Orexin-1 receptor mechanizmusok szerepe a kényszeres táplálékfogyasztásnál a nőstény patkányok étkezési módjának modelljében (2012)

Ugrás:

Absztrakt

Az orexinek (OX) és receptorai (OXR) modulálják a táplálkozást, az izgalmat, a stresszt és a kábítószerrel való visszaélést. A kábítószer-visszaélést motiváló és megerősítő idegrendszerek szintén a kényszeres élelmiszerkeresés és -felvétel alapját képezhetik. Ezért a GSK1059865 (5-bromo-N- [(2S,5S) -1- (3-fluor-2-metoxi-benzoil) -5-metil-piperidin-2-il] metil-piridin-2-amin), egy szelektív OX1R antagonista, JNJ-10397049 (N- (2,4-dibróm-fenil) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimetil-4-fenil-1,3-dioxan-5-il] karbamid), szelektív OX2R antagonista és SB-649868 (N- [((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide), a dual OX1/ÖKÖR2Az R antagonistát nőstény patkányoknál egy túlzott étkezési (BE) modellben értékelték. A nagyon ízletes élelmiszerek (HPF) BE-jét három ciklusú élelmezés-korlátozás váltotta ki, amelyet stressz követett, amelyet a patkányok HPF-nek való kitettsége váltott ki, de megakadályozta, hogy 15 percig hozzájussanak hozzájuk. Valamennyi vegyület farmakokinetikai értékelését ugyanazon kísérleti körülmények között végeztük, amelyeket a viselkedési kísérletekhez használtak. Referenciavegyületként topiramatot alkalmaztunk, mivel ez szelektíven blokkolja a BE-t patkányokban és emberekben. Az OXR-antagonisták alvást kiváltó hatásának dózisfüggő küszöbértékeit párhuzamos kísérletekben polisomnográfiásan mérjük meg. Az SB-649868 és a GSK1059865, de a JNJ-10397049 nem, szelektíven csökkentette a HPF BE-jét anélkül, hogy befolyásolta volna a szokásos élelmiszer-pellet-bevitelt, olyan adagokban, amelyek nem idéztek elő alvást. Ezek az eredmények először jelzik az OX fő szerepét1Az R mechanizmusok BE-ben, ami arra utal, hogy az OX szelektív antagonizmust mutat1R jelentheti a BE és esetleg egyéb étkezési rendellenességek új, farmakológiai kezelését kényszerkomponenssel.

Kulcsszavak: orexin-1 receptor antagonista, orexin-2 receptor antagonista, zsíros étkezés, nőstény patkányok, kényszeres ételfogyasztás

BEVEZETÉS

Az embereknél a szeszes étkezés epizódjaira jellemző a szokatlanul nagy mennyiségű, nagyon ízléses étel (HPF) kényszer, nem homeosztatikus fogyasztása rövid idő alatt. Annak ellenére, hogy nem éheznek, az alanyok a normálnál gyorsabban esznek, amíg kellemetlenül telnek. A DMS-IV-TR (Amerikai Pszichiátriai Szövetség, 2000), ezeket az epizódokat szubjektív érzés veszti el az étkezés feletti ellenőrzés elvesztéséről, és összekapcsolódnak a szorongás, undorral, depresszióval, a túlzott étkezés iránti bűntudatmal és a kínos zavar miatt egyedül eszik.

A BE a bulimia nervosa központi jellemzője, amelyben a BE epizódjait olyan viselkedés követi, amelynek célja a súlygyarapodás elkerülése, például az ön által kiváltott hányás. Az intenzív és tartós BE-epizódok tipikus jelenségeket képviselnek az étkezési rendellenességben (BED) szenvedő betegeknél is (Walsh és Devlin, 1998). A BED-re a BE ismételt epizódjai jellemzőek, ha nincs kompenzáló viselkedés a súlygyarapodás elkerülése érdekében. A DSM-IV-TR-ben a BED diagnosztikai kritériumai azt jelzik, hogy a BE epizódoknak hetente legalább 2 napokon kell fordulniuk az 6 hónapokban. A BED jelentős orvosi és pszichiátriai együttes morbiditással (Javaras et al, 2008; Grucza et al, 2007; Fassino et al, 2003). Becslések szerint a BE életének egy bizonyos idõpontjában az amerikai felnőtt népesség kb. 5% -át érinti (Foulds Mathes et al, 2009), és hozzájárul az elhízás és a kapcsolódó patológiák súlyosbításához (Hudson et al, 2007; Heath, 1998; Devlin et al, 2000; Yanovski, 2003).

Jelenlegi gyógyszerek, például a topiramát (McElroy et al, 2007; McElroy et al, 2009) vagy szibutramin (Appolinario et al, 2000; Wilfley et al, 2008), a klinikai vizsgálatok szerint csökkentették a BE-t. Azonban ezek beadása számos káros mellékhatással jár, amelyek krónikus kezelés során súlyos problémákat jelentenek (McElroy et al, 2009; kocsis et al, 2003; Yager, 2008). Különösen a szibutramint nemrégiben vonták ki az európai piacról, míg a topiramát jól ismert kognitív káros tulajdonságairól. Komoly mellékhatások nélküli innovatív kezelésekre van szükség a bulimia nervosa és a BED kezelésére.

Az 1998-ban két csoport egymástól függetlenül azonosította a hipotalamusz magjából származó neuropeptidek új osztályát (Sakurai et al, 1998; de Lecea et al, 1998). Ezeket az orexin-A (OXA) és orexin-B (OXB) elnevezésű peptideket (amelyek szintén 1 és hypocretin 2 jelöléssel vannak megjelölve) az elő-OX peptid proteolitikus feldolgozásával állítják elő, és két GPCR-hez, nevezetesen OX- 1 és OX-2 receptorok (OX1R és OX2R) (HcrtR1 és HcrtR2 néven is jelölve). ÖKÖR1R kapcsolódik a Gq / 11-hez, míg az idegsejteket használó vizsgálatok azt sugallják, hogy az OX2R kapcsolódik Gq, Gs és Gi proteinekhez. A központi idegrendszerben OX1R és OX2R részlegesen átfedő, de nagymértékben megkülönböztetett és egymást kiegészítő eloszlási mintákat mutat (Sakurai, 2007). Az agyterületek, mint például az infralimbikus kéreg, a hippokampusz és a locus coeruleus, magas OX expressziót mutatnak1R, míg az OX2R az egyetlen receptor, amely az ívelt magban, a tuberomamilláris magban és a dorsomedialis és laterális hypothalamusban (LH) expresszálódik. Mindkét receptor jelen van a prefrontalis kéregben, az amygdalaban, a stria terminalis ágymagjában, a paraventricularis thalamicusmagban, a dorsalis raphe-ban, a ventrális tegmental területben (VTA) és a laterodorszális tegmental magban - peduncolo pontine magban (Lu et al, 2000; Marcus et al, 2001; Trivedi et al, 1998). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az OX-k és receptorai valószínűleg széles körű szabályozó szerepet játszanak a központi idegrendszerben.

Az ébrenléti / alvásállapot fiziológiája azon területek egyike, ahol az OX-ek szerepét vizsgálták a legszélesebb körben. Valójában, az OX jelátvitel megszakítása a prepro-OX knockout egerekben olyan fenotípust eredményezett, amelynek tulajdonságai rendkívül hasonlóak a narkolepsziában szenvedő betegek jellemzőihez, egy krónikus rendellenességhez, amelyet túlzott álmosság jellemez, amely nagyon súlyos alvási bénulással, hypnagogikus hallucinációkkal és kataplexival járhat. (Chemelli et al, 1999). A túlzott álmosság úgy tűnik, hogy a meghosszabbított ébrenlét fenntartásának képtelenek.

Sőt, mindkét OX egyidejű antagonizmusa1R és OX2R vagy az OX szelektív gátlása2R erős hipnotikus hatás indukálását eredményezi (Brisbare-Roch et al, 2007; Dugovic et al, 2009; Di Fabio et al, 2011).

A szakirodalomban szereplő adatok alátámasztják az OX rendszer szerepét az etetés viselkedésében, mind a homeosztatikus, mind a jutalom alapú táplálékfelvétel szabályozásában. A narkolepsziás fenotípus bemutatása mellett az OX knockout egerek szintén hipofágiak, összehasonlítva a súly és az életkor szerinti alomtársakkal, jelezve, hogy az OX szerepet játszik a táplálkozás és az energia metabolizmus modulálásában (Willie et al, 2001). Az OXA befecskendezése a patkányok laterális kamrájába a korai fényfázisban a táplálékfelvétel dózisfüggő növekedését váltotta ki a patkányokban (Sakurai et al, 1998), amelyet az OX előkezeléssel blokkoltak1R antagonista SB-334867 (Haynes et al, 2000; Rodgers et al, 2001). Az OX - ok szerepe a jutalmalapú táplálékfelvételben egy nemrégiben készült, a Perello et al (2010), amely azt mutatja, hogy a magas zsírtartalmú étrend juttató értékének ghrelin által indukált növekedése OX-függő; emellett arról számoltak be, hogy az SB-334867 gátolja a magas zsírtartalmú étel önbeadását (Nair et al, 2008). Az OX aktiválása1Az R az élelmiszerrel megerősített reagálás, a motiváció vagy mindkettő szükséges eleme (Sharf et al, 2010). Ezen túlmenően az LH OX idegsejteket olyan élelmezéses haszonnal járó jelzések aktiválják, mint például az étel (Harris et al, 2005), amely felveti az OX rendszer potenciális szerepét a takarmányozás kognitív szempontjaihoz kapcsolódó külső környezeti útmutatásokra adott válaszként.

A legfrissebb jelentések támogatják az OX jelátvitel szerepét a visszaélések kábítószerének neuro-viselkedési és motivációs hatásaiban (Harris et al, 2005; Borgland et al, 2006; Jupp et al, 2011; a felülvizsgálathoz lásd: Bonci és Borgland, 2009; Martin-Fardon et al, 2010). Így az OX blokádja1R csökkenti az etanolt (Lawrence et al, 2006) és a nikotin önbeadása (hollandi et al, 2008) gátolja az etanol (cue) által kiváltott visszaállításátLawrence et al, 2006), kokain- (Kovács et al, 2010) és a morfinkeresés (Harris et al, 2005), és enyhíti a stressz által kiváltott kokain (Boutrel et al, 2005) és etanol-kereső (Richards et al, 2008). Sőt, a legfrissebb bizonyítékok összekapcsolták az OX-et is2R szelektív mechanizmusok az alkohol jutalmazására és a kereső viselkedésre (Shoblock et al, 2011).

Egyre több bizonyíték van arra, hogy bizonyos ételek túlzott mértékű bevitele meghatározott körülmények között olyan viselkedést és olyan változásokat okoz az agyban, amelyek függőségi állapothoz hasonlóak (Arany et al, 2003; Kenny, 2011; Pelchat et al, 2004; Avena et al, 2008; Ifland et al, 2009; Gearhardt et al, 2011a). A kábítószer-visszaélést motiváló és megerősítő idegrendszereket szintén javasolták a kényszeres élelmezés-kereséssel és -fogyasztással kapcsolatos viselkedés alátámasztására (Johnson és Kenny, 2010; Hoebel, 1985; Volkow és Wise, 2005; Corwin et al, 2011; Gearhardt et al, 2011b; Wang et al, 2011). Ezek az eredmények felveti a kérdést, hogy az OX-rendszer szerepet játszhat-e az étkezési rendellenességekben is, amelyeket kompultivus rohamok típusú epizódok jellemeznek, mint például a bulimia nervosa és a BED.

Ezért ennek a tanulmánynak a célja a kettős OX hatásainak vizsgálata volt1/ÖKÖR2R antagonista SB-649868 (N-[((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide) (Di Fabio et al, 2011), a szelektív OX1R antagonista GSK1059865 (5-bróm-N- [(2S,5S)-1-(3-fluoro-2-methoxybenzoyl)-5-methylpiperidin-2-yl]methyl-pyridin-2-amine) (Gozzi et al, 2011) és a szelektív OX2R antagonista JNJ-10397049 (N- (2,4-dibróm-fenil) -N'- [(4S,5S) -2,2-dimetil-4-fenil-1,3-dioxán-5-il] karbamid) (McAtee et al, 2004; Dugovic et al, 2009) a BE által leírt BE modellben Cifani et al (2009), amelyben a HPF BE-epizódjait nőstény patkányokban táplálkozási korlátozás / újratáplálás és akut stressz váltja ki. Először a három antagonistát értékelték in vitro patkány rekombináns OX-ban1R és OX2R, hogy meghatározzuk hatékonyságukat és szelektivitásukat a két receptor altípus tekintetében. Ezután farmakokinetikájukat (PK-k) értékelték, és alvó patkánymodellben meghatározták a hipnotikus hatásokat kiváltó dózisokat. Végül a vegyületeket a BE modellben meghatározott dózisokban teszteltük.

ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Állatok

Minden állatkísérletet az állatok jólétét és védelmét szabályozó 86/609 / EGK európai irányelvnek megfelelően hajtottak végre, amelyet az olasz sz. Törvényerejű rendelet is elismer. 116., 27. január 1992., és a GlaxoSmithKline Állatkutatási és Etikai Bizottság (CARE) belső felülvizsgálata és a vállalat laboratóriumi állatok gondozására és felhasználására vonatkozó politikája szerint.

Kábítószer

SB-649868 (Di Fabio et al, 2011), GSK1059865 (Gozzi et al, 2011) és JNJ-10397049 (McAtee et al, 2004) GSK laboratóriumokban szintetizálták. Az OXA-t a California Peptides Research (katalógusszám: 471-99, Kalifornia) szállította. Myo- [1,2-3H(N)] inozitolt (NET-906, fajlagos aktivitás: 51 Ci / mol) és ittrium-szilikát RNS-kötő gyöngyöket (RPNQ0013) a Perkin-Elmer cégtől (Olaszország) vásároltunk. A topiramatot (Topamax; Janssen-Cilag) a Janssen-Cilag cégtől vásároltuk. Tablettákban kapható, amelyeket az alkalmazás előtt porrá redukáltak.

1. Kísérlet: Az SB-649868, JNJ-10397049 és GSK1059865 antagonizmusa a patkány OX-ban1R és patkány OX2R

Sejttenyészet

Patkány basophil leukémiás sejtek, amelyeket stabilan transzfektáltunk patkány OX-del1R (rOX1R) vagy patkány OX2R (rOX2R) α-MEM-ben (Invitrogen / GIBCO) tenyésztettük 10% magzati szarvasmarha szérummal (FBS, PAA), 100 U / ml penicillin G-vel, 100 U / ml sztreptomicinnel (Pen / Strep; Invitrogen / GIBCO) és 400 μg / ml geneticin (Invitrogen / GIBCO), 37 ° C-on, 5% CO-val2 nedvesített légkörben.

Felhalmozódása3H] inozit-foszfátok (IP-k)

Felhalmozódása3A H] inozit-foszfátokat (IP) korábban leírtak szerint mértük (Megsuhogtat et al, 2003) a következő módosításokkal. Az sejtvonalak stabilan expresszálják az rOX-t1R vagy rOX2R-t 96-lyukú szövettenyésztő lemezekre beoltottuk 3 × 10-on4 sejtekenként lyukonként és 1.5 × 104 lyukakonként sejteket, illetve α-MEM-ben, kiegészítve 10% FBS-sel és Pen / Strep-kel genetikai nélkül. Az 24 h után a tápközeget beszívottuk, és 100 μl friss tápközeget, kiegészítve 10 μCi / ml NET-906-sel (Perkin-Elmer), adtunk a sejtekhez; így lyukonként radioaktívan jelölt inozit 1 μCi-t használtunk. Az 16 h inkubáció után a sejteket kétszer mossuk vizsgálati pufferrel (1 × HBSS, 20 mM HEPES (pH 7.4), plusz 0.1% szarvasmarha szérum albumin és 10 mM LiCl), mielőtt agonistákat vagy antagonistákat adunk hozzá. Az antagonistákat 30 percig inkubáltuk 37 ° C-on, mielőtt az agonistával stimuláltuk. Az OXA 0.0001-től 10 μM-ig terjedő koncentráció-válasz görbéit (CRC) végeztük. Az 1 órás 37 ° C hőmérsékleten történő inkubálás után a vizsgálati puffert beszívottuk, 80 μl-t adtunk 0.1 M jéghideg hangyasav lyukonként, és a sejteket hagytuk 30 percig inkubálni szobahőmérsékleten. 20 μl méretű sejtkivonatot adtunk az 80 μl ittrium-szilikát gyöngyökhöz (YSi SPA; Perkin-Elmer; 12.5 mg / ml), szobahőmérsékleten 1 h-re ráztuk, és 4 ° C-on hagytuk 2 h előtt. számítva egy Packard Top-Count NXT mikrolemez szcintillációs számlálón.

Az adatokat a maximális agonista válasz% -ában fejeztük ki, az alábbiak szerint számítva:% maximális agonista válasz = ((cpmantagonista-cpmalapvető) / CPMmaxagonistresponse-cpmalapvető) × 100.

In-vitro adatelemzés

A CRC-ket szigmoid nemlineáris regressziós elemzéssel illesztettük be a GraphPad Prism 5.0 szoftver (GraphPad Software, San Diego, CA) alkalmazásával, hogy agonista EC-t kapjunk50 (agonista koncentráció szükséges a maximális válasz 50% -ának eléréséhez).

Az erő (KB= a nem áthatolhatatlan antagonisták antagonista disszociációs állandója) a nem versenyképes antagonizmus operációs modell egyenletének alkalmazásával (Kenakin et al, 2006). A KB a leküzdhető antagonisták értékét Schild elemzésével számoltuk (Arunlakshana és Schild, 1959). Az SB-649868 esetében csak az antagonista IC50 kiszámításra került. Ábrázoltuk az 1 μM OXA által kiváltott választ négy különböző antagonista koncentráció hiányában és jelenlétében. IC50 "antagonista koncentráció": az agonista által kiváltott reakció 50% -os gátlásához szükséges antagonista koncentráció. Az eredményeket pEC-ben fejezzük ki50 (-log10 EC50)KB (-log10 KB) vagy PIC50 (-log10 IC50), és legalább három független kísérlet átlagaként ± SEM vagy átlagként adják meg az 95% konfidencia határokkal (95% CL). Az összes vizsgált gyógyszert feloldottuk dimetil-szulfoxidban (DMSO) és tovább hígítottuk a vizsgálati pufferben, hogy a végső DMSO-koncentráció nem haladja meg az 0.5% -ot.

2 kísérlet: A PK meghatározása hím és nőstény patkányokban

A PK vérnek kitett alvás- és BE-vizsgálatokhoz a vegyületek PK-profilját elemezték hím és nőstény patkányokban, azonos alvási és BE kísérletekben. A PK profilokat az 3 mg / kg SB-649868 adagolásával nőstény és hím patkányokon, 10 mg / kg nőstény patkányon és 5 mg / kg intraperitoneális adagolást a hím patkányokon és JNJ-10397049 adagolást követően végeztük. nőstény patkányok és intraperitoneális adagolás hím patkányokban, 10 mg / kg GSK1059865. A vérmintákat a combcsontból vették be az adagolást követő 4 h intervallumokban. Az agymintákat a kísérlet végén vettük. Az SB-649868, JNJ-10397049 és GSK1059865 koncentrációját a vér- és agymintákban protein kicsapáson alapuló módszerrel határoztuk meg, amelyet HPLC-MS / MS elemzés követ. A nem kompartmenciális PK paramétereket a vérkoncentráció-idő profilokból nyertük a WinNonlin v.4.0 szoftvercsomag segítségével (Pharsight, Mountain View, CA). A PK-paramétereket átlag ± SD (Olvassa el és Braggio, 2010).

3 kísérlet: Az SB-649868, JNJ-10397049 és a GSK1059865 hatása a patkány alvásmodellre

Állatok

A hím Sprague – Dawley patkányokat (275 – 300 g; Charles River, Calco, Como, Olaszország) külön-külön 12-h fény-sötét cikluson helyeztük el (világítás bekapcsolva az 0300 h) 1 héttel a műtét előtt. Megengedett az ételekhez és a vízhez való hozzáférés ad libitum. A biopotenciális jelek gyűjtéséhez egy miniatűr többcsatornás telemetrikus adókészüléket (TL10M3-F40-EET; Data Sciences Int.) Implantáltak intraperitoneálisan az állatokba. Két elektródot fogászati ​​cementtel tartósan rögzítettek a koponyához, hogy rögzítsék a kortikális elektroencephalogramot (EEG). Közvetlenül kapcsolatba voltak a dura mater két fúrt lyukon keresztül a fronto-parietális régióban. Két másik elektródot rögzítettek a nyaki csontvázizmokhoz az elektromiogram (EMG) felvételéhez vagy a szem periorbitális régiójában az elektrokultogram (EOG) rögzítéséhez.

Felvétel

A műtét utáni gyógyulást követően az állatokat otthoni ketrecükben szabályozott hőmérsékleten tartottuk (21 ± 1 ° C), élelemhez és vízhez hozzáférve ad libitum. Az implantált állatok normál viselkedési repertoárját mutatták közvetlenül a műtét utáni gyógyulás után. Ahhoz azonban, hogy lehetővé váljon a normál alvási szokások helyreállítása, az állatokat 3-hetes időszak után használtuk fel. A fent leírt környezeti feltételeket az alvási vizsgálatok során fenntartottuk. A teszt időtartama alatt a szabadon mozgó állatok házi ketrecükben maradtak az egyes vevőkön. Az EEG és az EMG, illetve az EOG jeleket folyamatosan rögzítettük a DSI Dataquest ART segítségével. Az EEG nyomkövetést, amely 10-korszakokra oszlik, digitálisan transzformáltuk (FFT transzformáció), hogy a δ, θ, αés β sávok, amelyek megkülönböztetik a három különböző aktivitási mintát patkányban (ébren, NREM alvás és REM alvás). Az automatizált pontozási rendszer által kiosztott markereket (alvó fokozat, DSI) az EEG digitális jelre vitték át, majd az EEG és EMG / EOG nyomok vizuális vizsgálatával megerősítették képzett operátorok által, akik a gyógyszeres kezeléstől vakok voltak. Az alvásparaméterek elemzése magában foglalta: az NREM alváshoz szükséges késleltetés (az injektálás utáni első hat egymást követő NREM alvási korszak közötti időintervallum), a REM alváshoz szükséges késés (az injekció utáni első REM alvási korszak közötti időtartam), NREM alvás, REM alvás és összesen alvási idő.

Kábítószer-kezelés

A gyógyszeres kezeléseket randomizált, párosított keresztezési terv szerint végeztük, ahol külön kísérleti szakaszokban minden állat hordozóval vagy droggal kezeltük. A patkányokat kísérleti vegyülettel vagy annak megfelelő vivőanyagával kezeltük 2 ml / kg térfogatban, 6 h a fény kikapcsolása után (Circadian idő (CT) 18). Felvételeket készítettünk a következő 3-h tesztperiódusra. Az SB-649868-et desztillált vízben oldottuk 0.5% HPMC-ben (hidroxi-propil-metil-cellulóz) (tömeg / térfogat), és szétválasztással adtuk be 3 és 10 mg / kg dózisban. A JNJ-10397049-et feloldottuk a 812N mygliolban, és intraperitoneálisan adtuk be 5 és 25 mg / kg dózisokban. A GSK1059865-et feloldottuk 0.5% HPMC (tömeg / térfogat) desztillált vízben, és intraperitoneálisan adtuk be 5 és 25 mg / kg dózisokban.

Az adatok elemzése

Az összes adatot középérték ± SEM-ben fejezzük ki. Az eredményeket egyirányú varianciaanalízissel (ANOVA) elemeztük. A post-hoc az összehasonlításokat Dunnett tesztjével végeztük. Statisztikai szignifikanciát P

4 kísérlet: Zsíros étkezés

Állatok

Nőstény Sprague – Dawley patkányokat (Charles River) használtunk. A testtömegük a kísérletek elején 225 – 250 g volt. A patkányokat egyéni ketrecekbe akklimatizáltuk egy 12-h világos / sötét ciklus alatt (világítás bekapcsolva az 0800 órakor) ad libitum chow és víz 2 héten a kísérletek előtt. Egy állandó hőmérsékletű (20 – 22 ° C) és páratartalmú (45 – 55%) helyiségben tartottuk őket. A patkányokat fém falakkal ellátott egyedi ketrecekben tartottuk; a padló és az elülső fal fémből készült. A ketrec padlójának méretei 30 cm × 30 cm; a ketrec 30 cm magas volt. A ketrec elülső falában fémrácsból álló bejárati ajtó (30 cm × 20 cm) volt a helyén, hogy hozzáférjen a ketrec belsejébe. Az elülső fal fennmaradó részét ivóbürettel felszerelték.

Diéta

Az állatoknak standard patkányeledel pelletteket, 4RF18 (Mucedola; Settimo Milanese, Milánó, Olaszország; 2.6 kcal / g) kínáltak. A HPF egy paszta, amelyet Nutella (Ferrero, Alba, Torino, Olaszország) csokoládékrém (5.33 kcal / g; 56%, 31% és 7% szénhidrátból, zsírból és proteinből) összekeverésével készítettek, őrölt élelmiszerpelletet ( 4RF18; Mucedola; Settimo Milanese) és víz a következő tömeg / tömeg% arányban: 52% Nutella, 33% élelmiszerpelletek és 15% víz. A HPF-étrend kalóriatartalma 3.63 kcal / g volt. Szabványos pellettet kínáltak egy fém rácsos tartályban, amelyet a ketrec elülső falára lógtak; eltávolítottuk a ketrecből, hogy meghatározzuk a súlyát az élelmiszerpellet bevitelének meghatározása céljából. A HPF-t egy kávéscsészében kínálták; a csésze fogantyúját beillesztették a ketrec elülső falának fémrácsába, és a falhoz rögzítették.

A stressz eljárás

Az 15 min alatt a HPF-t tartalmazó kínai kávéscsésze egy fém rácsos tartályba került, amelyet a ketrec elülső falára tettek. Ilyen körülmények között az állat látta azt a csészét, amelyben HPF-t kapott az első két ciklus 5, 6, 13 és 14 napján, képes volt látni magát a HPF-et, és meg is szagolni a szagát. Ebben az 15-perc időszakban a patkány az elülső láb, a fej és a csomagtartó ismételt mozgatásával foglalkozott a HPF megszerzése céljából, de nem tudta elérni.

Ez enyhén stresszes állapotot okozott, amely a szérum kortikoszteron szintjének jelentős növekedését okozza (Cifani et al, 2009). Az 15 perc elteltével a csészét a stresszcsoportokba tartozó patkányok ketrecébe helyeztük, hogy a HPF hozzáférhetővé váljon számukra.

Kábítószer-kezelés

Az 25 napon a vegyületeket vagy a megfelelő vivőanyagot adtuk a HPF-hez való hozzáférés előtt. Az SB-649868-et desztillált vízben oldottuk 0.5% HPMC (tömeg / térfogat) elegyben, és mágneses adagolással adtuk be 1 és 3 mg / kg dózisokban. A topiramatot feloldottuk desztillált vízben lévő 0.5% HPMC (tömeg / térfogat) elegyben, és mágneses adagolással adtuk be az 60 mg / kg dózisban. A JNJ-10397049-et desztillált vízben oldottuk 0.5% HPMC (tömeg / térfogat) elegyben, és intraperitoneálisan adtuk be 1 és 3 mg / kg dózisokban. A GSK1059865-et feloldottuk desztillált vízben lévő 0.5% HPMC (tömeg / térfogat) elegyben, és mágneses adagolással adtuk be az 10 és 30 mg / kg dózisokban. Valamennyi gyógyszert vagy azok vivőanyagát 1 h-vel adták be a HPF-hez való hozzáférés előtt.

4A kísérlet: Az SB-649868 és a topiramate hatása

Az OXR-antagonisták BE-ben betöltött szerepének értékeléséhez a nem-szelektív OXR-antagonistákat, az SB-649868-et teszteltük BE modellünkben.

Az állatokat négy 27 állatcsoportra osztottuk, a testtömeg és a napi táplálékfelvétel szempontjából egyeztetve: (1) nem korlátozott és stressznek nem kitett csoport (NR + NS); (2) a korlátozott és nem kitett stressz (R + NS) csoport; (3) nem korlátozott és stressznek kitett csoport (NR + S); és (4) a korlátozott és stressznek kitett (R + S) csoport. Miután bekerítették a fenti csoportok egyikébe, a patkányok abban a csoportban maradtak a vizsgálat során. A stressznek kitett patkányokat egy olyan helyiségben akklimatizálták, amely eltér a stressznek nem kitett csoportoktól. A patkányokat három egymást követő 8-napi ciklusnak tesszük ki, amelyet az 25 napon végzett utolsó teszt követ (Táblázat 1):

Táblázat 1 

Az ütemterv elfogadva a szélsőséges étkezéshez
  1. az NR + NS csoport volt ad libitum 4 napokon, az 5 és 6 napokon chow + HPF-et kaptak 2 h; az 7. és az 8. napon Chow-t kaptak ad libitum; és az 25 napon a stressz nem volt kitéve;
  2. a második csoportban chow és HPF NR + NS volt, de a teszt napján (25. nap) stressznek voltak kitéve (NR + S);
  3. a harmadik csoport (R + NS) a normál bevitel 66% -ára korlátozta a chow-ot az 4 napokon, chow és HPF (2 h) -ot kínálták az 5 és 6 napokon, és csak az 7 és 8 napokon tálaltak; Az 25 napon a stressz nem volt kitéve.
  4. az R + S csoport az 66 napokon a normál bevitel 4% -ára korlátozta a chow-t, chow-t és HPF-et (2 h) kínált nekik az 5 és az 6 napon, és csak az 7 és az 8. és az 25 napon stressznek voltak kitéve.

Az 8-napos ciklust háromszor megismételtük, de a harmadik ciklusban az állatok nem jutottak hozzá a HPF táplálékhoz.

Az 25 napon az 27 patkányok mindegyik csoportját három alcsoportra osztottuk, és vivőanyaggal, SB-649868, 1 vagy 3 mg / kg adaggal kezeltük, az 1 h támadásával, a HPF-hez való hozzáférés előtt.

A HPF-bevitelt átlag kcal / kg-ban, lenyelve, ± SEM-ben fejeztük ki; A HPF bevitelt 15, 30, 60 és 120 percenként mértük a hozzáférés megkezdése után. Az élelmiszerpellet bevitelét csak az 120 percnél mértük, mivel a korábbi vizsgálatok azt mutatták, hogy az élelmiszerpellet bevitel nagyon kicsi volt, és hogy elkerüljék az állatok zavarását a teszt során.

Topiramát, amelyet referenciavegyületként használtak ebben a kísérleti paradigmában (Cifani et al, 2009) ugyanazon patkányokban 10-vel teszteltük, az SB-649868 kísérlet befejezése után. Ezen 108 állatok közül az 72-et ugyanazon négy csoportba osztottuk (az egyes csoportok 18 állatainál), amelyeket korábban ismertettünk. Az első vizsgálat végén eltelt egy nap után ezek a patkánycsoportok további 8-napi ciklust kaptak: az NR + NS és az NR + S csoportoknak 8 napja volt a chow ad libitum, míg az R + NS és az R + S csoportok esetében az 4 nap chow a normál bevitel 66% -ára korlátozódott, amelyet a chow 4 napjai követtek ad libitum. Ebben a kiegészítő ciklusban minden csoportnak nem volt hozzáférése a HPF-hez. Másnap az NR + S és R + S csoportok stressznek vannak kitéve, míg az NR + NS és R + NS csoportok nem. Ezen a napon a topiramátot (60 mg / kg) vagy hordozóját az 1 h hétig történő beadása előtt adták be a HPF-hez való hozzáférés előtt.

4B. Kísérlet: A JNJ-10397049 és a GSK1059865 hatása

A BE epizódok csökkentésében részt vevő OXR vizsgálatához a szelektív OX2R antagonista, JNJ-10397049 és a szelektív OX1Az R antagonistát, a GSK1059865-et BE modellünkben teszteltük.

További 54 nőstény patkányokat, két csoportba osztva (NR + NS és R + S) az 27 patkányokon, ugyanazon kísérleti eljárásnak vetettük alá, mint a 4A kísérletben. Csak két patkánycsoportot használtunk ebben a kísérletben, mivel az NR + S és az R + NS patkányok sem mutatnak BE-t. A teszt napján (25. Nap), 1 h, a HPF-hez való hozzáférés előtt, a patkányokat intraperitoneálisan kezeltük JNJ-10397049 (1 és 3 mg / kg) vagy annak vivőanyagával.

A JNJ-10397049 teszt végén eltelt egy nap után ugyanaz a patkánycsoport kapott további 8 napos ciklust, amelyet az 10 napon követtek (az előző kísérletben leírtak szerint) GSK1059865 kezeléssel. A GSK1059865-et (10 és 30 mg / kg) vagy annak hordozóját az 1 h héjmosással adták be, mielőtt a HPF-hez hozzáfértek.

Az adatok elemzése

Az összes adatot középérték ± SEM formájában fejezzük ki, és minden érték tükrözi az állatok csoportonkénti átlagos számát, a legendákban leírtak szerint. Az adatokat kétirányú ANOVA segítségével elemeztük a kísérleti csoportok vagy a gyógyszeres kezelések alanyai közötti összehasonlításával, és a megfigyelés ideje szempontjából az alanyok összehasonlításával. A post-hoc az összehasonlításokat a Bonferroni teszttel végeztük. A statisztikai szignifikancia a következő volt: P

EREDMÉNYEK

1 kísérlet: Az SB-649868, JNJ-10397049 és a GSK1059865 antagonizmusa az rOX-on1R és rOX2R

Az OXA (0.1 nM – 10 μM) növelte a [3H] Az IP-k felhalmozódása koncentrációfüggő módon egy pEC-vel50 7.79 értéke ± 0.04 (n= 16) és 7.68 ± 0.04 (n= 16) az rOX-on1R és rOX2R, ill. Az rOX-on1R, JNJ-10397049 (1 μM – 33 μM; 1a) és GSK1059865 (0.3 nM – 10 nM; 2a) nem áthatolhatatlan antagonizmust eredményezett az OXA EC dózisfüggő jobb oldali eltolódásával50 és az agonista maximális válasz egyidejű csökkenése. A számított pKB az értékek 5.73 ± 0.16 (n= 3) és 8.77 ± 0.12 (n= 3) a JNJ-10397049 és a GSK1059865 esetében. SB-649868 (0.1, 0.3, 0.6 és 1 nM) (3a) az OXA maximális válaszának szignifikáns csökkenését eredményezte az agonista EC eltolódása nélkül50. A becsült PIC50 érték 9.46 ± 0.02 (n= 3). Az rOX-on2R JNJ-10397049 (10 nM – 0.3 μM) (1b) és GSK1059865 (0.1 – 3.3 μM) (2b) egy klasszikus, áthidalható profilt készített az OXA EC párhuzamos jobbra tolásával50 az agonista maximális válaszának depressziója nélkül. A Schild regressziós analízisével kapott meredekségek 1.17 (95% CL 0.92–1.42) és 0.86 (95% CL 0.71–1.00) voltak a JNJ-10397049 és a GSK1059865 esetében, és statisztikailag nem különböztek egytől (P> 0.05). A lejtőket egyre kényszerítve a pKB az értékek 8.49 voltak (95% CL 8.34 – 8.63; n= 3) és 6.90 (95% CL 6.80 – 6.99; n= 3) a JNJ-10397049 és a GSK1059865 esetében. SB-649868 (0.1 – 3.3 nM) (3b) az OXA EC dózisfüggő jobb oldali eltolódását hozta létre50, amelyet az agonista maximális válasz csökkenése kísér. Az operatív modell alkalmazásával a nem versenyképes antagonizmus elemzéséhez, amelyet az Anyagok és módszerek, pKB 9.35 értéke ± 0.15 (n= 3).

ábra 1 

[3H] inozit-foszfátok (IP) felhalmozódása, amelyet az orexin-A (OXA) koncentráció-válasz görbék (CRC) vált ki (•) patkány basophil leukémia (RBL) sejtekben, amelyek expresszálják: patkány OX-t1R (rOX1R) (a) 1 (Δ), 3.3 (▾), 10 jelenlétében ...
ábra 2 

[3H] inozit-foszfátok (IP) felhalmozódása, amelyet az orexin-A (OXA) koncentráció-válasz görbék (CRC) vált ki (•) patkány basophil leukémia (RBL) sejtekben, amelyek expresszálják: rOX-ot1R (a) 0.3 (▴), 1 (▾), 3.3 (♦) jelenlétében ...
ábra 3 

[3H] inozit-foszfátok (IP) felhalmozódása, amelyet az orexin-A (OXA) koncentráció-válasz görbék (CRC) vált ki (•) patkány basophil leukémia (RBL) sejtekben, amelyek expresszálják: patkány rOX-ot1R (rOX1R) (a) 0.1 (□), 0.3 (Δ) jelenlétében, ...

2 kísérlet: A PK meghatározása hím és nőstény patkányokban

A hím patkányok PK-meghatározásait ugyanolyan kísérleti körülmények között vizsgálták, mint az 3 kísérlet, és ezeket a Táblázat 2.

Táblázat 2 

Az SB-649868, JNJ-10397049 és GSK1059865 farmakokinetikai paraméterei hím Sprague – Dawley patkányokban

Cmax mg / kg 649868 SB-3 mennyisége 333 ± 52 ng / ml és AUC 1260 ± 262 ng*h / ml.

Cmax mg JNJ-10397049 koncentrációja 5 ± 14.2 ng / ml és AUC 1.0 ± 64 ng*h / ml.

Cmax mg / kg mennyiségű GSK1059865 mennyisége 10 ± 366 ng / ml és AUC 70 ± 1290 ng*h / ml.

A nőstény patkányok PK-meghatározásait ugyanolyan kísérleti körülmények között vizsgálták, mint az 4 kísérlet, és ezeket a Táblázat 3.

Táblázat 3 

Az SB-649868, JNJ-10397049 és GSK1059865 farmakokinetikai paraméterei a nőstény Sprague – Dawley patkányokban

Cmax mg / kg 649868 SB-3 mennyisége 572 ± 115 ng / ml és AUC 1708 ± 331 ng*h / ml.

Cmax mg JNJ-10397049 koncentrációja 10 ± 369 ng / ml és AUC 97 ± 457 ng*h / ml.

Cmax mg / kg mennyiségű GSK1059865 mennyisége 10 ± 268 ng / ml és AUC 29 ± 768 ng*h / ml.

3 kísérlet: Az SB-649868, JNJ-10397049 és a GSK1059865 hatása a patkány alvásmodellre

Az OXR antagonisták hipnotikus profilját egy patkány aktív fázisában egy 3-h időszak alatt értékeltük, a felvételi fázist a patkány világos-sötét ciklusának CT 18-jén kezdve (világít a CT 12-nál). A CT 18-et kifejezetten azért választottuk, hogy a vegyületek hipnotikus hatásainak maximális felmérése lehetővé tegye a maximális ablakot.

Ilyen kísérleti körülmények között a kettős OX1/ÖKÖR2Az SB-649868 R antagonista (3 és 10 mg / kg, szétválasztással) az ébrenlét robusztus csökkenését váltotta ki (F (2, 21) = 22.9; P<0.01), és csökken az alvási késés (F (2, 21) = 9.11; P<0.01) a kontroll csoporthoz képest. Az ANOVA utáni Dunnett-teszt statisztikailag szignifikáns hatást mutatott 3 és 10 mg / kg (P<0.01) mindkét alvási paraméterben. Az alvási minták elemzése mind az NREM, mind a REM alvás növekedését jelzi mindkét dózisnál (4a táblázat).

4a táblázat 

Az SB-649868 (a Gavage által) hatása patkányok alvási paramétereire

A szelektív OX2Az R antagonista JNJ-10397049 (5 és 25 mg / kg, intraperitoneálisan) hipnotikus hatást mutatott, amelyet az ébrenlét csökkenése mutat (F (2, 14) = 18.8; P<0.01) és az alvás késleltetése (F (2, 14) = 4.8; P<0.05). Az ANOVA utáni Dunnett-teszt azt mutatta, hogy a csökkenés statisztikailag szignifikáns volt mind az 5, mind a 25 mg / kg dózisnál (P<0.01 az ébrenlét és P<0.05 az alvási késésnél). Az NREM alvás növekedését figyelték meg mindkét adagnál (P<0.01), de semmilyen hatást nem figyeltek meg a REM alvásra (4b táblázat).

4b táblázat 

A JNJ-10397049 (ip) hatása patkányok alvási paramétereire

A szelektív OX1Az R antagonista GSK1059865 (5 és 25 mg / kg, intraperitoneálisan) tendenciát mutatott az ébrenlét csökkentése felé (F (2, 14) = 3.27; P<0.05) és az alvás késleltetése (F (2, 20) = 1.73; P> 0.05). Az alvási szokások elemzése csak az NREM alvás növekedését mutatta, statisztikailag szignifikánsan a legmagasabb tesztelt dózisnálP<0.05 Dunnett-teszt az ANOVA után); semmilyen hatást nem figyeltek meg a REM alvásban (4c táblázat).

4c táblázat 

A GSK1059865 (ip) hatása patkányok alvási paramétereire

Kísérlet az 4A-val. BE: Az SB-649868 és a topiramate hatása

Az ANOVA rendkívül szignifikáns különbséget mutatott az 2-h HPF-bevitelben a patkányok négy csoportjában a vivőanyag beadását követően (F (3, 32) = 13.81; P<0.01). Ahogy látható ábra 4, a vivőanyag beadását követően az R + S csoportban a HPF bevitel jelentősen magasabb volt, mint a kontroll (NR + NS) csoporté. Az R + S patkányok HPF-bevétele nagyon kifejezett volt a hozzáférés első 15 percében; Az NR + S csoport HPF-bevitele nem különbözött szignifikánsan a kontrollok adataitól (NR + NS), jelezve, hogy a stressz nem volt elegendő a BE indukálásához. Ezenkívül az R + NS csoport HPF-bevitele nem különbözött szignifikánsan a kontrollokétól (NR + NS), jelezve, hogy az étel-korlátozási ciklusok nem elegendőek a BE indukálásához. Ezért a BE-t a diéta és a stressz egyedülálló kölcsönhatása okozhatja.

ábra 4 

Az SB-649868 (1 és 3 mg / kg, szétzúzással) vagy hordozójának hatása a nagyon ízletes ételek (HPF) bevitelére. Az értékeket kilenc patkány átlag ± SEM-ben fejezik ki. **P<0.01, különbség a vivőanyaggal kezelt patkányoktól; ahol nincs feltüntetve, ...

A standard élelmiszer-pellet bevitel nagyon alacsony volt (az 3 h tesztben az összes kalóriabevitel kb. 4 – 2% -a), és nem befolyásolta sem az ételek korlátozása, a stressz, sem a kettő kombinációja.

Ahogy látható ábra 4, SB-649868 szignifikánsan csökkentette a HPF bevitelét az R + S csoportban (F (2, 24) = 18.63; P<0.01), de a többi csoportba nem: NR + NS (F (2, 24) = 0.91; P> 0.05); R + NS (F (2, 24) = 0.16; P> 0.05); NR + S (F (2, 24) = 1.1; P> 0.05). A post-hoc Az összehasonlítások azt mutatták, hogy az SB-649868 hatása az R + S csoportban statisztikailag szignifikáns volt minden idõpontban az 3 legmagasabb mg / kg dózisára adott válaszként. Az 1 mg / kg dózisa az R + S csoportban a csökkenés tendenciáját mutatta, amely nem volt statisztikailag szignifikáns.

A topiramát teszt rendkívül szignifikáns különbséget tárt fel az 2-h HPF bevitelben (F (3, 32) = 3.93; P<0.01) a különböző csoportokból a vivőanyag beadását követően. A 60 mg / kg szelektivitással adagolt topiramát csökkentette a HPF bevitelét (F (1, 16) = 6.57; P<0.01) az R + S csoportban (ábra 5), de nem az NR + NS, NR + S és R + NS csoportokban. Az NR + S és az R + NS csoport adatai nem jelennek meg.

ábra 5 

A topiramát (60 mg / kg, szoptatás útján) vagy hordozójának hatása a nagyon ízletes ételek (HPF) bevitelére. Az értékeket kilenc patkány átlag ± SEM-ben fejezik ki. *P<0.05, különbség a vivőanyaggal kezelt patkányoktól; ahol nincs feltüntetve, a különbség ...

Kísérlet 4B. BE: A JNJ-10397049 és a GSK1059865 hatása

Az előző kísérlethez hasonlóan az ANOVA megerősítette, hogy az R + S csoportban a HPF bevitel jelentős növekedést mutatott (F (1, 16) = 16.17; P<0.01). A JNJ-10397049 sem befolyásolta a táplálkozást az NR + NS csoportban (F (2, 26) = 0.23; P> 0.05) vagy az R + S csoportban (F (2, 24) = 0.49; P> 0.05) (6a).

ábra 6 

A JNJ-10397049 (1 és 3 mg / kg, intraperitoneálisan) (a) vagy a GSK1059865 (10 és 30 mg / kg, szúrás közben) hatása (b) a nagyon ízletes ételek (HPF) bevitelére. Az értékeket kilenc patkány átlag ± SEM-ben fejezik ki. *P<0.05, különbség ...

A kapott eredmények azt mutatják, hogy az OX2Az R antagonizmus nem befolyásolta a táplálkozási viselkedést. Ennélfogva az SB-649868 korábban megfigyelt hatása feltehetően az OX-en keresztül zajlott1R mechanizmusok. A megállapítás megerősítéséhez a szelektív OX1A GSK1059865 R antagonistát (10 és 30 mg / kg) teszteltük. Az ANOVA szignifikáns különbséget mutatott a csoportok között a vivőanyag kezelésére reagálva (F (1, 16) = 17.1; P<0.01), megerősítve a BE hatást az R + S csoportban. A GSK1059865 (10 és 30 mg / kg dózisban) nem befolyásolta az etetést az NR + NS csoportban (F (2, 24) = 0.10; P> 0.05). Az R + S csoportban az ANOVA szignifikáns hatást mutatott (F (2, 23) = 4.20, P<0.05) (6b). A post-hoc Az összehasonlítások azt mutatták, hogy a GSK1059865 hatása az R + S csoportban az 10 és 30 mg / kg dózisokban statisztikailag szignifikáns volt az 15, 30 és 60 percnél, miután a HPF-hez szabadon hozzáfértek.

VITA

Számos bizonyíték arra utal, hogy a diéta, a stressz és a negatív érzelmi állapotok a BE lehetséges kiváltó okait jelentik a BED-ben vagy a bulimia nervosa-ban szenvedő betegekben (Wardle et al, 2000; Freeman és Gil, 2004). Valójában, a diétás időszakok gyakoriak a rohamok evőinek történetében, bár az éhség önmagában nem tűnik elegendőnek ahhoz, hogy stressz és negatív érzelmi állapot hiányában beindítsák a BE-t (Polivy et al, 1994; Waters et al, 2001). Figyelemre méltó bizonyítékok arra utalnak, hogy a BE-t a diéta és a stressz egyedülálló kölcsönhatása okozhatja; így a környezeti stressz és a ciklikus élelmiszer-korlátozások múltja okozhatja a csapadékot és a fenntartást (Stice et al, 2001; Crowther et al, 2001; Wolff et al, 2000). Ennek megfelelően az ismétlődő élelmezéskorlátozások következetesen a legerősebb előrejelzője a stressz hatására fellépő túladagolásnak (Wardle et al, 2000).

A diéta és a stressz kombinációja szintén fontos szerepet játszik a BE preklinikai modellünk kialakulásában. A. Által kifejlesztett modellben Cifani et al (2009), A BE-t yo-yo diéta és stresszes HPF-expozíció váltja ki. Ebben a modellben a nőstény patkányokat ismételt restrikciós ciklusoknak és olyan stresszes eljárásnak teszik ki, amelyet az állatok HPF-nek való kitettsége jellemez, anélkül, hogy ehhez hozzáférnének.

Amint a bevezetésben kijelentettük, az OX mechanizmusok szerepet játszanak mind a homeosztatikus, mind a jutalom alapú táplálkozás ellenőrzésében, valamint a visszaélés elleni drogok motivációjában (Bonci és Borgland, 2009). Annak az elképzelésnek megfelelően, hogy a kábítószer-visszaélést motiváló és megerősítő idegrendszerek alapját képezhetik az élelmiszerkereséssel és -fogyasztással kapcsolatos viselkedés is (Gearhardt et al, 2011b), ez a tanulmány az OXR antagonista képességét vizsgálta a BE epizódok blokkolására és az OX szerepének felmérésére1 és OX2 mechanizmusok a BE epizódok kezelésében.

Ezért három vegyületről számoltak be az irodalomban, hogy szelektivitása eltérő vs OX1 és OX2 humán receptorokat teszteltük: a kettős OX-t1/ÖKÖR2R antagonista (SB-649868), a szelektív OX2R antagonista (JNJ-10397049) és a szelektív OX1R antagonista (GSK1059865). A farmakológiai szempontból releváns dózisok alkalmazásával először megvizsgálták a három OXR antagonistát in vitro patkány rekombináns OX-ban1R és OX2R, hogy meghatározzuk a hatékonyságot és megerősítsük szelektivitásukat ezen állatfajon. A különböző OX1/ÖKÖR2Az R szelektivitást patkányokban igazoltuk [3H] inozitol assay.

Az alvás- és BE-vizsgálatok alátámasztására a PK-vér expozíciójának értékelésére a vegyületek PK-profilját elemezték hím és nőstény patkányokban, mivel ezek voltak a nem és az alváskísérletek során alkalmazott nem.

Ezután alvó patkánymodellben meghatározzuk a hipnotikus hatásokat kiváltó dózisokat. Végül a vegyületeket a BE modellben meghatározott dózisokban teszteltük.

OX1R és OX2Az irodalomban közlik, hogy az R antagonisták részt vesznek az alvás szabályozásában, különös tekintettel hipnotikus hatások kiváltására (Di Fabio et al, 2011; Gozzi et al, 2011; Dugovic et al, 2009). Preklinikai hipnotikus alvási modellben hím patkányokban a kapott eredmények azt mutatták, hogy a kettős OX1/ÖKÖR2Az R antagonista, az SB-649868, erőteljes hipnotikus hatást váltott ki, mind az alvás indukálására, mind a fenntartására, és statisztikailag szignifikáns hatást ért el az 3 mg / kg adag mellett. Hasonló az SB-649868-hez, az OX-hez2A JNJ-10397049 R antagonista jó hipnotikus hatást mutatott, mivel az ébren töltött idő jelentősen csökkentette az 5 mg / kg adagot. Éppen ellenkezőleg, az OX1Az R antagonista, a GSK1059865 nagyon alacsony hipnotikus képességet mutatott az alvás kiváltására és fenntartására. Ezek az eredmények összhangban állnak az OX-re utaló egyéb jelentésekkel2Az R fontosabb lehet, mint az OX1R az OX hatás alvás közbeni közvetítésében (Sakurai, 2007; Brisbare-Roch et al, 2007; Malherbe et al, 2009; Dugovic et al, 2009; Di Fabio et al, 2011).

Az SB-649868, amelyet a stressz és az étel korlátozásának négy különböző körülményében (NR + NS, R + NS, NR + S, R + S) teszteltünk, csak az R + S csoportban volt képes csökkenteni a HPF bevitelt. Az 3 mg / kg adagnál az SB-649868 hasonló hatású volt, mint a topiramát esetében. A topiramáthoz hasonlóan az SB-649868 sem változtatta meg a HPF bevitelét az ételek korlátozásának és stresszének egyéb körülményei között.

Az OX2Az ugyanazon körülmények között tesztelt JNJ-10397049 R antagonista nem mutatott semmilyen hatást a HPF bevitelre mind a négy vizsgált körülmény között.

Ezek az eredmények világosan jelzik, hogy az OX1R részt vesz a BE epizódok kontrolljában, és felvetette az OX potenciális szerepét1R antagonisták a stressz és a korlátozott étrend által kiváltott BE-epizódok megfordításához. E hipotézis igazolására a szelektív OX1A GSK1059865 R antagonistát korlátozott és stresszes állatokban értékelték. A kapott eredmények megerősítették, hogy az OX1Az R antagonisták gátolták a HPF bevitel növekedését az R + S patkányokban, anélkül, hogy befolyásolták volna a kontroll táplálékfelvételét (NR + NS).

A JNJ-10397049 hatásának hiánya nem tulajdonítható a BE modellbe bevont állatok elégtelen vegyület-expozíciójának. A JNJ-10397049 PK értékelése nemi különbséget mutatott, a nőstényeknél jobban ki vannak téve a hím patkányoknak, ugyanabban a JNJ-10397049 dózisban (10 mg / kg). A becsült AUC-értékek 64 ng voltak*h / ml hím patkányokban vs 457 ng*h / ml nőstény patkányokban (körülbelül hétszer magasabb). Ezért arra a következtetésre jutott, hogy az állati expozíciók a BE modellben 1 és 3 mg / kg JNJ-10397049 koncentrációkkal jóval meghaladták az alvási vizsgálatban az 5 és 25 mg / kg adagokban kapott expozíciókat. Másrészt nem figyeltek meg nemi különbségeket mind az SB-649868, mind a GSK1059865 PK-ban, és a két vegyület expozíciója átfedésben volt hím és nőstény patkányokban.

Amint azt a bevezetésben kifejtettük, a stressz a BE egyik meghatározó tényezõje. Az elmúlt évtizedben számos adatkészletet készítettek, amelyek alátámasztják az OX peptidek szerepét a nagy izgalmi állapotokban, ideértve a stresszt is, amelyek utóbbi lényegesen magasabb OXerg neurotranszmisszióval társulnak. A perifornikus – dorsomedialis hipotalamusz OX idegsejtjeit javasolták a stressz aktiválásának közvetítésére (Harris és Aston-Jones, 2006, áttekintésért lásd Koob, 2008). Lehetséges, hogy ebből a hipotalamusz területről származó OXA aktiválja a CRF-t expresszáló idegsejteket a hipotalamusz paraventricularis magjában és az amygdala központi magjában (Sakamoto et al, 2004). Ennek megfelelően az OX1Az R antagonisták gátolják az etanol és a szacharóz keresletének visszaállítását, amelyet a yohimbin farmakológiai stresszor (Richards et al, 2008) és az OXA visszaállítja a kokain-kereső magatartást (Boutrel et al, 2005). Mostanában, Kuwaki (2011) megállapította, hogy az OX rendszer az autonóm funkciókat és az érzelmi viselkedést irányító idegáramkörök egyik alapvető modulátora. Korábbi megállapításai Johnson et al (2010) megmutatta, hogy a szelektív OX1Az SB334867 R antagonista enyhítette a szorongásos viselkedést, és gátolta a mozgás, a pulzusszám és a vérnyomás válaszok növekedését, amelyet patkányokban a nátrium-laktát-provokáció vált ki.

Számos tanulmány arra utal, hogy a striatális dopamin (DA) megváltozott szabályozása létezhet bulimia nervosa és BED betegekben (Bello és Hajnal, 2010; Broft et al, 2011; Wang et al, 2011). Hoebel és munkatársainak tanulmányai (áttekintésért lásd: Avena és Bocarsly, 2011) olyan változásokat tártak fel, amelyek a striatális DA felszabadulásában és a receptorok kötődésében mutatkoztak, hasonlóan azokhoz, amelyeket a visszaélés elleni gyógyszerekre adott válaszként észleltek. Az LH-ban termelődő neuropeptidek modulálhatják a VTA – DA és a striatális neuronok aktivitását. Az OX-tartalmú neuronok az LH-tól a VTA-ig terjednek, ahol az OX1Az R kulcsszerepet játszik a mezolimbikus DA átvitel, valamint a különféle kábítószer- és élelmezési szerek jutalmazó tulajdonságainak szabályozásában (Cason et al, 2010; Uramura et al, 2001; Zheng et al, 2007). Ezenkívül a BE epizódok a HPF jutalmazási és megerősítési folyamatainak speciális befolyásolásával szabályozhatók. Ebben a tekintetben érdekes megjegyezni, hogy az LH OX idegsejtjeit javasolták a jutalom aktiválásának közvetítésére (áttekintésért lásd: Koob, 2008). Tehát azt javasoljuk, hogy az LH OX idegsejtjeit olyan juttatások aktiválják, mint például a táplálék vagy a gyógyszerek, és az LH OX idegsejtjeinek stimulálása visszaállítja a patkányokban keresett gyógyszereket (Harris et al, 2005).

Csoportunk nemrégiben egy preklinikai MRI megközelítéssel bizonyította, hogy az OX1R helyett OX2R szelektíven modulálja a mezolimbikus agyi régiót és az izolátum kérgi részét, a jutalmazásban részt vevő területeket (Gozzi et al, 2011). Ezek az adatok megerősítik és kiterjesztik az OX korábbi megállapításait1R szerepet játszik a jutalom feldolgozásában és a kábítószer-kereső magatartás kiváltásában (Boutrel et al, 2005; Lawrence et al, 2006; hollandi et al, 2008; Kovács et al, 2010). Ezért további munkára van szükség annak értékeléséhez, hogy az OX kiváltja-e a BE-t elnyomó hatást1Az R antagonisták összefüggenek a stresszre, a jutalmazási mechanizmusokra, vagy mindkettőre gyakorolt ​​hatásukkal.

Összegezve: a tanulmány eredményei három OXR antagonista felhasználásával készültek, amelyek szelektivitása eltérő az OX vonatkozásában1R vs OX2R egyértelműen bemutatta az OXR eltérő szerepét a BE epizódok kontrolljában és az alvás modulálásában. Adataink megerősítették az OX fő szerepét2R mechanizmusok alvásvezérlésben. Ezen felül először mutatják be, hogy az OX1Az R mechanizmusok nagy szerepet játszanak a BE epizódok kontrollálásában. Ezek az eredmények arra engednek következtetni, hogy az OX-t célozzák meg1R jelenthet érdekes új farmakológiai megközelítést a BE-vel kapcsolatos rendellenességek kezelésében.

Köszönetnyilvánítás

Köszönjük Dr. Charles Pickens-nek a kézirat stílusos javítását.

Megjegyzések

Az EM-P a GSK teljes munkaidős alkalmazottja.

Referenciák

  • American Psychiatric Association. Mentális rendellenességek diagnosztikai és statisztikai kézikönyve, IV-TR. Amerikai Pszichiátriai Szövetség: Washington, DC; 2000.
  • Appolinario JC, Godoy-Matos A, Fontenelle LF, Carraro L, Cabral M, Vieira A és mtsai. A sibutramin nyílt vizsgálata elhízott, étkezési rendellenességben szenvedő betegeknél. J Clin Psychiatry. 2000; 63: 8-30. [PubMed]
  • Arunlakshana O, Schild HO. A gyógyszer antagonisták néhány mennyiségi felhasználása. Br J Pharmacol Chemother. 1959; 14: 48-58. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME. 2011D az agyi jutalmazási rendszerek szabályozása az étkezési rendellenességekben: a zsíros étkezés, a bulimia nervosa és az anorexia nervosa Neuropharmacologye-pub állati modelljeinek idegkémiai információi az 27 november 2011 nyomtatása előtt. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Bizonyíték a cukorbetegségről: az időszakos, túlzott cukorbevitel viselkedési és neurokémiai hatásai. Neurosci Biobehav Rev. 2008: 32: 20 – 39. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Bello NT, Hajnal A. Dopamin és a túlzott étkezési magatartás. Pharmacol Bioichem Behav. 2010; 97: 25-33. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Bonci A, Borgland S. Az orexin / hypocretin és CRF szerepe a gyógyszerfüggő szinaptikus plaszticitás kialakulásában a mezolimbikus rendszerben. Neuropharmacology. 2009; 56: 107-111. [PubMed]
  • Borgland SL, Taha SA, Sarti F, HL mezők, Bonci A. A VTA-ban az Orexin A kritikus jelentőségű a szinaptikus plaszticitás és a viselkedéshez való kokain-szenzibilizáció indukciója szempontjából. Idegsejt. 2006; 49: 589-601. [PubMed]
  • B butrel, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF és mtsai. A hipokretin szerepe a kokain-kereső viselkedés stressz által kiváltott visszaállításának közvetítésében. Proc Natl Acad Sci USA. 2005; 102: 19168-19173. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Brandish PE, Hill LA, Zheng W, Scolnick EM. Az inozitol-foszfátok szcintillációs közelségi vizsgálata sejtkivonatokban: a G-fehérjéhez kapcsolt receptor aktiválásának nagy áteresztőképességének mérése. Anal Biochem. 2003; 313: 311-318. [PubMed]
  • Brisbare-Roch C, Dingemanse J., Koberstein R., Hoever P, Aissaoui H, Flores S és munkatársai. Az alvás elősegítése patkányok, kutyák és emberek orexin rendszerének megcélzása révén. Nat Med. 2007; 13: 50-155. [PubMed]
  • Broft AI, Berner LA, Martinez D., Walsh BT. Bulimia nervosa és a striatális dopamin rendellenesség bizonyítéka: fogalmi áttekintés. Physiol Behav. 2011; 104: 122-127. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Carter WP, Hudson JI, Lalonde JK, Pindyck L, Mcelroy SL, HG pápa, Jr. A túlzott étkezési rendellenességek farmakológiai kezelése. Int J Eat Disord. 2003; 34 (Kellék: S74 – S88. [PubMed]
  • AM Cason, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Az orexin / hypocretin szerepe jutalomkeresésben és függőségben: az elhízás következményei. Physiol Behav. 2010; 100: 419-428. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, et al. Narkolepszia orexin knockout egerekben: az alvásszabályozás molekuláris genetikája. Sejt. 1999; 98: 437-451. [PubMed]
  • Cifani C, Polidori C, Melotto S, Ciccocioppo R, Massi MA. A testtömeg-étkezés preklinikai modellje, amelyet yo-yo diéta és stresszes stressz kitettség vált ki: a szibutramin, fluoxetin, topiramát és midazolám hatása. Psychopharmacology. 2009; 204: 113-125. [PubMed]
  • Corwin R, Avena NM, Boggiano MM. Érzés és jutalom: a harapós étkezés három patkányának perspektívája. Physiol Behav. 2011; 104: 87-97. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Crowther JH, Sanftner J, Bonifazi DZ, KL juhász. A napi gondok szerepe a túlzott étkezésben. Int J Eat Disord. 2001; 29: 449-454. [PubMed]
  • de Lecea L., Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, et al. A hypocretin-k: hipotalamusz-specifikus peptidek, amelyek neuroexcitator aktivitással rendelkeznek. Proc Natl Acad Sci USA. 1998; 95: 322-327. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Devlin MJ, Yanovski SZ, Wilson GT. Elhízás: a mentálhigiénés szakembereknek tudniuk kell. Am J Pszichiátria. 2000; 157: 854-866. [PubMed]
  • Di Fabio R, Pellacani A, Faedo S, Roth A, Piccoli L, Gerrard P és munkatársai. Alvási rendellenességek kezelésére használható új kettős 1 és orexin 2 receptor antagonista felfedezési folyamata és farmakológiai jellemzése. Biorg Med Chem Lett. 2011; 21: 5562-5567. [PubMed]
  • Dugovic C, Shelton JE, Aluisio LE, Fraser IC, Jiang X, Sutton SW, et al. Az orexin-1 receptorok blokkolása enyhíti az orexin-2 receptor antagonizmus által indukált alvásfokozást patkányokban. J Pharmacol Exp Ther. 2009; 330: 142-151. [PubMed]
  • Fassino S, Leombruni P, Pierò A, Abbate-Daga G, Giacomo Rovera G. Mood, étkezési hozzáállás és harag az elhízott nőkben, akiknek étkezési rendellenessége van és anélkül. J Psychosom Res. 2003; 54: 559-566. [PubMed]
  • Foulds Mathes W, Brownley KA, Mo X, Bulik CM. A túlzott étkezés biológiája. Étvágy. 2009; 52: 545-553. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Freeman LM, Gil KM. Napi stressz, megküzdés és étkezési visszafogás a túlzott étkezés során. Int J Eat Disord. 2004; 36: 204-212. [PubMed]
  • Gearhardt AN, Corbin WR, Brownell KD. Élelmiszer-függőség: a függőség diagnosztikai kritériumainak vizsgálata. J Addict Med. 2011a; 3: 1-7. [PubMed]
  • Gearhardt AN, Yokum S, Orr PT, Stice E, Corbin WR, Brownell KD. Az élelmiszerfüggőség idegi korrelációja. Arch pszichiátria. 2011b; 68: 808-816. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Arany MS, Frost-Pineda K, Jacobs WS. Túlmelegedés, túlzott étkezés és étkezési rendellenességek mint függőség. Psychiatr Ann. 2003; 33: 112-116.
  • Gozzi A, Turrini G, Piccoli L, Massagrande M, Amantini D., Antolini M, et al. A funkcionális mágneses rezonancia képalkotás különböző neurális szubsztrátokat tár fel az orexin-1 és az orexin-2 receptor antagonisták hatásaira. PLoS One. 2011; 6: e16406. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Grucza RA, Przybeck TR, Cloninger CR. A túlzott étkezési rendellenességek prevalenciája és összefüggései egy közösségi mintában. Compr Pszichiátria. 2007; 48: 124-131. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Harris GC, Aston-Jones G. Arousal és jutalom: egy dichotómia az orexin függvényben. Trendek Neurosci. 2006; 29: 571-577. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Az oldalsó hipotalamikus orexin neuronok szerepe a jutalomkeresésben. Természet. 2005; 437: 556-559. [PubMed]
  • Haynes AC, Jackson B., Chapman H, Tadayyon M, Johns A, Porter RA és munkatársai. A szelektív orexin-1 receptor antagonista csökkenti az ételfogyasztást hím és nőstény patkányokban. Regul Pept. 2000; 96: 45-51. [PubMed]
  • Heath AC. Binge-evés és bulimia: genetikai járványtani vizsgálatok révén lehetséges betekintés az etiológiába és a patofiziológiába. Biol Psychiatry. 1998; 44: 1208-1209. [PubMed]
  • Hoebel BG. Agyi neurotranszmitterek táplálék- és gyógyszerjutalomban. Am J Clin Nutr. 1985; 42 (Kellék: 1133 – 1150. [PubMed]
  • Hollander JA, Lu Q, Cameron MD, Kamenecka TM, Kenny PJ. Az izolált hypocretin átvitel szabályozza a nikotin jutalmat. Proc Natl Acad Sci USA. 2008; 105: 19480-19485. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Hudson JI, Hiripi E, HG pápa, Jr, Kessler RC. Az étkezési rendellenességek prevalenciája és összefüggései a nemzeti komorbiditási felmérés replikációjában. Biol Psychiatry. 2007; 61: 348-358. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Ifland JR, Preuss HG, Marcus MT, Rourke KM, Taylor WC, Burau K, et al. Finomított élelmiszer-függőség: klasszikus anyaghasználati zavar. Med hipotézisek. 2009; 72: 518-526. [PubMed]
  • Kenakin T, Jenkinson S, Watson C. A leküzdhetetlen antagonisták hatékonyságának és molekuláris hatásmechanizmusának meghatározása. J Pharmacol Exp Ther. 2006; 319: 710-723. [PubMed]
  • Kenny PJ. Az elhízás és a drogfüggőség általános celluláris és molekuláris mechanizmusai. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 638-651. [PubMed]
  • Koob GF. Az agyi stressz rendszer szerepe a függőségben. Idegsejt. 2008; 59: 11-34. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Kuwaki T. Orexin az érzelmi stresszt az autonóm funkciókhoz kapcsolja. Auton Neurosci. 2011; 161: 20-27. [PubMed]
  • Javaras KN, HG pápa, Lalonde JK, Roberts JL, Nillni YI, Laird NM, et al. A túl sok étkezési rendellenesség együttes előfordulása pszichiátriai és orvosi rendellenességekkel. J Clin Psychiatry. 2008; 269: 266-273. [PubMed]
  • Johnson PL, Truitt W, Fitz SD, Minick PE, Dietrich A, Sanghani S. et al. Az orexin kulcsszerepe a pánik szorongásban. Nat Med. 2010; 16: 111-115. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Johnson PM, Kenny PJ. Dopamin D2 receptorok függőség-szerű jutalmi diszfunkcióban és kényszeres étkezésben az elhízott patkányokban. Nat Neurosci. 2010; 13: 635-641. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Jupp B, Krivdic B, Krstew E, Lawrence AJ. Az orexin1 receptor antagonista SB-334867 eloszlatja az alkohol és a szacharóz motivációs tulajdonságait patkányokban. Brain Res. 2011; 1391: 54-59. [PubMed]
  • Lawrence AJ, Cowen MS, Yang HJ, Chen F, Oldfield B. Az orexin rendszer szabályozza az alkoholkeresést patkányokban. Br J Pharmacol. 2006; 148: 752-759. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Lu XY, Bagnol D., Burke S, Akil H, Watson SJ. Az OX1 és az OX2 orexin / hypocretin receptor messenger RNS differenciális eloszlása ​​és szabályozása az agyban éheztetéskor. Horm Behav. 2000; 37: 335-344. [PubMed]
  • Malherbe P, Borroni E, Pinard E, Wettstein JG, Knoflach F. Az almorexant, a kettős orexin 1 receptor (OX1) / orexin 2 receptor (OX2) antagonista biokémiai és elektrofiziológiai jellemzése: összehasonlítás a szelektív OX1 és antagonistákkal. Mol Pharmacol. 2; 2009: 76-618. [PubMed]
  • Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, et al. Az 1 és 2 orexin receptorok differenciális expressziója a patkány agyában. J Comp Neurol. 2001; 435: 6-25. [PubMed]
  • Martin-Fardon R, Zorrilla EP, Ciccocioppo R, Weiss F. Az agyi stressz és az izgalmi rendszerek veleszületett és gyógyszer-indukált rendellenességeinek szerepe függőségben: összpontosítás a kortikotropint felszabadító faktorra, a nociceptin / orfanin FQ-ra és az orexin / hipokretinre. Brain Res. 2010; 1314: 145-161. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • McAtee LC, Sutton SW, Rudolph DA, Li X, Aluisio LE, Phuong VK és munkatársai. Új szubsztituált 4-fenil- [1,3] dioxánok: erős és szelektív orexin receptor 2 (OX2R) antagonisták. Bioorg Med Chem Lett. 2004; 14: 4225-4229. [PubMed]
  • McElroy SL, Guerdjikova AI, Martens B, Keck PE, Jr, HG pápa, Hudson JI. Az epilepsziás gyógyszerek szerepe az étkezési rendellenességek kezelésében. Központi idegrendszeri gyógyszerek. 2009; 23: 139-156. [PubMed]
  • McElroy SL, Hudson JI, Capece JA, Beyers K, Fisher AC, Rosenthal NR. Topiramát az elhízással kapcsolatos túlzott étkezési rendellenességek kezelésére: placebo-kontrollos vizsgálat. Biol Psychiatry. 2007; 61: 1039-1048. [PubMed]
  • Nair SG, Golden SA, Shaham Y. A hipokretin 1 receptor antagonista SB 334867 differenciális hatásai a magas zsírtartalmú étel önadagolására és az ételkeresés visszaállítására patkányokban. Br. Pharmacol. 2008; 154: 406-416. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Pelchat ML, Johnson A, Chan R, Valdez J, Ragland JD. A vágy képei: étel-vágy aktiválás az fMRI során. NeuroImage. 2004; 23: 1486-1493. [PubMed]
  • Perello M., Sakata I., Birnbaum S., Chuang JC, Osborne-Lawrence S, Rovinsky SA és mtsai. A Ghrelin az orexinfüggő módon növeli a magas zsírtartalmú étrend jutalomértékét. Biol Psych. 2010; 67: 880-886. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Polivy J, Zeitlin SB, Herman CP, Beal AL. Élelmiszer-korlátozás és túlzott étkezés: volt háború-fogoly tanulmánya. J Abnorm Psychol. 1994; 103: 409-411. [PubMed]
  • Olvassa el a KD-t, Braggio S. Az agymentes frakció felmérése a gyógyszer korai felfedezésében. Szakértői vélemény Drug Metab Toxicol. 2010; 6: 337-344. [PubMed]
  • Richards JK, Simms JA, Steensland P, Taha SA, Borgland SL, Bonci A, et al. Az orexin-1 / hypocretin-1 receptorok gátlása gátolja a yohimbin által kiváltott etanol és szacharóz visszaállítását a Long-Evans patkányokban. Psychopharmacology. 2008; 199: 109-117. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Rodgers RJ, Halford JC, Nunes de Souza RL, Canto de Souza AL, Piper DC, Arch JR, et al. Az SB-334867, egy szelektív orexin-1 receptor antagonista, fokozza a viselkedési telítettséget és blokkolja az orexin-A hiperfagikus hatását patkányokban. Eur J Neurosci. 2001; 13: 1444-1452. [PubMed]
  • Sakamoto F, Yamada S, Ueta Y. A központilag beadott orexin-A aktiválja a kortikotropint felszabadító faktort, amely neuronokat tartalmaz a patkányok hipotalamikus paraventricularis magjában és központi amygdaloid magjában: a központi orexinek lehetséges bevonása a stressz által aktivált központi CRF neuronokba. Reg Pept. 2004; 118: 183-191. [PubMed]
  • Sakurai T. Az orexin (hipokretin) idegi áramköre: az alvás és az ébrenlét fenntartása. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 171-181. [PubMed]
  • Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​et al. Orexinek és orexin receptorok: hipotalamusz neuropeptidek és G-proteinhez kapcsolt receptorok családja, amelyek szabályozzák az etetési magatartást. Sejt. 1998; 92: 573-585. [PubMed]
  • Sharf R, Sarhan M, Brayton CE, Guarnieri DJ, Taylor JR, DiLeone RJ. Az OX1R-en keresztüli Orexin-jelzés közvetíti az operátort, reagálva az étel megerősítésére. Biol Psychiatry. 2010; 67: 753-760. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Shoblock JR, Welty N, Aluisio L, Fraser I, Motley ST, Morton K és mtsai. Az orexin-2 receptor szelektív blokádja csökkenti az etanol ön-beadását, a preferencia elvégzését és a helyreállítást. Psychopharmacology. 2011; 215: 191-203. [PubMed]
  • Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Aston-Jones G. Orexin / hypocretin szükséges a kontextus orientált kokainkereséshez. Neuropharmacology. 2010; 58: 179-184. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Stice E, Agras WS, Telch FC, Halmi KA, Mitchell JE, Wilson T. Az étkezési rendezetlen nők altípusozása a dietetika mellett és negatív hatással van a méretekre. Int J Eat Disord. 2001; 30: 11-27. [PubMed]
  • Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Az orexin receptor mRNS eloszlása ​​a patkány agyban. FEBS Lett. 1998; 438: 71-75. [PubMed]
  • Uramura K, Funahashi H, Muroya S, Shioda S, Takigawa M, Yada T. Orexin-a aktiválja a foszfolipáz C-t és a protein kináz C mediált Ca2+ jelzés a ventrális tegmental terület dopamin neuronjaiban. Neuro. 2001; 12: 1885-1889. [PubMed]
  • Volkow ND, Wise RA. Hogyan segíthet a kábítószer-függőség az elhízás megértésében? Nat Neurosci. 2005; 8: 555-560. [PubMed]
  • Yager J. Binge étkezési rendellenesség: jobb kezelések keresése. Am J Pszichiátria. 2008; 165: 4-6. [PubMed]
  • Yanovski SZ. Zsíros étkezési zavar és elhízás az 2003-ben: az étkezési rendellenességek kezelése pozitív hatással lehet az elhízásos járványra. Int J Eat Disord. 2003; 34 (Kellék: S117 – S120. [PubMed]
  • Walsh BT, Devlin MJ. Étkezési rendellenességek: haladás és problémák. Tudomány. 1998; 280: 1387-1390. [PubMed]
  • Wang GJ, Geliebter A, Volkow ND, Telang FW, Logan J, Jayne MC, et al. Fokozott striatális dopamin-felszabadulás az élelmezés stimulálása során az étkezési rendellenességek során. Elhízottság. 2011; 19: 1601-1608. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Wardle J, Steptoe A, Oliver G, Lipsey Z. Stressz, étrend-visszatartás és táplálékfelvétel. J Psychosom Res. 2000; 48: 195-202. [PubMed]
  • A vizek, A domb, Waller G. A rohamos étkezési epizódok belső és külső előzményei bulimia nervosa nők csoportjában. Int J Eat Disord. 2001; 29: 17-22. [PubMed]
  • Wilfley DE, Crow SJ, Hudson JI, Mitchell JE, Berkowitz RI, Blakesley V, et al. Sibutramine étkezési rendellenesség kutatócsoport. A szibutramin hatékonysága a túlzott étkezési rendellenességek kezelésében: randomizált multicentrikus, placebo-kontrollos kettős vak vizsgálat. Am J Pszichiátria. 2008; 165: 51-58. [PubMed]
  • Willie JT, Chemelli RM, Sinton CM, Yanagisawa M. Enni vagy aludni? Orexin az etetés és az ébrenlét szabályozásában. Annu Rev Neurosci. 2001; 24: 429-458. [PubMed]
  • Wolff GE, Crosby RD, Roberts JA, Wittrock DA. A napi stressz, a hangulat, a megküzdés és az étkezési magatartás különbségei az étkezési és az étkezés nélküli főiskolai nők esetében. Behav rabja. 2000; 25: 205-216. [PubMed]
  • Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Az orexin jelzésére a ventrális tegmentális területen szükség van a magas zsírtartalmú étvágyra, amelyet a nucleus accumbens opioid stimulációja vált ki. J Neurosci. 2007; 27: 11075-11082. [PubMed]