći konsenzus je da su razine ekspresije D2 ili D1 receptori se trajno ne mijenjaju nakon razvoja senzibilizacije lokomotora, iako se i D povećava i smanjuje2 prijavljen je broj receptora ubrzo nakon prestanka režima osjetljivosti (vidjeti (Pierce i Kalivas, 1997) za raspravu). Naše opažanje da su GluR1 i GluR2 mRNA nepromijenjene nakon kroničnog liječenja kokainom u ovom ranom trenutku isto je u skladu s prethodnim izvješćem (Fitzgerald i sur., 1996), premda je otkriveno povećanje mRNA GluR1 u kasnijim vremenskim točkama nakon prestanka liječenja kroničnim psihostimulantima (Churchill et al., 1999).

Međutim, primijetili smo mali porast mRNA PSD95 u NAc životinja koje su kronično tretirane kokainom. PSD95 je molekula skela i jedan je od glavnih bjelančevina unutar postsinaptičke gustoće ekscitacijskih sinapsi. Sidri nekoliko receptora glutamata i pridruženih signalnih proteina na sinapsi, a smatra se da porast ekspresije PSD95 odražava povećanu sinaptičku aktivnost i povećano ubacivanje i stabilizaciju receptora glutamata u sinapsama (van Zundert i dr., 2004). Prethodno je predložena uloga PSD95 u razvoju senzibilizacije lokomotora (Yao i sur., 2004).

Povećanje ekspresije luka također je povezano sa povećanjem sinaptičke aktivnosti. Međutim, dok je uočeno povećanje ekspresije luka u NAc 50 min nakon injekcije s amfetaminom (Klebaur et al., 2002), naši podaci pokazuju da kronično davanje kokaina ne smanjuje luk u NAc trajnije, iako su primijećena povećanja luka 24 h nakon kroničnog doziranja lijekova s ​​antidepresivima (Larsen i sur., 2007) i amfetamin (Ujike i dr., 2002). Povećanje fosforilacije CREB također je uočeno u NAc nakon akutne primjene kokaina i amfetamina (Kano i sur., 1995; Konradi i sur., 1994; Self i sur., 1998), ali možda nije iznenađujuće da nije primijećeno povećanje CREB mRNA nakon kronične primjene kokaina. Smatra se da je signalizacija putem CREB stava važnija u početnim fazama uzimanja lijekova, a faktori transkripcije poput ΔFosB dominiraju kako napreduje ovisnost (McClung i Nestler, 2003). Iako je CREB bio upleten u korisne učinke kokaina (Carlezon i sur., 1998), nije bilo izvještaja da povećanje CREB ekspresije utječe na lokomotornu osjetljivost, iako virusno posredovano povećanje endogenog dominantnog negativnog antagonista CREB, inducibilnog cAMP ranog represorskog proteina ili ICER, povećava hiperaktivnost uzrokovanu akutnom injekcijom amfetamina (Green i sur., 2006).

Ukratko, iako je većina promjena izazvanih drogom koje smo promatrali u skladu s predviđanjima iz literature, nismo pronašli promjene u ekspresiji gena unutar NAc koje bi mogle objasniti osjetljiv odgovor lokomotora na kokain opažen kod životinja koje nisu liječene od droga s intra-OFC AAV-ΔFosB. To povećava mogućnost da povećanje ΔFosB u OFC-u možda ne utječe na motoričku senzibilizaciju putem NAc-a, iako bi mnogi drugi geni, koji nisu ovdje proučavani, mogli biti uključeni. Značajan dokaz sugerira da modulacija medialnog prefrontalnog korteksa (mPFC) može promijeniti strijatalnu aktivnost i na taj način doprinijeti senzitizaciji ponašanja na psihostimulansi (Steketee, 2003; Steketee i Walsh, 2005), iako se manje zna o ulozi više ventralnih prefrontalnih regija poput OFC. NAc prima neke projekcije od OFC-a (Berendse i sur., 1992). Međutim, novija i detaljnija studija identificirala je vrlo malo izravnih projekcija OFC-NAc: rijetko je označeno najviše lateralnog dijela ljuske NAc nakon ubrizgavanja anterogradnog pratilaca u bočna i ventrolateralna područja OFC-a, i na najviše ventralne OFC regija šalje minimalne projekcije u jezgru NAc (Schilman i dr., 2008). Središnji kaudatani putamen dobiva mnogo gušće nutrine. U svjetlu ovih anatomskih dokaza, većinu tkiva NAc analiziranog u našim PCR reakcijama ne bi direktno inervirao OFC, smanjujući šanse da se bilo kakve promjene u ekspresiji gena uspješno otkriju.

OFC jako projicira u regije koje su same snažno povezane s NAc, poput mPFC-a, bazolateralne amigdale (BLA), kaudata putamenta i subtalamičkog jezgra (STN). Mogu li promjene u OFC-u neizravno modulirati funkcioniranje NAc-a svojim utjecajem na tim područjima, otvoreno je pitanje. Pokazano je da je aktivnost u BLA promijenjena nakon lečenja OFC-a i da to značajno doprinosi deficitu u obrnutom učenju uzrokovanom oštećenjem OFC-a (Stalnaker i dr., 2007), ali o učincima unutar područja kao što je NAc tek treba izvijestiti. Možda bi bilo produktivnije usmjeriti pozornost na druga područja koja su snažnije povezana s OFC-om i koja su također jako uključena u kontrolu motora. STN je posebno obećavajući cilj, jer ne samo da lezije STN-a i OFC-a proizvode slične učinke na impulzivnost i Pavlovićevo učenje (Baunez i Robbins, 1997; Chudasama i sur., 2003; Uslaner i Robinson, 2006; Winstanley i sur., 2005a), ali senzitizacija lokomotora izazvana psihostimulantima povezana je s porastom ekspresije c-Fos u ovoj regiji (Uslaner i sur., 2003). Budući eksperimenti osmišljeni su kako bi se ispitalo na koji način opravdane promjene droge u ekspresiji gena unutar OFC-a utječu na funkcioniranje nizvodnih područja poput STN-a. OFC također šalje manju projekciju na ventralno tegmentalno područje (Geisler i sur., 2007), regija za koju se zna da kritično sudjeluje u razvoju senzibilizacije lokomotora. Moguće je da prekomjerna ekspresija ΔFosB u OFC može utjecati na osjetljivost lokomotora kroz taj put.

Točna priroda povezanosti između lijekova uzrokovanih promjenama kognitivnih funkcija i lokomotorne senzibilizacije trenutno je nejasna, a dosad smo se fokusirali na OFC. S obzirom na ta otkrića, moguće je da promjene u ekspresiji gena povezane s razvojem lokomotorne senzibilizacije u drugim regijama mozga mogu obratno imati neki utjecaj na kognitivni odgovor na kokain. Eksperimenti koji istražuju međusobnu povezanost kortikalnih i subkortikalnih područja nakon primjene ovisničkih lijekova mogu osvijetliti način stvaranja i održavanja ovisne države i interaktivne uloge senzibilizacije i tolerancije u ovom procesu.

Idi na:

Reference

  • Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ. Regulacija ekspresije mRNA fosB i DeltafosB: in vivo i in vitro studije. Brain Res. 2007;1143: 22-33. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  • Američko udruženje psihijatara. Dijagnostički i statistički priručnik IV ″. Washington DC: Američka psihijatrijska udruga; 1994.
  • Bachtell RK, Whisler K, Karanian D, Self DW. Učinci intra-nucleus accumbens administracije dopaminskih agonista i antagonista na ponašanje kokaina i traženje kokaina kod štakora. Psihofarmakologija (Berl) 2005;183: 41-53. [PubMed]
  • Baunez C, Robbins TW. Bilateralne lezije subtalamičkog jezgra uzrokuju višestruke deficite u zadatku pažnje kod štakora. Eur J Neurosci. 1997;9: 2086-99. [PubMed]
  • Bechara A. Donošenje odluka, kontrola impulsa i gubitak snage volje za odupiranje drogama: neurokognitivna perspektiva. Nat Neurosci. 2005;8: 1458-63. [PubMed]
  • Berendse HW, Galis-de Graaf Y, Groenewegen HJ. Topografska organizacija i odnos s ventralnim strijatalnim odjeljcima prefrontalnih kortikostrijatalnih projekcija u štakora. J Comp Neurol. 1992;316: 314-47. [PubMed]
  • Carlezon WA, Jr i sur. CREB regulira nagradu za kokain. Znanost. 1998;282: 2272-5. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kronični fogeni antigeni: stabilne varijante deltaFosB izazvane u mozgu kroničnim tretmanima. J Neurosci. 1997;17: 4933-41. [PubMed]
  • Chudasama Y i sur. Disogirajući aspekti rada na zadatku serijskog reakcijskog odabira 5 nakon lezija dorzalnog prednjeg cingulata, infralimbičnog i orbitofrontalnog korteksa u štakora: različiti učinci na selektivnost, impulzivnost i kompulzivnost. Behav Brain Res. 2003;146: 105-19. [PubMed]
  • Churchill L, Swanson CJ, Urbina M, Kalivas PW. Ponovljeni kokain mijenja razine podjedinice receptora glutamata u jezgri accumbens i ventralnom tegmentalnom području štakora koje razvijaju senzibilizaciju ponašanja. J Neurochem. 1999;72: 2397-403. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatalna tipična prekomjerna ekspresija DeltaFosB-a povećava poticaj za kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-93. [PubMed]
  • Costall B, Domeney AM, Naylor RJ. Lokomotorna hiperaktivnost uzrokovana infuzijom dopamina u jezgru mozga štakora: specifičnost djelovanja. Psihofarmakologija (Berl) 1984;82: 174-180. [PubMed]
  • Deutch AY, Clark WA, Roth RH. Iscrpljivanje prefrontalnog kortikalnog dopamina pojačava reaktivnost mezolimbičnih dopaminskih neurona na stres. Brain Res. 1990;521: 311-5. [PubMed]
  • Fitzgerald LW, Ortiz J, Hamedani AG, Nestler EJ. Lijekovi zlouporabe i stresa povećavaju ekspresiju podjedinica GluR1 i NMDAR1 receptora glutamata u području ventralnog tegmentalnog štakora: uobičajene prilagodbe među agensima za unakrsno senzibiliziranje. J Neurosci. 1996;16: 274-82. [PubMed]
  • Garavan H, Hester R. Uloga kognitivne kontrole u ovisnosti o kokainu. Neuropsychol Rev. 2007;17: 337-45. [PubMed]
  • Geisler S, Derst C, Vehicle RW, Zahm DS. Glutamatergični utjecaji ventralnog tegmentalnog područja u štakora. J Neurosci. 2007;27: 5730-43. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  • Green TA, i sur. Indukcija ekspresije ICER-a u jezgri koja se povećava stresom ili amfetaminom povećava reakcije na ponašanje na emocionalne podražaje. J Neurosci. 2006;26: 8235-42. [PubMed]
  • Hanson KL, Luciana M, Sullwold K. Deficit u odlučivanju o nagrađivanju i povišena impulzivnost među MDMA i ostalim korisnicima droga. Ovisi o alkoholu. 2008
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokalno uklanjanje gena u mozgu korištenjem interakcije RNA posredovane virusom. Nat Med. 2003;9: 1539-44. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulacija neposredne rane ekspresije gena i vezanje AP-1-a u nukleusu štakora accumbens pomoću kroničnog kokaina. Proc Natl Acad Sci SAD A. 1992;89: 5764-8. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  • Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivnost koja proizlazi iz frontostriatalne disfunkcije u zlouporabi droga: implikacije za kontrolu ponašanja pomoću nagrada povezanih s nagradama. Psihofarmakologija. 1999;146: 373-90. [PubMed]
  • Kalivas PW, Stewart J. Dopaminska transmisija u inicijaciji i ekspresiji senzibilizacije motoričke aktivnosti izazvane lijekovima i stresom. Brain Res Brain Res Rev. 1991;16: 223-44. [PubMed]
  • Kalivas PW, Volkow ND. Neuralna osnova ovisnosti: patologija motivacije i izbora. Am J Psychiatry. 2005;162: 1403-13. [PubMed]
  • Kano T, Suzuki Y, Shibuya M, Kiuchi K, Hagiwara M. Fosforilacija CREB izazvana kokainom i ekspresija c-Fos su potisnuti u modelu miševa s Parkinsonizmom. NeuroReport. 1995;6: 2197-200. [PubMed]
  • Karler R, Calder LD, Bedingfield JB. Preosjetljivost na kokain i ekscitatorne aminokiseline. Psihofarmakologija (Berl) 1994;115: 305-10. [PubMed]
  • Kelz MB i sur. Izražavanje faktora transkripcije deltaFosB u mozgu kontrolira osjetljivost na kokain. Priroda. 1999;401: 272-6. [PubMed]
  • Klebaur JE i sur. Sposobnost amfetamina da evocira lučnu (Arg 3.1) mRNA ekspresiju u kaudatu, jezgri i neokorteksu modulira se u okruženju. Brain Res. 2002;930: 30-6. [PubMed]
  • Konradi C, Cole RL, Heckers S, Hyman SE. Amfetamin regulira ekspresiju gena u striatumu štakora putem transkripcijskog faktora CREB. J Neurosci. 1994;14: 5623-34. [PubMed]
  • Larsen MH, Rosenbrock H, Sams-Dodd F, Mikkelsen JD. Izražavanje neurotrofičnog faktora dobivenog iz mozga, proteina mitoze citoskeleta reguliranog djelovanjem, i povećanje neurogeneze hipokampala odraslih kod štakora nakon subhroničnog i kroničnog liječenja trostrukim inhibitorom ponovnog unosa monofina tesofensinom. Eur J Pharmacol. 2007;555: 115-21. [PubMed]
  • Lejuez CW, Bornovalova MA, kćeri SB, Curtin JJ. Razlike u impulsivnosti i seksualnom riziku u ponašanju korisnika droga / kokaina i heroina. Ovisi o alkoholu. 2005;77: 169-75. [PubMed]
  • Livak KJ, Schmittgen TD. Metode. Vol. 25. San Diego, Kalifornija: 2001. Analiza relativnih podataka o ekspresiji gena pomoću kvantitativnog PCR-a u stvarnom vremenu i metodom 2 (−Delta Delta C (T)); pp. 402 – 8.
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulacija ekspresije gena i nagrada kokaina od strane CREB-a i deltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-15. [PubMed]
  • Mitchell JB, Gratton A. Djelomično iscrpljivanje prefrontalnog korteksa dopamina dovodi do pojačanog oslobađanja mezolimbičkog dopamina izazvanog ponovljenim izlaganjem prirodno pojačavajućim podražajima. J Neurosci. 1992;12: 3609-18. [PubMed]
  • Moeller FG i sur. Smanjena cjelovitost bijele tvari prednjeg korpusnog tijela povezana je s povećanom impulzivnošću i smanjenom razlučivosti kod subjekata ovisnih o kokainu: difuzijsko snimanje tenzora. Neuropsvchopharmacologv. 2005;30: 610-7. [PubMed]
  • Nestler EJ. Transkripcijski mehanizmi ovisnosti: uloga deltaFosB. Philos Trans R Soc London, B Biol Sci. 2008;363: 3245-55. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakološka ispitivanja regulacije kronične indukcije antigena antigena s FOS kokainom u striatumu i nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-80. [PubMed]
  • Parkinson JA, i sur. Osiromašivanje dopamina uzrokovano nukleusom smanjuje i stjecanje i učinak apetitnog ponašanja Pavlovijskog pristupa: implikacije na funkciju mezoakumenki dopamina. Behav Brain Res. 2002;137: 149-63. [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. Mozak štakora u stereotaksičnim koordinatama. Sydney: Akademska štampa; 1998.
  • Peakman MC, et al. Inducibilna ekspresija dominantnog negativnog mutanta c-Juna kod transgenih miševa specifičnog za regiju mozga smanjuje osjetljivost na kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Model strujnih krugova za izražavanje senzibilizacije ponašanja na psihostimulanse slične amfetaminu. Brain Res Brain Res Rev. 1997;25: 192-216. [PubMed]
  • Robinson TE, Berridge KC. Neuralna osnova žudnje za drogom: poticajno-senzibilizacijska teorija ovisnosti. Brain Res Brain Res Rev. 1993;18: 247-91. [PubMed]
  • Rogers RD, et al. Disocirativni deficit u kogniciji kroničnih zlostavljača amfetamina, ovisnika o opijatu, bolesnika s žarišnim oštećenjem prefrontalnog korteksa i normalnih volontera koji su iscrpili triptofan: Dokaz za monoaminergičke mehanizme. Neuropsvchopharmacologv. 1999;20: 322-39. [PubMed]
  • Schilman EA, Uylings HB, Galis-de Graaf Y, Joel D, Groenewegen HJ. Orbitalna kora u štakora topografski se projicira na središnje dijelove kompleksa kaudata-putamen. Neurosci Lett. 2008;432: 40-5. [PubMed]
  • Schoenbaum G, Roesch MR, Stalnaker TA. Orbitofrontalni korteks, odluka i ovisnost o drogama. Trendovi Neurosci. 2006;29: 116-24. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  • Self DW, i sur. Uključivanje protein-kinaze ovisne o cAMP u jezgru, uključuje se u samo-davanju kokaina i relapsu ponašanja koje traži kokain. J Neurosci. 1998;18: 1848-59. [PubMed]
  • Stalnaker TA, Franz TM, Singh T, Schoenbaum G. Bazolateralne amigdalane lezije ukidaju obrnute poremećaje ovisne o orbitofrontalima. Neuron. 2007;54: 51-8. [PubMed]
  • Steketee JD. Neurotransmitorni sustavi medijalnog prefrontalnog c006Frtex: potencijalna uloga u osjetljivosti na psihostimulanse. Brain Res Brain Res Rev. 2003;41: 203-28. [PubMed]
  • Steketee JD, Walsh TJ. Ponavljane injekcije sulfpirida u medialni prefrontalni korteks potiču osjetljivost na kokain u štakora. Psihofarmakologija (Berl) 2005;179: 753-60. [PubMed]
  • Ujike H, Takaki M, Kodama M, Kuroda S. Genska ekspresija povezana sa sinaptogenezom, neuritogenezom i MAP kinazom u senzitivizaciji ponašanja na psihostimulanse. Ann NY Acad Sci. 2002;965: 55-67. [PubMed]
  • Uslaner JM, Crombag HS, Ferguson SM, Robinson TE. Kohina-inducirana psihomotorna aktivnost povezana je s njegovom sposobnošću da inducira c-fos mRNA ekspresiju u subtalamičkom jezgru: učinci doze i ponovljeno liječenje. Eur J Neurosci. 2003;17: 2180-6. [PubMed]
  • Uslaner JM, Robinson TE. Lezije subtalamičnih jezgara pojačavaju impulsivno djelovanje i smanjuju impulsivni izbor - posredovanje pojačanom motivacijskom motivacijom? Eur J Neurosci. 2006;24: 2345-54. [PubMed]
  • van Zundert B, Yoshii A, Constantine-Paton M. Dijeljenje receptora i trgovina sinapsama glutamata: razvojni prijedlog. Trendovi Neurosci. 2004;27: 428-37. [PubMed]
  • Verdejo-Garcia AJ, Perales JC, Perez-Garcia M. Kognitivna impulzivnost kod zloupotrebe polisušnih supstanci kokaina i heroina. Addict Behav. 2007;32: 950-66. [PubMed]
  • Volkow ND, Fowler JS. Ovisnost, bolest prisile i pogona: uključenost orbitofrontalnog korteksa. Cereb Cortex. 2000;10: 318-25. [PubMed]
  • Winstanley CA i sur. Povećana impulzivnost tijekom povlačenja iz kokaina, davanje kokainom: uloga DeltaFosB u orbitofrontalnom korteksu. Cereb Cortex. 2008 lipanj 6; Elektronička publikacija prije tiska.
  • Winstanley CA, Baunez C, Theobald DE, Robbins TW. Lezije subtalamičkog jezgra smanjuju impulzivni izbor, ali narušavaju automatsko oblikovanje štakora: važnost bazalnih ganglija u Pavlovijskom kondicioniranju i kontroli impulsa. Eur J Neurosci. 2005a;21: 3107-16. [PubMed]
  • Winstanley CA, Theobald DE, Dalley JW, Robbins TW. Interakcije između serotonina i dopamina u kontroli impulzivnog izbora kod štakora: Terapeutske implikacije za poremećaje kontrole impulsa. Neuropsvchopharmacologv. 2005b;30: 669-82. [PubMed]
  • Winstanley CA i sur. Indukcija DeltaFosB u orbitofrontalnom korteksu posreduje toleranciju na kokainsku disfunkciju. J Neurosci. 2007;27: 10497-507. [PubMed]
  • Vuk ME. Uloga ekscitatornih aminokiselina u senzibilizaciji ponašanja na psihomotorne stimulanse. Prog Neurobiol. 1998;54: 679-720. [PubMed]
  • Yao WD i sur. Identifikacija PSD-95 kao regulatora sinaptičke i bihevioralne plastičnosti posredovane dopaminom. Neuron. 2004;41: 625-38. [PubMed]
  • Zachariou V i sur. Bitna uloga DeltaFosB u jezgri se nalazi u djelovanju morfija. Nat Neurosci. 2006;9: 205-11. [PubMed]