Az oxxin közvetíti a szexuális viselkedést a szexuálisan naiv patkányokban, de nem bír kritikusan a szexuális teljesítmény szempontjából (2011)

Horm Behav. Szerzői kézirat; elérhető a PMC 2011 Aug 1-ban.

Végleges szerkesztett formában megjelent:

PMCID: PMC2917508

A kiadó ennek a cikknek a végleges szerkesztett változata elérhető a következő weboldalon: Horm Behav

Lásd a PMC egyéb cikkeit idéz a közzétett cikket.

Ugrás:

Absztrakt

Az orexin hipotalamusz neuropeptid közvetíti az éberséget, az alvást és a természetesen jutalmazó magatartást, beleértve az ételt. A férfi szexuális viselkedését az orexin-receptor-1 agonisták vagy antagonisták megváltoztatják, ami arra utal, hogy az orexin-A szerepe ebben a természetesen előnyös viselkedésben van. Az endogén orexin-A vagy B specifikus szerepe azonban a férfi szexuális viselkedés különböző elemeiben jelenleg nem tisztázott. Ezért a jelenlegi vizsgálatok a neurális aktiválásra és az orexin-sejt-specifikus elváltozásokra vonatkozó markereket használtak annak tesztelésére, hogy az orexin kritikus a hím patkányok szexuális motivációjához és teljesítményéhez. Először a cFos-expressziót orexin-neuronokban egy fogékony vagy nem-fogékony nő bemutatása után mutattuk ki anélkül, hogy a párzás különböző elemeinek további aktiválása következett be. Ezután az orexin funkcionális szerepét orexin-B konjugált szaporinnal teszteltük, ami a hypothalamusban az orexin sejtek károsodását eredményezte. A szexuálisan naiv férfiaknál a sérüléseket végeztük, és a következő szexuális viselkedést négy párosítási kísérlet során rögzítettük. A károsodási férfiak rövidített késleltetést mutattak az első, de nem későbbi párosodási kísérletek során, és azt sugallják, hogy a sérülések megkönnyítették a szexuális viselkedést szexuálisan naiv, de nem tapasztalt férfiaknál. Hasonlóképpen, a sérülések nem befolyásolták a szexuális motivációt tapasztalt férfiaknál, a kifutópálya tesztek alapján. Végül, a megnövekedett plusz labirintus vizsgálatok csökkent sérülést okozó viselkedést mutattak a sérült férfiaknál, ami az orexin szorongásában szerepet játszott a nőknek a naiv állatokban történő kezdeti expozíciójával összefüggésben. Összességében ezek az eredmények azt mutatják, hogy az orexin nem kritikus a férfi szexuális teljesítménye vagy motivációja szempontjából, de szerepet játszhat a nemi állatok szexuális viselkedésével kapcsolatos ébredésben és szorongásban.

Kulcsszavak: orexin, hypocretin, szexuális viselkedés, kopuláció, idegi aktiváció, motiváció, hipotalamusz, újdonság, arousal, szorongás

Bevezetés

Az oxxin, más néven hypocretin, egy hipotalamikus neuropeptid, amely kritikus a táplálkozási viselkedés szempontjából, (de Lecea és munkatársai, 1998; Sakurai és munkatársai; 1998, Sakurai, 2006; Benoit és munkatársai, 2008) arousal és alvás (Chemelli és munkatársai, 1999; Lin és munkatársai, 1999, Sakurai, 2007; Furlong és Carrive, 2007; Furlong és munkatársai, 2009; Carter és munkatársai, 2009). Orexin neuronok lokalizálódnak az oldalsó hipotalamusz területre (LHA) és a perifornikus dorsomedialis hypothalamusra (PFA-DMH), és két neuropeptidet, az orexin-A-t és a B-t (de Lecea és munkatársai, 1998; Sakurai és munkatársai, 1998). Kimutatták, hogy az oxxin neuronok az arousal mediációjában résztvevő agyi struktúrákra terjednek ki, beleértve a locus coeruleus-t, a tuberomammillary magot és a peduculopontine tegmental magot (Peyron és munkatársai, 1998; Hagan és munkatársai, 1999; Horvath és munkatársai, 1999; Baldo és munkatársai, 2003). Az oxxin szintén szerepet játszott a jutalomban és a motivációban, különös tekintettel az élelmiszerekre és a visszaélésszerű gyógyszerekre (Aston-Jones és munkatársai, 2009a; Aston-Jones és munkatársai, 2009b) és az orexin neuronok kimutatták, hogy a mesolimbikus rendszerben az agyi struktúrákat, köztük a ventralis tegmentális területet (VTA) és a nucleus accumbens (NAc), jutalmazzák.Peyron és munkatársai, 1998; Fadel és Deutch, 2002; Martin és munkatársai, 2002; Baldo és munkatársai, 2003). Orexin neuronok aktiválódnak az élelmiszerek és a drogok jutalmához kapcsolódó feltételes összefüggésekkel.Harris és munkatársai, 2005; de Lecea és munkatársai, 2006; Choi és munkatársai, 2010), és bebizonyosodott, hogy szerepet játszanak a jutalom alapú táplálkozási viselkedésben (Choi és munkatársai, 2010). Továbbá az orexin receptor 1 (ORX1) antagonista intracerebroventrikuláris (ICV) vagy intraperitoneális beadása csökkenti az ízletes ételek motivációját (Thorpe és munkatársai, 2005; Nair és munkatársai, 2008), míg az ICV orexin-A adminisztráció visszaállíthatja ezt a motivációt (Boutrel és munkatársai, 2005).

Az orexin szerepe más nyereséges viselkedésekben jelenleg nem tisztázott, bár számos tanulmányban szerepelt az orexin szerepe a hím patkányok szexuális viselkedésének szabályozásában. Korábban kimutatták, hogy az orexin neuronokat a hím patkányok kopulációjával aktiválják (Muschamp és munkatársai, 2007). Ezen túlmenően az orexin-A mediális preoptikai területre (mPOA) történő beadása fokozott szexuális teljesítményt eredményezett, amit a csatolt és késleltetett latenciák bizonyítottak, valamint a tartók és az intromission fokozott gyakoriságát.Gulia és munkatársai, 2003). Ezzel szemben az orexin-A ICV beadása csökkentette a szexuális motivációt a női preferenciák csökkentésével, bár csak nagyon szexuálisan motivált férfiaknál (Bai és munkatársai, 2009). Az ORX1-antagonistákkal végzett vizsgálatok szintén ellentmondásos adatokat mutattak, mivel az ORX1 antagonista szisztémás beadása enyhén csökkentette a szexuális teljesítményt, mivel a szexuális viselkedés egyéb paramétereit nem befolyásolta a behatolás késedelme (Muschamp és munkatársai, 2007), míg az ORX1 antagonista ICV-adagolása nem befolyásolta a szexuális motivációt (Bai és munkatársai, 2009). Ezek a vizsgálatok együttesen arra utalnak, hogy az exogén orexin-A beadása befolyásolja a szexuális teljesítményt és a motivációt; az endogén orexin azonban nem játszhat fontos szerepet a szexuális viselkedés közvetítésében (Bai és munkatársai, 2009). Ezért a vizsgálat célja annak meghatározása volt, hogy az endogén orexin nélkülözhetetlen-e a férfi patkányok szexuális motivációjához és teljesítményéhez.

Először meghatároztuk, hogy a szexuális viselkedés során az orexin neuronok aktiválódnak-e, tesztelve azt a hipotézist, hogy az orexin neuronok aktiválódnak a jutalmazó ösztönzés bevezetésekor. Továbbá, mivel bebizonyosodott, hogy a szexuális élmény befolyásolja a szexuális teljesítményt (Dewsbury, 1969) és a szexuális viselkedés jutalmazó tulajdonságai (Tenk és munkatársai, 2009) megállapították, hogy a szexuális élmény befolyásolja-e az orexin neuron aktiválódását párzás során. Végül tesztelték, hogy az orexin kritikus szerepet játszik-e a szexuális motivációban és a teljesítményben az orexin neuronok sejt-specifikus elváltozásainak alkalmazásával.

Anyagok és módszerek

Felnőtt hím Sprague Dawley patkányokat (200 – 250g) szereztünk be a Harlan-tól (Indianapolis, IN) vagy a Charles River Laboratories-tól (Sherbrooke, Quebec, Kanada), és egyedileg vagy párokban helyeztük el a plexi-ketrecekben végzett egyedi kísérletnek megfelelően (lásd alább). A kolónia helyiségét 12 / 12 fordított fény-sötét cikluson tartottuk (az 10 am-en világít), és az élelmiszer és a víz rendelkezésre állt ad libitum kivéve a viselkedési tesztek során. A nőstény Sprague-Dawley patkányokat Harlan-tól (Indianapolis, IN) vagy Charles River Laboratories-tól (Sherbrooke, Quebec, Kanada) szereztük be bilaterálisan ovariektomizáltuk és szubkután implantáltuk 5% 17-β-ösztradiol-benzoát-szilikát kapszulákkal. A szexuális fogékonyságot progeszteron (500 µg szezámolaj 0.1ml-ben) szubkután injekciói indukálták kb. Minden eljárást a Cincinnati Egyetem Állatgondozási Bizottságai és a Nyugat-Ontario Egyetem jóváhagyott, és megfelelnek az Országos Egészségügyi Intézet és a Kanadai Állategészségügyi Tanács irányelveinek. Minden viselkedési tesztet a sötét fázis első felében végeztünk halványvörös megvilágítás mellett, kivéve, ha másként jelezzük.

Kísérleti terv

cFos kifejezési tanulmányok

A hím patkányokat (n = 48) egyedileg helyeztük el, és az állatok fele szexuális élményt szerzett az otthoni ketrecben az 5 hetente kétszer párosodás közben. Az otthoni ketrecben párosítási teszteket végeztünk, hogy kiküszöböljük a különböző párzási arénákkal való expozíció által kiváltott izgalmi és cFos-expressziót, és az előzetes párosításhoz kapcsolódó kondicionált jelek expozícióját (Balfour és munkatársai, 2004). A befogadó nőstényt behelyeztük a házba, és a férfiaknak egy ejakulációig vagy 60 percig párosultak. Minden teszt során megfigyelték a szexuális viselkedést. Feljegyezték a rögzítések és a behatolások teljes számát, valamint az első rögzítés és a behatolás késleltetését (a befogadó nő bemutatásától az első felfüggesztésig vagy a behatolásig eltelt idő) és az ejakulációt (az első intromissiontől az ejakulációig eltelt idő). (Agmo, 1997). Az állatok fennmaradó fele szexuálisan naiv volt. Ezeket az állatokat ugyanabban a szobában helyeztük el, mint a szexuálisan tapasztalt férfiakat, kezeltük és érintkeztük a párzással kapcsolatos szagokkal és hangokkal, de nem párosultak. A naiv és tapasztalt állatokat minden esetben 6 kísérleti csoportokba osztottuk (n = 4 csoportonként). Az 6 nem korábban tapasztalt és tapasztalt csoportok közé tartoztak: a nemi viselkedés nélküli expozíciós férfiak (Home Cage); férfiak, akiket a nem kórokozó nősténynek ki van téve az otthoni ketrecben 15 percig (érzéstelen nő). A férfiak kutathatnak és kölcsönhatásba léphetnek, de nem tudtak párosodni a női fogékonyság hiánya miatt; férfiak, akiket egy fogadó nő szagának vetnek alá, amely egy huzalhálós dobozban van elhelyezve az otthoni ketrec tetején 15 percig (Estrous Female); férfiak, akik tartók, de nem vaginálisan maszkolt nőstényeknél (Mount); férfiak, akik csak rögzítéseket és behatolásokat mutattak (Intromission); és a férfiak, akik egy ejakulációhoz (ejakulációhoz) kapcsolódnak. Egy órával a vizsgálat befejezése után a hímeket leöljük a cFos expressziójának elemzése céljából. A szexuálisan tapasztalt csoportokat a szexuális viselkedés paramétereihez igazították, és a végső teszt előtt nem voltak szignifikáns különbségek a csoportok között. Ezenkívül nem volt szignifikáns különbség a naiv és a tapasztalt csoportok között a végső teszt során a szerelvények és a behatolások száma között.

Perfúziók: cFos kifejezés

Minden férfit mélyen érzéstelenítettünk nátrium-pentobarbitollal (270 mg / ml), és transzkardiálisan perfundáltuk 4% paraformaldehiddel (500 ml; PFA). A következő perfúziós agyakat azonnal eltávolítottuk, és egy órán át rögzítettük ugyanazon fixálószerben, majd átvisszük 20% -os szacharózoldatra krioprotekcióhoz. Az agyakat 35 µm koronális szakaszaiban fagyasztó mikrotomra (Microm, Walldorf, Németország) szétválasztottuk, és az 4 párhuzamos szekciókat gyűjtöttük a krioprotektáns oldatban (30% szacharóz 0.1 M PB-ben, amely 30% etilénglikolt és 0.01% nátrium-azidot tartalmaz) és tárolták. -20 ° C-on további feldolgozásig.

Immunohisztokémia

Minden inkubációt szobahőmérsékleten, enyhe keverés közben végeztünk. A szabadon lebegő szakaszokat nagy mértékben mossuk 0.1M sóoldattal pufferelt nátrium-foszfáttal (PBS). A szakaszokat 1% H-vel blokkoltuk2O2 (30% -os törzsoldat) PBS-ben 10 percig, majd ezt követően ismét átöblítjük PBS-sel. A szakaszokat inkubációs oldattal (PBS-t tartalmazó 0.1% szarvasmarha-szérumalbumint és 0.4% Triton X-100-et) inkubáltuk 1 órára. Az elsődleges antitest inkubálásokat az inkubációs oldatban szobahőmérsékleten egy éjszakán át végezzük. A következő festőszakaszokat PBS-ben öblítettük, plusz töltött üveglemezekre szereltük és dibutil-ftalát-xilollal (DPX) fedettük.

cFos / Orexin

A cFos és az orexin esetében egy szekciósorozatot immunizáltunk. A metszeteket egy éjszakán át inkubáltuk egy nyúl emelt antitesttel, amely felismerte a cFos-t (nyúl anti-cFos, sc-52; 1: 10 000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), majd 1 órás inkubálást végeztünk biotinilezett kecske anti-nyúlval (1: 500 Vector Laboratories, Burlingame, CA) és avidin torma peroxidáz komplex (1: 1000, ABC kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA). A szekciókat 10 percig inkubáltuk 0.02% diaminobenzidinben (DAB) (Sigma, St. Louis, MO) 0.1M foszfátpufferben (PB), amely 0.012% hidrogén-peroxidot és 0.08% nikkel-szulfátot tartalmaz, így kék-fekete reakcióterméket kaptunk. Ezután a szakaszokat egy éjszakán át inkubáltuk egy nyúl emelt antitesttel, amely felismeri az orexin-A-t (nyúl anti-orexin-A, H-003-30; 1: 20 000, Phoenix Pharmaceuticals, Burlingame, CA), majd 1 órás inkubálással biotinilezett kecske anti - nyúl és ABC, a fentiek szerint. Végül a szekciókat 10 percig 0.02% DAB-val inkubáltuk 0.1M PB-ben, amely 0.012% hidrogén-peroxidot tartalmaz, így vörösesbarna reakcióterméket kaptunk.

Minden antitestet korábban jellemeztek (Chen és munkatársai, 1999; Satoh és munkatársai, 2004; Solomon és munkatársai, 2007). Az immunhisztokémiai kontrollok magukban foglalják az elsődleges antitestek elhagyását, a Western-blot analízist, amely egyetlen sávot mutatott megfelelő tömegben (cFos), és az immunhisztokémiai orexin jel veszteségét orexin B-szaporin léziókkal (orexin).

Az adatok elemzése

cFos / Orexin

Az orexinre vagy orexinre és cFos-ra jelölt neuronokat két, egymástól reprezentatív szakaszban számoltuk ki egy állatonként, amelyről ismert, hogy az orexin neuronális populáció maximális számát tartalmazza.Sakurai és munkatársai, 1998) -2.3 mm-től a -3.6 mm-ig terjed a bregma (Paxinos és Watson, 1998) (ábra 1) egy Leica mikroszkóphoz (Leica Microsystems; Wetzlar Germany) csatolt rajzcső segítségével, a kísérleti csoportok által megfigyelt vakon. A PFA-DMH-t és az LHA-t a fornix elhelyezkedése alapján határoztuk meg (1a). A cFos-t expresszáló orexin neuronok százalékos arányát kiszámítottuk és átlagoltuk egy féltekénként minden állat esetében, és a csoporteszközöket kiszámítottuk. A csoportok közötti statisztikai szignifikanciát kétirányú ANOVA-val határoztuk meg a szexuális tapasztalattal és a szexuális viselkedéssel a végső teszt során, amit Fisher-féle LSD tesztek követnek 95% -os megbízhatósági szinttel.

ábra 1 

Az orexin neuronok elhelyezkedése a hypothalamusban. (A) Az orexin neuronok anatómiai elhelyezkedése a hypothalamusban. (Paxinos és Watson, 1998), Scale bar: 200 µm. (B) Egyetlen jelölt orexin neuronok a PFA-DMH-ban egy nem módosított kontrollállatban. (C) Orexin ...

Orexin károsodási vizsgálatok

Sebészet

A hímeket egyedileg helyeztük el, és egy elővizsgálat előtti párosodást alkalmaztunk egy befogadó nővel a sérülés és a lázas műtét előtt. A szexuális viselkedést a fent leírt módon rögzítettük, és a csoportokat a párosító magatartás paraméterei alapján egyeztettük. A hím patkányokat izofluránnal (Abbot Laboratories, St. Laurent, Quebec, Kanada) érzéstelenítettük egy Surgivet Isotec4 gázkészülékkel (Smiths Medical Vet Division, Markham, Ontario, Kanada) és sztereotaxikus készülékbe (Kopf Instruments, Tujunga, CA) helyeztük. az orrát és a száját lefedő gázmaszk az anesztézia fenntartása érdekében. Vágás történt, hogy a koponyát és a lambda-t feltárjuk, és a bregmát megállapították, és megállapították, hogy azok szintek. Egy dremel fúróval (Dremel, Racine, WI) és üvegmikropipettekkel (40µm átmérő, World Precision Instruments Inc., Sarasota, FL) töltött lyuk lyuk volt a célzott toxinnal, az orexin-B saporin (IT-20, Advanced Célzó rendszerek, San Diego, CA, 200ng / µL PBS-ben); vagy a BLANK-saporin (nem-konjugált toxin) (IT-21, Advanced Targeting Systems, San Diego, CA; 200ng / µL PBS-ben; lándzsás kontroll) csökkentettük a hypothalamusba. Kimutatták, hogy ez a célzott toxin nagy affinitással kötődik az orexin receptor 2-et (ORX2) expresszáló sejtekhez, és jelentősen alacsonyabb affinitással rendelkezik az ORX1-et expresszáló sejtekre (Gerashchenko és munkatársai, 2001), és kimutatták, hogy a hipotalamuszban kifejezetten az orexin neuronokat \ tFrederick-Duus és munkatársai, 2007). Az 1 µL (2 / félteke) kétoldalú infúzióját az alábbi koordinátákkal injektáltuk: AP = −2.8 és −3.2; ML = 0.7 és 0.8; DV = −9.0 (Paxinos és Watson, 1998). Minden infúzió után a tű a 3 percig a helyén maradt, hogy lehetővé tegye a diffúziót. A tűket lassan eltávolítottuk, és a sebeket sebbilincsekkel lezártuk. Két héttel a sérülési műtét után minden férfit szexuális élményben vizsgáltak négy párosítási kísérlet során, majd a kifutópálya és / vagy megemelt plusz labirintus tesztnek vetették alá (lásd alább). A műtéteket három különböző kohorszban végeztük el, egymástól több héttel elválasztva, hogy elegendő számú állatot érjünk el csoportonként.

Szexuális viselkedés

Minden férfit szexuális viselkedésre teszteltek az otthoni ketrecben minden második napon végzett 4 párosítás során. Minden egyes ülés során a férfiak egy nőstény asszonnyal párosultak egy ejakulációval vagy 60 percig, attól függően, hogy melyik jött előbb. A párosító viselkedést a fent leírtak szerint rögzítettük, és a kopulációs hatékonyságot is kiszámítottuk [a behatolások száma (a tartók száma + a behatolások száma)]. A szexuális teljesítmény paramétereinek statisztikai különbségeit összehasonlítottuk a károsodás és a hamis csoportok között minden egyes kísérletben, egyirányú ANOVA-val és a sebészi sebzéssel, mint Fisher és LSD-teszt 95% -os megbízhatósági szinttel, vagy adott esetben nem-parametrikus tesztek futtatásával. a Kruskal-Wallis egyirányú ANOVA-t, a sérülési műtétet mint tényezőt és Dunn-tesztet 95% -os megbízhatósági szinttel. Ezenkívül az egyes csoportokra vonatkozó adatokat összehasonlítottuk a műtét előtti adatokkal párosított t-próbákkal.

Szexuális motiváció: kifutópálya teszt

A szexuális viselkedés vizsgálatát követően a most szexuálisan tapasztalt férfiak egy alcsoportját szexuális motivációra tesztelték egy egyenes futópálya-berendezés segítségével (MED Associates Inc., St. Albans, VT) (120 cm hosszú; Lopez és munkatársai, 1999). A futópálya-készülékhez szokásosan férfiak, akik ugyanazon a napon két későbbi 10 periódusos vizsgálatban vettek részt. Ezután két vizsgálati vizsgálatot végeztünk. Az első vizsgálat során egy élénkítő állatot (estrous female, anestrous female vagy male) helyeztünk egy céldobozba, a perforált elválasztókkal a kifutópálya végén. Egy ventilátort alkalmaztak az inger állatok illatainak felrobbantására a hím felé. Kísérleti férfiak kerültek a kezdődobozba, az ajtót kinyitották, hogy hozzáférjen a kifutópályához, és az idő a céldoboz eléréséhez. Miután elérkezett a célmezőbe, a férfiaknak 30 másodperceket kaptak, hogy kölcsönhatásba lépjenek a képernyő mögötti ingerállattal. Egy azonos második kísérlet követte az 1 órát később. A kísérleti 1 és a 2 vizsgálat közötti időközönkénti statisztikai szignifikanciát párosított t-próbákkal elemeztük 95% konfidenciaszinten. A csoportok közötti statisztikai szignifikanciát egyirányú ANOVA-val határoztuk meg a sérüléses műtét mellett, amit Fisher-féle LSD-tesztek követnek 95% -os konfidenciaszinten.

Szorongásszerű viselkedés: emelkedett plusz labirintus

A most szexuálisan tapasztalt férfiak alcsoportját szorongásszerű viselkedésre tesztelték, hogy meghatározzák, hogy az orexin léziók hatása a szexuális teljesítményre vagy a motivációra a szorongás vagy az izgalom változásai miatt következett be. A férfiakat a megnövelt plusz labirintus készülékkel (EPM; MED Associates Inc., St. Albans, VT) fényes világítással tesszük ki a fényfázis végén. Az EPM 4 karokból állt, amelyek mindegyike 50 cm hosszú volt, egy központi csomóponttól kezdve, és emelkedett 75 cm. A labirintus két karja nyitott volt a külső környezetre, a másik kettő pedig sötét, 40 cm magas mellékvágású. Az állatokat az EPM-re helyezzük, és 5 percig figyeljük. A nyitott és zárt karokban eltöltött időt, és az egyes karokba való belépések teljes számát felvettük a fotobeam tömbök segítségével. A csoportok közötti statisztikai szignifikanciát egyirányú ANOVA-val határoztuk meg a lézióval, mint faktorot, amelyet Fisher LSD-tesztek követnek 95% -os konfidenciaszinten.

Perfúziók és párosodott cFosok

Az összes viselkedési tesztet követően minden férfit mélyen érzéstelenítettünk nátrium-pentobarbitollal (270mg / ml), és transzkardiálisan perfundáltuk 500 ml 4% PFA-val a sérülés-ellenőrzéshez, amint azt korábban leírtuk. Ezen túlmenően az orexin lézióknak a párosodás által indukált cFos-expresszióra gyakorolt ​​hatásának tesztelésére, az álarcok és a lézió csoportjai egy párosodásig párosultak. Egy órával az ejakuláció után a férfiakat transzkardiálisan perfundáltuk 4% PFA-val, amint azt fentebb leírtuk. Ebben a csoportban a férfiak fele nem került be egy nősténybe, és az otthoni ketrecből perfundálták, hogy nem kontrolláltak legyenek.

Immunohisztokémia

Az agyakat egy 4 párhuzamos sorozatú 35 µm koronális szakaszok fagyasztó mikrotomjával metszettük, és a fentiek szerint tároltuk. A sérülésellenőrzéshez az összes károsodási kísérletből származó hypothalamusot tartalmazó szakaszok egy sorozatát az orexinre egyetlen, fent említett, nyúl anti-orexin-A és DAB protokoll alkalmazásával jelöltük. Az egyes állatokból származó szakaszok egy sorát cFos-ra és orexinre festettük a fent leírtak szerint.

Lézióellenőrzés

Minden állatban az orexinre immunreaktív orexin neuronok számát kétoldalúan számoltuk a PFA-DMH-ban és az LHA-ban 3 szekciókban, amelyek az orexin sejtek maximális számát fejezték ki a nem műtéti kontrollokban, −2.3 mm –3.6 mm-re a bregma-tól, amint azt fentebb leírtuk. A féltekén lévő sejteket minden állatra átlagoltuk, és a csoportokat kiszámítottuk. Az orexin neuronok érintetlen / alapvonalszámának meghatározására nem sebészeti kontroll állatok (a cFos kísérletekből) kerültek meghatározásra, és az adatokat százalékos arányban fejezzük ki a nem műtéti kontroll férfiakhoz képest.ábra 2). Azoknál a férfiaknál, akiknél kevesebb volt az 20% orexin sejt, mint a nem műtéti kontroll állatokhoz, a sérülési csoportba került. Az 20-nél nagyobb, de az 80% -nál kevesebbet tartalmazó állatok részleges sérüléscsoportba tartoztak. A szabálytalan kontrollok nem változtak jelentősen az orexin sejtek számában. A véletlenszerű, részleges és teljes léziós állatok statisztikai szignifikanciáját egyirányú ANOVA és Fisher LSD teszt alkalmazásával számítottuk ki 95% konfidenciaszinten.

ábra 2 

Lézióellenőrzés. Az orexin (A) és az MCH (B) sejtek reprezentatív képei a BLANK-saporinnal befecskendezett álarcos állatokban. Reprezentatív képek, amelyek az orexin sejtek (C) elvesztését mutatják, de az ép MCH sejtek (D) orexinnel injektált sérüléses állatban ...

Lézió-specifitás

Annak ellenőrzésére, hogy az elváltozások az orexin neuronokra korlátozódtak-e, a hamis és léziós állatok egy részhalmazából (n = 20) tartozó hypothalamust tartalmazó szekciók egy sorozatát immunizáltuk melanocita-koncentráló hormon (MCH), amely egy átfedő helyet (de nem kolokalizáció) orexin neuronokkal (Broberger és munkatársai, 1998) egy nyúl-emelt antitestet alkalmazva, amely felismeri az MCH-t (nyúl anti-MCH, H-070-47; 1: 150 000, Phoenix Pharmaceuticals, Burlingame, CA) és DAB-t, amint azt korábban leírtuk. Az MCH neuronok expresszálják az ORX1-ot (Bäckberg és munkatársai, 2002) de nem ORX2 (Volgin és munkatársai, 2004), és az orexin B-szaporinnal végzett kezelés után nem szignifikánsan \ tFrederick-Duus és munkatársai, 2007). Az MCH immunreaktív sejteket két részre számoltuk állatonként két szakaszban (szégyen: n = 7; lézió n = 5), alternatív szekciókat használva az orexin neuronok esetében elemzett csoportokhoz. A sérülések nem csökkentették jelentősen az MCH neuronok számát sem PFA-DMH-ban, sem LHA-ban (Táblázat 1; 2b ábra, d; PFA-DMH: p = 0.47; LHA: p = 0.33). Továbbá a párosodás által indukált cFos-expressziót egy állatonként egy reprezentatív szakaszban számoltuk kétoldalúan (szégyen: n = 4; lézió n = 3), alternatív szekciókat használva az orexin-neuronokra vizsgáltakhoz. A sérülések nem befolyásolták a párosodás által indukált cFos-expressziót a PFA-DMH-ban vagy LHA-ban (Táblázat 1; PFA-DMH: p = 0.53; LHA: p = 0.82). Végül, az orexin sejtek számának reprezentatív szakaszai (állatok: szégyen: n = 6; lézió: n = 6) Nissl ellenszínezettek voltak cresil-ibolya alkalmazásával (5 g cresyl violet-acetát (C-5042, Sigma, St. Louis, MO), 0.5 g nátrium-acetát-trihidrát (S209, Thermo Fisher Scientific, Ottawa, Ontario, Kanada), 1L kettős desztillált víz jégecettel (AX0073-6, EMD Chemicals, Mississauga, Ontario, Kanada), pH: 3.14). A Nissl-festett neuronok számát az analízis standard területein (250 µm × 200 µm) végeztük az orexin neuronok általános helyén. A Nissl-festett neuronok száma nem különbözött a hamis és a sérült csoportok között (Táblázat 1; PFA-DMH: p = 0.23; LHA: p = 0.33).

Táblázat 1 

A sérülésspecifitás ellenőrzése: A Nissl, MCH vagy párosodott indukált cFosokhoz festett neuronok számának elemzése azt mutatta, hogy a PFA-DMH-ban vagy a PFA-DMH-ban nem mutatkozott szignifikáns veszteség az idegsejtekben, az MCH sejtekben vagy ...

Mivel az orexin hiánya kimutatta, hogy egerekben hozzájárul a narkolepsziához (Chemelli és munkatársai, 1999), kutyák (Lin és munkatársai, 1999) és az emberek (Siegel, 1999; Nishino és munkatársai, 2000; Peyron és munkatársai, 2000; Thannickal és munkatársai, 2000) az állatokat megfigyeltük, hogy biztosítsák a narcoleptikus fenotípus hiányát. Az állatokat az ebben a vizsgálatban jelentett összes viselkedési vizsgálat időtartama alatt figyeltük meg, és nem mutatták ki a narkolepszia jellemzőit.

A párosítás által indukált cFos expresszió a sérült állatokban

A cFos-immunreaktív sejtek számát a ventrális tegmentális területen (VTA; 3 × 900 µm), mPOA-ban (900 × 400 µm) az 600 szekciókban kétoldalúan vizsgáltuk állatokonként; a nukleáris accumbens (NAc) mag és a héj (400 × 600 µm) és a mediális prefrontális kéreg (mPFC) prelimbikus, infralimbic és anterior cinguláló alrégiói (600 × 800 µm alrégiónként) a kísérleti csoportok által megfigyelt vakon . A számokat átlagoltuk minden állat esetében, és kiszámítottuk a csoporteszközöket. A statisztikai szignifikanciát a szexuális élményt és károsodást mutató kétirányú ANOVA-t használtuk faktorként, amelyet Fisher-féle LSD-teszt követ, 95% -os megbízhatósági szinttel.

Eredmények

Orexin neuronok aktiválása szexuális viselkedés során

Mindkét PFA-DMH-ban (F(5,31) 63.4; p <0.001; 3a) és LHA (F(5,31) 10.4; p <0.001; 3b), szexuális élmény nélkül. Konkrétan mind a szexuálisan naiv, mind a tapasztalt állatokban a nemi viselkedés különböző paramétereit mutató férfiak összes kísérleti csoportja (érzéstelen nőstény vizsgálata, az asszonyos női szagok expozíciója, a szerelés, a behatolások vagy az ejakuláció) azonos volt a cFos indukciójával az otthonhoz képest a ketrec-kontrollok a PFA-DMH-ban aktivált orexin-sejtek nagyobb arányával (60 – 80%) szemben az LHA-val (14 – 33%), a kísérleti csoportok közötti különbségek nélkül. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az orexin neuronok aktiválódnak a stimulus nőstény expozíciója után, anélkül, hogy a szexuális teljesítmény során további aktiválódást érnének el. Ezenkívül az aktiválás nem függ a női inger ösztönző serkentésétől, mivel mind a nem-fogékony, mind a befogadó nők aktiválják a szexuálisan tapasztalt férfiakat.

ábra 3 

A PFA-DMH (A) és az LHA (B) oxxin neuronjai cFosokat fejeztek ki a naiv és tapasztalt állatokban a párzási viselkedés minden paramétere után. Rövidítések: HC, otthoni ketrec; AF: érzéstelen nő; EF, estrous női; M, Mount; IM, Intromission; E, Ejakuláció. ...

Az orexin léziók hatása

Szexuális viselkedés

Orexin léziók a szexuális viselkedés megkönnyítését eredményezték (mount latencia: F(2,47) 3.962; p = 0.034; intromission latencia: H = 9.104; p = 0.011). Az első párzási kísérlet során a léziós férfiak rövidebb késleltetést mutattak be és behatoltak, mint az álarcos állatokhoz (csatolási latencia: p = 0.03; intromission latencia: p = 0.01; 4a – b ábra) és a műtét előtti párosítási kísérlet során a latenciákhoz képest (mount latencia: p = 0.02; intromission latency: p = 0.03; adatok nem láthatók). A részleges lézióú férfiak nem különböztek szignifikánsan a hamis férfiaktól, és egyik csoport sem különbözött a műtét előtti párosítástól. A léziók és a behatolások késleltetésének hatása szexuális tapasztalatokkal gyengült, mivel nem volt különbség a csoportok között, a következő kísérletek során (4 kísérlet). 4a – b ábra). Ejakulációs késleltetések (4c), tartók száma (4d) és a behatolások (4e), valamint a kopuláció hatékonysága (4f) nem volt szignifikáns különbség a csoportok között az egyik kísérlet során vagy az egyes csoportok között az első párosítási vizsgálat és a műtét előtti vizsgálat között.

ábra 4 

Az Oxxiás léziók lerövidítették a késleltetést a szexuálisan naiv férfiakba történő beillesztéshez és intromissionáláshoz a 1 vizsgálat során. Az oxxiás elváltozások nem befolyásolták a párosodást a 4 vizsgálat során, miután a férfiak szexuális élményt szereztek. (A) A késleltetés beállítása. (B) Intromission Latency. (C) Ejakuláció ...
A kifutópálya tesztje

Az ortoxin-elváltozások nem befolyásolták a szexuális motivációt, amelyet a szexuálisan tapasztalt férfiaknál egyenes futópálya-vizsgálatban értékeltek. Két vizsgálati kísérlet során a károsodási férfiak a második vizsgálatban szignifikánsan gyorsabban fordultak elő egy estilis nőstény felé az első vizsgálathoz képest (p = 0.03; ábra 5). Ez a megnövekedett futási idő a szexuális motivációra utal (Lopez és munkatársai, 1999). A 2 vizsgálat során a részleges lézió és a hamis férfiak gyorsabban futtak egy estilis nőstény felé (p = 0.03), bár ez nem volt szignifikáns a hamis férfiaknál (p = 0.052). A csoportok egyike sem mutatott nagyobb sebességet, hogy az 2 vizsgálat alatt egy érzéstelenítő nő vagy egy férfi felé haladjon. Ezenkívül nem tapasztaltak szignifikáns különbséget a hamis, a részleges és a léziós férfiak között a sebességgel, hogy a 1 nem kísérletezhessenek, sem a 2 kísérletben, sem igazolták, hogy nincs különbség az általános aktivitásban a kifutópályán.

ábra 5 

Az ortoxin léziók nem befolyásolták a szexuális élményt a szexuális élményben. A 1 és az 2 vizsgálatok során látható, hogy a futópálya tesztjei elérik az estilis nőstényt. * jelzi, hogy az 2 vizsgálatban a nő jelentősen csökkent az idő eléréséhez ...
Szorongásszerű viselkedés

Az eddigi eredmények arra engednek következtetni, hogy a sérülések elősegíthetik a nemi állatok szexuális viselkedésének megkezdését az újdonságra és / vagy szorongásszerű viselkedésre adott válaszok hatására, amikor a férfiak egy új nővel találkoznak. Támogatásként a károsodott férfiak csökkent szorongásszerű viselkedést mutattak az EPM-en, a zárt karokban eltöltött idő csökkenésének százalékában (p = 0.012; ábra 6) és a nyitott karokon az idő növekedése (p = 0.023; ábra 6) a hamis férfiakhoz képest. A részleges elváltozásoknak nincs jelentős hatása. Ezek az adatok azt is alátámasztják, hogy a sérülés csökkenti a szorongásszerű viselkedést.

ábra 6 

Az öxxiás léziók csökkentek a szorongásszerű viselkedést a megnövelt plusz labirintusban. A zárt karokban (balra) eltöltött idő százalékos arányát csökkentettük, és a nyitott karokban (jobbra) az idő százalékát megnövelték a sérült férfiaknál. * jelentős különbséget jelez ...
cFos kifejezés

Annak megítéléséhez, hogy az endogén orexin hozzájárul-e a párosodás által indukált neuronok aktiválásához az orexin-beidegzett agyi régiókban, a párosodás által indukált cFos expresszió elemzését végeztük a VTA, NAc magban és a héjban, az mPOA-ban és az mPFC-ben. Mind a károsodásban, mind a páciensekben a párosulás jelentősen megnövelte a cFos-t az összes vizsgált agyterületen, összehasonlítva a változatlan kontrollokkal (Táblázat 2). A sérülések nem befolyásolták a neurális aktivációt, mivel az álarc és a sérülés nem különbözött az alapvonalban vagy a párosodás által indukált cFos expresszióban.

Táblázat 2 

Az indukált cFosok párosítása részleges és léziós csoportokban, összehasonlítva az azonos sérülési állapotú nem párosító kontrollokkal.

Megbeszélés

Ezek a vizsgálatok az endogén orexin szerepét vizsgálták a hím patkányok szexuális teljesítményében és motivációjában. Azt találták, hogy az orexin nem lényeges a szexuális motiváció vagy a teljesítmény szempontjából. Ehelyett az orexin neuronokat a női inger aktiválja, függetlenül a hím hormonális állapotától vagy a férfi szexuális élményétől. Ezenkívül az endogén orexin orexin sejt-specifikus léziókkal történő eltávolítása csökkentette a szorongásszerű viselkedést, és megkönnyítette a szexuális viselkedést a szexuálisan naiv férfiaknál. Így a tanulmány eredményei alátámasztják az orexin szerepét az izgalomban (de Lecea és munkatársai, 2006; Harris és Aston-Jones, 2006; Sakurai, 2007; Boutrel és munkatársai, 2009; Furlong és Carrive, 2009; Furlong és munkatársai, 2009) és szorongás (Suzuki és munkatársai, 2005; Davis és munkatársai, 2009; Li és munkatársai, 2010), de nem támogatják az orexin kritikus szerepét a szexuális motivációban vagy a teljesítményben.

Ezeknek a vizsgálatoknak az eredményei tovább tisztázzák az endogén orexin szerepét és a korábbi vizsgálatok nyilvánvaló ellentétes eredményeit, amelyek az orexin szerepét vizsgálják a férfi szexuális viselkedésben farmakológiai eszközökkel. Az exogén orexin-A-n belüli mPOA-infúzió megnövekedett szexuális izgalomhoz és jobb szexuális teljesítményhez vezetett, ami arra utal, hogy az orexin az mPOA-ban felléphet a szexuális viselkedés motivációjának és teljesítményének növelése érdekében (Gulia és munkatársai, 2003). Ezzel szemben az orexin-A ICV-infúziója gyengítette a szexuális motivációt és az izgalmat (Bai és munkatársai, 2009), míg az orexin receptor antagonistának nincs hatása a szexuális izgalomra (Bai és munkatársai, 2009), ami azt jelenti, hogy az endogén orexin nem játszik szerepet a szexuális motivációban. Végül, a szisztémás injekciók által okozott ORX1 blokád csak kismértékben rontja a kopulációs teljesítményt (Muschamp és munkatársai, 2007). Ezekből az ellentmondásos vizsgálatokból néhány következtetés vonható le. Először is, az exogén orexin-A alkalmazása befolyásolhatja a viselkedést, de az ORX1 blokád jelentős hatást nem mutat, ami az endogén orexinnek a férfi szexuális viselkedés szabályozásában való kisebb szerepére utal (Bai és munkatársai, 2009). A jelenlegi eredmények ezt a lehetőséget támogatják. Az orexin eltávolítását orexin sejt-specifikus elváltozásokkal végzett jelenlegi vizsgálatok azt mutatják, hogy az endogén orexin nem nélkülözhetetlen a szexuális motivációhoz vagy a teljesítményhez, összhangban a megfigyelésekkel. Bai és mtsai (2009). Fontos azonban megjegyezni, hogy az orexin sérüléseknek a kifutópályán a szexuális motivációra gyakorolt ​​hatásának hiánya annak a ténynek köszönhető, hogy az állatok szexuális élményt szereztek a szexuális motiváció tesztelése előtt, ezért a kifutópálya tesztében a hatás hiánya lehetett. a férfiak szexuális élményéhez. A jövőbeni kísérletek megoldhatják ezt a figyelmeztetést az orexin lézióknak a nemi férfiak szexuális motivációjára gyakorolt ​​hatásainak vizsgálatával.

Az is lehetséges, hogy a két orexin ligandum és az orexin receptorok két altípusa (ORX1 és ORX2; Sakurai és munkatársai, 1998) szabályozhatja a szexuális viselkedést ellentétes irányban. Az orexin sejtek károsodási technikáinak alkalmazásával az orexin receptorok mindkét altípusához tartozó ligandumokat (orexin-A és B) elimináltuk a jelenlegi vizsgálatban. A két receptor altípus különböző agyterületeken expresszálódik (Trivedi és munkatársai, 1998; Marcus és munkatársai, 2001), és kimutatták, hogy differenciálisan szabályozzák a cue-indukált kokainkeresés memóriáját (Smith és munkatársai, 2009). A korábbi szexuális viselkedési vizsgálatok elsősorban az orexin-A és az ORX1 szerepére összpontosítottak (lásd fentebb). Az eddig elvégzett vizsgálatokban alkalmazott orexin receptor antagonista SB334867 specifikusan az ORX1-re vonatkozik, amely nagy affinitással rendelkezik az orexin-A-val és jelentősen alacsonyabb affinitással az orexin-B-hez (Sakurai és munkatársai, 1998). Hasonlóképpen, az orexin-A-t exogén orexinként használták a korábbi vizsgálatokban (Gulia és munkatársai, 2003; Bai és munkatársai, 2009). Jövőbeli vizsgálatokra van szükség az orexin-B és az ORX2 szerepének vizsgálatára a férfi szexuális viselkedés szabályozásában.

A jelenlegi vizsgálat az orexin hosszú távú elvesztésének hatásait vizsgálta. Muschamp és mtsai. (2007) azt javasolta, hogy a kastráció után az orexin hosszú távú csökkentése a szexuális motiváció és teljesítmény csökkenését eredményezheti. Ezt a hipotézist ellentmond a jelenlegi megállapításoknak, mivel az orexin sejtes elváltozások nem csökkentették a szexuális motivációt vagy teljesítményt. Lehetséges, hogy a jelenlegi vizsgálatban a hosszú távú orexin-veszteség kompenzációs mechanizmusokat eredményezett, bár a szexuális viselkedést közvetítő áramkörben nem észleltek változást a párosodás által kiváltott neurális aktivációban. Mindazonáltal egyértelmű, hogy az orexin csökkentése vagy hiánya nem akadályozza meg a szexuális viselkedést. Ezenkívül a jelenlegi vizsgálat eredményei nem támasztják alá az orexin fő szerepét a cFos expressziójának szexuális viselkedésében történő indukciójában. Egyértelműen megállapították, hogy az orexin hozzájárul a neuronok aktiválásához a VTA-ban (Korotkova és munkatársai, 2003; Borgland és munkatársai, 2006; Narita és munkatársai, 2006; Vittoz et al., 2008). Az orexin sejtes elváltozások azonban nem blokkolták a párosodás által kiváltott neurális aktivációt a VTA-ban, vagy bármely más, jutalomhoz kapcsolódó agyi régióban, annak ellenére, hogy az orexin-immunreaktív szálak az álarcos aktivált neuronok közelében voltak. Tehát a párosulás által indukált neurális aktiváció ezekben az agyi régiókban nem függ az orexin hatásától.

A jelenlegi vizsgálat egy kissé váratlan eredménye az orexin léziók hatása a szexuális viselkedés iniciálásának megkönnyítésére szexuális naiv, de nem tapasztalt állatokban. Ez azt mutatta, hogy korrelál a szorongásszerű viselkedés csökkenésével. Ezért az orexin léziók szexuális motivációra és teljesítményre gyakorolt ​​hatásai másodlagosak lehetnek a szorongásra és az izgalomra gyakorolt ​​hatására. Valójában az előző vizsgálatok azt mutatták, hogy az orexin a szorongásban szerepet játszik az orexin-A ICV infúziójának csökkenésében az EPM nyitott karjain egerekben (Suzuki és munkatársai, 2005). Az orexin-A infúziója a hím patkányok talamuszának paraventricularis magjába csökkentette a nyitott terek kamra közepén töltött időt és az új objektumkutatás csökkenését, jelezve, hogy az orexin részt vehet a szorongásszerű viselkedés kialakulásában (Li és munkatársai, 2010). Emellett a domináns hím patkányok, amelyek fokozott kockázatot vállalnak az EPM-en, megnövekedett ORX1 mRNS szintet mutatnak az mPFC-ben (Davis és munkatársai, 2009). Azt is kimutatták, hogy az oxxin megváltoztatja a stresszre adott válaszokat.Ida és munkatársai, 1999; Ida és munkatársai, 2000), és az orexin receptorok stimulálása növeli a kortikotropin felszabadító faktor felszabadulását (Al-Barazanji és munkatársai, 2001; Singareddy és munkatársai, 2006), kortikoszteron (Ida és munkatársai, 2000; Kuru és munkatársai, 2000) és adrenokortikotrop hormon (Kuru és munkatársai, 2000). Az oxxin antagonisták jelenleg klinikai vizsgálatokban állnak az álmatlanság kezelésére, amely gyakran szorongásos zavarokkal járó rendellenesség.Sullivan és Neria, 2009), és feltételezhető, hogy az orexin antagonisták potenciálisan használhatók szorongásos rendellenességek kezelésére (\ tMathew és munkatársai, 2008). Tekintettel arra, hogy az orexin a szorongásban és az izgalomban betöltött szerepe egyre növekszik, az orexin léziók megkönnyíthetik a nemi férfiak szexuális viselkedésének megindítását azáltal, hogy csökkentik az új inger, azaz a nő bevezetésével kapcsolatos szorongásos reakciókat.

Az orexin neuronok szignifikáns aktiválódását a szexuális viselkedés és a szexuális viselkedés után mind a szexuálisan naiv, mind a tapasztalt állatokban észlelték mind a PFA-DMH-ban, mind az LHA-ban, az 60 – 80% és az 14-33% -kal az orexin sejtek esetében, amelyek expresszálnak cFos-t. Van egy olyan bizonyíték, amely támogatja az orexin neuronális funkciójának dichotómiáját az orexin sejtpopulációban, mivel a PFA-DMH kritikusan részt vesz az arousinban, és az LHA kritikus a jutalomhoz kapcsolódó magatartás szempontjából (Harris és munkatársai, 2005; Harris és Aston-Jones, 2006, Aston-Jones, 2009a). Ezért a PFA-DMH orexin sejtek aktiválása női ingerrel támogatja azt a hipotézist, hogy az orexin aktiválódik, és kritikus az arousal, beleértve a nemi és tapasztalt férfiak szexuális izgalmát, valamint a naiv férfiak új női ingerével kapcsolatos szorongás. Azonban a PFA-DMH sejteket hasonló szintre aktiváltuk, a férfiak tapasztalatától és a nőstény hormonális státuszától függetlenül, ami arra utal, hogy a PFA-DMH sejtek aktiválódtak az általános ébredés során, nem pedig kifejezetten szexuális izgalommal. Továbbá tanulmányaink nem támogatják teljes mértékben a teljesen dichotóm orexin sejtpopuláció létezését, mivel az LHA szignifikáns aktiválódása következett be a szexuális izgalom és teljesítmény minden paraméterének kitettsége után, függetlenül attól, hogy a viselkedés a jutalommal volt kapcsolatban. Tehát egy érett nősténynek kitett tapasztalt férfiak azonos szintű orexin sejt aktiválódást mutattak az LHA-ban, összehasonlítva a tapasztalt férfiakkal, akik az ejakulációval párosultak. Azonban csak az utóbbi csoport hozza létre a párosodáshoz kötött feltételes helyet.Tenk és mtsai: 2009); arra utal, hogy az ejakulációhoz való hasonlítás előnyösebb, mint a párzás más elemei. A jelenlegi tanulmány nem vizsgálta kifejezetten az orexin szerepét a szexuális jutalomban; ezért a kérdés megoldásához további tanulmányokra van szükség.

Összefoglalva, ezeknek a vizsgálatoknak az eredményei azt mutatják, hogy az orexin nem kritikus a szexuális teljesítmény vagy a motiváció szempontjából. Ehelyett az orexin sejtes elváltozások csökkentik a szorongást, ami arra utal, hogy az endogén orexin részt vesz a szorongás fokozásában. Továbbá az orexin eltávolítása megkönnyítette a szexuális viselkedést a szexuálisan naiv férfiaknál, ami arra utal, hogy az endogén orexin gátolhatja a párosodás megkezdését, esetleg az új ingerre, azaz a nőre adott szorongás növelésével. Ezek az eredmények tovább tisztázzák a szexuális teljesítményben és a szorongásban résztvevő neurális áramkört, és egyre növekvő számú irodalmat adnak az orexin szerepéről az arousal és a szorongás közvetítésében.

Köszönetnyilvánítás

Ezt a kutatást a Nemzeti Egészségügyi Intézetek (R01 DA014591), a kanadai Egészségügyi Kutatóintézetek (RN 014705) és Kanada Nemzeti Tudományos és Mérnöki Kutatási Tanácsa (Discovery Grant (341710)) támogatta.

Lábjegyzetek

Kiadói nyilatkozat: Ez egy PDF-fájl egy nem szerkesztett kéziratból, amelyet közzétételre fogadtak el. Ügyfeleink szolgálataként a kézirat korai változatát nyújtjuk. A kéziratot másolják, megírják és felülvizsgálják a kapott bizonyítékot, mielőtt a végleges idézhető formában közzéteszik. Kérjük, vegye figyelembe, hogy a gyártási folyamat során hibák észlelhetők, amelyek hatással lehetnek a tartalomra, és minden, a naplóra vonatkozó jogi nyilatkozat vonatkozik.

Referenciák

  1. Agmo A. Férfi patkány szexuális viselkedése. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Al-Barazanji KA, Wilson S, Baker J, Jessop DS, Harbuz MS. A központi orexin-A aktiválja a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese tengelyt, és a tudatos patkányokban stimulálja a hypothalamicus kortikotropin felszabadító faktort és az arginin vazopresszin neuronokat. J Neuroendocrinol. 2001; 13: 421-424. [PubMed]
  3. Aston-Jones G, Smith RJ, Moorman DE, Richardson KA. Az oldalsó hypothalamikus orexin neuronok szerepe a jutalom feldolgozásában és a függőségben. Neuropharmacology. 2009a, 56 Suppl 1: 112 – 121. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  4. Aston-Jones G, Smith RJ, Sartor GC, Moorman DE, Massi L, Tahsili-Fahadan P, Richardson KA. Oldalsó hypothalamic orexin / hypocretin neuronok: szerepe a jutalomkeresésben és a függőségben. Brain Res. 2009b; 1314: 74-90. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  5. Bai YJ, Li YH, Zheng XG, Han J, Yang XY, Sui N. Orexin A csökkenti a feltétel nélküli szexuális motivációt a hím patkányokban. Pharmacol Biochem Behav. 2009; 91: 581-589. [PubMed]
  6. Bäckberg M, Hervieu G, Wilson S, Meister B. Orexin-receptor-1 (OX-R1) immunreaktivitás a hypothalamus kémiailag azonosított neuronjaiban: az orexin célpontokra összpontosít, amelyek az élelmiszer- és vízbevitel szabályozásában részt vesznek. Eur J. Neurosci. 2002; 15: 315-328. [PubMed]
  7. Baldo BA, Daniel RA, Berridge CW, Kelley AE. Az orexin / hypocretin és dopamin-beta-hidroxiláz immunreaktív szálak átfedő eloszlása ​​patkány agyrégiókban, az arousal, motiváció és stressz közvetítésével. J Comp Neurol. 2003; 464: 220-237. [PubMed]
  8. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. A szexuális viselkedés és a nemekkel kapcsolatos környezeti jelek aktiválják a mesolimbikus rendszert hím patkányokban. Neuropsychop. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  9. Benoit SC, Tracy AL, Davis JF, Choi D, Clegg DJ. Az orexigén hipotalamikus peptidek új funkciói: a génektől a viselkedésig. Táplálás. 2008; 24: 843-847. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  10. Borgland SL, Taha SASF, Fields HL, Bonci A. Orexin A a VTA-ban kritikus a szinaptikus plaszticitás és a kokain viselkedési érzékenységének indukálásában. Idegsejt. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
  11. B, Cannella N, de Lecea L. A hypocretin szerepe az izgalom és a célorientált viselkedés vezetésében. Brain Res. 2009 [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  12. Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF, de Lecea L. A hipokretin szerepe a kokain-kereső viselkedés stressz által kiváltott visszaállításának közvetítésében. Proc Natl Acad Sci US A. 2005, 102: 19168 – 19173. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  13. Broberger C, De Lecea L, Sutcliffe JG, Hokfelt T. Hypocretin / orexin és melanin-koncentráló hormonok expresszáló sejtek különféle populációkat képeznek a rágcsáló oldalsó hipotalamuszban: kapcsolat az Y és a agopi génnel kapcsolatos fehérjék rendszerével. J Comp Neurol. 1998; 402: 460-474. [PubMed]
  14. Carter ME, Borg JS, de Lecea L. Az agy hipokretinek és receptoraik: allostatikus izgalom közvetítői. Curr Opin Pharmacol. 2009; 9: 39-45. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  15. Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, Richardson JA, Williams SC, Xiong Y, Kisanuki Y, Fitch TE, Nakazato M, Hammer RE, Saper CB, Yanagisawa M. Narcolepsy orexin knockout egerekben : Az alvásszabályozás molekuláris genetikája. Sejt. 1999; 98: 437-451. [PubMed]
  16. Chen CT, Dun SL, Kwok EH, Dun NJ, Chang JK. Orexin A-szerű immunreaktivitás a patkány agyban. Neurosci Lett. 1999; 260: 161-164. [PubMed]
  17. Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. Az orexin-A szerepe az élelmiszer-motivációban, a jutalom alapú táplálkozási viselkedésben és az élelmiszer által indukált neuronális aktivációban patkányokban. Neuroscience. 2010; 167: 11-20. [PubMed]
  18. Davis JF, Krause EG, Melhorn SJ, Sakai RR, Benoit SC. A domináns patkányok természetes kockázatvállalók, és fokozott motivációt mutatnak az élelmiszer-jutalomért. Neuroscience. 2009; 162: 23-30. [PubMed]
  19. de Lecea L, Jones BE, Boutrel B, Borgland SL, Nishino S, Bubser M, DiLeone R. Addiction és arousal: a hipotalamikus peptidek alternatív szerepei. J. Neurosci. 2006; 26 (41): 10372-10375. [PubMed]
  20. de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, Fukuhara C, Battenberg EL, Gautvik VT, Bartlett FS, 2nd, Frankel WN, van den Pol AN, Bloom FE, Gautvik KM, Sutcliffe JG. A hypocretins: hipotalamusz-specifikus peptidek, amelyek neuroexcitatory aktivitással rendelkeznek. Proc Natl Acad Sci US A. 1998, 95: 322 – 327. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  21. Dewsbury DA. A patkányok (Rattus norvegicus) kopulációs viselkedése a korábbi kopulációs tapasztalatok függvényében. Anim Behav. 1969; 17: 217-223. [PubMed]
  22. Fadel J, Deutch AY. Az orexin-dopamin kölcsönhatások anatómiai szubsztrátjai: oldalirányú hypothalamikus vetületek a ventrális tegmentális területre. Neuroscience. 2002; 111: 379-387. [PubMed]
  23. Frederick-Duus D, Guyton MF, Fadel J. Élelmiszer által kiváltott kortikális acetil-kolin felszabadulás növelése orexin-transzmissziót igényel. Neuroscience. 2007; 149: 499-507. [PubMed]
  24. A Furlong TM, a Carrive P. Neurotoxikus elváltozások, amelyek a perifornikus hipotalamuszra koncentrálnak, megszüntetik a feltételezett félelem kardiovaszkuláris és viselkedési válaszát a kontextusra, de nem korlátozzák. Brain Res. 2007; 1128: 107-119. [PubMed]
  25. A Furlong TM, Vianna DM, Liu L, Carrive P. Hypocretin / orexin hozzájárul a stressz és az izgalom néhány, de nem minden formájának kifejeződéséhez. Eur J Neurosci. 2009; 8: 1603-1614. [PubMed]
  26. Gerashchenko D, Kohls MD, Greco M, Waleh NS, Salin-Pascual R, Kilduff TS, Lappi DA, Shiromani PJ. Az oldalsó hipotalamusz Hypocretin-2-saporin-elváltozásai narkoleptikus jellegű alvási viselkedést eredményeznek a patkányokban. J Neurosci. 2001; 21: 7273-7283. [PubMed]
  27. Gulia KK, Mallick HN, Kumar VM. A mediális preopticus területen az Axx-A (hypocretin-1) alkalmazása fokozza a férfiak szexuális viselkedését patkányokban. Neuroscience. 2003; 116: 921-923. [PubMed]
  28. Hagan JJ, Leslie RA, Patel S, Evans ML, Wattam TA, Holmes S, Benham CD, Taylor SG, Routledge C, Hemmati P, Munton RP, Ashmeade TE, Shah AS, Hatcher JP, Hatcher PD, Jones DN, Smith MI Piper DC, Hunter AJ, Porter RA, Upton N. Orexin A aktiválja a lokális coeruleus sejt tüzelését és növeli az arousal-t a patkányokban. Proc Natl Acad Sci US A. 1999, 96: 10911 – 10916. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  29. Harris GC, Aston-Jones G. Arousal és jutalom: egy dichotómia az orexin függvényben. Trendek Neurosci. 2006; 29: 571-577. [PubMed]
  30. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Az oldalsó hipotalamikus orexin neuronok szerepe a jutalomkeresésben. Természet. 2005; 437 (7058): 556-559. [PubMed]
  31. Horvath TL, Peyron C, Diano S, Ivanov A, Aston-Jones G, Kilduff TS, van Den Pol AN. A locus coeruleus noradrenerg rendszer hipokretin (orexin) aktiválása és szinaptikus beidegzése. J Comp Neurol. 1999; 415: 145-159. [PubMed]
  32. Ida T, Nakahara K, Katayama T, Murakami N, Nakazato M. Az étvágy-stimuláló neuropeptid, az orexin és az Y neuropeptid oldalirányú cerebroventrikuláris injekciójának hatása a patkányok különböző viselkedési aktivitására. Brain Res. 1999; 821: 526-529. [PubMed]
  33. Ida T, Nakahara K, Murakami T, Hanada R, Nakazato M, Murakami N. Az orexin lehetséges bevonása patkányok stresszreakciójába. Biochem Biophys Res Commun. 2000; 270: 318-323. [PubMed]
  34. Korotkova TM, Sergeeva OA, Eriksson KS, Haas HL, Brown RE. A ventrális tegmentális terület gerjesztése az orexinek / hypocretins által okozott dopaminerg és nondopaminerg neuronok. J Neurosci. 2003; 23 (1): 7-11. [PubMed]
  35. Kuru M, Ueta Y, Serino R, Nakazato M, Yamamoto Y, Shibuya I, Yamashita H. A centrálisan beadott orexin / hypocretin aktiválja a HPA tengelyt patkányokban. Neuroreport. 2000; 11: 1977-1980. [PubMed]
  36. Li Y, Li S, Wei C, Wang H, Sui N, Kirouac GJ. Az orexin mikroinjekciók által okozott érzelmi viselkedés változásai a thalamus paraventricularis magjában. Pharmacol Biochem Behav. 2010; 95: 121-128. [PubMed]
  37. Lin L, Faraco J, Li R, Kadotani H, Rogers W, Lin X, Qiu X, Jong PJ, Nishino S, Mignot E. Az alvási rendellenesség kutya narkolepsziáját a hypocretin (orexin) 2 gén mutációja okozza. . Sejt. 1999; 98: 365-376. [PubMed]
  38. Lopez HH, Olster DH, Ettenberg A. Szexuális motiváció a patkányban: az elsődleges ösztönzők és a kopulációs tapasztalat szerepe. Horm Behav. 1999; 36: 176-185. [PubMed]
  39. Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, Elmquist JK. Az orexin receptorok 1 és 2 differenciális expressziója a patkány agyban. J Comp Neurol. 2001; 435: 6-25. [PubMed]
  40. Martin G, Fabre V, Siggins GR, de Lecea L. A hypocretinek kölcsönhatása a sejtmagban lévő neurotranszmitterekkel. Regul Pept. 2002; 104: 111-117. [PubMed]
  41. Mathew SJ, Ár RB, Charney DS. A szorongásos zavarok neurobiológiájában a közelmúltban elért eredmények: új terápiákra gyakorolt ​​hatások. Am. J. Med. Genet. 2008; 148C: 89-98. [PubMed]
  42. Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. A hypocretin (orexin) szerepe a férfi szexuális viselkedésben. J Neurosci. 2007; 27: 2837-2845. [PubMed]
  43. Nair SG, Golden SA, Shaham Y. A hipokretin 1 receptor antagonista SB 334867 differenciális hatásai a magas zsírtartalmú étel önadagolására és az ételkeresés visszaállítására patkányokban. Br. Pharmacol. 2008; 154: 406-416. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  44. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Az orexinerg rendszerek közvetlen bevonása a mesolimbikus dopamin út aktiválásába és a morfin által okozott hasonló viselkedésekbe. J Neurosci. 2006; 26: 398-405. [PubMed]
  45. Nishino S, Ripley B, Overeem S, Lammers GJ, Mignot E. Hypocretin (orexin) hiány a humán narkolepsziában. Lancet. 2000; 355: 39-40. [PubMed]
  46. Paxinos G, Watson C. A patkány agy sztereotaxikus koordinátákban. San Diego, CA: Academic Press; 1998.
  47. Peyron C, Faraco J, Rogers W, Ripley B, Overeem S, Charnay Y, Nevsimalova S, Aldrich M, Reynolds D, Albin R, Li R, Hungs M, Pedrazzoli M, Padigaru M, Kucherlapati M, Fan J, Maki R , Lammers GJ, Bouras C, Kucherlapati R, Nishino S, Mignot E. Mutáció a korai megjelenésű narkolepsziában és a hypocretin peptidek általánosan hiányában a humán narkoleptikus agyban. Nat Med. 2000; 6: 991-997. [PubMed]
  48. Peyron C, Tighe DK, van den Pol AN, de Lecea L, Heller HC, Sutcliffe JG, Kilduff TS. Hipocretin (orexin) projektet tartalmazó neuronok több neuronális rendszerbe. J Neurosci. 1998; 18: 9996-10015. [PubMed]
  49. Sakurai T. Az orexinek és az orexin receptorok szerepe a táplálkozási viselkedés és az energia homeosztázis központi szabályozásában. CNS Neurol Disord drogcélok. 2006; 5: 313-325. [PubMed]
  50. Sakurai T. Az orexin (hipokretin) idegi áramköre: az alvás és az ébrenlét fenntartása. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 171-181. [PubMed]
  51. Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​Williams SC, Richardson JA, Kozlowski GP, Wilson S, Arch JR, Buckingham RE, Haynes AC, Carr SA, Annan RS, McNulty DE, Liu WS , Terrett JA, Elshourbagy NA, Bergsma DJ, Yanagisawa M. Orexinek és orexin receptorok: a hipotalamusz neuropeptidek és a G-fehérjéhez kapcsolt receptorok családja, amelyek szabályozzák a táplálkozási viselkedést. Sejt. 1998; 92: 573-585. [PubMed]
  52. Satoh S, Matsumura H, Fujioka A, Nakajima T, Kanbayashi T, Nishino S, Shigeyoshi Y, Yoneda H. FOS expresszió orexin neuronokban a preopticus terület muszimol-perfúziója után. Neuroreport. 2004; 15: 1127-1131. [PubMed]
  53. Siegel JM. Narcolepszia: a hypocretins (orexins) sejt kulcsfontosságú szerepe. 1999; 98: 409-412. [PubMed]
  54. Singareddy R, Uhde T, Commissaris R. A hypocretinok különféle hatásai a zajra és a potencírozott kezdeti válaszokra. Physiol Behav. 2006; 89: 650-655. [PubMed]
  55. Smith RJ, lásd RE, Aston-Jones G. Oxxin / hypocretin jelzés az orexin 1 receptoron szabályozza a cue-kiváltott kokainkeresést. Eur J Neurosci. 2009; 30: 493-503. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  56. A Salomon A, De Fanti BA, Martinez JA. A perifériás ghrelin glükostatikus jelátvitelben kölcsönhatásba lép az orexin neuronokkal. Regul Pept. 2007; 144: 17-24. [PubMed]
  57. Sullivan GM, Neria Y. Gyógyszeres terápia poszt-traumás stressz-rendellenességben: véletlenszerűen ellenőrzött vizsgálatokból származó bizonyítékok. Curr Opin Investig Drugs. 2009; 10: 35-45. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  58. Suzuki M, Beuckmann CT, Shikata K, Ogura H, Sawai T. Orexin-A (hypocretin-1) valószínűleg részt vesz a szorongásszerű viselkedés generálásában. Brain Res. 2005; 1044: 116-121. [PubMed]
  59. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, KK kancsók, Coolen LM. Szexuális jutalom hím patkányokban: a szexuális élmény hatása az ejakulációval és a behatolásokkal kapcsolatos feltételes hely preferenciákra. Horm Behav. 2009; 55: 93-97. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  60. Thannickal TC, Moore RY, Nienhuis R, Ramanathan L, Gulyani S, Aldrich M, Cornford M, Siegel JM. Csökkentett számú hypocretin neuron humán narkolepsziában. Idegsejt. 2000; 27: 469-474. [PubMed]
  61. Thorpe AJ, Cleary JP, Levine AS, Kotz CM. A központi adagolású orexin A növeli az édes pelletek motivációját patkányokban. Pszichofarmakológia (Berl) 2005: 182: 75 – 83. [PubMed]
  62. Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Az orexin receptor mRNS eloszlása ​​a patkány agyban. FEBS Lett. 1998; 438: 71-75. [PubMed]
  63. Vittoz NM, Schmeichel B, Berridge CW. A hipokretin / orexin előnyösen a caudomedialis ventrális tegmentális terület dopamin neuronjait aktiválja. Eur J Neurosci. 2008; 28: 1629-1640. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  64. Volgin DV, Swan J, Kubin L. Egysejtes RT-PCR gén expressziója akut módon. disszociált és immunocitokémiailag azonosított központi idegsejtek. J. Neurosci módszerek. 2004; 136: 229-236. [PubMed]