DeltaFosB indukcija u podtipovima Striatal Medium Spiny Neuron kao odgovor na kronične farmakološke, emocionalne i optogenetske podražaje (2013)

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Lobo MK, Zaman S, Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, Nugent A, Finkel E, Chaudhury D, Chandra R, Riberio E, Rabkin J, Mouzon E, Cachope R, Razveseliti JF, Han MH, Dietz DM, Self DW, Hurd YL, Vialou V, Nestler EJ.

izvor

Odjel za anatomiju i neurobiologiju, Medicinski fakultet Sveučilišta u Marylandu, Baltimore, Maryland 21201, Fishberg Odjel za neuroznanost i Friedman Brain Institute, Medicinski fakultet Icahn na planini Sinai, New York, New York 10029, Odjeli za psihijatriju i farmakologiju i sustave Therapeutics, Medicinski fakultet Icahn na planini Sinai, New York, New York 10029, Odjel za psihijatriju, Medicinski centar Sveučilišta u Teksasu, Dallas, Texas 75390, Odjel za farmakologiju i toksikologiju i Istraživački institut za ovisnosti, Državno sveučilište u New Yorku u Buffalu, New York, New York, 14214 i Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, U952, Nacionalni centar za znanstvena istraživanja, Unité Mixte de Recherche 7224, UPMC, Pariz, 75005, Francuska.

Sažetak

Faktor transkripcije, ΔFosB, je robustno i uporno induciran u striatumu pomoću nekoliko kroničnih stimulansa, kao što su zlouporaba lijekova, antipsihotički lijekovi, prirodne nagrade i stres. Međutim, vrlo malo studija ispitalo je stupanj indukcije ΔFosB u dva podtipa striatnih srednjih neuronskih neurona (MSN). Koristimo fluorescentne reporterske BAC transgenične miševe za procjenu indukcije ΔFosB u obogaćenom dopaminskom receptoru 1 (D1) i dopaminskom receptoru 2 (D2) obogaćenom MSN u ventralnom striatumu, nucleus accumbens (NAc) ljusci i jezgri, te u dorzalnom striatumu (dStr) nakon kronične izloženosti nekoliko lijekova koji uključuju zlouporabu, uključujući kokain, etanol, Δ (9) -tetrahidrokanabinol i opijate; antipsihotični lijek, haloperidol; obogaćivanje maloljetnika; konzumiranje saharoze; ograničenje kalorija; inhibitor ponovne pohrane serotonina antidepresiv, fluoksetin; i društveni poraz stresa. Naši rezultati pokazuju da kronična izloženost mnogim stimulansima inducira ΔFosB u selektivnom uzorku MSN-podtipa u sva tri striatalna područja. Da bismo istražili indukciju ΔFosB u striatumu posredovanom krugom, koristimo optogenetiku za poboljšanje aktivnosti u limbičkim regijama mozga koje šalju sinaptičke ulaze NAc; ta područja uključuju ventralno tegmentalno područje i nekoliko glutamatergičnih aferentnih područja: medijalnog prefrontalnog korteksa, amigdale i ventralnog hipokampusa. Ovi optogenetski uvjeti dovode do vrlo izraženih obrazaca indukcije ΔFosB u podtipovima MSN u NAc jezgri i ljusci. Zajedno, ovi nalazi uspostavljaju selektivne uzorke ΔFosB indukcije u striatalnim MSN podtipovima kao odgovor na kronične podražaje i pružaju novi uvid u mehanizme na razini kruga indukcije ΔFosB u striatumu.

Uvod

Kronični podražaji, uključujući zlouporabu lijekova, antipsihotičke lijekove, stres i prirodne koristi, uzrokuju stabilnu akumulaciju ΔFosB, skraćenog proizvoda FosB gen, u striatumu (npr. Hope i sur., 1994; Hiroi i Graybiel, 1996; Hiroi i sur., 1997; Moratalla i sur., 1996; Perrotti i sur., 2004, 2008; Muller i Unterwald, 2005; McDaid i sur., 2006; Teegarden i Bale, 2007; Wallace i sur., 2008; Solinas i sur., 2009; Vialou i sur., 2010, 2011; Kaplan i sur., 2011). Ova akumulacija dovodi do dvosmjerne regulacije mnogih gena pomoću ΔFosB u ovoj regiji mozga (McClung i Nestler, 2003; Renthal et al., 2008, 2009; Vialou i sur., 2010; Robison i Nestler, 2011). Striatum je sastavljen uglavnom (N95%) od GABAergičnih projekcijskih medija, kičastih neurona (MSNs), koji su razdvojeni u dva podtipa na temelju obogaćivanja mnogih gena, uključujući dopamin receptor 1 (D1) ili dopamin receptor 2 (D2) (Gerfen, 1992; Graybiel, 2000; Lobo i sur., 2006; Heiman i sur., 2008) i njihovim diferencijalnim izlazima u različite subkortikalne strukture (Albin i sur., 1989; Gerfen, 1992; Kalivas i sur., 1993; Graybiel, 2000; Nicola, 2007; Smith i sur., 2013). U novije vrijeme postoji mnoštvo izvješća koja pokazuju različite molekularne i funkcionalne uloge ovih podtipova MSN-a u ventralnom striatumu (nucleus accumbens [NAc]) i dorzalnom striatumu (dStr) u posredovanju motivacijskog i motoričkog ponašanja (Lobo i Nestler, 2011; Gittis i Kreitzer, 2012).

Prethodne studije pokazale su da se ΔFosB inducira prvenstveno u D1-MSN-ima kroničnim liječenjem kokainom ili kroničnim pokretanjem kotača, što je oblik prirodne nagrade (Moratalla i sur., 1996; Werme i sur., 2002; Lee i sur., 2006), dok kronični stres sputavanja inducira ΔFosB u oba MSN podtipa (Perrotti i sur., 2004). Nadalje, uvjerljivi dokazi iz transgeničnih linija specifičnih za tip stanica ili virusno posredovan prijenos gena pokazuju da indukcija ΔFosB u D1-MSN povećava bihevioralnu i strukturalnu plastičnost kokaina, reakcije ponašanja na morfij, trčanje kotača, nagrađivanje hrane i otpornost na kronični društveni poraz stres, dok indukcija ΔFosB u D2-MSN-ima negativno regulira reakcije ponašanja na vožnju kotača (Kelz i sur., 1999; Werme i sur., 2002; Colby i sur., 2003; Olausson i sur., 2006; Zachariou i sur., 2006; Vialou i sur., 2010; Grueter i dr., 2013; Robison i sur., 2013).

S obzirom na ključnu ulogu ΔFosB u reguliranju ovih kroničnih motivacijskih stimulansa, s izraženim učincima na D1-MSN u odnosu na D2-MSN, ovdje provodimo opsežnu studiju o uzorcima indukcije ΔFosB u MSN podtipovima s nekoliko kroničnih stimulansa, uključujući kroničnu izloženost lijekovima zlostavljanja, kronično liječenje antipsihotičkim lijekom, kronična izloženost promijenjenim ekološkim i apetitivnim stimulansima, kronični društveni porazni stres i kronično liječenje antidepresivom. Da bismo razumjeli mehanizme sklopa koji kontroliraju indukciju ΔFosB u striatumu od strane nekoliko aferentnih limbičkih područja mozga, koristimo optogenetske tehnologije da opetovano aktiviramo stanična tijela u dopaminergičkim ili glutamatergičkim aferentnim područjima mozga i ispitamo rezultirajuću indukciju ΔFosB u MSN podtipovima. Naši rezultati pružaju novi uvid u indukciju ΔFosB u striatalnim D1-MSN i D2-MSN-ovima pomoću kroničnih stimulusa i, po prvi put, demonstriraju indukciju ΔFosB u striatumu i selektivnim MSN podtipovima.

Materijali i metode

Životinje.

D1-GFP or D2-GFP hemizygote miševi (Gong i sur., 2003) na pozadini C57BL / 6 održavana je na ciklusu 12 h svjetlo mraka s ad libitum hrana i voda. Sve su studije provedene u skladu sa smjernicama koje su postavili Institucionalni odbori za njegu i uporabu životinja na Medicinskom fakultetu Sveučilišta Maryland i Medicinskom fakultetu Icahn na brdu Sinai. Mužjaci miševa (8 tjedana starosti) korišteni su za sve pokuse. Svi miševi su perfundirani, a mozak je sakupljen tijekom poslijepodneva svjetlosnog ciklusa. hcmizigotni D1-GFP i D2-GFP Pokazalo se da su miševi na pozadini C57BL / 6 ili FVB / N ekvivalenti divljim tipovima miševa s obzirom na ponašanje, fiziologiju D1-MSN i D2-MSN i razvoj MSN-a (Lobo i sur., 2006; Chan i sur., 2012; Nelson i sur., 2012). Štoviše, ukupni obrasci indukcije ΔFosB viđeni u ovom istraživanju usporedivi su s onima viđenim kod životinja divljeg tipa s alatom koji nije selektivan za tip stanica (npr. Perrotti i sur., 2004, 2008).

Tretman kokainom.

D1-GFP (n = 4 po tretmanu) i D2-GFP (n = 4 po tretmanu) miševi su primali 7 dnevnu intraperitonealnu injekciju kokaina (20 mg / kg) ili 0.9% fiziološke otopine u kućni kavez. Za injekcije kokaina (1 mg / kg) za 3 ili 20 d, miševi su primali 6 ili 4 d injekcija fiziološke otopine 0.9% nakon čega su slijedili injekcije kokaina 1 ili 3 d. Svi miševi su perfundirani 24 h nakon posljednje injekcije. Ova doza kokaina odabrana je na temelju prethodnih studija (npr. Maze i sur., 2010).

Liječenje haloperidolom.

D1-GFP (n = 3 ili 4 po tretmanu) i D2-GFP (n = 4 po tretmanu) miševi su primili haloperidol (2 mg / kg) u vodi za piće, pH 6.0 (Narayan i sur., 2007), ili običnu pitku vodu, pH 6.0, za 3 tjedana (21 d). Miševi su perfundirani na dan 22.

Tretman morfinom.

D2-GFP miševi (n = 4 ili 5 po tretmanu) nakratko su anestezirani s izofluranom i primljeni su potkožni implantati morfija (25 mg) ili lažnih peleta na dan 1 i dan 3 kao što je prethodno opisano (Mazei-Robison i sur., 2011). Miševi su perfundirani na dan 5.

Liječenje etanolom.

D2-GFP miševi (n = 4 ili 5 po tretmanu) bili su izloženi 10% etanolu (EtOH), dozi za koju je pokazano da C57BL / 6 pije (Yoneyama i sur., 2008). Miševima je dan test s dvije boce za 10% EtOH (boca A) i vodu (boca B), dok su miševima dani testovi za izbor dvije boce D2-GFP kontrole su dobile vodu u obje boce (boca A i B) za 10 d. Svi miševi koji su primali EtOH boce pokazali su prednost prema EtOH kao što je izračunato (100 × volumen bočice / [volumen bočice + volumen B boce]). Miševi koji su primili bočicu 10% EtOH konzumirali su značajno više EtOH u usporedbi s vodom, dok miševi koji su primali vodu u obje boce nisu pokazali nikakvu razliku u potrošnji tekućine. Navečer dana 10, svim miševima je dana normalna voda za piće i perfundirani su na dan 11.

Tretman A (9) -tetrahidrokanabinola (A (9) -THC).

D2-GFP (n = 3 po tretmanu) miševi su primali intraperitonealne injekcije Δ (9) -THC (10 mg / kg) ili nosača (0.9% fiziološka otopina s 0.3% Tween) dva puta dnevno za 7 d (Perrotti i sur., 2008). Miševi su perfundirani 24 h nakon zadnje injekcije.

Kokainska samouprava.

D2-GFP miševi (n = 4 ili 5 po tretmanu) su prvotno uvježbani da pritisnu 20 mg saharozne pelete na fiksni raspon 1 (FR1) raspored ojačanja dok se ne postigne kriterij stjecanja 30 saharoznih peleta potrošenih za 3 uzastopne testne dane prema standardnim postupcima (Larson i sur., 2010). Miševi koji su naučili vršiti prešanje su kirurški implantirani s intravenskim jugularnim kateterom kako bi se omogućila kasnija intravenska primjena kokaina. Jedan tjedan nakon operacije, miševi su uvedeni u paradigmu samouprave tijekom 2 h dnevnih sesija na FR1 rasporedu pojačanja. Oprema za samoupravu (Med Associates) programirana je tako da je odgovor na aktivnu polugu rezultirao u isporuci (preko 2.5 s) kokaina (0.5 mg / kg / infuzija po ispravnoj polugi), dok je odgovor na neaktivnu polugu nije imao nikakvu programiranu posljedicu. Miševima se samostalno daje kokain na rasporedu FR1 u dnevnim 2 h sesijama, 5 d tjedno, za 3 tjedana. D2-GFP miševi koji su primali injekcije fiziološke otopine 0.9% tijekom ekvivalentnog vremenskog perioda korišteni su kao kontrole. Miševi su perfundirani 24 h nakon posljednje primjene kokaina ili fiziološke otopine.

Samouprava heroina.

Prije samouprave heroina, D2-GFP miševi (n = 4 po tretmanu) obučeni su za pokretanje preše za čokoladne kuglice (BioServ, Dustless Precision Pellets) u sedam 1 h dnevnih sesija. Miševi koji su naučili pritisnuti prešu su kirurški implantirani s intravenskim jugularnim kateterom kako bi se omogućilo daljnje intravensko davanje heroina. Tjedan dana nakon operacije, miševi su uvedeni u paradigmu samouprave tijekom 3 h dnevnih sesija na FR1 rasporedu ojačanja prema standardnim postupcima (Navarro i sur., 2001). Oprema za samoupravu (Med Associates) programirana je tako da je odgovor na aktivnu polugu rezultirao u isporuci (preko 5 s) heroina (30 μg / kg / injekcija; NIDA Program opskrbe lijekovima), dok je odgovor na neaktivne poluga nije imala programirane posljedice. Životinjama je dan pristup heroinskom samoprocesuiranom postupku za 14 d. D2-GFP miševi koji su primali injekcije fiziološke otopine 0.9% tijekom ekvivalentnog vremenskog perioda korišteni su kao kontrole. Miševi su perfundirani 24 h nakon posljednje primjene heroina ili fiziološke otopine.

Obogaćivanje okoliša maloljetnicima.

D2-GFP (n = 4 po skupini) miševi su odbijeni u obogaćeni okoliš ili normalne uvjete stanovanja u postnatalnom danu 21 (P21) koristeći paradigmu prilagođenu štakorima (Green i sur., 2010). Obogaćeni okoliš sastojao se od većeg hrčka hrčka s obogaćenom posteljicom (Andersons Laboratory bedding) ispunjenom uređajima za obogaćivanje koji su uključivali tunele za miš, kupolu i kotače, loptice za puzanje, kolibe (Bio Serv) i druge igračke. Miševi su ostali u uvjetima stanovanja za 4 tjedana do P50 i zatim su perfundirani.

Tretiranje saharozom.

D2-GFP miševi (n = 4 ili 5 po tretmanu) dani su testovi izbora za dvije bočice za 10% saharoze slično prethodnoj studiji (Wallace i sur., 2008). Miševima je dana 10% saharoza (boca A) i voda (boca B), dok su miševima dani XNUMX% saharoze (boca A) i vode (boca B) D2-GFP kontrole su dobile vodu u obje boce za 10 d. Svi miševi koji su primali boce saharoze pokazali su prednost prema saharozi kako je izračunato (100 × volumen bočice / boca volumen + volumen B boce). Miševi koji su primili bocu 10% saharoze konzumirali su znatno više saharoze u usporedbi s vodom, dok miševi koji su primali vodu u obje boce nisu pokazali nikakvu razliku u potrošnji tekućine. Navečer dana 10, svim miševima je dana normalna voda za piće i perfundirani su na dan 11.

Ograničenje kalorija.

D2-GFP miševi (n = 4 po genotipu) prošao je protokol ograničenja kalorija, u kojem su primili 60% od ad libitum kalorija dnevno (Vialou i sur., 2011) za 10 d. D2-GFP kontrolni miševi dobili su puni pristup hrani. Navečer dana 10, svi miševi dobili su puni pristup hrani i perfundirani su na dan 11.

Društveni poraz stresa.

D2-GFP miševi (n = 4 ili 5 po skupini) podvrgnut 10 d društvenog poraznog stresa kao što je prethodno opisano (Berton i sur., 2006; Krishnan i sur., 2007). Miševi su bili izloženi agresivnim umirovljenim uzgajivačima CD1-a za 5 min u velikom kavezu. Miševi su zatim smješteni za 24 h u istom kavezu s druge strane perforiranog razdjelnika da bi se održao senzorni kontakt. Slijedeći dan miševi su bili izloženi novom mišu CD1 pod istim uvjetima i stanovanju. Ovo je ponovljeno za 10 d s novim CD1 svaki dan. Kontrolni miševi su bili smješteni pod sličnim uvjetima bez poraza stresa. Miševi su testirani na socijalnu interakciju na dan 11. Miševi su prvo testirani na vrijeme provedeno u interakciji s novom komorom u otvorenom polju bez drugog miša (bez meta), a zatim su testirani na vrijeme provedeno u interakciji s novim CD1 mišem (metom) koji se nalazio iza komore (Berton i sur., 2006; Krishnan i sur., 2007). Miševi su razdvojeni u osjetljive ili elastične skupine na temelju prethodno opisanih parametara (Krishnan i sur., 2007). To je uključivalo ukupno vrijeme provedeno s novim mišem i omjerom interakcije: (vrijeme provedeno s ciljanim / provedenim vremenom bez cilja) × 100. Pokazalo se da ova mjera pouzdano identificira osjetljive i otporne skupine i da je u visokoj korelaciji s drugim razlika u ponašanju (Krishnan i sur., 2007). Svi miševi su perfundirani 24 h nakon testa socijalne interakcije (48 h nakon posljednje socijalne porazne epizode).

Liječenje fluoksetinom.

D2-GFP miševi (n = 3 ili 4 po skupini) primili su 14 dnevne intraperitonealne injekcije fluoksetina (20 mg / kg) ili nosača (0.9% fiziološka otopina s 10% ciklodekstrinom) (Berton i sur., 2006). Miševi su perfundirani 24 h nakon zadnje injekcije.

Stereotaksijska kirurgija.

D2-GFP miševi su anestezirani ketaminom (100 mg / kg) / ksilazinom (10 mg / kg), stavljeni u stereotaksični instrument male životinje, i izložena im je površina lubanje. Za jednostrano punjenje 0.5-1 μl, brzinom od 0.1 μl po minuti, virusa bilateralno u ventralno tegmentalno područje (VTA), medijalnu prefrontalni korteks (mPFC), amigdalu ili ventralni hipokampus upotrijebljene su trideset i tri igle s injekcijom. vHippo). AAV [adeno-pridruženi virus] -hSyn-ChR2 [channelrhodopsin 2] -EYFP ili AAV-hSyn-EYFP infundiran je u VTA od D2-GFP miševi (n = 5 po skupini) na stereotaksičnim koordinatama (anteriorno - posteriorno, - 3.3 mm; lateralno - medijalno, 0.5 mm; dorzalno - ventralno, - 4.4 mm, 0 ° kut). Nakon toga slijedila je bilateralna kanila (26-gauge), duljine 3.9 mm, implantacija preko VTA (anterior-posterior, -3.3 mm; lateralno-medijalna, 0.5 mm; dorzalno-ventralna, -3.7 mm) (Koo i sur., 2012; Chaudhury i sur., 2013). AAV-CaMKII-ChR2-mCherry ili AAV-CaMKII-mCherry su ubrizgani u mPFC (n = 4 ili 5 po skupini), amigdala (n = 3 ili 4 po grupi) ili vHippo (n = 3 ili 4 po skupini) od D2-GFP miševa nakon čega slijedi implantacija 105 μm kroničnih optičkih vlakana za implantaciju (Sparta i sur., 2011). Koordinate su bile sljedeće: mPFC (ciljan je infralimbik, ali smo primijetili prelijevanje virusa u prelimbijska područja: anteriorno-posteriorno, 1.7 mm; lateralno-medijalno, 0.75 mm; dorzalno-ventralno, -2.5 mm, 15 ° kut) i optičko vlakno (dorzalno-ventralno, -2.1 mm); amigdala (ciljana je bazolateralna amigdala, ali smo uočili prelijevanje virusa u središnju jezgru amigdale; prednje-stražnje, -1.6 mm; lateralno-medijalno, 3.1 mm; dorzalno-ventralno, -4.9 mm, 0 ° kut) i optički vlakno (dorzalno-ventralno, -4.9 mm); vHippo (ciljani je ventralni subikulum, ali smo primijetili prelijevanje virusa u druga područja ventralnog hipokampusa, prednje-stražnje, -3.9 mm; lateralno-medijalno, 3.0 mm; dorzalno-ventralno, -5.0 mm, 0 ° kut) i optičko vlakno (dorzalno-ventralno, -4.6 mm).

Optogenetski uvjeti.

Za in vivo optička kontrola VTA neuronskog pečenja, 200 μm jezgra optičkog vlakna patch kabel je modificiran za pričvršćivanje na kanilu. Kada je vlakno pričvršćeno na kanilu, vrh vlakna produžen ∼0.5 mm iza kanile (Lobo i sur., 2010; Chaudhury i sur., 2013). Za in vivo optičkom kontrolom mPFC, amigdale i vHippo neuronskog pečenja, 62.5 μm vlaknastog patch kabla pričvršćen je na implantirajuća vlakna za glavu (Sparta i sur., 2011). Optička vlakna su pričvršćena preko FC / PC adaptera na 473 nm plavu lasersku diodu (Crystal Lasers, BCL-473-050-M), a svjetlosni impulsi su generirani preko stimulatora (Agilent, 33220A). Za fazne impulse VTA, plavo svjetlo (473 nm), 20 Hz za 40 ms (Chaudhury i sur., 2013), isporučeni su za 10 min dnevno preko 5 d. Za mPFC, amigdalu i vHippo, plavo svjetlo (473 nm) impulsa, 20 Hz za 30 s, isporučeno je za 10 min dnevno za 5 d. Davanje svjetla dogodilo se u kavezu kod kuće, a svi miševi su perfundirani 24 h nakon posljednje stimulacije svjetlom.

In vitro elektrofiziologija patch-clampa.

Snimke cijelih stanica dobivene su iz VTA dopaminskih neurona ili mPFC glutamatergičnih neurona u akutnim rezovima mozga miševa kojima su injicirani gore navedeni virusi. Snimke su izvršene na miševima bez in vivo stimulacije, ali s 1 d stimulacije rezova (1 d) ili 4 d od in vivo stimulacija i 1 d stimulacije rezova (5 d). Kako bi se smanjio stres i dobili zdravi rezovi, miševi su anestezirani odmah nakon što su dovedeni na područje elektrofiziologije i perfundirani za 40-60 s ledeno hladnim aCSF, koji je sadržavao 128 mm NaCl, 3 mm KCl, 1.25 mm NaH2PO410 mm d-glukoza, 24 mm NaHCO32 mm CaCl2i 2 mm MgCl2 (oksigeniran s 95% O2 i 5% CO2, pH 7.4, 295 – 305 mOsm). Akutni rezovi mozga koji sadrže mPFC ili VTA rezani su pomoću mikroslikera (Ted Pella) u hladnoj saharozi-aCSF, koja je dobivena potpunim zamjenom NaCl sa 254 mm saharozom i zasićenom 95% O2 i 5% CO2, Rezovi su održavani u komori za držanje s aCSF za 1 h na 37 ° C. Patch pipete (3-5 MΩ), za struju cijelih stanica, napunjene su unutarnjim otopinama koje sadrže sljedeće: 115 mm kalijev glukonat, 20 mm KCl, 1.5 mm MgCl2, 10 mm fosfokreatin, 10 mm HEPES, 2 mm magnezij ATP i 0.5 mm GTP (pH 7.2, 285 mOsm). Snimke cijelih stanica provedene su korištenjem aCSF na 34 ° C (brzina protoka = 2.5 ml / min). Vlakovi plavog svjetla (20 Hz za mPFC ili fazni 20 Hz, 40 ms za VTA) generirani su pomoću stimulatora spojenog preko FC / PC adaptera na 473 nm plavu lasersku diodu (OEM) i isporučena na mPFC i VTA kriške putem 200-a μm optičkih vlakana. Eksperimenti sa strujnim stezanjem provedeni su pomoću Multiclamp 700B pojačala, a prikupljanje podataka provedeno je u pClamp 10 (Molecular Devices). Tijekom eksperimenata praćena je serijska otpornost, a struje i naponi membrane su filtrirani na 3 kHz (Besselov filtar).

Imunohistokcmija.

Miševi su anestezirani s kloral hidratom i perfuzirani s 0.1 m PBS, a zatim 4% paraformaldehidom u PBS. Mozgovi se postificiraju u 4% paraformaldehidu preko noći i zatim ciroprezerviraju u 30% saharozi. Mozgovi su podijeljeni na kriostatu (Leica) na 35 μm u PBS s 0.1% natrijevim azidom. Za imunohistokemiju, sekcije su blokirane u 3% normalnom serumu magaraca s 0.01% Triton-X u PBS za 1 h na mućkalici na sobnoj temperaturi. Sekcije su zatim inkubirane u primarnim antitijelima u bloku preko noći na mućkalici na sobnoj temperaturi. Upotrijebljena antitijela su slijedeća: zečja anti-FosB (1: 2000, katalog # sc-48, Santa Cruz Biotechnology), mišji anti-NeuN (1: 1000, katalog #MAB377, Millipore), pileći anti-GFP (1: 5000) , katalog # 10-20, Aves) i zečji anti-CREB (cAMP odgovor element koji veže protein; 1: 1000, katalog # 06-863, Millipore). Slijedeći dan, sekcije su isprane u PBS nakon čega slijedi 1 h inkubacija u sekundarnim antitijelima: magarac anti-zečji Cy3, magareći anti-mišji Cy5, i magareći anti-chicken DyLight-488 ili Alexa-488 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). Za imunohistokemiju mCherry i tirozin hidroksilaze, eksperimenti su provedeni kao što je prethodno opisano (Lobo i sur., 2010; Mazei-Robison i sur., 2011). Sekcije su isprane u PBS, postavljene na slajdove i pokrivene.

Slikanje i brojanje stanica.

Imunofluorescencija je snimljena na Zeiss Axioscope ili Olympus Bx61 konfokalni mikroskop. Brojanje stanica izvršeno je pomoću softvera ImageJ. Slike uzoraka bregma 1.42-1.1 NAc (jezgre i ljuske) i dorzalnog striatuma uzete su iz 2 ili 3 sekcija mozga / životinja (vidi Slika 1A). Ukupno je pregledano 400-500 stanica po mozgu po mišu korištenjem 250 μm × 250 μm slika. Stanice su brojane pomoću softvera ImageJ sličnog prethodnoj studiji (Lobo i sur., 2010). Približno 400-500 ukupne NeuN stanice izbrojene su po mozgu po mišu, a zatim broj GFP-a.+, GFP+: ΔFosB+, GFP-i GFP-: ΔFosB+ stanice su brojane u svakoj regiji. Podaci su kvantificirani kako slijedi: (GFP+: ΔFosB+ neuroni × 100%) / (ukupni GFP+ neurona) i (GFP-: ΔFosB+ neuroni × 100%) / (ukupni GFP- neuroni). Statističke analize provedene su pomoću softvera GraphPad Prism. Za sve analize brojanja stanica korištene su dvosmjerne ANOVA-e nakon kojih su slijedili Bonferroni post testovi.

Slika 1.  

Kronični kokain selektivno inducira ΔFosB u D1-MSN u striatnim regijama. AStriatalni dijelovi od bregma + 1.42 do + 1.10 korišteni su za brojanje stanica. Slika a D2-GFP striatalni odjeljak pokazuje tri ispitivana područja striatije: NAc jezgra, ...

Rezultati

ΔFosB je diferencijalno induciran u D1-MSN i D2-MSN-ovima nakon ponovljene izloženosti kokainu nasuprot haloperidolu

Najprije smo ispitali ΔFosB indukciju u MSN podtipovima u D1-GFP i D2-GFP miševi koji su koristili kronične uvjete kokaina za koje se pokazalo da preferencijalno induciraju ΔFosB protein u D1-MSNs (Moratalla i sur., 1996). D1-GFP i D2-GFP BAC transgenski miševi, koji eksprimiraju pojačani zeleni fluorescentni protein pod D1 ili D2 receptorskim genom (Slika 1A), primili su intraperitonealne injekcije kokaina (20 mg / kg) ili fiziološke otopine za 7 d, a mozak je sakupljen 24 h nakon završne injekcije (Slika 1B). Zatim smo izvršili imunohistokemiju na dijelovima mozga koristeći antitijela protiv NeuN, GFP, ili FosB i snimljene i prebrojane stanice u NAc jezgri, NAc ljusci i dStr (Slika 1A,C). Budući da antitijelo anti-FosB prepoznaje FosB i ΔFosB pune dužine, brojne studije koje su koristile Western blotting ili imunohistokemiju potvrdile su da je ΔFosB jedina vrsta koja se može detektirati u 24 h trenutku povlačenja (npr. Perrotti i sur., 2008). Stoga smo koristili 24 h ili dulju vremensku točku za prikupljanje mozga nakon svih uvjeta u ovoj studiji kako bi se osiguralo da detektiramo samo ΔFosB. Budući da MSN u striatama čine N95% svih neurona u striatumu, koristili smo imuno označavanje NeuN da bismo identificirali GFP- neurona, koji su obogaćeni u suprotnom MSN podtipu (tj., D2-MSN u D1-GFP miševi i D1-MSN-ovi u D2-GFP miševa). To smo pronašli D1-GFP miševi tretirani kokainom pokazuju značajnu indukciju ΔFosB u GFP+/ NeuN+ neuroni (D1-MSN) u NAc jezgri, NAc ljusci i dStr, dok GFP-/ NeuN+ stanice (D2-MSN) nisu pokazale značajnu indukciju ΔFosB u svim striatnim regijama (Slika 1D): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica F(1,12) = 16.41, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: lijek × tip stanice F(1,12) = 12.41, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.001; dStr: lijek × tip stanice F(1,12) = 12.07, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01. U skladu s tim nalazima, primijetili smo u D2-GFP miševima nije bilo značajne indukcije ΔFosB u GFP+/ NeuN+ neurona (D2-MSNs), ali značajna indukcija ΔFosB u GFP-/ NeuN+ (D1-MSN) u svim striatalnim područjima nakon tretmana kokainom (Slika 1D): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica F(1,12) = 15.76, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.0001; NAc ljuska: lijek × tip stanice: F(1,12) = 20.33, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; dStr: lijek × vrsta stanice: F(1,12) = 35.96, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.001. Ispitali smo kinetiku indukcije ΔFosB u MSN nakon injekcija 1, 3 ili 7 d kokaina (20 mg / kg, ip). Primijetili smo značajnu indukciju ΔFosB u D1-MSN s 3 ili 7 d liječenja kokainom u usporedbi s liječenjem fiziološkom otopinom u svim strijatalnim regijama (Slika 1F): reprezentativni grafikon iz dStr; dvosmjerna ANOVA, tip stanica × dan F(2,13) = 17.87, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.01, p <0.001. To je u skladu s vremenskim tijekom akumulacije ΔFosB u striatumu koji je ranije vidio Western blot (Hope i sur., 1994) i potvrđuje selektivnu indukciju ΔFosB isključivo u D1-MSN-ovima tijekom izlaganja kokainu.

Zatim smo ispitali ΔFosB indukciju imunohistokemijom u MSN podtipovima nakon kronične izloženosti haloperidolu (Slika 2). Prethodni rad je indirektno sugerirao da kronični haloperidol može inducirati ΔFosB preferencijalno u D2-MSNs (Hiroi i Graybiel, 1996; Atkins et al., 1999), iako to do sada nije izravno ispitivano. D1-GFP i D2-GFP miševi su primali haloperidol (2 mg / kg) u vodi za piće, pH 6.0, dok je D1-GFP i D2-GFP kontrolni miševi su dobili redovitu vodu za piće, pH 6.0, za 21 d (3 tjedana) i mozak je sakupljen na dan 22 (Slika 2A). Kao i kod kokaina, znamo da sva imunoreaktivnost FosB-a u striatumu u ovom trenutku predstavlja ΔFosB, a ne FosB cijele dužine (Atkins et al., 1999). To smo pronašli D1-GFP miševi koji su primali haloperidol nisu pokazali značajnu indukciju ΔFosB u GFP+/ NeuN+ neuroni (D1-MSNs) u NAc jezgri, NAc ljusci, ili dStr; međutim, značajno povećanje ΔFosB opaženo je u GFP-u-/ NeuN+ neurona (D2-MSN) u svim striatnim regijama (Slika 2B,C): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica: F(1,10) = 23.29, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: lijek: lijek × tip stanice: F(1,10) = 30.14, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; dStr: lijek × vrsta stanice: F(1,10) = 37.63, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.0001. To je potvrđeno ispitivanjem D2-GFP miševi: uočili smo značajnu indukciju ΔFosB u GFP+/ NeuN+ neurona (D2-MSN) u sva tri striatalna područja, ali bez značajne promjene ΔFosB u GFP-/ NeuN+ (D1-MSN) nakon liječenja haloperidolom (Slika 2B,C): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica: F(1,12) = 24.30, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.05; NAc ljuska: lijek × tip stanice: F(1,12) = 26.07, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.001; dStr: lijek × vrsta stanice: F(1,12) = 21.36, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.01. S obzirom na to da smo primijetili sličan obrazac indukcije ΔFosB u D1-MSN ponovljenom izloženošću kokainu u obje D1-GFP (GFP+/ NeuN+) I D2-GFP (GFP-/ NeuN+miševa, te ponovljenim haloperidolom u D2-MSNs u D1-GFP (GFP-/ NeuN+) I D2-GFP (GFP+/ NeuN+miševa, ostatak naših eksperimenata korišten D2-GFP miševa za ispitivanje indukcije ΔFosB u D1-MSNs (GFP-/ NeuN+) i D2-MSN (GFP+/ NeuN+) nakon drugih kroničnih podražaja.

Slika 2.  

Kronični haloperidol selektivno inducira ΔFosB u D2-MSN u striatnim regijama. A, Vrijeme 21 d tretmana haloperidola (2 mg / kg, u vodi za piće) ili vode. B, Imunohistokemija NAc ljuske D1-GFP i D2-GFP miševima nakon haloperidola ...

Kao kontrolu, ispitali smo razinu ekspresije CREB-a u uvjetima kokaina i haloperidola kako bismo utvrdili mogu li se naši rezultati generalizirati na druge transkripcijske faktore (Slika 3). Nismo primijetili značajnu razliku u ekspresiji CREB-a između kontrolnih i liječenih miševa. Nadalje, nije bilo razlike u razinama CREB-a između D2-MSN i D1-MSN-ova (Slika 3B,C).

Slika 3.  

Kronični kokain ili haloperidol ne izaziva CREB u MSN podtipovima. A, Immunostaining za CREB i GFP u striatumu od D2-GFP miševi nakon kroničnog kokaina ili kroničnog haloperidola (Slika 1 i and22 legende za liječenje lijekovima). Skala ljestvice, 50 μm. ...

Različiti obrasci indukcije ΔFosB u podtipovima MSN putem droga zlostavljanja

Budući da su prethodne studije pokazale da drugi lijekovi zlouporabe mogu snažno inducirati ΔFosB u podregijama strijata (Perrotti i sur., 2008), ispitali smo ΔFosB u MSN podtipovima nakon kronične izloženosti opijatima, EtOH ili Δ (9) -THC. Prvo smo ispitali je li kronična izloženost morfina inducirala ΔFosB u specifičnim MSN podtipovima u strijatalnim regijama. D2-GFP miševi su primili dva potkožna implantata lažnog ili morfijskog (25 mg) peleta na dane 1 i 3, a mozak je sakupljen na dan 5 (Slika 4A) kada je induciran ΔFosB, ali ne i FosB (Zachariou i sur., 2006). U iznimnom kontrastu s kokainom, oba podtipa MSN-a pokazala su značajno (i približno usporedivo) povećanje ΔFosB u NAc jezgri, NAc ljusci i dStr u morfinskoj skupini u usporedbi sa lažnim kontrolama, bez diferencijalne indukcije ΔFosB podtipa u svim striatama regije (Slika 4A): dvosmjerna ANOVA; NAc jezgra: lijek F(1,14) = 75.01, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); NAc ljuska: lijek F(1,14) = 62.87, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); dStr: lijek F(1,14) = 60.11, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Slika 4.  

Lijekovi zlouporabe induciraju ΔFosB u MSN podtipovima u striatalnim regijama. AKronični tretman morfina (25 mg peleti dana 1 i 3) u D2-GFP miševi dovode do značajne indukcije ΔFosB u oba MSN podtipa u NAc jezgri, NAc ljusci i dStr ...

Zatim smo istražili uzorak indukcije ΔFosB u MSN podtipovima nakon kronične izloženosti EtOH. D2-GFP miševima je dan test za izbor dvije boce za 10% EtOH (boca A) i vodu (bocu B), dok je D2-GFP Kontrole su dobile vodu u obje boce (boce A i B), za 10 d i mozgovi su sakupljeni na dan 11 (Slika 4B). Miševi koji su primili bočicu 10% EtOH konzumirali su znatno više EtOH u usporedbi s vodom, dok miševi koji su primali vodu u obje boce nisu pokazali nikakvu razliku u potrošnji tekućine (Slika 4B): prednost za skupinu vode u boci A: 50.00 ± 4.551%, EtOH skupina: 84.44 ± 8.511%; Studentska t test p <0.05. Kronična primjena EtOH rezultirala je značajnom indukcijom ΔFosB selektivno u D1-MSN u jezgri NAc, ljusci NAc i dStr, bez promjene u D2-MSN (Slika 4B): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica: F(1,14) = 24.58, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.05; NAc ljuska: lijek × tip stanice: F(1,14) = 36.51, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.01; dStr: lijek × vrsta stanice: F(1,14) = 29.03, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.01.

D2-GFP miševi su također tretirani s (9) -THC (10 mg / kg, ip) dva puta dnevno za 7 d, a mozgovi su sakupljeni 24 h nakon posljednje injekcije. Slično kokainu i EtOH uvjetima, uočili smo značajno povećanje ΔFosB selektivno u D1-MSN u svim striatalnim područjima u miševa koji su primali kronični Δ (9) -THC (Slika 3E): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica F(1,8) = 26.37, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: lijek × tip stanice: F(1,8) = 44.49, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.001; dStr: lijek × tip stanice F(1,8) = 29.30, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01.

Zatim smo ispitali da li se uočeni uzorak ΔFosB indukcije u MSN podtipovima primjenom kokaina ili opijata od strane istraživača javlja u kontingentnim paradigmama u kojima miševi volonterski samostalno daju lijek. Prvi, D2-GFP miševi su trenirani za samostalno davanje kokaina (0.5 mg / kg / infuzija) na rasporedu FR1 za 2 ha dan tijekom 3 tjedana, a mozak je sakupljen 24 h nakon posljednje infuzije (Slika 4D) kada je poznato da je ΔFosB, ali ne i FosB, induciran (Larson i sur., 2010). Miševi su proveli znatno više vremena pritiskanjem poluge aktivnog u odnosu na neaktivne (Slika 4D; Studentska t test p <0.01). Prosječna dnevna doza kokaina bila je 19.1 mg / kg intravenski (Slika 4D), slično gore opisanoj intraperitonealnoj dozi 20 mg / kg (Slika 1). Kao i kod izlaganja kokainu bez kontingenta (Slika 1), otkrili smo da je samokontrola kokaina izazvala značajnu indukciju ΔFosB samo u D1-MSN u svim striatnim regijama u usporedbi s izloženošću slanoj otopini (Slika 4D): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: vrsta lijeka × stanica F(1,14) = 21.75, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: lijek × tip stanice: F(1,14) = 26.52, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.01; dStr: lijek × tip stanice F(1,14) = 33.68, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.001. Isto tako, slično izloženosti nekompirajućem opijatu (morfiju) (Slika 4A), to smo pronašli D2-GFP miševi koji su sami uzimali heroin (30 μg / kg po infuziji), na rasporedu 1 h X3 ha tijekom 2 tjedana ispitanih 24 h nakon posljednje izloženosti lijeku, pokazali su značajnu indukciju ΔFosB u oba D2-MSN i D1-MSN-u u svim striatama regije (Slika 4E): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: lijek F(1,12) = 68.88, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); NAc ljuska: lijek F(1,12) = 80.08, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: lijek F(1,12) = 63.36, p <0.001, test Bonferroni nakon: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Prosječna dnevna doza heroina bila je 0.459 mg / kg, a miševi su proveli znatno više vremena pritiskajući aktivnu naspram neaktivne poluge (Studentova t test p <0.05) (Slika 4E).

Obogaćivanje okoliša i stimulativni apetiti izazivaju ΔFosB u oba D1-MSN i D2-MSN

Budući da su prethodne studije pokazale da prirodne nagrade izazivaju ΔFosB u strijatalnim regijama (Werme i sur., 2002; Teegarden i Bale, 2007; Wallace i sur., 2008; Solinas i sur., 2009; Vialou i sur., 2011), s indukcijskim kotačima koji su selektivni za D1-MSN (Werme i sur., 2002), ispitali smo je li indukcija drugim prirodnim nagradama pokazala staničnu specifičnost. Najprije smo koristili paradigmu obogaćivanja maloljetnika u kojoj D2-GFP miševi su smješteni u obogaćenom okolišu od odbića (3 tjedana) za 4 tjedno (Slika 5A). Ovaj pristup je prethodno pokazao da inducira ΔFosB u mišjim NAc i dStr (Solinas i sur., 2009; Lehmann i Herkenham, 2011). U usporedbi s normalnim uvjetima stanovanja, obogaćeno okruženje značajno je povećalo ΔFosB u svim striatnim regijama, ali to nije učinilo na način specifičan za tip stanica, s usporedivom indukcijom u D1-MSN i D2-MSNs (Slika 5A): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: okoliš F(1,12) = 89.13, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc ljuska: okoliš F(1,12) = 80.50, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: okoliš F(1,12) = 56.42, p <0.01, test Bonferroni nakon: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Slika 5.  

Obogaćivanje okoliša i stimulativni apetiti induciraju ΔFosB u oba podtipa MSN-a. A, D2-GFP miševi koji su bili smješteni u obogaćenom okolišu počevši od P21 tijekom 4 tjedana pokazuju indukciju ΔFosB u oba MSN podtipa u svim striatnim ...

Zatim smo ispitali ekspresiju ΔFosB u MSN podtipovima nakon kroničnih apetitivnih podražaja. Najprije smo testirali učinke pijenja kronične saharoze, za koje je ranije pokazano da inducira ΔFosB u NAc štakora (Wallace i sur., 2008). D2-GFP miševima je dan test za izbor dvije boce za 10% saharozu (boca A) i vodu (bocu B), dok je D2-GFP Kontrole su dobile vodu u obje boce (boca A i B) za 10 d, a mozak je sakupljen na dan 11 (Slika 5B). Miševi koji su primili 10% saharozu konzumirali su znatno više saharoze, dok su miševi koji su primali vodu u obje boce pokazali da nema razlike u potrošnji tekućine (Slika 5B): prednost za bočicu A, voda: 50.00 ± 4.749%, saharoza: 89.66 ± 4.473%; Studentska t test p <0.001. Otkrili smo da je kronična konzumacija saharoze inducirala ΔFosB u jezgri NAc, ljusci NAc i dStr i da se to dogodilo u oba MSN podtipa (Slika 5B): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: tretman F(1,12) = 76.15 p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc ljuska: liječenje F(1,12) = 63.35, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: liječenje F(1,12) = 63.36, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Konačno, ispitali smo ΔFosB ekspresiju u podtipovima MSN-a nakon restrikcije kalorija jer se to stanje, koje povećava lokomotornu aktivnost i motivacijsko stanje, ranije pokazalo da povećava razine ΔFosB u NAc miša (Vialou i sur., 2011). D2-GFP miševi su prošli kroz protokol ograničenog kalorija, u kojem su primili 60% od ad libitum kalorije dnevno za 10 d i mozak prikupljeni su na dan 11 (Slika 5C). Ograničenje kalorija povećalo je razine ΔFosB u NAc jezgri i NAc ljusci kao što je prethodno prikazano (Vialou i sur., 2011), a također i povećane razine ΔFosB u dStr. Međutim, uočili smo da nema diferencijalne indukcije u D1-MSN-ovima u odnosu na D2-MSN-ove (Slika 5C): dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: tretman F(1,12) = 67.94 p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc ljuska: liječenje F(1,12) = 67.84, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: liječenje F(1,12) = 82.70, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Kronični socijalni poraz i antidepresivni tretman uzrokuju diferencijalno induciranje ΔFosB u MSN podtipovima

Prethodno smo pokazali da se ΔFosB povećava u NAc miševa nakon kroničnog socijalnog poraznog stresa (Vialou i sur., 2010). Iako je ova indukcija opažena u oba osjetljiva miševa (oni koji pokazuju štetne posljedice stresa) kao i na miševe koji su elastični (oni koji izbjegavaju većinu ovih štetnih učinaka), indukcija ΔFosB bila je veća u elastičnoj podgrupi i prikazana je posredovati stanje otpornosti. U ovom smo istraživanju pronašli izrazitu staničnu specifičnost za indukciju ΔFosB u ove dvije fenotipske skupine. D2-GFP miševi su podvrgnuti 10 d društvenog poraznog stresa i podijeljeni u osjetljive i otporne populacije na temelju mjere socijalne interakcije (Slika 6A), koja je u visokoj korelaciji s drugim simptomima ponašanja (Krishnan i sur., 2007). Miševi koji su razvili osjetljivo ponašanje nakon socijalnog poraznog stresa pokazali su značajnu indukciju ΔFosB u D2-MSNs u NAc jezgri, NAc ljusci i dStr u usporedbi s kontrolnim i elastičnim miševima, bez indukcije vidljive u D1-MSNs. U upadljivom kontrastu, elastični miševi su pokazali značajnu indukciju ΔFosB u D1-MSN u svim striatnim regijama u usporedbi sa osjetljivim i kontrolnim miševima, bez indukcije vidljive u D2-MSNs (Slika 6A; dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: skupina × tip stanica F(1,20) = 20.11, p <0.05, Bonferroni post test: D2-MSN / osjetljiv p <0.05, D1-MSN / elastično p <0.05; NAc ljuska: skupina × tip stanice F(1,20) = 27.79, p <0.01, Bonferroni post test: D2-MSN / osjetljiv p <0.001, D1-MSN / elastično p <0.01; dStr: grupa × vrsta ćelije F(1,20) = 19.76, p <0.01, Bonferroni post test: D2-MSN / osjetljiv p <0.05, D1-MSN / elastično p <0.01).

Slika 6.  

Kronični društveni porazni stres i kronični fluoksetin uzrokuju indukciju ΔFosB u različitim podtipovima MSN-a u striatumu. A, D2-GFP koji su osjetljivi na 10 d tijek društvenog poraza stresa pokazuju ΔFosB indukciju u D2-MSNs u svim striatnim ...

Kronično liječenje SSRI antidepresivom, fluoksetin, preokreće ponašanje slično depresiji koje pokazuju miševi osjetljivi nakon kroničnog socijalnog poraznog stresa (Berton i sur., 2006). Štoviše, takav tretman inducira ΔFosB u NAc kod osjetljivih, kao i kod kontrolnih miševa, i pokazali smo da je takva indukcija potrebna za blagotvorne učinke fluoksetina na ponašanje (Vialou i sur., 2010). Tako smo ispitali staničnu specifičnost indukcije ΔFosB nakon kronične primjene fluoksetina. D2-GFP miševi su primili fluoksetin (20 mg / kg, ip) za 14 d, a mozak je sakupljen na dan 15 (Slika 6B). Uočili smo značajnu indukciju ΔFosB u D1-MSN, ali ne i kod D2-MSN, u miševa tretiranih fluoksetinom u usporedbi s kontrolama na vozilima (Slika 6B; dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: tip lijeka × stanica F(1,10) = 14.59, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: lijek × tip stanice: F(1,10) = 26.14, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; dStr: lijek × tip stanice F(1,10) = 8.19, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.001).

In vivo optogenetska manipulacija NAc aferentnih područja mozga uzrokuje različite obrasce indukcije ΔFosB u striatalnim regijama i podtipovima MSN-a

S obzirom da dopaminergični i glutamatergični aferentni ulazi u NAc mogu olakšati traženje nagrade i promijeniti ponašanje slično depresiji (Tsai i sur., 2009; Covington i sur., 2010; Adamantidis et al., 2011; Witten i sur., 2011; Britt i sur., 2012; Lammel i sur., 2012; Stuber et al., 2012; Chaudhury i sur., 2013; Kumar i sur., 2013; Tye et al., 2013), ispitali smo indukciju ΔFosB u striatalnim MSN podtipovima nakon manipuliranja aktivnostima nekoliko ključnih aferentnih područja mozga. Virusno smo izrazili ChR2 u svakoj od nekoliko regija i aktivirali ih plavim svjetlom (473 nm) kako je prethodno opisano (Gradinaru i sur., 2010; Yizhar et al., 2011). Budući da je nedavno istraživanje pokazalo da je fazna stimulacija plavim svjetlom, nakon ekspresije ChR2-a u VTA-u bez stanica, rezultirala istim bihevioralnim fenotipom kao selektivna ChR2 fazna stimulacija VTA dopaminskih neurona (Chaudhury i sur., 2013), izrazili smo ChR2 koristeći AAV-hsyn-ChR2-EYFP u VTA D2-GFP miševi; kontrolnim miševima je injiciran AAV-hsyn-EYFP. VTA sekcije su koimunostanice s tirozin hidroksilazom i GFP da bi se vizualizirala ekspresija ChR2-EYFP (Slika 7C). D2-GFP miševi koji eksprimiraju ChR2-EFYP ili EYFP sami u VTA primili su 5 d od 10 min fazne stimulacije plavog svjetla VTA kao što je prethodno opisano (Koo i sur., 2012; Chaudhury i sur., 2013) (Slika 7A), a mozak je sakupljen 24 h nakon zadnje stimulacije. Nije bilo desenzibilizacije sposobnosti ChR2-a da aktivira VTA dopaminske neurone nakon 5 d stimulacije (Slika 7B). Otkrili smo da ponovljena fazna stimulacija VTA neurona koji eksprimiraju ChR2-EYFP povećava ΔFosB u oba podtipa MSN-a u NAc jezgri, ali samo u D1-MSNs u NAc ljusci (Slika 7C; dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: optogenetski podražaji F(1,16) = 51.97, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.001; (obje MSN podvrste) NAc ljuska: optogenetski podražaj × tip stanice: F(1,16) = 13.82, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01). Nismo primijetili indukciju ΔFosB u dStr nakon fazne stimulacije plavim svjetlom na ChR2-EYFP koji izražava VTA u usporedbi s kontrolama EYFP. Ove rezultate treba tumačiti s oprezom, jer nismo selektivno ciljali VTA dopaminske neurone za optičku stimulaciju, a nedavne studije pokazale su nedopaminergične neurone projekcije u VTA, kao i znatnu heterogenost VTA, što može dovesti do različitih reakcija u ponašanju, ovisno o pucanju parametri i subpopulacije pogođenih neurona (Tsai i sur., 2009; Lammel i sur., 2011, 2012; Witten i sur., 2011; Kim i sur., 2012, 2013; Tan et al., 2012; van Zessen i sur., 2012; Stamatakis i Stuber, 2012; Chaudhury i sur., 2013; Tye et al., 2013).

Slika 7.  

Optogenetska aktivacija regija mozga koje inerviraju NAc uzrokuje različite obrasce indukcije ΔFosB u MSN podtipovima i striatalnim regijama. A, Optogenetska paradigma stimulacije za sve uvjete. Mozgovi su sakupljeni 24 h nakon 5 d optogenetskog ...

Zatim smo koristili AAV-CaMKII-ChR2-mCherry i AAV-CaMKII-mCherry vektore da izrazimo ChR2-mCherry, ili mCherry sam kao kontrolu, u mPFC, amigdala, ili vHippo od D2-GFP miševi (Slika 7D-F). Ekspresija ChR2-a i mCherry-a posredovana CaMKII-ChR2 virusom je prethodno pokazala da se kolokalizira s CaMKII ekspresijom, koja pretežno obilježava glutamatergijske neurone (Gradinaru i sur., 2009; Warden i sur., 2012). Aktivirali smo stanice koje izražavaju ChR2 u tim područjima sa 20 Hz plavim svjetlom za 10 min dnevno za 5 d, a mozgovi su prikupljeni 24 h nakon posljednje stimulacije (Slika 7A). Ovaj uzorak stimulacije izazvao je paljenje UM27-33 Hz, uglavnom zbog promatranog dubleta. Nije bilo očite desenzitizacije ChR2-a s 5 d stimulacije; međutim, primijetili smo blagi porast ispaljivanja iz 1 u 5 d (32 – 33 Hz) stimulacije. Utvrdili smo da je optogenetska aktivacija mPFC neurona rezultirala indukcijom ΔFosB u D1-MSNs u NAc jezgri, dok se indukcija ΔFosB dogodila u oba podtipa MSN u NAc ljusci (Slika 7D; dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: optogenetski stimulus × tip stanice F(1,14) = 10.31, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: optogenetski podražaji F(1,14) = 57.17, p <0.001, test Bonferroni nakon: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). Nije primijećena promjena razine ΔFosB u dStr nakon aktivacije mPFC. Nasuprot tome, optogenetska aktivacija neurona amigdale inducirala je ΔFosB u oba MSN podtipa u jezgri NAc i selektivno u D1-MSN u ljusci NAc, bez promjene u dStr (Slika 7E; dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: optogenetski podražaji F(1,10) = 78.92, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc ljuska: optogenetski podražaj × tip stanice: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, test Bonferroni nakon: p <0.0001). Konačno, optogenetska aktivacija vHippo neurona uzrokovala je značajnu indukciju ΔFosB samo u D1-MSN u jezgri NAc i NAc ljusci, bez ponovljene promjene u dStr (Slika 7F; dvosmjerna ANOVA, NAc jezgra: optogenetski stimulus × tip stanice F(1,10) = 18.30, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01; NAc ljuska: optogenetski podražaj × tip stanice: F(1,10) = 22.69, p <0.05, test Bonferroni nakon: p <0.01).

Rasprava

Ova studija ispituje indukciju ΔFosB u D1-MSN i D2-MSN u striatalnim regijama nakon nekoliko kroničnih stimulusa (Tablica 1). Najprije utvrdimo izvedivost korištenja D1-GFP i D2-GFP reporterske linije za pokazivanje selektivne indukcije ΔFosB u D1-MSN-ovima nakon kroničnog kokaina i kod D2-MSN nakon kroničnog haloperidola. Nalazi kokaina u skladu su s prethodnim studijama (Moratalla i sur., 1996; Lee i sur., 2006) i utvrđenu ulogu ΔFosB u D1-MSN-ima u promicanju nagrade za kokainKelz i sur., 1999; Colby i sur., 2003; Grueter i dr., 2013). Prethodno smo pokazali da kokain koji istražuje i sam primjenjuje inducira ΔFosB u ekvivalentnoj mjeri u NAc (Winstanley i sur., 2007; Perrotti i sur., 2008), i ovdje je važno pokazati da oba načina unosa kokaina induciraju ΔFosB selektivno u D1-MSNs u sva tri striatalna područja. Naši rezultati su u skladu s prethodnim istraživanjima koja pokazuju da akutni kokain potiče druge rane gene i fosforilaciju nekoliko unutarstaničnih signalnih proteina samo u D1-MSNs (Bateup i sur., 2008; Bertran-Gonzalez i sur., 2008). Isto tako, suprotan obrazac indukcije ΔFosB nakon kroničnog haloperidola je u skladu s blokadom ove indukcije agonistima receptora sličnih D2-u (Atkins et al., 1999), te s akutnom haloperidolovom selektivnom indukcijom neposrednih ranih gena i fosforilacijom nekoliko signalnih proteina u D2-MSN (Bateup i sur., 2008; Bertran-Gonzalez i sur., 2008).

Tablica 1.  

ΔFosB indukcija u striatnih MSN podtipovima nakon kroničnih farmakoloških, emocionalnih i optogenetskih podražajaa

Kao i kod kokaina, otkrili smo da kronična izloženost dvaju drugih lijekova, EtOH i Δ (9) -THC, selektivno inducira ΔFosB u D1-MSN u svim striatnim regijama. Prethodno smo pokazali da EtOH inducira ΔFosB u NAc jezgri, NAc ljusci i dStr, ali da Δ (9) -THC značajno povećava ΔFosB u NAc jezgri, s trendom u drugim regijama (Perrotti i sur., 2008). Mi smo ovdje slično promatrali najveću Δ (9) -THC indukciju ΔFosB u NAc jezgri u D1-MSNs; Naša sposobnost da pokažemo indukciju u drugim striatnim regijama vjerojatno je posljedica upotrebe specifične analize stanica. Zanimljivo je da kronična samoprimjena morfija i heroina, za razliku od drugih droga, izaziva ΔFosB u oba podtipa MSN-a u usporedivoj mjeri u svim striatnim regijama. Nedavna studija pokazala je da akutni morfij inducira c-Fos u D1-MSN, dok nalokson-precipitirano povlačenje nakon kroničnog morfija izaziva c-Fos u D2-MSNs (Enoksson i sur., 2012). Iako nismo primijetili znakove povlačenja opijata u našem istraživanju, zamislivo je da je suptilnije povlačenje koje se javlja kod primjene morfija ili heroina u promatranom trenutku odgovorno za indukciju ΔFosB u D2-MSN-ima. Ranije smo pokazali da ΔFosB u D1-MSN-ovima, ali ne i D2-MSN, povećava zadovoljavajuće odgovore na morfij (Zachariou i sur., 2006). Sada bi bilo zanimljivo testirati mogućnost da indukcija ΔFosB u D2-MSN-ovima doprinosi averzivnim učincima povlačenja opijata. Isto tako, treba istražiti potencijalni doprinos povlačenja lijeka i žudnje za indukcijom ΔFosB koji se vidi kod svih lijekova.

Prethodne studije pokazuju da obogaćivanje okoliša tijekom razvoja inducira ΔFosB u NAc i dStr (Solinas i sur., 2009; Lehmann i Herkenham, 2011). Naši podaci pokazuju da se ta akumulacija podjednako pojavljuje u D1-MSN i D2-MSN-ovima u svim striatnim regijama. Paradigma obogaćivanja prethodno je pokazala da otupljuje i lokomotorni odgovor na kokain (Solinas i sur., 2009); međutim, ovaj fenotip ponašanja vjerojatno nije posljedica akumulacije ΔFosB jer sama indukcija ΔFosB u D1-MSN-ovima poboljšava reakcije na kokain, dok takva indukcija u D2-MSN-ima nema vidljiv učinak (Kelz i sur., 1999; Colby i sur., 2003; Grueter i dr., 2013). Pokazalo se da je potrošnja kronične saharoze povećala ΔFosB u NAc, a pretjerana ekspresija ΔFosB, bilo u samim D1-MSN ili u oba podtipa, u NAc, povećava potrošnju saharoze (Olausson i sur., 2006; Wallace i sur., 2008). Ovdje smo uočili usporedbu ΔFosB indukcije u oba podtipa MSN u NAc i dStr nakon konzumiranja saharoze. Konačno, ranije smo pokazali da indukcija ΔFosB u NAc posreduje određene adaptivne odgovore na ograničenje kalorija kroz pojačanu motivaciju za hranu visoke masnoće i smanjenu potrošnju energije (Vialou i sur., 2011). Sveukupno, ovi rezultati pokazuju da se akumulacija ΔFosB u NAc i dStr javlja u oba D1-MSN i D2-MSN-u kao odgovor na nekoliko prirodnih nagrada. Ovo otkriće je iznenađujuće s obzirom na zapažanje da se ΔFosB akumulira u D1-MSN-ovima samo nakon još jedne prirodne nagrade, kroničnog pokretanja kotača, i da prekomjerna ekspresija ΔFosB u D1-MSN-ovima poboljšava rad kotača dok je ΔFosB prekomjerna ekspresija u D2-MSN-u smanjena (Werme i sur., 2002). Međutim, pokretanje kotača može aktivirati različite motorne putove, koji su odgovorni za različit uzorak indukcije ΔFosB. U svakom slučaju, rezultati s drugim prirodnim nagradama upućuju na to da oni različito kontroliraju ΔFosB u striatumu u usporedbi s jačim nagradama za lijekove, kao što su kokain, EtOH i Δ (9) -THC. Indukcija ΔFosB u oba podtipa MSN-a u tim prirodnim uvjetima nagrađivanja u skladu je s nedavnom studijom koja pokazuje da inicijacija akcije za nagradu za hranu aktivira oba podtipa MSN-a (Cui i sur., 2013).

Kronični društveni poraz uzrokuje ΔFosB u NAc ljusci osjetljivih i elastičnih miševa, ali u NAc jezgri samo u elastičnim miševima (Vialou i sur., 2010). Nadalje, prekomjerna ekspresija ΔFosB u D1-MSN-ovima promiče otpornost nakon hroničnog socijalnog stresa. Kronično liječenje fluoksetinom također uzrokuje akumulaciju ΔFosB u NAc miševa koji su bili naivni kod stresa i kod osjetljivih miševa nakon kroničnog socijalnog poraznog stresa, a pokazano je da ΔFosB prekomjerna ekspresija posreduje u ponašanju poput antidepresiva u potonjim uvjetima (Vialou i sur., 2010). Konačno, prethodna studija pokazala je indukciju ΔFosB u oba podtipa MSN-a nakon kroničnog restrikcijskog stresa (Perrotti i sur., 2004). Rezultati ove studije, gdje smo pokazali indukciju ΔFosB selektivno u D1-MSN u miševima otpornim i fluoksetin tretiranim, ali selektivno u D2-MSN u osjetljivih miševa, daju važan uvid u ove ranije nalaze i podupiru hipotezu da ΔFosB u D1- MSNs posreduje otpornost i antidepresivno djelovanje, dok ΔFosB u D2-MSN može posredovati u osjetljivosti. Sada je potreban daljnji rad kako bi se testirala ova hipoteza.

Nedavni rad korištenjem optogenetike pokazuje snažnu ulogu dopaminergičkih i glutamatergijskih aferenta na NAc u moduliranju odgovora na nagrađivanje i stres (vidi rezultate). Koristimo ove optogenetičke alate za ispitivanje ΔFosB indukcije u D1-MSN i D2-MSN-ovima nakon ponovnog aktiviranja NAc aferentnih regija. Otkrili smo da fazna stimulacija VTA neurona, ili aktiviranje uglavnom glutamatergijskih neurona u amigdali, inducira ΔFosB u D1-MSNs u NAc ljusci iu oba podtipa MSN u NAc jezgri. Nasuprot tome, aktivacija mPFC neurona rezultira suprotnim obrascem ΔFosB indukcije, s povećanim razinama u D1-MSNs u NAc jezgri, ali indukcijom u oba MSN podtipa u NAc ljusci. Konačno, optogenetička aktivacija vHippo neurona uzrokuje akumulaciju ΔFosB samo u D1-MSNs u NAc jezgri i ljusci. Rezultati vHippo konzistentni su s nedavnim istraživanjima koja pokazuju da su ulazni podaci hipokampusa mnogo slabiji na D2-MSN-ove u usporedbi s D1-MSN-ovima (MacAskill i sur., 2012) i da ti ulazi kontroliraju lokomociju uzrokovanu kokainom (Britt i sur., 2012). Štoviše, naša demonstracija ΔFosB indukcije pretežno u D1-MSNs sa svim ulazima je u skladu s prethodnim istraživanjima koja pokazuju da ΔFosB u D1-MSN-ovima poboljšava nagrađivanje odgovora na lijekove kao i studije koje pokazuju da je optogenetska stimulacija VTA dopaminskih neurona ili mPFC, amigdala ili vHippo terminali u NAc-u promoviraju nagradu (Kelz i sur., 1999; Zachariou i sur., 2006; Tsai i sur., 2009; Witten i sur., 2011; Britt i sur., 2012; Grueter i dr., 2013).

Konačno, postoji vjerojatnost da postoje selektivni neuronski sklopovi unutar ta dva MSN podtipa koji se diferencijalno aktiviraju pozitivnim ili negativnim stimulusima. To bi moglo objasniti naše promatranje indukcije ΔFosB u D2-MSN u određenim uvjetima nagrađivanja (opijati i prirodne nagrade) kao i averzivni (socijalni poraz) uvjeti. Striatum je vrlo heterogen izvan MSN podtipova, uključujući komadiće flastera i matriksa u dorzalnom i ventralnom striatumu (Gerfen, 1992; Watabe-Uchida i sur., 2012). Nadalje, prethodne studije pokazuju aktivaciju vrlo malog postotka striatnih neuronskih sklopova psihostimulansima, uz pojačanu indukciju FosB gen u ovim aktiviranim neuronima (Guez-Barber i sur., 2011; Liu i sur., 2013), iako se ne zna jesu li ti aktivirani neuroni D1-MSN ili D2-MSN. Funkcija ΔFosB u jezgri nasuprot ljuske u posredovanju nagrađivanja i odbijanja ponašanja je također nepoznata. Prekomjerna ekspresija ΔFosB u D1-MSN-ovima povećala je tihe sinapse u jezgri i ljusci, ali je izraz u D2-MSN-u smanjio tihi sinapsi samo u ljusci (Grueter i dr., 2013). Nadalje, indukcija ΔFosB u jezgri u odnosu na ljusku je vjerojatno posredovana različitim mehanizmima, jer smo otkrili da CaMKIIα stabilizira ΔFosB u ljusci, ali ne i jezgru koja dovodi do veće akumulacije ΔFosB u ljusci (Robison i sur., 2013). Buduće studije koje selektivno ciljaju podtipove MSN-a u jezgri u odnosu na ljusku, aktivirane neuronske cjeline ili odjeljke u odnosu na matrice pomoći će u definiranju uloge ΔFosB-a u ponašanju unutar tih heterogenih regija.

Sveukupno, ovi uzorci indukcije ΔFosB-a u NAc-u posredovani krugom, koji su selektivni za stanični tip, ukazuju na to da nagrađivanje i stresni stimulusi različito uključuju različite NAc-ove aferentne veze za kodiranje specifičnih značajki tih stimulusa. Naši rezultati ne samo da pružaju sveobuhvatan uvid u indukciju ΔFosB u striatnim MSN podtipovima putem kroničnih podražaja, već također ilustriraju korisnost u korištenju ΔFosB kao molekularnog markera za razumijevanje trajnih učinaka specifičnih neuronskih krugova u utjecaju na NAc funkciju.

fusnote

Autori ne prijavljuju konkurentne financijske interese.

Reference

  1. Adamantidis AR, Tsai HC, Boutrel B, Zhang F, Stuber GD, Budygin EA, Touriño C, Bonci A, Deisseroth K, de Lecea L. Optogenetsko ispitivanje dopaminergičke modulacije više faza ponašanja koje traži nagradu. J Neurosci. 2011; 31: 10829-10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  2. Albin RL, Young AB, Penney JB. Funkcionalna anatomija poremećaja bazalnih ganglija. Trendovi Neurosci. 1989; 12: 366-375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  3. Atkins JB, Chlan-Fourney J, Nye HE, Hiroi N, Carlezon WA, Jr, Nestler EJ. Regija-specifična indukcija δFosB ponovljenom primjenom tipičnih naspram atipičnih antipsihotičnih lijekova. Sinapsa. 1999; 33: 118–128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [Cross Ref]
  4. Bateup HS, Svenningsson P, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. Specifična regulacija tipa DARPP-32 fosforilacije pomoću psihostimulansa i antipsihotika. Nat Neurosci. 2008; 11: 932-939. doi: 10.1038 / nn.2153. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  5. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Bitna uloga BDNF-a u mezolimbičkom putu dopamina u socijalnom poraznom stresu. Znanost. 2006; 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  6. Bertran-Gonzalez J, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Hervé D, Valjent E, Girault JA. Suprotni uzorci signalizacijske aktivacije u striatnim neuronima receptora dopamina D1 i D2 receptora kao odgovor na kokain i haloperidol. J Neurosci. 2008; 28: 5671-5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [Cross Ref]
  7. Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Sinaptički i bihevioralni profil višestrukih glutamatergijskih ulaza u nucleus accumbens. Neuron. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  8. Chan CS, Peterson JD, Gertler TS, Glajch KE, Quintana RE, Cui Q, Sebel LE, Plotkin JK, Heiman M, Heintz N, Greengard P, Surmeier DJ. Specifična regulacija strija fenotipa striatije u Drd2-eGFP BAC transgenskim miševima. J Neurosci. 2012; 32: 9124-9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  9. Chaudhury D, Walsh JJ, Friedman AK, Juarez B, Ku SM, Koo JW, Ferguson D, Tsai HC, Pomeranz L, Christoffel DJ, Nectow AR, Ekstrand M, Domingos A, Mazei-Robison MS, Mouzon E, Lobo MK, Neve RL, Friedman JM, Russo SJ, Deisseroth K, i sur. Brza regulacija ponašanja povezanih s depresijom kontrolom neurona dopamina na srednjem mozgu. Priroda. 2013; 493: 532-536. doi: 10.1038 / nature11713. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB povećava poticaj za kokain. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Antidepresivni učinak optogenetičke stimulacije medijalnog prefrontalnog korteksa. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  12. Cui G, lipanj SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Costa RM. Istodobna aktivacija striatalnih izravnih i neizravnih putova tijekom inicijacije djelovanja. Priroda. 2013; 494: 238-242. doi: 10.1038 / nature11846. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  13. Enoksson T, Bertran-Gonzalez J, Christie MJ. Nucleus accumbens D2- i D1-receptorski ekspresirajući mediji kičmeni neuroni se selektivno aktiviraju morfinovim izvlačenjem i akutnim morfijem. Neurofarmakologija. 2012; 62: 2463-2471. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [Cross Ref]
  14. Gerfen CR. Neostriatalni mozaik: višestruka razina organizacije u bazalnim ganglijima. Annu Rev Neurosci. 1992; 15: 285-320. doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [Cross Ref]
  15. Gittis AH, Kreitzer AC. Striatalna mikrocirkriziranja i poremećaji kretanja. Trendovi Neurosci. 2012; 35: 557-564. doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  16. Gong S, Zheng C, Doughty ML, Losos K, Didkovsky N, Schambra UB, Nowak NJ, Joyner A, Leblanc G, Hatten ME, Heintz N. Atlas ekspresije gena središnjeg živčanog sustava baziran na bakterijskim umjetnim kromosomima. Priroda. 2003; 425: 917-925. doi: 10.1038 / nature02033. [PubMed] [Cross Ref]
  17. Gradinaru V, Mogri M, Thompson KR, Henderson JM, Deisseroth K. Optička dekonstrukcija parkinsonskih neuronskih sklopova. Znanost. 2009; 324: 354-359. doi: 10.1126 / science.1167093. [PubMed] [Cross Ref]
  18. Gradinaru V, Zhang F, Ramakrishnan C, Mattis J, Prakash R, Diester I, Goshen I, Thompson KR, Deisseroth K. Molekularni i stanični pristupi za diverzifikaciju i proširenje optogenetike. Stanica. 2010; 141: 154-165. doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [Cross Ref]
  19. Graybiel AM. Bazalni gangliji. Curr Biol. 2000; 10: R509-R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [Cross Ref]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Bass CE, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Obogaćivanje okoliša proizvodi fenotip ponašanja posredovan vezanjem (CREB) aktivnosti niskih cikličkih adenozin monofosfata (CREB) u nucleus accumbens. Biol Psychiatry. 2010; 67: 28-35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB diferencijalno modulira nukleus accumbens izravnu i neizravnu funkciju puta. Proc Natl Acad Sci US A. 2013, 110: 1923-1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Zlatni SA, Schrama R, Koya E, Stern AL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Hope BT. FACS identificira jedinstvenu kokainom induciranu regulaciju gena u selektivno aktiviranih strijalnih neurona. J Neurosci. 2011; 31: 4251-4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  23. Heiman M, Schaefer A, Gong S, Peterson JD, Dan M, Ramsey KE, Suárez-Farinas M, Schwarz C, Stephan DA, Surmeier DJ, Greengard P, Heintz N. Pristup translacijskog profiliranja za molekularnu karakterizaciju tipova stanica CNS , Stanica. 2008; 135: 738-748. doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  24. Hiroi N, Graybiel AM. Atipični i tipični neuroleptički tretmani induciraju različite programe ekspresije transkripcijskog faktora u striatumu. J Comp Neurol. 1996; 374: 70-83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [Cross Ref]
  25. Hiroi N, Brown JR, Haile CN, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. Mutirani miševi FosB: Gubitak kronične indukcije kokaina proteina povezanih s Fosom i povećana osjetljivost na psihomotorne i korisne učinke kokaina. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94: 10397–10402. doi: 10.1073 / str.94.19.10397. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  26. Nada BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcija dugotrajnog kompleksa AP-1 koji se sastoji od izmijenjenih bjelančevina u mozgu kroničnim kokainom i drugim kroničnim tretmanima. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [Cross Ref]
  27. Kalivas PW, Churchill L, Klitenick MA. Projekcija GABA i enkefalina iz nucleus accumbens i ventralnog paliduma u ventralno tegmentalno područje. Neuroscience. 1993; 57: 1047-1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [Cross Ref]
  28. Kaplan GB, Leite-Morris KA, Fan W, Mladi AJ, Guy MD. Senzibilizacija opijatima inducira ekspresiju FosB / ΔFosB u prefrontalnim kortikalnim, strijatalnim i amigdalnim područjima mozga. PLoS One. 2011; 6: e23574. doi: 10.1371 / journal.pone.0023574. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  29. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr., Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Ekspresija transkripcijskog faktora ΔFosB u mozgu kontrolira osjetljivost na kokain. Priroda. 1999; 401: 272-276. doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [Cross Ref]
  30. Kim KM, Baratta MV, Yang A, Lee D, Boyden ES, Fiorillo CD. Optogenetska mimikrija prolazne aktivacije dopaminskih neurona prirodnom nagradom dovoljna je za operantno pojačanje. PLoS One. 2012; 7: e33612. doi: 10.1371 / journal.pone.0033612. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  31. Kim TI, McCall JG, Jung YH, Huang X, Siuda ER, Li Y, Song J, Song YM, Pao HA, Kim RH, Lu C, Lee SD, pjesma IS, Shin G, Al-Hasani R, Kim S, Tan MP, Huang Y, Omenetto FG, Rogers JA, i sur. Injektabilna, celularna optoelektronika s aplikacijama za bežičnu optogenetiku. Znanost. 2013; 340: 211-216. doi: 10.1126 / science.1232437. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Sun H, Scobie KN, Damez-Werno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, Dietz DM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Han MH, Nestler EJ. BDNF je negativni modulator djelovanja morfija. Znanost. 2012; 338: 124-128. doi: 10.1126 / science.1222265. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  33. Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, tanina P, zelena TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A Eisch AJ, Self DW, Lee FS, i sur. Molekularne prilagodbe na kojima se temelji osjetljivost i otpornost na društveni poraz u regijama za nagrađivanje mozga. Stanica. 2007; 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  34. Kumar S, Black SJ, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington HE, 3rd, Dzirasa K. Kortikalna kontrola afektivnih mreža. J Neurosci. 2013; 33: 1116-1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, RC Malenka. Projekcijsko-specifična modulacija dopaminskih neuronskih sinapsa averzivnim i nagrađivanim podražajima. Neuron. 2011; 70: 855-862. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran C, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, RC Malenka. Kontrola nagrađivanja i averzije u ventralnom tegmentalnom području. Priroda. 2012; 491: 212-217. doi: 10.1038 / nature11527. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  37. Larson EB, Akkentli F, Edwards S, Graham DL, Simmons DL, Alibhai IN, Nestler EJ, Self DW. Striatalna regulacija ΔFosB, FosB i cFos tijekom kokainske samouprave i povlačenja. J Neurochem. 2010; 115: 112-122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  38. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Stvaranje dendritičkih kralježnica uzrokovanih kokainom u D1 i D2 dopaminskim receptorima koji sadrže srednje štitne neurone u nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2006, 103: 3399-3404. doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Obogaćivanje okoliša daje otpornost na stres socijalnom porazu putem infranimbičkog neuroanatomskog puta ovisnog o korteksu. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  40. Liu QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Hope BT. Detekcija molekularnih alteracija u Fos-eksprimirajućim neuronima metamfetamina iz jednog dozalnog striatuma štakora primjenom fluorescentno aktiviranog sortiranja stanica (FACS) J Neurochem. 2013 doi: 10.1111 / jnc.12381. doi: 10.1111 / jnc.12381. Unaprijed online objavljivanje. Preuzeto srpnja 29, 2013. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  41. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D, Friedman AK, Sun H, Damez-Werno D, Dietz DM, Zaman S, Koo JW, Kennedy PJ, Mouzon E, Mogri M, Neve RL, Deisseroth K, Han MH, Nestler EJ. Specifični gubitak BDNF signalizacije ovisi o optogenetskoj kontroli nagrade za kokain. Znanost. 2010; 330: 385-390. doi: 10.1126 / science.1188472. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  42. Lobo MK, Nestler EJ. Usklađenost s striatijom djeluje u ovisnosti o drogama: različite uloge izravnih i neizravnih puteva srednjih kičmenih neurona. Prednji Neuroanat. 2011; 5: 41. doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Gray M, Geschwind DH, Yang XW. FACS-profiliranje podtipova neurona strijatalne projekcije u mozgovima mladih i odraslih miša. Nat Neurosci. 2006; 9: 443-452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [Cross Ref]
  44. MacAskill AF, Mali JP, Cassel JM, Carter AG. Podstanična povezanost je temelj signaliziranja putanje u nukleusu accumbens. Nat Neurosci. 2012; 15: 1624-1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  45. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schafer Y, Nestler EJ. Bitna uloga histonske metiltransferaze G9a u plastičnosti izazvanoj kokainom. Znanost. 2010; 327: 213-216. doi: 10.1126 / science.1179438. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  46. Mazei-Robison MS, Koo JW, Friedman AK, Lansink CS, Robison AJ, Vinish M, Krishnan V, Kim S, MA Siuta, Galli A, Niswender KD, Appasani R, Horvath MC, Neve RL, Worley PF, Snyder SH, Hurd YL, Cheer JF, Han MH, Russo SJ, et al. Uloga za signalizaciju mTOR-a i neuronsku aktivnost u morfij-induciranim adaptacijama u neuronima neurona dopamina. Neuron. 2011; 72: 977-990. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  47. McClung CA, Nestler EJ. Regulacija ekspresije gena i nagrade kokaina od strane CREB i ΔFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  48. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Senzibilizacija inducirana metamfetaminom diferencijalno mijenja pCREB i ΔFosB kroz limbički krug mozga sisavca. Mol Pharmacol. 2006; 70: 2064-2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [Cross Ref]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Graybiel AM. Receptori dopamina D1 klase utječu na trajnu ekspresiju fos-srodnih proteina u striatumu izazvanoj kokainom. Neiirorepoii. 1996; 8: 1-5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [Cross Ref]
  50. Muller DL, Unterwald EM. D1 dopaminski receptori moduliraju indukciju δFosB u striatumu štakora nakon intermitentne primjene morfina. J Pharmacol Exp Ther. 2005; 314: 148-154. doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [Cross Ref]
  51. Narayan S, Kass KE, Thomas EA. Tretman kroničnim haloperidolom dovodi do smanjenja ekspresije gena povezanih s mijelinom / oligodendrocitom u mišjem mozgu. J Neurosci Res. 2007; 85: 757-765. doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [Cross Ref]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta W, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua MA, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. Funkcionalna interakcija između opioidnih i kanabinoidnih receptora u samouprave lijekovima. J Neurosci. 2001; 21: 5344-5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Pascoli V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Usporedba ponašanja ovisnog o striatiji kod divljeg tipa i hemizigotnog Drd1a i Drd2 BAC transgenskih miševa. J Neurosci. 2012; 32: 9119-9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  54. Nicola SM. Nukleus accumbens kao dio kruga odabira djelovanja bazalnih ganglija. Psihofarmakologija. 2007; 191: 521-550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [Cross Ref]
  55. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. ΔFosB u nucleus accumbens regulira instrumentalno ponašanje i motivaciju pojačanu hranom. J Neurosci. 2006; 26: 9196-9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [Cross Ref]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukcija δFosB u moždanim strukturama povezanim s nagrađivanjem nakon kroničnog stresa. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Različiti obrasci indukcije DeltaFosB u mozgu pomoću droga zlostavljanja. Sinapsa. 2008; 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  58. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. ΔFosB posreduje epigenetsku desenzibilizaciju gena c-fos nakon kronične izloženosti amfetaminu. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  59. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Čakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Genomska analiza regulacije kromatina kokainom otkriva novu ulogu sirtuina. Neuron. 2009; 62: 335-348. doi: 10.1016 / j.neuron.2009.03.026. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  60. Robison AJ, Nestler EJ. Transkripcijski i epigenetski mehanizmi ovisnosti. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 623-637. doi: 10.1038 / nrn3111. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Thomas M, Nestler EJ. Bihevioralni i strukturni odgovori na kronični kokain zahtijevaju prednju petlju koja uključuje ΔFosB i protein kinazu zavisnu od kalcija / kalmodulina II u shellusu nucleus accumbens. J Neurosci. 2013; 33: 4295-4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  62. Smith RJ, Lobo MK, Spencer S, Kalivas PW. Prilagodbe izazvane kokainom u D1 i D2 accumbens projekcijskim neuronima (dihotomija nije nužno sinonim za izravne i neizravne puteve) Curr Opin Neurobiol. 2013; 23: 546-552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. Obogaćivanje okoliša u ranim fazama života smanjuje bihevioralne, neurokemijske i molekularne učinke kokaina. Neuropsvchopharmacologv. 2009; 34: 1102-1111. doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [Cross Ref]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovelsø N, van Zessen R, Stuber GD. Konstrukcija implantirajućih optičkih vlakana za dugoročnu optogenetsku manipulaciju živčanih krugova. Nat Protoc. 2012; 7: 12-23. doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [Cross Ref]
  65. Stamatakis AM, Stuber GD. Aktivacija ulaza lateralne habenule u trbušni središnji mozak potiče izbjegavanje ponašanja. Nat Neurosci. 2012; 24: 1105-1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  66. Stuber GD, Britt JP, Bonci A. Optogenetska modulacija živčanih krugova koja je temelj za traženje nagrade. Biol Psychiatry. 2012; 71: 1061-1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  67. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, Deisseroth K, Tye KM, Lüscher C. GABA neuroni uvjetovane averzije mjesta VTA. Neuron. 2012; 73: 1173-1183. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [Cross Ref]
  68. Teegarden SL, Bale TL. Smanjenje prehrambenih preferencija dovodi do povećane emocionalnosti i rizika za povratak prehrani. Biol Psychiatry. 2007; 61: 1021-1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [Cross Ref]
  69. Tsai HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Fazno paljenje u dopaminergičkim neuronima dostatno je za uvjetovanje ponašanja. Znanost. 2009; 324: 1080-1084. doi: 10.1126 / science.1168878. [PubMed] [Cross Ref]
  70. Tye KM, Mirzabekov JJ, upravitelj MR, Ferenczi EA, Tsai HC, Finkelstein J, Kim SY, Adhikari A, Thompson KR, Andalman AS, Gunaydin LA, Witten IB, Deisserot K. Dopamin neuroni moduliraju neuronsko kodiranje i izražavanje vezanih uz depresiju ponašanje. Priroda. 2013; 493: 537-541. doi: 10.1038 / nature11740. [PubMed] [Cross Ref]
  71. van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Aktivacija VTA GABA neurona ometa potrošnju nagrade. Neuron. 2012; 73: 1184-1194. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, et al. ΔFosB u krugovima nagrađivanja mozga posreduje otpornost na stres i antidepresivne odgovore. Nat Neurosci. 2010; 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgoub M, Yu HG, Rush AJ, Pranav H, Jung S, Yangisawa M, Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. Uloga za ΔFosB u metaboličkim promjenama uzrokovanim ograničenjem kalorija , Biol Psychiatry. 2011; 70: 204-207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  74. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iñiguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños-Guzmán CA. Utjecaj DeltaFosB-a u nucleus accumbens na ponašanje koje se odnosi na prirodno nagrađivanje. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  75. Warden MR, Selimbeyoglu A, Mirzabekov JJ, Lo M, Thompson KR, Kim SY, Adhikari A, Tye KM, Frank LM, Deisseroth K. Neuronalna projekcija prefrontalnog korteksa-moždanog debla koja kontrolira odgovor na izazov ponašanja. Priroda. 2012; 492: 428-432. doi: 10.1038 / nature11617. [PubMed] [Cross Ref]
  76. Watabe-Uchida M, Zhu L, Ogawa SK, Vamanrao A, Uchida N. Mapiranje izravnih ulaza u neurone dopamina na srednjem mozgu. Neuron. 2012; 74: 858-873. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [Cross Ref]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB regulira rad kotača. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukcija ΔFosB u orbitofrontalnom korteksu posreduje tolerenciji kokain-inducirane kognitivne disfunkcije. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  79. Witten IB, Steinberg EE, Lee SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho SL, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. \ t tehnike, te optogenetska primjena na pojačanje dopamina. Neuron. 2011; 72: 721-733. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  80. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth K. Optogenetika u neuralnim sustavima. Neuron. 2011; 71: 9-34. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [Cross Ref]
  81. Yoneyama N, Crabbe JC, Ford MM, Murillo A, Finn DA. Dobrovoljna potrošnja etanola u sojevima 22 inbred mišjih sojeva. Alkohol. 2008; 42: 149-160. doi: 10.1016 / j.alcohol.2007.12.006. [PMC slobodan članak] [PubMed] [Cross Ref]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Bitna uloga za DeltaFosB u nucleus accumbens u djelovanju morfija. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [Cross Ref]