A kolecisztokinin által közvetített depresszió- és szorongásos viselkedés előtti kortikális áramkör: ΔFosB (2014) szerepe

Absztrakt

A mediális prefrontalis kéreg (mPFC) neuronális aktivitásának csökkenése egerek társadalmi vereség által kiváltott depressziós és szorongásos viselkedéséhez kapcsolódik. A csökkent mPFC-aktivitás és prodepresszáns szerepe alapjául szolgáló molekuláris mechanizmusok azonban továbbra sem ismertek. Megmutatjuk, hogy az ΔFosB transzkripciós faktor indukciója az mPFC-ben, konkrétan az prebikus (PrL) területen, a stressz iránti érzékenységet közvetíti. Az ΔFosB indukció a PrL-ben szelektíven történt érzékeny egerekben krónikus társadalmi vereségstressz és ΔFosB túlzott expressziója után ebben a régióban, de nem a közeli infralimbikus (IL) területen, fokozott stressz-érzékenység. Az ΔFosB ezeket a hatásokat részben a kolecisztokinin (CCK) -B receptor indukciójával váltotta ki: az mPFC-ben a CCKB blokkolása rugalmas fenotípust indukál, míg a májfoszfát-foszfátbe történő CCK-bevitel utánozza a társadalmi stressz szorongásos és depressziós jellegű hatásait. Korábban azt találtuk, hogy az érzékeny egerekben az mPFC idegsejtek optogenetikus stimulálása több viselkedési rendellenességet fordít vissza krónikus társadalmi vereségstressz után. Ezért feltételeztük, hogy a kortikális vetületek optogenetikus stimulálása megmenti a CCK kóros hatásait az mPFC-ben. Az mPFC-ben végzett CCK-infúzió után optogenetikusan stimuláltuk az mPFC-kivetítéseket basolateral amygdala vagy nucleus akumulénokra, két szubkortikális struktúrára, amelyek részt vesznek a hangulati szabályozásban. A kortikoamigdala előrejelzések stimulálása blokkolta a CCK aggodalomra okot adó hatását, bár a társadalmi vereség egyéb tüneteire nem figyeltek meg hatást. Ezzel szemben a kortikoackumbensek előrejelzése stimulálta a CCK által kiváltott társadalmi elkerülési és szacharózpreferencia-hiányokat, de nem szorongásgátló jellegű hatásokat. Ezek az eredmények együttesen azt mutatják, hogy a társadalmi stressz által kiváltott viselkedési hiányokat részben az mPFC molekuláris adaptációi közvetítik ΔFosB-t és CCK-t bevonva, a kortikális előrejelzések alapján a különálló szubkortikális célpontras.

Kulcsszavak: felhalmozódás, amygdala, szorongás, CCK, depresszió, mPFC

Bevezetés

Számos anatómiailag és funkcionálisan összekapcsolt limbikus agyrégió, köztük a mediális prefrontalis kéreg (mPFC), a hippokampusz, az amygdala és a nucleus akumulének (NAc) szerepet játszik a depresszió és szorongás legfontosabb tüneteinek közvetítésében (; ; ; ; , ; ; ). Például, az amygdala kérgi visszacsatolásának hiánya korrelál a diszforikus érzelmekkel, és a sikeres kezelés esetén normalizálódik. Az mPFC területén lévő subgenual cingulate cortex mély agyi stimulációjának antidepresszáns hatásai mind a corticalis, mind az subkortikális agyi aktivitás normál szintjére történő visszaállításához kapcsolódnak (; ). Hasonlóképpen, a NAc mély agyi stimulációja antidepresszáns és szorongásoldó, és korrelál a NAc, amygdala és mPFC megváltozott anyagcseréjével (; ; ). Ezek az adatok alátámasztják a hangulati rendellenességek neurális hálózati hipotézisét, amelyben az antidepresszáns kezelések - a mechanizmusoktól függetlenül - normalizálják az aktivitást mind a nem-aktív kortikális, mind az hiperaktív subkortikális körökben (; ; ; ; ; ).

Az állati modellek, amelyek krónikus fizikai vagy pszichológiai stressznek vannak kitéve, rontják az mPFC-ben lévő neuronok szerkezetét és működését (), amygdala (), hippokampusz () és NAc (; ). Krónikus társadalmi vereség-stressz, a depresszió etológiai szempontból érvényes modellje (), csökkenti az mPFC neuronális aktivitását, mivel a Zif268 és a c-Fos csökkent expressziójából következtethetünk (; ). Ezenkívül az mPFC optogenetikus stimulálása megfordítja ezeket a hiányokat és antidepresszáns-szerű hatásokat vált ki (), megerősítve az mPFC fontosságát a hangulathoz kapcsolódó jelenségekben. Trágcsáló mPFC, akárcsak a főemlősöknél, részben az érzelmi viselkedést szabályozza a basolateralis amygdala (BLA) és NAc (; ; ). Ennek ellenére az mPFC e szerepét közvetítő molekuláris mechanizmusok ismeretlenek maradnak.

Ez a tanulmány kezdetben az ΔFosB-re összpontosított, egy stabil transzkripciós faktorra, amelyet NAc-ban indukál a krónikus társadalmi veszteségstressz, amikor ellenzi a stressz-érzékenységet (). A vereség stressz utáni agyi szintű ΔFosB indukció feltérképezését végeztük el, és a korábbi vizsgálatokhoz hasonlóan (; ; ), robusztus indukció az mPFC-ben. Meglepő módon azt találtuk, hogy az ilyen ΔFosB indukció az mPFC-ben elősegíti a stressz-érzékenységet. Az mPFC-ben azonosítottuk a kolecisztokinin (CCK) -B receptorokat az ΔFosB molekuláris célpontjaként, ahol a CCKerg neurotranszmisszió szerepet játszik a társadalmi stressz mind az agiogén, mind a depressogén hatásaiben (, ). Megállapítottuk, hogy az mPFC-ben a CCK-aktivitás szükséges és elegendő a társadalmi stressz szorongás- és depressziós hatásához. Ezenkívül optogenetikai megközelítésekkel demonstráljuk a CCK specifikus hatásait az mPFC alkörökben: az mPFC-BLA vetületekben a CCK szorongásos tüneteket közvetít, míg az mPFC-NAc projekciókban a CCK a depresszió tüneteit közvetíti.

Anyagok és módszerek

1 kísérlet: ΔFosB indukció agyi szintű feltérképezése krónikus társadalmi veszteségstressz által.

Nyolchetes C57BL / 6J hím egereket az előzőekben leírtak szerint egymást követő 10 napokon krónikus társadalmi veszteség stressznek tettek alá (; ; ) (lát Táblázat 1; Ábra 1A). Röviden, mindegyik egeret egy ismeretlen, agresszív hím CD1 nyugdíjas tenyésztő egérnek tettük ki napi 5 percig. A CD1 agresszorral való közvetlen interakció után (5 min) az állatokat ugyanazon ketrec szomszédos rekeszébe helyeztük a következő 24 órára szenzoros, de nem fizikai érintkezés mellett. A kontrollállatokat azonos ketrecekben helyeztük el, de ugyanazon törzs tagjaival. A társadalmi interakciós teszteket 24 h-vel végeztük el a vereség utolsó napja után. Az ismeretlen CD1 hím egér társadalmi elkerülését a közzétett protokollok szerint értékelték. Megmértük az „interakciós zónában” (egy ketrec körülvevő 8 cm-es folyosón) töltött időt. A legyőzött egereket az érzékeny és rugalmas alpopulációkba szétválasztottuk a korábban leírtak szerint (; ). Mivel a kontroll egerek többsége több időt tölt el interakcióval egy társadalmi célzattal, mint egy üres célzáróval, ezért 100-as interakció-arányt (egyenlő időt töltenek az interakciós zónában társadalmi cél jelenlétében vs társadalmi cél nélkül): a 100-nál kevesebb pontszámú egereket „érzékenynek”, a ≥100-asokat pedig „ellenállónak” jelöljük. A kiterjedt viselkedési, biokémiai és elektrofiziológiai elemzések alátámasztják e különféle érzékeny és rugalmas szubpopulációk érvényességét (; ; ).

Táblázat 1.  

A FosB-immunreaktív magok átlagos száma (± SEM) mm-ben2 a kontroll, a fogékony és rugalmas egerek agyi területein 24 h krónikus (10 d) társadalmi vereségstressz után
Ábra 1.  

Az ΔFosB indukció az mPFC-ben elősegíti a stressz iránti érzékenységet. A, Az ΔFosB immunhisztokémia reprezentatív mikroszkópos felvételei az mPFC 24 h-ban az 10 társadalmi vereség-epizódjai utáni után. B, Az ΔFosB indukciója nem fordul elő a GABAergic-ben ...

Közvetlenül a társadalmi interakciós teszt után az egereket érzéstelenítettük és intrakardiálisan perfuzáltuk 4% paraformaldehid / PBS-sel. A sejtek száma ΔFosB+ a NAc-ben lévő neuronokat a korábban leírtak szerint hajtottuk végre (). Az agyokat 30% szacharózzal kryo-protektáltuk, majd a coronalis metszeteket (30 μm) fagyasztó mikrotomon vágtuk és immunhisztokémiai szempontból feldolgoztuk. A szabadon lebegő szakaszokat előinkubáltuk egy blokkoló pufferben, amely 0.3% Tritont és 3% normál kecskeszérumot tartalmaz. Az ΔFosB-t nyúl poliklonális antitestekkel detektáltuk a protein N-terminális részével szemben (1 / 1000 Santa Cruz Biotechnology, katalógus # sc-48) ugyanabban a pufferben, majd biotinilezett kecske anti-nyúl IgG antitestekkel és avidin – biotinnel dolgozták fel. peroxidáz komplex módszer DAB-val szubsztrátumként (Vector Laboratories). A diaminobenzidin inkubációs időtartamát állandó körülmények között tartottuk (100-k). A szeleteket összegyűjtöttük, dehidratáltuk és fedjük le. Az ΔFosB-immunopozitív sejtek specifikus barna foltot mutattak a magban, és egy vak megfigyelővel számszerűsítették őket a kezelési körülményekre mikroszkóp segítségével (20 × nagyítás). Egerenként három agyszekciót választottunk ki, amelyek az egyes agyi területeket fedik le. Az egyes agyi régiók anatómiai szétválasztását úgy végeztük, hogy a metszetet összehasonlítottuk a Paxinos egér agy atlasával. Az immunhisztokémiai körülményeket úgy optimalizálták, hogy a háttérszintet a lehető legkisebbre csökkentsék, lehetővé téve az ΔFosB-pozitív sejtek pontos azonosítását. Az állatok átlagértékeit kiszámítottuk, és a statisztikai elemzéshez egyedi megfigyelésként tekintettem meg. Noha a felhasznált antitest felismeri mind az ΔFosB, mind a teljes hosszúságú FosB-t, Western blot módszerrel tudjuk, hogy a vizsgált körülmények között csak ΔFosB kimutatható (; ).

2 kísérlet: a társadalmi stressz által kiváltott ΔFosB neuronfenotípus azonosítása az mPFC-ben.

Az ΔFosB expressziójának vizsgálatához kérgi GABAerg neuronokban GAD2-tdTomato egerek szöveteit használtuk krónikus társadalmi vereség-stressznek kitett és ΔFosB-ra festett fentebb leírtak szerint (lásd fent). Ábra 1B). Az egereket knockin GAD2-Cre egerek tenyésztésével hozták létre (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; JAX törzsszám 010802) () (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; JAX raktárszám 007908), amelyek floxed-stop vezérelt tdTomato-kat hordoznak (RFP változat).

3 kísérlet: Az ΔFosB túlzott mértékű expressziójának viselkedésbeli hatásai a prebikus (PrL) és az infralimbikus (IL) kéregben.

Sztereotaxikus műtétet végeztünk felnőtt hím egereken (8 hetek), hogy HSV-ΔFosB-GFP-t vagy HSV-GFP-t injektáljunk az mPFC PrL vagy IL régióiban. Röviden, az egereket érzéstelenítettük ketamin (10 mg / kg) és xil-amin (1 mg / kg) keverékével, és a következő sztereotaxikus koordinátákat használtuk a PrL vírusszállításához: 1.8 mm (elülső / hátsó), 0.65 mm (oldalsó) ), –2.2 mm (hátsó / ventrális); és IL esetében: 1.9 mm (elülső / hátsó), 0.75 mm (oldalsó), −2.8 mm (hátsó / ventrális) 10 ° szögben a középső vonaltól (a bregma-hoz viszonyítva). Összesen 0.5 μl tisztított vírust adtunk kétoldalúan egy 5 perc periódus alatt (0.1 μl / perc), majd az 5 perc pihenést követve. A vírusinjekció helyét standard szövettani módszerekkel igazoltuk (lásd: Ábra 1C). Bár az egérben nem lehet szelektíven megcélozni a PrL - t az IL - tel szemben, pontossággal, a ábra 1C szemléltetik, hogy nagyon megvalósítható elsősorban az egyik vagy a másik régió megcélozása. Valójában a két régió megcélzása által elért különféle viselkedési hatások igazolják ezt a megközelítést. Az egerek első tételét kizárólag egy szubmaximális társadalmi vereség-kísérletben használtuk (lásd Ábra 1D). Három nappal a műtét után az egereket két egymást követő vereségnek vetették alá ugyanazon a napon, majd később 24 h társasági interakcióra tesztelték. Ezt a szubmaximalis vereség-eljárást korábban validálták annak érdekében, hogy genetikai manipulációkat követően felismerjék a felfoghatósági fenotípusokat (; ).

Az egerek második tételét használtuk az alapvető szorongásos és depressziós jellegű viselkedés tesztelésére (lásd Ábra 1E-J). A műtét után egy nappal az egereket 1% (tömeg / térfogat) szacharóz oldattal szokták. Másnap az egerek választhattak egy vizes palackot és egy 1% szacharóz oldat palackot, naponta cserélve. Az 24 h szacharóz-oldat bevitelét a műtét utáni negyedik és ötödik napon mértük, és a felszívott folyadék teljes mennyiségének százalékában fejeztük ki. Az egereket nyílt terepen (3. Nap), emelt plusz labirintusban (4. Nap), társadalmi interakciót (5. Nap reggel) és kényszerű úszást (5. Nap délután) tesztelték tesztek alapján, közzétett protokollok alapján (). Megállapítottuk, hogy ennek a tesztelési sorrendnek a következõ tesztek eredményeit a korábbi tesztek nem befolyásolják (). Az egerek szabadtéri aktivitását feljegyeztük az 5 percre videotracking rendszer (Ethovision) segítségével vörös fény mellett. A megemelt plusz labirintus két egyenes keresztező futópályából állt, amelyek 60 cm-rel a padló felett helyezkedtek el, és két nyitott és két zárt karra osztottak. Az egereket külön-külön a labirintus közepére helyeztük, és 5 percig hagytuk szabadon felfedezni az egyes karokat. A nyílt terepen és az emelkedett plusz labirintus tesztben a középpontban és a karokban végzett időt használtuk a szorongással kapcsolatos válaszok inverz mutatójaként. Egynapos kényszer úszási tesztet végeztünk 5 perc alatt. A kényszerített úszási teszt során a megnövekedett mozgékonyságot prodepresszió-szerű viselkedésnek tekintették. Ezt az 1 napi tesztet széles körben alkalmazták egerekben és validálták a prediktív érvényesség mérésére, mivel az antidepresszáns gyógyszerek csökkentik a mozgékonyságot.

Végül külön egerek csoportját intra mOFC-ben injektálták HSV-ΔFosB-vel és a szubmaximális vereség utáni társadalmi interakciót megvizsgálták (lásd: Ábra 1K).

A HSV-vektorokat a Rachael Neve-től (Massachusetts Institute of Technology) szereztük be. A kérdéses gének (ΔFosB és GFP) egy CMV promoter alatt vannak. Ezeket a vektorokat korábban széles körben validálták (pl. ).

4 kísérlet: a krónikus társadalmi stressz hatása az mPFC CCKB receptor szintjére.

Az 24 órában a társadalmi interakció tesztje után az agyokat gyorsan eltávolítottuk és sorozatra szeleteltük, és az mPFC-t gyorsan boncoltuk és száraz jégen fagyasztottuk (lásd: Ábra 2A,B). Az RNS izolálását, a qPCR-t és az adatok elemzését a korábban leírtak szerint végeztük (; ). Az RNS-t TriZol reagenssel (Invitrogen) izoláltuk, majd a QIAGEN RNAeasy mikrokészleteivel tovább tisztítottuk. Az összes RNS mintát 260 / 280 és 260 / 230 értékekkel ≥1.8 értékekkel határoztuk meg. A reverz transzkripciót iScript (Bio-Rad) alkalmazásával hajtottuk végre. qPCR-t SYBR Green (Quanta) alkalmazásával végeztünk Applied Biosystems 7900HT RT PCR rendszerrel, a következő ciklusparaméterekkel: 2 min 95 ° C-on; 40 ciklusok: 95 ° C 15-ek esetén, 59 ° C 30-ek esetén és 72 ° C 33-k esetében; és melegítjük 95 ° C-ra, hogy disszociációs görbéket hozzunk létre az egyes PCR-termékek megerősítésére. Az adatokat C összehasonlításával elemeztükt a kezelési körülmények értékei (érzékeny vagy rugalmas vs kontroll egerek, vagy HSV-ΔFosB vs HSV-GFP) a ΔΔC-velt módszer (). qPCR primerek a következők: ΔFosB, előre, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT és fordított, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, előre, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC és fordított, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, előre, AGCGCGATACATCCAGCAG és hátra, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, előre, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG és fordított, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Ábra 2.  

A CCKB receptor blokkolása proreziliencia, antidepresszáns-szerű hatással rendelkezik. A, A társadalmi vereség csak az ellenálló egerekben csökkenti az mPFC CCKB receptor szintjét (n = 8 – 10). *p <0.05, összehasonlítva a kontrollal (egyirányú ANOVA). **p <0.05 ...
5 kísérlet: az ΔFosB hatása a CCKB receptor és a cFos szintre.

Az egereket intra-PrL-ben injektáltuk HSV-AFosB-vel. A műtét utáni 72 órában, a vírus túlexpressziójának csúcsán az injekció beadásának helyét fluoreszcens mikroszkóppal boncoltuk fel (lásd: Ábra 2C). Az RNS izolálását, qPCR-t és az adatok elemzését a fentebb leírtak szerint hajtottuk végre. qPCR primerek a következők: c-fos, forward, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA és fordított, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

6 kísérlet: Az ΔFosB blokkolás hatása a stressz által kiváltott CCKB receptor szintekre és az ellenálló képességre.

Felnőtt egereket kétoldalúan injektáltunk HSV-GFP-vel vagy HSV-ΔJunD-vel a PrL-be (lásd: Ábra 2D-F). Az ΔJunD a JunD N-terminális csonkított mutánsa, amely az ΔFosB domináns-negatív antagonistájaként működik. Az egereket napi kétszer társadalmi vereségnek vetik alá 5 d miatt. Ezt a felgyorsított társadalmi vereség-protokollt, amely egybeesik a HSV maximális transzgén expressziójának periódusával, korábban használták, és kimutatták, hogy a társadalmi elkerülés maximális szintjét indukálja (). Az utolsó stressz-epizód után 24 órával az egereket érzéstelenítés nélkül lefejezték, hogy elkerüljék az érzéstelenítők neuronális fehérje szintre gyakorolt ​​hatását. A fertőzött szöveteket PBS-tartalmú proteázzal (Roche) és foszfatáz (Sigma-Aldrich) inhibitorokkal távolítottuk el 15 g-os lyukasztóval és azonnal szárazjégre fagyasztottuk. A mintákat könnyű ultrahanggal ultrahanggal módosított RIPA pufferben homogenizáltuk: 10 mm-es Tris-bázis, 150 mm-es nátrium-klorid, 1 mm-es EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% nátrium-deoxikolát, pH 7.4, valamint proteáz- és foszfatáz-inhibitorok. felett. A Laemmli-puffer hozzáadása után a fehérjéket 4–15% poliakrilamaid-gradiens géleken (Criterion System; Bio-Rad) szétválasztottuk, és a Western-blotot az Odyssey-rendszer (Li-Cor) alkalmazásával hajtottuk végre a gyártó protokolljainak megfelelően. A membránokat CCKB receptor antitesttel (1/1000, Acris, AP01421PU-N katalógus) blottoltuk. Az egerek egy másik csoportját AAV-JJDD-vel vagy AAV-GFP-vel injektáltuk PrL-ben, majd 5 héttel a műtét után a maximális transzgén expresszió biztosítása érdekében az egereknek alávetették a szubmaximális vereségprotokollot. 24 órával az utolsó vereség után társadalmi interakciót teszteltek.

7 kísérlet: az intra-mPFC CI-988, egy CCKB antagonista hatása a társadalmi stressz által kiváltott társadalmi elkerülésre és az anedóniára.

Az érzékeny egerekbe implantáltak kétoldalú kanülket (1.0 mm-es kanül és a kanül közötti távolság, 1.8 mm-es elülső, injektor-−2.2 mm hátsó / ventrális) célzó mPFC-t. Ábra 2G,H). Egy héttel a műtét után az 10 ng CI-988-t közvetlenül az mPFC-hez infúzióban adták, elsősorban a PrL-t célozva. Az egereket ezután teszteltük társadalmi interakciós viselkedésük szempontjából. A szacharóz preferenciáját a fennmaradó 24 h-nél mértük. A CI-988-et (Tocris Bioscience) sóoldatban feloldottuk, aliquot részre osztottuk és fagyasztottuk. A végső hígítást a kísérlet napján készítettük el. További kísérletet végeztünk fogékony egerekben intraperitoneálisan beadott CI-988 (2 mg / kg) 30 perccel a szociális interakciós teszt előtt.

8 kísérlet: A CCKB agonista hatása a társadalmi stressz iránti érzékenységre és a mPFC-előrejelzések BLA-ra vagy NAc-re történő optogenetikus stimulációjával történő megfordulása.

Az AAV-CaMKII-ChR2-EYFP-t vagy az AAV-CaMKII-EYFP-t injektálták a jobb oldali mPFC-be, ismét elsősorban a PrL-t célozva (lásd Ábra 3A-G). Öt héttel később az optikai szálakat a jobb NAc-be (1.4 elülső / hátsó, 2.6 oldalsó, −4.7 hátsó / ventrális 25 ° szögben a középső vonaltól) vagy BLA-ba (−1.6 elülső / hátsó, 3.1 oldalsó, −4.7 hátsó) implantáltunk. / ventrális, a középső vonaltól nem szöget zár be). Ugyanezen műtéti eljárás során kétoldalas kanülket implantáltunk az mPFC-be (lásd fent). A kanülöket és a szálakat fogászati ​​cementtel rögzítették a koponyához. Az egereknek ezután 1 héten hagyták helyreállni a viselkedési kísérletek megkezdése előtt. Az egereket submaximalis vereségnek vetették alá, majd 24 h-rel később megvizsgálták a társadalmi interakciót, majd közvetlenül az emelt plusz labirintus és a fennmaradó 24 h szacharóz preferenciája után. A társadalmi interakciós teszt előtti 30 percnél az egerek felét CCK-8-mel (10 ng) infúzióval mPFC-re adtuk, míg a másik fele hordozóanyagot (sóoldatot) kapott. Az egereket páronként teszteltük (hordozóval és CCK-8 kezelt egérrel, AAV-GFP-vel vagy AAV-ChR2-el). A CCK-8-et (Sigma) sóoldatban feloldottuk, aliquot részre osztottuk és fagyasztottuk. A végső hígítást a kísérlet napján készítettük el.

Ábra 3.  

A CCK-8-indukált stressz-érzékenység a kérgi specifikus előrejelzésektől függ. A, Az 24 órában a szubmaximális társadalmi vereség után és az 30 percnél a CCK-8 infúzió után az mPFC vetítési régiókat lézer-stimuláltuk egy társadalmi interakció tesztje során. CCK-8 infúzió ...

Az optikai stimulációt a közzétett protokollok szerint végezték (). Az optikai szálakat (Thor Laboratories) krónikusan implantáltuk és FC / PC adapterrel csatlakoztattuk egy 473 nm kék lézerdiódához (Crystal Lasers, BCL-473 – 050-M). A kék fény impulzusok generálására stimulátort (Agilent, #33220A) használtunk. Valamennyi stimuláció során az 40 Hz (100 ms tüske szélessége) kék fényimpulzusok 9.9 ms-törzseit minden 3-n keresztül a BLA vagy NAc terminális régiókba továbbítottuk, csak a társadalmi interakciós teszt ideje alatt, hogy utánozzuk a corticalis burst-szerű mintáját. tevékenység. Az optikai szálas fény intenzitását minden használat előtt fényérzékelővel (Thor Laboratories, S130A) ellenőriztük, a fény intenzitása ∼15 mW. Ez a stimulációs protokoll, amelyet korábban elektrofiziológiailag validáltunk (), nem okozott rohamokat viselkedési megfigyelések és a c-Fos expresszió hiánya alapján az optogenetikusan stimulált régiókban ().

9 kísérlet: A CCKB agonista hatása az mPFC neuronális aktivitására, c-Fos mRNS szintekkel mérve.

Kétoldalas kanülöket implantáltunk az mPFC-t célzó felnőtt egerekbe (lásd Ábra 3H). Egy hetes pihenés után az egereket submaximalis vereségnek vetettük alá, majd később CCK-8 24-val infúztuk. Az mPFC lyukakat 30 perccel vettük a gyógyszer-infúzió után, és a mintákat előkészítettük az mRNS elemzéshez, a fentiek szerint.

Állattartás.

Nyolchetes C57BL / 6J hím egereket (The Jackson Laboratory) használtunk. Az egereket a kísérleti manipulációk előtt legalább 1 héten hozzászokták az állatkertbe, majd 23 ° C – 25 ° C hőmérsékleten tartottuk őket egy 12 h fény / sötét cikluson (világítás: 7: 00 AM) ad libitum élelemhez és vízhez való hozzáférés. A kísérleteket a neurológiai tudományos társaság és az intézményes állatgondozási és felhasználási bizottság irányelveivel összhangban végezték a Sinai-hegyi Icahn Orvostudományi Iskolában.

Statisztikai elemzések.

A megjelenített adatokat átlag ± SEM-ben fejezzük ki (hibasávokként ábrázolva). Az egyirányú ANOVA-kkal összehasonlítottuk a kontroll, fogékony és rugalmas egerek közötti átlagokat immunhisztokémiai, biokémiai és viselkedési elemzésekben. Az egyirányú ANOVA-kkal összehasonlítottuk a GFP-kontroll és az ΔFosB túlzott expressziójának átlagait PrL-ben vagy IL-ben nyílt terepen, emelt plusz labirintusban, kényszer úszás és szacharóz preferencia tesztekben. Kétféle ANOVA-t használtunk a GFP-kontrollok, az ΔFosB-PrL és ΔFosB-IL közötti átlagok összehasonlításához a társadalmi interakciós tesztben. Kétirányú ANOVA-kkal hasonlítottuk össze a CCK-8 hatásait optogenetikus stimulációval vagy anélkül minden viselkedési kísérletben, valamint az ΔFosB túlexpresszió vagy a CI-988 infúzió hatását a társadalmi elkerülésre. Amikor alkalmas, post hoc az elemzéseket Bonferroni alkalmazásával végeztük post hoc teszt. Diákok t teszteket használtunk a CI-988 infúziónak a szacharóz preferenciára gyakorolt ​​hatására és a kényszer úszási tesztekre, valamint a CCK-8 c-Fos mRNS szintek. A kísérleti feltételek közötti különbségeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük, ha p ≤ 0.05.

Eredmények

Az ΔFosB indukciójának agyi szintű feltérképezése krónikus társadalmi veszteségstressz által

Először az ΔFosB indukciót vizsgáltuk immunhisztokémiai úton kontrollált, érzékeny és rugalmas egerekben krónikus (10 d) társadalmi vereségstressz után, összpontosítva az előagy és a középső agy régiókra, amelyek korábban a stresszválaszban szerepeltek. Az állatokat 24 h-val elemeztük az utolsó vereség-epizód után. A krónikus társadalmi stressz számos agyterületen indukálja ΔFosB-t, eltérő mintázatot mutatva az ellenálló és érzékeny egerek között. Ahogy látható Táblázat 1 és a ábra 1A, IL, BLA, hippokampusz dentatált gyrus, dorsalis striatum és NAc mag preferenciális aktiválást mutattak rugalmas egerekben; az NAc-ban szereplő ilyen eredmények összhangban vannak a közzétett eredményekkel (). Feltűnő kontrasztban az érzékeny egerek nagyobb indukciót mutattak a PrL-ben, az oldalsó septumban és a stria terminalis ágymagjában. Több agyrégió összehasonlítható ΔFosB indukciót mutatott érzékeny és rugalmas egerekben; Ide tartoznak az orbitofrontalis kéreg (OFC, a PFC másik területe), NAc héj, dorsalis raphé és periaqueducal szürke (PAG).

Az ΔFosB indukciót mutató neuronális altípus azonosítása érdekében kérgi régiókban a GAD2-tdTomato egereket krónikus társadalmi veszteség-stressznek vettem alá. A ΔFosB immunreaktivitást érzékeny egerekben nem lehetett kimutatni a GABAerg neuronokban (Ábra 1B), amely megerősíti az ΔFosB specifikus indukciójának korábbi eredményeit a kortikális piramis idegsejtekben a krónikus stressz egyéb formái után (). Nem legyőzött kontroll egerekben a kiindulási ΔFosB szintek az agy régiói között hasonlóak voltak a korábbi vizsgálatokban leírtakhoz (, ) sokkal magasabb alapszinttel rendelkezik a NAc-ben és a hátsó striatumban, mint bármely más régióban, kivéve a dentate gyrus-t, amely szintje hasonló volt a striatális régiók szintjéhez (Táblázat 1).

Az mPFC-ben lévő ΔFosB elősegíti a stressz iránti érzékenységet

Ezen eredmények nyomon követése érdekében a PrL-re összpontosítottunk, mivel korábban bebizonyítottuk, hogy ennek a régiónak az optogenetikus aktiválása antidepresszáns-szerű hatást fejtett ki a társadalmi vereség paradigmában (). Az ΔFosB indukció funkcionális következményeinek tesztelésére ezen agyi régióban vírusosan túlexpresszáltunk ΔFosB-t a kontroll egerek PrL-jében (Ábra 1C), és alávette őket a társadalmi vereség stresszének szubmaximális folyamatához, amely normál állatoknál nem idéz elő társadalmi elkerülést. Az ΔFosB-t túl expresszáló egerek PrL-ben jobban érzékenyek voltak a társadalmi vereségre, mint a GFP-vel injektált kontroll egerek, mivel társadalmi elkerülési viselkedést mutattak a szubmaximális társadalmi vereség után (interakció, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, a vírus fő hatása, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Bonferroni utólagos teszt t = 2.447, p <0.05) (Ábra 1D). Ezek az egerek megnövekedett mozgékonyságot mutattak egy 1 napos kényszer úszási tesztben is (F(2,31) = 6.448, p <0.05; Bonferroni utólagos teszt t = 3.518, p <0.05) (Ábra 1E), amely ellentétes az antidepresszáns gyógyszerekkel. Ezzel ellentétben a ΔFosB túlzott expressziója a PrL-ben nem változtatott meg a szorongásos viselkedés, a szacharóz preferencia, a társadalmi interakció vagy a mozgásszervi aktivitás számos kiindulási mutatóját (Ábra 1F-J). Ezek a megállapítások együttesen alátámasztják azt a hipotézist, miszerint az ΔFosB szelektív indukciója a fogékony egerek PrL-jében hozzájárul a stressz sebezhetőségéhez és annak káros következményeihez. Ezzel szemben az ΔFosB túlzott expressziója az mPFC, IL más régiójában nem volt hatással az alapvető érzelmi viselkedésre vagy a társadalmi vereségstresszre adott válaszokra (Ábra 1D-J), mivel az ΔFosB túlexpressziója a medialis OFC-ben a krónikus társadalmi vereség ellenálló képességének fokozására irányult, bár ez a hatás nem érte el statisztikai jelentőségét (interakció, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, az interakciós idő fő hatása, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Bonferroni utólagos teszt t = 3.860, p <0.05 a GFP csoporton belül; t = 1.960, p <0.05 a FosB csoporton belül; vírus hatása, t = 2.447, p <0.05) (Ábra 1K).

Az ΔFosB elősegíti a CCKB indukcióját az mPFC-ben

Nagyon sok bizonyíték alátámasztja azt az elképzelést, hogy a CCK, az agyban gazdag neuropeptid, alapvető szerepet játszik a stressz és szorongás neurobiológiai mechanizmusaiban (). Különösen a CCK felszabadulása az mPFC-ben patkányok társadalmi stresszének során szorongással összefüggő magatartásokkal (). Noha a CCK szerepe az emberi depresszióban továbbra sem világos, a legfrissebb bizonyítékok rámutatnak annak szerepére a patkányok társadalmi vereség által kiváltott depressziós szerű viselkedésében (). Ezért feltételeztük, hogy az mPFC-ben a CCK vagy annak CCKB (más néven CCK2) receptor szintjének változásai hozzájárulhatnak az érzékeny és rugalmas egerek közötti különbségekhez. Az 48 órában a végső vereség-epizód után a CCKB mRNS szint csak a rugalmas egerek mPFC-jében csökkent (F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroni utólagos teszt, t = 3.104, p <0.05 vs kontroll; t = 5.113, p <0.01 vs fogékony) (Ábra 2A). Nem volt különbség a CCK mRNS-szintekben sem érzékeny, sem rugalmas egerekben (az adatokat nem mutatjuk be). Megfigyeltük az Δ növekedésétfosB mRNS-szintek csak fogékony egerekben, összhangban a fentiekben ismertetett fehérje-adatokkal (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Bonferroni utólagos teszt t = 3.336, p <0.05 vs fogékony; t teszt t(12) = 2.138, p <0.05 vs kontroll) (Ábra 2B). Mivel az ΔFosB számos gén transzkripcióját szabályozza (; ), fontolóra vettük annak lehetőségét, hogy szabályozhatja a CCKB mRNS expresszióját. Ennek a kérdésnek a megválaszolásához először a pressFosB-t túlexpresszáltuk PrL-ben és megállapítottuk, hogy ez a manipuláció e régióban a CCKB mRNS szintet szabályozza (t(12) = 2.012, p <0.05 vs GFP) (Ábra 2C). Érdekes módon a következőket is csökkentettük: c-Fos mRNS-szintek ΔFosB túlzott expressziója után (t(11) = 3.382, p <0.01) (Ábra 2C). TEzek az eredmények azt sugallják továbbá, hogy az ΔFosB indukció a fogékony egerekben a PrL-ben egy aktív mechanizmus a fogékonyságról, megakadályozva a rugalmas egerekben észlelt CCKB elnyomását.

Ezen megfigyelések további megerősítése érdekében túlzottan expresszáltuk az ΔJunD-t, egy ΔFosB-kötő partnerét, amelyben nincs tranzaktivációs doménje, és így domináns negatív antagonistaként működik, és meghatároztuk annak hatását a stressz által kiváltott CCKB expresszióra. Megállapítottuk, hogy a krónikus társadalmi vereségstressz növeli a CCKB protein szintjét a fogékony egerek PrL-ben (t teszt t(12) = 2.289, p <0.05 vs kontroll) (Ábra 2D,E). Sőt, az ilyen indukciót teljesen blokkolta az ΔJunD túlzott expressziója ebben a régióban (F(2,20) = 6.306, p <0.01, Bonferroni utólagos teszt t = 3.615, p <0.01) (Ábra 2D,E), alátámasztva azt a hipotézist, miszerint ΔFosB közvetíti a stressz által kiváltott CCKB expressziót. Ezenkívül a ΔFosB aktivitás blokkolása a PrL-ben a helyi ΔJunD expresszió révén szintén elősegítette a stressz legyőzését (t teszt t(16) = 2.114, p = 0.05 vs vezérlés) (Ábra 2F). A rugalmas egerekben a CCKB alulszabályozásának alapjául szolgáló mechanizmust még tisztázni kell.

A CCKB szerepe az ellenálló képességben és a stressz iránti hajlandóságban

Annak érdekében, hogy közvetlenül megvizsgáljuk a CCKB szabályozásának a PrL-ben betöltött szerepét az érzékenység és az ellenálló képesség mediálásában, a szelektív CCKB receptor antagonistát, a CI-988-t (10 ng) közvetlenül az érzékeny egerek ezen agyterületébe infúztuk. A CI-988 hatékonyan antagonizálja a CCKB receptorokat in vivo mert nanomoláris affinitást mutat és magas szelektivitást mutat a CCKB receptor altípusához (). A CCKB tevékenységének blokádja erőteljesen fokozta a társadalmi interakciót (Ábra 2G) (interakció, F(1,20) = 7.795, p <0.05; drog F(1,20) = 5.38, p <0.05, Bonferroni utólagos teszt t = 3.615, p <0.01). A CI-988 infúzió megfordította a fogékony egereknél megfigyelt szacharóz-preferencia-hiányt is (t(8) = 2.681, p <0.05) (Ábra 2H). Mindkét magatartási eredmény azt jelzi, hogy a CCK-blokkolás a PrL-ben erős antidepresszáns-szerű hatásokat mutat. Érdekes módon, amikor intraperitoneálisan adták be, a CI-988 nem volt hatékony a társadalmi elkerülés megfordításában (az adatokat nem mutatjuk be).

Ezzel szemben annak ellenőrzésére, hogy a CCKB aktiválása a PrL-ben közvetítheti-e a társadalmi elkerülést és a krónikus társadalmi vereség-stressz által kiváltott szacharóz-preferenciát, megvizsgáltuk a CCK-8 (10 ng), az agyban a CCK domináns formájának helyi infúziójának hatását. , a depresszióval és szorongással összefüggő magatartásokról. A gyógyszer dózisát az irodalom korábbi eredményei alapján választottuk meg (; ; ). Az egereket a viselkedésvizsgálat előtt (24 h) szubmaximális társadalmi vereségstressznek tettük ki (Ábra 3A). A tesztelés előtt az 8-val infúzióval beadott CCK-30 elegendő volt a társadalmi elkerülés indukálásához a társadalmi interakció tesztben, valamint a nyitott karokban töltött idő csökkentésével megemelt plusz labirintusban (SI: BLA, interakció, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; a gyógyszer fő hatása, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Bonferroni utólagos teszt t = 2.957, p <0.05; NAc: interakció, F(1,26) = 6.688, p <0.05, Bonferroni utólagos teszt t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, interakció, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni utólagos teszt t = 2.509, p <0.05 gyógyszerhatás; t = 2.528, p <0.05 vírushatás; NAc, t teszt t(17) = 1.961; p <0.05 gyógyszerhatás az eYFP csoporton belül) (Ábra 3LENNI, balra). Nem tapasztaltak különbségeket a szacharóz preferenciában (Ábra 3F,G, balra). Végül, a CCK-8 infúzió nem befolyásolta a naiv, nem legyőzött egerek viselkedését (társadalmi interakció és megemelkedett plusz labirintus) ezekben a vizsgálatokban (az adatokat nem mutatjuk be). TEzek az eredmények azt mutatják, hogy a fogékony egerekben a fogékony egerekben a CCL-aktivitás ΔFosB-mediált növekedése PrL-ben, szemben a rugalmas egerekkel, hozzájárul az ezen állatok által kiváltott stressz által kiváltott viselkedési hiányok némelyikéhez.

A CCK-indukált stressz-érzékenység blokkolása a kortikális vetület BLA-val szembeni aktiválásával

A csökkent mPFC idegi aktivitás korrelál az egerek depressziós jellegű viselkedésével, az érzékeny egerek mPFC idegsejtjeinek antidepresszáns-szerű hatást okozó optogenetikus stimulációjával (). Ezért feltételeztük, hogy a CCK a PrL-ben működhet úgy, hogy gátolja az idegrendszeri aktivitást, és ezáltal depresszióhoz hasonló viselkedést okoz. Ezzel a hipotézissel összhangban megfigyeltük a c-Fos mRNS-szintek a PrL-ben, válaszul a CCK infúzióra ezen agyi régióban (t(13) = 2.235, p <0.05) (Ábra 3H).

Következő hipotézisünk szerint az mPFC optogenetikus stimulálása antidepresszáns hatásait úgy fejti ki, hogy ellentétes a CCK idegrendszeri aktivitására. Ennek a hipotézisnek a tesztelésével megvizsgáltuk a szubkortikális struktúrákat, amelyek közvetítik a CCK szorongásgátló és prodepressziós jellegű hatásait. Az mPFC piramidális idegsejtjei erősen behatolnak a NAc-be és a BLA-ba, amelyek két limbikus struktúrát mutatnak a stressz viselkedésbeli válaszában. Kimutatták, hogy mindkét agyrégió megváltozott aktivitása alapvető szerepet játszik a szorongásos és depressziós jellegű viselkedés kifejezésében (; ). Ezért megvizsgáltuk, hogy a PrL-ből NAc-ig vagy BLA-ig terjedő glutamáterg vetületek stimulálása ellentétes-e a CCK mikroinfúzió PrL-beli káros hatásaival (Ábra 3A). Kontrollként AAV-CaMKII-ChR2-EYFP-t vagy AAV-CaMKII-EYFP-t fecskendeztünk a PrL-be. A CaMKII promoterről ismert, hogy a kortikális régiókban a vírus expresszióját célozza meg a glutamaterg piramis idegsejtekbe. Ezután elegendő időt (6 hetet) hagytunk a transzgének szállítására ezen piramis idegsejtek idegterminálisaiba NAc-ban és BLA-ban (Ábra 3I). Az egerek szubmaximális társadalmi vereséget kaptak; 24 órával később a CCK-8-t infúzióba hoztuk a PrL-be, majd 30 percig a társadalmi interakciót meghatározzuk a glutamáterg terminálisok optogenetikus stimulálása során NAc-ban vagy BLA-ban. Közvetlenül a társadalmi interakciós teszt után az egereket megnövekedett plusz labirintusban értékelték a szorongással kapcsolatos viselkedés felmérése céljából, majd a szacharóz preferencia szempontjából az anedónia értékeléséhez.

A PrL glutamaterg vetületének NAc-vel történő optogenetikus stimulálása teljesen megfordította a PrL-n belüli CCK-8 által kiváltott társadalmi elkerülést (interakció, F(1,26) = 6.688, p <0.05, nincs gyógyszerhatás a ChR2 csoportban) (Ábra 3C). Ezzel szemben az ilyen PrL – NAc stimuláció nem volt hatással a szorongáshoz hasonló viselkedésre, az emelkedett plusz labirintusban mérve (Ábra 3E); az ilyen stimuláció azonban növeli a szacharóz preferenciát a nem stimulált egerekhez képest (interakció, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Bonferroni utólagos teszt t = 2.998, p <0.05 stimulációs hatás a CCK-8 kezelt állatokon belül) (Ábra 3G).

Nagyon eltérő viselkedési mintát figyeltek meg a PrL glutamátergikus prognosztikájának optogenetikus stimulálásakor a BLA-ra. Az ilyen stimuláció nem akadályozta meg a PrL-n belüli CCK-8 infúzió által kiváltott társadalmi elkerülést (interakció, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; a gyógyszer fő hatása, F(1,22) = 11.75, p <0.05; nincs hatás a stimulált csoportban, t teszt t(12) = 2.054, p <0.05) (Ábra 3B). A BLA afferensek stimulálása azonban szorongásoldó jellegű hatást váltott ki, amit a megemelt plusz labirintus nyitott karjában töltött idő megnövekedett jele mutat (interakció, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni utólagos teszt t = 2.528, p <0.05 vírushatás a CCK-8 kezelt csoportokban) (Ábra 3D). A glutamatergikus előrejelzések stimulálása a BLA-val nem gyakorolt ​​szignifikáns hatást a szacharóz preferenciájára (interakció, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Ábra 3F).

Megbeszélés

A jelen tanulmány eredményei bizonyítják a PrL-ben bekövetkező molekuláris adaptációkat, amelyek alátámasztják a társadalmi stresszre való hajlamot. Megmutatjuk az ΔFosB indukcióját ebben az mPFC alrégióban krónikus társadalmi veszteségstressz után, ahol az ΔFosB túlzott expressziója elősegíti a stresszre fogékonyságot. Azonosítottuk a CCKB-receptort, mint az egyik ΔFosB által szabályozott célgént a PrL-ben, amely nyilvánvalóan indukálja a CCKB-proteint fogékony egerekben és megakadályozza a CCKB-expresszió alulszabályozását, amely szelektíven fordul elő rugalmas egerekben. Megmutattuk továbbá, hogy egy CCK-agonista PrL-be történő infúziója a társadalmi stresszre adott válaszként elősegíti a depresszió- és szorongásos viselkedési rendellenességeket, míg a fogékony egerek ezen régiójában a CCKB-receptor aktivitás blokkolása blokkolja ezeket a hatásokat. Ezután optogenetikai eszközöket használtunk a CCK proanxiety-prodepressziós szerű tevékenységeiben részt vevő mikroáramkör azonosításához a PrL-ben. Noha a cortico-NAc glutamátergiák előrejelzései a jutalomhiányt közvetítik, amelyet a társadalmi elkerülés és a csökkent szacharózpreferencia bizonyít, ez a mikroáramkör nem befolyásolja a PrL-be infúzióval ellátott CCK aggodalmas hatásait. Ezzel szemben a BLA kortikális előrejelzései közvetítik a szorongással kapcsolatos viselkedés megnyilvánulását, de nincs hatással a társadalmi stressz által kiváltott társadalmi elkerülésre vagy a szacharóz preferencia hiányára. Ezek az adatok együttesen azt mutatják, hogy a krónikus társadalmi vereség stressz utáni PrL-funkció változásai számos viselkedési hiányt közvetítenek specifikus szubkortikális előrejelzések segítségével.

ΔFosB: a limbikus stresszhálózat és az mPFC-ben betöltött szerep feltérképezése

Az ΔFosB immunhisztokémia az egysejtes felbontással azonosítja a krónikus stressz által érintett idegsejteket, és a stressz-szabályozott idegi áramkörök feltérképezésére használta (; ; ). Ezzel a módszerrel kimutattuk, hogy a krónikus társadalmi vereségstressz számos agyterületen indukálja ΔFosB-t, megkülönböztetõ mintázattal az ellenálló és érzékeny csoportok között, egyes régiók indukcióját csak ellenálló egerekben mutatják, mások csak érzékeny egerekben és mások mindkét esetben (Táblázat 1). A korábbi munkák kimutatták, hogy a ΔFosB indukció NAc-ben vagy ventrális PAG-ban elősegíti a krónikus stressz ellenálló képességét és hozzájárul az antidepresszáns válaszokhoz (; ).

Az ΔFosB indukciója érzékeny egerek PrL-jében, korábbi eredményekkel párhuzamosan, hogy ennek a régiónak az optogenetikus stimulálása antidepresszáns hatást fejt ki (), arra késztett minket, hogy vizsgáljuk meg az ΔFosB hatását ezen agykéregben. Az NAc és a ventrális PAG eredményekkel ellentétben azt találtuk, hogy a PrL-ben lévő ΔFosB elősegíti a krónikus társadalmi vereség-stressz iránti fogékonyságot, és prodepressziós szerű hatást fejt ki a kényszerített úszási tesztben anélkül, hogy befolyásolná a szorongásos viselkedést vagy a szacharóz preferenciát. A PrL-rel ellentétben nem találtunk hatást az ΔFosB túlzott expressziójára a közeli IL-ben. Egy nemrégiben végzett tanulmány megfigyelte, hogy az ΔFosB szintje megemelkedik az IL-ben az ellenálló egerekben, és bevonta ezt a kistérséget a társadalmi stressz ellenálló képességéhez (). Ezért további tanulmányokra van szükség a két mPFC alrégió differenciált szerepének kezeléséhez, amelyekről kimutatták, hogy ellentétes hatást gyakorolnak más viselkedési területeken is (; ; ). Korábban számoltunk arról, hogy a depressziós emberek alacsonyabb ΔFosB-szintet mutatnak a NAc által vizsgált NAc után (), wmivel a depressziós emberek dorsolaterális PFC-jében (Brodmann terület 46) magasabb ΔFosB szintet mutattak (). Az utóbbi tanulmányban nem vizsgáltak más korticalis régiókat. Mindenesetre ezek a megállapítások együttesen támogatják az ΔFosB expressziójának régióspecifikus rendellenességeit az emberi depresszióban, ahol a transzkripciós faktor nagyon eltérő hatást gyakorol a stressz sebezhetőségére. A jövőbeli tanulmányokban érdekes lenne megvizsgálni az ΔFosB hatását számos más agyi régióban, ahol az indukálódik (Táblázat 1) a stresszreakciókról.

Az egyik mechanizmus, amellyel az ΔFosB indukció a PrL-ben hozzájárulhat a depresszióhoz hasonló viselkedéshez, a PrL-aktivitás elnyomása. Kimutatták, hogy az ΔFosB elnyomja az AMPA glutamát válaszokat, és a c-Fos expresszió NAc közepes tüskés idegsejtekben (; ; ). Hasonlóképpen, csökkenést találtunk a c-Fos expresszió ΔFosB túlzott expressziója után PrL-ben. Így az ΔFosB indukció a PrL-ben felelős lehet a csökkent neuronális aktivitásért, amelyet ebben a régióban láthatunk krónikus társadalmi vereségstressz után. A PrL ilyen csökkentett hangszintje olyan szubkortikális célpontjaihoz képest, mint például a BLA és a NAc, várhatóan fokozni fogja a félelem kifejeződését és a stresszre adott érzelmi reakciók eloltásának képtelenségét (, ). Ezenkívül az mPFC léziók szenzibilizált stresszválaszokat és félelem kihalási hiányokat indukálnak (; ; ; ), amely arra utal, hogy az mPFC stressz által kiváltott károsodása, amelyet részben ΔFosB indukció közvetít, hozzájárulhat a depresszióhoz és más stresszel kapcsolatos rendellenességekhez ().

A CCK szerepe a stressz sebezhetőségében

Bizonyítékokat szolgáltatunk arra, hogy a CCKB receptor az ΔFosB célpontja, tehát az ΔFosB indukció csak a fogékony egerek PrL-jében egy olyan mechanizmus, amelyen keresztül az ΔFosB emeli prodepressziós jellegű hatásait ebben a régióban. Bár a CCK specifikus hatása az mPFC áramkörben továbbra sem világos, rágcsálókban a CCK a GABAergic interneuronokban lokalizálódik (). Úgy gondolják, hogy elnyomja a kortikális piramis idegsejtek aktivitását azáltal, hogy fokozza a GABA helyi felszabadulását és közvetlenül hat a piramis idegsejtek által expresszált CCKB receptorokra (; ; ; ). Így a CCKergic neurotranszmisszió hozzájárulhat a fentebb említett csökkent PrL aktivitáshoz.

A CCK egy szorongást okozó szer, a CCKB agonisták szisztémás beadása esetén egészséges önkénteseknél pánikrohamok kiváltására kerül sor. A pánikrohamokra hajlamos betegek túlérzékenyülnek a CCK expozíció után (; ). Számos tanulmány megerősítette a CCK rágcsálókban alkalmazott szorongásos hatásait (). Patkányokban a vereségstressz során az mPFC-ben a CCK felszabadulása szorongással összefüggő viselkedéssel (); Ebben a tanulmányban a PrL és az IL kistérségeket nem különítették el. A közelmúltban a CCKB szisztémás, krónikus blokkolása a CI-988-rel antidepresszáns-szerű hatást váltott ki patkányokban (). A CI-988 a kényszer úszási teszt során normalizálta a mozghatatlanságot. Emellett megakadályozta a hipotalám-hipofízis-mellékvese tengely hiperaktivitását, csökkentette a hippokampusz térfogatát és a sejtek proliferációját, és csökkentette a szacharóz preferenciát, amelyet általában a társadalmi vereség idéz elő. Itt megerősítjük ezeket az eredményeket azáltal, hogy megmutatjuk az érzékeny egerek PrL-jébe infúzált CI-988 antidepresszáns-szerű hatását, bár egyetlen szisztémás injekció nem utánozta ezt a hatást.

A PrLL-ben fellépő akut CCKB-akciókon túl a CCKB mRNS szintjének azonosítását tapasztaltuk rugalmas egerekben, ami a rugalmasság alapjául szolgáló molekuláris adaptáció lehet. Valójában a CCKergikus hangváltozás, különös tekintettel a CCKB szintjére, fontos mechanizmust jelent a szorongás kifejezéséhez. A CCKB-t az expressziós agyban kifejező transzgenikus egerek fokozott szorongási és félelemre adott válaszokat mutatnak (). A reziliens és a fogékony egerek közötti megváltozott CCKB-szint megállapítása hozzájárulhat a szorongás és a depresszió-szerű viselkedés fenotípusos különbségeihez. Itt bemutatjuk a PrL-t, mint a CCK szorongásos és prodepresszáns hatásainak kritikus anatómiai szubsztrátját a társadalmi stressz összefüggésében. Ennek ellenére számos más agyi régió vesz részt a CCK viselkedési tevékenységeiben, beleértve a BLA-t, a hippocampust, az NAc-t és a PAG-t (; ; ; ; ). Megállapítottuk továbbá, hogy a fogékony állatok mPFC-jében növekedett a CCKB fehérje szint, de nem mRNS szint. Ezek az eredmények hangsúlyozzák, hogy noha az mRNS-szintek gyakran korrelálnak a fehérjeszintekkel, ez nem feltétlenül a helyzet ().

Optogenetikai kísérleteink azt mutatják, hogy a PrL-től NAc-ig vagy BLA-ig terjedő glutamáterg vetületek növekvõ aktivitása antagonizálja a CCK PrL-ben kifejtett hatásait. További vizsgálatokra van szükség annak megállapításához, hogy az optogenetikus stimuláció ezen hatását ugyanazok a PrL idegsejtek közvetítik, amelyeket a CCK irányít. Érdekes, hogy adataink e két mikroáramkör különféle szerepeit fedik fel a viselkedési rendellenességek különböző területeinek közvetítésében. A cortico-NAc vetület irányítja az anedóniát és a jutalmat; az a tény, hogy szabályozza a társadalmi elkerülést, megerősíti, hogy ez a tünet inkább a csökkent viselkedés motivációjának és jutalmának, és nem a fokozott társadalmi szorongás tükröződését tükrözi. Ez a következtetés összhangban áll azzal, hogy a benzodiazepinek nem tudják korrigálni ezt a rendellenességet (), valamint a közelmúltban bebizonyosodott, hogy a NAc stimulálása az mPFC-vel növeli a visszaélés elleni drogok jutalmát és motivációját (). Ezzel szemben a cortico-BLA vetület ellenőrzi a szorongással kapcsolatos tüneteket, összhangban egy rágcsálók és emberekkel foglalkozó nagy irodalomban (lásd fent).

Összefoglalva, A jelen vizsgálat eredményei meghatározzák a fogékony és ellenálló állatokban érintett limbikus agyrégiók mintáját, és bemutatják a fogékonyságot elősegítő PrL változásokat. Ezek a változások magukban foglalják az ΔFosB indukcióját és a CCKB receptor indukcióját. Ezzel szemben a PrK-ban a CCK-akciók blokkolása elősegíti az antidepresszáns és szorongáscsillapító hatásokat. Megállapítottuk ezen kortikális piramis idegsejtek subkortikális célpontjait is, amelyek közvetítik ezeket a tevékenységeket, a depresszióval összefüggő viselkedéshez elengedhetetlen cortico-NAc áramkörrel, valamint szorongással összefüggő viselkedéshez elengedhetetlen cortico-BLA körrel. Míg a depressziós betegekben az 1990-kben végzett CCKB-antagonisták klinikai vizsgálata nem ígéretes eredményeket hozott, a jelen eredmények arra utalnak, hogy érdemes-e felülvizsgálni az ilyen szerek terápiás potenciálját a magas szintű stressznek kitett betegek alcsoportjaiban.

Lábjegyzetek

 

Ezt a munkát az Országos Mentális Egészségügyi Intézet (EJN) és az Agyi és Viselkedéskutató Alapítvány Országos Szövetsége a skizofrénia és a depresszió fiatal kutatójának díja a VV számára

 

 

A szerzők nem hirdetnek versengő pénzügyi érdekeket.

 

Referenciák

  • I. Akirav, Maroun M. A mediális prefrontalis cortex-amygdala áramkör szerepe a stressz kihatására gyakorolt ​​stresszhatásokban. Neural Plast. 2007; 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Barbas H, Blatt GJ. A topográfiailag specifikus hippokampusz vetületek funkcionálisan megkülönböztetett prefrontalis területeket céloznak meg a rhesus majomban. Hippocampus. 1995; 5: 511-533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [PubMed] [Cross Ref]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. A kolecisztokinin-szerű anyag fokozott kortikális extracelluláris szintje patkányok társadalmi vereségének előrejelzésében. J Neurosci. 2001; 21: 262-269. [PubMed]
  • Becker C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Ismétlődő társadalmi vereség által kiváltott depressziós szerű viselkedésbeli és biológiai változások patkányokban: kolecisztokinin bevonása. Mol Pszichiátria. 2008; 13: 1079-1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [PubMed] [Cross Ref]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. A aszimmetria a patkánymag-akumulációkba és az amygdala-ba mikroinjektált kolecisztokininre adott viselkedési válaszok során. Neuropharmacology. 1994; 33: 995-1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. A GABA, mind a GABAA, mind a GABAB receptorokon hatva, gátolja a kolecisztokinin-szerű anyag felszabadulását a patkány gerincvelői in vitro. Brain Res. 1992; 590: 255-262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V., Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. A BDNF alapvető szerepe a mezolimbikus dopamin útjában a társadalmi vereségstresszben. Tudomány. 2006; 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. A δFosB indukciója a periaqueductalis szürkeben stressz által elősegíti az aktív megküzdési válaszokat. Idegsejt. 2007; 55: 289-300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. A Nucleus akumulánsok mély agyi stimulációja csökkenti a depresszió és szorongás besorolását a kezeléssel szemben ellenálló depresszióban. Biol Psychiatry. 2010; 67: 110-116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Fokozott érzékenység a kolecisztokinin-tetrapeptiddel szemben pánikbetegségben: klinikai és viselkedési eredmények. Arch pszichiátria. 1991; 48: 603-610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Károsítja-e a stressz az agyat? Biol Psychiatry. 1999; 45: 797-805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Traumás stressz: az agyra gyakorolt ​​hatás. Dialogos Clin Neurosci. 2006; 8: 445-461. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Bremner JD. Neurokémia poszttraumás stressz rendellenességekben és más stresszel kapcsolatos rendellenességekben. Neuroimaging Clin North Am. 2007; 17: 523-538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. A szaporodásgátló és viselkedésbeli profilja a nucleusibumbens többszörös glutamatergikus bemenetekről. Idegsejt. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Az prelimbiás és az infralimbikus idegsejtek az étvágygerjesztő instrumentális viselkedésének különféle aspektusait jelzik. PLoS One. 2013; 8: e57575. doi: 10.1371 / journal.pone.0057575. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. A megemelkedett kolesztokininerg tónus fontos molekuláris / neuronális mechanizmust jelent a szorongás kifejezéséhez egérben. Proc Natl Acad Sci, USA A. 2006; 103: 3881 – 3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Choi DC, Gourley SL, Ressler KJ. Az prelimbiás BDNF és a TrkB jelátvitel szabályozza az étvágy és az agresszív érzelmi tanulás konszolidációját. Transl Psychiatry. 2012; 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Christoffel DJ, Golden SA, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. Az IκB kináz szabályozza a társadalmi vereség stressz által kiváltott szinaptikus és viselkedési plaszticitást. J Neurosci. 2011; 31: 314-321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Rövid társadalmi vereségstressz: a kokain szedése és a zif268 mRNS expressziójának hosszú távú hatása az amygdala és a prefrontalis kéregben. Neuropsychop. 2005; 30: 310-321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. A mediális prefrontalis kéreg optogenetikus stimulációjának antidepresszáns hatása. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, Tamminga CA, Nestler EJ. Az elnyomó hiszton-metilezés szerepe a kokain által kiváltott stresszsebességben. Idegsejt. 2011; 71: 656-670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • de Montigny C. A kolecisztokinin-tetrapeptid pánikszerű rohamokat vált ki egészséges önkénteseknél: előzetes eredmények. Arch pszichiátria. 1989; 46: 511-517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Cross Ref]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen JJ. A kolecisztokinin-oktapeptid (CCK-8) és a tetrapeptid (CCK-4) ellentétes hatásait a felhalmozódásgátló atommagok caudalis részébe vagy annak rostális részébe és az agykamrákba történő injekciózást követően lehet beadni. Neurochem Int. 1987; 10: 473-479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. A medialis prefrontalis cortex (cingulate gyrus) szerepe a hypothalamus-hipofízis-mellékvese stresszreakciók szabályozásában. J Neurosci. 1993; 13: 3839-3847. [PubMed]
  • Drevets WC. A depresszió neurokémiai és neuropatológiai vizsgálata: a hangulati rendellenességek kognitív-érzelmi jellemzőire gyakorolt ​​hatás. Curr Opin Neurobiol. 2001; 11: 240-249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Megváltozott érzelmi interferencia-feldolgozás az érzelmi és kognitív-kontroll agyi áramkörökben súlyos depresszió esetén. Biol Psychiatry. 2008; 63: 377-384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Mathews J, Snyder AZ, Sheline YI. Az antidepresszáns kezelés normalizálja a dorsolateralis prefrontalis cortex hipoaktivitását a depresszióban fellépő érzelmi interferencia feldolgozása során. J Befolyásolja a rendetlenséget. 2009; 112: 206-211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Az ellenálló képesség pszichobiológiája és molekuláris genetikája. Nat Rev Neurosci. 2009; 10: 446-457. doi: 10.1038 / nrn2649. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. A CRF, NKB és CCK kortikális forrásai és ezek hatása a neocortex piramissejtjeire. Cereb Cortex. 2006; 16: 1440-1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. A nucleus carrben neuropszichológiai biztonsága a mély agyi stimuláció súlyos depresszió esetén: az 12-hónap stimuláció hatása. J Biol világ pszichiátria. 2011; 12: 516-527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. Az ΔFosB differenciálisan modulálja a magvakkumbens közvetlen és közvetett útfunkcióját. Proc Natl Acad Sci, USA A. 2013; 110: 1923 – 1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Összefüggés a fehérje és az mRNS bősége között az élesztőben. Mol Cell Biol. 1999; 19: 1720-1730. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. A mediális prefrontalis kéreg patkányban: a dorso-ventrális megkülönböztetés bizonyítéka funkcionális és anatómiai tulajdonságok alapján. Neurosci Biobehav rev. 2003; 27: 555 – 579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Cross Ref]
  • Holson RR. Mezialis prefrontalis corticalis elváltozások és félénység patkányokban: I. Reakciókészség averzív ingerekre. Physiol Behav. 1986; 37: 221-230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Az anhedonia idegi korrelációja súlyos depressziós rendellenességekben. Biol Psychiatry. 2005; 58: 843-853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Kezelési rezisztens depresszió: halad a szomatikus terápiákban. Ann Clin Pszichiátria. 2007; 19: 279-287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Az agyi regionális glükóz anyagcseréjének változásai pozitron emissziós tomográfiával mérve a súlyos depresszió paroxetin kezelése után. Am J Pszichiátria. 2001; 158: 899-905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V., Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, R Reister, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS és mtsai. Az agyi jutalom régiókban a társadalmi vereség iránti érzékenység és ellenállás alapjául szolgáló molekuláris adaptációk. Sejt. 2007; 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  • V. Krishnan, Nestler EJ. A depresszió molekuláris neurobiológiája. Természet. 2008; 455: 894-902. doi: 10.1038 / nature07455. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Lehmann ML, Herkenham M. A környezeti gazdagodás az infralimbikus kéregfüggő neuroanatómiai úton biztosítja a stressz ellenálló képességét a társadalmi vereség számára. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Agy, hálózatok, depresszió és így tovább. Eur Neuropsychopharmacol. 2013; 23: 55-62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Cross Ref]
  • Mayberg HS, Lozano AM, Voon V, McNeely HE, Seminowicz D., Hamani C, Schwalb JM, Kennedy SH. Mély agyi stimuláció a kezelésre rezisztens depresszióhoz. Idegsejt. 2005; 45: 651-660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Cross Ref]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. A G9a hiszton-metil-transzferáz alapvető szerepe a kokain által indukált plaszticitásban. Tudomány. 2010; 327: 213-216. doi: 10.1126 / science.1179438. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Nestler EJ. A gén expresszió és a kokain jutalom szabályozása a CREB és a DeltaFosB által. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  • Milad MR, Quirk GJ. A medialis prefrontalis cortex neuronjai jelzik a memóriát a kipusztulástól való félelem miatt. Természet. 2002; 420: 70-74. doi: 10.1038 / nature01138. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J, Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Kétoldalú epidurális prefrontalis corticalis stimuláció kezelési rezisztens depresszióhoz. Biol Psychiatry. 2010; 67: 101-109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nikulina EM, Arrillaga-Romay I., Miczek KA, Hammer RP., Jr Mezokortikolimbiás struktúrák tartós változása a patkányok ismételt társadalmi vereségstresszét követően: a mu-opioid receptor mRNS időbeli folyamata és a FosB / DeltaFosB immunreaktivitás. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272-2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Roques BP. CCK-B receptor: kémia, molekuláris biológia, biokémia és farmakológia. Prog Neurobiol. 1999; 58: 349-379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Seroogy KB, Hamon M, Roques BP. Nemzetközi Farmakológiai Unió: XXI. A kolecisztokinin receptorok felépítése, eloszlása ​​és funkciói. Pharmacol Rev. 1999; 51: 745 – 781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M., Hernandez-Gómez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 növeli a K (+) - kiváltotta [3H] gamma-amino-vajsav felszabadulása szeletekben agy különböző területein. Eur J Pharmacol. 1993; 250: 423-430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. ΔFosB indukció a jutalomhoz kapcsolódó agyszerkezetekben krónikus stressz után. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. A DeltaFosB indukciójának különféle mintái az agyban a visszaélés elleni gyógyszerekkel. Szinapszis. 2008; 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Radley JJ, Rocher AB, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Az ismétlődő stressz dendritikus gerincvesztést indukál a patkány mediális prefrontalis kéregében. Cereb Cortex. 2006; 16: 313-320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [PubMed] [Cross Ref]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. A Delta FosB a c-fos gén epigenetikus deszenzibilizációját közvetíti krónikus amfetamin expozíció után. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rezayat M, Roohbakhsh A, Zarrindast MR, Massoudi R, Djahanguiri B. Kolecisztokinin és GABA kölcsönhatás patkányok dorsalis hippokampuszában a szorongás megnövekedett labirintus tesztjében. Physiol Behav. 2005; 84: 775-782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Cross Ref]
  • Richard JM, Berridge KC. A prefrontalis cortex modulálja a nucleus carrbens glutamát-megszakítás által keltett vágyat és rettegést. Biol Psychiatry. 2013; 73: 360-370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Kolecisztokinin receptor altípusok: szerepe a szorongással és a jutalommal kapcsolatos viselkedés modulálásában állati modellekben. J Psychiatry Neurosci. 2003; 28: 171-181. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axmacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. A mély agyi stimuláció az áramkörök jutalmazására enyhíti az anhedóniát a refrakteris depresszióban. Neuropsychop. 2008; 33: 368-377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [PubMed] [Cross Ref]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Az prebikus és infralimbikus kéreg, a ventrális hippokampusz és a basolateralis amygdala elválasztható szerepe a kondicionált félelem expressziójában és kihalásában. Neuropsychop. 2011; 36: 529-538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Silva MG, Boyle MA, Finger S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. A patkány medialis frontális kéregének nagy és kicsi sérüléseinek viselkedésbeli hatásai. Exp Brain Res. 1986; 65: 176-181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. A macska látókéregében és hippokampuszában a GABAerg neuronok különböző populációi szomatosztatin vagy kolecisztokinin immunoreaktív anyagot tartalmaznak. J Neurosci. 1984; 4: 2590-2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Az antidepresszánsok új neuronokat toboroznak a stresszválasz szabályozásának javítása érdekében. Mol Pszichiátria. 2011; 16: 1177-1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Taniguchi H, He M, Wu P, Kim S, Paik R, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. A Cre meghajtó vonalak forrása a GABAerg neuronok genetikai célzására az agykéregben. Idegsejt. 2011; 71: 995-1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gélinier JC, Trojak B, Bonin B. DeltaFOSB-függő gén expressziós mintázat aktiválása súlyos depressziós betegek dorsolateral prefrontális kéregében. J Befolyásolja a rendetlenséget. 2011; 133: 174-178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tsankova NM, Berton O, Renthal W, Kumar A, Neve RL, Nestler EJ. A hippokampusz tartós fenntartása a depresszió és antidepresszáns hatás egér modelljében. Nat Neurosci. 2006; 9: 519-525. doi: 10.1038 / nn1659. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Amygdala áramkör, amely a szorongás visszafordítható és kétirányú irányítását közvetíti. Természet. 2011; 471: 358-362. doi: 10.1038 / nature09820. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, et al. Az agyi jutalmazási körökben a DeltaFosB közvetíti a stressz ellenálló képességét és az antidepresszáns válaszokat. Nat Neurosci. 2010; 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Funkcionális heterogenitás a cortulate cortexben: az elülső végrehajtó és a hátsó értékelési régiók. Cereb Cortex. 1992; 2: 435-443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Az imipramin-kezelés és az ellenálló képesség hasonló kromatin-szabályozást mutat az egérmag-felhalmozódásban a depressziós modellekben. J Neurosci. 2009; 29: 7820-7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [PMC ingyenes cikk] [PubMed] [Cross Ref]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. A DeltaFosB indukció az orbitofrontalis kéregben a kokain által kiváltott kognitív diszfunkció toleranciáját közvetíti. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. A kolecisztokinin felszabadulása patkány agykéregben in vivo: a GABA és a glutamát receptor rendszerek szerepe. Brain Res. 1987; 406: 207-214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • A Zanoveli JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr A kolecisztokinin-szulfatált oktapeptid (CCK-8s) szisztémás és intra-dorsalis periaqueductalis szürke injekciói pánikszerű reakciót váltanak ki a megemelt T-labirintusban kezelt patkányokban. Peptidek. 2004; 25: 1935-1941. doi: 10.1016 / j.peptides.2004.06.016. [PubMed] [Cross Ref]