Funkcionalna uloga N-terminalne domene ΔFosB u odgovoru na stres i droge (2014)

Neuroscience. 2014 listopad 10. pii: S0306-4522(14)00856-2. doi: 10.1016/j.neuroscience.2014.10.002.

Ohnishi YN1, Ohnishi YH1, Vialou V2, Mouzon E2, LaPlant Q2, Nishi A3, Nestler EJ4.

Sažetak

Prethodni rad podrazumijevao je faktor transkripcije, ΔFosB, djelujući u jezgri jezgre, u posredovanju pozitivnih učinaka zlouporabe droga poput kokaina, kao i u posredovanju otpornosti na kronični socijalni stres. Međutim, transgeni i virusni modeli prenošenja gena koji se koriste za uspostavljanje tih fenotipa ΔFosB, osim ΔFosB, izražavaju i alternativni proizvod za prijevod ΔFosB mRNA, nazvan Δ2ΔFosB, kojem nedostaje N-terminalni 78 aa prisutan u ΔFosB. Da bismo proučili mogući doprinos Δ2ΔFosB ovim fenotipovima lijekova i stresa, pripremili smo virusni vektor koji prekomjerno izražava tačkasti mutantni oblik ΔFosB mRNA koji ne može biti podvrgnut alternativnom prijevodu, kao i vektor koji prekomjerno izražava Δ2ΔFosB. Naši rezultati pokazuju da mutirani oblik ΔFosB, kada je prekomjerno izražen u jezgri, povećava nagradu i otpornost kakve primjenjuju naši raniji modeli, a efekti Δ2ΔFosB nisu vidljivi. Prekomjerna ekspresija FosB pune duljine, drugi glavni proizvod FosB gena, također nema učinka. Ovi nalazi potvrđuju jedinstvenu ulogu ΔFosB u jezgri okoline u kontroli reakcija na lijekove zlostavljanja i stresa.

UVOD

ΔFosB je kodiran s FosB gena i dijeli homologiju s drugim faktorima transkripcije u obitelji Fos, koji uključuju c-Fos, FosB, Fra1 i Fra2. Svi proteini obitelji Fos induciraju se brzo i prolazno u određenim regijama mozga nakon akutne primjene mnogih lijekova zlouporabe [vidi ]. Ti se odgovori najistaknutije primjećuju u nukleus acumbens (NAc) i dorzalnom striatumu, koji su važni posrednici nagrađivanja i lokomotornog djelovanja lijekova. Svi ti proteini iz Fos obitelji, međutim, vrlo su nestabilni i vraćaju se na bazalnu razinu unutar sat vremena primjene lijeka. Suprotno tome, ΔFosB, zbog svoje neobične stabilnosti in vitro i in vivo (; Carle i sur., 2006; ), nakuplja se jedinstveno unutar iste regije mozga nakon opetovanog izlaganja lijekovima (; ; ). Novija istraživanja pokazala su da kronično izlaganje određenim oblicima stresa također inducira nakupljanje ΔFosB u NAc i da se takva indukcija javlja preferirano kod životinja koje su relativno otporne na štetne učinke stresa (tj. Otporne životinje) (; , ).

Dokazali smo da prekomjerna ekspresija ΔFosB u NAc, bilo u inducibilnim bitransgenskim miševima ili lokalnim prijenosom gena posredovanih virusima, povećava osjetljivost životinje na korisne učinke kokaina i drugih droga koje aktiviraju lokomotorno aktiviranje (; ; ; ; Robison i dr., 2013). Takva indukcija također povećava potrošnju i motivaciju za prirodne nagrade (; ; ; ; ; Pitchers i sur., 2009; ), povećava nagradu za stimulaciju mozga u intrakranijalnim paradigmama samo-stimulacije () i čini životinje otpornijima na nekoliko oblika kroničnog stresa (, ). Isto tako, miševi kojima konstitutivno nedostaje ekspresija FosB pune duljine, ali pokazuju pojačanu ekspresiju ΔFosB, pokazuju smanjenu osjetljivost na stres (). Zajedno, ovi nalazi podržavaju stajalište da ΔFosB, djelujući u NAc-u, pojačava životnu nagradu, raspoloženje i motivaciju.

Međutim, glavni nagovještaj ovih studija jest još jedan proizvod ove knjige FosB gen, nazvan Δ2ΔFosB, također se izražava u svim tim genetskim mutiranim miševima i virusnim vektorskim sustavima, ostavljajući otvoren mogući doprinos Δ2ΔFosB u opaženim fenotipovima ponašanja. Δ2ΔFosB prevodi se s alternativnog startnog kodona smještenog unutar ΔFosB mRNA transkript (). Ovaj alternativni prijevod dovodi do stvaranja Δ2ΔFosB, kojem nedostaje 78 N-terminal aa ΔFosB. U ovom istraživanju ispitali smo ulogu Δ2ΔFosB u modelima zloupotrebe droga i stresa prekomjernim pritiskom na njega, ili ΔFosB ili FosB, s AAV (vezanim za adeno-pridruženi virus) vektorima; koristili smo mutirani oblik ΔFosB mRNA koja ne može proći ovaj alternativni mehanizam prevođenja. Naši rezultati potvrđuju da su akcije nagrađivanja i otpornosti na koje smo vidjeli u ranijim studijama doista posredovani putem ΔFosB, a ne s dva druga protenprodukta FosB gen, FosB u punoj duljini ili Δ2ΔFosB.

METODE

Životinje

Prije eksperimentiranja, muški miševi C9BL / 11J stari 57 u tjednu 6 (laboratorija Jackson, Bar Harbor, ME, SAD) bili su smješteni u kući po pet po kavezu u sobi u koloniji postavljenoj na konstantnu temperaturu (23 ° C) na 12 hr ciklus svijetlo / tamno svjetlo (svijetli u 7 AM) s pristupom ad libitum hrani i vodi. Neki eksperimenti koristili su bitransgene miševe kod kojih je prekomjerna ekspresija ΔFosB pod nadzorom sustava regulacije gena tetraciklina, kako je opisano (). Miševi su korišteni na doksiciklinu (za održavanje isključene ekspresije gena) ili isključenog doksiciklina što omogućava ΔFosB ekspresiju. Sve protokole odobrio je Institucionalni odbor za njegu i upotrebu životinja (IACUC) na brdu Sinaj.

AAV vektori

Koristili smo AAV2 serotip za pakiranje AAV vektora koji eksprimiraju FosB, ΔFosB ili Δ2ΔFosB ispod promotora ljudskog neposrednog ranog citomegalovirusa (CMV) s fluorescentnim proteinom Venere kodiranim nakon intervenirajućeg IRES2 (unutarnjeg mjesta ponovnog ulaska u ribosome 2). Konstrukt AAV-ΔFosB izrazio je mutirani oblik ΔFosB mRNA, gdje je kodon koji predstavlja Met79 mutiran u Leu da bi izbrisao alternativno početno mjesto prevođenja koje stvara Δ2ΔFosB.

Prenošenje gena posredovano virusima

Miševi su smješteni u malim životinjskim stereotaksičnim instrumentima pod anestezijom ketamin (100 mg / kg) i ksilazin (10 mg / kg), a njihove kranijalne površine bile su izložene. Trideset i tri igle špriceve bile su bilateralno spuštene u NAc da bi infuzirale 0.5 μl AAV vektora pod kutom 10 ° (prednji / stražnji + 1.6; medijalni / bočni + 1.5; dorzalni / ventralni - 4.4 mm). Infuzije su se javljale brzinom 0.1 μl / min. Životinjama koje su primile AAV injekcije ostavljeno je da se oporave najmanje 24 h nakon operacije. Za potvrdu ekspresije, miševi su anestezirani i perfardani intrakardijalno 4% paraformaldehidom / PBS (fiziološkom otopinom fosfatom). Mozak je krio zaštićen sa 30% saharoze, a potom zamrznut i skladišten na -80 ° C do upotrebe. Koronalni presjeci (40 μm) izrezani su na kriostatu i obrađeni za skeniranje konfokalnom mikroskopijom.

Testiranje ponašanja

Miševi su proučavani s nekoliko standardnih testova ponašanja prema objavljenim protokolima kako slijedi:

Kronični (10 dana) socijalni porazni stres izvedeno točno onako kako je opisano (; ). Ukratko, jedan eksperimentalni miš i jedan CD1 agresor smješteni su u trajanju od 5 min u kućni kavez CD1. Zatim su razdvojeni plastičnim razdjelnikom, koji je bio perforiran kako bi omogućio senzorni kontakt za podsjetnik dana. Svakog jutra tokom 10 dana pokusni miš premještao se u kavez drugog agresorskog miša. Neporaženi kontrolni miševi podvrgnuti su sličnom izlaganju, ali s drugim C57BL / 6J miševima. Testovi za društvena interakcija su izvedeni kao što je prethodno opisano (; ). Ukratko, test miš je smješten u novu arenu koja je s jedne strane imala mali kavez. Kretanje (npr. Prijeđena udaljenost, provedeno vrijeme u blizini tog malog kaveza) praćeno je u početku 150 sec kad je mali kavez prazan, nakon čega je uslijedila dodatna 150 sek. S mišem CD1 u tom kavezu. Podaci o kretanju dobiveni su korištenjem EthoVision 5.0 softvera (Noldus).

Koristili smo standardni, nepristrani uvjetovanog mjesta (CPP) postupak (; Robison i dr., 2013). Ukratko, životinje su testirane na 20 min u foto-snopu praćenom trokomornom kutijom sa slobodnim pristupom ekološki različitim bočnim komorama. Miševi su zatim podijeljeni u kontrolne i eksperimentalne skupine s jednakim rezultatima pretesta. Nakon eksperimentalnih manipulacija, miševi su prošli četiri 30 min treninga (naizmjenično uparivanje kokaina i fiziološke otopine). Na dan ispitivanja, miševi su imali 20 min neograničenog pristupa svim komorama, a CPP rezultat izračunao se oduzimanjem vremena provedenog u komori uparenoj s kokainom, umanjene za vrijeme provedeno u komori uparenoj sa fiziološkom otopinom. Kokomin-inducirana lokomotorna aktivnost izmjerena je prekidima foto-zrake u CPP kutiji 30 min nakon svake testne injekcije.

Povišen plus labirint ispitivanja su izvedena korištenjem crnog pleksiglasa opremljenog bijelim površinama na dnu da bi se postigao kontrast (). Miševi su postavljeni u sredinu labirinta i ostavljeno im je da slobodno istražuju lavirint 5 min pod uvjetima crvenog svjetla. Položaj svakog miša tijekom vremena u otvorenom i zatvorenom oružju praćen je opremom za video praćenje (Ethovision) i stropom montiranom na strop.

Općenito, ambulantno lokomotorna aktivnost tijekom noćne faze procijenjen je u kućištu u kavezima uređajem za fotoceliju (Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA) koji je brojao broj ambulantnih prekida foto-zrake tijekom 12 hr razdoblja ().

Western blotting

Uzorci NAc podvrgnuti su se Western blotingu kako je opisano (, ). Smrznute disekcije NAc homogenizirane su u 100 μl pufera koji sadrži koktele inhibitora fosfataze I i II (Sigma, St. Louis, MO, SAD) i inhibitore proteaza (Roche, Basel, Švicarska) pomoću ultrazvučnog procesora (Cole Parmer, Vemon Hills, IL , SAD). Koncentracije proteina određene su korištenjem testa proteina DC (Bio-Rad, Hercules, Kalifornija, SAD) i 10-30 μg proteina naneseni su na 12.5% ili 4% -15% gradijent plyakrilamidni gradijent gela za frakcioniranje elektroforeze (Bio -Rad). Nakon prijenosa proteina u nitrocelulozne filtre, filtri su inkubirani s anti-FosB antitijelom koje prepoznaje sve FosB genskim produktima, zatim s sekundarnim antitijelom i na kraju kvantificirano primjenom Odyssey sustava (Li-Cor) prema protokolima proizvođača.

Statistika

Korišteni su ANOVA i studentski t-testovi, ispravljeni za višestruku usporedbu, sa značajnošću postavljenom na p <0.05.

REZULTATI

Kao što je prikazano u Slika 1Aje FosB gen kodira mRNA za FosB pune duljine i za ΔFosB. ΔFosB mRNA se generira iz alternativnog događaja spajanja unutar Exon 4 od FosB primarni prijepis; to rezultira stvaranjem kodona preuranjenog zaustavljanja i skraćenim ΔFosB proteinom, kojem nedostaje C-terminalni 101 aa prisutan u FosB-u. FosB i ΔFosB mRNA dijeli isti ATG startni kodon smješten prema 3-u Exon 1. Poznato je još od izvornog kloniranja FosB proizvodi koji dvije mRNA također dijele alternativna mjesta početka prevođenja unutar Exon 2, nazvani AT AT1, Δ2 i Δ3 ATG. Prethodni rad pokazao je da se iz Δ generira manji proteinFosB mRNA, ali ne FosB mRNA, putem Δ2 ATG; ovaj protein se naziva Δ2ΔFosB i nedostaje mu 78 aa N-terminalno područje ΔFosB (). Suprotno tome, čini se da su Δ1 i Δ3 ATG tihi, jer ne postoje dokazi za njihovu upotrebu u prijevodu FosB ili ΔFosB transkripti.

Slika 1 

Razina ekspresije FosB genskim proizvodima

Slika 1B ilustrira indukciju FosB genskih proizvoda u NAc nakon tijeka ponovljenog davanja kokaina, s životinjama ispitanim 2 h nakon posljednje doze kokaina. U ovom trenutku, i ΔFosB i FosB proteini pokazuju značajnu indukciju kokaina, bez konzistentne indukcije Δ2ΔFosB. Imajte na umu da je indukcija i ΔFosB i FosB različita od uzorka koji se vidi u 24 h ili više nakon posljednje doze lijeka, kada se inducira samo ΔFosB zbog jedinstvene stabilnosti proteina ΔFosB (; ; ). Međutim, nasuprot nedostatku indukcije Δ2ΔFosB opetovanim davanjem kokaina, bitrangeni mišji sustav koji smo koristili da prekomjerno izražavamo ΔFosB i time proučava njegove posljedice ponašanja (; ; ) dovodi do značajne, iako niže razine, prekomjerne ekspresije Δ2ΔFosB pored ΔFosB (Slika 1C). Slična razina indukcije Δ2ΔFosB uočena je s našim virusnim vektorima koji prekomjerno izražavaju wildtype ΔFosB (npr. vidi Slika 2). Ova zapažanja povećavaju mogućnost da bi neke od navodnih radnji ΔFosB-a o kojima je ranije izvješteno moglo djelomično biti posredovano putem Δ2ΔFosB.

Slika 2

Selektivni izraz FosB genskih proizvoda s AAV vektorima u Neuro2A stanicama

Da bismo razlučili diferencijalne uloge ΔFosB u odnosu na Δ2ΔFosB, stvorili smo AAV vektor koji prekomjerno izražava samo Δ2ΔFosB, kao i novi vektor koji prekomjerno izražava mutirani oblik ΔFosB mRNA (mΔFosB mRNA) koji ne može biti podvrgnut alternativnom prijevodu za stvaranje Δ2ΔFosB. Oba vektora također izražavaju Veneru kao marker izražavanja. Usporedili smo učinke ova dva vektora s drugima, koji izražavaju FosB plus Veneru i samu Veneru kao kontrolu. Sposobnost ovih novih AAV vektora za selektivno prekomjerno izražavanje kodiranih transgena prikazana je u Slika 2.

Zatim ispitivanje učinka svakog od njih FosB genskog proizvoda, djelujući u NAc. na složenom ponašanju, ubrizgali smo svaki od ovih AAV u ovo područje mozga bilateralno odvojenih skupina miševa i, 3 tjedana kasnije, kada je ekspresija transgena maksimalna (Slika 3A), obavio bateriju testova. Prvo smo procijenili sposobnost FosB genski proizvodi koji utječu na fenotip otpornosti, za koji je prethodno spomenut ΔFosB, u paradigmi socijalnog poraza (, ), Kao što je prikazano u Slika 3A, kontrolni miševi koji izražavaju samo Veneru pokazali su očekivano smanjenje u ponašanju u društvenoj interakciji, dobro utvrđen bihevioralni marker osjetljivosti (; ). Prekomjerna ekspresija mΔFosB u potpunosti je preokrenula ovaj fenotip, za razliku od Δ2ΔFosB i FosB koji nisu imali učinka.

Slika 3 

Učinak FosB genskih proizvoda u NAc na bihevioralne reakcije na kokain ili socijalni stres

Za provjeru relativnog doprinosa svakog od njih FosB genskog proizvoda na korisne učinke kokaina, dvosmjerno smo izrazili Δ2ΔFosB, mΔFosB ili FosB, obostrano u NAc i proučavali životinje u paradigmi preferiranih mjesta. Kao što je prikazano u Slika 3B, bilateralna prekomjerna ekspresija mΔFosB u NAc povećava efekte usporavanja praga doze kokaina koji nije stvorio značajnu preferenciju u kontrolnim životinjama koje eksprimiraju Veneru. Suprotno tome, prekomjerna ekspresija Δ2ΔFosB ili FosB nije utjecala na kondicioniranje mjesta kokaina. Budući da smo koristili prag doze kokaina, koji nije stvorio značajnu sklonost mjestu kontrolnih životinja, ne možemo isključiti mogućnost da FosB ili Δ2ΔFosB mogu smanjiti korisne učinke kokaina.

Konačno, da bismo procijenili početno ponašanje, ispitali smo lokomotornu aktivnost u kućnom kavezu životinja kao i anksiozno ponašanje u povišenom plusu labirinta. Prevelika ekspresija FosB, mΔFosB, niti Δ2ΔFosB u NAc imala je utjecaj na lokomotornu aktivnost, iako su FosB i Δ2ΔFosB - ali ne mΔFosB - proizveli mali, ali značajan pad anksioznog ponašanja u povišenom plus labirintu (Slika 3D, E). Ovi podaci ukazuju na to FosB ekspresija gena ne mijenja značajno ponašanje u normalnim uvjetima.

RASPRAVA

Rezultati ove studije potvrđuju da se fenotip koji je prethodno prijavljen za ΔFosB doista posreduje putem ΔFosB, a ne pomoću Δ2ΔFosB, alternativno prevedenog proizvoda ΔFosB mRNA kojoj nedostaje ΔFosB-ov N-kraj. Dok naši ranije korišteni alati za prekomjerno izražavanje ΔFosB također rezultiraju stvaranjem niskih razina Δ2ΔFosB, ovdje pokazujemo da prekomjerna ekspresija kod NAc mutiranog oblika ΔFosB mRNA, koja ne može generirati Δ2ΔFosB zbog mutacije uključenog alternativnog startnog kodona, rekapitulira povećanje nagradnje kokaina i otpornost na stres od socijalnog poraza koji je prethodno prijavljen za ΔFosB (; ). Nadalje, prekomjerna ekspresija Δ2ΔFosB sama po sebi nema utjecaja ni na kokain ni na stresne reakcije. Također po prvi put pokazujemo da prekomjerna ekspresija FosB-a pune dužine u NAc također nema utjecaja na bihevioralne reakcije na kokain ili stres.

Iako ovi rezultati ne isključuju mogućnost da je Δ2ΔFosB, kao mali proteinski proizvod FosB gena, koji bi mogao iskazati funkcionalne učinke u drugim regijama mozga ili u perifernim tkivima, međutim naši nalazi potvrđuju jedinstven doprinos ΔFosB, djelujući u nagradnom krugu NAc, promovirajući nagradu kokain i otpornost na stres.

pramenovi

  • ΔFosB mRNA nastaje ΔFosB i do manje alternativnog prevedenog Δ2ΔFosB.
  • Prekomjerna ekspresija ΔFosB sama potvrđuje fenotip pro-nagrađivanja i otpornosti na otpornost.
  • Suprotno tome, Δ2ΔFosB nema učinka na nagradu za kokain ili ranjivost stresa.
  • FosB cijele duljine, kodiran od FosB mRNA, također ne utječe na nagradu ili otpornost.

Zahvale

Ovaj rad je podržan stipendijama Nacionalnog instituta za mentalno zdravlje i Nacionalnog instituta za zlouporabu droga, te Ishibashi fondacije i Japanskog društva za promicanje znanosti (brojevi JSPS KAKENHI: 24591735).

fusnote

Izjava izdavača: Ovo je PDF datoteka neobjavljenog rukopisa koji je prihvaćen za objavljivanje. Kao uslugu našim klijentima pružamo ovu ranu verziju rukopisa. Rukopis će biti podvrgnut kopiranju, slaganju i pregledu rezultirajućeg dokaza prije nego što bude objavljen u konačnom obliku. Imajte na umu da se tijekom proizvodnog procesa mogu otkriti pogreške koje mogu utjecati na sadržaj, a sve pravne izjave koje se odnose na časopis pripadaju.

Reference

  1. LE, Hedges VL, Vialou V, Nestler EJ, Meisel RL. Izraz Delta JunD u jezgri accumens sprečava seksualnu nagradu kod sirijskih hrčaka ženki. Geni Brain Behav. 2013; 12: 666-672. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  2. Berton O, McClung CA, DiLeone RJ, Krishnan V, Russo S, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Esencijalna uloga BDNF-a na putu mezolimbičkog dopamina u stresu socijalnog poraza. Znanost. 2006; 311: 864-868. [PubMed]
  3. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Odsustvo očuvane domene C-terminala degrona pridonosi jedinstvenoj stabilnosti ΔFosB. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009-3019. [PubMed]
  4. Chen JS, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kronični fogeni antigeni: stabilne varijante deltaFosB izazvane u mozgu kroničnim tretmanima. J Neurosci. 1997; 17: 4933-4941. [PubMed]
  5. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB povećava poticaj za kokain. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  6. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB različito modulira funkciju izravne i neizravne jezgre. Proc Natl Acad Sci USA. 2013; 110: 1923-1927. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  7. Živice VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Prevelika ekspresija ΔFosB u jezgri povećava seksualnu nagradu kod sirijskih hrčaka ženki. Geni Brain Behav. 2009; 8: 442-449. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  8. Hiroi N, Brown J, Haile C, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB mutirani miševi: Gubitak kronične indukcije kokaina za Fos proteine ​​i povećana osjetljivost na psihomotorne i kokainske učinke. Proc Natl Acad Sci USA. 1997; 94: 10397-10402. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  9. Nada BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcija dugotrajnog AP-1 kompleksa sastavljenog od izmijenjenih Fos-sličnih proteina u mozgu kroničnim kokainom i drugim kroničnim tretmanima. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch R, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Izražavanje transkripcijskog faktora ΔFosB u mozgu kontrolira osjetljivost na kokain. Priroda. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  11. Monteggia LM, Luikart B, Barrot M, Theobald D, Malkovska I, Nef S, Parada LF, Nestler EJ. BDNF uvjetni otkazi pokazuju razlike u spolovima u ponašanju povezanim s depresijom. Biološka psihijatrija. 2007; 61: 187-197. [PubMed]
  12. Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA., Jr ΔFosB pojačava korisne učinke kokaina, smanjujući prodepresivne učinke kappa-opioidnog agonista U50488. Biološka psihijatrija. 2012; 71: 44-50. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  13. Nestler EJ. Transkripcijski mehanizmi ovisnosti: uloga deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008; 363: 3245-3255. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  14. Ohnishi YN, Ohnishi YH, Hokama M, Nomaru H, Yamazaki K, Tominaga Y, Sakumi K, Nestler EJ, Nakabeppu Y. FosB je neophodan za jačanje tolerancije na stres i antagonizira senzibilizaciju lokomotora od strane FosB. Biološka psihijatrija. 2011; 70: 487-495. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  15. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery P, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Uvođenje ΔFosB u regije mozga povezane s nagradama nakon kroničnog stresa. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
  16. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Različiti obrasci indukcije ΔFosB u mozgu lijekovima zlouporabe. Sinapsa. 2008; 62: 358-369. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  17. Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. ΔFosB u jezgri jezgra kritičan je za pojačavanje učinaka seksualne nagrade. Geni Brain Behav. 2010; 9: 831-840. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  18. Pitchers KK, Vialou V, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. Seksualno iskustvo povećava nagradu za amfetamin i jezgro pojačava spinogenezu putem aktivnosti receptora dopamina D1 i indukcije deltaFosB. J Neurosci. 2013; 33: 3434-3442. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  19. Roybal K, Theobold D, DiNieri JA, Graham A, Russo S, Krishnan V, Chakravarty S, Peevey J, Oehrlein N, Birnbaum S, Vitaterna MH, Orsulak P, Takahashi JS, Nestler EJ, Carlezon WA, Jr, McClung, CA Manijako ponašanje uzrokovano poremećajem CLOCK-a. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 6406-6411. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  20. Teegarden SL, Bale TL. Smanjenje prehrambenih preferencija dovodi do povećane emocionalnosti i rizika za povratak prehrani. Biol Psychiatry. 2007; 61: 1021-1029. [PubMed]
  21. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulacija stabilnosti FFosB fosforilacijom. J Neurosci. 2006; 26: 5131-5142. [PubMed]
  22. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforilacija ΔFosB posreduje njegovu stabilnost in vivo. Neuroscience. 2009; 158: 369-372. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  23. Vialou V, Robison AJ, LaPlant QC, Covington HE, III, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, III, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren B, Krishnan V, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, Nestler EJ. ΔFosB u krugovima za nagradu na mozgu posreduje otpornost na stres i antidepresivne reakcije. Neurosci prirode. 2010a; 13: 745-752. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  24. Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ. Faktor odziva u serumu potiče otpornost na kronični socijalni stres indukcijom ΔFosB. J Neurosci. 2010b; 30: 14585-14592. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  25. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham D, Green TA, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños CA. Utjecaj ΔFosB u jezgri raste na prirodno ponašanje vezano uz nagrađivanje. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. [PMC slobodan članak] [PubMed]
  26. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB regulira rad kotača. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  27. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ. ΔFosB: Suštinska uloga ΔFosB u jezgri se nalazi u djelovanju morfija. Neurosci prirode. 2006; 9: 205-211. [PubMed]